CN116940341A

CN116940341A - 抗体组合物及其使用方法

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Publication number: CN116940341A
Application number: CN202180094320.6A
Authority: CN
Inventors: M·黄; M·霍斯萨维; T·A·哈比; S·A·哈特; R·V·曼特利; H·E·维齐纳; A·罗伊; B·P·默西; U·A·阿拉斯; K·桑加维; X·赵; A·贝洛
Original assignee: Olozme Co; Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Olozme Co; Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2020-12-28
Filing date: 2021-12-27
Publication date: 2023-10-24

Abstract

本公开文本提供了包含抗体和至少两种抗氧化剂的药物组合物。在一些方面，药物配制品被配制用于皮下递送。在一些方面，所述药物组合物还包含内切糖苷酶水解酶。本公开文本的其他方面涉及皮下递送所述药物组合物的方法。

Description

抗体组合物及其使用方法

相关申请的交叉引用

本申请要求2020年12月28日提交的美国临时申请号US 63/131,234；2020年12月28日提交的美国临时申请号US 63/131,244；以及2021年2月17日提交的美国临时申请号US63/150,465的优先权和权益；所述申请各自通过引用以其整体特此并入本文。

通过EFS-WEB电子提交的序列表的引用

电子提交的序列表(名称：3338_191PC03_Seqlisting_ST25.txt；大小：1,011,388字节；创建日期：2021年12月27日)的内容通过引用以其整体并入本文。

技术领域

本公开文本提供了包含抗体的药物组合物以及使用所述药物组合物治疗患有肿瘤的受试者的方法。

背景技术

人类癌症具有许多遗传和表观遗传改变，产生了潜在地可被免疫系统识别的新抗原(Sjoblom等人,Science(2006)314(5797):268-274)。由T淋巴细胞和B淋巴细胞构成的适应性免疫系统具有强大的抗癌潜力，具有广泛的能力和精确的特异性以响应多样的肿瘤抗原。此外，免疫系统展现了相当大的可塑性和记忆组分。成功地利用适应性免疫系统的所有这些属性将使得免疫疗法在所有癌症治疗方式中是独特的。

直到最近，癌症免疫疗法将大量努力集中于通过过继性转移激活的效应细胞、针对相关抗原进行免疫或提供非特异性免疫刺激剂(如细胞因子)来增强抗肿瘤免疫应答的方法。然而，在过去的十年中，开发特异性免疫检查点途径抑制剂的大量努力已经开始提供用于治疗癌症的新的免疫治疗方法，包括开发与程序性死亡蛋白-1(PD-1)受体特异性结合并阻断抑制性PD-1/PD-1配体途径的抗体(如纳武单抗(nivolumab)和派姆单抗(pembrolizumab)(先前为兰布利珠单抗(lambrolizumab)；USAN委员会声明，2013))(Topalian等人,2012a,b；Topalian等人,2014；Hamid等人,2013；Hamid和Carvajal,2013；McDermott和Atkins,2013)。

递送抗PD-1和/或抗PD-L1抗体的当前方法使用定期静脉内施用，由临床医师施用，通常在诊所或医院进行。所述治疗的不便性和侵入性可能会对患者的体验造成负面影响。皮下递送(如通过使用自动注射器或穿戴式泵)可以显著改善患者依从性。然而，本领域中仍然需要适合于皮下递送至患者的包含抗PD-1或抗PD-L1抗体的配制品。

发明内容

本公开文本的某些方面涉及一种药物组合物，所述药物组合物包含(i)特异性结合PD-1的抗体(“抗PD-1抗体”)，(ii)内切糖苷酶水解酶，以及(iii)至少两种抗氧化剂。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂中的至少一种是牺牲抗氧化剂。在一些方面，所述牺牲抗氧化剂选自甲硫氨酸、色氨酸、和组氨酸、半胱氨酸、抗坏血酸、甘氨酸或其他牺牲剂。

在一些方面，所述至少两种抗氧化剂中的至少一种包含金属离子螯合剂。在一些方面，所述金属离子螯合剂选自喷替酸(“DTPA”)和EDTA。

在一些方面，所述至少两种抗氧化剂选自甲硫氨酸、DTPA和EDTA。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂中的一种是甲硫氨酸。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂中的一种是DTPA。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂中的一种是EDTA。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂是甲硫氨酸和DTPA。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂是甲硫氨酸和EDTA。

在一些方面，所述至少一种抗氧化剂包含至少约1至约20mM甲硫氨酸。在一些方面，所述至少一种抗氧化剂包含至少约1mM、至少约1.5mM、至少约2mM、至少约2.5mM、至少约3mM、至少约3.5mM、至少约4mM、至少约4.5mM、至少约5mM、至少约5.5mM、至少约6mM、至少约6.5mM、至少约7mM、至少约7.5mM、至少约8mM、至少约8.5mM、至少约9mM、至少约9.5mM、至少约10mM、至少约11mM、至少约12mM、至少约13mM、至少约14mM、至少约15mM、至少约16mM、至少约17mM、至少约18mM、至少约19mM或至少约20mM甲硫氨酸。在一些方面，所述至少一种抗氧化剂包含约5mM甲硫氨酸。

在一些方面，所述至少一种抗氧化剂包含至少约10μM至约200μM DTPA。在一些方面，所述至少一种抗氧化剂包含至少约10μM、至少约15μM、至少约20μM、至少约25μM、至少约30μM、至少约35μM、至少约40μM、至少约45μM、至少约50μM、至少约55μM、至少约60μM、至少约65μM、至少约70μM、至少约75μM、至少约80μM、至少约85μM、至少约90μM、至少约95μM、至少约100μM、至少约110μM、至少约120μM、至少约130μM、至少约140μM、至少约150μM、至少约160μM、至少约170μM、至少约180μM、至少约190μM或至少约200μM DTPA。在一些方面，所述至少一种抗氧化剂包含约50μM DTPA。

在一些方面，所述药物组合物包含至少约20mg/mL至至少约200mg/mL的抗PD-1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约135mg/mL至至少约180mg/mL的抗PD-1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约108mg/mL至至少约132mg/mL的抗PD-1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约20mg/mL、至少约30mg/mL、至少约40mg/mL、至少约50mg/mL、至少约60mg/mL、至少约70mg/mL、至少约80mg/mL、至少约90mg/mL、至少约100mg/mL、至少约110mg/mL、至少约120mg/mL、至少约130mg/mL、至少约140mg/mL、至少约150mg/mL、至少约160mg/mL、至少约170mg/mL、至少约180mg/mL、至少约190mg/mL或至少约200mg/mL的抗PD-1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含约120mg/mL的抗PD-1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含约150mg/mL的抗PD-1抗体。

在一些方面，所述药物组合物包含至少约5U至至少约100,000U的内切糖苷酶水解酶。在一些方面，所述药物组合物包含至少约5U、至少约10U、至少约20U、至少约30U、至少约40U、至少约50U、至少约75U、至少约100U、至少约200U、至少约300U、至少约400U、至少约500U、至少约750U、至少约1000U、至少约2000U、至少约3000U、至少约4000U、至少约5000U、至少约6000U、至少约7000U、至少约8000U、至少约9000U、至少约10,000U、至少约20,000U、至少约30,000U、至少约40,000U、至少约50,000U、至少约60,000U、至少约70,000U、至少约80,000U、至少约90,000U或至少约100,000U的内切糖苷酶水解酶。在一些方面，所述药物组合物包含至少约20,000U的内切糖苷酶水解酶。在一些方面，所述药物组合物包含至少约500U/mL至至少约5000U/mL的内切糖苷酶水解酶。在一些方面，所述药物组合物包含至少约1500U/mL、至少约1600U/mL、至少约1700U/mL、至少约1800U/mL、至少约1900U/mL、至少约2000U/mL、至少约2100U/mL、至少约2200U/mL、至少约2300U/mL、至少约2400μM、至少约2500μM、至少约3000μM、至少约3500μM、至少约4000μM、至少约4500U/mL或至少约5000U/mL的内切糖苷酶水解酶。在一些方面，所述药物组合物包含约2000U/mL的内切糖苷酶水解酶。

在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶在己糖胺β(1-4)或(1-3)连接处切割透明质酸。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包含透明质酸酶PH-20(HuPH20)、HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4或HYALPS1的催化结构域。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包含与SEQ IDNO:1的氨基酸36-490具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包括透明质酸酶。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包括选自HuPH20、HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4、其任何变体和任何亚型的透明质酸酶。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包括rHuPH20或其片段。

在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包括经修饰的透明质酸酶，所述经修饰的透明质酸酶相对于选自HuPH20、HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4、HYALPS1或其片段的野生型透明质酸酶包含一个或多个氨基酸取代。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包括经修饰的透明质酸酶，所述经修饰的透明质酸酶相对于选自HuPH20、HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4、HYALPS1或其片段的野生型透明质酸酶包含α螺旋区中的一个或多个氨基酸取代。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包括经修饰的透明质酸酶，所述经修饰的透明质酸酶相对于选自HuPH20、HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4、HYALPS1或其片段的野生型透明质酸酶包含接头区中的一个或多个氨基酸取代。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包括经修饰的透明质酸酶，其中相对于选自HuPH20、HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4、HYALPS1或其片段的野生型透明质酸酶，一个或多个N末端和/或C末端氨基酸缺失。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包括经修饰的rHuPH20，其中所述经修饰的rHuPH20包含：i.相对于野生型rHuPH20，α螺旋区、接头区或α螺旋区和接头区二者中的一个或多个氨基酸取代；ii.相对于野生型rHuPH20，一个或多个N末端氨基酸、一个或多个C末端氨基酸或一个或多个N末端氨基酸和一个或多个C末端氨基酸的缺失；或者iii.(i)和(ii)二者。

在一些方面，所述药物组合物还包含张力调节剂和/或稳定剂。在一些方面，所述张力调节剂和/或稳定剂包括糖、氨基酸、多元醇、盐或其组合。在一些方面，所述张力调节剂和/或稳定剂包括蔗糖、山梨醇、海藻糖、甘露醇、甘油、甘氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、氯化钠、脯氨酸、精氨酸、组氨酸或其任何组合。在一些方面，所述张力调节剂包括蔗糖。在一些方面，所述药物组合物包含至少约10mM至至少约500mM蔗糖。在一些方面，所述药物组合物包含至少约10mM、至少约20mM、至少约30mM、至少约40mM、至少约50mM、至少约60mM、至少约70mM、至少约80mM、至少约90mM、至少约100mM、至少约110mM、至少约120mM、至少约130mM、至少约140mM、至少约150mM、至少约160mM、至少约170mM、至少约180mM、至少约190mM、至少约200mM、至少约210mM、至少约220mM、至少约230mM、至少约240mM、至少约250mM、至少约260mM、至少约270mM、至少约280mM、至少约290mM、至少约300mM、至少约310mM、至少约320mM、至少约330mM、至少约340mM、至少约350mM、至少约360mM、至少约370mM、至少约380mM、至少约390mM、至少约400mM、至少约410mM、至少约420mM、至少约430mM、至少约440mM、至少约450mM、至少约460mM、至少约470mM、至少约480mM、至少约490mM或至少约500mM蔗糖。在一些方面，所述药物组合物包含约250mM蔗糖。

在一些方面，所述药物组合物还包含缓冲剂。在一些方面，所述缓冲剂选自组氨酸、琥珀酸盐、氨丁三醇、磷酸钠、乙酸钠和柠檬酸钠。在一些方面，所述缓冲剂包括组氨酸。在一些方面，所述药物组合物包含至少约5mM至至少约100mM组氨酸。在一些方面，所述药物组合物包含至少约5mM、至少约10mM、至少约15mM、至少约20mM、至少约25mM、至少约30mM、至少约35mM、至少约40mM、至少约45mM、至少约50mM、至少约60mM、至少约70mM、至少约80mM、至少约90mM或至少约100mM组氨酸。在一些方面，所述药物组合物包含约20mM组氨酸。

在一些方面，所述药物组合物还包含表面活性剂。在一些方面，所述表面活性剂选自聚山梨酯20、聚山梨酯80和泊洛沙姆188。在一些方面，所述表面活性剂包括聚山梨酯80。在一些方面，所述药物组合物包含至少约0.01％w/v至至少约0.1％w/v聚山梨酯80。在一些方面，所述药物组合物包含至少约0.01％w/v、至少约0.02％w/v、至少约0.03％w/v、至少约0.04％w/v、至少约0.05％w/v、至少约0.06％w/v、至少约0.07％w/v、至少约0.08％w/v、至少约0.09％w/v或至少约0.1％w/v聚山梨酯80。在一些方面，所述药物组合物包含约0.05％w/v聚山梨酯80。

在一些方面，所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约0.0182mg/mL rHuPH20。在一些方面，所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。在一些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约0.0182mg/mL rHuPH20。在一些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，所述抗PD-1抗体选自纳武单抗、派姆单抗、PDR001、MEDI-0680、西米普利单抗、特瑞普利单抗、替雷利珠单抗、INCSHR1210、TSR-042、GLS-010、AM-0001、STI-1110、AGEN2034、MGA012、BCD-100、IBI308、萨善利单抗及其任何组合。在一些方面，所述抗PD-1抗体是纳武单抗。在一些方面，所述抗PD-1抗体是派姆单抗。

在一些方面，所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约0.0182mg/mL rHuPH20。在一些方面，所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。在一些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约0.0182mg/mL rHuPH20。在一些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。在一些方面，所述药物组合物包含：(a)约672mg纳武单抗；(b)约8.68mg组氨酸；(c)约11.8mg组氨酸HCl H2O；(d)约479mg蔗糖；(e)约2.80mg聚山梨酯80；(f)约0.110mg喷替酸；(g)约4.18mg甲硫氨酸；(h)约0.102mg rHuPH20；其中(a)-(h)在水中重构至至少约5.6mL的最终体积。

在一些方面，所述药物组合物具有约5.2至约6.8的pH。在一些方面，所述药物组合物具有约5.2、约5.3、约5.4、约5.5、约5.6、约5.7、约5.8、约5.9、约6.0、约6.1、约6.2、约6.3、约6.4、约6.5、约6.6、约6.7或约6.8的pH。在一些方面，所述药物组合物具有约6.0的pH。

在一些方面，所述药物组合物还包含第二治疗剂。在一些方面，所述第二治疗剂是抗体。在一些方面，所述第二治疗剂是检查点抑制剂。在一些方面，所述检查点抑制剂是抗CTLA-4抗体、抗LAG-3抗体、抗TIM3抗体、抗TIGIT抗体、抗NKG2a抗体、抗OX40抗体、抗ICOS抗体、抗MICA抗体、抗CD137抗体、抗KIR抗体、抗TGFβ抗体、抗IL-10抗体、抗IL-8抗体、抗B7-H4抗体、抗Fas配体抗体、抗CXCR4抗体、抗间皮素抗体、抗CD27抗体、抗GITR抗体或其任何组合。在一些方面，所述药物组合物还包含第三治疗剂。在一些方面，所述第二治疗剂、所述第三治疗剂或二者包含IL-2(例如，贝培阿地白介素(bempegaldesleukin))或IL12-Fc(例如，BMS-986415)。

在一些方面，所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)约2000U/mL rHuPH20；以及(h)抗CTLA-4抗体。在一些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)约2000U/mL rHuPH20；以及(h)抗CTLA-4抗体。在一些方面，所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)约2000U/mLrHuPH20；以及(h)抗LAG-3抗体。在一些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)约2000U/mL rHuPH20；以及(h)抗LAG-3抗体。在一些方面，所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)约2000U/mL rHuPH20；以及(h)抗TIM3抗体。在一些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)约2000U/mL rHuPH20；以及(h)抗TIM3抗体。

本公开文本的某些方面涉及一种小瓶，所述小瓶包含本文公开的任何药物组合物。

本公开文本的某些方面涉及一种针筒，所述针筒包含本文公开的任何药物组合物。

本公开文本的某些方面涉及一种自动注射器，所述自动注射器包含本文公开的任何药物组合物。

本公开文本的某些方面涉及一种穿戴式泵，所述穿戴式泵包含本文公开的任何药物组合物。在一些方面，所述针筒还包含柱塞。

本公开文本的某些方面涉及一种治疗有需要的受试者的疾病或障碍的方法，所述方法包括向所述受试者施用药学有效量的本文公开的任何药物组合物。在一些方面，皮下施用药物组合物。

在一些方面，所述疾病或障碍是感染性疾病。在一些方面，所述疾病或障碍是癌症。在一些方面，所述癌症选自鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma)、小细胞肺癌(SCLC)、非小细胞肺癌(NSCLC)、鳞状NSCLC、非鳞状NSCLC、神经胶质瘤、胃肠癌、肾癌(renalcancer)、透明细胞癌、卵巢癌、肝癌、结直肠癌、子宫内膜癌(endometrial cancer)、肾癌(kidney cancer)、肾细胞癌(RCC)、前列腺癌、激素难治性前列腺腺癌、甲状腺癌、神经母细胞瘤、胰腺癌、胶质母细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤、宫颈癌(cervical cancer)、胃癌(stomach cancer)、膀胱癌、肝细胞瘤、乳腺癌、结肠癌、头颈癌、胃癌(gastric cancer)、生殖细胞肿瘤、儿科肉瘤、鼻窦自然杀伤细胞、黑色素瘤、骨癌、皮肤癌、子宫癌、肛区癌症、睾丸癌、输卵管癌、子宫内膜癌(carcinoma of the endometrium)、宫颈癌(carcinoma ofthe cervix)、阴道癌、外阴癌、食管癌、小肠癌、内分泌系统癌症、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、直肠癌、儿童实体瘤、输尿管癌、肾盂癌、中枢神经系统(CNS)肿瘤、原发性CNS淋巴瘤、肿瘤血管生成、脊柱轴肿瘤、脑癌、脑干神经胶质瘤、垂体腺瘤、卡波西肉瘤、表皮样癌、鳞状细胞癌(squamous cell cancer)、包括石棉诱发癌症在内的环境诱发癌症、病毒相关癌症或病毒来源的癌症(例如，人乳头瘤病毒(HPV相关的或来源的肿瘤))及其任何组合。

本公开文本的某些方面涉及一种治疗有需要的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者皮下施用有效剂量的药物组合物，所述药物组合物包含特异性结合PD-1或PD-L1并抑制PD-1与PD-L1相互作用的抗体(分别为“抗PD-1抗体”或“抗PD-L1抗体”)；其中所述有效剂量包含一个或多个皮下单位剂量，其中所述皮下单位剂量中的至少一个的总体积小于约5mL、小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约3mL或小于约2.5mL；并且其中所述有效剂量包含至少约250mg至至少约2400mg的所述抗体。在一些方面，所述药物组合物不包含透明质酸酶。

在一些方面，所述有效剂量包含两个或更多个皮下单位剂量，其中所述两个或更多个皮下单位剂量是并行或随后施用。在一些方面，所述两个或更多个皮下单位剂量是随后施用，其中所述两个或更多个皮下单位剂量中的每一个是在所述两个或更多个皮下单位剂量之间约10分钟、约15分钟、约20分钟、约30分钟、约45分钟、约一小时、约两小时、约三小时、约四小时、约五小时、约六小时、约九小时、约十二小时、约十八小时或约二十四小时的间隔内施用。在一些方面，约每一、二、三或四周施用所述有效剂量。

在一些方面，所述抗体包括抗PD-1抗体。在一些方面，所述抗体的有效剂量为约每周施用约250mg至约600mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体的有效剂量为约每周施用约250mg、约260mg、约270mg、约280mg、约290mg、约300mg、约310mg、约320mg、约330mg、约340mg、约350mg、约360mg、约370mg、约380mg、约390mg、约400mg、约410mg、约420mg、约430mg、约440mg、约450mg、约460mg、约470mg、约480mg、约490mg、约500mg、约510mg、约520mg、约530mg、约540mg、约550mg、约560mg、约570mg、约580mg、约590mg或约600mg。在一些方面，所述抗体的有效剂量为约每周施用约300mg。在一些方面，所述抗体的有效剂量包含约300mg的单一皮下单位剂量。在一些方面，所述抗体的有效剂量包含约2mL总施用体积中约300mg的单一皮下单位剂量。

在一些方面，所述抗体的有效剂量包含(i)两个皮下单位剂量，其中所述两个皮下单位剂量中的每一个包含约150mg的所述抗体；或者(ii)三个皮下单位剂量，其中所述三个皮下单位剂量中的每一个包含约100mg的所述抗体。在一些方面，(i)所述两个皮下单位剂量中的至少一个包含小于约5mL总体积中约150mg的所述抗体；并且(ii)所述三个皮下单位剂量中的至少一个包含约2mL总体积中约100mg的所述抗体。在一些方面，(i)所述两个皮下单位剂量被施用至所述受试者的两个不同身体位置，或(ii)所述三个皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。

在一些方面，所述抗体的有效剂量为约每两周施用约300mg至约900mg。在一些方面，所述抗体的有效剂量为约每两周施用约300mg、约350mg、约400mg、约450mg、约500mg、约510mg、约520mg、约530mg、约540mg、约550mg、约560mg、约570mg、约580mg、约590mg、约600mg、约610mg、约620mg、约630mg、约640mg、约650mg、约660mg、约670mg、约680mg、约690mg、约700mg、约710mg、约720mg、约730mg、约740mg、约750mg、约760mg、约770mg、约780mg、约790mg、约800mg、约810mg、约820mg、约830mg、约840mg、约850mg、约860mg、约870mg、约880mg、约890mg或约900mg。在一些方面，所述抗体的有效剂量为约每两周施用约600mg。

在一些方面，所述抗体的有效剂量包含单一皮下单位剂量。在一些方面，所述抗体的有效剂量包含两个、三个或至少四个皮下单位剂量。在一些方面，所述抗体的有效剂量包含两个皮下单位剂量，其中所述两个皮下单位剂量中的每一个包含约300mg的所述抗体。在一些方面，所述两个皮下单位剂量中的至少一个包含约2mL总体积中约300mg的所述抗体。在一些方面，所述皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。

在一些方面，所述抗体的有效剂量为约每四周施用约900mg至约1500mg。在一些方面，所述抗体的有效剂量为约每四周施用约900、约950、约1000mg、约1010mg、约1020mg、约1030mg、约1040mg、约1050mg、约1060mg、约1070mg、约1080mg、约1090mg、约1100mg、约1110mg、约1120mg、约1130mg、约1140mg、约1150mg、约1160mg、约1170mg、约1180mg、约1190mg、约1200mg、约1210mg、约1220mg、约1230mg、约1240mg、约1250mg、约1260mg、约1270mg、约1280mg、约1290mg、约1300mg、约1310mg、约1320mg、约1330mg、约1340mg、约1350mg、约1360mg、约1370mg、约1380mg、约1390mg、约1400mg、约1410mg、约1420mg、约1430mg、约1440mg、约1450mg、约1460mg、约1470mg、约1480mg、约1490mg或约1500mg。在一些方面，所述抗体的有效剂量为约每四周施用约1200mg。在一些方面，所述抗体的有效剂量包含两个、三个、四个、六个或至少八个皮下单位剂量。在一些方面，所述抗体的有效剂量包含四个皮下单位剂量，其中所述四个皮下单位剂量中的每一个包含约300mg的所述抗体。在一些方面，所述四个皮下单位剂量中的至少一个包含约2mL总体积中约300mg的所述抗体。在一些方面，所述皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。在一些方面，所述两个、三个、四个、六个或至少八个皮下单位剂量是在同一天施用。

在一些方面，所述抗体包括抗PD-L1抗体。在一些方面，所述抗体的有效剂量为约每两周施用约900mg至约1800mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体的有效剂量为约每两周施用约900mg、约950mg、约1000mg、约1010mg、约1020mg、约1030mg、约1040mg、约1050mg、约1060mg、约1070mg、约1080mg、约1090mg、约1100mg、约1110mg、约1120mg、约1130mg、约1140mg、约1150mg、约1160mg、约1170mg、约1180mg、约1190mg、约1200mg、约1210mg、约1220mg、约1230mg、约1240mg、约1250mg、约1260mg、约1270mg、约1280mg、约1290mg、约1300mg、约1310mg、约1320mg、约1330mg、约1340mg、约1350mg、约1360mg、约1370mg、约1380mg、约1390mg、约1400mg、约1410mg、约1420mg、约1430mg、约1440mg、约1450mg、约1460mg、约1470mg、约1480mg、约1490mg或约1500mg。在一些方面，所述抗体的有效剂量为约每两周约1200mg。在一些方面，所述有效剂量包含至少两个、至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个或至少八个皮下单位剂量。在一些方面，所述抗体的有效剂量包含四个皮下单位剂量，其中所述四个皮下单位剂量中的每一个包含约300mg的所述抗体。在一些方面，所述四个皮下单位剂量中的至少一个包含约2mL总体积中约300mg的所述抗体。在一些方面，所述皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。在一些方面，所述两个、三个、四个、五个、六个、七个或至少八个皮下单位剂量是在同一天施用。

在一些方面，所述抗PD-1抗体包括如下抗体，所述抗体包括纳武单抗、派姆单抗、PDR001、MEDI-0680、西米普利单抗、特瑞普利单抗、替雷利珠单抗、INCSHR1210、TSR-042、GLS-010、AM-0001、STI-1110、AGEN2034、MGA012、BCD-100、IBI308、KN035、萨善利单抗或其任何组合。在一些方面，所述抗PD-1抗体与纳武单抗交叉竞争与人PD-1的结合。在一些方面，所述抗PD-1抗体包括纳武单抗。在一些方面，所述抗PD-1抗体包括派姆单抗。

在一些方面，所述抗PD-L1抗体包括如下抗体，所述抗体包括BMS-936559、阿特珠单抗、度伐鲁单抗、阿维鲁单抗、STI-1014、CX-072、KN035、LY3300054、BGB-A333、CK-301或其任何组合。

在一些方面，所述受试者患有癌症。在一些方面，所述癌症包含鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma)、小细胞肺癌(SCLC)、非小细胞肺癌(NSCLC)、鳞状NSCLC、非鳞状NSCLC、神经胶质瘤、胃肠癌、肾癌(renal cancer)、透明细胞癌、卵巢癌、肝癌、结直肠癌、子宫内膜癌(endometrial cancer)、肾癌(kidney cancer)、肾细胞癌(RCC)、前列腺癌、激素难治性前列腺腺癌、甲状腺癌、神经母细胞瘤、胰腺癌、胶质母细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤、宫颈癌(cervical cancer)、胃癌(stomach cancer)、膀胱癌、肝细胞瘤、乳腺癌、结肠癌、头颈癌、胃癌(gastric cancer)、生殖细胞肿瘤、儿科肉瘤、鼻窦自然杀伤细胞、黑色素瘤、骨癌、皮肤癌、子宫癌、肛区癌症、睾丸癌、输卵管癌、子宫内膜癌(carcinoma of theendometrium)、宫颈癌(carcinoma of the cervix)、阴道癌、外阴癌、食管癌、小肠癌、内分泌系统癌症、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、直肠癌、儿童实体瘤、输尿管癌、肾盂癌、中枢神经系统(CNS)肿瘤、原发性CNS淋巴瘤、肿瘤血管生成、脊柱轴肿瘤、脑癌、脑干神经胶质瘤、垂体腺瘤、卡波西肉瘤、表皮样癌、鳞状细胞癌(squamous cellcancer)、包括石棉诱发癌症在内的环境诱发癌症、病毒相关癌症或病毒来源的癌症(例如，人乳头瘤病毒(HPV相关的或来源的肿瘤))或其任何组合。

在一些方面，使用自动注射器施用所述药物组合物。在一些方面，使用穿戴式泵施用所述药物组合物。在一些方面，所述药物组合物通过皮下输注小于约10分钟施用至所述受试者。在一些方面，所述药物组合物通过皮下输注小于约5分钟施用至所述受试者。

在一些方面，所述药物组合物还包含至少两种抗氧化剂。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂选自甲硫氨酸、色氨酸、组氨酸、半胱氨酸、抗坏血酸、甘氨酸、DTPA和EDTA。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂包含(i)甲硫氨酸和EDTA，或者(ii)甲硫氨酸和DTPA。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂包含至少约1至约20mM甲硫氨酸。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂包含至少约1mM、至少约1.5mM、至少约2mM、至少约2.5mM、至少约3mM、至少约3.5mM、至少约4mM、至少约4.5mM、至少约5mM、至少约5.5mM、至少约6mM、至少约6.5mM、至少约7mM、至少约7.5mM或至少约8mM、至少约8.5mM、至少约9mM、至少约9.5mM、至少约10mM、至少约11mM、至少约12mM、至少约13mM、至少约14mM、至少约15mM、至少约16mM、至少约17mM、至少约18mM、至少约19mM或至少约20mM甲硫氨酸。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂包含约5mM甲硫氨酸。

在一些方面，所述至少两种抗氧化剂包含至少约10μM至约200μM DTPA。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂包含至少约10μM、至少约15μM、至少约20μM、至少约25μM、至少约30μM、至少约35μM、至少约40μM、至少约45μM、至少约50μM、至少约55μM、至少约60μM、至少约65μM、至少约70μM、至少约75μM、至少约80μM、至少约85μM、至少约90μM、至少约95μM、至少约100μM、至少约110μM、至少约120μM、至少约130μM、至少约140μM、至少约150μM、至少约160μM、至少约170μM、至少约180μM、至少约190μM或至少约200μM DTPA。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂包含约50μM DTPA。

在一些方面，所述药物组合物还包含张力调节剂和/或稳定剂。在一些方面，所述张力调节剂和/或稳定剂包括糖、氨基酸、多元醇、盐或其组合。在一些方面，所述张力调节剂和/或稳定剂选自蔗糖、山梨醇、海藻糖、甘露醇、甘油、甘氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、氯化钠、脯氨酸、精氨酸、组氨酸及其任何组合。在一些方面，所述张力调节剂包括蔗糖。在一些方面，所述药物组合物包含至少约10mM至至少约500mM蔗糖。在一些方面，所述药物组合物包含至少约10mM、至少约20mM、至少约30mM、至少约40mM、至少约50mM、至少约60mM、至少约70mM、至少约80mM、至少约90mM、至少约100mM、至少约110mM、至少约120mM、至少约130mM、至少约140mM、至少约150mM、至少约160mM、至少约170mM、至少约180mM、至少约190mM、至少约200mM、至少约210mM、至少约220mM、至少约230mM、至少约240mM、至少约250mM、至少约260mM、至少约270mM、至少约280mM、至少约290mM、至少约300mM、至少约310mM、至少约320mM、至少约330mM、至少约340mM、至少约350mM、至少约360mM、至少约370mM、至少约380mM、至少约390mM、至少约400mM、至少约410mM、至少约420mM、至少约430mM、至少约440mM、至少约450mM、至少约460mM、至少约470mM、至少约480mM、至少约490mM或至少约500mM蔗糖。在一些方面，所述药物组合物包含约250mM蔗糖。

在一些方面，所述药物组合物还包含表面活性剂。在一些方面，所述表面活性剂选自聚山梨酯20、聚山梨酯80和泊洛沙姆188。在一些方面，所述表面活性剂包括聚山梨酯80。根据权利要求1至81中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含至少约0.01％w/v至至少约0.1％w/v聚山梨酯80。在一些方面，所述药物组合物包含至少约0.01％w/v、至少约0.02％w/v、至少约0.03％w/v、至少约0.04％w/v、至少约0.05％w/v、至少约0.06％w/v、至少约0.07％w/v、至少约0.08％w/v、至少约0.09％w/v或至少约0.1％w/v聚山梨酯80。在一些方面，所述药物组合物包含约0.05％w/v聚山梨酯80。

在一些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。

在一些方面，所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。

本公开文本的某些方面涉及一种用于本文公开的任何方法中的药物组合物。

本公开文本的某些方面涉及一种药物组合物，所述药物组合物包含(i)特异性结合PD-1的抗体(“抗PD-1抗体”)，和(ii)至少两种抗氧化剂。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂选自甲硫氨酸、色氨酸、组氨酸、半胱氨酸、抗坏血酸、甘氨酸、DTPA和EDTA。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂包含(i)甲硫氨酸和EDTA，或者(ii)甲硫氨酸和DTPA。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂包含至少约1至约20mM甲硫氨酸。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂包含至少约1mM、至少约1.5mM、至少约2mM、至少约2.5mM、至少约3mM、至少约3.5mM、至少约4mM、至少约4.5mM、至少约5mM、至少约5.5mM、至少约6mM、至少约6.5mM、至少约7mM、至少约7.5mM、至少约8mM、至少约8.5mM、至少约9mM、至少约9.5mM、至少约10mM、至少约11mM、至少约12mM、至少约13mM、至少约14mM、至少约15mM、至少约16mM、至少约17mM、至少约18mM、至少约19mM或至少约20mM甲硫氨酸。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂包含约5mM甲硫氨酸。

在一些方面，所述组合物包含至少约20mg/mL至至少约200mg/mL的抗PD-1抗体。在一些方面，所述组合物包含至少约135mg/mL至至少约180mg/mL的抗PD-1抗体。在一些方面，所述组合物包含至少约108mg/mL至至少约132mg/mL的抗PD-1抗体。在一些方面，所述组合物包含至少约20mg/mL、至少约30mg/mL、至少约40mg/mL、至少约50mg/mL、至少约60mg/mL、至少约70mg/mL、至少约80mg/mL、至少约90mg/mL、至少约100mg/mL、至少约110mg/mL、至少约120mg/mL、至少约130mg/mL、至少约140mg/mL、至少约150mg/mL、至少约160mg/mL、至少约170mg/mL、至少约180mg/mL、至少约190mg/mL或至少约200mg/mL的抗PD-1抗体。在一些方面，所述组合物包含约120mg/mL的抗PD-1抗体。在一些方面，所述组合物包含约150mg/mL的抗PD-1抗体。

在一些方面，所述组合物还包含张力调节剂和/或稳定剂。在一些方面，所述张力调节剂和/或稳定剂包括糖、氨基酸、多元醇、盐或其组合。在一些方面，所述张力调节剂和/或稳定剂选自蔗糖、山梨醇、海藻糖、甘露醇、甘油、甘氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、氯化钠、脯氨酸、精氨酸、组氨酸及其任何组合。在一些方面，所述张力调节剂包括蔗糖。在一些方面，所述组合物包含至少约10mM至至少约500mM蔗糖。在一些方面，所述组合物包含至少约10mM、至少约20mM、至少约30mM、至少约40mM、至少约50mM、至少约60mM、至少约70mM、至少约80mM、至少约90mM、至少约100mM、至少约110mM、至少约120mM、至少约130mM、至少约140mM、至少约150mM、至少约160mM、至少约170mM、至少约180mM、至少约190mM、至少约200mM、至少约210mM、至少约220mM、至少约230mM、至少约240mM、至少约250mM、至少约260mM、至少约270mM、至少约280mM、至少约290mM、至少约300mM、至少约310mM、至少约320mM、至少约330mM、至少约340mM、至少约350mM、至少约360mM、至少约370mM、至少约380mM、至少约390mM、至少约400mM、至少约410mM、至少约420mM、至少约430mM、至少约440mM、至少约450mM、至少约460mM、至少约470mM、至少约480mM、至少约490mM或至少约500mM蔗糖。在一些方面，所述组合物包含约250mM蔗糖。

在一些方面，所述组合物还包含缓冲剂。在一些方面，所述缓冲剂选自组氨酸、琥珀酸盐、氨丁三醇、磷酸钠、乙酸钠和柠檬酸钠。在一些方面，所述缓冲剂包括组氨酸。在一些方面，所述组合物包含至少约5mM至至少约100mM组氨酸。在一些方面，所述组合物包含至少约5mM、至少约10mM、至少约15mM、至少约20mM、至少约25mM、至少约30mM、至少约35mM、至少约40mM、至少约45mM、至少约50mM、至少约60mM、至少约70mM、至少约80mM、至少约90mM或至少约100mM组氨酸。在一些方面，所述组合物包含约20mM组氨酸。

在一些方面，所述组合物还包含表面活性剂。在一些方面，所述表面活性剂选自聚山梨酯20、聚山梨酯80和泊洛沙姆188。在一些方面，所述表面活性剂包括聚山梨酯80。在一些方面，所述组合物包含至少约0.01％w/v至至少约0.1％w/v聚山梨酯80。在一些方面，所述组合物包含至少约0.01％w/v、至少约0.02％w/v、至少约0.03％w/v、至少约0.04％w/v、至少约0.05％w/v、至少约0.06％w/v、至少约0.07％w/v、至少约0.08％w/v、至少约0.09％w/v或至少约0.1％w/v聚山梨酯80。在一些方面，所述组合物包含约0.05％w/v聚山梨酯80。

在一些方面，所述组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。

在一些方面，所述组合物包含：(a)约120mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。

在一些方面，所述组合物具有约5.2至约6.8的pH。在一些方面，所述组合物具有约5.2、约5.3、约5.4、约5.5、约5.6、约5.7、约5.8、约5.9、约6.0、约6.1、约6.2、约6.3、约6.4、约6.5、约6.6、约6.7或约6.8的pH。在一些方面，所述组合物具有约6.0的pH。

在一些方面，所述药物组合物还包含第二治疗剂。在一些方面，所述第二治疗剂是抗体。在一些方面，所述第二治疗剂是检查点抑制剂。在一些方面，所述检查点抑制剂是抗CTLA-4抗体、抗LAG-3抗体、抗TIM3抗体、抗TIGIT抗体、抗TIM3抗体、抗NKG2a抗体、抗OX40抗体、抗ICOS抗体、抗MICA抗体、抗CD137抗体、抗KIR抗体、抗TGFβ抗体、抗IL-10抗体、抗IL-8抗体、抗B7-H4抗体、抗Fas配体抗体、抗CXCR4抗体、抗间皮素抗体、抗CD27抗体、抗GITR抗体或其任何组合。在一些方面，所述药物组合物还包含第三治疗剂。在一些方面，所述第二治疗剂、所述第三治疗剂或二者包含IL-2(例如，贝培阿地白介素)或IL12-Fc(例如，BMS-986415)。

本公开文本的某些方面涉及一种小瓶，所述小瓶包含本文公开的药物组合物。

本公开文本的某些方面涉及一种单位剂量，所述单位剂量包含本文公开的任何药物组合物。

本公开文本的某些方面涉及一种单位剂量，所述单位剂量包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。

在一些方面，所述小瓶是自动注射器。本公开文本的某些方面涉及一种自动注射器，所述自动注射器包含本文公开的单位剂量。在一些方面，所述小瓶是穿戴式装置。本公开文本的某些方面涉及一种穿戴式装置，所述穿戴式装置包含本文公开的单位剂量。

方面

药物组合物及其用途。

方面A1.一种药物组合物，所述药物组合物包含(i)特异性结合PD-1的抗体(“抗PD-1抗体”)，(ii)内切糖苷酶水解酶，以及(iii)至少两种抗氧化剂。

方面A2.根据方面A1所述的药物组合物，其中所述至少两种抗氧化剂中的至少一种是牺牲抗氧化剂。

方面A3.根据方面A2所述的药物组合物，其中所述牺牲抗氧化剂选自甲硫氨酸、色氨酸、和组氨酸、半胱氨酸、抗坏血酸、甘氨酸或其他牺牲剂。

方面A4.根据方面A1至A3中任一项所述的药物组合物，其中所述至少两种抗氧化剂中的至少一种包含金属离子螯合剂。

方面A5.根据方面A4所述的药物组合物，其中所述金属离子螯合剂选自喷替酸(“DTPA”)和EDTA。

方面A6.根据方面A1至A5中任一项所述的药物组合物，其中所述至少两种抗氧化剂选自甲硫氨酸、DTPA和EDTA。

方面A7.根据方面A1至A6中任一项所述的药物组合物，其中所述至少两种抗氧化剂中的一种是甲硫氨酸。

方面A8.根据方面A1至A7中任一项所述的药物组合物，其中所述至少两种抗氧化剂中的一种是DTPA。

方面A9.根据方面A1至A7中任一项所述的药物组合物，其中所述至少两种抗氧化剂中的一种是EDTA。

方面A10.根据方面A1至A8中任一项所述的药物组合物，其中所述至少两种抗氧化剂是甲硫氨酸和DTPA。

方面A11.根据方面A1至A7和A9中任一项所述的药物组合物，其中所述至少两种抗氧化剂是甲硫氨酸和EDTA。

方面A12.根据方面A1至A11中任一项所述的药物组合物，其中所述至少一种抗氧化剂包含至少约1至约20mM甲硫氨酸。

方面A13.根据方面A1至A12中任一项所述的药物组合物，其中所述至少一种抗氧化剂包含至少约1mM、至少约1.5mM、至少约2mM、至少约2.5mM、至少约3mM、至少约3.5mM、至少约4mM、至少约4.5mM、至少约5mM、至少约5.5mM、至少约6mM、至少约6.5mM、至少约7mM、至少约7.5mM、至少约8mM、至少约8.5mM、至少约9mM、至少约9.5mM、至少约10mM、至少约11mM、至少约12mM、至少约13mM、至少约14mM、至少约15mM、至少约16mM、至少约17mM、至少约18mM、至少约19mM或至少约20mM甲硫氨酸。

方面A14.根据方面A1至A13中任一项所述的药物组合物，其中所述至少一种抗氧化剂包含约5mM甲硫氨酸。

方面A15.根据方面A1至A14中任一项所述的药物组合物，其中所述至少一种抗氧化剂包含至少约10μM至约200μM DTPA。

方面A16.根据方面A1至A15中任一项所述的药物组合物，其中所述至少一种抗氧化剂包含至少约10μM、至少约15μM、至少约20μM、至少约25μM、至少约30μM、至少约35μM、至少约40μM、至少约45μM、至少约50μM、至少约55μM、至少约60μM、至少约65μM、至少约70μM、至少约75μM、至少约80μM、至少约85μM、至少约90μM、至少约95μM、至少约100μM、至少约110μM、至少约120μM、至少约130μM、至少约140μM、至少约150μM、至少约160μM、至少约170μM、至少约180μM、至少约190μM或至少约200μM DTPA。

方面A17.根据方面A1至A16中任一项所述的药物组合物，其中所述至少一种抗氧化剂包含约50μM DTPA。

方面A18.根据方面A1至A17中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约20mg/mL至至少约200mg/mL的抗PD-1抗体。

方面A19.根据方面A1至A18中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约135mg/mL至至少约180mg/mL的抗PD-1抗体。

方面A20.根据方面A1至A17中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约108mg/mL至至少约132mg/mL的抗PD-1抗体。

方面A21.根据方面A1至A20中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约20mg/mL、至少约30mg/mL、至少约40mg/mL、至少约50mg/mL、至少约60mg/mL、至少约70mg/mL、至少约80mg/mL、至少约90mg/mL、至少约100mg/mL、至少约110mg/mL、至少约120mg/mL、至少约130mg/mL、至少约140mg/mL、至少约150mg/mL、至少约160mg/mL、至少约170mg/mL、至少约180mg/mL、至少约190mg/mL或至少约200mg/mL的抗PD-1抗体。

方面A22.根据方面A1至A21中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含约120mg/mL的抗PD-1抗体。

方面A23.根据方面A1至A21中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含约150mg/mL的抗PD-1抗体。

方面A24.根据方面A1至A23中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约5U至至少约100,000U的内切糖苷酶水解酶。

方面A25.根据方面A1至A24中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约5U、至少约10U、至少约20U、至少约30U、至少约40U、至少约50U、至少约75U、至少约100U、至少约200U、至少约300U、至少约400U、至少约500U、至少约750U、至少约1000U、至少约2000U、至少约3000U、至少约4000U、至少约5000U、至少约6000U、至少约7000U、至少约8000U、至少约9000U、至少约10,000U、至少约20,000U、至少约30,000U、至少约40,000U、至少约50,000U、至少约60,000U、至少约70,000U、至少约80,000U、至少约90,000U或至少约100,000U的内切糖苷酶水解酶。

方面A26.根据方面A1至A25中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含约20,000U的内切糖苷酶水解酶。

方面A27.根据方面A1至A26中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约500U/mL至至少约5000U/mL的内切糖苷酶水解酶。

方面A28.根据方面A1至A27中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约1500U/mL、至少约1600U/mL、至少约1700U/mL、至少约1800U/mL、至少约1900U/mL、至少约2000U/mL、至少约2100U/mL、至少约2200U/mL、至少约2300U/mL、至少约2400μM、至少约2500U/mL、至少约3000U/mL、至少约3500U/mL、至少约4000U/mL、至少约4500U/mL或至少约5000U/mL的内切糖苷酶水解酶。

方面A29.根据方面A1至A28中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含约2000U/mL的内切糖苷酶水解酶。

方面A30.根据方面A1至A29中任一项所述的药物组合物，其中所述内切糖苷酶水解酶在己糖胺β(1-4)或(1-3)连接处切割透明质酸。

方面A31.根据方面A1至A30中任一项所述的药物组合物，其中所述内切糖苷酶水解酶包含透明质酸酶PH-20(HuPH20)、HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4或HYALPS1的催化结构域。

方面A32.根据方面A1至A31中任一项所述的药物组合物，其中所述内切糖苷酶水解酶包含与SEQ ID NO:1的氨基酸36-490具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。

方面A33.根据方面A1至A32中任一项所述的药物组合物，其中所述内切糖苷酶水解酶包括透明质酸酶。

方面A34.根据方面A1至A33中任一项所述的药物组合物，其中所述内切糖苷酶水解酶包括选自HuPH20、HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4、其任何变体和任何亚型的透明质酸酶。

方面A35.根据方面A1至A34中任一项所述的药物组合物，其中所述内切糖苷酶水解酶包括rHuPH20或其片段。

方面A36.根据方面A1至A35中任一项所述的药物组合物，其中所述内切糖苷酶水解酶包括经修饰的透明质酸酶，所述经修饰的透明质酸酶相对于选自HuPH20、HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4、HYALPS1或其片段的野生型透明质酸酶包含一个或多个氨基酸取代。

方面A37.根据方面A1至A36中任一项所述的药物组合物，其中所述内切糖苷酶水解酶包括经修饰的透明质酸酶，所述经修饰的透明质酸酶相对于选自HuPH20、HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4、HYALPS1或其片段的野生型透明质酸酶包含α螺旋区中的一个或多个氨基酸取代。

方面A38.根据方面A1至A37中任一项所述的药物组合物，其中所述内切糖苷酶水解酶包括经修饰的透明质酸酶，所述经修饰的透明质酸酶相对于选自HuPH20、HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4、HYALPS1或其片段的野生型透明质酸酶包含接头区中的一个或多个氨基酸取代。

方面A39.根据方面A1至A38中任一项所述的药物组合物，其中所述内切糖苷酶水解酶包括经修饰的透明质酸酶，其中相对于选自HuPH20、HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4、HYALPS1或其片段的野生型透明质酸酶，一个或多个N末端和/或C末端氨基酸缺失。

方面A40.根据方面A1至A39中任一项所述的药物组合物，其中所述内切糖苷酶水解酶包括经修饰的rHuPH20，其中所述经修饰的rHuPH20包含：i.相对于野生型rHuPH20，α螺旋区、接头区或α螺旋区和接头区二者中的一个或多个氨基酸取代；ii.相对于野生型rHuPH20，一个或多个N末端氨基酸、一个或多个C末端氨基酸或一个或多个N末端氨基酸和一个或多个C末端氨基酸的缺失；或者iii.(i)和(ii)二者。

方面A41.根据方面A1至A40中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物还包含张力调节剂和/或稳定剂。

方面A42.根据方面A41所述的药物组合物，其中所述张力调节剂和/或稳定剂包括糖、氨基酸、多元醇、盐或其组合。

方面A43.根据方面A41或A42所述的药物组合物，其中所述张力调节剂和/或稳定剂包括蔗糖、山梨醇、海藻糖、甘露醇、甘油、甘氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、氯化钠、脯氨酸、精氨酸、组氨酸或其任何组合。

方面A44.根据方面A41至A43中任一项所述的药物组合物，其中所述张力调节剂包括蔗糖。

方面A45.根据方面A1至A44中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约10mM至至少约500mM蔗糖。

方面A46.根据方面A1至A45中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约10mM、至少约20mM、至少约30mM、至少约40mM、至少约50mM、至少约60mM、至少约70mM、至少约80mM、至少约90mM、至少约100mM、至少约110mM、至少约120mM、至少约130mM、至少约140mM、至少约150mM、至少约160mM、至少约170mM、至少约180mM、至少约190mM、至少约200mM、至少约210mM、至少约220mM、至少约230mM、至少约240mM、至少约250mM、至少约260mM、至少约270mM、至少约280mM、至少约290mM、至少约300mM、至少约310mM、至少约320mM、至少约330mM、至少约340mM、至少约350mM、至少约360mM、至少约370mM、至少约380mM、至少约390mM、至少约400mM、至少约410mM、至少约420mM、至少约430mM、至少约440mM、至少约450mM、至少约460mM、至少约470mM、至少约480mM、至少约490mM或至少约500mM蔗糖。

方面A47.根据方面A1至A46中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含约250mM蔗糖。

方面A48.根据方面A1至A47中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物还包含缓冲剂。

方面A49.根据方面A48所述的药物组合物，其中所述缓冲剂选自组氨酸、琥珀酸盐、氨丁三醇、磷酸钠、乙酸钠和柠檬酸钠。

方面A50.根据方面A48或A49所述的药物组合物，其中所述缓冲剂包括组氨酸。

方面A51.根据方面A1至A50中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约5mM至至少约100mM组氨酸。

方面A52.根据方面A1至A51中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约5mM、至少约10mM、至少约15mM、至少约20mM、至少约25mM、至少约30mM、至少约35mM、至少约40mM、至少约45mM、至少约50mM、至少约60mM、至少约70mM、至少约80mM、至少约90mM或至少约100mM组氨酸。

方面A53.根据方面A1至A52中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含约20mM组氨酸。

方面A54.根据方面A1至A53中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物还包含表面活性剂。

方面A55.根据方面A54所述的药物组合物，其中所述表面活性剂选自聚山梨酯20、聚山梨酯80和泊洛沙姆188。

方面A56.根据方面A54或A55所述的药物组合物，其中所述表面活性剂包括聚山梨酯80。

方面A57.根据方面A1至A56中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约0.01％w/v至至少约0.1％w/v聚山梨酯80。

方面A58.根据方面A1至A57中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约0.01％w/v、至少约0.02％w/v、至少约0.03％w/v、至少约0.04％w/v、至少约0.05％w/v、至少约0.06％w/v、至少约0.07％w/v、至少约0.08％w/v、至少约0.09％w/v或至少约0.1％w/v聚山梨酯80。

方面A59.根据方面A1至A58中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含约0.05％w/v聚山梨酯80。

方面A60.根据方面A1至A35和A41至A59中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约0.0182mg/mL rHuPH20。

方面A61.根据方面A1至A35和A41至A59中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。

方面A62.根据方面A1至A35和A41至A59中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约0.0182mg/mL rHuPH20。

方面A63.根据方面A1至A35和A41至A59中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。

方面A64.根据方面A1至A63中任一项所述的药物组合物，其中所述抗PD-1抗体选自纳武单抗、派姆单抗、PDR001、MEDI-0680、西米普利单抗、特瑞普利单抗、替雷利珠单抗、INCSHR1210、TSR-042、GLS-010、AM-0001、STI-1110、AGEN2034、MGA012、BCD-100、IBI308、萨善利单抗及其任何组合。

方面A65.根据方面A1至A64中任一项所述的药物组合物，其中所述抗PD-1抗体是纳武单抗。

方面A66.根据方面A1至A64中任一项所述的药物组合物，其中所述抗PD-1抗体是派姆单抗。

方面A67.根据方面A1至A35和A41至A65中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约0.0182mg/mL rHuPH20。

方面A68.根据方面A1至A35和A41至A65中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。

方面A69.根据方面A1至A35和A41至A65中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约0.0182mg/mL rHuPH20。

方面A70.根据方面A1至A35和A41至A65中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。

方面A71.根据方面A1至A35和A41至A65中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：(a)约672mg纳武单抗；(b)约8.68mg组氨酸；(c)约11.8mg组氨酸HCl H2O；(d)约479mg蔗糖；(e)约2.80mg聚山梨酯80；(f)约0.110mg喷替酸；(g)约4.18mg甲硫氨酸；(h)约0.102mg rHuPH20；其中(a)-(h)在水中重构至至少约5.6mL的最终体积。

方面A72.根据方面A1至A71中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含约5.2至约6.8的pH。

方面A73.根据方面A1至A72中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物具有约5.2、约5.3、约5.4、约5.5、约5.6、约5.7、约5.8、约5.9、约6.0、约6.1、约6.2、约6.3、约6.4、约6.5、约6.6、约6.7或约6.8的pH。

方面A74.根据方面A1至A73中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物具有约6.0的pH。

方面A75.根据方面A1至A74中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物还包含第二治疗剂。

方面A76.根据方面A75所述的药物组合物，其中所述第二治疗剂是抗体。

方面A77.根据方面A76所述的药物组合物，其中所述第二治疗剂是检查点抑制剂。

方面A78.根据方面A77所述的药物组合物，其中所述检查点抑制剂是抗CTLA-4抗体、抗LAG-3抗体、抗TIM3抗体、抗TIGIT抗体、抗NKG2a抗体、抗OX40抗体、抗ICOS抗体、抗MICA抗体、抗CD137抗体、抗KIR抗体、抗TGFβ抗体、抗IL-10抗体、抗IL-8抗体、抗B7-H4抗体、抗Fas配体抗体、抗CXCR4抗体、抗间皮素抗体、抗CD27抗体、抗GITR抗体或其任何组合。

方面A79.根据方面A1至A35和A41至A78中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)约2000U/mL rHuPH20；以及(h)抗CTLA-4抗体。

方面A80.根据方面A1至A35和A41至A78中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)约2000U/mL rHuPH20；以及(h)抗CTLA-4抗体。

方面A81.根据方面A1至A35和A41至A78中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)约2000U/mL rHuPH20；以及(h)抗LAG-3抗体。

方面A82.根据方面A1至A35和A41至A78中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)约2000U/mL rHuPH20；以及(h)抗LAG-3抗体。

方面A83.根据方面A1至A35和A41至A78中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)约2000U/mL rHuPH20；以及(h)抗TIM3抗体。

方面A84.根据方面A1至A35和A41至A78中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)约2000U/mL rHuPH20；以及(h)抗TIM3抗体。

方面A85.一种小瓶，所述小瓶包含根据方面A1至A84中任一项所述的药物组合物。

方面A86.一种针筒，所述针筒包含根据方面A1至A84中任一项所述的药物组合物。

方面A87.一种自动注射器，所述自动注射器包含根据方面A1至A84中任一项所述的药物组合物。

方面A88.一种穿戴式泵，所述穿戴式泵包含根据方面A1至A84中任一项所述的药物组合物。

方面A89.根据方面A86所述的针筒，所述针筒还包含柱塞。

方面A90.一种治疗有需要的受试者的疾病或障碍的方法，所述方法包括向所述受试者施用药学有效量的根据方面A1至A84中任一项所述的药物组合物。

方面A91.根据方面A90所述的方法，其中所述药物组合物是皮下施用。

方面A92.根据方面A90或A91所述的方法，其中所述疾病或障碍是感染性疾病。

方面A93.根据方面A90或A91所述的方法，其中所述疾病或障碍是癌症。

方面A94.根据方面A93所述的方法，其中所述癌症选自鳞状细胞癌(squamouscell carcinoma)、小细胞肺癌(SCLC)、非小细胞肺癌(NSCLC)、鳞状NSCLC、非鳞状NSCLC、神经胶质瘤、胃肠癌、肾癌(renal cancer)、透明细胞癌、卵巢癌、肝癌、结直肠癌、子宫内膜癌(endometrial cancer)、肾癌(kidney cancer)、肾细胞癌(RCC)、前列腺癌、激素难治性前列腺腺癌、甲状腺癌、神经母细胞瘤、胰腺癌、胶质母细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤、宫颈癌(cervical cancer)、胃癌(stomach cancer)、膀胱癌、肝细胞瘤、乳腺癌、结肠癌、头颈癌、胃癌(gastric cancer)、生殖细胞肿瘤、儿科肉瘤、鼻窦自然杀伤细胞、黑色素瘤、骨癌、皮肤癌、子宫癌、肛区癌症、睾丸癌、输卵管癌、子宫内膜癌(carcinoma of theendometrium)、宫颈癌(carcinoma of the cervix)、阴道癌、外阴癌、食管癌、小肠癌、内分泌系统癌症、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、直肠癌、儿童实体瘤、输尿管癌、肾盂癌、中枢神经系统(CNS)肿瘤、原发性CNS淋巴瘤、肿瘤血管生成、脊柱轴肿瘤、脑癌、脑干神经胶质瘤、垂体腺瘤、卡波西肉瘤、表皮样癌、鳞状细胞癌(squamous cellcancer)、包括石棉诱发癌症在内的环境诱发癌症、病毒相关癌症或病毒来源的癌症(例如，人乳头瘤病毒(HPV相关的或来源的肿瘤))及其任何组合。

方面1.一种治疗有需要的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者皮下施用有效剂量的药物组合物，所述药物组合物包含特异性结合PD-1或PD-L1并抑制PD-1与PD-L1相互作用的抗体(分别为“抗PD-1抗体”或“抗PD-L1抗体”)；其中所述有效剂量包含一个或多个皮下单位剂量，其中所述皮下单位剂量中的至少一个的总体积小于约5mL、小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约3mL或小于约2.5mL；并且其中所述有效剂量包含至少约250mg至至少约2400mg的所述抗体。

方面B2.根据方面B1所述的方法，其中所述药物组合物不包含透明质酸酶。

方面B3.根据方面B1或B2所述的方法，其中所述有效剂量包含两个或更多个皮下单位剂量，并且其中所述两个或更多个皮下单位剂量是并行或随后施用。

方面B4.根据方面B3所述的方法，其中所述两个或更多个皮下单位剂量是随后施用，其中所述两个或更多个皮下单位剂量中的每一个是在所述两个或更多个皮下单位剂量之间约10分钟、约15分钟、约20分钟、约30分钟、约45分钟、约一小时、约两小时、约三小时、约四小时、约五小时、约六小时、约九小时、约十二小时、约十八小时或约二十四小时的间隔内施用。

方面B5.根据方面B1至B4中任一项所述的方法，其中约每一、二、三或四周施用所述有效剂量。

方面B6.根据方面B1至B5中任一项所述的方法，其中所述抗体包括抗PD-1抗体。

方面B7.根据方面B1至B6中任一项所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每周施用约250mg至约600mg的所述抗体。

方面B8.根据方面B1至B7中任一项所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每周施用约250mg、约260mg、约270mg、约280mg、约290mg、约300mg、约310mg、约320mg、约330mg、约340mg、约350mg、约360mg、约370mg、约380mg、约390mg、约400mg、约410mg、约420mg、约430mg、约440mg、约450mg、约460mg、约470mg、约480mg、约490mg、约500mg、约510mg、约520mg、约530mg、约540mg、约550mg、约560mg、约570mg、约580mg、约590mg或约600mg。

方面B9.根据方面B1至B8中任一项所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每周施用约300mg。

方面B10.根据方面B9所述的方法，其中所述抗体的有效剂量包含约300mg的单一皮下单位剂量。

方面B11.根据方面B9或B10所述的方法，其中所述抗体的有效剂量包含约2mL总施用体积中约300mg的单一皮下单位剂量。

方面B12.根据方面B9所述的方法，其中所述抗体的有效剂量包含(i)两个皮下单位剂量，其中所述两个皮下单位剂量中的每一个包含约150mg的所述抗体；或者(ii)三个皮下单位剂量，其中所述三个皮下单位剂量中的每一个包含约100mg的所述抗体。

方面B13.根据方面B12所述的方法，其中(i)所述两个皮下单位剂量中的至少一个包含小于约5mL总体积中约150mg的所述抗体；并且(ii)所述三个皮下单位剂量中的至少一个包含约2mL总体积中约100mg的所述抗体。

方面B14.根据方面B12或B13所述的方法，其中(i)所述两个皮下单位剂量被施用至所述受试者的两个不同身体位置，或(ii)所述三个皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。

方面B15.根据方面B1至B6中任一项所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每两周施用约300mg至约900mg。

方面B16.根据方面B15所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每两周施用约300mg、约350mg、约400mg、约450mg、约500mg、约510mg、约520mg、约530mg、约540mg、约550mg、约560mg、约570mg、约580mg、约590mg、约600mg、约610mg、约620mg、约630mg、约640mg、约650mg、约660mg、约670mg、约680mg、约690mg、约700mg、约710mg、约720mg、约730mg、约740mg、约750mg、约760mg、约770mg、约780mg、约790mg、约800mg、约810mg、约820mg、约830mg、约840mg、约850mg、约860mg、约870mg、约880mg、约890mg或约900mg。

方面B17.根据方面B15或B16所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每两周施用约600mg。

方面B18.根据方面B17所述的方法，其中所述抗体的有效剂量包含单一皮下单位剂量。

方面B19.根据方面B17所述的方法，其中所述抗体的有效剂量包含两个、三个或至少四个皮下单位剂量。

方面B20.根据方面B17或B19所述的方法，其中所述抗体的有效剂量包含两个皮下单位剂量，其中所述两个皮下单位剂量中的每一个包含约300mg的所述抗体。

方面B21.根据方面B20所述的方法，其中所述两个皮下单位剂量中的至少一个包含约2mL总体积中约300mg的所述抗体。

方面B22.根据方面B19至B21中任一项所述的方法，其中所述皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。

方面B23.根据方面B1至B6中任一项所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每四周施用约900mg至约1500mg。

方面B24.根据方面B23所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每四周施用约900、约950、约1000mg、约1010mg、约1020mg、约1030mg、约1040mg、约1050mg、约1060mg、约1070mg、约1080mg、约1090mg、约1100mg、约1110mg、约1120mg、约1130mg、约1140mg、约1150mg、约1160mg、约1170mg、约1180mg、约1190mg、约1200mg、约1210mg、约1220mg、约1230mg、约1240mg、约1250mg、约1260mg、约1270mg、约1280mg、约1290mg、约1300mg、约1310mg、约1320mg、约1330mg、约1340mg、约1350mg、约1360mg、约1370mg、约1380mg、约1390mg、约1400mg、约1410mg、约1420mg、约1430mg、约1440mg、约1450mg、约1460mg、约1470mg、约1480mg、约1490mg或约1500mg。

方面B25.根据方面B23或B24所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每四周施用约1200mg。

方面B26.根据方面B23至B25中任一项所述的方法，其中所述抗体的有效剂量包含两个、三个、四个、六个或至少八个皮下单位剂量。

方面B27.根据方面B23至B26中任一项所述的方法，其中所述抗体的有效剂量包含四个皮下单位剂量，其中所述四个皮下单位剂量中的每一个包含约300mg的所述抗体。

方面B28.根据方面B27所述的方法，其中所述四个皮下单位剂量中的至少一个包含约2mL总体积中约300mg的所述抗体。

方面B29.根据方面B26至B28中任一项所述的方法，其中所述皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。

方面B30.根据方面B26至B29中任一项所述的方法，其中所述两个、三个、四个、六个或至少八个皮下单位剂量是在同一天施用。

方面B31.根据方面B1至B5中任一项所述的方法，其中所述抗体包括抗PD-L1抗体。

方面B32.根据方面B31所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每两周施用约900mg至约1800mg的所述抗体。

方面B33.根据方面B31或B32所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每两周施用约900、约950、约1000、约1010mg、约1020mg、约1030mg、约1040mg、约1050mg、约1060mg、约1070mg、约1080mg、约1090mg、约1100mg、约1110mg、约1120mg、约1130mg、约1140mg、约1150mg、约1160mg、约1170mg、约1180mg、约1190mg、约1200mg、约1210mg、约1220mg、约1230mg、约1240mg、约1250mg、约1260mg、约1270mg、约1280mg、约1290mg、约1300mg、约1310mg、约1320mg、约1330mg、约1340mg、约1350mg、约1360mg、约1370mg、约1380mg、约1390mg、约1400mg、约1410mg、约1420mg、约1430mg、约1440mg、约1450mg、约1460mg、约1470mg、约1480mg、约1490mg、约1500mg。

方面B34.根据方面B31至B33中任一项所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每两周约1200mg。

方面B35.根据方面B31至B34中任一项所述的方法，其中所述有效剂量包含两个、三个、四个、六个或至少八个皮下单位剂量。

方面B36.根据方面B31至B35中任一项所述的方法，其中所述抗体的有效剂量包含四个皮下单位剂量，其中所述四个皮下单位剂量中的每一个包含约300mg的所述抗体。

方面B37.根据方面B36所述的方法，其中所述四个皮下单位剂量中的至少一个包含约2mL总体积中约300mg的所述抗体。

方面B38.根据方面B35至B37中任一项所述的方法，其中所述皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。

方面B39.根据方面B35至B38中任一项所述的方法，其中所述两个、三个、四个、六个或至少八个皮下单位剂量是在同一天施用。

方面B40.根据方面B1至B30中任一项所述的方法，其中所述抗PD-1抗体包括选自以下的抗体：纳武单抗、派姆单抗、PDR001、MEDI-0680、西米普利单抗、特瑞普利单抗、替雷利珠单抗、INCSHR1210、TSR-042、GLS-010、AM-0001、STI-1110、AGEN2034、MGA012、BCD-100、IBI308、KN035、萨善利单抗及其任何组合。

方面B41.根据方面B1至B30中任一项所述的方法，其中所述抗PD-1抗体与纳武单抗交叉竞争与人PD-1的结合。

方面B42.根据方面B40所述的方法，其中所述抗PD-1抗体包括纳武单抗。

方面B43.根据方面B40所述的方法，其中所述抗PD-1抗体包括派姆单抗。

方面B44.根据方面B1至B5和B7至B39中任一项所述的方法，其中所述抗PD-L1抗体包括选自以下的抗体：BMS-936559、阿特珠单抗、度伐鲁单抗、阿维鲁单抗、STI-1014、CX-072、KN035、LY3300054、BGB-A333、CK-301及其任何组合。

方面B45.根据方面B1至B44中任一项所述的方法，其中所述受试者患有癌症。

方面B46.根据方面B45所述的方法，其中所述癌症选自鳞状细胞癌(squamouscell carcinoma)、小细胞肺癌(SCLC)、非小细胞肺癌(NSCLC)、鳞状NSCLC、非鳞状NSCLC、神经胶质瘤、胃肠癌、肾癌(renal cancer)、透明细胞癌、卵巢癌、肝癌、结直肠癌、子宫内膜癌(endometrial cancer)、肾癌(kidney cancer)、肾细胞癌(RCC)、前列腺癌、激素难治性前列腺腺癌、甲状腺癌、神经母细胞瘤、胰腺癌、胶质母细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤、宫颈癌(cervical cancer)、胃癌(stomach cancer)、膀胱癌、肝细胞瘤、乳腺癌、结肠癌、头颈癌、胃癌(gastric cancer)、生殖细胞肿瘤、儿科肉瘤、鼻窦自然杀伤细胞、黑色素瘤、骨癌、皮肤癌、子宫癌、肛区癌症、睾丸癌、输卵管癌、子宫内膜癌(carcinoma of theendometrium)、宫颈癌(carcinoma of the cervix)、阴道癌、外阴癌、食管癌、小肠癌、内分泌系统癌症、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、直肠癌、儿童实体瘤、输尿管癌、肾盂癌、中枢神经系统(CNS)肿瘤、原发性CNS淋巴瘤、肿瘤血管生成、脊柱轴肿瘤、脑癌、脑干神经胶质瘤、垂体腺瘤、卡波西肉瘤、表皮样癌、鳞状细胞癌(squamous cellcancer)、包括石棉诱发癌症在内的环境诱发癌症、病毒相关癌症或病毒来源的癌症(例如，人乳头瘤病毒(HPV相关的或来源的肿瘤))及其任何组合。

方面B47.根据方面B1至B46中任一项所述的方法，其中使用自动注射器施用所述药物组合物。

方面B48.根据方面B1至B46中任一项所述的方法，其中使用穿戴式泵施用所述药物组合物。

方面B49.根据方面B1至B48中任一项所述的方法，其中所述药物组合物通过皮下输注小于约10分钟施用至所述受试者。

方面B50.根据方面B1至B49中任一项所述的方法，其中所述药物组合物通过皮下输注小于约5分钟施用至所述受试者。

方面B51.根据方面B1至B50中任一项所述的方法，其中所述药物组合物还包含至少两种抗氧化剂。

方面B52.根据方面B51所述的方法，其中所述至少两种抗氧化剂选自甲硫氨酸、色氨酸、组氨酸、半胱氨酸、抗坏血酸、甘氨酸、DTPA和EDTA。

方面B53.根据方面B51或B52所述的方法，其中所述至少两种抗氧化剂包含(i)甲硫氨酸和EDTA，或者(ii)甲硫氨酸和DTPA。

方面B54.根据方面B51至B53中任一项所述的方法，其中所述至少两种抗氧化剂包含至少约1至约20mM甲硫氨酸。

方面B55.根据方面B51至B54中任一项所述的方法，其中所述至少两种抗氧化剂包含至少约1mM、至少约1.5mM、至少约2mM、至少约2.5mM、至少约3mM、至少约3.5mM、至少约4mM、至少约4.5mM、至少约5mM、至少约5.5mM、至少约6mM、至少约6.5mM、至少约7mM、至少约7.5mM、至少约8mM、至少约8.5mM、至少约9mM、至少约9.5mM、至少约10mM、至少约11mM、至少约12mM、至少约13mM、至少约14mM、至少约15mM、至少约16mM、至少约17mM、至少约18mM、至少约19mM或至少约20mM甲硫氨酸。

方面B56.根据方面B51至B55中任一项所述的方法，其中所述至少两种抗氧化剂包含约5mM甲硫氨酸。

方面B57.根据方面B51至B56中任一项所述的方法，其中所述至少两种抗氧化剂包含至少约10μM至约200μM DTPA。

方面B58.根据方面B51至B57中任一项所述的方法，其中所述至少两种抗氧化剂包含至少约10μM、至少约15μM、至少约20μM、至少约25μM、至少约30μM、至少约35μM、至少约40μM、至少约45μM、至少约50μM、至少约55μM、至少约60μM、至少约65μM、至少约70μM、至少约75μM、至少约80μM、至少约85μM、至少约90μM、至少约95μM、至少约100μM、至少约110μM、至少约120μM、至少约130μM、至少约140μM、至少约150μM、至少约160μM、至少约170μM、至少约180μM、至少约190μM或至少约200μM DTPA。

方面B59.根据方面B51至B58中任一项所述的方法，其中所述至少两种抗氧化剂包含约50μM DTPA。

方面B60.根据方面B1至B59中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含至少约20mg/mL至至少约200mg/mL的抗PD-1抗体。

方面B61.根据方面B1至B60中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含至少约135mg/mL至至少约180mg/mL的抗PD-1抗体。

方面B62.根据方面B1至B61中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含至少约108mg/mL至至少约132mg/mL的抗PD-1抗体。

方面B63.根据方面B1至B60中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含至少约20mg/mL、至少约30mg/mL、至少约40mg/mL、至少约50mg/mL、至少约60mg/mL、至少约70mg/mL、至少约80mg/mL、至少约90mg/mL、至少约100mg/mL、至少约110mg/mL、至少约120mg/mL、至少约130mg/mL、至少约140mg/mL、至少约150mg/mL、至少约160mg/mL、至少约170mg/mL、至少约180mg/mL、至少约190mg/mL或至少约200mg/mL的抗PD-1抗体。

方面B64.根据方面B1至B63中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含约120mg/mL的抗PD-1抗体。

方面B65.根据方面B1至B63中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含约150mg/mL的抗PD-1抗体。

方面B66.根据方面B1至B65中任一项所述的方法，其中所述药物组合物还包含张力调节剂和/或稳定剂。

方面B67.根据方面B66所述的方法，其中所述张力调节剂和/或稳定剂包括糖、氨基酸、多元醇、盐或其组合。

方面B68.根据方面B66或B67所述的方法，其中所述张力调节剂和/或稳定剂选自蔗糖、山梨醇、海藻糖、甘露醇、甘油、甘氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、氯化钠、脯氨酸、精氨酸、组氨酸及其任何组合。

方面B69.根据方面B66至B68中任一项所述的方法，其中所述张力调节剂包括蔗糖。

方面B70.根据方面B1至B69中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含至少约10mM至至少约500mM蔗糖。

方面B71.根据方面B1至B70中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含至少约10mM、至少约20mM、至少约30mM、至少约40mM、至少约50mM、至少约60mM、至少约70mM、至少约80mM、至少约90mM、至少约100mM、至少约110mM、至少约120mM、至少约130mM、至少约140mM、至少约150mM、至少约160mM、至少约170mM、至少约180mM、至少约190mM、至少约200mM、至少约210mM、至少约220mM、至少约230mM、至少约240mM、至少约250mM、至少约260mM、至少约270mM、至少约280mM、至少约290mM、至少约300mM、至少约310mM、至少约320mM、至少约330mM、至少约340mM、至少约350mM、至少约360mM、至少约370mM、至少约380mM、至少约390mM、至少约400mM、至少约410mM、至少约420mM、至少约430mM、至少约440mM、至少约450mM、至少约460mM、至少约470mM、至少约480mM、至少约490mM或至少约500mM蔗糖。

方面B72.根据方面B1至B71中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含约250mM蔗糖。

方面B73.根据方面B1至B72中任一项所述的方法，其中所述药物组合物还包含缓冲剂。

方面B74.根据方面B73所述的方法，其中所述缓冲剂选自组氨酸、琥珀酸盐、氨丁三醇、磷酸钠、乙酸钠和柠檬酸钠。

方面B75.根据方面B73或B74所述的方法，其中所述缓冲剂包括组氨酸。

方面B76.根据方面B1至B75中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含至少约5mM至至少约100mM组氨酸。

方面B77.根据方面B1至B76中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含至少约5mM、至少约10mM、至少约15mM、至少约20mM、至少约25mM、至少约30mM、至少约35mM、至少约40mM、至少约45mM、至少约50mM、至少约60mM、至少约70mM、至少约80mM、至少约90mM或至少约100mM组氨酸。

方面B78.根据方面B1至B49中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含约20mM组氨酸。

方面B79.根据方面B1至B78中任一项所述的方法，其中所述药物组合物还包含表面活性剂。

方面B80.根据方面B79所述的方法，其中所述表面活性剂选自聚山梨酯20、聚山梨酯80和泊洛沙姆188。

方面B81.根据方面B79或B80所述的方法，其中所述表面活性剂包括聚山梨酯80。

方面B82.根据方面B1至B81中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含至少约0.01％w/v至至少约0.1％w/v聚山梨酯80。

方面B83.根据方面B1至B82中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含至少约0.01％w/v、至少约0.02％w/v、至少约0.03％w/v、至少约0.04％w/v、至少约0.05％w/v、至少约0.06％w/v、至少约0.07％w/v、至少约0.08％w/v、至少约0.09％w/v或至少约0.1％w/v聚山梨酯80。

方面B84.根据方面B1至B83中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含约0.05％w/v聚山梨酯80。

方面B85.根据方面B1至B30、B40至B43和B45至B84中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。

方面B86.根据方面B1至B30、B40至B43和B45至B84中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。

方面B87.根据方面B1至B86中任一项所述的方法，其中所述药物组合物具有约5.2至约6.8的pH。

方面B88.根据方面B1至B87中任一项所述的方法，其中所述药物组合物具有约5.2、约5.3、约5.4、约5.5、约5.6、约5.7、约5.8、约5.9、约6.0、约6.1、约6.2、约6.3、约6.4、约6.5、约6.6、约6.7或约6.8的pH。

方面B89.根据方面B1至B88中任一项所述的方法，其中所述药物组合物具有约6.0的pH。

方面B90.一种药物组合物，所述药物组合物用于在根据方面B1至B89中任一项所述的方法中使用。

方面B91.一种药物组合物，所述药物组合物包含(i)特异性结合PD-1的抗体(“抗PD-1抗体”)，和(ii)至少两种抗氧化剂。

方面B92.根据方面B91所述的药物组合物，其中所述至少两种抗氧化剂选自甲硫氨酸、色氨酸、组氨酸、半胱氨酸、抗坏血酸、甘氨酸、DTPA和EDTA。

方面B93.根据方面B91或B92所述的药物组合物，其中所述至少两种抗氧化剂包含(i)甲硫氨酸和EDTA，或者(ii)甲硫氨酸和DTPA。

方面B94.根据方面B91至B93中任一项所述的药物组合物，其中所述至少两种抗氧化剂包含至少约1至约20mM甲硫氨酸。

方面B95.根据方面B91至B94中任一项所述的药物组合物，其中所述至少两种抗氧化剂包含至少约1mM、至少约1.5mM、至少约2mM、至少约2.5mM、至少约3mM、至少约3.5mM、至少约4mM、至少约4.5mM、至少约5mM、至少约5.5mM、至少约6mM、至少约6.5mM、至少约7mM、至少约7.5mM、至少约8mM、至少约8.5mM、至少约9mM、至少约9.5mM、至少约10mM、至少约11mM、至少约12mM、至少约13mM、至少约14mM、至少约15mM、至少约16mM、至少约17mM、至少约18mM、至少约19mM或至少约20mM甲硫氨酸。

方面B96.根据方面B91至B95中任一项所述的药物组合物，其中所述至少两种抗氧化剂包含约5mM甲硫氨酸。

方面B97.根据方面B91至B96中任一项所述的药物组合物，其中所述至少两种抗氧化剂包含至少约10μM至约200μM DTPA。

方面B98.根据方面B91至B97中任一项所述的药物组合物，其中所述至少两种抗氧化剂包含至少约10μM、至少约15μM、至少约20μM、至少约25μM、至少约30μM、至少约35μM、至少约40μM、至少约45μM、至少约50μM、至少约55μM、至少约60μM、至少约65μM、至少约70μM、至少约75μM、至少约80μM、至少约85μM、至少约90μM、至少约95μM、至少约100μM、至少约110μM、至少约120μM、至少约130μM、至少约140μM、至少约150μM、至少约160μM、至少约170μM、至少约180μM、至少约190μM或至少约200μM DTPA。

方面B99.根据方面B91至B98中任一项所述的药物组合物，其中所述至少两种抗氧化剂包含约50μM DTPA。

方面B100.根据方面B91至B99中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约20mg/mL至至少约200mg/mL的抗PD-1抗体。

方面B101.根据方面B91至B100中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约135mg/mL至至少约180mg/mL的抗PD-1抗体。

方面B102.根据方面B91至B101中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约108mg/mL至至少约132mg/mL的抗PD-1抗体。

方面B103.根据方面B91至B100中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约20mg/mL、至少约30mg/mL、至少约40mg/mL、至少约50mg/mL、至少约60mg/mL、至少约70mg/mL、至少约80mg/mL、至少约90mg/mL、至少约100mg/mL、至少约110mg/mL、至少约120mg/mL、至少约130mg/mL、至少约140mg/mL、至少约150mg/mL、至少约160mg/mL、至少约170mg/mL、至少约180mg/mL、至少约190mg/mL或至少约200mg/mL的抗PD-1抗体。

方面B104.根据方面B91至B103中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含约120mg/mL的抗PD-1抗体。

方面B105.根据方面B91至B103中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含约150mg/mL的抗PD-1抗体。

方面B106.根据方面B91至B105中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物还包含张力调节剂和/或稳定剂。

方面B107.根据方面B106所述的药物组合物，其中所述张力调节剂和/或稳定剂包括糖、氨基酸、多元醇、盐或其组合。

方面B108.根据方面B106或B107所述的药物组合物，其中所述张力调节剂和/或稳定剂选自蔗糖、山梨醇、海藻糖、甘露醇、甘油、甘氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、氯化钠、脯氨酸、精氨酸、组氨酸及其任何组合。

方面B109.根据方面B106至B108中任一项所述的药物组合物，其中所述张力调节剂包括蔗糖。

方面B110.根据方面B91至B109中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约10mM至至少约500mM蔗糖。

方面B111.根据方面B91至B110中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约10mM、至少约20mM、至少约30mM、至少约40mM、至少约50mM、至少约60mM、至少约70mM、至少约80mM、至少约90mM、至少约100mM、至少约110mM、至少约120mM、至少约130mM、至少约140mM、至少约150mM、至少约160mM、至少约170mM、至少约180mM、至少约190mM、至少约200mM、至少约210mM、至少约220mM、至少约230mM、至少约240mM、至少约250mM、至少约260mM、至少约270mM、至少约280mM、至少约290mM、至少约300mM、至少约310mM、至少约320mM、至少约330mM、至少约340mM、至少约350mM、至少约360mM、至少约370mM、至少约380mM、至少约390mM、至少约400mM、至少约410mM、至少约420mM、至少约430mM、至少约440mM、至少约450mM、至少约460mM、至少约470mM、至少约480mM、至少约490mM或至少约500mM蔗糖。

方面B112.根据方面B91至B111中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含约250mM蔗糖。

方面B113.根据方面B91至B112中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物还包含缓冲剂。

方面B114.根据方面B113所述的药物组合物，其中所述缓冲剂选自组氨酸、琥珀酸盐、氨丁三醇、磷酸钠、乙酸钠和柠檬酸钠。

方面B115.根据方面B113或B114所述的药物组合物，其中所述缓冲剂包括组氨酸。

方面B116.根据方面B91至B115中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约5mM至至少约100mM组氨酸。

方面B117.根据方面B91至B116中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约5mM、至少约10mM、至少约15mM、至少约20mM、至少约25mM、至少约30mM、至少约35mM、至少约40mM、至少约45mM、至少约50mM、至少约60mM、至少约70mM、至少约80mM、至少约90mM或至少约100mM组氨酸。

方面B118.根据方面B91至B117中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含约20mM组氨酸。

方面B119.根据方面B91至B118中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物还包含表面活性剂。

方面B120.根据方面B119所述的药物组合物，其中所述表面活性剂选自聚山梨酯20、聚山梨酯80和泊洛沙姆188。

方面B121.根据方面B119或B120所述的药物组合物，其中所述表面活性剂包括聚山梨酯80。

方面B122.根据方面B91至B121中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约0.01％w/v至至少约0.1％w/v聚山梨酯80。

方面B123.根据方面B91至B122中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约0.01％w/v、至少约0.02％w/v、至少约0.03％w/v、至少约0.04％w/v、至少约0.05％w/v、至少约0.06％w/v、至少约0.07％w/v、至少约0.08％w/v、至少约0.09％w/v或至少约0.1％w/v聚山梨酯80。

方面B124.根据方面B91至B123中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含约0.05％w/v聚山梨酯80。

方面B125.根据方面B91至B124中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。

方面B126.根据方面B91至B124中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。

方面B127.根据方面B91至B126中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物具有约5.2至约6.8的pH。

方面B128.根据方面B91至B127中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物具有约5.2、约5.3、约5.4、约5.5、约5.6、约5.7、约5.8、约5.9、约6.0、约6.1、约6.2、约6.3、约6.4、约6.5、约6.6、约6.7或约6.8的pH。

方面B129.根据方面B91至B128中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物具有约6.0的pH。

方面B130.根据方面B1至B129中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物还包含第二治疗剂。

方面B131.根据方面B130所述的药物组合物，其中所述第二治疗剂是抗体。

方面B132.根据方面B131所述的药物组合物，其中所述第二治疗剂是检查点抑制剂。

方面B133.根据方面B132所述的药物组合物，其中所述检查点抑制剂是抗CTLA-4抗体、抗LAG-3抗体、抗TIM3抗体、抗TIGIT抗体、抗TIM3抗体、抗NKG2a抗体、抗OX40抗体、抗ICOS抗体、抗MICA抗体、抗CD137抗体、抗KIR抗体、抗TGFβ抗体、抗IL-10抗体、抗IL-8抗体、抗B7-H4抗体、抗Fas配体抗体、抗CXCR4抗体、抗间皮素抗体、抗CD27抗体、抗GITR抗体或其任何组合。

方面B134.一种小瓶，所述小瓶包含根据方面B87至B133中任一项所述的药物组合物。

方面B135.一种单位剂量，所述单位剂量包含根据方面B87至B133中任一项所述的药物组合物。

方面B136.一种单位剂量，所述单位剂量包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。

方面B137.根据方面B134所述的小瓶，所述小瓶是自动注射器。

方面B138.一种自动注射器，所述自动注射器包含根据方面B135或B136所述的单位剂量。

方面B139.根据方面B134所述的小瓶，所述小瓶是穿戴式装置。

方面B140.一种穿戴式装置，所述穿戴式装置包含根据方面B135或B136所述的单位剂量。

附图说明

图1呈现随根据实施例1的配制品中的蔗糖浓度而变的与纳武单抗皮下(SC)注射配制品的渗透压和黏度相关的数据的图形表示。X轴表示蔗糖浓度(mM)，并且Y轴表示配制品渗透压(mOsm/kg)。实心圆和实线表示渗透压值，并且实心X和虚线表示黏度值。

图2呈现与75mM添加的精氨酸对根据实施例1纳武单抗皮下(SC)注射配制品黏度的作用相关的数据的图形表示。X轴表示蛋白质浓度(mg/mL)，并且Y轴表示在20℃的黏度(cP)。实心框表示包含添加的精氨酸的样品，并且实心菱形表示未添加精氨酸的样品。

图3是研究示意图，所述研究涉及评估单独的或与透明质酸酶(例如，rHuPH20)组合的各种剂量的皮下施用的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗)的安全性和功效。

图4是用于施用纳武单抗的组合SC/IV PPK模型的预测性检查的线图说明。单独的点表示观察数据。线条分别表示观察数据的第5、第50和第95个百分位数。阴影区域表示对于预测数据的第5(最低趋向线)、第50(中间趋向线)和第95(最高趋向线)个百分位数，基于模拟的90％ CI。Conc＝浓度；Nivo＝纳武单抗；Pred-Corr＝预测校正的。

图5A-图5C是箱线图，其说明按肿瘤类型预测的Cavgd28(图5A)、Cmind28(图5B)和Cmax1(图5C)暴露的几何平均值比率(SC/IV)。CRC＝结直肠癌；HCC＝肝细胞癌；Mel＝黑色素瘤；NSCLC＝非小细胞肺癌；并且RCC＝肾细胞癌。

图6是研究示意图，所述研究涉及评估与每2周一次IV施用的3mg/kg纳武单抗相比，每4周一次皮下施用的与透明质酸酶(例如，rHuPH20)组合的1200mg纳武单抗的安全性和功效。

图7是箱线图，其说明在每2周一次IV施用的3mg/kg纳武单抗、每2周一次IV施用的10mg/kg纳武单抗和每4周一次皮下施用的1200mg纳武单抗下，纳武单抗Cmind28在剂量和体重中的分布。

图8A-图8C是箱线图，其说明在与rHuPH20一起以720mg、960mg或1200mg皮下递送纳武单抗之后观察到的C_avg(图8A)、C_tau(图8B)和C_max(图8C)按体重的观察分布。虚线显示纳武单抗3mg/kg IV Q2W(历史)的几何平均值C_avg(图8A)和C_tau(图8B)以及纳武单抗10mg/kgIV Q2W(历史)的几何平均值C_max(图8C)。

图9A-图9B显示对于患有非小细胞肺癌(NSCLC)、肾细胞癌(RCC)、黑色素瘤(Mel)、肝细胞癌(HCC)和微卫星不稳定性高/错配修复缺陷性结直肠癌(MSI-H/dMMR CRC)的受试者，在第一皮下剂量的纳武单抗和rHuPH20(部分A、B和D)之后14天的肿瘤浸润淋巴细胞CD8表达(图9A)和PD-L1肿瘤表达(图9B)。

图10是在研究1中，在金属、过氧化物和光应激与30℃的热应激的组合之后，通过SEC，对于Nivo，顶空氮气和空气对％HMW物质的影响的图形表示。RT/光照是连续光应激，其他光应激条件持续3天持续时间。配制品1(空气)和6(氮气)具有：50μmDTPA、5mM Met；配制品2(空气)和7(氮气)具有：0μM DTPA、0mM Met。所有配制品还含有120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、0.05％w/v PS80，pH 6.0，以及2,000U/mL rHuPH20。

图11是在研究1中，在金属、过氧化物和光应激与30℃的热应激的组合之后，通过SEC，对于Nivo，各种应激条件对％HMW物质的影响的图形表示。RT/光照是连续光应激，其他光应激条件持续3天持续时间。配制品1：50μm DTPA、5mM Met；配制品2：0μM DTPA、0mM Met；配制品3：0μM DTPA、5mM Met；配制品4：50μM DTPA、0mM Met；以及配制品5：100μM EDTA、5mMMet。所有配制品还含有120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、0.05％w/v PS80，pH 6.0，以及2,000U/mL rHuPH20。

图12是在研究1中，在金属(铁、铬和铜各为0.5ppm)+光照(在1000勒克斯和室温下3天)+1mM过氧化物+30℃热应激下，HMW形成的图形表示。注意：配制品1(空气)和6(氮气)彼此完全上下叠加，并且对于相同的配制品组成具有最少HMW形成。配制品1(空气)和6(氮气)：50μm DTPA、5mM Met；配制品2(空气)和7(氮气)：0μM DTPA、0mM Met；配制品3：0μMDTPA、5mM Met；配制品4：50μMDTPA、0mM Met；以及配制品5：100μM EDTA、5mM Met。所有配制品还含有120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、0.05％w/v PS80，pH 6.0，以及2,000U/mL rHuPH20。

图13是在研究1中，在金属(铁、铬和铜各为0.5ppm)、光照(在1000勒克斯和室温下3天)和过氧化物(1mM过氧化物)的各种组合与30℃热应激下3个月之后，按照具有/不具有5mM Met和50μM DTPA和100μm EDTA的配制品组成，％HMW的图形表示。所有配制品还含有120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、0.05％w/v PS80，pH 6.0，以及2,000U/mLrHuPH20。

图14是在研究1中，在金属(铁、铬和铜各为0.5ppm)、光照(在1000勒克斯和室温下3天)和过氧化物(1mM过氧化物)的各种组合与30℃热应激下3个月之后，主要作用统计模型中包括的％HMW的图形表示。图形按照具有/不具有5mM Met和50μMDTPA的配制品组成划分。所有配制品还含有120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、0.05％w/v PS80，pH 6.0，以及2,000U/mL rHuPH20。

图15是在研究1中，在3天RT/黑暗之后30℃/黑暗下储存[对照-左图]、在RT/RL下3天之后30℃/黑暗及金属加标和过氧化物加标下储存[MPL-中图]以及在室温/室内照明下储存[RT/光照-右图]后，rHuPH20酶活性的图形表示。配制品1(空气)和6(氮气)：50μmDTPA、5mM Met；配制品2(空气)和7(氮气)：0μM DTPA、0mM Met；配制品3：0μM DTPA、5mMMet；配制品4：50μM DTPA、0mM Met。所有配制品还含有120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、0.05％w/v PS80，pH 6.0，以及2,000U/mL rHuPH20。

图16A-图16F是研究2的配制品分布的图形表示。配制品的范围为赋形剂的max和min，所有其他因素处于如下目标组成：120mg/mL Nivo(图16A)、20mM His(图16C)、250mM蔗糖、50μM DTPA(图16D)、5mM Met(图16E)、2,000U/mL rHPH20(图16F)、0.05％w/v PS80(图16B)，pH 6.0。

图17是对于研究2，对于0-200μM DTPA，对于25℃、35℃和MPL以及RT/RL应激条件，在直至6个月的不同时间点，通过SEC，高分子量物质的图形表示。组成包括：120mg/mLNivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、5mM Met、0.05％w/v PS80、2000U/mL rHuPH20，pH 6.0。

图18是对于研究2，按照配制品DTPA和Met浓度区分的，对于25℃、35℃和MPL以及RT/RL应激条件，在直至6个月的不同时间点，通过SEC，高分子量物质的图形表示。组成包括：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、0.05％w/v PS80、2000U/mL rHuPH20，pH 6.0。

图19是对于研究2，按照配制品DTPA和Met浓度区分的，在直至6个月的不同时间点，通过SEC，高分子量物质的图形表示。组成包括：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、0.05％w/v PS80、2000U/mL rHuPH20，pH 6.0。

图20是在三种最后取样的(last-sampled)应激条件及平滑曲线趋势估计下，在以下组成下，SEC％HMW与甲硫氨酸浓度的关系的图形表示：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、0.05％w/v PS80、2000U/mL rHuPH20，pH 6.0。

图21A-图21C是在25℃下6个月6个月(图21A)、在35℃下3个月(图21B)以及在MPL应激下3个月(图21C)后，随Met水平而变的％总HMW的线性回归模型的图形表示，以及含有以下的配制品的拟合表现：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、0.05％w/vPS80、2000U/mL rHuPH20，pH 6.0。

图22A-图22B是在MPL条件(图22A)和35℃应激(图22B)下随时间而变的酸性物质的图形表示。具有DTPA和Met的配制品以及单独的DTPA的复份样品。在50μM和5mM Met浓度下的DTPA。配制品具有120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、0.05％w/v PS80、2,000U/mL rHuPH20，pH 6.0。

图23A-图23B是在MPL条件(图23A)和35℃应激(图23B)下随时间而变的酶活性的图形表示。具有DTPA和Met的配制品以及单独的DTPA的复份样品。在50μM和5mM Met浓度下的DTPA。配制品具有120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、0.05％w/v PS80、2,000U/mLrHuPH20，pH 6.0。

图24A-图24B是在MPL条件(图24A)和35℃应激(图24B)下随时间而变的PS80水平的图形表示。具有DTPA和Met的配制品以及单独的DTPA的复份样品。在50μM和5mM Met浓度下的DTPA。配制品具有120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、0.05％w/v PS80、2,000U/mL rHuPH20，pH 6.0。

图25A是图形表示，其说明在各种Met水平下按照具有和不具有2,000U/mLrHuPH20酶区分，在MPL条件的3个月时间点，通过SEC，关于高分子量物质在研究1、研究2和研究3之间的比较。图25B是在MPL条件的3个月时间点，通过SEC，对于高分子量物质，随Met而变的研究1、研究2和研究3的回归图。组成包括120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、0.05％w/v PS80、2000U/mL rHuPH20，pH 6.0(图25A-图25B)。

图26是条形图，其提供对于甘氨酸、甘露醇、蔗糖、海藻糖和琥珀酸盐，log10(kd)的比较，如图所示。

图27是条形图，其显示对于甘氨酸、山梨醇、海藻糖、甘露醇和蔗糖在MD模拟的最后8ns期间，与纳武单抗Fab基团相互作用的赋形剂分子的数量的平均计数，如图所示。

图28A-图28E是针对甘氨酸(图28A)、山梨醇(图28B)、甘露醇(图28C)、蔗糖(图28D)和海藻糖(图28E)中的每一种在纳武单抗Fab上发现的结合位姿的说明。Fab基团展示为带状，轻结合位姿以球棍表示来显示，并且紧密结合位姿以空间填充表示来显示。

图29A-图29B是条形图，其说明对于中等强度相互作用(图29A)和强结合相互作用(图29B)，在MD模拟中针对每种赋形剂(甘氨酸、山梨醇、海藻糖、甘露醇和蔗糖)发现的独特结合位姿的数量。

具体实施方式

递送抗PD-1和/或抗PD-L1抗体的当前方法需要定期静脉内施用，由临床医师施用，通常在诊所或医院进行。该方案通常为患者造成显著不便，并且治疗本身的性质可能会对患者的体验造成负面影响。皮下递送(如通过使用自动注射器或穿戴式泵)可以显著改善患者顺应性，从而可能允许患者在自己家中舒适地接受这种可能救命的疗法。本公开文本提供了一种治疗有需要的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者皮下施用一定剂量的药物组合物，所述药物组合物包含(i)特异性结合PD-1或PD-L1并抑制PD-1与PD-L1相互作用的抗体(分别为“抗PD-1抗体”或“抗PD-L1抗体”)。在一些方面，所述药物组合物还包含(ii)内切糖苷酶水解酶。在一些方面，所述剂量包含一个或多个皮下单位剂量。

在一些方面，所述药物组合物不包含内切糖苷酶水解酶。在一些方面，所述皮下单位剂量中的至少一个的总体积小于约5mL(例如，小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约3mL或小于约2.5mL)。在某些方面，所述剂量包含至少约250mg至至少约2400mg的所述抗体。

I.术语

为了可以更容易地理解本公开文本，首先定义某些术语。如本申请所用，除非本文另外明确提供，否则以下术语中的每一个应具有下文所阐述的含义。另外的定义在整个申请中阐述。

应当理解，本文中无论用语言“包括/包含(comprising)”描述任何方面，还提供了以“由……组成”和/或“本质上由……组成”描述的其他类似方面。

除非另外定义，否则本文所使用的所有技术和科学术语均具有与本公开文本所涉及领域的普通技术人员通常所理解的相同的含义。例如，Concise Dictionary ofBiomedicine and Molecular Biology,Juo,Pei-Show,第2版,2002,CRC Press；TheDictionary of Cell and Molecular Biology,第3版,1999,Academic Press；以及OxfordDictionary of Biochemistry And Molecular Biology,修订版,2000,OxfordUniversity Press为技术人员提供了本公开文本所用的许多术语的通用词典。

单位、前缀和符号以其国际单位制(SI)认可的形式表示。数值范围包括限定所述范围的数字。除非另外指示，否则核苷酸序列从左至右按5'至3'方向书写。氨基酸序列从左至右按氨基至羧基方向书写。本文提供的标题不是对本公开文本的各个方面的限制，所述各个方面可以通过参考作为整体的说明书而获得。因此，通过从整体上参考说明书，更全面地定义下文紧接着定义的术语。

“施用”是指使用本领域技术人员已知的多种方法和递送系统中的任何一种将包含治疗剂的组合物物理引入受试者。施用可以是指用于免疫疗法(例如，抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体)的任何形式的施用，包括静脉内、肌内、皮下、腹膜内、脊柱或其他肠胃外施用途径，例如通过注射或输注。短语“皮下施用”与“皮下注射”可互换使用并且是指施用方式，其中将物质(例如，包含特异性结合PD-1或PD-L1并抑制PD-1与PD-L1相互作用的抗体的组合物)在皮肤下，在真皮与例如肌肉之间递送至受试者。

皮下施用可以使用任何方法实现。在一些方面，皮下施用使用短针或多个短针来实现。在一些方面，所述针或所述多个针中的至少一个小于约1英寸、小于约7/8英寸、小于约6/8英寸、小于约5/8英寸、小于约1/2英寸。在一些方面，所述针或所述多个针中的至少一个的长度为约5/8英寸。

施用可以进行例如一次、多次和/或在一个或多个延长时间段中进行。因此，如本文所用，施用可以是指单一单位剂量或超过一个单位剂量。

如本文所用，术语“剂量(dose)”或“剂量(dosage)”定义为可以在给定点施用的治疗剂的量。剂量(dose)或剂量(dosage)可以是足以实现或至少部分实现期望效果的量，但是这样的期望效果可能不是可见的或可检测的。药物或治疗剂的“治疗有效量”或“治疗有效剂量”是药物的任何如下量：在单独使用或与另一种治疗剂组合使用时，促进疾病消退，表现为疾病症状的严重程度降低、无疾病症状期的频率和持续时间的增加、总存活期(从疾病如癌症的诊断日期或开始治疗的日期起，被诊断患有所述疾病的患者仍然存活的时间长度)的增加或者对因疾病困扰所致损伤或残疾的预防。药物的量或剂量包括“预防有效量”或“预防有效剂量”，其为药物的任何如下量：在单独或与另一种治疗剂组合施用至处于患上疾病或发生疾病复发的风险的受试者时，抑制所述疾病的发展或复发。治疗剂促进疾病消退或抑制疾病发展或复发的能力可以使用熟练的执业医师可用的多种方法来评价，如在临床试验期间在人类受试者中，在预测在人体中的功效的动物模型系统中，或者通过在体外测定中测定药剂的活性。“剂量”可以包含单一单位剂量或多个单位剂量。在一些方面，所述剂量包含单一单位剂量。在一些方面，所述剂量包含多个单位剂量。

如本文所用，皮下“单位剂量”是指通过皮下注射(例如，从单一小瓶、单一自动注射器和/或单一针筒)递送的物质的单一量。在一些方面，施用多个皮下剂量以实现治疗有效剂量。在施用多个单位剂量时，单独的单位剂量可以同时或依序施用。在一些方面，治疗有效剂量的每个单位剂量是在同一天施用。每个单位剂量可以在同一身体位置处或在不同的身体位置处施用。在一些方面，第一单位剂量是在第一身体位置处施用，并且第二单位剂量是在第二身体位置处施用。本领域中已知适合于皮下递送的任何身体位置可以用于本文公开的方法中。在一些方面，将所述剂量中的至少一个皮下单位剂量施用至选自以下的身体位置：臂(例如，上臂的侧面或后部)、腹部和大腿前部。

如本文所用，“不良事件”(AE)是与医学治疗的使用相关的任何不利的并且通常是无意的或不期望的体征(包括异常的实验室发现)、症状或疾病。例如，不良事件可能与响应于治疗的免疫系统的激活或免疫系统细胞(例如，T细胞)的扩增相关。医学治疗可能具有一种或多种相关的AE，并且每种AE可能具有相同或不同级别的严重程度。对能够“改变不良事件”的方法的提及意指降低与不同治疗方案的使用相关的一种或多种AE的发生率和/或严重程度的治疗方案。

“抗体”(Ab)应包括但不限于糖蛋白免疫球蛋白(其与抗原特异性结合并包含通过二硫键相互连接的至少两条重(H)链和两条轻(L)链)或其抗原结合部分。每条H链包含重链可变区(本文缩写为V_H)和重链恒定区。重链恒定区包含三个恒定结构域，即C_H1、C_H2和C_H3。每条轻链包含轻链可变区(本文缩写为V_L)和轻链恒定区。轻链恒定区包含一个恒定结构域，即C_L。V_H和V_L区可以进一步细分为高变性区域，称为互补决定区(CDR)，其间穿插有更保守的区域，称为框架区(FR)。每个V_H和V_L包含三个CDR和四个FR，按照以下顺序从氨基末端到羧基末端排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3和FR4。重链和轻链的可变区含有与抗原相互作用的结合结构域。抗体的恒定区可以介导免疫球蛋白与宿主组织或因子的结合，所述宿主组织或因子包括免疫系统的各种细胞(例如，效应细胞)和经典补体系统的第一组分(C1q)。因此，术语“抗PD-1抗体”包括与PD-1特异性结合、具有两条重链和两条轻链的全抗体和全抗体的抗原结合部分。抗原结合部分的非限制例子在本文别处示出。

免疫球蛋白可以源自任何公知的同种型，包括但不限于IgA、分泌型IgA、IgG和IgM。IgG亚类也是本领域技术人员熟知的，并且包括但不限于人IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。“同种型”是指由重链恒定区基因编码的抗体分类或亚类(例如，IgM或IgG1)。举例来说，术语“抗体”包括天然存在的抗体和非天然存在的抗体两者；单克隆抗体和多克隆抗体；嵌合抗体和人源化抗体；人抗体或非人抗体；全合成抗体；和单链抗体。可以通过重组方法将非人抗体人源化以降低其在人体中的免疫原性。在没有明确说明的情况下，除非上下文另有指示，否则术语“抗体”还包括任何上述免疫球蛋白的抗原结合片段或抗原结合部分，并且包括单价和二价片段或部分以及单链抗体。

在一些方面，本公开文本的“抗体”能够与超过一种抗原结合，例如，“多特异性”抗体或“双特异性”抗体。如本文所用，“双特异性”抗体是能够特异性结合两种抗原的抗体，其中第一抗原与第二抗原是相同的或不同的。如本文所用，“多特异性”抗体能够特异性结合超过一种抗原，例如，至少两种(即，“双特异性”抗体)、至少三种(即，“三特异性”抗体)、至少四种、至少五种或至少六种抗原。多种多特异性抗体是已知的，并且可以用于本文公开的组合物和/或方法中，包括但不限于结合PD-1和第二靶标的双特异性抗体以及结合PD-L1和第二靶标的双特异性抗体。在一些方面，多特异性抗体是T细胞依赖性双特异性抗体。在一些方面，多特异性抗体是靶向B细胞谱系标记物FcRH5和CD3的抗FcRH5/CD3双特异性抗体，例如，其用于多发性骨髓瘤的治疗中。

在一些方面，本公开文本的“抗体”被工程化以在靶位点激活，例如，“前抗体(probody)”。在一些方面，抗体(例如，前抗体)在靶组织(例如，肿瘤)处被蛋白水解切割。

“分离的抗体”是指基本上不含具有不同抗原特异性的其他抗体的抗体(例如，与PD-1特异性结合的分离的抗体基本上不含与PD-1以外的抗原特异性结合的抗体)。然而，与PD-1特异性结合的分离的抗体可能与其他抗原(如来自不同物种的PD-1分子)具有交叉反应性。此外，分离的抗体可以基本上不含其他细胞材料和/或化学物质。

术语“单克隆抗体”(mAb)是指具有单一分子组成的抗体分子的非天然存在的制剂，即其一级序列基本上相同并且对特定表位展现出单一结合特异性和亲和力的抗体分子。单克隆抗体是分离的抗体的例子。单克隆抗体可以通过杂交瘤、重组、转基因或本领域技术人员已知的其他技术产生。

“人抗体”(HuMAb)是指具有可变区的抗体，在所述可变区中，框架区和CDR区二者均源自人种系免疫球蛋白序列。此外，如果抗体含有恒定区，则所述恒定区也源自人种系免疫球蛋白序列。本公开文本的人抗体可以包括不是由人种系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基(例如，通过体外随机或位点特异性诱变或通过体内体细胞突变引入的突变)。然而，如本文所用，术语“人抗体”不旨在包括源自另一种哺乳动物物种(诸如小鼠)的种系的CDR序列已被移植到人框架序列上的抗体。术语“人抗体”和“完全人抗体”同义使用。

“人源化抗体”是指非人抗体的CDR外的一些、大部分或所有氨基酸被源自人免疫球蛋白的相应氨基酸替代的抗体。在人源化形式的抗体的一个方面，CDR外的一些、大部分或所有氨基酸已经被来自人免疫球蛋白的氨基酸替代，而一个或多个CDR内的一些、大部分或所有氨基酸未改变。氨基酸的少量添加、缺失、插入、取代或修饰是可允许的，只要它们不消除抗体与特定抗原结合的能力即可。“人源化抗体”保留与原始抗体相似的抗原特异性。

“嵌合抗体”是指可变区源自一个物种并且恒定区源自另一个物种的抗体，如可变区源自小鼠抗体并且恒定区源自人抗体的抗体。

“抗抗原抗体”是指与抗原特异性结合的抗体。例如，抗PD-1抗体与PD-1特异性结合，并且抗PD-L1抗体与PD-L1特异性结合。

抗体的“抗原结合部分”(也称为“抗原结合片段”)是指抗体的一个或多个片段，其保留与完整抗体所结合的抗原特异性结合的能力。已经证明抗体的抗原结合功能可以由全长抗体的片段执行。涵盖在术语抗体(例如本文所述的抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体)的“抗原结合部分”内的结合片段的例子包括(i)Fab片段(来自木瓜蛋白酶切割的片段)或由V_L、V_H、LC和CH1结构域组成的相似的单价片段；(ii)F(ab')2片段(来自胃蛋白酶切割的片段)或包含由铰链区的二硫桥连接的两个Fab片段的相似的二价片段；(iii)由V_H和CH1结构域组成的Fd片段；(iv)由抗体单臂的V_L和V_H结构域组成的Fv片段；(v)dAb片段(Ward等人,(1989)Nature 341:544-546)，其由V_H结构域组成；(vi)分离的互补决定区(CDR)；以及(vii)可以任选地通过合成接头连接的两个或更多个分离的CDR的组合。此外，尽管Fv片段的两个结构域V_L和V_H由分开的基因编码，但是它们可以使用重组方法通过合成的接头进行连接，从而将它们制成单个蛋白质链，在所述单个蛋白质链中V_L和V_H区配对形成单价分子(称为单链Fv(scFv))；参见例如，Bird等人(1988)Science 242:423-426；以及Huston等人(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85:5879-5883)。此类单链抗体也旨在涵盖在抗体的“抗原结合部分”术语内。这些抗体片段是使用本领域技术人员已知的常规技术获得的，并且以与完整抗体相同的方式筛选所述片段的效用。抗原结合部分可以通过重组DNA技术或通过完整的免疫球蛋白的酶促或化学切割来产生。

“癌症”是指一组广泛的不同疾病，其特征在于体内异常细胞的不受控制的生长。不受调节的细胞分裂和生长导致恶性肿瘤的形成，恶性肿瘤侵入邻近组织并且还可以通过淋巴系统或血流转移到身体的远端部分。

术语“免疫疗法”是指通过包括诱导、增强、抑制或以其他方式改变免疫应答的方法治疗患有疾病或者有感染疾病或发生疾病复发风险的受试者。受试者的“治疗”或“疗法”是指对受试者进行的任何类型的干预或处理，或者向受试者施用活性剂，目的是逆转、减轻、改善、抑制、减缓或预防症状、并发症或病症的发作、进展、发展、严重程度或复发或者与疾病相关的生化指标。

“程序性死亡蛋白-1”(PD-1)是指属于CD28家族的免疫抑制性受体。PD-1主要在体内先前激活的T细胞上表达，并与两种配体即PD-L1和PD-L2结合。如本文所用的术语“PD-1”包括人PD-1(hPD-1)，hPD-1的变体、亚型和物种同源物，以及与hPD-1具有至少一个共同表位的类似物。完整的hPD-1序列可以在GenBank登录号U64863下找到。

“程序性死亡蛋白配体-1”(PD-L1)是PD-1的两种细胞表面糖蛋白配体之一(另一种是PD-L2)，其在与PD-1结合后下调T细胞激活和细胞因子分泌。如本文所用，术语“PD-L1”包括人PD-L1(hPD-L1)，hPD-L1的变体、亚型和物种同源物，以及与hPD-L1具有至少一个共同表位的类似物。完整的hPD-L1序列可以在GenBank登录号Q9NZQ7下找到。人PD-L1蛋白由人CD274基因(NCBI基因ID：29126)编码。

如本文所用的“透明质酸酶”是指能够催化透明质酸切割的酶。透明质酸是N-乙酰基-葡糖胺和葡糖醛酸的重复聚合物，其存在于皮下间隙中并为皮肤的细胞外基质的可溶凝胶样组分做出贡献，并且通过快速周转(再合成)来恢复。在一些方面，透明质酸酶包含rHuPH20，其为糖基化的447个氨基酸的单链多肽，其在皮肤的注射部位处使皮下间隙中的透明质酸局部解聚。通过透明质酸酶使透明质酸解聚是通过多糖聚合物的水解来完成的。透明质酸的解聚导致细胞外基质的凝胶样相的黏度短暂下降并增加水分传导性，从而促进共施用的治疗剂的分散和吸收。因此，透明质酸酶(例如，rHuPH20)可以通过起渗透促进剂的作用来改进可注射生物制品和药物的皮下递送的速度和容易性。在某些方面，所述透明质酸酶包含ENHANZETM。

“受试者”包括任何人或非人动物。术语“非人动物”包括但不限于脊椎动物，如非人灵长类动物、绵羊、狗和啮齿动物(如小鼠、大鼠和豚鼠)。在优选的方面，受试者是人。术语“受试者”和“患者”在本文可互换使用。

关于本公开文本的方法和剂量的术语“平剂量”的使用意指在不考虑患者的体重或体表面积(BSA)的情况下施用至患者的剂量。因此，所述平剂量不以mg/kg剂量提供，而是以药剂(例如，抗PD-1抗体)的绝对量提供。例如，60kg的人和100kg的人将接受相同剂量的抗体(例如，240mg的抗PD-1抗体)。

如本文所提及的术语“基于体重的剂量”意指基于患者的体重计算的施用至患者的剂量。例如，当体重为60kg的患者需要3mg/kg的抗PD-1抗体时，人们可以计算并使用适当量的抗PD-1抗体(即，180mg)进行施用。

举例来说，“抗癌剂”促进受试者的癌症消退。在一些方面，治疗有效量的药物促进癌症消退至消除癌症的程度。“促进癌症消退”意指单独地或与抗肿瘤剂组合地施用治疗有效量的药物导致肿瘤生长或大小的减小、肿瘤的坏死、至少一种疾病症状的严重程度的降低、无疾病症状期的频率和持续时间的增加或者对因疾病困扰所致损伤或残疾的预防。另外，关于治疗的术语“有效的”和“有效性”包括药理学有效性和生理学安全性。药理学有效性是指药物促进患者的癌症消退的能力。生理学安全性是指因施用药物引起的毒性水平或者在细胞、器官和/或生物体水平上的其他不良生理作用(不良作用)。

举例来说，对于肿瘤的治疗，相对于未治疗的受试者，治疗有效量的抗癌剂优选将细胞生长或肿瘤生长抑制至少约20％、更优选至少约40％、甚至更优选至少约60％、并且再更优选至少约80％。在本公开文本的其他优选的方面，可以观察到肿瘤消退并且持续至少约20天、更优选至少约40天或甚至更优选至少约60天的时间段。尽管有这些治疗有效性的最终测量，免疫治疗药物的评价还必须考虑免疫相关的反应模式。

“免疫应答”是如本领域所理解的，并且通常是指脊椎动物内针对外来因子(agent)或异常例如癌细胞的生物学应答，所述应答保护生物免受这些因子和由其引起的疾病的侵害。免疫应答是由免疫系统的一种或多种细胞(例如，T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤(NK)细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞、树突细胞或嗜中性粒细胞)和通过这些细胞或肝脏中的任何一种产生的可溶性大分子(包括抗体、细胞因子和补体)的作用介导的，所述作用导致选择性靶向、结合、损伤、破坏和/或消除脊椎动物体中侵入的病原体、感染病原体的细胞或组织、癌性或其他异常细胞，或者在自身免疫性或病理性炎症的情况下导致选择性靶向、结合、损伤、破坏和/或消除正常的人细胞或组织。免疫应答包括例如T细胞(例如，效应T细胞、Th细胞、CD4⁺细胞、CD8⁺T细胞或Treg细胞)的激活或抑制，或者免疫系统中任何其他细胞(例如，NK细胞)的激活或抑制。

“免疫相关的反应模式”是指在用免疫治疗剂治疗的癌症患者中通常观察到的临床反应模式，所述免疫治疗剂通过诱导癌症特异性免疫应答或通过修饰天然免疫过程而产生抗肿瘤作用。此反应模式的特征在于在肿瘤负荷初始增加或新病变出现之后的有益治疗效果，其在传统化学治疗剂的评价中将被分类为疾病进展并且将与药物失效同义。因此，对免疫治疗剂的适当评价可能需要长期监测这些药剂对目标疾病的作用。

如本文所用，关于配制品或药物产品的术语“稳定的”是这样的术语，其中的一种或多种抗体或分子在储存后基本上保留其物理和化学稳定性和完整性。本文中的配制品的稳定性可以在选择的时间段之后在选择的温度下测量。例如，聚集体形成或低分子量物质的增加是不稳定性的指标。初始澄清度和/或颜色在整个保质期期间的保持也是用于监测稳定性的指标。在一些方面，“稳定的”药物产品是这样的药物产品，其中在将配制品储存于2℃-8℃至少约一年时，如通过高分子量物质的百分比(％HMW)增加所测量的聚集的增加小于约5％，优选地小于约3％。

如本文所用，术语“治疗(treat)”、“治疗(treating)”和“治疗(treatment)”是指对受试者进行的任何类型的干预或过程，目的是逆转、减轻、缓解、抑制或减缓或防止症状、并发症、病症或与疾病有关的生化指标的进展、发展、严重程度或复发，或提高总存活期。治疗可以是对患有疾病的受试者或未患疾病的受试者的治疗(例如，用于预防)。

如本文所用的术语“约每周”、“约每两周”或任何其他类似的给药间隔术语意指近似数。“约每周”可以包括每七天±一天，即，每六天至每八天。“约每两周”可以包括每十四天±三天，即，每十一天至每十七天。类似的近似适用于例如约每三周、约每四周、约每五周、约每六周和约每十二周。在一些方面，约每六周或约每十二周的给药间隔意指分别地，第一剂量可以在第一周中的任一天施用，然后下一剂量可以在第六周或第十二周中的任一天施用。在其他方面，约每六周或约每十二周的给药间隔意指分别地，第一剂量在第一周的特定日期(例如，周一)施用，然后下一剂量在第六周或第十二周的同一日期(即，周一)施用。在施用多个皮下单位剂量以达到某一剂量时，给药间隔是指在施用第一有效剂量的第一皮下单位剂量与施用第二有效剂量的第一皮下单位剂量之间的时间段。例如，在所述方法包括施用约每两周施用的约600mg剂量的情况下，其中所述抗体的剂量包括两个皮下单位剂量，其中所述两个皮下单位剂量中的每一个包含约300mg的所述抗体，所述抗体的第一有效剂量的约300mg的第一皮下单位剂量是在第1天施用，并且所述抗体的第二有效剂量的约300mg的第一皮下单位剂量是在约第14天施用。在此例子中，所述抗体的第一有效剂量的约300mg的第二单位剂量可以在第1天或者在施用所述抗体的第二有效剂量的约300mg的第一皮下单位剂量之前的任何其他时间施用。

替代方案(例如，“或”)的使用应理解为意指替代方案中的任一者、两者或其任何组合。如本文所用，不定冠词“一个/一种(a)”或“一个/一种(an)”应理解为是指任何所述或列举组分中的“一个或多个/一种或多种”。

术语“约”或“基本上由……构成”是指如通过本领域普通技术人员所确定在特定值或组成的可接受误差范围内的值或组成，其将部分取决于如何测量或确定所述值或组成，即测量系统的限制。例如，根据本领域的实践，“约”或“基本上由……构成”可以意指在1个或多于1个标准差内。可替代地，“约”或“基本上由……组成”可以意指至多10％的范围。此外，特别是关于生物系统或过程，所述术语可以意指值的至多一个数量级或至多5倍。当在本申请和权利要求中提供特定值或组成时，除非另有说明，否则应假定“约”或“基本上由……构成”的含义在该特定值或组成的可接受误差范围内。

如本文所述，除非另有说明，否则任何浓度范围、百分比范围、比率范围或整数范围应理解为包括所列举范围内的任何整数及(在适当时)其分数(如整数的十分之一和百分之一)的值。

在以下小节中更详细地描述本公开文本的各个方面。

II.本公开文本的组合物

本公开文本的一些方面涉及药物组合物，所述药物组合物包含(i)抗体或其抗原结合部分，和(ii)至少两种抗氧化剂。在一些方面，超过一种抗氧化剂(例如，两种抗氧化剂)预防配制品组分的氧化和/或改进抗体的稳定性。在一些方面，所述抗体或其抗原结合部分是检查点抑制剂。在一些方面，所述抗体或其抗原结合部分特异性结合PD-1(“抗PD-1抗体”)。在一些方面，所述药物组合物被配制用于皮下施用。在一些方面，所述药物组合物还包含(iii)内切糖苷酶水解酶。在一些方面，所述药物组合物不包含内切糖苷酶水解酶。在一些方面，所述药物组合物包含至少两种抗体或其抗原结合部分。

包含抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体的药物组合物也在本公开文本的范围内。在一些方面，所述药物组合物被配制用于根据本文所公开的方法皮下施用。在一些方面，所述药物组合物被配置使得它们展现与没有两种抗氧化剂或至少一种抗氧化剂的组合物相比改进的特性。

本公开文本的治疗剂可以构成组合物，例如，含有抗体和药学上可接受的载体的药物组合物。如本文所用，“药学上可接受的载体”包括生理上可相容的任何和所有溶剂、分散介质、包衣、抗细菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。优选地，用于含有抗体的组合物的载体适合于静脉内、肌内、皮下、肠胃外、脊柱或表皮施用(例如，通过注射或输注)，而用于含有抗体和/或细胞因子的组合物的载体适合于非肠胃外(例如，口服)施用。

在一些方面，所述药物组合物包含(i)抗体或其抗原结合部分(例如，抗PD-1抗体)，(ii)至少两种抗氧化剂，(iii)张力调节剂或稳定剂，(iv)缓冲剂，以及(v)表面活性剂。在一些方面，所述药物组合物包含(i)抗体或其抗原结合部分(例如，抗PD-1抗体)，(ii)至少两种抗氧化剂，(iii)张力调节剂或稳定剂，(iv)缓冲剂，(v)表面活性剂，以及(vi)内切糖苷酶水解酶。在一些方面，所述抗体是双特异性抗体或多特异性抗体。

在一些方面，所述药物组合物包含(i)第一抗体或其抗原结合部分(例如，抗PD-1抗体)，(ii)至少两种抗氧化剂，(iii)张力调节剂或稳定剂，(iv)缓冲剂，以及(v)表面活性剂。在一些方面，所述药物组合物包含(i)抗体或其抗原结合部分(例如，抗PD-1抗体)，(ii)至少两种抗氧化剂，(iii)张力调节剂或稳定剂，(iv)缓冲剂，(v)表面活性剂，(vi)第二抗体或其抗原结合部分，以及(vii)内切糖苷酶水解酶。在一些方面，所述第一抗体是双特异性抗体或多特异性抗体。

II.A.抗体和抗原结合部分

在一些方面，所述药物组合物包含抗体或其抗原结合部分。本文所述的药物组合物可以包括任何抗体或其抗原结合部分。在一些方面，所述抗体或其抗原结合部分是检查点抑制剂。在一些方面，所述抗体或其抗原结合部分特异性结合检查点蛋白。在一些方面，所述抗体或其抗原结合部分特异性结合如下蛋白质，所述蛋白质选自PD-1、PD-L1、CTLA-4、LAG-3、TIGIT、TIM3、NKG2a、OX40、ICOS、MICA、CD137、KIR、TGFβ、IL-10、IL-8、B7-H4、Fas配体、CXCR4、间皮素、CD27、GITR及其任何组合。在一些方面，所述药物组合物包含抗PD-1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含抗CTLA-4抗体。在一些方面，所述药物组合物包含抗LAG-3抗体。在一些方面，所述药物组合物包含抗TIM3抗体。

在一些方面，所述抗体是多特异性抗体。在一些方面，所述抗体是双特异性抗体。在一些方面，所述抗体是三特异性抗体。在一些方面，所述抗体特异性结合(i)PD-1和(ii)第二抗原。在一些方面，所述抗体特异性结合(i)PD-1、(ii)第二抗原和(iii)第三抗原。在一些方面，所述抗体特异性结合(i)PD-L1和(ii)第二抗原。在一些方面，所述抗体特异性结合(i)PD-L1、(ii)第二抗原和(iii)第三抗原。在一些方面，所述第二抗原和第三抗原是相同的。在一些方面，所述第二抗原和第三抗原是不同的。在一些方面，所述第二抗原是CD3。在一些方面，所述第二抗原是TIGIT。在一些方面，所述第二抗原是LAG-3。

在一些方面，所述抗体特异性结合(i)TIGIT和(ii)在T细胞、NK细胞或二者上表达的抑制性受体。在一些方面，所述抗体特异性结合(i)CD40和(ii)CD20。在一些方面，所述抗体特异性结合(i)PD-1和(ii)TIGIT。在一些方面，所述抗体特异性结合(i)PD-1和(ii)LAG-3。

在一些方面，所述药物组合物包含至少约10mg/mL至至少约500mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约10mg/mL至至少约500mg/mL、至少约10mg/mL至至少约400mg/mL、至少约10mg/mL至至少约300mg/mL、至少约10mg/mL至至少约250mg/mL、至少约10mg/mL至至少约200mg/mL、至少约10mg/mL至至少约190mg/mL、至少约10mg/mL至至少约180mg/mL、至少约10mg/mL至至少约170mg/mL、至少约10mg/mL至至少约160mg/mL、至少约10mg/mL至至少约150mg/mL、至少约20mg/mL至至少约500mg/mL、至少约20mg/mL至至少约400mg/mL、至少约20mg/mL至至少约300mg/mL、至少约20mg/mL至至少约250mg/mL、至少约20mg/mL至至少约200mg/mL、至少约20mg/mL至至少约190mg/mL、至少约20mg/mL至至少约180mg/mL、至少约20mg/mL至至少约170mg/mL、至少约20mg/mL至至少约160mg/mL、至少约20mg/mL至至少约150mg/mL、至少约50mg/mL至至少约200mg/mL、至少约100mg/mL至至少约200mg/mL、至少约150mg/mL至至少约200mg/mL、至少约135mg/mL至至少约180mg/mL、至少约100mg/mL至至少约200mg/mL、至少约150mg/mL至至少约200mg/mL、至少约100mg/mL至至少约130mg/mL或至少约108mg/mL至至少约132mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约50mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约60mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约70mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约75mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约80mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约90mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约100mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约108mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约110mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约120mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约130mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约132mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约135mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约140mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约150mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约160mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约170mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约175mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约180mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约190mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约200mg/mL的所述抗体(例如，抗PD-1或抗PD-L1抗体)。

II.A.1可用于本公开文本的抗PD-1抗体

在一些方面，所述药物组合物包含施用特异性结合PD-1的抗体或其抗原结合部分(“抗PD-1抗体”)。任何抗PD-1抗体可以用于本发明所述的组合物和方法中。以高亲和力与PD-1特异性结合的多种人单克隆抗体已经披露于美国专利号8,008,449中。已经证明美国专利号8,008,449中披露的抗PD-1人抗体展现出以下特征中的一种或多种：(a)以1x 10^-7M或更小的K_D与人PD-1结合，如使用Biacore生物传感器系统通过表面等离子体共振确定的；(b)基本上不与人CD28、CTLA-4或ICOS结合；(c)在混合淋巴细胞反应(MLR)测定中增加T细胞增殖；(d)在MLR测定中增加干扰素-γ产生；(e)在MLR测定中增加IL-2分泌；(f)与人PD-1和食蟹猴PD-1结合；(g)抑制PD-L1和/或PD-L2与PD-1的结合；(h)刺激抗原特异性记忆应答；(i)刺激抗体应答；以及(j)抑制体内肿瘤细胞生长。可用于本公开文本中的抗PD-1抗体包括与人PD-1特异性结合并且展现出前述特征中的至少一种(在一些方面至少五种)的单克隆抗体。

其他抗PD-1单克隆抗体已经描述于例如以下文献中：美国专利号6,808,710、7,488,802、8,168,757和8,354,509，美国公开号2016/0272708，以及PCT公开号WO 2012/145493、WO 2008/156712、WO 2015/112900、WO 2012/145493、WO 2015/112800、WO 2014/206107、WO 2015/35606、WO 2015/085847、WO 2014/179664、WO 2017/020291、WO 2017/020858、WO 2016/197367、WO 2017/024515、WO 2017/025051、WO 2017/123557、WO 2016/106159、WO 2014/194302、WO 2017/040790、WO 2017/133540、WO 2017/132827、WO 2017/024465、WO 2017/025016、WO 2017/106061、WO 2017/19846、WO 2017/024465、WO 2017/025016、WO 2017/132825和WO 2017/133540，它们各自通过引用以其整体并入。

在一些方面，所述抗PD-1抗体选自纳武单抗(也称为5C4、BMS-936558、MDX-1106和ONO-4538)、派姆单抗(Merck；也称为/>帕博利珠单抗和MK-3475；参见WO 2008/156712)、PDR001(Novartis；参见WO 2015/112900)、MEDI-0680(AstraZeneca；也称为AMP-514；参见WO 2012/145493)、西米普利单抗(Regeneron；也称为REGN-2810；参见WO 2015/112800)、JS001(TAIZHOU JUNSHI PHARMA；也称为特瑞普利单抗(toripalimab)；参见Si-Yang Liu等人,J.Hematol.Oncol.10:136(2017))、BGB-A317(Beigene；也称为替雷利珠单抗；参见WO 2015/35606和US2015/0079109)、INCSHR1210(Jiangsu Hengrui Medicine；也称为SHR-1210；参见WO 2015/085847；Si-Yang Liu等人,J.Hematol.Oncol.10:136(2017))、TSR-042(Tesaro Biopharmaceutical；也称为ANB011；参见WO 2014/179664)、GLS-010(Wuxi/Harbin Gloria Pharmaceuticals；也称为WBP3055；参见Si-Yang Liu等人,J.Hematol.Oncol.10:136(2017))、AM-0001(Armo)、STI-1110(Sorrento Therapeutics；参见WO 2014/194302)、AGEN2034(Agenus；参见WO 2017/040790)、MGA012(Macrogenics，参见WO 2017/19846)、BCD-100(Biocad；Kaplon等人,mAbs10(2):183-203(2018)、IBI308(Innovent；参见WO 2017/024465、WO 2017/025016、WO2017/132825和WO 2017/133540)以及萨善利单抗(PF-06801591)。

在一个方面，所述抗PD-1抗体是纳武单抗。纳武单抗是完全人IgG4(S228P)PD-1免疫检查点抑制剂抗体，其选择性地阻止与PD-1配体(PD-L1和PD-L2)的相互作用，从而阻断抗肿瘤T细胞功能的下调(美国专利号8,008,449；Wang等人,2014Cancer Immunol Res.2(9):846-56)。纳武单抗的重链可变区和轻链可变区显示于表1A(SEQ ID NO:2和3)中。在一些方面，所述抗PD-1抗体包含含有SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的重链可变区以及含有SEQID NO:3所示氨基酸序列的轻链可变区。在一些方面，所述抗体包含重链互补决定区(CDR)1、CDR2和CDR3序列，它们包含SEQ ID NO:2的重链CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列。在一些方面，所述抗体包含轻链CDR1、CDR2和CDR3序列，它们包含SEQ ID NO:3的轻链CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列。

表1A：抗PD-1抗体序列

在另一方面，所述抗PD-1抗体是派姆单抗。派姆单抗是针对人细胞表面受体PD-1(程序性死亡蛋白-1或程序性细胞死亡蛋白-1)的人源化单克隆IgG4(S228P)抗体。派姆单抗描述于例如美国专利号8,354,509和8,900,587中。

在另一方面，所述抗PD-1抗体是萨善利单抗。

可用于所公开的组合物和方法中的抗PD-1抗体还包括分离的抗体，所述分离的抗体与人PD-1特异性结合并且与本文所公开的任何抗PD-1抗体(例如，纳武单抗)交叉竞争与人PD-1的结合(参见例如，美国专利号8,008,449和8,779,105；WO 2013/173223)。在一些方面，所述抗PD-1抗体与本文所述的任何抗PD-1抗体(例如，纳武单抗)结合相同的表位。抗体交叉竞争结合抗原的能力表明这些单克隆抗体结合抗原的相同表位区域并且在空间上阻碍其他交叉竞争抗体与该特定表位区域的结合。预期这些交叉竞争抗体由于它们结合PD-1的相同表位区域而具有与参考抗体(例如，纳武单抗)非常相似的功能特性。在标准PD-1结合测定(如Biacore分析、ELISA测定或流式细胞术)中可以基于交叉竞争抗体与纳武单抗交叉竞争的能力容易地鉴定它们(参见例如，WO 2013/173223)。

在某些方面，与纳武单抗交叉竞争与人PD-1的结合或与纳武单抗结合人PD-1抗体的相同表位区域的抗体是单克隆抗体。对于施用至人类受试者，这些交叉竞争抗体是嵌合抗体、工程化抗体或者人源化抗体或人抗体。可以通过本领域熟知的方法来制备和分离这样的嵌合、工程化、人源化或人单克隆抗体。

可用于所公开的公开文本的组合物和方法中的抗PD-1抗体还包括上述抗体的抗原结合部分。已经充分地证明，抗体的抗原结合功能可以通过全长抗体的片段来执行。

适用于所公开的组合物和方法的抗PD-1抗体是以高特异性和亲和力与PD-1结合、阻断PD-L1和或PD-L2的结合并抑制PD-1信号传导途径的免疫抑制作用的抗体。在本文所公开的任何组合物或方法中，抗PD-1“抗体”包括与PD-1受体结合并且在抑制配体结合和上调免疫系统方面展现出与完整抗体相似的功能特性的抗原结合部分或片段。在某些方面，所述抗PD-1抗体或其抗原结合部分与纳武单抗交叉竞争与人PD-1的结合。

在一些方面，所述抗PD-1抗体以范围为0.1mg/kg至20.0mg/kg体重的剂量每2、3、4、5、6、7或8周施用一次，例如，0.1mg/kg至10.0mg/kg体重每2、3或4周施用一次。在其他方面，所述抗PD-1抗体以约2mg/kg、约3mg/kg、约4mg/kg、约5mg/kg、约6mg/kg、约7mg/kg、约8mg/kg、约9mg/kg或10mg/kg体重的剂量每2周施用一次。在其他方面，所述抗PD-1抗体以约2mg/kg、约3mg/kg、约4mg/kg、约5mg/kg、约6mg/kg、约7mg/kg、约8mg/kg、约9mg/kg或10mg/kg体重的剂量每3周施用一次。在一个方面，所述抗PD-1抗体以约5mg/kg体重的剂量约每3周施用一次。在另一方面，所述抗PD-1抗体(例如，纳武单抗)以约3mg/kg体重的剂量约每2周施用一次。在其他方面，所述抗PD-1抗体(例如，派姆单抗)以约2mg/kg体重的剂量约每3周施用一次。

可用于本公开文本的抗PD-1抗体可以以平剂量施用。在一些方面，所述抗PD-1抗体以如下平剂量施用：约100至约1000mg、约100mg至约900mg、约100mg至约800mg、约100mg至约700mg、约100mg至约600mg、约100mg至约500mg、约200mg至约1000mg、约200mg至约900mg、约200mg至约800mg、约200mg至约700mg、约200mg至约600mg、约200mg至约500mg、约200mg至约480mg或约240mg至约480mg。在一个方面，所述抗PD-1抗体以约1、2、3、4、5、6、7、8、9或10周的给药间隔以如下平剂量施用：至少约200mg、至少约220mg、至少约240mg、至少约260mg、至少约280mg、至少约300mg、至少约320mg、至少约340mg、至少约360mg、至少约380mg、至少约400mg、至少约420mg、至少约440mg、至少约460mg、至少约480mg、至少约500mg、至少约520mg、至少约540mg、至少约550mg、至少约560mg、至少约580mg、至少约600mg、至少约620mg、至少约640mg、至少约660mg、至少约680mg、至少约700mg或至少约720mg。在另一方面，所述抗PD-1抗体以约1、2、3或4周的给药间隔以如下平剂量施用：约200mg至约800mg、约200mg至约700mg、约200mg至约600mg、约200mg至约500mg。

在一些方面，所述抗PD-1抗体以约200mg的平剂量约每3周施用一次。在其他方面，所述抗PD-1抗体以约200mg的平剂量约每2周施用一次。在其他方面，所述抗PD-1抗体以约240mg的平剂量约每2周施用一次。在某些方面，所述抗PD-1抗体以约480mg的平剂量约每4周施用一次。

在一些方面，纳武单抗以约240mg的平剂量约每2周施用一次。在一些方面，纳武单抗以约240mg的平剂量约每3周施用一次。在一些方面，纳武单抗以约360mg的平剂量约每3周施用一次。在一些方面，纳武单抗以约480mg的平剂量约每4周施用一次。在一些方面，纳武单抗以约720mg的平剂量约每6周施用一次。在一些方面，纳武单抗以约960mg的平剂量约每8周施用一次。

在一些方面，派姆单抗以约200mg的平剂量约每2周施用一次。在一些方面，派姆单抗以约200mg的平剂量约每3周施用一次。在一些方面，派姆单抗以约400mg的平剂量约每4周施用一次。

在一些方面，所述药物组合物包含至少约10mg/mL至至少约500mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约10mg/mL至至少约500mg/mL、至少约10mg/mL至至少约400mg/mL、至少约10mg/mL至至少约300mg/mL、至少约10mg/mL至至少约250mg/mL、至少约10mg/mL至至少约200mg/mL、至少约10mg/mL至至少约190mg/mL、至少约10mg/mL至至少约180mg/mL、至少约10mg/mL至至少约170mg/mL、至少约10mg/mL至至少约160mg/mL、至少约10mg/mL至至少约150mg/mL、至少约20mg/mL至至少约500mg/mL、至少约20mg/mL至至少约400mg/mL、至少约20mg/mL至至少约300mg/mL、至少约20mg/mL至至少约250mg/mL、至少约20mg/mL至至少约200mg/mL、至少约20mg/mL至至少约190mg/mL、至少约20mg/mL至至少约180mg/mL、至少约20mg/mL至至少约170mg/mL、至少约20mg/mL至至少约160mg/mL、至少约20mg/mL至至少约150mg/mL、至少约50mg/mL至至少约200mg/mL、至少约100mg/mL至至少约200mg/mL、至少约150mg/mL至至少约200mg/mL、至少约135mg/mL至至少约180mg/mL、至少约100mg/mL至至少约200mg/mL、至少约150mg/mL至至少约200mg/mL、至少约100mg/mL至至少约130mg/mL或至少约108mg/mL至至少约132mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约50mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约60mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约70mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约75mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约80mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约90mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约100mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约108mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约110mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约120mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约130mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约132mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约135mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约140mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约150mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约160mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约170mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约175mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约180mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约190mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约200mg/mL的抗PD-1抗体(例如，纳武单抗或派姆单抗)。

在一些方面，所述药物组合物包含含有第一抗原结合部分和第二抗原结合部分的双特异性抗体或多特异性抗体，其中所述第一抗原结合部分包含抗PD-1抗原结合部分(例如，纳武单抗的scFv)。在一些方面，所述第二抗原结合部分是本文公开的抗体中的任一种的抗原结合部分。在一些方面，所述第二抗原结合部分是抗LAG-3抗体(例如，瑞拉利单抗(relatlimab))的抗原结合部分。在一些方面，所述第二抗原结合部分是抗TIGIT抗体的抗原结合部分。

在一些方面，所述药物组合物包含含有第一抗原结合部分、第二抗原结合部分和至少第三抗原结合部分的多特异性抗体，其中所述第一抗原结合部分包含抗PD-1抗原结合部分(例如，纳武单抗的scFv)。

II.A.2.可用于本公开文本的抗PD-L1抗体

在一些方面，所述药物组合物包含特异性结合PD-L1的抗体或其抗原结合部分(“抗PD-L1抗体”)。在一些方面，在本文公开的任何组合物或方法中，用抗PD-L1抗体替代抗PD-1抗体。任何抗PD-L1抗体可以用于本公开文本的组合物和方法中。可用于本公开文本的组合物和方法中的抗PD-L1抗体的例子包括美国专利号9,580,507中披露的抗体。已经证明美国专利号9,580,507中披露的抗PD-L1人单克隆抗体展现出以下特征中的一种或多种：(a)以1x10^-7M或更小的K_D与人PD-L1结合，如使用Biacore生物传感器系统通过表面等离子体共振确定的；(b)在混合淋巴细胞反应(MLR)测定中增加T细胞增殖；(c)在MLR测定中增加干扰素-γ产生；(d)在MLR测定中增加IL-2分泌；(e)刺激抗体应答；以及(f)逆转T调节细胞对T细胞效应细胞和/或树突细胞的作用。可用于本公开文本中的抗PD-L1抗体包括与人PD-L1特异性结合并且展现出前述特征中的至少一种(在一些方面至少五种)的单克隆抗体。

在某些方面，所述抗PD-L1抗体选自BMS-936559(也称为12A4、MDX-1105；参见例如，美国专利号7,943,743和WO 2013/173223)、阿特珠单抗(Roche；也称为MPDL3280A、RG7446；参见US 8,217,149；还参见Herbst等人(2013)J Clin Oncol 31(增刊):3000)、度伐鲁单抗(AstraZeneca；也称为IMFINZI^TM、MEDI-4736；参见WO 2011/066389)、阿维鲁单抗(Pfizer；也称为/>MSB-0010718C；参见WO 2013/079174)、STI-1014(Sorrento；参见WO 2013/181634)、CX-072(Cytomx；参见WO 2016/149201)；KN035(3D Med/Alphamab；参见Zhang等人,Cell Discov.7:3(2017年3月))、LY3300054(Eli Lilly Co.；参见例如，WO 2017/034916)、BGB-A333(BeiGene；参见Desai等人,JCO 36(15增刊):TPS3113(2018))以及CK-301(Checkpoint Therapeutics；参见Gorelik等人,AACR:Abstract 4606(2016年4月))。

在某些方面，所述PD-L1抗体是阿特珠单抗阿特珠单抗是一种完全人源化IgG1单克隆抗PD-L1抗体。

在某些方面，所述PD-L1抗体是度伐鲁单抗(IMFINZI^TM)。度伐鲁单抗是人IgG1κ单克隆抗PD-L1抗体。

在某些方面，所述PD-L1抗体是阿维鲁单抗阿维鲁单抗是一种人IgG1λ单克隆抗PD-L1抗体。

可用于所公开的组合物和方法中的抗PD-L1抗体还包括分离的抗体，所述分离的抗体与人PD-L1特异性结合并且与本文所公开的任何抗PD-L1抗体(例如，阿特珠单抗、度伐鲁单抗和/或阿维鲁单抗)交叉竞争与人PD-L1的结合。在一些方面，所述抗PD-L1抗体与本文所述的任何抗PD-L1抗体(例如，阿特珠单抗、度伐鲁单抗和/或阿维鲁单抗)结合相同的表位。抗体交叉竞争结合抗原的能力指示这些抗体结合抗原的相同表位区域并且在空间上阻碍其他交叉竞争抗体与该特定表位区域的结合。预期这些交叉竞争抗体由于它们结合PD-L1的相同表位区域而具有与参考抗体(例如，阿特珠单抗和/或阿维鲁单抗)非常相似的功能特性。在标准PD-L1结合测定(如Biacore分析、ELISA测定或流式细胞术)中可以基于交叉竞争抗体与阿特珠单抗和/或阿维鲁单抗交叉竞争的能力容易地鉴定它们(参见例如，WO2013/173223)。

在某些方面，与阿特珠单抗、度伐鲁单抗和/或阿维鲁单抗交叉竞争与人PD-L1的结合或与阿特珠单抗、度伐鲁单抗和/或阿维鲁单抗结合人PD-L1抗体的相同表位区域的抗体是单克隆抗体。对于施用至人类受试者，这些交叉竞争抗体是嵌合抗体、工程化抗体或者人源化抗体或人抗体。可以通过本领域熟知的方法来制备和分离这样的嵌合、工程化、人源化或人单克隆抗体。

可用于所公开的公开文本的组合物和方法中的抗PD-L1抗体还包括上述抗体的抗原结合部分。已经充分地证明，抗体的抗原结合功能可以通过全长抗体的片段来执行。

适用于所公开的组合物和方法的抗PD-L1抗体是以高特异性和亲和力与PD-L1结合、阻断PD-1的结合并且抑制PD-1信号传导途径的免疫抑制作用的抗体。在本文所公开的任何组合物或方法中，抗PD-L1“抗体”包括与PD-L1结合并且在抑制受体结合和上调免疫系统方面展现出与完整抗体相似的功能特性的抗原结合部分或片段。在某些方面，所述抗PD-L1抗体或其抗原结合部分与阿特珠单抗、度伐鲁单抗和/或阿维鲁单抗交叉竞争与人PD-L1的结合。

可用于本公开文本的抗PD-L1抗体可以是与PD-L1特异性结合的任何PD-L1抗体，例如与度伐鲁单抗、阿维鲁单抗或阿特珠单抗交叉竞争与人PD-1的结合的抗体，例如与度伐鲁单抗、阿维鲁单抗或阿特珠单抗结合相同表位的抗体。在特定方面，所述抗PD-L1抗体是度伐鲁单抗。在其他方面，所述抗PD-L1抗体是阿维鲁单抗。在一些方面，所述抗PD-L1抗体是阿特珠单抗。

在一些方面，所述抗PD-L1抗体以范围为约0.1mg/kg至约20.0mg/kg体重，约2mg/kg、约3mg/kg、约4mg/kg、约5mg/kg、约6mg/kg、约7mg/kg、约8mg/kg、约9mg/kg、约10mg/kg、约11mg/kg、约12mg/kg、约13mg/kg、约14mg/kg、约15mg/kg、约16mg/kg、约17mg/kg、约18mg/kg、约19mg/kg或约20mg/kg的剂量约每2、3、4、5、6、7或8周施用一次。

在一些方面，所述抗PD-L1抗体以约15mg/kg体重的剂量约每3周施用一次。在其他方面，所述抗PD-L1抗体以约10mg/kg体重的剂量约每2周施用一次。

在其他方面，可用于本公开文本的抗PD-L1抗体是平剂量。在一些方面，所述抗PD-L1抗体以如下平剂量施用：约200mg至约1600mg、约200mg至约1500mg、约200mg至约1400mg、约200mg至约1300mg、约200mg至约1200mg、约200mg至约1100mg、约200mg至约1000mg、约200mg至约900mg、约200mg至约800mg、约200mg至约700mg、约200mg至约600mg、约700mg至约1300mg、约800mg至约1200mg、约700mg至约900mg或约1100mg至约1300mg。在一些方面，所述抗PD-L1抗体以约1、2、3或4周的给药间隔以如下平剂量施用：至少约240mg、至少约300mg、至少约320mg、至少约400mg、至少约480mg、至少约500mg、至少约560mg、至少约600mg、至少约640mg、至少约700mg、至少720mg、至少约800mg、至少约840mg、至少约880mg、至少约900mg、至少960mg、至少约1000mg、至少约1040mg、至少约1100mg、至少约1120mg、至少约1200mg、至少约1280mg、至少约1300mg、至少约1360mg或至少约1400mg。在一些方面，所述抗PD-L1抗体以约1200mg的平剂量约每3周施用一次。在其他方面，所述抗PD-L1抗体以约800mg的平剂量约每2周施用一次。在其他方面，所述抗PD-L1抗体以约840mg的平剂量约每2周施用一次。

在一些方面，阿特珠单抗以约1200mg的平剂量约每3周施用一次。在一些方面，阿特珠单抗以约800mg的平剂量约每2周施用一次。在一些方面，阿特珠单抗以约840mg的平剂量约每2周施用一次。

在一些方面，阿维鲁单抗以约800mg的平剂量约每2周施用一次。

在一些方面，度伐鲁单抗以约10mg/kg的剂量约每2周施用一次。在一些方面，度伐鲁单抗以约800mg/kg的平剂量约每2周施用一次。在一些方面，度伐鲁单抗以约1200mg/kg的平剂量约每3周施用一次。

在一些方面，所述药物组合物包含至少约10mg/mL至至少约500mg/mL的抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约10mg/mL至至少约500mg/mL、至少约10mg/mL至至少约400mg/mL、至少约10mg/mL至至少约300mg/mL、至少约10mg/mL至至少约250mg/mL、至少约10mg/mL至至少约200mg/mL、至少约10mg/mL至至少约190mg/mL、至少约10mg/mL至至少约180mg/mL、至少约10mg/mL至至少约170mg/mL、至少约10mg/mL至至少约160mg/mL、至少约10mg/mL至至少约150mg/mL、至少约20mg/mL至至少约500mg/mL、至少约20mg/mL至至少约400mg/mL、至少约20mg/mL至至少约300mg/mL、至少约20mg/mL至至少约250mg/mL、至少约20mg/mL至至少约200mg/mL、至少约20mg/mL至至少约190mg/mL、至少约20mg/mL至至少约180mg/mL、至少约20mg/mL至至少约170mg/mL、至少约20mg/mL至至少约160mg/mL、至少约20mg/mL至至少约150mg/mL、至少约50mg/mL至至少约200mg/mL、至少约100mg/mL至至少约200mg/mL、至少约150mg/mL至至少约200mg/mL、至少约135mg/mL至至少约180mg/mL、至少约100mg/mL至至少约200mg/mL、至少约150mg/mL至至少约200mg/mL、至少约100mg/mL至至少约130mg/mL或至少约108mg/mL至至少约132mg/mL的抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约50mg/mL的抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约60mg/mL的抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约70mg/mL的抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约75mg/mL的抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约80mg/mL的抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约90mg/mL的抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约100mg/mL的抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约108mg/mL的抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约110mg/mL的抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约120mg/mL的抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约130mg/mL的抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约132mg/mL的抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约135mg/mL的抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约140mg/mL的抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约150mg/mL的抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约160mg/mL的抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约170mg/mL的抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约175mg/mL的抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约180mg/mL的抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约190mg/mL的抗PD-L1抗体。在一些方面，所述药物组合物包含至少约200mg/mL的抗PD-L1抗体。

在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)PD-L1和(ii)第二抗原。在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)PD-L1和(ii)CD3。

II.A.3.抗CTLA-4抗体

在一些方面，所述药物组合物包含特异性结合CTLA-4的抗体或其抗原结合部分(“抗CTLA-4抗体”)。本领域已知的任何抗CTLA-4抗体可以用于本公开文本的组合物和方法中。本发明的抗CTLA-4抗体与人CTLA-4结合，从而破坏CTLA-4与人B7受体的相互作用。由于CTLA-4与B7的相互作用转导导致携带CTLA-4受体的T细胞失活的信号，因此所述相互作用的破坏有效地诱导、增强或延长此类T细胞的激活，从而诱导、增强或延长免疫应答。

以高亲和力与CTLA-4特异性结合的人单克隆抗体已经披露于美国专利号6,984,720中。其他抗CTLA-4单克隆抗体已经描述于例如以下文献中：美国专利号5,977,318、6,051,227、6,682,736和7,034,121，以及国际公开号WO 2012/122444、WO 2007/113648、WO2016/196237和WO 2000/037504，将其每一个通过引用以其整体并入本文。已经证实美国专利号6,984,720中披露的抗CTLA-4人单克隆抗体展现以下特征中的一种或多种：(a)与人CTLA-4特异性结合，其结合亲和力反映为平衡缔合常数(K_a)为至少约10⁷M^-1、或约10⁹M^-1、或约10¹⁰M^-1至10¹¹M^-1或更高，如通过Biacore分析所确定；(b)动力学缔合常数(k_a)为至少约10³、约10⁴或约10⁵m^-1s^-1；(c)动力学解离常数(k_d)为至少约10³、约10⁴或约10⁵m^-1s^-1；以及(d)抑制CTLA-4与B7-1(CD80)和B7-2(CD86)的结合。可用于本发明的抗CTLA-4抗体包括与人CTLA-4特异性结合并展现前述特征中的至少一种、至少两种或至少三种的单克隆抗体。

在某些方面，所述CTLA-4抗体选自伊匹单抗(也称为MDX-010、10D1；参见美国专利号6,984,720)、MK-1308(Merck)、AGEN-1884(Agenus Inc.；参见WO 2016/196237)以及曲美木单抗(AstraZeneca；也称为替西木单抗，CP-675,206；参见WO 2000/037504和Ribas,Update Cancer Ther.2(3):133-39(2007))。在特定方面，所述抗CTLA-4抗体是伊匹单抗。

在特定方面，所述CTLA-4抗体是用于本文所公开的组合物和方法中的伊匹单抗。伊匹单抗是完全人IgG1单克隆抗体，其阻断CTLA-4与其B7配体的结合，从而刺激T细胞激活并改善患有晚期黑色素瘤的患者的总存活期(OS)。

在特定方面，所述CTLA-4抗体是曲美木单抗。在特定方面，所述CTLA-4抗体是MK-1308。在特定方面，所述CTLA-4抗体是AGEN-1884。

在一些方面，所述CTLA-4抗体是非岩藻糖基化的或低岩藻糖基化的。在一些方面，所述CTLA-4抗体展现增强的ADCC和/或ADCP活性。在一些方面，所述CTLA-4抗体是BMS-986218，如PCT/US18/19868中所述。

可用于所公开的组合物和方法中的抗CTLA-4抗体还包括分离的抗体，所述分离的抗体与人CTLA-4特异性结合并与本文所公开的任何抗CTLA-4抗体(例如，伊匹单抗和/或曲美木单抗)交叉竞争与人CTLA-4的结合。在一些方面，所述抗CTLA-4抗体与本文所述的任何抗CTLA-4抗体(例如，伊匹单抗和/或曲美木单抗)结合相同的表位。抗体交叉竞争结合抗原的能力指示这些抗体结合抗原的相同表位区域并且在空间上阻碍其他交叉竞争抗体与该特定表位区域的结合。预期这些交叉竞争抗体由于它们结合CTLA-4的相同表位区域而具有与参考抗体(例如，伊匹单抗和/或曲美木单抗)非常相似的功能特性。在标准CTLA-4结合测定(如Biacore分析、ELISA测定或流式细胞术)中可以基于交叉竞争抗体与伊匹单抗和/或曲美木单抗交叉竞争的能力容易地鉴定它们(参见例如，WO 2013/173223)。

在某些方面，与伊匹单抗和/或曲美木单抗交叉竞争与人CTLA-4的结合或与伊匹单抗和/或曲美木单抗结合人CTLA-4抗体的相同表位区域的抗体是单克隆抗体。对于施用至人类受试者，这些交叉竞争抗体是嵌合抗体、工程化抗体或者人源化抗体或人抗体。可以通过本领域熟知的方法来制备和分离这样的嵌合、工程化、人源化或人单克隆抗体。

可用于所公开发明的组合物和方法中的抗CTLA-4抗体还包括上述抗体的抗原结合部分。已经充分地证明，抗体的抗原结合功能可以通过全长抗体的片段来执行。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗CTLA-4抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗CTLA-4抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mLrHuPH20。

在一些方面，抗CTLA-4抗体可以与抗PD-1抗体一起配制于作为单一配制品的任一种本文公开的配制品中。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗CTLA-4抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗CTLA-4抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗CTLA-4抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗CTLA-4抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

适用于所公开的方法或组合物的抗CTLA-4抗体是以高特异性和亲和力与CTLA-4结合、阻断CTLA-4的活性并破坏CTLA-4与人B7受体的相互作用的抗体。在本文所公开的任何组合物或方法中，抗CTLA-4“抗体”包括与CTLA-4结合并且在抑制CTLA-4与人B7受体的相互作用和上调免疫系统方面展现出与完整抗体相似的功能特性的抗原结合部分或片段。在某些方面，所述抗CTLA-4抗体或其抗原结合部分与伊匹单抗和/或曲美木单抗交叉竞争与人CTLA-4的结合。

在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)CTLA-4和(ii)第二抗原。在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)CTLA-4和(ii)CD3。

II.A.4.抗LAG-3抗体

在一些方面，所述药物组合物包含特异性结合LAG-3的抗体或其抗原结合部分(“抗LAG-3抗体”)，例如瑞拉利单抗。本公开文本的抗LAG-3抗体与人LAG-3结合。任何抗LAG-3抗体可以用于本文公开的药物组合物和方法中。结合LAG-3的抗体已经披露于国际公开号WO/2015/042246以及美国公开号2014/0093511和2011/0150892中，将其每一个通过引用以其整体并入本文。

可用于本公开文本中的示例性LAG-3抗体是25F7(描述于美国公开号2011/0150892中)。可用于本公开文本中的另外的示例性LAG-3抗体是BMS-986016(瑞拉利单抗)。在一些方面，可用于本公开文本中的抗LAG-3抗体与25F7或BMS-986016交叉竞争。在一些方面，可用于本公开文本中的抗LAG-3抗体与25F7或BMS-986016结合相同的表位。在一些方面，抗LAG-3抗体包含25F7或BMS-986016的六个CDR。

可以用于本公开文本的方法和/或组合物中的其他本领域公认的抗LAG-3抗体包括US2011/007023中所述的IMP731(H5L7BW)、WO 2016028672和美国公开号2020/0055938中所述的MK-4280(28G-10，法韦泽利单抗(favezelimab))、Burova E等人,J.Immunother.Cancer(2016)；4(增刊1):P195和美国专利号10,358,495中所述的REGN3767(弗安利单抗(fianlimab))、WO 2017/019894中所述的人源化BAP050、GSK2831781、美国专利号10,711,060和美国公开号2020/0172617中所述的IMP-701(LAG525；埃拉利单抗(ieramilimab))、aLAG3(0414)、aLAG3(0416)、Sym022、TSR-033、TSR-075、XmAb841(以前为XmAb22841)、MGD013(特泊利单抗(tebotelimab))、BI754111、FS118、P 13B02-30、AVA-017、AGEN1746、RO7247669、INCAGN02385、IBI-110、EMB-02、IBI-323、LBL-007和ABL501。可用于所要求保护的发明中的这些和其他抗LAG-3抗体可以在例如以下文献中找到：US10,188,730、WO 2016/028672、WO 2017/106129、WO 2017/062888、WO 2009/044273、WO 2018/069500、WO 2016/126858、WO 2014/179664、WO 2016/200782、WO 2015/200119、WO 2017/019846、WO 2017/198741、WO 2017/220555、WO 2017/220569、WO 2018/071500、WO 2017/015560、WO 2017/025498、WO 2017/087589、WO 2017/087901、WO 2018/083087、WO 2017/149143、WO 2017/219995、US2017/0260271、WO 2017/086367、WO 2017/086419、WO 2018/034227、WO 2018/185046、WO 2018/185043、WO 2018/217940、WO 19/011306、WO 2018/208868、WO 2014/140180、WO 2018/201096、WO 2018/204374和WO 2019/018730。将这些参考文献中的每一个的内容通过引用以其整体并入。

可以用于本公开文本的方法和/或组合物中的抗LAG-3抗体还包括分离的抗体，所述分离的抗体与人LAG-3特异性结合并且与本文公开的任何抗LAG-3抗体(例如，瑞拉利单抗)交叉竞争与人LAG-3的结合。在一些方面，所述抗LAG-3抗体与本文所述的抗LAG-3抗体中的任一种(例如，瑞拉利单抗)结合相同的表位。

在一些方面，与本文公开的任何抗LAG-3抗体(例如，瑞拉利单抗)交叉竞争与人LAG-3的结合或与本文公开的任何抗LAG-3抗体结合相同表位区域的抗体是单克隆抗体。对于施用至人类受试者，这些交叉竞争抗体是嵌合抗体、工程化抗体或者人源化抗体或人抗体。可以通过本领域熟知的方法来制备和分离这样的嵌合、工程化、人源化或人单克隆抗体。

抗体交叉竞争结合抗原的能力指示所述抗体结合抗原的相同表位区域并且在空间上阻碍其他交叉竞争抗体与该特定表位区域的结合。预期这些交叉竞争抗体由于它们结合相同表位区域而具有与参考抗体(例如，瑞拉利单抗)非常相似的功能特性。在标准结合测定(如Biacore分析、ELISA测定或流式细胞术)中可以基于交叉竞争抗体交叉竞争的能力容易地鉴定它们(参见例如，WO 2013/173223)。

可以用于本公开文本的方法和/或组合物中的抗LAG-3抗体还包括上文全长抗体中的任一种的抗原结合部分。已经充分地证明，抗体的抗原结合功能可以通过全长抗体的片段来执行。

在一些方面，所述抗LAG-3抗体是全长抗体。

在一些方面，所述抗LAG-3抗体是单克隆抗体、人抗体、人源化抗体、嵌合抗体或多特异性抗体。在一些方面，所述多特异性抗体是双亲和重靶向抗体(DART)、DVD-Ig或双特异性抗体。

在一些方面，所述抗LAG-3抗体是F(ab')2片段、Fab'片段、Fab片段、Fv片段、scFv片段、dsFv片段、dAb片段或单链结合多肽。

在一些方面，所述抗LAG-3抗体是BMS-986016(瑞拉利单抗)、IMP731(H5L7BW)、MK4280(28G-10，法韦泽利单抗)、REGN3767(弗安利单抗)、GSK2831781、人源化BAP050、IMP-701(LAG525，埃拉利单抗)、aLAG3(0414)、aLAG3(0416)、Sym022、TSR-033、TSR-075、XmAb841(XmAb22841)、MGD013(特泊利单抗)、BI754111、FS118、P 13B02-30、AVA-017、25F7、AGEN1746、RO7247669、INCAGN02385、IBI-110、EMB-02、IBI-323、LBL-007、ABL501，或者包含其抗原结合部分。

在一些方面，所述抗LAG-3抗体是瑞拉利单抗。

在一些方面，所述抗LAG-3抗体是MGD013(特泊利单抗)，其是双特异性PD-1×LAG-3DART。

在一些方面，所述抗LAG-3抗体是REGN3767(弗安利单抗)。

在一些方面，所述抗LAG-3抗体是LAG525(埃拉利单抗)。

在一些方面，所述抗LAG-3抗体是MK4280(法韦泽利单抗)。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗LAG-3抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)瑞拉利单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗LAG-3抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)瑞拉利单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，抗LAG-3抗体(例如，瑞拉利单抗)可以与抗PD-1抗体一起配制于作为单一配制品的任一种本文公开的配制品中。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗LAG-3抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)瑞拉利单抗。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗LAG-3抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)瑞拉利单抗；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗LAG-3抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)瑞拉利单抗。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗LAG-3抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)瑞拉利单抗；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

可用于本公开文本中的示例性LAG-3抗体是25F7(描述于美国公开号2011/0150892中)。可用于本公开文本的另外的示例性LAG-3抗体是BMS-986016。在一个方面，可用于组合物的抗LAG-3抗体与25F7或BMS-986016交叉竞争。在另一方面，可用于组合物的抗LAG-3抗体与25F7或BMS-986016结合相同的表位。在其他方面，抗LAG-3抗体包含25F7或BMS-986016的六个CDR。

在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)LAG-3和(ii)第二抗原。在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)LAG-3和(ii)CD3。

II.A.5.抗CD137抗体

在一些方面，所述第二抗体包括抗CD137抗体。抗CD137抗体特异性结合并激活表达CD137的免疫细胞，从而刺激针对肿瘤细胞的免疫应答，特别是细胞毒性T细胞应答。结合CD137的抗体已经披露于以下文献中：美国公开号2005/0095244；以及美国专利号7,288,638、6,887,673、7,214,493、6,303,121、6,569,997、6,905,685、6,355,476、6,362,325、6,974,863和6,210,669。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗CD137抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗CD137抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mLrHuPH20。

在一些方面，抗CD137抗体可以与抗PD-1抗体一起配制于作为单一配制品的任一种本文公开的配制品中。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗CD137抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗CD137抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗CD137抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗CD137抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，所述抗CD137抗体是乌瑞芦单抗(urelumab，BMS-663513)，描述于美国专利号7,288,638中(20H4.9-IgG4[10C7或BMS-663513])。在一些方面，所述抗CD137抗体是BMS-663031(20H4.9-IgG1)，描述于美国专利号7,288,638中。在一些方面，所述抗CD137抗体是4E9或BMS-554271，描述于美国专利号6,887,673中。在一些方面，所述抗CD137抗体是以下披露的抗体：美国专利号7,214,493、6,303,121、6,569,997、6,905,685或6,355,476。在一些方面，所述抗CD137抗体是1D8或BMS-469492；3H3或BMS-469497；或3E1，描述于美国专利号6,362,325中。在一些方面，所述抗CD137抗体是以下披露的抗体：授权的美国专利号6,974,863(如53A2)。在一些方面，所述抗CD137抗体是以下披露的抗体：授权的美国专利号6,210,669(如1D8、3B8或3E1)。在一些方面，所述抗体是Pfizer的PF-05082566(PF-2566)。在其他方面，可用于本发明的抗CD137抗体与本文公开的抗CD137抗体交叉竞争。在一些方面，抗CD137抗体与本文公开的抗CD137抗体结合相同的表位。在其他方面，可用于本公开文本的抗CD137抗体包含本文公开的抗CD137抗体的六个CDR。

在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)CD137和(ii)第二抗原。在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)CD137和(ii)CD3。

II.A.6.抗KIR抗体

在一些方面，所述第二抗体包括抗KIR3抗体。与KIR特异性结合的抗体阻断NK细胞上的杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)与它们的配体之间的相互作用。阻断这些受体帮助NK细胞的激活，并且有可能通过NK细胞破坏肿瘤细胞。抗KIR抗体的例子已经披露于国际公开号WO/2014/055648、WO 2005/003168、WO 2005/009465、WO 2006/072625、WO 2006/072626、WO 2007/042573、WO 2008/084106、WO 2010/065939、WO 2012/071411和WO/2012/160448中。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗KIR抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗KIR抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，抗KIR抗体可以与抗PD-1抗体一起配制于作为单一配制品的任一种本文公开的配制品中。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗KIR抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗KIR抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗KIR抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗KIR抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

可用于本公开文本的一种抗KIR抗体是首先在国际公开号WO 2008/084106中描述的利瑞鲁单抗(也称为BMS-986015、IPH2102或1-7F9的S241P变体)。可用于本公开文本的另外的抗KIR抗体是在国际公开号WO 2006/003179中描述的1-7F9(也称为IPH2101)。在一个方面，用于本发明组合物的抗KIR抗体与利瑞鲁单抗或I-7F9交叉竞争与KIR的结合。在另一方面，抗KIR抗体与利瑞鲁单抗或I-7F9结合相同的表位。在其他方面，抗KIR抗体包含利瑞鲁单抗或I-7F9的六个CDR。

在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)KIR和(ii)第二抗原。在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)KIR和(ii)CD3。

II.A.7.抗GITR抗体

在一些方面，所述第二抗体包括抗GITR抗体。抗GITR抗体包括与人GITR靶标特异性结合并且激活糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)的任何抗GITR抗体。GITR是TNF受体超家族的成员，其在多种类型的免疫细胞(包括调节性T细胞、效应T细胞、B细胞、自然杀伤(NK)细胞和激活的树突细胞)的表面表达(“抗GITR激动剂抗体”)。具体地，GITR激活增加效应T细胞的增殖和功能，以及消除由激活的T调节性细胞所诱导的抑制。另外，GITR刺激通过增加其他免疫细胞(如NK细胞、抗原呈递细胞和B细胞)的活性来促进抗肿瘤免疫。抗GITR抗体的例子已经披露于以下文献中：国际公开号WO/2015/031667、WO 2015/184,099、WO 2015/026,684、WO 11/028683和WO/2006/105021，美国专利号7,812,135和8,388,967，以及美国公开号2009/0136494、2014/0220002、2013/0183321和2014/0348841。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗GITR抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗GITR抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mLrHuPH20。

在一些方面，抗GITR抗体可以与抗PD-1抗体一起配制于作为单一配制品的任一种本文公开的配制品中。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗GITR抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗GITR抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗GITR抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗GITR抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在一个方面，可用于本公开文本中的抗GITR抗体是TRX518(描述于例如Schaer等人Curr Opin Immunol.(2012)4月；24(2):217-224和WO/2006/105021中)。在另一方面，所述抗GITR抗体选自MK4166、MK1248、以及在WO 11/028683和U.S.8,709,424中描述的并且包含例如含有SEQ ID NO:104的VH链和含有SEQ ID NO:105的VL链(其中SEQ ID NO来自WO11/028683或U.S.8,709,424)的抗体。在某些方面，抗GITR抗体是WO 2015/031667中披露的抗GITR抗体，例如包含分别含有WO 2015/031667的SEQ ID NO:31、71和63的VH CDR 1-3以及含有WO 2015/031667的SEQ ID NO:5、14和30的VL CDR 1-3的抗体。在某些方面，抗GITR抗体是在WO 2015/184099中公开的抗GITR抗体，例如抗体Hum231#1或Hum231#2，或其CDR，或其衍生物(例如，pab1967、pab1975或pab1979)。在某些方面，抗GITR抗体是在JP2008278814、WO 09/009116、WO 2013/039954、US 20140072566、US20140072565、US20140065152或WO 2015/026684中公开的抗GITR抗体，或者是INBRX-110(INHIBRx)、LKZ-145(Novartis)或MEDI-1873(MedImmune)。在某些方面，抗GITR抗体是PCT/US2015/033991中描述的抗GITR抗体(例如，包含28F3、18E10或19D3的可变区的抗体)。

在某些方面，所述抗GITR抗体与本文所述的抗GITR抗体(例如，TRX518、MK4166或包含本文所述的VH结构域和VL结构域氨基酸序列的抗体)交叉竞争。在一些方面，所述抗GITR抗体与本文所述的抗GITR抗体(例如，TRX518、MK4166或包含本文所述的VH结构域和VL结构域氨基酸序列的抗体)结合相同的表位。在某些方面，所述抗GITR抗体包含TRX518、MK4166的六个CDR或含有本文所述的VH结构域和VL结构域氨基酸序列的抗体的那些。

在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)GITR和(ii)第二抗原。在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)GITR和(ii)CD3。

II.A.8.抗TIM3抗体

在一些方面，所述第二抗体包括抗TIM3抗体。在一些方面，所述抗TIM3抗体包括选自以下文献中披露的抗TIM3抗体：国际公开号WO 2018013818、WO/2015/117002(例如，MGB453，Novartis)、WO/2016/161270(例如，TSR-022，Tesaro/AnaptysBio)、WO2011155607、WO 2016/144803(例如，STI-600，Sorrento Therapeutics)、WO 2016/071448、WO 17055399；WO 17055404、WO 17178493、WO 18036561、WO 18039020(例如，Ly-3221367，Eli Lilly)、WO 2017205721、WO 17079112；WO 17079115；WO 17079116、WO 11159877、WO13006490、WO 2016068802、WO 2016068803、WO 2016/111947、WO/2017/031242。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗TIM3抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗TIM3抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mLrHuPH20。

在一些方面，抗TIM3抗体可以与抗PD-1抗体一起配制于作为单一配制品的任一种本文公开的配制品中。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗TIM3抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗TIM3抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗TIM3抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗TIM3抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)TIM-3和(ii)第二抗原。在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)TIM-3和(ii)CD3。

II.A.9.抗OX40抗体

在一些方面，所述第二抗体包括抗OX40(也称为CD134、TNFRSF4、ACT35和/或TXGP1L)抗体。在一些方面，所述抗OX40抗体包括BMS-986178(Bristol-Myers SquibbCompany)，描述于国际公开号WO 20160196228中。在一些方面，所述抗OX40抗体包括选自以下文献中描述的抗OX40抗体：WO 95012673、WO 199942585、WO 14148895、WO 15153513、WO15153514、WO 13038191、WO 16057667、WO 03106498、WO 12027328、WO 13028231、WO16200836、WO 17063162、WO 17134292、WO 17096179、WO 17096281和WO 17096182。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗OX40抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗OX40抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mLrHuPH20。

在一些方面，抗OX40抗体可以与抗PD-1抗体一起配制于作为单一配制品的任一种本文公开的配制品中。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗OX40抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗OX40抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗OX40抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗OX40抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)OX40和(ii)第二抗原。在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)OX40和(ii)CD3。

II.A.10.抗NKG2A抗体

在一些方面，所述第二抗体包括抗NKG2A抗体。NKG2A是C型凝集素受体家族的成员，其表达于自然杀伤(NK)细胞和T淋巴细胞子集上。具体地，NKG2A主要表达于肿瘤浸润性先天免疫效应NK细胞上以及一些CD8+T细胞上。其天然配体人白细胞抗原E(HLA-E)表达于实体瘤和血液肿瘤上。NKG2A是结合HLA-E的抑制性受体。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗NKG2A抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗NKG2A抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mLrHuPH20。

在一些方面，抗NKG2A抗体可以与抗PD-1抗体一起配制于作为单一配制品的任一种本文公开的配制品中。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗NKG2A抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗NKG2A抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗NKG2A抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗NKG2A抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，所述抗NKG2A抗体包括BMS-986315，这是一种人单克隆抗体，其阻断NKG2A与其配体HLA-E的相互作用，从而允许激活抗肿瘤免疫应答。在一些方面，所述抗NKG2A抗体包括激活T细胞、NK细胞和/或肿瘤浸润性免疫细胞的检查点抑制剂。在一些方面，所述抗NKG2A抗体包括选自描述于例如以下文献中的抗NKG2A抗体：WO 2006/070286(Innate Pharma S.A.；热那亚大学)；美国专利号8,993,319(Innate Pharma S.A.；热那亚大学)；WO 2007/042573(Innate Pharma S/A；Novo Nordisk A/S；热那亚大学)；美国专利号9,447,185(Innate Pharma S/A；Novo Nordisk A/S；热那亚大学)；WO 2008/009545(Novo Nordisk A/S)；美国专利号8,206,709、8,901,283、9,683,041(Novo Nordisk A/S)；WO 2009/092805(Novo Nordisk A/S)；美国专利号8,796,427和9,422,368(Novo NordiskA/S)；WO 2016/134371(Ohio State Innovation Foundation)；WO 2016/032334(Janssen)；WO 2016/041947(Innate)；WO 2016/041945(Academisch Ziekenhuis LeidenH.O.D.N.LUMC)；WO 2016/041947(Innate Pharma)；以及WO 2016/041945(InnatePharma)。

在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)NKG2A和(ii)第二抗原。在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)NKG2A和(ii)CD3。

II.A.11.抗ICOS抗体

在一些方面，所述第二抗体包括抗ICOS抗体。ICOS是免疫检查点蛋白，其为CD28超家族的成员。ICOS是55-60kDa的I型跨膜蛋白，在T细胞激活后表达于T细胞上，并且在结合其配体ICOS-L(B7H2)后共刺激T细胞激活。ICOS也称为可诱导T细胞共刺激物、CVID1、AILIM、可诱导共刺激剂、CD278、激活诱导型淋巴细胞免疫介导分子和CD278抗原。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗ICOS抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗ICOS抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mLrHuPH20。

在一些方面，抗ICOS抗体可以与抗PD-1抗体一起配制于作为单一配制品的任一种本文公开的配制品中。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗ICOS抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗ICOS抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗ICOS抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗ICOS抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，所述抗ICOS抗体包括BMS-986226，这是一种结合并刺激人ICOS的人源化IgG单克隆抗体。在一些方面，所述抗ICOS抗体包括选自描述于例如以下文献中的抗ICOS抗体：WO 2016/154177(Jounce Therapeutics,Inc.)、WO 2008/137915(MedImmune)、WO 2012/131004(INSERM，French National Institute of Health and MedicalResearch)、EP3147297(INSERM，French National Institute of Health and MedicalResearch)、WO 2011/041613(Memorial Sloan Kettering Cancer Center)、EP 2482849(Memorial Sloan Kettering Cancer Center)、WO 1999/15553(Robert KochInstitute)、美国专利号7,259,247and 7,722,872(Robert Kotch Institute)；WO 1998/038216(Japan Tobacco Inc.)、美国专利号7,045,615；7,112,655和8,389,690(JapanTobacco Inc.)、美国专利号9,738,718和9,771,424(GlaxoSmithKline)以及WO 2017/220988(Kymab Limited)。

在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)ICOS和(ii)第二抗原。在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)ICOS和(ii)CD3。

II.A.12.抗TIGIT抗体

在一些方面，所述第二抗体包括抗TIGIT抗体。在一些方面，所述抗TIGIT抗体包括BMS-986207。在一些方面，所述抗TIGIT抗体包括克隆22G2，如WO 2016/106302中所述。在一些方面，所述抗TIGIT抗体包括MTIG7192A/RG6058/RO7092284或克隆4.1D3，如WO 2017/053748中所述。在一些方面，所述抗TIGIT抗体包括选自描述于例如以下文献中的抗TIGIT抗体：WO 2016/106302(Bristol-Myers Squibb Company)和WO 2017/053748(Genentech)。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗TIGIT抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗TIGIT抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mLrHuPH20。

在一些方面，抗TIGIT抗体可以与抗PD-1抗体一起配制于作为单一配制品的任一种本文公开的配制品中。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗TIGIT抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗TIGIT抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗TIGIT抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗TIGIT抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)TIGIT和(ii)第二抗原。在一些方面，所述抗体包括TIGIT双特异性抗体，其特异性结合(i)TIGIT；和(ii)在T细胞、NK细胞或T细胞和NK细胞二者上表达的抑制性受体。在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)TIGIT和(ii)CD3。

II.A.13.抗IL-12抗体

在一些方面，所述第二抗体包括抗IL-12抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗IL-12抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗IL-12抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，抗IL-12抗体可以与抗PD-1抗体一起配制于作为单一配制品的任一种本文公开的配制品中。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗IL-12抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗IL-12抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗IL-12抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗IL-12抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)IL-12和(ii)第二抗原。在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)IL-12和(ii)CD3。

II.A.14.抗IL-13抗体

在一些方面，所述第二抗体包括抗IL-13抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗IL-13抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗IL-13抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，抗IL-13抗体可以与抗PD-1抗体一起配制于作为单一配制品的任一种本文公开的配制品中。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗IL-13抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗IL-13抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗IL-13抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗IL-13抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)IL-13和(ii)第二抗原。在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)IL-13和(ii)CD3。

II.A.15.抗IL-15抗体

在一些方面，所述第二抗体包括抗IL-15抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗IL-15抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗IL-15抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，抗IL-15抗体可以与抗PD-1抗体一起配制于作为单一配制品的任一种本文公开的配制品中。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗IL-15抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗IL-15抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗IL-15抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗IL-15抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)IL-15和(ii)第二抗原。在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)IL-15和(ii)CD3。

II.A.16.抗SIRPα抗体

在一些方面，所述第二抗体包括抗SIRPα抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗SIRPα抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗SIRPα抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，抗SIRPα抗体可以与抗PD-1抗体一起配制于作为单一配制品的任一种本文公开的配制品中。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗SIRPα抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗SIRPα抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗SIRPα抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗SIRPα抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)SIRPα和(ii)第二抗原。在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)SIRPα和(ii)CD3。

II.A.17.抗CD47抗体

在一些方面，所述第二抗体包括抗CD47抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗CD47抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗CD47抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，抗CD47抗体可以与抗PD-1抗体一起配制于作为单一配制品的任一种本文公开的配制品中。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗CD47抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗CD47抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗CD47抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗CD47抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)CD47和(ii)第二抗原。在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)CD47和(ii)CD3。

II.A.18.抗CCR8抗体

在一些方面，所述第二抗体包括抗CCR8抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗CCR8抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗CCR8抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，抗CCR8抗体可以与抗PD-1抗体一起配制于作为单一配制品的任一种本文公开的配制品中。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗CCR8抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗CCR8抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗CCR8抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗CCR8抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)CCR8和(ii)第二抗原。在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)CCR8和(ii)CD3。

II.A.19.抗MICA抗体

在一些方面，所述第二抗体包括抗MICA抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗MICA抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗MICA抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，抗MICA抗体可以与抗PD-1抗体一起配制于作为单一配制品的任一种本文公开的配制品中。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗MICA抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗MICA抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗MICA抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗MICA抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)MICA和(ii)第二抗原。在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)MICA和(ii)CD3。

II.A.20.抗ILT4抗体

在一些方面，所述第二抗体包括抗ILT4抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗ILT4抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)抗ILT4抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，抗ILT4抗体可以与抗PD-1抗体一起配制于作为单一配制品的任一种本文公开的配制品中。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗ILT4抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗ILT4抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)抗ILT4抗体。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；(g)抗ILT4抗体；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)ILT4和(ii)第二抗原。在一些方面，所述抗体是多特异性抗体，例如，双特异性抗体，其特异性地结合(i)ILT4和(ii)CD3。

II.B.内切糖苷酶水解酶

在一些方面，所述药物组合物包含内切糖苷酶水解酶。任何内切糖苷酶水解酶可以用于本文公开的药物组合物和方法中。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶在己糖胺β(1-4)或(1-3)连接处切割透明质酸。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包含透明质酸酶PH-20(HuPH20)、HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4或HYALPS1的催化结构域。

在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包括透明质酸酶。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包括选自HuPH20、HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4、其任何变体和任何亚型的透明质酸酶。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包括rHuPH20或其片段。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包含与SEQ ID NO:1的氨基酸36-490具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包含rHuPH20(UniProt ID号P38567-1)的催化结构域。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包括rHuPH20成熟肽(SEQ ID NO:1的氨基酸36-490)。

表1B：rHuPH20的氨基酸序列

信号肽：加下划线；成熟蛋白质：粗体；前肽：斜体。

在一些方面，药物组合物包含Halozyme Therapeutics的药物递送技术(参见美国专利号7,767,429，其通过引用以其整体并入本文)。/>使用抗体与重组人透明质酸酶(rHuPH20)的共配制品，其消除了由于细胞外基质而对可以皮下递送的生物制剂和药物的体积的传统限制(参见美国专利号7,767,429)。在一些方面，用于本公开文本的药物组合物可以还包含重组人透明质酸酶(例如，rHuPH20)。

重组人透明质酸酶PH20(rHuPH20，Halozyme Therapeutics Inc.)是一种糖基化的447个氨基酸的单链重组人多肽，其在注射部位处使皮下(SC)间隙中的透明质酸局部解聚。透明质酸是N-乙酰基-葡糖胺和葡糖醛酸的重复聚合物，其对皮肤的细胞外基质的可溶凝胶样组分做出贡献。通过rHuPH20使透明质酸解聚导致细胞外基质的凝胶样相的黏度的短暂下降并增加水分传导性，从而促进所注射药物的分散和吸收(参见rHuPH20IB)。rHuPH20的使用使得能够递送大体积用于快速SC注射(例如，大约2mL至20mL)，这可以缩短剂量施用时间，降低施用频率，并且使得能够对共施用药物的PK概况作出潜在的改进，包括改善吸收，增加生物利用度，加快到最大浓度的时间(Tmax)，增加最大浓度(Cmax)以及降低PK差异性。

rHuPH20在皮肤中的半衰期<30分钟，并且这些组织中的局部渗透屏障在注射透明质酸酶后的24小时至48小时内恢复至注射前水平。研究显示，rHuPH20在以10,000U和30,000U的剂量SC施用后在健康志愿者和患者中不是全身可检测的。对rHuPH20的PK的另一项研究(Halozyme研究HALO-104-104)证实，rHuPH20的血浆浓度快速下降，t1/2极短(≤10.4min)，并且在以10,000或30,000单位的rHuPH20的IV剂量IV输注结束后1.5小时内，血浆浓度变得不可检测(<0.03ng/mL)。

在健康参与者、脱水的儿科参与者、临终关怀和缓和照顾参与者、患有1型和2型糖尿病的参与者以及患有类风湿性关节炎的参与者中，rHuPH20的皮下注射通常耐受良好。单独的或与乳酸盐林格溶液、生理盐水、共注射的药物(吗啡、头孢曲松、胰岛素和胰岛素类似物)或生物产品(免疫球蛋白G[IgG]和阿达木单抗)共施用的rHuPH20的皮下注射耐受良好。

在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包括经修饰的透明质酸酶，所述经修饰的透明质酸酶相对于选自HuPH20、HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4、HYALPS1或其片段的野生型透明质酸酶包含一个或多个氨基酸取代。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包括经修饰的透明质酸酶，所述经修饰的透明质酸酶相对于选自HuPH20、HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4、HYALPS1或其片段的野生型透明质酸酶包含α螺旋区中的一个或多个氨基酸取代。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包括经修饰的透明质酸酶，所述经修饰的透明质酸酶相对于选自HuPH20、HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4、HYALPS1或其片段的野生型透明质酸酶包含接头区中的一个或多个氨基酸取代。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包括经修饰的透明质酸酶，其中相对于选自HuPH20、HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4、HYALPS1或其片段的野生型透明质酸酶，一个或多个N末端和/或C末端氨基酸缺失。

在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包括经修饰的rHuPH20，其中所述经修饰的rHuPH20相对于野生型rHuPH20包含α螺旋区、接头区或α螺旋区和接头区二者中的一个或多个氨基酸取代。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包括经修饰的rHuPH20，其中所述经修饰的rHuPH20相对于野生型rHuPH20包含一个或多个N末端氨基酸、一个或多个C末端氨基酸或一个或多个N末端氨基酸和一个或多个C末端氨基酸的缺失。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包括经修饰的rHuPH20，其中所述经修饰的rHuPH20相对于野生型rHuPH20包含α螺旋区、接头区或α螺旋区和接头区二者中的一个或多个氨基酸取代；并且其中所述经修饰的rHuPH20相对于野生型rHuPH20包含一个或多个N末端氨基酸、一个或多个C末端氨基酸或一个或多个N末端氨基酸和一个或多个C末端氨基酸的缺失。

内切糖苷酶水解酶的另外的非限制性例子发现于EP3636752中，其通过引用以其整体并入本文。

在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶是以下文献中披露的具有内切糖苷酶水解酶活性的任何多肽：美国专利号US 9,447,401；US10,865,400；US11,041,149；US 11,066,656；US 8,927,249；US 9,284,543；US10,588,983；US10/328,130；和/或US 9,993,529，将其每一个通过引用以其整体并入本文。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶是以下文献中披露的具有内切糖苷酶水解酶活性的任何多肽：国际公开号WO/13/102144、WO/10/077297、WO/15/003167、WO/04/078140、WO/09/128917、WO/12/174478和/或WO/12/174480，将其每一个通过引用以其整体并入本文。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包含与选自SEQ IDNO:5-52和264所示氨基酸序列的氨基酸序列至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％相同的氨基酸序列。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包含选自SEQ ID NO:5-52和264所示氨基酸序列的氨基酸序列。

在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶是以下文献中披露的具有内切糖苷酶水解酶活性的任何多肽：美国专利申请公开号US2021155913A1和/或US2021363270A1；和/或国际公开号WO/20/022791、WO/20/197230和/或WO/21/150079；将其每一个通过引用以其整体并入本文。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包含与选自SEQ ID NO:53-263所示氨基酸序列的氨基酸序列至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％相同的氨基酸序列。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包含与SEQ ID NO:92所示的氨基酸序列至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％相同的氨基酸序列。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包含选自SEQ ID NO:53-263所示氨基酸序列的氨基酸序列。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶包含SEQ ID NO:92所示的氨基酸序列。在一些方面，所述内切糖苷酶水解酶是HP46(国际公开号WO/20/197230的SEQ ID NO:44)。

在某些方面，本文公开的药物组合物包含透明质酸酶。在一些方面，所述药物组合物包含足够浓度的透明质酸酶用于施用至少约20,000单位的所述透明质酸酶。在一些方面，所述药物组合物包含足够浓度的透明质酸酶用于施用至少约50,000单位的所述透明质酸酶。在一些方面，所述药物组合物包含足够浓度的透明质酸酶用于施用至少约75,000单位的所述透明质酸酶。在一些方面，所述药物组合物包含足够浓度的透明质酸酶用于施用至少约100,000单位的所述透明质酸酶。在一些方面，所述透明质酸酶是rHuPH20。在其他方面，所述药物组合物不包含透明质酸酶。

在一些方面，所述药物组合物包含至少约50单位至至少约48000单位的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约50U/mL至至少约5000U/mL的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约50U/mL、至少约100U/mL、至少约150U/mL、至少约200U/mL、至少约250U/mL、至少约300U/mL、至少约350U/mL、至少约400U/mL、至少约450U/mL、至少约500U/mL、至少约750U/mL、至少约1000U/mL、至少约1500U/mL、至少约2000U/mL、至少约2500U/mL、至少约3000U/mL、至少约3500U/mL、至少约4000U/mL、至少约4500U/mL、至少约5000U/mL、至少约5500U/mL、至少约6000U/mL、至少约6500U/mL、至少约7000U/mL、至少约7500U/mL、至少约8000U/mL、至少约8500U/mL、至少约9000U/mL、至少约9500U/mL、至少约10,000U/mL的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约500U/mL的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约1000U/mL的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约2000U/mL的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约2500U/mL的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约3000U/mL的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约3500U/mL的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约4000U/mL的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约4500U/mL的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约5000U/mL的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约6000U/mL的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约7000U/mL的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约8000U/mL的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约9000U/mL的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约10,000U/mL的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。

在一些方面，所述药物组合物包含至少约50单位至至少约100,000单位的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约500单位至至少约100,000单位的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约50单位、至少约100单位、至少约150单位、至少约200单位、至少约250单位、至少约300单位、至少约400单位、至少约500单位、至少约600单位、至少约700单位、至少约800单位、至少约900单位、至少约1000单位、至少约1500单位、至少约2000单位、至少约2500单位、至少约3000单位、至少约4000单位、至少约5000单位、至少约10,000单位、至少约15,000单位、至少约20,000单位、至少约25,000单位、至少约30,000单位、至少约35,000单位、至少约40,000单位、至少约45,000单位、至少约48,000单位、至少约50,000单位、至少约55,000单位、至少约60,000单位、至少约65,000单位、至少约70,000单位、至少约75,000单位、至少约80,000单位、至少约85,000单位、至少约90,000单位、至少约95,000单位或至少约100,000单位的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约20,000单位的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约30,000单位的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约40,000单位的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约50,000单位的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约60,000单位的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约70,000单位的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约80,000单位的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约90,000单位的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约100,000单位的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。

本领域技术人员将容易地了解，所述内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)的量可以以单位或U/mL来表示，或者所述内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)的量可以以mg/mL(或者以其他基于重量的单位)来表示。例如，在一些方面，所述药物组合物包含表示为至少约500U/mL或至少约0.00455mg/mL的量的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。在另一个例子中，在一些方面，所述药物组合物包含表示为至少约2000U/mL或至少约0.0182mg/mL的量的内切糖苷酶水解酶(例如，rHuPH20)。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL的抗体或其抗原结合部分(例如，抗PD-1抗体，例如，纳武单抗或派姆单抗)；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸，以及(g)约2000U/mLrHuPH20。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸，以及(g)约2000U/mL rHuPH20。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL的抗体或其抗原结合部分(例如，抗PD-1抗体，例如，纳武单抗或派姆单抗)；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸，以及(g)约0.0182mg/mL rHuPH20。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸，以及(g)约0.0182mg/mL rHuPH20。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗体或其抗原结合部分(例如，抗PD-1抗体，例如，纳武单抗或派姆单抗)；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸，以及(g)约2000U/mLrHuPH20。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸，以及(g)约2000U/mL rHuPH20。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗体或其抗原结合部分(例如，抗PD-1抗体，例如，纳武单抗或派姆单抗)；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸，以及(g)约0.0182mg/mL rHuPH20。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸，以及(g)约0.0182mg/mL rHuPH20。

在某些方面，本文所述的单位剂量包含：(a)约120mg/mL的抗体或其抗原结合部分(例如，抗PD-1抗体，例如，纳武单抗或派姆单抗)；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸，以及(g)约2000U/mLrHuPH20。在某些方面，本文所述的单位剂量包含：(a)约120mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。在某些方面，本文所述的单位剂量包含：(a)约120mg/mL的抗体或其抗原结合部分(例如，抗PD-1抗体，例如，纳武单抗或派姆单抗)；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸，以及(g)约0.0182mg/mL rHuPH20。在某些方面，本文所述的单位剂量包含：(a)约120mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸，以及(g)约0.0182mg/mL rHuPH20。

在某些方面，本文所述的单位剂量包含：(a)约150mg/mL的抗体或其抗原结合部分(例如，抗PD-1抗体，例如，纳武单抗或派姆单抗)；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸，以及(g)约2000U/mLrHuPH20。在某些方面，本文所述的单位剂量包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。在某些方面，本文所述的单位剂量包含：(a)约150mg/mL的抗体或其抗原结合部分(例如，抗PD-1抗体，例如，纳武单抗或派姆单抗)；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸，以及(g)约0.0182mg/mL rHuPH20。在某些方面，本文所述的单位剂量包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸，以及(g)约0.0182mg/mL rHuPH20。

在某些方面，所述药物组合物包含(a)约672mg纳武单抗；(b)约8.68mg L-组氨酸；(c)约11.8mg组氨酸HCl H2O；(d)约479mg蔗糖；(e)约2.80mg聚山梨酯80；(f)约0.110mg喷替酸；(g)约4.18mg甲硫氨酸；(h)约0.102mg rHuPH20；其中(a)-(h)在水中重构至至少约5.6mL的最终体积。

II.C.抗氧化剂

在一些方面，所述药物组合物还包含抗氧化剂。任何抗氧化剂可以用于本文公开的药物组合物中。在一些方面，所述抗氧化剂选自甲硫氨酸、色氨酸、和组氨酸、半胱氨酸、抗坏血酸、甘氨酸、喷替酸(DTPA)和EDTA。在一些方面，所述药物组合物包含至少两种抗氧化剂。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂中的至少一种是牺牲抗氧化剂。任何牺牲抗氧化剂可以用于本文公开的组合物和方法中。在一些方面，所述牺牲抗氧化剂选自甲硫氨酸、色氨酸、和组氨酸、半胱氨酸、抗坏血酸、甘氨酸或其他牺牲剂。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂中的至少一种包含金属离子螯合剂。任何金属离子螯合剂可以用于本文公开的药物组合物和方法中。在一些方面，所述金属离子螯合剂是喷替酸(“DTPA”)或EDTA。

在某些方面，所述药物组合物包含甲硫氨酸。在一些方面，所述药物组合物包含至少两种抗氧化剂。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂选自甲硫氨酸、DTPA和EDTA。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂包含甲硫氨酸和EDTA。在一些方面，所述至少两种抗氧化剂包含甲硫氨酸和喷替酸(DTPA)。

在一些方面，所述药物组合物包含抗体或其抗原结合部分(例如，抗PD-1抗体，例如，纳武单抗或派姆单抗)、甲硫氨酸和喷替酸(DTPA)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约0.1mM至至少约100mM甲硫氨酸。在一些方面，所述药物组合物包含至少约1mM至至少约20mM、至少约1mM至至少约15mM、至少约1mM至至少约10mM、至少约1mM至至少约5mM、至少约5mM至至少约20mM、至少约5mM至至少约15mM、至少约5mM至至少约10mM、至少约2mM至至少约9mM、至少约3mM至至少约8mM、至少约4mM至至少约7mM、至少约4mM至至少约6mM、至少约4mM至至少约5mM、至少约5mM至至少约6mM、至少约5mM至至少约7mM甲硫氨酸。在一些方面，所述药物组合物包含至少约1mM、至少约1.5mM、至少约2mM、至少约2.5mM、至少约3mM、至少约3.5mM、至少约4mM、至少约4.5mM、至少约5mM、至少约5.5mM、至少约6mM、至少约6.5mM、至少约7mM、至少约7.5mM、至少约8mM、至少约8.5mM、至少约9mM、至少约9.5mM、或至少约10mM、至少约11mM、至少约12mM、至少约13mM、至少约14mM、至少约15mM、至少约16mM、至少约17mM、至少约18mM、至少约19mM或至少约20mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含至少约10mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含至少约9mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含至少约8mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含至少约7mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含至少约6mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含至少约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含至少约4mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含至少约3mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含至少约2mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含至少约1mM甲硫氨酸。

在一些方面，所述药物组合物包含至少约1μM至至少约250μM喷替酸(DTPA)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约10μM至至少约200μM、至少约10μM至至少约175μM、至少约10μM至至少约150μM、至少约10μM至至少约125μM、至少约10μM至至少约100μM、至少约10μM至至少约75μM、至少约10μM至至少约70μM、至少约10μM至至少约60μM、至少约10μM至至少约50μM、至少约20μM至至少约100μM、至少约20μM至至少约75μM、至少约20μM至至少约70μM、至少约20μM至至少约60μM、至少约20μM至至少约50μM、至少约25μM至至少约100μM、至少约25μM至至少约75μM、至少约25μM至至少约50μM、至少约30μM至至少约100μM、至少约30μM至至少约75μM、至少约30μM至至少约70μM、至少约30μM至至少约30μM、至少约30μM至至少约50μM、至少约40μM至至少约100μM、至少约40μM至至少约75μM、至少约40μM至至少约70μM、至少约40μM至至少约60μM、至少约40μM至至少约50μM、至少约50μM至至少约100μM、至少约50μM至至少约75μM、至少约50μM至至少约70μM或至少约50μM至至少约60μM喷替酸(DTPA)。在一些方面，所述药物组合物包含至少约1μM、至少约5μM、至少约10μM、至少约15μM、至少约20μM、至少约25μM、至少约30μM、至少约35μM、至少约40μM、至少约45μM、至少约50μM、至少约55μM、至少约60μM、至少约65μM、至少约70μM、至少约75μM、至少约80μM、至少约85μM、至少约90μM、至少约95μM或至少约100μM、至少约110μM、至少约120μM、至少约130μM、至少约140μM、至少约150μM、至少约160μM、至少约170μM、至少约180μM、至少约190μM或至少约200μM DTPA。在某些方面，所述药物组合物包含至少约75μM喷替酸(DTPA)。在某些方面，所述药物组合物包含至少约70μM喷替酸(DTPA)。在某些方面，所述药物组合物包含至少约65μM喷替酸(DTPA)。在某些方面，所述药物组合物包含至少约60μM喷替酸(DTPA)。在某些方面，所述药物组合物包含至少约55μM喷替酸(DTPA)。在某些方面，所述药物组合物包含至少约50μM喷替酸(DTPA)。在某些方面，所述药物组合物包含至少约45μM喷替酸(DTPA)。在某些方面，所述药物组合物包含至少约40μM喷替酸(DTPA)。在某些方面，所述药物组合物包含至少约35μM喷替酸(DTPA)。在某些方面，所述药物组合物包含至少约30μM喷替酸(DTPA)。在某些方面，所述药物组合物包含至少约25μM喷替酸(DTPA)。

II.D.张力调节剂/稳定剂

在一些方面，所述药物组合物还包含张力调节剂和/或稳定剂。任何张力调节剂和/或任何稳定剂可以用于本文公开的药物组合物中。在一些方面，所述张力调节剂和/或稳定剂包括糖、氨基酸、多元醇、盐或其任何组合。在一些方面，所述张力调节剂和/或稳定剂选自蔗糖、山梨醇、海藻糖、甘露醇、甘油、甘氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、氯化钠、脯氨酸、精氨酸、多元醇、氨基酸和盐。

在某些方面，所述药物组合物包含蔗糖。在一些方面，所述药物组合物包含至少约1mM至至少约500mM蔗糖。在一些方面，所述药物组合物包含至少约10mM至至少约500mM、至少约10mM至至少约400mM、至少约50mM至至少约400mM、至少约100mM至至少约400mM、至少约150mM至至少约400mM、至少约200mM至至少约400mM、至少约250mM至至少约400mM、至少约300mM至至少约400mM、至少约350mM至至少约400mM、至少约50mM至至少约350mM、至少约100mM至至少约300mM、至少约100mM至至少约250mM、至少约100mM至至少约200mM、至少约100mM至至少约150mM、至少约200mM至至少约400mM、至少约200mM至至少约300mM或至少约200mM至至少约250mM蔗糖。在一些方面，所述药物组合物包含至少约10mM、至少约20mM、至少约30mM、至少约40mM、至少约50mM、至少约60mM、至少约70mM、至少约80mM、至少约90mM、至少约100mM、至少约110mM、至少约120mM、至少约130mM、至少约140mM、至少约150mM、至少约160mM、至少约170mM、至少约180mM、至少约190mM、至少约200mM、至少约210mM、至少约220mM、至少约230mM、至少约240mM、至少约250mM、至少约260mM、至少约270mM、至少约280mM、至少约290mM、至少约300mM、至少约310mM、至少约320mM、至少约330mM、至少约340mM、至少约350mM、至少约360mM、至少约370mM、至少约380mM、至少约390mM、至少约400mM、至少约410mM、至少约420mM、至少约430mM、至少约440mM、至少约450mM、至少约460mM、至少约470mM、至少约480mM、至少约490mM或至少约500mM蔗糖。在某些方面，所述药物组合物包含至少约200mM蔗糖。在某些方面，所述药物组合物包含至少约210mM蔗糖。在某些方面，所述药物组合物包含至少约220mM蔗糖。在某些方面，所述药物组合物包含至少约230mM蔗糖。在某些方面，所述药物组合物包含至少约240mM蔗糖。在某些方面，所述药物组合物包含至少约250mM蔗糖。在某些方面，所述药物组合物包含至少约260mM蔗糖。在某些方面，所述药物组合物包含至少约270mM蔗糖。在某些方面，所述药物组合物包含至少约280mM蔗糖。在某些方面，所述药物组合物包含至少约290mM蔗糖。在某些方面，所述药物组合物包含至少约300mM蔗糖。

II.E.缓冲剂

在一些方面，所述药物组合物还包含缓冲剂。在一些方面，所述缓冲剂选自组氨酸、琥珀酸盐、氨丁三醇、磷酸钠、乙酸钠和柠檬酸钠。在某些方面，所述药物组合物包含组氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含柠檬酸盐。在一些方面，所述药物组合物包含至少约1mM至至少约100mM组氨酸。在一些方面，所述药物组合物包含至少约5mM至至少约100mM、至少约10mM至至少约100mM、至少约15mM至至少约100mM、至少约20mM至至少约100mM、至少约25mM至至少约100mM、至少约30mM至至少约100mM、至少约35mM至至少约100mM、至少约40mM至至少约100mM、至少约45mM至至少约100mM、至少约50mM至至少约100mM、至少约10mM至至少约75mM、至少约10mM至至少约50mM、至少约10mM至至少约40mM、至少约10mM至至少约30mM、至少约15mM至至少约30mM、至少约10mM至至少约25mM或至少约15mM至至少约25mM组氨酸。

在一些方面，所述药物组合物包含至少约5mM、至少约10mM、至少约15mM、至少约20mM、至少约25mM、至少约30mM、至少约35mM、至少约40mM、至少约45mM、至少约50mM、至少约60mM、至少约70mM、至少约80mM、至少约90mM或至少约100mM组氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含至少约10mM组氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含至少约15mM组氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含至少约20mM组氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含至少约25mM组氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含至少约30mM组氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含至少约35mM组氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含至少约40mM组氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含至少约45mM组氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含至少约50mM组氨酸。

在一些方面，所述药物组合物具有约5.2至约6.8的pH。在一些方面，所述药物组合物的pH为约5.2。在一些方面，所述药物组合物的pH为约5.3。在一些方面，所述药物组合物的pH为约5.4。在一些方面，所述药物组合物的pH为约5.5。在一些方面，所述药物组合物的pH为约5.6。在一些方面，所述药物组合物的pH为约5.7。在一些方面，所述药物组合物的pH为约5.8。在一些方面，所述药物组合物的pH为约5.9。在一些方面，所述药物组合物的pH为约6.0。在一些方面，所述药物组合物的pH为约6.1。在一些方面，所述药物组合物的pH为约6.2。在一些方面，所述药物组合物的pH为约6.3。在一些方面，所述药物组合物的pH为约6.4。在一些方面，所述药物组合物的pH为约6.5。在一些方面，所述药物组合物的pH为约6.6。在一些方面，所述药物组合物的pH为约6.7。在一些方面，所述药物组合物的pH为约6.8。

II.F.表面活性剂

在一些方面，所述药物组合物还包含表面活性剂。任何表面活性剂可以用于本文公开的药物组合物中。在一些方面，所述表面活性剂选自聚山梨酯20、聚山梨酯80和泊洛沙姆188。在某些方面，所述药物组合物包含聚山梨酯80。在一些方面，所述药物组合物包含至少约0.001％至至少约1％w/v聚山梨酯80。在一些方面，所述药物组合物包含至少约0.01％至至少约0.1％、至少约0.02％至至少约0.1％、至少约0.03％至至少约0.1％、至少约0.04％至至少约0.1％、至少约0.05％至至少约0.1％、至少约0.01％至至少约0.09％、至少约0.01％至至少约0.8％、至少约0.01％至至少约0.7％、至少约0.01％至至少约0.6％、至少约0.01％至至少约0.5％、至少约0.02％至至少约0.09％、至少约0.03％至至少约0.08％、至少约0.04％至至少约0.07％或至少约0.04％至至少约0.06％w/v聚山梨酯80。在一些方面，所述药物组合物包含至少约0.01％至至少约0.1％w/v聚山梨酯80。

在一些方面，所述药物组合物包含至少约0.01％w/v、至少约0.02％w/v、至少约0.03％w/v、至少约0.04％w/v、至少约0.05％w/v、至少约0.06％w/v、至少约0.07％w/v、至少约0.08％w/v、至少约0.09％w/v或至少约0.1％w/v聚山梨酯80。在某些方面，所述药物组合物包含至少约0.03％w/v聚山梨酯80。在某些方面，所述药物组合物包含至少约0.04％w/v聚山梨酯80。在某些方面，所述药物组合物包含至少约0.05％w/v聚山梨酯80。在某些方面，所述药物组合物包含至少约0.06％w/v聚山梨酯80。在某些方面，所述药物组合物包含至少约0.07％w/v聚山梨酯80。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL的抗体(例如，抗PD-1抗体，例如，纳武单抗或派姆单抗)；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约120mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。

在一些方面，所述药物组合物包含：(a)抗PD-1抗体，例如，纳武单抗；(b)检查点抑制剂，例如，抗CTLA-4抗体；(c)约20mM组氨酸；(d)约250mM蔗糖；(e)约0.05％w/v聚山梨酯80；(f)约50μM喷替酸；以及(g)约5mM甲硫氨酸。在一些方面，所述药物组合物包含：(a)抗PD-1抗体，例如，纳武单抗；(b)检查点抑制剂，例如，抗CTLA-4抗体；(c)约20mM组氨酸；(d)约250mM蔗糖；(e)约0.05％w/v聚山梨酯80；(f)约50μM喷替酸；(g)约5mM甲硫氨酸；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在一些方面，所述药物组合物包含：(a)抗PD-1抗体，例如，纳武单抗；(b)检查点抑制剂，例如，抗LAG-3抗体；(c)约20mM组氨酸；(d)约250mM蔗糖；(e)约0.05％w/v聚山梨酯80；(f)约50μM喷替酸；以及(g)约5mM甲硫氨酸。在一些方面，所述药物组合物包含：(a)抗PD-1抗体，例如，纳武单抗；(b)检查点抑制剂，例如，抗LAG-3抗体；(c)约20mM组氨酸；(d)约250mM蔗糖；(e)约0.05％w/v聚山梨酯80；(f)约50μM喷替酸；(g)约5mM甲硫氨酸；以及(h)约2000U/mL rHuPH20。

在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，所述药物组合物包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。

在某些方面，本文所述的单位剂量包含：(a)约120mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，本文所述的单位剂量包含：(a)约120mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。在某些方面，本文所述的单位剂量包含：(a)约120mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，本文所述的单位剂量包含：(a)约120mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。

在某些方面，本文所述的单位剂量包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，本文所述的单位剂量包含：(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。在某些方面，本文所述的单位剂量包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在某些方面，本文所述的单位剂量包含：(a)约150mg/mL的纳武单抗；(b)约20mM组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约2000U/mL rHuPH20。

在某些方面，所述药物组合物包含(a)约672mg纳武单抗；(b)约8.68mg L-组氨酸；(c)约11.8mg组氨酸HCl H2O；(d)约479mg蔗糖；(e)约2.80mg聚山梨酯80；(f)约0.110mg喷替酸；(g)约4.18mg甲硫氨酸；其中(a)-(g)在水(例如，注射用无菌水，SWFI)中重构至至少约5.6mL的最终体积。

II.G.其他治疗剂(例如抗癌剂)

在一些方面，所述药物组合物还包含第二治疗剂(例如，抗PD-1抗体和另外的治疗剂，或者抗PD-L1抗体和另外的治疗剂)。在一些方面，所述药物组合物还包含第三治疗剂。所述另外的治疗剂可以包含用于治疗受试者的肿瘤的任何疗法和/或任何护理标准疗法，如本文所公开。在一些方面，所述另外的治疗剂包含第二抗体。在一些方面，所述另外的治疗剂包含抗体或其抗原结合部分，所述抗体或其抗原结合部分特异性结合CTLA-4、LAG-3、TIGIT、TIM3、NKG2a、OX40、ICOS、MICA、CD137、KIR、TGFβ、IL-10、IL-8、B7-H4、Fas配体、CXCR4、间皮素、CD27、GITR或其任何组合。在一些方面，所述第二治疗剂、所述第三治疗剂或二者包含IL-2(例如，贝培阿地白介素)。在一些方面，所述第二治疗剂、所述第三治疗剂或二者包含IL12-Fc(例如，BMS-986415)。

在一些方面，所述第二抗体包括抗CTLA-4抗体。所述抗CTLA-4抗体可以是结合CTLA-4并抑制其活性的任何抗体或其抗原结合部分。在一些方面，所述抗CTLA-4抗体是本文公开的任何抗CTLA-4抗体。在一些方面，所述第二抗体包括曲美木单抗。在一些方面，所述第二抗体包括伊匹单抗。

在一些方面，所述第二抗体包括抗LAG3抗体。所述抗LAG3抗体可以是结合LAG-3并抑制其活性的任何抗体或其抗原结合部分。在一些方面，所述抗LAG3抗体包括本文公开的任何抗LAG3抗体。在一些方面，所述第二抗体包括25F7。

在一些方面，所述第二抗体包括抗CD137抗体。所述抗CD137抗体可以是结合CD137并抑制其活性的任何抗体或其抗原结合部分。在一些方面，所述抗CD137抗体包括本文公开的任何抗CD137抗体。在一些方面，所述第二抗体包括乌瑞芦单抗。

在一些方面，所述第二抗体包括抗KIR抗体。所述抗KIR抗体包括结合KIR并抑制其活性的任何抗体或其抗原结合部分。在一些方面，所述抗KIR抗体包括本文公开的任何抗KIR抗体。在一些方面，所述第二抗体包括利瑞鲁单抗。

在一些方面，所述第二抗体包括抗GITR抗体。所述抗GITR抗体可以是结合GITR并抑制其活性的任何抗体或其抗原结合部分。在一些方面，所述抗GITR抗体包括本文公开的任何抗GITR抗体。在一些方面，所述第二抗体包括MK4166。在一些方面，所述第二抗体包括TRX518。

在一些方面，本文公开的药物组合物包含(i)抗PD-1或抗PD-L1抗体和(ii)抗VISTA抗体。

在一些方面，本文公开的药物组合物包含(i)抗PD-1或抗PD-L1抗体和(ii)抗CD96抗体。

在一些方面，本文公开的药物组合物包含(i)抗PD-1或抗PD-L1抗体和(ii)抗IL-8抗体，例如，具有-IL8。

在一些方面，本文公开的药物组合物包含(i)抗PD-1或抗PD-L1抗体和(ii)抗TGFβ抗体。

在一些方面，所述第二抗体包括抗B7-H4抗体。在某些方面，所述抗B7-H4抗体是国际公开号WO/2009/073533中披露的抗B7-H4抗体。

在一些方面，所述第二抗体包括抗CD96抗体。在一些方面，所述第二抗体包括抗TIM3抗体。在一些方面，所述第二抗体包括抗VISTA抗体。在一些方面，所述第二抗体包括抗NKG2A抗体。在一些方面，所述第二抗体包括抗ICOS抗体。在一些方面，所述第二抗体包括抗OX40抗体。在一些方面，所述第二抗体包括抗TIGIT抗体。在一些方面，所述第二抗体包括抗IL8抗体，如-IL8(BMS-986253)。在一些方面，所述第二抗体包括抗TGFβ抗体。

在一些方面，本文公开的药物组合物包含(i)抗PD-1或抗PD-L1抗体和(ii)抗Fas配体抗体。在某些方面，所述抗Fas配体抗体是国际公开号WO/2009/073533中披露的抗Fas配体抗体。

在一些方面，本文公开的药物组合物包含(i)抗PD-1或抗PD-L1抗体和(ii)抗CXCR4抗体。在某些方面，所述抗CXCR4抗体是美国公开号2014/0322208中披露的抗CXCR4抗体(例如，乌洛鲁单抗(BMS-936564))。

在一些方面，本文公开的药物组合物包含(i)抗PD-1或抗PD-L1抗体和(ii)抗间皮素抗体。在某些方面，所述抗间皮素抗体是美国专利号8,399,623中披露的抗间皮素抗体。

在一些方面，本文公开的药物组合物包含(i)抗PD-1或抗PD-L1抗体和(ii)抗HER2抗体。在某些方面，所述抗HER2抗体是赫塞汀(美国专利号5,821,337)、曲妥珠单抗或阿多曲妥珠单抗-恩美坦新(Kadcyla，例如WO/2001/000244)。

在一些方面，本文公开的药物组合物包含(i)抗PD-1或抗PD-L1抗体和(ii)抗CD27抗体。在一些方面，所述抗CD-27抗体是伐立鲁单抗(也称为“CDX-1127”和“1F5”)，其为作为人CD27的激动剂的人IgG1抗体，如例如美国专利号9,169,325中所披露。

在一些方面，本文公开的药物组合物包含(i)抗PD-1或抗PD-L1抗体和(ii)抗CD73抗体。在某些方面，所述抗CD73抗体是CD73.4.IgG2C219S.IgG1.1f。

在一些方面，本文公开的药物组合物包含(i)抗PD-1或抗PD-L1抗体和(ii)抗MICA/B抗体。在某些方面，所述抗MICA/B抗体是特异性结合人MICA/B的任何抗体或其抗原结合部分，包括但不限于国际公开号WO 2019/183551中披露的任何抗MICA/B抗体，其通过引用以其整体并入本文。

在一些方面，本文公开的药物组合物包含(i)抗PD-1或抗PD-L1抗体和(ii)抗IL-10抗体。在一些方面，本文公开的药物组合物包含(i)抗PD-1或抗PD-L1抗体和(ii)长效IL-10分子。在一些方面，所述长效IL-10分子包含IL-10-Fc融合分子。在一些方面，所述长效IL-10分子包含聚乙二醇化IL-10，如AM0010(ARMO BioSciences)。

在一些方面，本文公开的药物组合物包含(i)抗PD-1或抗PD-L1抗体和(ii)抗IL-2抗体。在一些方面，本文公开的药物组合物包含(i)抗PD-1或抗PD-L1抗体和(ii)长效IL-2分子。在一些方面，所述长效IL-2包含聚乙二醇化IL-2，如NKTR-214(Nektar；参见US 8,252,275、WO12/065086和WO15/125159)。

II.H.容器和递送装置

本公开文本的一些方面涉及一种小瓶，所述小瓶包含本文公开的药物组合物。在一些方面，所述小瓶包含单位剂量的所述药物组合物。在一些方面，所述小瓶包含(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM L-组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在一些方面，所述小瓶不包含透明质酸酶。

在一些方面，所述小瓶是针筒。任何针筒可以用于本文公开的组合物和方法中。在一些方面，所述针筒包含改进皮下施用的一个或多个机械元件。

在一些方面，所述小瓶是自动注射器。通常，自动注射器由患者仅通过在注射部位上施加压力来开动针和随后的药物流动而运作。所述压力引起针罩开动，其衔接针并使装置注射药物。因此，本公开文本的一些方面涉及一种自动注射器，所述自动注射器包含(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM L-组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在一些方面，所述自动注射器不包含透明质酸酶。

在一些方面，所述小瓶是笔式注射器。标准笔式注射器需要患者激活按钮，其将针推入所靶向的注射部位中。因此，本公开文本的一些方面涉及一种注射笔，所述注射笔包含(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM L-组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在一些方面，所述注射笔不包含透明质酸酶。

在一些方面，所述小瓶是穿戴式泵或穿戴式装置。在一些方面，所述穿戴式泵是贴片泵(patch pump)。因此，本公开文本的一些方面涉及一种穿戴式泵，所述穿戴式泵包含(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM L-组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；以及(f)约5mM甲硫氨酸。在一些方面，所述穿戴式泵不包含透明质酸酶。

本公开文本的一些方面涉及一种自动注射器，所述自动注射器包含

(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM L-组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约0.0182mg/mLrHuPH20。

在一些方面，所述小瓶是笔式注射器。标准笔式注射器需要患者激活按钮，其将针推入所靶向的注射部位中。因此，本公开文本的一些方面涉及一种注射笔，所述注射笔包含(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM L-组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约0.0182mg/mL rHuPH20。

在一些方面，所述小瓶是穿戴式泵或穿戴式装置。在一些方面，所述穿戴式泵是贴片泵。因此，本公开文本的一些方面涉及一种穿戴式泵，所述穿戴式泵包含(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；(b)约20mM L-组氨酸；(c)约250mM蔗糖；(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；(e)约50μM喷替酸；(f)约5mM甲硫氨酸；以及(g)约0.0182mg/mL rHuPH20。

III.本公开文本的方法

本公开文本的一些方面涉及治疗有需要的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者皮下施用一定剂量的本文公开的药物组合物，例如，所述药物组合物包含(i)特异性结合PD-1或PD-L1并抑制PD-1与PD-L1的相互作用的抗体(分别为“抗PD-1抗体”或“抗PD-L1抗体”)。在一些方面，所述药物组合物包含内切糖苷酶水解酶。在一些方面，所述药物组合物不包含透明质酸酶。

本公开文本的一些方面涉及治疗有需要的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者皮下施用一定剂量的药物组合物，所述药物组合物包含特异性结合PD-1或PD-L1并抑制PD-1与PD-L1的相互作用的抗体(分别为“抗PD-1抗体”或“抗PD-L1抗体”)。在一些方面，所述剂量是治疗有效剂量。在一些方面，所述治疗有效剂量包含一个或多个皮下单位剂量。在一些方面，所述皮下单位剂量中的至少一个的总体积小于约5mL(例如，小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约3mL或小于约2.5mL)。在某些方面，所述治疗有效剂量包含至少约250mg至至少约2400mg的所述抗体。在一些方面，所述药物组合物不包含促进皮下递送的酶。在某些方面，所述药物组合物不包含透明质酸酶。

III.A.给药

在一些方面，所述抗体的治疗有效剂量包含单一皮下单位剂量，例如，整个剂量作为单一单位剂量来施用。在一些方面，所述抗体的治疗有效剂量包含两个或更多个皮下单位剂量，例如，将有效单位剂量分为两个或更多个皮下单位剂量。在一些方面，所述抗体的治疗有效剂量包含至少两个皮下单位剂量。在一些方面，所述抗体的治疗有效剂量包含至少三个皮下单位剂量。在一些方面，所述抗体的治疗有效剂量包含至少四个皮下单位剂量。在一些方面，所述抗体的治疗有效剂量包含至少五个皮下单位剂量。在一些方面，所述抗体的治疗有效剂量包含至少六个皮下单位剂量。在一些方面，所述抗体的治疗有效剂量包含至少七个皮下单位剂量。在一些方面，所述抗体的治疗有效剂量包含至少八个皮下单位剂量。在一些方面，所述抗体的治疗有效剂量包含至少九个皮下单位剂量。在一些方面，所述抗体的治疗有效剂量包含十个或更多个皮下单位剂量。

在一些方面，每个皮下单位剂量是在同一天施用。在一些方面，一个或多个皮下单位剂量是在第一天施用，并且同一治疗有效剂量的一个或多个皮下单位剂量是在第二天施用。在一些方面，第一皮下单位剂量和第二皮下单位剂量是依序施用的。在一些方面，同一有效剂量的第一皮下单位剂量和第二皮下单位剂量是依序施用的，其中所述第二皮下单位剂量是在所述第一皮下单位剂量之后小于约5分钟、小于约10分钟、小于约15分钟、小于约20分钟、小于约25分钟、小于约30分钟、小于约45分钟、小于约60分钟、小于约75分钟、小于约90分钟、小于约2小时、小于约2.5小时、小于约3小时、小于约3.5小时、小于约4小时、小于约4.5小时、小于约5小时、小于约5.5小时、小于约6小时、小于约7小时、小于约8小时、小于约9小时、小于约12小时、小于约18小时或小于约24小时施用。在一些方面，所述两个或更多个皮下单位剂量是随后施用的，其中所述两个或更多个皮下单位剂量中的每一个是在所述皮下单位剂量之间的小于约10分钟、小于约15分钟、小于约20分钟、小于约25分钟、小于约30分钟、小于约45分钟、小于约1小时、小于约2小时、小于约3小时、小于约4小时、小于约5小时、小于约6小时、小于约7小时、小于约8小时、小于约9小时、小于约10小时、小于约11小时、小于约12小时、小于约15小时、小于约18小时、小于约21小时或小于约24小时的间隔内施用。

在一些方面，所述一个或多个皮下单位剂量是在一个或多个身体位置处施用。在一些方面，第一皮下单位剂量和第二皮下单位剂量是在同一身体位置处施用。在一些方面，第一皮下单位剂量和第二皮下单位剂量是在第一身体位置和第二身体位置处施用，其中所述第一身体位置与所述第二身体位置不同。在一些方面，第一皮下单位剂量和第二皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，并且第三皮下单位剂量是在第二身体位置处施用，其中所述第一身体位置与所述第二身体位置不同。在一些方面，第一皮下单位剂量和第二皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，并且第三皮下单位剂量和第四皮下剂量是在第二身体位置处施用，其中所述第一身体位置与所述第二身体位置不同。在一些方面，第一皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，第二皮下单位剂量是在第二身体位置处施用，并且第三皮下单位剂量是在第三身体位置处施用，其中所述第一身体位置、所述第二身体位置和所述第三身体位置是不同的。在一些方面，第一皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，第二皮下单位剂量是在第二身体位置处施用，第三皮下单位剂量是在第三身体位置处施用，并且第四皮下单位剂量是在第四身体位置处施用，其中所述第一身体位置、所述第二身体位置、所述第三身体位置和所述第四身体位置是不同的。

如本文所用，在至少两个皮下单位剂量是在同一身体位置处施用的情况下，两个皮下剂量可以在完全相同的注射部位处或在同一身体位置内的附近注射部位处施用。例如，施用至单一身体位置的两个皮下剂量可以都施用至受试者的右臂。在此例子中，只要两个皮下剂量被施用至例如右臂，则两个皮下单位剂量被施用至同一“身体位置”，如本文所用。

治疗有效剂量和/或皮下剂量可以使用任何方法或装置如本文所公开皮下施用。在一些方面，使用针筒施用治疗有效剂量和/或皮下剂量。在一些方面，使用自动注射器施用治疗有效剂量和/或皮下剂量。在一些方面，使用注射笔施用治疗有效剂量和/或皮下剂量。在一些方面，使用穿戴式泵施用治疗有效剂量和/或皮下剂量。

在一些方面，治疗有效剂量和/或皮下单位剂量通过皮下输注小于约30分钟、小于约25分钟、小于约20分钟、小于约15分钟、小于约14分钟、小于约13分钟、小于约12分钟、小于约11分钟、小于约10分钟、小于约9分钟、小于约8分钟、小于约7分钟、小于约6分钟、小于约5分钟、小于约4分钟、小于约3分钟或小于约2分钟来施用。在一些方面，治疗有效剂量和/或皮下单位剂量通过皮下输注小于约90秒、小于约75秒、小于约60秒、小于约45秒、小于约30秒、小于约15秒或小于约10秒来施用。在一些方面，治疗有效剂量和/或皮下单位剂量通过皮下输注小于约15分钟来施用。在一些方面，治疗有效剂量和/或皮下单位剂量通过皮下输注小于约10分钟来施用。在一些方面，治疗有效剂量和/或皮下单位剂量通过皮下输注小于约5分钟来施用。在一些方面，治疗剂量和/或皮下剂量通过皮下输注小于约4分钟来施用。在一些方面，治疗有效剂量和/或皮下剂量通过皮下输注小于约3分钟来施用。在一些方面，治疗有效剂量和/或皮下单位剂量通过皮下输注小于约2分钟来施用。

III.A.1.抗PD-1抗体给药

在本公开文本的某些方面，所述抗体包括抗PD-1抗体。任何抗PD-1抗体可以用于本文公开的方法中。在一些方面，所述抗PD-1抗体包括纳武单抗。在一些方面，所述抗PD-1抗体包括派姆单抗。

在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-1抗体(例如，纳武单抗))的剂量为约每周施用约250mg至约600mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-1抗体(例如，纳武单抗))的剂量为约每周施用约250mg至约550mg、约250mg至约500mg、约250mg至约450mg、约250mg至约400mg、约250mg至约350mg、约250mg至约300mg、约275mg至约400mg、约275mg至约375mg、约275mg至约350mg、约275mg至约325mg、约275mg至约300mg、约300mg至约600mg、约300mg至约550mg、约300mg至约400mg、约300mg至约450mg、约300mg至约400mg、约300mg至约350mg或约300mg至约325mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-1抗体(例如，纳武单抗))的剂量为约每周施用约250mg至约400mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-1抗体(例如，纳武单抗))的剂量为约每周施用约250mg至约350mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-1抗体(例如，纳武单抗))的剂量为约每周施用约275mg至约325mg的所述抗体。

在一些方面，所述抗体的剂量为约每周施用约250mg、约260mg、约270mg、约275mg、约280mg、约290mg、约300mg、约310mg、约320mg、约325mg、约330mg、约340mg、约350mg、约360mg、约370mg、约375mg、约380mg、约390mg、约400mg、约410mg、约420mg、约425mg、约430mg、约440mg、约450mg、约460mg、约470mg、约475mg、约480mg、约490mg、约500mg、约510mg、约520mg、约525mg、约530mg、约540mg、约550mg、约560mg、约570mg、约575mg、约580mg、约590mg或约600mg。在某些方面，所述抗体的剂量为约每周施用约250mg。在某些方面，所述抗体的剂量为约每周施用约275mg。在某些方面，所述抗体的剂量为约每周施用约300mg。在某些方面，所述抗体的剂量为约每周施用约325mg。在某些方面，所述抗体的剂量为约每周施用约350mg。

在一些方面，所述抗体的剂量包含约300mg的单一皮下单位剂量。在一些方面，所述抗体的剂量包含约2mL总施用体积中约300mg的单一皮下单位剂量。在一些方面，所述抗体的剂量包含两个皮下单位剂量，其中所述两个皮下单位剂量中的每一个包含约150mg的所述抗体。在一些方面，所述两个皮下单位剂量中的至少一个包含小于约5mL(例如，小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约2.5mL或小于约2.0mL)总体积中约150mg的所述抗体。在一些方面，所述两个皮下单位剂量被施用至所述受试者的两个不同身体位置。

在一些方面，所述剂量包含三个皮下单位剂量，其中所述三个皮下单位剂量中的每一个包含约100mg的所述抗体。在一些方面，所述三个皮下单位剂量中的至少一个包含约5mL(例如，小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约2.5mL或小于约2.0mL)总体积中约100mg的所述抗体。在一些方面，所述三个皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。在一些方面，所述第一皮下单位剂量和所述第二皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，并且所述第三皮下单位剂量是在第二身体位置处施用。在一些方面，所述第一皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，所述第二皮下单位剂量是在第二身体位置处施用，并且所述第三皮下单位剂量是在第三身体位置处施用。

在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-1抗体(例如，纳武单抗))的剂量为约每两周施用约300mg至约900mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-1抗体(例如，纳武单抗))的剂量为约每两周施用约300mg至约850mg、约300mg至约800mg、约300mg至约750mg、约300mg至约700mg、约300mg至约650mg、约300mg至约600mg、约350mg至约900mg、约350mg至约850mg、约350mg至约800mg、约350mg至约750mg、约350mg至约700mg、约350mg至约650mg、约350mg至约600mg、约400mg至约900mg、约400mg至约850mg、约400mg至约800mg、约400mg至约750mg、约400mg至约700mg、约400mg至约650mg、约400mg至约600mg、约450至约900mg、约450至约850mg、约450至约800mg、约450mg至约750mg、约450mg至约700mg、约450mg至约650mg、约450mg至约600mg、约500mg至约900mg、约500mg至约850mg、约500mg至约800mg、约500mg至约700mg、约500mg至约650mg、约500mg至约600mg、约550mg至约900mg、约550mg至约850mg、约550mg至约800mg、约550mg至约750mg、约550mg至约700mg、约550mg至约650mg、约550mg至约600mg、约600mg至约900mg、约600mg至约850mg、约600mg至约800mg、约600mg至约750mg、约600mg至约700mg、约600mg至约650mg、约575mg至约625mg、约575mg至约600mg或约600mg至约625mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-1抗体(例如，纳武单抗))的剂量为约每两周施用约400mg至约800mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-1抗体(例如，纳武单抗))的剂量为约每两周施用约500mg至约700mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-1抗体(例如，纳武单抗))的剂量为约每两周施用约550mg至约650mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-1抗体(例如，纳武单抗))的剂量为约每两周施用约575mg至约625mg的所述抗体。

在一些方面，所述抗体的剂量为约每两周施用约300mg、约350mg、约400mg、约450mg、约500mg、约510mg、约520mg、约530mg、约540mg、约550mg、约560mg、约570mg、约580mg、约590mg、约600mg、约610mg、约620mg、约630mg、约640mg、约650mg、约660mg、约670mg、约680mg、约690mg、约700mg、约710mg、约720mg、约730mg、约740mg、约750mg、约760mg、约770mg、约780mg、约790mg、约800mg、约810mg、约820mg、约830mg、约840mg、约850mg、约860mg、约870mg、约880mg、约890mg或约900mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每两周施用约500mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每两周施用约550mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每两周施用约575mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每两周施用约600mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每两周施用约625mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每两周施用约650mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每两周施用约700mg。

在一些方面，所述抗体的剂量包含约600mg的单一皮下单位剂量。在一些方面，所述抗体的剂量包含小于约5mL(例如，小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约2.5mL或小于约2.0mL)总施用体积中约600mg的单一皮下单位剂量。在一些方面，所述抗体的剂量包含两个皮下单位剂量，其中所述两个皮下单位剂量中的每一个包含约300mg的所述抗体。在一些方面，所述两个皮下单位剂量中的至少一个包含小于约5mL(例如，小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约2.5mL或小于约2.0mL)总体积中约300mg的所述抗体。在某些方面，所述两个皮下单位剂量中的至少一个包含小于约2mL总体积中约300mg的所述抗体。在一些方面，所述两个皮下单位剂量被施用至所述受试者的单一身体位置。在一些方面，所述两个皮下单位剂量被施用至所述受试者的两个不同身体位置。

在一些方面，约600mg的所述抗体的剂量包含三个皮下单位剂量。在一些方面，所述三个皮下单位剂量中的至少一个包含约200mg的所述抗体。在一些方面，所述三个皮下单位剂量中的每一个包含约200mg的所述抗体。在一些方面，所述三个皮下单位剂量中的至少一个包含小于约5mL(例如，小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约2.5mL或小于约2.0mL)总体积中约200mg的所述抗体。在一些方面，所述三个皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。在一些方面，所述第一皮下单位剂量和所述第二皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，并且所述第三皮下单位剂量是在第二身体位置处施用。在一些方面，所述第一皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，所述第二皮下单位剂量是在第二身体位置处施用，并且所述第三皮下单位剂量是在第三身体位置处施用。

在一些方面，约600mg的所述抗体的剂量包含至少四个皮下单位剂量。在一些方面，所述四个皮下单位剂量中的至少一个包含约150mg的所述抗体。在一些方面，所述四个皮下单位剂量中的至少一个包含小于约5mL(例如，小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约2.5mL或小于约2.0mL)总体积中约150mg的所述抗体。在一些方面，所述四个皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。在一些方面，所述第一皮下单位剂量和所述第二皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，并且所述第三皮下单位剂量和所述第四皮下单位剂量是在第二身体位置处施用。在一些方面，所述第一皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，所述第二皮下单位剂量是在第二身体位置处施用，所述第三皮下单位剂量是在第三身体位置处施用，并且所述第四皮下单位剂量是在第四身体位置处施用。

在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-1抗体(例如，纳武单抗))的剂量为约每四周施用约900mg至约1500mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-1抗体(例如，纳武单抗))的剂量为约每四周施用约900mg至约1450mg、约900mg至约1400mg、约900mg至约1350mg、约900mg至约1300mg、约900mg至约1250mg、约900mg至约1200mg、约950mg至约1500mg、约950mg至约1450mg、约950mg至约1400mg、约950mg至约1350mg、约950mg至约1300mg、约950mg至约1250mg、约950mg至约1200mg、约1000mg至约1500mg、约1000mg至约1450mg、约1000mg至约1400mg、约1000mg至约1350mg、约1000mg至约1300mg、约1000mg至约1250mg、约1000mg至约1200mg、约1050至约1500mg、约1050至约1450mg、约1050至约1400mg、约1050mg至约1350mg、约1050mg至约1300mg、约1050mg至约1250mg、约1050mg至约1200mg、约1100mg至约1500mg、约1100mg至约1450mg、约1100mg至约1400mg、约1100mg至约1350mg、约1100mg至约1300mg、约1100mg至约1250mg、约1100mg至约1200mg、约1150mg至约1500mg、约1150mg至约1450mg、约1150mg至约1400mg、约1150mg至约1350mg、约1150mg至约1300mg、约1150mg至约1250mg、约1150mg至约1200mg、约1200mg至约1500mg、约1200mg至约1450mg、约1200mg至约1400mg、约1200mg至约1350mg、约1200mg至约1300mg、约1200mg至约1250mg、约1175mg至约1225mg、约1175mg至约1200mg或约1200mg至约1225mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-1抗体(例如，纳武单抗))的剂量为约每四周施用约1000mg至约1400mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-1抗体(例如，纳武单抗))的剂量为约每四周施用约1100mg至约1300mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-1抗体)的剂量为约每四周施用约1150mg至约1250mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-1抗体(例如，纳武单抗))的剂量为约每四周施用约1175mg至约1225mg的所述抗体。

在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约900mg、约950mg、约1000mg、约1010mg、约1020mg、约1030mg、约1040mg、约1050mg、约1060mg、约1070mg、约1080mg、约1090mg、约1100mg、约1110mg、约1120mg、约1130mg、约1140mg、约1150mg、约1160mg、约1170mg、约1180mg、约1190mg、约1200mg、约1210mg、约1220mg、约1230mg、约1240mg、约1250mg、约1260mg、约1270mg、约1280mg、约1290mg、约1300mg、约1310mg、约1320mg、约1330mg、约1340mg、约1350mg、约1360mg、约1370mg、约1380mg、约1390mg、约1400mg、约1410mg、约1420mg、约1430mg、约1440mg、约1450mg、约1460mg、约1470mg、约1480mg、约1490mg或约1500mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约1100mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约1150mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约1175mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约1200mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约1225mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约1250mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约1300mg。

在一些方面，所述抗体的剂量包含约1200mg的单一皮下单位剂量。在一些方面，所述抗体的剂量包含小于约5mL(例如，小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约2.5mL或小于约2.0mL)总施用体积中约1200mg的单一皮下单位剂量。

在一些方面，所述抗体的剂量包含两个、三个、四个、六个或至少八个皮下单位剂量。在一些方面，所述抗体的剂量包含两个皮下单位剂量，其中所述两个皮下单位剂量中的每一个包含约600mg的所述抗体。在一些方面，所述两个皮下单位剂量中的至少一个包含小于约5mL(例如，小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约2.5mL或小于约2.0mL)总体积中约600mg的所述抗体。在某些方面，所述两个皮下单位剂量中的至少一个包含小于约2mL总体积中约600mg的所述抗体。在一些方面，所述两个皮下单位剂量被施用至所述受试者的单一身体位置。在一些方面，所述两个皮下单位剂量被施用至所述受试者的两个不同身体位置。

在一些方面，约1200mg的所述抗体的剂量包含三个皮下单位剂量。在一些方面，所述三个皮下单位剂量中的至少一个包含约400mg的所述抗体。在一些方面，所述三个皮下单位剂量中的每一个包含约400mg的所述抗体。在一些方面，所述三个皮下单位剂量中的至少一个包含约5mL(例如，小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约2.5mL或小于约2.0mL)总体积中约400mg的所述抗体。在一些方面，所述三个皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。在一些方面，所述第一皮下单位剂量和所述第二皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，并且所述第三皮下单位剂量是在第二身体位置处施用。在一些方面，所述第一皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，所述第二皮下单位剂量是在第二身体位置处施用，并且所述第三皮下单位剂量是在第三身体位置处施用。

在一些方面，约1200mg的所述抗体的剂量包含四个皮下单位剂量。在一些方面，所述四个皮下单位剂量中的至少一个包含约300mg的所述抗体。在一些方面，所述四个皮下单位剂量中的至少一个包含约5mL(例如，小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约2.5mL或小于约2.0mL)总体积中约300mg的所述抗体。在一些方面，所述四个皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。在一些方面，所述第一皮下单位剂量和所述第二皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，并且所述第三皮下单位剂量和所述第四皮下单位剂量是在第二身体位置处施用。在一些方面，所述第一皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，所述第二皮下单位剂量是在第二身体位置处施用，所述第三皮下单位剂量是在第三身体位置处施用，并且所述第四皮下单位剂量是在第四身体位置处施用。

在一些方面，约1200mg的所述抗体的剂量包含六个皮下单位剂量。在一些方面，所述六个皮下单位剂量中的至少一个包含约200mg的所述抗体。在一些方面，所述六个皮下单位剂量中的至少一个包含约5mL(例如，小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约2.5mL或小于约2.0mL)总体积中约200mg的所述抗体。在一些方面，所述六个皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。在一些方面，所述第一皮下单位剂量和所述第二皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，所述第三皮下单位剂量和所述第四皮下单位剂量是在第二身体位置处施用，并且所述第五皮下单位剂量和所述第六皮下单位剂量是在第三身体位置处施用。在一些方面，所述第一皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，所述第二皮下单位剂量是在第二身体位置处施用，所述第三皮下单位剂量是在第三身体位置处施用，所述第四皮下单位剂量是在第四身体位置处施用，所述第五皮下单位剂量是在第五身体位置处施用，并且所述第六皮下单位剂量是在第六身体位置处施用。

在一些方面，约1200mg的所述抗体的剂量包含至少八个皮下单位剂量。在一些方面，所述八个皮下单位剂量中的至少一个包含约150mg的所述抗体。在一些方面，所述八个皮下单位剂量中的至少一个包含约5mL(例如，小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约2.5mL或小于约2.0mL)总体积中约150mg的所述抗体。在一些方面，所述八个皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。在一些方面，所述第一皮下单位剂量和所述第二皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，所述第三皮下单位剂量和所述第四皮下单位剂量是在第二身体位置处施用，所述第五皮下单位剂量和所述第六皮下单位剂量是在第三身体位置处施用，并且所述第七皮下单位剂量和所述第八皮下单位剂量是在第四身体位置处施用。

在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-1抗体(例如，纳武单抗))的剂量为约每八周施用约1800mg至约3000mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约1900mg、约1950mg、约2000mg、约2010mg、约2020mg、约2030mg、约2040mg、约2050mg、约2060mg、约2070mg、约2080mg、约2090mg、约2100mg、约2110mg、约2120mg、约2130mg、约2140mg、约2150mg、约2160mg、约2170mg、约2180mg、约2190mg、约2200mg、约2210mg、约2220mg、约2230mg、约2240mg、约2250mg、约2260mg、约2270mg、约2280mg、约2290mg、约2300mg、约2310mg、约2320mg、约2330mg、约2340mg、约2350mg、约2360mg、约2370mg、约2380mg、约2390mg、约2400mg、约2410mg、约2420mg、约2430mg、约2440mg、约2450mg、约2460mg、约2470mg、约2480mg、约2490mg、约2500mg、约2510mg、约2520mg、约2530mg、约2540mg、约2550mg、约2560mg、约2570mg、约2580mg、约2590mg或约2600mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约2300mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约2350mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约2375mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约2400mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约2425mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约2450mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约2475mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约2500mg。

在一些方面，所述抗体的剂量包含约2400mg的单一皮下单位剂量。在一些方面，所述抗体的剂量包含小于约5mL(例如，小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约2.5mL或小于约2.0mL)总施用体积中约2400mg的单一皮下单位剂量。

在一些方面，约2400mg的所述抗体的剂量包含四个皮下单位剂量。在一些方面，所述四个皮下单位剂量中的至少一个包含约600mg的所述抗体。在一些方面，所述四个皮下单位剂量中的至少一个包含约5mL(例如，小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约2.5mL或小于约2.0mL)总体积中约600mg的所述抗体。在一些方面，所述四个皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。在一些方面，所述第一皮下单位剂量和所述第二皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，并且所述第三皮下单位剂量和所述第四皮下单位剂量是在第二身体位置处施用。在一些方面，所述第一皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，所述第二皮下单位剂量是在第二身体位置处施用，所述第三皮下单位剂量是在第三身体位置处施用，并且所述第四皮下单位剂量是在第四身体位置处施用。

在一些方面，约2400mg的所述抗体的剂量包含六个皮下单位剂量。在一些方面，所述六个皮下单位剂量中的至少一个包含约400mg的所述抗体。在一些方面，所述六个皮下单位剂量中的至少一个包含约5mL(例如，小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约2.5mL或小于约2.0mL)总体积中约400mg的所述抗体。在一些方面，所述六个皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。在一些方面，所述第一皮下单位剂量和所述第二皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，所述第三皮下单位剂量和所述第四皮下单位剂量是在第二身体位置处施用，并且所述第五皮下单位剂量和所述第六皮下单位剂量是在第三身体位置处施用。在一些方面，所述第一皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，所述第二皮下单位剂量是在第二身体位置处施用，所述第三皮下单位剂量是在第三身体位置处施用，所述第四皮下单位剂量是在第四身体位置处施用，所述第五皮下单位剂量是在第五身体位置处施用，并且所述第六皮下单位剂量是在第六身体位置处施用。

在一些方面，约2400mg的所述抗体的剂量包含至少八个皮下单位剂量。在一些方面，所述八个皮下单位剂量中的至少一个包含约300mg的所述抗体。在一些方面，所述八个皮下单位剂量中的至少一个包含约5mL(例如，小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约2.5mL或小于约2.0mL)总体积中约300mg的所述抗体。在一些方面，所述八个皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。在一些方面，所述第一皮下单位剂量和所述第二皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，所述第三皮下单位剂量和所述第四皮下单位剂量是在第二身体位置处施用，所述第五皮下单位剂量和所述第六皮下单位剂量是在第三身体位置处施用，并且所述第七皮下单位剂量和所述第八皮下单位剂量是在第四身体位置处施用。

在一些方面，所述抗PD-1抗体包括派姆单抗，其为皮下施用，约每周一次、约每两周一次、约每三周一次或约每四周一次。在一些方面，皮下施用约100mg至约300mg派姆单抗，约每两周一次。在一些方面，皮下施用约100mg、约110mg、约120mg、约130mg、约140mg、约150mg、约160mg、约170mg、约180mg、约190mg、约200mg、约210mg、约220mg、约230mg、约240mg、约250mg、约260mg、约270mg、约280mg、约290mg或约300mg派姆单抗，约每两周一次。在一些方面，皮下施用至少约150mg派姆单抗，约每两周一次。在一些方面，皮下施用至少约200mg派姆单抗，约每两周一次。在一些方面，皮下施用至少约300mg派姆单抗，约每四周一次。在一些方面，皮下施用至少约400mg派姆单抗，约每四周一次。在一些方面，派姆单抗的所述剂量是以至少约2mL至至少约4mL的体积施用。

在一些方面，所述抗PD-1抗体包括萨善利单抗，其为皮下施用，约每周一次、约每两周一次、约每三周一次或约每四周一次。在一些方面，皮下施用约200mg至约400mg萨善利单抗，约每四周一次。在一些方面，皮下施用约200mg、约210mg、约220mg、约230mg、约240mg、约250mg、约260mg、约270mg、约280mg、约290mg、约300mg、约310mg、约320mg、约330mg、约340mg、约350mg、约360mg、约370mg、约380mg、约390mg或约400mg萨善利单抗，约每四周一次。在一些方面，皮下施用至少约250mg萨善利单抗，约每四周一次。在一些方面，皮下施用至少约200mg萨善利单抗，约每四周一次。在一些方面，皮下施用至少约250mg萨善利单抗，约每四周一次。在一些方面，皮下施用至少约300mg萨善利单抗，约每四周一次。在一些方面，萨善利单抗的所述剂量是在单一注射中以至少约2mL的体积施用。在一些方面，萨善利单抗的所述剂量是在至少三次注射中以至少约6mL的体积施用。

在一些方面，所述抗PD-1抗体包括KN035，其为皮下施用，约每周一次、约每两周一次、约每三周一次或约每四周一次。在一些方面，皮下施用约100mg至约200mg KN035，约每周一次。在一些方面，皮下施用约100mg、约110mg、约120mg、约130mg、约140mg、约150mg、约160mg、约170mg、约180mg、约190mg或约200mg KN035，约每周一次。在一些方面，皮下施用至少约150mg KN035，约每周一次。在一些方面，皮下施用约2.5mg/kg KN035，约每周一次。在一些方面，皮下施用约200mg至约400mg KN035，约每三周一次。在一些方面，皮下施用约200mg、约210mg、约220mg、约230mg、约240mg、约250mg、约260mg、约270mg、约280mg、约290mg、约300mg、约310mg、约320mg、约330mg、约340mg、约350mg、约360mg、约370mg、约380mg、约390mg或约400mg KN035，约每三周一次。在一些方面，皮下施用至少约300mgKN035，约每三周一次。在一些方面，皮下施用至少约300mg KN035，约每四周一次。在一些方面，皮下施用至少约400mg KN035，约每四周一次。在一些方面，KN035的所述剂量是以小于约1mL的体积施用。

III.A.2.抗PD-L1抗体给药

在本公开文本的一些方面，所述抗体包括抗PD-L1抗体。本领域中已知和/或本文公开的任何抗PD-L1抗体可以用于本文公开的方法中。在某些方面，所述抗PD-L1抗体包括阿特珠单抗。在某些方面，所述抗PD-L1抗体包括度伐鲁单抗。在某些方面，所述抗PD-L1抗体包括阿维鲁单抗。

在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-L1抗体)的剂量为约每周施用约300mg至约900mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-L1抗体)的剂量为约每周施用约300mg至约850mg、约300mg至约800mg、约300mg至约750mg、约300mg至约700mg、约300mg至约650mg、约300mg至约600mg、约350mg至约900mg、约350mg至约850mg、约350mg至约800mg、约350mg至约750mg、约350mg至约700mg、约350mg至约650mg、约350mg至约600mg、约400mg至约900mg、约400mg至约850mg、约400mg至约800mg、约400mg至约750mg、约400mg至约700mg、约400mg至约650mg、约400mg至约600mg、约450至约900mg、约450至约850mg、约450至约800mg、约450mg至约750mg、约450mg至约700mg、约450mg至约650mg、约450mg至约600mg、约500mg至约900mg、约500mg至约850mg、约500mg至约800mg、约500mg至约700mg、约500mg至约650mg、约500mg至约600mg、约550mg至约900mg、约550mg至约850mg、约550mg至约800mg、约550mg至约750mg、约550mg至约700mg、约550mg至约650mg、约550mg至约600mg、约600mg至约900mg、约600mg至约850mg、约600mg至约800mg、约600mg至约750mg、约600mg至约700mg、约600mg至约650mg、约575mg至约625mg、约575mg至约600mg或约600mg至约625mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-L1抗体)的剂量为约每周施用约400mg至约800mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-L1抗体)的剂量为约每周施用约500mg至约700mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-L1抗体)的剂量为约每周施用约550mg至约650mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-L1抗体)的剂量为约每周施用约575mg至约625mg的所述抗体。

在一些方面，所述抗体的剂量为约每周施用约300mg、约350mg、约400mg、约450mg、约500mg、约510mg、约520mg、约530mg、约540mg、约550mg、约560mg、约570mg、约580mg、约590mg、约600mg、约610mg、约620mg、约630mg、约640mg、约650mg、约660mg、约670mg、约680mg、约690mg、约700mg、约710mg、约720mg、约730mg、约740mg、约750mg、约760mg、约770mg、约780mg、约790mg、约800mg、约810mg、约820mg、约830mg、约840mg、约850mg、约860mg、约870mg、约880mg、约890mg或约900mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每周施用约500mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每周施用约550mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每周施用约575mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每周施用约600mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每周施用约625mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每周施用约650mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每周施用约700mg。

在一些方面，约600mg的所述抗体的剂量包含三个皮下单位剂量。在一些方面，所述三个皮下单位剂量中的至少一个包含约200mg的所述抗体。在一些方面，所述三个皮下单位剂量中的每一个包含约200mg的所述抗体。在一些方面，所述三个皮下单位剂量中的至少一个包含约5mL(例如，小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约2.5mL或小于约2.0mL)总体积中约200mg的所述抗体。在一些方面，所述三个皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。在一些方面，所述第一皮下单位剂量和所述第二皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，并且所述第三皮下单位剂量是在第二身体位置处施用。在一些方面，所述第一皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，所述第二皮下单位剂量是在第二身体位置处施用，并且所述第三皮下单位剂量是在第三身体位置处施用。

在一些方面，约600mg的所述抗体的剂量包含至少四个皮下单位剂量。在一些方面，所述四个皮下单位剂量中的至少一个包含约150mg的所述抗体。在一些方面，所述四个皮下单位剂量中的至少一个包含约5mL(例如，小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约2.5mL或小于约2.0mL)总体积中约150mg的所述抗体。在一些方面，所述四个皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。在一些方面，所述第一皮下单位剂量和所述第二皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，并且所述第三皮下单位剂量和所述第四皮下单位剂量是在第二身体位置处施用。在一些方面，所述第一皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，所述第二皮下单位剂量是在第二身体位置处施用，所述第三皮下单位剂量是在第三身体位置处施用，并且所述第四皮下单位剂量是在第四身体位置处施用。

在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-L1抗体)的剂量为约每两周施用约900mg至约1800mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-L1抗体)的剂量为约每两周施用约900mg至约1750mg、约900mg至约1700mg、约900mg至约1650mg、约900mg至约1600mg、约900mg至约1550mg、约900mg至约1500mg、约900mg至约1450mg、约900mg至约1400mg、约900mg至约1350mg、约900mg至约1300mg、约900mg至约1250mg、约900mg至约1200mg、约950mg至约1500mg、约950mg至约1450mg、约950mg至约1400mg、约950mg至约1350mg、约950mg至约1300mg、约950mg至约1250mg、约950mg至约1200mg、约1000mg至约1500mg、约1000mg至约1450mg、约1000mg至约1400mg、约1000mg至约1350mg、约1000mg至约1300mg、约1000mg至约1250mg、约1000mg至约1200mg、约1050至约1500mg、约1050至约1450mg、约1050至约1400mg、约1050mg至约1350mg、约1050mg至约1300mg、约1050mg至约1250mg、约1050mg至约1200mg、约1100mg至约1500mg、约1100mg至约1450mg、约1100mg至约1400mg、约1100mg至约1350mg、约1100mg至约1300mg、约1100mg至约1250mg、约1100mg至约1200mg、约1150mg至约1500mg、约1150mg至约1450mg、约1150mg至约1400mg、约1150mg至约1350mg、约1150mg至约1300mg、约1150mg至约1250mg、约1150mg至约1200mg、约1200mg至约1500mg、约1200mg至约1450mg、约1200mg至约1400mg、约1200mg至约1350mg、约1200mg至约1300mg、约1200mg至约1250mg、约1175mg至约1225mg、约1175mg至约1200mg或约1200mg至约1225mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-L1抗体)的剂量为约每两周施用约1000mg至约1400mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-L1抗体)的剂量为约每两周施用约1100mg至约1300mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-L1抗体)的剂量为约每两周施用约1150mg至约1250mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-L1抗体)的剂量为约每两周施用约1175mg至约1225mg的所述抗体。

在一些方面，所述抗体的剂量为约每两周施用约900mg、约950mg、约1000mg、约1010mg、约1020mg、约1030mg、约1040mg、约1050mg、约1060mg、约1070mg、约1080mg、约1090mg、约1100mg、约1110mg、约1120mg、约1130mg、约1140mg、约1150mg、约1160mg、约1170mg、约1180mg、约1190mg、约1200mg、约1210mg、约1220mg、约1230mg、约1240mg、约1250mg、约1260mg、约1270mg、约1280mg、约1290mg、约1300mg、约1310mg、约1320mg、约1330mg、约1340mg、约1350mg、约1360mg、约1370mg、约1380mg、约1390mg、约1400mg、约1410mg、约1420mg、约1430mg、约1440mg、约1450mg、约1460mg、约1470mg、约1480mg、约1490mg、约1500mg、约1550mg、约1600mg、约1650mg、约1700mg、约1750mg或约1800mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每两周施用约1100mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每两周施用约1150mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每两周施用约1175mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每两周施用约1200mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每两周施用约1225mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每两周施用约1250mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每两周施用约1300mg。

在一些方面，所述两个、三个、四个、六个或至少八个皮下单位剂量是在同一天施用。

在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-L1抗体)的剂量为约每四周施用约2100mg至约2700mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-L1抗体)的剂量为约每四周施用约2100mg至约2650mg、约2100mg至约2600mg、约2100mg至约2550mg、约2100mg至约2500mg、约2100mg至约2450mg、约2100mg至约2400mg、约2200mg至约2700mg、约2200mg至约2650mg、约2200mg至约2600mg、约2200mg至约2550mg、约2200mg至约2500mg、约2200mg至约2450mg、约2200mg至约2400mg、约2300mg至约2700mg、约2300mg至约2650mg、约2300mg至约2600mg、约2300mg至约2550mg、约2300mg至约2500mg、约2300mg至约2450mg、约2300mg至约2400mg、约2350mg至约mg、约2350mg至约2700mg、约2350mg至约2650mg、约2350mg至约2600mg、约2350mg至约2550mg、约2350mg至约2500mg、约2350mg至约2450mg、约2350mg至约2400mg、约2400mg至约2700mg、约2400mg至约2650mg、约2400mg至约2600mg、约2400mg至约2550mg、约2400mg至约2500mg、约2400mg至约2450mg、约2400mg至约2425mg、约2375mg至约2425mg或约2375mg至约2400mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-L1抗体)的剂量为约每四周施用约2200mg至约2600mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-L1抗体)的剂量为约每四周施用约2300mg至约2500mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-L1抗体)的剂量为约每四周施用约2350mg至约2450mg的所述抗体。在一些方面，所述抗体(例如，所述抗PD-L1抗体)的剂量为约每四周施用约2375mg至约2425mg的所述抗体。

在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约2100mg、约2150mg、约2200mg、约2250mg、约2300mg、约2350mg、约2400mg、约2450mg、约2500mg、约2550mg、约2600mg、约2650mg或约2700mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约2300mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约2350mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约2400mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约2450mg。在一些方面，所述抗体的剂量为约每四周施用约2500mg。

在一些方面，所述抗体的剂量包含两个、三个、四个、六个或至少八个皮下单位剂量。在一些方面，所述抗体的剂量包含两个皮下单位剂量，其中所述两个皮下单位剂量中的每一个包含约1200mg的所述抗体。在一些方面，所述两个皮下单位剂量中的至少一个包含小于约5mL(例如，小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约2.5mL或小于约2.0mL)总体积中约1200mg的所述抗体。在某些方面，所述两个皮下单位剂量中的至少一个包含小于约2mL总体积中约1200mg的所述抗体。在一些方面，所述两个皮下单位剂量被施用至所述受试者的单一身体位置。在一些方面，所述两个皮下单位剂量被施用至所述受试者的两个不同身体位置。

在一些方面，约2400mg的所述抗体的剂量包含三个皮下单位剂量。在一些方面，所述三个皮下单位剂量中的至少一个包含约800mg的所述抗体。在一些方面，所述三个皮下单位剂量中的每一个包含约800mg的所述抗体。在一些方面，所述三个皮下单位剂量中的至少一个包含约5mL(例如，小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约2.5mL或小于约2.0mL)总体积中约800mg的所述抗体。在一些方面，所述三个皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。在一些方面，所述第一皮下单位剂量和所述第二皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，并且所述第三皮下单位剂量是在第二身体位置处施用。在一些方面，所述第一皮下单位剂量是在第一身体位置处施用，所述第二皮下单位剂量是在第二身体位置处施用，并且所述第三皮下单位剂量是在第三身体位置处施用。

在一些方面，所述抗PD-L1抗体包括阿特珠单抗，其为皮下施用，约每周一次、约每两周一次、约每三周一次或约每四周一次。在一些方面，皮下施用约1000mg至约1400mg阿特珠单抗，约每两周一次。在一些方面，皮下施用约1100mg、约1110mg、约1120mg、约1130mg、约1140mg、约1150mg、约1160mg、约1170mg、约1180mg、约1190mg、约1200mg、约1210mg、约1220mg、约1230mg、约1240mg、约1250mg、约1260mg、约1270mg、约1280mg、约1290mg或约1300mg阿特珠单抗，约每两周一次。在一些方面，皮下施用至少约1200mg阿特珠单抗，约每两周一次。在一些方面，皮下施用约1700mg至约1900mg阿特珠单抗，约每三周一次。在一些方面，皮下施用约1700mg、约1710mg、约1720mg、约1730mg、约1740mg、约1750mg、约1760mg、约1770mg、约1780mg、约1790mg、约1800mg、约1810mg、约1820mg、约1830mg、约1840mg、约1850mg、约1860mg、约1870mg、约1880mg、约1890mg或约1900mg阿特珠单抗，约每三周一次。在一些方面，皮下施用至少约1800mg阿特珠单抗，约每三周一次。在一些方面，阿特珠单抗的所述剂量是以至少约2mL至至少约20mL的体积施用。

III.B.组合疗法

在本公开文本的一些方面，本文公开的药物组合物与另外的抗癌疗法组合施用。在本公开文本的一些方面，本文公开的方法包括施用与另外的抗癌疗法组合的抗PD-1抗体(或抗PD-L1抗体)。所述另外的抗癌疗法可以包括用于治疗受试者的肿瘤的任何疗法和/或任何护理标准疗法，如本文所公开。在一些方面，所述另外的抗癌疗法包括手术、放射疗法、化学疗法、免疫疗法或其任何组合。在一些方面，所述另外的抗癌疗法包括化学疗法，包括本文公开的任何化学疗法。在一些方面，所述另外的抗癌疗法包括免疫疗法。在一些方面，所述另外的抗癌疗法包括施用抗体或其抗原结合部分，所述抗体或其抗原结合部分特异性结合CTLA-4、LAG-3、TIGIT、TIM3、NKG2a、OX40、ICOS、MICA、CD137、KIR、TGFβ、IL-10、IL-8、B7-H4、Fas配体、CXCR4、间皮素、CD27、GITR或其任何组合。在一些方面，所述另外的抗癌疗法包括施用IL-2(例如，经修饰的IL-2，例如，聚乙二醇化IL-2，例如，贝培阿地白介素)。在一些方面，所述第二治疗剂、所述第三治疗剂或二者包含IL12-Fc(例如，BMS-986415)。

在一些方面，所述药物组合物(例如，包含抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体)例如根据本文公开的任何方法皮下施用，并且所述另外的抗癌疗法通过本领域中已知的任何合适的途径施用。在一些方面，所述药物组合物(例如，包含抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体)例如包含根据本文公开的任何方法皮下施用，并且所述另外的抗癌疗法是皮下施用。在一些方面，所述药物组合物(例如，包含抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体)例如根据本文公开的任何方法皮下施用，并且所述另外的抗癌疗法是静脉内施用。在一些方面，所述药物组合物(例如，包含抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体)和所述另外的抗癌疗法是并行施用的。在一些方面，所述药物组合物(例如，包含抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体)和所述另外的抗癌疗法是依序施用的。在一些方面，所述药物组合物(例如，包含抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体)和所述另外的抗癌疗法是在同一天施用。在一些方面，所述药物组合物(例如，包含抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体)和所述另外的抗癌疗法是在不同日期施用。

在一些方面，所述抗PD-1抗体或所述抗PD-L1抗体和所述另外的抗癌疗法(例如，检查点抑制剂)在单一配制品中组合。

在一些方面，所述方法包括施用治疗有效量的抗PD-1抗体和抗CTLA-4抗体，例如，伊匹单抗。在其他方面，所述方法包括施用治疗有效量的包含抗PD-L1抗体和抗CTLA-4抗体的组合物。以高亲和力与CTLA-4特异性结合的人单克隆抗体已经披露于美国专利号6,984,720中。其他抗CTLA-4单克隆抗体已经描述于例如以下文献中：美国专利号5,977,318、6,051,227、6,682,736和7,034,121，以及国际公开号WO 2012/122444、WO 2007/113648、WO2016/196237和WO 2000/037504，将其每一个通过引用以其整体并入本文。在某些方面，所述CTLA-4抗体选自伊匹单抗(也称为MDX-010、10D1；参见美国专利号6,984,720)、MK-1308(Merck)、AGEN-1884(Agenus Inc.；参见WO 2016/196237)以及曲美木单抗(AstraZeneca；也称为替西木单抗，CP-675,206；参见WO 2000/037504和Ribas,UpdateCancer Ther.2(3):133-39(2007))。在特定方面，所述抗CTLA-4抗体是伊匹单抗。在特定方面，所述CTLA-4抗体是曲美木单抗。在特定方面，所述CTLA-4抗体是MK-1308。在特定方面，所述CTLA-4抗体是AGEN-1884。

在一些方面，所述方法包括施用治疗有效量的抗PD-1抗体和抗LAG-3抗体。在其他方面，所述方法包括施用治疗有效量的包含抗PD-1抗体和抗LAG-3抗体(例如，瑞拉利单抗)的单一配制品。在一些方面，所述抗LAG-3抗体是瑞拉利单抗，例如，如PCT/US13/48999中所述的BMS-986016，其传授内容通过引用特此并入。在一些方面，所述抗LAG-3抗体与瑞拉利单抗交叉竞争与人LAG-3的结合。在一些方面，所述抗LAG-3抗体与瑞拉利单抗结合相同的表位。在一些方面，所述抗LAG-3抗体是瑞拉利单抗的生物类似物。在一些方面，所述抗LAG-3抗体是LAG-525、MK-4280、REGN3767、TSR-033、TSR-075、Sym022、FS-118或其任何组合。

在一些方面，所述方法包括根据本文公开的任何方法和化学疗法施用治疗有效量的药物组合物(例如，包含抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体)。在一些方面，所述化学疗法包括基于铂的疗法。在一些方面，所述基于铂的疗法包括选自以下的基于铂的抗肿瘤药：顺铂、卡铂、奥沙利铂、奈达铂、四硝酸三铂、菲铂(phenanthriplatin)、吡铂、沙铂及其任何组合。在某些方面，所述基于铂的疗法包括顺铂。在一个特定方面，所述基于铂的疗法包括卡铂。在一些方面，所述化学疗法包括选自以下的抗癌剂：铂剂(例如，顺铂、卡铂)、紫杉烷类药剂(例如，紫杉醇、白蛋白结合型紫杉醇、多西他赛)、长春瑞滨、长春碱、依托泊苷、培美曲塞、吉西他滨、贝伐珠单抗厄洛替尼/>克唑替尼西妥昔单抗/>及其任何组合。在某些方面，所述化学疗法包括基于铂的双药化学疗法。

III.C.肿瘤

本公开文本的某些方面涉及治疗受试者的方法，所述方法包括递送本文公开的药物组合物(例如，包含抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体)，其中所述受试者患有癌症(例如，源自癌症的肿瘤)。在一些方面，所述药物组合物是皮下施用的。在一些方面，所述肿瘤源自选自以下的癌症：鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma)、小细胞肺癌(SCLC)、非小细胞肺癌(NSCLC)、鳞状NSCLC、非鳞状NSCLC、神经胶质瘤、胃肠癌、肾癌(renal cancer)、透明细胞癌、卵巢癌、肝癌、结直肠癌、子宫内膜癌(endometrial cancer)、肾癌(kidney cancer)、肾细胞癌(RCC)、前列腺癌、激素难治性前列腺腺癌、甲状腺癌、神经母细胞瘤、胰腺癌、胶质母细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤、宫颈癌(cervical cancer)、胃癌(stomach cancer)、膀胱癌、肝细胞瘤、乳腺癌、结肠癌、头颈癌、胃癌(gastric cancer)、生殖细胞肿瘤、儿科肉瘤、鼻窦自然杀伤细胞、黑色素瘤、骨癌、皮肤癌、子宫癌、肛区癌症、睾丸癌、输卵管癌、子宫内膜癌(carcinoma of the endometrium)、宫颈癌(carcinoma of the cervix)、阴道癌、外阴癌、食管癌、小肠癌、内分泌系统癌症、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、直肠癌、儿童实体瘤、输尿管癌、肾盂癌、中枢神经系统(CNS)肿瘤、原发性CNS淋巴瘤、肿瘤血管生成、脊柱轴肿瘤、脑癌、脑干神经胶质瘤、垂体腺瘤、卡波西肉瘤、表皮样癌、鳞状细胞癌(squamous cell cancer)、包括石棉诱发癌症在内的环境诱发癌症、病毒相关癌症或病毒来源的癌症(例如，人乳头瘤病毒(HPV相关的或来源的肿瘤))及其任何组合。在某些方面，所述受试者已经接受一种、两种、三种、四种、五种或更多种先前癌症治疗。在其他方面，所述受试者是未经治疗的。在一些方面，所述受试者在进行其他癌症治疗时发生进展。在某些方面，所述先前癌症治疗包括免疫疗法。在其他方面，所述先前癌症治疗包括化学疗法。在一些方面，所述肿瘤已经复发。在一些方面，所述肿瘤是转移性的。在其他方面，所述肿瘤不是转移性的。在一些方面，所述肿瘤是局部晚期的。

在一些方面，所述受试者已经接受先前疗法来治疗所述肿瘤并且所述肿瘤是复发性或难治性的。在某些方面，所述至少一种先前疗法包括护理标准疗法。在一些方面，所述至少一种先前疗法包括手术、放射疗法、化学疗法、免疫疗法或其任何组合。在一些方面，所述至少一种先前疗法包括化学疗法。在一些方面，所述受试者已经接受先前免疫-肿瘤学(I-O)疗法来治疗所述肿瘤并且所述肿瘤是复发性或难治性的。在一些方面，所述受试者已经接受过超过一种先前疗法来治疗所述肿瘤并且所述受试者是复发性或难治性的。在其他方面，所述受试者已经接受抗PD-1或抗PD-L1抗体疗法。

在一些方面，先前疗法线包括化学疗法。在一些方面，所述化学疗法包括基于铂的疗法。在一些方面，所述基于铂的疗法包括选自以下的基于铂的抗肿瘤药：顺铂、卡铂、奥沙利铂、奈达铂、四硝酸三铂、菲铂、吡铂、沙铂及其任何组合。在某些方面，所述基于铂的疗法包括顺铂。在一个特定方面，所述基于铂的疗法包括卡铂。

在一些方面，所述至少一种先前疗法选自包括施用选自以下的抗癌剂的疗法：铂剂(例如，顺铂、卡铂)、紫杉烷类药剂(例如，紫杉醇、白蛋白结合型紫杉醇、多西他赛)、长春瑞滨、长春碱、依托泊苷、培美曲塞、吉西他滨、贝伐珠单抗厄洛替尼克唑替尼/>西妥昔单抗/>及其任何组合。在某些方面，所述至少一种先前疗法包括基于铂的双药化学疗法。

在一些方面，所述受试者在所述至少一种先前疗法之后经历了疾病进展。在某些方面，受试者已经接受至少两种先前疗法、至少三种先前疗法、至少四种先前疗法或至少五种先前疗法。在某些方面，所述受试者已经接受至少两种先前疗法。在一个方面，所述受试者在所述至少两种先前疗法之后经历了疾病进展。在某些方面，所述至少两种先前疗法包括第一先前疗法和第二先前疗法，其中受试者在第一先前疗法和/或第二先前疗法之后经历了疾病进展，并且其中第一先前疗法包括手术、放射疗法、化学疗法、免疫疗法或其任何组合；并且其中第二先前疗法包括手术、放射疗法、化学疗法、免疫疗法或其任何组合。在一些方面，所述第一先前疗法包括基于铂的双药化学疗法，并且第二先前疗法包括单一药剂化学疗法。在某些方面，所述单一药剂化学疗法包括多西他赛。

在某些方面，所述肿瘤是PD-L1阳性肿瘤。如本文所用的“PD-L1阳性的”可以与“至少约1％的PD-L1表达”可互换地使用。PD-L1表达可以通过本领域中已知的任何方法来测量。在一些方面，PD-L1表达是通过自动化IHC来测量。PD-L1阳性肿瘤因此可以具有至少约1％、至少约2％、至少约5％、至少约10％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％或约100％的表达PD-L1的肿瘤细胞，如通过自动化IHC所测量。在某些方面，“PD-L1阳性的”意指存在至少100个在细胞表面上表达PD-L1的细胞。

为了评估PD-L1表达，在一个方面，从需要本文公开的疗法的患者获得测试组织样品。在另一方面，对PD-L1表达的评估是在未获得测试组织样品的情况下实现的。在一些方面，选择合适的患者包括(i)任选地提供从患有组织癌症的患者获得的测试组织样品，所述测试组织样品包含肿瘤细胞和/或肿瘤浸润性炎性细胞；和(ii)基于测试组织样品中在细胞表面上表达PD-L1的细胞的比例高于预定阈值水平的评估，评估所述测试组织样品中在细胞表面上表达PD-L1的细胞的比例。

然而，在包括测量测试组织样品中PD-L1表达的任何方法中，应当理解，包括提供从患者获得的测试组织样品的步骤是任选步骤。还应当理解，在某些方面，用于鉴定测试组织样品中表达PD-L1(例如，PD-L1在细胞表面上的表达)的细胞或确定所述细胞的数量或比例的“测量”或“评估”步骤是通过测定PD-L1表达的转化方法进行的，例如通过进行逆转录酶-聚合酶链式反应(RT-PCR)测定或IHC测定进行。在某些其他方面，不涉及转化步骤并且通过例如审查来自实验室的测试结果的报告来评估PD-L1表达。在某些方面，直到(并且包括)评估PD-L1表达的方法的步骤提供了中间结果，可以将所述中间结果提供给医师或其他医疗保健提供者用于在选择适合于抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体疗法的候选者中使用。在某些方面，提供所述中间结果的步骤是由执业医师或在执业医师的指导下行动的人进行的。在其他方面，这些步骤是由独立实验室或由独立人员(如实验室技术员)进行的。

在任何本发明方法的某些方面，通过进行测定以确定PD-L1 RNA的存在来评估表达PD-L1的细胞的比例。在其他方面，通过RT-PCR、原位杂交或RNA酶保护来确定PD-L1 RNA的存在。在其他方面，通过进行测定以确定PD-L1多肽的存在来评估表达PD-L1的细胞的比例。在其他方面，通过免疫组织化学(IHC)、酶联免疫吸附测定(ELISA)、体内成像或流式细胞术来确定PD-L1多肽的存在。在一些方面，通过IHC测定PD-L1表达。在所有这些方法的其他方面，使用例如IHC或体内成像来测定PD-L1的细胞表面表达。

成像技术在癌症研究和治疗中提供了重要工具。分子成像系统的最新发展(包括正电子发射断层扫描(PET)、单光子发射计算机断层扫描(SPECT)、荧光反射成像(FRI)、荧光介导的断层扫描(FMT)、生物发光成像(BLI)、激光扫描共聚焦显微术(LSCM)和多光子显微术(MPM))可能预示着这些技术在癌症研究中的更多使用。这些分子成像系统中的一些不仅允许临床医生看到肿瘤在体内的位置，还允许使影响肿瘤针对治疗药物的行为和/或反应性的特定分子、细胞和生物过程的表达和活性可视化(Condeelis和Weissleder,"Invivo imaging in cancer,"Cold Spring Harb.Perspect.Biol.2(12):a003848(2010))。抗体特异性，再加上PET的灵敏度和分辨率，使得免疫PET成像对组织样品中抗原表达的监测和测定特别有吸引力(McCabe和Wu,"Positive progress in immunoPET—not just acoincidence,"Cancer Biother.Radiopharm.25(3):253-61(2010)；Olafsen等人,"ImmunoPET imaging of B-cell lymphoma using 124I-anti-CD20 scFv dimers(diabodies),"Protein Eng.Des.Sel.23(4):243-9(2010))。在任何本发明方法的某些方面，通过免疫PET成像测定PD-L1表达。在任何本发明方法的某些方面，通过进行测定以确定测试组织样品中细胞表面上PD-L1多肽的存在来评估测试组织样品中表达PD-L1的细胞的比例。在某些方面，所述测试组织样品是FFPE组织样品。在其他方面，通过IHC测定确定PD-L1多肽的存在。在另外的方面，使用自动化过程进行IHC测定。在一些方面，使用抗PD-L1单克隆抗体与PD-L1多肽结合来进行IHC测定。

在本发明方法的一方面，使用自动化IHC方法来测定FFPE组织样本中细胞表面上的PD-L1表达。本公开文本提供了用于检测测试组织样品中人PD-L1抗原的存在，或定量样品中人PD-L1抗原的水平或表达所述抗原的细胞的比例的方法，所述方法包括使所述测试样品和阴性对照样品在一定条件下与特异性结合人PD-L1的单克隆抗体接触，所述条件允许在所述抗体或其部分与人PD-L1之间形成复合物。在某些方面，所述测试和对照组织样品是FFPE样品。然后检测复合物的形成，其中测试样品与阴性对照样品之间的复合物形成差异指示所述样品中人PD-L1抗原的存在。使用多种方法对PD-L1表达进行定量。

在特定方面，所述自动化IHC方法包括：(a)在自动染色机中对封固的组织切片进行脱蜡和再水化；(b)使用显现室(decloaking chamber)和pH 6缓冲液(加热至110℃持续10min)回收抗原；(c)在所述自动染色机上放置试剂；以及(d)运行自动染色机以包含中和组织样本中的内源性过氧化物酶的步骤；在载玻片上封闭非特异性蛋白质结合位点；将所述载玻片与一抗一起孵育；与一抗染色后(postprimary)封闭剂一起孵育；与NovoLink聚合物一起孵育；添加色原底物并显影；并用苏木精复染。

对于评估肿瘤组织样品中的PD-L1表达，病理学家在显微镜下检查每个视野中的膜PD-L1⁺⁺肿瘤细胞的数量，并且在头脑中估计呈阳性的细胞的百分比，然后对其取平均值以得出最终百分比。将不同的染色强度定义为0/阴性、l+/弱、2+/中和3+/强。通常，首先将百分比值分配给0和3+桶(bucket)，然后考虑中间的1+和2+强度。对于高度异质性组织，将样本分成多个区，并且对每个区单独评分，然后合并为百分比值的单个集合。从每个区域确定不同染色强度的阴性和阳性细胞的百分比，并且给出每个区的中位值。对于以下每个染色强度类别给出所述组织的最终百分比值：阴性、1+、2+和3+。需要所有染色强度的总和为100％。在一个方面，需要呈PD-L1阳性的细胞的阈值数量为至少约100、至少约125、至少约150、至少约175或至少约200个细胞。在某些方面，需要呈PD-L1阳性的细胞的阈值数量为至少约100个细胞。

还在肿瘤浸润性炎性细胞(如巨噬细胞和淋巴细胞)中评估染色。在大多数情况下，巨噬细胞充当内部阳性对照，因为在大部分巨噬细胞中观察到染色。尽管不需要3+强度的染色，但应当将巨噬细胞不染色考虑在内以排除任何技术故障。评估巨噬细胞和淋巴细胞的质膜染色，并且对于每种细胞类别仅记录所有样品为阳性或阴性。还根据外部/内部肿瘤免疫细胞名称来表征染色。“内部”意指免疫细胞在肿瘤组织内和/或在肿瘤区域的界限上而没有物理地插入肿瘤细胞之间。“外部”意指与肿瘤没有物理关联，免疫细胞被发现于与结缔组织或任何相关的相邻组织有关的外周。

在这些评分方法的某些方面，由两名独立工作的病理学家对样品进行评分，随后合并得分。在某些其他方面，使用适当的软件对阳性和阴性细胞的鉴定进行评分。

使用组织得分(也描述为H得分)作为IHC数据的更定量的量度。组织得分计算如下：

组织得分＝[(肿瘤％x 1(低强度))+(肿瘤％x 2(中强度))

+(肿瘤％x 3(高强度)]

为了确定组织得分，病理学家估计样本内每个强度类别中染色细胞的百分比。因为大多数生物标记物的表达是异质性的，所以组织得分是总体表达更真实的表示。最终的组织得分的范围是0(无表达)至300(最大表达)。

对测试组织样品IHC中PD-L1表达进行定量的替代性手段是确定调整的炎症得分(AIS)，其被定义为炎症密度乘以肿瘤浸润性炎性细胞的PD-L1表达百分比(Taube等人,"Colocalization of inflammatory response with B7-h1 expression in humanmelanocytic lesions supports an adaptive resistance mechanism of immuneescape,"Sci.Transl.Med.4(127):127ra37(2012)。

III.D.感染性疾病

本公开文本的某些方面涉及治疗有需要的受试者的方法，所述方法包括递送本文公开的药物组合物(例如，包含抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体)，其中所述受试者患有感染性疾病。在一些方面，所述药物组合物是皮下施用的。在一些实施方案中，所述感染性疾病是由致病性病毒引起的。在一些实施方案中，所述致病性病毒选自人类免疫缺陷病毒(HIV)、甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、疱疹病毒、腺病毒、流感病毒、黄病毒、埃可病毒、鼻病毒、柯萨奇病毒、冠状病毒(例如COVID-19和/或SARS)、呼吸道合胞病毒、腮腺炎病毒、轮状病毒、麻疹病毒、风疹病毒、细小病毒、痘苗病毒(vaccinia virus)、人类嗜T淋巴细胞病毒(HTL)、登革病毒、乳头瘤病毒、软疣病毒、脊髓灰质炎病毒、狂犬病毒、约翰·坎宁安(JC)病毒和虫媒病毒性脑炎病毒。在一些实施方案中，所述感染性疾病是由致病性细菌引起的。在一些实施方案中，所述致病性细菌选自衣原体属(chlamydia)、立克次体属细菌(rickettsialbacteria)、分枝杆菌属(mycobacteria)、葡萄球菌属(staphylococci)、链球菌属(streptococci)、肺炎球菌(pneumonococci)、脑膜炎球菌(meningococci)和淋球菌(gonococci)、克雷伯菌属(klebsiella)、变形杆菌属(proteus)、沙雷菌属(serratia)、假单胞菌属(pseudomonas)、军团菌属(legionella)、白喉、沙门氏菌属(salmonella)、芽孢杆菌属(bacilli)、霍乱、破伤风、肉毒中毒、炭疽、鼠疫、钩端螺旋体病和莱姆病细菌。在一些实施方案中，所述感染性疾病是由致病性真菌引起的。在一些实施方案中，所述致病性细菌选自念珠菌属(Candida)(白色念珠菌(albicans)、克柔念珠菌(krusei)、光滑念珠菌(glabrata)、热带念珠菌(tropicalis)等)、新型隐球菌(Cryptococcus neoformans)、曲霉属(Aspergillus)(烟曲霉(fumigatus)、黑曲霉(niger)等)、属毛霉目(Genus Mucorales)(毛霉属(mucor)、犁头霉属(absidia)、根霉属(rhizopus))、申克孢子丝菌(Sporothrixschenkii)、皮炎芽生菌(Blastomyces dermatitidis)、巴西副球孢子菌(Paracoccidioides brasiliensis)、粗球孢子菌(Coccidioides immitis)和荚膜组织胞浆菌(Histoplasma capsulatum)。在一些实施方案中，所述感染性疾病是由致病性寄生虫引起的。在一些实施方案中，所述致病性寄生虫选自溶组织内阿米巴(Entamoebahistolytica)、结肠小袋纤毛虫(Balantidium coli)、福氏耐格里阿米巴(Naegleriafowleri)、棘阿米巴属物种(Acanthamoeba sp.)、蓝氏贾第虫(Giardialambia)、隐孢子虫属物种(Cryptosporidium sp.)、卡氏肺孢子虫(Pneumocystiscarinii)、间日疟原虫(Plasmodium vivax)、微小巴贝虫(Babesia microti)、布氏锥虫(Trypanosoma brucei)、克氏锥虫(Trypanosoma cruzi)、杜氏利什曼原虫(Leishmaniadonovani)、刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)和巴西日圆线虫(Nippostrongylusbrasiliensis)。

将以上引用的所有参考文献以及本文引用的所有参考文献均通过引用以其整体并入本文。

通过说明的方式而不是通过限制的方式，提供以下实施例。

实施例

实施例1-皮下注射配制品开发

本实施例讨论纳武单抗的稳定、稳健皮下(SC)配制品以及适合于商业规模生产的制造工艺的开发。作为配制品研究的一部分，评价各种不同药学上可接受的赋形剂对纳武单抗稳定性的作用。还进行研究来选择与选择的配制品相容的加工和包装部件。另外，进行使用时间研究以支持经由皮下注射施用药物产品。

针对纳武单抗SC注射剂的开发进行的这些研究的目标包括：1.用于纳武单抗SC注射剂的稳定可注射配制品的鉴定和开发，所述配制品将适合于临床使用和最终的商业化；2.与纳武单抗SC注射剂相容的制造设备和包装部件的鉴定；3.用于制造药物产品的工艺的开发和优化；4.用于长期稳定性研究和3期临床试验的三个批次的纳武单抗SC注射剂的制造；以及5.将用于产品制造的技术转移至商业生产设施并制造PPQ批次。

配制品开发缓冲液系统和pH的选择

与纳武单抗的静脉内(IV)配制品开发相关的先前研究使用毛细管差示扫描量热法(DSC)评价随溶液pH而变的蛋白质稳定性，其测量蛋白质解折叠的热力学；并且进一步评价对于配制品在pH 6.0和7.0下适当的纳武单抗在缓冲液中的物理稳定性。根据这两项研究的结果，选择pH6.0的20mM柠檬酸盐缓冲液用于纳武单抗的IV配制品。

尽管已证实柠檬酸盐是IV纳武单抗药物产品的合适的缓冲液，但是不会是用于皮下施用的产品的优选缓冲液，因为在很多资料中，已知柠檬酸盐缓冲液会在SC施用后引起刺痛和灼痛。

在鉴定适用于SC配制品的目标pH为6.0的其他缓冲液的努力中，进行研究以检查高浓度(100mg/mL)纳武单抗在pH值范围为5.5至6.5的20mM组氨酸缓冲配制品中的稳定性。储存于40℃应激条件下的样品的稳定性数据呈现于表2中。尽管高分子量物质的形成速率在pH范围中是相对一致的，在40℃储存两个月后，HMWS水平在pH 6.0样品中是最低的。还观察到，对于pH 6.0的样品，通过iCIEF确定的主峰面积是最高的。基于这些研究的结果，选择目标pH为6.0的20mM组氨酸缓冲液用于纳武单抗SC注射剂的配制品。

配制品缓冲液浓度的选择

进行研究以评价组氨酸缓冲液浓度对纳武单抗的溶液稳定性的作用。以100mg/mL的纳武单抗浓度在pH 6.0下制备溶液样品。将组氨酸浓度调整至10mM、20mM和30mM。每个配制品还含有250mM蔗糖、0.05％w/w聚山梨酯80和50μM喷替酸。将样品填充至3cc玻璃小瓶中，将其储存于25℃的加速储存条件下长达6个月。

在整个研究中，所有样品的外观是透明至淡乳白色、无色至浅黄色。另外的稳定性结果呈现于表3和表4中。在三种组氨酸浓度中，溶液pH或蛋白质浓度无变化。高和低分子量物质的水平在6个月的储存期间以相同的近似速率随时间而增加。亚可见微粒水平低，没有明显趋势。

表4呈现通过还原性和非还原性CE-SDS二者确定的大小变体的数据。在加速25℃条件下储存的6个月中，通过还原性和非还原性CE-SDS二者确定的纯度百分比是不变的。通过iCIEF确定的电荷变体的数据也呈现于表4中。所有3种配制品的酸性物质的水平在25℃储存的6个月中增加约8％。酸性物质的增加伴随主峰面积的大致相等的减小。碱性物质的水平在6个月储存期中几乎没有变化。基于此研究的结果，选择20mM的组氨酸缓冲液浓度用于纳武单抗SC注射剂的配制品。

张力调整剂的选择

进行研究以评价在高浓度蛋白质配制品中蔗糖对纳武单抗稳定性的作用。以100mg/mL的纳武单抗浓度在20mM组氨酸缓冲液(pH 6.0)中制备溶液，其蔗糖浓度范围为200mM至400mM。在25℃的加速条件下监测样品长达7个月。所有样品的外观保持透明至淡乳白色、无色至浅黄色。表5中呈现的研究结果显示配制品pH或纳武单抗浓度无变化。所有样品的亚可见微粒水平都低，没有明显趋势。在研究中评价的蔗糖浓度范围内，高和低分子量物质形成的速率是一致的。

基于稳定性研究的结果，选择浓度为250mM(85.6g/L)的蔗糖作为纳武单抗SC注射配制品的张力调整剂。如图1中所呈现，配制品黏度和渗透压二者都随着蔗糖浓度增加而增加。但是基于表5中的结果，发现蔗糖浓度的增加对所述配制品的质量属性几乎没有影响。

表面活性剂浓度的选择

评价聚山梨酯80(一种非离子型表面活性剂)在配制品中的使用。评价四种不同浓度的聚山梨酯80(0.01％w/v、0.03％w/v、0.05％w/v和0.07％w/v)连同无聚山梨酯80样品一起对纳武单抗SC注射剂稳定性的作用。在研究的初始筛选部分中，制备配制品，然后使其经历六个冻融循环(-60℃至25℃)。还将配制品在室温/室内照明下在腕式振荡器上剧烈搅动60分钟。在暴露于冻融或搅动时，在无聚山梨酯80样品中观察到多个可见颗粒。尽管数量减少，但是在暴露于冻融或搅动的0.01％w/v聚山梨酯80样品中也观察到可见颗粒。在含有0.03％w/v、0.05％w/v或0.07％w/v的聚山梨酯80浓度的样品中未观察到可见颗粒。因此，得出结论，对于纳武单抗SC注射剂，低于0.01％w/v的聚山梨酯80浓度不足以防止由于冻融或剧烈搅动的应激而配制可见颗粒。

在此研究的第二部分中，检查聚山梨酯80浓度对纳武单抗SC注射剂稳定性的作用。将聚山梨酯80浓度为0.03％w/v、0.05％w/v和0.07％w/v的样品储存于40℃的应激条件下，并监测稳定性两个月。在整个研究期期间，溶液外观无变化，并且如表6中所呈现，pH或蛋白质浓度无变化。在三种聚山梨酯80浓度中，高和低分子量物质的形成速率是相对可比较的。所有样品的亚可见微粒水平都低，没有明显趋势。基于此研究的结果，选择0.05％w/v的目标聚山梨酯80浓度用于纳武单抗SC注射剂的配制品。

金属离子螯合剂的添加

作为要掺入用于纳武单抗SC注射剂的配制品中的潜在金属螯合剂，评价EDTA和DTPA(喷替酸)。在用金属对含有纳武单抗的样品进行加标时，进行初步筛选研究以比较EDTA与喷替酸的表现。在此研究中，以20mM组氨酸与260mM蔗糖在pH 6.0下制备含有10mg/mL纳武单抗的溶液。用金属对样品进行加标至500ppb铁、15ppb铬、15ppb镍、30ppb铜、10ppb钼和10ppb锰的浓度。还制备未加标的样品用作对照。制备了以下六种配制品：1.配制品A：无金属加标，无EDTA或喷替酸；2.配制品B：无金属加标，50μM喷替酸；3.配制品C：无金属加标，50μM EDTA；和4.配制品D：金属加标，无EDTA或喷替酸；5.配制品E：金属加标，50μM喷替酸；和6.配制品F：金属加标，50μM EDTA。

将样品置于40℃的应激条件下并且监测HMWS和LMWS的水平长达4周。表7中呈现的数据显示添加金属离子螯合剂的益处。对于配制品D，在用金属对样品进行加标但不添加螯合剂的情况下，在40℃储存的4周中，HMWS的水平从0.27％增加至7.07％且LMWS的水平从0.12％增加至0.32％。对于金属加标的样品，浓度为50μM(配制品F)的EDTA能够将HMWS和LMWS水平的增加分别限制为3.75％和0.18％。然而，使用50μM喷替酸观察到金属加标的样品的最佳表现，其中在4周研究期中，HMWS的水平仅增加至0.55％，并且LMWS的水平没有变化。即使未加标的配制品A、B和C也显示添加金属离子螯合剂的益处。在不添加螯合剂的情况下，在40℃储存的4周中，HMWS的水平从0.27％增加至1.94％且LMWS的水平从0.12％增加至0.17％。在配制品中包括50μM喷替酸或50μEDTA时，HMWS的增加减小，对于喷替酸从0.26％增加至0.48％，并且对于EDTA从0.26％增加至0.52％。在4周储存期中，含有金属离子螯合剂的样品的LMWS水平不变。基于此研究的结果，选择喷替酸作为用于纳武单抗SC注射配制品的金属离子螯合剂。

为了进一步调查金属离子螯合剂在防止可能由于痕量金属离子的存在而发生的降解中的益处，进行第二项更深入的研究以评价喷替酸对纳武单抗SC注射剂稳定性的作用。此研究中测试的配制品为含有250mM蔗糖和0.05％w/v聚山梨酯80的20mM组氨酸缓冲液(pH 6.0)中的120mg/mL纳武单抗。用浓缩金属溶液对溶液进行加标，使得金属加标的样品中的总金属浓度为1.5ppm(铁、铬和铜各为0.5ppm)。如在先前研究中，也制备未加标的样品用作对照。制备了以下五种配制品：1.配制品A：无金属加标，无喷替酸；2.配制品B：无金属加标，50μM喷替酸；3.配制品C：1.5ppm金属加标，无喷替酸；4.配制品D：1.5ppm金属加标，50μM喷替酸；和5.配制品E：1.5ppm金属加标，100μM喷替酸。

将样品填充至加塞的3cc玻璃小瓶中并储存于40℃的应激条件下，并且监测稳定性两个月。在整个研究期期间，溶液外观无变化，并且如表8中所呈现，pH或蛋白质浓度无变化。所有样品的亚可见微粒水平都低，没有明显趋势。在40℃储存2个月后，HMWS和LMWS的水平在配制品C(不添加喷替酸的金属加标的溶液)中最高。在含有50μM和100μM喷替酸的配制品D和E中分别观察到更低的和相等的HMWS和LMWS的水平。来自未加标的配制品A和B的结果也显示添加喷替酸的益处。在不添加螯合剂(配制品A)的情况下，在40℃储存的2个月中，HMWS的水平从0.61％增加至4.34％并且LMWS的水平从0.05％增加至0.25％。在配制品中包括50μM喷替酸(配制品B)时，在2个月时间点的HMWS水平仅为2.97％，并且在2个月时间点的LMWS水平仅为0.20％。基于此研究的结果，选择50μM的目标喷替酸浓度用于纳武单抗SC注射剂的配制品。

蛋白质浓度的选择

进行多项实验以帮助选择用于纳武单抗SC注射剂的目标蛋白质浓度。发现配制品在操作期间是稳定的，并且超滤运行允许达到高达200mg/mL的纳武单抗浓度。然而，发现在大于150mg/mL的纳武单抗浓度下，黏度快速增加。

L-精氨酸是已知可降低溶液黏度的氨基酸。为了评价精氨酸对配制品黏度的作用，进行如下研究，其中将75mM精氨酸添加至140mg/mL纳武单抗SC配制品(在20mM组氨酸、250mM蔗糖、0.05％w/v聚山梨酯80、50μM喷替酸，pH 6.0中)，然后使用10kDa膜和离心机进行浓缩。添加精氨酸对配制品黏度的作用显示于图2中。在大于100mg/mL的纳武单抗浓度下，75mM精氨酸引起溶液黏度的降低。例如，在20℃在没有精氨酸的情况下，140mg/mL纳武单抗配制品的黏度为13.3cP，但是在具有75mM精氨酸的情况下为9.1cP。黏度测量是在20℃进行。

然后进行研究以评价75mM精氨酸对纳武单抗SC注射剂(ELN A0C6F-023、ELNA259D-007)的稳定性的作用。在具有250mM蔗糖、0.05％w/v聚山梨酯和50μM喷替酸的20mM组氨酸(pH 6.0)中制备小批次的纳武单抗。纳武单抗浓度为100mg/mL或140mg/mL，并且制备含有和不含75mM精氨酸的溶液。针对监测的质量属性生成典型的稳定性数据，但是在3个月40℃时间点，在含有精氨酸的配制品中观察到多个小的白色可见颗粒。在不含精氨酸的配制品中未观察到可见颗粒。基于这些稳定性结果，决定在用于纳武单抗SC注射剂的配制品中将不包括精氨酸。

选择用于纳武单抗SC注射剂的目标纳武单抗浓度为120mg/mL。选择用于FIH临床试验的配制品为含有250mM蔗糖、0.05％w/v聚山梨酯80和50μM喷替酸的20mM组氨酸缓冲液(pH 6.0)。在相同配制品中提供药物物质，但是目标浓度为150mg/mL，储存于-60℃。

实验室规模批次的纳武单抗SC注射剂的稳定性数据

制备两个实验室规模批次的纳武单抗SC注射剂并以稳定状态放置(placed onstability)。两个批次使用选择的FIH配制品，即20mM组氨酸缓冲液(pH 6.0)、250mM蔗糖、0.05％w/v聚山梨酯80和50μM喷替酸。为了包括(bracket)选择用于FIH配制品的120mg/mL蛋白质浓度，一个批次的纳武单抗浓度为100mg/mL且另一个批次的纳武单抗浓度为140mg/mL。制备配制品并将小等分样品无菌过滤至3cc I型玻璃小瓶中。将小瓶加塞，密封并在5℃、25℃和40℃置于操作台(station)上。在指定时间点，从稳定性操作台抽出样品并测试外观、pH、蛋白质浓度、大小同质性(通过SE-HPLC确定)、亚可见微粒物质(通过HIAC确定)、电荷变体(通过iCIEF确定)和分子大小变体(通过CE-SDS(R&NR)确定)。

所有样品在所有时间点的视觉外观都是透明至淡乳白色、无色至浅黄色溶液。另外的稳定性数据提供于表9至表11中。如表9中所示，对于100mg/mL和140mg/mL样品二者，在整个研究期间未观察到pH或蛋白质浓度的变化。在5℃储存的12个月中，100mg/mL样品的HMWS的水平增加0.56％，并且140mg/mL样品的HMWS的水平增加0.73％。对于加速25℃条件，在6个月的储存后，100mg/mL样品的HMWS的水平增加0.88％，并且140mg/mL样品的HMWS的水平增加1.15％。在40℃应激条件下，在3个月的储存中，100mg/mL和140mg/mL样品的HMWS的水平分别增加3.17％和3.92％。在5℃和25℃储存的样品的LMWS的水平几乎没有变化，但是在40℃储存3个月的样品的LMWS的水平增加约0.2％。

表10呈现亚可见微粒和电荷变体的结果。所有样品在所有时间点的亚可见微粒水平都低，并且没有明显趋势。酸性物质的水平在所有储存条件下随时间而增加。在5℃储存的12个月中，100mg/mL样品的酸性物质增加6.3％，并且140mg/mL样品的酸性物质增加5.8％。在加速25℃条件下，100mg/mL样品的酸性物质增加26.0％，并且140mg/mL样品的酸性物质增加23.8％。在40℃应激条件下，在3个月的储存中，100mg/mL和140mg/mL样品的酸性物质的水平分别增加44.9％和43.9％。酸性物质的增加伴随主峰面积的大致相等的减小。对于所有样品，在整个研究期期间，碱性物质的水平几乎没有变化。

表11呈现通过还原性和非还原性CE-SDS二者确定的大小变体的数据。在5℃储存的12个月中，对于100mg/mL和140mg/mL样品，通过还原性和非还原性CE-SDS二者确定的纯度百分比是不变的。在加速25℃条件下，在6个月的储存中，通过还原性CE-SDS确定的100mg/mL样品的纯度百分比是不变的，并且140mg/mL样品的纯度百分比降低0.2％。在40℃应激条件下，在3个月的储存中，通过还原性CE-SDS确定的100mg/mL样品的纯度百分比降低1.0％，并且140mg/mL样品的纯度百分比降低1.4％。对于非还原性CE-SDS，在25℃储存的6个月中，100mg/mL样品的纯度百分比降低2.2％。对于140mg/mL样品，纯度百分比的降低为1.8％。在40℃应激条件下，在3个月的储存中，通过非还原性CE-SDS确定的100mg/mL和140mg/mL样品的纯度百分比的降低分别为2.6％和3.1％。

选择用于FIH临床试验的药物产品的描述和组成

选择用于FIH临床试验的药物产品为纳武单抗注射剂，960mg/小瓶(120mg/mL)。其被描述为无菌的、非致热的、透明至浓乳白色、无色至黄色液体。在一些情况下，可能存在外观上与蛋白质性颗粒一致的少数微粒。所述药物产品是用于皮下(SC)施用的一次性的、不含防腐剂的等渗水溶液。将纳武单抗SC注射剂包装于10cc 1型火石玻璃小瓶中，用20mmDaikyo D21-7S涂布的丁基塞加塞，并用具有flip-off盖的20mm铝密封件固定。纳武单抗SC注射剂的组成呈现于表12中，其包括每种组分的质量标准和功能。每个小瓶中包括纳武单抗SC注射剂的过充满以确保可以将8.0mL的标记的量施用至患者。在确定药物产品的过充满时，考虑了以下因素：1.在产品的使用期间，小瓶、针头和针筒(VNS)中的损失为0.5mL(与USP<1151>最小建议过量体积填充一致)；2.封闭系统转移装置(如果使用)中的损失为0.2mL；3.翼型输注装置(如果使用)中的启动损失为0.5mL；以及4.0.3mL用于灌装机差异性。

基于在剂量制备和施用期间可能损失的纳武单抗SC注射剂的量，在每个小瓶的药物产品中包括1.5mL的过充满。

^a目标填充包括1.5mL过充满以补偿小瓶、针和针筒(VNS)滞留量、灌装机差异性和施用组分滞留量

USP＝美国药典，Ph.Eur.＝欧洲药典，NF＝美国国家处方集，JP＝日本药典，q.s.＝补足

允许FIH配制品的稳定性批次的IND

制造开发实验室批次的纳武单抗SC注射剂(FIH配制品)并以稳定状态放置。批次大小为3,000mL大小，并且其在检查后产生291个小瓶。将药物产品填充(目标填充为9.5mL)至Schott 10cc I型火石玻璃小瓶中，将其用20mm Daikyo D-21-7-S Flurotec涂布的丁基橡胶塞封闭。将小瓶用具有flip-off盖的20mm West铝密封件密封。将药物产品小瓶在5℃、25℃和40℃置于操作台上。在指定时间点，从稳定性操作台抽出样品并测试。十二个月的稳定性数据呈现于表13至表16中。

所有样品在所有时间点的视觉外观都是透明至淡乳白色、无色至浅黄色溶液。另外的稳定性数据提供于表13至表16中。如表13中所示，在整个研究期间未观察到pH或蛋白质浓度的变化。在5℃储存的12个月中，HMWS的水平增加0.3％。在加速25℃条件下，在6个月的储存后，HMWS的水平增加0.6％。在40℃应激条件下，在3个月的储存中，HMWS的水平增加3.3％。在5℃和25℃储存的样品的LMWS的水平几乎没有变化，但是在40℃储存3个月的样品的LMWS的水平增加1.1％。

^a符合＝透明至浓乳白色、无色至黄色液体，可能存在轻(极少)微粒(外观与蛋白质微粒一致)。

表14呈现通过还原性和非还原性CE-SDS二者确定的大小变体的数据。在5℃储存的12个月中，通过还原性和非还原性CE-SDS二者确定的纯度百分比是不变的。在加速25℃条件下，在6个月的储存中，通过还原性CE-SDS确定的纯度百分比降低0.2％。在40℃应激条件下，在3个月的储存中，通过还原性CE-SDS确定的纯度百分比降低2.9％。对于非还原性CE-SDS，在25℃储存的6个月中，纯度百分比降低1.2％，并且在40℃应激条件下储存的3个月中，纯度百分比降低4.4％。

酸性物质的水平在所有储存条件下随时间而增加。在5℃储存的12个月中，酸性物质增加0.8％。在加速25℃条件下，在6个月的储存中，酸性物质增加11.3％。在40℃应激条件下，在3个月的储存中，酸性物质的水平增加38.8％。在5℃储存的整个12个月期间，碱性物质的水平几乎没有变化。在25℃条件下，在6个月中，碱性物质的水平增加1.6％，并且在40℃储存的3个月后，碱性物质的水平增加2.6％。观察到的酸性物质和碱性物质的增加伴随主峰面积的大致相等的减小。

表16呈现活性结合ELISA、基于细胞的生物测定和亚可见微粒的结果。在所有温度和时间点中，活性结合ELISA的结果的范围为95％至112％，并且基于细胞的生物测定的结果的范围为79％至105％。所有样品在所有时间点的亚可见微粒水平都低，并且没有明显趋势。

临床批次制造(FIH配制品)

使用FIH配制品制造两个临床批次(批次1和批次2)的纳武单抗SC注射剂。两个批次的最终批次规模为大约20升，将其填充至约1,800个小瓶中。两个批次通过了所有最终测试并且放行用于临床应用。这些前两个临床批次的纳武单抗SC注射剂的放行测试结果呈现于表17中。

制造工艺的简单描述提供如下。使20mM组氨酸、250mM蔗糖、0.05％(w/v)聚山梨酯80和50μM喷替酸(pH 6.0)中的150mg/mL纳武单抗药物物质在室温下解冻，避光，且在容器之间有足够空间以确保解冻效率。一旦药物物质完全解冻，将袋手动混合2至3分钟以确保同质性。制备配制品缓冲液溶液(20mM组氨酸、250mM蔗糖、0.05％(w/v)聚山梨酯80和50μM喷替酸，pH 6.0)，然后经由0.22μm过滤器过滤。将特定量的缓冲溶液添加至药物物质以将蛋白质浓度调整至120mg/mL。取出样品用于蛋白质浓度确定、pH和内毒素测试。将120mg/mL药物产品溶液经由0.45μm预滤器过滤。取出样品用于生物负荷测试。将药物产品溶液经由两个0.22μm过滤器过滤。对过滤器进行预过滤和后过滤完整性测试。然后将无菌的过滤的溶液填充至洗涤的、灭菌的、去热原的小瓶中。将小瓶用灭菌塞加塞并用铝密封件密封。在填充过程期间，定期进行填充重量检查。100％目视检查密封的小瓶的缺陷。将检查过的小瓶加标签并包装。

形式使用-时间/相容性研究

进行使用-时间研究以支持纳武单抗注射剂(960mg/小瓶，120mg/mL)的皮下临床施用。在初始临床研究中，使用两种方法之一将纳武单抗皮下(SC)施用至患者。对于方法1，在添加生理盐水(NS)和rHuPH20(ENHANZE药物产品(EDP))的小等分样品以将小瓶中的纳武单抗浓度调整至109.1mg/mL并将rHuPH20浓度调整至2,000U/mL之后，以480mg、720mg和960mg的剂量，以每分钟2毫升与4毫升之间的速率，以推注皮下注射剂施用纳武单抗。在109.1mg/mL的浓度下，4.4mL、6.6mL和8.8mL的SC施用体积分别提供480mg、720mg和960mg的纳武单抗剂量。对于方法2，使用针筒泵经大约30分钟(约0.27mL/分钟)施用960mg(120mg/mL的8mL)(不添加NS和EDP)。为了模拟此使用-时间研究中最坏的情况，在经过27G 1/2”针时限定高达4毫升/分钟的溶液流速。此外，一旦药物产品处于施用针筒中，在2℃-8℃限定长达24小时的保持期，在所述24小时中有4小时处于室温/室内照明(RT/RL)。

对于方法1，将0.76mL NS和0.19mL EDP添加至纳武单抗SC注射剂的小瓶中，然后将其温和旋动和倒置以混合。将小瓶内容物抽至单独的10cc针筒中。在初始时间点，将小瓶内容物经由翼型输液器(27G 1/2”针)以4mL/分钟的速率排出至取样容器中。将尖端盖施加至另一组填充的针筒，将其在RT/RL下保持4小时，然后处于2℃-8℃，避光，再保持20小时。在24小时时间点，再次将小瓶内容物经由翼型输液器以4mL/分钟的速率排出至取样容器中。对于方法2，将小瓶内容物(不添加NS或EDP)抽至单独的10cc针筒中。如上文针对方法1所述，收集样品，储存并取样。

来自使用-时间研究的结果呈现于表18-21中。表18显示通过SE-HPLC确定的蛋白质浓度和大小同质性的结果。在整个研究期期间，蛋白质浓度或者高或低分子量物质的水平没有变化。

表19呈现溶液外观、pH、结合活性和亚可见微粒物质的测试结果。在整个研究期期间，溶液pH和活性结合二者几乎没有变化。样品中的亚可见微粒水平低，并且没有明显趋势。

^a符合指示淡黄色、浓乳白色溶液，基本上不含可见颗粒。

表20显示通过CE-SDS确定的纯度百分比和所有次峰的总和(≥0.3％)的数据。

结果显示，对于所有样品，在整个研究期期间，大小变体的水平是不变的。

表21呈现酶活性和通过iCIEF确定电荷变体的数据。结果显示，在整个研究期期间，酶活性相对没有变化。在24小时研究期期间，酸性物质、主峰和碱性物质的水平是不变的。

基于此使用-时间研究的结果，得出以下结论：

1.纳武单抗SC注射剂当用0.76mL 0.9％氯化钠注射剂(NS)和0.19mL ENHANZE药物产品(EDP)稀释至109mg/mL的蛋白质浓度并在2℃-8℃在塑料针筒中储存长达24小时时是稳定的，其中24小时中的4小时是在室温和室内照明下；2.120mg/mL的纳武单抗SC注射剂当在2℃-8℃在塑料针筒中储存长达24小时时是稳定的，其中24小时中的4小时是在室温和室内照明下；以及3.用NS和EDP稀释至109mg/mL的蛋白质浓度的纳武单抗SC注射剂和120mg/mL的纳武单抗SC注射剂与PVC施用组分相容，并且能够以高达4毫升/分钟的流速通过针筒针头。

商业配制品开发

在上文讨论的初始临床试验中，在即将把剂量皮下施用至患者之前，将rHuPH20酶添加至纳武单抗SC注射剂的小瓶中。本研究评价将rHuPH20添加至配制品，使得可以从纳武单抗SC注射剂的商业配制品的单一小瓶制备所述剂量。

在初始临床试验中，将药物产品(EDP，Halozyme Therapeutics)添加至纳武单抗并混合，之后抽取于针筒中。EDP是无菌的、非致热的、一次性的、不含防腐剂的等渗水溶液。EDP在含有10mM组氨酸(pH 6.5)、130mM氯化钠、10mM甲硫氨酸和0.02％w/w聚山梨酯80的配制品中提供1mg/mL rHuPH20。将EDP包装于2cc I型火石玻璃小瓶中，用氯化丁基橡胶塞加塞，并用铝密封件密封。

对于共配制的药物产品，在配制品中使用rHuPH20药物物质代替EDP。该药物物质提供10mg/mL的更高rHuPH20浓度并且与10mM组氨酸和130mM氯化钠(pH 6.5)一起配制。rHuPH20药物物质作为瓶子中的冷冻溶液来供应，在使用前将其解冻并温和混合。与FIH临床研究一样，商业共配制药物产品中的酶浓度保持在2,000U/mL。

初始可行性研究

进行初始可行性研究以评价在包装于玻璃小瓶中时，在5℃、25℃和40℃，在2,000U/mL rHuPH20的存在下，100mg/mL纳武单抗的稳定性。用和不用2,000U/mL rHuPH20制备配制品，将其填充至3cc玻璃小瓶中，加塞，密封并置于操作台上。针对溶液外观、pH、蛋白质浓度、大小同质性(通过SE-HPLC确定)和亚可见微粒物质(通过HIAC确定)，在初始时间点测试样品，并在1周、2周和4周再次测试。另外，通过iCIEF确定电荷变体，通过CE-SDS(R&NR)确定分子量分布，并且使用基于板的比浊法确定酶活性。

表22至表26中呈现的此研究中生成的结果显示，2,000U/mL rHuPH20在配制品中的存在对纳武单抗的质量属性没有影响。在将含有酶的配制品的结果与无酶对照的结果相比较时，在5℃、25℃和40℃储存的4周期间，溶液外观、pH、蛋白质浓度或亚可见微粒水平没有差异。对于大小同质性(通过SE-HPLC确定)、电荷变体(通过iCIEF确定)或分子量变体(通过CE-SDS(R&NR)确定)的结果，也没有观察到差异。在5℃和25℃观察到酶活性的可比较的结果，但是由于所述酶相对低的Tm，当在40℃条件下储存时，活性迅速降低。

^a透明至淡乳白色、无色至浅黄色溶液

/>

^a不适用，^b未检测

商业配制品的开发-rHuPH20的添加

用于纳武单抗SC注射剂的商业配制品的开发中的主要目标是将rHuPH20添加至FIH临床配制品中。与FIH给药一样，商业药物产品中的目标酶活性为2,000单位/毫升。rHuPH20药物物质的目标蛋白质浓度为10mg/ml，目标酶活性为110,000单位/毫克，并且在20℃密度为1.010g/mL。因此，对于2,000单位/mL的酶活性，每升成品药物产品需要的rHuPH20药物物质的理论量为：2,000kU/L的DP x 1mg rHuPH20/110kU x 1mL/10mg x1.010g/mL＝1.84g/L。

1.84g rHuPH20药物物质/升药物产品导致药物产品酶浓度为0.0182mg/mL，来自：1.84g/L x 1mL/1.010g x 10mg/mL x 1L/1,000mL＝0.0182mg rHuPh20/mL药物产品。

在药物产品的制造期间添加的rHuPH20药物物质的实际量是基于rHuPH20药物物质的蛋白质浓度和酶活性确定的，其范围可以分别为8.5至12.5mg/mL和80至140kU/mg。

作为牺牲抗氧化剂的甲硫氨酸的添加

为了防止rHuPH20的氧化，进行如下研究，其中将甲硫氨酸作为牺牲抗氧化剂添加至配制品。为了使配制品受到应激，将过氧化物以1mM的浓度添加至以0mM、5mM和10mM的浓度含有甲硫氨酸的配制品。基于文献中的信息选择1mM水平的过氧化物，所述信息陈述，当在40℃储存长达5周时，可以在含有0.05％w/v聚山梨酯80的溶液中形成大约0.15mM的过氧化物。

在此实验中，在具有250mM蔗糖、0.05％w/v聚山梨酯80、50μM喷替酸和2,000U/mLrHuPH20的20mM组氨酸缓冲液(pH 6.0)中以120mg/mL的纳武单抗浓度制备溶液。每种溶液中的过氧化物和甲硫氨酸浓度调节如下：1.配制品A：无过氧化物，无甲硫氨酸；2.配制品B：无过氧化物，10mM甲硫氨酸；3.配制品C：1mM过氧化物，无甲硫氨酸；4.制剂D：1mM过氧化物，5mM甲硫氨酸；以及5.配制品E：1mM过氧化物，10mM甲硫氨酸

将样品在25℃的加速条件下置于操作台上，并监测长达6个月。所有样品的外观保持透明至淡乳白色、无色至浅黄色。另外的稳定性结果呈现于表27中。数据显示，观察到配制品pH、纳武单抗浓度或高分子量和低分子量物质的水平基本上没有差异。另外，所有样品的亚可见微粒的水平都低，没有明显趋势。观察到的一个差异在于，含有过氧化物但不含甲硫氨酸的配制品C的酶活性显著低于其他4种配制品的酶活性。即使在配制品中含有1mM过氧化物，配制品D和E二者也完全保留酶活性。基于此稳定性研究的结果，选择5mM的甲硫氨酸浓度用于商业药物产品。

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在用1.5ppm金属对配制品进行加标时，纳武单抗SC注射剂的稳定性-评估喷替酸和甲硫氨酸的保护作用

如先前所讨论，选择50μM喷替酸作为配制品的组分来防止痕量金属催化纳武单抗降解，并且选择5mM甲硫氨酸作为牺牲抗氧化剂来防止过氧化物诱导rHuPH20氧化。进行研究以评价在配制品中同时包括这两种赋形剂时，对纳武单抗SC注射剂稳定性的影响。在此实验中，在含有250mM蔗糖和0.05％w/v聚山梨酯80的20mM组氨酸缓冲液(pH6.0)中以120mg/mL的纳武单抗浓度制备溶液。每种配制品中的喷替酸和甲硫氨酸浓度调整如下：1.配制品A：无喷替酸，无甲硫氨酸；2.配制品B：50μM喷替酸，无甲硫氨酸；3.配制品C：无喷替酸，5mM甲硫氨酸；以及4.配制品D：50μM喷替酸，5mM甲硫氨酸。

用浓缩金属溶液对每种配制品进行加标，使得金属的最终配制品浓度为1.5ppm(铁、铬和铜各为0.5ppm)。将每种配制品的样品填充至小瓶中，在40℃的应激条件下置于操作台上，并监测长达2个月。所有样品的外观保持透明至淡乳白色、无色至浅黄色。表28中呈现的另外的稳定性结果显示，配制品pH、纳武单抗浓度或亚可见微粒的水平没有差异。在40℃储存2个月后，高分子量物质的水平在既不含喷替酸也不含甲硫氨酸的配制品A中是最高的，并且在同时含有这两种赋形剂的配制品D中是最低的。比较配制品B与配制品C中的HMWS水平显示，50μM喷替酸针对HMWS形成的保护性强于5mM甲硫氨酸。因此，此研究的结果支持在用于纳武单抗SC注射剂的商业配制品中包括50μM喷替酸和5mM甲硫氨酸二者。

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允许商业配制品的稳定性批次的IND

制造实验室批次的120mg/mL纳武单抗SC注射剂(商业配制品)并以稳定状态放置。配制品为含有250mM蔗糖、0.05％w/v聚山梨酯80、50μM喷替酸、5mM甲硫氨酸和2,000单位/mL rHuPH20的20mM组氨酸缓冲液(pH 6.0)中的120mg/mL纳武单抗。批次大小为3,000mL大小，并且其在注射后产生368个小瓶(来自此批次的800mL用于其他开发活动)。将药物产品填充(目标填充为5.67mL，标签强度为600mg/小瓶)至Schott 10R I型火石玻璃小瓶中，将其用20mm Daikyo D-21-7-S Flurotec涂布的丁基橡胶塞封闭。将小瓶用具有flip-off盖的20mm West铝密封件密封。将药物产品小瓶在5℃、25℃和40℃置于操作台上。在指定时间点，从稳定性操作台抽出样品并测试。十二个月的IND稳定性数据呈现于表29至表32中。

所有样品在所有时间点的视觉外观符合规范(透明至浓乳白色、无色至黄色液体，可能存在轻(极少)微粒(外观与蛋白质微粒一致))。另外的稳定性数据提供于表29至表32中。如表29中所示，在整个研究期间未观察到pH或蛋白质浓度的变化。在5℃储存的12个月中，HMWS的水平增加1.X％。在加速25℃条件下，在6个月的储存后，HMWS的水平增加0.6％。在40℃应激条件下，在3个月的储存中，HMWS的水平增加3.3％。在5℃和25℃储存的样品的LMWS的水平几乎没有变化，但是在40℃储存3个月的样品的LMWS的水平增加1.1％。

表30呈现通过还原性和非还原性CE-SDS二者确定的大小变体的数据。在5℃储存的12个月中，通过还原性和非还原性CE-SDS二者确定的纯度百分比是不变的。在加速25℃条件下，在6个月的储存中，通过还原性CE-SDS确定的纯度百分比降低0.2％。在40℃应激条件下，在3个月的储存中，通过还原性CE-SDS确定的纯度百分比降低2.9％。对于非还原性CE-SDS，在25℃储存的6个月中纯度百分比降低1.2％，并且在40℃应激条件下纯度百分比降低4.4％。

酸性物质的水平在所有储存条件下随时间而增加。在5℃储存的12个月中，酸性物质增加1.5％。在加速25℃条件下，在6个月的储存中，酸性物质增加11.3％。在40℃应激条件下，在3个月的储存中，酸性物质的水平增加38.8％。在5℃储存的整个12个月期间，碱性物质的水平几乎没有变化。在25℃条件下，在6个月中，碱性物质的水平增加1.6％，并且在40℃储存的3个月后，碱性物质的水平增加2.6％。酸性物质和碱性物质的增加伴随主峰面积的大致相等的减小。

表32呈现活性结合ELISA、基于细胞的生物测定和亚可见微粒的结果。在所有温度和时间点中，活性结合ELISA的结果的范围为95％至112％，并且基于细胞的生物测定的结果的范围为79％至105％。所有样品在所有时间点的亚可见微粒水平都低，并且没有明显趋势。

配制品稳健性

进行研究以检查选择用于商业药物产品的配制品的稳健性。研究设计要求制备13种不同的配制品。制备九种配制品用于主要作用筛选，以靶标制备两种配制品，并且制备两次轴向运行来确定蛋白质浓度的作用。准备额外的小瓶用于目标配制品之一，并且在-60℃冷冻储存。在每个时间点将这些冷冻样品解冻并测试，以评估分析(在时间点之间)差异。所制备的配制品中五种因素变化，并且包括蛋白质浓度(105mg/mL至135mg/mL)、pH(5.5至6.5)、聚山梨酯80浓度(0.025％w/v至0.075％w/v)、喷替酸浓度(25μM至75μM)和甲硫氨酸浓度(2.5mM至7.5mM)。所制备用于稳健性研究的配制品呈现于表33中。

通过首先将大约一升纯化的药物物质(在20mM组氨酸、250mM蔗糖(pH 6.0)中的150g/L纳武单抗)解冻来制备配制品。然后使用切向流过滤交换缓冲液，并且将本体的一半调整至pH 5.5且将另一半调整至pH 6.5。对于pH 6.0的中间目标，将pH 5.5的纯化的药物物质添加至pH 6.5的纯化的药物物质，直至达到6.0的目标pH。对于14种配制品的每一种，制备50mL体积。通过添加不同量的浓缩的加标溶液来调整每种配制品中聚山梨酯80、喷替酸和甲硫氨酸的浓度。在制备后，使每种配制品经过0.22μm灭菌过滤器，然后将其填充至3cc玻璃小瓶中，加塞并密封。然后将填充的小瓶在建议的5℃储存条件下以及在25℃的加速稳定性条件下置于操作台上。

在初始时间点测试每组样品的溶液外观、pH、蛋白质浓度、大小同质性(通过SE-HPLC确定)和亚可见微粒物质(通过HIAC确定)。另外，通过iCIEF确定电荷变体，通过CE-SDS(R&NR)确定分子量分布，并且使用基于板的比浊法确定酶活性。在25℃的加速条件下储存1个月和3个月后以及在5℃储存6个月和12个月后，再次测试样品。稳定性结果呈现于表34至表39中。

在初始时间点，在所有四个组中，溶液外观、pH或纳武单抗浓度没有变化。对于组1、组3和组4的大小同质性(通过SE-HPLC确定)、电荷变体(通过iCIEF确定)、大小变体(通过CE-SDS(R&NR)确定)和酶活性观察到类似的初始结果。组2样品(室温、室内照明和30℃储存)的HMWS水平比对照高0.21％，并且组2样品的酸性物质水平比对照高1.4％。所有样品的亚可见微粒物质(通过HIAC)都非常低。在初始时间点，组2样品的酶活性比对照的酶活性低2.5％。

在25℃的加速条件下储存六个月后，在所有四个组中，溶液外观、pH或纳武单抗浓度没有变化。组1、组3和组4的HMWS水平是类似的，并且组2的HWWS水平比对照的HWWS水平高0.15％。所有四组的LMWS水平是相同的，为0.13％。对于电荷变体(通过iCIEF确定)，组2的酸性物质水平比对照的酸性物质水平高2.7％，并且组1和组3与对照类似。在六个月时间点，所有四组的碱性物质的范围为5.9％至6.0％。所有四组的分子大小变体的水平在99.7％至99.8％的范围内(对于还原性CE-SDS)以及在96.5％至97.2％的范围内(对于非还原性CE-SDS)。在六个月时间点，所有样品通过HIAC确定的亚可见微粒物质计数非常低，没有明显趋势，并且确定所有组的酶活性在对照的99.2％和105.6％内。

^a符合＝透明至淡乳白色、无色至浅黄色溶液

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^a符合＝透明至淡乳白色、无色至浅黄色溶液

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小瓶目标填充体积和过充满的确定

纳武单抗的标记的SC剂量为480mg，其为纳武单抗浓度为120mg/mL的药物产品的4mL注射剂。每个小瓶中包括纳武单抗SC注射剂的过充满以补偿小瓶、针和针筒(VNS)在产品的使用期间的损失(与USP<1151>最小建议过量体积填充一致)以及补偿灌装机中的差异性。过充满确保，可以从小瓶抽取标签要求的纳武单抗SC注射剂。

进行研究以确定小瓶、针和针筒中实际的纳武单抗SC注射剂滞留体积。向小瓶精确填充4.50mL药物产品，加塞并密封。五名参与者使用20G 1.5”针使用5cc塑料针筒抽取小瓶内容物。将20G 1.5”针更换为25G 5/8”针，并且将针筒内容物排出至小烧杯中。将排出的药物产品的重量转换为体积并从4.50mL的小瓶填充体积中减去。5名参与者的滞留体积的范围为0.29mL至0.35mL，平均值为0.32mL。注意到该值与USP<1151>建议的用于6cc小瓶大小的0.34mL(外推值)的过量类似。

在许多设施使用封闭的系统转移装置(CSTD)来保护医疗服务人员免于暴露于药物。用于直接SC注射的CSTD大体上由3个部分构成，并且包括小瓶适配器、针筒适配器和针适配器。为了确定CSTD中的滞留体积，相同的5名参与者使用6种最常用的CSTD重复所述研究。一旦将CSTD附到小瓶上，就无法被轻易去除，由此这部分研究将确定小瓶中的滞留体积加上CSTD和针筒中的滞留体积。

与研究的前一组一样，向6R小瓶精确填充4.50mL的纳武单抗注射剂，然后加塞并密封。五名参与者使用CSTD小瓶适配器和CSTD针筒适配器将小瓶内容物抽取至5cc塑料针筒中。将针筒与小瓶分离，添加CSTD针适配器和25G 5/8”针，并将针筒内容物排出至小烧杯中。将排出的药物产品的重量转换为体积并从4.50mL的小瓶填充体积中减去。5名参与者的滞留体积呈现于表40中。在生成的30个结果中，平均小瓶加CSTD滞留体积为0.46mL，标准差为0.06mL。然而，6种不同CSTD中每一种的最高滞留体积的范围为0.46mL至0.58mL。则选择的滞留体积为0.58mL+0.06mL＝0.64mL。在3％灌装机差异性下，选择的目标填充为(4.00mL+0.64mL)/0.97＝4.78mL。

商业配制品的描述和组成

用于纳武单抗SC注射剂(600mg/小瓶，120mg/mL)的商业配制品是无菌的、非致热的、透明至浓乳白色、无色至黄色液体。可能存在少数微粒，其外观与蛋白质性颗粒一致。所述药物产品是用于皮下(SC)施用的一次性的、不含防腐剂的等渗水溶液。将纳武单抗SC注射剂包装于6R 1型火石玻璃小瓶中，用20mm Daikyo D21-7S 涂布的丁基塞加塞，并用具有flip-off盖的20mm铝密封件固定。纳武单抗SC注射剂的组成呈现于表41中，其包括每种组分的质量标准和功能。每个小瓶中包括纳武单抗SC注射剂的过充满以确保可以将5.0mL的标记的量施用至患者。

^a目标填充包括1.5mL过充满以补偿小瓶、针和针筒(VNS)滞留量、灌装机差异性和施用组分滞留量。^b在rHuPH20药物物质中存在氯化钠和组氨酸，但是对最终组成的贡献无足轻重。USP＝美国药典，Ph.Eur.＝欧洲药典，NF＝美国国家处方集，q.s.＝补足

选择的物理和化学特性

150mg/mL纳武单抗药物物质、120mg/mL纳武单抗药物产品和稀释缓冲液的选择的物理和化学特性呈现于表42中。

^a稀释缓冲液中甲硫氨酸和rHuPH20的准确量将取决于用于制造以下批次参考的药物物质的纳武单抗浓度：ELN A0C6F-067、ELN A0C6F-079、ELN A0C6F-083、ELN A0C6F-085、ELN A0C6F-086。

应激研究

短期室温和室内照明研究

此研究的目标是评价短期室温/室内照明(RT/RL)暴露对纳武单抗SC注射剂的影响。在此短期研究中生成的数据帮助告知要在更长期的应激研究中使用的暴露长度。此研究中使用的药物产品配制品是在具有250mM蔗糖、0.05％w/v聚山梨酯80、50μM喷替酸、5mM甲硫氨酸和2,000U/mL rHuPH20的20mM组氨酸缓冲液(pH 6.0)中的120mg/mL纳武单抗。将本体溶液(5.67mL等分样品)填充至10cc玻璃小瓶中，将其加塞并密封。然后使小瓶单独经历以下应激。将小瓶置于水平位置用于最坏情况光暴露：25C/RL暴露-在RT/RL下7天、14天和28天后测试；25C/RL避光*-在RT下7天、14天和28天后测试(*通过将小瓶包裹在铝箔中来避光)。

光源是装在塑料管中的卤代磷酸盐灯泡。将未标记的小瓶置于白纸上，处于水平位置，位于塑料托盘上。在每个时间点，在所有四个角落的UV计读数都是0μW/cm2。在每个时间点获取在四个角落的光度计读数并且范围为933勒克斯至1023勒克斯。在从暴露于应激条件抽离后，将样品储存于5℃。在研究结束时一起测试所有样品。测试包括外观、pH、蛋白质浓度、SE-HPLC、亚可见微粒水平(通过HIAC确定)、CE-SDS(R&NR)、iCIEF和酶活性。

来自所述研究的稳定性数据呈现于表43至表45中。如表43中所呈现，所有样品在所有时间点的视觉外观都为透明至淡乳白色、无色至浅黄色溶液。在28天研究中未观察到任何样品的pH或蛋白质浓度的变化。储存于加速25℃避光条件下的样品的HMWS水平增加0.12％，并且储存于25℃和1,000勒克斯光下的样品的HMWS水平增加1.00％。所有样品至28天时间点的LMWS水平几乎没有变化。

^a符合＝透明至淡乳白色、无色至浅黄色溶液。

表44呈现电荷变体(通过iCIEF确定)和酶活性的稳定性数据。在28天储存期中，储存于25℃黑暗中的样品的酸性物质水平增加1.0％，并且储存于25℃/1,000勒克斯下的样品的酸性物质水平增加5.6％。两个储存条件的碱性物质水平几乎没有变化。观察到的酸性物质的增加伴随主峰面积的大致相等的减小。储存于25℃黑暗中的样品的酶活性几乎没有变化，但是储存于25℃/1,000勒克斯下的样品的酶活性每天降低约2％。

表45呈现CE-SDS还原性、CE-SDS非还原性和亚可见微粒物质的数据。不管是在光照中还是在黑暗中储存，在28天研究期中，通过还原性CE-SDS确定的纯度百分比是不变的。在28天储存期中，对于暴露于室内照明和避光的样品二者，通过非还原性CE-SDS确定的纯度百分比降低0.4％。亚可见微粒水平低，没有明显趋势。

基于此研究的结果，建议限制使药物产品暴露于室内照明。

rHuPH20在储存于25℃-40℃的纳武单抗SC注射剂中的短期稳定性

进行研究以评价在将纳武单抗SC注射剂在范围为25℃至40℃的温度下储存长达24小时时，储存温度对rHuPH20酶活性的影响。将药物产品的单独小瓶在25℃、32℃、36℃和40℃在黑暗中储存长达24小时。在储存期后，测试样品的rHuPH20活性。每种样品一式三份测试。还测试已经在5℃连续储存的样品作为对照。结果呈现于表46中。

尽管酶活性结果显示显著差异性，但是观察到稳定性随温度升高而降低的趋势。因此，必须限制药物产品在高于25℃的储存时间。

物理应激研究

进行研究以检查物理应激对纳武单抗SC注射剂稳定性的影响。施加于药物产品上的物理应激与通常在制造、运输或使用期间可能经历的物理应激是相似的。所述应激包括冻融(组1)、室温暴露、室内照明暴露、高温偏移(组2)、冲击和振荡(组3)以及在5℃、避光下连续储存(组4-对照)。制备一批次的纳武单抗SC注射剂并将药物产品的3.0mL等分样品填充至6cc小瓶中，然后加塞并密封。使填充的小瓶经历各种应激，然后将其在25℃以加速稳定状态放置。

对于所述研究的冻融组(组1)，使填充的小瓶在-20℃与5℃之间循环四次，在-20℃的最短冷冻时间为16小时，且在5℃的最短解冻时间为8小时。观察到，小瓶中的溶液在-20℃储存2至3小时后完全冷冻，并且在5℃储存6至7小时后完全解冻。对于所述研究的室温、室内照明和高温偏移组(组2)，将小瓶在25℃、避光下储存22天。组2小瓶还经历相对于该25℃/黑暗储存条件的两次偏移：在25℃在1,000勒克斯光照中72小时(3天)，以及在30℃、避光下72小时(3天)。对于冲击和振荡应激(组3)，使小瓶从36英寸的高度落下五次，然后将其置于最坏情况水平位置，在定轨振荡器上以120rpm持续24小时。小瓶的落下和定轨振荡在5℃和环境室温(大约22℃)二者下进行。药物产品组4(即对照组)的样品保持5℃储存且避光。

在初始时间点测试每组样品的溶液外观、pH、蛋白质浓度、大小同质性(通过SE-HPLC确定)和亚可见微粒物质(通过HIAC确定)。另外，通过iCIEF确定电荷变体，通过CE-SDS(R&NR)确定分子量分布，并且使用基于板的比浊法确定酶活性。在25℃的加速条件下储存3个月和6个月后再次测试样品。稳定性结果呈现于表47至表49中。

^a符合＝透明至淡乳白色、无色至浅黄色溶液。

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在初始时间点，在所有四个组中，未观察到溶液外观、pH或纳武单抗浓度的变化。对于组1、组3和组4的大小同质性(通过SE-HPLC确定)、电荷变体(通过iCIEF确定)、大小变体(通过CE-SDS(R&NR)确定)和酶活性观察到类似的初始结果。组2样品(室温、室内照明和30℃储存)的HMWS水平比对照高0.21％，并且组2样品的酸性物质水平比对照高1.4％。所有样品的亚可见微粒物质(通过HIAC)都非常低。在初始时间点，组2样品的酶活性比对照的酶活性低2.5％。

制冷的超时(Time Out)和在室内照明下的时间

用于纳武单抗SC注射剂的建议储存条件为2℃-8℃，避光。基于从短期室温/室内照明研究、rHuPH20在25℃-40℃的短期稳定性和物理应激研究收集的数据，可以确立药物产品的制冷的超时和在室内照明下的时间。短期RT/RL研究显示对室内照明的敏感性，rHuPH20研究显示所述酶对较高温度的敏感性，并且物理应激研究数据显示在药物产品制造、运输或使用期间可能出现的应激对质量属性的极小影响。基于这些研究的结果，可以建议成品药物产品的制冷的超时/在室内照明下的时间(TOR/TARL)。此TOR/TARL覆盖始于将密封件应用于小瓶且终于开始准备以供施用至患者的时间段，并且包括填充后活动(小瓶操作、检查、取样、标记、二次包装和运输准备)以及在运输直至开始准备剂量以供患者施用期间的温度偏移。

用于纳武单抗SC注射剂的建议储存条件为2℃-8℃，避光。相对于在高达25℃储存长达28天的建议储存条件的偏移是被允许的，包括在室温和室内照明下储存长达72小时以及在30℃储存长达72小时。

用于小瓶中的药物产品的冷冻温度

作为物理应激评价的一部分，进行研究以确定在填充于6cc玻璃小瓶中并在零下温度储存相对短的时间段时，纳武单抗SC注射剂冷冻的温度。将六个小瓶的纳武单抗SC注射剂(3mL/小瓶)置于控制温度的水浴中。使浴温下降至-8℃(温度用校准的热电偶确认)并保持9小时。在9小时时间点，检查小瓶以确定所述小瓶中的溶液是否已冷冻。然后使浴温下降至-10℃并再保持15小时。在-10℃下15小时后，再次检查小瓶以确定所述小瓶中的溶液是否已冷冻。然后使浴温下降至-12℃并保持9小时。在12℃储存9小时后，所有6个小瓶已经冷冻。

所述研究的结果呈现于下表中。在-8℃下9小时且之后在-10℃下15小时后，所有样品仍处于溶液状态。在-12℃下9小时后，所有六个小瓶已经冷冻。因此，在填充于玻璃小瓶中时，纳武单抗SC注射剂的冷冻温度在-12℃与-10℃之间，并且在低至-10℃的温度下储存长达15小时时，所述小瓶中的溶液将不会冷冻。

通用产品信息

关于药物物质和药物产品的一些通用信息提供如下。将纳武单抗药物物质储存于≤-35℃，在12L FFTp袋中且避光。药物产品的储存条件为2℃-8℃，避光。药物物质和药物产品的组成列于表51中，药物物质、药物产品和稀释缓冲液的选择的特性呈现于表52中。

^a将甲硫氨酸和rHuPH20添加至稀释缓冲液，然后将其添加至药物物质以产生药物产品。^b在rHuPH20药物物质中存在氯化钠和组氨酸，但是对最终组成的贡献无足轻重

实施例2-具有或没有rHuPH20的皮下纳武单抗

在进行中的1/2期研究中，评价在已经充分表征纳武单抗在IV施用后的PK、功效、安全性和免疫原性的实体瘤(转移性黑色素瘤、RCC、NSCLC、HCC和CRC)中，具有或没有透明质酸酶rHuPH20的皮下(SC)施用的纳武单抗单一疗法在患者中的PK、安全性、功效和耐受性。充分表征IV纳武单抗的PK的其他实体瘤(食管胃结合部[GEJ]、胃癌(gastric cancer)(GC)、转移性尿路上皮癌(mUC)和SCCHN是被允许的)。

选择用于部分A的起始SC剂量为720mg Q4W。基于来自部分A的初步PK和随后的建模，此研究如所计划以用于部分B的960mg Q4W的第二剂量继续进行。

对于部分A和部分B，表征单一剂量SC纳武单抗(具有和没有rHuPH20)的PK，之后在第4周表征IV纳武单抗480mg Q4W。使用这些SC PK数据来升级现有的IV PPK模型。然后使用组合SC/IV PPK模型选择1200mg Q4W的SC纳武单抗给药方案用于随后的研究中。

部分C和部分D将提供在部分C(大约45名患者)和部分D(大约36名患者)中SC施用1200mg Q4W后另外的PK和安全性数据。部分C设计为表征在从IV转换(从部分A和部分B转变)的情况下，SC纳武单抗1200mg Q4W的连续给药的PK和研究安全性。部分D包括从开始疗法起SC纳武单抗1200mg Q4W的连续给药的PK和安全性。将进行中间分析，包括在使用1200mg剂量的大约10名受试者中，对剂量前循环2第1天PK和早期安全性的评价。

部分A-部分D的主要目标是描述具有或没有rHuPH20的SC纳武单抗的PK，如通过多种量度(包括Cavgd28、Cmind28和Cmax1)所评估。

部分A-部分D研究的主要目标是描述具有或没有rHuPH20的皮下施用的纳武单抗的药代动力学，并且终点是Cmax、Tmax、AUC(TAU)、和Ctau(部分A、B和D)和Ctau(部分C)。次要目标包括(i)评估SC纳武单抗的安全性概况；(ii)评价过敏性反应的广泛标准化MedDRA查询(SMQ)中AE的发生率和选择的AE超敏性/输液反应类别；以及(iii)评估纳武单抗的免疫原性。次要终点包括(i)AE、SAE、导致中止的AE、死亡和实验室异常的发生率；(ii)在研究药物施用后2天内发生的过敏性反应的广泛SMQ中的AE的发生率；(iii)在研究药物施用后2天内发生的超敏性/输液反应选择AE类别内的事件的发生率；以及(iv)抗纳武单抗抗体和中和抗体的发生率，如果适用。探索性目标包括(i)评价在所有参与者中的初步功效；(ii)表征免疫功能和肿瘤遗传学和基因组学的生物标记物量度；(iii)评估rHuPH20的免疫原性；以及(iv)评估对于纳武单抗的SC或IV施用的初步参与者体验和偏好。探索性终点包括(i)ORR、PFS和OS；(ii)肿瘤的各种生物标记物和分子特征相对于基线的变化(或变化％)的概括性量度；(iii)抗rHuPH20抗体和中和抗体的发生率，如果适用；以及(iv)患者体验/偏好问卷和定性患者访谈。

结果

已经用与rHuPH20共施用的经由SC注射施用的单一剂量的纳武单抗(720mg或960mg)和之后的IV纳武单抗治疗三十二名受试者。在部分B(组3)中的所有受试者都完成1个循环的SC纳武单抗后，进行中间分析。分析部分A-组1中的22名受试者(720mg+rHuPH20)和部分B-组3中的10名受试者(960mg+rHuPH20)的PK和早期安全性数据。在由于短期随访而锁定时，没有可用的功效形式输出。

截至DBL(所有部分B组3中的最小剂量前循环2第1天)，部分A-组1(N＝22)的中值随访为4.4个月(范围：2.4-8.8个月)，并且部分B-组3(N＝10)的中值随访为2.5个月(范围：2.1-3.5个月)。

研究参与者的基线疾病特征显示于表53中。有14名男性和18名女性。所有患者的中值(范围)年龄为66.5(48-90)岁。32名受试者代表不同的患者群体，包括在晚期/转移性环境中具有一系列年龄、体重和肿瘤(NSCLC、CRC、RCC、HCC、黑色素瘤和SCCHN)的受试者。

表53A：基线特征

初步安全性数据

组1(720mg+rHuPH20 SC剂量和之后的IV剂量)：在10名(45.5％)受试者中报告任何等级的治疗相关AE(TRAE)，并且是纳武单抗IV程序内通常已知的AE(表54B)。在3名(14％)受试者中报告SC注射剂部位的低等级红斑、刺激和肿胀。

组3(960mg+rHuPH20 SC剂量和之后的IV剂量)：在3名(30％)受试者中报告任何等级的TRAE，其包括1-2级的免疫介导的皮疹、网状青斑和局部部位反应。在2名(20％)受试者中报告SC注射剂部位处的低等级红斑、瘙痒和肿胀。在DBL时，组3中没有报告治疗相关的SAE(TRSAE)。

对接受SC纳武单抗720mg+rHuPH20(组1)和960mg SC+rHuPH20(组3)的受试者的早期安全性分析是描述性的(并且不意图用于组间比较)。单一剂量SC纳武单抗和之后的IV(循环2+)的临床安全性概况反映先前在纳武单抗IV IB内报告的治疗相关的AE和SAE，但SC局部反应例外。关于使用SC注射的局部AE，不存在意外的局部部位反应，并且所有报告的事件都是低等级且可管控的。组1和组3中的所有32名受试者接受在单一手动注射中施用的分别为6mL或8mL的循环1第1天SC纳武单抗(720mg或960mg)+rHuPH20剂量。

在研究中由于疾病进展而发生两例死亡(都不归因于研究药物)。

AE、TRAE和TRSAE的总结分别提供于表2A-表2C中。

表54A：不良事件总结-所有治疗的受试者，组1和组3-中间分析

^a 5级：50岁男性由于恶性肿瘤进展而死亡，具有肺转移的RCC；以及76岁男性由于恶性肿瘤进展而死亡，CRC

表54B：按最差CTC等级的药物相关不良事件总结-所有治疗的受试者，组1和组3-中间分析

表54C：药物相关严重不良事件总结-所有治疗的受试者，组1和组3-中间分析

组合的纳武单抗SC/IV数据的群体药代动力学分析

采用群体药代动力学(PPK)建模和模拟方法来表征SC纳武单抗PK并优化用于SC纳武单抗的剂量选择。此基于建模的分析的目标是构建PPK模型来描述在通过SC和IV两种施用途径施用时的纳武单抗浓度数据。来自进行中的试验部分A和部分B的第一剂量SC施用后的纳武单抗浓度数据可从2个剂量水平中的29名受试者获得，所述剂量水平包括720mg SC纳武单抗+rHuPH20(部分A-组1)和960mg SC纳武单抗+rHuPH20(部分B-组3)。将这些SC数据与现有的IV浓度数据合并，以开发用于纳武单抗的组合SC/IV PPK模型。将血管外吸收组分添加至现有的已确立的IV PPK模型，随后估计吸收的适当参数，包括BA(F1)和吸收速率常数(ka)。来自组合SC/IV模型的PK参数的估计值总结于表55中。

表55：来自纳武单抗的组合SC/IV PPK模型的PK参数的估计值

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^a具有固定值(非估计的)参数在名称后用上标“f”表示，其固定值在估计值栏给出。^b含有冒号(：)的随机效应和残差参数表示相关参数。^c随机效应和残差参数估计值显示为对角元(ωi,i或σi,i)的方差(标准差)和非对角元(ωi,i或σi,i)的协方差(相关性)。^dRSE％是相对标准误差(作为估计值的百分比的标准误差)。^e随机效应和残差参数的置信区间是针对方差或协方差。BS置信区间值得自自助法计算(总计1000例中的934例成功)。

结构PK模型由2个区室组成：IV施用的零阶吸收和SC施用的一阶吸收。纳武单抗的模型确定的BA为67％，具有高精度(95％ CI：60％-75％)。采用PPK建模和模拟方法来表征SC纳武单抗PK并优化用于SC纳武单抗的剂量选择。此基于建模的分析的目标是构建PPK模型来描述在通过SC和IV两种施用途径施用时的纳武单抗浓度数据。来自进行中的试验(部分A和部分B)的第一剂量SC施用后的纳武单抗浓度数据可从2个剂量水平中的29名受试者获得，所述剂量水平包括720mg SC纳武单抗+rHuPH20(部分A-组1)和960mg SC纳武单抗+rHuPH20(部分B-组3)。将这些SC数据与现有的IV浓度数据合并，以开发用于纳武单抗的组合SC/IV PPK模型。将血管外吸收组分添加至现有的已确立的IV PPK模型，随后估计吸收的适当参数，包括BA(F1)和吸收速率常数(ka)。来自组合SC/IV模型的PK参数的估计值总结于表55中。

结构PK模型由2个区室组成：IV施用的零阶吸收和SC施用的一阶吸收。纳武单抗的模型确定的BA为67％，具有高精度(95％ CI：60％-75％)。采用PPK建模和模拟方法来表征SC纳武单抗PK并优化用于SC纳武单抗的剂量选择。此基于建模的分析的目标是构建PPK模型来描述在通过SC和IV两种施用途径施用时的纳武单抗浓度数据。来自进行中的CA2098KX(部分A和部分B)的第一剂量SC施用后的纳武单抗浓度数据可从2个剂量水平中的29名受试者获得，所述剂量水平包括720mg SC纳武单抗+rHuPH20(部分A-组1)和960mg SC纳武单抗+rHuPH20(部分B-组3)。将这些SC数据与现有的IV浓度数据合并，以开发用于纳武单抗的组合SC/IV PPK模型。将血管外吸收组分添加至现有的已确立的IV PPK模型，随后估计吸收的适当参数，包括BA(F1)和吸收速率常数(ka)。来自组合SC/IV模型的PK参数的估计值总结于表55中。

结构PK模型由2个区室组成：IV施用的零阶吸收和SC施用的一阶吸收。纳武单抗的模型确定的BA为67％，具有高精度(95％ CI：60％-75％)。

组合SC/IV PPK模型经历内部验证实践，以确保所述模型能够预测在SC施用后观察到的浓度值。目视预测性检查(图4)表明，组合SC/IV模型充分捕捉并描述观察到的SC纳武单抗浓度数据。

使用上述模型，进行确定性的模拟以生成用于CA2098KX中以可用PK数据治疗的受试者的暴露量度。暴露量度按剂量水平的总结提供于表56中。

表56：所治疗受试者中预测的暴露按剂量水平的总结

缩写：Cavgd28＝在第28天的平均浓度；Cmax1＝在第一剂量后的最大浓度；Cmind28＝在第28天的最小浓度；CV＝变异系数；GeoMean＝几何平均值；Q4W＝每4周；SC＝皮下；SD＝标准差；Tmax1＝第一剂量后至最大血浆浓度的时间。

RCC受试者的单一组扩展群组

将扩展所述试验以包括患有晚期/转移性RCC的单一组、单一肿瘤扩展群组(部分E)(图3)。部分E的主要目标是通过比较模型预测的SC和IV暴露来证实SC纳武单抗1200mg+rHuPH20(共配制品)Q4W相比于IV给药(3mg/kg Q2W)的PK非劣效性。非劣效性定义为暴露量度的几何平均值比率的双侧90％ CI为至少0.8(共同主要终点：Cavgd28；Cmind28)。Cavgd28和Cmind28非劣效性的证实将确保，SC纳武单抗Q4W的功效将被维持在与IV纳武单抗3mg/kg Q2W可比较的水平。

部分E的次要目标是(i)评价与rHuPH20共配制的SC纳武单抗的PK；(ii)评价与rHuPH20共配制的SC纳武单抗的安全性概况；(iii)评价纳武单抗的免疫原性；以及(iv)评价研究者评估的反应。次要终点包括(i)Cmax1、AUC(TAU)、Cavg(ss)和Cmin(ss)；(ii)AE、SAE、导致中止的AE、死亡和实验室异常的发生率；(iii)抗纳武单抗抗体和中和抗体的发生率，如果适用；以及(iv)ORR。探索性目标包括(i)探索在所有参与者中的功效；(ii)探索免疫功能和肿瘤遗传学和基因组学的生物标记物量度；(iii)探索rHuPH20的免疫原性；以及(iv)探索使用SC纳武单抗的参与者体验。探索性终点包括(i)PFS、OS、至反应的时间以及反应的持续时间；(ii)肿瘤/血液的不同生物标记物和分子特征相对于基线的变化；(iii)抗rHuPH20抗体和中和抗体的发生率，如果适用；以及(iv)患者体验/偏好问卷和定性患者访谈。

选择RCC作为用于部分E的肿瘤类型受到肿瘤类型的IV纳武单抗的广泛历史PK数据以及公认PPK和E-R模型的支持。纳武单抗在RCC中的功效和安全性的E-R曲线在1mg/kg至10mg/kg的剂量范围内是平坦的(数据未显示)。鉴于在测试剂量的宽范围中RCC和黑色素瘤的公认平坦E-R关系，在部分E中对SC纳武单抗的益处/风险评估可以合理地支持外推至已证实IV纳武单抗安全且有效的所有肿瘤类型。选择3mg/kg IV Q2W作为实际IV治疗组是基于：关于3mg/kg IV Q2W的暴露、功效和安全性的稳健数据。大多数研究(包括针对所有批准的适应证的关键性研究)评价在3mg/kg IV Q2W剂量下的纳武单抗。因此，可获得该剂量的充分表征的功效、安全性和PK概况。RCC和黑色素瘤中跨越3mg/kg IV Q2W方案的公认E-R显示暴露与安全性/功效没有显著关联。SC剂量相比于3mg/kg Q2W IV剂量的PK非劣效性的证实足以得出结论，由于以下原因，在晚期/转移性RCC中以及通过外推至其他肿瘤类型，SC纳武单抗的益处-风险概况将是与IV纳武单抗可比较的：

已经在剂量范围和跨肿瘤类型进行的关键性研究中证实3mg/kg IV Q2W的功效。因此，如果用1200mg Q4W的SC给药方案实现类似或更大的Cavgd28和Cmind28，则预期SC纳武单抗的安全性和功效概况将是与IV纳武单抗可比较的。

入选/排除标准/患者特征

关键入选标准包括：(i)未经PD-L1治疗的；(ii)具有透明细胞组分的RCC的组织学确认(必须已经在晚期或转移性环境中接受至少1个、且不超过2个先前全身治疗方案线，并且必须具有在接受最后一次治疗方案时或之后以及在研究入组之前6个月内进展的证据)；(iii)在进入研究时要求受试者用于生物标记物评价的福尔马林固定的、石蜡包埋的肿瘤组织块或肿瘤样品的未染色载玻片(档案或近期的)；(iv)男性和女性参与者必须≥12岁或知情同意时的年龄；(v)必须评估参与者的肿瘤PD-L1表达通过免疫组织化学(IHC)；(vi)根据实体瘤反应评价标准(RECIST)1.1版标准可测量的疾病；(vii)参与者必须具有0或1的ECOG体能状态；以及(viii)所有参与者必须有能力依从治疗、患者报告结局、PK、药效学样品收集和研究随访要求。

关键排除标准包括(i)在随机化/治疗之前2周内用植物制剂(例如，草本补充剂或传统中药)治疗以治疗研究中的疾病；(ii)参与者患有活动性自身免疫病或者在随机化的14天内需要使用皮质类固醇(>10mg每日泼尼松当量)的全身治疗或在随机化的30天内需要使用其他免疫抑制药的全身治疗的任何其他病症(在没有活动性自身免疫病的情况下，允许吸入或外用类固醇，以及>10mg每日泼尼松当量的肾上腺替代类固醇剂量)；(iii)允许患有I型糖尿病、仅需要激素替代的甲状腺功能减退、不需要全身治疗的皮肤障碍(如白癜风、银屑病或脱发)或者预期在不存在外部触发因子的情况下不会复发的病症的参与者入组；(iv)未治疗的有症状的中枢神经系统(CNS)转移(如果CNS转移是无症状的并且不需要立即治疗，或者已经进行治疗并且患者已经在神经学上恢复基线状态(除了与CNS治疗有关的残留体征或症状以外)，则患者是合格的；另外，患者在入组前必须已经停用皮质类固醇，或者正在服用稳定或降低剂量的≤10mg每日泼尼松(或当量)至少2周)；(v)携带已知的人类免疫缺陷病毒(HIV)的患者，所述患者已经在过去一年内患有获得性免疫缺陷综合征(AIDS)限定的机会性感染，或者当前分化群4(CD4)计数<350个细胞/uL；(vi)基于基线实验室评估，器官功能不足；(vii)患有需要治疗的并发恶性肿瘤的患者(如果治疗在注册之前至少2年已经完成并且患者没有疾病证据，则患有先前治疗的恶性肿瘤的患者是合格的；并且患有临床上稳定并且不需要针对肿瘤的治疗的并发恶性肿瘤的患者也是合格的)；(viii)患有严重或不受控的医学障碍的患者；(ix)慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染的血清学证据，且HBV病毒载量高于定量限。患有慢性HBV感染的参与者必然正在进行并行的病毒抑制疗法；(x)当前丙型肝炎病毒(HCV)感染的血清学证据，且HCV病毒载量高于定量限；(xi)已经在第一次治疗的30天内接受活疫苗/减毒疫苗的参与者；(xii)对研究药物组分有变态反应或超敏性历史；以及(xiii)使用抗PD-1、抗PD-L1、抗细胞毒性T-淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)抗体或者特异性靶向T细胞共刺激或检查点通路的任何其他抗体或药物的先前治疗。

选择SC剂量的原理

采用PPK建模和模拟方法进行用于SC纳武单抗的剂量选择。来自部分A和部分B的第一剂量SC施用后的纳武单抗浓度数据是在与rHuPH20共施用的2个剂量水平(720mg和960mg)中收集。将这些与现有的IV浓度数据合并，以开发用于纳武单抗的组合SC和IV PPK模型。将血管外吸收组分添加至现有的已确立的IV PPK模型，随后估计吸收的适当参数，包括BA和ka。使用此组合SC/IV PPK模型进行模拟，以预测在体重范围内施用一系列剂量后的全身暴露。在解释所测试BA的潜在不确定性的各种情景下确定，SC纳武单抗1200mg Q4W方案将引发与IV纳武单抗3mg/kg Q2W可比较的益处-风险概况。这是基于如下原理：对于所有体重，此给药方案能够递送的Cavgd28和Cmin28暴露类似于或大于与IV纳武单抗3mg/kgQ2W相关的Cavgd28和Cmin28暴露，同时维持所有暴露量度低于与IV纳武单抗10mg/kg Q2W相关的那些暴露量度。另外，在所考虑的最保守情景(低生物利用度，在往往具有更高体重的RCC群体中)下的临床试验模拟表明，在SC相比于IV的试验中，SC纳武单抗1200mg Q4W具有比960mg Q4W相对更高的概率达到非劣效性标准。

关于预料的使用1200mg SC剂量的安全性概况，预期预测的暴露不会超过通过纳武单抗10mg/kg Q2W IV(该剂量的安全性已经被充分表征并且显示与3mg/kg Q2W IV类似)产生的那些暴露。鉴于在3mg/kg与10mg/kg Q2W IV的IV暴露之间，AE发生率不存在临床上有意义的差异，1200mg+rHuPH20 Q4W SC是适当的剂量，其将提供的暴露等于或大于3mg/kgQ2W IV且在通过10mg/kg Q2W IV产生的暴露内。这将作为进行中的修正的一部分加以评估，以表征1200mg SC剂量的实际PK(部分C和部分D)，并且在开始部分E之前将审查初步结果。

对来自组A和组B中的患者的确定性模拟的暴露进行进一步比较以确定基于肿瘤类型，SC纳武单抗1200mg Q4W的暴露相对于3mg/kg Q2W是否存在任何差异。这些模拟解释了吸收、生物利用度、全身PK参数和单独协变量信息的单独参数。在此研究中收集的肿瘤类型中，所有暴露量度的几何平均值比率(GMR)不存在明显趋势或差异。所有GMR都等于或大于1，表明肿瘤类型不可能影响对非劣暴露的解释，并且体重将继续保持作为来自SC1200Q4W和3mg/kg Q2W IV给药的暴露的任何差异的主要贡献因素(图5A-图5C)。

实施例3-具有或没有rHuPH20的皮下纳武单抗

在使用皮下(SC)纳武单抗施用的临床研究的支持下，在食蟹猴中进行非临床研究以评价在作为具有和没有rHuPH20的SC配制品施用两次(间隔3周)时，对纳武单抗的局部耐受性和全身暴露。SC纳武单抗以154.57mg/mL供应，并且通过SC注射以0mg/kg(媒介物)、50mg/kg(无rHuPH20)或50mg/kg(具有rHuPH20，2000U/mL)的剂量向每个性别3只猴子的组施用两次(第1天和第22天/第20天[雄性/雌性])。所有剂量都以0.5mL/kg在由20mM组氨酸、250mM蔗糖、0.05％聚山梨酯80和50μM喷替酸组成的媒介物/载体(组氨酸缓冲液)中施用。在第1天于给药后收集用于毒物代谢动力学分析的样品，并且在第22天/第21天(雄性/雌性)于给药后72小时进行排定的尸检。

在具有rHuPH20的50mg/kg下的平均纳武单抗全身暴露(AUC[0-T])通常与没有rHuPH20的情况类似(表57)。在具有或没有rHuPH20的情况下，平均到最大血浆浓度的时间(Tmax)分别为剂量后32小时或68小时。这些结果证实，尽管在此非临床研究中具有rHuPH20共施用的Tmax更早，但是rHuPH20对总体纳武单抗全身暴露没有显著影响。

表57：毒物代谢动力学总结-平均性别组合值

缩写：AUC＝浓度-时间曲线的曲线下面积；Cmax＝最大浓度；Tmax＝到最大血浆浓度的时间。^a值是用所有猴子/排除具有可检测的治疗中出现的抗纳武单抗抗体的猴子来计算。

在具有或没有rHuPH20的6只猴子中的1只中检测到治疗中出现的纳武单抗抗药物抗体(ADA)。6monkeys either with or without rHuPH20.然而，通常，治疗中出现的ADA的存在对纳武单抗暴露没有显著影响。

在具有和没有rHuPH20(2000U/mL)的情况下以50mg/kg施用的纳武单抗耐受良好，在SC注射剂部位没有临床观察结果且没有局部耐受性问题，并且在此非临床研究中，在存在或不存在rHuPH20的情况下，对纳武单抗的暴露没有有意义的差异。

实施例3-在先前治疗的晚期、复发性或转移性非小细胞肺癌中，与重组人透明质酸酶组

合的皮下纳武单抗

将进行3期研究以在患有先前治疗的晚期、复发性或转移性非小细胞肺癌(NSCLC)的参与者中评价与重组人PH20(rHuPH20)共配制的皮下(SC)纳武单抗的施用相比于静脉内(IV)纳武单抗。此研究寻求建立每4周(Q4W)SC施用的与20,000单位rHuPH20共配制的1200mg纳武单抗的药代动力学(PK)和与每2周(Q2W)IV施用的3mg/kg纳武单抗相比的功效非劣效性。在整个方案中，纳武单抗和rHuPH20的共配制品将被称为SC纳武单抗，并且纳武单抗的IV配制品将被称为IV纳武单抗。

18岁或更大(或大多数的当地年龄)的男性或女性，具有组织学确认的IIIB/IIIC/IV期NSCLC(鳞状或非鳞状)，其已经在1种用于晚期或转移性疾病的先前全身疗法期间或之后经历疾病复发或进展。目标和终点呈现于表58中。

表58：目标和终点

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缩写：AE＝不良事件；BICR＝盲态独立中心审查；CminD28＝在28天中的最小血清浓度；Cavgd28＝在第28天的平均血清浓度；Cmax1＝在第一剂量后的最大血清浓度；Cminss＝稳态谷浓度；Cavgss＝稳态平均血清浓度；DCR＝疾病控制率；DoR＝反应的持续时间；IV＝静脉内；MedDRA＝国际医学用语词典(Medical Dictionary for RegulatoryActivities)；ORR＝客观反应率；OS＝总存活期；PFS＝无进展存活期；PK＝药代动力学；Q2W＝每2周；Q4W＝每4周；rHuPH20＝重组人透明质酸酶PH20；SAE＝严重不良事件；SC＝皮下；SMQ＝标准化MedDRA查询；Tmax＝达到Cmax1的时间；TTR＝至反应的时间。

总体设计

本研究是一项多中心、随机化的、开放标签、3期研究，其将评价SC纳武单抗相比于IV纳武单抗的PK和功效非劣效性，以及SC纳武单抗在患有晚期、复发性或转移性NSCLC的参与者中的安全性和耐受性。

·组A(n＝257)：1200mg纳武单抗与20,000单位rHuPH20的SC纳武单抗共配制品，Q4W±7天；以及

·组B(n＝257)：IV纳武单抗3mg/kg，Q2W±3天(图6)。

总计大约514名参与者将被以1:1方式随机化为以下治疗组：随机化为治疗组将按组织学(鳞状与非鳞状)、PD-L1得分(≥1％与<1％与不确定的)、体重(<65kg与65-90kg与>90kg)和东部肿瘤协作组体能状态ECOG-PS(0与1)分层(图6)。ECOGPS必须在随机化之前14天内评估。此研究中的给药将继续进行，直至根据实体瘤反应评价标准(RECIST)v.1.1疾病进展、不可接受的毒性、撤回同意、104周的治疗完成、死亡或发起人终止研究，以最先发生者为准。

研究中的肿瘤评估应由胸部的对比增强的CT、腹部、骨盆和所有其他已知和/或疑似患病部位的CT/MRI组成，应从随机化开始每8周(±7天)进行持续2年(104周)，然后每12周(±7天)进行，直至疾病进展和治疗中止(包括进展后的治疗)(以后发生者为准)。必须评估部分反应(PR)和完全反应(CR)，并且必须在初始评估后至少4周进行确认。肿瘤反应将使用RECIST 1.1来评估。

将在组A中在循环1期间以及在组B中在循环1和2期间收集系列血样，之后在组A和组B二者中在整个治疗期期间收集剂量前PK样品，以表征纳武单抗的PK和免疫原性。

安全性监测将由在整个给药间隔期间的所选择时间的体格检查、生命体征测量和临床实验室评价组成。将在整个研究期间密切监测参与者的AE。根据国家癌症研究所通用不良事件术语标准(NCI CTCAE)v.5标准收集AE和严重程度还将包括SC施用后的局部注射部位反应和IV输注相关反应。

剂量的正当性

使用来自研究(其中与或不与rHuPH20一起SC施用纳武单抗(720mg、960mg和1200mg))中入组的参与者的PK数据和几种肿瘤类型的历史IV数据(来自大约3000名患者的数据)表征纳武单抗在皮下给予时的吸收概况。群体PK(PPK)分析估计平均(90％ CI)生物利用度为70％(66％-74％)且一阶吸收速率为0.250(90％ CI：0.225-0.274)天^-1。所有其他PK参数以及协变量对这些参数的作用与先前用IV PPK模型估计的那些一致。模型估计的使用SC纳武单抗1200mg Q4W和IV纳武单抗3mg/kg Q2W的暴露呈现于表59中。基于这些结果，如与IV纳武单抗3mg/kg Q2W相比，预期1200mg Q4W纳武单抗的SC纳武单抗剂量会在所有体重范围内提供类似或更高的暴露。使用1200mg Q4W的SC施用纳武单抗的几何平均暴露也低于10mg/kg Q2W的最高耐受IV剂量的暴露，并被认为是安全的(图7)。

表59：模型估计的对SC纳武单抗(具有rHUPH20)和IV纳武单抗的暴露

缩写：Cavgd28＝在第28天的平均血清浓度；Cmax1＝在第一剂量后的最大血清浓度；Cmind28＝在第28天的最小血清浓度；CV＝变异系数；IV＝静脉内；Q4W＝每4周；Q2W＝每2周；SC＝皮下。

纳入标准

参与者必须患有组织学确认NSCLC(鳞状或非鳞状)并且呈现IIIB/IIIC/IV期疾病(根据国际肺癌研究协会胸部肿瘤分期手册第8版)，或者在多模式疗法(放射疗法、手术切除或用于局部晚期疾病的确定性化放疗)后呈现复发或疾病进展(根据RECIST 1.1标准)。参与者必须在第一治疗剂量之前28天内患有根据RECIST 1.1标准通过CT或MRI可测量的疾病。参与者必须具有在随机化的14天内评估的0或1的ECOG体能状态。参与者必须已经在1种用于晚期或转移性疾病的先前全身疗法期间或之后经历疾病复发或进展。

在基于铂的双药化学疗法之后的维持疗法不被视为单独的治疗方案。接受培美曲塞、贝伐珠单抗或厄洛替尼作为维持疗法(基于铂的双药化学疗法的无进展者)并出现进展的参与者是合格的。已经接受辅助或新辅助铂双药化学疗法(在手术和/或放射疗法后)并在完成疗法的6个月内患上复发性或转移性疾病的参与者是合格的。在辅助或新辅助基于铂的化学疗法后>6个月患有复发性疾病，并且随后还在为了治疗复发而给予的铂双药方案期间或之后出现进展的参与者是合格的。

必须测试具有非鳞状组织学的所有参与者的EGFR突变状态(包括但不限于外显子19中的缺失和外显子21[L858R]取代)；非常鼓励使用机构批准的测试。对敏化EGFR突变呈阳性的参与者应在接受一种先前批准的EGFR抑制剂之后发生疾病进展。具有已知ALK易位的具有非鳞状组织学的参与者应在接受一种先前批准的ALK抑制剂之后发生疾病进展。此研究不需要ALK突变测试。

非常鼓励可能在第一剂量的研究治疗的4周内需要姑息性放射疗法的在基线时患有有症状的肿瘤病变的参与者在入组前接受姑息性放射疗法。姑息性放射疗法应在第一剂量之前2周完成。如果在先前辐照的区域中存在有记录的(放射摄影)疾病进展(根据RECIST1.1标准)，则靶病变可能位于该部位。

患有在进入研究时受控的慢性阻塞性肺病(COPD)的参与者是合格的。

在入组前(在入组的12周内)从核心活检、钻取活检(punch biopsy)、切除活检或手术样本获得的福尔马林固定的、石蜡包埋的(FFPE)肿瘤组织块或最少20个未染色的肿瘤组织载玻片，在IRT中的采集时间与治疗随机化之间不进行中间全身抗癌治疗。如果不管如何努力，都无法获得最少20个载玻片，在与医学监督人或指定人员讨论后，在一些情况下，递交更少的载玻片可能是可接受的。如果在入组的12周内获得的肿瘤组织不可用，则可以递交档案组织块(在入组的大约12个月内)，在IRT中的采集时间与治疗随机化之间不进行中间全身抗癌治疗。细针抽吸物和其他细胞学样品不是可接受的。通过IHC对肿瘤细胞PD-L1表达的评估必须由分析实验室使用治疗前组织样品来进行。分析实验室必须提供具有随机化之前的PD-L1结果的IRT。

排除标准

参与者患有活动性自身免疫病或者在随机化的14天内需要使用皮质类固醇(>10mg每日泼尼松当量)的全身治疗或在随机化的30天内需要使用其他免疫抑制药的全身治疗的任何其他病症。在没有活动性自身免疫病的情况下，允许吸入或外用类固醇，以及>10mg每日泼尼松当量的肾上腺替代类固醇剂量。已知的人类免疫缺陷病毒(HIV)阳性测试史或已知的获得性免疫缺陷综合征(AIDS)。

允许患有I型糖尿病、仅需要激素替代的甲状腺功能减退、不需要全身治疗的皮肤障碍(如白癜风、银屑病或脱发)或者预期在不存在外部触发因子的情况下不会复发的病症的参与者入组。

患有未治疗的有症状的CNS转移的参与者。如果CNS转移是无症状的并且不需要立即治疗，或者已经进行治疗并且患者在神经学上恢复基线状态(除了与CNS治疗有关的残留体征或症状以外)，则参与者是合格的。另外，参与者在入组前必须已经停用皮质类固醇，或者正在服用稳定或降低剂量的≤10mg每日泼尼松(或当量)至少2周。

患有需要治疗的并发恶性肿瘤的参与者。如果治疗在随机化之前至少2年完成并且患者没有疾病证据，则患有先前治疗的恶性肿瘤的参与者是合格的。患有临床上稳定并且不需要针对肿瘤的治疗的并发恶性肿瘤的患者也是合格的。

患有有症状的或者可能干扰疑似药物相关肺毒性的检测或管理的间质性肺病的参与者。

在随机化/治疗之前2周内已经接受使用植物制剂(例如草本补充剂或传统中药)的治疗以治疗研究中的疾病的参与者。已经在第一次治疗的30天内接受活疫苗/减毒疫苗的参与者。已经接受使用抗PD-1、抗PD-L1、抗CTLA 4抗体或者特异性靶向T细胞共刺激或检查点通路的任何其他抗体或药物的先前治疗的参与者。

基于基线实验室评估的器官功能不足包括(i)白细胞(WBC)<2000/μL；(ii)嗜中性粒细胞<1500/μL；(iii)血小板<100x 103/μL；(iv)血红蛋白<9.0g/dL；(v)血清肌酐>1.5x正常上限(ULN)，除非肌酐清除率≥40mL/min(使用Cockroft-Gault公式测量或计算)；(vi)天冬氨酸转氨酶(AST)/丙氨酸转氨酶(ALT)：>3.0x ULN；(vii)总胆红素>1.5x ULN(患有吉尔伯特综合征的参与者除外，其总胆红素水平必须<3.0xULN)；以及(viii)HBV或HCV病毒的任何阳性检测结果表明存在病毒，例如，乙型肝炎表面抗原(HBsAg，澳大利亚抗原)阳性或丙型肝炎抗体(抗HCV)阳性(除非HCV-RNA阴性)。

纳武单抗与rHuPH20的皮下施用(组A)

SC纳武单抗应每4周±7天在每个治疗循环的第1天施用，直至进展、不可接受的毒性、撤回同意、104周(2年)的治疗完成、死亡或研究结束，以最先发生者为准。参与者应在随机化的3个日历日内开始研究治疗。

将不允许纳武单抗的剂量逐增或降低。可以在从Q4W循环的前一剂量起不小于25天对参与者给药。对于纳武单抗的第一剂量，不建议前驱用药。

纳武单抗的剂量可能被中断、延迟或中止，根据参与者对治疗的耐受性而定。不跳过、仅延迟给药访视。

对于第一循环，将在腹部的一个象限中经由手动注射来施用SC纳武单抗。对于随后的循环，腹部四个象限中的一个和任一大腿是选项，并且注射部位应交替。SC施用应在大约3-5分钟的时间段中尽可能平稳地进行(即，没有开始或停止，并且以稳定速率进行)。将在循环1第1天和循环2第1天SC手动注射SC纳武单抗后监测参与者大约360分钟。接受随后的SC注射的参与者可以在注射后被监测大约30分钟，根据临床需要且根据研究者的慎重考虑而定。另外，将在每次SC注射后大约24小时联系所有参与者以供报告任何注射部位反应。也将在下一次研究访视时评价注射部位。SC注射部位、持续时间和针型必须被记录在电子病例报告表(eCRF)上。制备SC纳武单抗剂量的说明书提供于药房手册(Pharmacy Manual)中。

实施例4-具有或没有rHuPH20的皮下纳武单抗

在进行中的1/2期研究中，向≥18岁、ECOGPS 0-1、患有转移性/无法切除的实体瘤和可测量的疾病的未用过检查点抑制剂的患者(pt)施用不同剂量的纳武单抗(具有或没有rHuPH20)。主要目标是描述皮下纳武单抗药代动力学(PK)；并且次要目标是安全性和免疫原性。另外的分析比较对历史IV纳武单抗的暴露。在循环1中，部分A中的患者接受皮下纳武单抗720mg+rHuPH20，并且部分B中的患者接受皮下纳武单抗720mg、皮下纳武单抗960mg+rHuPH20或皮下纳武单抗960mg。对于循环2+，部分A和部分B中的患者每4周(Q4W)接受IV纳武单抗480mg。仍进行研究的患者转换为部分C，即皮下纳武单抗1200mg+rHuPH20，直至疗法结束。在部分D中，患者接受从头皮下纳武单抗1200mg+rHuPH20 Q4W。皮下注射是单一注射至腹部或大腿中。

患者特征随年龄、体重、肿瘤类型和先前治疗而变化。部分C和部分D的基线基本信息和疾病特征显示于表60中。部分A中的肿瘤类型包括非小细胞肺癌(NSCLC)、肾细胞癌(RCC)、黑色素瘤(Mel)、肝细胞癌(HCC)和微卫星不稳定性高/错配修复缺陷性结直肠癌(MSI-H/dMMR CRC)。

表60：部分C和部分D的基线基本信息/疾病特征

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纳武单抗暴露随皮下剂量增加而增加(表61；图8A-图8C)。对于960mg和1200mg纳武单抗+rHuPH20，C_avg和C_tau高于IV纳武单抗3mg/kg每2周(Q2W)的几何平均暴露，并且C_max低于IV纳武单抗10mg/kg Q2W。在部分C(n＝28)中，13名(46.4％)患者经历任何等级的TRAE，但没有新的/恶化的3+级TRAE或导致中止的TRAE/死亡；7名(25.0％)报告1级局部部位反应。在部分D(n＝36)中，27名(75.0％)患者经历任何等级的TRAE，4名(11.1％)经历3/4级TRAE，2名(5.6％)经历严重的3/4级TRAE，且1例导致中止，并且没有治疗相关的死亡；10名(27.8％)报告1级局部部位反应。使用皮下纳武单抗时观察到抗纳武单抗抗体(Ab)，但是与改变的PK/安全性或中和抗体无关。部分A中的一名(4.5％)患者被认为是持久性抗药物抗体(ADA)阳性(表62)。在部分D中，仅1名(3.8％)患者具有8个效价单位的正ADA效价。未检测到中和ADA，并且不存在改变的PK概况和ADA产生的证据。也不存在抗纳武单抗抗体产生与选择的AE(即，支气管痉挛、超敏性、输注相关反应)的相关性。探索性生物标记物数据在治疗后活检中发现增加的CD8+肿瘤浸润淋巴细胞和PD-L1肿瘤表达，与IV纳武单抗类似。

表61：按具有rHuPH20的剂量的纳武单抗暴露

^a对于C_max，n＝22；^b对于C_max，n＝26；C_tau＝在给药间隔结束时的浓度

表62：NIVO ADA评估：部分A、B和D

^a所有群组的基线ADA滴度≤8滴度单位。

本研究中调查的与皮下纳武单抗+rHuPH20剂量相关的暴露的耐受良好，其安全性概况与IV纳武单抗一致。数据支持3期研究中对皮下纳武单抗+rHuPH20的评价。

在治疗组之间，皮下纳武单抗注射的平均持续时间短于5分钟。部分C和部分D中的所有患者都经由单一注射接受纳武单抗1200mg+rHuPH20(22,000U)的完整皮下剂量。

通过免疫组织化学(IHC)评估治疗前和治疗中(C1D15)成对活检的在肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)上的CD8(n＝23)表达(图9A)和肿瘤PD-L1(n＝25)(图9B)表达。皮下递送的纳武单抗的免疫组织化学结果显示CD8 TIL表达的5.0％的平均变化和PD-L1肿瘤表达的2.8％的平均变化，表明在肿瘤微环境中与历史静脉内递送的纳武单抗相比类似的药效学作用。

实施例5-对氧化应激的分析

在此报告中，评估促进纳武单抗和rHuPH20二者的稳定性增加的因素，它们是两种极为不同的蛋白质，在相差很大的水平下以一种配制品处于其稳定活性状态中。进行了三项研究以充分理解配制品组成的影响。

研究1-除了加速稳定性以外，调查关于金属、过氧化物和光照的不同组合的多个氧化应激条件。研究2-调查观察到配制品保护的浓度范围。研究3-调查与载药针筒和穿戴式装置相关的另外的主要包装部件。此研究还谨慎地检查没有rHuPH20的配制品影响。

为了评估纳武单抗的稳定性，主要使用尺寸排阻色谱(SEC)，并且为了评估rHuPH20的稳定性，测量酶活性。将在所选择的时间点测量PS80水平和微粒。在此报告中显示，DTPA和Met的添加使rHuPH20氧化的风险降至最低，并且使纳武单抗的稳定性最大化。

研究设计

研究1：应激条件

研究1被设置为确定彼此组合的不同氧化应激的作用。所研究的三种氧化应激为：光照[L](在室温下1000勒克斯)、金属应激[M](总计1.5ppm，铁、铬和铜各为0.5ppm)和过氧化物[P](1mM过氧化物)。三种应激是单独评估的并且彼此组合。初步数据显示，酶活性随RT/RL储存而降低，因此将与其他应激组合的光暴露[LP、LM、MPL]在1000勒克斯和RT下保持至3天(3D)。注意：此研究的光暴露组[L]是在时间点的完整持续时间中在RT下暴露于1000勒克斯的唯一条件。Nivo在25℃暴露下显示极小HMW增加，因此将标准储存条件温度提高至30℃。由于光照组合应激条件有3天在室温(RT)下暴露于光，所有条件都以在RT/黑暗下3天或在1000勒克斯和RT下3天开始。研究中的8种应激条件为：光照/RT(1000勒克斯)[L]；金属应激(1.5ppm铁、铬和铜)在RT/黑暗下3D+30℃/黑暗[M]；1mM过氧化物在RT/黑暗下3D+30℃/黑暗[P]；光照/RT 3D+过氧化物+30℃/黑暗[PL]；光照/RT 3D+金属+30℃/黑暗[ML]；过氧化物+金属在RT/黑暗下3D+30℃/黑暗[MP]；光照/RT 3D+金属+过氧化物+30℃/黑暗[MPL]；RT/黑暗3D+30℃/黑暗[对照]。

中心点配制品组成为：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸(pH 6.0)、250mM蔗糖、0.05％w/v聚山梨酯80和2000U/mL rHuPH20。在此研究中，研究顶空、螯合剂(DTPA/EDTA)和牺牲氧化剂(Met)的影响，如表63中所示。表64显示此研究的储存条件和计划的时间点。

表63：研究1-用于BMS-986298的氧化研究的实验条件

配制品	顶空	DTPA(μM)	EDTA(μM)	Met(mM)
					1	空气	50	0	5.0
2	空气	0	0	0.0
					3	空气	0	0	5.0
4	空气	50	0	0
					5	空气	0	100	5.0
6	氮气	50	0	5.0
					7	氮气	0	0	0

(所有配制品中相等地存在在20mM组氨酸(pH 6.0)、250mM蔗糖、0.05％(w/v)聚山梨酯80和2,000U/mL rHuPH20中的120mg/mL BMS-986298)

表64：研究1-氧化研究时间点

X抽出但未测试。样品分析定义于表65中

在此报告中，专注于通过尺寸排阻色谱(SEC)确定不同的参数如何影响纳武单抗(Nivo)的稳定性。由于所述方法的低通过量，仅在选择的时间点进行对rHuPH20稳定性的评价。另外，选择所选择的样品用于评价PS80的稳定性，PS80是为提供药物产品的稳定性而添加的关键赋形剂。这些结果用于预测选择的条件如何在不同氧化应激条件下影响Nivo和rHuPH20二者的稳定性。

表65：研究1-分析体积

*对所选择的样品进行

研究2：配制品组成差异

研究2被设置为确定观察到配制品组成的益处的范围。从氧化应激角度，研究1将条件限定为包括为MPL和RT/RL。研究这两种应激条件以及对照的氧化应激。在氧化和热应激(5℃、25℃和35℃)两种条件下研究预期具有氧化益处的配制品条件。使用热应激条件研究所有配制品以评估稳定性。

氧化应激条件：

·MPL：所有三种应激的组合：在室温/室内照明[L](1000勒克斯)下3天，加标金属[M](总计1.5ppm，铁、铬和铜各为0.5ppm)且加标过氧化物[P](1mM过氧化物)。金属和过氧化物是在T0(初始时间点)加标。在室温/室内照明下3天后，移动样品并储存在30℃/避光下持续该时间点的剩余部分。

·RT30：MPL应激条件的对照。在室温/黑暗下3天，之后在30℃/避光下持续该时间点的剩余部分

·RT/RL：在研究的完整持续时间中处于室温/室内照明(1000勒克斯)。

热应激条件包括(i)5℃/避光；(ii)25℃/避光(也用作RT/RL条件的对照)；以及(iii)35℃/避光。

选择配制品以显示，配制品在以下配制品组成中是稳定的：(i)pH：5.2-6.8His；(ii)组氨酸：10-100mM(Alt：琥珀酸盐)；(iii)DTPA 10-200μM(Alt：100μM EDTA)；(iv)Met：1-20mM(Alt：10mM Trp)；(v)rHuPH20：0-5,000U/mL；(vi)PS80：0.01％-0.1％w/v(Alt：PS200.05％w/v和泊洛沙姆0.2mg/mL)；(vii)糖：10-400mM蔗糖(Alt：10％山梨醇和海藻糖)；以及(viii)蛋白质：100-175mg/mL。对于所有这些条件，中心点配制品组成为：120mg/mLNivo、20mM组氨酸(pH 6.0)、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mM Met、0.05％聚山梨酯80和2,000U/mL rHuPH20，并且在小瓶中测试。

针对热应激和氧化应激条件二者研究的条件显示于表66中。注意，在用于中心点条件和具有50μM DTPA且无Met的条件的设计中存在复份独立配制品制剂。筛选包括小型赋形剂表征DOE，其调查在pH、DTPA与Met浓度之间是否存在任何组合作用。除了具有氮气顶空外，在这些条件下研究DTPA、Met和酶水平的差异，其中氧化更有可能受这些配制品变化的影响。添加替代性赋形剂以理解它们相对于所提出的赋形剂如何表现。作为Met的替代物，添加Trp，并且作为DTPA的替代物，研究EDTA。研究更高水平的这些替代性赋形剂，以确保关于所述替代性赋形剂相对于所提出的赋形剂的表现没有问题。研究中包括所选择配制品的独立重复(仅具有DTPA的配制品21和29以及配制品15和28-中心点)。

仅针对热应激调查的配制品条件列于表67中。不太可能影响氧化的因素在此处是变化的。这些因素为：蛋白质浓度、替代性缓冲液的使用和缓冲液强度、替代性糖和糖浓度以及替代性表面活性剂和变化的表面活性剂水平。此处还研究缓冲液pH的极值。对于所有这些条件，配制品包括50μM DTPA、5mM Met和2,000U/mL rHuPH20。

将对应于氧化应激条件的应激和时间点制表于表68中。将对应于热应激条件的时间点制表于表69中。

表66：研究2-用于BMS-986298的氧化和热应激的实验条件

*复份独立配制品制剂。

(所有配制品中相等地存在在20mM组氨酸、250mM蔗糖和0.05％(w/v)聚山梨酯80中的120mg/mL BMS-986298)

表67：研究2-用于BMS-986298的仅热应激的实验条件

*上文表66中的配制品15和28的复份独立配制品制剂(也测试热应激)。此配制品还确认两种DS来源的可比较的表现。

使用无糖的不同DS来源进行配制。

对于此配制品，后来发现未添加糖。此处忽略这些结果，但是在研究3中覆盖这两种糖。

(所有配制品中相等地存在50μM DTPA、5mM Met和2,000U/mL rHuPH20)

表68：研究2-氧化研究时间点

样品分析定义于表70中。注意。MFI的1M和3M样品，其中有计划但可能由于COVID期间的人员配置限制而无法运行。*可选测试

表69：研究2-热研究时间点

样品分析定义于表70中。注意。MFI的6M样品，其中有计划但可能由于COVID期间的人员配置限制而无法运行。*可选测试

在此研究中，专注于主要通过尺寸排阻色谱(SEC)确定不同的参数如何影响BMS-986298或纳武单抗的稳定性。由于酶活性方法的低通过量，仅在选择的时间点进行对rHuPH20稳定性的评价。另外，选择所选择的样品用于评价PS80的稳定性，PS80是

为提供药物产品的稳定性而添加的关键赋形剂。对所选择的样品测试CE-SDS和iCE以理解低分子量物质和电荷变体的形成。这些结果用于预测选择的条件如何在不同氧化应激条件下影响Nivo和rHuPH20二者的稳定性。

表70：研究2-分析体积

*对所选择的样品运行

研究3：PFS和穿戴式装置的配制品组成差异

研究3的设置类似于研究2，但是条件专注于载药针筒和穿戴式装置的使用。与研究2类似，从氧化应激条件包括来自研究1(MPL)的最坏情况。去掉室温/室内照明条件，因为在现实生活中不可能遇到这种条件，并且其赋予蛋白质和酶二者高应激。与研究2类似，除了氧化应激以外，研究标准热应激条件。对于氧化和热应激条件二者，研究可能会影响氧化的配制品条件。在标准热稳定性条件下测试所有配制品。

氧化应激条件包括：

·RT30：MPL应激条件的对照。在室温/黑暗下3天，之后在30℃/避光下持续该时间点的剩余部分。

热应激条件包括(i)5℃/避光；(ii)25℃/避光；以及(iii)35℃/避光。

使用来自研究2的数据，将期望调查的配制品浓度范围缩窄以尝试找到用于稳定化的最佳范围。选择配制品以显示，配制品在这些配制品组成中是稳定的：(i)pH：5.2-6.5His；(ii)组氨酸：15-100mM；(iii)DTPA 10-200μM(Alt：100μM EDTA)；(iv)Met：1-20mM(Alt：10mM Trp)；(v)rHuPH20：0-10,000U/mL；(vi)PS80：0.01％-0.1％w/v(Alt：PS20和泊洛沙姆0.2mg/mL)；(vii)糖：10-400mM蔗糖(Alt：10％山梨醇和海藻糖)；(viii)蛋白质：100-200mg/mL；以及(ix)小瓶和PFS和贴片泵。

对于所有这些条件，中心点配制品组成为：20mM组氨酸(pH 6.0)、250mM蔗糖、50μMDTPA、5mM Met、0.05％w/v聚山梨酯80和2,000U/mL rHuPH20。小瓶中的样品的蛋白质浓度为120mg/mL。PFS中的样品的纳武单抗蛋白质浓度为150mg/mL。此研究包括研究2中研究的多种条件，但不含酶。预期酶引起的影响极小，因此进行确认性研究且在中心点测试一次性(one-off)条件。

针对热和氧化应激和氧化应激条件二者研究的条件显示于表71中。此处包括为覆盖PFS而添加的条件以及关于PFS使用的条件(硅油和钨加标)。此处还研究DTPA、Met和酶水平，其中氧化更有可能受这些配制品组成差异的影响。

仅针对热应激调查的配制品条件列于表72中。不太可能影响氧化的因素在此处是变化的。这些因素为：蛋白质浓度、缓冲液强度和酶水平。对于所有这些条件，配制品包括50μM DTPA和5mM Met。

将对应于氧化应激条件的应激和时间点制表于表73中。将对应于热应激条件的时间点制表于表74中。

表71：研究3-用于BMS-986298的氧化和热应激的实验条件

所有配制品中相等地存在20mM组氨酸(pH 6.0)、250mM蔗糖和0.05％(w/v)聚山梨酯80。

表72：研究3-用于BMS-986298的仅热应激的实验条件

(所有配制品中相等地存在50uM DTPA和5mM Met。都填充至小瓶中)

表73：研究3-氧化研究时间点

样品分析定义于表75中。^*可选测试。

表74：研究3-热研究时间点

温度	5℃	25℃	35℃
				T0	ab	-	-
2W	-	a*	a*
				1M	-	a	a
3M	a	a	a
				6M	ab	ab	a

样品分析定义于表75中。^*可选测试。

在此研究中，专注于主要通过尺寸排阻色谱(SEC)确定不同的参数如何影响BMS-986298或Nivo的稳定性。仅对5℃和25℃ 6M样品运行确认性MFI样品。

表75：研究3-分析体积

*对所选择的样品运行

材料和方法

材料

研究中使用的材料的详情提供于表76中。

表76：材料信息

样品制备

解冻

将药物物质(DS)BMS-986298和rHuPH20冷冻储存。使这些DS瓶在室温避光下解冻。一旦解冻，将DS瓶温和混合以确保同质性。将DS储存在5℃直至使用，并在使用后将任何剩余部分再次冷冻。配制品研究中使用的DS都是不含DTPA和PS80的。

对于研究1配制品，使用本体DS材料BMS-986298(170mg/mL)通过添加以下储备溶液来制备DP样品：(i)10mg/mL rHuPH20 DS(112kU/mg rHuPh20)；(ii)5％聚山梨酯80(100x)；(iii)2.5mM DTPA(50x)；(iv)5mM EDTA(50x)；(v)250mM甲硫氨酸(50x)；(vi)20mM组氨酸、250mM蔗糖，pH 6.0；(vii)50mM过氧化氢(50x)；(viii)50ppm氯化铬(III)六水合物、50ppm硝酸铜(II)三水合物和50ppm硫酸铁(II)铵(100x)。DS起始组成包含20mM组氨酸和250mM蔗糖，pH 6.0。

对于每种配制品，以无加标、仅用过氧化物加标、仅金属以及金属和过氧化物来制备样品。紧接在加标之前制备金属混合剂。所有配制品都在温和混合后使用具有0.2μmSupor膜的Acrodisc针筒过滤器过滤。实验记录在手册A0F7F-090中。

对于研究2配制品，通过4种方法制备DP样品。第一，通过使用本体DS材料BMS-986298(170mg/mL)直接添加，没有进一步制备-无缓冲液交换。通过添加0.2μm过滤的储备溶液至目标浓度来进行配制。储备溶液包括：2M蔗糖；495mM组氨酸，pH 6.0；500mM组氨酸，pH 5.2；500mM组氨酸，pH 5.5；211mM组氨酸，pH 6.5；262.5mM组氨酸，pH 6.8；5％ PS80；5mM EDTA；2.5mM DTPA；250mM Met；5％ PS80；20mg/mL泊洛沙姆；1400mM琥珀酸盐；80％山梨醇；40％海藻糖；54mM色氨酸；以及水。

此方法用于配制品组成，其中DS pH为6.0，且蔗糖处于250mM水平。DS起始组成为：20mM组氨酸、250mM蔗糖，pH 6.0。

CM3：使用自动化设备交换缓冲液，其中使用加压的10kDa过滤器进行浓缩，并将目标缓冲液添加至目标缓冲液交换组合物。使用两种输入DS流：(i)呈170mg/mL Nivo原液的DS(此为直接原样使用；DS起始组成为：20mM组氨酸、250mM蔗糖，pH 6.0)；以及(ii)呈10mg/mL Nivo原液的DS(此材料是在添加糖之前在病毒过滤步骤期间收获的；此DS原液使用糖组成发生变化的样品；将适当的糖添加至DS至目标组成，然后使用centricon过滤器进行浓缩；使用30kDa过滤器进行浓缩)。

需要此类缓冲液交换的配制品具有小样品需求(用于仅1种配制品，其需要独特的pH或糖水平)。在缓冲液交换后，用于如上所述进行配制的相同原液。切向流过滤(TFF)使用30kDa过滤器和8透析体积(diavolume)的缓冲液交换。运行两次TFF，一次为pH 5.5，一次为pH 6.5。由于具有这两种pH值的配制品，这是被需要的。在缓冲液交换后，用于如上文步骤1中进行配制的相同原液。使用透析制备配制品38，其为一种无糖配制品。所述溶液最初为无糖配制品，然后将其缓冲液交换至目标缓冲液pH/组成。随后通过经由10kDa膜离心来调整浓度。在缓冲液交换后，使用相同原液如上文步骤1中进行配制。

对于MPL条件，通过产生50ppm氯化铬(III)六水合物、50ppm硝酸铜(II)三水合物和50ppm硫酸铁(II)铵的储备溶液用金属加标。类似地，制备50mM过氧化氢溶液以在过氧化物中加标。

所有配制品都在温和混合后使用具有0.2μm Supor膜的Acrodisc针筒过滤器过滤。

对TFF缓冲液运行赋形剂分析以确认赋形剂水平。所述分析发现，与山梨醇的CM3缓冲液交换没有添加山梨醇，并且海藻糖也非故意地失去了。因此，从所述分析省略来自这两个样品(配制品43和44)的结果。研究3中包括这些条件但不含酶。

对于研究3配制品，通过直接添加、通过CM3进行缓冲液交换或者用TFF进行缓冲液交换来制备DP样品。制备方法与研究2的制备方法类似。研究2与研究3之间的主要差异在于，DS原液是不同批次的材料，并且研究3中用于加标的一种金属是氯化铜(II)，而在研究2中是硝酸铜(II)三水合物。

使用针填充贴片泵芯包并与小瓶和针筒一起以稳定状态放置。在适当的抽出时间抽出样品并冷冻，直至Smart Dose贴片泵到达。使用所述贴片泵从芯包递送所述溶液。使用针取出液体用于对照样品。

填充

将配制并过滤的DP填充至去热原的3cc小瓶(Schott 1型玻璃小瓶)或BD Neopack2.25mL针筒中，并且用高压蒸汽处理的13mm Daikyo塞(D-21-7S，Fluorotec包被的血清)或BD1-3mL柱塞加塞。将小瓶旋紧并以竖直位置直立稳定放置。例外是在暴露于光时，此时将小瓶水平放置。将针筒以水平位储存。

分析

抽出样品然后立即冷冻直至分析时间，例外是微粒分析(MFI)；将其保持在5℃直至分析。

SEC

通过SEC-HPLC(MTD-10789)分析DP样品用于HMW和LMW物质的定量分析。使用TSK凝胶Super SW 3000柱(TOSOH 1875)分析样品，流速为0.5mL/min且运行时间为35min。流动相为100mM磷酸盐和100mM硫酸钠，pH 6.8。每次运行注入50μg载量的Nivo样品。通过在280nm的UV吸光度检测峰，并且测量每个峰的面积和保留时间。计算并报告单体、HMW和LMW物质的面积百分比。

酶活性

使用基于板的浊度测定，即DCA中的方法CTL-10028来测量rHuPH20活性。透明质酸酶效力测定是基于透明质酸(HA)与酸化血清结合时不溶性沉淀物的形成。所述沉淀物导致混浊溶液，可以在640nm下测量。透明质酸酶的效力(或活性)是通过以下方式直接测量的：将所述酶与HA底物一起孵育30分钟，用酸化血清沉淀出未消化的HA，并将浊度与参考标准曲线相比较。PS80分析

使用Waters Oasis Max柱，以1mL/分钟的流速，用0.1％甲酸和5mM甲酸铵/乙腈中的0.1％甲酸，在30℃用质谱仪测量PS80水平。

微粒

使用微流成像(MFI)测试微粒水平。将1.1mL的每个样品填充至单独玻璃小瓶中用于MFI分析。在分析之间以水样运行测试样品。以0.15mL吹扫和0.43mL分析体积测试样品。

通过成像毛细管等电聚焦(iCIEF)确定的电荷变体

通过iCIEF使用称为iCE3(MTD-10788)的成像等电聚焦系统分析电荷变体。将与适当pI标记物、两性电解质和其他添加剂混合的样品通过自动进样器注射至氟碳化合物(FC)涂布的毛细管卡盒中。在高电压的预聚焦和聚焦后，通过UV检测器捕捉样品迁移，并且通过CCD照相机拍摄UV光吸收图像。计算并报告主峰、酸性变体和碱性变体的面积百分比。

CE-SDS

通过CE-SDS使用LabChip GX II卡尺系统在非还原条件下确定Nivo的相对纯度百分比。使样品变性并在十二烷基硫酸钠(SDS)的存在下准备，十二烷基硫酸钠是一种洗涤剂，其包被蛋白质，提供负电荷从而有效遮蔽所述蛋白质的天然电荷。将每个样品抽吸至芯片上，与染料混合并通过电泳分离。然后在芯片上进行单独的脱色步骤。仪器内的光学元件检测每个样品的荧光信号。基于大小和电泳迁移率分离蛋白质种类。计算每个峰的相对面积百分比并报告相对纯度百分比(％主峰)。

结果-研究1

尺寸排阻色谱

尺寸排阻色谱是用于监测纳武单抗在所研究的各种应激条件下的稳定性的主要工具。

为了调查氮气顶空的影响，调查具有氮气顶空的两种配制品。具有50μm DTPA和5mM Met二者的配制品(配制品1-空气，配制品6-氮气)和既没有DTPA也没有Met的配制品(配制品2-空气，配制品7-氮气)。HMW变化绘制于图10中。对于具有DTPA和Met二者的配制品，顶空影响对于除了具有连续光暴露的RT/光照条件以外的所有条件都是极小的(图10)。在没有DTPA也没有met的配制品，具有氮气顶空存在益处(图10)。在添加DTPA和Met二者的情况下，对氧化的控制良好，因此不需要氮气顶空。

各种配制品对在暴露于各种应激条件后Nivo的HMW物质形成的影响显示于图11中。所述应激条件包括(从左至右)：1.)在室温/黑暗(对于L条件控制3天光暴露)+30℃热应激(用于除了RT/光照以外的所有条件的热应激)下控制暴露至3天；2.)金属-铁、铬和铜各为0.5ppm(M条件)+光照(在1000勒克斯和室温下3天-L条件)+30℃热应激；3.)M+1mM过氧化物(P条件)+L+30℃热应激；4.)M+L+30℃热应激；5.)M+30℃热应激；6.)P+L+30℃热应激；7.)P+30℃热应激；8.)室温/室内照明(无额外热应激)。

在所有应激条件中，没有DTPA且没有Met的配制品2具有最高HMW形成速率，之后是没有DTPA且具有5mM Met的配制品3。具有100mM EDTA和5mM Met的配制品5，之后是具有50μM DTPA且没有Met的配制品4。最佳配制品是具有50μm DTPA和5mM Met二者的配制品1。在所有应激条件下都观察到此表现，但通过查看MPL(具有30℃热应激的组合应激条件)最佳地观察到差异。此MPL应激条件针对所有配制品条件的图显示于图12中。

对图12中MPL应激条件的谨慎检查显示具有50μM DTPA和5mM Met二者(配制品1-空气和配制品6-氮气)的益处。在配制品中具有两种抗氧化剂稳定Nivo，使得将顶空更换为氮气不显示改进的稳定化(配制品1与配制品6完全重叠)。仅具有DTPA(配制品4：50μM DTPA和0mM Met)胜过更大量的EDTA和Met(配制品5：100μM EDTA和5mM Met)。在没有DTPA且没有Met的情况下在空气顶空下(配制品2：0μM DTPA和0mM Met)观察到最高的HMW形成，其次是相同的配制品但在氮气顶空下(配制品7)以及仅具有Met(配制品3：0μM DTPA和5mM Met)。

检查这些数据的另一种方式是通过查看配制品组成以及它们按应激条件表现如何，如图13中所示。可以观察到具有DTPA和Met二者的益处。这种检查数据的方式显示，RT/光照条件是最坏的情况，并且对于单独应激角度，3天光照和/或金属导致最高的％HMW形成并且过氧化物的作用被减弱。对于RT/光照条件，氮气顶空的益处非常明显。对于没有DTPA、没有Met的样品，在所有应激条件中，氮气顶空将％HMW降低大约0.5％。对于具有DTPA和Met二者的配制品，没有观察到氮气顶空所致的显著改进。100μMEDTA和5mM Met的％HMW大于50μM DTPA和5mM Met，但是作用的大小可能依赖于准确的应激源。

为了提供统计学评估，探索各种线性模型。纯误差估计值的不存在、设计不平衡和复杂的配制品-应激动力学排除了在单一组合模型中掺入所有因素的企图。从分析排除氮气和EDTA样品。其余的螯合剂-甲硫氨酸观察结果显示于图14中，并且提供下文所述分析的图像动机。尽管在统计模型中包括，但是已经从下文图中去除RT/室内照明条件，因为这种极端应激条件与计划的使用情况不太相关。

对于此还原性数据集，螯合剂-应激相互作用的潜能是明显的。但是，在仅DTPA样品中，应激作用似乎是加性的。这表明主要作用统计模型是可估的并且可以用于比较具有/不具有甲硫氨酸的DTPA。基于DTPA的存在或不存在，残余方差差异是可能的。

基于所呈现的分析，谨慎地检查对使用空气顶空的具有或没有5mM甲硫氨酸的DTPA的比较。在空气下使用仅DTPA样品，掺入甲硫氨酸和应激的主要作用线性模型估计添加甲硫氨酸在4周时在％HMW方面具有边际显著平均益处(差异为0.0375％，p为约0.0796)并且在12周时在所有应激条件中在％HMW方面具有统计学上显著的平均改进(差异为0.125％，p为约0.0016)(数据未显示)。

聚山梨酯80

测试样品子集以理解聚山梨酯的稳定性，聚山梨酯是防止Nivo形成微粒的关键表面活性剂。所测试样品的PS80水平显示于表77中。PS80确实被金属、过氧化物和光照氧化。通过添加螯合剂(DTPA或EDTA)减轻降解。在不含螯合剂的条件下储存后，PS80水平显著下降。即使在5℃储存，在2个月后也可以观察到此下降。在30℃及金属和过氧化物应激(其中3天处于室温/室内照明下)下储存1个月后，不含螯合剂的样品下降至小于0.1mg/mL(从起始0.5mg/mL靶标)。氮气顶空稍微保护PS80(在氮气下为0.08mg/mL，与之相比，在空气下为0.02mg/mL)。

表77：研究1-在5℃下2个月和在光照+金属+过氧化物+30℃/黑暗[MPL]下3天后1个月的PS80水平，从0.5mg/mL的初始PS80开始。

rHuPH20酶活性

为了评估rHuPH20的稳定性，测量样品的有界集的酶活性。酶活性测定的结果显示于图15中。在30℃/黑暗和MPL应激(金属和过氧化物应激，其中前3天处于室温/室内照明中)下的样品的酶水平制表于图15(中图)中。具有DTPA和Met二者的配制品(配制品1)胜过仅具有DTPA的配制品，仅具有DTPA的配制品胜过仅具有Met的配制品。没有它们(既没有DTPA也没有甲硫氨酸)的配制品具有最大酶活性下降。

图15(左图)中暴露于3天RT/黑暗和之后的30℃/黑暗的样品显示类似的表现，其中具有DTPA和Met的配制品和仅具有DTPA的配制品胜过仅具有Met的配制品和没有DPTA也没有Met的配制品。

对于暴露于RT/RL的样品，rHuH20酶活性显示不同的表现，图15(右图)。对于这些条件，所有配制品对于所有3M样品都具有不可报告(低)水平的rHuPH20活性，但保持在氮气顶空下具有DTPA和Met的样品例外。在连续暴露于室内照明且顶空为空气的情况下，未观察到配制品差异。这些结果表明，顶空氮气与DTPA和Met的组合在连续暴露于室温/室内照明下有助于保护所述酶。

微粒形成

对于所有应激条件和配制品，在两周时间点评价微粒形成。对于所有样品，≥25μm颗粒的大微粒的水平低(小于32个颗粒/mL)。对于所有样品，≥10μm颗粒的微粒都低于164个颗粒/mL。具有最高微粒计数的样品是在室温/室内照明下的条件，但是颗粒数量远低于USP<788>规范。在此研究期间未观察到微粒问题。

通过三种关键组分监测配制品的稳定性：通过SEC确定的Nivo的稳定性、通过监测酶活性确定的rHuPH20的稳定性以及通过测量PS80水平确定的PS80的稳定性。对于这些质量属性中的每一种，将从最佳配制品至最差(顶部至底部)配制品排序的配制品表现和排名制表于表78中。

通过SEC确定的Nivo稳定性显示响应于氧化应激的HMW增加。在各种组合的应激(金属、过氧化物和光照)下，通过抗氧化剂的存在来防止HMW的增加。Met与DTPA的组合显示比仅DTPA更高的稳定性，仅DTPA胜过Met，Met胜过没有DTPA也没有Met的配制品。

rHuPH20酶活性响应于氧化应激而降低。具体而言，由于光应激所致的下降是显著的。对于金属、过氧化物和光应激(3天)条件的组合可以观察到配制品组成益处。在存在Met和DTPA二者的情况下，酶活性的保存最佳。相对于仅DTPA，存在酶活性的可测量的下降，仅DTPA相对于仅Met具有可测量的下降，仅Met相对于没有Met也没有DTPA具有活性的可测量的下降。

对于具有螯合剂(DTPA)的条件，观察到PS80保护。Met未保护PS80免于降解。

表78：研究1-能够区分配制品的所研究的质量属性以及这些配制品的排名

来自调查过氧化物、金属和光照的各种组合及添加30℃热应激及各种配制品的关键结果表明，在具有50μM DTPA和5mM Met二者的配制品中存在益处。使用这些抗氧化剂中仅一种的稳定性不如具有螯合剂和牺牲抗氧化剂二者。

结果-研究2

分析制表于表68和表69中的配制品。在此研究中，目的是理解可以观察到此配制品的益处的因素和范围。所探索的因素和范围是：pH：5.2-6.8His；组氨酸：10-100mM(Alt：琥珀酸盐)；DTPA 10-200μM(Alt：100μM EDTA)；Met：1-20mM(Alt：10mM Trp)；rHuPH20：0-5,000U/mL；PS80：0.01％-0.1％w/v(Alt：PS20和泊洛沙姆0.2mg/mL)；糖：10-400mM蔗糖；以及蛋白质：100-175mg/mL。这导致此处要研究49种不同的配制品。pH、DTPA和Met水平是共同变化的。具有赋形剂范围的max和min的配制品每次单变量变化，所有其他因素处于目标组成。目标组成为：在20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mM Met、2,000U/mL rHuPH20、0.05％w/v PS80(pH 6.0)中的120mg/mL Nivo，具有空气顶空。注意，在用于中心点条件和具有50μM DTPA且无Met的条件的设计中，存在复份独立配制品制剂。所研究配制品的分布显示于图16A-图16F中。

类似于在目标组成下研究的配制品范围，还研究替代性赋形剂：琥珀酸盐、100μMEDTA、10mM Trp、0.05％w/v PS20、泊洛沙姆0.2mg/mL、10％山梨醇和海藻糖，其他赋形剂处于目标组成。

尺寸排阻色谱

尺寸排阻色谱是用于监测纳武单抗的稳定性的主要工具。

再现性

在用于中心点条件和具有50μM DTPA且无Met的条件的设计中包括复份和独立配制品制剂。这些配制品按应激和时间点通过SEC确定的最终HMW制表于表79中。

表79：研究2-对于复份样品，在每一种所研究的应激条件中，对于最后时间点通过SEC确定的高分子量物质-中心和0Met配制品。中心配制品组成：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mM Met、0.05％w/v PS80，pH 6.0。0Met组成：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、0.05％w/v PS80，H 60。

酶水平

在此研究中，研究在0至5,000U/mL之间的酶水平的范围。对于该应激条件，对于最终时间点，将对于各种酶水平通过SEC确定的最终HMW制表于表80中。配制品组成具有不同水平的酶，具有120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mM Met、0.05％w/vPS80，pH 6.0。在所研究的所有应激条件中，酶水平对HMW物质的形成没有影响。

表80：研究2-对于各种酶水平，在每一种所研究的应激条件中，对于最后时间点，通过SEC确定的高分子量物质。配制品组成：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μMDTPA、5mM Met、0.05％ PS80，pH 6.0。

替代性赋形剂

在此研究中，以用于所有其他赋形剂的中心点组成研究替代性赋形剂。作为0.05％w/v PS80的替代性表面活性剂，研究0.05％w/v PS20和0.2mg/mL泊洛沙姆。作为20mM组氨酸的替代性缓冲液，研究20mM琥珀酸盐。表面活性剂和缓冲液替代物不可能对针对氧化的保护具有大的影响，因此在热应激条件下研究这些替代物的表现。对于与中心点条件相邻的该应激条件(目标配制品组成为120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μMDTPA、5mM Met、2,000U/mL rHuPH20、0.05％w/v PS80，pH 6.0)，对于最终时间点，将使用这些替代性赋形剂通过SEC确定的最终HMW制表于表81中。作为替代性赋形剂，可以通过PS20或泊洛沙姆替代PS80且对稳定性的影响极小。具有组氨酸作为缓冲剂的配制品是Nivo稳定性必不可少的并且无法被琥珀酸盐替代。在所研究的所有热应激条件(5℃、25℃和35℃)中，使用琥珀酸盐缓冲液时HMW物质显著增加。

表81：研究2-对于替代性赋形剂，在每一种所研究的应激条件中，对于最后的时间点，通过SEC确定的高分子量物质。中心点组成：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mM Met、0.05％w/v PS80、2000U/mL rHuPH20，pH 6.0。

作为50μM DTPA的替代性螯合剂，研究100μM EDTA。DTPA是更好的螯合剂，因此此处研究更高水平的EDTA。类似地，作为5mM甲硫氨酸的替代性牺牲剂，研究10mM色氨酸。由于螯合剂和牺牲氧化剂的添加可能影响针对氧化的保护，在热应激和氧化应激条件二者下研究这些螯合剂和牺牲氧化剂。对于与中心点条件和相应的对照相邻的该应激条件(中心点配制品组成为120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mM Met、2,000U/mLrHuPH20、0.05％ PS80，pH 6.0)，对于最终时间点，将使用这些替代性赋形剂通过SEC确定的最终HMW制表于表82中。

表82：研究2对于DTPA和Met的替代性赋形剂，在每一种所研究的应激条件中，对于最后的时间点，通过SEC确定的高分子量物质。组成包括：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、0.05％w/v PS80、2000U/mL rHuPH20，pH 6.0。

在MPL应激下3个月后制表的％HMW值明确显示具有DTPA的独特益处，并且其为与EDTA相比更优秀的螯合剂。在MPL应激下3个月后观察到的％HMW为1.6％相比于2.1％ HMW。对仅螯合剂(没有Met)的评价进一步说明了DTPA相对于EDTA的益处(在3M的MPL应激后对于DTPA为1.8％ HMW相比于对于EDTA为3.7％ HMW)。类似地，数据显示，Met优于Trp。观察到的HMW为，在RT/RL下1M后，对于Met为1.9％相比于对于Trp为2.4％，并且在3M MPL后，对于Met为1.5％相比于对于Trp为1.9％ HMW。在用5mM Met和50μM DTPA配制时，对％HMW增加的控制最佳。这些结果与研究1一致。

DTPA的水平

以如下中心点配制品组成研究从0-200μM的DTPA水平的范围：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、5mM Met、2,000U/mL rHuPH20、0.05％w/v PS80，pH 6.0。对于该应激条件，对于最终时间点，将在各种Met水平下通过SEC确定的最终HMW制表于表83中。在加速热条件(25℃和35℃)以及MPL氧化条件中，具有0μM DTPA存在影响；然而，在10-200μM的浓度之间，未观察到浓度依赖性DTPA作用的令人信服的证据。此表现在应激条件之间在时间之间是一致的，如图17中所示。

表83：研究2对于各种DTPA水平，在每一种所研究的应激条件中，对于最后的时间点，通过SEC确定的高分子量物质。组成包括：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、5mMMet、0.05％w/v PS80、2000U/mL rHuPH20，pH 6.0。

甲硫氨酸的水平

以如下中心点配制品组成研究从0-20mM Met的甲硫氨酸(Met)水平的范围：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、2,000U/mL rHuPH20、0.05％w/vPS80，pH 6.0。对于该应激条件，对于最终时间点，将在各种Met水平下通过SEC确定的最终HMW制表于表84中。对于热条件(5℃、25℃、35℃和RT/30℃对照)，Met水平的变化没有导致重大影响。在RT/RL的氧化应激条件下经过1个月和在MPL的氧化应激条件下保持3个月，在与DTPA组合时观察到高水平Met的益处。由于在所有这些配制品中添加DTPA对HMW形成的较大影响，所述益处是极小的。

表84：研究2对于各种Met水平，在每一种所研究的应激条件中，对于最后的时间点，通过SEC确定的高分子量物质。组成包括：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μMDTPA、0.05％w/v PS80、2000U/mL rHuPH20，pH 6.0。

在每种条件下％HMW的时程变化显示于图18中。在多个应激条件中，0μMDTPA和0mMMet具有最高HMW水平。在0μM DTPA水平下0与5mM甲硫氨酸配制品之间的区别是明显的，Met的添加对于Nivo的稳定性是有益的。在目标50μM DTPA浓度下，在2周和1个月时间点，Met水平在各种应激下的作用更难以区别。然而，在3个月和6个月时间点，需要谨慎的评价。

对MPL(金属+过氧化物+3D光照之后30℃/黑暗应激条件)的谨慎评价显示于图19中。注意：对于具有0mM Met和50μM DTPA的配制品以及具有5mM Met和50μM DTPA的配制品，存在由两个和三个*标志标记的复份独立配制品。在0μM DTPA下的0和5mM Met配制品在所有三个时间点相区别。在50μM DTPA浓度下，在这些MPL条件下，在1个月和3个月两个时间点，％HMW形成似乎随甲硫氨酸浓度而变化。特别地，对于在3个月时间点的MPL应激条件，明显地观察到具有更高水平Met的益处。在100和200μM DTPA以及5mM Met浓度下的HWM形成与50μM DTPA和5mM Met水平是类似的。这是由于具有DTPA的二元作用所致，但是如上文所讨论的浓度依赖性DTPA作用没有令人信服的证据。

pH

以如下中心点配制品组成研究从5.2至6.8的pH水平的范围：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mM Met、2,000U/mL rHuPH20、0.05％w/vPS80。对于该应激条件，对于最终时间点，将在各种pH水平下通过SEC确定的最终HMW制表于表85中。在所有热条件(5℃、25℃和35℃)和氧化条件(RT/RL、MPL和RT/30℃对照)中，具有更高pH有影响。在5.2至6.5的pH范围之间，配制品具有良好的稳定性。表85：研究2对于各种pH水平，在每一种所研究的应激条件中，对于最后的时间点，通过SEC确定的高分子量物质。组成包括：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mM Met、0.05％w/v PS80和2000U/mLrHuPH20。

对pH、Met和DTPA水平的DOE评价

存在对pH、Met和DTPA水平的组合运行的小型赋形剂表征DOE。将DOE中的配制品制表于表86中，所有配制品都含有120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、2,000U/mLrHuPH20和0.05％ PS80。对于该应激条件，对于最终时间点，将在各种Met水平下通过SEC确定的最终HMW制表。在所有应激条件中，对结果的检查显示明显的pH作用。这部分研究的结果与上述单变性研究结果一致。对于MPL条件，主要作用是pH，pH越高导致的HMW值越高。较高水平的Met存在保护作用，并且此处研究的DTPA水平(10-100μM)不影响HMW。

表86：研究2对于调查pH、Met和DTPA水平的影响的DOE，在每一种所研究的应激条件中，对于最后的时间点，通过SEC确定的高分子量物质。组成包括：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、0.05％w/v PS80和2000U/mL rHuPH20。

组氨酸水平的影响

以如下中心点配制品组成研究从10至100mM的组氨酸水平的范围：120mg/mLNivo、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mM Met、2,000U/mL rHuPH20、0.05％w/vPS80，pH 6.0。对于该应激条件，对于最终时间点，将在各种组氨酸水平下通过SEC确定的最终HMW制表于表87中。数据表明，组氨酸不仅是配制品中的缓冲剂，还在较高组氨酸水平下具有保护特性，从而增加蛋白质的稳定性。在低组氨酸浓度下，保护作用降至最低，尤其在低于20mM组氨酸时。此处的数据显示低于此20mM组氨酸水平的断崖。该断崖的确切位置是未知的。预期15mM-100mM的组氨酸浓度范围具有可比较的且良好的稳定性。

表87：研究2对于各种组氨酸水平，在每一种所研究的应激条件中，对于最后的时间点，通过SEC确定的高分子量物质。组成包括：120mg/mL Nivo、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mMMet、0.05％w/v PS80和2000U/mL rHuPH20，pH 6.0

蛋白质浓度的影响

所研究的蛋白质浓度范围为100至175mg/mL，其中心点配制品组成为20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mM Met、2,000U/mL rHuPH20、0.05％w/v PS80，pH 6.0。对于该应激条件，对于最终时间点，将在各种蛋白质浓度下通过SEC确定的最终HMW制表于表88中。更高的蛋白质浓度显示更高的HMW形成，并且与在更高蛋白质浓度下进行的其他研究一致。

表88：研究2对于各种蛋白质浓度，在每一种所研究的应激条件中，对于最后的时间点，通过SEC确定的高分子量物质。组成包括：20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mMMet、0.05％w/v PS80和2000U/mL rHuPH20，pH 6.0

蔗糖浓度的影响

所研究的蔗糖浓度范围为0至400mM，其中心点配制品组成为120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、50μM DTPA、5mM Met、2,000U/mL rHuPH20、0.05％w/v PS80，pH 6.0。对于该应激条件，对于最终时间点，将在各种蔗糖浓度下通过SEC确定的最终HMW制表于表89中。低蔗糖水平具有较低稳定性。升高的HMW值与10-400mM蔗糖的范围无关。

表89：研究2对于各种蔗糖浓度，在每一种所研究的应激条件中，对于最后的时间点，通过SEC确定的高分子量物质。组成包括：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、50μM DTPA、5mMMet、0.05％w/v PS80和2000U/mL rHuPH20，pH 6.0

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PS80浓度的影响

所研究PS80浓度的范围为0至0.10w/v PS80，其中心点配制品组成为120mg/mLNivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mM Met、2,000U/mL rHuPH20，pH 6.0。对于该应激条件，对于最终时间点，将在各种PS80浓度下通过SEC确定的最终HMW制表于表90中。所观察到的HMW值在所研究的配制品组成的范围内是恒定的。表90：研究2对于各种PS80浓度，在每一种所研究的应激条件中，对于最后的时间点，通过SEC确定的高分子量物质。组成包括：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mM Met和2000U/mL rHuPH20，pH 6.0

氮气顶空的影响

为了理解配制品的益处，使用氮气顶空确定其在氧化应激以及热应激期间对HMW的影响。所研究的两种配制品是目标中心点配制品条件：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mM Met、2,000U/mL rHuPH20、0.05％w/v PS80，pH 6.0；以及既没有DTPA也没有Met的条件：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、2,000U/mL rHuPH20、0.05％w/v PS80，pH 6.0。对于该应激条件，对于最终时间点，对于这两种配制品及氮气和空气顶空，将通过SEC确定的最终HMW制表于表91中。表91：研究2对于具有和没有氮气顶空的2种配制品，在每一种所研究的应激条件中，对于最后的时间点，通过SEC确定的高分子量物质。中心组成为120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mM Met、0.05％w/vPS80和2000U/mL rHuPH20，pH 6.0。0DTPA 0Met是指从中心点配制品去除两种抗氧化剂(DTPA和Met)。

数据显示具有DTPA和Met二者的中心点配制品相对于既没有DPTA也没有Met的组成的明显益处。在未添加抗氧化剂(牺牲剂和螯合剂)的情形中，具有氮气顶空存在益处。有趣的表现是中心点配制品在RT/RL条件下的表现的轻微差异。此处，氮气顶空有助于减少HMW形成。然而，在MPL条件下，在螯合剂和牺牲剂二者都存在时，氮气顶空不影响HMW形成。与既没有牺牲也没有螯合剂的情况相比，含有牺牲剂和螯合剂二者的配制品能够防范来自弱光(3天)、过氧化物和金属的氧化应激所致的HMW形成。

统计模型：用于pH 6的50μM DTPA浓度配制品的最终时间点

评价统计模型的总％HMW。由于在大多数应激条件中观察到的微小/可忽略不计的作用，仅开发用于应激条件子集的统计模型。还探索各种混合模型(未显示)，假定用于％HMW与时间(天)的关系的线性模型。由于设计限制，在12周，对于所述应激条件，对于关键比较，用于估计大约0.15％至0.25％平均置信区间的配制品间和配制品内差异性以及％HMW均方差(RMSE)的有限数量的自由度是基本上重叠的。对于两种关键配制品比较(上文)，来自第一研究的结果估计平均％HMW差异为0.125％。所有分析都使用JMP 15.2.0进行。

对25℃、35℃和MPL条件的密切评价提供这三种应激条件在至少最长时间点中在pH 6下的否-是(no-yes)DTPA有益作用的薄弱至明显证据。此外，对于无DTPA pH 6配制品，观察到0-5mM否-是甲硫氨酸作用。为了简化结果的呈现，开发仅在最后测量的时间点这三种应激条件中的每一种的统计模型。即使在受限于仅pH 6配制品时，也观察到在各种统计模型下大约0.15％至0.25％的％HMW RMSE。为了进一步减少对可能不适当的经验模型的需要，仅概述在50μM DTPA下的统计学结果。模型复杂性和/或非线性(例如，由于包括无DTPA样品所致)可能增加指定错误或指定不足的模型的残余方差。

图20显示在具有平滑曲线趋势估计的三种最后取样的应激条件下，SEC％HMW与甲硫氨酸浓度的关系的图形。

对于35℃ 3个月样品，相对于残余信号的重复差异性大。对于25℃-6个月测量，仅获得三个不同的值。对于这两种热应激条件，极小或无(little-or-no)趋势是明显的。对于组合的氧化应激-MPL条件，在3个月时，近线性趋势是最明显的。

估计每种条件的简单线性回归以评价所观察到的关系的强度(图21A-图21C)。

只有组合的氧化应激条件(MPL)线性回归是显著的(p为约0.0088)。这些数据表明对于此氧化应激条件，递增的甲硫氨酸浓度在50μM DTPA存在下的明显益处。未检测到缺少拟合的模型(还以改进的拟合估计曲线模型，未显示)并且在所有三种回归中，平均HMW％RMSE为大约0.06％至0.08％。对于50μM DTPA-0mM甲硫氨酸配制品，预测的在3个月的平均％HMW为1.73％(95％置信区间1.62-1.83)；对应的50μM DTPA-5mM甲硫氨酸估计值是1.63％(95％置信区间1.55-1.71)。这些估计值之间的平均差异大致等于在第一研究(上文)中在MPL氧化应激条件下在3个月在相同的两种配制品之间观察到的0.125％平均差异。

电荷变体

使用iCIEF评估电荷变体。详细研究专注于具有两种抗氧化剂的益处的样品子集以评价电荷变体对Nivo的影响。所测试的样品是针对MPL氧化应激条件的3M时间点和35℃热应激的3M时间点。结果图示于图22A-图22B中。

对于没有抗氧化剂(无)的条件，％酸性物质是最高的。仅甲硫氨酸的保护弱于仅具有DTPA或同时具有DTPA和甲硫氨酸二者。在储存于35℃条件时，在仅具有DTPA的配制品与具有DTPA和Met二者的配制品之间没有差异。在MPL应激下3个月，在3个月时间点可以观察到微小益处。

CE-SDS

使用CE-SDS来测量Nivo的修剪(clipped)种类。详细研究专注于具有两种抗氧化剂的益处的样品子集以评价所述配制品对防止Nivo氧化的影响。所测试的样品是针对MPL氧化应激条件的3M时间点和35℃ 3M时间点。将主峰面积％的结果制表于表92中。相对于初始(T0)样品，在样品之间未检测到主峰面积的显著差异。在所研究的配制品之间，未检测到在所研究的研究条件中LMW物质形成的变化。

表92：研究2在MPL条件和35℃应激下随时间而变的CE-SDS主峰面积百分比。对于具有DTPA和Met的配制品以及对于仅具有DTPA的样品，制备复份样品。配制品的DTPA浓度为50μM且Met浓度为5mM。所有配制品还含有120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、0.05％w/v PS80、2,000U/mL rHuPH20，pH 6.0

酶活性

测量酶活性以确定rHuPH20酶的稳定性。详细研究专注于具有两种抗氧化剂的益处的样品子集以评价所述配制品对防止酶氧化(主要降解机制)的影响。所测试的样品是针对MPL氧化应激条件的3M时间点和35℃ 3M时间点。结果图示于图23A-图23B中。

对于没有抗氧化剂(无)的条件，酶降解是最高的。仅甲硫氨酸的保护弱于仅具有DTPA。具有DTPA和甲硫氨酸二者提供最佳保护。查看MPL应激条件时，所述益处更明显，但是在35℃与MPL条件二者之间观察到一致的趋势。这些结果与在上文研究1中观察到的一致。

PS80稳定性

测量PS80稳定性以确定关键赋形剂PS80的稳定性。详细研究专注于具有两种抗氧化剂的益处的样品子集以评价所述配制品对防止PS80氧化的影响。所测试的样品是针对MPL氧化应激条件的3M时间点和35℃ 3M时间点。结果图示于图24A-图24B中。

在MPL应激条件下，对于没有DTPA的条件(数据未显示)，PS80降解高并且PS80水平下降至零。对于35℃条件在3M时间点，可以观察到无与仅Met之间的差异。对于没有抗氧化剂的条件(无)，PS80降解动力学是最快的，其次是仅甲硫氨酸的条件。在仅具有DTPA的配制品与具有DTPA和甲硫氨酸二者的配制品之间，MPL和35℃应激条件二者显示可比较的对PS80的保护。从PS80稳定性角度，关键特征是包括DTPA。这些结果与在研究1中观察到的一致。

配制品范围和替代性赋形剂

研究2被设置为确定影响和主要通过SEC观察到配制品组成的益处的范围。仅用热应激(5℃、25℃、35℃)或用热应激和氧化应激(MPL、RT/RL)对配制品施加应激。

基于此研究，维持稳定性最佳的配制品组成范围如下：pH：5.2-6.5His；组氨酸：15-100mM；DTPA：10-200μM(Alt：100μM EDTA)；Met：1-20mM(Alt：10mM Trp)；rHuPH20：0-5,000U/mL；PS80：0.01％-0.1％w/v(Alt：PS20 0.05％w/v和泊洛沙姆0.2mg/mL)；糖：10-400mM蔗糖；以及蛋白质：100-175mg/mL。

中心点配制品为：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、5mM Met、50μM DTPA、0.05％w/v聚山梨酯80，pH 6.0，以及2,000U/mL rHuPH20。

组氨酸缓冲液在配制品中至关重要，使用琥珀酸盐作为缓冲液的具有相同pH的配制品未显示足够稳定性(表91)。组氨酸具有稳定作用，其在更高浓度下显示增加的稳定性。在此研究中，研究高达100mM组氨酸(表87)，但是预期更高的组氨酸浓度也是稳定的。在低组氨酸浓度下，稳定性下降。特别地，在小于10mM的组氨酸浓度下，％HMW增加。在15-100mM之间的范围在使HMW物质形成最小化方面至关重要。

pH范围也至关重要，超过pH 6.5的更高pH显示关于稳定性的HMW增加(表85)。

不存在蔗糖的Nivo导致HMW形成的水平略微更高(表89)。在10-400mM之间的蔗糖显示良好稳定性。

此处研究的在0-0.1％之间的PS80水平防止Nivo发生HMW形成(表90)。替代性表面活性剂：PS20(0.05％w/v)和泊洛沙姆(0.2mg/mL)显示对Nivo抵抗HMW形成的良好保护(表81)。

范围在0至5,000U/mL之间的酶的添加不影响Nivo的稳定性(表80)。

此报告显示对两种抗氧化剂的需要。除了螯合剂(DTPA)外，还需要一种牺牲剂(Met)。特别地，这两种抗氧化剂的表现优于其替代性赋形剂(表82)。为了确认所选赋形剂的优越性，已经以更高浓度测试替代性氧化剂的表现。在两种RT/RL条件下以及在MPL应激条件下，用10mM Trp替代5mM Met导致更高的HMW。用100μM EDTA替代50μM DTPA在RT/RL条件下的表现是可比较的，但是在加速热条件下和在MPL应激条件下显示更高HMW物质形成。组合的配制品的氧化保护不需要氮气顶空来防范MPL应激(表91)。

在10-200μM之间的DTPA水平已经显示可比较的稳定性(表83)。具有10μM最低浓度的DTPA是至关重要的，但是更高水平的DTPA不会增加Nivo的稳定性。

Met的增加已经在1-20mM水平范围内显示可接受的稳定性(表84)。对于Met的情形，构建统计模型，并且对于MPL应激条件，发现线性回归是显著的(上文)。这显示，具有Met存在明显益处，并且更高浓度的Met对于抵抗MPL应激是有利的。

排名排序

具有两种抗氧化剂的益处通过监测以下来证实：Nivo的稳定性(通过SEC和iCIEF确定)、rHuPH20的稳定性(通过查看酶活性)以及PS80的稳定性(通过查看PS80水平)。这部分研究专注于集中于对两种抗氧化剂(二种相比于仅一种相比于无)的需要的样品子集。对于这些质量属性中的每一种，将从最佳配制品至最差(顶部至底部)配制品排序的配制品表现和排名制表于表93中。

表93：研究2-能够区分配制品的所研究的质量属性以及这些配制品的排名

通过SEC确定的Nivo稳定性显示响应于氧化应激(MPL)的HMW增加。通过抗氧化剂的存在使HMW的增加降至最低。Met与DTPA的组合显示比仅DTPA更高的稳定性，仅DTPA胜过Met，Met胜过既没有DTPA也没有Met的配制品。这些结果与研究1一致。

电荷变体(上文)显示在没有DTPA也没有Met的情况下，％酸性物质增加是最高的。对于热(35℃)和氧化(MPL)应激条件二者，仅具有Met显示略微更慢的增加速率。在热应激条件下，具有仅DTPA与具有DTPA和Met二者是可比较的；但是，在MPL条件下，相比于仅DTPA，具有二者时观察到微小益处。

rHuPH20酶活性响应于热应激和氧化应激二者而降低。对于氧化应激(MPL)可以最佳地观察到配制品组成益处。在存在Met和DTPA二者的情况下，酶活性的保存最佳。相对于仅DTPA，存在酶活性的可测量的下降，仅DTPA相对于仅Met具有可测量的下降，仅Met相对于没有Met也没有DTPA具有可测量的下降。这种表现对于热应激(35℃)条件是一致的，但是在仅DTPA与二者(DTPA和Met)之间的差异更小。

以各种配制品组合调查氧化应激(MPL-除了在30℃的热应激外，金属、过氧化物和3天光照的组合)的关键结果表明，在具有50μM DTPA和5mM Met二者的配制品中存在益处。具有这些抗氧化剂中的仅一种的稳定性不如具有螯合剂和牺牲抗氧化剂二者。这些结果与研究1结果是一致的。

结果-研究3

在此研究中，目标是理解分子在不同包装部件(载药针筒和贴片泵)中的表现。另外，存在与初始配制品组成的几种配制品组成差异，以确定可以观察到这种配制品的益处的范围。这些包括：

i.15-100mM的组氨酸范围。研究2显示在10mM的低组氨酸浓度下HMW增加。

ii.从0-10,000U/mL的更宽的酶水平，相比于研究2仅覆盖最高5,000U/mL。

iii.从100-200mg/mL的更宽的蛋白质浓度。研究2覆盖最高150mg/mL。

此研究还使用这些确认在不存在酶时的情形中的配制品范围，配制品：pH：5.2-6.5His；组氨酸：15-100mM；DTPA：10-200μM(Alt：100μM EDTA)；Met：1-20mM(Alt：10mMTryp)；PS80：0.01％-0.1％w/v(Alt：PS20和泊洛沙姆0.2mg/mL)；糖：10-400mM蔗糖(Alt：10％山梨醇和海藻糖)；蛋白质：100-200mg/mL；以及主要包装：小瓶、PFS和贴片泵。

注意，在此研究中，将山梨醇和海藻糖正确地添加于在研究2中失去的TFF缓冲液中。由于所述酶对HMW形成没有影响，这些结果将被用于理解使用这些替代性糖的表现，对于酶也一样。

这导致46种配制品，其中类似于研究2，每次单变量研究配制品，所有其他因素处于目标组成。在此研究中，主要以120mg/mL研究小瓶和贴片泵，并且PFS处于150mg/mL Nivo目标浓度。目标配制品组成为：20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mM Met、2,000U/mLrHuPH20、0.05％w/v PS80，pH 6.0，具有空气顶空。注意，在用于中心点条件和具有50μMDTPA且无Met的条件的设计中，存在复份独立配制品制剂。

在此研究中，使用SEC调查Nivo的稳定性，并且由于缺少来自研究3的微粒数据，在选择的时间点(MPL 3M、RT30 3M、5C 6M和25C 6M)进行微粒分析。

尺寸排阻色谱

尺寸排阻色谱是用于监测纳武单抗的稳定性的主要工具。

再现性和酶影响

在用于中心点条件和0Met条件的设计中包括复份和独立配制品制剂，如对于研究2所进行的；但是对于研究3，配制品未包括酶。对于研究2和研究3二者，将两种配制品按应激和时间点通过SEC确定的最终HMW制表于表94中。此数据显示在研究2与研究3之间以及在研究内的独立制剂之间的再现性。所述数据始终在彼此的0.1％ HMW内。

表94：研究2和研究3-对于复份样品，在每一种所研究的应激条件中，对于最后的时间点，通过SEC确定的高分子量物质-中心和0Met配制品。中心配制品组成：120mg/mLNivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mM Met、0.05％w/v PS80，pH 6.0。0Met组成：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、0.05％w/vPS80，pH 6.0。

此研究以及研究2(表80)显示，在所研究的全部酶水平(0-10,000U/mL)中，具有或没有酶对Nivo稳定性没有影响(表95)。在整个研究3期间，存在具有酶和没有酶的所测试复份组成。这些结果非常一致(表95、表96、表97、表98、表99、表100、图25A和图25B)，并允许我们自信地在具有和没有酶的条件之间转译知识(learning)。

表95：研究3-对于不同酶水平，在每一种所研究的应激条件中，对于最后的时间点，通过SEC确定的高分子量物质。配制品组成：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mM Met、0.05％w/v PS80，pH 6.0。

主要包装

此研究评价三种不同类型的主要包装：小瓶、载药针筒和贴片泵。在如下中心点配制品组成中，对于120mg/mL的蛋白质浓度，各种主要包装的数据显示于表96中：20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mM Met、0.05％w/v PS80，pH 6.0。不存在由于主要包装差异所致的HMW形成的差异。

表96：研究3-在120mg/mL Nivo下，对于不同的主要包装，在每一种所研究的应激条件中，对于最后的时间点，通过SEC确定的高分子量物质。配制品组成：20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mM Met、0.05％w/v PS80，pH 6.0

*由于贴片泵的数量有限，贴片泵可获得的数据也是有限的。

为了理解是否由于PFS组分而存在任何易感性，测试两种额外条件：一种具有1ppm钨(W)加标，并以在标准BD Neopack针筒中发现的硅油的两倍填充至BD Neopack针筒中。将该应激条件在最后时间点的高分子量值制表于表97中，在150mg/mL浓度下，也具有20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mM Met、0.05％w/v PS80，pH 6.0。未检测到由于钨或硅油所致的HMW增加。

表97：研究3-在150mg/mL Nivo下，对于PFS组分的使用，在每一种所研究的应激条件中，对于最后的时间点，通过SEC确定的高分子量物质。配制品组成：20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mM Met、0.05％w/v PS80，pH 6.0

蛋白质浓度

主要包装和酶水平不影响HMW形成，如上文所讨论。在从100至200mg/mL的蛋白质浓度范围下，在中心点配制品组成下，将在包装和酶水平之间的HMW形成一起制表于表98中。所述中心点配制品组成包括20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mM Met、0.05％w/vPS80，pH 6.0。更高的蛋白质浓度显示更高的HMW形成，并且这与在更高蛋白质浓度下的其他研究和来自研究2的数据一致(表88)。

表98：研究3-对于各种蛋白质浓度，在每一种所研究的应激条件中，对于最后的时间点，通过SEC确定的高分子量物质。配制品组成：20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mMMet、0.05％w/v PS80，pH 6.0

替代性赋形剂

在研究3中，作为250mM(8.6％)蔗糖的替代性糖，研究两种替代性糖：10％山梨醇和10％海藻糖。研究所述结果以及使用0.05％w/v PS80、0.05％w/v PS20和0.2mg/mL泊洛沙姆的替代性表面活性剂的结果并将其制表于表99中。这些结果针对研究2与研究3制表，其中此处的差异是研究2具有2,000U/mL rHuPH20并且研究3没有rHuPH20。其他赋形剂处于目标组成：目标配制品组成为120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mMMet、0.05％w/v PS80，pH 6.0。在具有用于替代性赋形剂的海藻糖和山梨醇的配制品的研究2中，在样品制备期间存在误差，因此不呈现具有酶的数据。

表99：研究2和研究3-对于替代性赋形剂，在每一种所研究的应激条件中，对于最后的时间点，通过SEC确定的高分子量物质。研究2条件具有2,000U/mL rHuPH20，研究3具有0U/mL rHuPH20。中心点组成：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、50μM DTPA、5mMMet、0.05％w/v PS80，pH 6.0。

作为替代性赋形剂，可以通过PS20或泊洛沙姆替代PS80且对稳定性的影响极小。这些结果在两项研究之间是一致的。

具有组氨酸作为缓冲剂对于Nivo稳定性是至关重要的，并且无法用琥珀酸盐替代。在所研究的所有热应激条件(5℃ 6M、25℃ 6M和35℃ 3M)中，使用琥珀酸盐缓冲液时存在HMW物质的显著增加，并且这在两项研究之间仍是一致的。

糖数据表明，蔗糖具有相对于山梨醇或海藻糖更优秀的稳定作用。

作为50μM DTPA的替代性螯合剂，如在研究2中所进行来研究100μM EDTA。DTPA是更好的螯合剂，因此此处研究更高水平的EDTA。类似地，作为5mM甲硫氨酸的替代性牺牲剂，研究10mM色氨酸。由于螯合剂和牺牲氧化剂的添加可能影响针对氧化的保护，在热应激和氧化应激条件二者下研究这些螯合剂和牺牲氧化剂。对于研究2和研究3，对于该应激条件，对于最终时间点，将使用这些替代性赋形剂通过SEC确定的最终HMW制表于表100中，其中此处的差异是研究2具有2,000U/mL rHuPH20且研究3没有rHuPH20。配制品组成包括120mg/mLNivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、0.05％w/v PS80，pH 6.0。

两项研究的结果是彼此可比较的。例外是具有0DTPA和0Met的条件，其中在此自催化HWM增加多快地发生方面存在更高差异性。制表的在MPL应激下3个月后的％HMW值明确显示在两项研究之间具有DTPA的独特益处，并且其为与EDTA相比更优秀的螯合剂。类似地，数据显示，Met优于Trp。在用5mM Met和50μM DTPA配制时，对％HMW增加的控制最佳。这些结果在三项研究之间是一致的。

这些研究显示与Met和DTPA二者组合的组氨酸和蔗糖对Nivo稳定性的独特有益作用。

表100：研究2和研究3-对于DTPA和Met的替代性赋形剂，在每一种所研究的应激条件中，对于最后的时间点，通过SEC确定的高分子量物质。组成包括：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、0.05％w/v PS80，pH 6.0。研究2条件具有2,000U/mL rHuPH20，研究3具有0U/mL rHuPH20。

赋形剂范围

与研究2类似，在研究3中研究各种赋形剂范围。这些结果是一致的并且符合研究2结果，如通过研究2中的关键发现所证实，其中Met浓度的影响随着浓度增加而具有有益作用。所有三项研究中的结果显示于图25A中。研究1仅评价0和5mM Met值，且研究2专注于具有酶的条件，且研究3专注于没有酶的条件。在整个此实施例中，已经证实，所述酶不影响Nivo稳定性，并且此处再次证实了这个发现。

所有3项研究的回归图显示于图25B中。所述三项研究彼此非常充分地重叠。在如下中心点组成，0至5mM甲硫氨酸作用的线性逼近为0.19％ HMW：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、50μM DTPA、250mM蔗糖、0.05％w/v PS80，pH 6.0。

在研究2和研究3中，维持稳定性最佳的配制品组成范围如下：pH：5.2-6.5His；组氨酸：15-100mM；DTPA：10-200μM(Alt：100μM EDTA)；Met：1-20mM(Alt：10mM Trp)；rHuPH20：0-5,000U/mL；PS80：0.01％-0.1％w/v(Alt：PS20 0.05％w/v和泊洛沙姆0.2mg/mL)；糖：10-400mM蔗糖；蛋白质：100-175mg/mL；以及主要包装：小瓶、PFS、贴片泵。

中心点配制品为：120mg/mL Nivo、20mM组氨酸、250mM蔗糖、5mM Met、50μM DTPA、0.05％w/v聚山梨酯80，pH 6.0，及2,000U/mL rHuPH20。

此配制品的pH范围是至关重要的。超过pH 6.5，观察到HMW的增加，并且这在研究2和研究3二者中是一致的。基于数据建议更接近pH 6的配制。

组氨酸作为缓冲液在配制品中是至关重要的，并且具有稳定作用。来自研究2和研究3的数据是一致的。琥珀酸盐作为缓冲液未显示足够稳定性。更低的组氨酸浓度导致更高的HMW形成。接近15mM组氨酸水平，存在稳定性降低的断崖。在此研究中，研究高达100mM组氨酸，但是预期更高浓度是稳定的。

已经研究在0至10,000U/mL之间的酶范围，并且未影响Nivo的稳定性。这在研究2和研究3之间是一致的。

在0-0.1％w/v之间的PS80水平防止Nivo发生HMW形成。替代性表面活性剂PS20(0.05％w/v)和泊洛沙姆(0.2mg/mL)显示对Nivo抵抗HMW形成的良好保护。

蔗糖水平在10-400mM之间的Nivo显示良好稳定性。作为替代性赋形剂，在储存后，海藻糖和山梨醇显示如与蔗糖相比更高的HMW形成。

在所测试的小瓶、PFS和贴片泵之间，未观察到由于主要包装所致的对稳定性的影响。

浓度范围在10-200μM DTPA之间的DTPA显示相同的稳定性。即使以低10μM水平存在也足以保护Nivo。在研究2和研究3二者之间未观察到浓度依赖性。

增加的Met水平在1-20mM Met的范围内显示可接受的稳定性。所述结果在所述研究之间是一致的(图25B)。对于Met的情形，构建统计模型。对于MPL应激条件，发现线性回归对于研究2和研究3二者都是显著的。这显示，具有Met存在明显益处，并且更高浓度的Met对于抵抗MPL应激是有利的。

微粒

研究2未包括微粒分析。在研究3中，在选择的时间点(MPL 3M、RT30 3M、5℃ 6M和25℃ 6M)进行微粒分析。一个样品具有升高的微粒计数：已经用琥珀酸盐替代组氨酸作为缓冲液的样品，即配制品25。在25℃下6个月的HMW显示6527个颗粒/mL≥10μm。其余样品具有少于130个颗粒/mL≥10μm，远低于USP<788>颗粒规范限值。这些数据显示转换为琥珀酸盐作为缓冲剂的问题，即使所有其他配制品组分都存在。

结论-研究3

在研究3中，除了小瓶以外研究不同的包装部件(载药针筒和贴片泵)，并且确认它们与配制品表现良好。

所述研究的目标还在于理解维持稳定性最佳的完整范围。所发现的范围(从研究2和研究3的组合)如下：pH：5.2-6.5His；组氨酸：15-100mM；DTPA：10-200μM(Alt：100μMEDTA)；Met：1-20mM(Alt：10mM Trp)；rHuPH20：0-5,000U/mL；PS80：0.01％-0.1％w/v(Alt：PS20 0.05％w/v和泊洛沙姆0.2mg/mL)；糖：10-400mM蔗糖；蛋白质：100-175mg/mL；以及主要包装：小瓶、PFS、贴片泵。对于没有酶的样品，这些范围是相同的。

中心点配制品为：120mg/mL Nivo(对于小瓶)和150mg/mL Nivo(对于PFS)，都含有20mM组氨酸、250mM蔗糖、5mM Met、50μM DTPA、0.05％w/v聚山梨酯80，pH 6.0，以及2,000U/mL rHuPH20。

此配制品的pH范围是至关重要的。超过pH 6.5，观察到HMW的增加。组氨酸作为缓冲液在配制品中是至关重要的，并且具有稳定作用。更低的组氨酸浓度导致更高的HMW形成。接近15mM组氨酸水平，存在稳定性降低的断崖。在此研究中，研究高达100mM组氨酸，但是预期更高浓度是稳定的。DTPA的存在在维持Nivo稳定性方面是重要的，但是未观察到浓度依赖性。Met的增加显示对Nivo的更高保护。具有Met存在明显益处，并且更高浓度的Met对于抵抗MPL应激是有利的。

琥珀酸盐作为缓冲液未显示对Nivo的足够稳定性，既形成可溶性聚集体(通过SEC确定的HMW增加)也形成不溶性聚集体(通过MFI确定的颗粒)。作为蔗糖的替代性稳定剂，海藻糖和山梨醇在储存后显示更高的HMW形成。EDTA不如DTPA，并且Tryp不如Met，即使在更高浓度下。这些研究显示与Met和DTPA组合的组氨酸和蔗糖改进Nivo稳定性的独特有益作用。

实施例6-使用核磁共振(NMR)光谱法和分子动力学(MD)探测纳武单抗-赋形剂相互作用

已经进行NMR实验和计算建模以研究纳武单抗-赋形剂相互作用。两种方法都确认应存在优先的蛋白质-糖相互作用，并且显示蔗糖相对于甘露醇、海藻糖、甘氨酸、山梨醇或琥珀酸盐更强的结合表现。结果可以指示糖在蛋白质配制品中的作用的关键分子机制。

使用糖来稳定蛋白质配制品并防止蛋白质聚集体形成。此实施例的目标是使用核磁共振(NMR)与分子动力学(MD)方法的组合，更好地理解稳定化的机制，确定为什么一些糖的作用好于另一些，并且帮助指导配制品选择。使用STD(饱和转移差谱)NMR实验来测量蛋白质-配体相互作用和结合(参见Angulo J.等人,Chem.Eur.J.,16:7803-7812(2010)，通过引用以其整体并入本文)。

在NEO 700Bruker NMR光谱仪上使用ICONNMR中的NMR数据采集在283K下使用脉冲序列stddiff进行STD NMR实验。使用3-4.5秒的再循环延迟。对具有赋形剂甘氨酸、甘露醇、蔗糖、海藻糖、山梨醇和琥珀酸盐的纳武单抗样品(21.3mg/ml浓度)进行NMR实验以获取每种糖与纳武单抗的结合效率。以一系列赋形剂浓度进行实验，并且将不同光谱中积分峰的强度拟合至Michaelis-Menten方程中，以评估赋形剂与蛋白质之间的相互作用是否具有特异性。特异性相互作用产生不同光谱中信号的饱和效应。

分子动力学(MD)是在原子水平上模拟分子之间的相互作用的计算机方法。此处，模拟是含有一个纳武单抗Fab基团、组氨酸缓冲液(15mM当量)和赋形剂分子(大约190mM当量)的设置。在单独模拟中研究每种赋形剂分子。使用MOE 2019.0101软件(MolecularOperating Environment 2019.0101；Chemical Computing Group Inc.,Montreal,Canada,2017)设置模拟室，并且使用NAMD 2.12(Phillips,J.C.等人,J.Comp.Chem,26:1781-1802(2005))运行模拟。

通过首先计数在距Fab基团的任一原子的氢键距离(<2A)内有多少赋形剂分子来分析MD结果。为了区分赋形剂的紧密结合的相互作用位姿与更轻结合的相互作用位姿，进行聚类分析以将每种单独赋形剂的类似结合位姿分组，并且按模拟中处于那些位姿的频率进行排名。

STD NMR结果显示，相对于海藻糖、甘氨酸和甘露醇、山梨醇和琥珀酸盐，蔗糖具有最小Kd(解离常数)值，显示与纳武单抗mAb的最强相互作用(图26)。

图27显示在MD模拟的最终8ns期间，在纳武单抗Fab基团的内糖分子的平均数量。在不同赋形剂之间观察到显著差异，其中蔗糖分子的相互作用最多，且甘氨酸最少。相互作用的数量的总体趋势是：蔗糖>甘露醇＝海藻糖>甘氨酸。蔗糖分子的相互作用比甘氨酸更频繁超过五倍，并且比具有次多相互作用数量的甘露醇多约50％。定性地，这些结果与NMR结果一致，但是因为STD-NMR实验对结合强度敏感，而不只对相互作用敏感，在MD中使用聚类分析进一步探索相互作用强度。

图28A-图28C显示通过聚类分析针对每种赋形剂鉴定的独特结合位点的位置。在视觉上，赋形剂之间的差异是明显的，甘露醇(图28C)、海藻糖(图28E)和蔗糖(图28D)的结合位点的数量显著大于山梨醇(图28B)和甘氨酸(图28A)，与图27中的趋势相匹配。图29A-图29B显示针对每种赋形剂鉴定的独特位点的数量，其中图29A是弱-中结合位点，且图29B是强结合位点。仅蔗糖、海藻糖和山梨醇在模拟中具有强结合位点，其中海藻糖和山梨醇具有1个这样的位点，且蔗糖具有7个这样的位点。对这些位点的进一步分析已经显示，在这些强结合位姿中，在蛋白质与赋形剂分子之间形成3-4个氢键，从而验证这些位姿是非常有利的并且可能是通过STD-NMR结果鉴定的交换位点的良好候选者。应注意，强结合的海藻糖和山梨醇位点位于Fab的恒定结构域中并且靠近铰链区，在所述铰链区中可能存在另外的空间相互作用会阻止在完整mAb中的结合。

NMR结果表明，与甘氨酸、甘露醇、蔗糖、海藻糖、山梨醇和琥珀酸盐相比，仅蔗糖与纳武单抗进行强相互作用/结合。MD结果表明，所研究的所有糖都在一定程度上相互作用，偏好为：蔗糖>甘露醇≥海藻糖>甘氨酸>山梨醇。MD聚类分析显示，仅蔗糖和海藻糖具有强结合相互作用，所述相互作用通过与Fab上暴露的残基的非特异性和特异性相互作用加以稳定。仅对蔗糖的强结合位点的观察结果将NMR观察结果与MD结果相关联，因此蔗糖的差异性表现(Kamerzell,T.J.等人,Advanced Drug Delivery Reviews,63:1118-1159(2011))使其成为用于稳定蛋白质的更好的赋形剂。蔗糖结合位点的总体数量更大可以解释为什么蔗糖显示对所测试分子的最佳聚集抑制。

实施例7-对另外的透明质酸酶和纳武单抗的分析

纳武单抗皮下配制品包括透明质酸酶(rHuPH20)。在当前研究中，将评价纳武单抗与rHuPH20的替代性类似物的相容性。将替代性酶变体在如下当前配制品组成中以稳定状态放置(例如，在5℃、25℃或35℃)：120mg/mL纳武单抗，在20mM组氨酸(pH 6.0)、250mM蔗糖、0.05％聚山梨酯80、5mM甲硫氨酸、50μM喷替酸和2000U/mL rHuPH20中。

将评价与纳武单抗皮下配制品组合的rHuPH20的各种替代性类似物。将考虑的替代性类似物的例子包括但不限于具有选自SEQ ID NO:5-264所示氨基酸序列的氨基酸序列的酶。例如，将具有SEQ ID NO:92所示的氨基酸序列的rHuPH20的替代性类似物在如下当前配制品组成中以稳定状态放置：120mg/mL纳武单抗，在20mM组氨酸(pH 6.0)、250mM蔗糖、0.05％聚山梨酯80、5mM甲硫氨酸、50μM喷替酸和rHuPH20(例如，2000U/mL)中；其中所述rHuPH20具有SEQ ID NO:92所示的氨基酸序列。在另一个例子中，将具有SEQ ID NO:264所示的氨基酸序列的rHuPH20的替代性类似物在如下当前配制品组成中以稳定状态放置：120mg/mL纳武单抗，在20mM组氨酸(pH 6.0)、250mM蔗糖、0.05％聚山梨酯80、5mM甲硫氨酸、50μM喷替酸和rHuPH20(例如，2000U/mL)中；其中所述rHuPH20具有SEQ ID NO:264所示的氨基酸序列。

将针对每个时间点测量以下参数：pH、蛋白质浓度和SEC。将测试所选择的样品的微粒物质(使用HIAC)和酶活性。将保持足够样品用于PS-80分析以及通过CD-SDS和iCiEF进行的分析，并且如果需要将进行测试。对于每个时间点，将制备6mL以供分析。

将用3mL的每个样品填充总计22个小瓶以覆盖11个时间点。这将通过以下方式来进行：用80mL配制品制备样品以补偿在使用0.22μM PES过滤器过滤期间的损失。所过滤的药物产品将被填充至去热原的3cc小瓶(Schott 1型玻璃)中并用高压蒸汽处理的13mmDaikyo塞(D-21-7S，Fluorotec包被的血清)加塞。小瓶将被旋紧并以直立位置稳定放置。

序列表

<110> 百时美施贵宝公司

奥洛兹美公司

<120> 抗体组合物及其使用方法

<130> 3338.191PC03

<150> US 63/131,234

<151> 2020-12-28

<150> US 63/131,244

<151> 2020-12-28

<150> US 63/150,465

<151> 2021-02-17

<160> 264

<170> PatentIn 3.5版

<210> 1

<211> 509

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> rHuPH20

<400> 1

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1 5 10 15

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Leu Val Tyr Thr Phe Gly Glu Thr Val Ala Leu Gly Ala Ser Gly Ile

325 330 335

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Ser Ile Leu Phe Leu Ile Ile Ser Ser Val Ala Ser Leu

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<210> 2

<211> 113

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗PD-1抗体重链可变区

<400> 2

Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg

1 5 10 15

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Ser

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<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 抗PD-1抗体轻链可变区

<400> 3

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Tyr

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<211> 509

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> rHuPH20

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1 5 10 15

Ser Ser Gly Val Ser Gln Ile Val Phe Thr Phe Leu Leu Ile Pro Cys

20 25 30

Cys Leu Thr Leu Asn Phe Arg Ala Pro Pro Val Ile Pro Asn Val Pro

35 40 45

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50 55 60

Asp Glu Pro Leu Asp Met Ser Leu Phe Ser Phe Ile Gly Ser Pro Arg

65 70 75 80

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<210> 5

<211> 447

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 5

Leu Asn Phe Arg Ala Pro Pro Val Ile Pro Asn Val Pro Phe Leu Trp

1 5 10 15

Ala Trp Asn Ala Pro Ser Glu Phe Cys Leu Gly Lys Phe Asp Glu Pro

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Gly Lys Asp Phe Leu Val Glu Thr Ile Lys Leu Gly Lys Leu Leu Arg

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<210> 6

<211> 446

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 6

Leu Asn Phe Arg Ala Pro Pro Val Ile Pro Asn Val Pro Phe Leu Trp

1 5 10 15

Ala Trp Asn Ala Pro Ser Glu Phe Cys Leu Gly Lys Phe Asp Glu Pro

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Leu Asp Met Ser Leu Phe Ser Phe Ile Gly Ser Pro Arg Ile Asn Ala

35 40 45

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Glu Glu Trp Arg Pro Thr Trp Ala Arg Asn Trp Lys Pro Lys Asp Val

115 120 125

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130 135 140

Ser Leu Thr Glu Ala Thr Glu Lys Ala Lys Gln Glu Phe Glu Lys Ala

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Gly Lys Asp Phe Leu Val Glu Thr Ile Lys Leu Gly Lys Leu Leu Arg

165 170 175

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Leu Tyr Val Arg Asn Arg Val Arg Glu Ala Ile Arg Val Ser Lys Ile

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260 265 270

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290 295 300

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Asn Tyr Met Glu Thr Ile Leu Asn Pro Tyr Ile Ile Asn Val Thr Leu

325 330 335

Ala Ala Lys Met Cys Ser Gln Val Leu Cys Gln Glu Gln Gly Val Cys

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Asn Phe Ala Ile Gln Leu Glu Lys Gly Gly Lys Phe Thr Val Arg Gly

370 375 380

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405 410 415

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435 440 445

<210> 7

<211> 445

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 7

Leu Asn Phe Arg Ala Pro Pro Val Ile Pro Asn Val Pro Phe Leu Trp

1 5 10 15

Ala Trp Asn Ala Pro Ser Glu Phe Cys Leu Gly Lys Phe Asp Glu Pro

20 25 30

Leu Asp Met Ser Leu Phe Ser Phe Ile Gly Ser Pro Arg Ile Asn Ala

35 40 45

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50 55 60

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65 70 75 80

Gln Lys Ile Ser Leu Gln Asp His Leu Asp Lys Ala Lys Lys Asp Ile

85 90 95

Thr Phe Tyr Met Pro Val Asp Asn Leu Gly Met Ala Val Ile Asp Trp

100 105 110

Glu Glu Trp Arg Pro Thr Trp Ala Arg Asn Trp Lys Pro Lys Asp Val

115 120 125

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130 135 140

Ser Leu Thr Glu Ala Thr Glu Lys Ala Lys Gln Glu Phe Glu Lys Ala

145 150 155 160

Gly Lys Asp Phe Leu Val Glu Thr Ile Lys Leu Gly Lys Leu Leu Arg

165 170 175

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180 185 190

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<223> 透明质酸酶变体

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<223> 透明质酸酶变体

<400> 15

Leu Asn Phe Arg Ala Pro Pro Val Ile Pro Asn Val Pro Phe Leu Trp

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<210> 23

<211> 477

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体

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<400> 24

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<220>

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<400> 31

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<211> 437

<212> PRT

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<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 32

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<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 74

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1 5 10 15

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20 25 30

Ser Phe Ile Gly Ser Pro Arg Ile Asn Ala Thr Gly Gln Gly Val Thr

35 40 45

Ile Phe Tyr Val Asp Arg Leu Gly Tyr Tyr Pro Tyr Ile Asp Ser Ile

50 55 60

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65 70 75 80

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Ser Cys Lys Glu Lys Ala Asp Val Lys Asp Thr Asp Ala Val Asp Val

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Cys Ile Ala Asp Gly Val Cys Ile Asp Ala Phe Leu Lys Pro Pro Met

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Glu Thr Glu Glu Pro Gln Ile Phe Tyr Asn Ala Ser Pro Ser Thr Leu

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Ser

<210> 75

<211> 432

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 75

Leu Asn Phe Arg Ala Pro Pro Val Ile Pro Asn Val Pro Phe Leu Trp

1 5 10 15

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420 425 430

<210> 76

<211> 429

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 76

Leu Asn Phe Arg Ala Pro Pro Val Ile Pro Asn Val Pro Phe Leu Trp

1 5 10 15

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<210> 77

<211> 426

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 77

Leu Asn Phe Arg Ala Pro Pro Val Ile Pro Asn Val Pro Phe Leu Trp

1 5 10 15

Ala Trp Asn Ala Pro Ser Glu Phe Cys Leu Gly Lys Phe Asp Glu Pro

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Leu Asp Met Ser Leu Phe Ser Phe Ile Gly Ser Pro Arg Ile Asn Ala

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Gly Lys Asp Phe Leu Val Glu Thr Ile Lys Leu Gly Lys Leu Leu Arg

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<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 78

Leu Asn Phe Arg Ala Pro Pro Val Ile Pro Asn Val Pro Phe Leu Trp

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<210> 79

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<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 79

Leu Asn Phe Arg Ala Pro Pro Val Ile Pro Asn Val Pro Phe Leu Trp

1 5 10 15

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420

<210> 80

<211> 433

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 80

Phe Arg Ala Pro Pro Val Ile Pro Asn Val Pro Phe Leu Trp Ala Trp

1 5 10 15

Asn Ala Pro Ser Glu Phe Cys Leu Gly Lys Phe Asp Glu Pro Leu Asp

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Val Arg Asn Arg Val Arg Glu Ala Ile Arg Val Ser Lys Ile Pro Asp

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Lys

<210> 81

<211> 435

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 81

Phe Arg Ala Pro Pro Val Ile Pro Asn Val Pro Phe Leu Trp Ala Trp

1 5 10 15

Asn Ala Pro Ser Glu Phe Cys Leu Gly Lys Phe Asp Glu Pro Leu Asp

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Met Ser Leu Phe Ser Phe Ile Gly Ser Pro Arg Ile Asn Ala Thr Gly

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Asn Arg Ser Ile Glu Leu Val Gln Gln Gln Asn Val Gln Leu Ser Leu

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Asp Phe Leu Val Glu Thr Ile Lys Leu Gly Lys Leu Leu Arg Pro Asn

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Ser Ile Tyr Leu Asn Thr Gln Gln Ser Pro Val Ala Ala Thr Leu Tyr

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Val Arg Asn Arg Val Arg Glu Ala Ile Arg Val Ser Lys Ile Pro Asp

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Trp Glu Asn Thr Arg Thr Lys Glu Ser Cys Gln Ala Ile Lys Glu Tyr

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Met Asp Thr Thr Leu Asn Pro Tyr Ile Ile Asn Val Thr Leu Ala Ala

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Lys Met Cys Ser Gln Val Leu Cys Gln Glu Gln Gly Val Cys Ile Arg

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405 410 415

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Lys Pro Pro

435

<210> 82

<211> 436

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 82

Phe Arg Ala Pro Pro Val Ile Pro Asn Val Pro Phe Leu Trp Ala Trp

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Ile Ser Leu Gln Asp His Leu Asp Lys Ala Lys Lys Asp Ile Thr Phe

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Trp Arg Pro Thr Trp Ala Arg Asn Trp Lys Pro Lys Asp Val Tyr Lys

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Asn Arg Ser Ile Glu Leu Val Gln Gln Gln Asn Val Gln Leu Ser Leu

130 135 140

Thr Glu Ala Thr Glu Lys Ala Lys Gln Glu Phe Glu Lys Ala Gly Lys

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Asp Phe Leu Val Glu Thr Ile Lys Leu Gly Lys Leu Leu Arg Pro Asn

165 170 175

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Lys Lys Pro Gly Tyr Asn Gly Ser Cys Phe Asn Val Glu Ile Lys Arg

195 200 205

Asn Asp Asp Leu Ser Trp Leu Trp Asn Glu Ser Thr Ala Leu Tyr Pro

210 215 220

Ser Ile Tyr Leu Asn Thr Gln Gln Ser Pro Val Ala Ala Thr Leu Tyr

225 230 235 240

Val Arg Asn Arg Val Arg Glu Ala Ile Arg Val Ser Lys Ile Pro Asp

245 250 255

Ala Lys Ser Pro Leu Pro Val Phe Ala Tyr Thr Arg Ile Val Phe Thr

260 265 270

Asp Gln Val Leu Lys Phe Leu Ser Gln Asp Glu Leu Val Tyr Thr Phe

275 280 285

Gly Glu Thr Val Ala Leu Gly Ala Ser Gly Ile Val Ile Trp Gly Thr

290 295 300

Trp Glu Asn Thr Arg Thr Lys Glu Ser Cys Gln Ala Ile Lys Glu Tyr

305 310 315 320

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<220>

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<220>

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450

<210> 88

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<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 88

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435 440 445

Leu Ser

450

<210> 89

<211> 428

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 89

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<220>

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<220>

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<400> 107

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<220>

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<211> 431

<212> PRT

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<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 175

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<210> 177

<211> 431

<212> PRT

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<220>

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<400> 177

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Val Arg Asn Arg Val Arg Glu Ala Ile Arg Val Ser Lys Ile Pro Asp

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<220>

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<211> 431

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 184

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<220>

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<220>

<223> 透明质酸酶变体

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<220>

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<211> 431

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<220>

<223> 透明质酸酶变体

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<220>

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<220>

<223> 透明质酸酶变体

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<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体

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<211> 431

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<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 255

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Asn Arg Ser Ile Glu Leu Val Gln Gln Gln Asn Val Gln Leu Ser Met

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Thr Glu Ala Thr Asp Lys Ala Lys Gln Glu Phe Glu Lys Ala Gly Lys

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Asp Phe Leu Val Glu Thr Ile Lys Leu Gly Lys Leu Leu Arg Pro Asn

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195 200 205

Asn Asp Asp Leu Ser Trp Leu Trp Asn Glu Ser Thr Ala Leu Tyr Pro

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Ser Ile Tyr Leu Asn Thr Ala Gln Ser Pro Val Ala Ala Thr Leu Tyr

225 230 235 240

Val Arg Asn Arg Val Arg Glu Ala Ile Arg Val Ser Lys Leu Pro Asp

245 250 255

Ala Lys Ser Pro Leu Pro Val Phe Ala Tyr Thr Arg Ile Val Phe Thr

260 265 270

Asp Gln Ala Leu Lys Phe Leu Ser Gln Asp Glu Leu Val Tyr Thr Phe

275 280 285

Gly Glu Thr Val Ala Leu Gly Ala Ser Gly Ile Val Ile Trp Gly Ser

290 295 300

Trp Glu Asn Thr Arg Thr Lys Glu Ser Cys Gln Ala Ile Lys Glu Tyr

305 310 315 320

Met Asp Thr Thr Leu Asn Pro Tyr Ile Ile Asn Val Thr Leu Ala Ala

325 330 335

Lys Met Cys Ser Gln Val Leu Cys Gln Glu Gln Gly Val Cys Ile Arg

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Lys Asn Trp Asn Ser Ser Asp Tyr Leu His Leu Asn Pro Asp Asn Phe

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Ala Ile Gln Leu Glu Lys Gly Gly Lys Phe Thr Val Arg Gly Lys Pro

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Tyr Ser Thr Leu Ser Cys Lys Glu Lys Ala Asp Val Lys Asp Asp Asp

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Ala Val Asp Val Cys Ile Ala Asp Gly Val Cys Ile Asp Ala Phe

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<210> 256

<211> 431

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 256

Phe Arg Ala Pro Pro Val Ile Pro Asn Val Pro Phe Leu Trp Ala Trp

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<211> 431

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 259

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Asn Arg Ser Ile Glu Leu Val Gln Gln Gln Asn Val Gln Leu Ser Leu

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<220>

<223> 透明质酸酶变体

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420 425 430

<210> 261

<211> 431

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 261

Phe Arg Ala Pro Pro Val Ile Pro Asn Val Pro Phe Leu Trp Ala Trp

1 5 10 15

Asn Ala Pro Ser Glu Phe Cys Leu Gly Lys Phe Asp Glu Pro Leu Asp

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420 425 430

<210> 262

<211> 431

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 262

Phe Arg Ala Pro Pro Val Ile Pro Asn Val Pro Phe Leu Trp Ala Trp

1 5 10 15

Asn Ala Pro Ser Glu Phe Cys Leu Gly Lys Phe Asp Glu Pro Leu Asp

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<210> 263

<211> 431

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体

<400> 263

Phe Arg Ala Pro Pro Val Ile Pro Asn Val Pro Phe Leu Trp Ala Trp

1 5 10 15

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Ser Ile Tyr Leu Asn Thr Ala Gln Ser Pro Val Ala Ala Thr Leu Tyr

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Val Arg Asn Arg Val Arg Glu Ala Ile Arg Val Ser Lys Leu Pro Asp

245 250 255

Ala Lys Ser Pro Leu Pro Val Phe Ala Tyr Thr Arg Ile Val Phe Thr

260 265 270

Asp Gln Ala Leu Lys Phe Leu Ser Gln Asp Glu Leu Val Tyr Thr Phe

275 280 285

Gly Glu Thr Val Ala Leu Gly Ala Ser Gly Ile Val Ile Trp Gly Asp

290 295 300

Leu Ser Ile Ser Arg Thr Met Glu Ser Cys Gln Ala Ile Asp Glu Tyr

305 310 315 320

Met Glu Thr Ile Leu Asn Pro Tyr Ile Ile Asn Val Thr Leu Ala Ala

325 330 335

Lys Met Cys Ser Gln Val Leu Cys Gln Glu Gln Gly Val Cys Ile Arg

340 345 350

Lys Asn Trp Asn Ser Ser Asp Tyr Leu His Leu Asn Pro Asp Asn Phe

355 360 365

Ala Ile Gln Leu Glu Lys Gly Gly Lys Phe Thr Val Arg Gly Lys Pro

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420 425 430

<210> 264

<211> 447

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 透明质酸酶变体- PH20v

<400> 264

Leu Asn Phe Arg Ala Pro Pro Val Ile Pro Asn Val Pro Phe Leu Trp

1 5 10 15

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50 55 60

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Gln Lys Ile Ser Leu Gln Asp His Leu Asp Lys Ala Lys Lys Asp Ile

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130 135 140

Ser Leu Thr Glu Ala Thr Glu Lys Ala Lys Gln Glu Phe Glu Lys Ala

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Gly Lys Asp Phe Leu Val Glu Thr Ile Lys Leu Gly Lys Leu Leu Arg

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180 185 190

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195 200 205

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210 215 220

Tyr Pro Ser Ile Tyr Leu Asn Thr Gln Gln Ser Pro Val Ala Ala Thr

225 230 235 240

Leu Tyr Val Arg Asn Arg Val Arg Glu Ala Ile Arg Val Ser Lys Ile

245 250 255

Pro Asp Ala Lys Ser Pro Leu Pro Val Phe Ala Tyr Thr Arg Ile Val

260 265 270

Phe Thr Asp Gln Val Leu Lys Phe Leu Ser Gln Asp Glu Leu Val Tyr

275 280 285

Thr Phe Gly Glu Thr Val Ala Leu Gly Ala Ser Gly Ile Val Ile Trp

290 295 300

Gly Thr Leu Ser Ile Met Arg Ser Met Lys Ser Cys Leu Leu Leu Asp

305 310 315 320

Asn Tyr Met Glu Thr Ile Leu Asn Pro Tyr Ile Ile Asn Val Thr Leu

325 330 335

Ala Ala Lys Met Cys Ser Gln Val Leu Cys Gln Glu Gln Gly Val Cys

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Asn Phe Ala Ile Gln Leu Glu Lys Gly Gly Lys Phe Thr Val Arg Gly

370 375 380

Lys Pro Thr Leu Glu Asp Leu Glu Gln Phe Ser Glu Lys Phe Tyr Cys

385 390 395 400

Ser Cys Tyr Ser Thr Leu Ser Cys Lys Glu Lys Ala Asp Val Lys Asp

405 410 415

Thr Asp Ala Val Asp Val Cys Ile Ala Asp Gly Val Cys Ile Asp Ala

420 425 430

Phe Leu Lys Pro Pro Met Glu Thr Glu Glu Pro Gln Ile Phe Tyr

435 440 445

Claims

1.一种药物组合物，所述药物组合物包含(i)特异性结合PD-1的抗体(“抗PD-1抗体”)，(ii)内切糖苷酶水解酶，以及(iii)至少两种抗氧化剂。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述两种抗氧化剂中的至少一种是选自甲硫氨酸、色氨酸、和组氨酸、半胱氨酸、抗坏血酸、甘氨酸或其他牺牲剂的牺牲抗氧化剂。

3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其中所述至少两种抗氧化剂中的至少一种包含金属离子螯合剂。

4.根据权利要求3所述的药物组合物，其中所述金属离子螯合剂选自喷替酸(“DTPA”)和EDTA。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的药物组合物，其中所述至少两种抗氧化剂选自甲硫氨酸、DTPA和EDTA。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的药物组合物，其中所述至少两种抗氧化剂是(i)甲硫氨酸和DTPA，或者(ii)甲硫氨酸和EDTA。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的药物组合物，其中所述至少一种抗氧化剂包含至少约1至约20mM甲硫氨酸。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的药物组合物，其中所述至少一种抗氧化剂包含至少约1mM、至少约1.5mM、至少约2mM、至少约2.5mM、至少约3mM、至少约3.5mM、至少约4mM、至少约4.5mM、至少约5mM、至少约5.5mM、至少约6mM、至少约6.5mM、至少约7mM、至少约7.5mM、至少约8mM、至少约8.5mM、至少约9mM、至少约9.5mM、至少约10mM、至少约11mM、至少约12mM、至少约13mM、至少约14mM、至少约15mM、至少约16mM、至少约17mM、至少约18mM、至少约19mM或至少约20mM甲硫氨酸。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的药物组合物，其中所述至少一种抗氧化剂包含约5mM甲硫氨酸。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的药物组合物，其中所述至少一种抗氧化剂包含至少约10μM至约200μM DTPA。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的药物组合物，其中所述至少一种抗氧化剂包含至少约10μM、至少约15μM、至少约20μM、至少约25μM、至少约30μM、至少约35μM、至少约40μM、至少约45μM、至少约50μM、至少约55μM、至少约60μM、至少约65μM、至少约70μM、至少约75μM、至少约80μM、至少约85μM、至少约90μM、至少约95μM、至少约100μM、至少约110μM、至少约120μM、至少约130μM、至少约140μM、至少约150μM、至少约160μM、至少约170μM、至少约180μM、至少约190μM或至少约200μM DTPA。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的药物组合物，其中所述至少一种抗氧化剂包含约50μM DTPA。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约20mg/mL至至少约200mg/mL的所述抗PD-1抗体。

14.根据权利要求1至13中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约20mg/mL、至少约30mg/mL、至少约40mg/mL、至少约50mg/mL、至少约60mg/mL、至少约70mg/mL、至少约80mg/mL、至少约90mg/mL、至少约100mg/mL、至少约110mg/mL、至少约120mg/mL、至少约130mg/mL、至少约140mg/mL、至少约150mg/mL、至少约160mg/mL、至少约170mg/mL、至少约180mg/mL、至少约190mg/mL或至少约200mg/mL的所述抗PD-1抗体。

15.根据权利要求1至14中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含约120mg/mL或约150mg/mL的所述抗PD-1抗体。

16.根据权利要求1至15中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约5U至至少约100,000U的所述内切糖苷酶水解酶。

17.根据权利要求1至16中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约5U、至少约10U、至少约20U、至少约30U、至少约40U、至少约50U、至少约75U、至少约100U、至少约200U、至少约300U、至少约400U、至少约500U、至少约750U、至少约1000U、至少约2000U、至少约3000U、至少约4000U、至少约5000U、至少约6000U、至少约7000U、至少约8000U、至少约9000U、至少约10,000U、至少约20,000U、至少约30,000U、至少约40,000U、至少约50,000U、至少约60,000U、至少约70,000U、至少约80,000U、至少约90,000U或至少约100,000U的所述内切糖苷酶水解酶。

18.根据权利要求1至17中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含约20,000U的所述内切糖苷酶水解酶。

19.根据权利要求1至18中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约500U/mL至至少约5000U/mL的所述内切糖苷酶水解酶。

20.根据权利要求1至19中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约1500U/mL、至少约1600U/mL、至少约1700U/mL、至少约1800U/mL、至少约1900U/mL、至少约2000U/mL、至少约2100U/mL、至少约2200U/mL、至少约2300U/mL、至少约2400μM、至少约2500μM、至少约3000μM、至少约3500μM、至少约4000μM、至少约4500U/mL或至少约5000U/mL的所述内切糖苷酶水解酶。

21.根据权利要求1至20中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含约2000U/mL的所述内切糖苷酶水解酶。

22.根据权利要求1至21中任一项所述的药物组合物，其中所述内切糖苷酶水解酶在己糖胺β(1-4)或(1-3)连接处切割透明质酸。

23.根据权利要求1至22中任一项所述的药物组合物，其中所述内切糖苷酶水解酶包含透明质酸酶PH-20(HuPH20)、HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4或HYALPS1的催化结构域。

24.根据权利要求1至23中任一项所述的药物组合物，其中所述内切糖苷酶水解酶包含与SEQ ID NO:1的氨基酸36-490具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。

25.根据权利要求1至24中任一项所述的药物组合物，其中所述内切糖苷酶水解酶包括透明质酸酶。

26.根据权利要求1至25中任一项所述的药物组合物，其中所述内切糖苷酶水解酶包括选自HuPH20、HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4、其任何变体和任何亚型的透明质酸酶。

27.根据权利要求1至26中任一项所述的药物组合物，其中所述内切糖苷酶水解酶包括rHuPH20或其片段。

28.根据权利要求1至27中任一项所述的药物组合物，其中所述内切糖苷酶水解酶包括经修饰的透明质酸酶，所述经修饰的透明质酸酶相对于选自HuPH20、HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4、HYALPS1或其片段的野生型透明质酸酶包含一个或多个氨基酸取代。

29.根据权利要求1至28中任一项所述的药物组合物，其中所述内切糖苷酶水解酶包括经修饰的透明质酸酶，所述经修饰的透明质酸酶相对于选自HuPH20、HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4、HYALPS1或其片段的野生型透明质酸酶包含α-螺旋区中的一个或多个氨基酸取代，(ii)接头区中的一个或多个氨基酸取代，(iii)一个或多个N末端和/或C末端氨基酸的缺失，或(iv)(i)-(iii)的任何组合。

30.根据权利要求1至29中任一项所述的药物组合物，其中所述内切糖苷酶水解酶包括经修饰的rHuPH20，其中所述经修饰的rHuPH20包含：

i.相对于野生型rHuPH20，α螺旋区、接头区或α螺旋区和接头区二者中的一个或多个氨基酸取代；

ii.相对于野生型rHuPH20，一个或多个N末端氨基酸、一个或多个C末端氨基酸或一个或多个N末端氨基酸和一个或多个C末端氨基酸的缺失；或者

iii.(i)和(ii)二者。

31.根据权利要求1至30中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物还包含张力调节剂和/或稳定剂。

32.根据权利要求31所述的药物组合物，其中所述张力调节剂和/或稳定剂包括糖、氨基酸、多元醇、盐或其组合。

33.根据权利要求31或32所述的药物组合物，其中所述张力调节剂和/或稳定剂包括蔗糖、山梨醇、海藻糖、甘露醇、甘油、甘氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、氯化钠、脯氨酸、精氨酸、组氨酸或其任何组合。

34.根据权利要求31至33中任一项所述的药物组合物，其中所述张力调节剂包括蔗糖。

35.根据权利要求1至34中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约10mM至至少约500mM蔗糖。

36.根据权利要求1至35中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约10mM、至少约20mM、至少约30mM、至少约40mM、至少约50mM、至少约60mM、至少约70mM、至少约80mM、至少约90mM、至少约100mM、至少约110mM、至少约120mM、至少约130mM、至少约140mM、至少约150mM、至少约160mM、至少约170mM、至少约180mM、至少约190mM、至少约200mM、至少约210mM、至少约220mM、至少约230mM、至少约240mM、至少约250mM、至少约260mM、至少约270mM、至少约280mM、至少约290mM、至少约300mM、至少约310mM、至少约320mM、至少约330mM、至少约340mM、至少约350mM、至少约360mM、至少约370mM、至少约380mM、至少约390mM、至少约400mM、至少约410mM、至少约420mM、至少约430mM、至少约440mM、至少约450mM、至少约460mM、至少约470mM、至少约480mM、至少约490mM或至少约500mM蔗糖。

37.根据权利要求1至36中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含约250mM蔗糖。

38.根据权利要求1至37中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物还包含缓冲剂。

39.根据权利要求38所述的药物组合物，其中所述缓冲剂选自组氨酸、琥珀酸盐、氨丁三醇、磷酸钠、乙酸钠和柠檬酸钠。

40.根据权利要求38或39所述的药物组合物，其中所述缓冲剂包括组氨酸。

41.根据权利要求1至40中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约5mM至至少约100mM组氨酸。

42.根据权利要求1至41中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约5mM、至少约10mM、至少约15mM、至少约20mM、至少约25mM、至少约30mM、至少约35mM、至少约40mM、至少约45mM、至少约50mM、至少约60mM、至少约70mM、至少约80mM、至少约90mM或至少约100mM组氨酸。

43.根据权利要求1至42中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含约20mM组氨酸。

44.根据权利要求1至43中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物还包含表面活性剂。

45.根据权利要求44所述的药物组合物，其中所述表面活性剂选自聚山梨酯20、聚山梨酯80和泊洛沙姆188。

46.根据权利要求44或45所述的药物组合物，其中所述表面活性剂包括聚山梨酯80。

47.根据权利要求1至46中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约0.01％w/v至至少约0.1％w/v聚山梨酯80。

48.根据权利要求1至47中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含至少约0.01％w/v、至少约0.02％w/v、至少约0.03％w/v、至少约0.04％w/v、至少约0.05％w/v、至少约0.06％w/v、至少约0.07％w/v、至少约0.08％w/v、至少约0.09％w/v或至少约0.1％w/v聚山梨酯80。

49.根据权利要求1至48中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含约0.05％w/v聚山梨酯80。

50.根据权利要求1至27和31至49中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：

(a)约120mg/mL的所述抗PD-1抗体；

(b)约20mM组氨酸；

(c)约250mM蔗糖；

(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；

(e)约50μM喷替酸；

(f)约5mM甲硫氨酸；以及

(g)约0.0182mg/mL rHuPH20。

51.根据权利要求1至27和31至49中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：

(a)约120mg/mL的所述抗PD-1抗体；

(b)约20mM组氨酸；

(c)约250mM蔗糖；

(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；

(e)约50μM喷替酸；

(f)约5mM甲硫氨酸；以及

(g)约2000U/mL rHuPH20。

52.根据权利要求1至27和31至49中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：

(a)约150mg/mL的所述抗PD-1抗体；

(b)约20mM组氨酸；

(c)约250mM蔗糖；

(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；

(e)约50μM喷替酸；

(f)约5mM甲硫氨酸；以及

(g)约0.0182mg/mL rHuPH20。

53.根据权利要求1至27和31至49中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：

(a)约150mg/mL的所述抗PD-1抗体；

(b)约20mM组氨酸；

(c)约250mM蔗糖；

(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；

(e)约50μM喷替酸；

(f)约5mM甲硫氨酸；以及

(g)约2000U/mL rHuPH20。

54.根据权利要求1至53中任一项所述的药物组合物，其中所述抗PD-1抗体选自纳武单抗、派姆单抗、PDR001、MEDI-0680、西米普利单抗、特瑞普利单抗、替雷利珠单抗、INCSHR1210、TSR-042、GLS-010、AM-0001、STI-1110、AGEN2034、MGA012、BCD-100、IBI308、萨善利单抗及其任何组合。

55.根据权利要求1至64中任一项所述的药物组合物，其中所述抗PD-1抗体是纳武单抗。

56.根据权利要求1至64中任一项所述的药物组合物，其中所述抗PD-1抗体是派姆单抗。

57.根据权利要求1至27和31至55中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：

(a)约120mg/mL纳武单抗；

(b)约20mM组氨酸；

(c)约250mM蔗糖；

(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；

(e)约50μM喷替酸；

(f)约5mM甲硫氨酸；以及

(g)约0.0182mg/mL rHuPH20。

58.根据权利要求1至27和31至55中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：

(a)约120mg/mL纳武单抗；

(b)约20mM组氨酸；

(c)约250mM蔗糖；

(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；

(e)约50μM喷替酸；

(f)约5mM甲硫氨酸；以及

(g)约2000U/mL rHuPH20。

59.根据权利要求1至27和31至55中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：

(a)约150mg/mL纳武单抗；

(b)约20mM组氨酸；

(c)约250mM蔗糖；

(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；

(e)约50μM喷替酸；

(f)约5mM甲硫氨酸；以及

(g)约0.0182mg/mL rHuPH20。

60.根据权利要求1至27和31至55中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：

(a)约150mg/mL纳武单抗；

(b)约20mM组氨酸；

(c)约250mM蔗糖；

(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；

(e)约50μM喷替酸；

(f)约5mM甲硫氨酸；以及

(g)约2000U/mL rHuPH20。

61.根据权利要求1至27和31至55中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：

(a)约672mg纳武单抗；

(b)约8.68mg组氨酸；

(c)约11.8mg组氨酸HCl H2O；

(d)约479mg蔗糖；

(e)约2.80mg聚山梨酯80；

(f)约0.110mg喷替酸；

(g)约4.18mg甲硫氨酸；

(h)约0.102mg rHuPH20；

其中(a)-(h)在水中重构至至少约5.6mL的最终体积。

62.根据权利要求1至61中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物具有约5.2至约6.8的pH。

63.根据权利要求1至62中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物具有约5.2、约5.3、约5.4、约5.5、约5.6、约5.7、约5.8、约5.9、约6.0、约6.1、约6.2、约6.3、约6.4、约6.5、约6.6、约6.7或约6.8的pH。

64.根据权利要求1至63中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物具有约6.0的pH。

65.根据权利要求1至64中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物还包含第二治疗剂。

66.根据权利要求65所述的药物组合物，其中所述第二治疗剂是抗体。

67.根据权利要求66所述的药物组合物，其中所述第二治疗剂是检查点抑制剂。

68.根据权利要求67所述的药物组合物，其中所述检查点抑制剂是抗CTLA-4抗体、抗LAG-3抗体、抗TIM3抗体、抗TIGIT抗体、抗NKG2a抗体、抗OX40抗体、抗ICOS抗体、抗MICA抗体、抗CD137抗体、抗KIR抗体、抗TGFβ抗体、抗IL-10抗体、抗IL-8抗体、抗B7-H4抗体、抗Fas配体抗体、抗CXCR4抗体、抗间皮素抗体、抗CD27抗体、抗GITR抗体或其任何组合。

69.根据权利要求1至27和31至68中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：

(a)约120mg/mL纳武单抗；

(b)约20mM组氨酸；

(c)约250mM蔗糖；

(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；

(e)约50μM喷替酸；

(f)约5mM甲硫氨酸；

(g)约2000U/mL rHuPH20；以及

(h)抗CTLA-4抗体。

70.根据权利要求1至27和31至68中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：

(a)约150mg/mL纳武单抗；

(b)约20mM组氨酸；

(c)约250mM蔗糖；

(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；

(e)约50μM喷替酸；

(f)约5mM甲硫氨酸；

(g)约2000U/mL rHuPH20；以及

(h)抗CTLA-4抗体。

71.根据权利要求1至27和31至68中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：

(a)约120mg/mL纳武单抗；

(b)约20mM组氨酸；

(c)约250mM蔗糖；

(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；

(e)约50μM喷替酸；

(f)约5mM甲硫氨酸；

(g)约2000U/mL rHuPH20；以及

(h)抗LAG-3抗体。

72.根据权利要求1至27和31至68中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：

(a)约150mg/mL纳武单抗；

(b)约20mM组氨酸；

(c)约250mM蔗糖；

(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；

(e)约50μM喷替酸；

(f)约5mM甲硫氨酸；

(g)约2000U/mL rHuPH20；以及

(h)抗LAG-3抗体。

73.根据权利要求1至27和31至68中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：

(a)约120mg/mL纳武单抗；

(b)约20mM组氨酸；

(c)约250mM蔗糖；

(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；

(e)约50μM喷替酸；

(f)约5mM甲硫氨酸；

(g)约2000U/mL rHuPH20；以及

(h)抗TIM3抗体。

74.根据权利要求1至27和31至68中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物包含：

(a)约150mg/mL纳武单抗；

(b)约20mM组氨酸；

(c)约250mM蔗糖；

(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；

(e)约50μM喷替酸；

(f)约5mM甲硫氨酸；

(g)约2000U/mL rHuPH20；以及

(h)抗TIM3抗体。

75.一种小瓶，所述小瓶包含根据权利要求1至74中任一项所述的药物组合物。

76.一种针筒，所述针筒包含根据权利要求1至74中任一项所述的药物组合物。

77.一种自动注射器，所述自动注射器包含根据权利要求1至74中任一项所述的药物组合物。

78.一种穿戴式泵，所述穿戴式泵包含根据权利要求1至74中任一项所述的药物组合物。

79.根据权利要求76所述的针筒，所述针筒还包含柱塞。

80.一种治疗有需要的受试者的疾病或障碍的方法，所述方法包括向所述受试者施用药学有效量的根据权利要求1至74中任一项所述的药物组合物。

81.根据权利要求80所述的方法，其中所述药物组合物是皮下施用的。

82.根据权利要求80或81所述的方法，其中所述疾病或障碍是感染性疾病。

83.根据权利要求80或81所述的方法，其中所述疾病或障碍是癌症。

84.根据权利要求83所述的方法，其中所述癌症选自鳞状细胞癌(squamous cellcarcinoma)、小细胞肺癌(SCLC)、非小细胞肺癌(NSCLC)、鳞状NSCLC、非鳞状NSCLC、神经胶质瘤、胃肠癌、肾癌(renal cancer)、透明细胞癌、卵巢癌、肝癌、结直肠癌、子宫内膜癌(endometrial cancer)、肾癌(kidney cancer)、肾细胞癌(RCC)、前列腺癌、激素难治性前列腺腺癌、甲状腺癌、神经母细胞瘤、胰腺癌、胶质母细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤、宫颈癌(cervical cancer)、胃癌(stomach cancer)、膀胱癌、肝细胞瘤、乳腺癌、结肠癌、头颈癌、胃癌(gastric cancer)、生殖细胞肿瘤、儿科肉瘤、鼻窦自然杀伤细胞、黑色素瘤、骨癌、皮肤癌、子宫癌、肛区癌症、睾丸癌、输卵管癌、子宫内膜癌(carcinoma of theendometrium)、宫颈癌(carcinoma of the cervix)、阴道癌、外阴癌、食管癌、小肠癌、内分泌系统癌症、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、直肠癌、儿童实体瘤、输尿管癌、肾盂癌、中枢神经系统(CNS)肿瘤、原发性CNS淋巴瘤、肿瘤血管生成、脊柱轴肿瘤、脑癌、脑干神经胶质瘤、垂体腺瘤、卡波西肉瘤、表皮样癌、鳞状细胞癌(squamous cellcancer)、包括石棉诱发癌症在内的环境诱发癌症、病毒相关癌症或病毒来源的癌症(例如，人乳头瘤病毒(HPV相关的或来源的肿瘤))及其任何组合。

85.一种治疗有需要的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者皮下施用有效剂量的药物组合物，所述药物组合物包含特异性结合PD-1或PD-L1并抑制PD-1与PD-L1相互作用的抗体(分别为“抗PD-1抗体”或“抗PD-L1抗体”)；其中所述有效剂量包含一个或多个皮下单位剂量，其中所述皮下单位剂量中的至少一个的总体积小于约5mL、小于约4.5mL、小于约4.0mL、小于约3.5mL、小于约3.0mL、小于约3mL或小于约2.5mL；并且其中所述有效剂量包含至少约250mg至至少约2400mg的所述抗体。

86.根据权利要求85所述的方法，其中所述药物组合物不包含透明质酸酶。

87.根据权利要求85或86所述的方法，其中有效剂量包含两个或更多个皮下单位剂量，并且其中所述两个或更多个皮下单位剂量是并行或随后施用。

88.根据权利要求87所述的方法，其中所述两个或更多个皮下单位剂量是随后施用，其中所述两个或更多个皮下单位剂量中的每一个是在所述两个或更多个皮下单位剂量之间约10分钟、约15分钟、约20分钟、约30分钟、约45分钟、约一小时、约两小时、约三小时、约四小时、约五小时、约六小时、约九小时、约十二小时、约十八小时或约二十四小时的间隔内施用。

89.根据权利要求1至88中任一项所述的方法，其中约每一、二、三或四周施用所述有效剂量。

90.根据权利要求85至89中任一项所述的方法，其中所述抗体包括抗PD-1抗体。

91.根据权利要求85至90中任一项所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每周施用约250mg至约600mg的所述抗体。

92.根据权利要求85至91中任一项所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每周施用约250mg、约260mg、约270mg、约280mg、约290mg、约300mg、约310mg、约320mg、约330mg、约340mg、约350mg、约360mg、约370mg、约380mg、约390mg、约400mg、约410mg、约420mg、约430mg、约440mg、约450mg、约460mg、约470mg、约480mg、约490mg、约500mg、约510mg、约520mg、约530mg、约540mg、约550mg、约560mg、约570mg、约580mg、约590mg或约600mg。

93.根据权利要求1至92中任一项所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每周施用约300mg。

94.根据权利要求93所述的方法，其中所述抗体的有效剂量包含约300mg的单一皮下单位剂量。

95.根据权利要求93或94所述的方法，其中所述抗体的有效剂量包含约2mL总施用体积中约300mg的单一皮下单位剂量。

96.根据权利要求93所述的方法，其中所述抗体的有效剂量包含(i)两个皮下单位剂量，其中所述两个皮下单位剂量中的每一个包含约150mg的所述抗体；或者(ii)三个皮下单位剂量，其中所述三个皮下单位剂量中的每一个包含约100mg的所述抗体。

97.根据权利要求96所述的方法，其中(i)所述两个皮下单位剂量中的至少一个包含小于约5mL总体积中约150mg的所述抗体；并且(ii)所述三个皮下单位剂量中的至少一个包含约2mL总体积中约100mg的所述抗体。

98.根据权利要求96或97所述的方法，其中(i)所述两个皮下单位剂量被施用至所述受试者的两个不同身体位置，或(ii)所述三个皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。

99.根据权利要求85至90中任一项所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每两周施用约300mg至约900mg。

100.根据权利要求99所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每两周施用约300mg、约350mg、约400mg、约450mg、约500mg、约510mg、约520mg、约530mg、约540mg、约550mg、约560mg、约570mg、约580mg、约590mg、约600mg、约610mg、约620mg、约630mg、约640mg、约650mg、约660mg、约670mg、约680mg、约690mg、约700mg、约710mg、约720mg、约730mg、约740mg、约750mg、约760mg、约770mg、约780mg、约790mg、约800mg、约810mg、约820mg、约830mg、约840mg、约850mg、约860mg、约870mg、约880mg、约890mg或约900mg。

101.根据权利要求99或100所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每两周施用约600mg。

102.根据权利要求101所述的方法，其中所述抗体的有效剂量包含单一皮下单位剂量。

103.根据权利要求101所述的方法，其中所述抗体的有效剂量包含两个、三个或至少四个皮下单位剂量。

104.根据权利要求101或103所述的方法，其中所述抗体的有效剂量包含两个皮下单位剂量，其中所述两个皮下单位剂量中的每一个包含约300mg的所述抗体。

105.根据权利要求104所述的方法，其中所述两个皮下单位剂量中的至少一个包含约2mL总体积中约300mg的所述抗体。

106.根据权利要求103至105中任一项所述的方法，其中所述皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。

107.根据权利要求85至90中任一项所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每四周施用约900mg至约1500mg。

108.根据权利要求107所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每四周施用约900、约950、约1000mg、约1010mg、约1020mg、约1030mg、约1040mg、约1050mg、约1060mg、约1070mg、约1080mg、约1090mg、约1100mg、约1110mg、约1120mg、约1130mg、约1140mg、约1150mg、约1160mg、约1170mg、约1180mg、约1190mg、约1200mg、约1210mg、约1220mg、约1230mg、约1240mg、约1250mg、约1260mg、约1270mg、约1280mg、约1290mg、约1300mg、约1310mg、约1320mg、约1330mg、约1340mg、约1350mg、约1360mg、约1370mg、约1380mg、约1390mg、约1400mg、约1410mg、约1420mg、约1430mg、约1440mg、约1450mg、约1460mg、约1470mg、约1480mg、约1490mg或约1500mg。

109.根据权利要求107或108所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每四周施用约1200mg。

110.根据权利要求107至109中任一项所述的方法，其中所述抗体的有效剂量包含两个、三个、四个、六个或至少八个皮下单位剂量。

111.根据权利要求107至110中任一项所述的方法，其中所述抗体的有效剂量包含四个皮下单位剂量，其中所述四个皮下单位剂量中的每一个包含约300mg的所述抗体。

112.根据权利要求111所述的方法，其中所述四个皮下单位剂量中的至少一个包含约2mL总体积中约300mg的所述抗体。

113.根据权利要求110至112中任一项所述的方法，其中所述皮下单位剂量中的至少两个被施用至所述受试者的至少两个不同身体位置。

114.根据权利要求110至113中任一项所述的方法，其中所述两个、三个、四个、六个或至少八个皮下单位剂量是在同一天施用。

115.根据权利要求85至89中任一项所述的方法，其中所述抗体包括抗PD-L1抗体。

116.根据权利要求115所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每两周施用约900mg至约1800mg的所述抗体。

117.根据权利要求115或116所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每两周施用约900、约950、约1000、约1010mg、约1020mg、约1030mg、约1040mg、约1050mg、约1060mg、约1070mg、约1080mg、约1090mg、约1100mg、约1110mg、约1120mg、约1130mg、约1140mg、约1150mg、约1160mg、约1170mg、约1180mg、约1190mg、约1200mg、约1210mg、约1220mg、约1230mg、约1240mg、约1250mg、约1260mg、约1270mg、约1280mg、约1290mg、约1300mg、约1310mg、约1320mg、约1330mg、约1340mg、约1350mg、约1360mg、约1370mg、约1380mg、约1390mg、约1400mg、约1410mg、约1420mg、约1430mg、约1440mg、约1450mg、约1460mg、约1470mg、约1480mg、约1490mg、约1500mg。

118.根据权利要求115至117中任一项所述的方法，其中所述抗体的有效剂量为约每两周约1200mg。

119.根据权利要求85至114中任一项所述的方法，其中所述抗PD-1抗体包括选自以下的抗体：纳武单抗、派姆单抗、PDR001、MEDI-0680、西米普利单抗、特瑞普利单抗、替雷利珠单抗、INCSHR1210、TSR-042、GLS-010、AM-0001、STI-1110、AGEN2034、MGA012、BCD-100、IBI308、KN035、萨善利单抗及其任何组合。

120.根据权利要求85至114中任一项所述的方法，其中所述抗PD-1抗体与纳武单抗交叉竞争与人PD-1的结合。

121.根据权利要求119所述的方法，其中所述抗PD-1抗体包括纳武单抗。

122.根据权利要求119所述的方法，其中所述抗PD-1抗体包括派姆单抗。

123.根据权利要求85至89和91至118中任一项所述的方法，其中所述抗PD-L1抗体包括选自以下的抗体：BMS-936559、阿特珠单抗、度伐鲁单抗、阿维鲁单抗、STI-1014、CX-072、KN035、LY3300054、BGB-A333、CK-301及其任何组合。

124.根据权利要求85至123中任一项所述的方法，其中所述受试者患有癌症。

125.根据权利要求124所述的方法，其中所述癌症选自鳞状细胞癌(squamous cellcarcinoma)、小细胞肺癌(SCLC)、非小细胞肺癌(NSCLC)、鳞状NSCLC、非鳞状NSCLC、神经胶质瘤、胃肠癌、肾癌(renal cancer)、透明细胞癌、卵巢癌、肝癌、结直肠癌、子宫内膜癌(endometrial cancer)、肾癌(kidney cancer)、肾细胞癌(RCC)、前列腺癌、激素难治性前列腺腺癌、甲状腺癌、神经母细胞瘤、胰腺癌、胶质母细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤、宫颈癌(cervical cancer)、胃癌(stomach cancer)、膀胱癌、肝细胞瘤、乳腺癌、结肠癌、头颈癌、胃癌(gastric cancer)、生殖细胞肿瘤、儿科肉瘤、鼻窦自然杀伤细胞、黑色素瘤、骨癌、皮肤癌、子宫癌、肛区癌症、睾丸癌、输卵管癌、子宫内膜癌(carcinoma of theendometrium)、宫颈癌(carcinoma of the cervix)、阴道癌、外阴癌、食管癌、小肠癌、内分泌系统癌症、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、直肠癌、儿童实体瘤、输尿管癌、肾盂癌、中枢神经系统(CNS)肿瘤、原发性CNS淋巴瘤、肿瘤血管生成、脊柱轴肿瘤、脑癌、脑干神经胶质瘤、垂体腺瘤、卡波西肉瘤、表皮样癌、鳞状细胞癌(squamous cellcancer)、包括石棉诱发癌症在内的环境诱发癌症、病毒相关癌症或病毒来源的癌症(例如，人乳头瘤病毒(HPV相关的或来源的肿瘤))及其任何组合。

126.根据权利要求85至125中任一项所述的方法，其中使用自动注射器施用所述药物组合物。

127.根据权利要求85至125中任一项所述的方法，其中使用穿戴式泵施用所述药物组合物。

128.根据权利要求85至127中任一项所述的方法，其中所述药物组合物通过皮下输注小于约10分钟施用至所述受试者。

129.根据权利要求85至128中任一项所述的方法，其中所述药物组合物通过皮下输注小于约5分钟施用至所述受试者。

130.根据权利要求85至129中任一项所述的方法，其中所述药物组合物还包含至少两种抗氧化剂。

131.根据权利要求130所述的方法，其中所述至少两种抗氧化剂选自甲硫氨酸、色氨酸、组氨酸、半胱氨酸、抗坏血酸、甘氨酸、DTPA和EDTA。

132.根据权利要求130或131所述的方法，其中所述至少两种抗氧化剂包含(i)甲硫氨酸和EDTA，或者(ii)甲硫氨酸和DTPA。

133.根据权利要求130至132中任一项所述的方法，其中所述至少两种抗氧化剂包含至少约1至约20mM甲硫氨酸。

134.根据权利要求130至133中任一项所述的方法，其中所述至少两种抗氧化剂包含至少约1mM、至少约1.5mM、至少约2mM、至少约2.5mM、至少约3mM、至少约3.5mM、至少约4mM、至少约4.5mM、至少约5mM、至少约5.5mM、至少约6mM、至少约6.5mM、至少约7mM、至少约7.5mM、至少约8mM、至少约8.5mM、至少约9mM、至少约9.5mM、至少约10mM、至少约11mM、至少约12mM、至少约13mM、至少约14mM、至少约15mM、至少约16mM、至少约17mM、至少约18mM、至少约19mM或至少约20mM甲硫氨酸。

135.根据权利要求130至134中任一项所述的方法，其中所述至少两种抗氧化剂包含约5mM甲硫氨酸。

136.根据权利要求130至135中任一项所述的方法，其中所述至少两种抗氧化剂包含至少约10μM至约200μM DTPA。

137.根据权利要求130至136中任一项所述的方法，其中所述至少两种抗氧化剂包含至少约10μM、至少约15μM、至少约20μM、至少约25μM、至少约30μM、至少约35μM、至少约40μM、至少约45μM、至少约50μM、至少约55μM、至少约60μM、至少约65μM、至少约70μM、至少约75μM、至少约80μM、至少约85μM、至少约90μM、至少约95μM、至少约100μM、至少约110μM、至少约120μM、至少约130μM、至少约140μM、至少约150μM、至少约160μM、至少约170μM、至少约180μM、至少约190μM或至少约200μM DTPA。

138.根据权利要求130至137中任一项所述的方法，其中所述至少两种抗氧化剂包含约50μM DTPA。

139.根据权利要求85至138中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含至少约20mg/mL至至少约200mg/mL的所述抗PD-1抗体。

140.根据权利要求85至139中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含至少约135mg/mL至至少约180mg/mL的所述抗PD-1抗体。

141.根据权利要求85至140中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含至少约108mg/mL至至少约132mg/mL的所述抗PD-1抗体。

142.根据权利要求85至141中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含至少约20mg/mL、至少约30mg/mL、至少约40mg/mL、至少约50mg/mL、至少约60mg/mL、至少约70mg/mL、至少约80mg/mL、至少约90mg/mL、至少约100mg/mL、至少约110mg/mL、至少约120mg/mL、至少约130mg/mL、至少约140mg/mL、至少约150mg/mL、至少约160mg/mL、至少约170mg/mL、至少约180mg/mL、至少约190mg/mL或至少约200mg/mL的所述抗PD-1抗体。

143.根据权利要求85至142中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含约120mg/mL或约150mg/mL的所述抗PD-1抗体。

144.根据权利要求85至143中任一项所述的方法，其中所述药物组合物还包含张力调节剂和/或稳定剂。

145.根据权利要求144所述的方法，其中所述张力调节剂和/或稳定剂包括糖、氨基酸、多元醇、盐或其组合。

146.根据权利要求144或145所述的方法，其中所述张力调节剂和/或稳定剂选自蔗糖、山梨醇、海藻糖、甘露醇、甘油、甘氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、氯化钠、脯氨酸、精氨酸、组氨酸及其任何组合。

147.根据权利要求144至146中任一项所述的方法，其中所述张力调节剂包括蔗糖。

148.根据权利要求85至147中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含至少约10mM至至少约500mM蔗糖。

149.根据权利要求85至148中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含约250mM蔗糖。

150.根据权利要求85至149中任一项所述的方法，其中所述药物组合物还包含缓冲剂。

151.根据权利要求150所述的方法，其中所述缓冲剂选自组氨酸、琥珀酸盐、氨丁三醇、磷酸钠、乙酸钠和柠檬酸钠。

152.根据权利要求150或151所述的方法，其中所述缓冲剂包括组氨酸。

153.根据权利要求85至152中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含至少约5mM至至少约100mM组氨酸。

154.根据权利要求85至153中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含约20mM组氨酸。

155.根据权利要求85至154中任一项所述的方法，其中所述药物组合物还包含表面活性剂。

156.根据权利要求155所述的方法，其中所述表面活性剂选自聚山梨酯20、聚山梨酯80和泊洛沙姆188。

157.根据权利要求155或156所述的方法，其中所述表面活性剂包括聚山梨酯80。

158.根据权利要求85至157中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含至少约0.01％w/v至至少约0.1％w/v聚山梨酯80。

159.根据权利要求85至158中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含约0.05％w/v聚山梨酯80。

160.根据权利要求85至114、119至122和124至159中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含：

(a)约150mg/mL的所述抗PD-1抗体；

(b)约20mM组氨酸；

(c)约250mM蔗糖；

(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；

(e)约50μM喷替酸；以及

(f)约5mM甲硫氨酸。

161.根据权利要求85至114、119至122和124至159中任一项所述的方法，其中所述药物组合物包含：

(a)约120mg/mL的所述抗PD-1抗体；

(b)约20mM组氨酸；

(c)约250mM蔗糖；

(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；

(e)约50μM喷替酸；以及

(f)约5mM甲硫氨酸。

162.根据权利要求85至161中任一项所述的方法，其中所述药物组合物具有约5.2至约6.8的pH。

163.根据权利要求85至162中任一项所述的方法，其中所述药物组合物具有约6.0的pH。

164.一种药物组合物，所述药物组合物用于在根据权利要求85至163中任一项所述的方法中使用。

165.一种单位剂量，所述单位剂量包含：

(a)约150mg/mL的抗PD-1抗体；

(b)约20mM组氨酸；

(c)约250mM蔗糖；

(d)约0.05％w/v聚山梨酯80；

(e)约50μM喷替酸；以及

(f)约5mM甲硫氨酸。

166.一种自动注射器，所述自动注射器包含根据权利要求165所述的单位剂量。

167.一种穿戴式装置，所述穿戴式装置包含根据权利要求165所述的单位剂量。