CN116744934A - 用于治疗病毒性呼吸疾病的吸入性他汀类药物 - Google Patents

Abstract

本公开涉及通过吸入施用他汀类药物来治疗呼吸道病毒感染的方法和制剂。

Description

用于治疗病毒性呼吸疾病的吸入性他汀类药物

相关申请的交叉引用

本申请要求于2020年5月7日提交的美国临时申请第63/021,618号和2021年3月8日提交的美国临时申请第63/158,144号的优先权，出于所有目的，在此将其全部内容并入本文。

关于在联邦资助的研究和开发下作出的发明权利的声明

这项发明是在政府的支持下完成的。政府对本发明享有一定的权利。

背景技术

SARS-CoV-2病毒可导致严重的肺部并发症，包括严重的呼吸衰竭、急性肺损伤(ALI)、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、肺炎、败血症、血栓和死亡，但在许多情况下是无症状。由该病毒引起的疾病被称为COVID-19。到2020年4月下旬，COVID-19大流行疾病在全球已超过300万例确诊病例，超过200,000人死于该感染。

据信该病毒通过呼吸飞沫和/或气溶胶传播，最初感染鼻咽上皮细胞，然后感染呼吸道和肺部。SARS-CoV-2通过与细胞表面受体血管紧张素转换酶2(ACE2，UniProtKBQ9BYF1)结合进入上皮细胞细胞质。病毒进入需要S(“刺突”)蛋白与ACE2结合，并被TMPRSS2(跨膜丝氨酸蛋白酶2，UniProtKB O15393)切割，TMPRSS2是一种也在上皮细胞的细胞外表面发现的丝氨酸蛋白酶(M.Hoffman等人，细胞(2020)181：271-80)。

SARS-CoV-2很容易在人与人之间传播，许多COVID-19感染似乎没有症状，即使大量病毒从鼻咽部排出。然而，一些COVID-19感染会导致严重的疾病，通常需要住院和重症监护，有时甚至是致命的。尽管有许多候选治疗剂，并且疫苗正在开发中，但目前还没有针对COVID-19的有效治疗方法。

发明简述

在一些实施方案中，本发明提供了一种用于在有需要的受试者中减轻病毒性呼吸感染的方法，该方法包括：向患有病毒性呼吸感染的受试者鼻内或通过吸入施用制剂，其中，该制剂包含治疗有效量他汀类药物；和药学上可接受的载体。

在一些实施方案中，本发明提供了一种在有需要的受试者中治疗病毒性呼吸感染的方法，该方法包括：向患有病毒性呼吸感染或可能暴露于该病毒性呼吸感染的受试者鼻内或通过吸入施用制剂，其中，所述制剂包含治疗有效量的他汀类药物；和药学上可接受的载体。

在一些实施方案中，本发明提供了一种药物组合物，其包含：治疗有效量的他汀类药物；至少一种另外的治疗剂；和药学上可接受的载体。

在一些实施方案中，本发明提供了一种用于治疗病毒性呼吸疾病的药物制剂，该组合物包含：治疗有效量的他汀类药物或其异构体、对映异构体或非对映异构体，以及适用于吸入给药的药学上可接受的载体。

在一些实施方案中，本发明提供了一种在有需要的受试者中治疗SARS-CoV-2病毒感染的方法，该方法包括：向患有病毒性呼吸感染的受试者鼻内或通过吸入施用制剂，其中所述制剂包含治疗有效量的他汀类药物；和药学上可接受的载体。

在一些实施方案中，本发明提供了一种在有需要的受试者中治疗SARS-CoV-2病毒感染的方法，该方法包括：向可能暴露于SARS-CoV-2病毒的受试者鼻内或通过吸入施用制剂，其中所述制剂包含治疗有效量的他汀类药物；和药学上可接受的载体。

在一些实施方案中，本发明提供了一种用于减轻感染了SARS-CoV-2的受试者中COVID-19严重程度的方法，该方法包括：向受感染的受试者鼻内或通过吸入施用制剂，其中该制剂包含治疗有效量的他汀类药物；和药学上可接受的载体。

在一些实施方案中，本发明提供了用于阻断病毒进入细胞的方法，包括施用治疗有效量的他汀类药物，并且其中所述病毒是SARS病毒。

附图说明

图1显示了用辛伐他汀治疗48小时后，人支气管上皮细胞(HBE1)中的细胞胆固醇降低。辛伐他汀的应用浓度为50、100、200和400nM。显著抑制(p<0.05)用星号(*)表示。

图2显示了用辛伐他汀治疗48小时后，人支气管上皮细胞(HBE1)中的细胞胆固醇降低。辛伐他汀的应用浓度为1、5、10和20μM。显著抑制(p<0.05)用星号(*)表示。

图3A-3C显示了来自ACE2实验的数据。图3A显示了毛细管扫描，图3B示出了MST轨迹，图3C表示剂量反应曲线。

图4显示了来自他汀配体测定的数据。

图5显示了用化合物处理细胞72小时后INS-102和INS-103的细胞活力数据。

图6显示了在用化合物预处理细胞6至24小时后INS-102和INS-103的细胞活力数据。

图7显示了细胞感染病毒1小时后加入INS-102或INS-103后的INS-102和INS-103的细胞活力数据。

图8显示了细胞感染病毒24小时后加入INS-102或INS-103后的INS-102和INS-103的细胞活力数据。所述化合物与受感染的细胞接触48小时。

图9显示了细胞感染病毒48小时后加入INS-102或INS-103后的INS-102和INS-103的细胞活力数据。所述化合物与受感染的细胞接触24小时。

图10显示了INS-102和INS-103的细胞活力数据，其中细胞用INS-102或INS-103预处理6小时，然后用病毒感染72小时。

图11显示了INS-102和INS-103的细胞活力数据，其中细胞用INS-102或INS-103预处理24小时，然后用病毒感染72小时。

图12显示了INS-102和INS-103的细胞活力数据，其中细胞用INS-102或INS-103预处理1小时，然后用病毒感染72小时。

图13显示了INS-102的病毒载量数据。

图14显示了INS-103的病毒载量数据。

图15显示了INS-102和INS-103的Luminex实验IL-6产量。

图16显示了INS-102和INS-103的Luminex实验IL-8产量。

图17显示了INS-102和INS-103的Luminex实验IL-10产量。

图18显示了INS-102和INS-103的Luminex实验IL-1α产量。

图19显示了INS-102和INS-103的ELISA实验IL-6产量。

图20显示了仓鼠模型的示意性研究设计。

图21表示用对照组处理的动物保持相对恒定的体重。相反，用SARS-CoV-2处理且未使用药物治疗的动物体重减轻，而用匹伐他汀治疗的动物体重减轻较少。

图22显示了来自鼻拭子的病毒滴度。

图23显示了病毒滴度的比较。

图24显示了在感染后第3天用匹伐他汀和对照处理的仓鼠鼻拭子(左图)和气管(右图)中的病毒滴度。

图25显示了在感染后第3天用匹伐他汀和对照处理的仓鼠肺样本(R2-右肺叶-右内侧；R4右肺叶-右后腔静脉)中的病毒滴度。

图26显示了来自治疗和对照样品的肺组织病理学。

图27显示了基于根据炎症严重程度分级的肺组织病理学的平均+/-SEM的所有感染动物的肺部炎症等级的盲法评分。

图28显示了基于受影响肺百分比的肺组织病理学评分。

图29显示了在SARS-CoV-2(MOI 0.01)感染前6小时作为预处理施用的INS-102的数据。通过在感染后24小时进行的RT-PCR(ORF1ab基因)测量病毒载量。与单一疗法相比，瑞德西韦或地塞米松与他汀类药物联合使用可增强病毒载量的降低。

图30显示了INS-103和SARS-CoV-2(MOI 0.01)在加入细胞前在室温下混合1小时的数据。通过在感染后24小时进行的RT-PCR(ORF1ab基因)测量病毒载量。与单一疗法相比，瑞德西韦或地塞米松与他汀类药物联合使用可增强病毒载量的降低。

图31显示了INS-104和SARS-CoV-2(MOI 0.01)在加入细胞前在室温下混合1小时的数据。通过在感染后24小时进行的RT-PCR(ORF1ab基因)测量病毒载量。他汀类药物与地塞米松和瑞德西韦具有协同作用。单独使用INS-104可降低对照组病毒载量的22％。单独使用地塞米松可降低46％。

图32显示了INS-102的细胞设置和处理的细节。

图33显示了用INS-102处理细胞的统计分析。

图34显示了INS-103的细胞设置和处理的细节。

图35显示了用INS-103处理细胞的统计分析。

图36显示了INS102和INS103的细胞研究设置。

图37显示了Luminex实验对IL-6产生的统计分析。

图38显示了Luminex实验对IL-8产生的统计分析。

图39显示了Luminex实验对IL-10产生的统计分析。

图40显示了Luminex实验对IL-1α产生的统计分析。

图41显示了ELISA实验对IL-6产生的统计分析。

图42A显示了INS-102的组合数据，其中他汀类药物为1μM。图42B显示了INS-102的组合数据，其中他汀类药物为0.1μM。图42C显示了INS-102的组合数据，其中他汀类药物为10μM。

图43显示了INS-103的组合数据，其中他汀类药物为1μM。

图44A显示了INS-104的组合数据，其中他汀类药物为5μM，地塞米松为1nM，瑞德西韦为1nM。图44B显示了INS-104组合数据，其中他汀类药物为5μM，地塞米松为1nM，瑞德西韦为10nM。

图45显示了低剂量INS-102预处理6小时，然后感染SARS-CoV-2，并在感染后24小时进行测量。

图46显示了低剂量INS-103预处理6小时，然后感染SARS-CoV-2，并在感染后24小时进行测量。

图47显示了高剂量INS-104预处理6小时，然后感染SARS-CoV-2，并在感染后24小时进行测量。

图48显示低剂量INS-102与SARS-CoV-2在室温下预混合1小时，然后与Calu-3细胞一起孵育，并在感染后24小时进行测量。

图49显示中剂量INS-103与SARS-CoV-2在室温下预混合1小时，然后与Calu-3细胞一起孵育，并在感染后24小时进行测量。

图50显示低剂量INS-104与SARS-CoV-2在室温下预混合1小时，然后与Calu-3细胞一起孵育，并在感染后24小时进行测量。

图51显示中剂量INS-104与SARS-CoV-2在室温下预混合1小时，然后与Calu-3细胞一起孵育，并在感染后24小时进行测量。

图52显示低剂量INS-103预处理6小时，然后感染SARS-CoV-2，并在感染后72小时进行测量。

图53显示高剂量INS-103预处理6小时，然后感染SARS-CoV-2，并在感染后72小时进行测量。

图54显示INS-103与SARS-CoV-2在室温下预混合1小时，然后与Calu-3细胞一起孵育，并在感染后72小时进行测量。

图55显示INS-104与SARS-CoV-2在室温下预混合1小时，然后与Calu-3细胞一起孵育，并在感染后72小时进行测量。

具体实施方式

I.通用

使用他汀类药物的新方法满足了对新型抗病毒药物的需求，该方法提供了一种新的机制来抑制或防止病毒进入细胞并通过吸入将他汀类药物直接输送到鼻道和呼吸道来减轻症状。

已知ACE2和TMPRSS2以及其他受体都与细胞膜中的脂筏相关。脂筏是膜微区，比周围的膜更刚性、更紧密。这些脂筏含有高浓度的胆固醇和鞘脂。不受任何特定理论的束缚，目前认为脂筏对于至少一些表面受体的支持和功能是必需的。

他汀类药物是3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMG-CoA还原酶)抑制剂，可阻断甲羟戊酸(MA)和下游类异戊二烯脂质法尼基焦磷酸(FPP)和香叶基香叶基焦磷酸(GGPP)的生物合成。目前，在美国，他汀类药物仅被批准作为降脂剂用于口服给药。

将他汀类药物直接施用于呼吸道将有效量的他汀类药物递送至呼吸道上皮和呼吸道平滑肌，这是口服给药所不能达到的。吸入时，他汀类药物会减少呼吸道上皮细胞的细胞内胆固醇合成，从而减少脂筏。当没有脂筏支持时，ACE2的活性会受到抑制，从而减少或消除SARS-CoV-2和其他依赖ACE2进入的病毒的进入途径。这降低了感染率和由此产生的症状。类似地，如果表面蛋白的结构和/或功能依赖于脂筏，则依赖于其他表面蛋白进入的病毒也可以通过施用吸入他汀类药物来抑制或减少。

II.定义

除非另有特别说明，本文中使用的所有技术和科学术语与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同。此外，与本文所述的方法或材料类似或等效的任何方法或材料都可以用于实施本发明。为了本发明的目的，定义了以下术语。

如本文所用，“一”、“一个”或“该”不仅包括具有一个成员的方面，而且还包括具有多于一个成员的方面。例如，单数形式“一”、“一个”和“该”包括复数指称对象，除非上下文另有明确规定。因此，例如，对“一细胞”的提及包括多个这样的细胞，对“该试剂”的提及包括对本领域技术人员已知的一种或多种试剂的提及，等等。“A和/或B”在本文中用于包括以下所有备选方案：“A”、“B”、“A或B”以及“A和B”。

在提供数值范围的情况下，应当理解，除非上下文另有明确规定，否则在该范围的上限和下限之间的每个中间值，直到下限单位的十分之一，以及在该所述范围内的任何其它所述或中间值，都包含在本公开中。这些较小范围的上限和下限可独立地包括在较小范围内，并且也包含在本公开内容内，但受所述范围内受到任何特别排除的限制。在所述范围包括一个或两个极限的情况下，排除一个或两个所包括的极限的范围也包括在本公开中。

本文公开的所有范围还涵盖任何和所有可能的子范围及其子范围的组合。任何列出的范围都可以被认为是充分描述并能够将相同的范围分解为至少相等的一半、三分之一、四分之一、五分之一、十分之一等。作为非限制性示例，本文讨论的每个范围可以容易地分解为下三分之一、中三分之一和上三分之一等。如本领域技术人员也将理解的，所有语言，例如至多、至少、大于、小于等都包括所列举的数字并且指代可以随后分解为上述讨论的子范围的范围。最后，如本领域技术人员将理解的，一个范围包括每个单独的成员。因此，例如，具有1-3个物品的组是指具有1、2或3个物品的组。类似地，具有1-5个物品的组是指具有1、2、3、4或5个物品的组，等等。

应当理解，为了清楚起见，在单独实施例的上下文中描述的本公开的某些特征也可以在单个实施例中组合提供。相反，为了简洁起见，在单个实施例的上下文中描述的本公开的各种特征也可以单独提供或以任何合适的子组合提供。与本公开有关的实施例的所有组合都被本公开特别地包含并且在本文中公开，就好像每一种组合都被单独且明确地公开一样。此外，各种实施例及其元素的所有子组合也被本公开特别地包含并在本文中公开，就好像每个这样的子组合在本文中单独且明确地公开一样。

他汀类药物是小分子HMG-CoA还原酶抑制剂。他汀类药物旨在阻断甲羟戊酸代谢途径，从而减少体内FPP、GGPP和胆固醇的产生。本公开的合适的他汀类药物包括但不限于辛伐他汀、匹伐他汀、罗苏伐他汀、阿托伐他汀、洛伐他汀、氟伐他汀、美伐他汀、西立伐他汀、替尼伐他汀和普伐他汀，以及它们的异构体、对映异构体和非对映异构体。疏水性他汀类药物包括辛伐他汀、匹伐他汀和其他具有相似疏水性的他汀类药物。亲水性他汀类药物包括普伐他汀和其他具有相似亲水性的他汀类药物。

术语“治疗有效量”是指当通过吸入给药时足以减轻病毒性呼吸道感染的他汀类药物(或异构体、对映异构体、非对映异构体)或其混合物的量。病毒性呼吸道感染的减轻可以包括减轻对呼吸道上皮的损伤、减轻或预防症状，包括例如严重的症状如ARDS、病毒性肺炎、肺栓塞、呼吸衰竭、败血症、急性肺损伤(ALI)或死亡。感染了某些病毒(例如SARS-CoV-2)的受试者可能没有症状，或者只有轻微症状，这会导致与此类受试者接触的其他人在不知情的情况下感染。因此，病毒性呼吸道感染的另一种可测量的减轻包括病毒负荷的减少(受试者体内的病毒量，例如，使用基于PCR的测定法测量或估计的)，或感染呼吸道病毒疾病的受试者排出的病毒量的减少。

术语“预防性地”或“预防性治疗”是指预防性治疗方法，其可以防止疾病或疾病症状的发展或进展，和/或最小化疾病的不利影响。在一些情况下，预防性治疗包括预防或显著减少感染(例如，病毒进入细胞或组织)，从而预防或显著减轻疾病。

“亚治疗剂量”是指一种或多种药剂在协同或增强组合制剂、方法或系统中的剂量，其中当单独给药或作为非协同或组合制剂、方法或系统的一部分给药时，药剂的剂量减少到不足或亚治疗的水平，但当作为协同或组合制剂、方法或系统的一部分给药时，其足以用于治疗用途。当作为根据本发明的非协同制剂、方法或系统的一部分通过吸入给药时，药剂的亚治疗剂量可以是药剂有效剂量的约90％、80％、75％、70％、65％、60％、55％、50％、45％、40％、35％、30％、25％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.9％、0.8％、0.7％、0.6％、0.5％、0.4％、0.3％、0.2％或0.1％。

术语“药学上可接受的载体”是指在给药的量和浓度下对受试者无毒的赋形剂，他汀类药物可以溶解和/或悬浮于其中。在本公开的实践中，药学上可接受的载体适合通过吸入给药。药学上可接受的载体可以帮助将活性剂施用于受试者和被受试者吸收。可用于本发明的药用赋形剂包括但不限于粘合剂、填充剂、崩解剂、润滑剂、包衣剂、甜味剂、调味剂和色素。本领域技术人员将认识到其他药物赋形剂可用于本发明。

术语“非病毒性呼吸道疾病”是指非病毒性疾病或病症，其中阻塞、限制或干扰进出肺的气流是主要症状。这种阻塞可能是由呼吸道平滑肌收缩(支气管收缩)和/或粘液过度分泌和/或炎症引起的。非病毒性肺呼吸道疾病包括但不限于哮喘；运动诱发的支气管收缩(或运动诱发的哮喘)；慢性阻塞性肺病(COPD)，可能包括肺气肿、慢性支气管炎和/或α-1抗胰蛋白酶缺乏症(AATD)；哮喘-COPD重叠综合征(ACOS)(也称为哮喘-COPD重叠或ACO)；囊性纤维化；急性支气管炎；嗜酸粒细胞性支气管炎；缩窄性细支气管炎；传染性细支气管炎；和支气管扩张。

术语“病毒性呼吸道感染”是指以呼吸道上皮细胞和/或呼吸道平滑肌感染为主要症状的疾病或病症。非限制性示例性病毒性呼吸道感染包括由冠状病毒(包括，例如，SARS-CoV、MERS-CoV和SARS-CoV-2)、麻疹病毒(包括，例如，麻疹和犬瘟热)、布尼亚病毒(包括，例如汉坦病毒和克里米亚-刚果出血热病毒)、沙粒病毒(包括，例如，拉沙病毒和鸠宁病毒)、流感、鼻病毒(包括“普通感冒”)和腺病毒(包括，例如，HAdV-B和HAdV-C)。

“抗病毒”剂是能够抑制生长、复制、传染性或其他降低或消除病毒对哺乳动物对象的影响的因素的化合物。

“减少”或“抑制”是指化合物减轻与感染相关的症状的能力。例如，该化合物在给予有需要的受试者后可以降低病毒滴度或病毒载量。在另一个非限制性实例中，化合物可在施用化合物后降低或抑制受试者中蛋白质、细胞因子或免疫反应的水平。

术语“受试者”是指动物，例如哺乳动物，包括但不限于灵长类动物(例如人)、牛、绵羊、山羊、马、狗、猫、兔、大鼠、小鼠等。在某些实施方案中，受试者是人。

术语“给药”是指给受试者口服给药、以栓剂形式给药、局部接触、肠胃外、静脉内、腹膜内、肌肉内、病灶内、鼻内或皮下给药、鞘内给药或植入缓释装置，例如微型渗透泵。

“治疗”是指治疗或改善损伤、病理、病症或症状(例如疼痛)的任何成功标志，包括任何客观或主观参数，例如减轻；缓解；减少症状或使症状、损伤、病理或病症对患者更易耐受；减少症状或病症的频率或持续时间；或者，在某些情况下，防止症状发作。症状的治疗或改善可以基于任何客观或主观参数；包括，例如，体检的结果。

术语“病毒滴度”或“病毒载量”是指一定量的液体中病毒的量，可以通过体积来测量。病毒载量可以以每毫升的病毒或传染性颗粒表示。较高的病毒滴度或病毒载量可能与活动性病毒感染的严重程度相关。用于确定病毒载量的测试可能包括但不限于逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测试、分支DNA(bDNA)测试、定性转录介导的扩增测定和基于核酸序列的扩增(NASBA)测试。

III.制剂

所公开的组合物被配制成适合吸入，其中组合物被吸入或喷入鼻咽和肺中。理想地，组合物以这样的方式施用，即其均匀分布在整个鼻道和呼吸道中，直接向鼻咽和呼吸道的上皮提供有效量的他汀类药物。这通常通过将制剂作为悬浮在空气或气体中的小颗粒群给药来实现，其中粒径分布影响颗粒将穿透气管远端的距离。该组合物可以是溶液、悬浮液、粉末或其他适合肺部给药的形式。例如，参见H.M.Mansour等人，国际纳米医学杂志(IntJ Nanomed)(2009年)4：299-319。这些组合物例如以气溶胶、汽雾化、雾化或汽化形式通过本领域已知的适当装置施用于肺。所施用的组合物的量可以通过提供阀门以输送计量的量来控制，如在计量剂量吸入器(MDI)中，其在每次启动装置时以喷雾形式递送固定剂量。以这种方式，可以从包含多个剂量的装置中可靠地递送适当剂量(例如，治疗有效量)的组合物。

用于递送的制剂通常设计为与特定的给药模式一起使用，例如气雾剂制剂、喷雾器制剂或干粉制剂。

本公开的制剂包含治疗有效量的他汀类药物。在一些实施方案中，治疗有效量为至少约0.005、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.75、0.8、0.9、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10、12、14、15、17、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95或100μg。在一些实施方案中，治疗有效量为至少约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.75、0.8、0.9、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10、12、14、15、17、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95或100毫克。在一些实施方案中，治疗有效量将不大于约100、95、90、85、80、75、70、65、60、55、50、45、40、35、30、25、20、15、10、9、8、7、6、5、4、3、2、1、0.9、0.8、0.7、0.6、0.5、0.4、0.3、0.2、0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01或0.005毫克。

在一些实施方案中，该制剂还包含另外的治疗剂。由于另外的治疗剂也不受肝脏首过代谢的影响，它也可以以通常低于口服或肠胃外给药的有效剂量的剂量给药。在一些实施方案中，通过吸入给药时的有效剂量小于约90％、80％、75％、70％、65％、60％、55％、50％、45％、40％、35％、30％、25％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.9％、0.8％、0.7％、0.6％、0.5％、0.4％、0.3％、0.2％或0.1％的通常推荐用于口服给药的剂量。

在一些实施方案中，用于吸入的制剂被设计为将他汀类药物和/或另外的治疗剂递送至下呼吸道。在一些实施方案中，该制剂设计为通过下呼吸道吸收将他汀类药物和/或另外的治疗剂递送至体循环。用于制备靶向下呼吸道或体循环的吸入制剂的技术和方法是已知的：参见，例如，J.G.Weers等人，《AAPS药学科技(AAPS Pharm Sci Tech)》(2019)20(3)：103；J.S.Patton等人，《美国胸科学学会会议论文(Proc Am Thorac Soc)》(2004年)1(4)：338-44。用于吸入的全身靶向制剂可用于减少非呼吸道组织中的病毒感染，因为一些病毒靶向呼吸道上皮以外的组织。可通过将吸入的他汀类药物递送至体循环来靶向的组织包括但不限于循环系统，包括心脏、动脉、静脉和毛细血管；消化道，包括食道、胃、小肠和大肠；和其他。

该制剂可以含有任何药物活性他汀类药物或其混合物。在一些实施方案中，所述的他汀类药物选自下组：辛伐他汀、匹伐他汀、瑞舒伐他汀、阿托伐他汀、洛伐他汀、氟伐他汀、美伐他汀、西立伐他汀、替尼伐他汀和普伐他汀，及其异构体、对映异构体和非对映异构体。在一些实施方案中，所述的他汀类药物选自下组：辛伐他汀、匹伐他汀、阿托伐他汀、洛伐他汀和普伐他汀。在一些实施方案中，所述的他汀类药物选自下组：辛伐他汀和匹伐他汀。在一些实施方案中，所述的他汀类药物是辛伐他汀。在一些实施方案中，所述的他汀类药物是匹伐他汀。

他汀类药物可配制成海绵状多孔微球。合适的微球通过两步法制备。在第一步中，通过在水或磷酸盐缓冲盐水中高压均化长链饱和磷脂(例如，二硬脂酰磷脂酰胆碱)来制备亚微米水包油(O/W)乳液。这导致磷脂作为乳化剂掺入油/水界面。

第二步包括将API与基质形成剂如海藻酸钠(用钙控制凝胶化)、壳聚糖、海藻糖、棉子糖、亮氨酸、羟丙基甲基纤维素、羟丙基-β-环糊精和/或分散剂如F-68(一种聚氧乙烯-聚氧丙烯二嵌段共聚物)逐滴混合到水包油乳液中。将所得混合物雾化以供给药，或将其喷雾干燥以干粉制剂形式给药。

本公开的制剂还包括另外的治疗剂，其可以选自抗病毒剂，例如RNA聚合酶抑制剂、TMPRSS2抑制剂、病毒蛋白酶抑制剂、病毒调节蛋白抑制剂、病毒衣壳组装抑制剂、病毒进入抑制剂、病毒包膜或非包膜抑制剂，以及免疫刺激剂，例如IFNγ。抗病毒剂的实例包括但不限于氯喹或其盐、羟氯喹或其盐、金刚烷胺、金刚烷乙胺、洛匹那韦、利托那韦、阿比朵尔、瑞德西韦、法匹拉韦、甲磺酸奈非那韦、阿奇霉素、巴弗洛霉素、卡莫司他或其盐、地瑞那韦、奥司他韦和利巴韦林。在一些实施方案中，所述的制剂包含另外的抗病毒剂，选自RNA聚合酶抑制剂、TMPRSS2抑制剂、病毒蛋白酶抑制剂、病毒调节蛋白抑制剂、病毒衣壳组装抑制剂、病毒进入抑制剂和病毒包膜或非包膜抑制剂。在一些实施方案中，另外的抗病毒剂是磷酸氯喹、硫酸羟氯喹、金刚烷胺、金刚烷乙胺、洛匹那韦、利托那韦、阿比朵尔、瑞德西韦、法匹拉韦、甲磺酸奈非那韦、阿奇霉素、巴弗洛霉素、甲磺酸卡莫司他、地瑞那韦、奥司他韦或利巴韦林。在一些实施方案中，另外的抗病毒剂是磷酸氯喹、硫酸羟氯喹、瑞德西韦、法匹拉韦、甲磺酸奈非那韦、阿奇霉素、巴弗洛霉素、甲磺酸卡莫司他或地瑞那韦。在一些实施方案中，另外的抗病毒剂是氯喹或其盐或酯。在一些实施方案中，所述盐是磷酸氯喹。在一些实施方案中，另外的抗病毒剂是羟氯喹或其盐或酯。在一些实施方案中，盐是硫酸羟氯喹。在一些实施方案中，另外的抗病毒剂是卡莫司他或其盐或酯。在一些实施方案中，盐是甲磺酸卡莫司他。在一些实施方案中，包括两种或更多种另外的抗病毒剂的组合。在一些实施方案中，所述的组合包含阿奇霉素和氯喹或其盐或酯。在一些实施方案中，所述的组合包含阿奇霉素和羟氯喹或其盐或酯。在一些实施方案中，所述的组合包含阿奇霉素和卡莫司他或其盐或酯。在一些实施方案中，所述的另外的治疗剂是瑞德西韦。在一些实施方案中，所述的另外的治疗剂是地塞米松。在一些实施方案中，所述的另外的治疗剂是地塞米松，并且进一步包含瑞德西韦。

也可以使用被发现抑制病毒蛋白或与病毒蛋白相互作用或防止病毒利用宿主蛋白的其它化合物和疗法。就SARS-CoV-2而言，最近报道了病毒蛋白与宿主蛋白之间的相互作用和过程，参见，例如,D.E.Gordon等人，自然(2020年)doi.org/10.1038/s41586-020-2286-9)。已鉴定出体外干扰病毒过程的化合物，包括但不限于溴结构域抑制剂、Sigma 1和/或Sigma 2受体靶向药物、抗组胺药、蛋白质翻译抑制剂、抗精神病药、抗抑郁药和抗焦虑药。在一些实施方案中，另外的抗病毒剂是溴结构域抑制剂(BETS)、Sigma 1和/或Sigma2受体靶向药物(例如但不限于PB28)、抗组胺剂(例如但不限于氯马斯汀和/或氯哌斯汀)、蛋白质翻译抑制剂(例如但不限于佐他替芬、特拉廷(ternatin-4)和/或普拉泰(plitidepsin))、抗精神病药物(例如但不限于氟哌啶醇和/或氯拉嗪(cloperazine))；或西拉美新(一种抗抑郁和抗焦虑药物)。在一些实施方案中，抗病毒剂是PB28、氯马斯汀、氯哌斯汀、佐他替芬、特拉廷、普拉泰、氟哌啶醇、氯拉嗪或西拉美新。

本公开的制剂进一步包括另外的治疗剂，其可以选自β-激动剂；皮质类固醇；毒蕈碱拮抗剂；RhoA抑制剂；GGTase-I或-II抑制剂；ROCK1和/或ROCK2抑制剂；可溶性环氧化物水解酶抑制剂；脂肪酸酰胺水解酶抑制剂；白三烯受体拮抗剂；磷酸二酯酶-4抑制剂，如罗氟司特；5-脂氧合酶抑制剂，例如齐留通；肥大细胞稳定剂，例如奈多罗米；角鲨烯合酶抑制剂，例如拉帕司他(lapaquistat)、萨拉戈西酸(zaragozic acid)和RPR 107393；法尼基焦磷酸合酶抑制剂，包括但不限于二膦酸盐，例如阿仑膦酸盐、依替膦酸盐、氯屈膦酸盐、替鲁膦酸盐、帕米膦酸盐、奈立膦酸盐、奥帕膦酸盐、伊班膦酸盐、利塞膦酸盐、唑来膦酸盐；茶碱；抗IL5抗体或抗体衍生物；抗IgE抗体或抗体衍生物；抗IL5受体抗体或抗体衍生物；抗IL13/4受体抗体或抗体衍生物；生物制剂，例如美泊利单抗、瑞利珠单抗、贝那利珠单抗、奥马珠单抗和杜匹鲁单抗；β-激动剂和毒蕈碱拮抗剂组合，包括长效和短效制剂；β-激动剂和皮质类固醇组合，包括长效和短效制剂；皮质类固醇和毒蕈碱拮抗剂组合，包括长效和短效制剂；β-激动剂、皮质类固醇和毒蕈碱拮抗剂组合，包括长效和短效制剂。

抗体衍生物是能够结合类似于或基于抗体的抗原的蛋白质。抗体衍生物的实例包括纳米抗体、双抗体、三抗体、微型抗体、F(ab')2片段、F(ab)v片段、单链可变片段(scFv)、单域抗体(sdAb)及其功能片段。

适合用作另外的治疗剂的皮质类固醇包括但不限于：倍氯米松、氟替卡松、布地奈德、莫米松、氟尼缩松、阿氯米松、倍氯米松、倍他米松、氯倍他索、氯倍他松、氯可托龙、去羟米松、地塞米松、二氟拉松、双氟可龙、氟氯龙、氟米松、氟可汀、氟可龙、氟泼尼汀、氟替卡松、糠酸氟替卡松、卤米松、甲泼尼松、莫米松、糠酸莫米松、帕拉米松、泼尼立定、利美索龙、乌倍他索、安西奈德、环索奈德、地夫可特、地奈德、福莫可他、氟氯奈德、氟氢缩松、醋酸氟轻松、氟轻松、哈西奈德和曲安奈德。

毒蕈碱拮抗剂是阻断毒蕈碱乙酰胆碱受体的抗胆碱药物，因此可以阻断支气管收缩。适合用作另外的治疗剂的毒蕈碱拮抗剂包括但不限于：异丙托溴铵、噻托溴铵、格隆溴铵(glycopyrrolate)、格隆溴铵(glycopyrronium bromide)、雷芬那辛、芜地溴铵、阿地溴铵、曲司氯铵、氧托溴铵、奥昔布宁、托特罗定、索利那新、非索罗定和达非那新。

β-激动剂是激活β2-肾上腺素能受体的化合物，用于放松气道平滑肌。适合用作另外的治疗剂的β-激动剂包括但不限于：沙丁胺醇、阿莫特罗、布酚宁、克仑特罗、波培明(bopexamine)、肾上腺素、非诺特罗、福莫特罗、异他林、异丙肾上腺素、奥西那林、左沙丁胺醇(levoalbutamol)、左沙丁胺醇(levalbuterol)、吡布特罗、丙卡特罗、利托君、沙丁胺醇(albuterol)、沙美特罗、特布他林、阿布他明、布福洛尔、溴乙酰基阿普洛尔薄荷烷(bromoacetylalprenololmenthane)、溴沙特罗、西马特罗、西拉唑啉、依替福林、海索那林、去甲乌药碱、异舒普林、马布特罗、甲氧那明、安心酮、莱克多巴胺、瑞普特罗、利米特罗、夜罗宁、妥布特罗、齐帕特罗和辛特罗(zintero)。

ROCK抑制剂抑制Rho激酶(ROCK1和/或ROCK2)。合适的ROCK抑制剂包括，例如，1-甲基-5-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)-1H-吲唑(“TS-f22”，M.Shen等人，《科学报告(SciRep)》(2015)5：16749)，(1S)-2-氨基-1-(4-氯苯基)-1-[4-(1H-吡唑-4-基)苯基]乙醇(“AT13148”，T.A.Yap等人，《临床癌症研究(Clin Cancer Res)》(2012)18(14):3912-23)，N-(6-氟-1H-吲唑-5-基)-6-甲基-2-氧代-4-[4-(三氟甲基)苯基]-3,4-二氢-1H-吡啶-5-甲酰胺(“GSK429286A”，E.Ahler等人，《分子细胞(Mol Cell)》(2019)74(2):393-408e20),1-[(3-羟基苯基)甲基]-3-(4-吡啶-4-基-1,3-噻唑-2-基)尿素(“RKI-1447,”H.Wang等人，《癌症研究》(Cancer Res)(2017)77(8)：2148-60)和4-[(1R)-1-氨基乙基]-N-吡啶-4-基环己烷-1-甲酰胺(“Y-27632”，Y-C.Liao等人，《细胞(cell)》(2019)179(1)：147-64.e20)。合适的RhoA抑制剂包括N-[1-(4-氯苯胺基)-1-氧代丙烷-2-基]氧基-3,5-双(三氟甲基)苯甲酰胺等化合物(“CCG-1423”,D.A.Lionarons等人，《癌细胞(Cancer Cell)》(2019)36(1):68-83.e9)。合适的GGTI抑制剂包括诸如N-(1-氨基-1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-4-[2-(3,4-二氯苯基)-4-(2-甲硫基乙基)-5-吡啶-3-基吡唑-3-基]氧基丁酰胺的化合物(“GGTI-DU40”，Y.K.Peterson等人，《生物化学杂志(J Biol Chem)》(2006)281:12445-50)，和(2S)-2-[[4-[[(2R)-2-氨基-3-硫基丙基]氨基]-2-萘-1-基苯甲酰基]氨基]-4-甲基戊酸2，2，2-三氟乙酸(“GGTI-297”，P.A.Subramani等人，《生物信息(Bioinformation)》(2015)11(5):248-53)。合适的可溶性环氧化物水解酶抑制剂包括化合物例如1-(1-乙酰基哌啶-4-基)-3-(1-金刚烷基)脲(“AR9281”，R.H.Ingraham等人，《现代药物化学(Curr Med Chem)》(2011)18(4):587-603)，1-(1-丙酰基哌啶-4-基)-3-[4-(三氟甲氧基)苯基]脲(“TPPU”，Y-M.Kuo等人，《分子神经生物学(Mol Neurobiol)》(2019)56:8451-74)。

合适的脂肪酸酰胺水解酶抑制剂包括但不限于化合物例如4-羟基-N-[(5Z，8Z，11Z，14Z)-二十-5，8，11，14-四烯基]苯甲酰胺(“AM-1172”，C.J.Hillard等人，《分子神经科学杂志(J Mol Neurosci)》(2007)33:18-24)，N-苯基-4-(3-苯基-1，2，4-噻二唑-5-基)-1-哌嗪甲酰胺(“JNJ 1661010”，T.Lowin等人，《关节炎研究与治疗(Arth Res Ther)》(2015)17:321)，和N-3-吡啶基-4-[[3-[[5-(三氟甲基)-2-吡啶基]氧基]苯基]甲基]-1-哌啶甲酰胺(“PF-3845”，S.Ghosh等人，《药理学与实验学杂志(J Pharmacol Exp)》(2015)354(2):111-20)。合适的白三烯受体拮抗剂包括但不限于扎鲁司特、孟鲁司特和齐留通等化合物。

(a)气雾制剂

气雾剂是小固体颗粒或液滴的悬浮液，通常平均直径<10μm，悬浮在空气或其他气体中。众所周知，在本领域中，气雾制剂被用于将药物输送到呼吸道中。例如，参见A.Adjei等人，《药学研究杂志(J Pharm Res)》(1990)1：565-69；P.Zanen等人，《国际药剂学杂志(JInt J Pharm)》(1995)114：111-15；I.Gonda,《治疗药物载体系统的重要评论(Crit RevTher Drug Carrier Syst)》(1990)6：273-313；Anderson等人，《美国呼吸系统疾病综述(AmRev Respir Dis)》(1989)140：1317-24；所有这些内容的全部内容以引用的方式并入本文。

通过加压定量吸入器(pMDI)进行气雾剂给药的组合物可以配制成溶液或悬浮液。溶液组合物的制造更为方便，因为活性剂可以完全溶解在推进剂载体中,并且避免了有时与悬浮组合物相关的物理稳定性问题(例如颗粒聚集)。如果药剂在推进剂中不充分溶解，可以使用共溶剂如乙醇用于提高通过pMDI给药的药物组合物中的溶解度。在一些实施方案中，所述的制剂包括溶解在推进剂和共溶剂中的他汀类药物。

悬浮制剂可以包括小的、药剂的固体颗粒，通常具有小于约10μm的平均直径。这种制剂可以通过研磨或碾磨该试剂的结晶形式，或通过喷雾-干燥含有该试剂的溶液来制备。在一些实施方案中，所述的制剂包括粉状他汀类药物、推进剂和悬浮载体。在一些实施方案中，所述的悬浮载体选自环糊精、PEG400、PEG1000和丙二醇(1，2-丙二醇)。

药物组合物可以用一种或多种合适的推进剂配制，例如氢氟烷烃、CO₂或其他合适的气体。在一些实施方案中，可以添加表面活性剂以降低组合物、推进剂和共溶剂(如果存在的话)之间的表面张力和界面张力。所述的表面活性剂可以是任何合适的、无毒的化合物，其不与其他药物组合物组分反应并且将组合物、推进剂和共溶剂之间的表面张力和/或界面张力降低至所需程度。在一些实施方案中，所述的制剂在正常操作条件下不需要表面活性剂来产生和/或维持稳定的药物组合物溶液，并且可以不含表面活性剂。

(b)雾化器制剂

“雾化”是指将液体还原成细小的喷雾或薄雾。以受控方式从较大的液体制剂主体产生均匀尺寸的小液滴，通常具有约0.5μm至约10μm的平均粒径。可以通过任何合适的方式实现雾化，包括机械雾化器，例如Soft Mist雾化器，其中制剂在弹簧压力下通过喷嘴挤出；喷射雾化器，其中压缩机压缩空气或氧气以高速流过液体，形成雾；超声波雾化器，其中以超声频率振荡的压电换能器与液体制剂接触，振动形成雾或气溶胶；或振动筛网雾化器，其中带有小孔的筛网或膜在储液器表面振动，形成细雾。使用任何这些技术的雾化器都是市售的。当活性成分适合通过喷雾器一起或单独给药时，它们可以是喷雾水悬浮液或溶液的形式，有或没有合适的pH或张力调节，作为单位剂量或多剂量装置。

用于喷雾器给药的制剂通常，但不一定，主要是水溶液。在待施用的药剂仅微溶于水的情况下，可加入药学上可接受的共溶剂如乙醇以溶解或帮助溶解药剂。或者，该制剂可以是悬浮在主要是水性载体中的适当尺寸颗粒的悬浮液。药剂还可以配制成固体脂质微粒(SLM)、固体脂质纳米颗粒(SLN)或脂质体，并悬浮在液体载体中用于雾化或气雾化。参见，例如，M.Paranjpe等人，《国际分子科学杂志(Int J Mol Sci)》(2014)15:5852-73；M.J.deJesús Valle等人，《抗生素杂志(J Antibiot)》(东京)(2013)66(8):447-51，均以引用方式并入本文。如本领域所教导的，可以通过许多参数来调节雾化液滴的粒径，包括例如制剂粘度和表面张力，以及雾化器特性。

(c)干粉制剂：

顾名思义，干粉制剂没有液体载体。而是将活性剂和赋形剂磨碎或研磨成细粉，具有适合吸入的粒径。该制剂设计为通过剧烈吸入和/或一股压缩空气或气体进入肺部。当施用难以溶解或悬浮在常规液体载体中的药剂时，干粉制剂特别方便。

除了一种或多种活性剂之外，干粉制剂通常还含有赋形剂。这些赋形剂通常加入用以改善产品的流动性，包括分散和吸收，以及储存期间的化学稳定性。例如，所述制剂可以使用本领域已知的方法例如通过喷雾干燥(A.A.Ambike等人,《药物研究(Pharm Res)》(2005)22(6):990-98)、研磨或碾磨、挤出、沉淀和/或筛选来制备，以获得可吸入粉末。使用的赋形剂也可以是通过混合不同平均粒径的赋形剂部分获得的研磨赋形剂的混合物。

用于制备在吸入器(或其药筒)中使用的可吸入粉末的生理学上可接受的赋形剂的实例包括单糖(例如葡萄糖、果糖或阿拉伯糖)、二糖(例如乳糖、蔗糖、麦芽糖、海藻糖)、寡糖和多糖(例如，葡聚糖、糊精、麦芽糖糊精、淀粉、纤维素)、多元醇(例如，山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇)、环糊精(例如，α-环糊精、β-环糊精、χ-环糊精、甲基-β-环糊精，羟丙基-β-环糊精、磺丁基-β-环糊精(Dexolve^TM))、氨基酸(例如，盐酸精氨酸)和盐(例如，氯化钠、碳酸钙)，或它们的混合物。乳糖、葡萄糖和其他化合物可以以其水合物的形式使用。赋形剂可以在粉末化过程之前、期间或之后与他汀类药物组合。

在可吸入粉末的范围内，赋形剂可具有高达约250μm、10至150μm或15至80μm的最大平均粒径。还可以将平均粒径为1至9μm的更细的赋形剂部分添加到上述赋形剂中。可以使用本领域已知的方法(例如WO 02/30389)确定平均粒径。最后，为了制备可吸入粉末，将平均粒径为约0.5至约10μm，或约1至约5μm的微粉化结晶他汀类药物添加到赋形剂混合物中(参见，例如，WO 02/30389)。研磨和微粉化活性物质的方法是本领域已知的。如果没有专门制备的赋形剂混合物用作赋形剂，可以使用平均粒径为10-50μm、10％细粒含量为0.5-6μm的赋形剂。在一些实施方案中，最大平均粒径小于约250、225、200、190、180、170、160、150、140、130、125、120、115、110、105、100、95、90、85、80、75、70、65、60、55、50、45、40、35、30、25、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、65、4、3、2、或1μm。在一些实施方案中，平均粒径至少约为0.001、0.005、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、15、17、19、20、25、30、35、40、45或50μm。在一些实施方案中，平均粒径小于约250、225、200、190、180、170、160、150、140、130、125、120、115、110、105、100、95、90、85、80、75、70、65、60、55、50、45、40、35、30、25、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2或1μm。

在制备干粉制剂的一种方法中，将赋形剂和活性剂置于合适的混合容器中。在一些实施方案中，活性剂具有0.5至10μm、1至6μm或2至5μm的平均粒径。使用筛孔尺寸为0.1至2mm、0.3至1mm或0.3至0.6mm的筛或制粒筛加入赋形剂和活性剂。可以先添加赋形剂，然后将活性剂添加到混合容器中。在该混合过程中，两种组分可以分批加入，两种组分在交替的层筛分。赋形剂与活性剂的混合可在两种组分仍在添加时进行。

可吸入粉末也可以配制成PulmoSpheres(参见，例如，J.G.Weers等人，《治疗性递送(Ther Deliv)》(2014年)5(3):277-95；J.G.Weers等人，《美国只制药科学家协会(AAPSPharSciTech)》(2019)20(3)：103；和美国专利No.9452139，均以引用方式并入本文)，其中微粉化药物颗粒的悬浮液被喷雾-干燥以形成粉末。或者，粉末和悬浮液可以由自组装纳米颗粒配制(参见例如，N.J.Kenyon等人，《公共科学图书馆(PLOS One)》(2013)doi.org/10.1371/journal.pone.0077730)。

吸入器

三种主要类型的吸入器是雾化器、加压定量吸入器(pMDI)和干粉吸入器(DPI)。雾化器将药物的液体溶液或悬浮液转化为细小的液滴雾，然后吸入肺部。与pMDI或DPI相比，雾化器通常需要更长的时间来给药，并且由于药物在设备中和周围空气中的损失，在吸收药物的确切剂量方面不太准确。然而，它们通常是最容易使用的，并且可以用于太年轻而无法操作pMDI或DPI或失去知觉的受试者。雾化器通常包括容纳药物制剂的容器、雾化室、面罩和用于雾化制剂的装置。在喷射雾化器中，该装置包括一个喷嘴，空气高速通过该喷嘴，该喷嘴通过毛细管向上抽吸液体制剂。制剂的液滴被夹带在空气射流中，并撞击挡板，所述挡板减小液滴尺寸和/或筛除过大的液滴。所述的挡板还降低了空气速度，因此产生的雾气以较低的速度离开雾化器，更有可能到达下呼吸道。由于液滴的蒸发，这些装置中的雾化过程通常会降低制剂的温度。喷射雾化器通常需要压缩机来产生气流，这使得它们比其他吸入器更嘈杂且更不便携。

超声雾化器采用在超声频率振动的元件，以将液体制剂破碎成液滴。所述的振动元件通常是刚性网或穿孔膜。这些雾化器通常比喷射式雾化器更安静，并且不需要压缩机，尽管它们仍然需要电源。所述的超声振动通常会提高制剂的温度。

pMDI包含处于压力下的推进剂中的药物溶液或悬浮液，并包含一个阀门，该阀门在启动时递送精确测量的制剂量。所述的推进剂通常是气体，例如氢氟烷烃推进剂，其与药物和任选地助溶剂例如乙醇和/或表面活性剂结合。将制剂压缩成液态，并装入pMDI或pMDI药筒中。典型的pMDI将液体形式的制剂释放到计量室中，计量室确定剂量。当装置启动时，测量的制剂被释放到膨胀室中，推进剂在此挥发。为了有效和一致的输送药物，使用pMDI的受试者必须使他或她的呼吸与设备驱动相协调，以确保尽可能大量的气溶胶到达下呼吸道。现代pMDI可能还包括阀门或传感装置，它们仅在受试者吸入时才释放气溶胶。大多数pMDI还使用间隔器，它本质上是pMDI和受试者之间的管子，它提高了气溶胶输送的效率并允许推进剂有更多时间蒸发(导致更小的液滴)。

通常，DPIs含有一定量的干粉形式的药物，任选地具有干粉载体，例如粉状乳糖。DPI依靠受试者的剧烈吸入来释放粉末制剂，而不是形成雾或气溶胶。它们通常比pMDI更易于使用，尽管递送效率部分取决于受试者能够产生的空气速度。呼吸触发但动力辅助的较新DPIs正在开发中。

本公开的制剂可以使用可商购的吸入装置例如雾化器来施用，例如但不限于Soft Mist^TM吸入器；吸入器，例如/>吸入器、/>吸入器、吸入器、/>吸入器、/>吸入器、/>吸入器(阿莱克萨制药公司，山景市，加利福尼亚州(Alexza Pharmaceuticals，Mountain View，CA))等。吸入器可以是预填充的、包含一个或多个治疗剂量的本公开的制剂，或者可以被配置为接受预填充有一个或多个治疗剂量的本公开的制剂的药筒。

例如，可吸入粉剂和气雾剂可以使用吸入器来施用，所述吸入器通过测量室(参见例如US 4,570,630)或通过其他方式(参见例如DE 3625685)计量来自容器的单次剂量。在一些实施方案中，可吸入粉末被装入胶囊或药筒中，所述胶囊或药筒用于例如WO 94/28958中所述的吸入器中。

用于吸入器的胶囊和药筒可以配制成含有所公开的化合物或药物组合物的粉末混合物和合适的粉末基质如乳糖或淀粉。

系统

本公开的方法还可以使用本公开的系统来实施，所述系统包含他汀类药物或他汀类药物制剂，以及一种或多种另外的治疗剂或包含一种或多种另外的治疗剂的制剂。在本公开的系统中，他汀类药物和另外的治疗剂不需要存在于相同的制剂中，并且可以在不同的时间施用。在一些实施方案中，所述的系统包含选自下组的他汀类药物：辛伐他汀、匹伐他汀、罗苏伐他汀、阿托伐他汀、洛伐他汀、氟伐他汀、美伐他汀、西立伐他汀、替尼伐他汀和普伐他汀，以及它们的异构体、对映异构体和非对映异构体。在一些实施方案中，所述的他汀类药物选自辛伐他汀、匹伐他汀、洛伐他汀、氟伐他汀、美伐他汀、西立伐他汀和替尼伐他汀。在一些实施方案中，所述的他汀类药物是疏水性他汀类药物。在一些实施方案中，所述的他汀类药物是辛伐他汀或匹伐他汀。在一些实施方案中，所述的他汀类药物是匹伐他汀类药物。在一些实施方案中，所述的他汀类药物是辛伐他汀类药物。

在一些实施方案中，所述的制剂是干粉制剂。在一些实施方案中，所述的制剂是气雾制剂。在一些实施方案中，所述的制剂是喷雾制剂。在一些实施方案中，所述的喷雾制剂包含他汀类药物的水溶液。在一些实施方案中，所述的喷雾制剂还包含药学上可接受的醇。在一些实施方案中，所述的药学上可接受的醇包括乙醇。

在一些实施方案中，所述的系统还包括另外的治疗剂。所述的另外的治疗剂可以治疗与他汀类药物相同的疾病、病症或症状，或者可以治疗相同疾病或病症的不同症状。一种或多种他汀类药物与一种或多种其他治疗剂的组合在一些情况下表现出加和效应，其中由组合制剂引起的反应程度与单独施用时每种药剂的反应程度的总和基本相同。组合也可以产生亚加和效应，其中组合产生的反应程度小于单独给药时每种药剂的反应程度之和(但仍大于单独使用任一药剂产生的反应)，或协同效应，其中组合产生的反应程度大于单独给药时每种药剂的反应程度之和。因此，一种或多种他汀类药物和一种或多种另外的治疗剂的组合可用于在施用给定剂量时实现更大的反应，在施用降低的剂量时实现相同的反应，或其任意组合。

如果组合产生的效果程度大于所需或需要的程度，则可以减少一种或多种药剂的剂量，直到达到所需的效果程度。对于每种药剂，剂量减少的量不一定是相同的量或百分比。这可以用来减少副作用，或最小化遇到副作用的可能性。因此，协同组合制剂中的一种或多种药剂的剂量可以降低到当单独给药或作为非协同组合制剂的一部分给药时不足或亚治疗的水平，但当作为协同组合制剂的一部分给药时，足以用于治疗用途。协同组合制剂中药剂的亚治疗剂量可以是当作为根据本发明的非协同制剂的一部分通过吸入给药时药剂有效剂量的约90％、80％、75％、70％、65％、60％、55％、50％、45％、40％、35％、30％、25％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.9％、0.8％、0.7％、0.6％、0.5％、0.4％、0.3％、0.2％或0.1％。

在一些系统中，吸入他汀类药物的给药增强了在给定时间段后给药的另外的治疗剂的作用，并提供了比单独的他汀类药物或另外的治疗剂更好的治疗效果。在一些系统中，吸入他汀类药物的给药增强了另外的治疗剂的作用，而不是减少呼吸道病毒感染。在一些系统中，另外的治疗剂的施用晚于他汀类药物。在一些实施例中，所述的时间段是至少约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23或24小时，或约1、2或3天。在一些实施例中，所述的时间段不超过约72、48、36、24、23、22、21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7或6小时。

所述的另外的治疗剂可以是本公开中描述的任何另外的治疗剂。在一些实施方案中，另外的治疗剂是氯喹或其盐、羟氯喹或其盐、金刚烷胺、金刚烷乙胺、洛匹那韦、利托那韦、阿比朵尔、瑞德西韦、法匹拉韦、甲磺酸奈非那韦、阿奇霉素、巴弗洛霉素、卡莫司他或其盐、地瑞那韦、奥司他韦和利巴韦林。在一些实施方案中，另外的治疗剂包括两种或更多种抗病毒剂。在一些实施方案中，另外的抗病毒剂是溴结构域抑制剂(BETS)、Sigma 1和/或Sigma 2受体靶向药物(例如但不限于PB28)、抗组胺剂(例如但不限于氯马斯汀和/或氯哌斯汀)、蛋白质翻译抑制剂(例如但不限于佐他替芬、特拉廷(ternatin-4)和/或普拉泰(plitidepsin))、抗精神病药物(例如但不限于氟哌啶醇和/或氯拉嗪(cloperazine))；或西拉美新(一种抗抑郁和抗焦虑药物)。在一些实施方案中，抗病毒剂是PB28、氯马斯汀、氯哌斯汀、佐他替芬、特拉廷、普拉泰、氟哌啶醇、氯拉嗪或西拉美新。

可以与本公开的吸入他汀类制剂和系统一起使用的另外的抗病毒治疗包括恢复期血浆和/或源自其的抗体；塞利尼索(selinexor)(一种选择性核输出抑制剂(SINE)化合物，可阻断细胞蛋白XPO1；吸入一氧化氮；外泌体和微泡技术(异源心球样细胞团衍生干细胞)；以及脐带血调节性T细胞。

ACE2将血管紧张素II转化为血管紧张素(1-7)(Ang_1-7)，具有抗炎、抗氧化和抗血栓的作用。由于这些作用的减少可能是有害的，本公开的一些系统和治疗还包括该活性的替代或补充。这可以通过施用Ang_1-7、可溶性ACE2和/或其他催化血管紧张素II水解成Ang_1-7的酶来实现。参见，例如，P.Verdecchia等人，《欧洲内科杂志(Eur J Int Med)》(2020)doi.org/10.1016/j.ejim.2020.04.037(印刷中)。或者或另外，例如但不限于，通过施用ACE抑制剂(血管紧张素转化酶)、血管紧张素II受体抑制剂(血管紧张素II受体阻滞剂或ARB)或其组合来降低血管紧张素II活性。合适的ACE抑制剂包括但不限于卡托普利、贝那普利、佐芬普利、培哚普利、群多普利、依那普利、赖诺普利和雷米普利。合适的ARB阻断血管紧张素II1型受体(AT1)的活性，包括但不限于氯沙坦、缬沙坦、坎地沙坦、替米沙坦和非马沙坦。

在一些实施方案中，另外的的治疗剂是倍氯米松、氟替卡松、布地奈德、莫米松、氟尼缩松、阿氯米松、倍氯米松、倍他米松、氯倍他索、氯倍他松、氯可托龙、去羟米松、地塞米松、二氟拉松、双氟可龙、氟氯龙、氟米松、氟可汀、氟可龙、氟泼尼汀、氟替卡松、糠酸氟替卡松、卤米松、甲泼尼松、莫米松、糠酸莫米松、帕拉米松、泼尼立定、利美索龙、乌倍他索、安西奈德、环索奈德、地夫可特、地奈德、福莫可他、氟氯奈德、氟氢缩松、醋酸氟轻松、氟轻松、哈西奈德或曲安奈德，或其组合。在一些实施方案中，另外的治疗剂是沙丁胺醇、阿莫特罗、布酚宁、克仑特罗、波培明(bopexamine)、肾上腺素、非诺特罗、福莫特罗、异他林、异丙肾上腺素、奥西那林、左沙丁胺醇(levoalbutamol)、左沙丁胺醇(levalbuterol)、吡布特罗、丙卡特罗、利托君、沙丁胺醇(albuterol)、沙美特罗、特布他林、阿布他明、布福洛尔、溴乙酰基阿普洛尔薄荷烷(bromoacetylalprenololmenthane)、溴沙特罗、西马特罗、西拉唑啉、依替福林、海索那林、去甲乌药碱、异舒普林、马布特罗、甲氧那明、安心酮、莱克多巴胺、瑞普特罗、利米特罗、夜罗宁、妥布特罗、齐帕特罗或辛特罗(zintero)，或其组合。在一些实施方案中，另外的的治疗剂是沙丁胺醇。在一些实施方案中，另外的的治疗剂包含抗病毒剂和皮质类固醇。

在一些实施方案中，另外的治疗剂是异丙托溴铵、噻托溴铵、格隆溴铵(glycopyrrolate)、格隆溴铵(glycopyrronium bromide)、雷芬那辛、芜地溴铵、阿地溴铵、曲司氯铵、氧托溴铵、奥昔布宁、托特罗定、索利那新、非索罗定、达非那新，或其组合。在一些实施方案中，另外的治疗剂是罗氟司特、齐留通、奈多罗米、角鲨烯合酶抑制剂，例如拉帕司他(lapaquistat)、萨拉戈西酸(zaragozic acid)和RPR 107393；法尼基焦磷酸合酶抑制剂，包括但不限于二膦酸盐，例如阿仑膦酸盐、依替膦酸盐、氯屈膦酸盐、替鲁膦酸盐、帕米膦酸盐、奈立膦酸盐、奥帕膦酸盐、伊班膦酸盐、利塞膦酸盐、唑来膦酸盐；茶碱；抗IL5抗体或抗体衍生物；抗IgE抗体或抗体衍生物；抗IL5受体抗体或抗体衍生物；抗IL13/4受体抗体或抗体衍生物；美泊利单抗、瑞利珠单抗、贝那利珠单抗、奥马珠单抗、杜匹鲁单抗，或其组合。在一些实施方案中，另外的治疗剂是TS-f22、AT13148、GSK429286A、RKI-1447、Y-27632、CCG-1423、GGTI-DU40、GGTI-297、AR9281、TPPU、AM-1172、JNJ 1661010、PF-3845、扎鲁司特、孟鲁司特、齐留通或其组合。

在一些实施方案中，所述另外的治疗剂以包含所述另外的治疗剂和药学上可接受的载体或赋形剂的制剂提供。在一些实施方案中，所述的制剂适合通过吸入给药。在一些实施方案中，所述的制剂适合口服或注射给药。

可以与本公开的吸入他汀类制剂和系统一起使用的其他抗病毒治疗包括恢复期血浆和/或源自其的抗体；塞利尼索(一种选择性核输出抑制剂(SINE)化合物，可阻断细胞蛋白XPO1；吸入一氧化氮；外泌体和/或微泡(例如，异源心球样细胞团衍生干细胞)；以及脐带血调节性T细胞。在一些实施方案中，所述的系统包含本公开的他汀类制剂，恢复期血浆和/或源自其的抗体；selinexor；吸入一氧化氮；外泌体和/或微泡；或脐带血调节性T细胞。

IV.药物组合物

在一些实施方案中，本文提供了一种药物组合物，其包括：治疗有效量的他汀类药物；至少一种另外的治疗剂；和药学上可接受的载体。

在一些实施方案中，所述的他汀类药物选自下组：辛伐他汀、匹伐他汀、罗苏伐他汀、阿托伐他汀、洛伐他汀、氟伐他汀、美伐他汀、西立伐他汀、替尼伐他汀和普伐他汀。在一些实施方案中，所述的他汀类药物选自下组：辛伐他汀和匹伐他汀。在一些实施方案中，所述的他汀类药物是辛伐他汀。在一些实施方案中，所述的他汀类药物是匹伐他汀。在一些实施方案中，所述的另外的治疗剂是β-激动剂、皮质类固醇、毒蕈碱拮抗剂或其任意组合。在一些实施方案中，所述的另外的治疗剂是地塞米松、金刚烷胺、金刚烷乙胺、洛匹那韦、利托那韦、阿比朵尔、瑞德西韦、法匹拉韦、甲磺酸奈非那韦、阿奇霉素、巴弗洛霉素、卡莫司他或其盐、地瑞那韦、奥司他韦、利巴韦林、恢复期血浆或源自其的抗体、塞利尼索、吸入一氧化氮；外泌体和/或微泡；和脐带血调节性T细胞。在一些实施方案中，所述的他汀类药物选自下组：匹伐他汀和辛伐他汀；另外的治疗剂选自下组：瑞德西韦、地塞米松，及其组合。

在一些实施方案中，本文提供了一种用于治疗病毒性呼吸道疾病的药物制剂，所述的组合物包括：治疗有效量的他汀类药物或其异构体、对映异构体或非对映异构体，以及适于通过吸入给药的药学上可接受的载体。在一些实施方案中，本文提供了一种用于治疗病毒性呼吸道疾病的药物制剂，所述的组合物包括：治疗有效量的他汀类药物或其异构体、对映异构体或非对映异构体，以及适于通过吸入和/或鼻内给药的药学上可接受的载体。

在一些实施方案中，所述的药物制剂的给药是通过吸入和/或鼻内给药。在一些实施方案中，所述的药物制剂包括如本文所述的他汀类药物和另外的治疗剂。在一些实施方案中，另外的治疗剂是瑞德西韦或地塞米松。在一些实施方案中，所述的另外的治疗剂是瑞德西韦。在一些实施方案中，所述的另外的治疗剂是地塞米松。

在一些实施方案中，他汀类药物通过吸入和/或鼻内给药，另外的治疗剂通过吸入和/或鼻内给药。在一些实施方案中，他汀类药物通过吸入和/或鼻内给药，另外的治疗剂是瑞德西韦并且通过吸入和/或鼻内给药。在一些实施方案中，他汀类药物通过吸入和/或鼻内给药，另外的治疗剂是地塞米松并且通过吸入和/或鼻内给药。在一些实施方案中，通过吸入和/或鼻内施用他汀类药物，并且口服施用另外的治疗剂。在一些实施方案中，他汀类药物通过吸入和/或鼻内给药，另外的治疗剂是瑞德西韦并口服给药。在一些实施方案中，他汀类药物通过吸入和/或鼻内给药，另外的治疗剂是地塞米松并口服给药。

本发明的组合物可以制备成多种口服、非肠道和局部剂型。口服制剂包括适合患者摄入的片剂、丸剂、粉剂、糖衣丸、胶囊剂、液体剂、锭剂、扁囊剂、凝胶剂、糖浆剂、浆剂、混悬剂等。本发明的组合物也可以通过注射给药，即静脉内、肌内、皮内、皮下、十二指肠内或腹膜内。此外，本文所述的组合物可以通过吸入例如鼻内给药。此外，本发明的组合物可以经皮给药。本发明的组合物还可以通过眼内、阴道内和直肠内途径给药，包括栓剂、吹入剂、散剂和气雾制剂(例如类固醇吸入剂，参见Rohatagi，《临床药学杂志(J.Clin.Pharmacol.)》35:1187-1193,1995；Tjwa，《过敏性哮喘和免疫学年鉴(Ann.Allergy Asthma Immunol.)》75:107-111,1995)。因此，本发明还提供了包含药学上可接受的载体或赋形剂和本发明化合物的药物组合物。

为了从本发明的化合物制备药物组合物，药学上可接受的载体可以是固体或液体。固体形式的制剂包括粉剂、片剂、丸剂、胶囊剂、扁囊剂、栓剂和可分散颗粒剂。固体载体可以是一种或多种物质，它们也可以用作稀释剂、调味剂、粘合剂、防腐剂、片剂崩解剂或包封材料。在科学和专利文献中详细描述了制剂和给药技术，参见例如最新版的《雷明顿制药科学(Remington's Pharmaceutical Sciences)》,马克出版公司(Maack Publishing Co)，宾夕法尼亚州伊斯顿(Easton PA)(“Remington's”)。

在粉末中，载体是细碎的固体，它与细碎的活性成分混合在一起。在片剂中，活性成分与具有必要粘合性质的载体以合适的比例混合，并压制成所需的形状和大小。粉剂和片剂优选含有5％或10％至70％的本发明化合物。

合适的固体赋形剂包括但不限于碳酸镁、硬脂酸镁、滑石、果胶、糊精、淀粉、黄蓍胶、低熔点蜡、可可脂、碳水化合物；糖，包括但不限于乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨糖醇、来自玉米、小麦、水稻、马铃薯或其他植物的淀粉；纤维素，例如甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素或羧甲基纤维素钠；和树胶，包括阿拉伯树胶和黄蓍胶；以及蛋白质，包括但不限于明胶和胶原蛋白。如果需要，可以添加崩解剂或增溶剂，例如交联的聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、海藻酸或其盐，例如海藻酸钠。

糖衣丸芯具有合适的包衣，例如浓缩糖溶液，其还可以包含阿拉伯树胶、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、卡波姆凝胶、聚乙二醇和/或二氧化钛、漆溶液和合适的有机溶剂或溶剂混合物。可以将染料或颜料添加到片剂或糖衣丸包衣中，用于产品鉴定或表征活性化合物的量(即剂量)。本发明的药物制剂也可以口服使用，例如，由明胶制成的推入配合胶囊，以及由明胶和包衣如甘油或山梨糖醇制成的软密封胶囊。推入配合胶囊可包含与填充剂或粘合剂如乳糖或淀粉、润滑剂如滑石或硬脂酸镁以及任选的稳定剂混合的本发明化合物。在软胶囊中，本发明的化合物可以溶解或悬浮在合适的液体中，例如脂肪油、液体石蜡或液体聚乙二醇，含或不含稳定剂。

为了制备栓剂，首先熔化低熔点蜡，例如脂肪酸甘油酯或可可脂的混合物，然后通过搅拌将本发明的化合物均匀地分散在其中。然后将熔融的均匀混合物倒入尺寸合适的模具中，使其冷却，从而固化。

液体形式的制剂包括溶液、悬浮液和乳液，例如水或水/丙二醇溶液。对于肠胃外注射剂，液体制剂可以配制成在聚乙二醇水溶液中的溶液。

适合口服使用的水溶液可以通过将本发明的化合物溶解在水中并根据需要添加合适的着色剂、调味剂、稳定剂和增稠剂来制备。适合口服使用的水性混悬剂可以通过将细碎的活性组分与粘性材料和分散剂或润湿剂分散在水中来制备，所述的粘性材料例如天然或合成树胶、树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍胶和阿拉伯树胶，所述的分散剂或润湿剂例如天然存在的磷脂(例如卵磷脂)、环氧烷烃与脂肪酸的缩合产物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)、环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物(例如，十七亚乙基氧鲸蜡醇)、环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物(例如，聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯)、或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产品(例如聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯)。水性悬浮液还可含有一种或多种防腐剂如对羟基苯甲酸乙酯或正丙酯、一种或多种着色剂、一种或多种调味剂和一种或多种甜味剂如蔗糖、阿斯巴甜或糖精。可以根据渗透压调整制剂。

还包括固体形式的制剂，其旨在在使用前不久转化为液体形式的制剂用于口服给药。这种液体形式包括溶液、悬浮液和乳液。除了活性成分之外，这些制剂还可以含有着色剂、调味剂、稳定剂、缓冲剂、人造和天然甜味剂、分散剂、增稠剂、增溶剂等。

油混悬液可以通过将本发明的化合物悬浮在植物油(如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油)或矿物油(如液体石蜡)，或者这些的混合物中来配制。油混悬液可以含有增稠剂，例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可以添加甜味剂以提供可口的口服制剂，例如甘油、山梨糖醇或蔗糖。这些配方可以通过添加抗氧化剂如抗坏血酸来保存。作为可注射油载体的一个例子，参见Minto，《药理学与实验治疗学杂志(J.Pharmacol.Exp.Ther.)》281:93-102,1997。本发明的药物制剂也可以是水包油乳剂的形式。油相可以是植物油或矿物油，如上所述，或这些的混合物。合适的乳化剂包括天然存在的树胶，例如阿拉伯树胶和黄蓍胶，天然存在的磷脂，例如大豆卵磷脂，衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯，例如脱水山梨糖醇单油酸酯，以及这些偏酯与环氧乙烷的缩合产物，如聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。乳剂还可以含有甜味剂和调味剂，如在糖浆和酏剂的配方中。此类制剂还可包含缓和剂、防腐剂或着色剂。

本发明的组合物也可以以微球形式递送以在体内缓慢释放。例如，微球可以配制成通过皮内注射含药物的微球来给药，其在皮下缓慢释放(参见Rao，《生物材料科学杂志-聚合物版(J.Biomater Sci.Polym.Ed.)》7:623-645,1995)；作为可生物降解和可注射的凝胶制剂(参见例如Gao《药物研究(Pharm.Res.)》12:857-863,1995)；或作为用于口服给药的微球(参见例如i，Eyles，《药剂学与药理学杂志(J.Pharm.Pharmacol.)》49:669-674,1997)。透皮和皮内途径均可提供数周或数月的持续递送。

在另一个实施方案中，本发明的组合物可以配制用于肠胃外给药，例如静脉内(IV)给药或给药到体腔或器官内腔中。用于给药的制剂通常包含溶解在药学上可接受的载体中的本发明组合物的溶液。在可接受的载体和溶剂中，可以使用的是水和任氏液(Ringer's solution)，一种等渗氯化钠。此外，无菌固定油通常可用作溶剂或悬浮介质。为此，可以使用任何温和的固定油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，脂肪酸如油酸同样可用于制备注射剂。这些溶液是无菌的并且通常不含不需要的物质。这些制剂可以通过常规的、众所周知的灭菌技术进行灭菌。所述制剂可含有接近生理条件所需的药学上可接受的辅助物质，例如pH调节剂和缓冲剂、毒性调节剂，例如乙酸钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙、乳酸钠等。本发明的组合物在这些制剂中的浓度可以在很大范围内变化，并且根据所选择的特定给药方式和患者的需要，主要基于流体体积、粘度、体重等进行选择。对于IV给药，制剂可以是无菌可注射制剂，例如无菌可注射水性或油性混悬液。该混悬液可以根据已知技术使用那些合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂来配制。无菌可注射制剂也可以是在无毒的胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或混悬液，例如1，3-丁二醇溶液。

在另一个实施方案中，本发明组合物的制剂可以通过使用与细胞膜融合或被内吞的脂质体递送，即通过使用连接到脂质体上或直接连接到寡核苷酸上的配体来递送，所述配体与细胞的表面膜蛋白受体结合，导致内吞作用。通过使用脂质体，特别是在脂质体表面携带对靶细胞特异的配体，或以其他方式优先针对特定器官的情况下，可以将本发明的组合物在体内集中递送到靶细胞中。(参见，例如，Al-Muhammed，《微胶囊技术杂志(J.Microencapsul)》13:293-306，1996；Chonn，《生物技术最新观点(Curr.Opin.Biotechnol.)》6:698-708，1995；Ostro，《美国医院药学杂志(Am.J.Hosp.Pharm.)》46:1576-1587,1989)。

V.治疗方法

(a)吸入给药或鼻内给药

本公开的治疗方法基于通过吸入或通过鼻内给药施用合适的他汀类药物。本公开的方法、制剂和系统治疗呼吸道病毒感染，从而为现有治疗剂不能有效或完全治疗的疾病提供治疗。吸入给药具有以下优点：(a)直接接触呼吸道，(b)避免首过肝脏代谢，和(c)避免注射(J.L.Rau，《呼吸护理(Resp Care)》(2005)50(3)：367-82；M.Ibrahim等人，《医学研究综述(Med Dev Evidence Res)》(2015)8：131-39)。由于该药物不受首过代谢的影响，并且是局部给药于肺部而不是全身给药，因此吸入药物的剂量通常小于口服给药的量。

如本文所述，在一些实施方案中，本公开的制剂在吸入装置(“吸入器”)的帮助下施用，所述吸入装置可以是雾化器、pMDI、DPI或能够将制剂输送到下呼吸道中的其他装置。在一些实施方案中，本公开的制剂经鼻内给药，例如使用喷雾器、雾化器或滴鼻剂。给药频率将取决于他汀类药物和/或另外的治疗剂从受试者肺部的清除率。在一些实施方案中，每天不超过8、7、6、5、4、3、2或一次，或每2、3、4、5、6或7天不超过一次施用他汀类制剂。在一些实施方案中，每4、3或2天至少一次或每天至少1、2、3、4、5或6次施用他汀类制剂。治疗持续时间可以是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20天。在一些实施方案中，治疗持续时间为5至7天。在一些实施方案中，治疗持续时间为1至10天。在一些实施方案中，治疗持续时间为1至12天。在一些实施方案中，治疗持续时间为1至14天。在一些实施方案中，在受试者进行机械通气时将制剂施用给受试者(例如，已经插管和/或正在接受呼吸辅助的受试者)。在一些实施方案中，本公开的制剂通过呼吸机或呼吸器施用于受试者。

在本公开的方法中，治疗组合物直接施用于肺(例如通过吸入或通过鼻内递送)，因此在肝脏中不经历首过代谢。因此，制剂中的活性剂不会在受试者的整个身体中被稀释，也不会被肝脏代谢，因此与常规口服相比，在受试者呼吸道中达到治疗浓度所需的量更少。治疗有效量将取决于待治疗的病症、感染的严重程度、受试者的一般健康和状态，以及特定的他汀类药物(和/或异构体、对映异构体和/或非对映异构体)。因此，在本公开的实践中，他汀类药物的治疗有效量可低至约0.005μg、约0.008μg、约0.01μg、约0.05μg、约0.08μg、约0.1μg、约0.5μg、约0.8μg、约1μg、约2μg、约3μg、约4μg、约5μg、约6μg、约7μg、约8μg、约9μg、约10μg、约11μg、约12μg、约14μg、约15μg、约16μg、约18μg或约20μg。在本公开的实践中，他汀类药物的治疗有效量可以高达约40mg、20mg、18mg、15mg、12mg、10mg、9mg、8mg、7mg、6mg、5mg、4mg、3mg、2mg或1mg。

在一些实施方案中，他汀类药物的治疗有效量为至少约0.005μg/kg、约0.008μg/kg、约0.01μg/kg、约0.05μg/kg、约0.08μg/kg、约0.1μg/kg、约0.5μg/kg、约0.8μg/kg、约1μg/kg、约2μg/kg、约3μg/kg、约4μg/kg、约5μg/kg、约6μg/kg、约7μg/kg、约8μg/kg、约9μg/kg、约10μg/kg、约11μg/kg、约12μg/kg、约14μg/kg、约15μg/kg、约16μg/kg、约18μg/kg或约20μg/kg。在一些实施方案中，他汀类药物的治疗有效量不高于约40mg/kg、20mg/kg、18mg/kg、15mg/kg、12mg/kg、10mg/kg、9mg/kg、8mg/kg、7mg/kg、6mg/kg、5mg/kg、4mg/kg、3mg/kg、2mg/kg或1mg/kg。

(b)病毒进入的抑制与预防

如本文所述，许多病毒需要特定受体才能进入宿主细胞，并且在许多情况下，该受体必须位于宿主细胞膜的脂筏中才能发挥作用。他汀类药物能够消耗脂筏中的胆固醇，从而减少脂筏。不受任何特定理论的束缚，据信脂筏的减少使依赖于脂筏的受体不稳定，并减少或阻止病毒进入宿主细胞，从而降低感染性。

在一些实施方案中，他汀类药物直接与病毒如冠状病毒或SARS-CoV-2相互作用，从而减少病毒对细胞的摄取。在一些情况下，所述的细胞是呼吸道细胞、鼻细胞、口腔细胞或肺细胞，例如肺上皮细胞。在一些实施方案中，施用他汀类药物可防止病毒(例如SARS-CoV-2)进入细胞，从而抑制、减少或预防病毒感染。在一些实施方案中，他汀类药物的施用防止病毒摄取到细胞中，从而降低受试者中病毒的总量(滴度)。在某些情况下，此类给药可降低感染的严重程度和/或由该病毒产生的症状，例如降低COVID-19的严重程度或症状。在一些实施方案中，这种给药通过降低存在于受试者或特定组织(例如肺和/或气道上皮)或受试者孔口(例如鼻或口)中的病毒水平来降低病毒从受感染受试者的传播性。在一些实施方案中，向受试者预防性地施用他汀类药物，并且这种施用减少、抑制、阻断或预防病毒感染，例如SARS-CoV-2感染。在一些实施方案中，在受试者检测出病毒呈阳性或暴露于病毒之后，如SARS-CoV-2病毒，但在受试者出现可辨别的感染症状之前，向受试者提供他汀类药物。

抑制病毒进入并因此减少呼吸道病毒感染的治疗有效量将取决于病毒的特性和病毒靶向的宿主受体、疾病的严重程度、一般健康状况和受试者的状态，以及选择的特定他汀类药物(和/或异构体、对映异构体和/或非对映异构体)。本公开的治疗(本公开的制剂、方法和系统)将病毒进入和/或增殖减少至少10、20、30、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或约100％。这种功效可以使用标准微生物测定法和测试来测量。例如，可以将相关细胞或组织的培养物暴露于病毒或怀疑含有病毒的样品，在存在或不存在本公开的他汀类药物或他汀类药物制剂的情况下，在生理条件下孵育，并测量、定量或滴定病毒、病毒核酸、病毒蛋白或其组合的量。相关细胞或组织可以是与正常或预期会被研究的病毒感染的细胞或组织相似或相同的细胞、细胞培养物或组织样品。在呼吸道病毒感染的情况下，相关细胞和组织可以是例如但不限于呼吸道上皮细胞、肺切片、上皮细胞培养物或其他模型细胞或生物体。或者，这些测试可以在体内进行，使用对病毒敏感的模型动物，或在人中进行，例如但不限于在临床试验中进行。

在本公开的实践中，他汀类药物的治疗有效量可以低至约0.005μg、约0.008μg、约0.01μg、约0.05μg、约0.08μg、约0.1μg、约0.5μg、约0.8μg、约1μg、约2μg、约3μg、约4μg、约5μg、约6μg、约7μg、约8μg、约9μg、约10μg、约11μg、约12μg、约14μg、约15μg、约16μg、约18μg或约20μg。在本公开的实践中，他汀类药物的治疗有效量可以高达约40mg、20mg、18mg、15mg、12mg、10mg、9mg、8mg、7mg、6mg、5mg、4mg、3mg、2mg或1mg。

在一些实施方案中，他汀类药物的治疗有效量为至少约0.005μg/kg、约0.008μg/kg、约0.01μg/kg、约0.05μg/kg、约0.08μg/kg、约0.1μg/kg、约0.5μg/kg、约0.8μg/kg、约1μg/kg、约2μg/kg、约3μg/kg、约4μg/kg、约5μg/kg、约6μg/kg、约7μg/kg、约8μg/kg、约9μg/kg、约10μg/kg、约11μg/kg、约12μg/kg、约14μg/kg、约15μg/kg、约16μg/kg、约18μg/kg或约20μg/kg。在一些实施方案中，他汀类药物的治疗有效量不高于约40mg/kg、20mg/kg、18mg/kg、15mg/kg、12mg/kg、10mg/kg、9mg/kg、8mg/kg、7mg/kg、6mg/kg、5mg/kg、4mg/kg、3mg/kg、2mg/kg或1mg/kg。

在某些情况下，由于病毒复制的指数性质，感染的早期治疗可以产生更有效的结果。在一些实施方案中，在暴露于病毒或暴露于具有呼吸道病毒感染的另一对象之后，尽快治疗(使用本公开的制剂、方法或系统)患有呼吸道病毒感染的对象。在一些实施方案中，在暴露的48、36、24、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2或1小时内，或在小于1小时内治疗受试者。在一些情况下，暴露时间是未知的，并且在诊断为感染或出现与呼吸道病毒感染一致的症状(例如，咳嗽、喘气、呼吸短促、产生痰、打喷嚏、发烧等，或取决于病毒特性的其他症状)后尽快治疗受试者。可以通过使用核酸检测方法(例如使用PCR测定或基于CRISPR的病毒检测测定特异性一种或多种病毒)、通过检测从受试者获得的生物样品中的抗病毒抗体、通过在细胞培养物中生长病毒或通过标准医学诊断实践来进行感染的诊断。在一些实施方案中，在诊断感染或出现症状的48、36、24、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2或1小时内，或在小于1小时内治疗受试者。

在一些情况下，受试者可能处于暴露于呼吸道病毒的风险中，并且可以在经历该风险之前或同时给予本发明的治疗。例如但不限于，医护人员、公共卫生检测人员、疾病暴发调查人员、医学研究人员和可能有暴露于一种或多种呼吸道病毒的风险其他人，并且可以在暴露前进行治疗以预防感染和/或减少感染的可能性。在一些实施方案中，受试者在经历可能暴露于呼吸道病毒之前的48、36、24、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2或1小时内，或在少于1小时内接受治疗。例如，可以在进入医院工作之前对医院工作人员进行治疗，以限制或避免呼吸道病毒感染。教师可以在开学第一天之前接受治疗，以限制或避免从返回课堂的学生(和其他教师)处可能的呼吸道病毒感染。

在一些实施方案中，呼吸道病毒是冠状病毒或SARS-CoV-2。在一些实施方案中，呼吸道病毒是SARS-CoV-2。在一些实施方案中，施用他汀类药物可防止SARS-CoV-2的摄取、SARS-CoV-2进入细胞，从而抑制、减少或预防SARS-CoV-2感染。在一些实施方案中，施用他汀类药物可防止SARS-CoV-2被摄取入细胞，从而降低受试者体内SARS-CoV-2的总量(滴度)。在一些实施方案中，这样的给药降低了SARS-CoV-2感染和/或由此产生的症状的严重性。在一些实施方案中，这种给药通过降低存在于受试者或特定组织(例如肺和/或气道上皮)或受试者孔口(例如鼻或口)中的病毒水平来降低SARS-CoV-2从受感染受试者的传播性。

在一些实施方案中，将他汀类药物预防性地施用于有暴露于SARS-CoV-2风险或暴露于SARS-CoV-2之后的受试者。在一些实施方案中，将他汀类药物预防性地施用于有暴露于SARS-CoV-2风险的受试者。在一些实施方案中，在暴露于SARS-CoV-2之后施用他汀类药物。在一些实施方案中，在受试者的SARS-CoV-2检测呈阳性后，将他汀类药物施用于受试者。在一些实施方案中，在受试者检测出SARS-COV-2呈阳性之后、但在受试者出现可辨别的感染症状之前施用他汀类药物。

在一些实施方案中，对于有暴露风险或怀疑暴露(由于与病毒或受感染个体接触)的受试者，每天给予他汀类制剂不超过8、7、6、5、4、3、2或1次，或每2、3、4、5、6或7天不超过一次。在一些实施方案中，每4、3或2天至少一次或每天至少1、2、3、4、5或6次施用他汀类制剂。治疗持续时间可以是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20天。在一些实施方案中，治疗持续时间为5至7天。在一些实施方案中，治疗持续时间为1至10天。在一些实施方案中，治疗持续时间为1至12天。在一些实施方案中，治疗持续时间为1至14天。

在大流行情况下，大量受试者处于感染风险中，可以治疗任何受试者：在这种情况下，风险事件可被视为大流行的正式宣布，宣布在受试者生活、工作或最近访问过的地理区域内发生流行病；开始前往正在经历流行病、大流行或爆发的地理区域。在一些情况下，如果受试者发生严重并发症的风险升高，例如但不限于病毒性肺炎、肺栓塞、呼吸衰竭、ARDS、败血症、急性肺损伤(ALI)或死亡，则在大流行期间接受治疗。由于现有的合并症，例如糖尿病、肥胖症、心脏病、肺病、肝病、肾病、免疫功能低下状态、癌症或其他降低受试者抵抗疾病能力的疾病，此类患者的风险有时会升高。在一些实施方案中，将本公开的制剂或系统施用于患有呼吸道病毒感染的受试者，该受试者同时患有糖尿病、肥胖症、心脏病、肺病、肝病、肾病、免疫功能低下(包括由病毒和/或药物如化疗的免疫抑制)，或癌症。

呼吸道病毒感染的减少还可以减少从轻度感染形式(例如，轻微的鼻、口和/或喉咙感染)到更严重的感染形式(例如，支气管炎、肺炎、肺栓塞、呼吸衰竭、ARDS、败血症、ALI、心肌炎或死亡)。呼吸道病毒感染的减少还可以降低所需的侵入性医疗的程度，例如重症监护病房(ICU)入院、插管、机械通气和/或体外膜肺氧合(ECMO)。

在一些实施方案中，吸入或鼻内给药的他汀类药物是在感染的早期阶段施用的，此时病毒可能存在于鼻子和喉咙中，但基本上没有进入下呼吸道和肺。

在一些实施方案中，将他汀类药物施用于受试者以防止病毒诱导的上皮细胞死亡。这种他汀类药物的施用在面对病毒感染时保持上皮细胞活力，从而可以降低感染的严重性和由此引起的症状。在一些实施方案中，施用他汀类药物可防止SARS-CoV-2诱导的上皮细胞死亡。

在一些实施方案中，施用他汀类药物，例如吸入或鼻内施用他汀类药物可降低免疫反应，该免疫反应可能导致对病毒感染的严重反应，例如冠状病毒如SARS-CoV-2的感染。在一些实施方案中，他汀类药物的施用降低了受感染受试者例如感染了SARS-CoV-2的受试者的IL-6水平。在一些实施方案中，他汀类药物的施用减少、抑制或防止受感染受试者中导致严重的全身炎症的细胞因子风暴。

在一些实施方案中，施用他汀类药物，例如吸入或鼻内施用他汀类药物，可减少或防止由呼吸道病毒例如SARS-CoV-2引起的并发症和/或损害。这种并发症或损害可能包括对肺和其他组织的损害。在一些实施方案中，施用他汀类药物，例如吸入或鼻内施用他汀类药物，可减少或防止与呼吸道病毒如SARS-CoV-2感染相关的急性呼吸窘迫综合征(ARDS)和肺瘢痕形成或纤维化。在一些实施方案中，施用他汀类药物，例如吸入或鼻内施用他汀类药物可减少或防止与COVID-19相关的ARDS诱导的血栓形成(血液凝固)。在一些实施方案中，施用他汀类药物，例如吸入或鼻内施用他汀类药物，可减少或防止“长期”症状，例如长期COVID-19(也称为“长期COVID-19”)，其可包括疲劳、咳嗽、关节痛、气短、胸痛、肌肉痛、头痛、认知困难、发烧和抑郁的一种或多种。

病毒进入的减少也会受到呼吸系统以外的影响。例如，在某些情况下，病毒以呼吸系统以外的组织为目标。例如但不限于，已发现SARS-CoV-2还靶向心脏、脉管系统和肠道中的携带ACE2的细胞，并可能导致心肌炎。在这种情况下，可以通过吸入施用本发明的制剂或系统来减少病毒进入，所述制剂或系统以体循环为目标。在一些实施方案中，通过吸入施用本公开的全身循环靶向制剂或系统来减少病毒感染。在一些实施方案中，病毒感染还感染呼吸系统。在一些实施方案中，病毒感染也不感染呼吸系统。

在一些实施方案中，本文提供了一种用于在有需要的受试者中减轻病毒性呼吸道感染的方法，该方法包括：向患有病毒性呼吸道感染的受试者鼻内或通过吸入施用制剂，其中该制剂包含治疗有效量的他汀类药物；和药学上可接受的载体。

在一些实施方案中，本文提供了一种用于在有需要的受试者中治疗病毒性呼吸道感染的方法，该方法包括：向患有病毒性呼吸道感染或可能暴露于病毒性呼吸道感染的受试者鼻内或通过吸入施用制剂呼吸道感染，其中所述制剂包含治疗有效量的他汀类药物；和药学上可接受的载体。

在一些实施方案中，本发明方法的病毒性呼吸道感染是本领域技术人员已知的任何病毒性呼吸道感染。在一些实施方案中，病毒性呼吸道感染选自下组：冠状病毒、麻疹病毒、布尼亚病毒、沙粒病毒、流感病毒、鼻病毒和腺病毒。在一些实施方案中，病毒性呼吸道感染选自下组：SARS-CoV-2、SARS、MERS、汉坦病毒肺综合征、麻疹、拉沙热、流感、甲型流感、甲型H1型流感、甲型H1-2009型流感、甲型H3型流感、乙型流感、呼吸道合胞病毒(RSV)A、RSVB、副流感病毒1、副流感病毒2、副流感病毒3、副流感病毒4、偏肺病毒、肠道病毒和腺病毒。在一些实施方案中，病毒性呼吸道感染选自下组：CoV-2、SARS、MERS、汉坦病毒肺综合征、麻疹、拉沙热、流感、甲型流感、甲型H1型流感、甲型H1-2009型流感、甲型H3型流感、乙型流感。在一些实施方案中，病毒性呼吸道感染是COVID-19。

在一些实施方案中，本发明方法的制剂通过本领域技术人员已知的任何方法施用。在一些实施方案中，制剂如以上部分所述施用。在一些实施方案中，制剂通过鼻内或通过吸入给药。在一些实施方案中，该制剂是鼻内给药的。在一些实施方案中，制剂通过吸入给药。在一些实施方案中，施用是通过机械吸入器。在一些实施方案中，机械吸入器是定量粉末吸入器、加压气溶胶吸入器、干粉吸入器或雾化器。在一些实施方案中，机械吸入器选自下组：Soft Mist^TM吸入器，/>吸入器，/>吸入器，吸入器，/>吸入器，/>吸入器，和/>吸入器。

在一些实施方案中，本发明的方法包括本领域技术人员已知的任何他汀类药物。在一些实施方案中，所述的他汀类药物选自下组：辛伐他汀、匹伐他汀、罗苏伐他汀、阿托伐他汀、洛伐他汀、氟伐他汀、美伐他汀、西立伐他汀、替尼伐他汀和普伐他汀。在一些实施方案中，所述的他汀类药物选自下组：辛伐他汀、匹伐他汀、罗苏伐他汀和阿托伐他汀。在一些实施方案中，所述的他汀类药物选自下组：匹伐他汀和辛伐他汀。在一些实施方案中，所述的他汀类药物是匹伐他汀。在一些实施方案中，所述的他汀类药物是辛伐他汀。

在一些实施方案中，本发明的方法包括以本领域技术人员已知的任何治疗有效量施用他汀类药物。如上文所述，他汀类药物可以以任何治疗有效量给药。在一些实施方案中，治疗有效量在约0.005μg和约40mg之间。在一些实施方案中，治疗有效量在约0.1μg和约15mg之间。在一些实施方案中，治疗有效量在约0.1μg和约5mg之间。在一些实施方案中，治疗有效量在约0.5μg和约15mg之间。在一些实施方案中，治疗有效量在约1.0μg和约10mg之间。在一些实施方案中，治疗有效量在约1.0μg和约5mg之间。在一些实施方案中，治疗有效量在约0.1μg和约100μg之间。

在一些实施方案中，本发明的方法还包括施用至少一种另外的治疗剂。在一些实施方案中，本发明的方法包括本领域技术人员已知的任何另外的治疗剂。在一些实施方案中，每种另外的治疗剂独立地选自下组：RNA聚合酶抑制剂；病毒蛋白酶抑制剂、宿主蛋白酶抑制剂、TMPRSS2抑制剂、抗病毒剂、氯喹或其盐、羟氯喹或其盐、金刚烷胺、金刚烷乙胺、洛匹那韦、利托那韦、阿比朵尔、瑞德西韦、法匹拉韦、甲磺酸奈非那韦、阿奇霉素、巴弗洛霉素、卡莫司他或其盐、地瑞那韦、奥司他韦和利巴韦林、恢复期血浆和/或源自其的抗体、塞利尼索、吸入一氧化氮、外泌体和/或微泡、和脐带血调节性T细胞。在一些实施方案中，每种另外的治疗剂是甲磺酸奈非那韦、阿奇霉素、巴弗洛霉素、甲磺酸卡莫司他、卡莫司他或其盐、阿比朵尔、金刚烷胺、金刚烷乙胺、洛匹那韦、地瑞那韦、利巴韦林、瑞德西韦、法匹拉韦、氯喹、羟氯喹、托珠单抗或沙利鲁单抗(sarilumab)。在一些实施方案中，所述的另外的治疗剂是瑞德西韦。

在一些实施方案中，每种另外的治疗剂选自下组：β-激动剂；皮质类固醇；毒蕈碱拮抗剂；RhoA抑制剂；GGTase-I或-II抑制剂；ROCK1和/或ROCK2抑制剂；可溶性环氧化物水解酶抑制剂；脂肪酸酰胺水解酶抑制剂；白三烯受体拮抗剂；磷酸二酯酶-4抑制剂，如罗氟司特；5-脂氧合酶抑制剂，例如齐留通；肥大细胞稳定剂，例如奈多罗米；角鲨烯合酶抑制剂，例如拉帕司他(lapaquistat)、萨拉戈西酸(zaragozic acid)和RPR 107393；法尼基焦磷酸合酶抑制剂，包括但不限于二膦酸盐，例如阿仑膦酸盐、依替膦酸盐、氯屈膦酸盐、替鲁膦酸盐、帕米膦酸盐、奈立膦酸盐、奥帕膦酸盐、伊班膦酸盐、利塞膦酸盐、唑来膦酸盐；茶碱；抗IL5抗体；抗IgE抗体；抗IL5受体抗体；抗IL13/4受体抗体；生物制剂，例如美泊利单抗、瑞利珠单抗、贝那利珠单抗、奥马珠单抗和杜匹鲁单抗；β-激动剂和毒蕈碱拮抗剂组合，包括长效和短效制剂；β-激动剂和皮质类固醇组合，包括长效和短效制剂；皮质类固醇和毒蕈碱拮抗剂组合，包括长效和短效制剂；β-激动剂、皮质类固醇和毒蕈碱拮抗剂组合，包括长效和短效制剂。在一些实施方案中，每种另外的治疗剂是β-激动剂、皮质类固醇、毒蕈碱拮抗剂或其任何组合。在一些实施方案中，另外的药剂是地塞米松。在一些实施方案中，另外的药剂包括地塞米松并且还包括瑞德西韦。

本发明的另外的治疗剂可以通过本领域技术人员已知的任何方法和任何剂量给药。在一些实施方案中，另外的治疗剂经鼻内或通过吸入施用。在一些实施方案中，另外的治疗剂是鼻内施用的。在一些实施方案中，另外的治疗剂通过吸入施用。在一些实施方案中，另外的治疗剂以治疗剂量或亚治疗剂量施用。在一些实施方案中，另外的治疗剂以治疗剂量施用。在一些实施方案中，另外的治疗剂以亚治疗剂量施用。

在一些实施方案中，本发明方法的制剂可以在任何合适的时间施用。在一些实施方案中，该制剂是预防性施用的。在一些实施方案中，在暴露于病毒性呼吸道感染之前施用制剂。在一些实施方案中，在暴露于病毒性呼吸道感染前1小时至7天施用制剂。在一些实施方案中，在暴露于病毒性呼吸道感染前1小时至24小时施用制剂。在一些实施方案中，在暴露于病毒性呼吸道感染前3小时至12小时施用制剂。在一些实施方案中，在暴露于病毒性呼吸道感染前约4小时、6小时、8小时或10小时施用制剂。在一些实施方案中，在暴露于病毒性呼吸道感染前约6小时施用制剂。

在一些实施方案中，在暴露于病毒感染后施用制剂。在一些实施方案中，在受试者被诊断出感染后施用制剂。在一些实施方案中，在怀疑暴露于呼吸道病毒后施用制剂。

在一些实施方案中，在可能暴露于病毒性呼吸道感染之前1小时至24小时施用制剂，其中，他汀类药物包括匹伐他汀或辛伐他汀，并且其中该制剂还包含瑞德西韦或地塞米松中的至少一种。

在一些实施方案中，本文提供了一种在有需要的受试者中治疗SARS-CoV-2病毒感染的方法，该方法包括：向患有病毒性呼吸道感染的受试者鼻内或通过吸入施用制剂，其中该制剂包含治疗有效量的他汀类药物；和药学上可接受的载体。

在一些实施方案中，本文提供了一种在有需要的受试者中治疗SARS-CoV-2病毒感染的方法，该方法包括：向可能暴露于SARS-CoV-2病毒的受试者鼻内或通过吸入施用制剂，其中所述制剂包含治疗有效量的他汀类药物；和药学上可接受的载体。

在一些实施方案中，本文提供了一种用于降低感染SARS-CoV-2的受试者中COVID-19严重程度的方法，该方法包括：向受感染的受试者鼻内或通过吸入施用制剂，其中该制剂包含治疗有效量的他汀类药物；和药学上可接受的载体。

在一些实施方案中，用于本发明方法的制剂可以降低或抑制病毒滴度、病毒载量、病毒感染症状或促炎反应。在一些实施方案中，该制剂抑制病毒滴度的增加。在一些实施方案中，该制剂降低了受试者的病毒载量。在一些实施方案中，所述制剂减少或抑制病毒感染的一种或多种症状。在一些实施方案中，制剂减少或抑制一种或多种促炎反应。

在一些实施方案中，促炎反应是细胞因子、趋化因子或IL-6水平的增加。在一些实施方案中，促炎反应是细胞因子或趋化因子。在一些实施方案中，所述制剂降低或抑制受试者中IL-6水平的增加。在一些实施方案中，所述制剂预防、抑制或减少受试者中的细胞因子风暴。

在一些实施方案中，在怀疑暴露于呼吸道病毒后施用制剂。在一些实施方案中，在暴露于SARS-CoV-2病毒之后施用制剂。在一些实施方案中，制剂在疑似暴露后1小时、2小时、6小时或24小时内施用于受试者。在一些实施方案中，制剂在疑似暴露后1-14天内施用于受试者。在一些实施方案中，制剂在疑似暴露后1天、2天、3天、4天、5天、6天或7天内施用于受试者。在一些实施方案中，制剂在疑似暴露后7-10天内施用于受试者。

在一些实施方案中，在可能暴露于呼吸道病毒之前施用制剂。在一些实施方案中，在可能暴露于SARS-CoV-2病毒之前施用制剂。在一些实施方案中，制剂在潜在暴露前1小时、2小时、6小时或24小时内施用于受试者。

本发明方法的制剂可以如以上部分所述进行给药。在一些实施方案中，向受试者施用一次、两次、三次、4次或5次制剂。在一些实施方案中，所述制剂在受试者暴露于SARS-CoV-2病毒后施用一次、两次、三次、4次或5次。在一些实施方案中，在将受试者暴露于SARS-CoV-2病毒之前，施用一次、两次、三次、4次或5次制剂。

在一些实施方案中，所述制剂在接种SARS-CoV-2病毒疫苗之前和/或之后给予受试者。在一些实施方案中，所述制剂在接种SARS-CoV-2病毒疫苗之前给予受试者。在一些实施方案中，所述制剂在接种SARS-CoV-2病毒疫苗后施用于受试者。在一些实施方案中，所述制剂与SARS-CoV-2病毒的疫苗联合施用于受试者。

在一些实施方案中，将制剂与另外的COVID-19治疗组合给予受试者。另外的COVID-19治疗可以是本领域技术人员已知的任何治疗。在一些实施方案中，另外的COVID-19治疗是瑞德西韦或地塞米松。

本发明的他汀类药物可以保持细胞活力。在一些实施方案中，他汀类药物保持受试者的上皮细胞活力。在一些实施方案中，在肺组织和/或咽喉组织中保留上皮细胞活力。在一些实施方案中，在肺组织中保留上皮细胞活力。

在一些实施方案中，本文提供了一种用于阻断病毒进入细胞的方法，包括施用治疗有效量的他汀类药物，并且其中该病毒是SARS病毒。

SARS病毒可以是本领域技术人员已知的任何SARS病毒。在一些实施方案中，病毒是SARS-CoV-2病毒。

本发明方法的细胞可以是本领域技术人员已知的任何合适的细胞。在一些实施方案中，细胞是呼吸道上皮细胞。在一些实施方案中，细胞是口、鼻、气管或肺的呼吸道上皮细胞。

在一些实施方案中，上皮细胞存在于感染SARS-CoV-2的受试者中，并且他汀类药物制剂通过鼻内或通过吸入给予受感染的受试者，其中，该制剂包含治疗有效量的他汀类药物和药学上可接受的载体。

VI.实施例

提供以下实施例用于指导，并不旨在限制本文权利要求的范围。

为了增强细胞摄取和可预测的细胞松弛特性，辛伐他汀通过碱性水解活化，以化学方式将辛伐他汀内酯转化为辛伐他汀酸(SA)。在体内，水解也可以通过内酯酶、对氧磷酶、碱性水解酶和羧酸酯酶在细胞内自然发生。使用Merck提供的方案，辛伐他汀通过打开其内酯环至羟基酸而被激活。简而言之，将8mg辛伐他汀(0.019mM)溶解在0.2mL 100％乙醇中，随后加入0.3mL 0.1N NaOH。然后将溶液在50℃下在沙浴中加热2小时，然后用HCl中和至pH为7.2(C.C.Ghosh等人，《重症监护医学(Crit Care Med)》(2015)43(7):e230-40)。

实施例1:胆固醇的消耗

将正常人支气管上皮细胞(细胞系HBE1)在气液界面(Ali)中生长至汇合，并用50、100、200或400nM和1、5、10或20μM的辛伐他汀处理48小时。通过分光光度法测量细胞总胆固醇，并以吸光度与总蛋白的比值(μg)作图。图1显示了用50、100、200和400nM的辛伐他汀处理的结果。图2显示了用1、5、10和20μM辛伐他汀处理的结果。表明胆固醇含量显著降低(≥50％，p<0.05)(*)。

实施例2:抗病毒活性

呼吸道上皮细胞在双相ALI条件下生长至汇合，并用辛伐他汀、匹伐他汀、罗苏伐他汀、阿托伐他汀、洛伐他汀、氟伐他汀、美伐他汀、西立伐他汀、替尼伐他汀和普伐他汀处理24至72小时，浓度为1至5μM。在噬斑测定中测量病毒复制，并使用病毒RNA的定量RT-PCR测定病毒水平。

细胞死亡也通过MTT测定、LDH释放和阿尔玛蓝(Alamar blue)确定(等人，《应用毒理学杂志(J Appl Toxicol)》(2005)25：328-37；R.Hamid等人，《体外毒理学(Toxicol Vitr)》(2004)18(5):703-10；和J.O’Brien等人，《欧洲生物化学杂志(Eur JBiochem)》(2000)267(17):5421-26)。促炎基因(IFNγ、IFNβ、TNFα、IL6、IL8、IL1β)的表达。

在Calu-3人上皮细胞系和原代人支气管上皮细胞或精确切割的人肺切片(PCL)中，进行药物前和药物后实验，以证明SARS-CoV-2感染前和感染后的药效。使用qRT-PCR和ELISA测量ACE2和TMPRSS2的表达，并通过噬斑测定确定感染性。如上所述测定细胞死亡、病毒水平和炎症基因表达。

实施例3:制剂

如下制备匹伐他汀的海绵状微球制剂。使用T-25Ultra-Turrax型混合器以8000rpm的转速将二硬脂酰磷脂酰胆碱(1.24g)分散在50mL去离子水中2至5分钟(T＝60-70℃)。使用T-25Ultra-Turrax型混合器(T＝60-70℃)将水包油乳液以10000rpm的转速再混合不少于4分钟。然后将得到的粗乳液在高压下用Avestin(渥太华，加拿大)均化器在18000psi下进行5次均质化。

向F68(BASF)(2.0g)中加入500mL去离子水，并用T-25Ultra-Turrax型混合器以10000rpm的转速混合组合物60分钟(T＝60-70℃)。将匹伐他汀(0.4g)以10mg的增量添加到/>混合物中，间隔5分钟，将温度保持在60-70℃以形成药物原料。

然后在连续磁力搅拌下将药物原料滴加到O/W乳液中，使原料的温度保持在60℃。在过滤器堵塞妨碍无菌过滤的情况下，可以在雾化之前对混合原料进行紫外线或伽马射线灭菌。最终产品包装后通过雾化器给药，或者被喷雾干燥以作为干粉给药。

实施例4:计算机模拟结合分析(In silico 2BinD Assay)

蛋白质标记和相互作用测试：根据制造商的说明，在1C PBS pH 7.4，0.005％吐温(Tween)中，使用Monolith多聚组氨酸标签RED-Tris-NTA第二代(Monolith His-TagLabeling Kit RED-tris-NTA 2nd Generation)(诺坦普科技公司，NanotemperTechnologies)标记SARS-CoV-2S1。为了确保在全剂量响应中测试多聚组氨酸标签(His-tag)和染料的稳定相互作用，进行MST结合测定。25℃时，在MonolithYONGUOL NT.115pico(诺坦普科技公司，慕尼黑，德国；Nanotemper Technologies)设备上，在优质毛细管中，在40％MST功率、10％LED功率下，提供恒定的5nM Red-Tris-NTA染料和一定浓度范围的SARS-CoV-2S1(0,0305–1000nM)。结合缓冲液是PBS pH 7.4，0.005％吐温(Tween)。

微量热泳动(MST)结合试验SARS-CoV-2S1(标记)vs ACE2。微量热泳动(MST)结合试验使用在结合缓冲液(PBS pH 7.4，0.005％吐温)中的25nM RED-tris-NTA标记的SARS-CoV-2S1与系列浓度的ACE2(0,2332–7.640nM)在40％MST功率，10％LED功率的条件下，在25℃时，在Monolith NT.115pico(诺坦普科技公司，慕尼黑，德国；NanotemperTechnologies)设备上，优质毛细管中进行。使用MO.亲和力分析(MO.Affinity Analysis)软件(版本v2.3，诺坦普科技公司，NanoTemper Technologies)在15秒的标准MST开启时间分析数据，振幅>5个单位且信噪比水平>5个单位的数据拟合被定义为结合事件。

微量热泳动(MST)结合试验SARS-CoV-2S1(标记)vs配体。微量热泳动(MST)结合试验使用在结合缓冲液(PBS pH 7.4，0.005％吐温+2％DMSO)中的25nM RED-tris-NTA标记的SARS-CoV-2S1与系列浓度的各个配体(6.1035–200.000nM)在40％MST功率，10％LED功率的条件下，在25℃时，在Monolith NT.115pico(诺坦普科技公司，慕尼黑，德国；NanotemperTechnologies)设备上，优质毛细管中进行。使用MO.亲和力分析(MO.Affinity Analysis)软件(版本v2.3，诺坦普科技公司，NanoTemper Technologies)在每个数据集的不同合适的MST开启时间(1-20秒)分析数据,振幅>5个单位且信噪比水平>5个单位的数据拟合被定义为结合事件。

综合性MST结合试验：

目标：SARS-CoV-2S1，以恒定的25nM使用

配体：INS101-INS107从200μm开始滴定,向下16个1：1稀释步骤

仪器：Monolith NT.115Pico

缓冲液：1xPBS pH7.4，0.2％CHAPS，2％DMSO

复制：技术

来自ACE2试验的数据显示在图3。

来自他汀配体的数据显示在图4。

有关配体亲和力和信噪比(S/N)的数据显示在下面的表1中。

表1.配体亲和力和信噪比(S/N)

ACE2受体和他汀配体的亲和力和对接分数(docking score)的总体结果显示在下面的表2中。

表2.配体亲和力和对接分数

值得注意的是，INS-101和INS-102S具有所示的弱结合。对于INS-107，没有指示结合，尽管可能指示非常弱的结合。基于结合试验的亲和力顺序为：hACE2>INS-104>INS-102>INS-105>InS-103>InS-106。

对接分数是通过他汀类药物和刺突蛋白(S-protein)靶标的计算机模拟生成的。对接分数越负，结合亲和力越大。因此，基于对接分数的亲和力顺序为：hACE2>INS-104>INS-109>INS-103>INS-105>INS-106>INS-102。

总之，INS-102、INS-103、INS-104(疏水性他汀类药物)在纳摩尔(nM)浓度下与SARS-COV-2刺突蛋白(S-protein)结合。INS-101是亲水的，对刺突蛋白(S-protein)没有亲和力或亲和力很低。INS-102、INS-103和INS-104可能会阻碍SARS-COV-2和hACE2之间的相互作用。

实施例5:Oncodesign研究

该研究评估了两种化合物在3种浓度的2种化合物的SARS-CoV-2病毒在人肺细胞系Calu-3上的复制阶段对人肺上皮细胞模型中的SARS-CoV-2诱导的细胞因子谱的影响。在实验结束时，收集上清液通过Elisa检测IL6，通过多重技术检测10种细胞因子组。最后的病毒载量也通过RTqPCR技术进行评估。

测试物质。两种受试物质化合物INS102和INS103由赞助方提供，并在-20℃下储存直至使用。INS102和INS103在DMSO中以25mM的浓度提供。

细胞系。本研究中使用的细胞系详述如下：

细胞培养条件。Calu-3细胞模型在SARS-CoV的文献中已经得到了很好的描述(例如，Tseng等人，2005，《病毒学杂志(J Virol)》，https://doi:10.1128/JVI.79.15.9470–9479)。Calu-3细胞在37℃的潮湿气氛(5％CO₂，95％空气)中以单层形式生长到相应的细胞培养基(MEM+1％丙酮酸+1％谷氨酰胺+10％胎牛血清)中。所有细胞都粘附在塑料瓶上。对于细胞传代程序，通过用胰蛋白酶-Versene液处理5分钟将细胞从培养瓶中分离出来，并通过添加完全培养基进行中和。在这项研究中，细胞被涂在96孔板上。通过使用V-细胞计数器对细胞进行计数并评估其活力。

病毒分离。该病毒株是通过欧洲病毒档案走向全球(Evag)平台(https://www.european-virus-archive.com/)提供的。在本研究中，使用了斯洛伐克分离株(参考SARS-CoV-2株Slovakia/SK-BMC5/2020)。病毒滴度：通过Oncodesign在Vero E6 TMPRSS2细胞系(起源于NIBsc，英国(UK))上对SARS-CoV-2进行了扩增和滴度。

实验目的是评估在人肺上皮细胞系上复制阶段的抗病毒作用。所有实验独立地重复一次(N＝2)。

感染和治疗方案：对Calu-3细胞进行计数，并使用Vi-Cell自动装置评估其活力。测试前约两小时(细胞粘附在孔板底部所需的时间)，将细胞以每孔30,000个细胞的密度接种在96孔板中。培养细胞以使其达到汇合。该方法研究化合物在复制阶段(细胞感染后)的作用—简而言之，病毒是在一感染复数(M.O.I＝～0.01)下制备的。由于病毒原液的滴度为5x10e4 pfu/mL，因此根据实验时每孔Calu3细胞的数量计算和制备病毒主混合物。去除平板中包含的细胞培养基，并立即将100μL病毒化合物添加到专用孔中。将平板转移到37℃培养箱中1小时，并在所有孔中添加80μl完全细胞培养基-参考对照(二磷酸氯喹(#C6628，Sigma)在细胞培养基中制备为300μM：即将10x浓度，20μl添加到细胞中)。化合物在感染细胞上的最终浓度描述如下。

INS102	INS103
		浓度(μM)最终	浓度(μM)最终
10	5
		1	1
0.1	0.2

研究了不同的案例：

-案例A：感染后一小时，加入10x浓度的20μL化合物(化合物在37℃培养箱中与感染细胞接触72小时)

-案例B：感染后24小时，添加10x浓度的20μL化合物(化合物在37℃培养箱中与感染细胞接触48小时)

-案例C：感染后48小时，添加10x浓度的20μL化合物(化合物在37℃培养箱中与感染细胞接触24小时)

-案例D：感染前6小时，添加10x浓度的20μL化合物(化合物在37℃培养箱中与感染细胞接触72小时，他汀类药物总暴露时间为78小时)

-案例E：感染前24小时，添加10x浓度的20μL化合物(化合物在37℃培养箱中与感染细胞接触72小时，他汀类药物总暴露时间为96小时)

-案例F：感染前一小时，添加10x浓度的20μL化合物(化合物在37℃培养箱中与感染细胞接触72小时，他汀类药物总暴露时间为73小时)

在研究结束时，从带有病毒的细胞板中收集并储存所有上清液，以便通过RT-qPCR对病毒载量进行定量。

细胞活力。细胞活力由Promega的Cell Titer Glow试剂盒测量，该试剂盒测量细胞中的ATP。可在Promega网站上的CellTiter-Glo 2.0细胞活力测定页面下找到该试剂盒的方案。

通过ELISA收集用于IL6测定的上清液。在实验结束时(感染后72小时)，收集来自各个孔的上清液，并分成3个单独的平板以避免冻融循环。该研究的一个分支是通过技术测定白介素6(IL6)。该方案严格遵循制造商的建议(#430507，LEGEND MAX^TMHuman IL-6ELISA Kit，BioLegend)。

收集上清液用于测定10种细胞因子组。该研究的另一部分是在实验结束时检测10种细胞因子组(IL6，IL8，IL10，TNF和IL1，IL1，IL18，嗜酸细胞活化趋化因子3，MCP-1，IP10)。这种方法使用Luminex技术，通过基于磁珠的多重检测同时分析多种细胞因子和趋化因子生物标志物。该方案严格遵循制造商的建议(#MX3227W-PPX10，生命科技(LifeTechnologies))。

收集上清液用于RT-qPCR技术。该研究的第三部分是在实验结束时通过RTqPCR对病毒载量进行定量。在靶向区域中，这些测定包括使用IP2/IP4基因(根据WHO列出的法国巴斯德研究所公布的方案：https://www.who.int/docs/default-source/coronaviruse/real-time-rt-pcr-assays-for-t he-detection-of-sars-cov-2-institut-pasteur-paris.pdf？sfvrsn＝3662fcb6_2)。

使用QIAamp病毒RNA微型试剂盒(Qiagen)或类似试剂进行病毒RNA的提取。RNA在-20℃冷冻直到RTqPCR；使用Superscript^TMIII一步法QRT-PCR系统试剂盒(商用试剂盒#1732-020，生命科技(Life Technologies))，使用针对IP2/IP4基因的引物和RT-PCR条件进行完整的RT-PCR。使用Bio-Rad CFX96^TM或Thermo仪器和附带软件进行扩增。

研究结果如下。

INS-102和INS-103对无病毒的Calu3细胞的细胞活力的影响。用化合物处理细胞72小时。如图5所示，使用工作浓度的INS-102和INS-103没有观察到细胞活力的损失。下面提供了细胞设置和处理的详细信息。

APP指的是阿匹莫德，它是一种抗增殖剂，ChIQ指的是氯喹。报告的浓度单位为μm。

细胞也用化合物预处理6或24小时，然后加入含DMSO的培养基72小时。如图6所示，使用工作浓度的INS-102和INS-103没有观察到细胞活力的损失。报告的浓度单位为μm。下面提供了细胞设置和处理的详细信息。

案例A.细胞用病毒感染1小时，然后加入INS102或INS103，其中化合物与感染的细胞接触72小时。如图7所示，发现使用INS102和INS103处理对病毒诱导的细胞活力丧失具有剂量依赖性保护作用。细胞活力百分比计算为[(值-感染细胞的平均值)/(细胞的平均值)]x100。下面提供了细胞设置和处理的详细信息。

/>

下表3提供了与DMSO处理的样品相比的统计数据。

表3.案例A中INS102和INS103与DMSO相比的t检验

显著值以粗体显示。

上述t-检验结果表明，与DMSO对照相比，10μM和1μM的INS102剂量以及5μM、1μM和0.2μM的INS103剂量是显著的。

案例B.细胞用病毒感染24小时，然后加入INS102或INS103，使化合物与感染细胞接触48小时。如图8所示，发现使用INS102处理对病毒诱导的细胞活力丧失具有剂量依赖性保护作用。如上所述计算细胞活力百分比。

下面的表4提供了与案例B的DMSO处理的样品相比的统计数据。T-检验结果表明，当与DMSO对照相比时，10μM和1μM的INS102剂量是显著的。

表4.案例B中INS102和INS103与DMSO相比的t检验

显著值以粗体显示。

案例C.细胞用病毒感染48小时，然后加入INS102或INS103，其中化合物与感染细胞接触24小时。数据如图9所示。如上所述计算的细胞活力百分比。

下面的表5提供了与案例C的DMSO处理的样品相比的统计数据。上面所示的T-检验结果表明，当与DMSO对照相比时，10μM剂量的INS102是显著的。

表5.案例C中INS102和INS103与DMSO相比的t检验

显著值以粗体显示。

案例D.将细胞用INS102或INS103预处理6小时，然后用病毒感染72小时，其中化合物与细胞接触78小时。如图10所示，发现使用INS102和INS103处理对病毒诱导的细胞活力丧失具有剂量依赖性保护作用。如上所述计算细胞活力百分比。下面提供了细胞设置和处理的详细信息。

下面的表6提供了与案例D的DMSO处理的样品相比的统计数据。上述T-检验结果表明，当与DMSO对照相比时，所有剂量的INS102和INS103都是显著的。

表6.案例D中INS102和INS103与DMSO相比的t检验

显著值以粗体显示。

下面的表7提供了单因素方差分析Dunnett's多重比较检验。

表7.案例D的Dunnett's多重比较检验

案例E.将细胞用INS102或INS103预处理24小时，然后用病毒感染72小时，其中化合物与细胞接触96小时。发现高剂量和中剂量的INS102和高剂量的INS103处理对病毒诱导的细胞活力丧失具有剂量依赖性保护作用。如上所述计算细胞活力百分比。下面提供了细胞设置和处理的详细信息。

下面的表8提供了与案例E的DMSO处理样品相比的统计数据。上述T检验结果表明，与DMSO对照相比，10μM剂量的INS102和5μM剂量的INS103是显著的。

表8.案例E中INS102和INS103与DMSO相比的t检验

下面的表9提供了单因素方差分析Dunnett's多重比较检验。

表9.案例E的Dunnett's多重比较检验

案例F.细胞用INS102或INS103处理1小时，然后用病毒感染72小时，其中化合物与细胞接触73小时。如图12所示，发现高剂量的INS102和所有剂量的INS103治疗具有剂量依赖性的抗病毒保护作用。如上所述计算细胞活力百分比。

下面提供了细胞设置和处理的详细信息。

下面的表10提供了与案例E的DMSO处理样品相比的统计数据。上述T检验结果表明，与DMSO对照相比，1μM的INS102剂量和5μM、1μM和0.2μM的INS103剂量都是显著的。

表10.案例F中INS102和INS103与DMSO相比的t检验

显著值以粗体显示。

下面的表11提供了单因素方差分析Dunnett's多重比较检验。

表11.案例F的Dunnett's多重比较检验

INS102对案例A-C的SARS-CoV-2病毒载量的影响如下所示：10μM剂量的INS-102在24、48和72小时降低的病毒载量如图13所示。细胞设置和处理的细节如图32所示。统计分析如图33所示。

INS103对案例A-C的SARS-CoV-2病毒载量的影响如下所示：如图14所示，INS-103剂量依赖性地降低病毒载量。细胞设置和处理的细节如图34所示。统计分析如图35所示。

INS102和INS103的细胞研究创建显示在图36。

Luminex。Luminex实验中使用的细胞因子如上定义。案例A-C的IL-6产生的实验结果如图15所示。统计分析如图37所示。

案例A-C的IL-8产生的实验结果如图16所示。统计分析如图38所示。

案例A-C的IL-10产生的实验结果如图17所示。统计分析如图39所示。

病例A-C的IL-1α产生的实验结果如图18所示。统计分析如图40所示。

ELISA。上面定义了ELISA实验的设置。案例A-C的IL-6产生的实验结果如图19所示。统计分析如图41所示。

Oncodesign研究表明，SARS-CoV-2会降低Calu-3细胞的活力。如本文所证明的，INS-102和INS-103对Calu-3细胞或Vero细胞没有细胞毒性。INS-102和INS-103抑制SARS-CoV-2诱导的Calu-3细胞活力丧失。INS-102和INS-103预处理6小时可抑制SARS-CoV-2诱导的Calu-3细胞活力丧失。将SARS-CoV-2与INS化合物一起孵育可抑制SARS-CoV-2诱导的Calu-3细胞活力丧失。高剂量(10μM INS-102、5μM INS-103)降低了SARS-CoV-2病毒载量。INS-102和INS-103均抑制SARS-CoV-2诱导的Calu-3细胞中的细胞因子和趋化因子的产生。

实施例6：SARS-CoV-2的体内吸入治疗

测试他汀类药物吸入对SARS-CoV-2的影响。选择了仓鼠模型。仓鼠是专性鼻呼吸者，也是呼吸道疾病和治疗的模型。总体研究设计的示意图显示在图20。

成年雄性仓鼠(7-9周龄；查尔斯(Charles)河)饲养在ABSL-3隔离区，每笼2只仓鼠。从感染前2天开始，持续到感染后第6天，每天对仓鼠进行称重。同样在感染前2天开始，用药物、PPBS或对照载体处理仓鼠。药物(匹伐他汀)在柠檬酸盐缓冲制剂中制备，对照载体(DV)包含不含匹伐他汀的制剂。药物和DV样品保存在避光条件下直至使用。

实验材料	数量(克)	浓度(％)
			匹伐他汀钙	4.18	0.40(游离酸)
柠檬酸钠二水合物	2.42	0.24
			柠檬酸	0.34	0.03
氯化钠	7.6	0.76
			去离子水(毫升)	1000	-

在第0天(即处理开始后2天)，第一组15只仓鼠鼻内接种30μL体积的10⁴PFU SARS-CoV-2，第二组15只仓鼠仅鼻内接种相同体积的DPBS。接种(病毒和对照)在药物或对照载体处理后约2小时施用。病毒和对照载体的制备如表12所示。在接种之前，仓鼠在钟罩系统中用异氟醚麻醉(2-5％饱和度)。允许仓鼠在空笼子中从麻醉中恢复，然后返回到有被褥的分组住房。

表12.病毒组和对照组

将病毒稀释至333,333PFU/mL(以获得10⁴PFU/30μL)

在病毒感染后的第1-3天，对每只仓鼠进行咽拭子检查。在第3天，对每个治疗组的一半实施安乐死，其余的动物在感染后第6天实施安乐死。治疗组如表13所示。对于咽拭子，在擦拭之前，用钟罩系统中的异氟烷(2-5％饱和度)麻醉仓鼠。在第3天和第6天，用氯胺酮、甲苯噻嗪和乙酰丙嗪的混合物麻醉仓鼠，然后通过颈椎脱臼实施安乐死。进行尸检以获得表14中列出的组织。

表13.治疗组

表14.样品采集和保存：

组织	速冻	三唑	福尔马林
				咽拭子	是
气管	是	是	是
				肺	是	是	是
脑	是	是	是
				肝	是	是	是
脾	是	是	是
				心	是	是	是
肾	是	是	是
				骨骼肌	是	是	是
血液(血清)	是

如下所述从收获的组织中分析样品。

噬斑测试：将气管拭子、血清、肺和脑匀浆的冲洗液在37℃下解冻，并在不冷冻的情况下直接测定接种物。样品在DMEM中用1％牛血清白蛋白(BSA)连续稀释10倍，初始稀释度为1:8。将125μL的每种稀释液加入到12孔簇板中的融合Vero CCL-81细胞(ATCC)中并慢慢注入细胞培养基。在37℃的加湿培养箱中，在5％CO₂的条件下将病毒在细胞上培养1小时。将细胞单层用溶解在DMEM中的0.5％琼脂糖、5％胎牛血清(FBS)和1x抗生素抗真菌剂(Thermo Fisher)覆盖，并在5％CO₂和37℃的加湿培养箱中孵育3天。用4％缓冲福尔马林固定细胞30分钟以上，然后去除琼脂糖塞。细胞用0.05％结晶紫在20％乙醇中染色10分钟，然后用水冲洗三次。将板倒置至完全干燥，然后在重复孔中计数。通过平均最高稀释度的倒数来记录病毒滴度，其中记录了斑块，并表示为每拭子PFU或每毫克固体组织PFU。

噬斑减少中和试验：接种后第3天和第6天的仓鼠血清在37℃下解冻，并取30μL在水浴中在56℃下加热30分钟以灭活补体蛋白。用PBS和1％FBS组成的病毒稀释剂将血清稀释4倍，然后将样品连续稀释2倍11次，动态范围为1:4至1:4096。将含有80PFU SARS-CoV-2的等体积病毒稀释剂添加到每个抗体稀释液和仅由病毒稀释剂组成的无抗体对照液中，得到1:4至1:8192的最终动态范围和一个无抗体对照。将抗体病毒稀释系列应用于单次复制的融合Vero CCL-81细胞，并在湿润培养箱中在5％CO₂和37℃下培养1小时。如上所述，将细胞覆盖、孵育、固定并染色，以进行噬斑测试。中和滴度定义为检测到与无抗体对照相比少于20％斑块的稀释度(>80％中和)的倒数。

统计数据：所有统计测试均使用GraphPad PRISM 9.0.2(GraphPad软件)进行。成对进行生存比例的时序检验(Mantel-Cox)，并使用R版本4.0.0(R项目)p.校正函数通过邦费罗尼(Bonferroni)校正调整p值。通过费舍尔(Fisher)精确检验计算死亡率和阳性病毒检测之间的相关性。对log₁₀转换值进行重复测量双因素方差分析，并根据Tukey方法计算多重比较。在病毒攻击时的起始值或log₁₀转化后病毒滴度的归一化权重进行主效应双向方差分析，并使用Tukey方法计算多重比较。计算纵向采集的气管拭子和log10转换的曲线下面积(AUC)。分组log₁₀-AUC的方差分析采用Tukey方法计算的多重比较进行。对未转化的PRNT80中和值进行Kruskal-Wallis H检验，并根据Dunn方法计算多重比较。

组织病理学：尸检时，用10％缓冲福尔马林(赛默飞世尔)使肺膨胀，并将仓鼠组织在10倍体积的10％缓冲福尔马林中在室温下固定48小时。在4℃下，用10倍体积的0.5M乙二胺四乙酸(EDTA)(pH＝7)将颅骨脱盐18天，每5天更换一次EDTA溶液。将组织包埋在石蜡中，切成薄片并常规用苏木精和伊红(H&E)染色。H&E玻片采用全玻片图像技术，使用带有放大倍镜和分辨率为0.25μm/像素的Aperio玻片扫描仪进行40倍放大扫描。图像文件被上传到徕卡(Leica)托管的网站上，委员会认证的兽医解剖病理学家对SARS-CoV-2诱导的组织学病变进行盲法评估。对于肺部炎症的定量评估，使用ImageJ软件(斐济，Fiji)捕获并分析数字图像，以估计发炎组织的面积(在亚总放大率下肉眼可见)占肺切片总表面积的百分比。

治疗研究的结果显示在图21-28中。

观察到鼻内吸入匹伐他汀治疗的保护作用(与对照相比)。如图21，用对照(无病毒)处理的动物保持相对恒定的体重。用SARS-CoV-2处理且未使用药物治疗的动物在第3天左右开始出现体重减轻，并在第6天持续到实验结束。相比之下，接受鼻内吸入匹伐他汀治疗的动物体重减轻较少，这在第4天显示出统计学意义。

图22显示了来自鼻拭子的病毒滴度。与用DPBS或对照载体(DV)治疗的动物相比，鼻内吸入匹伐他汀治疗的动物显示出病毒滴度降低的趋势。图23显示了每个感染治疗组中病毒滴度的比较。匹伐沙汀治疗在第1天降低了咽拭子中的病毒滴度，但在第2天或第3天没有观察到这种趋势。这可能是因为病毒在上呼吸道自然清除和/或向下移动到动物的下呼吸道。

图24显示了在感染后第3天用鼻内吸入匹伐他汀处理的仓鼠和对照的鼻拭子(左图)和气管(右图)中的病毒滴度。在匹伐他汀治疗的动物中观察到病毒滴度的降低。在后来的时间点没有观察到这种差异。

图25显示了在感染后第3天用鼻内吸入匹伐他汀和对照处理的仓鼠肺样本(R2左图；R4右图)中的病毒滴度。与R4样品中的对照相比，在接受鼻内吸入匹伐他汀的动物中观察到病毒滴度显著降低。

治疗样本和对照样本的肺组织病理学如图26所示。与对照组相比，鼻内吸入匹伐他汀治疗的仓鼠急性肺部炎症减少。图27显示了基于根据炎症严重程度分级的肺组织病理学的平均+/-SEM的所有感染动物的肺部炎症等级的盲法评分的半定量曲线。模拟组代表没有病毒感染且鼻内滴注PBS(i.n.)。

图28显示了基于受影响的肺的百分比(即，受急性炎症影响的肺的量)的肺组织病理学评分。第3天和第6天的所有治疗组(模拟感染和病毒处理)。第3天的动物检查仅有少量因病毒感染引起的炎症(～25％)。到第6天，由于SARS-CoV-2感染，病毒感染动物的炎症明显增加(约50％)。鼻内吸入匹伐他汀治疗将第6天的炎症减少至约30％。虚线框突出显示了用药物和对照治疗的病毒感染动物的比较。

鼻内吸入匹伐他汀的结果证明了对SARS-CoV-2(COVID-19)的保护/治疗作用，如对仓鼠体重的保持、鼻、气道、咽喉和肺部病毒载量减少的趋势以及肺部炎症的轻度/中度减少的统计学显著作用所示。

实施例7:联合治疗

按照实施例5中提供的感染细胞和应用治疗剂的方法，在Calu-3人肺上皮细胞中测试他汀类药物与地塞米松或瑞德西韦组合对病毒感染的作用。下面提供了有关细胞系的信息。

/>

细胞培养条件。Calu-3细胞模型在SARS-CoV的文献中已经得到了很好的描述(例如，Tseng等人，2005，《病毒学杂志(J Virol)》，https://doi:10.1128/JVI.79.15.9470–9479)。Calu-3细胞在37℃的潮湿气氛(5％CO₂，95％空气)中以单层形式生长到相应的细胞培养基(MEM+1％丙酮酸+1％谷氨酰胺+10％胎牛血清)中。所有细胞都粘附在塑料瓶上。对于细胞传代程序，通过用胰蛋白酶-乙二胺四乙酸二钠(trypsin-Versene)液处理5分钟将细胞从培养瓶中分离出来，并通过添加完全培养基进行中和。在这项研究中，细胞被涂在96孔板上。通过使用V-细胞计数器对细胞进行计数并评估其活力。

病毒分离。该病毒株是通过欧洲病毒档案走向全球(Evag)平台(https://www.european-virus-archive.com/)提供的。在本研究中，使用了斯洛伐克分离株(参考SARS-CoV-2株Slovakia/SK-BMC5/2020)。病毒滴度：通过Oncodesign在Vero E6 TMPRSS2细胞系(起源NIBsc，英国)上扩增SARS-Cof2并进行滴度测定。

对Calu-3细胞进行计数，并使用Vi-细胞自动仪器评估它们的活力。培养细胞以在接种的96孔板中达到汇合。该方法将包括研究化合物在感染和复制阶段的作用(完成了两个分支：感染前用化合物处理细胞和细胞感染前用化合物处理病毒)。根据我们在实验阶段从病毒库中获得的结果，制备一个感染复数(M.O.I＝～0.01)的病毒。由于病毒原液的滴度为1.5x10e6 pfu/mL，因此根据实验时Calu3细胞/孔的数量计算和制备病毒主混合物。

案例1。用一种他汀类药物(INS-102、INS-103或INS-104)作为单药或与地塞米松(Dex)或瑞德西韦(Remde)联合治疗细胞6小时，并在37℃下孵育。预处理6小时后，将SARS-CoV-2病毒以0.01的MOI感染细胞，并在37℃下孵育72小时。还仅使用载体(DMSO)、单独使用Dex和单独使用Remde进行对照和比较治疗。他汀类药物在10μM、1μM、和0.1μM或5μM、1μM、和0.2μM浓度下实验，Dex在10μM、1μM和0.1μM浓度下，Remde在1nM、10nM和100nM浓度下实验。

案例2。在室温下，用他汀类药物(INS-102、INS-103或INS-104)中的一种作为单药或与地塞米松(Dex)或瑞德西韦(Remde)联合治疗细胞1小时。预处理1小时后，将SARS-CoV-2病毒以0.01的MOI感染细胞，并在37℃下孵育72小时。还仅使用载体(DMSO)、单独使用Dex和单独使用Remde进行对照和比较治疗。他汀类药物在10μM、1μM、和0.1μM或5μM、1μM、和0.2μM浓度下实验，Dex在10μM、1μM和0.1μM浓度下，Remde在1nM、10nM和100nM浓度下实验。

感染后24小时收获细胞，病毒载量通过RT-PCR对于开放阅读框1ab(ORF1ab)基因的相对基因表达来测定，该基因是SARS-CoV-2中最大的一个，编码负责病毒转录和复制的多蛋白PP1ab和PP1a。使用以下引物通过RT-PCR评估基因表达：

RT PCR引物：ORF1ab_Fw CCGCAAGGTTCTTCTTCGTAAG；ORF1ab_RvTGCTATGTTTAGTGTTCCAGTTTTC；ORF1ab_探针

AAGGATCAGTGCCAAGCTCGTCGCC[5']HEX[3']BHQ-1。

结果显示在表15-17中，示例性条形图显示在图42-55。

与DMSO对照相比，在所有单一药物治疗中，病毒载量均有所降低。与两种单一药剂相比，显示病毒载量降低增强的每种组合用“E”表示。与两种单一药剂相比，显示出病毒载量降低略有增加的趋势的组合用“(e)”表示。

与使用单一药剂1μM INS-102、0.1μM和1μM Dex、0.1μM INS-102、1μM和10μM Dex相比，INS-102和地塞米松的组合显示病毒载量的降低增强。当瑞德西韦以100nM浓度提供时，与单一药剂1μM和10μM INS-102相比，INS-102和瑞德西韦的组合显示病毒载量的降低增强。

表15.INS-102的组合数据

INS-103与其他药物的组合在降低病毒载量方面表现出较小的增强作用。与单一药剂相比，1μM的INS-103和1μM的Dex的组合表现了病毒载量降低的增强。

表16.INS-103的组合数据

与单一药剂相比，5μM的INS-104和1μM的Dex的组合显示出病毒载量降低的协同增强，并且当Dex处于10μM水平时，增强保持在较低水平。当以10nM提供瑞德西韦时，与5μM的INS-104的单一药物相比，INS-104与瑞德西韦的组合在病毒载量的降低方面具有增强作用。

表17.INS-104的组合数据

下面的数据显示了引物和探针的序列。

SARS-CoV-2拥有近30kbp长的基因组。基因组包含开放阅读框架1ab(ORF1ab)基因，是SARS-CoV-2中最大的一个，编码负责病毒转录和复制的多蛋白PP1ab和PP1a。

治疗研究的结果显示在图29-31中。

尽管已经公开了本公开的特定替代方案，应当理解，各种修改和组合是可能的，并且在所附权利要求的真正精神和范围内是预期的。因此，无意限制本文所呈现的确切摘要和公开内容。

本公开中提及的所有出版物、专利和专利申请都通过引用并入本文，其程度与每个单独的出版物或专利申请被具体地和单独地指示通过引用并入的程度相同。不承认本文引用的任何参考文献构成现有技术。参考文献的讨论陈述了他们的作者所主张的内容，并且发明人保留质疑引用文件的准确性和相关性的权利。应当清楚地理解，尽管本文提及了许多信息源，包括科学期刊文章、专利文件和教科书；该参考并不构成承认任何这些文件构成本领域公知常识的一部分。

Claims (103)

1.一种在有需要的受试者中减轻病毒性呼吸道感染的方法，所述方法包括：向患有病毒性呼吸道感染的受试者鼻内或通过吸入施用制剂，其中所述制剂包含治疗有效量的他汀类药物；和药学上可接受的载体。

2.如权利要求1所述的方法，其中，所述的病毒性呼吸道感染选自下组：冠状病毒、麻疹病毒、布尼亚病毒、沙粒病毒、流感病毒、鼻病毒和腺病毒。

3.如权利要求1或2所述的方法，其中，所述的病毒性呼吸道感染选自下组:SARS-CoV-2、SARS、MERS、汉坦病毒肺综合征、麻疹、拉沙热、流感、甲型流感、甲型H1流感、甲型H1-2009流感、甲型H3流感、乙型流感、呼吸道合胞病毒(RSV)A、RSV B、副流感病毒1、副流感病毒2、副流感病毒3、副流感病毒4、偏肺病毒、肠道病毒和腺病毒。

4.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中，所述的病毒性呼吸道感染是COVID-19。

5.如权利要求1至4中任一项所述的方法，其中，所述制剂是鼻内施用的。

6.如权利要求1至4中任一项所述的方法，其中，所述制剂通过吸入给药。

7.如权利要求1至4和6中任一项所述的方法，其中，所述给药是通过机械吸入器进行的。

8.如权利要求7所述的方法，其中所述的机械吸入器是计量粉末吸入器、加压气溶胶吸入器、干粉吸入器或雾化器。

9.如权利要求7或8所述的方法，其中所述的机械吸入器选自下组:SoftMist^TM吸入器，/>吸入器，/>吸入器，/>吸入器，/>吸入器，/>吸入器，和/>吸入器。

10.如权利要求1至9中任一项所述的方法，其中，所述的他汀类药物选自下组：辛伐他汀、匹伐他汀、罗苏伐他汀、阿托伐他汀、洛伐他汀、氟伐他汀、美伐他汀、西立伐他汀、替尼伐他汀和普伐他汀。

11.如权利要求1至10中任一项所述的方法，其中，所述他汀类药物选自下组：辛伐他汀、匹伐他汀、罗苏伐他汀和阿托伐他汀。

12.如权利要求1至11中任一项所述的方法，其中，所述的他汀类药物选自下组：匹伐他汀和辛伐他汀。

13.如权利要求1至12中任一项所述的方法，其中，所述的治疗有效量在约0.005μg至约40mg之间。

14.如权利要求1至13中任一项所述的方法，其中，所述的治疗有效量在约0.5μg至约15mg之间。

15.如权利要求1至14中任一项所述的方法，其中，所述的治疗有效量在约1.0μg至约10mg之间。

16.如权利要求1至15中任一项所述的方法，其中，所述的治疗有效量在约1.0μg至约5mg之间。

17.如权利要求1至16中任一项所述的方法，还包括施用至少一种另外的治疗剂。

18.如权利要求17所述的方法，其中，各另外的治疗剂独立地选自下组：RNA聚合酶抑制剂；病毒蛋白酶抑制剂；宿主蛋白酶抑制剂；TMPRSS2抑制剂；抗病毒剂；氯喹或其盐、羟氯喹或其盐、金刚烷胺、金刚烷乙胺、洛匹那韦、利托那韦、阿比朵尔、瑞德西韦、法匹拉韦、甲磺酸奈非那韦、阿奇霉素、巴弗洛霉素、卡莫司他或其盐、地瑞那韦、奥司他韦、利巴韦林、恢复期血浆或源自其的抗体、塞利尼索(selinexor)、吸入一氧化氮、外泌体和/或微泡、和脐带血调节性T细胞。

19.如权利要求17或18所述的方法，其中，各另外的治疗剂选自下组：甲磺酸奈非那韦、阿奇霉素、巴弗洛霉素、甲磺酸卡莫司他、卡莫司他或其盐、阿比朵尔、金刚烷胺、金刚烷乙胺、洛匹那韦、地瑞那韦、利巴韦林、瑞德西韦、法匹拉韦、氯喹、羟氯喹、托珠单抗或沙利鲁单抗(sarilumab)。

20.如权利要求19所述的方法，其中，所述另外的治疗剂是瑞德西韦。

21.如权利要求17所述的方法，其中，各另外的治疗剂选自下组:β-激动剂；皮质类固醇；毒蕈碱拮抗剂；RhoA抑制剂；GGTase-I或-II抑制剂；ROCK1和/或ROCK2抑制剂；可溶性环氧化物水解酶抑制剂；脂肪酸酰胺水解酶抑制剂；白三烯受体拮抗剂；磷酸二酯酶-4抑制剂，如罗氟司特；5-脂氧合酶抑制剂，例如齐留通；肥大细胞稳定剂，例如奈多罗米；角鲨烯合酶抑制剂，例如拉帕司他(lapaquistat)、萨拉戈西酸(zaragozic acid)和RPR 107393；法尼基焦磷酸合酶抑制剂，包括但不限于二膦酸盐，例如阿仑膦酸盐、依替膦酸盐、氯屈膦酸盐、替鲁膦酸盐、帕米膦酸盐、奈立膦酸盐、奥帕膦酸盐、伊班膦酸盐、利塞膦酸盐、唑来膦酸盐；茶碱；抗IL5抗体；抗IgE抗体；抗IL5受体抗体；抗IL13/4受体抗体；生物制剂，例如美泊利单抗、瑞利珠单抗、贝那利珠单抗、奥马珠单抗和杜匹鲁单抗；β-激动剂和毒蕈碱拮抗剂组合，包括长效和短效制剂；β-激动剂和皮质类固醇组合，包括长效和短效制剂；皮质类固醇和毒蕈碱拮抗剂组合，包括长效和短效制剂；β-激动剂、皮质类固醇和毒蕈碱拮抗剂组合，包括长效和短效制剂。

22.如权利要求21所述的方法，其中，各另外的治疗剂是β-激动剂、皮质类固醇、毒蕈碱拮抗剂，或其任何组合。

23.如权利要求21或22所述的方法，其中，所述的另外的治疗剂是地塞米松。

24.如权利要求23所述的方法，还包括瑞德西韦。

25.如权利要求17至24中任一项所述的方法，其中，各另外的治疗剂通过鼻内或通过吸入给药。

26.如权利要求17至25中任一项所述的方法，其中，各另外的治疗剂以亚治疗剂量施用。

27.一种在有需要的受试者中治疗病毒性呼吸道感染的方法，所述的方法包括：向患有病毒性呼吸道感染或可能暴露于病毒性呼吸道感染的受试者鼻内或通过吸入施用制剂，其中，所述的制剂包含治疗有效量的他汀类药物；和药学上可接受的载体。

28.如权利要求27所述的方法，其中所述的制剂是预防性施用的。

29.如权利要求28所述的方法，其中，所述制剂在暴露于病毒性呼吸道感染之前施用。

30.如权利要求29所述的方法，其中所述制剂在暴露于病毒性呼吸道感染前1小时至7天施用。

31.如权利要求29或30所述的方法，其中所述制剂在暴露于病毒性呼吸道感染之前1小时至24小时之间施用。

32.如权利要求29至31中任一项所述的方法，其中所述制剂在暴露于病毒性呼吸道感染之前3小时至12小时之间施用。

33.如权利要求29至32中任一项所述的方法，其中所述制剂在暴露于病毒性呼吸道感染之前约6小时施用。

34.如权利要求27至33中任一项所述的方法，其中，所述的病毒性呼吸道感染选自下组：冠状病毒、麻疹病毒、布尼亚病毒、沙粒病毒、流感病毒、鼻病毒和腺病毒。

35.如权利要求27至34中任一项所述的方法，其中，所述的病毒性呼吸道感染选自下组：SARS-CoV-2、SARS、MERS、汉坦病毒肺综合征、麻疹、拉沙热、流感、甲型流感、甲型H1型流感、甲型H1-2009型流感、甲型H3型流感、乙型流感、呼吸道合胞病毒(RSV)A、RSV B、副流感病毒1、副流感病毒2、副流感病毒3、副流感病毒4、偏肺病毒、肠道病毒和腺病毒。

36.如权利要求27至35中任一项所述的方法，其中，所述的病毒性呼吸道感染是COVID-19。

37.如权利要求27至36中任一项所述的方法，其中，所述的制剂是鼻内施用的。

38.如权利要求27至36中任一项所述的方法，其中，所述的制剂通过吸入给药。

39.如权利要求27至36和38中任一项所述的方法，其中，所述给药是通过机械吸入器进行的。

40.如权利要求39所述的方法，其中所述的机械吸入器是计量粉末吸入器、加压气溶胶吸入器、干粉吸入器或雾化器。

41.如权利要求39或40所述的方法，其中，所述的机械吸入器选自下组：Soft Mist^TM吸入器，/>吸入器，/>吸入器，/>吸入器，吸入器，/>吸入器，和/>吸入器。

42.如权利要求27至41中任一项所述的方法，其中，所述的他汀类药物选自下组：辛伐他汀、匹伐他汀、罗苏伐他汀、阿托伐他汀、洛伐他汀、氟伐他汀、美伐他汀、西立伐他汀、替尼伐他汀和普伐他汀。

43.如权利要求27至42中任一项所述的方法，其中，所述的他汀类药物选自下组：辛伐他汀、匹伐他汀、罗苏伐他汀和阿托伐他汀。

44.如权利要求27至43中任一项所述的方法，其中，所述的他汀类药物选自下组：匹伐他汀和辛伐他汀。

45.如权利要求27至44中任一项所述的方法，其中，所述的治疗有效量在约0.005μg至约40mg之间。

46.如权利要求27至45中任一项所述的方法，其中，所述的治疗有效量在约0.1μg至约15mg之间。

47.如权利要求27至46中任一项所述的方法，其中，所述的治疗有效量在约0.1μg至约5mg之间。

48.如权利要求27至47中任一项所述的方法，其中，所述的治疗有效量在约0.1μg至约100μg之间。

49.如权利要求27至48中任一项所述的方法，还包括施用至少一种另外的治疗剂。

50.如权利要求49所述的方法，其中，各另外的治疗剂独立地选自下组：RNA聚合酶抑制剂；病毒蛋白酶抑制剂；宿主蛋白酶抑制剂；TMPRSS2抑制剂；抗病毒剂；氯喹或其盐、羟氯喹或其盐、金刚烷胺、金刚烷乙胺、洛匹那韦、利托那韦、阿比朵尔、瑞德西韦、法匹拉韦、甲磺酸奈非那韦、阿奇霉素、巴弗洛霉素、卡莫司他或其盐、地瑞那韦、奥司他韦、利巴韦林、恢复期血浆、或源自其的抗体、塞利尼索、吸入一氧化氮、外泌体和/或微泡、和脐带血调节性T细胞。

51.如权利要求49或50所述的方法，其中，各个另外的治疗剂选自下组：甲磺酸奈非那韦、阿奇霉素、巴弗洛霉素、甲磺酸卡莫司他、卡莫司他或其盐、阿比朵尔、金刚烷胺、金刚烷乙胺、洛匹那韦、地瑞那韦、利巴韦林、瑞德西韦、法匹拉韦、氯喹、羟氯喹、托珠单抗或沙利鲁单抗(sarilumab)。

52.如权利要求51所述的方法，其中，所述另外的治疗剂是瑞德西韦。

53.如权利要求49所述的方法，其中，各另外的治疗剂选自下组:β-激动剂；皮质类固醇；毒蕈碱拮抗剂；RhoA抑制剂；GGTase-I或-II抑制剂；ROCK1和/或ROCK2抑制剂；可溶性环氧化物水解酶抑制剂；脂肪酸酰胺水解酶抑制剂；白三烯受体拮抗剂；磷酸二酯酶-4抑制剂，如罗氟司特；5-脂氧合酶抑制剂，例如齐留通；肥大细胞稳定剂，例如奈多罗米；角鲨烯合酶抑制剂，例如拉帕司他(lapaquistat)、萨拉戈西酸(zaragozic acid)和RPR 107393；法尼基焦磷酸合酶抑制剂，包括但不限于二膦酸盐，例如阿仑膦酸盐、依替膦酸盐、氯屈膦酸盐、替鲁膦酸盐、帕米膦酸盐、奈立膦酸盐、奥帕膦酸盐、伊班膦酸盐、利塞膦酸盐、唑来膦酸盐；茶碱；抗IL5抗体；抗IgE抗体；抗IL5受体抗体；抗IL13/4受体抗体；生物制剂，例如美泊利单抗、瑞利珠单抗、贝那利珠单抗、奥马珠单抗和杜匹鲁单抗；β-激动剂和毒蕈碱拮抗剂组合，包括长效和短效制剂；β-激动剂和皮质类固醇组合，包括长效和短效制剂；皮质类固醇和毒蕈碱拮抗剂组合，包括长效和短效制剂；β-激动剂、皮质类固醇和毒蕈碱拮抗剂组合，包括长效和短效制剂。

54.如权利要求53所述的方法，其中，各个另外的治疗剂为β-激动剂、皮质类固醇、毒蕈碱拮抗剂，或其任何组合。

55.如权利要求53所述的方法，其中，所述另外的治疗剂是地塞米松。

56.如权利要求55所述的方法，还包括瑞德西韦。

57.如权利要求49至56中任一项所述的方法，其中，各个另外的治疗剂通过鼻内或通过吸入给药。

58.如权利要求49至57中任一项所述的方法，其中各个另外的治疗剂以亚治疗剂量施用。

59.如权利要求29至57中任一项所述的方法，其中，所述的制剂在潜在暴露于病毒性呼吸道感染之前1小时至24小时施用，其中，所述的他汀类药物包括匹伐他汀或辛伐他汀，并且其中所述的制剂还包含瑞德西韦或地塞米松中的至少一种。

60.一种药物组合物，包括：治疗有效量的他汀类药物；至少一种另外的治疗剂；和药学上可接受的载体。

61.如权利要求60所述的药物组合物，其中所述的他汀类药物选自下组：匹伐他汀和辛伐他汀；和所述的另外的治疗剂选自下组：瑞德西韦、地塞米松，及其组合。

62.一种用于治疗病毒性呼吸道疾病的药物制剂，所述组合物包含：

治疗有效量的他汀类药物或其异构体、对映异构体或非对映异构体，和

适用于吸入给药的药学上可接受的载体。

63.一种用于在有需要的受试者中治疗SARS-CoV-2病毒感染的方法，该方法包括：向患有病毒性呼吸道感染的受试者鼻内或通过吸入施用一制剂，其中，所述的制剂包含治疗有效量的他汀类药物；和药学上可接受的载体。

64.如权利要求63所述的方法，其中，制剂抑制病毒滴度的增加。

65.如权利要求63或64所述的方法，其中所述的制剂降低所述受试者中的病毒载量。

66.如权利要求63至65中任一项所述的方法，其中，所述的制剂减轻或抑制病毒感染的一种或多种症状。

67.如权利要求63至66中任一项所述的方法，其中，所述的制剂减轻或抑制一种或多种促炎反应。

68.如权利要求67所述的方法，其中所述的促炎反应是细胞因子或趋化因子。

69.如权利要求67所述的方法，其中所述的制剂降低或抑制受试者中IL-6水平的增加。

70.一种用于在有需要的受试者中治疗SARS-CoV-2病毒感染的方法，该方法包括：

向可能暴露于SARS-CoV-2病毒的受试者鼻内或通过吸入施用制剂，其中，所述的制剂包含治疗有效量的他汀类药物；和药学上可接受的载体。

71.如权利要求70所述的方法，其中所述的制剂在疑似暴露于所述呼吸道病毒之后施用。

72.如权利要求71所述的方法，其中所述的制剂在所述疑似暴露后1小时、2小时、6小时或24小时内施用于受试者。

73.如权利要求71所述的方法，其中所述的制剂在所述疑似暴露后1天、2天、3天、4天、5天、6天或7天内施用于受试者。

74.如权利要求71所述的方法，其中，所述的制剂在所述疑似暴露后7-10天内施用于所述受试者。

75.如权利要求70所述的方法，其中，所述的制剂在潜在暴露于所述的呼吸道病毒之前施用。

76.如权利要求75所述的方法，其中，所述的制剂在潜在暴露前1小时、2小时、6小时或24小时内施用于受试者。

77.一种在感染SARS-CoV-2的受试者中降低COVID-19严重程度的方法，所述的方法包括：

向受感染的受试者鼻内或通过吸入施用一制剂，其中所述制剂包含治疗有效量的他汀类药物；和药学上可接受的载体。

78.如权利要求77所述的方法，其中所述的制剂在潜在暴露于SARS-CoV-2病毒之前施用。

79.如权利要求77所述的方法，其中所述制剂在暴露于SARS-CoV-2病毒之后施用。

80.如权利要求77至79中任一项所述的方法，其中，所述的制剂抑制病毒滴度的增加。

81.如权利要求77至79中任一项所述的方法，其中，所述的制剂降低所述受试者中的病毒载量。

82.如权利要求77至79中任一项所述的方法，其中，所述的制剂减轻或抑制病毒感染的一种或多种症状。

83.如权利要求77至79中任一项所述的方法，其中，所述的制剂减轻或抑制一种或多种促炎反应。

84.如权利要求83所述的方法，其中所述的促炎反应是细胞因子或趋化因子。

85.如权利要求84所述的方法，其中所述的制剂降低或抑制受试者中IL-6水平的增加。

86.如权利要求77至79中任一项所述的方法，其中，所述的制剂预防、抑制或减轻受试者中的细胞因子风暴。

87.如权利要求63至86中任一项所述的方法，其中，所述的他汀类药物选自下组：辛伐他汀、匹伐他汀、罗苏伐他汀、阿托伐他汀、洛伐他汀、氟伐他汀、美伐他汀、西立伐他汀、替尼伐他汀和普伐他汀。

88.如权利要求63至86中任一项所述的方法，其中，所述的他汀类药物选自下组：辛伐他汀、匹伐他汀、罗苏伐他汀和阿托伐他汀。

89.如权利要求63至86中任一项所述的方法，其中，所述的他汀类药物选自下组：匹伐他汀和辛伐他汀。

90.如权利要求63至89中任一项所述的方法，其中，将所述的制剂施用给所述受试者一次、两次、三次、四次或五次。

91.如权利要求63至69和77至90中任一项所述的方法，其中，所述的制剂在受试者暴露于SARS-CoV-2病毒后施用一次、两次、三次、四次或五次。

92.如权利要求70至76和87至90中任一项所述的方法，其中，在受试者暴露于SARS-CoV-2病毒之前，施用所述制剂一次、两次、三次、四次或五次。

93.如权利要求63至89中任一项所述的方法，其中在针对SARS-CoV-2病毒进行疫苗接种之前将所述制剂施用于受试者。

94.如权利要求63至89中任一项所述的方法，其中在针对SARS-CoV-2病毒进行疫苗接种后将所述制剂施用于受试者。

95.如权利要求63至89中任一项所述的方法，其中所述制剂与针对SARS-CoV-2病毒的疫苗联合施用于受试者。

96.如权利要求63至89中任一项所述的方法，其中将所述制剂与另外的COVID-19治疗组合施用于受试者。

97.如权利要求96所述的方法，其中，所述另外的COVID-19治疗是瑞德西韦或地塞米松。

98.如权利要求77所述的方法，其中，所述的他汀类药物保持受试者的上皮细胞活力。

99.如权利要求98所述的方法，其中所述上皮细胞的活力在肺组织中得以保存。

100.一种阻断病毒进入细胞的方法，包括施用治疗有效量的他汀类药物，并且其中所述的病毒是SARS病毒。

101.如权利要求100所述的方法，其中，所述的病毒是SARS-CoV-2病毒。

102.如权利要求100或101所述的方法，其中所述细胞是口腔、鼻子、气管或肺的呼吸道上皮细胞。

103.如权利要求102所述的方法，其中，所述的上皮细胞存在于感染SARS-CoV-2的受试者中，并且所述的他汀类药物作为制剂鼻内或通过吸入给予受感染的受试者，其中所述制剂包含治疗有效量的他汀类药物和药学上可接受的载体。