CN116725026A - 一种农药组合物及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于农药技术领域，具体涉及一种农药组合物及其应用。本发明通过将威百亩、麦角甾醇生物合成抑制剂以及咯菌腈和氰烯菌酯中的一种进行组合使用，协同增效作用明显，可以达到兼治由真菌和线虫引发的种传病害和土传病害，且能够降低农药用量的同时，扩大防病谱，提高农药的安全性，降低病原菌对农药的抗药性，解决现有农药所存在的活性低、作用谱窄、用量大、易造成药害和使病菌易产生抗药性的缺陷。

Description

一种农药组合物及其应用
技术领域
本发明属于农药技术领域，具体涉及一种农药组合物及其应用。
背景技术
随着水稻高产栽培技术的推广应用，特别是病原物抗药性发展，水稻恶苗病、干尖线虫病和秧苗青枯病等发生逐年加重。这些种传和土传的病原物种类多，生物学差异大，几乎没有一种农药能够同时防治这几种真菌病害和线虫病害。这些水稻种传和土传病害通过喷雾处理的防治效果差或完全没有效果，采用物理和生物的方法进行种子处理，也费工费力，效果较差，难以实施。只有采用不同选择性生物活性的化学农药组合物进行种子处理或土壤处理才是最安全、经济有效的方法。
目前生产上可以用来防治这些病虫害的农药大多是二元和三元的农药组合物，但是这些农药往往对植物的安全性差，对出苗和苗期生长有抑制作用，不利于作物的健康生长；同时这些农药组合物对主要种传和土传病原物的活性低、用量大，防治效果差，在出现抗药性的地方，常因防控失败造成毁灭性危害，严重威胁着水稻生产安全。
发明内容
本发明的目的在于提供一种农药组合物及其应用，所述农药组合物可以达到兼治由真菌和线虫引发的种传病害和土传病害，具有显著增效作用的同时降低农药的用量，进而达到扩大防病谱，提高安全性和延缓抗药性发展的技术效果。
本发明提供了一种农药组合物，包括威百亩、咯菌腈和麦角甾醇生物合成抑制剂，或威百亩、氰烯菌酯和麦角甾醇生物合成抑制剂；所述威百亩、咯菌腈和麦角甾醇生物合成抑制剂，或威百亩、氰烯菌酯和麦角甾醇生物合成抑制剂的重量比分别为(1～90)：(0～80)：(1～75)。
优选的，所述威百亩、咯菌腈和麦角甾醇生物合成抑制剂，或威百亩、氰烯菌酯和麦角甾醇生物合成抑制剂的重量比分别为(3～55)：(0～60)：(3～50)。
优选的，所述麦角甾醇生物合成抑制剂包括叶菌唑、灭菌唑、种菌唑、戊唑醇和丙硫菌唑的一种或两种。
优选的，所述麦角甾醇生物合成抑制剂包括第一组分和第二组分，所述第一组分为叶菌唑、灭菌唑、种菌唑或戊唑醇，所述第二组分为丙硫菌唑；所述第一组分和第二组分的质量比为(1～10)：(1～10)。
本发明还提供了上述技术方案所述的农药组合物在防治植物种传病害和/或土传病害中的应用。
本发明还提供了上述技术方案所述的农药组合物在农药中的应用。
优选的，所述农药组合物为含所述农药有效成分重量的3％～50％。
本发明还提供了一种农药制剂，包括上述技术方案所述的农药组合物为有效成分和辅料。
优选的，所述农药组合物有效成分为所述农药制剂重量的3％～50％。
所述农药制剂包括悬浮剂、种衣剂、可湿性粉剂和水分散粒剂中的一种或多种。
有益效果：
本发明提供了一种农药组合物，包括威百亩、咯菌腈和麦角甾醇生物合成抑制剂，或威百亩、氰烯菌酯和麦角甾醇生物合成抑制剂；所述威百亩、咯菌腈和麦角甾醇生物合成抑制剂，或威百亩、氰烯菌酯和麦角甾醇生物合成抑制剂的重量比分别为(1～90)：(0～80)：(1～75)。
本发明通过将威百亩、麦角甾醇生物合成抑制剂以及咯菌腈和氰烯菌酯中的一种进行复配使用，协同增效作用明显，可以达到兼治由真菌和线虫引发的种传病害和土传病害，且能够降低农药用量的同时，扩大防病谱，降低农药对植物的抑制作用以提高对植物的安全性，降低病原菌或害虫对农药的抗药性；所述农药组合物与现有杀菌剂没有交互抗性，可以防治抗药性病害，解决多重抗药性病害无药可治的问题；所述农药组合物毒力相互作用，抗性风险低，抗菌活性高，增效作用显著，百公斤种子用药少、使用成本低，投入产出比高，经济效益好，有效解决现有农药所存在的活性低、作用谱窄、用量大、易造成药害和使病菌和害虫易产生抗药性的缺陷。
同时，以本发明所述农药组合物为有效成分的农药制剂处理水稻种子和苗床，对出苗和苗期生长安全，且有壮苗和促进分蘖的效果，并对环境具有适应性。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1为本发明中威百亩的结构图；
图2为本发明中咯菌腈的结构图；
图3为本发明中氰烯菌酯的结构图；
图4为本发明中叶菌唑的结构图；
图5为本发明中灭菌唑的结构图；
图6为本发明中种菌唑的结构图；
图7为本发明中戊唑醇的结构图；
图8为本发明中丙硫菌唑的结构图。
具体实施方式
本发明提供了一种农药组合物，包括威百亩、咯菌腈和麦角甾醇生物合成抑制剂，或威百亩、氰烯菌酯和麦角甾醇生物合成抑制剂；所述威百亩、咯菌腈和麦角甾醇生物合成抑制剂，或威百亩、氰烯菌酯和麦角甾醇生物合成抑制剂的重量比分别为(1～90)：(0～80)：(1～75)。
在本发明中，所述威百亩、咯菌腈和麦角甾醇生物合成抑制剂，或威百亩、氰烯菌酯和麦角甾醇生物合成抑制剂的重量比分别优选为(3～55)：(0～60)：(3～50)，更分别优选为(5～45)：(0-40)：(5-40)。本发明所述麦角甾醇生物合成抑制剂优选包括叶菌唑、灭菌唑、种菌唑、戊唑醇和丙硫菌唑的一种或两种，更优选包括叶菌唑、灭菌唑、种菌唑、戊唑醇或丙硫菌唑。当所述麦角甾醇生物合成抑制剂包括两种物质时，优选包括第一组分和第二组分，所述第一组分优选为叶菌唑、灭菌唑、种菌唑或戊唑醇，所述第二组分优选为丙硫菌唑；所述第一组分和第二组分的质量比优选为(1～10)：(1～10)。本发明中使用的威百亩(carbathion)，又称N-甲基二硫代氨基甲酸钠，其化学结构如图1所示，威百亩是一种兼有杀线虫、杀菌和除草作用的硫代异硫氰酸甲酯类化合物，抑制生物的呼吸作用，不易产生抗药性，易溶于水，但是使用不当或用量过大会造成对农作物的药害，因此一般用于苗前土壤处理。本发明通过增效配比、安全剂量选择及浸种、撒施或浇灌的配套的使用技术研发，发现种子处理可以有效杀灭水稻干尖线虫，土壤处理可以抑制稻腐霉孢子囊萌发，按照本发明中威百亩的剂量可以用于水稻种子处理和苗床处理。
本发明使用的咯菌腈(fludioxonil)，其结构式如图2所示，咯菌腈是一种苯基吡咯类内吸性杀菌剂，对多种植物病原真菌具有生物活性，长期使用会导致病原菌产生抗药性，抗药性病原菌对渗透压敏感，药剂难溶于水，对作物安全性好。本发明的研究中发现该杀菌剂用量过高反而会降低生物活性，通过本发明中的剂量选择和组合得到本发明中的增效组合物配方。
本发明使用的氰烯菌酯(phenamacril)，其结构式如图3所示，氰烯菌酯是一种氰基丙烯酸酯类内吸性杀菌剂，抑制肌球蛋白-5马达功能，专化性强，仅对少数几种镰刀菌有效，对作物安全，但抗性风险很高。本发明根据其抗性风险筛选得到了本发明中合理的增效组合物配方。
本发明使用的麦角甾醇生物合成抑制剂是叶菌唑(metconazole)、灭菌唑(triticonazole)、种菌唑(ipconazole)、戊唑醇(tebconazole)、丙硫菌唑(prothioconazole)的一种或两种，上述麦角甾醇生物合成抑制剂的结构式依次如图4～8所示，叶菌唑、灭菌唑、种菌唑、戊唑醇和丙硫菌唑均属于麦角甾醇生物合成抑制剂，内吸性强，抗菌谱广，活性高，对单子叶作物安全性好，抗性风险低。
本发明通过将威百亩、麦角甾醇生物合成抑制剂以及咯菌腈和氰烯菌酯中的一种进行组合使用，协同增效作用明显，可以达到兼治由真菌和线虫引发的种传病害和土传病害，且能够降低农药用量的同时，扩大防病谱，提高农药的安全性，降低病原菌或害虫对农药的抗药性风险。
基于上述技术优势，本发明还提供了上述技术方案所述的农药组合物在防治植物病害中的应用。本发明所述植物病害优选包括种传病害和/或土传病害，进一步优选由真菌和/或线虫引起的植物病害，更进一步优选包括由镰刀菌(Fusarium spp.)、丝核菌(Rhizoctonia solani)、稻腐霉(Pythium oryzae)和线虫(nematodes)引起的一种或多种植物病害，更优选为水稻恶苗病、水稻干尖线虫病和秧苗青枯病中的一种或多种。
在本发明所述应用中，所述农药组合物的使用方法优选包括浸种、撒施或浇灌。
本发明所述浸种优选包括：以所述农药组合物水溶液按水稻播种前浸种的常规操作技术对种子进行浸泡；所述农药组合物在所述农药组合物水溶液中的有效浓度优选为20～300mg a.i./L，更优选为25～250mg a.i./L；所述浸泡的条件优选包括：15～25℃浸泡24～48h，或1～7℃浸泡7～10d。将浸种后的植物种子催芽播种，可以防治水稻恶苗病和干尖线虫病，特别是能够防治目前对多种药剂产生抗药性的水稻恶苗病。
本发明所述撒施优选包括：将所述农药组合物与土壤混匀后撒施，所述农药组合物的用量优选为40～500mg a.i./hm2，更优选为100～400mg a.i./hm2。本发明所述农药组合物撒施的时期优选为水稻秧苗二叶一心(断奶期)。
本发明所述浇灌优选包括：将所述农药组合物与水混匀稀释后浇灌，所述农药组合物的用量优选为40～500mg a.i./hm2，更优选为50～400mg a.i./hm2。采用撒施或浇灌的施用方式可以防治水稻秧苗青枯病。本发明所述浇灌和撒施的时期优选为水稻秧苗二叶一心(断奶期)。
基于所述农药组合物所具有的优势，本发明还提供了上述技术方案所述的农药组合物在农药中的应用。本发明所述农药组合物优选为含所述农药有效成分重量的3％～50％，更优选在3％～50％中任意取值，如3.5％、5％、10％、16％、35％或40％。
本发明还提供了一种农药制剂，以上述技术方案所述的农药组合物为有效成分，所述农药组合物优选为所述农药制剂重量的3％～50％，更优选在3％～50％中任意取值，如3.5％、5％、10％、16％、35％或40％。本发明所述农药制剂优选但不限于包括悬浮剂、种衣剂、可湿性粉剂和水分散粒剂中的一种或多种，进一步优选为悬浮剂和/或水分散性粒剂，更优选为悬浮剂和水分散性粒剂。
本发明所述农药制剂中的辅料优选依据所选定的剂型添加本领域中常用的载体和/或助剂，如：当所述农药制剂为悬浮剂时，优选选择添加烷基萘磺酸盐、木质素磺酸钠或聚羧酸盐等分散剂；苯乙基酚聚氧乙烯基醚磷酸酯、烷基酚聚氧乙烯基醚磷酸酯、聚氧乙烯醇、烷基硫酸盐、烷基磺酸盐或萘磺酸盐等湿润剂；膨润土、硅酸镁铝或黄原胶等增稠剂；苯甲酸和苯甲酸钠等防腐剂；甘油、尿素、乙二醇或丙二醇等防冻剂。当所述农药制剂为种衣剂时，优选选择添加环氧树脂成膜剂、聚酯乳液成膜剂、复合预膜液及水性或有性染料等成膜剂和警戒色染料。当所述农药制剂为可湿性粉剂和水分散粒剂时，优选选择添加烷基萘磺酸盐、木质素磺酸钠或聚羧酸盐等分散剂；苯乙基酚聚氧乙烯基醚磷酸酯、烷基酚聚氧乙烯基醚磷酸酯、聚氧乙烯醇、烷基硫酸盐、烷基磺酸盐或萘磺酸盐等湿润剂；轻质碳酸钙、滑石粉、硅藻土、膨润土或高岭土等载体；当加工成水分散粒剂时，另外优选添加柠檬酸、硫酸铵、氯化钠、葡萄糖、尿素或碳酸氢钠等崩解剂；玉米粉或硅藻土等粘结剂。
本发明对所述辅料的添加剂量和种类没有具体限定，依据所制备的农药剂型常规添加即可。本发明对所述农药制剂的制备方法也没有具体限定，依据制备剂型合理选择制备方法即可，如可根据《农药剂型加工与管理》(沈晋良主编，中国农业出版社，北京(2002))、《农药制剂学》(王开运主编，中国农业出版社，北京(2002))描述的方法制备所述农药制剂的剂型。
为了进一步说明本发明，下面结合附图和实施例对本发明提供的技术方案进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
下述实施例中使用的威百亩是利民化工股份有限公司提供的42％可溶液剂；98％咯菌腈原药购于湖北速普尔化工有限公司；96％氰烯菌酯原药和25％悬浮剂由江苏农药研究所股份有限公司提供；95％叶菌唑原药、95％灭菌唑原药和95％种菌唑购于湖北信康医药化工有限公司；95％戊唑醇和95％丙硫菌唑分别由江苏七洲绿色化工股份有限公司和安徽久易农业股份有限公司提供；所用杀线虫剂和杀菌剂均在4℃下存放。
实施例1
几种农药对水稻恶苗病菌和青枯病菌及干尖线虫的毒力测定，步骤如下：
分别称取98％咯菌腈、96％氰烯菌酯、95％丙硫菌唑、95％叶菌唑、95％灭菌唑、95％种菌唑和95％戊唑醇杀菌剂原药，分别溶于二甲基亚砜(DMSO)，分别制备成10mg/mL母液(重量计1％)冷藏备用；42％威百亩杀线虫可溶液剂用无菌水稀释至1％水溶液(10mg/mL)冷藏备用。
同时按照重量比配制成不同比例的农药组合物，其中农药组合物由威百亩、麦角甾醇生物合成抑制剂和咯菌腈或威百亩、麦角甾醇生物合成抑制剂和氰烯菌酯杀菌剂组成的混合液，其中麦角甾醇生物合成抑制剂为丙硫菌唑、叶菌唑、灭菌唑、种菌唑或戊唑醇。
按设计处理最高剂量吸取药剂单剂或农药组合物0.1％的药液与冷却至45℃左右的马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)混合，并用培养基稀释至含系列浓度药剂的培养基，倒入90mm直径的无菌培养皿内(10-12mL/皿)冷却制成含系列药剂浓度的平板，以不含药PDA培养基平板作对照。分别接种水稻恶苗病菌Fusarium moniliforme，(有性阶段Gibborellafujikuroi)，秧苗立枯病菌Rhizoctonia solani和镰刀菌Fusarium sp.在PDA平板上培养的5mm菌丝块，置于25C下培养3-4天，测量各处理的菌落生长直径，按公式(1)计算各处理浓度对菌丝生长的抑制率。
菌丝生长抑制率(％)＝(对照菌落增长直径-处理菌落增长直径)/对照菌落增长直径×100％………………………………………(1)；
前期研究发现采用的组合物各组分对稻腐霉(Pythium oryzae)菌丝生长几乎没有抑制活性。
测定水稻恶苗病菌、秧苗青枯镰刀菌和秧苗青枯立枯丝核菌的药敏性时，氰烯菌酯、叶菌唑、灭菌唑、种菌唑、丙硫菌唑和戊唑醇在培养基中的最终系列浓度根据各药剂对病原菌的活性精细设计，如2、1.0、0.5、0.25、0.125μg/mL；100、25、6.25、1.563和0.39μg/mL；5、1.25、0.3125、0.078和0.019μg/mL；咯菌腈的最终系列浓度设计为1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.0312、0156μg/mL，威百亩的最终系列浓度设计为60、40、20、10、5μg/mL。根据药剂对不同病原菌的活性及测定目的，在不同试验中设计处理的系列浓度差为2～10倍。
在含药培养基平板上，分别接种水稻恶苗病菌Fusarium moniliforme(Fm)，秧苗立枯病菌Rhizoctonia solani(Rs)，镰刀菌Fusarium sp.(Fs)在PDA平板上培养的5mm菌丝块，置于25C下培养3-4天，测量各处理的菌落生长直径，根据公式(1)计算各处理浓度对菌丝生长的抑制率，用DPS 7.05软件进行统计分析，计算抑制率几率值与药剂浓度对数之间的剂量反应曲线回归方程及EC50值，结果如表1所示，测定的剂量及毒力回归方程和剂量效应相关系数如表2～24所示。
表1试验用各药剂单剂对不同病原菌的EC50值(μg/mL)
表2咯菌腈对水稻恶苗病菌(F.moniliforme)菌丝生长的抑制效果
表3咯菌腈对青枯镰孢菌(Fusarium sp.)病菌丝生长的抑制活性
表4咯菌腈对水稻立枯病菌(Rhizoctonia solani)菌丝生长的抑制活性
表5氰烯菌酯对水稻恶苗病菌(F.moniliforme)菌丝生长的抑制效果
表6氰烯菌酯对秧苗青枯病菌(Fusarium sp.)菌丝生长的抑制效果
表7氰烯菌酯对秧苗青枯病菌(Rhizoctonia solani)菌丝生长的抑制效果
表8丙硫菌唑对水稻恶苗病菌(F.moniliforme)菌丝生长的抑制效果
表9丙硫菌唑对秧苗青枯病菌(Fusarium sp.)菌丝生长的抑制效果
表10丙硫菌唑对秧苗青枯病菌(Rhizoctonia solani)菌丝生长的抑制效果
表11戊唑醇对水稻恶苗病菌(F.moniliforme)菌丝生长的抑制效果
表12戊唑醇对秧苗青枯病菌(Fusarium sp.)菌丝生长的抑制效果
表13戊唑醇对秧苗青枯病菌(Rhizoctonia solani)菌丝生长的抑制效果
表14叶菌唑对水稻恶苗病菌(F.moniliforme)菌丝生长的抑制效果
表15叶菌唑对秧苗青枯病菌(Fusarium sp.)菌丝生长的抑制效果
表16叶菌唑对秧苗青枯病菌(Rhizoctonia solani)菌丝生长的抑制效果
表17灭菌唑对水稻恶苗病菌(F.moniliforme)菌丝生长的抑制效果
表18灭菌唑对秧苗青枯病菌(Fusarium sp.)菌丝生长的抑制效果
表19灭菌唑对秧苗青枯病菌(Rhizoctonia solani)菌丝生长的抑制效果
表20种菌唑对水稻恶苗病菌(F.moniliforme)菌丝生长的抑制效果
表21种菌唑对秧苗青枯病菌(Fusarium sp.)菌丝生长的抑制效果
表22威百亩对恶苗病菌(F.moniliforme)菌丝生长的抑制效果
表23威百亩对秧苗青枯病菌(Fusarium sp.)菌丝生长的抑制效果
表24威百亩对秧苗青枯病菌(Rhizoctonia solani)菌丝生长的抑制效果
由表1中的结果可以得出：除了威百亩对引起水稻恶苗病和秧苗青枯病的F.moniliforme、Fusarium sp.和Rhizoctonia solani的菌丝生长活性较低以外，咯菌腈及麦角甾醇生物合成抑制剂丙硫菌唑、戊唑醇、叶菌唑、灭菌唑和种菌唑对测定的三种水稻秧苗期病原菌具有很高的抗菌活性，氰烯菌酯除了对Rhizoctonia solani的抗菌活性较低以外，对恶苗病原菌和青枯病原镰刀菌也有很高的活性。
根据预试验结果及实际可以使用的浓度设置药液浓度，并按等差和倍量配制处理药剂浓度。将带水稻干尖线虫稻种剥开颖壳浸泡离心并配制成1×104条幼虫/mL悬浮液。先在2mL离心管中加入200μL的2倍药液处理浓度，再加入200μL水稻干尖线虫悬浮液，使最终体积达到400μL，药剂达到最终浓度为10、8、6、4、2、1mg/L，以200μL清水加200μL线虫悬浮液混合作为对照(CK)。在25℃下恒温静置培养36h后，在显微镜下检查线虫存活情况，记录各处理线虫死亡数及供试线虫总数，以虫体僵直并不活动者为死虫，虫体呈“C”形或活动者为活虫。按徐汉虹主编《植物化学保护学》第四版中的方法计算各处理线虫死亡率和校正死亡率，药剂浓度及结果如表25所示。
表25几种药剂对水稻干尖线虫的离体毒力
由表25可以得出：威百亩对干尖线虫幼虫有强烈杀灭活性，从表25数据计算获得剂量反应毒力回归方程为y＝3.6923x+3.6506，LD50和LD95值分别为2.3198μg/mL和5.159μg/mL。而测定的其他三唑类戊唑醇和丙硫菌唑及苯基吡咯类杀菌剂咯菌腈则无杀线虫活性。
实施例2
威百亩和杀菌剂对孢子和孢子囊萌发的毒力测定，步骤如下：
鉴于呼吸作用抑制剂对孢子萌发有比较高的毒力特点，本发明测定了呼吸抑制剂威百亩及其他生物合成抑制剂对水稻恶苗病菌孢子萌发和稻腐霉孢子囊萌发的抑制活性。
水稻恶苗病菌孢子的制备是在50mL三角瓶中倒入20mL绿豆汤，接入恶苗病菌3-5个菌碟，180r/min，25℃恒温摇培5d。将培养液经三层灭菌纱布过滤，将滤液8000rpm下离心5min，吸去上清液得到含有孢子的沉淀物。向离心管中加入无菌水调节孢子浓度至1×105个/mL，得到孢子悬浮液。
在含0.5％葡萄糖的2％水琼脂培养基灭菌后，冷却至45℃左右时加入相应药液混匀，倒入直径90mm灭菌培养皿中，制成不同浓度含药培养基平板，每个药剂处理浓度做3个重复，以不加药剂但含等量溶剂二甲基亚砜的平板为对照(CK)。吸取20μL孢子悬浮液于平板中央，用玻棒涂布均匀。将平板放入恒温培养箱中，在25℃下培养6-8h，镜检观察大、小孢子萌发情况。
以芽管长度大于孢子短直径的1/2为萌发标准，当对照组孢子萌发率达到90％以上时检查结果。每个重复随机镜检3个以上视野，检查孢子总数不少于200个，记录检查孢子总数及孢子萌发数，根据公式(2)计算各处理浓度孢子萌发抑制率。
水稻腐霉孢子囊的制备是将Pythium oryzae在CMA培养基上25℃下培养，3天后从菌落边缘挑取菌丝接种于皮氏(Petri)液体培养液中摇培2-3天，纱布过滤和1000r/min离心5分钟，收集孢子囊并用灭菌水重悬浮并调节孢子囊浓度至1×105个/mL，得到孢子囊悬浮液，加入1％V8汁液，与药液1:1混合得到最终浓度，25℃下培养6-8h，检查孢子囊萌发率，根据公式(2)计算各处理浓度孢子囊萌发抑制率。
孢子(囊)萌发抑制率(％)＝(对照孢子萌发率-处理孢子萌发率)/对照孢子萌发率×100………………………………………………(2)，结果如表26所示。
表26威百亩和几种杀菌剂对恶苗病菌孢子和稻腐霉孢子囊萌发的抑制作用
由表26可以得出：甾醇生物合成抑制剂丙硫菌唑、戊唑醇在50μg/mL以上和苯吡咯类杀菌剂咯菌腈在高达200μg/mL处理时，对水稻恶苗病菌孢子萌发才有80％和98％以上的抑制率，但这些杀菌剂对稻腐霉的孢子囊萌发几乎没有抑制活性。威百亩在10μg/mL处理时，对孢子和孢子囊萌发的活性高达97％以上。
从表26的数据计算发现威百亩抑制水稻恶苗病菌孢子萌发的毒力方程为y＝0.9159x+5.4654，LD50和LD95值分别为0.310μg/mL和7.782μg/mL。威百亩抑制稻腐霉孢子囊萌发的活性高于抑制恶苗病菌孢子萌发的活性约一倍，其毒力方程为y＝0.9261x+5.7529，LD50和LD95值分别为0.154μg/mL和3.723μg/mL。
从毒力测定结果发现威百亩不仅对水稻干尖线虫有强烈杀灭效果，对水稻恶苗病菌分生孢子及引起秧苗烂秧的腐霉孢子囊萌发也有很强的抑制效果。
实施例3
含威百亩和杀菌剂的二元组合物对水稻恶苗病菌的毒力测定
基于表1和表25各药剂对菌丝生长的毒力活性及需要解决生产上主要的水稻恶苗病和干尖线虫病问题，设计了含杀线虫剂威百亩和抑制恶苗病菌的杀菌剂二元组合物及其配比，并以水稻恶苗病菌为测试材料，测定了各组合物系列处理浓度的抗菌活性。
当无药对照平板上的菌落接近培养皿边缘时，测量各处理菌落生长直径，使用DPS7.05软件对试验数据进行统计分析，计算抑制率几率值与药剂浓度对数之间的剂量反应曲线回归方程及EC50值。采用Wadley法，按公式(3)计算组合物理论EC50(th)，按公式(4)计算混剂的增效指数(SR)。
EC50(th)＝(PA+PB+PC)/(PA/A+PB/B+PC/C)…………………(3)
SR＝EC50(th)/EC50(ob)………………………………………(4)
式中：PA、PB、PC分别表示化合物A、化合物B和化合物C在混剂中的百分比含量或实际剂量；A、B、C分别表示混剂中化合物A、化合物B和化合物C的EC50值(μg/mL)；EC50(th)和EC50(ob)分别表示混剂的理论EC50值和实际测定的EC50值(μg/mL)；SR为增效比或增效系数。
理论上SR等于1为相加作用，大于1为增效作用，小于1为拮抗作用。本发明在室内严格控制条件下进行测定的试验误差小，重复性好，选择SR＝大于1.1的组合物配方用于制剂加工和在活体上的药效试验，结果如表27所示。
表27戊唑醇与威百亩组合物对水稻恶苗病菌的联合毒力及增效指数
由表27可以得出：威百亩与戊唑醇不同配比组合使用对水稻恶苗病菌生长抑制的毒力具有相加和增效作用。
实施例4
含威百亩和杀菌剂的三元组合物对水稻恶苗病菌的毒力测定
基于表1和表25各药剂的活性及需要解决生产上主要的水稻恶苗病和干尖线虫病问题，设计了含杀线虫剂威百亩和抑制恶苗病菌的杀菌剂三元组合物及其配比，并以水稻恶苗病菌为测试材料，测定了各组合物系列处理浓度的抗菌活性。
当无药对照平板上的菌落接近培养皿边缘时，测量各处理菌落生长直径，使用DPS7.05软件对试验数据进行统计分析，计算抑制率几率值与药剂浓度对数之间的剂量反应曲线回归方程及EC50值。采用Wadley法，按公式(3)计算组合物理论EC50(th)，按公式(4)计算混剂的增效指数(SR)。其中含威百亩的三元组合物对水稻恶苗病菌的毒力及增效系数如表28所示，毒力回归方程和EC50计算数据，见表29～49所示，增效系数计算数据见表50所示。
表28含威百亩的三元组合物对水稻恶苗病菌的毒力及增效系数
组合物及配比 毒力回归方程 EC50(μg/mL) 增效系数(SR)
威百亩+咯菌腈+戊唑醇(10:1:30) Y＝6.064+1.1673X 0.1226 1.24
威百亩+咯菌腈+戊唑醇(10:1:20) Y＝6.1095+1.2668X 0.1331 1.26
威百亩+咯菌腈+戊唑醇(10:1:10) Y＝6.3844+1.7714X 0.1654 1.26
威百亩+咯菌腈+戊唑醇(10:1:5) Y＝5.8514+1.4071X 0.2483 1.10
威百亩+咯菌腈+戊唑醇(10:1:1) Y＝5.8076+1.9871X 0.3923 1.22
威百亩+咯菌腈+戊唑醇(10:5:1) Y＝6.1351+1.4933X 0.1737 1.02
威百亩+咯菌腈+戊唑醇(30:5:1) Y＝5.553+1.3807X 0.3976 1.00
威百亩+咯菌腈+戊唑醇(30:10:1) Y＝5.8129+1.1844X 0.2059 1.15
威百亩+咯菌腈+丙硫菌唑(10:1:30) Y＝5.7447+1.1376X 0.2215 2.00
威百亩+咯菌腈+丙硫菌唑(10:1:10) Y＝5.5387+1.2517X 0.3712 1.99
威百亩+咯菌腈+丙硫菌唑(10:5:1) Y＝6.0676+1.4773X 0.1894 1.00
威百亩+咯菌腈+丙硫菌唑(30:5:1) Y＝5.7768+1.9372X 0.3972 1.07
威百亩+咯菌腈+丙硫菌唑(30:10:1) Y＝5.8694+1.3673X 0.2313 1.06
威百亩+氰烯菌酯+丙硫菌唑(30:1:1) Y＝4.0096+1.7047X 3.8108 1.04
威百亩+氰烯菌酯+丙硫菌唑(1:1:1) Y＝5.9334+1.3841X 0.2117 1.99
威百亩+氰烯菌酯+丙硫菌唑(1:10:1) Y＝6.2228+1.8862X 0.2248 1.11
威百亩+氰烯菌酯+丙硫菌唑(1:20:1) Y＝6.3025+1.8574X 0.1989 1.19
威百亩+氰烯菌酯+戊唑醇(1:10:1) Y＝6.1149+1.6953X 0.2200 1.01
威百亩+咯菌腈+叶菌唑(10:1:10) Y＝6.2925+1.6453X 0.1638 1.02
威百亩+咯菌腈+种菌唑(10:1:10) Y＝6.1613+1.7753X 0.2217 1.05
威百亩+咯菌腈+灭菌唑(10:1:10) Y＝6.1359+1.7019X 0.2151 1.06
表29威百亩+咯菌腈+戊唑醇(10：1：30)对Fm生长的抑制活性
表30威百亩+咯菌腈+戊唑醇(10：1：20)对Fm生长的抑制活性
表31威百亩+咯菌腈+戊唑醇(10：1：10)对Fm生长的抑制活性
表32威百亩+咯菌腈+戊唑醇(10：1：1)对Fm生长的抑制活性
表33威百亩+咯菌腈+戊唑醇(10：1：5)对Fm生长的抑制活性
表34威百亩+咯菌腈+戊唑醇(10：5：1)对Fm生长的抑制活性
表35威百亩+咯菌腈+戊唑醇(30：5：1)对Fm生长的抑制活性
表36威百亩+咯菌腈+戊唑醇(30：10：1)对Fm生长的抑制活性
表37威百亩+咯菌腈+丙硫菌唑(10：1：30)对Fm生长的抑制活性
表38威百亩+咯菌腈+丙硫菌唑(10：1：10)对Fm生长的抑制活性
表39威百亩+咯菌腈+丙硫菌唑(10：5：1)对Fm生长的抑制活性
表40威百亩+咯菌腈+丙硫菌唑(30：5：1)对Fm生长的抑制活性
表41威百亩+咯菌腈+丙硫菌唑(30：10：1)对Fm生长的抑制活性
表42威百亩+氰烯菌酯+丙硫菌唑(30：1：1)对Fm生长的抑制活性
表43威百亩+氰烯菌酯+丙硫菌唑(1：1：1)对Fm生长的抑制活性
表44威百亩+氰烯菌酯+丙硫菌唑(1：10：1)对Fm生长的抑制活性
表45威百亩+氰烯菌酯+丙硫菌唑(1：20：1)对Fm生长的抑制活性
表46威百亩+氰烯菌酯+戊唑醇(1：10：1)对Fm生长的抑制活性
表47威百亩+咯菌腈+叶菌唑(10：1：10)对Fm生长的抑制活性
表48威百亩+咯菌腈+种菌唑(10：1：10)对Fm生长的抑制活性
表49威百亩+咯菌腈+灭菌唑(10：1：10)对Fm生长的抑制活性
表50含威百亩三元组合物对水稻恶苗病菌菌丝生长的联合毒力及增效系数
备注：在表50中，威表示威百亩、咯表示咯菌腈、氰表示氰烯菌酯、丙表示丙硫菌唑、戊表示戊唑醇，叶表示叶菌唑、种表示种菌唑、灭表示灭菌唑，下述表格中相同，不再赘述。
由上述数据，可以得出，威百亩与咯菌腈或氰烯菌酯和甾醇生物合成抑制剂戊唑醇、丙硫菌唑、叶菌唑、种菌唑和灭菌唑的不同配比组合物对水稻恶苗病菌生长抑制的毒力具有相加和增效作用。
农药制剂加工
根据不同药剂对主要防治对象水稻恶苗病、干尖线虫病和秧苗青枯病的病原物活性及各个组分之间的联合作用，加工制备了含威百亩的二元和三元组合物悬浮剂和水分散粒剂制剂样品，用于田间小区试验，如实施例5～6所示。
实施例5
本发明制备的10％、16％和40％悬浮剂(SC)方法如下，具体制备的农药制剂及配比如表51所述：
根据拟加工的制剂有效含量及其配比以有效成分重量计，称取300目以下咯菌腈或氰烯菌酯和麦角甾醇生物合成抑制剂叶菌唑、种菌唑、灭菌唑、戊唑醇、丙硫菌唑之一原药的折百样品，称取0.2％～1.0％十二烷基磺酸钠、十二烷基苯硫酸钠、平平加、浓乳100、山梨醇、聚氧乙烯醚作为水溶性润湿剂，0.3％～3.0％如NNO、拉开粉、聚羧酸酯钠盐和乙二胺四乙酸钠盐作为分散助悬剂，0.2％～5.0％如阿拉伯胶、黄原酸胶和海藻酸作为增粘剂，1％～20.0％膨润土、硅藻土作为稳定剂，3％～8％聚乙二醇400、丙三醇和尿素作为防冻剂，0.3％～5％苯甲酸、苯甲酸钠作为防腐剂，与水混合至预设体积，调配成浆料，经砂磨机研磨3～4次，再用移液器按设计取威百亩可溶液剂(重量/体积)样品加入并加水不足至预设总体积，搅拌均匀，最后调控pH、流动性、湿润性等技术指标，根据NY/T 4014-2021标准方法检测，制备悬浮剂的有效成分含量±0.1～0.5％、室内放置30天无分层和沉淀、与水稀释能保持稳定悬浮状态，静止1小时的有效悬浮率大于90％，pH6.5～7.2。
表51含威百亩的10％、16％和40％的组合物悬浮剂样品加工配方
实施例6
3％、3.5％和5％水分散粒剂样品制备，方法如下，具体制备的农药制剂及配比如表52中所示。
本发明制备的3％、3.5％和5％水分散性粒剂(WG)制备方法如下：根据拟加工的制剂有效含量及其比例以有效成分重量计，按表52设计重量称取300目以下咯菌腈和麦角甾醇生物合成抑制剂叶菌唑、种菌唑、灭菌唑、丙硫菌唑原药之一折百样品，用移液器按设计有效成分剂量(重量/体积)吸取威百亩水剂样品。称取15％～45％300目以下的高岭土、硅藻土、陶土、白炭黑作为载体，5％～30％300目以下的十二烷基磺酸钠、木质素磺酸盐、平平加、拉开粉、尿素、脂肪酸、月桂酸、硬脂酸、硅胶、葡萄糖、硫酸铵、硫酸钾、碳酸氢钠、氯化钠作为助剂和崩解剂。首先用载体和非水溶性助剂吸收威百亩水剂后，干燥并粉碎，再将上述药剂及助剂和崩解剂混合，称重，并以氯化钠补足至预设重量，气流粉碎，收集粒径10μm以下混合物，挤压造粒，干燥。根据HG/T4463-2012标准方法检测，制备水分散性粒剂达到湿润崩解时间小于2分钟，搅拌后静置1小时的悬浮率大于70％，pH6.5～7.2。
表52含威百亩3％、3.5％和5％组合物水分散粒剂样品加工配方
实施例7
浸种处理防治水稻恶苗病和干尖线虫病的安全性和药效试验，步骤如下：
鉴于恶苗病和干尖线虫病是由种子为唯一侵染来源的生物学特征，只要种子消毒即可防治这两种病害。本发明采用带恶苗病菌和干尖线虫的稻种(安徽省潜山市植保站提供)按照水稻栽培的通常农艺方法进行浸种处理：称取50克稻种分别在制备的含威百亩组合物水溶液中15-25℃室温下浸渍稻种2天，然后取出稻种放入三角瓶中25℃下催芽3天，间隔8-10小时摇晃一次，防止表面稻种干燥，如有干燥则加入少许水，保持种子湿润。
然后播种于装土的塑料周转箱中，在温室中培育秧苗，25天后检查恶苗病发病情况，计算各组合物对恶苗病的防效。同时，稻种浸种后的浸种液1000r/min离心5分钟，沉淀物再用清水0.5mL重悬浮，镜检干尖线虫存活率。采用江苏农药研究所股份有限公司提供的25％氰烯菌酯悬浮剂(SC)作为对照药剂处理和清水浸种空白对照处理，结果如表53所示。浸渍的稻种在播种时，取出100粒稻种放入置放湿滤纸的培养皿内25℃下催芽3天，检查发芽率、芽长和种根发育情况，评价其安全性(表54)。
表53含威百亩的二元和三元组合物浸种防治恶苗病和杀灭干尖线虫的效果
表54含威百亩二元和三元组合物浸种处理对种子发芽的影响
由表53可以看出，含威百亩的二元和三元组合物进行浸种处理，其药效与剂型没有明显的相关性；但当威百亩和麦角甾醇生物合成抑制和/或咯菌腈在浸种药液中的浓度达到20mg/L以上时，对恶苗病均有很高的防治效果；浸种液中的威百亩浓度达10-15mg/L以上时，对干尖线虫也有很好的杀灭效果。
由表54可以看出，含威百亩的二元和三元组合物进行浸种处理，对水稻种子发芽率没有显著影响，较高浓度处理对芽长和根长有所抑制作用，但不影响秧苗生长。如果威百亩与戊唑醇和丙硫菌唑组合使用，安全性则更好。
实施例8
含威百亩二元和三元组合物防治秧苗青枯病
将实施例5和实施例6的农药制剂进行种子处理播种后，在温室培育秧苗两周时，用种子处理相应的农药制剂按预备试验的安全性设计浓度，对水喷洒进行土壤处理，然后将用灭菌麸皮分别培养的青枯病菌(Rhizoctonia solani)和腐霉病菌(Pythium oryzae)混合搓碎，撒施接种，一周后检查死苗数，计算防效，结果见表55。
表55含威百亩二元和三元组合物防治秧苗青枯病的效果
由表55可以得出：含威百亩的二元和三元组合物杀菌剂悬浮剂或水分散粒剂喷施秧苗苗床，对接种的立枯丝核菌和稻腐霉所引起的秧苗青枯病有很好的防治效果。试验浓度处理未观察到对秧苗生长的不良影响，说明这些组合物对秧苗生长安全。
由以上实施例可以得出：本发明所述农药组合物及以其为有效成分的农药制剂可以达到兼治由真菌和线虫引发的种传病害和土传病害，且能够降低农药用量的同时，扩大防病谱，提高农药的安全性，降低病原菌或害虫对农药的抗药性；预备实验的毒力测定，发现组合物对氰烯菌酯和多菌灵表现高水平抗性的水稻恶苗病菌和敏感病菌的毒力没有显著差异，说明所述农药组合物与现有常用杀菌剂没有交互抗性，可以防治抗药性病害，解决多重抗药性病害无药可治的问题。
尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。

Claims (10)

1.一种农药组合物，其特征在于，包括威百亩、咯菌腈和麦角甾醇生物合成抑制剂，或威百亩、氰烯菌酯和麦角甾醇生物合成抑制剂；所述威百亩、咯菌腈和麦角甾醇生物合成抑制剂，或威百亩、氰烯菌酯和麦角甾醇生物合成抑制剂的重量比分别为(1～90)：(0～80)：(1～75)。
2.根据权利要求1所述的农药组合物，其特征在于，所述威百亩、咯菌腈和麦角甾醇生物合成抑制剂，或威百亩、氰烯菌酯和麦角甾醇生物合成抑制剂的重量比分别为(3～55)：(0～60)：(3～50)。
3.根据权利要求1或2所述的农药组合物，其特征在于，所述麦角甾醇生物合成抑制剂包括叶菌唑、灭菌唑、种菌唑、戊唑醇和丙硫菌唑的一种或两种。
4.根据权利要求3所述的农药组合物，其特征在于，所述麦角甾醇生物合成抑制剂包括第一组分和第二组分，所述第一组分为叶菌唑、灭菌唑、种菌唑或戊唑醇，所述第二组分为丙硫菌唑；所述第一组分和第二组分的质量比为(1～10)：(1～10)。
5.权利要求1～4任一项所述的农药组合物在防治植物种传病害和/或土传病害中的应用。
6.权利要求1～4任一项所述的农药组合物在农药中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述农药组合物为含所述农药有效成分重量的3％～50％。
8.一种农药制剂，其特征在于，包括权利要求1～4任一项所述的农药组合物和辅料。
9.根据权利要求8所述的农药制剂，其特征在于，所述农药组合物有效成分为所述农药制剂重量的3％～50％。
10.根据权利要求8或9所述的农药制剂，其特征在于，所述农药制剂包括悬浮剂、种衣剂、可湿性粉剂和水分散粒剂中的一种或多种。
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