CN117003805A - 一种利用顺序式连续离子交换法分离纯化ump料液的工艺 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种利用顺序式连续离子交换法分离纯化UMP料液的工艺，所述顺序式连续离子交换法由3根或3根以上树脂柱组成，树脂柱分为I区、II区和III区，每一区至少1根树脂柱，料液从树脂柱顶部进入，底部流出，每根树脂柱中装填阴离子交换树脂；按照步骤进行吸附、洗杂和洗脱以及再生的操作。本发明可连续生产UMP且收率和纯度均高达99％。

Description

一种利用顺序式连续离子交换法分离纯化UMP料液的工艺
技术领域
本发明属于生物分离技术领域，具体涉及一种利用顺序式连续离子交换法分离纯化UMP料液的工艺。
背景技术
5'-尿嘧啶核苷酸(Uridine monophosphate，也称一磷尿苷，以下简称UMP)，分子量324.18，与胞苷酸一起构成RNA的嘧啶核苷酸部分。在食品、医药和化工行业上有着广泛的用途，尤其是在婴儿食品和医药领域有着不可替代的功能。我国UMP生产大多数在用酶解法生产，生产周期长，工艺繁琐，分离难度高，且UMP的产率底，成本高。生物催化法生产UMP技术是生产核苷酸的新技术，具有高效、高选择性、条件温和、环境友好等优点，缩短了生产周期，也大大增加了UMP的产量，并且反应体系简单，一般只需要底物，表面活性剂、酶辅基(如镁离子)及一定量的pH调节剂。所以在UMP料液的生产中，尿苷-胞苷酶(UCK)作为生物体核苷酸代谢补偿途径中的重要催化剂，可以催化尿苷和胞苷磷酸化成为尿苷酸和胞苷酸。得到的UMP料液中含有Na+、Mg2+、UMP、和PO4 3-等，且料液的pH值大约在2左右。UMP在pH为2时大多以UMP-形式存在。由于酶解液中的成分比较复杂，传统的分离UMP料液的方法通常是先采用1根阳离子交换柱分离4种单核苷酸[1]，分别得到UMP、胞苷酸(CMP)、腺苷酸(AMP)的稀溶液和鸟苷酸(GMP)、CMP的混合液；再将UMP调pH值后，上氢氧型阴柱分离纯化、浓缩。该法存在树脂利用率低、4种核苷酸不易完全分离，且氢氧型阴离子交换树脂在纯化过程中，交换基团OH-易与Mg2+形成沉淀，使得柱子堵塞，造成过多的资源消耗。肖林平[2]研究了一种新的阳离子交换树脂，可以将4种核苷酸在阳柱上分离，但各产品色谱峰之间几乎没有距离，导致流出液产品收集存在一定的困难。李德莹[3]采用串联的阳离子交换柱在酸性条件下首先吸附AMP、CMP、GMP，未经吸附的UMP流经弱碱性树脂柱和强碱性树脂柱后，经洗脱、浓缩、干燥，得到UMP产品，过程较为繁琐，树脂的再生会过多的消耗酸碱。
参考文献：
DEODA A J,SINGHAL R S.5'-Phosphodiesterase(5'-PDE)from germinatedbarley for hydrolysis of RNA to produce flavour nucleotides[J].BioresourTechnol,2003,
88(3):245-50.
肖林平.5’-尿苷酸分离纯化工艺的研究[D]；南京工业大学,2003.
Tanaka,Release of intracellularly stored 5-phosphodiesterase withpreserved plant.
Biotech Bioengineering 1985.
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对现有工艺较为繁琐、能量消耗很大的不足，提供一种利用顺序式连续离子交换法分离纯化UMP料液的工艺，以解决UMP料液中Ca2+、Mg2+、ATP+、AMP+、UR-、PO4 3-难以去除的难题，并且最终能获得收率和纯度均达到99％以上的UMP。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：
一种利用顺序式连续离子交换法分离纯化UMP料液的工艺，所述顺序式连续离子交换法由3根或3根以上树脂柱组成，树脂柱分为I区、II区和III区，每一区至少1根树脂柱，每根树脂柱为相同规格的层析柱，料液从树脂柱顶部进入，底部流出，每根树脂柱中装填阴离子交换树脂；按照如下步骤操作(图1)：
(1)将I区和II区串联；UMP料液进入Ⅰ区进行吸附，同时在Ⅱ区出口收集得到含有杂质的残余液，PO4 3-和UMP与树脂发生离子交换，而杂质(Ca2+、Mg2+、Na+、ATP+、AMP+、UR-)不吸附，是不保留组分；当Ⅰ区树脂吸附饱和后，纯水进入Ⅰ区进行洗杂，去除树脂颗粒间隙的物料，该树脂间隙的物料主要含Ca2+、Mg2+、Na+、ATP+、AMP+、UR-，含有微量的UMP-，同时在Ⅱ区出口收集残余杂质直至杂质镁离子的穿透曲线C/C0≤0.1；第一洗脱剂进入Ⅰ区洗脱，同时在Ⅱ区出口收集弱保留组分UMP直至UMP的穿透曲线C/C0≤0.1；步骤(1)中，III区同步用纯水再生；
(2)将I区和II区断联，第二洗脱剂进入Ⅰ区洗脱，在Ⅰ区的出口收集强保留组分PO4 3-；步骤(2)中，II区和III区分别同步用纯水再生；
(3)将II区和III区串联替换步骤(1)和步骤(2)中的I区和II区，I区替换步骤(1)和(2)中的III区，重复步骤(1)和(2)的操作，以此顺序切换重复吸附、洗杂和再生的操作。当系统达到稳定后，每一个切换周期内的树脂与上一周期状态一致，比如：每切换一次，吸附段吸附情况和上一周期是相同的；其中，各阶段均是在常温下同时进行的。
其中，所述的阴离子交换树脂是以苯乙烯为骨架的I型或II型强碱性阴离子交换树脂，或多胺类型的碱性阴离子交换树脂，或凝胶型的阴离子交换树脂。
其中，所述的多胺包含三亚乙基四胺和/或四亚乙基五胺。
其中，所述的阴离子交换树脂，其功能基团为季胺基和/或叔胺基，所述的季胺基的含量为1.0～2.5mmol/g阴离子交换树脂，所述的叔胺基的含量是1.0～2.5mmol/g阴离子交换树脂；所述的阴离子交换树脂的可交换离子是氯离子，氯离子的含量为1.0～2.5mmol/g，体积全交换容量≥1.35mmol/mL；所述的阴离子交换树脂的交联度为3～10％。
其中，所述的阴离子交换树脂，其粒径为0.1～0.8mm，含水量为42～48％，湿真密度1.03～1.18g/cm3，比表面积为100～2000m2/g，孔容为0.51～1.33cm3/g，孔径为1～200nm。
所述的阴离子交换树脂包括但不限于以上所述的阴离子交换树脂。
其中，所述的UMP料液为UTP经酶解脱去两个磷酸根后生成UMP料液，所述的UMP料液的制备过程，由于加入了Ca2+、Mg2+等辅助因子，并且酸调节后，整个料液pH值为1～3，基本在pH2左右。所述的UMP料液含有Mg2+、Na+、UMP-、Ca2+、AMP+、ATP+、UR-和PO4 3-，pH1～3。所述的UMP料液为UTP经酶解反应后，只需经板框过滤除去菌体，无需经过超滤或者纳滤操作即可进行树脂分离的工艺。
其中，所述的UMP料液，Mg2+的含量为0.1mg/L～3g/L，Na+的含量为1g/L～30g/L，UMP-的含量为10g/L～70g/L，Ca2+的含量0.1mg/L～3g/L，AMP+的含量为2g/L～10g/L，ATP+的含量为2g/L～10g/L，UR-的含量为2g/L～10g/L，PO4 3-的含量为0.5g/L～10g/L。优选的，所述的UMP料液，Mg2+的含量为0.1mg/L～0.3g/L，Na+的含量为10g/L～20g/L，UMP-的含量为35g/L～45g/L，Ca2+的含量60mg/L～100mg/L，AMP+的含量为2.5g/L～3.5g/L，ATP+的含量为2g/L～4g/L，UR-的含量为2g/L～5g/L，PO4 3-的含量为2g/L～3g/L。
步骤(1)中，所述的吸附，其上样速率为2.5～4BV/h；可通过对固定床穿透实验中穿透曲线的饱和点(C/C0＝1)来判断树脂是否吸附饱和；所述的含有杂质的残余液，杂质为Ca2+、Mg2+、Na+、ATP+、AMP+和UR-；纯水洗杂速率为2.5～4BV/h。
步骤(1)和步骤(2)中，所述的第一洗脱剂为0.1M～1.5M NaCl和0.001M～0.1MHCl的混合水溶液；所述的第二洗脱剂为1M～3M NaCl和0.001M～0.1M HCl的混合水溶液；洗脱速率分别独立的选自2.5～4BV/h。
纯水再生流速一般控制在3～8BV/h。
步骤(1)和(2)中，吸附、洗杂和洗脱各工段的切换时间为45～200min。
本发明所述的C/C0，其中C指瞬时浓度，C0指料液初始浓度。
有益效果：本发明利用顺序式连续离子交换法分离纯化UMP料液的工艺，不需要复杂的操作，树脂利用率达到最高，不需要经过纳滤脱磷，通过连续色谱分离，便可连续生产UMP且收率和纯度均高达99％，只需要等比例放大，可应用于工业化生产。
与现有技术相比，本发明具有如下优势：
(1)顺序式连续离子交换法操作均在室温下进行，大大降低了能耗。
(2)树脂易于再生，可重复使用，利用率达到最高，还具有一定的除色素的效果，过程连续，运行成本低，可直接进行工艺放大。
(3)不需要经过纳滤脱磷，通过连续分离，一步便将杂质Ca2+、Mg2+、ATP+、AMP+、UR-、PO4 3-和产品UMP分离，保证了UMP产品的纯度和品质，收率可达到99％以上，HPLC纯度可达到100％，Ca2+、Mg2+、ATP+、AMP+、UR-、PO4 3-等离子的去除率达到了99％以上。
附图说明
下面结合附图和具体实施方式对本发明做更进一步的具体说明，本发明的上述和/或其他方面的优点将会变得更加清楚。
图1为本发明的工艺流程图，从步骤a-e，按顺序切换。
图2为UMP钠盐料液的HPLC图(样品稀释100倍)。
图3为UMP钠盐产品液的HPLC图(样品稀释100倍)。
图4为UMP钠盐料液的离子色谱图(样品稀释100倍)。
图5为UMP钠盐产品液的离子色谱图(样品未稀释)。
具体实施方式
以下实施例中使用外标法对料液中的UMP、Mg2+和PO4 3-浓度进行检测。
Ca2+、Mg2+、Na+离子色谱条件为：
1)检测器：Thermo Scientific-CD检测器；
2)色谱柱：Dionex IonpacTM CS12A；
3)抑制器：DionexTM CDRS 600 4mm；
4)流动相：20mmol/L二甲基磺酸；
5)流速：1mL/min；
6)柱温：25℃；
7)进样体积：25μL。
Ca2+、Mg2+、Na+的检测方法及步骤：
1)色谱柱的平衡：配置好的20mmol/L的二甲基磺酸以1mL/min的流速冲洗色谱柱，同时开启柱温箱，开始采集基线，待CD信号值基线趋于0.5以下时，平衡结束。
2)样品的检测：按照离子色谱条件编写进样序列及方法，将过膜处理后的标准品及样品按照进样序列置于自动进样器的相应位置上，开始进样并收集图谱信息。
PO4 3-的检测方法及步骤：
定磷试剂：将3mol/L的硫酸，水，2.5％钼酸铵，10％的抗坏血酸按1∶2∶1∶1的比例配制(体积比)，配制时，按顺序加。取两支硬质玻璃试管，一支加入样品0.1ml，水2.9ml，定磷试剂3.0ml；另一支只管加入水3.0ml，定磷试剂3.0ml，作为空白；将两支只管摇匀后，置于45℃的水浴中，加热25分钟，然后取出冷却至室温，在660nm处，以空白为参比，测定样品的OD值，然后根据标准曲线的线性关系，得出其中所含的磷含量。
UMP色谱条件为：
1)检测器：Agilent 1260型高效液相色谱仪-紫外检测器(254nm)；
2)色谱柱：ZORBAX SB-AQ液相色谱柱；
3)流动相：pH为6.5的磷酸三乙胺缓冲液：甲醇＝91：9；
4)流速：0.7mL/min；
5)柱温：25℃；
6)进样体积：20μL。
检测方法及步骤：
1)色谱柱的平衡：配置流动相pH为6.5的磷酸三乙胺缓冲液：甲醇＝91：9，用孔径0.22μm的混合微孔滤膜过滤，再进行超声处理30min。用处理好的流动相以0.7mL/min的流速冲洗色谱柱，同时开启柱温箱，开始采集基线，待基线趋于直线时，平衡结束。
2)样品的检测：按照色谱条件编写进样序列及方法，将过膜处理后的标准品及样品按照进样序列置于自动进样器的相应位置上，开始进样并收集图谱信息。
使用以下方法计算产品液中UMP的收率：
C1：产品液中UMP的浓度；
v2：产品液的体积；
C：上样液中UMP的浓度；
v：上样液的体积。
使用以下方法计算产品液中Ca2+、Mg2+、ATP+、AMP+、UR-、PO4 3-等离子的去除率：
C0：上样液中Ca2+、Mg2+、ATP+、AMP+、UR-、PO4 3-的浓度；
C2：产品液中Ca2+、Mg2+、ATP+、AMP+、UR-、PO4 3-的浓度。
以下实施例中，所使用的氯型阴离子交换树脂(HY06)是以苯乙烯为骨架的I型强碱性阴树脂。树脂的功能基团为三甲胺，所述的胺基的含量为1.0～2.5mmol/g阴离子交换树脂；可交换离子是氯离子，所述的氯离子的含量为1.0～2.5mmol/g阴离子交换树脂；离子交换树脂粒径为0.4～0.7mm，含水量42.00-48.00％，湿真密度1.07-1.10g/cm3，体积全交换容量≥1.35mmol/mL。树脂厂家可以根据上述条件自行合成。
以下实施例中，所用的连续分离装置由3根树脂柱组成，树脂柱分为I区、II区和III区，每一区1根树脂柱，每根树脂柱为相同规格的层析柱，料液从树脂柱顶部进入，底部流出，每根树脂柱中装填阴离子交换树脂；按照如下步骤操作(图1)：
(1)将I区和II区串联；UMP料液进入Ⅰ区进行吸附，同时在Ⅱ区出口收集得到含有杂质的残余液，PO4 3-和UMP与树脂发生离子交换，而杂质(Ca2+、Mg2+、Na+、ATP+、AMP+、UR-)不吸附，是不保留组分；当Ⅰ区树脂吸附饱和后，纯水进入Ⅰ区进行洗杂，去除树脂颗粒间隙的物料，该树脂间隙的物料主要含Ca2+、Mg2+、Na+、ATP+、AMP+、UR-，含有微量的UMP-，同时在Ⅱ区出口收集残余杂质直至杂质镁离子的穿透曲线C/C0≤0.1；第一洗脱剂进入Ⅰ区洗脱，同时在Ⅱ区出口收集弱保留组分UMP直至UMP的穿透曲线C/C0≤0.1；步骤(1)中，III区同步用纯水再生；
(2)将I区和II区断联，第二洗脱剂进入Ⅰ区洗脱，在Ⅰ区的出口收集强保留组分PO4 3-；步骤(2)中，II区和III区分别同步用纯水再生；
(3)将II区和III区串联替换步骤(1)和步骤(2)中的I区和II区，I区替换步骤(1)和(2)中的III区，重复步骤(1)和(2)的操作，以此顺序切换重复吸附、洗杂和再生的操作。不改变树脂柱的位置，仅按照图1a～图1d的顺序，通过切换料液的进出口位置从而达到改变树脂柱的状态。三个区域按顺序切换各料液进出口，保持持续进样的状态，当系统达到稳定后，每一个切换周期内的树脂与上一周期状态一致，比如：每切换一次，吸附段吸附情况和上一周期是相同的；其中，各阶段均是在常温下同时进行的。
实施例1：UMP料液的获得
UMP料液由南京同凯兆业生物技术有限责任公司提供，制备方法为UTP经酶解后，生成UMP料液，由于过程中加入了Mg2+等辅助因子，并且酸调节后，整个料液pH值为2左右，所以整个UMP料液中含有Ca2+、Mg2+、Na+、ATP+、AMP+、UR-、PO4 3-、UMP-。
按照上述方法重复三次实验，分别得到三批UMP料液。
第一批料液中，Mg2+含量为0.17g/L，PO4 3-的含量为2.2g/L，UMP-含量为38g/L，Na+含量为13g/L，Ca2+的含量为0.08g/L，AMP+的含量为2.7g/L，ATP+的含量为2.9g/L，UR-的含量为3.7g/L；
第二批料液中，Mg2+含量为0.19g/L，PO4 3-的含量为2.1g/L，UMP-含量为43g/L，Na+含量为17g/L，Ca2+的含量为0.07g/L，AMP+的含量为3.1g/L，ATP+的含量为3g/L，UR-的含量为4.1g/L；
第三批料液中，Mg2+含量为0.18g/L，PO4 3-的含量为2.3g/L，UMP-含量为41g/L，Na+含量为16g/L，Ca2+的含量为0.06g/L，AMP+的含量为3.5g/L，ATP+的含量为2.7g/L，UR-的含量为2.8g/L；
实施例2：连续色谱分离UMP料液
每根树脂柱装填74mL特异性阴离子交换树脂，树脂柱直径2.2cm，高度27cm。
UMP料液(第一批料液)的液相图如图2所示，UMP料液的上样量为2.7BV，吸附流速为3.5BV/h。
纯水洗杂流速为3.5BV/h。
第一洗脱剂为0.4M NaCl和0.01M HCl的混合水溶液，用量为8.1BV，流速为3.5BV/h。
第二洗脱剂为1.5M NaCl和0.01M HCl的混合水溶液，用量为6.8BV，流速为3.5BV/h。
6.25h后实验结束。
收集的产品流出液用HPLC检测UMP-、ATP+、AMP+、UR-浓度，用离子色谱检测Ca2+、Mg2+等离子浓度，用紫外分光光度计检测PO4 3-浓度，UMP钠盐产品的收率达到99％，HPLC的纯度达到100％，Mg2+、PO4 3-等离子的去除率达到了99.6％。从HPLC和离子色谱图谱来看，图2为UMP料液稀释100倍的HPLC色谱图，从图2中可以看出，除了UMP产品峰，还有一些杂质峰(比如ATP+、AMP+、UR-)，这些杂质峰与UMP产品峰稍有重叠，使得色谱峰的自动积分稍有偏差，从图3的UMP钠盐产品色谱图可以看出，UMP的纯度达到了100％，杂质(ATP+、AMP+、UR-)完全去除掉。同时，图4是UMP料液稀释100倍的离子色谱图，而图5是未经稀释的UMP钠盐产品的离子色谱图，图4和图5对比来看，UMP钠盐产品中Mg2+等离子(除Na+外)的含量几乎全部为0，也说明本实验纯化效果良好。
实施例3：连续色谱分离UMP料液
每根树脂柱装填74mL特异性阴离子交换树脂，树脂柱直径2.2cm，高度27cm。
UMP料液(第二批料液)的上样量为2.7BV，吸附流速为3.1BV/h。
纯水洗杂流速为3.5BV/h。
第一洗脱剂为0.4M NaCl和0.01M HCl的混合水溶液，用量为8.1BV，流速为3.5BV/h。
第二洗脱剂为1.5M NaCl和0.01M HCl的混合水溶液，用量为6.8BV，流速为4BV/h。
5.9h后实验结束。
收集的产品流出液用HPLC检测UMP-、ATP+、AMP+、UR-浓度，用离子色谱检测Ca2+、Mg2+等离子浓度，用紫外分光光度计检测PO4 3-浓度，Ca2+、Mg2+浓度低于离子色谱检测限，ATP+、AMP+、UR-的浓度低于液相色谱检测限，PO4 3-浓度低于紫外分光光度计检测限，UMP钠盐产品的收率达到99％，HPLC的纯度达到100％，Ca2+、Mg2+、PO4 3-等离子的去除率达到了99.4％。
实施例4：连续色谱分离UMP料液
每根树脂柱装填74mL特异性阴离子交换树脂，树脂柱直径2.2cm，高度27cm。
UMP料液(第三批料液)的上样量为2.7BV，吸附流速为3.6BV/h。
纯水洗杂流速为3.5BV/h。
第一洗脱剂为0.41M NaCl和0.01M HCl的混合水溶液，用量为8.1BV，流速为3BV/h。
第二洗脱剂为1.5M NaCl和0.01M HCl的混合水溶液，用量为6.8BV，流速为3.4BV/h。
6.7h后实验结束。
收集的产品流出液用HPLC检测UMP-、ATP+、AMP+、UR-浓度，用离子色谱检测Ca2+、Mg2+等离子浓度，用紫外分光光度计检测PO4 3-浓度，Ca2+、Mg2+浓度低于离子色谱检测限，ATP+、AMP+、UR-的浓度低于液相色谱检测限，PO4 3-浓度低于紫外分光光度计检测限，UMP钠盐产品的收率达到99％，HPLC的纯度达到100％，Ca2+、Mg2+、PO4 3-等离子的去除率达到了99.8％。
对比例1
同实施例3，使用同一批次的料液，相同的进样量、流速等条件，将第一洗脱剂NaCl的浓度更换为0.45M，在步骤(1)Ⅱ区出口处收集产品液中检测出PO4 3-的存在，并且收集液中UMP产品纯度仅为72％，PO4 3-的去除率为75％，说明该洗脱剂不能很好的提纯UMP料液中的UMP产品。
本发明提供了一种利用顺序式连续离子交换法分离纯化UMP料液的工艺的思路及方法，具体实现该技术方案的方法和途径很多，以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。本实施例中未明确的各组成部分均可用现有技术加以实现。

Claims (10)

1.一种利用顺序式连续离子交换法分离纯化UMP料液的工艺，其特征在于，所述顺序式连续离子交换法由3根或3根以上树脂柱组成，树脂柱分为I区、II区和III区，每一区至少1根树脂柱，料液从树脂柱顶部进入，底部流出，每根树脂柱中装填阴离子交换树脂；按照如下步骤操作：
(1)将I区和II区串联；UMP料液进入Ⅰ区进行吸附，同时在Ⅱ区出口收集得到含有杂质的残余液；当Ⅰ区树脂吸附饱和后，纯水进入Ⅰ区进行洗杂，同时在Ⅱ区出口收集残余杂质直至杂质镁离子的穿透曲线C/C0≤0.1；第一洗脱剂进入Ⅰ区洗脱，同时在Ⅱ区出口收集UMP直至UMP的穿透曲线C/C0≤0.1；步骤(1)中，III区同步用纯水再生；
(2)将I区和II区断联，第二洗脱剂进入Ⅰ区洗脱，在Ⅰ区的出口收集PO4 3-；步骤(2)中，II区和III区分别同步用纯水再生；
(3)将II区和III区串联替换步骤(1)和步骤(2)中的I区和II区，I区替换步骤(1)和(2)中的III区，重复步骤(1)和(2)的操作，以此顺序切换重复吸附、洗杂和再生的操作。
2.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述的阴离子交换树脂是以苯乙烯为骨架的I型或II型强碱性阴离子交换树脂，或多胺类型的碱性阴离子交换树脂，或凝胶型的阴离子交换树脂。
3.根据权利要求2所述的工艺，其特征在于，所述的多胺包含三亚乙基四胺和/或四亚乙基五胺。
4.根据权利要求2或3所述的工艺，其特征在于，所述的阴离子交换树脂，其功能基团为季胺基和/或叔胺基，所述的季胺基的含量为1.0～2.5mmol/g阴离子交换树脂，所述的叔胺基的含量是1.0～2.5mmol/g阴离子交换树脂；所述的阴离子交换树脂的可交换离子是氯离子，氯离子的含量为1.0～2.5mmol/g，体积全交换容量≥1.35mmol/mL；所述的阴离子交换树脂的交联度为3～10％。
5.根据权利要求2所述的工艺，其特征在于，所述的阴离子交换树脂，其粒径为0.1～0.8mm，含水量为42～48％，湿真密度1.03～1.18g/cm3，比表面积为100～2000m2/g，孔容为0.51～1.33cm3/g，孔径为1～200nm。
6.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述的UMP料液为UTP经酶解脱去两个磷酸根后生成UMP料液，所述的UMP料液含有Mg2+、Na+、UMP-、Ca2+、AMP+、ATP+、UR-和PO4 3-，pH1～3。
7.根据权利要求6所述的工艺，其特征在于，所述的UMP料液，Mg2+的含量为0.1mg/L～3g/L，Na+的含量为1g/L～30g/L，UMP-的含量为10g/L～70g/L，Ca2+的含量0.1mg/L～3g/L，AMP+的含量为2g/L～10g/L，ATP+的含量为2g/L～10g/L，UR-的含量为2g/L～10g/L，PO4 3-的含量为0.5g/L～10g/L。
8.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，步骤(1)中，所述的吸附，其上样速率为2.5～4BV/h；所述的含有杂质的残余液，杂质为Ca2+、Mg2+、Na+、ATP+、AMP+和UR-；纯水洗杂速率为2.5～4BV/h。
9.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，步骤(1)和步骤(2)中，所述的第一洗脱剂为0.1M～1.5M NaCl和0.001M～0.1M HCl的混合水溶液；所述的第二洗脱剂为1M～3M NaCl和0.001M～0.1M HCl的混合水溶液；洗脱速率分别独立的选自2.5～4BV/h。
10.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，步骤(1)和(2)中，吸附、洗杂和洗脱各工段的切换时间为45～200min。
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