CN116546986A - Alk-5抑制剂及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供化合物(例如式(I)、(II)、(III)和(IV)或表1或表4的化合物)及其药学可接受的盐、其药物组合物和包括彼的套件。本发明所提供的化合物为活化素受体样激酶(例如ALK‑5)抑制剂且因此可用于例如治疗和/或预防受试者的疾病(例如增殖性疾病，诸如癌症)、抑制受试者的肿瘤生长或抑制活化素受体样激酶(例如ALK‑5)在体外或体内的活性。本发明还提供用于制备本发明所描述的化合物的方法和合成中间体。

Description

ALK-5抑制剂及其用途

技术领域

本发明关于ALK-5抑制剂及其用途的相关技术。

相关申请

本申请要求2020年12月10日提交的美国临时申请第63/123,894号和2021年3月26日提交的美国临时申请第63/166,621号的优先权，在此将这些申请的完整教导并入以供参考。

背景技术

活化素受体样激酶5(ALK-5)(也称作TGFβ受体1型(TGFβR1))为治疗标靶，例如在增殖性疾病诸如癌症中，因为其在促进肿瘤生长、存活及转移中所示的作用。ALK-5为TGFβ受体超家族的成员，已显示其调节广泛的细胞过程。调节TGFβ信号传导对于控制涉及细胞增生的细胞过程十分重要。参见，例如，Akhurst,R.J.和Hata,A.，"Targeting the TGF-βSignalling Pathway in Disease",Nat.Rev.Drug Disc.,11pp 790-811(2012)；Hallberg和Palmer，"The role of the ALK receptor in cancer biology",Annals of Oncology,2016,27,iii4。

通常在TGFβ信号传导期间，使I型受体与II型受体在一起，两者都为丝胺酸/苏胺酸激酶。迄今有七(7)种已知的I型受体：活化素受体样激酶1至7(ALK-1至ALK-7)。在一些情况下，TGFβ通过TβRII(II型受体)与ALK-5的组合传导信号。一经活化，I型受体通过各种蛋白质转导信号，例如活化的I型受体磷酸化经受体调节的SMAD亚家族成员，其容许其与介质SMAD复合。所得的活化的SMAD复合物积聚在细胞核中，在此其发挥靶基因转录的作用。通过ALK抑制(特别为ALK-5抑制)阻断该TGFβ信号传导路径为有吸引力的治疗标靶，因为该路径在细胞增殖、分化、粘附、迁移及凋亡中扮演复杂的作用。已注意到在增生性及纤维化疾病发生细胞突变，其中赋予TGFβ信号传导的正常增殖抑制功能，从而容许细胞不受控的增殖，参见，例如，Blobe,G.C.等人，"Role of Transforming Growth Factorβin HumanDisease",N Engl J Med(342),pp 1350-1358(2000)；Ballester,B.等人，"IdiopathicPulmonary Fibrosis and Lung cancer:Mechanisms and Molecular Targets",Int.J.ofMolecular Sciences 20(593),doi:10.3390/ijms20030593(2019)；和Huang,J.J.和Blobe,G.C.，"Dichotomous Roles of TGF-βin Human Cancer",Biochem Soc.Trans342(2016)；1441-1454(https://doi.org/10.1042/BST20160065。

TGFβ为癌症中促进肿瘤生长及免疫逃避的重要路径，并且在其他癌症过程(诸如转移和血管生成)中发挥作用。在许多类型的癌症中观察到TGFβ路径的组分(包括配体及受体)的上调，其经常与不良的结果相关联(de Reyniès,A.,Javelaud,D.,Elarouci,N.等人，Sci Rep 10,14491(2020).https://doi.org/10.1038/s41598-020-71559-w)。已显示异常的TGFβ信号传导涉及多种癌症类型的发展，包括三阴性乳腺癌(Bhola,Neil E.等人，"TGF-βinhibition enhances chemotherapy action against triple-negative breastcancer."The Journal of clinical investigation 123.3(2013)https://doi.org/10.1172/JCI65416；Vishnubalaji,Radhakrishnan和Nehad M.Alajez.的"Epigeneticregulation of triple negative breast cancer(TNBC)by TGF-βsignaling."Scientific Reports 11.1(2021)https://doi.org/10.1038/s41598-021-94514-9)、胰腺癌("Progress in cancer genetics:lessons from pancreatic cancer."Annals ofoncology 10(1999)https://doi.org/10.1093/annonc/10.suppl_4.S4)；Truty,Mark J.和Raul Urrutia，"Basics of TGF-βand pancreatic cancer."Pancreatology 7.5-6(2007)https://doi.org/10.1159/000108959)和卵巢癌(Monsivais,Diana等人，"Activin-like kinase 5(ALK5)inactivation in the mouse uterus results inmetastatic endometrial carcinoma."Proceedings of the National Academy ofSciences 116.9(2019)https://doi.org/10.1073/pnas.1806838116；Newsted,Daniel等人，"Blockade of TGF-βsignaling with novel synthetic antibodies limits immuneexclusion and improves chemotherapy response in metastatic ovarian cancermodels."Oncoimmunology 8.2(2019)https://doi.org/10.1080/2162402X.2018.1539613)。

通过该路径传导信号从释放潜在配体(TGFβ)且结合特定受体(TGFβR2)上的特定丝胺酸/苏胺酸残基开始，其接着结合至第二受体(TGFβR1，也称作ALK5)且使其磷酸化。该复合物进而使蛋白质的SMAD家族成员磷酸化并活化，使其易位至细胞核且调节该TGFβ路径的靶基因的表达(Weiss,Alexander和Liliana Attisano，"The TGFbeta superfamilysignaling pathway."Wiley Interdisciplinary Reviews:Developmental Biology 2.1(2013)https://doi.org/10.1002/wdev.86)。

TGFβ路径的活化可通过上皮细胞向间充质细胞转化(epithelial-to-mesenchymal transition)(EMT)而导致肿瘤细胞免疫逃避(Wang,G.,Xu,D.,Zhang,Z.等人，The pan-cancer landscape of crosstalk between epithelial-mesenchymaltransition and immune evasion relevant to prognosis and immunotherapyresponse.npj Precis.Onc.5,56(2021).https://doi.org/10.1038/s41698-021-00200-4)。其亦可通过对先天性及后天性免疫细胞的直接抑制效应以及刺激抑制性Treg及MDSC而导致免疫抑制(de Streel,Grégoire和Sophie Lucas，"Targeting immunosuppression byTGF-β1for cancer immunotherapy."Biochemical Pharmacology(2021)https://doi.org/10.1016/j.bcp.2021.114697)。TGFβ额外地通过改变ECM蛋白质及信号传导分子水平而有效力地调节肿瘤微环境，导致免疫细胞排除(Ghahremanifard,P.；Chanda,A.；Bonni,S.；Bose,P.，TGF-βMediated Immune Evasion in Cancer-Spotlight on Cancer-Associated Fibroblasts.Cancers 2020,12,3650.https://doi.org/10.3390/cancers12123650)。

卵巢的粒层细胞瘤(GCT)占恶性卵巢癌的～5％，且据最近报导95至97％的成人型粒层细胞瘤在FOXL2基因中携带独特的体细胞突变402C>C(Jamieson,S.,Butzow,R.,Andersson,N.等人，The FOXL2C134W mutation is characteristic of adult granulosacell tumors of the ovary.Mod Pathol 23,1477-1485(2010).https://doi.org/10.1038/modpathol.2010.145)。402C>G突变导致色氨酸被半胱氨酸取代的氨基酸取代(C134W)(Shah SP,Kobel M,Senz J,Morin RD,Clarke BA等人，(2009)Mutation of FOXL2in granulosa-cell tumors of the ovary.N Engl J Med 360:2719-2729)，其位于叉头结构域表面上的第二翼中。计算机模拟表明，此改变不破坏FOXL2叉头结构域的折叠或其与DNA的相互作用。另外，已显示突变不影响FOXL2蛋白质的定位(Benayoun BA,Caburet S,Dipietromaria A,Georges A,D'Haene B等人，(2010)Functional exploration of theadult ovarian granulosa cell tumor-associated somatic FOXL2 mutationp.Cys134Trp(c.402C>G).PloS one 5:e8789)。因此，据信突变的FOXL2的致病性通过改变其与其他蛋白质的相互作用而发生。这些候选蛋白质包括SMAD转录因子以及TGFβ和BMP家族信号传导的效应子(Kobel M,Gilks CB,Huntsman DG，(2009)Adult-type granulosacell tumors and FOXL2 mutation.Cancer Res 69:9160-9162)。另外，突变的FOXL2的许多转录标靶为已知的TGFβ信号传导基因。因此，这一关键的抗增殖路径的失调为促成成人型GCT发病机制的单向突变的FOXL2(Rosario R,Araki H,Print CG,Shelling AN，(2012)The transcriptional targets of mutant FOXL2 in granulosa cell tumors.PloSone；https://doi.org/10.1371/journal.pone.0046270)。

活化素受体样激酶由于其促进肿瘤生长、存活及转移的作用而涉及为增殖性疾病(诸如癌症)的重要治疗标靶。例如，许多小分子ALK-5抑制剂已显示在各种癌症及肿瘤类型中具有抗增殖活性。开发出小分子SB-431542作为ALK-5抑制剂且发现其抑制其他的活化素受体样激酶ALK-4和ALK-7。参见例如，Inman等人，"SB-431542is a Potent and SpecificInhibitor of Transforming Growth Factor-βSuperfamily Type IActivin Receptor-Like Kinase(ALK)Receptors ALK4,ALK5,and ALK7",Molecular Pharmacology,2002,62,65。另外，发开出小分子ALK-4、ALK-5和ALK-7抑制剂A-83-01且发现其抑制SMAD信号传导及上皮细胞向间充质细胞转化(EMT)，表明这些抑制剂可用于治疗各种晚期癌症。参见例如，Tojo等人，"The ALK-5inhibitor A-83-01inhibits SMAD signaling and epithelial-to-mesenchymal transition by transforming growth factor-β",Cancer Sci.,2005,96,791。以相同的方式，ALK-5在TGFβ信号传导中的作用可能在癌症相关纤维母细胞及其他纤维化病症的产生中发挥作用。参见例如，Blobe,G.C.等人，"Role of TransformingGrowth Factorβin Human Disease",N Engl J Med(342),pp 1350-1358(2000)；Ballester,B.等人，"Idiopathic Pulmonary Fibrosis and Lung cancer:Mechanismsand Molecular Targets",Int.J.of Molecular Sciences 20(593),doi:10.3390/ijms20030593(2019)；Liu,L等人，"Smad2 and Smad3 Have Differential Sensitivityin Relaying TGFb Signaling and Inversely Regulate Early LinageSpecification",Scientific Reports[6:21602/DOI:10.1038/srep21602],Feb 2015-14pages；Huang,J.J.和Blobe,G.C.，"Dichotomous Roles of TGF-βin Human Cancer",Biochem Soc.Trans 342(2016)；1441-1454(https://doi.org/10.1042/BST20160065)；Akhurst,R.J.和Hata,A.，"Targeting the TGF-βSignalling Pathway in Disease",Nat.Rev.Drug Disc.,11pp 790-811(2012)；Leslie,K.O.，"Idiopathic PulmonaryFibrosis May Be a Disease of Recurrent,Tractional Injury to the Periphery ofthe Aging Lung-AUnifying Hypothesis Regarding Etiology and Pathogenesis"ArchPathol Lab Med(136)[[591-600(2012)；Knuppel,L.等人，"A Novel AntifibroticMechanism of Nintedanib and Pirfenidone-Inhibition of Collagen FibrilAssembly",Am.J.of Resp.Cell and Mole.Bio.1(57),pp 77-90(2017)；Laping,N.J.等人，"Inhibition of TGF-b1-Induced Extracellular Matrix",Mol.Pharmacol.Vol 62,No1,pp580-64(2002)；Moore,B.B.和Moore,T.A.，Viruses in Idiopathic PulmonaryFibrosis-Etiology and Exacerbation,Ann Am Thorac.Soc.,Vol 12(Suppl 2)pp S186-S192(2015)-[DOI:10.1513/AnnalsATS.201502-088AW]；Cho,M.E.和Kopp,J.B.，"Pirfenidone:an Anti-Fibrotic and Cytoprotective Agent as Thereapy forProgressive Kidney Disease",Expert Opin.Investig.Drugs,19(2),pp275-283(2010)[DOI:10.1517/13543780903501539]；及B.Rybinski等人，"The Wound Healing,ChronicFibrosis,and Cancer Progresion Triad,Physiol Genomics.46(7)；2014,223-244PMID:24520152。

发现Galunisertib(小分子ALK-5抑制剂)抑制乳腺癌模型中的肿瘤的生长。Galunisertib与PD-L1抑制剂的组合显示抑制和消退结肠癌模型中的肿瘤生长，在ALK-5抑制与PD-1/PD-L1抑制之间的信号传导协同性。参见例如，Holmgaard等人，"Targeting theTGFβpathway with galunisertib,a TGFβRI small molecule inhibitor,promotesanti-tumor immunity leading to durable,complete responses,as monotherapy andin combination with checkpoint blockade",Journal for ImmunoTherapy of Cancer,2018,6,47。另外，已进行以Galunisertib用于治疗各种其他癌症的研究，包括胶质母细胞瘤、胰腺癌、肝细胞癌(HCC)和骨髓增生异常综合征，有时与PD-1/PD-L1抑制剂组合。参见例如，Herbertz等人，"Clinical development of galunisertib(LY2IS7299 monohydrate),a small molecule inhibitor of transforming growth factor-beta signalingpathway",Drug Design,Development,and Therapy,2015,9,4479。

另外已进行以另一小分子ALK-5抑制剂(TEW-7197，也称作vactosertib)治疗癌症的研究，诸如黑色素瘤、前列腺癌、乳腺癌、HCC和胶质母细胞瘤。

ALK抑制剂(尤其为ALK-5抑制剂)为仍在探索用于各种适应症的有希望的治疗剂。例如，研究显示TGFβR1/ALK-5突变体可诱导Foxp3表达，已发现其在不同的肿瘤类型(包括胰腺癌)的免疫抗性中扮演关键作用。参见例如，Hinz等人，"Foxp3 Expression inPancreatic Carcinoma Cells as Novel Mechanism of Immune Evasion in Cancer",Cancer Res.2007,67,8344。因此，当与ALK-5抑制组合时，传统上已对经由基于化学和/或放射疗法的细胞凋亡具有抗性的癌症可以有反应。

研究还显示，ALK-5抑制剂也可用于治疗受试者中除了癌症以外的增殖性疾病，包括全身性硬化症和其他的纤维化病症，包括与癌症相关联的纤维化病症，参见例如，在以下文献中所描述的病症：Mori等人，"Activin Receptor-Like Kinase 5Signaling BlocksProfibrotic Transforming Growth FactorβResponses in Skin Fibroblasts",Arthritis&Rheumatism,2004,8,4008；Akhurst,R.J.和Hata,A.，"Targeting the TGF-βSignalling Pathway in Disease",Nat.Rev.Drug Disc.,11pp790-811(2012)；和Cox,T.R和Erler,J.T.，"Molecular Pathways Connecting Fibrosis and Solid TumorMetastasis",Clin Cancer Res.,2014,20(14),pp 3637-3643。

ALK-5水平增加还涉及心脏病理学和心血管疾病，其不仅包括例如心肌梗塞和心脏肥大后的心脏重塑和纤维化，而且还包括扩张性、缺血性和肥厚性心肌病变、心瓣病和心律不整，诸如房颤。Khan,R.和Sheppard,R.，"Fibrosis in heart disease:understandingthe role of transforming growth factor-β₁in cardiomyopathy,valvular diseaseand arrhythmia",Immunology 2006,118:10-24；Bujak,M.和Frangogiannis,N.G.，"Therole of TGF-βin myocardial infarction and cardiac remodeling,"CardiovascularResearch 74(2007),184-195；Dobaczewski,M.等人，"Transforming Growth Factor(TGF)-βsignaling in cardiac remodeling",J.Mol.Cell Cardiol.,2011,51(4):600-606；和Accornero,F.等人，"Genetic Analysis of Connective Tissue Growth Factoras an Effector of Transforming Growth FactorβSignaling and CardiacRemodeling",Molecular and Cellular Biology 2015,35(12):2154-2164。

尽管取得进展，但仍需要额外的化合物推进对患有增殖性疾病(诸如肿瘤和癌症)及那些与增殖性疾病相关联和那些与增殖性疾病无关联的纤维化疾病的患者的研究及医疗护理。

发明内容

本发明提供活化素受体样激酶(例如ALK-5)抑制剂，其包括本发明的化学式中任一者的化合物、包括其的药物组合物和套件(kit)、和使用其的方法(例如用于治疗和/或预防受试者的疾病)。本发明另外提供制备本发明所描述的化合物及药物组合物的方法。

在一些实施方式中，其提供式(I)的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中R¹、R²、R³、R⁴和R⁵如本发明所定义者。在一些实施方式中，提供如本发明所定义的式(II)的化合物。在一些实施方式中，提供如本发明所定义的式(III)的化合物。在一些实施方式中，提供如本发明所定义的式(IV)的化合物。在一些实施方式中，提供表1中呈现的化合物。

本发明所提供的化合物为用于治疗和/或预防疾病的活化素受体样激酶(例如ALK-5)抑制剂(例如，其参与调节或靶向TGFβ信号传导路径，例如，因为其与治疗、改善或预防纤维化、炎症性和/或增殖性疾病有关(例如与TGFβ1信号传导相关联的癌症、肺纤维化和心脏病))。参见例如，这些疾病及病症与可能涉及治疗的各种信号传导路径的作用的关系描述于例如，Akhurst,R.J.和Hata,A.，"Targeting the TGF-βSignalling Pathway inDisease",Nat.Rev.Drug Disc.,11pp 790-811(2012)；Cox,T.R.和Erler,J.T.，"Molecular Pathways Connecting Fibrosis and Solid Tumor Methastasis",ClinCancer Res.,2014,20(14),pp 3637-3643；Radisky,D.C.等人，"Fibrosis and Cancer:DoMyofibroblasts Come Also From Epithelial Cells via EMT？",J.Cell Biochem.,2101(4),pp 830-839[DOI:10.1002/jcb.21186]中，病毒并发症在IPF中的作用描述于例如Moore,B.B.和Moore,T.A.，Viruses in Idiopathic Pulmonary Fibrosis-Etiology andExacerbation,Ann Am Thorac.Soc.,Vol 12(Suppl 2)pp S186-S192(2015)-[DOI:10.1513/AnnalsATS.201502-088AW]中，TGF信号传导在心脏重塑中的作用描述于例如Dobaczewski,M.等人，"Transforming Growth Factor(TGF)-βsignaling in cardiacremodeling",J.Mol.Cell Cardiol.,2011,51(4):600-606中。

在某些实施方式中，本发明所提供的化合物为选择性ALK-5抑制剂，即对ALK-5的选择性超越其他激酶(例如超越其他的活化素受体样激酶)。在某些实施方式中，例如式(I)的化合物选自表1(下文)中所引述的化合物及其药学可接受的盐。

在本文公开的各个方面及实施方式中，应理解明确提及的式(I)的化合物可替代地指任何所公开的其亚属的化合物，例如式(I)的化合物包括式(II)(下文)、式(III)(下文)、式(IV)(下文)的化合物或表1(下文)、表4(下文)的化合物或本文公开的特定化合物中任一者。

在一些方面中，提供化合物、或其药学上可接受的盐，其为：

N4-(7-氟-8-甲基噌啉-4-基)-N2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(7-氟-8-甲基噌啉-4-基)-N2-(4-(哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N2-(2-氟-5-(哌嗪-1-基甲基)苯基)-N4-(8-甲基噌啉-4-基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(4-(哌啶-4-基甲基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N2-(3-氟-5-(哌嗪-1-基甲基)苯基)-N4-(8-甲基噌啉-4-基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(6-氟-8-甲基噌啉-4-基)-N2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N2-(3-氟-4-(哌嗪-1-基)苯基)-N4-(8-甲基噌啉-4-基)嘧啶-2,4-二胺；

5-氟-N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(4-(哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(4-吗啉基苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(3-吗啉基苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N2-(3-氯-4-吗啉基苯基)-N4-(8-甲基噌啉-4-基)嘧啶-2,4-二胺；

N2-(3-氟-4-吗啉基苯基)-N4-(8-甲基噌啉-4-基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(6-氟-8-甲基噌啉-4-基)-N2-(4-(哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N2-(2-氟-5-(哌啶-4-基甲基)苯基)-N4-(8-甲基噌啉-4-基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(4-(4-(2,2,2-三氟乙基)哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(4-(哌嗪-1-基甲基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N2-(2-氟-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-N4-(8-甲基噌啉-4-基)嘧啶-2,4-二胺；

N2-(2-氟-4-(哌嗪-1-基)苯基)-N4-(8-甲基噌啉-4-基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(5-氟-8-甲基噌啉-4-基)-N2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(4-(吗啉基甲基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N2-(4-(8-甲基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)苯基)-N4-(8-甲基噌啉-4-基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N2-(4-氯苯基)-N4-(8-甲基噌啉-4-基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(3-(哌嗪-1-基甲基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

5-氟-N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N2-(3-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-N4-(8-甲基噌啉-4-基)嘧啶-2,4-二胺；

3-((4-((8-甲基噌啉-4-基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)苯磺酰胺；

N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(3-(哌啶-4-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

2-(4-(4-((4-((8-甲基噌啉-4-基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)苯基)哌嗪-1-基)乙-1-醇；

N2-(4-氟-3-吗啉基苯基)-N4-(8-甲基噌啉-4-基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(3-吗啉基-5-(三氟甲基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(7-氟-8-甲基噌啉-4-基)-N2-(3-吗啉基苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(7-氟-8-甲基噌啉-4-基)-N2-(4-吗啉基苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N2-(3-氟-5-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)-N4-(8-甲基噌啉-4-基)嘧啶-2,4-二胺；

N2-(3-氟-5-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)苯基)-N4-(8-甲基噌啉-4-基)嘧啶-2,4-二胺；

N2-(3-氟-5-吗啉基苯基)-N4-(8-甲基噌啉-4-基)嘧啶-2,4-二胺；

N2-(4-(5-甲基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基)苯基)-N4-(8-甲基噌啉-4-基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(3-(吗啉基甲基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(4-(哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(8-氯噌啉-4-基)-N2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(8-氯噌啉-4-基)-N2-(4-(哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(3,8-二甲基噌啉-4-基)-N2-(3-吗啉基苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(3,8-二甲基噌啉-4-基)-N2-(4-吗啉基苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N2-(3-氟-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-N4-(8-甲基噌啉-4-基)嘧啶-2,4-二胺；

N2-(4-(叔丁基)苯基)-N4-(8-甲基噌啉-4-基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(4-(哌啶-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(8-环丙基噌啉-4-基)-N2-(3-吗啉基苯基)嘧啶-2,4-二胺；

N4-(8-环丙基噌啉-4-基)-N2-(4-吗啉基苯基)嘧啶-2,4-二胺；或

N2-(4-环己基苯基)-N4-(8-甲基噌啉-4-基)嘧啶-2,4-二胺。

在另一方面中，本发明提供药物组合物，其包括式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐和一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。在某些实施方式中，本发明提供的药物组合物包括治疗和/或预防有效量的式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐。本发明所描述的药物组合物可用于治疗和/或预防受试者中的疾病(例如炎症性、纤维化或增殖性疾病，例如癌症或前述的两种或更多种的组合，如本发明进一步的描述)。本发明提供的药物组合物可进一步包括一种或多种额外的治疗剂(例如抗增殖剂，例如抗癌剂)。

在另一方面中，本发明提供治疗和/或预防受试者(例如有其需要的受试者)中的疾病的方法，该方法包括向受试者施用治疗和/或预防有效量的式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或该化合物中任一者的药学上可接受的盐、或其药物组合物。例如，本发明提供用于治疗受试者中的疾病(例如炎症性、纤维化或增殖性疾病(例如癌症))的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐、或包括式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐的药物组合物，例如式(II)、(III)、(IV)、表1或表4的化合物、或本文公开的特定化合物中任一者、或该化合物中任一者的药学上可接受的盐、或其药物组合物。

在某些实施方式中，增殖性疾病为癌症。在某些实施方式中，增殖性疾病为实体瘤癌症。在一些实施方式中，增殖性疾病为血液癌。在一些实施方式中，癌症与受试者或细胞中的活化素受体样激酶(例如ALK-5)活性(例如异常或增加的活性)相关联。在一些实施方式中，癌症与疾病进展至关重要的TGFβ信号传导路径相关联，且其可通过Alk-5抑制来改善。在一些实施方式中，癌症与其FOXL2突变相关联，例如与肿瘤相关联的体细胞FOXL2突变p.Cys134Trp(c.402C>G)相关联。在一些实施方式中，FOXL2突变影响一种或多种转录标靶，其为TGFβ信号传导基因。

在某些实施方式中，癌症为肺癌(例如非小细胞肺癌(NSCLC))、脑癌(例如神经母细胞瘤、胶质母细胞瘤)、甲状腺癌(例如间变性甲状腺癌(ATC))、乳腺癌、结直肠癌(例如结肠癌)、肝癌(例如肝细胞癌(HCC))、胰腺癌(pancreatic cancer)(例如胰腺癌(pancreaticcarcinoma))、皮肤癌(例如黑色素瘤)、前列腺癌或血液癌(例如间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)、骨髓增生异常综合征(MDS))。在某些实施方式中，癌症为骨髓纤维化(MF)。

在一些实施方式中，增殖性疾病为癌症，例如间变性星状细胞瘤、胰腺癌(例如胰腺导管腺癌和相关联的CAF)、转移性黑色素瘤、结直肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肾癌、肝细胞癌、卵巢癌、HPV相关性癌症(例如宫颈癌、口咽癌、肛门癌、外阴/阴道癌和阴茎癌)、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征或骨髓纤维化。在一些实施方式中，通过靶向肿瘤基质细胞(例如在肿瘤微环境中)(诸如癌症相关性纤维母细胞(CAF)、星状细胞或肌纤维母细胞)和/或肿瘤相关性免疫细胞(例如在肿瘤免疫微环境中)，例如由此调节肿瘤基质微环境和/或肿瘤免疫微环境，从而治疗癌症。

在一些实施方式中，疾病为纤维化病症，例如特发性肺纤维化、肝纤维化、肝硬化、非酒精性脂肪肝炎、佩罗尼氏病(Peyronie's disease)、囊性纤维化、β型地中海贫血、光化性角化病、高血压、一般炎症性疾患、干眼症、溃疡、角膜纤维化、湿性老年性黄斑变性、银屑病、伤口闭合、慢性肾病、肾纤维化、全身性硬化症和慢性查加斯(Chagas)氏心脏病。在一些实施方式中，纤维化病症为心脏纤维化或相关病症，例如心瓣病、心律不整(例如房颤)、心肌重塑(例如在梗塞后)、心肌病变(例如扩张性、缺血性或肥厚性心肌病变)、再狭窄(例如支架内再狭窄、血管成形术后再狭窄)。在一些实施方式中，纤维化病症为掌筋膜挛缩症(Dupuytren’s contracture)。在一些实施方式中，纤维化病症为例如特发性肺纤维化的急性恶化或家族性肺纤维化、血管纤维化、肾纤维化(肾纤维化)、皮肤纤维化(皮肤纤维化或子宫内膜纤维化，例如结疤瘤、硬皮病或肾因性全身纤维化)、胃肠道纤维化(例如克隆氏症)、骨髓纤维化(bone marrow fibrosis)(骨髓纤维化(myelofibrosis))、关节纤维化(例如膝盖、肩膀或其他关节的关节纤维化)、掌筋膜挛缩症、纵隔纤维化、腹膜后纤维化、全身性硬化症或自体免疫性肝炎。在一些实施方式中，纤维化病症为癌症相关性纤维化；肺纤维化，常称为”肺部结疤”(例如肺纤维化，例如特发性肺纤维化的急性恶化或家族性肺纤维化)。在一些实施方式中，纤维化病症为肺纤维化，例如肺的纤维化，诸如特发性肺纤维化、特发性肺纤维化的急性恶化或家族性肺纤维化。在一实施方式中，肝纤维化为肝的纤维化，例如结疤瘤、硬皮病、肾因性全身纤维化、胆管纤维化(胆道纤维化)或肝硬化，例如原发性胆汁性胆管炎(胆汁性肝硬化)或原发性硬化性胆管炎。

本发明还提供抑制受试者(例如有其需要的受试者)中肿瘤生长的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。

本发明还提供治疗受试者(例如有其需要的受试者)中恶病质的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。

本发明还提供用于促进有其需要的受试者中肿瘤免疫微环境浸润的方法，其包括向受试者施用治疗有效量的式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。

本发明还提供用于抑制肿瘤(例如有其需要的受试者)中上皮细胞向间充质细胞转化的方法，其包括使肿瘤与(例如有效量的)式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物接触。在一些实施方式中，肿瘤位于有其需要的受试者中，且该方法包括向受试者施用治疗有效量的式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。

本发明还提供用于调节(例如促进、上调)肿瘤中(例如有其需要的受试者中)的抗原呈递路径的方法，其包括使肿瘤与(例如有效量的)式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物接触。在一些实施方式中，肿瘤位于有其需要的受试者中，且该方法包括向受试者施用治疗有效量的式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。

本发明还提供调节受试者的肿瘤免疫微环境的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。

本发明还提供增加受试者的肿瘤血管或流向肿瘤的血液或该两者的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。

本发明还提供抑制受试者的癌症转移的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。

本发明还提供用于在体内或体外抑制活化素受体样激酶(例如ALK-5)活性的方法，该方法包括使活化素受体样激酶(例如ALK-5)与式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物接触。在某些实施方式中，抑制在受试者活体内发生。在某些实施方式中，抑制系在体外(例如细胞系或生物学样品中)发生。在某些实施方式中，抑制为选择性Alk-5抑制。

在另一方面中，本发明提供用于本发明所描述的用途的式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或前述中任一者的药学上可接受的盐、或前述中任一者的药物组合物，其用于包括但不限于治疗和/或预防受试者中的疾病(例如炎症性疾病、纤维化疾病(例如心脏纤维化或肥厚性病症)或增殖性疾病(例如癌症)或前述的两种或更多种的组合)、抑制受试者的肿瘤生长或抑制活化素受体样激酶(例如ALK-5)在体外或体内的活性。在又另一方面中，本发明提供式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或前述中任一者的药学上可接受的盐、或前述中任一者的药物组合物用于制备药物的用途，例如，上述药物用于治疗和/或预防受试者中的疾病(例如炎症性疾病、纤维化疾病(例如心脏纤维化或肥厚性病症)或增殖性疾病(例如癌症)或前述的两种或更多种的组合)、抑制受试者的肿瘤生长或抑制受试者的ALK-5活性。

在一些实施方式中，本发明提供所述的方法及用途进一步包括向受试者施用一种或多种额外的治疗剂(例如抗癌剂或免疫治疗剂或本发明所描述的其他药剂)。在某些实施方式中，PD-1或PD-L1抑制剂与本发明提供的化合物或药物组合物联合给药。本发明提供所述的方法也可以或另外可选地包括用放射疗法或手术治疗受试者。

本发明还提供用于增强一种或多种用于治疗受试者(例如有其需要的受试者，诸如患有癌症或接受一种或多种治疗剂的受试者)中的癌症的治疗剂(例如抗癌剂和/或免疫疗法)的活性的方法，其包括向受试者施用治疗有效量的式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。

在另一方面中，本发明提供包括式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物的套件。本发明所描述的套件可包括单一剂量或多剂量的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。所提供的套件可用于本发明所述的方法(例如治疗和/或预防受试者的疾病的方法)。本发明的套件可进一步包括使用套件的用法说明(instruction)(例如使用包括在套件中的化合物、或其药学上可接受的盐、或其组合物的用法说明)。

本发明还提供制备本发明化合物，例如式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、及其药学可接受的盐的方法。本发明还提供用于制备这些化合物、及其药学可接受的盐的合成中间体，以及合成中间体的制备。

本发明的特定实施方式的细节在具体实施方式的详细描述中阐述，如下文所述。本发明的其他特性、目的及优点将自定义、实施例、附图及权利要求显而易见。

附图说明

专利或申请文件含有至少一个以彩色绘制的图。具有彩色图的本专利或专利申请公开的副本由专利局在请求及支付必要费用后提供。

并入且构成本说明书的一部分且可例证本发明的数个实施方式的附图与描述一起可提供本发明的非限制性实例。

图1显示实施例A所描述的纤维母细胞检验法的图示例证。

图2A显示在实施例B所描述的研究中，与仅接受载体的组相比，在治疗小鼠中观察到的p-SMAD2抑制百分比的剂量依赖性降低。

图2B显示来自实施例B的小鼠的血浆PK。

图2C显示来自实施例B的小鼠的肿瘤PK。

图2D显示来自实施例B以EX-10处理的小鼠的血浆PK、肿瘤PK及肿瘤PD。

图2E显示来自实施例B以EX-11处理的小鼠的血浆PK、肿瘤PK及肿瘤PD。

图2F显示来自实施例B以EX-13处理的小鼠的血浆PK、肿瘤PK及肿瘤PD。

图3显示来自实施例A所描述的检验法的EX-11的αSMA抑制百分比(PIN)及其余细胞百分比的标准化数据。

图4显示LanthaScreen Eu激酶结合检验程序的示意图。

图5显示CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg细胞在以CD3/CD28+IL2+TGFβ刺激的CD4⁺CD45RA⁺原态T细胞中未以TGFβ处理及以载体或30nM、300nM或3,000nM的EX-11处理的CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg细胞百分比，如实施例C所述。

图6A显示来自实施例D以EX-10或EX-11处理的小鼠的肿瘤样品中随时间的相对pSMAD2。

图6B显示在实施例D中以EX-10在pSMAD2的纵向PK/PD分析中的PK/PD关系。

图6C显示在实施例D中以EX-11在pSMAD2的纵向PK/PD分析中的PK/PD关系。

图7显示当每天以150mg/Kg的ALK5抑制剂EX-11施用两次时，携有ES-2-luc肿瘤的雌性小鼠的存活率有显著的改进，如实施例E所述。

图8显示在实施例F中的EX-11的剂量反应曲线。

图9显示在以10nM、100nM或1,000nM的EX-11处理的KGN细胞中的内源性pSMAD2的表达，如实施例G所述。

图10显示来自实施例H所描述的实验的KGN及COV434细胞系中的TGFβ水平。

图11显示以实施例J所描述的检验法的结果。

图12A显示在实施例K的给药期期间第1组的个体肿瘤体积曲线。

图12B显示在实施例K的给药期期间第2组的个体肿瘤体积曲线。

图12C显示在实施例K的给药期期间第3组的个体肿瘤体积曲线。

图12D显示在实施例K的给药期期间第4组的个体肿瘤体积曲线。

图12E显示在实施例K的给药期期间第5组的个体肿瘤体积曲线。

图12F显示在实施例K的给药期期间第6组的个体肿瘤体积曲线。

图12G显示在实施例K的给药期期间第7组的个体肿瘤体积曲线。

图12H显示在实施例K的给药期期间第8组的个体肿瘤体积曲线。

图12I显示在实施例K中接受载体、抗PD-L1、150mg/kg的EX-11或抗PD-L1+150mg/kg的EX-11的组合的各组于整个给药期间的平均肿瘤体积。

图12J显示在实施例K中接受载体、抗PD-L1、150mg/kg的EX-11或抗PD-L1+150mg/kg的EX-11的组合的各组的存活率曲线。

图12K显示在实施例K中接受载体、抗PD-1、150mg/kg的EX-11或抗PD-1+150mg/kg的EX-11的组合的各组于整个给药期间的平均肿瘤体积。

图12L显示在实施例K中接受载体、抗PD-1、150mg/kg的EX-11或抗PD-1+150mg/kg的EX-11的组合的各组的存活率曲线。

图12M显示来自实施例K的肿瘤的肿瘤柔软度的量化。

图13A显示在实施例L的给药期期间第1组的个体肿瘤体积曲线。

图13B显示在实施例L的给药期期间第2组的个体肿瘤体积曲线。

图13C显示在实施例L的给药期期间第3组的个体肿瘤体积曲线。

图13D显示在实施例L的给药期期间第4组的个体肿瘤体积曲线。

图13E显示在实施例L的给药期期间第5组的个体肿瘤体积曲线。

图13F显示在实施例L的给药期期间第6组的个体肿瘤体积曲线。

图13G显示来自实施例L中接受载体、抗PD-1、150mg/kg的EX-11或抗PD-1+150mg/kg的EX-11的组合的各组的肺组织中的平均发光通量值。

图13H显示来自实施例L中接受载体、抗PD-1、150mg/kg的EX-11或抗PD-1+150mg/kg的EX-11的组合的各组的肝组织中的平均发光通量值。

图14A显示如实施例M所述处理的小鼠的卡普兰-麦尔(Kaplan-Meier)存活率曲线。用于计算存活率的显著差异的对数秩(Mantel-Cox)试验。

图14B显示在实施例M的给药期期间第1组的个体肿瘤体积曲线。

图14C显示在实施例M的给药期期间第2组的个体肿瘤体积曲线。

图14D显示在实施例M的给药期期间第3组的个体肿瘤体积曲线。

图14E显示在实施例M的给药期期间第4组的个体肿瘤体积曲线。

图14F显示在实施例M的给药期期间第5组的个体肿瘤体积曲线。

图14G显示在实施例M的给药期期间第6组的个体肿瘤体积曲线。

图15A显示与载体治疗组相比，来自实施例N的经EX-11处理的动物具有减少的腹水体积。

图15B显示与载体处理相比，如实施例N所述以150mg/Kg的EX-11BID处理改进后肢重量滞留。

图16显示所有的组在实施例P所使用的4T1、EMT6及S91研究中的肿瘤生长曲线(图的左边部分)及自实施例P中所描述的Nanostring分析所得涉及MHC第I型和第II型抗原呈递路径的因子的热图(图的右边部分)。

图17A显示来自实施例T的载体、abraxane、EX-11及组合的abraxane+EX-11治疗组于整个给药期间的平均肿瘤体积(平均±SEM)。

图17B显示来自实施例T的载体治疗组于整个给药期间的个体肿瘤体积曲线。

图17C显示来自实施例T的EX-11治疗组于整个给药期间的个体肿瘤体积曲线。

图17D显示来自实施例T的abraxane治疗组于整个给药期间的个体肿瘤体积曲线。

图17E显示来自实施例T的abraxane+EX-11治疗组于整个给药期间的个体肿瘤体积曲线。

图17F为显示实施例T所描述的各治疗组的最后一天平均肿瘤体积的条形图。

图18A显示在实施例Q所描述的研究中的所有动物自第0天至第21天的体重(以克纪录)。各数据点代表各组的平均值，误差条表明平均值的标准误差。

图18B显示来自实施例Q所描述的研究中的各组在第21天平均以克计的平均肺重量。误差条表明平均值的标准误差(SEM)。****经调整的p值<0.0001及**经调整的p值0.0037，两者均通过普通单向(one-way)ANOVA试验。

图18C显示来自实施例Q所描述的研究中的各组在第21天平均的各动物重量标准化的平均肺重量。误差条表明平均值的标准误差(SEM)。****经调整的p值<0.0001及*经调整的p值0.0228，两者均通过单向ANOVA试验。

图18D显示使用来自实施例Q所描述的研究的肺组织的H&E或马森氏三色(Masson's trichrome)染色的组织病理学评分的结果。

图18E为来自实施例Q所描述的研究的原态动物的代表性H&E图像，且显示由薄壁隔膜(箭头)及透明空气空间所组成的肺泡(A)。另外指出代表性血管(BV)和细支气管(Br)。

图18F为来自实施例Q所描述的研究的博莱霉素(bleomycin)/载体组动物的代表性H&E图像，且显示影响较小的肺泡(A)区域呈斑块状。混合型细胞浸润病灶(*)存在于纤维化区域中。亦指出代表性血管(BV)和细支气管(Br)。

图18G为来自实施例Q所描述的研究的博莱霉素/EX-11组动物的代表性H&E图像，且显示沿着肺边缘观察到的局部纤维化肿块(箭头)。纤维化区域含有炎症性病灶(*)。在图像中捕获的其余肺泡(A)位于正常限度内。示出代表性血管(BV)和细支气管(Br)。

图18H为来自实施例Q所描述的研究的博莱霉素/吡非尼酮(pirfenidone)动物的代表性H&E图像，且显示在肺实质内观察到的区域广泛的纤维化肿块及偶尔较小的结节(箭头)。纤维化区域含有少量炎症性细胞(*)。在图像中捕获的大部分肺泡(A)不受影响。示出代表性血管(BV)和细支气管(Br)。

图18I为来自实施例Q所描述的研究的原态动物的代表性马森氏三色图像，且显示在未损伤的肺中滞留的支持性胶原蛋白(*；亮蓝色染色)局限于血管(BV)和细支气管(Br)周围的区域。指出代表性肺泡(A)。

图18J为来自实施例Q所描述的研究的博莱霉素/载体组动物的代表性马森氏三色图像，且显示整个切片及远离细支气管(Br)和血管(BV)的胶原蛋白增加(浅蓝色染色)，与纤维化一致。滞留的胶原蛋白(*)局限于血管周围/细支气管周围空间。在大部分捕获的图像中的肺实质经多处局部聚结的纤维化肿块(箭头)置换。影响较小的肺泡(A)区域呈斑块状。

图18K为来自实施例Q所描述的研究的博莱霉素/Ex-11组动物的代表性马森氏三色图像，且显示纤维化(箭头)沿着肺边缘形成单一肿块。在捕获的图像中的其余肺泡(A)为正常的。在细支气管(Br)和血管(BV)周围观察到滞留的胶原蛋白(*)。

图18L为来自实施例Q所描述的研究的博莱霉素/吡非尼酮组动物的代表性马森氏三色图像，且显示增加的胶原蛋白区域(纤维化；箭头)构成实质内较大的肿块及偶尔较小的结节区域。常看到未受影响的肺泡(A)且占捕获区域的大部分。在细支气管(Br)和血管(BV)周围观察到滞留的胶原蛋白(*)。

图19显示在经EX-11处理的以及未以TGFβ刺激的KGN细胞中的人类白血球抗原(HLA)第I型表达，如实施例R所述。

图20显示实施例S所描述的TMA的免疫表型的结果。

图21A显示在来自实施例U所描述的每一EMT6治疗组的肿瘤切片中的CD31+血管密度量化及CD45+细胞百分比。

图21B显示来自实施例U所描述的载体及aPD-1+EX-11的EMT6治疗组的CD45染色的代表性显微照片。

图21C显示在来自实施例U所描述的每一S91治疗组的肿瘤切片中的CD31+血管密度量化及CD45+细胞百分比。

图21D显示来自实施例U所描述的aPD-1+EX-11(NR)及aPD-1+EX-11(R)的S91治疗组的CD45染色的代表性显微照片。

具体实施方式

本发明提供化合物(例如式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物或本发明具体例示的化合物“例示性化合物”中任一者)及其药学可接受的盐、前述者的药物组合物及包括其的套件。本发明所提供的化合物为活化素受体样激酶(例如ALK-5)抑制剂且因此可用于例如治疗和/或预防受试者中的疾病(例如增殖性疾病，例如癌症)、抑制受试者的肿瘤生长或抑制活化素受体样激酶(例如ALK-5)在体外或体内的活性。在某些实施方式中，本发明所提供的化合物为ALK-5抑制剂(例如选择性ALK-5抑制剂)。本发明还提供用于制备本发明所描述的化合物的方法及合成中间体。

定义

特定的官能团及化学术语的定义在下文更详细地描述。化学元素系依照元素周期表，CAS版本，Handbook of Chemistry and Physics，第75版的内封面识别，且特定的官能团通常如其中所述予以定义。另外，有机化学的一般原理以及特定的功能性部分和反应性描述于Organic Chemistry,Thomas Sorrell,University Science Books,Sausalito,1999；Smith和March的第5版March's Advanced Organic Chemistry，John Wiley&Sons,Inc.,New York,2001；Larock的Comprehensive Organic Transformations,VCHPublishers,Inc.,New York,1989；及Carruthers的第3版Some Modern Methods ofOrganic Synthesis，Cambridge University Press,Cambridge,1987中。

本发明所描述的化合物可以包括一个或多个不对称中心，因此可以各种立体异构体形式存在，例如对映异构体和/或非对映异构体。例如，本发明所描述的化合物可以为单个的对映异构体、非对映异构体或几何异构体的形式或可以为立体异构体的混合物的形式，其包括外消旋混合物及富集一种或多种立体异构体的混合物。异构体可以本领域技术人员已知的方法自混合物分离，包括手性高效液相色谱(HPLC)和手性盐的形成及结晶；或优选的异构体可以不对称合成法制备。参见例如，Jacques等人，Enantiomers,Racematesand Resolutions(Wiley Interscience,New York,1981)；Wilen等人，Tetrahedron 33:2725(1977)；Eliel,E.L.的Stereochemistry of Carbon Compounds(McGraw-Hill,NY,1962)；及Wilen,S.H.的Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions p.268(E.L.Eliel,Ed.,Univ.of Notre Dame Press,Notre Dame,IN 1972)。另外，包括实质上不含其他异构体的单独异构体的化合物及另外可选地作为各种异构体的混合物的化合物。

除非另外说明，否则本发明所描述的结构亦意指包括仅以化合物富集一种或多种同位素而不同的化合物，例如具有除了被氢占据的选定位置富集氘或氚、被F占据的选定位置富集¹⁹F或被C占据的选定位置富集¹³C或¹⁴C以外的本发明结构的化合物。可并入本发明所描述的化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟、氯和碘的同位素，诸如分别为²H、³H、¹¹C、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁸F、³¹P、³²P、³⁵S、³⁶Cl、¹²³I、¹²⁴I和¹²⁵I。应当认识到，可进行许多其他的同位素富集，其均在本发明的范围内及在本公开的范围内。这些化合物可用作，例如治疗剂或例如生物学检验法中的分析工具或探针。

例如，本发明包括其中存在有放射性同位素(诸如³H和¹⁴C)的化合物和/或其中存在有非放射性同位素(诸如²H和¹³C)的化合物。这些经同位素标记的化合物可用于代谢研究(具有¹⁴C)、反应动力学研究(具有例如²H或³H)、检测或成像技术，诸如正电子发射断层摄影术(PET)或单光子发射计算机断层摄影术(SPECT)，包括药物或底物组织分布检验法，或用于患者的放射性治疗。特别地，¹⁸F或标记的化合物可以特别合意地用于PET或SPECT研究。

而且，被较重的同位素，特别为氘(亦即²H或D)取代可以由于更高的代谢稳定性而提供某些治疗优势，例如增加体内半衰期或减少剂量需求或改进的治疗指数。应理解在此上下文中的氘被认为是本文公开的化合物的取代基。该较重的同位素(尤其为氘)的浓度可由同位素富集因子定义。如本发明所使用的术语“同位素富集因子”意指特定同位素的同位素丰度与天然丰度之间的比。若本发明化合物中的取代基表示为氘，则此化合物对各标示的氘原子具有至少3500的同位素富集因子(在各标示的氘原子处具有52.5％的氘并入)、至少4000(60％的氘并入)、至少4500(67.5％的氘并入)、至少5000(75％的氘并入)、至少5500(82.5％的氘并入)、至少6000(90％的氘并入)、至少6333.3(95％的氘并入)、至少6466.7(97％的氘并入)、至少6600(99％的氘并入)或至少6633.3(99.5％的氘并入)。

经同位素标记的化合物通常可以通过本领域技术人员已知的常规技术或通过在下文所描述的路线中和在实施例和制备中所公开的方法(或与那些下文所述者类似所述的方法)制备，该方法通过以适当或容易取得的同位素标记的试剂取代以其他方式所使用的非同位素标记的试剂。这些化合物具有多种潜在用途，例如作为测定潜在的医药化合物结合至靶蛋白或受体的能力的标准物和试剂，或用于使体内或体外结合至生物受体的本公开的化合物成像。

当列出数值范围时，其意欲涵盖此范围内的各值及子范围。例如，”C_1-6烷基”意欲涵盖C₁、C₂、C₃、C₄、C₅、C₆、C_1-6、C_1-5、C_1-4、C_1-3、C_1-2、C_2-6、C_2-5、C_2-4、C_2-3、C_3-6、C_3-5、C_3-4、C_4-6、C_4-5和C_5-6烷基。

术语“烷基”系指直链或支链饱和烃基的基团。在一些实施方式中，烷基具有1至6个碳原子(“C_1-6烷基”)。在一些实施方式中，烷基具有1至5个碳原子(“C_1-5烷基”)。在一些实施方式中，烷基具有1至4个碳原子(“C_1-4烷基”)。在一些实施方式中，烷基具有1至3个碳原子(“C_1-3烷基”)。在一些实施方式中，烷基具有1至2个碳原子(“C_1-2烷基”)。在一些实施方式中，烷基具有1个碳原子(“C₁烷基”)。在一些实施方式中，烷基具有2至6个碳原子(“C_2-6烷基”)。C_1-6烷基的实例包括甲基(C₁)、乙基(C₂)、丙基(C₃)(例如正丙基、异丙基)、丁基(C₄)(例如正丁基、叔丁基、仲丁基、异丁基)、戊基(C₅)(例如正戊基、3-戊基、戊基、新戊基、3-甲基-2-丁基、三级戊基)和己基(C₆)(例如正己基和包括6个碳原子的所有支链烷基)及类似者。当烷基在本发明被定义为“被取代”，连同在本发明定义时提出的任何限制及除非另有其他指定时，“经取代的烷基”表示在烷基的碳主链上通常被质子占据的一个或多个位置被另一取代基置换(例如任选地被一个或多个包括-F、-Cl和/或-Br的卤素取代的甲基，且例如当经F取代时，包括-CH₂F、-CHF₂和-CF₃)。

术语“碳环基”、“碳环”或“环”系指非芳族环烃取代基(意指限定环不含有杂原子)，其中限定环在单环、双环、桥连或螺环结构中具有3至10个环碳原子(“C_3-10碳环”)。尽管碳环为非芳族，但它们可含有一个或多个位于环内的双键，使得它们不共轭。在一些实施方式中，环碳原子的一个或多个可以是氧化的(例如环酮)。在一些实施方式中，碳环基团(部分)具有3至10个环碳原子(“C_3-10碳环”)。在一些实施方式中，碳环基团具有3至8个环碳原子(“C_3-8碳环”)。在一些实施方式中，碳环基团具有3至7个环碳原子(“C_3-7碳环”)。在一些实施方式中，碳环基团具有3至6个环碳原子(“C_3-6碳环”)。在一些实施方式中，碳环基团具有4至6个环碳原子(“C_4-6碳环”)。C_3-6碳环基团的实例包括而不限于环丙基(C₃)、环丙烯基(C₃)、环丁基(C₄)、环丁烯基(C₄)、环戊基(C₅)、环戊烯基(C₅)、环己基(C₆)、环己烯基(C₆)、环己二烯基(C₆)及类似者。在一些实施方式中，碳环基团为环丙基(C₃)。如前述实例例证，在某些实施方式中，碳环基团为单环(“单环碳环”)或多环(例如含有稠合、桥连或螺环系统，诸如双环系统(“双环碳环”)或三环系统(“三环碳环”))且可为饱和环或可含有一个或多个碳-碳双键或三键。在一些实施方式中，碳环为饱和环。在一些实施方式中，碳环基团为双环碳环，例如优选地包括6至9个碳原子的螺环。应理解在双环碳环中最少的碳原子数目为四个，及在螺环碳环中最少的碳原子数目为五个。因此，应理解单环、双环或螺环C₃-C₁₀碳环的引述系指单环C₃-C₁₀碳环基、双环C₄-C₁₀碳环基或螺环C₅-C₁₀碳环基。在螺环碳环基的一些实施方式中，碳环优选为C_5-10螺环碳环基，例如C_6-9螺环碳环基。

术语“羟基(hydroxy)或(hydroxyl)”系指-OH。

术语“杂环基”、“杂环”或“杂环”系指非芳族取代基，其通过包括选择成形成稳定的化学实体(“C_3-10杂环”)的碳原子和至少1个、至多3个(例如1或2个)相同或独立地选自N、S和O(例如N和O)的杂原子的3至10元的环形成。杂环可为饱和环或可含有一个或多个不饱和位点，只要连接方式不提供芳族非定域化。杂环核心可为单环(“单环杂环”)或多环(例如稠合、桥连或螺环系统，诸如双环系统(“双环杂环”)或三环系统(“三环杂环”))，只要由环成员形成的至少一个环部分含有杂原子，且多环状杂环取代基可以但不必要在多个环中包括一个或多个杂原子。杂环基团的实例包括而不限于氮杂环丁基、氧杂环丁基、哌啶基、哌嗪基、吡咯基、吡咯烷基、咪唑烷基、咪唑啉基、吗啉基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢噻喃基、四氢吡喃基、二氮杂双环辛基、二氮杂双环庚基、氧杂环己烷基、1,4-二氧杂环己烷基、1,4-氧硫杂环己烷基(oxathianyl)、六氢嘧啶基、3-氮杂双环[3.1.0]己烷基、氮杂环庚烷基、3-氮杂双环[3.2.2]壬基、十氢异喹啉基、2-氮杂螺[3.3]庚基、2-氧杂-6-氮杂螺[3.3]庚基、2,6-二氮杂螺[3.3]庚基、8-氮杂双环[3.2.1]辛基、3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛基、3-氧杂-8-氮杂双环[3.2.1]辛基、8-氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛基、2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚基、2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚基、1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸基、3-氧杂-1,8-二氮杂螺[4.5]癸基、十氢吡咯并[3,2-b]吡咯基及类似者。如前述实例例证，在某些实施方式中，杂环基团为单环(“单环杂环”)或多环(例如含有稠合、桥连或螺环系统，诸如双环系统(“双环杂环”)或三环系统(“三环杂环”))且可为饱和环或可含有一个或多个碳-碳双键或三键。在一些实施方式中，杂环为饱和环。在一些实施方式中，杂环基团为单环或双环杂环(例如饱和杂环)，优选地包括6至9个碳原子。

除非另有其他指定，否则杂环的各情况独立地未经取代(“未取代的杂环”)或被一个或多个取代基取代(“取代的杂环”)。与“取代的杂环”核心连接的取代基可以经由提供稳定的键合排列的环成员原子中任一者键合。在某些实施方式中，杂环基团为未取代的3至10元杂环。在某些实施方式中，杂环基团为取代的3至10元杂环。在一些实施方式中，优选地，选择6元环系统的杂环取代基。在一些实施方式中，优选地，选择10元螺环取代基的杂环取代基。应理解在双环杂环中最少的环原子数目为四个，及在螺环杂环中最少的环原子数目为五个。因此，应理解单环、双环或螺环中C₃-C₁₀杂环的引述系指单环C₃-C₁₀杂环基、双环C₄-C₁₀杂环基或螺环C₅-C₁₀杂环基。在螺环杂环基的一些实施方式中，杂环基优选为C_5-10螺环杂环基，例如C_6-9螺环杂环基。

术语“芳基”系指形成芳族环系统的至多10个碳原子的芳族部分。这些取代基系经由提供稳定结构的任何环碳原子与基质(substrate)键合。如在使用时的定义或限制，这些部分可包括单环或双环结构(例如稠合环)。在一些实施方式中，芳基具有6个环碳原子(“C₆芳基”；例如苯基)。在一些实施方式中，芳基具有10个环碳原子(“C₁₀芳基”；例如萘基，诸如1-萘基和2-萘基)。在一些实施方式中，如在本发明使用时的定义或示例，芳基部分包括在芳基环上的取代基，如上文所定义者，其与芳基部分键合以形成稠合碳环结构，在稠合结构中的碳环大小系在使用时定义。若芳基部分在此定义为取代的，则其意指指定的取代基可以提供稳定种类的方式置换一个或多个与定义芳基环的碳原子键合的质子。在一些实施方式中，芳基部分为6元芳基环。

语“杂芳基”系指形成芳族环系统的至少6个原子的芳族部分，其中形成该芳族环系统的原子的一个或多个选自N或S。杂芳基取代基可经由杂芳基环中供给稳定的键的任何原子与基质键合。在一些实施方式中，杂芳基具有6个环碳原子(“C₆杂芳基”；例如吡啶基，诸如吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基)。杂芳基的其他实例包括但不限于吡咯基、吡啶基、吡唑基、吲哚基、吲哚啉基、异吲哚啉基、吲唑基、噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基、二氢苯并呋喃基、二氢异苯并呋喃基、噁唑基、异噁唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、三嗪基、嘧啶基、吡嗪基、噻唑基、嘌呤基、苯并咪唑基、喹啉基、异喹啉基、喹噁啉基、四氢喹啉基、苯并呋喃基、苯并吡喃基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、1H-苯并[d][1,2,3]三唑基及类似者。杂芳基取代基可任选地如在此使用时的定义取代。

在本发明的取代基定义中所使用的术语“任选地被取代”表示所定义的部分可以存在而没有任何取代基，或者可以具有一个或多个通常经质子占据的键合位置被一个或多个指定的任选取代基置换(亦即取代)的形式存在。在所有的实施方式中，当有任选的取代基存在时，它们以提供稳定的化合物的量及键合结构存在，例如提供不自发性进行转变的化合物，诸如通过重排、环化、消除或其他反应，然而却预期以提供互变异构体的重排或其他类似的键合重排。除非另外指出，否则“被取代的”部分在该部分的一个或多个可取代的位置上具有取代基，且当任何给出的结构中超过一个位置被取代时，取代基独立地选自所描述的可允许的取代基。除非在使用时有不同的定义，否则术语“被取代的”预期包括以有机化合物的所有可允许的取代基的取代，且包括本发明所描述的导致形成稳定的化合物的任何取代基。本公开预期任何及所有这些组合以得到稳定的化合物。出于本公开的目的，杂原子(诸如氮)可以具有氢取代基和/或如本发明所描述的任何适合的取代基，其满足杂原子的原子价且导致形成稳定的部分。在一些实施方式中，在三价氮可四级化或四级氮可去质子化成三价形式的情况下，任一形式的呈现预期两种形式之间的转变，并且该呈现无意于受本发明所描述的示例性取代基以任何方式限制。例如，本发明所描述的化合物中的氮原子可以通过氧化剂(例如mCPBA和/或过氧化氢)处理而独立地转化成其(它们的)N-氧化物，以提供也为本公开预期的其他化合物。因此，所示及请求保护的氮原子被认为涵盖所示的氮及其N-氧化物(N→O)衍生物。

除非在定义时有不同的指定，否则如本发明所使用的术语“卤代”或“卤素”系指氟(氟基，-F)、氯(氯基，-Cl)、溴(溴基，-Br)或碘(碘基，-I)，除非该术语在本发明使用时受到更多限制。

术语“磺酰胺”系指-SO₂R'R"，其中R'和R"为相同或不同且各自独立地选自氢、烷基或碳环基。在一些实施方式中，R'和R"各自独立地选自氢、C₁-C₅烷基或C₃-C₅环烷基。在一些实施方式中，磺酰胺为-SO₂NH₂。

当任何变量在化合物的任何结构或式中出现一次以上时，其在每次出现时的定义与其在其他每次出现时的定义无关。因此，例如若显示基团被0至3个取代基取代，则该基团可以使未取代的，或者可以被最多三个取代基取代，且各取代基与其他取代基独立地选择。

当连接取代基的键显示与连接环中的两个原子的键交叉(例如连接I中的R³的键)或与表示环的圆交叉时，则这些取代基可与环中的任何可取代的原子键合。而且，当与取代基交叉键合的环为多环时，取代基可以与交叉键合的环或环系统的任何可取代的原子键合。当列出取代基而未指示该取代基与指定式的化合物的其余部分键合的原子时，则该取代基可经由该取代基中的任何原子键合。

取代基和/或变量的组合只在这些组合导致稳定的化合物时才为可允许的。

化合物均可具有不对称中心、手性轴及手性平面(例如如下列中所述：E.L.Eliel和S.H.Wilen，Stereo-chemistry of Carbon Compounds,John Wiley&Sons,New York,1994,pages 1119-1190)，作为外消旋混合物、单独的异构体(例如非对映异构体、对映异构体、几何异构体、构形异构体(包括旋转异构体和阻转异构体)、互变异构体)及中间体混合物连同所有可能的异构体及其混合物存在，其均包括在本公开中。

如本发明所用的术语“异构体”系指具有相同的分子式但原子排列及构型不同的不同化合物。

“对映异构体”为一对呈彼此不可重叠的镜像的立体异构体。一对对映异构体的1：1的混合物为“外消旋混合物”。“外消旋体”或“外消旋”在适当时用于表示外消旋混合物。当标示本公开的化合物的立体化学时，具有两个手性中心的已知的相对及绝对构型的单一立体异构体使用常规的RS系统(例如(1S,2S))标示；具有已知的相对构型但绝对构型未知的单一立体异构体系以星号标示(例如(1R*,2R*))；具有两个字母的外消旋体(例如(1RS,2RS)为(1R,2R)与(1S,2S)的外消旋混合物，(1RS,2SR)为(1R,2S)与(1S,2R))的外消旋混合物)。非对映异构体为具有至少两个不对称原子但彼此不为镜像的立体异构体。绝对立体化学系根据嵌-英格-普洛(Cahn-Ingold-Prelog)R-S系统指定。当化合物为纯对映异构体时，在各手性碳上的立体化学可由R或S指定。绝对构型未知的经解析的化合物可取决于它们在钠D线的波长下旋转平面偏振光的方向(右旋或左旋)而标示(+)或(-)。另外可选地，经解析的化合物可通过手性HPLC以对应的对映异构体/非对映异构体的各自的保留时间来定义。

当化合物含有双键或一些其赋予分子特定量的结构刚性的特性时，可能会出现几何异构体。若化合物含有双键，则双键可能为E-或Z-构型。若化合物含有二取代的环烷基，则环烷基取代基可能具有顺式或反式构型。

构象异构体(或conformer)为可通过围绕一个或多个键旋转而不同的异构体。旋转异构体为通过仅围绕单一键旋转而不同的构象异构体。

如本发明所使用的术语“阻转异构体”系指基于分子中的旋转受限而引起的轴或平面手性的结构异构体。

学活性(R)-及(S)-异构体可使用手性合成子或手性试剂制备或使用常规的技术拆分(例如在手性SFC或HPLC色谱柱上分离，诸如获自DAICEL Corp.的和柱或其他等同的柱上使用适当的溶剂或溶剂混合物实现适合的分离)。

化合物(例如本文公开的化合物)可以光学活性或外消旋形式分离。光学活性形式可通过外消旋形式的拆分或通过从光学活性起始材料合成来制备。用于制备本文公开的化合物及中间体的所有方法被认为是本发明的一部分。当制备对映异构的或非对映异构的产物时，它们可以通过常规的方法分离，例如通过层析或分段结晶。

在某些实施方式中，化合物取代基的某些特征可以用本领域技术人员已知的保护基来保护，例如那些在Protecting Groups in Organic Synthesis,T.W.Greene和P.G.M.Wuts,3^rd edition,John Wiley&Sons,1999中详述者，将其并入本发明以供参考。所有这些转变预期以未保护化合物的形式呈现。

如本发明所使用的术语“盐”系指本文公开的化合物可制成的任何及所有的盐形式，且涵盖药学上可接受的盐。优选为药学上可接受的盐。然而，其他的盐可用于例如在制备期间可使用的分离或纯化步骤中，因此预期在本公开的范围内。本发明所描述的化合物的盐通常为那些提供适合于经由任何适合的药物组合物给药途径施用于人类或动物受试者的组成的盐。

短语“药学上可接受的”意指该短语修饰的物质或组合物必须在合理的医学判断范围内适合与人类及低等动物的组织接触使用而没有过度的毒性、刺激性、过敏反应及类似者，且与合理的获益/风险比相称。如果一物质为组合物或制剂的一部分，则该物质也必须与组合物或制剂中的其他成分在化学和/或毒理学上可相容。

术语“药学上可接受的盐”系指那些在合理的医学判断范围内适合与人类及低等动物的组织接触使用而没有过度的毒性、刺激性、过敏反应及类似者，且与合理的获益/风险比相称的盐。药学上可接受的盐为本技术中所熟知。例如，Berge等人在J.Pharmaceutical Sciences,1977,66,1-19中详细描述药学上可接受的盐，将其并入本发明以供参考，且适合的盐的列表可见于Allen,L.V.,Jr.,ed.,Remington:The Science andPractice of Pharmacy,22nd Edition,Pharmaceutical Press,London,UK(2012)。本发明所描述的化合物的药学上可接受的盐包括那些衍生自适合的无机和有机酸和无机和有机碱的盐。

药学上可接受的酸加成盐为用无机酸(诸如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和过氯酸)或有机酸(诸如乙酸、草酸、顺丁烯二酸、酒石酸、柠檬酸、丁二酸或丙二酸)或使用本技术中已知的其他方法(诸如离子交换)所形成的氨基的盐。其他药学上可接受的酸加成盐包括乙酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬胺酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、反丁烯二酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡萄糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘化物、2-羟基乙磺酸盐、乳糖醛酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、顺丁烯二酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟碱酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、果冻酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、丁二酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一酸盐、戊酸盐及类似者。

药学上可接受的碱加成盐由无机碱和有机碱形成。衍生自适当的碱的盐包括碱金属、碱土金属、铵和N⁺(C_1-4烷基)₄ ^-盐。代表性碱金属或碱土金属盐包括钠、锂、钾、钙、镁及类似者。当适当时，其他药学上可接受的盐包括例如使用抗衡离子(诸如卤化物、氢氧化物、羧酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐、低级烷基磺酸盐和芳基磺酸盐)所形成的无毒铵、季铵和胺阳离子(例如一级、二级、三级、四级胺阳离子)。可衍生出碱加成盐的有机胺的实例包括但不限于异丙胺、苄乙二胺(benzathine)、胆酸盐、二乙醇胺、二乙胺、离胺酸、甲葡胺(meglumine)、哌嗪和胺丁三醇。

本发明所描述的化合物的盐(例如药学上可接受的盐)可以常规的化学方法由含有碱性或酸性部分的母体化合物合成。这些盐通常可通过将游离酸或碱形式的这些化合物与化学计量的量的适当的碱或酸在水或有机溶剂中或二者的混合物中反应来制备；通常优选为非水性介质，如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。

应当理解当本发明所描述的化合物含有超过一个碱性部分或超过一个酸性部分时，此各部分可以独立地参与形成酸加成盐形式或碱加成盐形式，以所有可能的盐形式包括在本公开中。而且，当化合物中的二或更多个部分呈盐形式时，形成二或更多种盐形式的阴离子或阳离子可为相同或不同的。形成二或更多种盐形式的阴离子或阳离子通常为相同的。在本公开的化合物的盐中的阴离子或阳离子对本发明所描述的化合物典型的摩尔比为3：1、2：1、1：1、2：1、3：1、4：1和5：1。在一些实施方式中，在本发明所描述的化合物的盐中的阴离子或阳离子(例如阴离子)对化合物的摩尔比为1：1。

适合的盐列表可见于Allen,L.V.,Jr.,ed.,Remington:The Science andPractice of Pharmacy,22nd Edition,Pharmaceutical Press,London,UK(2012)中，将其相关公开内容特此以其全文并入以供参考。

本发明所描述的化合物亦以游离碱提供且可以游离碱施用。

术语“溶剂合物”意指本公开的化合物与一种或多种无论为有机或无机的溶剂分子的物理缔合。该物理缔合包括氢键。在某些情况下，溶剂合物能够分离，例如当一种或多种溶剂分子并入结晶固体的晶格中时。在溶剂合物中的溶剂分子可以有序排列和/或无序排列存在。溶剂合物可包括化学计量或非化学计量的量的溶剂分子。“溶剂合物”涵盖溶液相及固相溶剂合物两者。溶剂合物的实例包括但不限于水合物、乙醇化物、甲醇化物和异丙醇化物。溶剂化方法通常为本技术中已知的。

“药学上可接受的载体”系指本技术用于递送生物活性剂至动物(特别为哺乳动物)的通常接受的介质，包括认定为安全(GRAS)的溶剂、分散介质、包衣、表面活性剂、抗氧化剂、防腐剂(例如抗菌剂、抗真菌剂)、等渗剂、吸收延迟剂、盐、防腐剂、药物稳定剂、粘合剂、缓冲剂(例如顺丁烯二酸、酒石酸、乳酸、柠檬酸、乙酸、碳酸氢钠、磷酸钠及类似者)、崩解剂、润滑剂、甜味剂、调味剂、染料及类似者和其组合，如可为本领域技术人员已知者(参见例如Allen,L.V.,Jr.等人，Remington:The Science and Practice of Pharmacy(2Volumes),22nd Edition,Pharmaceutical Press(2012)。

术语“组合物”和“制剂”可互换使用。

预期对其施用的“者”系指人类(亦即任何年龄组的男性或女性，例如儿科受试者(例如婴儿、儿童或青少年)或成人受试者(例如年轻成人、中年成人或年长成人))或非人类动物。在某些实施方式中，非人类动物为哺乳动物(例如灵长类动物(例如石蟹猕猴或恒河猴)、商业相关的哺乳动物(例如牛、猪、马、绵羊、山羊、猫或狗)或鸟类(例如商业相关的鸟类，诸如鸡、鸭、鹅或火鸡))。在某些实施方式中，非人类动物为鱼、爬行动物或两栖动物。非人类动物可为任何发育阶段的雄性或雌性。非人类动物可为基因转殖动物或基因工程动物。术语“患者”要治疗疾病的人类受试者。

如本发明所使用，若受试者在生物学、医学或生活质量方面从治疗中获益，则该受试者(例如人类)“需要”治疗。

术语“施用”、“给药”或“给予”系指在受试者中或受试者上植入、吸收、摄取、注射、吸入或以其他方式引入所提及的材料(例如本发明所描述的化合物、或其药学上可接受的盐或其组合物)。

术语“治疗(treatment)”、”治疗(treat)”及“治疗(treating)”系指对患有关注的疾病或病症(例如癌症)的受试者(诸如人类)施用药剂或医疗护理，且包括：(i)预防在受试者中发生疾病或病症，特别当该受试者易患此病症但尚未被诊断患有该病症时；(ii)抑制疾病或病症，例如遏止其发展；(iii)缓解疾病或病症，例如引起疾病或病症消退；和/或(iv)缓解由疾病或病症引起的症状(例如疼痛、体重减轻、咳嗽、疲劳、虚弱等)。治疗因此包括逆转、减轻、延迟疾病的发作和/或抑制疾病的进展(例如本发明所描述的疾病)。在一些实施方式中，治疗可在已发展或已观察到疾病的一种或多种体征或症状后施用。在其他的实施方式中，治疗可在没有疾病体征或症状存在下施用。例如，治疗可在症状发作前对易患病受试者施用。治疗亦可在在症状消除后继续治疗，例如以延迟或防止复发。

本发明所描述的化合物的“有效量”系指足以引发所需生物反应的量。本发明所描述的化合物的有效量可取决于诸如所需生物学终点、化合物的药物动力学、要治疗的病症、给药方式及受试者的年龄和健康的因素而变化。在某些实施方式中，有效量为治疗有效量。另外可选地，有效量为预防有效量。在某些实施方式中，有效量为呈单一剂量的本发明所描述的化合物的量。在某些实施方式中，有效量为呈多重剂量的本发明所描述的化合物的组合量。

本发明所描述的化合物的“治疗有效量”为足以提供病症治疗的治疗效益的量，例如足以延迟或最小化与病症相关联的一种或多种症状的量。化合物的治疗有效量意指单独或与其他疗法组合的治疗剂的量，其提供病症治疗的治疗效益。术语“治疗有效量”可涵盖改善整体治疗、减少或避免病症的症状、体征或原因和/或增强另一治疗剂的治疗功效的量。在某些实施方式中，治疗有效量为足以治疗所描述的任何疾病或病症的量。

本发明所描述的化合物的“预防有效量”为足以预防病症或与病症相关联的一种或多种症状或防止其复发的量。化合物的预防有效量意指单独或与其他剂组合的治疗剂的量，其提供病症预防的预防效益。术语“预防有效量”可涵盖改善整体预防或增强另一预防剂的预防功效的量。

如本发明所使用的“抑制(inhibition)”、“抑制(inhibiting)”、“抑制(inhibit)”及“抑制剂”及类似者系指化合物降低、减慢、停止或防止生物过程的活性(例如活化素受体样激酶(例如ALK-5)在受试者或细胞中的活性)或通过例如改变信号传导路径，例如改变TGFβ1信号传导从而改变疾病进展的能力。

在某些实施方式中，本发明所描述的化合物为“选择性抑制剂”且“选择性抑制”一种蛋白质激酶超越一种或多种其他激酶。在某些实施方式中，本发明所描述的化合物为选择性ALK-5抑制剂，亦即对ALK-5的选择超越一种或多种其他激酶(例如超越其他活化素受体样激酶)。本发明所描述的化合物抑制ALK-5超越不同激酶(例如不同的活化素受体样激酶)的活性的选择性可通过化合物抑制不同激酶的活性的IC₅₀值对化合物抑制ALK-5的活性的IC₅₀值的商来测量。本发明所描述的化合物对ALK-5超越不同激酶(例如不同的活化素受体样激酶)的选择性亦可通过化合物与不同激酶的加成的K_d值及对化合物与ALK-5的加成的K_d值的商来测量。选择性抑制包括例如对ALK-5的IC₅₀抑制，其为在相同的测试条件下对ALK-2观察到的IC₅₀的至少2倍、至少3倍、至少5倍、至少10倍、至少30倍、至少50倍、至少100倍或大于100倍。

如本发明所使用的术语“实体瘤”系指由通常不含有囊肿或液体区域的异常组织块所形成的恶性肿瘤/癌症。实体瘤根据起源的组织/细胞来命名/分类。实例包括但不限于肉瘤和癌。

如本发明所使用的术语“白血病”系指在造血组织(诸如骨髓)中开始的血液或血细胞恶性肿瘤/癌症。实例包括但不限于慢性白血病、急性白血病、急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、急性淋巴细胞性白血病(ALL)、急性成淋巴细胞性白血病(例如B细胞、T细胞)和慢性淋巴细胞性白血病(CLL)。如本发明所使用的术语“淋巴瘤”系指在免疫系统的细胞中开始的淋巴细胞恶性肿瘤/癌症。实例包括但不限于霍奇金氏(Hodgkin)淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤和多发性骨髓瘤。

本公开的化合物

如本领域技术人员所认知，本发明提及的“本公开的化合物”、“本文所述的化合物”及类似者系指本发明所描述的任何结构式的化合物(例如式I化合物、式I化合物的子式)以及其异构体，诸如立体异构体(包括非对映异构体、对映异构体和外消旋体)、几何异构体、构象异构体(包括旋转异构体和阻转异构体)、互变异构体、同位素标记的化合物(包括氘取代)及固有形成的部分(例如多晶形物和/或溶剂合物，诸如水合物)。当有能够形成盐的部分存在时，则亦包括盐，特别为药学上可接受的盐。本公开的化合物亦可作为无定形固体或结晶固体提供。可使用冻干来提供成为固体的本公开的化合物。这些固体形式亦包括在这些术语中。例如，使用本公开的化合物的游离碱形式的结构呈现的描述预期化合物的水合物、溶剂合物、多晶形物、共晶、盐、互变异构体、立体异构体及同位素标记的衍生物。例如，本公开的化合物的游离碱形式的结构呈现预期化合物的所有盐形式(例如药学上可接受的盐形式)。例如，缺少立体化学标示的具有不对称碳中心的本公开的化合物的结构呈现预期所有异构体，包括以所有水平的对映异构或非对映异构纯度分离的一种或多种特定异构体。例如，具有呈一种特定的互变异构体形式的酮/烯醇互变异构体形式的本公开的化合物的结构呈现预期化合物的所有互变异构体形式。

在第一实施方式中，提供式(I)的化合物

或其药学上可接受的盐，其中：

R¹为C₁-C₅烷基或C₃-C₅碳环或卤素；

R³为-H、-F或-Cl；

R⁴为-H或卤素或各自任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基；

R⁵为-H或-F或各自任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基；且

R²为至少6个碳原子的芳基或至少6个原子的含氮杂芳基，其各自任选地经下列者取代：

(i)一个或多个卤素；

(ii)一部分，其为任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；且其中当选择为大于C₃的烷基或大于环丙基的碳环时，该部分位于R²的芳基或杂芳基上的位置是相对于连接所述芳基的氨基键的间位或对位；

(iii)磺酰胺；

(iv)单环、双环或螺环碳环，其任选地被一个或多个任选地被羟基或一个或多个卤素取代的至多6个碳原子的直链、支链或环状烷基取代，且其中当存在时，所述碳环位于R²的芳基或杂芳基上的位置是相对于连接R²的芳基或杂芳基的氨基键的间位或对位；

(v)单环、双环或螺环碳环杂环，其可含有至多3个独立地选自N和O的杂原子且其任选地及独立地被一个或多个任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环取代，且其中当存在是，所述杂环在R²的芳基上的位置是相对于连接R²的芳基或杂芳基的氨基键的间位或对位；

(vi)下式的部分：

其中，

G为>N-或>C(H)-；且

E为-O-或>C(H)-R¹³，其中R¹³为-H或各自任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；或

(vii)下式的部分：

其中：

R⁸为-H或任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；

A为>N-或>C(H)-；且

X、Y和Z如下文所定义者：

Z为>CH₂，且X和Y系独立为>CH₂或>C(CH₃)₂，或X和Y两者都为>CH-且通过亚甲基或乙撑基桥连接在一起；或Y为>CH₂或>C(CH₃)₂，且X和Z两者都为>CH-且通过亚甲基或乙撑基桥连接在一起。

在一些实施方式中，R¹为C₁-C₅烷基或C₃-C₅碳环。

在一些实施方式中，R¹为C₁-C₅烷基。

在一些实施方式中，R¹为-CH₃。

在一些实施方式中，R¹为C₃-C₅碳环。

在一些实施方式中，R¹为环丙基。

在一些实施方式中，R¹为卤素(例如-Cl或-F)。

在一些实施方式中，R¹为-Cl。

在一些实施方式中，R³为-F或-Cl。

在一些实施方式中，R³为-H。

在一些实施方式中，R³为-F。

在一些实施方式中，R³为-Cl。

在一些实施方式中，R⁴为卤素。

在一些实施方式中，R⁴为-Cl。

在一些实施方式中，R⁴为-F。

在一些实施方式中，R⁴为各自任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基。

在一些实施方式中，R⁴为任选地被一个或多个-F取代的环丙基。

在一些实施方式中，R⁴为任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基。

在一些实施方式中，R⁴为-CF₃。

在一些实施方式中，R⁴为-CH₃。

在一些实施方式中，R⁴为-H。

在一些实施方式中，R⁵为各自任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基。

在一些实施方式中，R⁵为-CH₃。

在一些实施方式中，R⁵为-CF₃。

在一些实施方式中，R⁵为-H。

在一些实施方式中，R⁵为-F。

在一些实施方式中，R²为式AA的部分：

其中

R⁶为-H、-F、-Cl或任选地及独立地被一个或多个卤素取代的C₁-C₃烷基或环丙基；

R^7A和R^7B中一者为-H且另一者为：

(i)卤素；

(ii)-SO₂NR^7F ₂，其中各R^7F独立为-H或至多4个碳原子的直链或支链烷基；

(iii)任选地被一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；

(iv)下式的部分：

其中

G为>N-或>C(H)-；且

E为-O-或>C(H)-R¹³，其中R¹³为-H或各自任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；或

(v)下式的部分：

其中

R⁸为-H或任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；

A为>N-或>C(H)-；且

X、Y和Z如下文所定义者：

Z为>CH₂，且X和Y独立地为>CH₂或>C(CH₃)₂，或X和Y两者都为>CH-且通过亚甲基或乙撑基桥连接在一起；或

Y为>CH₂或>C(CH₃)₂，且X和Z两者都为>CH-且通过亚甲基或乙撑基桥连接在一起。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R¹为C₁-C₅烷基。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R¹为C₃-C₅碳环。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R¹为-CH₃。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R¹为环丙基。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R¹为卤素。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R¹为-Cl。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R³为-H。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R³为-F。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R⁴为-H。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R⁴为任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R⁴为-CF₃。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R⁴为-CH₃。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R⁴为卤素。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R⁴为-Cl。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R⁴为-F。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R⁵为-CH₃。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R⁵为-CF₃。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R⁵为-H。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R⁵为-F。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R⁶为任选地被一个或多个卤素取代的C₁-C₃烷基。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R⁶为-CH₃。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R⁶为-CF₃。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R^7A和R^7B中一者为-H且另一者为卤素。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R^7A和R^7B中一者为-H且另一者为-F或-Cl。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R^7A和R^7B中一者为-H且另一者为各自任选地被一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R^7A和R^7B中一者为-H且另一者为：

(i)下式结构的部分：

其各自在其一个或多个碳原子上任选地被卤素或任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基或C₃-C₄碳环取代；或

(ii)-SO₂N(R^7F)₂。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R^7A为-H。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R^7B为-H。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R³为-F，R⁴为-H或-CH₃，R⁵为-H，且R⁶为-H。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R⁴为-H、-Cl、-F、-CF-₃或-CH₃，R⁵为-H、-CH₃、-CF₃、-Cl或-F，且R⁶为-H、-F、-Cl、-CH₃或-CF₃。

在一些实施方式中，其中R²为式AA的部分，R⁴为-H或-CH₃，R⁵为-H或-F，且R⁶为-H、-F、-Cl或-CF₃。

在一些实施方式中，R²为式AB、AC或AD的杂芳基部分：

其中：

各R¹⁰独立地为-H、-F、-Cl或各自任选地被一个或多个卤素取代的C₁-C₃烷基或环丙基；且

R¹¹连接在相对于连接所述杂芳基部分的氨基键的间位或对位，且为：

(i)-SO₂N(R^10F)₂，其中各R^10F独立地为-H或C₁-C₄烷基；

(ii)各自任选地被一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；

(iii)下式的部分：

其中：

R¹²为-H或各自任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；

A为>N-或>C(H)-；且

X、Y和Z系如下所定义者：

Z为>CH₂，且X和Y系独立为>CH₂或>C(CH₃)₂，或X和Y两者都为>CH-且通过亚甲基或乙撑基桥连接在一起；或

Y为>CH₂或>C(CH₃)₂，且X和Z两者都为>CH-且通过亚甲基或乙撑基桥连接在一起；或

(iv)下式的部分：

其中：

G为>N-或>C(H)-；且

E为-O-或>C(H)-R¹³，其中R¹³为-H或各自任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环。

在一些实施方式中，其中R²选自为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R¹¹为：

(I)下式结构的部分：

其各自在其一个或多个碳原子上任选地被卤素取代或被一部分取代，该部分为C₁-C₄烷基或C₃-C₄碳环，其各自其一个或多个碳原子上任选地被以下取代：卤素；或部分，该部分为各自任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基或C₃-C₄碳环；或

(ii)-SO₂N(R^10F)₂。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R¹为C₁-C₅烷基。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R¹为C₃-C₅碳环。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R¹为-CH₃。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R¹为-CF₃。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R¹为环丙基。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R¹为卤素。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R¹为-Cl。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R³为-H。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R³为-H或-F。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R³为-F。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R⁴为-H、-Cl或-CH₃。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R⁴为-H。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R⁴为任选地在一个或多个位置上被一个或多个卤素取代的C₁-C₃烷基。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R⁴为-CF₃。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R⁴为-CH₃。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R⁴为卤素。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R⁴为-Cl。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R⁴为-F。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R⁵为-CH₃。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R⁵为-CF₃。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R⁵为-H或-F。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R⁵为-H。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R⁵为-F。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，各R¹⁰独立地为各自任选地及独立地被一个或多个卤素取代的C₁-C₃烷基或环丙基。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，各R¹⁰独立地为任选地及独立地被一个或多个卤素取代的C₁-C₃烷基。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，各R¹⁰独立为-H、-CH₃、-CF₃、-Cl或-F。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，各R¹⁰为-CH₃。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，各R¹⁰为-CF₃。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，各R¹⁰为-H。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，各R¹⁰为-F。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R¹⁰为-Cl。

在一些实施方式中，其中R²选择为式AB、AC或AD的杂芳基部分，R¹⁰为任选地在一个或多个碳位置上经卤素取代的环丙基。

在一方面中，本发明提供式(II)的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

R¹为环丙基、-CH₃或-Cl(例如-CH₃或-Cl)；

R⁴为-H或-CH₃；

R⁵为-H或-F；且

R²为：

a)下式的部分：

其中，

R^6A和R^6B中一者为-H且另一者为-H、-F、-Cl、-CH₃或CF₃；

R^7C和R^7D中一者为-H且另一者为：

(i)-F；

(ii)-Cl；

(iii)-SO₂NH₂；

(iv)环己基；

(v)叔丁基；或

(vi)下式的部分：

b)下式的部分：

或

c)下式的部分：

在一些实施方式中，式(I)的化合物为式(III)的化合物：

/>

或其药学上可接受的盐，其中：

R^1A为甲基或环丙基；

R^6B为-H、-F或-Cl；且

R^7D和R^7E中一者为-H且另一者为下式的杂环：

(例如/>)。

在式(III)的化合物的一些实施方式中，R^7D为下式之一：

在式(III)的化合物的一些实施方式中，R^7E为下式之一：

在一些实施方式中，化合物具有下式结构：

或其药学上可接受的盐、其中R'为H或F；且R"位于相对于氨基键的间位或对位，且为任选地被下列者N取代的吗啉或哌嗪基：-CH₃、-CH₂CF₃或-CH₂CH₂OH。

在一些实施方式中，化合物为式(IV)的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

Q、R或G的一为＝N-，且

当Q不选为N时，其为C-R^10A，

当R不选为N时，其为C-R^11A，

当G不选为N时，其为C-R^11A，且其中：

R^10A在各情况下独立地选自-H、-F、-Cl或各自任选地被一个或多个卤素取代的C₁-C₃烷基或环丙基；

R^11A在各情况下独立地选自：

(i)-H；

(ii)-F或-Cl；

(iii)各自任选地被一个或多个卤素取代的C₁-C₃烷基或环丙基；

(iv)-SO₂N(R^10F)₂，其中各R^10F独立为-H或C₁-C₄烷基；

(v)C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；

(vi)下式的部分：

其中：

R¹²为-H或任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；

A为>N-或>C(H)-；且

X、Y和Z系如下所定义者：

Z为>CH₂，且X和Y系独立为>CH₂或C(CH₃)₂，或X和Y两者都为>CH-且通过亚甲基或乙撑基桥连接在一起；或

Y为>CH₂或>C(CH₃)₂，且X和Z两者都为>CH-且通过亚甲基或乙撑基桥连接在一起；或

(vii)下式的部分：

其中：

G为>N-或>C(H)-；且

E为-O-或>C(H)-R¹³，其中R¹³为-H或任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环，其先决条件为存在的R^11A之一不为-H、-F、-Cl或在一个或多个位置上任选地被卤素取代的C₁-C₃烷基或C₃碳环。

在某些实施方式中，例如式(I)、(II)、(III)或(IV)中任一者的化合物选自表1(下文)中所引述的化合物，例如示例性化合物Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58或这些药学上可接受的盐形式中任一者。

在本文公开的各个方面及实施方式中，应理解明确提及的示例性化合物或通式可替代地指任何所公开的其亚属的化合物。

在某些实施方式中，式(I)的化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

在某些实施方式中，式(I)的化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

在某些实施方式中，式(I)的化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

在某些实施方式中，式(I)的化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

在某些实施方式中，式(I)的化合物具有下式：

/>

或其药学上可接受的盐。

在某些实施方式中，式(I)的化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

在某些实施方式中，式(I)的化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

在某些实施方式中，式(I)的化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

在某些实施方式中，式(I)的化合物具有下式：

/>

或其药学上可接受的盐。

在第二实施方式中，其提供式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐，其中：

R¹为C₁-C₅烷基或C₃-C₅碳环或卤素；

R²为至少6个碳原子的芳基或至少6个原子的含氮杂芳基，其任选地被下列的一个或多个取代：

(i)一个或多个卤素；

(ii)任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基，其中当选择为大于C₃的烷基时，该烷基存在于R²的芳基或杂芳基上位置是相对于连接R²的芳基或杂芳基的氨基键的间位或对位；

(iii)磺酰胺；

(iv)单环、双环或螺环碳环，其任选地被羟基、一个或多个卤素或一个或多个任选地被羟基或一个或多个卤素取代的至多6个碳原子的直链、支链或环状烷基取代，其中所述碳环通过单键或亚甲基或乙撑基连接基团连接R²的芳基或杂芳基，且其中当存在且选择为大于环丙基的碳环时，该碳环位于R²的芳基或杂芳基上的位置是相对于连接R²的芳基或杂芳基的氨基键的间位或对位；或

(v)单环、双环或螺环杂环，其可含有至多3个独立地选自N和O的杂原子且任选地及独立地被一个或多个任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环取代，其中所述杂环系通过单键或亚甲基或乙撑基连接基团连接R²的芳基或杂芳基，且其中当存在时，所述杂环位于R²的芳基上的位置是相对于连接所述芳基的氨基键的间位或对位；

R³为-H、-F或-Cl；

R⁴为-H或卤素或任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基；且

R⁵为-H或-F或任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基。

在一些实施方式中，R¹为C₁-C₅烷基或C₃-C₅碳环。

在一些实施方式中，R¹为-CH₃。

在一些实施方式中，R¹为环丙基。

在一些实施方式中，R¹为卤基。

在一些实施方式中，R¹为-Cl或-F。

在一些实施方式中，R²为任选地被下列的一个或多个取代的苯基或吡啶基：

(i)一个或多个卤素；

(ii)任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基，其中当选择为大于C₃的烷基时，烷基存在于R²的芳基或杂芳基上的位置是相对于连接R²的芳基或杂芳基的氨基键的间位或对位；

(iii)磺酰胺；

(iv)单环、双环或螺环碳环，其任选地被羟基、一个或多个卤素或一个或多个任选地被羟基或一个或多个卤素取代的至多6个碳原子的直链、支链或环状烷基取代，其中所述碳环系通过单键或亚甲基或乙撑基连接基团连接R²的芳基或杂芳基，且其中当存在且选择为大于环丙基的碳环时，该碳环在R²的芳基或杂芳基上的位置是相对于连接R²的芳基或杂芳基的氨基键的间位或对位；或

(v)单环、双环或螺环杂环，其可含有至多3个独立地选自N和O的杂原子且任选地及独立地被一个或多个任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环取代，其中所述杂环通过单键或亚甲基或乙撑基连接基团连接R²的芳基或杂芳基，且其中当存在时，所述杂环位于R²的芳基上的位置是相对于连接所述芳基的氨基键的间位或对位。

在一些实施方式中，R²为被下列的一个或多个取代的苯基或吡啶基：

(i)一个或多个卤素；

(ii)任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基，其中当选择为大于C₃的烷基时，该烷基存在于R²的芳基或杂芳基上的位置是相对于连接R²的芳基或杂芳基的氨基键的间位或对位；

(iii)磺酰胺；

(iv)单环、双环或螺环碳环，其任选地被羟基、一个或多个卤素或一个或多个任选地被羟基或一个或多个卤素取代的至多6个碳原子的直链、支链或环状烷基取代，其中所述碳环通过单键或亚甲基或乙撑基连接基团连接R²的芳基或杂芳基，且其中当存在且选择为大于环丙基的碳环时，该碳环在R²的芳基或杂芳基上的位置是相对于连接R²的芳基或杂芳基的氨基键的间位或对位；或

(v)单环、双环或螺环杂环，其可含有至多3个独立地选自N和O的杂原子且任选地及独立地被一个或多个任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环取代，其中所述杂环通过单键或亚甲基或乙撑基连接基团连接R²的芳基或杂芳基，且其中当存在时所述杂环在R²的芳基上的位置上是相对于连接所述芳基的氨基键的间位或对位。

在一些实施方式中，R²被一个或多个卤素取代。

在一些实施方式中，R²被磺酰胺取代。

在一些实施方式中，R²任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基取代，其中当选择为大于C₃的烷基时，该烷基存在于R²的芳基或杂芳基上的位置是相对于连接R²的芳基或杂芳基的氨基键的间位或对位。

在一些实施方式中，R²被单环、双环或螺环碳环取代，该碳环任选地被羟基、一个或多个卤素或一个或多个任选地被羟基或一个或多个卤素取代的至多6个碳原子的直链、支链或环状烷基取代，其中所述碳环通过单键或亚甲基或乙撑基连接基团连接R²的芳基或杂芳基，且其中当存在且选择为大于环丙基的碳环时，该碳环系在R²的芳基或杂芳基上的位置是相对于连接R²的该芳基或杂芳基的氨基键的间位或对位。

在一些实施方式中，R²被单环、双环或螺环杂环取代，该杂环可含有至多3个独立地选自N和O的杂原子且任选地及独立地被一个或多个任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环取代，其中所述杂环通过单键或亚甲基或乙撑基连接基团连接R²的该芳基或杂芳基，且其中当存在时，所述杂环在R²的该芳基上的位置是相对于连接所述芳基的氨基键的间位或对位。

在一些实施方式中，杂环为哌嗪基、吗啉基、哌啶基、二氮杂双环辛基、二氮杂双环庚基或氧杂环己烷基，其任选地及独立地被一个或多个任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基取代。

在一些实施方式中，杂环为

在一些实施方式中，连接R²的芳基或杂芳基的碳环或杂环通过单键或亚甲基连接基团连接R²的芳基或杂芳基。

在一些实施方式中，连接R²的芳基或杂芳基的碳环或杂环通过单键连接R²的该芳基或杂芳基。

在一些实施方式中，连接R²的芳基或杂芳基的碳环或杂环与R²的芳基或杂芳基连接在R²上的位置是相对于连接R²的氨基键的间位。

在一些实施方式中，连接R²的芳基或杂芳基的碳环或杂环与R²的芳基或杂芳基连接在R²上的位置是相对于连接R²的氨基键的对位。

在一些实施方式中，R²为：

其中：

R⁶为-H、-F、-Cl、或任选地及独立地被一个或多个卤素取代的C₁-C₃烷基或环丙基；

R^7A和R^7B中一者为-H且另一者为：

(i)卤素；

(ii)-SO₂NR^7F ₂，其中各R^7F独立为-H或至多4个碳原子的直链或支链烷基；

(iii)任选地被一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基；或

(iv)其中：

A为>N-或>C(H)-；

E为-O-、>N(R⁸)或>C(H)-R¹³；

R⁸为-H或任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；

R¹³为-H或任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；且

n为0、1或2，且

当E为>N(R⁸)时，X、Y和Z系如下所定义者：

Z为>CH₂，且X和Y系独立为>CH₂或>C(CH₃)₂，或X和Y两者都为>CH-且通过亚甲基或乙撑基桥连接在一起；或

Y为>CH₂或>C(CH₃)₂，且X和Z两者都为>CH-且通过亚甲基或乙撑基桥连接在一起，且

当E为-O-或>C(H)-R¹³时，X、Y和Z为>CH₂。

在一些实施方式中，R⁶为-H、-F、-Cl、-CH₃或-CF₃。

在一些实施方式中，n为0或1。

在一些实施方式中，n为0。

在一些实施方式中，R^7A和R^7B中一者为-H且另一者为：

在一些实施方式中，R³为-H。

在一些实施方式中，R³为-F或-Cl。

在一些实施方式中，R³为-F。

在一些实施方式中，R³为-Cl。

在一些实施方式中，R⁴为任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基。

在一些实施方式中，R⁴为卤素。

在一些实施方式中，R⁴为-CF₃。

在一些实施方式中，R⁴为-CH₃。

在一些实施方式中，R⁴为-H。

在一些实施方式中，R⁴为-Cl。

在一些实施方式中，R⁴为-F。

在一些实施方式中，R⁵为任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基。

在一些实施方式中，R⁵为-H。

在一些实施方式中，R⁵为-CH₃。

在一些实施方式中，R⁵为-CF₃。

在一些实施方式中，R⁵为-F或-Cl。

在一些实施方式中，式(I)的化合物为式(II)的化合物、或其药学上可接受的盐，其中：

R¹为-CH₃或-Cl；

R²为：

a)其中：

R^6A和R^6B中一者为-H且另一者为-H、-F、-Cl、-CH₃或CF₃；

R^7C和R^7D中一者为-H且另一者为：

(i)-F；

(ii)-Cl；

(iii)-SO₂NH₂；

(iv)环己基；

(v)叔丁基；或

(vi)

b)或

c)/>

R⁴为-H或-CH₃；且

R⁵为-H或-F。

在一些实施方式中，式(I)的化合物为式(III)的化合物、或其药学上可接受的盐，其中：

R^1A为甲基或环丙基；

R^6B为-H、-F或-Cl；且

R^7D和R^7E中一者为-H且另一者为下式的杂环：

在一些实施方式中，R^7D和R^7E中一者为-H且另一者为下式的杂环：

在某些实施方式中，例如式(I)、(II)、(III)和(IV)中任一者的化合物选自表1或表4中的化合物、或其药学上可接受的盐。

在一方面中，本发明提供式Int-A5化合物：

或其盐，其中R¹、R³和R⁴系如本发明所定义者。在一些实施方式中，R¹为甲基或氯。在一些实施方式中，R¹为甲基。在一些实施方式中，R¹为氯。在一些实施方式中，R³位于相对于R¹的间位，且为-H、-Cl或-F。在一些实施方式中，R⁴为-H、-CH₃或-F。本发明还提供制备Int-A5或其盐的方法，其包括

(a)提供式Int-A4化合物：

且使用钯催化的还原反应将叠氮官能团还原成氨基官能团，

其中：

R¹为C₁-C₅烷基或C₃-C₅碳环或卤素；

R³为-H、-F或-Cl；且

R⁴为-H、卤素或任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或C₃碳环。在一些实施方式中，该方法进一步包括通过将式Int-A3化合物：

用叠氮化钠处理，制备式Int-A4化合物的方法，其中R¹、R³和R⁴系如式Int-A4化合物所定义者。在一些实施方式中，该方法进一步包括通过将式Int-A2化合物：

用三氯氧化磷(phosphorousoxytrichloride)处理，制备式Int-A3化合物的方法，其中R¹、R³和R⁴系如式Int-A4化合物所定义者。在一些实施方式中，该方法进一步包括通过将式Int-A1化合物：

或其盐，在酸溶液中用亚硝酸钠处理，制备式Int-A2化合物的方法，其中R¹、R³和R⁴系如式Int-A4化合物所定义者。

在一实施方式中，式Int-A5化合物通过以下方法制备：通过经亚硝酸钠驱动的1-氨基-2-烷基酮芳基化合物Int-A1的环化，提供式Int-A2化合物，接着将其以POCl₃处理而转化成其氯类似物，以提供氯噌啉式Int-A3化合物，接着将其用叠氮化钠处理而转化成对应的式Int-A4的叠氮化物。经钯金属催化的式Int-A4化合物的还原提供式Int-A5化合物。

在另一方面中，本发明提供用于提供式Int-A5化合物的方法，其包括：

其中R¹、R³和R⁴系如本发明所定义者。

在一方面中，本发明提供式Int-B2化合物：

或其盐，其中R¹、R³、R⁴和R⁵系如本发明所定义者。在一些实施方式中，R¹为甲基或氯。在一些实施方式中，R³位于相对于R¹的间位，且为-H、-Cl或-F。在一些实施方式中，R⁴为-H、-CH₃或-F。在一些实施方式中，R⁵为-H、-CH₃或-F。

本发明还提供用于制备Int-B2化合物或其盐的方法，其包括：

(a)提供式IntB-1化合物：

且与式Int-A5化合物：

在钯偶联催化剂的存在下反应，其中：

R¹为C₁-C₅烷基或C₃-C₅碳环或卤素；

R³为-H、-F或-Cl；

R⁴为-H、卤素或任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基；且

R⁵为-H、-F或任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基。

因此，在一实施方式中，式Int-B2化合物通过氯嘧啶化合物Int-B1与氨基-噌啉化合物Int-A5的钯催化偶合制备，其中R¹、R³、R⁴和R⁵系如本发明所定义者。

在一方面中，本发明提供用于提供式Int-B2化合物的方法：

其中R¹、R³、R⁴和R⁵系如本发明所定义者。

其他的示例性化合物的制备在下文中提供。

在本发明的变量的任何定义中详述的化学基团列表包括该变量以任何单一基团或所列基团的组合的定义。对本发明的变量的实施方式的详述包括以任何单一实施方式或与任何其他实施方式或其部分组合的实施方式。本发明实施方式的详述包括以任何单一实施方式或与任何其他实施方式或其部分组合的实施方式。

药物组合物、组合、套件和施用

本发明提供药物组合物，其包括式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体或赋形剂。在某些实施方式中，本发明提供的药物组合物包括治疗和/或预防有效量的式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐。在某些实施方式中，药物组合物包括治疗有效量的式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐。本发明提供的药物组合物可进一步包括一种或多种额外的治疗剂(例如抗增殖剂，例如抗癌剂)。

本发明所描述的药物组合物可以药学领域已知的任何方法制备。这些制备方法通常包括使本发明所描述的化合物(亦即“活性成分”)与载体或赋形剂和/或一种或多种其他辅助成分结合，且若需要和/或要求时，接着将产品成形和/或包装成所需的单一剂量或多剂量单位。在一些实施方式中，药物组合物适合于经口施用。

可制备、包装和/或销售作为单一单位剂量和/或多个单一单位剂量的散装形式的药物组合物。“单位剂量”为包括预定量的活性成分的药物组合物的离散量。活性成分的量等于可施用受试者的活性成分的剂量和/或此剂量的合宜分量，诸如此剂量的二分之一或三分之一。

在本发明所描述的药物组合物中的活性成分(例如式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐)、药学上可接受的载体或赋形剂和/或任何额外成分的相对量将取决于例如被治疗的受试者特性、身型和/或病症及施用组合物的途径而定。组合物可以包括介于0.1％与100％(w/w)之间的活性成分。

在制造所提供的药物组合物所使用的药学上可接受的赋形剂包括惰性稀释剂、分散和/或造粒剂、表面活性剂和/或乳化剂、崩解剂、粘合剂、防腐剂、缓冲剂、润滑剂和/或油。赋形剂亦可存在于组合物中，诸如可可脂和栓剂蜡、着色剂、包衣剂、甜味剂、调味剂和/或芳香剂。

稀释剂的实例包括碳酸钙、碳酸钠、磷酸钙、磷酸二钙、硫酸钙、磷酸氢钙、磷酸钠、乳糖、蔗糖、纤维素、微晶纤维素、高岭土、甘露醇、山梨醇、肌醇、氯化钠、干燥淀粉、玉米淀粉、糖粉及其混合物。

造粒和/或分散剂的实例包括马铃薯淀粉、玉米淀粉、树薯淀粉、乙醇酸淀粉钠、黏土、海藻酸、瓜尔胶、柑橘渣、洋菜、膨土、纤维素和木制品、天然海绵、阳离子交换树脂、碳酸钙、硅酸盐、碳酸钠、经交联的聚(乙烯吡咯烷酮)(crospovidone)、羧甲基淀粉钠(乙醇酸淀粉钠)、羧甲基纤维素、经交联的羧甲基纤维素钠(croscarmellose)、甲基纤维素、预糊化淀粉(淀粉1500)、微晶淀粉、不溶于水的淀粉、羧甲基纤维素钙、硅酸镁铝(Veegum)、月桂基硫酸钠、四级铵化合物及其混合物。

表面活性剂和/或乳化剂的实例包括天然乳化剂(例如阿拉伯胶、洋菜、海藻酸、海藻酸钠、黄蓍树胶、软骨泥(chondrux)、胆固醇、黄原胶、果胶、明胶、蛋黄、酪蛋白、羊毛脂、胆固醇、蜡和卵磷脂)、胶态黏土(例如膨土(硅酸铝)和Veegum(硅酸镁铝))、长链氨基酸衍生物、高分子量醇(例如硬酯醇、鲸腊醇、油醇、三乙酸甘油单硬脂酸酯、乙二醇二硬脂酸酯、单硬脂酸甘油酯和丙二醇单硬脂酸酯、聚乙烯醇)、卡波姆(carbomer)(例如聚羧乙烯(carboxy polymethylene)、聚丙烯酸、丙烯酸聚合物和羧乙烯基聚合物)、鹿角菜胶、纤维素衍生物(例如羧甲基纤维素钠、粉末状纤维素、羟甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素)、山梨醇酐脂肪酸酯(例如聚氧乙烯山梨醇酐单月桂酸酯(20)、聚氧乙烯山梨醇酐(/>60)、聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯(/>80)、山梨醇酐单棕榈酸酯(/>40)、山梨醇酐单硬脂酸酯(/>60)、山梨醇酐三硬脂酸酯(/>65)、单油酸甘油酯、山梨醇酐单油酸酯(/>80)、聚氧乙烯酯(例如聚氧乙烯单硬脂酸酯(/>45)、聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚乙氧基化蓖麻油、聚甲醛硬脂酸酯和/>)、蔗糖脂肪酸酯、聚乙二醇脂肪酸酯(例如/>)、聚氧乙烯醚(例如聚氧乙烯月桂醚(/>30))、聚(乙烯吡咯烷酮)、二乙二醇单月桂酸酯、三乙醇胺油酸酯、油酸钠、油酸钾、油酸乙酯、油酸、月桂酸乙酯、月桂基硫酸钠、/>F-68、poloxamer P-188、溴化鲸蜡基三甲铵(cetrimoniumbromide)、氯化鲸蜡基吡啶鎓、氯化烷基二甲基苯甲铵(benzalkonium chloride)、多库酯钠(docusate sodium)和/或其混合物。

粘合剂的实例包括淀粉(例如玉米淀粉和淀粉糊)、明胶、糖(例如蔗糖、葡萄糖、右旋糖、糊精、糖蜜、乳糖、乳糖醇、甘露醇等)、天然和合成胶(例如阿拉伯胶、海藻酸钠、鹿角菜萃取物、潘瓦胶(panwar gum)、甘地胶(ghatti gum)、洋车前子果壳(isapol husk)胶浆、羧甲基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、微晶纤维素、乙酸纤维素、聚(乙烯吡咯烷酮)、硅酸镁铝和落叶松阿拉伯半乳聚糖(larch arabogalactan))、海藻酸盐、聚环氧乙烷、聚乙二醇、无机钙盐、硅酸、聚甲基丙烯酸酯、蜡、水、醇和/或其混合物。

防腐剂的实例包括抗氧化剂、螯合剂、抗微生物防腐剂、抗真菌防腐剂、抗原生动物防腐剂、醇防腐剂、酸性防腐剂和其他防腐剂。在某些实施方式中，防腐剂为抗氧化剂。在其他的实施方式中，防腐剂为螯合剂。

抗氧化剂的实例包括α生育酚、抗坏血酸、棕榈酸抗坏血酯(acorbyl palmitate)、丁基化羟基茴香醚、丁基化羟基甲苯、单硫甘油、偏二亚硫酸钾、丙酸、五倍子酸丙酯、抗坏血酸钠、亚硫酸氢钠、偏二亚硫酸钠和亚硫酸钠。

螯合剂的实例包括乙二胺四乙酸(EDTA)及其盐和水合物(例如依地酸(edetate)钠、依地酸二钠、依地酸三钠、依地酸钙二钠、依地酸二钾及类似者)、柠檬酸及其盐和水合物(例如柠檬酸单水合物)、反丁烯二酸及其盐和水合物、苹果酸及其盐和水合物、磷酸及其盐和水合物、酒石酸及其盐和水合物。抗微生物防腐剂包括氯化烷基二甲基苯甲铵、氯化苯铵(benzethonium chloride)、苯甲醇、泊诺帕(bronopol)、溴化十六基三甲铵、氯化鲸蜡基吡啶鎓、氯己定(chlorhexidine)、氯丁醇、氯甲酚、氯二甲酚、甲酚、乙醇、甘油、赫西替定(hexetidine)、咪唑啶脲(imidurea)、酚、苯氧基乙醇、苯乙醇、硝酸苯基汞、丙二醇和乙汞硫柳酸钠。

抗真菌防腐剂的实例包括对羟苯甲酸丁酯、对羟苯甲酸甲酯、对羟苯甲酸乙酯、对羟苯甲酸丙酯、苯甲酸、羟基苯甲酸、苯甲酸钾、山梨酸钾、苯甲酸钠、丙酸钠和山梨酸。

醇防腐剂的实例包括乙醇、聚乙二醇、酚、酚化合物、双酚、氯丁醇、羟基苯甲酸酯和苯乙醇。

酸性防腐剂的实例包括维生素A、维生素C、维生素E、β-胡萝卜素、柠檬酸、乙酸、去氢乙酸、抗坏血酸、山梨酸和植酸。

其他防腐剂包括生育酚、生育酚乙酸酯、甲磺酸去铁胺(deteroxime mesylate)、溴化鲸蜡基三甲铵、丁基化羟基茴香醚(BHA)、丁基化羟基甲苯(BHT)、乙二胺、月桂基硫酸钠(SLS)、月桂醚硫酸钠(SLES)、亚硫酸氢钠、偏二亚硫酸钠、亚硫酸钾、偏二亚硫酸钾、Plus、/>对羟苯甲酸甲酯、/>115、/>II、/> 和/>

缓冲剂的实例包括柠檬酸盐缓冲溶液、乙酸盐缓冲溶液、磷酸盐缓冲溶液、氯化铵、碳酸钙、氯化钙、柠檬酸钙、葡乳醛酸钙(calcium glubionate)、葡庚糖酸钙(calciumgluceptate)、葡萄糖酸钙、D-葡萄糖酸、甘油磷酸钙、乳酸钙、丙酸、乙酰丙酸钙、戊酸、磷酸氢二钙、磷酸、磷酸三钙、氢氧化磷酸钙、乙酸钾、氯化钾、葡萄糖酸钾、钾混合物、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、磷酸钾混合物、乙酸钠、碳酸氢钠、氯化钠、柠檬酸钠、乳酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸钠混合物、胺丁三醇、氢氧化镁、氢氧化铝、海藻酸、无热原水、等渗压盐水、林格氏溶液(Ringer's solution)、乙醇及其混合物。

润滑剂的实例包括硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸、二氧化硅、滑石、麦芽、萝酸甘油酯、氢化植物油、聚乙二醇、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠、白胺酸、月桂基硫酸镁、月桂基硫酸钠及其混合物。

天然油的实例包括扁桃(almond)油、杏仁(apricot kernel)油、酪梨油、棕榈仁油(babassu)、佛手柑油、黑加仑籽(black current seed)油、琉璃苣油、杜松油、黄金菊油、芥花油、香菜油、巴西棕榈油、蓖麻油、肉桂油、可可脂油、椰子油、鳕鱼肝油、咖啡油、玉米油、棉籽油、鸸鹋油、桉树油、月见草油、鱼油、亚麻籽油、香叶草醇油、葫芦油、葡萄籽油、榛果油、牛膝草油、肉豆蔻酸异丙酯油、荷荷芭(jojoba)油、夏威夷果油、醒目熏衣草(lavandin)油、熏衣草(lavender)油、柠檬油、山胡椒油、夏威夷豆(macademia nut)油、锦葵油、芒果籽油、白芒花籽(meadowfoam seed)油、貂油、肉荳蔻油、橄榄油、橙油、大西洋胸棘鲷(orangeroughy)油、棕榈油、棕榈果仁(palm kernel)油、桃仁油、花生油、罂粟籽油、南瓜籽油、菜籽油、米糠油、迷迭香油、红花油、檀香木油、山茶(sasquana)油、欧洲薄荷油、沙棘油、芝麻油、牛油树脂、聚硅氧油、大豆油、葵花油、茶树油、蓟油、桩油、香根草油、胡桃和小麦胚芽油。示例性合成油包括但不限于硬脂酸丁酯、辛酸三甘油酯、癸酸三甘油酯、环甲聚硅氧烷(cyclomethicone)、癸二酸二乙酯、二甲聚硅氧烷(dimethicone)360、肉豆蔻酸异丙酯、矿油、辛基十二醇、油醇、聚硅氧油及其混合物。

用于例如经口及肠胃外施用的液体剂型包括药学上可接受的乳液、微乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除了活性成分以外，液体剂型可包括本技术中常用的惰性稀释剂，诸如水或其他溶剂、增溶剂和乳化剂，诸如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苯甲酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(例如棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和山梨醇酐的脂肪酸酯及混合物。除了惰性稀释剂以外，经口组合物可包括佐剂，诸如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、调味剂和芳香剂。在用于肠胃外施用的特定的实施方式中，组合物可与增溶剂混合，诸如醇、油、改质油、二醇、聚山梨醇酯、环糊精、聚合物及其混合物。

可注射制剂(例如无菌可注射水性或含油悬浮液)可根据已知的技术使用适合的分散剂或润湿剂和悬浮剂配制。无菌可注射制剂可为在肠胃外可接受的无毒性稀释剂和/或溶剂中的无菌可注射溶液、悬浮液或乳液，例如在1,3-丁二醇中的溶液。在可使用的可接受的载体及溶剂的中，这些为水、林格氏溶液、U.S.P.和等渗氯化钠溶液。另外，无菌的不挥发油照惯例用作为溶剂或悬浮介质。出于此目的，可使用任何无刺激性的不挥发油，包括合成单甘油酯或二甘油酯。另外，脂肪酸(诸如油酸)可用于制备可注射物。

可将可注射制剂灭菌，例如通过保留细菌的过滤器过滤，或通过并入无菌固体组合物形式的灭菌剂，其在使用前可溶解或分散于无菌水或其他无菌可注射介质中。

为了延长药物的效应，常希望减慢自皮下或肌内注射的药物的吸收。这可通过使用水溶性差的结晶或无定形材料的液体悬浮液而实现。药物的吸收速率于是取决于其溶解速率而定，该溶解速率则可取决于晶体大小和结晶形式而定。另外可选地，推迟肠胃外给药的药物的吸收可通过将药物溶解或悬浮于油性载体中而实现。

经口给药的固体剂型包括胶囊、锭剂、丸剂、粉剂和颗粒剂。在这些固体剂型中，将活性成分与至少一种惰性、药学上可接受的赋形剂或载体(诸如柠檬酸钠或磷酸二钙)和/或(a)填充剂或增量剂，诸如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸，(b)粘合剂，诸如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶，(c)保湿剂，诸如甘油，d)崩解剂，诸如洋菜、碳酸钙、马铃薯或树薯淀粉、海藻酸、特定的硅酸盐和碳酸钠，(e)溶液阻滞剂，诸如石腊，f)吸收促进剂，诸如季铵化合物，g)湿润剂，诸如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯，h)吸收剂，诸如高岭土和膨土，及i)润滑剂，诸如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固态聚乙二醇、月桂基硫酸钠及其混合物混合。在胶囊、锭剂和丸剂的例子中，剂型亦可包括缓冲剂。

类似类型的固体组合物也可以用作使用诸如乳糖(lactose)或乳糖(milk sugar)以及高分子量聚乙二醇及类似者的赋形剂的软及硬填充式明胶胶囊中的填充剂。锭剂、糖衣药丸、胶囊、丸剂和颗粒剂的固体剂型可以制备成具有包衣及外壳，诸如肠溶衣和药理学技术中熟知的其他包衣。其可任选地包括遮光剂且可具有使其仅或优先地在肠道的特定部位任选地以延迟方式释放活性成分的组合物。可使用的包封组合物的实例包括聚合物质和蜡。类似类型的固体组合物也可以用作使用诸如乳糖或乳糖(milk sugar)以及高分子量聚乙二醇及类似者的赋形剂的软及硬填充式明胶胶囊中的填充剂。

活性成分可以使具有一种或多种如上所描述的赋形剂的微囊封形式。锭剂、糖衣药丸、胶囊、丸剂粒剂的固体剂型可以制备成具有包衣及外壳，诸如肠溶衣、释放控制型包衣和医药调配技术中熟知的其他包衣。在这些固体剂型中，活性成分可与至少一种惰性稀释剂掺合，诸如蔗糖、乳糖和淀粉。如常规的实施中，除了惰性稀释剂以外，这些剂型还可包括额外的物质，例如制锭润滑剂和其他制锭助剂，诸如硬脂酸镁和微晶纤维素。在胶囊、锭剂和丸剂的例子中，剂型可包括缓冲剂。这些剂型可任选地包括有遮光剂且可具有使其仅或优先地在肠道的特定部位任选地以延迟方式释放活性成分的组合物。可使用的囊封剂的实例包括聚合物质和蜡。

本发明所描述的化合物用于局部和/或经皮给药的剂型可包括软膏、糊剂、乳霜、洗剂、凝胶、粉剂、乳液、喷雾剂、吸入剂和/或贴片。活性成分通常在无菌条件下与药学上可接受的载体或赋形剂和/或任何需要的防腐剂和/或可依要求的缓冲剂掺合。另外，本公开预期使用经皮贴片，其常具有提供活性成分经控制递送至身体的额外的优点。这些剂型可通过例如将活性成分溶解和/或分散在适当的介质中来制备。另外可选地或额外地，速率可以通过提供速率控制膜和/或通过将活性成分分散在聚合物基质和/或凝胶中来控制。

适合于递送本发明所描述的皮内药物组合物的设备包括短针设备。皮内组合物可以限制针以有效穿透长度至皮肤内的设备施用。另外可选地或额外地，常规的注射器可用于皮内施用的典型的曼托(mantoux)方法中。经由液体射流注射器和/或经由刺穿角质层且产生到达真皮的射流的针以递送液体制剂至真皮的射流注射设备为合适的。使用压缩气体加速粉剂形式的化合物通过皮肤外层至真皮的冲击粉剂/粒子递送设备为合适的。

适合于局部给药的制剂包括但不限于液体和/或半液体制剂，诸如擦剂、洗剂、水包油和/或油包水乳液，诸如乳霜、软膏和/或糊剂和/或溶液和/或悬浮液。局部可给药的制剂可例如包括约1％至约10％(w/w)的活性成分，尽管活性成分的浓度可与活性成分于溶剂中的溶解度限度一样高。用于局部给药的制剂可进一步包括本发明所描述的额外成分的一个或多个。

用于直肠或阴道施用的组合物通常为栓剂，其可通过将本发明所描述的共轭体与适合的无刺激性赋形剂或载体(诸如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡)混合来制备，其在周围温度下为固体但在体温下为液体，且因此在直肠或阴道腔中熔融且释放活性成分。

本发明所描述的药物组合物可以适合于经由口腔的肺部施用的制剂的形式制备、包装和/或销售以的。这类制剂可包括干粒子，其包括活性成分且具有约约0.5至约7纳米或约1至约6纳米的范围内的直径。这些组合物方便地呈干粉剂形式，用于使用可引导推进剂流以分散粉剂的包括干粉剂储库的设备施用和/或使用自推进溶剂/粉剂分配容器施用，诸如包括溶解和/或悬浮在密封容器中的低沸点推进剂中的活性成分的设备。这些粉剂包括其中至少98重量％的粒子具有大于0.5纳米的直径及至少95％数目的粒子具有少于7纳米的直径的粒子。另外可选地至少95重量％的粒子具有大于1纳米的直径及至少90％数目的粒子具有少于6纳米的直径。干粉剂组合物可包括固体细粉剂稀释剂(诸如糖)且可方便地以单位剂型提供。

低沸点推进剂通常包括在大气压下沸点低于65°F的液体推进剂。推进剂通常可占组合物的50至99.9％(w/w)及活性成分可占组合物的0.1至20％(w/w)。推进剂可进一步包括额外的成分，诸如液体非离子和/或固体阴离子表面活性剂和/或固体稀释剂(其可具有与包括活性成分的粒子相同等级的粒度)。

配制成用于肺递送的本发明所描述的药物组合物可提供呈溶液和/或悬浮液微滴形式的活性成分。这些制剂可制备成包括活性成分的水性/或稀释的醇溶液和/或悬浮液、包装和/或销售，任选地为无菌的，且这些制剂可使用任何微粒化和/或雾化设备方便地施用。这些制剂可进一步包括一种或多种额外的成分，包括但不限于调味剂(诸如糖精钠)、挥发油、缓冲剂、表面活性剂和/或防腐剂，诸如羟苯甲酸甲酯。以此施用途径提供的微滴可具有约0.1至约200纳米的范围内的平均直径。

用于肺递送的本发明所描述的制剂用于经鼻腔内递送本发明所描述的药物组合物。适合于经鼻腔内施用的另一制剂为包括活性成分且具有约0.2至500微米的平均粒子的粗粉剂。此制剂通过自保持在靠近鼻孔的粉剂容器通过鼻道快速吸入而施用。

用于经鼻施用的制剂可例如包括约低至0.1％(w/w)至高至100％(w/w)的活性成分且可包括本发明所描述的额外的成分中的一种或多种。

可制备、包装和/或销售用于颊内施用的制剂的本发明所描述的药物组合物。这些制剂可使用常规的方法制成例如锭剂和/或菱形锭的形式，且可含有例如0.1至20％(w/w)的活性成分，其余部分包括经口可溶解的和/或可降解的组合物及任选的本发明所描述的额外的成分中的一种或多种。另外可选地用于颊内施用的制剂可包括粉剂和/或气雾化和/或雾化溶液和/或悬浮液，其包括活性成分。这些粉末化、气雾化和/或气雾化制剂在分散时可具有在约0.1至约200纳米的范围内的平均粒度和/或微滴大小，且可进一步包括本发明所描述的额外的成分中的一种或多种。

可制备、包装和/或销售用于眼内施用的制剂的本发明所描述的药物组合物。这些制剂可呈例如眼滴剂的形式，其包括例如在水性或油性液体载体或赋形剂中的0.1至1.0％(w/w)的活性成分溶液和/或悬浮液。这些滴剂可进一步包括缓冲剂、盐和/或一种或多种本发明所描述的其他额外的成分。有用的其他眼内可施用的制剂包括那些包括呈微晶形式和/或在脂质体制剂中的活性成分的制剂。预期耳滴剂和/或眼滴剂也在本公开的范围内。

尽管本发明提供的药物组合物的描述主要针对适合施用人类的药物组合物，但是本领域技术人员应理解这些组合物通常适合施用所有物种。为了使组合物适合施用各种动物，对适合施用人类的药物组合物的修饰为众所周知的，且一般技能的兽医药理学家可以通过常规实验设计和/或执行此修饰。

本发明所描述的治疗剂(例如本公开的化合物)或其组合物可以任何途径施用，包括经肠(经口)、肠胃外、静脉内、肌肉内、动脉内、脊髓内、鞘内腔、皮下、脑室内、经皮、皮内、直肠、阴道内、腹膜内、局部(以粉剂、软膏、乳霜和/或滴剂)、眼内、黏膜、鼻腔、颊内、舌下；以气管内滴入、支气管滴入和/或吸入；和/或作为经口喷雾剂、鼻喷雾剂和/或气雾剂。具体而言，预期的途径为经口施用、静脉内施用(例如全身性静脉内注射)、经由血液和/或淋巴供应的区域性施用和/或直接施用受影响的位点。最适当的施用途径通常将取决于各种因素而定，诸如药剂的性质(例如其在胃肠道环境中的稳定性)和/或受试者状况(例如受试者是否能够耐受于经口施用)。在一些实施方式中，药物组合物配置成用于经口施用。

在某些情况下，可能有利的是本公开的化合物(例如式I或其子式的化合物、或其药学上可接受的盐)与一种或多种额外的治疗剂组合施用。例如，可能有利的是本公开的化合物(例如式I或其子式的化合物、或其药学上可接受的盐)与一种或多种例如独立地选自下列的额外的治疗剂组合施用以治疗癌症：抗癌剂(例如化学治疗剂)、免疫疗法(例如免疫检查点抑制剂)、抗过敏剂、止吐剂、疼痛缓解剂、免疫调节剂和细胞保护剂。

用于组合疗法的组合物一起配制成药物组合，或提供用于单独施用(例如伴随在套件中)。因此，本发明提供包括本公开的化合物(例如式I或其子式的化合物、或其药学上可接受的盐)(例如治疗有效量的本公开的化合物)及一种或多种其他治疗剂(例如治疗有效量的一种或多种其他治疗剂)的药物组合。药物组合可进一步包括一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂，诸如本发明所描述的药学上可接受的载体或赋形剂中的一种或多种。用于本发明所描述的药物组合及套件的额外的治疗剂包括本发明识别的治疗剂中任一者，特别有关下文讨论的组合疗法。

治疗剂(诸如本发明所描述的化合物及组合物)通常配置成成容易施用及剂量均匀的单位剂型。然而，应理解这些剂型的整天使用量可由主治医师在健全的医学判断范围内决定。用于任何具体受试者或生物体的具体的治疗有效剂量水平将取决各种因素而定，包括例如正治疗的疾病和疾患的严重性；所使用的具体活性成分的活性；所使用的具体组合物；受试者的年龄、体重、一般健康、性别和饮食；所使用的具体活性成分的施用时间、施用途径和排泄速率；治疗的持续时间；与所使用的特定活性成分的组合或同时使用的药物；及在医疗技术中熟知的类似因素。

在组合物中实现有效量所需的治疗剂的确切量将因受试者而改变，其取决于例如受试者的物种、年龄和一般状况、副作用或疾患的严重性、具体化合物的特性、施用模型及类似者而定。有效量可包括在单一剂量(例如单一经口剂量)或多剂量(例如多个经口剂量)。在某些实施方式中，当多剂量施用于受试者或施用于组织或细胞时，多剂量中任何两个剂量可包括不同或实质上相同量的治疗剂，诸如本发明所描述的化合物。在某些实施方式中，当多剂量施用于受试者或施予组织或细胞时，对受试者施用多剂量或对组织或细胞施予多剂量的频率为每天三个剂量、每天两个剂量(例如BID)、每天一个剂量(例如QD)、每隔一天一个剂量、每三天一个剂量、每周一个剂量、每两周一个剂量、每三周一个剂量或每四周一个剂量。在某些实施方式中，对受试者施用多剂量或对组织或细胞施予多剂量的频率为每天一个剂量。在某些实施方式中，对受试者施用多剂量或对组织或细胞施予多剂量的频率为每天两个剂量。在某些实施方式中，对受试者施用多剂量或对组织或细胞施予多剂量的频率为每天三个剂量。在某些实施方式中，当多剂量施用受试者或施予组织或细胞时，在多剂量的第一剂量与最后剂量之间的持续时间为一天、两天、四天、一周、两周、三周、一个月、两个月、三个月、四个月、六个月、九个月、一年、两年、三年、四年、五年、七年、十年、十五年、二十年或受试者、组织或细胞的生命期。在某些实施方式中，在多剂量的第一剂量与最后剂量之间的持续时间为三个月、六个月或一年。在某些实施方式中，在多剂量的第一剂量与最后剂量之间的持续时间为受试者、组织或细胞的生命期。

在某些实施方式中，剂量(例如单一剂量或多剂量中任一剂量、单位剂型)独立地包括介于0.1μg与1μg之间、介于0.001mg与0.01mg之间、介于0.01mg与0.1mg之间、介于0.1mg与1mg之间、介于1mg与3mg之间、介于3mg与10mg之间、介于10mg与30mg之间、介于30mg与100mg之间、介于100mg与300mg之间、介于300mg与1,000mg或介于1g与10g(含)之间的本发明所描述的化合物。在某些实施方式中，剂量独立地包括介于1mg与3mg(含)之间的本发明所描述的化合物。在某些实施方式中，剂量独立地包括介于3mg与10mg(含)之间的本发明所描述的化合物。在某些实施方式中，剂量独立地包括介于10mg与30mg(含)之间的本发明所描述的化合物。在某些实施方式中，剂量独立地包括介于30mg与100mg(含)之间的本发明所描述的化合物。在某些实施方式中，剂量独立地包括介于10mg与250mg(含)之间的本发明所描述的化合物。在某些实施方式中，剂量独立地包括介于10mg与100mg之间(例如约45mg、约75mg、约90mg)(含)的本发明所描述的化合物。

例如，本发明所描述的药物组合物或组合可以是单位剂型的形式，其含有约1至约1000mg活性成分(例如用于约50至约70kg的受试者)或约1至约500mg、约1至约250mg、约1至约150mg、约0.5至约100mg、或约1至约50mg活性成分(例如用于约50至约70kg的受试者)。化合物、药物组合物或药物组合的治疗有效剂量取决于受试者的物种、受试者的体重、年龄和个别状况和正治疗的疾病、疾患或病症或其严重性而定。具有一般技能的医师、临床医师或兽医可轻易地确定预防或治疗疾病、疾患或病症进展所必要的活性成分中的各自的治疗有效量。

组合物也可以配制成向受试者递送特定的剂量。尤其取决于施用途径的剂量范围可为介于约0.1mg/kg至约500mg/kg受试者质量或介于约1mg/kg至约100mg/kg受试者质量。在一些实施方式中，剂量预计在1mg/Kg受试者质量至150mg/Kg受试者质量的范围内，例如至少约1mg/Kg、至少约10mg/Kg、至少约20mg/Kg、至少约30mg/Kg、至少约40mg/Kg、至少约50mg/Kg、至少约60mg/Kg、至少约70mg/Kg、至少约80mg/Kg、至少约90mg/Kg、至少约100mg/Kg、至少约110mg/Kg、至少约120mg/Kg、至少约130mg/Kg、至少约140mg/Kg或约150mg/Kg。

在一些实施方式中，本发明所描述的剂量范围提供对成人施用所提供的药物组合物的指导。要施用于例如儿童或青少年的量可以由执业医师或本领域技术人员确定且可低于或等于施用成人的量。

本公开还包括套件(例如药物包装)。所提供的套件可包括本公开的化合物或其药物组合物及容器(例如小瓶、安瓿、瓶子、注射器和/或分配器包装或其他适合的容器)。在一些实施方式中，所提供的套件可任选地另外包括第二容器，其包括用于稀释或悬浮内含在套件中的药物组合物或化合物的药物赋形剂。在一些实施方式中，提供在第一容器及第二容器中的本发明所描述的药物组合物或化合物经组合以形成单位剂型。

因此，在一个方面中，提供套件，其包括：包括本公开的化合物或其药物组合物的第一容器。在某些实施方式中，套件用于本发明所描述的方法中的一个或多个，例如用于治疗有其需要的受试者的疾病(例如增殖性疾病，诸如癌症)。在某些实施方式中，套件用于预防有其需要的受试者的疾病。在某些实施方式中，套件用于降低在有其需要的受试者中发展出疾病风险。

本发明所描述的套件可包括作为单独组合物或在包括本公开的化合物或其药物组合物的组合中的一种或多种本发明所描述的额外的治疗剂。

在某些实施方式中，本发明所描述的套件进一步包括使用套件的用法说明。本发明所描述的套件还可包括如由管理机构(诸如美国食品和药物管理局(FDA))要求的信息。在某些实施方式中，包括在套件中的信息为处方信息。

在本发明所描述的组合和/或套件中，本公开的化合物及其他治疗剂可由相同或不同的制造商制造和/或配制。而且，本公开的化合物及其他治疗剂可一起进入组合疗法中：(i)在释出组合产物给医师前(例如在包括本公开的化合物及其他治疗剂的套件的例子中)；(ii)在施用之后由医师(或在医师的指导下)进行；(iii)在患者自身中，例如在依序施用本公开的化合物及其他治疗剂期间。

供应用的药物组合物(或制剂)可取决于用于施用药物所述的方法而以各种方式包装。用于分配的物品通常包括使医药制剂以适当的形式存放于其中的容器。适合的容器为本领域技术人员熟知的且包括诸如瓶子(塑料和玻璃)、囊袋、安瓿、塑料袋、金属圆筒及类似者的材料。容器亦可包括防拆封装配(tamper-proof assemblage)以防止不慎触及包装内容物。另外，容器上贴有描述容器内容物的标签。标签亦可包括适当的警示语。

在一些实施方式中，在药物组合物中所提供的一种或多种治疗剂的浓度为少于100％、90％、80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％、19％、18％、17％、16％、15％,14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％、0.4％、0.3％、0.2％、0.1％、0.09％、0.08％、0.07％、0.06％、0.05％、0.04％、0.03％、0.02％、0.01％、0.009％、0.008％、0.007％、0.006％、0.005％、0.004％、0.003％、0.002％、0.001％、0.0009％、0.0008％、0.0007％、0.0006％、0.0005％、0.0004％、0.0003％、0.0002％或0.0001％w/w、w/v或v/v。

在一些实施方式中，在药物组合物中所提供的一种或多种治疗剂的浓度为大于90％、80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％、19.75％、19.50％、19.25％、19％、18.75％、18.50％、18.25％、18％、17.75％、17.50％、17.25％、17％、16.75％、16.50％、16.25％、16％、15.75％、15.50％、15.25％、15％、14.75％、14.50％、14.25％、14％、13.75％、13.50％、13.25％、13％、12.75％、12.50％、12.25％、12％、11.75％、11.50％、11.25％、11％、10.75％、10.50％、10.25％、10％、9.75％、9.50％、9.25％、9％、8.75％、8.50％、8.25％、8％、7.75％、7.50％、7.25％、7％、6.75％、6.50％、6.25％、6％、5.75％、5.50％、5.25％、5％、4.75％、4.50％、4.25％、4％、3.75％、3.50％、3.25％、3％、2.75％、2.50％、2.25％、2％、1.75％、1.50％、125％、1％、0.5％、0.4％、0.3％、0.2％、0.1％、0.09％、0.08％、0.07％、0.06％、0.05％、0.04％、0.03％、0.02％、0.01％、0.009％、0.008％、0.007％、0.006％、0.005％、0.004％、0.003％、0.002％、0.001％、0.0009％、0.0008％、0.0007％、0.0006％、0.0005％、0.0004％、0.0003％、0.0002％或0.0001％w/w、w/v或v/v。

在一些实施方式中，在药物组合物中所提供的一种或多种治疗剂的浓度在下列范围内：约0.0001％至约50％、约0.001％至约40％、约0.01％至约30％、约0.02％至约29％、约0.03％至约28％、约0.04％至约27％、约0.05％至约26％、约0.06％至约25％、约0.07％至约24％、约0.08％至约23％、约0.09％至约22％、约0.1％至约21％、约0.2％至约20％、约0.3％至约19％、约0.4％至约18％、约0.5％至约17％、约0.6％至约16％、约0.7％至约15％、约0.8％至约14％、约0.9％至约12％、约1％至约10％w/w、w/v或v/v。

在一些实施方式中，在药物组合物中所提供的一种或多种治疗剂的浓度在下列范围内：约0.001％至约10％、约0.01％至约5％、约0.02％至约4.5％、约0.03％至约4％、约0.04％至约3.5％、约0.05％至约3％、约0.06％至约2.5％、约0.07％至约2％、约0.08％至约1.5％、约0.09％至约1％、约0.1％至约0.9％w/w、w/v或v/v。

治疗方法及用途

如本发明所示，本公开的化合物为活化素受体样激酶(例如ALK-5)抑制剂。在一些实施方式中，本发明所提供的化合物用于治疗和/或预防受试者(例如有其需要的受试者)的疾病(例如纤维化疾病，例如IPF或心脏纤维化或与TGFβ信号传导相关联的心脏病，及增殖性疾病(例如癌症))、抑制受试者(例如有其需要的受试者)的肿瘤生长、或抑制活化素受体样激酶(例如ALK-5)在体外或体内的活性。在一些实施方式中，本公开的化合物可用于和缓、预防或提供治疗予病症和/或疾病，其进展由或利用使疾病进展的TGFβ信号传导驱动，如本发明所详述。

本发明提供治疗和/或预防(例如治疗)受试者(例如有其需要的受试者)中本发明所描述的疾病、疾患或病症(例如以其本身或与感染性、炎症性或增殖性疾病(良性或恶性)共病存在的纤维化疾病、或增殖性疾病(例如癌症))的方法，该方法包括向受试者施用治疗和/或预防有效量(例如治疗有效量)的式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。本发明还提供用于治疗和/或预防本发明所描述的疾病、疾患或病症(例如以其本身或与感染性、炎症性或增殖性疾病(良性或恶性)共病存在的纤维化疾病、或增殖性疾病(例如癌症))的式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐、及其药物组合物。本发明还提供式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐、及其药物组合物用于制造药物的用途，该药物用于治疗和/或预防本发明所描述的疾病、疾患或病症(例如以其本身或与感染性、炎症性或增殖性疾病(良性或恶性)共病存在的纤维化疾病、或增殖性疾病(例如癌症))。在某些实施方式中，疾病、疾患或病症为与例如受试者或细胞中的活化素受体样激酶(例如ALK-5)活性相关联的疾病、疾患或病症。在某些实施方式中，活性为异常的(例如增加的)活化素受体样激酶(例如ALK-5)活性。

在某些实施方式中，疾病、疾患或病症为增殖性疾病。本发明提供用于治疗受试者(例如有其需要的受试者)中增殖性疾病(例如癌症)的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。本发明还提供用于治疗增殖性疾病(例如癌症)的式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐、及其药物组合物。本发明还提供式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐、及其药物组合物用于制造药物的用途，该药物用于治疗增殖性疾病(例如增殖性疾病，例如癌症)。在某些实施方式中，增殖性疾病与例如受试者或细胞中的活化素受体样激酶(例如ALK-5)活性相关联。在某些实施方式中，活性为异常或增加的活化素受体样激酶(例如ALK-5)活性。

“增殖性疾病”指由于细胞繁殖的异常生长或延伸而发生的疾病(Walker,Cambridge Dictionary of Biology；Cambridge University Press:Cambridge,UK,1990)。增殖性疾病可能与以下者相关联：(1)正常的静止细胞的病理性增生；(2)细胞自其正常位置的病理性迁移(例如肿瘤细胞转移)；(3)蛋白水解酶的病理性表达，诸如基质金属蛋白酶(例如胶原酶、明胶酶和弹性蛋白酶)；或(4)如在增殖性视网膜病变及肿瘤转移中的病理性血管生成。示例性增殖性疾病包括癌症(即“恶性肿瘤”)、良性肿瘤、血管生成、炎症性疾病和自体免疫性疾病。

术语“肿瘤(neoplasm)”及“肿瘤(tumor)”在本发明可互换使用且指异常的组织肿块，其中肿块的生长超越正常组织的生长且与其不协调。肿瘤(neoplasm及tumor)可取决于例如以下特征而为“良性”或“恶性”：细胞分化程度(包括形态和功能)、生长速率、局部侵入及转移。

“良性肿瘤”通常有良好的分化、在特征上具有比恶性肿瘤慢的生长且保持定位于起源位点。另外，良性肿瘤不具有浸润、侵入或转移至远程的能力。良性肿瘤的实例包括但不限于脂肪瘤、软骨瘤、腺瘤、垂疣、老年血管瘤、漏脂性角化病、斑痣和皮脂腺增生症。在一些例子中，特定的“良性”肿瘤后来可能引起恶性肿瘤，其可能起因于肿瘤的肿瘤细胞亚群的额外的基因变化，且这些肿瘤被称为“癌变前期肿瘤”。癌变前期肿瘤的实例为畸胎瘤。

相反地，“恶性肿瘤”通常为分化不良(间变性)且在特征上具有伴随着进行性浸润、侵入及周围组织破坏的快速生长。此外，恶性肿瘤通常具有转移至远程的能力。术语“转移(metastasis)”、“转移(metastatic)”或“转移(metastasize)”指癌细胞自原发性或原始肿瘤扩散或迁移至另一个器官或组织，且通常以原发性或原始肿瘤的组织类型的“继发性肿瘤”或“继发性细胞肿块”的存在识别，而不以继发性(转移性)肿瘤所在的器官或组织识别。

在某些实施方式中，要治疗的疾病、疾患或病症为癌症。本发明提供治疗受试者(例如有其需要的受试者)的癌症的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的本公开的化合物(例如例示性化合物的一个或多个)、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。在一些实施方式中，化合物为式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如化合物Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或其药学上可接受的盐。本发明还提供用于治疗癌症的式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或其药学上可接受的盐、及其药物组合物，例如化合物Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或其药学上可接受的盐。本发明还提供式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或其药学上可接受的盐、及其药物组合物用于制造药物的用途，该药物用于治疗癌症。

在某些实施方式中，癌症与受试者或细胞中的活化素受体样激酶(例如ALK-5)活性相关联。在某些实施方式中，癌症与受试者或细胞中的ALK-5活性相关联。在某些实施方式中，活性为增加的(例如异常的)活化素受体样激酶(例如ALK-5)活性。

在某些实施方式中，癌症表达或具有突变的叉头盒L2(FOXL2)和/或FOXL2(例如FOXL2^C134W)。FOXL2^C134W具有约97％的AGCT(罕见的卵巢癌亚型(>5％))的特征。表达或具有突变的FOXL2的癌症的实例为卵巢癌(例如AGCT)。其他的性索间质瘤，诸如JGCT、卵泡膜细胞瘤、SLCT、雄性AGCT和半阴阳胚细胞瘤为表达或具有突变的FOXL2和/或FOXL2的癌症的其他实例。

在一些实施方式中，本发明提供用于治疗癌症(例如卵巢癌，诸如成人型粒层细胞瘤)的方法，其包括确定受试者是否携有FOXL2突变(例如FOXL2^C134W)，且如果受试者经识别具有FOXL2突变，则用治疗有效量的本公开的化合物，例如式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58中的一种或多种、或前述者的药学上可接受的盐、或其组合物治疗受试者。

在一些实施方式中，癌症具有FOXL2驱动的肿瘤生长。

在一些实施方式中，癌症与升高的pSmad2和/或αVβ6和/或α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平相关联。在一些实施方式中，癌症与升高的磷酸化SMAD 2(pSMAD2)或α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平相关联。

除了FOXL2突变体(例如FOXL2^C134W)、pSMAD2、αVβ6和α-SMA以外，可预测(例如且用作为患者的选择标准)和/或可指示(例如且用于治疗期间和/或的后评定一些治疗观点)本文公开的治疗功效的其他生物标记包括CD31(例如升高的CD31水平)、CD45(例如升高的CD45水平)和/或HLA(例如低水平的HLA)。

在一些实施方式中，癌症表现排除(excluded)或沙漠(desert)表型。

术语“癌症”指以不受控制地增殖且具有浸润及破坏正常身体组织的能力的异常细胞发展为特征的疾病类别。在某些实施方式中，癌症为实体瘤。在某些实施方式中，癌症为血液癌。

各种广泛的癌症，包括实体瘤、白血病、淋巴瘤和骨髓瘤均适合于本发明所公开的方法。在一些实施方式中，癌症为实体瘤癌症。在一些实施方式中，癌症包括实体瘤(例如结肠直肠、乳房、前列腺、肺、胰脏、肾或卵巢肿瘤)。因此，在一些实施方式中，癌症为实体瘤癌症。在一些实施方式中，癌症选自下列的一个或多个：肺系统癌、脑癌、胃肠道癌、皮肤癌、生殖泌尿道癌、头颈癌、肉瘤、癌和神经内分泌癌。在各种实施方式中，实体瘤癌症为乳腺癌、膀胱癌、子宫内膜癌、食管癌、肝癌、胰腺癌、肺癌、宫颈癌、结肠癌、结直肠癌、胃癌、肾癌、卵巢癌、前列腺癌、睾丸癌、子宫癌、病毒诱导的癌症、黑色素瘤或肉瘤。在一些实施方式中，癌症为膀胱癌。在一些实施方式中，癌症为肺癌(例如非小细胞肺癌)。在其他的实施方式中，癌症为肝癌。在一些实施方式中，癌症为肉瘤、膀胱癌或肾癌。在一些实施方式中，癌症为胃癌。在一些实施方式中，癌症为乳腺癌。在一些实施方式中，癌症为卵巢癌。在一些实施方式中，癌症为胰腺癌。在一些实施方式中，癌症为间皮瘤。在一些实施方式中，癌症为前列腺癌(例如去势抗性前列腺癌、去势敏感性前列腺癌)。在其他的实施方式中，癌症为膀胱癌、胰腺癌、结直肠癌、胶质母细胞瘤、肾癌、非小细胞肺癌、前列腺癌、肉瘤、皮肤癌、甲状腺癌、睾丸癌或外阴癌。在一些实施方式中，癌症为子宫内膜癌、胰腺癌、睾丸癌、肾癌、黑色素瘤、结直肠癌、甲状腺癌、膀胱癌、胰腺癌、外阴癌、肉瘤、前列腺癌、肺癌或肛门癌。在一些实施方式中，癌症为肉瘤。在一些实施方式中，癌症为肾细胞癌。在某些实施方式中，癌症为卵巢粒层细胞瘤(例如成人型粒层细胞瘤(AGCT)、幼儿粒层细胞瘤)。

在一些实施方式中，癌症为非实体瘤癌症。在一些实施方式中，癌症为血液癌。可根据本发明所描述所述的方法治疗的血液癌包括白血病(例如急性白血病、慢性白血病)、淋巴瘤(例如B细胞淋巴瘤、T细胞淋巴瘤)和多发性骨髓瘤。在一些实施方式中，血液癌选自多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征(MDS)、急性骨髓性白血病(AML)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、急性淋巴细胞性白血病、淋巴球性淋巴瘤、蕈状肉芽肿、慢性淋巴原白血病、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、套细胞淋巴瘤、弥漫型大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤或骨髓纤维化。

根据本发明所描述所述的方法可治疗的癌症的实例包括但不限于乳腺癌、前列腺癌和结肠癌；所有形式的肺支气管癌；骨髓性；黑色素瘤；肝肿瘤；神经母细胞瘤；乳头状瘤；脱羧细胞瘤(apudoma)；迷行瘤；鳃瘤；恶性类癌综合征；类癌心脏病；和癌(例如华克(Walker)癌、基底细胞癌、嗜碱性鳞状癌、布朗-皮西(Brown-Pearce)二氏上皮癌、管癌、艾利希氏瘤、Krebs 2、莫克尔氏细胞、粘液素癌、肺癌(例如大细胞肺癌，诸如鳞状细胞癌、非小细胞肺癌)、燕麦状细胞癌、乳头状癌、硬癌、细支气管癌、支气管原性癌、鳞状细胞癌和移行细胞癌)。根据本发明所描述所述的方法可治疗的癌症的额外实例包括但不限于组织细胞疾患；白血病；恶性组织细胞增多病；霍奇金氏病；嗜伊红性白过多症、免疫增生性小；非霍奇金氏淋巴瘤；浆细胞瘤；网状内皮细胞增生症；黑色素瘤；软骨胚细胞瘤；软骨瘤；软骨肉瘤；隆突性皮肤纤维肉瘤、纤维化癌(骨髓纤维化、胰腺癌(例如胰腺导管腺癌)、肾癌、肝癌、肺癌(例如大细胞肺癌，诸如鳞状细胞癌)、乳腺癌(例如炎症性乳腺癌)、卵巢癌(例如高分化浆液性卵巢癌)、子宫内膜癌、子宫癌、子宫肉瘤(例如子宫平滑肌肉瘤)、肾细胞癌、肉瘤(例如软组织肉瘤)、恶性纤维性组织细胞瘤、纤维肉瘤(例如隆突性皮肤纤维肉瘤)和肝细胞癌)；纤维瘤；纤维肉瘤；巨细胞瘤；组织细胞瘤；脂肪瘤；脂肪肉瘤；间皮瘤；黏液瘤；黏液肉瘤；骨瘤；骨肉瘤；儿科恶性肿瘤、脊索瘤；颅咽管瘤；恶性胚胎瘤；错构瘤；间叶瘤；中肾瘤；肌肉瘤；釉质母细胞瘤；齿垩质瘤；齿瘤；畸胎瘤；胸腺瘤；滋养层细胞肿瘤。再者，亦预期以下类型的癌症为可顺从于治疗：腺瘤；胆管瘤；胆硬脂瘤；圆柱瘤；囊腺癌；囊腺瘤；粒层细胞瘤；半阴阳胚细胞瘤；肝细胞癌、肝肿瘤；汗腺瘤；胰岛细胞瘤；莱迪希氏细胞瘤；乳头状瘤；赛特利细胞瘤；滤泡膜细胞瘤；平滑肌瘤；平滑肌肉瘤；肌胚细胞瘤；肌瘤；肌肉瘤；横纹肌瘤；横纹肌肉瘤；室管膜瘤；神经节细胞瘤；神经胶瘤；神经管胚细胞瘤；脑脊髓膜瘤；神经鞘瘤；神经母细胞瘤；神经上皮细胞瘤；神经纤维瘤；神经瘤；副神经节瘤；非嗜铬性副神经节瘤。根据本发明所描述所述的方法可治疗的癌症的又更多实例包括但不限于血管角化瘤；血管淋巴样增生伴嗜酸性球增多症；硬化性血管瘤；血管瘤病；球块状血管瘤；血管内皮瘤；血管瘤；血管外皮细胞瘤；血管肉瘤；淋巴管瘤；淋巴管肌瘤；淋巴管肉瘤；松果体瘤；癌肉瘤；软骨肉瘤；叶状囊肉瘤；纤维肉瘤；血管肉瘤；平滑肌肉瘤；白血病性肉瘤；脂肪肉瘤；淋巴管肉瘤；肌肉瘤；黏液肉瘤；卵巢癌；横纹肌肉瘤；肉瘤；赘瘤；神经纤维瘤病；及子宫颈发育不良。

根据本发明所描述所述的方法可治疗的癌症的更多实例包括但不限于急性成淋巴细胞性白血病(ALL)；急性骨髓性白血病(AML)；肾上腺皮质癌；儿童肾上腺皮质癌；AIDS相关癌症(例如卡波西(Kaposi)肉瘤、AIDS相关淋巴瘤、原发性CNS淋巴瘤)；肛门区癌；肛门癌；阑尾癌；儿童星状细胞瘤；非典型畸胎瘤/横纹肌瘤，儿童，中枢神经统(CNS)；CNS赘瘤(例如原发性CNS淋巴瘤、脊髓轴瘤、神经管胚细胞瘤、脑干神经胶瘤或脑下垂体腺瘤)、巴瑞特(Barrett)氏食管(例如癌变前期综合征)和蕈状肉芽肿、皮肤的基底细胞癌；胆管癌；膀胱癌；儿童膀胱癌；骨癌(包括尤恩(Ewing)肉瘤、骨肉瘤和恶性纤维性组织细胞瘤)；脑肿瘤/脑癌；乳腺癌；伯基特氏(Burkitt)淋巴瘤；类癌肿瘤(胃肠道)；儿童类癌瘤；儿童心脏性(心脏)肿瘤；儿童胚胎肿瘤；儿童生殖细胞肿瘤；原发性CNS淋巴瘤；宫颈癌；儿童宫颈癌；胆管癌；儿童脊索瘤；慢性淋巴细胞性白血病(CLL)；慢性骨髓性白血病(CML)；慢性骨髓增生性赘瘤；结直肠癌；儿童结直肠癌；儿童颅咽管瘤；皮肤T细胞淋巴瘤(例如蕈状肉芽肿和塞泽里(Sézary)综合征)；管原位癌(DCIS)；儿童胚胎肿瘤、中枢神经统；内分泌统癌(例如甲状腺、胰脏、副甲状腺或肾上腺的癌)、子宫内膜癌(子宫癌)；儿童室管膜瘤；食管癌；儿童食管癌；敏感性神经母细胞瘤；尤恩肉瘤；儿童性腺外生殖细胞瘤；性腺外生殖细胞瘤；眼癌；儿童眼球内黑色素瘤；眼球内黑色素瘤；视网膜母细胞瘤；输卵管癌；恶性骨纤维性组织细胞瘤和骨肉瘤；胆囊癌；胃(Gastric)(胃(Stomach))癌；儿童胃(胃)癌；胃肠道类癌瘤；胃肠道间质瘤(GIST)；儿童胃肠道间质瘤；生殖细胞肿瘤；儿童中枢神经统生殖细胞肿瘤(例如儿童性腺外生殖细胞瘤、性腺外生殖细胞瘤、卵巢生殖细胞瘤、睾丸癌)；妊娠性滋养层细胞疾病；妇科癌(例如子宫肉瘤、输卵管的癌、子宫内膜的癌、子宫颈的癌、阴道的癌或外阴的癌)、毛细胞白血病；头颈癌；儿童心脏肿瘤；肝细胞(肝)癌；组织细胞增多病，兰格汉氏细胞；霍奇金氏淋巴瘤；咽下癌；皮肤或眼球内黑色素瘤；儿童眼球内黑色素瘤；胰岛细胞瘤；胰脏神经内分泌瘤；卡波西肉瘤；肾(肾细胞)癌；兰格汉氏细胞组织细胞增生症；喉癌；白血病；唇癌和口腔癌；肝癌；肺癌(非小细胞和小细胞)；儿童肺癌；淋巴瘤；男性乳腺癌；骨的恶性纤维性组织细胞瘤和骨肉瘤；黑色素瘤；儿童黑色素瘤；眼球内(眼)黑色素瘤；儿童眼球内黑色素瘤；莫克尔氏细胞癌；恶性间皮瘤；儿童间皮瘤；转移癌；伴随隐匿原发性的转移性鳞状颈癌；伴随NUT基因改变的中线道癌；口腔癌；多发性内分泌肿瘤综合征；多发性骨髓瘤/浆细胞赘瘤；蕈状肉芽肿；骨髓增生异常综合征；骨髓发育不良/骨髓增生性赘瘤；慢性骨髓性白血病(CML)；急性骨髓性白血病(AML)；慢性骨髓增生性赘瘤；鼻腔和副鼻窦癌；鼻咽癌；神经母细胞瘤；非霍奇金氏淋巴瘤；非小细胞肺癌；口腔癌、唇与口腔癌和口咽癌；骨肉瘤和骨的恶性纤维性组织细胞瘤；卵巢癌；儿童卵巢癌；胰腺癌；儿童胰腺癌；胰脏神经内分泌瘤；乳头状瘤症(儿童喉)；副神经节瘤；儿童副神经节瘤；副鼻窦和鼻腔癌；副甲状腺癌；阴茎癌；咽癌；嗜铬细胞瘤；儿童嗜铬细胞瘤；脑下垂体肿瘤；浆细胞赘瘤/多发性骨髓瘤；胸膜肺母细胞瘤；妊娠癌和乳腺癌；原发性中枢神经统(CNS)淋巴瘤；原发性腹膜癌；前列腺癌；直肠癌；复发性癌症；肾细胞(肾)癌；视网膜母细胞瘤；儿童横纹肌肉瘤；唾液腺癌；肉瘤(例如儿童横纹肌肉瘤、儿童血管瘤、尤恩肉瘤、卡波西肉瘤、骨肉瘤(骨癌)、软组织肉瘤、子宫肉瘤)；塞泽里综合征；皮肤癌；儿童皮肤癌；小细胞肺癌；小腺癌；软组织肉瘤；皮肤鳞状细胞癌；伴随隐匿原发性的转移性鳞状颈癌；胃(Gastric)(胃(Stomach))癌；儿童胃(胃)癌；皮肤T细胞淋巴瘤(例如蕈状肉芽肿和塞泽里综合征)；睾丸癌；儿童睾丸癌；喉癌(例如鼻咽癌、口咽癌、咽下癌)；胸腺瘤和胸腺癌；甲状腺癌；肾盂和输尿管移行细胞癌；输尿管和肾盂(例如肾细胞癌、肾盂癌)、良性前列腺肥大、副甲状腺癌、移行细胞癌；尿道癌；子宫内膜性子宫癌；子宫肉瘤；阴道癌；儿童阴道癌；血管瘤；外阴癌；及威尔姆(Wilms)瘤和其他儿童肾脏肿瘤。

前述癌症的转移也可以依照本发明所描述所述的方法治疗。在一些实施方式中，癌症为转移前癌症。在一些实施方式中，癌症为转移癌。

在某些实施方式中，癌症为血液癌(例如白血病(例如急性淋巴细胞性白血病(ALL)(例如B细胞ALL、T细胞ALL)、急性骨髓性白血病(AML)(例如B细胞AML、T细胞AML)、慢性骨髓性白血病(CML)(例如B细胞CML、T细胞CML)、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)(例如B细胞CLL、T细胞CLL))；淋巴瘤(例如霍奇金氏淋巴瘤(HL)(例如B细胞HL、T细胞HL))、非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(例如B细胞NHL，诸如弥漫型大细胞淋巴瘤(DLCL)(例如弥漫型大B细胞淋巴瘤))、滤泡性淋巴瘤、慢性淋巴细胞性白血病/小淋巴球性淋巴瘤(CLL/SLL)、套细胞淋巴瘤(MCL)、缘带B细胞淋巴瘤(例如黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤、结节性缘带B细胞淋巴瘤、脾脏缘带B细胞淋巴瘤)、原发性纵隔B细胞淋巴瘤、伯基特氏淋巴瘤、淋巴浆细胞淋巴瘤(亦即瓦登斯特隆氏巨球蛋白血症)、毛细胞白血病(HCL)、免疫母细胞大细胞淋巴瘤、前体B淋巴母细胞淋巴瘤和原发性中枢神经统(CNS)淋巴瘤、T细胞NHL，诸如前体T淋巴母细胞淋巴瘤/白血病、周边T细胞淋巴瘤(PTCL)(例如皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)(例如蕈状肉芽肿、塞泽里综合征))、血管免疫母细胞T细胞淋巴瘤、结外自然杀手T细胞淋巴瘤、肠病变型T细胞淋巴瘤、皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤、退行性大细胞淋巴瘤)；重链蛋白质病(例如α链病、γ链病、μ链病)；骨髓增生性疾患(MPD)(例如真性红血球增多症(PV)、自发性血小板增多症(ET)、特发性髓样化生(AMM)a.k.a.骨髓纤维化(MF)、慢性自发性骨髓纤维化、慢性骨髓性白血病(CML)、慢性嗜中性球白血病(CNL)、嗜伊红性白血球增多综合征(HES))；多发性骨髓瘤(MM)；浆细胞赘瘤形成；家族性嗜伊红性白过多症；炎症性肌纤维母细胞瘤；免疫细胞类淀粉变性症)。在某些实施方式中，癌症为白血病。在某些实施方式中，癌症为急性成淋巴细胞性白血病(ALL)。在某些实施方式中，癌症为早期前体T细胞(ETP)-急性成淋巴细胞性白血病(ALL)。

在某些实施方式中，癌症为间变性星状细胞瘤、胰腺癌、皮肤癌、黑色素瘤、转移性黑色素瘤、结直肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肾癌、肝细胞癌、卵巢癌、HPV相关性癌症(例如宫颈癌、口咽癌、肛门癌、外阴/阴道癌和阴茎癌)、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征或骨髓纤维化。

在某些实施方式中，癌症为肝癌(例如肝细胞癌(HCC)(例如肝细胞癌、肝母细胞瘤、肝细胞腺瘤)、恶性肝肿瘤、血管瘤、胆道癌(例如胆管癌))。在其中癌症为肝癌的一些实施方式中，其为肝细胞癌(HCC)。在一些实施方式中，癌症为肺癌(例如非小细胞肺癌(NSCLC))。在一些实施方式中，癌症为脑癌(例如神经母细胞瘤、胶质母细胞瘤)。在其中癌症为脑癌的一些实施方式中，其为间变性星状细胞瘤。在一些实施方式中，癌症为甲状腺癌(例如间变性甲状腺癌(ATC))。在一些实施方式中，癌症为乳腺癌。在一些实施方式中，癌症为肾癌。在一些实施方式中，癌症为卵巢癌。在一些实施方式中，癌症为HPV相关性癌症，例如HPV相关性宫颈癌、HPV相关性口咽癌、HPV相关性肛门癌、HPV相关性外阴/阴道癌和HPV相关性阴茎癌。在一些实施方式中，癌症为结直肠癌(例如结肠癌)。在一些实施方式中，癌症为胰腺癌(例如胰腺癌)。在其中癌症为胰腺癌的一些实施方式中，其为胰腺导管腺癌及相关性纤维化CAF。在一些实施方式中，癌症为皮肤癌。在其中癌症为皮肤癌的一些实施方式中，其为转移性黑色素瘤。在一些实施方式中，癌症为前列腺癌。

在一些实施方式中，增殖性疾病为血液癌(例如间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)、骨髓增生异常综合征、多发性骨髓瘤和骨髓纤维化)。

在某些实施方式中，癌症为肌肉骨骼癌(例如骨癌(例如骨肉瘤、骨样骨瘤、恶性纤维性组织细胞瘤、尤恩肉瘤、脊索瘤、恶性巨细胞肿瘤脊索瘤、软骨肉瘤骨软骨瘤、良性软骨瘤、软骨胚细胞瘤、软骨黏液纤维瘤、骨髓增生异常综合征(MDS))、肌肉癌(例如横纹肌肉瘤、横纹肌瘤)、结缔组织癌、滑膜瘤)。

在某些实施方式中，癌症为神经统癌(例如脑癌(例如星状细胞瘤、神经管胚细胞瘤、神经胶瘤(例如星状细胞瘤、寡树突细胞瘤)、胶质母细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤、神经管胚细胞瘤、室管膜瘤、胚细胞瘤(亦即松果体瘤)、寡树突细胞瘤、神经鞘瘤、视网膜母细胞瘤、先天瘤、颅咽管瘤)、脊髓癌、神经纤维瘤(例如神经纤维瘤病(NF)第1型或第2型、神经鞘瘤病)、神经母细胞瘤、原始神经外胚层肿瘤(PNT)、脑膜癌(例如脑脊髓膜瘤、脑脊髓膜肉瘤、神经胶瘤病)、颅骨癌、听神经瘤、室管膜瘤、血管母细胞瘤、眼癌(例如眼球内黑色素瘤、视网膜母细胞瘤))。在某些实施方式中，要治疗的疾病为脑瘤。在某些实施方式中，疾病为多形性黄色星形细胞瘤(xenoanthrocytoma)(PXA)。在某些实施方式中，疾病为幼儿多形性黄色星形细胞瘤(PXA)。

在某些实施方式中，癌症选自内分泌/外分泌癌症(例如甲状腺癌(例如乳头状甲状腺癌、滤泡性甲状腺癌；髓质性甲状腺癌、多发性内分泌肿瘤第2A型、多发性内分泌肿瘤第2B型、家族性髓质性甲状腺癌、嗜铬细胞瘤、副神经节瘤)、胰腺癌(例如胰脏腺癌、胰管内乳头状黏液性肿瘤(IPMN)、胰岛细胞瘤、管癌腺癌、胰岛素瘤、升糖素瘤、VIP瘤)、肾上腺癌、神经内分泌癌(例如胃肠胰神经内分泌瘤(GEP-NET)、类癌瘤)、皮脂腺癌、汗腺癌)。在某些实施方式中，癌症为汗腺癌(例如汗腺癌)。

在某些实施方式中，癌症为头颈癌(例如头颈的鳞状细胞癌(SCCHN)、腺样囊性癌)。

在某些实施方式中，癌症为口腔癌(例如口腔癌癌、唇癌、舌癌、口腔癌、咽癌、咽下部癌(例如咽下癌)、喉癌(例如喉癌、咽癌、鼻咽癌、口咽癌)、唾液腺癌)。

在某些实施方式中，癌症为食管癌(例如食管鳞状细胞癌、食管腺癌、巴瑞特氏腺癌、食管平滑肌肉瘤)。

在某些实施方式中，癌症为胃肠道癌(例如肛门癌、结直肠癌(例如结肠癌、直肠癌、结肠直肠腺癌)、胆囊癌、胃癌(例如胃癌(例如胃腺癌))、胃肠道间质瘤(GIST)、小肠癌(例如阑尾癌、小肠癌、例如小肠腺癌)、小腺癌、大肠癌、大肠癌)。

在某些实施方式中，癌症为心血管癌(例如原发性心脏肿瘤、血管肉瘤(例如淋巴管肉瘤、淋巴管肉瘤、血管肉瘤)、内皮肉瘤(例如卡波西肉瘤、多发性特发性出血肉瘤)、心脏黏液瘤、心脏横纹肌瘤)。

在某些实施方式中，癌症为肺癌(例如支气管癌(例如支气管原癌、支气管腺瘤)、肺泡癌、间皮瘤、小细胞肺癌(SCLC)、非小细胞肺癌(NSCLC)、肺腺癌、软骨性错构瘤、乳头状腺癌)。

在某些实施方式中，癌症为生殖泌尿道癌(例如膀胱癌(例如尿道上皮癌)、尿道癌、肾癌(例如肾胚细胞瘤，也称作威尔姆氏肿瘤、肾细胞癌)、睾丸癌(例如精原细胞瘤、睪丸胚胎癌)、生殖细胞癌、前列腺癌(例如前列腺腺癌)、阴茎癌(例如佩吉特(Paget)氏阴茎和阴囊病))。

在某些实施方式中，癌症为妇科癌(例如乳腺癌(例如乳腺癌、乳房的乳头状癌、乳腺癌、乳房的髓质性癌、三阴性乳腺癌、HER-2阳性乳腺癌、HER2阴性乳腺癌)、子宫内膜癌(例如子宫癌(例如子宫肉瘤、绒毛膜癌)、子宫内膜癌)、宫颈癌(例如子宫颈腺癌)、卵巢癌(例如囊腺癌、卵巢胚胎癌、卵巢腺癌)、生殖细胞癌、外阴癌(例如佩吉特氏外阴病)、阴道癌、输卵管癌)。

在某些实施方式中，癌症为皮肤癌(例如鳞状细胞癌(SCC)、角质棘皮瘤(KA)、黑色素瘤、基底细胞癌(BCC)、皮肤纤维瘤)。

在某些实施方式中，癌症为软组织癌(例如上皮内赘瘤、上皮癌、上皮肉瘤、腺癌、腺瘤、纤维肉瘤、纤维瘤、脂肪肉瘤、脂肪瘤、黏液瘤、畸胎瘤)。

骨髓增生性赘瘤亦可根据本发明所描述所述的方法治疗。骨髓增生性赘瘤的非限制性实例包括骨髓纤维化、真性红血球增多症和原发性血小板过多症。

在某些实施方式中，癌症为罕见癌症。术语“罕见癌症”指发生在相对少数患者中的癌症。

在某些实施方式中，癌症为肺癌(例如非小细胞肺癌(NSCLC))、脑癌(例如神经母细胞瘤、胶质母细胞瘤)、甲状腺癌(例如间变性甲状腺癌(ATC))、乳腺癌、结直肠癌(例如结肠癌)、肝癌(例如肝细胞癌(HCC))、胰腺癌(例如胰腺癌)、皮肤癌(例如黑色素瘤)、前列腺癌或血液癌(例如退行性大细胞淋巴瘤(ALCL)、骨髓增生异常综合征)。在一些实施方式中，癌症为卵巢癌(例如卵巢粒层细胞瘤)、胃癌或间皮瘤。在一些实施方式中，优选地，以一种或多种本公开的化合物，例如式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如示例性化合物Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或其药学上可接受的盐治疗被TGFβ信号传导驱动或利用TGFβ信号传导使疾病进展的癌症。在其他的实施方式中，优选地，用一种或多种本公开的化合物，例如式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如示例性化合物Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或其药学上可接受的盐治疗被TGFβ信号传导驱动或利用TGFβ信号传导使疾病进展和/或与FOXL2基因突变有关的癌症。

在一些实施方式中，本发明所描述的癌症(例如实体瘤癌)表现排除或沙漠表型。在一些实施方式中，癌症(例如实体瘤癌)表现排除表型。在一些实施方式中，癌症(例如实体瘤癌)表现沙漠表型。

在一些实施方式中，本发明提供用于治疗纤维化病症的方法。在一些实施方式中，纤维化病症与增殖性疾病相关联。在一些实施方式中，纤维化病症没有共病一起存在。在一些实施方式中，纤维化病症为特发性肺纤维化、肝纤维化、肝硬化、非酒精性脂肪肝炎、佩罗尼氏病、囊性纤维化、β型地中海贫血、光化性角化病、高血压、一般炎症性疾患、干眼症、溃疡、角膜纤维化、湿性老年性黄斑变性、银屑病、伤口闭合、慢性肾疾病、肾纤维化、全身性硬化症或慢性查加斯氏心脏病。在一些实施方式中，纤维化病症为心脏纤维化或与心脏纤维化相关连的病症(例如心瓣病、心律不整(例如房颤)、心肌重塑(例如在梗塞后)、心肌病变(例如扩张性、缺血性或肥厚性心肌病变)、再狭窄(例如支架内再狭窄、血管成形术后再狭窄))。在一些实施方式中，纤维化病症为掌筋膜挛缩症。在一些实施方式中，纤维化病症为纤维类瘤(纤维瘤病)。

如本发明所使用的术语“纤维化”、“纤维化疾病”、“纤维化病症”、“纤维化病变”及“纤维化疾病和/或病症”(在本发明统称为纤维化)指涉及器官或组织中形成过量纤维结缔组织的受试者的疾病或病症。纤维化的发生可能伴随另一疾病状态或病症，例如炎症性、癌症、病毒或细菌感染或类似者。

据信导致纤维化的过多的纤维结缔组织形成在修复或反应过程中发生在器官或组织中。这可为反应性、良性或病理状态。纤维化在生理上具有沉积结缔组织的作用，其可干扰或完全抑制下层器官或组织的正常结构及功能。例如，肺纤维化为呼吸统疾病，在肺组织中形成结疤，导致严重的呼吸问题。结疤形成通常涉及过多的纤维结缔组织积聚，且时常导致壁增厚及引起血液中的氧气供应减少。血液中的氧气供应减少进而可导致心衰竭及甚至死亡。以结疤组织代替正常的肺引起不可逆的氧扩散能力降低。据信一些类型的肺纤维化由异常的伤口愈合而不是慢性炎症而永存。一旦发展出结疤，其时常为永存的。特发性肺纤维化(IPF)为肺纤维化类型，其为具有病因未知的致命性肺部疾病，但可与炎症性、癌症和/或病毒感染一起存在。

纤维化通常以三个阶段进展(以肺纤维化例证，但常遍及许多纤维化病症)：损伤阶段(“阶段1”)、上皮-纤维母细胞相互作用阶段(“阶段2”)及异常的修复和纤维化阶段(“阶段3”)。在阶段1中，通常损伤上皮且可能发生下列事件的一个或多个：上皮损伤、内皮损伤，例如在肺纤维化中的肺泡毛细血管基底膜破坏、血管渗漏、血小板活化和纤维蛋白凝块活化。在阶段2中，通常纤维母细胞开始与损伤的上皮相互作用且可能发生下列事件的一个或多个：释放促纤维化细胞因子、(肌)纤维母细胞募集、增生和分化、临时基质形成、血管生成和有缺陷的再上皮化。在阶段3中，通常上皮损伤经异常修复而导致纤维化且可能发生下列事件的一个或多个：过度的细胞外基质(ECM)积聚、缺乏基质降解，例如在肺纤维化中的进行性肺重塑和蜂窝状变化(在肺纤维化中，肺组织变得像蜂窝状)。

尽管伴随其他疾病状况的纤维化的发生并不少见，例如伴随纤维化的癌症、伴随纤维化的病毒感染或伴随纤维化的慢性炎症性的存在，但是纤维化疾病的病因尚未完全理解且亦在没有其他疾病状态存在下发生。然而，据信类似的机制及信号传导路径存在于纤维化病症及许多影响其中亦有纤维化疾病存在的器官或组织的伴随疾病(包括癌症、感染和一般炎症性)两者中，例如IPF与肺癌的存在。因此，据信纤维化与时常与其一起存在的许多疾病经由TGFβ蛋白质及受其过度表达牵连的信号传导级联而进展，参见例如Ballester,B等人，Idiopathic Pulmonary Fibrosis and lung Cancer:Mechanisms and Moleculartargets,Int.J.Mol.Sci.2019,20,593；doi:10.3390/ijms20030593。

因此，在一些实施方式中，本发明所描述的化合物可用于纤维化疾病的治疗(例如提供用于其的疗法、逆转其过程)、改善(例如降低与其相关联的症状)、预防(例如预防性治疗)或管理(例如减慢或停止进展)(在本发明统称为“纤维化疾病的治疗”或“纤维化的治疗”)。在一些实施方式中，要治疗的纤维化未与任何伴随的疾病一起存在。在一些实施方式中，要治疗的纤维化与感染一起存在，例如病毒或细菌感染。在一些实施方式中，要治疗的纤维化与炎症性病症一起存在。在一些实施方式中，存在的炎症性病症为那些本发明详细描述的病症中各自及多者。在一些实施方式中，治疗包括识别患者，其患有伴随或未伴随共病、致病或恶化的病症的纤维化或发展出伴随或未伴随共病、致病或恶化的病症的纤维化的风险，且对其施用治疗有效量的本发明所描述的化合物，例如一种或多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的ALK-5抑制剂化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或其药学上可接受的盐中的一种或多种。

在一些实施方式中，要治疗的纤维化与癌症一起存在。在一些实施方式中，纤维化与癌性病症共病。在一些实施方式中，癌症为纤维化病症的原因。在一些实施方式中，纤维化病症因癌症而恶化。在一些实施方式中，存在的癌症为那些本发明详细描述的癌症中各自及多者，不论是否为共病、致病或恶化的病症。

在一些实施方式中，要治疗的纤维化与病毒感染一起存在。在一些实施方式中，病毒感染与癌性病症共病。在一些实施方式中，病毒感染为纤维化病症的原因。在一些实施方式中，纤维化病症因病毒感染而恶化。在一些实施方式中，存在的病毒感染为本发明述及的病毒感染中各自及多者。

在一些实施方式中，单独或与选自病毒感染、癌或炎症性病症中的各自或多者，例如那些本发明所描述者中的各自或多者的另一病症(其可为纤维化的共病、恶化或致病的病症)一起存在的纤维化疾病的治疗通过施用本发明所描述的化合物，例如一种或多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的ALK-5抑制剂化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或其药学上可接受的盐中的一种或多种来进行。在一些实施方式中，纤维化疾病(有或没有伴随的病症)，例如那些本发明所描述者的一个或多个的治疗通过施用两种或更多种本发明所描述的化合物，例如两种或更多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述者的药学上可接受的盐的两种或更多种进行。在一些实施方式中，纤维化疾病(有或没有伴随的病症)，例如那些本发明所描述者的一个或多个的治疗通过施用包括一种或多种本发明所描述的化合物(例如例示性化合物、或其药学上可接受的盐的一个或多个)的治疗剂与一种或多种额外的治疗剂组合(例如至少一种本发明所描述的化合物及至少一种额外的治疗剂，一种或多种本发明所描述的化合物与一种或两种或更多种额外的治疗剂)的组合来进行。在一些实施方式中，组合治疗通过施用本公开的一种化合物，例如式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如化合物Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或其任一的药学上可接受的盐及一种或多种额外的治疗剂来提供。在一些实施方式中，治疗剂的组合包括本发明所描述的一种化合物及超过一种以上的额外的治疗剂。

在一些实施方式中，使用单独或与一种或多种额外的治疗剂组合的至少一种本发明所描述的化合物的纤维化治疗在纤维化疾病的单一阶段期间(例如阶段1、阶段2、阶段3)施用。在一些实施方式中，纤维化治疗包括在跨疾病的多个阶段分次施用组合疗法。作为非限制性实例，本发明所描述的化合物(例如示例性化合物、或其药学上可接受的盐的一个或多个)可在疾病的阶段1、阶段2或阶段3期间施用，而一种或多种额外的治疗剂可在与本发明所描述的化合物不同的阶段期间施用。例如，在一些实施方式中，纤维化治疗(如本发明详细描述)通过施用本公开的化合物，例如式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物的一个或多个，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述者的药学上可接受的盐的一个或多个达成。在一些实施方式中，在使用组合以治疗增殖性疾病的情况下，组合为式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物的一个或多个，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述者的药学上可接受的盐的一个或多个和IO剂。在一些实施方式中，构成组合疗法的本发明所描述的化合物及额外的治疗剂在纤维化的所有阶段期间施用。在一些实施方式中，本公开的化合物在在一些阶段而不在其他阶段施用。在其中使用组合疗法的一些实施方式中，本公开的化合物在疾病的所有阶段期间施用且与其组合的额外的治疗剂在疾病的一些阶段而不在其他阶段施用。

在一些实施方式中，本发明所描述的化合物以有效治疗纤维化疾病的量施用于有其需要的受试者，例如本发明所描述的化合物的施用量减慢或停止疾病或病症(例如特发性肺纤维化、急性恶化的IPF、心脏病、肝纤维化、肝硬化、非酒精性脂肪肝炎、佩罗尼氏病、掌筋膜挛缩症、囊性纤维化、β型地中海贫血、光化性角化病、高血压、一般炎症性疾患、干眼症、溃疡、角膜纤维化、湿性老年性黄斑变性、银屑病、伤口闭合、慢性肾疾病、肾纤维化、全身性硬化症和慢性查加斯氏心脏病)的进展、增加遭受疾病或病症的受试者的存活时间(例如与未施用本发明所描述的化合物的受试者相比时增加至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或100％)、增加受试者群的存活率(例如在入住加护病房后的存活率与未施用本发明所描述的化合物的受试者群相比时增加至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或100％)、与未施用本发明所描述的化合物的受试者相比时降低受试者发展出纤维化病症(例如肺纤维化或IPF)的风险、与未施用本发明所描述的化合物的受试者相比时保留器官功能(例如肺功能或肝功能)、和/或与未施用本发明所描述的化合物的受试者相比时阻止或降低病症急性恶化的风险。

在一些实施方式中，其提供抑制组织纤维化的方法，其包括施用本发明所描述的ALK-5抑制剂化合物。在本发明所描述的方法的一些实施方式中，该方法包括使组织与足以降低或抑制纤维化的量的本发明所描述的化合物、或其药学上可接受的盐，例如式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述者的药学上可接受的盐的一个或多个接触。在本发明所描述的方法的一些实施方式中，该方法可包括抑制组织纤维化的形成或沉积和/或减少纤维化病变的大小、细胞结构、组成、细胞或胶原蛋白含量。在一些实施方式中，纤维化病变于受试者(例如人类受试者)中。在一些实施方式中，抑制方法适用于伴随病症存在的受试者，例如癌症、炎症性或病毒感染，这些为该纤维化的共病、致病原因或使其恶化。

在一些实施方式中，其提供治疗组织纤维化的方法，其包括施用本发明所描述的化合物，例如式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物的一个或多个，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述者的药学上可接受的盐的一个或多个。在本发明所描述所述的方法的一些实施方式中，该方法包括使组织与足以逆转纤维化的进展或消除纤维化的量的本发明所描述的化合物接触。在本发明所描述所述的方法的一些实施方式中，该方法可包括逆转或消除组织纤维化的形成或沉积和/或减少纤维化病变的大小、细胞结构、组成、细胞或胶原蛋白含量。在一些实施方式中，纤维化病变于受试者(例如人类受试者)中。在一些实施方式中，治疗所述的方法适用于伴随病症存在的受试者，例如癌症、炎症性或病毒感染，这些为该纤维化的共病、致病原因或使其恶化。

在一些实施方式中，与癌癌(共病、由其引起和/或由其恶化)一起存在的纤维化病症(例如肺纤维化)的治疗、改善或预防(例如预防性治疗)通过施用一种或多种本发明所描述的化合物，例如一种或多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述者的药学上可接受的盐的一个或多个来提供。

在一些实施方式中，与癌性病症一起存在的纤维化病症，例如急性恶化的特发性肺纤维化的治疗、改善或预防通过施用一种或多种本发明所描述的化合物，例如一种或多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述者的药学上可接受的盐的一个或多个来进行。

在一些实施方式中，与癌症(例如那些本发明所描述的癌症中的各自或多者)共病、由其引起和/或由其恶化的纤维化病症(例如肺纤维化)的治疗、改善或预防(例如预防性治疗)通过施用两种或更多种本发明所描述的化合物，例如一种或多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述者的药学上可接受的盐的一个或多个来进行。

在一些实施方式中，与癌症(例如那些本发明所描述的癌症的一个或多个)一起存在的纤维化疾病的治疗通过施用包括一种或多种本发明所描述的化合物，例如一种或多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述者的药学上可接受的盐的一个或多个的治疗剂与一种或多种额外的治疗剂组合(例如至少一种本发明所描述的化合物及至少一种额外的治疗剂，一种或多种本发明所描述的化合物与一种或两种或更多种额外的治疗剂)的组合来进行。在一些实施方式中，与癌症一起存在的纤维化的组合治疗通过施用两种或更多种本公开的化合物，例如两种或更多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如前述Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述者的药学上可接受的盐的两种或更多种及一种或多种额外的治疗剂来提供。

在一些实施方式中，与病毒感染共病(即与病毒感染一起存在)的纤维化的治疗、改善或预防(例如预防性治疗)通过施用一种或多种本公开的化合物，例如式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述者的药学上可接受的盐的一个或多个来进行。在一些实施方式中，与病毒感染(例如那些本发明所描述的病毒感染的一个或多个)一起存在的纤维化疾病的治疗通过施用两种或更多种本公开的化合物，例如两种或更多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述中任一者的药学上可接受的盐的两种或更多种来进行。

在一些实施方式中，与病毒感染(例如那些本发明所描述的病毒感染的一个或多个)一起存在的纤维化疾病的治疗通过施用包括一种或多种本公开的化合物，例如式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述中任一者的药学上可接受的盐的一个或多个的治疗剂与一种或多种额外的治疗剂组合(例如至少一种本发明所描述的化合物及至少一种额外的治疗剂，一种或多种本发明所描述的化合物与一种或两种或更多种额外的治疗剂)的组合来进行。

在一些实施方式中，与病毒感染一起存在的纤维化病症(例如急性恶化的特发性肺纤维化)的治疗、改善或预防通过施用一种或多种本公开的化合物，例如式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述中任一者的药学上可接受的盐的一个或多个来进行。

在一些实施方式中，与炎症性病症共病、由其引起和/或由其恶化的纤维化病症(例如肺纤维化)的治疗、改善或预防(例如预防性治疗)通过施用一种或多种本公开的化合物，例如式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述中任一者的药学上可接受的盐的一个或多个来提供。在一些实施方式中，与炎症性病症(例如本发明所描述的炎症性病症中的各自或多者)一起存在的纤维化病症(例如肺纤维化)的治疗、改善或预防(例如预防性治疗)通过施用两种或更多种本发明所描述的化合物，例如式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述中任一者的药学上可接受的盐的一个或多个来进行。

在一些实施方式中，与炎症性病症(例如本发明所描述的炎症性病症中的各自或多者)共病、由其引起和/或由其恶化的纤维化病症(例如肺纤维化)的治疗、改善或预防(例如预防性治疗)通过施用包括一种或多种本公开的化合物，例如一种或多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述中任一者的药学上可接受的盐的一个或多个的治疗剂与一种或多种额外的治疗剂组合(例如至少一种本公开的化合物与至少一种额外的治疗剂，一种或多种本公开的化合物与一种或两种或更多种额外的治疗剂)的组合来进行。在一些实施方式中，组合治疗通过施用两种或更多种本公开的化合物，例如两种或更多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述中任一者的药学上可接受的盐的一个或多个及一种或多种额外的治疗剂来提供。在一些实施方式中，与炎症性病症一起存在的纤维化病症(例如急性恶化的特发性肺纤维化)的治疗、改善或预防通过施用一种或多种本公开的化合物，例如式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述中任一者的药学上可接受的盐的一个或多个来进行。

在一些实施方式中，纤维化病症(例如肺纤维化)与一种或多种额外的病症(伴随的病症)一起存在，例如炎症性病症、癌症和/或病毒感染。伴随的病症可为纤维化病症的原因或恶化或它们可与纤维化病症共病。在一些实施方式中，伴随的病症为病毒感染；在一些实施方式中，伴随的病症为癌症；在一些实施方式中，伴随的病症为本发明述及的炎症性病症中任一者的炎症性病症。在一些实施方式中，在提供与癌症、病毒感染或炎症性病症一起存在、由其引起和/或由其恶化的纤维化病症(例如肺纤维化)的治疗、改善或预防(例如预防性治疗)的情况下，纤维化病症为肺纤维化。在一些实施方式中，纤维化病症为特发性肺纤维化。在一些实施方式中，纤维化病症为急性恶化的特发性肺纤维化。

在一些实施方式中，经施用治疗的纤维化病症(例如肺纤维化)未伴随疾病状态存在。在一些实施方式中，未伴随疾病状态存在的纤维化病症的治疗通过施用本发明所描述的化合物，例如式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或其药学上可接受的盐的一个或多个来提供。在一些实施方式中，未伴随疾病状态存在的纤维化病症的治疗通过施用治疗有效量的本发明所描述的化合物，例如式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或其药学上可接受的盐的一个或多个来提供。在一些实施方式中，提供未伴随癌症、病毒感染或炎症性病症存在纤维化病症(例如肺纤维化)的治疗、改善或预防(例如预防性治疗)。在一些实施方式中，纤维化病症为肺纤维化。在一些实施方式中，纤维化病症为特发性肺纤维化。在一些实施方式中，纤维化病症为急性恶化的特发性肺纤维化。

在一些实施方式中，依照本发明所述的方法施用本发明所描述的化合物(单独或成为组合疗法的一部分)，例如个别或组合的式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物的两种或更多种，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述中任一者的药学上可接受的盐的一个或多个治疗的纤维化病症为例如但不限于肺纤维化，常称为“肺部结疤”(例如肺纤维化，例如特发性肺纤维化、急性恶化的特发性肺纤维化或家族性肺纤维化)、肝纤维化(肝纤维化，例如结疤瘤、硬皮病或肾因性全身纤维化、胆管纤维化(胆道纤维化)、肝硬化，例如原发性胆汁性胆管炎(胆汁性肝硬化)、原发性硬化性胆管炎)、在心脏组织中的纤维化(心脏纤维化)、血管纤维化、肾纤维化(肾纤维化)、皮肤纤维化(皮肤纤维化或子宫内膜纤维化，例如结疤瘤、硬皮病或肾因性全身纤维化)、胃肠道纤维化(例如克隆氏症)、骨髓纤维化(也称作骨髓纤维化)、关节纤维化(例如膝盖的，肩膀的或另一个关节的)、掌筋膜挛缩症、纵隔纤维化、佩罗尼氏病、腹膜后纤维化、全身性硬化症、自体免疫性肝炎或其两种或更多种。

在一些实施方式中，要治疗的纤维化病症为肺纤维化。在一些实施方式中，要治疗的纤维化病症为肝纤维化。在一些实施方式中，要治疗的纤维化病症为肝硬化。在一些实施方式中，要治疗的纤维化病症为非酒精性脂肪肝炎。在一些实施方式中，要治疗的纤维化病症为佩罗尼氏病。在一些实施方式中，要治疗的纤维化病症为囊性纤维化。在一些实施方式中，要治疗的纤维化病症为β型地中海贫血。在一些实施方式中，要治疗的纤维化病症为光化性角化病。在一些实施方式中，要治疗的纤维化病症为高血压。在一些实施方式中，要治疗的纤维化病症为慢性肾疾病，例如肾纤维化。在一些实施方式中，要治疗的纤维化病症为慢性查加斯氏心脏病。

在一些实施方式中，要治疗的纤维化病症为干眼症、溃疡、角膜纤维化、湿性老年性黄斑变性、慢性伤口(无法痊愈)或全身性硬化症。在一些实施方式中，要治疗的纤维化病症为银屑病。在一些实施方式中，纤维化病症为特发性肺纤维化、肝纤维化、肝硬化、非酒精性脂肪肝炎、佩罗尼氏病、囊性纤维化、β型地中海贫血、光化性角化病、高血压、一般炎症性疾患、干眼症、溃疡、角膜纤维化、湿性老年性黄斑变性、银屑病、伤口闭合、慢性肾疾病、肾纤维化、全身性硬化症或慢性查加斯氏心脏病。在一些实施方式中，纤维化病症为心脏纤维化或与心脏纤维化相关联的病症，例如心瓣病、心律不整(例如房颤)、心肌重塑(例如在梗塞后)、心肌病变(例如扩张性、缺血性或肥厚性心肌病变)、再狭窄(例如支架内再狭窄、血管成形术后再狭窄)。在一些实施方式中，纤维化病症为掌筋膜挛缩症。

在一些实施方式中，纤维化病症(例如肺纤维化)可与病毒感染一起存在、由其引起和/或由其恶化(伴随病毒感染)。在一些实施方式中，存在的病毒感染可为正黏液病毒科(Orthomyxoviridae)病毒感染(例如A型流感病毒感染或B型流感病毒感染)、肺病毒科(Pneumoviridae)病毒感染(例如间质肺炎病毒感染(例如人类间质肺炎病毒(HMPV)感染)或正肺病毒属(orthopneumovirus)感染(例如呼吸道合胞病毒(RSV)(例如人类呼吸道合胞病毒(HRSV)感染(例如A2型人类呼吸道合胞病毒(HRSV-A2)感染或B1型人类呼吸道合胞病毒(HRSV-B1)感染))))、正肝脱氧核糖核酸病毒属(Orthohepadnavirus)病毒感染(例如B型肝炎病毒感染)、肝炎病毒属(Hepacivirus)病毒感染(例如C型肝炎病毒感染)、副黏液病毒科病毒感染(例如呼吸道病毒感染(例如第1型人类副流感病毒(HPIV-1)感染或第3型人类副流感病毒(HPIV-3)感染)或腮腺炎病毒属病毒感染(例如第2型人类副流感病毒(HPIV-2)感染或第4型人类副流感病毒(HPIV-4)感染))、腺病毒科(Adenoviridae)病毒感染(例如哺乳动物腺病毒属(Mastadenovirus)感染(例如B型人类腺病毒(HAdV-B)感染或C型人类腺病毒(HAdV-C)感染))、肠病毒感染(例如A型鼻病毒感染、B型鼻病毒感染或C型鼻病毒感染)。

在一些实施方式中，提供用于本发明所描述的纤维化中各自及多者的治疗，其中前述病毒感染中各自及多者作为共病病症存在，该治疗包括施用一种或多种本发明所描述的化合物，例如一种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或其药学上可接受的盐的一个或多个。在一些实施方式中，纤维化疾病(例如本发明所描述的纤维化疾病中的各自或多者)的治疗通过施用两种或更多种本发明所描述的化合物，例如两种或更多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述中任一者的药学上可接受的盐的一个或多个来进行。在一些实施方式中，与病毒感染共病的纤维化疾病(例如本发明所描述的纤维化疾病中的各自或多者)的治疗通过施用包括一种或多种本发明所描述的化合物(例如一种或多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述中任一者的药学上可接受的盐的一个或多个)的治疗剂与一种或多种额外的治疗剂组合(例如至少一种本发明所描述的化合物及至少一种额外的治疗剂，一种或多种本发明所描述的化合物与一种或两种或更多种额外的治疗剂)的组合来进行。在一些实施方式中，组合治疗通过施用一种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或其药学上可接受的盐的一个或多个及一种或多种额外的治疗剂来提供。

在一些实施方式中，提供用于本发明所描述的纤维化中各自及多者的治疗，其中这些病毒感染中各自及多者作为恶化的病症存在，该治疗包括施用一种或多种本发明所描述的化合物，例如一种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或其药学上可接受的盐的一个或多个。在一些实施方式中，与恶化的病毒感染一起存在的纤维化疾病(例如本发明所描述的纤维化疾病中的各自或多者)的治疗通过施用两种或更多种本发明所描述的化合物，例如两种或更多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述中任一者的药学上可接受的盐的一个或多个来进行。在一些实施方式中，与恶化的病毒感染一起存在的纤维化疾病(例如本发明所描述的纤维化疾病的一个或多个)的治疗通过施用包括一种或多种本发明所描述的化合物(例如一种或多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述中任一者的药学上可接受的盐的一个或多个)的治疗剂与一种或多种额外的治疗剂组合(例如至少一种本发明所描述的化合物及至少一种额外的治疗剂，一种或多种本发明所描述的化合物与一种或两种或更多种额外的治疗剂)的组合来进行。在一些实施方式中，组合治疗通过施用一种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或其药学上可接受的盐的一个或多个及一种或多种额外的治疗剂来提供。

在一些实施方式中，提供用于与成为纤维化的原因的这些病毒感染中各自及多者一起存在的纤维化的治疗，该方法包括施用一种或多种本发明所描述的化合物，例如一种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的ALK-5抑制剂化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述中任一者的药学上可接受的盐的一个或多个。在一些实施方式中，与致病的病毒感染一起存在的纤维化疾病(例如本发明所描述的纤维化疾病中的各自或多者)的治疗通过施用两种或更多种本发明所描述的化合物，例如两种或更多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述中任一者的药学上可接受的盐的一个或多个来进行。在一些实施方式中，与致病的病毒感染一起存在的纤维化疾病(例如本发明所描述的纤维化疾病中的各自或多者)的治疗通过施用包括一种或多种本发明所描述的化合物(例如,一种或多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述中任一者的药学上可接受的盐的一个或多个)的治疗剂与一种或多种额外的治疗剂组合(例如至少一种本发明所描述的化合物及至少一种额外的治疗剂，一种或多种本发明所描述的化合物与一种或两种或更多种额外的治疗剂)的组合来进行。在一些实施方式中，组合治疗通过施用一种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的ALK-5抑制剂化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或其药学上可接受的盐的一个或多个及一种或多种额外的治疗剂来提供。

在一些实施方式中，纤维化病症(例如肺纤维化)可与炎症性病症一起存在，可由炎症性病症引起和/或可由炎症性病症恶化。如本发明所使用的术语“炎症性疾病”、“炎症性病症”及“炎症性疾病和/或病症”指涉及一种或多种身体组织对由身体认定为有害的刺激的反应的受试者的疾病或病症。在一些实施方式中，炎症性病症为自体免疫性病症。示例性炎症性病症包括非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)、酒精性脂肪性肝炎(ASH)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、原发性胆汁性胆管炎(PBC)、原发性硬化性胆管炎和自体免疫性肝炎。NAFLD为其中由于过度饮酒以外的原因而使脂肪沉积在肝中的疾病，且NASH为NAFLD的前进形式，其中使肝兼具炎症性及损伤。在NASH中的异常的损伤修复可导致肝硬化。ASH为其中与饮酒相关联的肝炎症性及损伤的病症且其可包括肝纤维化和/或肝硬化。PBC为肝的自体免疫性疾病且肝损伤的异常的修复可导致结疤、纤维化和/或肝硬化。原发性硬化性胆管炎可以胆管炎症性及结疤为特征，其可导致纤维化和/或肝硬化。自体免疫性肝炎可引起肝炎症性，其异常的修复可导致纤维化和/或肝硬化。

在一些实施方式中，提供用于与成为纤维化的共病病症存在的这些炎症性病症中各自及多者一起存在的纤维化的治疗，该治疗包括施用一种或多种本发明所描述的化合物，例如一种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或其药学上可接受的盐的一个或多个。在一些实施方式中，与炎症性病症共病的纤维化疾病(例如本发明所描述的纤维化疾病中的各自或多者)的治疗通过施用两种或更多种本发明所描述的化合物，例如两种或更多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的ALK-5抑制剂化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述中任一者的药学上可接受的盐的一个或多个来进行。在一些实施方式中，与炎症性病症共病的纤维化疾病(例如本发明所描述的纤维化疾病中的各自或多者)的治疗通过施用包括一种或多种本发明所描述的化合物(例如一种或多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述中任一者的药学上可接受的盐的一个或多个)的治疗剂与一种或多种额外的治疗剂组合(例如至少一种本发明所描述的化合物及至少一种额外的治疗剂，一种或多种本发明所描述的化合物与一种或两种或更多种额外的治疗剂)的组合来进行。在一些实施方式中，组合治疗通过施用一种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或其药学上可接受的盐的一个或多个及一种或多种额外的治疗剂来提供。

在一些实施方式中，提供用于成为纤维化的恶化病症存在的这些炎症性病症中各自的治疗，该治疗包括施用一种或多种本发明所描述的化合物，例如一种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或其药学上可接受的盐的一个或多个。在一些实施方式中，与恶化的炎症性病症一起存在的纤维化疾病(例如本发明所描述的纤维化疾病中的各自或多者)的治疗通过施用两种或更多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述中任一者的药学上可接受的盐的一个或多个来进行。在一些实施方式中，与恶化的炎症性病症一起存在的纤维化疾病(例如本发明所描述的纤维化疾病中的各自或多者)的治疗通过施用包括一种或多种本发明所描述的化合物(例如一种或多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述中任一者的药学上可接受的盐的一个或多个)的治疗剂与一种或多种额外的治疗剂组合(例如至少一种本发明所描述的化合物及至少一种额外的治疗剂，一个或多个本发明所描述的化合物与一种或两种或更多种额外的治疗剂)的组合来进行。在一些实施方式中，组合治疗通过施用一种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或其药学上可接受的盐的一个或多个及一种或多种额外的治疗剂来提供。

在一些实施方式中，提供用于成为纤维化的原因存在的这些炎症性病症中各自的治疗，该治疗包括施用一种或多种本发明所描述的化合物，例如一种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的ALK-5抑制剂化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或其药学上可接受的盐的一个或多个。在一些实施方式中，与致病的炎症性病症一起存在的纤维化疾病(例如本发明所描述的纤维化疾病中的各自或多者)的治疗通过施用两种或更多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述中任一者的药学上可接受的盐的一个或多个来进行。在一些实施方式中，与致病的炎症性病症一起存在的纤维化疾病(例如本发明所描述的纤维化疾病中的各自或多者)的治疗通过施用包括一种或多种本发明所描述的化合物(例如一种或多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或前述中任一者的药学上可接受的盐的一个或多个)的治疗剂与一种或多种额外的治疗剂组合(例如至少一种本发明所描述的化合物及至少一种额外的治疗剂，一种或多种本发明所描述的化合物与一种或两种或更多种额外的治疗剂)的组合来进行。在一些实施方式中，组合治疗通过施用一种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或其药学上可接受的盐的一个或多个及一种或多种额外的治疗剂来提供。

在一些实施方式中，纤维化病症为纤维化癌症。

纤维化癌症亦可根据本发明所描述所述的方法治疗。如本发明所使用的”纤维化癌症”为与纤维化相关联的癌症。纤维化可先于(例如致病于)癌症或纤维化癌症中的癌症治疗或在(例如由其引起)的后。纤维化亦可或另一选择地与纤维化癌症中的癌症一起存在。纤维化癌症的非限制性实例包括骨髓纤维化、胰腺癌(例如胰腺导管腺癌)、肾癌、肝癌、肺癌(例如大细胞肺癌，诸如鳞状细胞癌)、乳腺癌(例如炎症性乳腺癌)、卵巢癌(例如高分化浆液性卵巢癌)、子宫内膜癌、子宫癌、子宫肉瘤(例如子宫平滑肌肉瘤)、肾细胞癌、肉瘤(例如软组织肉瘤)、恶性纤维性组织细胞瘤、纤维肉瘤(例如隆突性皮肤纤维肉瘤)、胃癌、食管癌、头颈癌、宫颈癌、外阴癌和肝细胞癌(例如肝细胞癌)。在一些实施方式中，纤维化癌症为实体瘤癌(例如肾、肝、肺、乳房、卵巢、子宫内膜性、子宫和/或胰腺癌)。在一些实施方式中，纤维化癌症为内脏器官(例如胰脏、肺、肾、肝)的癌症。

在一些实施方式中，疾病或病症为纤维化病症。

在一些实施方式中，纤维化病症为特发性肺纤维化、肝纤维化、肝硬化、非酒精性脂肪肝炎、佩罗尼氏病、囊性纤维化、β型地中海贫血、光化性角化病、高血压、一般炎症性疾患、干眼症、溃疡、角膜纤维化、湿性老年性黄斑变性、银屑病、伤口闭合、慢性肾疾病、肾纤维化、全身性硬化症和慢性查加斯氏心脏病的一个或多个。

在一些实施方式中，病症为特发性肺纤维化。

在一些实施方式中，纤维化病症为心脏纤维化或与心脏纤维化相关联的病症，例如心瓣病、心律不整(例如房颤)、心肌重塑(例如在梗塞后)、心肌病变(例如扩张性、缺血性或肥厚性心肌病变)、再狭窄(例如支架内再狭窄、血管成形术后再狭窄)。

在一些实施方式中，纤维化病症为掌筋膜挛缩症。

在肺纤维化中，纤维化过程常被认为是肺泡上皮反复损伤，随后不受控制的纤维母细胞增值的结果。纤维化通常以三个阶段进展(以肺纤维化例证，但常遍及许多纤维化病症)：损伤阶段(“阶段1”)、上皮-纤维母细胞相互作用阶段(“阶段2”)及异常的修复和纤维化阶段(“阶段3”)。在阶段1中，通常损伤上皮且可能发生下列事件的一个或多个：上皮损伤、内皮损伤，例如在肺纤维化中的肺泡毛细血管基底膜破坏、血管渗漏、血小板活化和纤维蛋白凝块活化。在阶段2中，通常纤维母细胞开始与损伤的上皮相互作用且可能发生下列事件的一个或多个：释放促纤维化细胞因子、(肌)纤维母细胞募集、增生和分化、临时基质形成、血管生成和有缺陷的再上皮化。在阶段3中，通常上皮损伤经异常修复而导致纤维化且可能发生下列事件的一个或多个：过度的细胞外基质(ECM)积聚、缺乏基质降解，例如在肺纤维化中的进行性肺重塑和蜂窝状变化(在肺纤维化中，肺组织变得像蜂窝状)。

纤维化疾病、疾患及病症的非限制性实例包括癌症相关纤维化；肺纤维化，常称为“肺部结疤”(例如肺纤维化，例如特发性肺纤维化、急性恶化的特发性肺纤维化或家族性肺纤维化)；肝纤维化(肝纤维化、例如结疤瘤、硬皮病、肾因性全身纤维化、胆管纤维化(胆道纤维化)、肝硬化，例如原发性胆汁性胆管炎(胆汁性肝硬化)、原发性硬化性胆管炎)；心脏病；心脏纤维化或再狭窄(例如支架内再狭窄、血管成形术后再狭窄)；血管纤维化；肾纤维化(肾纤维化)；皮肤纤维化(皮肤纤维化或子宫内膜纤维化，例如结疤瘤、硬皮病或肾因性全身纤维化)；胃肠道纤维化(例如克隆氏症)；骨髓纤维化(骨髓纤维化)；关节纤维化(例如膝盖、肩膀或其他关节)；掌筋膜挛缩症；纵隔纤维化；佩罗尼氏病；腹膜后纤维化；全身性硬化症；自体免疫性肝炎；非酒精性脂肪肝炎；囊性纤维化；β型地中海贫血；光化性角化病；高血压；慢性肾疾病；查加斯氏心脏病；干眼症；溃疡；角膜纤维化；湿性老年性黄斑变性；慢性伤口(无法痊愈，闭合)；银屑病。在一些实施方式中，纤维化疾病、疾患或病症为肺纤维化，例如肺纤维化，诸如特发性肺纤维化、急性恶化的特发性肺纤维化或家族性肺纤维化。在一些实施方式中，纤维化疾病、疾患或病症为心脏病或心脏纤维化或再狭窄，例如支架内再狭窄、血管成形术后再狭窄。

纤维化可与另一疾病、疾患或病症(例如炎症性、炎症性疾病、疾患或病症，诸如银屑病、增殖性疾病，诸如癌症、病毒或细菌感染或类似者)相关联或可独立发生。例如，纤维化可先于(例如致病于)另一疾病、疾患或病症或在其(例如由其引起)的后。纤维化亦可或另一选择地与另一疾病、疾患或病症(例如炎症性、炎症性疾病、疾患或病症，诸如银屑病、增殖性疾病，诸如癌症、病毒或细菌感染或类似者)一起存在，无论是否相关联，或可能未伴随疾病、疾患或病症(例如相关联的疾病、疾患或病症)一起存在。在一些实施方式中，纤维化未与相关联的疾病、疾患或病症一起存在。在一些实施方式中，纤维化与相关联的疾病、疾患或病症一起存在。

尽管与另一疾病、疾患或病症相关联的纤维化的发生并不少见，例如癌症相关纤维化的存在，但是纤维化的病因尚未完全理解，且纤维化亦无关于和/或在没有其他疾病、疾患或病症存在下发生。然而，据信类似的机制及信号传导路径存在于纤维化及许多影响其中亦有纤维化存在的器官或组织的相关联的疾病、疾患或病症两者中，例如IPF与肺癌的存在。例如，据信纤维化与时常与其一起存在的许多疾病经由TGFβ蛋白质及受其过度表达牵连的信号传导级联而进展，参见例如Ballester,B.等人，Idiopathic PulmonaryFibrosis and lung Cancer:Mechanisms and Molecular targets,Int.J.Mol.Sci.2019,20,593；doi:10.3390/ijms20030593。

纤维化可与相关联的疾病、疾患或病症共病、由其引起和/或由其恶化(例如感染，诸如本发明所描述的感染，诸如病毒或细菌感染；炎症性疾病、疾患或病症，诸如本发明所描述的炎症性疾病、疾患或病症，诸如银屑病；或增殖性疾病，诸如本发明所描述的增殖性疾病，诸如癌症，特别为纤维化癌症)。因此，在一些实施方式中，与纤维化相关联的疾病、疾患或病症为共病、致病的和/或恶化的疾病、疾患或病症。在一些实施方式中，纤维化与相关联的疾病、疾患或病症共病。例如，纤维化可与下列者共病：感染，例如病毒或细菌感染；炎症性疾病、疾患或病症，诸如本发明所描述的炎症性疾病、疾患或病症，诸如银屑病；或增殖性疾病，诸如本发明所描述的增殖性疾病，诸如癌症，特别为纤维化癌症。在一些实施方式中，纤维化由相关联的疾病、疾患或病症引起(例如纤维化由下列者引起：感染，例如病毒或细菌感染；炎症性疾病、疾患或病症，诸如本发明所描述的炎症性疾病、疾患或病症，诸如银屑病；或增殖性疾病，诸如本发明所描述的增殖性疾病，诸如癌症)。在一些实施方式中，纤维化与相关联的疾病、疾患或病症共病和/或其由引起(例如感染，例如病毒或细菌感染；炎症性疾病、疾患或病症，诸如本发明所描述的炎症性疾病、疾患或病症，诸如银屑病；或增殖性疾病，诸如本发明所描述的增殖性疾病，诸如癌症，特别为纤维化癌症)。在一些实施方式中，纤维化由相关联的疾病、疾患或病症恶化。例如，纤维化可由下列者恶化：感染，例如病毒或细菌感染；炎症性疾病、疾患或病症，诸如本发明所描述的炎症性疾病、疾患或病症，诸如银屑病；或增殖性疾病，诸如本发明所描述的增殖性疾病，诸如癌症，特别为纤维化癌症。

在一些实施方式中，与纤维化相关联的疾病、疾患或病症为感染(例如病毒感染、细菌感染)。在其他的实施方式中，感染为病毒感染(伴随病毒感染)。病毒感染的非限制性实例包括正黏液病毒科病毒感染(例如A型流感病毒感染或B型流感病毒感染)、肺病毒科病毒感染(例如间质肺炎病毒病毒感染，诸如人类间质肺炎病毒(HMPV)感染或正肺炎病毒属感染，诸如呼吸道合胞病毒(RSV)(例如人类呼吸道合胞病毒(HRSV)感染，诸如人类呼吸道合胞病毒A2(HRSV-A2)感染或人类呼吸道合胞病毒B1(HRSV-B1)感染))、正肝脱氧核糖核酸病毒属病毒感染(例如B型肝炎病毒感染)、肝炎病毒属病毒感染(例如C型肝炎病毒感染)、副黏液病毒科病毒感染(例如呼吸道病毒感染，诸如第1型人类副流感病毒(HPIV-1)感染或第3型人类副流感病毒(HPIV-3)感染或腮腺炎病毒属病毒感染，诸如第2型人类副流感病毒(HPIV-2)感染或第4型人类副流感病毒(HPIV-4)感染)、腺病毒科病毒感染(例如哺乳动物腺病毒属感染，诸如B型人类腺病毒(HAdV-B)感染或C型人类腺病毒(HAdV-C)感染)及肠病毒病毒感染(例如A型鼻病毒感染、B型鼻病毒感染或C型鼻病毒感染)。与纤维化相关联的感染可为共病、致病和/或恶化的感染。

在一些实施方式中，与纤维化相关联的疾病、疾患或病症为炎症性疾病、疾患或病症。如本发明所使用的”炎症性疾病、疾患或病症”指涉及受试者的身体组织的一个或多个对由身体认定为有害的刺激的反应的疾病、疾患或病症。炎症性疾病、疾患或病症的非限制性实例包括非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)、酒精性脂肪性肝炎(ASH)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、原发性胆汁性胆管炎(PBC)、原发性硬化性胆管炎、自体免疫性肝炎、皮肤炎症和银屑病。与纤维化相关联的炎症性疾病、疾患或病症可为共病、致病和/或恶化的疾病、疾患或病症。

在一些实施方式中，炎症性疾病、疾患或病症为自体免疫性疾病、疾患或病症，诸如骨关节炎、类风湿性关节炎、疼痛、炎症性肠道疾病、呼吸统疾病或皮肤疾病。在一些实施方式中，炎症性疾病、疾患或病症为炎症性肠道疾病，例如克隆氏症、溃疡性结肠炎或肠躁综合征。在一些实施方式中，炎症性疾病、疾患或病症为呼吸统疾病，例如气喘、鼻炎、慢性阻塞性肺疾病、支气管炎、鼻瘜肉、鼻塞、农夫肺的肺纤维化或咳嗽。在一些实施方式中，炎症性疾病、疾患或病症为皮肤疾病，例如皮肤炎、皮肤嗜酸性球增多症、扁平苔癣、荨痲疹、银屑病、瘙痒、皮血管炎、角膜溃疡、慢性皮肤溃疡、结膜炎、血管炎、葡萄膜炎或红斑。

在一些实施方式中，与纤维化相关联的疾病、疾患或病症为癌症，诸如本发明所描述的癌症中任一者，特别为纤维化癌症。在一些实施方式中，另外描述纤维化为癌症相关纤维化。癌症可为可为共病、致病和/或恶化的癌症。另外可选地在一些实施方式中，纤维化与癌症没有关联。

应理解一些纤维化可以与癌症(例如纤维化癌症)相关联，但是也可以无关于和/或没有相关联的癌症存在下发生。例如，IPF可以与肺癌相关联，但是也可以无关于和/或在没有肺癌存在下发生。因此，在一些实施方式中，纤维化在没有癌症(例如纤维化癌症)存在下出现，例如IPF在没有肺癌存在下出现。

一些实施方式包括识别患有纤维化或处于发展出纤维化的风险(例如由于相关联的疾病、疾患或病症，诸如共病、致病或恶化的疾病、疾患或病症)的受试者且对受试者施用治疗有效量(例如治疗有效量、预防有效量)的本公开的化合物。

本公开的化合物单独或与一种或多种额外的治疗剂(包括那些本发明所描述者中任一者)组合施用可发生在纤维化的单一阶段(例如阶段1，阶段2、阶段3)期间或可以跨纤维化的多个阶段(例如两个阶段、三个阶段)分开。例如，本公开的化合物可在纤维化的阶段1、阶段2或阶段3期间施用，而一种或多种额外的治疗剂可在纤维化的不同阶段期间施用。另外可选地本公开的化合物及一种或多种额外的治疗剂可在纤维化的所有阶段期间施用。

在各种实施方式中，有效治疗纤维化疾病、疾患或病症的量为有效减慢或停止纤维化疾病、疾患或病症的进展、增加遭受纤维化疾病、疾患或病症的受试者的存活时间(例如与未施用治疗的受试者相比时增加至少至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或100)、增加受试者群的存活率(例如在入住加护病房后的存活率与未施用治疗的受试者群相比时增加至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或100％)、与未施用治疗的受试者相比时降低受试者发展出纤维化疾病、疾患或病症的风险、与未施用治疗的受试者相比时保留器官功能(例如肺功能、肝功能)、和/或与未施用治疗的受试者相比时阻止或降低纤维化疾病、疾患或病症急性恶化的风险的量。

本发明还提供抑制组织纤维化所述的方法，其包括使组织(例如体外、离体或体内)与本公开的化合物(例如有效量的本公开的化合物)接触。在各种实施方式中，有效量为有效抑制组织纤维化的形成或沉积和/或减少纤维化病变的大小、细胞结构、组成、细胞或胶原蛋白含量的量。在一些实施方式中，组织于受试者(例如人类)中。

在一些实施方式中，增殖性疾病(诸如癌症)通过靶向肿瘤基质细胞(例如在肿瘤微环境中)，诸如癌症相关纤维母细胞(CAF)、星状细胞或肌纤维母细胞、和/或免疫细胞，诸如肿瘤相关免疫细胞(例如在肿瘤免疫微环境中)来治疗，例如由此调节肿瘤基质微环境和/或肿瘤免疫微环境。

恶病质与慢性疾病有关且表达于非自愿体重减轻(例如大于5％的病前体重)，其起因于骨骼肌和脂肪组织萎缩。此病症与其他病症(如厌食症)不同，其中脂肪储存耗尽，但是肌肉质量大部分保持完好。恶病质影响超过一半的癌症患者，导致差的生活质量差(疲劳和虚弱)且有时甚至可使治疗策略在一些受试者中妥协。肌肉生长抑制素(Myostatin)(转变生长因子β(TGFβ)超家族成员)已成为肌肉生长及发育的负调节剂完全特征化。不想受到任何特定理论的束缚，据信阻断此路径可能使癌症患者受益，尤其为患有其中恶病质突出的晚期疾病及转移的患者。因此，在一些实施方式中，疾病或病症为恶病质(例如癌恶病质)。

另外，本发明提供抑制受试者(例如有其需要的受试者)的肿瘤生长所述的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。本发明还提供用于抑制肿瘤生长的式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐、及其药物组合物。本发明还提供式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐、及其药物组合物用于制造药物的用途，该药剂用于抑制肿瘤生长。

本发明还提供用于抑制活体内或试管内的活化素受体样激酶(例如ALK-5)活性的方法，该方法包括使活化素受体样激酶(例如ALK-5)与本公开的化合物，例如一种或多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物接触。本发明还提供用于抑制活体内或试管内的活化素受体样激酶(例如ALK-5)活性的式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或其药学上可接受的盐、及其药物组合物。本发明还提供式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或其药学上可接受的盐、及其药物组合物用于制造药物的用途，该药物用于抑制活体内或试管内的活化素受体样激酶(例如ALK-5)活性。在某些实施方式中，抑制发生于受试者体内。在某些实施方式中，抑制发生于以外(例如细胞或生物学样品中)。在某些实施方式中，该方法及用途用于抑制ALK-5。在某些实施方式中，抑制对ALK-5的选择性，亦即对ALK-5的选择性超越一种或多种其他激酶(例如对ALK-5的选择性超越其他活化素受体样激酶)。在某些实施方式中，抑制对ALK-5的选择性超越ALK-2。

肿瘤微环境时常通过使癌生物学获益超越健康的细胞功能而使肿瘤生长及存活获益。”排除”或”沙漠”表型特别为癌细胞创造最优化的微环境以避免免疫监测，使微环境具有高酸度及缺氧且具有高间质压力。此肿瘤微环境阻止例如免疫肿瘤剂的有益效应，而差的灌注及间质压力阻碍药物递送。

如本发明用于描述癌症的“沙漠表型”指以肿瘤内及其边缘没有或实质上没有T细胞存在为特征的肿瘤的免疫表型。此表型可由以下因素引起：包括但不限于启动不足、抗原呈现缺陷和/或缺乏抗原。

如本发明用于描述癌症的“排除表型”指以T细胞仅位于或实质上仅位于肿瘤边缘为特征的肿瘤的免疫表型。在“排除表型”中，T细胞不存在或实质上不存在于肿瘤床中。此表型可由以下因素引起：包括但不限于基质屏障、异常的血管分布、缺乏趋化因子、致癌途径和/或缺氧。

肿瘤微环境可通过促进浸润表型而有益地调节。如本发明所使用的“浸润表型”及“免疫炎性表型”指癌症、指以T细胞遍及或实质上遍及整个肿瘤床为特征的肿瘤的免疫表型。此所欲表型的促进可受到例如下列的影响：抑制TGFβ、增加血管形成(例如血管生成)、减少肿瘤硬结、增加抗原呈现、使癌症相关纤维母细胞失活、增加T细胞浸润至肿瘤床中或其任何组合。

现已显示本公开的化合物可调节肿瘤微环境(例如肿瘤-基质微环境和/或肿瘤-免疫微环境)，如例如通过促进浸润表型。因此，在一些实施方式中，本发明提供用于调节(例如标准化)试管内或活体内(例如受试者，诸如患有癌症的受试者中)肿瘤微环境(例如肿瘤-基质微环境和/或肿瘤-免疫微环境)所述的方法，该方法包括使肿瘤和/或肿瘤微环境与有效量的本公开的化合物，例如一种或多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物接触。在其中调节发生在有其需要的受试者体内的一些实施方式中，该方法包括向受试者施用治疗有效量的本公开的化合物或其药物组合物。

还提供用于促进试管内或活体内(例如受试者，诸如患有癌症的受试者中)免疫浸润(例如免疫细胞(诸如T细胞)浸润)至肿瘤中的方法，该方法包括使肿瘤与有效量的本公开的化合物，例如一种或多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物接触。在其中该方法发生在有其需要的受试者体内的一些实施方式中，该方法包括向受试者施用治疗有效量的本公开的化合物或其药物组合物。

本发明还提供用于靶向体外或体内肿瘤基质细胞或免疫细胞(例如肿瘤相关免疫细胞)和/或(例如且由此)调节(例如标准化)体外或体内肿瘤微环境(例如肿瘤-基质微环境和/或肿瘤-免疫微环境)的方法，该方法包括使肿瘤基质细胞或免疫细胞(例如肿瘤相关免疫细胞)与本公开的化合物，例如一种或多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或其药学上可接受的盐或药物组合物接触。本发明还提供用于靶向体内或体外肿瘤基质细胞或免疫细胞(例如肿瘤相关免疫细胞)和/或(例如且由此)调节(例如标准化)体内或体外肿瘤微环境(例如肿瘤-基质微环境和/或肿瘤-免疫微环境)的式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或其药学上可接受的盐、及其药物组合物。本发明还提供式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或其药学上可接受的盐、及其药物组合物制造药物的用途，该药剂用于靶向体内或体外肿瘤基质细胞或免疫细胞(例如肿瘤相关免疫细胞)和/或(例如且由此)调节(例如标准化)体内或体外肿瘤微环境(例如肿瘤-基质微环境和/或肿瘤-免疫微环境)。在某些实施方式中，调节发生于受试者体内。在某些实施方式中，调节发生于体外(例如细胞或生物学样品中)。在某些实施方式中，肿瘤基质细胞为癌症相关纤维母细胞(CAF)、星状细胞或肌纤维母细胞。

还提供用于促进体外或体内例如受试者，诸如患有癌症的受试者中)肿瘤血管形成(例如血管生成)所述的方法，该方法包括使肿瘤与有效量的本公开的化合物，例如一种或多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物接触。在其中该方法发生在有其需要的受试者活体内的一些实施方式中，该方法包括向受试者施用治疗有效量的本公开的化合物或其药物组合物。

在一些实施方式中，本发明提供用于抑制癌症转移的方法，该方法包括向受试者施用如本发明所描述的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。

本发明提供治疗易感受TGFβ信号传导路径抑制的纤维化、炎症性或增殖性疾病或病症的方法，该方法包括对遭受该纤维化、炎症性或增殖性疾病或病症的受试者施用抑制TGFβ信号传导有效量的如本发明所描述的化合物、或其药学上可接受的盐形式、或其药物组合物。

本发明还提供抑制遭受TGFβ信号传导(特别为TGFβ1信号传导)促进的疾病或病症的受试者的TGFβ信号传导的方法，其包括施用有效充分抑制该TGFβ信号传导以改变疾病或病症过程的量的至少一种如本发明所描述的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。

在一些实施方式中，本发明提供治疗以和/或利用TGF-β信号传导路径驱动而使疾病进展(例如以其驱动)的癌症、纤维化疾病、疾患或病症、炎症性疾病、疾患或病症、或增殖性疾病、疾患或病症所述的方法，该方法包括向受试者施用如本发明所描述的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。

在一些实施方式中，本发明提供治疗表达或具有突变的叉头盒L2(FOXL2)和/或FOXL2的癌症、纤维化疾病、疾患或病症、炎症性疾病、疾患或病症、或增殖性疾病、疾患或病症所述的方法，该方法包括向受试者施用如本发明所描述的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。

FOXL2基因编码属于FOX超家族的叉头盒蛋白L2且在卵巢发育及功能中扮演重要的作用。在产后卵巢中，FOXL2调节粒层细胞分化且支持成年期排卵前滤泡的生长。在FOXL2基因C134W中的错义突变发生于成人型粒层细胞瘤中。

在一些实施方式中，本发明提供治疗与升高的磷酸化SMAD 2(pSMAD2)或α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平相关联的癌症、纤维化疾病、疾患或病症、炎症性疾病、疾患或病症、或增殖性疾病、疾患或病症的方法，该方法包括向受试者施用如本发明所描述的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。

Smad(或SMAD)包括结构类似的蛋白质家族，彼等为转变生长因子β(TGFβ)超家族受体的主要信号转导子，其对调节细胞发育及生长至关重要。Smad信号传导的缺陷可导致TGFβ抗性，引起细胞生长失调。TGFβ信号传导失调已与许多癌症类型有牵连，包括胰腺癌、结肠癌、乳腺癌、肺癌和前列腺癌。在一些情况下，低水平的CD31为失调的TGFβ信号传导路径的指针。

在一些实施方式中，本发明所描述的癌症表现排除或沙漠表型。

本发明还提供增强一种或多种用于治疗受试者的癌症的治疗剂的活性的方法，该方法包括向受试者施用如本发明所描述的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。在一些实施方式中，该方法进一步包括向受试者施用一种或多种额外的治疗剂。在一些实施方式中，额外的治疗剂中至少一者为抗癌剂。在一些实施方式中，额外的治疗剂中至少一者为PD-1或PD-L1抑制剂。在一些实施方式中，额外的治疗剂中至少一者为免疫检查点抑制剂。

不想受到任何特定理论的束缚，据信本公开的化合物(包括例示性化合物)可使肿瘤微环境标准化且由此改进血管灌注及药物递送。预期增强的药物递送进而增强药物的功效，例如免疫调节剂(例如免疫肿瘤剂)或抗癌剂，包括本发明所描述的任何免疫调节剂或抗癌剂。

在一些实施方式中，本发明所描述的ALK-5抑制剂化合物可用于增加肿瘤血管分布。因此，在其他的实施方式中，本发明所描述的ALK-5抑制剂化合物的组合可用于增加其他治疗剂的活性。不想受到任何特定理论的束缚，本发明所描述的ALK-5抑制剂化合物可改进流向肿瘤的血流。在一些实施方式中，本发明所描述的组合可具有累加效应。在又其他的实施方式中，组合可具有协同效应。在一些实施方式中，本发明所描述的ALK-5抑制剂化合物可用于增加肿瘤血管分布且可与一种或多种额外的治疗剂组合使用。在一实施方式中，此组合改进治疗剂的功效。在一实施方式中，治疗剂为抗癌药物。在另一实施方式中，抗癌药物选自本发明所描述的任何抗癌药物。在一实施方式中，抗癌药物选自紫杉烷家族。在一实施方式中，抗癌药物为紫杉醇或abraxane。在一些实施方式中，施用的ALK-5抑制剂选自式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4中所描述的化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58的一个或多个、或其任一者的药学上可接受的盐。

因此，本发明还提供用于调节(例如标准化)体内或体外的肿瘤微环境(例如肿瘤-基质微环境和/或肿瘤-免疫微环境)的方法，该方法包括使肿瘤与例示性化合物的一个或多个，例如一种或多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或其药学上可接受的盐、或前述的药物组合物接触。本发明还提供用于调节(例如标准化)体内或体外的肿瘤微环境(例如肿瘤-基质微环境和/或肿瘤-免疫微环境)的式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物及其药学可接受的盐及前述的药物组合物。本发明还提供式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物及其药学可接受的盐及前述的药物组合物用于制造药物的用途，该药物用于调节(例如标准化)体内或体外的肿瘤微环境(例如肿瘤-基质微环境和/或肿瘤-免疫微环境)。在某些实施方式中，抑制发生于受试者活体内。在某些实施方式中，抑制发生于体外(例如细胞或生物学样品中)。

因此，在一些实施方式中，本发明所描述的ALK-5抑制剂化合物可用于调节肿瘤-免疫微环境且增加CD8+T细胞，如例如通过促进浸润表型。在其他的实施方式中，本发明所描述的ALK-5抑制剂化合物的施用可与免疫调节剂(例如CAR-T疗法，免疫检查点抑制剂，诸如PD-1、PD-L1或CTLA4抑制剂)组合使用。在一些实施方式中，免疫调节剂为CAR-T疗法，包括本发明所描述的CAR-T疗法中任一者。在一些实施方式中，免疫调节剂为免疫检查点抑制剂，例如PD-1、PD-L1或CTLA4抑制剂，包括本发明所描述的免疫检查点抑制剂中任一者。在一些实施方式中，治疗包括施用免疫调节剂及治疗有效量的一种或多种本发明所描述的ALK-5抑制剂化合物，例如一种或多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的ALK-5抑制剂化合物，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58的一个或多个、或其任一者的药学上可接受的盐。

本发明还提供用于增加肿瘤血管分布或流向肿瘤的血液或该两者的方法，其包括使肿瘤与本公开的化合物，例如一种或多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物接触。本发明还提供用于增加肿瘤血管分布或流向肿瘤的血液或该两者的式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或其药学上可接受的盐、及其药物组合物。本发明还提供式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或其药学上可接受的盐、及其药物组合物用于增加肿瘤血管分布或血流或该两者的用途。在某些实施方式中，肿瘤在受试者中。在某些实施方式中，肿瘤是离体的。

治疗剂(例如本公开的化合物)及其药物组合物可取决于化合物及要治疗的具体疾病而经由多种施用途径施用，包括例如经口、饮食、局部、经皮、直肠、肠胃外(例如动脉内、静脉内、肌肉内、皮下注射、皮内注射)、静脉内输液和吸入(例如支气管内、鼻内或经口吸入、鼻内滴剂)施用途径。施用可依指示为局部或全身。优选的施用模型可取决于所选择的具体化合物而改变。在一些实施方式中，治疗剂(例如本公开的化合物)经口施用。在一些实施方式中，治疗剂(例如本公开的化合物)经静脉内施用。治疗剂(例如本公开的化合物)可以本发明所描述的剂量中任一者施用。

联合疗法

本公开的化合物可作为单一疗法施用。除了作为单一疗法施用以外，本公开的化合物，包括例示性化合物及其药学可接受的盐、及其药物组合物可与其他的治疗剂和/或治疗模型联合施用。因此，在一些实施方式中，该方法进一步包括向受试者施用一种或多种额外的疗法(例如治疗剂)。适合于本发明所公开所述的方法、组合物及组合使用的额外的疗法(例如治疗剂)包括那些本发明所公开者。

术语“联合疗法”指施用两种或更多种治疗剂以治疗本发明所描述的疾病、疾患或病症。这些施用包括以实质上同时的方式共同施用治疗剂，诸如在具有固定比率的活性成分的单一胶囊中。另外可选地这些施用包括以用于各活性成分的多个或单独的容器中(例如胶囊、粉剂和液体)共同施用。这些施用还包括以依序的方式在约相同的时间或不同的时间使用各类型的治疗剂。本公开的化合物(诸如示例性化合物、或其药学上可接受的盐、或其组合物)及额外的治疗剂可经由相同的施用途径或经由不同的施用途径施用。粉剂和/或液体可在施用之前重组或稀释至所需剂量。治疗方案通常提供有益的药物组合效应以治疗本发明所描述的疾病、病症或疾患。

在一些实施方式中，本公开的化合物及额外的疗法共同施用，例如以同时或实质上同时的方式。在一些实施方式中，本公开的化合物及额外的疗法在约相同的时间或不同的时间依序施用。例如，本公开的化合物可在额外的疗法前施用。或者，本公开的化合物可在额外的疗法后施用。

在一些实施方式中，与本公开的化合物联合使用的疗法提供用于调节与本公开的化合物所调节的路径不同的其他路径的已知的药剂或与本公开的化合物所调节的路径相同的路径的其他组分(例如酶)。式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或其药学上可接受的盐、或其组合物可与一种或多种额外的疗法(例如治疗剂)组合施用，例如改进在有其需要的受试者中治疗疾病的活性、效力和/或功效、预防在有其需要的受试者中的疾病、降低在有其需要的受试者中发展出疾病的风险和/或抑制受试者或细胞中的蛋白激酶活性；改进生物利用率；改进安全性；降低抗药性；降低和/或修饰代谢；抑制排泄；和/或修饰式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或其药学上可接受的盐、或其组合物在受试者或细胞中的分布。应当认识到所使用的额外的疗法可对相同的疾患实现所需效应和/或可实现不同的效应。在一个方面中，联合疗法包括但不限于本发明所描述的化合物与化疗剂、治疗性抗体和/或放疗的组合，例如以提供协同或累加治疗效应。

当与另一疗法联合施用时，本公开的化合物(诸如示例性化合物、或其药学上可接受的盐、或其组合物)可在其他疗法(例如额外的治疗剂)之前、之后或并行施用。当两种或更多种治疗剂同时(例如并行)共同施用时，本公开的化合物(诸如示例性化合物、或其药学上可接受的盐)及其他治疗剂可在单独的制剂中或同一制剂中。另外可选地本公开的化合物(诸如示例性化合物、或其药学上可接受的盐、或其组合物)及其他疗法可在如熟练的临床医师确定的适当的时间框内(例如足以容许本公开的化合物(诸如示例性化合物、或其药学上可接受的盐、或其组合物)及其他疗法的药物作用重叠的时间)依序施用(例如作为单独的组合物)。

额外的治疗剂包括治疗活性剂。治疗剂亦包括预防活性剂。治疗剂包括小有机分子，诸如药物化合物(例如经美国食品及药物管理局批准用于人类或兽医的化合物，如联邦管制法规(Code of Federal Regulations)(CFR)中的提供)、肽、蛋白质、碳水化合物、单糖、寡糖、多糖、核蛋白、黏蛋白、脂蛋白、合成多肽或蛋白质、与蛋白质连结的小分子、糖蛋白、类固醇、核酸、DNA、RNA、核苷酸、核苷、寡核苷酸、反义寡核苷酸、脂质、激素、维生素和细胞。各额外的治疗剂可针对该治疗剂确定的剂量和/或时程施用。额外的治疗剂也可以彼此一起和/或与本发明所描述的化合物或组合物一起以单剂量施用或以不同剂量单独施用。用于方案中的具体组合将考虑例如本发明所描述的化合物与额外的治疗剂的兼容性和/或要实现的所需治疗和/或预防效应。通常预期在组合中的额外的治疗剂的使用水平不超过彼等单独使用的水平。在一些实施方式中，在组合中的使用水平比那些单独使用的水平低。

在某些实施方式中，额外的治疗剂选自：抗代谢物、DNA分段剂、DNA交联剂、嵌入剂、蛋白质合成抑制剂、拓朴异构酶I毒物(例如喜树碱或托泊替康(topotecan))、拓朴异构酶II毒物、微管引导剂、激酶抑制剂、激素和激素拮抗剂。

在一些实施方式中，增殖性疾病(例如癌症)的治疗使用本公开的本发明化合物，例如一种或多种式(I)、(II)、(III)或(IV)、或表1或表4的化合物、或其药学上可接受的盐，例如Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58、或其药学上可接受的盐的一个或多个及一种或多种免疫肿瘤(IO)药剂进行。

与本公开的化合物组合使用的疗法(例如在组合疗法中、在药物组合中)的实例包括标准护理疗法(standard of care therapies)和/或方案(例如标准护理剂)，诸如第一线标准护理疗法(例如化学疗法)或最后一线标准护理疗法(例如化疗法)。标准护理疗法为临床医师应使用于特定类型的患者、疾病和/或临床环境的疗法。诸如美国国家癌症信息网(National Comprehensive Cancer Network)(NCCN)的组织时常发布指南和/或治疗法则(treatment algorithm)，提出对治疗特定患者、疾病和/或临床环境最好的做法。参见nccn.org。这些指南时常建立、提出和/或总结标准护理疗法。

在一些实施方式中，本公开的化合物与用于纤维化和/或纤维化症状的标准护理疗法联合施用。用于纤维化的标准护理疗法的非限制性实例包括尼达尼布(nintedanib)、吡非尼酮和氧疗法。在一些实施方式中，本公开的化合物与尼达尼布或吡非尼酮或其药学上可接受的盐组合施用。在一些实施方式中，本公开的化合物与氧疗法组合施用。

在一些实施方式中，本公开的化合物与用于卵巢癌的标准护理疗法联合施用。例如，用于卵巢癌的标准护理疗法的非限制性实例包括铂类似物(例如顺铂(cisplatin)、太平洋紫杉醇(paclitaxel)、卡铂(carboplatin))或包括铂类似物的组合(例如欧洲紫杉醇(docetaxel)与卡铂；太平洋紫杉醇与卡铂；卡铂与脂质体多柔比星(doxorubicin)(dox)；太平洋紫杉醇、卡铂与贝伐珠单抗(bevacizumab)(bev)；卡铂与吉西他滨(gemcitabine)(gem)/(bev)；卡铂、脂质体dox与bev；卡铂、太平洋紫杉醇与bev；顺铂与吉西他滨；奥沙利铂(oxaliplatin))；六甲蜜胺(altretamine)；卡培他滨(capecitabine)；依弗酰胺(ifosfamide)；伊立替康(irinotecan)；霉法兰(melphalan)；太平洋紫杉醇(例如白蛋白结合的太平洋紫杉醇)；培美曲塞(pemetrexed)；或长春瑞滨(vinorelbine)。用于卵巢癌的标准护理疗法的非限制性实例亦包括标靶疗法，诸如抗体疗法(例如贝伐珠单抗)；PARP抑制剂(例如奥拉帕尼(olaparib)、芦卡帕尼(rucaparib)、尼拉帕尼(niraparib)、维利帕尼(veliparib)、拉唑帕尼(talazoparib))；酪氨酸激酶抑制剂(TKI)(例如帕唑帕尼(pazopanib))；免疫疗法；免疫检查点抑制剂(例如PD-1或PD-L1抑制剂)；帕博利珠单抗(pembrolizumab)；或激素疗法(例如他莫昔芬(tamoxifen)、阿那曲唑(anastrozole)、伊析美斯坦(exemestane)、利妥唑(letrozole)、LHRH促效剂，诸如乙酸亮丙瑞林(leuprolide)、乙酸甲地孕酮(megestrol))。用于卵巢癌的标准护理疗法的非限制性实例进一步包括激素疗法(例如阿那曲唑、伊析美斯坦、利妥唑、乙酸亮丙瑞林、乙酸甲地孕酮、他莫昔芬)。用于卵巢癌的标准护理疗法的非限制性实例另外包括环磷酰胺；依托泊苷(etoposide)；索拉非尼(sorafenib)；或长春瑞滨。

在一些实施方式中，本公开的化合物与用于胰腺癌的标准护理疗法联合施用。用于胰腺癌的标准护理疗法的非限制性实例包括FOLFIRINOX(由醛叶酸、推注的氟尿嘧啶、伊立替康及奥沙利铂所组成的化学疗法方案)；经修饰的FOLFIRINOX方案(由醛叶酸、连续输液的氟尿嘧啶、伊立替康及奥沙利铂所组成的化学疗法方案)；吉西他滨和白蛋白-太平洋紫杉醇；吉西他滨和卡培他滨；奥拉帕尼；吉西他滨和厄洛替尼(erlotinib)；吉西他滨、欧洲紫杉醇和卡培他滨；拉诺翠替尼布(larotrectinib)；帕博利珠单抗；吉西他滨；及白蛋白-太平洋紫杉醇、吉西他滨与顺铂的三重组合。

在一些实施方式中，本公开的化合物与用于前列腺癌(包括去势抗性前列腺癌)的标准护理疗法联合施用。用于前列腺癌的标准护理疗法的非限制性实例包括PARP抑制剂(例如奥拉帕尼、芦卡帕尼、尼拉帕尼、维利帕尼、拉唑帕尼)、LHRH促效剂(例如乙酸戈舍瑞林(goserelin)、以酸组胺瑞林(histrelin)、乙酸亮丙瑞林和双羟萘酸曲普瑞林(triptorelin))；LHRH拮抗剂(例如地加瑞克(degarelix))；抗雄激素受体(例如比卡鲁胺(bicalutamide)、氟他胺(flutamide)、尼鲁胺(nilutamide)、恩杂鲁胺(enzalutamide)、阿珀鲁胺(apalutamide)、达隆鲁胺(darolutamide))；皮质类固醇(例如普赖松(prednisone)、甲基去氢皮质醇(methylprednisolone)、氢皮质酮、地塞米松(dexamethasone))；雌激素(例如己烯雌酚)；雄激素合成抑制剂(例如酮康唑(ketoconazole)、乙酸阿比特龙(abiraterone))；及雄激素剥夺疗法。

在一些实施方式中，本公开的化合物与用于多发性骨髓瘤的标准护理疗法联合施用。用于多发性骨髓瘤的标准护理疗法的非限制性实例包括蛋白酶体抑制剂，诸如硼替佐米(bortezomib)、卡夫佐米(carfilzomib)和马瑞佐米(marizomib)。

在一些实施方式中，本公开的化合物与放疗法联合施用。放疗法的非限制性实例包括体外放射线疗法(external-beam therapy)、体内放射疗法(internal radiationtherapy)、埋植疗法、立体定位放射手术、全身性放射疗法、放射疗法和永久或暂时性间质近接疗法。如本发明所使用的术语“近距放射疗法”指通过在肿瘤或其他增生性组织疾病位点或附近插入体内的空间局限的放射性材料而递送的放射疗法。该术语意欲但不限于包括暴露于放射性同位素(例如At211、I131、I125、Y90、Re186、Re188、Sm153、Bi212、P32和Lu的放射性同位素)。适合用作为细胞调理剂的辐射源包括固体和液体两者。以非限制性实例方式描述，辐射源可为放射性核素，诸如作为固体源的I125、I131、Yb169、Ir192，作为固体源的I125，或发射光子、β粒子、γ辐射或其他治疗射线的其他放射性核素。放射性材料亦可为自任何放射性核素溶液(例如I125或I131溶液)所制成的流体，或放射性流体可使用含有固体放射性核素(诸如Au198、Y90)小颗粒的适合的流体浆液来生产。而且，放射性核素可包埋在凝胶或放射性微球中。

不想受到任何理论的限制，本公开的化合物可使得异常细胞对以杀死和/或抑制这些细胞生长为目的的放射治疗更敏感。因此，一些实施方式包括使哺乳动物的异常细胞对放射治疗敏感的方法，其包括对哺乳动物施用一定量的如本发明所描述的化合物，该量有效使异常细胞对放射治疗敏感。本公开的化合物在此方法中的量可根据用于确定本发明所描述的这些化合物的有效量的方式测定。

在一些实施方式中，标准护理疗法包括放射疗法。

DNA损伤剂也可以与本公开的化合物组合使用。DNA损伤剂的非限制性实例包括放射、拓朴异构酶抑制剂、PARP抑制剂、DNA交联剂和诱导DNA损伤的标准护理剂，诸如DNA交联剂。DNA损伤剂的具体的非限制性实例包括abraxane、吉西他滨、太平洋紫杉醇和替莫唑胺(temozolomide)。如本发明所使用的“DNA损伤剂”指直接或间接地损伤DNA的任何剂，同源重组能以此方式修复损伤。DNA损伤剂的非限制性实例为DNA损伤化学剂、化学治疗剂、放射化学疗法和游离或紫外线放射。DNA损伤化学治疗剂的非限制性实例包括烷化剂、亚硝基脲(nitrosourea)、抗代谢物、植物碱、植物浸出液和放射性同位素。DNA损伤化学治疗剂的非限制性实例亦包括DNA损伤药物，例如5-氟尿嘧啶(5-FU)、卡培他滨、吉西他滨、替莫唑胺、S-1(替加氟(Tegafur)、5-氯-2,4-二羟基吡啶和氧嗪酸(oxonic acid))、5-乙炔基尿嘧啶、阿拉伯糖基胞嘧啶(ara-C)、5-氮杂胞苷(5-AC)、2',2'-二氟-2'-脱氧胞苷(dFdC)、嘌呤抗代谢剂(例如巯嘌呤、硫唑嘌呤、硫鸟嘌呤)、吉西他滨盐酸盐(Gemzar)、喷司他丁(pentostatin)、别嘌呤醇(allopurinol)、2-氟-阿拉伯糖基-腺嘌呤(2F-ara-A)、羟基脲、硫芥子气(双氯乙基硫醚)、甲基二(氯乙基)胺、霉法兰、氯芥苯丁酸(chlorambucil)、环磷酰胺、依弗酰胺、塞替派(thiotepa)、AZQ、丝裂霉素C、二脱水半乳糖醇、二溴甜醇(dibromoducitol)、烷基磺酸盐(白消安(busulfan))、亚硝基脲(BCNU、CCNU、4-甲基CCNU或ACNU)、丙卡巴肼(procarbazine)、癸巴肼(decarbazine)、蝴蝶霉素(rebeccamycin)、蒽环(anthracyclin)，诸如多柔比星(阿霉素(adriamycin)；ADR)、道诺霉素(daunorubicin)(塞鲁比星(Cerubicine))、伊达比星(idarubicin)(伊达霉素(Idamycin))和表柔比星(epirubicin)(艾伦斯(Ellence))、蒽环类似物，诸如米托蒽醌(mitoxantrone)、放线菌素D、拓朴异构酶抑制剂(例如非插入性拓朴异构酶抑制剂，诸如表鬼臼毒素(epipodophyllotoxin)(依托泊苷或VP16、替尼泊苷(teniposide)或VM-26))、PARP抑制剂、鬼臼毒素(podophylotoxin)、博莱霉素(Blea)、培坡霉素(pepleomycin)、与核酸形成加成物的化合物，包括铂衍生物，例如顺铂(CDDP)、顺铂的反式类似物、卡铂、异丙铂(iproplatin)、四铂和奥沙利铂，以及喜树碱、托泊替康、伊立替康(CPT-11)和SN-38。放射(例如紫外线(UV)、红外线(IR)或α-、β-或γ-放射)亦为DNA损伤剂。

在一些实施方式中，标准护理疗法包括DNA损伤剂，诸如DNA交联剂。

诱导内质网(ER)压力的药剂也可以与本公开的化合物组合使用。诱导ER压力的药剂的非限制性实例包括增加活性含氧物(ROS)水平的药剂(例如那帕布新(napabucasin))、伴护蛋白抑制剂、HSP90抑制剂、HSP70抑制剂、PDI抑制剂和蛋白酶体抑制剂。诱导ER压力的药剂的更多非限制性实例包括GSK2606414、GSK2656157、STF-083010、酪氨酸激酶抑制剂(例如索拉非尼)、磷酸-eif2α磷酸酶(例如Sal003)、二吲哚基甲烷衍生物、蛋白酶体抑制剂(例如硼替佐米)、列维斯托利(levistolide)A、雄茸交酯、托芬那酸(tolfenamic acid)、斑螫素、鼠尾草酸(carnosic acid)、紫花牡荆素(casticin)、隐丹参醌(cryptotanshinone)、姜黄素、卡瓦胡椒素(flavokawain)B、岩藻依聚糖(fucoidan)、2-3,4-二羟基苯基乙醇、7-二甲氧基黄酮、SMIP004(N-(4-丁基-2-甲基-苯基乙酰胺)、甘草查尔酮(licochalcone)A、甲基莲心碱(neferine)、牡丹酚、豹鳎毒素、小白菊内酯(parthenolide)、胡椒碱、绿茶多酚(polyphenon)E、重楼皂苷(polyphyllin)D、白藜芦醇、去氢木香内酯(dehydrocostuslactone)、γ-参双键生殖酚、Ω-羟基十一-9-烯酸、蛇葡萄素(ampelopsin)、紫金牛醌(ardisianone)、金雀异黄酮、牙黄酮(guttiferone)H、香胶树脂酮(guggulsterone)、地钱素(marchantin)M、菝葜皂苷元(sarsasapogenin)、三萜类皂苷(saxifragifolin)、灵菌红素、槲皮素、厚朴酚(honokiol)、布雷菲德菌素(brefeldin)A、A-琥珀酸生育酚、疣孢菌素(verrucarin)A、琥珀酸维生素E、阿拓芬(ultrafine)和花姜酮。参见例如Walczak,A.等人，Oxidative Medicine and Cellular Longevity Volume 2019,Article ID 5729710，将其完整内容并入本发明以供参考。

在某些实施方式中，如本发明所描述的化合物与B细胞受体信号传导拮抗剂(例如布鲁顿(Bruton)氏酪氨酸激酶(BTK)抑制剂，诸如依鲁替尼(Ibrutinib))组合施用于有其需要的受试者。因此，本公开所述的方法包括治疗癌症所述的方法，其包括对有其需要的受试者施用有效量的如本发明所描述的化合物及布鲁顿氏酪氨酸激酶(BTK)抑制剂。施用可在B细胞受体信号传导拮抗剂(例如BTK抑制剂)的施用之前、同时或之后。

在一些实施方式中，如本发明所描述的化合物与BTK抑制剂共同施用。在其他的实施方式中，如本发明所描述的化合物在BTK抑制剂之后施用。在又不同的实施方式中，如本发明所描述的化合物在BTK抑制剂之后施用。

在各种实施方式中，BTK抑制剂为依鲁替尼。在一些具体实施方式中，癌症为慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、小淋巴球性淋巴瘤(SLL)或该两者。在一些实施方式中，受试者已接受过用于CLL、SLL或该两者的先前治疗方案。在一些实施方式中，受试者在先前治疗方案的后是难治的，受试者在反应先前治疗方案之后复发CLL、SLL或该两者或受试者具有可检测的微量残存疾病(MRD)。

在另一实施方式中，如本发明所描述的化合物与Bcl-2抑制剂(诸如维尼克拉(venetoclax))组合施用于有其需要的受试者。施用可在Bcl-2抑制剂的施用之前、同时或之后。在某些实施方式中，受试者对Bcl-2抑制剂的治疗不敏感、不适合以Bcl-2抑制剂治疗或在以Bcl-2抑制剂治疗之后复发。在一具体实施方式中，如本发明所描述的化合物与Bcl-2抑制剂(诸如维尼克拉)组合施用于有其需要的受试者以治疗白血病(例如CLL、SLL或该两者)。

与本公开的化合物联合使用的特别关注的免疫调节剂包括：阿富妥珠单抗(afutuzumab)(取自)；派非格司亭(pegfilgrastim)/>雷利窦迈(lenalidomide)(CC-5013，/>)；沙利窦迈(thalidomide)/>)；艾可米得(actimid)(CC4047)；及IRX-2(包括介白素1、介白素2和干扰素γ的细胞因子混合物，CAS 951209-71-5，取自IRX Therapeutics)。

与本公开的化合物联合使用的特别关注的嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)疗法包括：替沙津鲁(Tisagenlecleucel)(Novartis)、西卡思罗(Axicabtagene ciloleucel)(Kite)及托希珠单抗(Tocilizumab)和阿利珠单抗(Atlizumab)(Roche)。

在另一实施方式中，如本发明所描述的化合物与免疫调节剂(例如CAR-T疗法，免疫检查点抑制剂，诸如PD-1、PD-L1或CTLA4抑制剂)组合施用于有其需要的受试者。在一些实施方式中，免疫调节剂为CAR-T疗法，包括本发明所描述的CAR-T疗法中任一者。在一些实施方式中，免疫调节剂为免疫检查点抑制剂，例如PD-1、PD-L1或CTLA4抑制剂，包括本发明所描述的免疫检查点抑制剂中任一者。不想受到任何特定理论的束缚，据信本公开的化合物(诸如例示性化合物)可改进对肿瘤的血管灌注且由此增强对肿瘤的药物递送。预期增强的药物递送进而增强药物的功效，诸如免疫调节剂(例如免疫肿瘤剂)，包括本发明所描述的免疫调节剂，例如通过使肿瘤对循环药物更敏感。

在又另一实施方式中，本发明所描述的化合物与免疫检查点抑制剂(例如PD-1抑制剂(诸如帕博利珠单抗或尼沃鲁单抗(Nivolumab))、PD-L1抑制剂(诸如阿特珠单抗(Atezolizumab)、艾维鲁单抗(Avelumab)或德瓦鲁单抗(Durvalumab))、CTLA-4抑制剂、LAG-3抑制剂或Tim-3抑制剂)组合施用于有其需要的受试者。因此，本公开所述的方法包括治疗癌症的方法，其包括对有其需要的受试者施用有效量的本发明所描述的化合物及免疫检查点抑制剂。本发明所描述的化合物的施用可在免疫检查点抑制剂(例如PD-1抑制剂(诸如帕博利珠单抗或尼沃鲁单抗)、PD-L1抑制剂(诸如阿特珠单抗、艾维鲁单抗或德瓦鲁单抗)、CTLA-4抑制剂、LAG-3抑制剂或Tim-3抑制剂)的施用之前、同时或之后。

在一些实施方式中，本发明所描述的化合物与免疫检查点抑制剂共同施用。在其他的实施方式中，本发明所描述的化合物在免疫检查点抑制剂之后施用。在又不同的实施方式中，本发明所描述的化合物在免疫检查点抑制剂之前施用。

与本公开的化合物组合使用的关注的免疫检查点抑制剂包括：PD-1抑制剂，诸如帕博利珠单抗帕博利珠单抗(也称作兰博利珠单抗(Lambrolizumab)、MK-3475、MK03475、SCH-900475或/>)。帕博利珠单抗及其他抗PD-1抗体描述于Hamid,O.等人的(2013)New England Journal of Medicine 369(2):134-44、US 8,354,509及WO 2009/114335中，并入其全文以供参考。尼沃鲁单抗/>尼沃鲁单抗(也称作MDX-1106、MDX-1106-04、ONO-4538、BMS-936558或/>)。尼沃鲁单抗(Clone5C4)及其他抗PD-1抗体公开于US 8,008,449及WO 2006/121168中，并入其全文以供参考。

与本公开的化合物组合使用的关注的免疫检查点抑制剂还包括PD-1抑制剂，诸如西米普利单抗(cemiplimab)斯巴达珠单抗(spartalizumab)(PDR001)、匹利珠单抗(Pidilizumab)(CureTech)、MEDI0680(Medimmune)、西米普利单抗(REGN2810)、多斯利单抗(dostarlimab)(TSR-042)、PF-06801591(Pfizer)、替雷利珠单抗(tislelizumab)(BGB-A317)、卡瑞利珠单抗(camrelizumab)(INCSHR1210、SHR-1210)和AMP-224(Amplimmune)；AMP-224(Amplimmune)、CBT-501(CBT Pharmaceuticals)、CBT-502(CBTPharmaceuticals)、JS001(Junshi Biosciences)、IBI308(Innovent Biologics)、INCSHR1210(Incyte)，也称作SHR-1210(Hengrui Medicine)、BGBA317(Beigene)、BGB-108(Beigene)、BAT-I306(Bio-Thera Solutions)、GLS-010(Gloria Pharmaceuticals；WuXiBiologics)、AK103、AK104、AK105(Akesio Biopharma；Hangzhou Hansi Biologics；Hanzhong Biologics)、LZM009(Livzon)、HLX-10(Henlius Biotech)、MEDI0680(Medimmune)、PDF001(Novartis)、PF-06801591(Pfizer)、匹利珠单抗(CureTech)、REGN2810(Regeneron)、TSR-042(Tesaro)，也称作ANB011或CS1003(CStonePharmaceuticals)。MEDI0680(Medimmune)也称作AMP-514。MEDI0680及其他抗PD-1抗体公开于US 9,205,148及WO 2012/145493中，并入其全文以供参考。匹利珠单抗也称作CT-011。匹利珠单抗及其他抗PD-1抗体公开于Rosenblatt,J.等人，(2011)JImmunotherapy 34(5):409-18、US 7,695,715、US 7,332,582及US 8,686,119中，并入其全文以供参考。PD-1抑制剂的其他实例包括帕博利珠单抗(也称作兰博利珠单抗、MK-3475、MK03475、SCH-900475或)及其他抗PD-1抗体(如Hamid,O.等人的(2013)New England Journal ofMedicine 369(2):134-44、US 8,354,509及WO 2009/114335中所公开，并入其全文以供参考)、尼沃鲁单抗(也称作MDX-1106、MDX-1106-04、ONO-4538、BMS-936558或/>)及其他抗PD-1抗体(如US 8,008,449及WO 2006/121168中所公开，并入其全文以供参考)、西米普利单抗/>斯巴达珠单抗(PDR001)、匹利珠单抗(CureTech)、MEDI0680(Medimmune)、西米普利单抗(REGN2810)、多斯利单抗(TSR-042)、PF-06801591(Pfizer)、西尼替利单抗(sinitilimab)、特瑞普利单抗(toripalimab)、替雷利珠单抗(BGB-A317)、卡瑞利珠单抗(INCSHR1210、SHR-1210)、AMP-224(Amplimmune)、CBT-501(CBTPharmaceuticals)、CBT-502(CBT Pharmaceuticals)、JS001(Junshi Biosciences)、IBI308(Innovent Biologics)、INCSHR1210(Incyte)，也称作SHR-1210(HengruiMedicine)、BGBA317(Beigene)、BGB-108(Beigene)、BAT-I306(Bio-Thera Solutions)、GLS-010(Gloria Pharmaceuticals；WuXi Biologics)、AK103、AK104、AK105(AkesioBiopharma；Hangzhou Hansi Biologics；Hanzhong Biologics)、LZM009(Livzon)、HLX-10(Henlius Biotech)、MEDI0680(Medimmune)、PDF001(Novartis)、PF-06801591(Pfizer)、匹利珠单抗(CureTech)，也称作CT-011及其他抗PD-1抗体(如Rosenblatt,J.等人的(2011)JImmunotherapy 34(5):409-18、US 7,695,715、US 7,332,582及US 8,686,119中所公开，并入其全文以供参考)、REGN2810(Regeneron)、TSR-042(Tesaro)，也称作ANB011或CS1003(CStone Pharmaceuticals)。MEDI0680(Medimmune)也称作AMP-514。MEDI0680及其他抗PD-1抗体公开于US 9,205,148及WO 2012/145493中，并入其全文以供参考。其他已知的抗PD-1抗体分子包括那些在例如WO 2015/112800、WO 2016/092419、WO 2015/085847、WO 2014/179664、WO 2014/194302、WO 2014/209804、WO 2015/200119、US 8,735,553、US 7,488,802、US 8,927,697、US 8,993,731及US 9,102,727中所描述的抗体分子，并入其全文以供参考。在一实施方式中，PD-1抑制剂为抗PD-1抗体分子，如描述于2015年7月30日以"Antibody Molecules to PD-1and Uses Thereof"为标题发表的US 2015/0210769中，并入其全文以供参考。在一实施方式中，抗PD-1抗体分子包括BAP049-Clone-E或BAP049-Clone-B的CDR、可变区、重链和/或轻链，其公开于US 2015/0210769中。本文公开的抗体分子可以US 2015/0210769中所描述的载体、宿主细胞和方法制成，并入其全文以供参考。在一实施方式中，PD-1抑制剂为抑制PD-1信号传导路径的肽，如例如US 8,907,053中所述，并入其全文以供参考。在一实施方式中，PD-1抑制剂为免疫粘附素(例如包括融合至恒定区(例如免疫球蛋白序列的Fc区)的PD-L1或PD-L2的细胞外或PD-1结合部分的免疫粘附素)。在一实施方式中，PD-1抑制剂为AMP-224(B7-DCIg(Amplimmune)，例如公开于WO 2010/027827及WO2011/066342中，并入其全文以供参考)。

PD-L1抑制剂，诸如阿特珠单抗艾维鲁单抗德瓦鲁单抗/>FAZ053(Novartis)和BMS-936559(Bristol-Myers Squibb)；及靶向CTLA-4的药物，诸如易普利姆单抗(ipilimumab)PD-L1抑制剂，诸如阿特珠单抗(也称作MPDL3280A、RG7446、RO5541267、YW243.55.S70或/>)及如US 8,217,149中所公开的其他抗PD-L1抗体(并入其全文以供参考)、艾维鲁单抗(/>也称作MSB0010718C)及如WO 2013/079174中所公开的其他抗PD-L1抗体(并入其全文以供参考)、德瓦鲁单抗(/>或MEDI4736)及如US 8,779,108中所公开的其他抗PD-L1抗体(并入其全文以供参考)、FAZ053(Novartis)及BMS-936559(Bristol-Myers Squibb)。在某些实施方式中，PD-L1抑制剂为KN035(Alphamab；3DMed；Ascletis Pharma)、恩伐利单抗(Envafolimab)(TRACONPharmaceuticals)、BMS 936559(Bristol-Myers Squibb)、CS1001(CStonePharmaceuticals,Ligand Pharmaceuticals)、CX-072(CytomX Therapeutics)、FAZ053(Novartis)、SHR-1316(Hengrui Medicine)、TQB2450(Chiatai Tianqing)、STI-A1014(Zhaoke Pharm；Lee's Pharm,Lonza,Sorrento Therapeutics,NantWorks)、LYN00102(Lynkcell)、A167(Harbour BioMed,Kelun Group)、BGB-A333(Beigene)、MSB2311(Mabspace Biosciences)或HLX-20(Henlius Biotech)。在一实施方式中，抗PD-L1抗体分子为BMS-936559(Bristol-Myers Squibb)，也称作MDX-1105或12A4。BMS-936559及其他抗PD-L1抗体公开于US 7,943,743和WO 2015/081158中，并入其全文以供参考。在某些实施方式中，PD-L1抑制剂为可西贝利单抗(Cosibelimab)(Fortress Biotech)、LY3300054或碘达泊利单抗(Iodapolimab)(Eli Lilly)、GS-4224(Gilead Sciences)、STI-A1015(Yuhan,Sorrento Therapeutics)、BCD-135(BIOCAD)、可西贝利单抗(Dana-Farber CancerInstitute,TG Therapeutics)、APL-502(Apollomics)、AK106(Akeso Biopharma)、MSB2311(Transcenta Holding)、TG-1501(TG Therapeutics)、FAZ053(Novartis)。在某些实施方式中，PD-L1抑制剂为MT-6035(Molecular Templates)、淫羊藿苷(Icaritin)和ZKAB001(Lonza,Lee's Pharmaceutical Holdings,Sorrento Therapeutics,Shenogen PharmaGroup)、TRIDENT抗体(MacroGenics,Zai Lab)、YBL-007(Anh-Gook Pharmaceutical,Y-Biologics)、HTI-1316(Hengrui Therapeutics)、PD-L1 Oncology Project(WeizmannInstitute of Sciences)、JS003(Shanghai Junshi Biosciences)、ND021(NumabTherapeutics,CStone Pharmaceuticals)、Toca 521(Tocagen)、STT01(STCube)。在某些实施方式中，PD-L1抑制剂为DB004(DotBio)、MT-5050(Molecular Templates)、KD036(Kadmon)。在一实施方式中，PD-L1抑制剂为抗PD-L1抗体分子。在一实施方式中，PD-L1抑制剂为抗PD-L1抗体分子，如2016年4月21日以"Antibody Molecules to PD-L1 and UsesThereof"为标题所发表的US 2016/0108123中所公开，并入其全文以供参考。在一实施方式中，抗PD-L1抗体分子包括在US 2016/0108123中所公开的BAP058-CloneO或BAP058-CloneN的CDR、可变区、重链和/或轻链。

其他已知的抗PD-L1抗体包括那些例如在WO 2015/181342、WO 2014/100079、WO2016/000619、WO 2014/022758、WO 2014/055897、WO 2015/061668、WO 2013/079174、WO2012/145493、WO 2015/112805、WO 2015/109124、WO 2015/195163、US 8,168,179、US 8,552,154、US 8,460,927及US 9,175,082中所描述的抗体，并入其全文以供参考。

在一些实施方式中，免疫检查点抑制剂为细胞毒性T淋巴细胞相关调节剂。在一些实施方式中，免疫检查点抑制剂靶向CTLA-4，诸如易普利姆单抗曲美木单抗(tremelimumab)、ALPN-202(Alpine Immune Sciences)、RP2(Replimune)、BMS-986249(Bristol-Myers Squibb)、BMS-986218(Bristol-Myers Squibb)、扎利福雷单抗(zalifrelimab)(Agenus,Ludwig Institute for Cancer Research,UroGen Pharma,Recepta Biopharma)、BCD-217(BIOCAD)、Onc-392(Pfizer、OncoImmune)、IBI310(InnoventBiologics)、KN046(Alphamab)、MK-1308(Merck&Co)、REGN4659(RegeneronPharmaceuticals)、XmAb20717(Xencor)、XmAb22841(Xencor)、抗CTLA-4NF(Bristol-MyersSquibb)、MEDI5752(AstraZeneca)、AGEN1181(Agenus)、MGD019(MacroGenics)、ATOR-1015(Alligator Bioscience)、BCD-145(BIOCAD)、PSB205(Sound Biologics)、CS1002(CStonePharmaceuticals)、ADU-1604(Aduro Biotech)、PF-06753512(Pfizer)、BioInvent-转基因研究计划(Transgene)、AGEN2041(Agenus,Recepta Biopharam)、ATOR-1144(AlligatorBioscience)、CTLA-4研究项目(Sorrento Therapeutics)、PD-L1/CTLA-4研究项目(Sorrento Therapeutics)、HLX13(Shanghai Henlius Biotech)、ISA203(ISAPharmaceuticals)、PRS-300列A(Pieris Pharmaceuticals)、BA3071(BioAtla)、CTLA4癌研究计划(Biosortia Pharmaceuticals)、RP3(Replimune)、CG0161(Cold Genesys)、APL-509(Apollomics、JSR)、AGEN2041(Ludwig Institute for Cancer Research)、APC 101(Advanced Proteome)、CTLA-4抑制剂(Advanced Proteome)、BA3071(BeiGene)、BPI-002(BeyondSpring Pharmaceuticals)、CTLA-4抗体(Tikcro Technologies)、免疫肿瘤学研究计划II(OliPass)、PBP1701(Prestige BioPharma)、DB002(DotBio)、DB003(DotBio)、OR-2299(OncoResponse)、NK044(Alphamab)。在某些实施方式中，CTLA-4抑制剂为易普利姆单抗。在其他的实施方式中，CTLA4抑制剂为曲美木单抗。

与本发明所描述的化合物组合使用的关注的免疫检查点抑制剂亦包括：LAG-3抑制剂。在一些实施方式中，LAG-3抑制剂选自LAG525(Novartis)、BMS-986016(Bristol-Myers Squibb)或TSR-033(Tesaro)。在一实施方式中，LAG-3抑制剂为抗LAG-3抗体分子。在一实施方式中，LAG-3抑制剂为抗LAG-3抗体分子，如2015年9月17日以"AntibodyMolecules to LAG-3and Uses Thereof"为标题发表的US 2015/0259420中所公开，并入其全文以供参考。在一实施方式中，抗LAG-3抗体分子包括在US 2015/0259420中所公开的BAP050-CloneI或BAP050-CloneJ的CDR、可变区、重链和/或轻链。在一实施方式中，抗LAG-3抗体分子为BMS-986016(Bristol-Myers Squibb)，也称作BMS986016。BMS-986016及其他抗LAG-3抗体公开于WO 2015/116539及US 9,505,839中，并入其全文以供参考。在一实施方式中，抗LAG-3抗体分子为TSR-033(Tesaro)。在一实施方式中，抗LAG-3抗体分子为IMP731或GSK2831781(GSK and Prima BioMed)。IMP731及其他抗LAG-3抗体公开于WO 2008/132601及US 9,244,059中，并入其全文以供参考。在一实施方式中，抗LAG-3抗体分子为IMP761(Prima BioMed)。其他已知的抗LAG-3抗体包括那些例如在WO 2008/132601、WO 2010/019570、WO 2014/140180、WO 2015/116539、WO 2015/200119、WO 2016/028672、US 9,244,059、US 9,505,839中所描述的抗体，并入其全文以供参考。在一实施方式中，抗LAG-3抑制剂为可溶性LAG-3蛋白质，例如IMP321(Prima BioMed)，例如在WO 2009/044273中所公开，并入其全文以供参考。

与本发明所描述的化合物组合使用的关注的免疫检查点抑制剂还包括：Tim-3抑制剂。在一些实施方式中，TIM-3抑制剂为MGB453(Novartis)或TSR-022(Tesaro)。在一实施方式中，TIM-3抑制剂为抗TIM-3抗体分子。在一实施方式中，TIM-3抑制剂为抗TIM-3抗体分子，如在2015年8月6日以"Antibody Molecules to TIM-3and Uses Thereof"为标题发表的US 2015/0218274中所公开，并入其全文以供参考。在一实施方式中，抗TIM-3抗体分子包括在US 2015/0218274中所公开的ABTIM3-hum11或ABTIM3-hum03的CDR、可变区、重链和/或轻链。在一实施方式中，抗TIM-3抗体分子为TSR-022(AnaptysBio/Tesaro)。在一实施方式中，抗TIM-3抗体分子包括APE5137或APE5121的CDR序列(或统称为所有的CDR序列)、重链或轻链可变区序列或重链或轻链序列的一个或多个。APE5137、APE5121及其他抗TIM-3抗体公开于WO 2016/161270中，并入其全文以供参考。在一实施方式中，抗TIM-3抗体分子为抗体CloneF38-2E2。其他已知的抗TIM-3抗体包括那些例如在WO 2016/111947、WO 2016/071448、WO 2016/144803、US 8,552,156、US 8,841,418及US 9,163,087中所描述的抗体，并入其全文以供参考。

在保护正常细胞免于治疗毒性及限制器官毒性的努力中，细胞保护剂(诸如神经保护剂、自由基清除剂、心脏保护剂、蒽环外渗中和剂、营养素及类似者)可作为辅助疗法与本公开的化合物组合使用。适合的细胞保护剂包括阿米福汀(amifostine)麸酰胺酸、地美司那(dimesna)/>美司那(mesna)/>右雷佐生(dexrazoxane)(/>或/>)、扎利罗登(xaliproden)及菊白叶酸(也称作菊白叶酸钙、嗜橙菌因子和醛叶酸)。

在各种实施方式中，免疫检查点抑制剂为PD-1抑制剂。在某些实施方式中，PD-1抑制剂为帕博利珠单抗、尼沃鲁单抗或其组合。在一实施方式中，抗PD-1抗体分子为西米普利单抗。在一实施方式中，抗PD-1抗体分子为辛迪利单抗(Sintilimab)。在一实施方式中，抗PD-1抗体分子为特瑞普利单抗。在一实施方式中，抗PD-1抗体分子为卡瑞利珠单抗。

其他已知的抗PD-1抗体分子包括那些例如在WO 2015/112800、WO 2016/092419、WO 2015/085847、WO 2014/179664、WO 2014/194302、WO 2014/209804、WO 2015/200119、US8,735,553、US 7,488,802、US 8,927,697、US 8,993,731及US 9,102,727中所述者，并入其全文以供参考。

在一实施方式中，PD-1抑制剂为抗PD-1抗体分子，如在2015年7月30日以"Antibody Molecules to PD-1and Uses Thereof"为标题发表的US 2015/0210769中所述，并入其全文以供参考。在一实施方式中，抗PD-1抗体分子包括在US 2015/0210769中所公开的BAP049-Clone-E或BAP049-Clone-B的CDR、可变区、重链和/或轻链。本发明所描述的抗体分子可以US 2015/0210769中所描述的载体、宿主细胞及方法制成，并入其全文以供参考。

在一实施方式中，PD-1抑制剂为抑制PD-1信号传导路径的肽，例如US 8,907,053中所述，并入其全文以供参考。在一实施方式中，PD-1抑制剂为免疫粘附素(例如包括融合至恒定区(例如免疫球蛋白序列的Fc区)的PD-L1或PD-L2的细胞外或PD-1结合部分的免疫粘附素)。在一实施方式中，PD-1抑制剂为AMP-224(B7-DCIg(Amplimmune)，例如公开于WO2010/027827及WO 2011/066342中，并入其全文以供参考)。

在一些实施方式中，免疫检查点抑制剂为PD-L1抑制剂。在一些这些实施方式中，PD-L1抑制剂为艾维鲁单抗或其组合。在某些实施方式中，PD-L1抑制剂为阿特珠单抗，也称作MPDL3280A、RG7446、RO5541267、YW243.55.S70或TECENTRIQ^TM。阿特珠单抗及其他抗PD-L1抗体公开于US 8,217,149中，并入其全文以供参考。在某些实施方式中，PD-L1抑制剂为艾维鲁单抗，也称作MSB0010718C。艾维鲁单抗及其他抗PD-L1抗体公开于WO 2013/079174中，并入其全文以供参考。在某些实施方式中，PD-L1抑制剂为德瓦鲁单抗，也称作MEDI4736。德瓦鲁单抗及其他抗PD-L1抗体公开于US 8,779,108中，并入其全文以供参考。在某些实施方式中，PD-L1抑制剂为KN035(Alphamab；3Dmed；Ascletis Pharma)、恩伐利单抗(TRACONPharmaceuticals)、BMS 936559(Bristol-Myers Squibb)、CS1001(CStonePharmaceuticals,Ligand Pharmaceuticals)、CX-072(CytomX Therapeutics)、FAZ053(Novartis)、SHR-1316(Hengrui Medicine)、TQB2450(Chiatai Tianqing)、STI-A1014(Zhaoke Pharm；Lee's Pharm,Lonza,Sorrento Therapeutics,NantWorks)、LYN00102(Lynkcell)、A167(Harbour BioMed,Kelun Group)、BGB-A333(Beigene)、MSB2311(Mabspace Biosciences)或HLX-20(Henlius Biotech)。在一实施方式中，抗PD-L1抗体分子为BMS-936559(Bristol-Myers Squibb)，也称作MDX-1105或12A4。BMS-936559及其他抗PD-L1抗体公开于US 7,943,743及WO 2015/081158中，并入其全文以供参考。在一些实施方式中，PD-L1抑制剂为单株抗体(例如由Hisun Pharm制成且在此申请中应用于临床试验)。

在某些实施方式中，PD-L1抑制剂为可西贝利单抗(Fortress Biotech)、LY3300054或碘达泊利单抗(Eli Lilly)、GS-4224(Gilead Sciences)、STI-A1015(Yuhan,Sorrento Therapeutics)、BCD-135(BIOCAD)、可西贝利单抗(Dana-Farber CancerInstitute,TG Therapeutics)、APL-502(Apollomics)、AK106(Akeso Biopharma)、MSB2311(Transcenta Holding)、TG-1501(TG Therapeutics)、FAZ053(Novartis)。

在某些实施方式中，PD-L1抑制剂为MT-6035(Molecular Templates)、淫羊藿苷和ZKAB001(Lonza,Lee's Pharmaceutical Holdings,Sorrento Therapeutics,ShenogenPharma Group)、TRIDENT抗体(MacroGenics,Zai Lab)、YBL-007(Anh-GookPharmaceutical,Y-Biologics)、HTI-1316(Hengrui Therapeutics)、PD-L1 OncologyProject(Weizmann Institute of Sciences)、JS003(Shanghai Junshi Biosciences)、ND021(Numab Therapeutics,CStone Pharmaceuticals)、Toca 521(Tocagen)、STT01(STCube)。

在某些实施方式中，PD-L1抑制剂为DB004(DotBio)、MT-5050(MolecularTemplates)或KD036(Kadmon)。

在一实施方式中，PD-L1抑制剂为抗PD-L1抗体分子。在一实施方式中，PD-L1抑制剂为抗PD-L1抗体分子，如在2016年4月21日以"Antibody Molecules to PD-L1 and UsesThereof"为标题发表的US 2016/0108123中所公开，并入其全文以供参考。在一实施方式中，抗PD-L1抗体分子包括在US 2016/0108123中所公开的BAP058-CloneO或BAP058-CloneN的CDR、可变区、重链和/或轻链。

其他已知的抗PD-L1抗体包括那些例如在WO 2015/181342、WO 2014/100079、WO2016/000619、WO 2014/022758、WO 2014/055897、WO 2015/061668、WO 2013/079174、WO2012/145493、WO 2015/112805、WO 2015/109124、WO 2015/195163、US 8,168,179、US 8,552,154、US 8,460,927及US 9,175,082中所述者，并入其全文以供参考。

在一些实施方式中，免疫检查点抑制剂为细胞毒性T淋巴细胞相关调节剂。在一些实施方式中，免疫检查点抑制剂为CTLA-4抑制剂。在某些实施方式中，CTLA-4抑制剂为易普利姆单抗、曲美木单抗、ALPN-202(Alpine Immune Sciences)、RP2(Replimune)、BMS-986249(Bristol-Myers Squibb)、BMS-986218(Bristol-Myers Squibb)、扎利福雷单抗(Agenus,Ludwig Institute for Cancer Research,UroGen Pharma,ReceptaBiopharma)、BCD-217(BIOCAD)、Onc-392(Pfizer,OncoImmune)、IBI310(InnoventBiologics)、KN046(Alphamab)、MK-1308(Merck&Co)、REGN4659(RegeneronPharmaceuticals)、XmAb20717(Xencor)、XmAb22841(Xencor)、抗CTLA-4NF(Bristol-MyersSquibb)、MEDI5752(AstraZeneca)、AGEN1181(Agenus)、MGD019(MacroGenics)、ATOR-1015(Alligator Bioscience)、BCD-145(BIOCAD)、PSB205(Sound Biologics)、CS1002(CStonePharmaceuticals)、ADU-1604(Aduro Biotech)、PF-06753512(Pfizer)、BioInvent-转基因研究计划(Transgene)、AGEN2041(Agenus,Recepta Biopharam)、ATOR-1144(AlligatorBioscience)、CTLA-4研究项目(Sorrento Therapeutics)、PD-L1/CTLA-4研究项目(Sorrento Therapeutics)、HLX13(Shanghai Henlius Biotech)、ISA203(ISAPharmaceuticals)、PRS-300列A(Pieris Pharmaceuticals)、BA3071(BioAtla)、CTLA4癌研究计划(Biosortia Pharmaceuticals)、RP3(Replimune)、CG0161(Cold Genesys)、APL-509(Apollomics,JSR)、AGEN2041(Ludwig Institute for Cancer Research)、APC 101(Advanced Proteome)、CTLA-4抑制剂(Advanced Proteome)、BA3071(BeiGene)、BPI-002(BeyondSpring Pharmaceuticals)、CTLA-4抗体(Tikcro Technologies)、免疫肿瘤学研究计划II(OliPass)、PBP1701(Prestige BioPharma)、DB002(DotBio)、DB003(DotBio)、OR-2299(OncoResponse)、NK044(Alphamab)。在某些实施方式中，CTLA-4抑制剂为易普利姆单抗。在其他的实施方式中，CTLA4抑制剂为曲美木单抗。

在一些实施方式中，免疫检查点抑制剂为LAG-3抑制剂。在一些实施方式中，LAG-3抑制剂选自LAG525(Novartis)、BMS-986016(Bristol-Myers Squibb)或TSR-033(Tesaro)。

在一实施方式中，LAG-3抑制剂为抗LAG-3抗体分子。在一实施方式中，LAG-3抑制剂为抗LAG-3抗体分子，如在2015年9月17日以"Antibody Molecules to LAG-3and UsesThereof"为标题发表的US 2015/0259420中所公开，并入其全文以供参考。在一实施方式中，抗LAG-3抗体分子包括在US 2015/0259420中所公开的BAP050-CloneI或BAP050-CloneJ的CDR、可变区、重链和/或轻链。

在一实施方式中，抗LAG-3抗体分子为BMS-986016(Bristol-Myers Squibb)，也称作BMS986016。BMS-986016及其他抗LAG-3抗体公开于WO 2015/116539及US 9,505,839中，并入其全文以供参考。在一实施方式中，抗LAG-3抗体分子为TSR-033(Tesaro)。在一实施方式中，抗LAG-3抗体分子为IMP731或GSK2831781(GSK and Prima BioMed)。IMP731及其他抗LAG-3抗体公开于WO2008/132601及US 9,244,059中，并入其全文以供参考。在一实施方式中，抗LAG-3抗体分子为IMP761(Prima BioMed)。

其他已知的抗LAG-3抗体包括那些例如在WO 2008/132601、WO 2010/019570、WO2014/140180、WO 2015/116539、WO 2015/200119、WO 2016/028672、US 9,244,059、US 9,505,839中所述者，并入其全文以供参考。

在一实施方式中，抗LAG-3抑制剂为可溶性LAG-3蛋白质，例如IMP321(PrimaBioMed)，例如在WO 2009/044273中所公开，并入其全文以供参考。

在一些实施方式中，免疫检查点抑制剂为TIM-3抑制剂。在一些实施方式中，TIM-3抑制剂为MGB453(Novartis)或TSR-022(Tesaro)。

在一实施方式中，TIM-3抑制剂为抗TIM-3抗体分子。在一实施方式中，TIM-3抑制剂为抗TIM-3抗体分子，如在2015年8月6日以"Antibody Molecules to TIM-3and UsesThereof"为标题发表的US 2015/0218274中所公开，并入其全文以供参考。在一实施方式中，抗TIM-3抗体分子包括在US 2015/0218274中所公开的ABTIM3-hum11或ABTIM3-hum03的CDR、可变区、重链和/或轻链。

在一实施方式中，抗TIM-3抗体分子为TSR-022(AnaptysBio/Tesaro)。在一实施方式中，抗TIM-3抗体分子包括APE5137或APE5121的CDR序列(或统称为所有的CDR序列)、重链或轻链可变区序列或重链或轻链序列的一个或多个。APE5137、APE5121及其他抗TIM-3抗体公开于WO 2016/161270中，并入其全文以供参考。在一实施方式中，抗TIM-3抗体分子为抗体CloneF38-2E2。

其他已知的抗TIM-3抗体包括那些在例如WO 2016/111947、WO 2016/071448、WO2016/144803、US 8,552,156、US 8,841,418及US 9,163,087中所述者，并入其全文以供参考。

在实施方式中，如本发明所描述的化合物与溴结构域抑制剂、组蛋白去乙酰酶(HDAC)或该两者组合施用于有其需要的受试者。

溴结构域抑制剂抑制至少一种溴结构域蛋白质，诸如Brd2、Brd3、Brd4和/或BrdT，例如Brd4。在一些这些实施方式中，溴结构域抑制剂为JQ-1(Nature 2010Dec 23；468(7327):1067-73)、BI2536(ACS Chem.Biol.2014May 16；9(5):1160-71；BoehringerIngelheim)、TG101209(ACS Chem.Biol.2014May 16；9(5):1160-71)、OTX015(Mol.CancerTher.November 201312；C244；Oncoethix)、IBET762(JMed Chem.2013Oct 10；56(19):7498-500；GlaxoSmithKline)、IBET151(Bioorg.Med.Chem.Lett.2012Apr 15；22(8):2968-72；GlaxoSmithKline)、PFI-1(J.Med.Chem.2012Nov 26；55(22):9831-7；CancerRes.2013Jun 1；73(11):3336-46；Structural Genomics Consortium)或CPI-0610(Constellation Pharmaceuticals)。在一些实施方式中，溴结构域抑制剂为TG101209、BI2536、OTX015、C244、IBET762、IBET151或PFI-1。

HDAC抑制剂抑制至少一种HDAC蛋白质。HDAC蛋白质可基于与酵母HDAC蛋白质的同源性分类，类别I由HDAC1、HDAC2、HDAC3及HDAC8所组成；类别IIa由HDAC4、HDAC5、HDAC7及HDAC9所组成；类别IIb由HDAC6及HDAC10所组成；类别IV由HDAC11所组成。在一些这些实施方式中，HDAC抑制剂为曲古抑菌素(trichostatin)A、伏立诺司他(vorinostat)(Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.1998Mar 17；95(6):3003-7)、吉维诺司他(givinostat)、阿贝诺司他(abexinostat)(Mol.Cancer Ther.2006May；5(5):1309-17)、贝利诺司他(belinostat)(Mol.Cancer Ther.2003Aug；2(8):721-8)、帕比诺司他(panobinostat)(Clin.CancerRes.2006Aug 1；12(15):4628-35)、瑞米诺司他(resminostat)(Clin.Cancer Res.2013Oct1；19(19):5494-504)、奎诺司他(quisinostat)(Clin.Cancer Res.2013Aug 1；19(15):4262-72)、酯肽(depsipeptide)(Blood.2001Nov 1；98(9):2865-8)、恩替诺司他(entinostat)(Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.1999Apr 13；96(8):4592-7)、莫妥诺司他(mocetinostat)(Bioorg.Med.Chem.Lett.2008Feb 1；18(3):106771)或丙戊酸(valproicacid)(EMBO J.2001Dec 17；20(24):6969-78)。例如在一些实施方式中，HDAC抑制剂为帕比诺司他、伏立诺司他、MS275、贝利诺司他或LBH589。在一些实施方式中，HDAC抑制剂为帕比诺司他或SAHA。

在一些实施方式中，本公开所述的方法进一步包括向受试者施用放射疗法。

一些患者可能在施用期间或之后对本公开的化合物和/或其他治疗剂(例如抗癌剂)经历过敏反应。因此，抗过敏剂可与本公开的化合物和/或其他治疗剂(例如抗癌剂)组合施用，使过敏反应的风险降至最低。适合的抗过敏剂包括皮质类固醇(Knutson,S.等人的PLoS One,DOI:10.1371/journal.pone.0111840(2014))，诸如地塞米松(例如)、倍氯米松(beclomethasone)(例如/>)、氢皮质酮(也称作皮质酮、丁二酸钠氢皮质酮、磷酸钠氢皮质酮，以商品名/>磷酸氢皮质酮、/>HYDROCORT/>和/>销售)、去氢皮质醇(以商品名/>和/>销售)、普赖松(以商品名/>LIQUID/>和/>销售)、甲基去氢皮质醇(也称作6-甲基去氢皮质醇、乙酸甲基去氢皮质醇、丁二酸钠甲基去氢皮质醇，以商品名/>和/>销售)；抗组织胺，诸如苯海拉明(diphenhydramine)(例如)、羟嗪(hydroxyzine)和塞浦西他啶(cyproheptadine)；及支气管扩张剂，诸如β肾上腺素受体促效剂、沙丁胺醇(albuterol)(例如/>)及特必林(terbutaline)

一些患者可能在施用本发明所描述的化合物和/或其他治疗剂(例如抗癌剂)期间或之后经历恶心。因此，止吐剂可与本公开的化合物和/或其他治疗剂(例如抗癌剂)组合使用以防止恶心(上部胃)及呕吐。适合的止吐剂包括阿瑞匹坦(aprepitant)昂丹司琼(ondansetron)/>格拉司琼(granisetron)HCl/>劳拉西泮(lorazepam)(/>地塞米松/>普鲁氯嗪(prochlorperazine)卡索匹坦(casopitant)(/>和/>)及彼的组合。

时常开出减轻在治疗期间所经历的疼痛的药剂以使患者更舒适。常见的成药镇痛剂(诸如)亦可与本公开的化合物和/或其他治疗剂(例如抗癌剂)组合使用。类鸦片镇痛剂药物(诸如二氢可待因酮(hydrocodone)/乙酰胺酚(paracetamol)或二氢可待因酮/乙酰胺苯酚(acetaminophen)(例如/>)、吗啡(例如或/>)、羟考酮(例如/>或/>)、氧化吗啡酮盐酸盐/>及芬太尼(fentanyl)(例如/>))可用于中度或重度疼痛且可与本公开的化合物和/或其他治疗剂(例如抗癌剂)组合使用。

在一些前述的实施方式中，该方法用于治疗肝癌、难治性癌症(例如非小细胞肺癌)、肺癌、食管癌、霍奇金氏淋巴瘤、NK/T细胞淋巴瘤或黑色素瘤。在一些特定的实施方式中，该方法用于治疗食管鳞状细胞癌、胃癌、肺癌、鼻咽癌、膀胱癌、软组织肉瘤、弥漫型大B细胞淋巴瘤、头与颈鳞状细胞癌、肾癌、尿道上皮癌、卵巢癌、子宫癌或胰腺癌。在一些实施方式中，该方法用于治疗胆管癌。

许多化学治疗剂为目前本技术中已知的且可与如本发明所描述的化合物组合使用。在一些实施方式中，化学治疗剂选自：有丝分裂抑制剂、烷化剂、抗代谢物、嵌入抗生素、生长因子抑制剂、细胞周期抑制剂、酶、拓朴异构酶抑制剂、生物反应修饰剂、抗激素、血管生成抑制剂和抗雄激素。

可与如本发明所描述的化合物组合使用的治疗剂的非限制性实例为化学治疗剂、细胞毒性剂及非肽小分子，诸如(甲磺酸伊马替尼(Imatinib))、/>(硼替佐米)、Casodex(比卡鲁胺)、/> (吉非替尼(gefitinib))和阿霉素以及化学治疗剂主体。化学治疗剂的非限制性实例包括烷化剂，诸如塞替派和环磷酰胺/>烷基磺酸盐，诸如白消安、英丙舒凡(improsulfan)和哌泊舒凡(piposulfan)；氮丙啶，诸如苯多巴(benzodopa)、卡波醌(carboquone)、甲基优瑞多巴(meturedopa)和优瑞多巴(uredopa)；伸乙亚胺(ethylenimine)和甲基阿美胺(methylamelamine)，包括六甲蜜胺、三乙烯三聚氰胺(triethylenemelamine)、三乙烯磷酰胺(triethylenephosphoramide)、三乙烯硫代磷酰胺(triethylenethiophosphaoramide)和三羟甲基三聚氰胺；氮芥子气，诸如氯芥苯丁酸、萘氮芥(chlornaphazine)、氯磷酰胺(cholophosphamide)、雌二醇氮芥(estramustine)、依弗酰胺、甲基二(氯乙基)胺、氧氮芥(mechlorethamine oxide)盐酸盐、霉法兰、新氮芥(novembichin)、胆固醇苯乙酸氮芥(phenesterine)、松龙苯芥(prednimustine)、氯乙环磷酰胺(trofosfamide)、尿嘧啶芥(uracil mustard)；亚硝基脲，诸如卡氮芥(carmustine)、吡葡亚硝脲(chlorozotocin)、福莫司汀(fotemustine)、罗氮芥(lomustine)、尼氮芥(nimustine)、雷诺氮芥(ranimustine)；抗生素，诸如阿克拉霉素(aclacinomysin)、放线菌素、安曲霉素(authramycin)、氮丝胺酸(azaserine)、博莱霉素、放线菌素(cactinomycin)、卡利奇霉素(calicheamicin)、卡拉比辛(carabicin)、洋红霉素(carminomycin)、嗜癌素(carzinophilin)、/>色霉素(chromomycin)、达克霉素(dactinomycin)、道诺霉素、地托比星(detorubicin)、6-重氮-5-氧代-L-正白胺酸、多柔比星、表柔比星、依索比星(esorubicin)、伊达比星、麻西罗霉素(marcellomycin)、丝裂霉素、霉酚酸、诺加霉素(nogalamycin)、橄榄霉素(olivomycin)、培洛霉素(peplomycin)、波弗霉素(potfiromycin)、嘌呤霉素(puromycin)、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星(rodorubicin)、链霉黑素(streptonigrin)、链脲佐菌素(streptozocin)、杀结核菌素(tubercidin)、乌苯美司(ubenimex)、净司他汀(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)；抗代谢物，诸如甲胺喋呤(methotrexate)和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，诸如傣诺特呤(denopterin)、甲胺喋呤、蝶罗特呤(pteropterin)、三甲蝶呤(trimetrexate)；嘌呤类似物，诸如氟达拉滨(fludarabine)、6-巯嘌呤、硫咪嘌呤(thiamiprine)、硫鸟嘌呤；嘧啶类似物，诸如安西他滨(ancitabine)、阿扎胞苷(azacitidine)、6-硫唑脲嘧啶(azauridine)、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷(cytarabine)、二脱氧尿苷、脱氧氟尿苷(doxifluridine)、依诺他滨(enocitabine)、氟尿苷(floxuridine)；雄激素，诸如卡鲁睪酮(calusterone)、屈他雄酮(dromostanolone)丙酸盐、硫雄甾醇(epitiostanol)、美雄烷(mepitiostane)、睪酮内酯(testolactone)；抗肾上腺剂，诸如胺鲁米特(aminoglutethimide)、米托坦(mitotane)、曲洛司坦(trilostane)；叶酸补充剂，诸如亚叶酸(frolinic acid)；乙酰格雷酮(aceglatone)；醛磷酰胺(aldophosphamide)糖苷；氨基戊酮酸；安吖啶(amsacrine)；贝斯特氮芥(bestrabucil)；比生群(bisantrene)；依达曲沙(edatraxate)；磷胺氮芥(defofamine)；秋水仙胺(demecolcine)；地吖醌(diaziquone)；艾氟米辛(elfomithine)；依利醋铵(elliptinium acetate)；依托格鲁(etoglucid)；硝酸镓；羟基脲；蘑菇多糖(lentinan)；洛尼达明(lonidamine)；米托胍腙(mitoguazone)；米托蒽醌；莫哌达醇(mopidamol)；二胺硝吖啶(nitracrine)；喷司他丁；蛋胺氮芥(phenamet)；吡柔比星(pirarubicin)；鬼臼酸(podophyllinic acid)；2-乙基酰肼；丙卡巴肼；PSK.RTM.；雷佐生(razoxane)；西佐喃(sizofiran)；螺旋锗(spirogermanium)；细交链孢菌酮酸(tenuazonicacid)；三亚胺醌(triaziquone)；2,2',2"-三氯三乙胺；乌拉坦(urethan)；长春地辛(vindesine)；达喀尔巴嗪(dacarbazine)；甘露莫司汀(mannomustine)；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴卫矛醇(mitolactol)；哌泊溴烷(pipobroman)；加西托星(gacytosine)；阿拉伯糖苷(“Ara-C”)；环磷酰胺；塞替派；紫杉烷，例如任何形式的太平洋紫杉醇(例如经蛋白质结合的太平洋紫杉醇，例如abraxane(ABRAXANE)，Celgene，及例如TAXOLTM,Bristol-Myers Squibb Oncology,Princeton,N.J.)和欧洲紫杉醇(克癌易(TAXOTERETM),Rhone-Poulenc Rorer,Antony,France)；视黄酸；埃斯培拉霉素(esperamicin)；卡培他滨；及上述中任一者的药学上可接受的盐、酸或衍生物。

与本公开的化合物组合(例如在组合疗法中、在药物组合中)使用的化学治疗剂的其他实例包括卡培他滨N4-戊氧基羰基-5-脱氧-5-氟胞苷、卡铂顺铂/>克拉屈滨(cladribine)/>环磷酰胺(或/>)、阿糖胞苷、胞嘧啶阿拉伯糖苷/>阿糖胞苷脂质体注射液/>达喀尔巴嗪/>多柔比星盐酸盐/>氟达拉滨磷酸盐/>5-氟尿嘧啶/>吉西他滨(二氟脱氧胞核苷)、伊立替康/>L-天冬酰胺酶/>6-巯嘌呤甲胺喋呤/>喷司他丁、6-硫鸟嘌呤、塞替派和用于注射的托泊替康盐酸盐/>另一实例为硼替佐米。又更多的实例包括吉西他滨、白蛋白-太平洋紫杉醇/>厄洛替尼、氟尿嘧啶和FOLFIRINOX(由醛叶酸、氟尿嘧啶、伊立替康及奥沙利铂所组成的化学疗法方案)或前述的两种或更多种的任何组合，例如以治疗胰腺癌(例如晚期胰腺癌、胰腺导管腺癌)。

与本公开的化合物组合使用的特别关注的抗癌剂包括：

拓朴异构酶抑制剂，包括第I型拓朴异构酶抑制剂，诸如伊立替康、托泊替康和喜树碱，及第2型拓朴异构酶抑制剂，诸如依托泊苷、多柔比星和表柔比星。

聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)抑制剂，诸如奥拉帕尼、芦卡帕尼、尼拉帕尼、拉唑帕尼、维利帕尼、帕米帕尼(pamiparib)和伊尼帕尼(iniparib)。

DNA交联剂，诸如顺铂、卡铂和奥沙利铂。

增加活性含氧物(ROS)水平的药剂，诸如那帕布新。

PARP抑制剂，诸如奥拉帕尼、芦卡帕尼、尼拉帕尼、维利帕尼和拉唑帕尼。

嘌呤抗代谢剂和/或重新嘌呤合成抑制剂：培美曲塞吉西他滨5-氟尿嘧啶(/>和/>)、甲胺喋呤/>卡培他滨/>氟尿苷/>地西他滨(decitabine)/>阿扎胞苷(和/>)、6-巯嘌呤/>克拉屈滨(/> 和)、氟达拉滨/>喷司他丁/>奈拉滨(nelarabine)氯法拉滨(clofarabine)(/>和/>)和阿糖胞苷/>

抗血管生成剂包括例如MMP-2(基质金属蛋白酶2)抑制剂、雷帕霉素(rapamycin)、西罗莫司(temsirolimus)(CCI-779)、依维莫司(everolimus)(RAD001)、索拉非尼、舒尼替尼(sunitinib)和贝伐珠单抗。有用的COX-II抑制剂的实例包括CELEBREX^TM(阿来昔布(alecoxib))、伐地昔布(valdecoxib)和罗非昔布(rofecoxib)。有用的基质金属蛋白酶抑制剂的实例描述于WO 96/33172(1996年10月24日公开)、WO 96/27583(1996年3月7日公开)、欧洲专利申请第97304971.1号(1997年7月8日申请)、欧洲专利申请第99308617.2号(1999年10月29日申请)、WO 98/07697(1998年2月26日公开)、WO 98/03516(1998年1月29日公开)、WO 98/34918(1998年8月13日公开)、WO 98/34915(1998年8月13日公开)、WO 98/33768(1998年8月6日公开)、WO 98/30566(1998年7月16日公开)、欧洲专利申请606,046(1994年7月13日公开)、欧洲专利申请931,788(1999年7月28日公开)、WO 90/05719(1990年5月31日公开)、WO 99/52910(1999年10月21日公开)、WO 99/52889(1999年10月21日公开)、WO 99/29667(1999年6月17日公开)、PCT国际申请第PCT/IB98/01113号(1998年7月21日申请)、欧洲专利申请第99302232.1号(1999年3月25日申请)、英国专利申请第9912961.1号(1999年6月3日申请)、美国临时申请第60/148,464号(1999年8月12日申请)、美国专利5,863,949(1999年1月26日颁布)、美国专利5,861,510(1999年1月19日颁布)和欧洲专利申请780,386(1997年6月25日公开)，将全部以其全文并入本发明以供参考。MMP-2及MMP-9抑制剂的实施方式包括那些具有很少或没有抑制MMP-1的活性的抑制剂。其他的实施方式包括那些选择性抑制相对于其他基质金属蛋白酶(亦即MAP-1、MMP-3、MMP-4、MMP-5、MMP-6、MMP-7、MMP-8、MMP-10、MMP-ll、MMP-12和MMP-13)的MMP-2和/或AMP-9的抑制剂。在一些实施方式中有用的MMP抑制剂的一些具体实例为AG-3340、RO 323555和RS 13-0830。

自噬抑制剂包括但不限于氯喹(chloroquine)、3-甲基腺嘌呤、羟基氯喹(Plaquenil^TM)、巴弗洛霉素(bafilomycin)A1、5-氨基-4-咪唑甲酰胺核糖苷(AICAR)、冈田软海绵酸、抑制2A型或1型蛋白磷酸酶的自噬抑制藻毒素、cAMP类似物及升高cAMP水平的药物，诸如腺苷、LY204002、N6-巯嘌呤核糖苷和长春花碱。另外，也可以使用抑制蛋白质表达的反义或siRNA，包括但不限于ATG5(其涉及自噬)。

在其他的实施方式中，可用于与如本发明所描述的化合物的联合疗法的方法中的药剂包括但不限于：厄洛替尼、阿法替尼(afatinib)、艾瑞莎(Iressa)(吉非替尼)、GDC0941、MLN1117、BYL719(阿博利布(alpelisib))、BKM120(布帕利布(buparlisib))、CYT387、GLPG0634、巴瑞替尼(baricitinib)、雷他替尼(lestaurtinib)、莫罗替尼(momelotinib)、帕瑞替尼(pacritinib)、鲁索利替尼(ruxolitinib)、TG101348、克唑替尼(crizotinib)、堤凡替尼(tivantinib)、AMG337、卡博替尼(cabozantinib)、福替尼(foretinib)、昂妥珠单抗(onartuzumab)、NVP-AEW541、达莎替尼(dasatinib)、波那替尼(ponatinib)、萨拉卡替尼(saracatinib)、博舒替尼(bosutinib)、曲美替尼(trametinib)、司露美替尼(selumetinib)、寇比替尼(cobimetinib)、PD0325901、RO5126766、安希替尼(axitinib)、贝伐珠单抗、波司替尼(bostutinib)、西妥昔单抗(cetuximab)、福斯马替尼(fostamatinib)、伊马替尼、拉帕替尼(lapatinib)、乐伐替尼(lenvatinib)、依鲁替尼、尼罗替尼(nilotinib)、帕尼单抗(panitumumab)、帕唑帕尼、培加他尼(pegaptanib)、兰尼珠单抗(ranibizumab)、索拉非尼、舒尼替尼、SU6656、曲妥珠单抗(trastuzumab)、托法替尼(tofacitinib)、凡德替尼(vandetanib)、威罗非尼(vemurafenib)、伊立替康、紫杉醇、欧洲紫杉醇、雷帕霉素或MLN0128。

B细胞受体信号传导拮抗剂(例如布鲁顿氏酪氨酸激酶(BTK)抑制剂)：依鲁替尼。

溴结构域抑制剂。溴结构域抑制剂抑制至少一种溴结构域蛋白质，诸如Brd2、Brd3、Brd4和/或BrdT，例如Brd4。在一些这些实施方式中，溴结构域抑制剂为JQ-1(Nature2010Dec 23；468(7327):1067-73)、BI2536(ACS Chem.Biol.2014May 16；9(5):1160-71；Boehringer Ingelheim)、TG101209(ACS Chem.Biol.2014May 16；9(5):1160-71)、OTX015(Mol.Cancer Ther.November 201312；C244；Oncoethix)、IBET762(J Med Chem.2013Oct10；56(19):7498-500；GlaxoSmithKline)、IBET151(Bioorg.Med.Chem.Lett.2012Apr 15；22(8):2968-72；GlaxoSmithKline)、PFI-1(J.Med.Chem.2012Nov 26；55(22):9831-7；Cancer Res.2013Jun 1；73(11):3336-46；Structural Genomics Consortium)或CPI-0610(Constellation Pharmaceuticals)。在一些实施方式中，溴结构域抑制剂为TG101209、BI2536、OTX015、C244、IBET762、IBET151或PFI-1。

组蛋白去乙酰酶(HDAC)抑制剂。HDAC抑制剂抑制至少一种HDAC蛋白质。HDAC蛋白质可基于与酵母HDAC蛋白质的同源性分出类别，类别I由HDAC1、HDAC2、HDAC3及HDAC8所组成；类别IIa由HDAC4、HDAC5、HDAC7及HDAC9所组成；类别IIb由HDAC6及HDAC10所组成；类别IV由HDAC11所组成。在一些这些实施方式中，HDAC抑制剂为曲古抑菌素A、伏立诺司他(Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.1998Mar 17；95(6):3003-7)、吉维诺司他、阿贝诺司他(Mol.Cancer Ther.2006May；5(5):1309-17)、贝利诺司他(Mol.Cancer Ther.2003Aug；2(8):721-8)、帕比诺司他(Clin.Cancer Res.2006Aug 1；12(15):4628-35)、瑞米诺司他(Clin.Cancer Res.2013Oct 1；19(19):5494-504)、奎诺司他(Clin.Cancer Res.2013Aug1；19(15):4262-72)、酯肽(Blood.2001Nov 1；98(9):2865-8)、恩替诺司他(Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.1999Apr 13；96(8):4592-7)、莫妥诺司他(Bioorg.Med.Chem.Lett.2008Feb1；18(3):106771)或丙戊酸(EMBO J.2001Dec 17；20(24):6969-78)。例如在一些实施方式中，HDAC抑制剂为帕比诺司他、伏立诺司他、MS275、贝利诺司他或LBH589。在一些实施方式中，HDAC抑制剂为帕比诺司他或SAHA。

在实施方式中，如本发明所描述的化合物与表皮生长因子受体酪氨酸激酶(EGFR)抑制剂组合施用。EGFR抑制剂的实例包括厄洛替尼、奥希替尼(osimertinib)、西妥昔单抗、吉非替尼、奈昔木单抗(necitumumab)、拉帕替尼、乃拉替尼(neratinib)、帕尼单抗、凡德替尼和奈昔木单抗。如本发明所描述的化合物与EGFR抑制剂的组合可用于例如与EGFR失调有关的癌症，诸如非小细胞肺癌(NSCLC)、胰腺癌、乳腺癌和结肠癌症。EGFR可能例如由于活化在外显子18、19、20或21中的突变而失调。在某些实施方式中，EGFR抑制剂为厄洛替尼或奥希替尼。在某些实施方式中，如本发明所描述的化合物与EGFR抑制剂的组合用于治疗经EGFR突变的NSCLC。在某些实施方式中，如本发明所描述的化合物与EGFR抑制剂的组合用于治疗EGFR抑制剂抗性癌症，且如本发明所描述的化合物使癌症对EGFR抑制剂敏感。

EGFR抗体：西妥昔单抗奈昔木单抗、帕尼单抗(例如西妥昔单抗)。

MTAP抑制剂：(3R,4S)-1-((4-氨基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-4-((甲硫基)甲基)吡咯啶-3-醇(MT-DADMe-免疫霉素(Immucillin)-A，CAS 653592-04-2)。

甲硫基腺苷：((2R,3R,4S,5S)-2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-5-((甲硫基)甲基)四氢呋喃-3,4-二醇，CAS 2457-80-9)。

MET抑制剂：卡马替尼(capmatinib)(INC280，CAS 1029712-80-8)。

血小板衍生的生长因子(PDGF)受体抑制剂：伊马替尼利尼伐尼(linifanib)(N-[4-(3-氨基-1H-吲唑-4-基)苯基]-N'-(2-氟-5-甲基苯基)脲，也称作ABT869，取自Genentech)；舒尼替尼苹果酸盐/>奎扎替尼(quizartinib)(AC220，CAS950769-58-1)；帕唑帕尼/>安希替尼/>索拉非尼/>维加特夫(vargatef)(BIBF1120，CAS 928326-83-4)；泰拉替尼(telatinib)(BAY57-9352，CAS332012-40-5)；伐他拉尼(vatalanib)二盐酸盐(PTK787，CAS 212141-51-0)；及莫替沙尼(motesanib)二磷酸盐(在PCT公开第WO 02/066470号中所描述的AMG706，CAS 857876-30-3，N-(2,3-二氢-3,3-二甲基-1H-吲哚-6-基)-2-[(4-吡啶基甲基)氨基]-3-吡啶甲酰胺)。

磷酸肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂：4-[2-(1H-吲唑-4-基)-6-[[4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基]甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基]吗啉(也称作GDC 0941且描述于PCT公开第WO09/036082号及第WO 09/055730中)；4-(三氟甲基)-5-(2,6-二吗啉基嘧啶-4-基)吡啶-2-胺(也称作BKM120或NVP-BKM120且描述于PCT公开第WO 2007/084786号中)；阿博利布(BYL719)：(5Z)-5-[[4-(4-吡啶基)-6-喹啉基]亚甲基]-2,4-噻唑啶二酮(GSK1059615，CAS958852-01-2)；5-[8-甲基-9-(1-甲基乙基)-2-(4-吗啉基)-9H-嘌呤-6-基]-2-嘧啶胺(VS-5584，CAS 1246560-33-7)和依维莫司

周期蛋白依赖型激酶(CDK)抑制剂：瑞博西利(ribociclib)(LEE011，CAS1211441-98-3)；阿洛新(aloisine)A；阿沃西迪(alvocidib)(也称作夫拉平度(flavopiridol)或HMR-1275，2-(2-氯苯基)-5,7-二羟基-8-[(3S,4R)-3-羟基-1-甲基-4-哌啶基]-4-苯并哌喃酮且描述于美国专利第5,621,002号中)；克唑替尼(PF-02341066，CAS877399-52-5)；2-(2-氯苯基)-5,7-二羟基-8-[(2R,3S)-2-(羟基甲基)-1-甲基-3-吡咯烷基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮盐酸盐(P276-00，CAS 920113-03-7)；1-甲基-5-[[2-[5-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基]-4-吡啶基]氧基]-N-[4-(三氟甲基)苯基]-1H-苯并咪唑-2-胺(RAF265，CAS 927880-90-8)；依地苏兰(indisulam)(E7070)；罗可威汀(roscovitine)(CYC202)；6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮盐酸盐(PD0332991)；地那昔利(dinaciclib)(SCH727965)；N-[5-[[(5-叔丁基噁唑-2-基)甲基]硫基]噻唑-2-基]哌啶-4-甲酰胺(BMS 387032，CAS 345627-80-7)；4-[[9-氯-7-(2,6-二氟苯基)-5H-嘧啶并[5,4-d][2]苯并氮呯-2-基]氨基]-苯甲酸(MLN8054，CAS 869363-13-3)；5-[3-(4,6-二氟-1H-苯并咪唑-2-基)-1H-吲唑-5-基]-N-乙基-4-甲基-3-吡啶甲胺(AG-024322，CAS 837364-57-5)；4-(2,6-二氯苯甲酰基氨基)-1H-吡唑-3-羧酸N-(哌啶-4-基)酰胺(AT7519，CAS 844442-38-2)；4-[2-甲基-1-(1-甲基乙基)-1H-咪唑-5-基]-N-[4-(甲基磺酰基)苯基]-2-嘧啶胺(AZD5438，CAS 602306-29-6)；帕博西林(palbociclib)(PD-0332991)；及(2R,3R)-3-[[2-[[3-[[S(R)]-S-环丙基磺酰亚胺酰基]-苯基]氨基]-5-(三氟甲基)-4-嘧啶基]氧基]-2-丁醇(BAY 10000394)。

p53-MDM2抑制剂：(S)-1-(4-氯-苯基)-7-异丙氧基-6-甲氧基-2-(4-{甲基-[4-(4-甲基-3-氧代-哌嗪-1-基)-反式-环己基甲基]-氨基}-苯基)-1,4-二氢-2H-异喹啉-3-酮、(S)-5-(5-氯-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-吡啶-3-基)-6-(4-氯-苯基)-2-(2,4-二甲氧基-嘧啶-5-基)-1-异丙基-5,6-二氢-1H-吡咯并[3,4-d]咪唑-4-酮、[(4S,5R)-2-(4-叔丁基-2-乙氧基苯基)-4,5-双(4-氯苯基)-4,5-二甲基咪唑-1-基]-[4-(3-甲基磺酰基丙基)哌嗪-1-基]甲酮(RG7112)、4-[[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-氯-2-氟苯基)-4-(4-氯-2-氟苯基)-4-氰基-5-(2,2-二甲基丙基)吡咯啶-2-羰基]氨基]-3-甲氧基苯甲酸(RG7388)、SAR299155、2-((3R,5R,6S)-5-(3-氯苯基)-6-(4-氯苯基)-1-((S)-1-(异丙基磺酰基)-3-甲基丁-2-基)-3-甲基-2-氧代哌啶-3-基)乙酸(AMG232)、{(3R,5R,6S)-5-(3-氯苯基)-6-(4-氯苯基)-1-[(2S,3S)-2-羟基-3-戊基]-3-甲基-2-氧代-3-哌啶基}乙酸(AM-8553)、(±)-4-[4,5-双(4-氯苯基)-2-(2-异丙氧基-4-甲氧基-苯基)-4,5-二氢-咪唑-1-羰基]-哌嗪-2-酮(纽特林(Nutlin)-3)、2-甲基-7-[苯基(苯基氨基)甲基]-8-喹啉醇(NSC66811)、1-N-[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-4-N-吡啶-4-基苯-1,4-二胺(JNJ-26854165)、4-[4,5-双(3,4-氯苯基)-2-(2-异丙氧基-4-甲氧基-苯基)-4,5-二氢-咪唑-1-羧基]-哌嗪-2-酮(凯林(Caylin)-1)、4-[4,5-双(4-三氟甲基-苯基)-2-(2-异丙氧基-4-甲氧基-苯基)-4,5-二氢-咪唑-1-羧基]-哌嗪-2-酮(凯林-2)、5-[[3-二甲基氨基)丙基]氨基]-3,10-二甲基嘧啶并[4,5-b]喹啉-2,4(3H,10H)-二酮二盐酸盐(HLI373)及反式-4-碘-4′-硼烷基-查酮(SC204072)。

促分裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制剂：XL-518(也称作GDC-0973，CAS No.1029872-29-4，取自ACC Corp.)；司露美替尼(5-[(4-溴-2-氯苯基)氨基]-4-氟-N-(2-羟基乙氧基)-1-甲基-1H-苯并咪唑-6-甲酰胺，也称作AZD6244或ARRY 142886，描述于PCT公开第WO2003/077914号中)；2-[(2-氯-4-碘苯基)氨基]-N-(环丙基甲氧基)-3,4-二氟苯甲酰胺(也称作CI-1040或PD184352且描述于PCT公开第WO 2000/035436号中)；N-[(2R)-2,3-二羟基丙氧基]-3,4-二氟-2-[(2-氟-4-碘苯基)氨基]-苯甲酰胺(也称作PD0325901且描述于PCT公开第WO 2002/006213中)；2,3-双[氨基[(2-氨基苯基)硫基]亚甲基]-丁二腈(也称作U0126且描述于美国专利第2,779,780号中)；N-[3,4-二氟-2-[(2-氟-4-碘苯基)氨基]-6-甲氧基苯基]-1-[(2R)-2,3-二羟基丙基]-环丙烷磺酰胺(也称作RDEA119或BAY869766且描述于PCT公开第WO 2007/014011号中)；(3S,4R,5Z,8S,9S,11E)-14-(乙基氨基)-8,9,16-三羟基-3,4-二甲基-3,4,9；19-四氢-1H-2-苯并氧杂环十四烷-1,7(8H)-二酮](也称作E6201且描述于PCT公开第WO 2003/076424号中)；2'-氨基-3'-甲氧基黄酮(也称作PD98059，取自Biaffin GmbH&Co.,KG,Germany)；(R)-3-(2,3-二羟基丙基)-6-氟-5-(2-氟-4-碘苯基氨基)-8-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-4,7(3H,8H)-二酮(TAK-733，CAS 1035555-63-5)；匹玛色替(pimasertib)(AS-703026，CAS 1204531-26-9)；曲美替尼二甲亚砜(GSK-1120212，CAS1204531-25-80)；2-(2-氟-4-碘苯基氨基)-N-(2-羟基乙氧基)-1,5-二甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酰胺(AZD 8330)；3,4-二氟-2-[(2-氟-4-碘苯基)氨基]-N-(2-羟基乙氧基)-5-[(3-氧代-[1,2]氧氮杂环已-2-基(oxazinan-2-yl))甲基]苯甲酰胺(CH 4987655或Ro4987655)；及5-[(4-溴-2-氟苯基)氨基]-4-氟-N-(2-羟基乙氧基)-1-甲基-1H-苯并咪唑-6-甲酰胺(MEK162)。

B-RAF抑制剂：瑞戈非尼(regorafenib)(BAY73-4506，CAS 755037-03-7)；图维扎尼(tuvizanib)(AV951，CAS 475108-18-0)；威罗非尼(PLX-4032，CAS918504-65-1)；恩拉非尼(encorafenib)(也称作LGX818)；1-甲基-5-[[2-[5-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基]-4-吡啶基]氧基]-N-[4-(三氟甲基)苯基-1H-苯并咪唑-2-胺(RAF265，CAS927880-90-8)；5-[1-(2-羟基乙基)-3-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]-2,3-二氢茚-1-酮肟(GDC-0879，CAS 905281-76-7)；5-[2-[4-[2-(二甲基氨基)乙氧基]苯基]-5-(4-吡啶基)-1H-咪唑-4-基]-2,3-二氢-1H-茚-1-酮肟(GSK2118436或SB590885)；(+/-)-(5-(2-(5-氯-2-甲基苯基)-1-羟基-3-氧代-2,3-二氢-1H-异吲哚-1-基)-1H-苯并咪唑-2-基)胺甲酸甲酯(也称作XL-281和BMS908662)、达博非尼(dabrafenib)/>及N-(3-(5-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)丙烷-1-磺酰胺(也称作PLX4720)。

ALK抑制剂：克唑替尼

PIM激酶抑制剂，诸如：

或其药学上可接受的盐。

蛋白酶体抑制剂：硼替佐米N-5-苯甲氧基羰基-Ile-Glu(O-叔丁基)-Ala-白胺醛(leucinal)(PSI)、卡夫佐米和艾沙佐米(ixazomib)(例如硼替佐米)、马瑞佐米(NPI-0052)、地兰佐米(delanzomib)(CEP-18770)、O-甲基-N-[(2-甲基-5-噻唑基)羰基]-L-丝胺酰基-O-甲基-N-[(1S)-2-[(2R)-2-甲基-2-氧/>基]-2-氧代-1-(苯基甲基)乙基]-L-丝胺酰胺(ONX-0912)。RNAi筛选识别TNK1为骨髓瘤中的蛋白酶体抑制剂敏感性的潜在调节剂。Zhu等人的Blood(2011)117(14):3847-3857。在一些实施方式中，本公开的化合物(例如式I化合物或其子式、或前述者的药学上可接受的盐)与本发明所描述的蛋白酶体抑制剂组合施用，例如用于治疗多发性骨髓瘤。

还包括抗激素剂作为适合的化学治疗剂细胞调理剂，其以调节或抑制对肿瘤的激素作用见效，诸如抗雌激素，包括例如他莫昔芬、(NolvadexTM)、雷洛昔芬(raloxifene)、芳香酶抑制4(5)-咪唑、4羟基他莫昔芬、曲沃昔芬(trioxifene)、凯沃昔芬(keoxifene)、LY117018、奥那司酮(onapristone)和托瑞米芬(toremifene)(Fareston)；及抗雄激素，诸如氟他胺、尼鲁胺、比卡鲁胺、亮丙瑞林和戈舍瑞林；氯芥苯丁酸；吉西他滨；6-硫鸟嘌呤；巯嘌呤；甲胺喋呤；铂类似物诸如顺铂和卡铂；长春花碱；铂；依托泊苷(VP-16)；依弗酰胺；丝裂霉素C；米托蒽醌；长春新碱；长春瑞滨；温诺平(navelbine)；诺消灵(novantrone)；替尼泊苷；柔红霉素(daunomycin)；胺蝶呤；卡培他滨(xeloda)；伊班膦酸盐(ibandronate)；喜树碱-11(CPT-11)；拓朴异构酶抑制剂RFS 2000；二氟甲基鸟胺酸(DMFO)。

可与如本发明所描述的化合物组合使用的治疗剂的非限制性实例为mTOR抑制剂。mTOR抑制剂的实例包括例如西罗莫司；地磷莫司(ridaforolimus)(正式称为地非洛莫司(deferolimus)、二甲基亚膦酸(1R,2R,4S)-4-[(2R)-2-[(1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28Z,30S,32S,35R)-1,18-二羟基-19,30-二甲氧基-15,17,21,23,29,35-六甲基-2,3,10,14,20-五氧代-11,36-二氧杂-4氮杂三环[30.3.1.0^4,9]三十六烷-16,24,26,28-四烯-12-基]丙基]-2-甲氧基环己酯，也称作AP23573和MK8669且描述于PCT公开第WO 03/064383号中)；依维莫司(或RAD001)；雷帕霉素(AY22989，/>)；斯马匹莫(simapimod)(CAS 164301-51-3)；安罗莫司(emsirolimus)，(5-{2,4-双[(3S)-3-甲基吗啉-4-基]吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基}-2-甲氧基苯基)甲醇(AZD8055)；2-氨基-8-[反式-4-(2-羟基乙氧基)环己基]-6-(6-甲氧基-3-吡啶基)-4-甲基-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF04691502，CAS 1013101-36-4)；及N²-[1,4-二氧代-4-[[4-(4-氧代-8-苯基-4H-1-苯并吡喃-2-基)吗啉鎓-4-基]甲氧基]丁基]-L-精氨酰基甘胺酰基-L-α-天冬氨酰基L-丝氨酸-内盐(SEQ ID NO：1482)(SF1126，CAS 936487-67-1)及XL765。

化学治疗剂主体可与本公开的化合物组合使用。在一些实施方式中，化学治疗剂选自：有丝分裂抑制剂(例如太平洋紫杉醇、白蛋白-太平洋紫杉醇)、烷化剂、抗代谢物、嵌入抗生素、生长因子抑制剂、细胞周期抑制剂、酶、拓朴异构酶抑制剂、生物反应修饰剂、抗激素、血管生成抑制剂和抗雄激素。

与本公开的化合物组合(例如在组合疗法中、在药物组合中)使用的化学治疗剂的非限制性实例包括烷化剂，诸如塞替派和环磷酰胺烷基磺酸盐，诸如白消安、英丙舒凡和哌泊舒凡；氮丙啶，诸如苯多巴、卡波醌、甲基优瑞多巴和优瑞多巴；伸乙亚胺和甲基阿美胺，包括六甲蜜胺、三乙烯三聚氰胺、三乙烯磷酰胺(triethylenephosphoramide)、三乙烯硫代磷酰胺和三羟甲基三聚氰胺；氮芥子气，诸如氯芥苯丁酸、萘氮芥、氯磷酰胺、雌二醇氮芥、依弗酰胺、甲基二(氯乙基)胺、氧氮芥盐酸盐、霉法兰、新氮芥、胆固醇苯乙酸氮芥、松龙苯芥、氯乙环磷酰胺、尿嘧啶芥；亚硝基脲，诸如卡氮芥、吡葡亚硝脲、福莫司汀、罗氮芥、尼氮芥、雷诺氮芥；抗生素，诸如阿克拉霉素、放线菌素、安曲霉素、氮丝胺酸、博莱霉素、放线菌素、卡利奇霉素、卡拉比辛、洋红霉素、嗜癌素、色霉素、达克霉素、道诺霉素、地托比星、6-重氮-5-氧代-L-正白胺酸、多柔比星、表柔比星、依索比星、伊达比星、麻西罗霉素、丝裂霉素、霉酚酸、诺加霉素、橄榄霉素、培洛霉素、波弗霉素、嘌呤霉素、三铁阿霉素、罗多比星、链霉黑素、链脲佐菌素、杀结核菌素、乌苯美司、净司他汀、佐柔比星；抗代谢物，诸如甲胺喋呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，诸如傣诺特呤、甲胺喋呤、蝶罗特呤、三甲蝶呤；嘌呤类似物，诸如氟达拉滨、6巯嘌呤、硫咪嘌呤、硫鸟嘌呤；嘧啶类似物，诸如安西他滨、阿扎胞苷、6-硫唑脲嘧啶、卡莫氟、阿糖胞苷、二脱氧尿苷、脱氧氟尿苷、依诺他滨、氟尿苷；雄激素，诸如卡鲁睪酮、屈他雄酮丙酸盐、硫雄甾醇、美雄烷、睪酮内酯；抗肾上腺剂，诸如胺鲁米特、米托坦、曲洛司坦；叶酸补充剂，诸如亚叶酸；乙酰格雷酮；醛磷酰胺糖苷；氨基戊酮酸；安吖啶；贝斯特氮芥；比生群；依达曲沙；磷胺氮芥；秋水仙胺；地吖醌；艾氟米辛；依利醋铵；依托格鲁；硝酸镓；羟基脲；蘑菇多糖；洛尼达明；米托胍腙；米托蒽醌；莫哌达醇；二胺硝吖啶；喷司他丁；蛋胺氮芥；吡柔比星；鬼臼酸；2-乙基酰肼；丙卡巴肼；PSK.RTM.；雷佐生；西佐喃；螺旋锗；细交链孢菌酮酸；三亚胺醌；2,2',2"-三氯三乙胺；乌拉坦；长春地辛；达喀尔巴嗪；甘露莫司汀；二溴甘露醇；二溴卫矛醇；哌泊溴烷；加西托星；阿拉伯糖苷(“Ara-C”)；环磷酰胺；塞替派；紫杉烷，例如太平洋紫杉醇(TAXOTERETM，Bristol-Myers Squibb Oncology,Princeton,N.J.)、欧洲紫杉醇(克癌易，Rhone-Poulenc Rorer,Antony,France)和卡巴他赛(cabazitaxel)(JEVTANA，Sanofi Genzyme)；视黄酸；埃斯培拉霉素；卡培他滨；及上述中任一者的药学上可接受的盐、酸或衍生物。与本公开的化合物组合(例如在组合疗法中、在药物组合中)使用的化学治疗剂的其他非限制性实例包括硼替佐米、卡培他滨/>N4-戊氧基羰基-5-脱氧-5-氟胞苷、卡铂/>顺铂/>克拉屈滨/>环磷酰胺(或/>)、阿糖胞苷、胞嘧啶阿拉伯糖苷/>阿糖胞苷脂质体注射液/>达喀尔巴嗪/>多柔比星盐酸盐/>厄洛替尼、氟达拉滨磷酸盐/>5-氟尿嘧啶 FOLFIRINOX、吉西他滨(二氟脱氧胞核苷)、伊立替康L-天冬酰胺酶/>6-巯嘌呤/>甲胺喋呤白蛋白-太平洋紫杉醇、喷司他丁、6-硫鸟嘌呤、塞替派和用于注射的托泊替康盐酸盐/>与本公开的化合物组合(例如在组合疗法中、在药物组合中)使用的化学治疗剂的又其他非限制性实例包括厄洛替尼、阿法替尼、吉非替尼、GDC0941、MLN1117、BYL719(阿博利布)、BKM120(布帕利布)、CYT387、GLPG0634、巴瑞替尼、雷他替尼、莫罗替尼、帕瑞替尼、鲁索利替尼、TG101348、克唑替尼、堤凡替尼、AMG337、卡博替尼、福替尼、昂妥珠单抗、NVP-AEW541、达莎替尼、波那替尼、萨拉卡替尼、博舒替尼、曲美替尼、司露美替尼、寇比替尼、PD0325901、RO5126766、安希替尼、贝伐珠单抗、西妥昔单抗、福斯马替尼、伊马替尼、拉帕替尼、乐伐替尼、依鲁替尼、尼罗替尼、帕尼单抗、帕唑帕尼、培加他尼、兰尼珠单抗、索拉非尼、舒尼替尼、SU6656、曲妥珠单抗、托法替尼、凡德替尼、威罗非尼、伊立替康、紫杉醇、欧洲紫杉醇、雷帕霉素和MLN0128。与本公开的化合物组合(例如在组合疗法中、在药物组合中)使用的化学治疗剂的更多非限制性实例包括卡培他滨/>N4-戊氧基羰基-5-脱氧-5-氟胞苷、卡铂/>顺铂/>克拉屈滨环磷酰胺(/>或/>)、阿糖胞苷、胞嘧啶阿拉伯糖苷阿糖胞苷脂质体注射液/>达喀尔巴嗪/>多柔比星盐酸盐/>氟达拉滨磷酸盐/>5-氟尿嘧啶吉西他滨(二氟脱氧胞核苷)、伊立替康/>L-天冬酰胺酶/>6-巯嘌呤/>甲胺喋呤/>喷司他丁、6-硫鸟嘌呤、塞替派和用于注射的托泊替康盐酸盐/>

常用处方的抗癌药物亦可与本公开的化合物组合使用。常用处方的抗癌药物的非限制性实例包括 ABVD、AVICINE、阿巴伏单抗(Abagovomab)、吖啶甲酰胺、阿德木单抗(Adecatumumab)、17-N-烯丙基氨基-17-去甲氧基格尔德霉素(geldanamycin)、阿尔法拉丁(Alpharadin)、阿沃西迪、3-氨基吡啶-2-甲醛硫半卡腙、阿莫那菲(Amonafide)、蒽醌、抗CD22免疫毒素、抗癌药、抗肿瘤药草、阿帕齐醌(Apaziquone)、阿替莫德(Atiprimod)、硫唑嘌呤、贝洛替康(Belotecan)、苯达莫司汀(Bendamustine)、BIBW 2992、比里科达(Biricodar)、伯斯塔利辛(Brostallicin)、苔藓虫素(Bryostatin)、丁硫胺酸亚砜胺(Buthionine sulfoximine)、CBV(化学疗法)、花萼海绵诱癌素(Calyculin)、细胞周期非特异性抗癌剂、二氯乙酸、迪莫利德(Discodermolide)、依沙芦星(Elsamitrucin)、依诺他滨、埃坡霉素(Epothilone)、艾雷布尔(Eribulin)、依维莫司、依沙替康(Exatecan)、依昔舒林(Exisulind)、菲罗松酚(Ferruginol)、氟罗德辛(Forodesine)、磷雌酚(Fosfestrol)、ICE化学疗法方案、IT-101、伊美克(Imexon)、咪喹莫特(Imiquimod)、吲哚并咔唑、伊罗夫文(Irofulven)、拉尼喹达(Laniquidar)、拉洛他赛(Larotaxel)、雷利窦迈、鲁坎松(Lucanthone)、勒托替康(Lurtotecan)、马磷酰胺(Mafosfamide)、米托唑胺(Mitozolomide)、那福昔定(Nafoxidine)、奈达铂(Nedaplatin)、奥拉帕尼、奥他赛(Ortataxel)、PAC-1、番木瓜(Pawpaw)、匹杉琼(Pixantrone)、蛋白酶体抑制剂、蝴蝶霉素、雷西莫特(Resiquimod)、卢比替康(Rubitecan)、SN-38、盐孢菌酰胺(Salinosporamide)A、沙帕他滨(Sapacitabine)、斯坦福(Stanford)V、苦马豆素(Swainsonine)、他拉泊芬(Talaporfin)、塔利圭达(Tariquidar)、替加氟-尿嘧啶、特莫多(Temodar)、替司他赛(Tesetaxel)、四硝酸三铂、参(2-氯乙基)胺、曲沙他滨(Troxacitabine)、乌拉莫司汀(Uramustine)、瓦帝莫泽(Vadimezan)、长春氟宁(Vinflunine)、ZD6126或唑喹达(Zosuquidar)。

在需要的情况下，本发明所描述的化合物或其药物组合物可与常用处方的抗癌药物组合使用，诸如 ABVD、AVICINE、阿巴伏单抗、吖啶甲酰胺、阿德木单抗、17-N-烯丙基氨基-17-去甲氧基格尔德霉素、阿尔法拉丁、阿沃西迪、3-氨基吡啶-2-甲醛硫半卡腙、阿莫那菲、蒽醌、抗CD22免疫毒素、抗癌药、抗肿瘤药草、阿帕齐醌、阿替莫德、硫唑嘌呤、贝洛替康、苯达莫司汀、BIBW2992、比里科达、伯斯塔利辛、苔藓虫素、丁硫胺酸亚砜胺、CBV(化学疗法)、花萼海绵诱癌素、细胞周期非特异性抗癌剂、二氯乙酸、迪莫利德、依沙芦星、依诺他滨、埃坡霉素、艾雷布尔、依维莫司、依沙替康、依昔舒林、菲罗松酚、氟罗德辛、磷雌酚、ICE化学疗法方案、IT-101、伊美克、咪喹莫特、吲哚并咔唑、伊罗夫文、拉尼喹达、拉洛他赛、雷利窦迈、鲁坎松、勒托替康、马磷酰胺、米托唑胺、那福昔定、奈达铂、奥拉帕尼、奥他赛、PAC-1、番木瓜、匹杉琼、蛋白酶体抑制剂、蝴蝶霉素、雷西莫特、卢比替康、SN-38、盐孢菌酰胺A、沙帕他滨、斯坦福V、苦马豆素、他拉泊芬、塔利圭达、替加氟-尿嘧啶、特莫多、替司他赛、四硝酸三铂、参(2-氯乙基)胺、曲沙他滨、乌拉莫司汀、瓦帝莫泽、长春氟宁、ZD6126或唑喹达。

在一实施方式中，如本发明所描述的化合物与CDK9抑制剂组合施用于有其需要的受试者，诸如阿沃西迪。在有关的实施方式中，如本发明所描述的化合物的药学上可接受的盐与CDK9抑制剂组合施用于有其需要的受试者，诸如阿沃西迪。该施用可在CDK9抑制剂的施用之前、同时或之后。在一个特定的实施方式中，如本发明所描述的化合物与CDK9抑制剂组合施用于有其需要的受试者，诸如用于治疗胰腺癌的阿沃西迪。在有关的特定实施方式中，如本发明所描述的化合物的药学上可接受的盐与CDK9抑制剂组合施用于有其需要的受试者，诸如用于治疗胰腺癌的阿沃西迪。在一些前述的实施方式中，该盐为酒石酸盐。在一些前述的实施方式中，CDK9抑制剂为阿沃西迪。在一些实施方式中，该盐为酒石酸盐及CDK9抑制剂为阿沃西迪。

在特定的其他实施方式中，其提供用于治疗癌症所述的方法，该方法包括对有其需要的受试者施用有效量的如本发明所描述的化合物及CDK抑制剂。如本发明所描述的化合物及CDK抑制剂可为本技术中已知的AXL激酶或CDK抑制剂中任一者。

在实施方式中，CDK抑制剂为CDK2、CDK4、CDK6、CDK7、CDK8、CDK9、CDK10和/或CDK11抑制剂。在一些实施方式中，CDK抑制剂为CDK7、CDK9抑制剂或该两者。在一些实施方式中，CDK抑制剂为地那昔利(ACS Med.Chem.Lett.2010May 17；1(5):204-8；Mol.CancerTher.2010Aug；9(8):2344-53；Merck,Sharp and Dohme)、AT7519(J.Med.Chem.2008Aug28；51(16):4986-99；Astex Pharmaceutical)或帕博西林(J.Med.Chem.2005Apr 7；48(7):2388-406；Pfizer)。在某些实施方式中，CDK抑制剂为CDK9抑制剂，诸如阿沃西迪。阿沃西迪可作为游离碱、作为药学上可接受的盐或作为前药施用。在某些实施方式中，CDK9抑制剂为阿沃西迪。在其他的实施方式中，CDK9抑制剂为阿沃西迪的药学上可接受的盐。在其他的实施方式中，CDK9抑制剂为阿沃西迪的前药。阿沃西迪的前药包括那些在WO 2016/187316中所公开者，将其完整公开内容特此其全文并入以供参考。

各种不同的癌症可以如本发明所描述的化合物与CDK抑制剂的组合治疗。在一些实施方式中，癌症为血液癌或实体瘤，例如本发明所公开或本技术中已知的血液癌或实体瘤中任一者。

在一些特定的实施方式中，癌症为血液癌，诸如多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征(MDS)、急性骨髓性白血病(AML)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴原白血病、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、套细胞淋巴瘤、弥漫型大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤或非霍奇金氏淋巴瘤。在一些特定的实施方式中，血液癌为CLL、SLL或该两者。在一些特定的实施方式中，血液癌为CLL。在一些特定的实施方式中，血液癌为SLL。

在一些其他特定的实施方式中，以如本发明所描述的化合物与CDK抑制剂的组合所治疗的癌症为实体瘤，诸如胰腺癌、结肠癌或肺癌。

实施方式进一步关于对有其需要的受试者施用如本发明所描述的化合物与本发明提供的BTK抑制剂(例如依鲁替尼)或CDK9抑制剂(例如阿沃西迪)的组合、与放射疗法的组合所述的方法，用于哺乳动物中抑制异常细胞生长或治疗过度增生疾患。用于施用放射疗法的技术为本技术中已知且这些技术可用于本发明所描述的组合疗法。以此组合疗法施用如本发明所描述的化合物的药学上可接受的盐可如本发明所描述者确定。

在一实施方式中，如本发明所描述的化合物与ATR抑制剂组合施用于有其需要的受试者，诸如AZD6738或VX-970。该施用可在ATR抑制剂的施用之前、同时或之后。在一个特定的实施方式中，如本发明所描述的化合物与ATR抑制剂组合施用于有其需要的受试者，诸如用于治疗非小细胞肺癌的AZD6738或VX-970。在有关的特定实施方式中，如本发明所描述的化合物的药学上可接受的盐与ATR抑制剂组合施用于有其需要的受试者，诸如用于治疗非小细胞肺癌的AZD6738或VX-970。在一些前述的实施方式中，该盐为酒石酸盐。在一些前述的实施方式中，ATR抑制剂为AZD6738。在一些前述的实施方式中，ATR抑制剂为VX-970。在一些实施方式中，该盐为酒石酸盐及ATR抑制剂为AZD6738。在一些实施方式中，该盐为酒石酸盐及ATR抑制剂为VX-970。在一些前述的实施方式中，ATR抑制剂为AZD6738与VX-970的组合。

在一些前述的实施方式中，非小细胞肺癌包括TCGA肺腺癌、一种或多种LUAD肿瘤、TCGA肺鳞状细胞癌、一种或多种LUSC肿瘤、一种或多种MDACC PROSPECT肿瘤、一种或多种MDACC BATTLE1肿瘤、一种或多种BATTLE2肿瘤或其组合。在一些实施方式中，非小细胞肺癌包括TCGA LUAD肿瘤，例如富集ALK移位的肿瘤。在一些实施方式中，非小细胞肺癌包括TCGALUAD肿瘤，例如包括一种或多种EGFR突变的肿瘤。

在一实施方式中，如本发明所描述的化合物施用于有其需要的受试者，由此使受试者对ATR抑制剂的施用敏感，诸如AZD6738或VX-970。在有关的实施方式中，如本发明所描述的化合物的药学上可接受的盐施用于有其需要的受试者，由此使受试者对ATR抑制剂的施用敏感，诸如AZD6738或VX-970。在一个特定的实施方式中，如本发明所描述的化合物施用于有其需要的受试者，由此使受试者对ATR抑制剂的施用敏感，诸如用于治疗非小细胞肺癌的AZD6738或VX-970。在有关的特定实施方式中，如本发明所描述的化合物的药学上可接受的盐施用于有其需要的受试者，由此使受试者对ATR抑制剂的施用敏感，诸如用于治疗非小细胞肺癌的AZD6738或VX-970。在一些前述的实施方式中，该盐为酒石酸盐。在一些前述的实施方式中，ATR抑制剂为AZD6738。在一些前述的实施方式中，ATR抑制剂为VX-970。在一些实施方式中，该盐为酒石酸盐及ATR抑制剂为AZD6738。在一些实施方式中，该盐为酒石酸盐及ATR抑制剂为VX-970。在一些前述的实施方式中，ATR抑制剂为AZD6738与VX-970的组合。

在一些实施方式中，放射疗法可与如本发明所描述的化合物组合施用。示例性放射疗法包括体外放射线疗法、体内放射疗法、埋植疗法、立体定位放射手术、全身性放射疗法、放射线疗法和永久或暂时性间质近接疗法。如本发明所使用的术语“近距放射治疗”指通过在肿瘤或其他增生性组织疾病位点或附近插入体内的空间局限的放射性材料而递送的放射疗法。该术语意欲但不限于包括暴露于放射性同位素(例如At211、I131、I125、Y90、Re186、Re188、Sm153、Bi212、P32和Lu的放射性同位素)。适合用作为本发明的细胞调理剂的辐射源包括固体和液体两者。以非限制性实例方式描述，辐射源可为放射性核素，诸如作为固体源的I125、I131、Yb169、Ir192，作为固体源的I125，或发射光子、β粒子、γ辐射或其他治疗射线的其他放射性核素。放射性材料也可以是由任何放射性核素溶液(例如I125或I131溶液)所制成的流体，或放射性流体可使用含有固体放射性核素(诸如Au198、Y90)小颗粒的适合的流体浆液来生产。而且，放射性核素可包埋在凝胶或放射性微球中。

不想受到任何理论的限制，如本发明所描述的化合物可使得异常细胞对以杀死和/或抑制这些细胞生长为目的的放射治疗更敏感。因此，一些实施方式包括使哺乳动物的异常细胞对放射治疗敏感所述的方法，其包括对哺乳动物施用一定量的如本发明所描述的化合物，该量有效使异常细胞对放射治疗敏感。如本发明所描述的化合物在此方法中的量可根据用于确定本发明所描述的这些化合物及盐的有效量的方式测定。

如本发明所描述的化合物亦可与一种或多种选自下列物质的量组合使用：抗血管生成剂、信号转导抑制剂、抗增殖剂、糖解抑制剂或自噬抑制剂。

抗血管生成剂包括例如MMP-2(基质金属蛋白酶2)抑制剂、雷帕霉素、西罗莫司(CCI-779)、依维莫司(RAD001)、索拉非尼、舒尼替尼和贝伐珠单抗。有用的COX-II抑制剂的实例包括CELEBREX^TM(阿来昔布)、伐地昔布和罗非昔布。有用的基质金属蛋白酶抑制剂的实例描述于WO 96/33172(1996年10月24日公开)、WO 96/27583(1996年3月7日公开)、欧洲专利申请第97304971.1号(1997年7月8日申请)、欧洲专利申请第99308617.2号(1999年10月29日申请)、WO 98/07697(1998年2月26日公开)、WO 98/03516(1998年1月29日公开)、WO98/34918(1998年8月13日公开)、WO 98/34915(1998年8月13日公开)、WO 98/33768(1998年8月6日公开)、WO 98/30566(1998年7月16日公开)、欧洲专利申请606,046(1994年7月13日公开)、欧洲专利申请931,788(1999年7月28日公开)、WO 90/05719(1990年5月31日公开)、WO 99/52910(1999年10月21日公开)、WO 99/52889(1999年10月21日公开)、WO 99/29667(1999年6月17日公开)、PCT国际申请第PCT/IB98/01113号(1998年7月21日申请)、欧洲专利申请第99302232.1号(1999年3月25日申请)、英国专利申请第9912961.1号(1999年6月3日申请)、美国临时申请第60/148,464号(1999年8月12日申请)、美国专利5,863,949(1999年1月26日颁布)、美国专利5,861,510(1999年1月19日颁布)和欧洲专利申请780,386(1997年6月25日公开)，将全部以其全文并入本发明以供参考。MMP-2及MMP-9抑制剂的实施方式包括那些具有很少或没有抑制MMP-1的活性的抑制剂。其他的实施方式包括那些选择性抑制相对于其他基质金属蛋白酶(即MAP-1、MMP-3、MMP-4、MMP-5、MMP-6、MMP-7、MMP-8、MMP-10、MMP-ll、MMP-12和MMP-13)的MMP-2和/或AMP-9的抑制剂。在一些实施方式中有用的MMP抑制剂的一些特定的实例为AG-3340、RO 323555和RS 13-0830。

自噬抑制剂包括但不限于氯喹、3-甲基腺嘌呤、羟基氯喹(Plaquenil^TM)、巴弗洛霉素A1、5-氨基-4-咪唑甲酰胺核糖苷(AICAR)、冈田软海绵酸、抑制2A型或1型蛋白磷酸酶的自噬抑制藻毒素、cAMP类似物及升高cAMP水平的药物，诸如腺苷、LY204002、N6-巯嘌呤核糖苷和长春花碱。另外，也可以使用抑制蛋白质表达的反义或siRNA，包括但不限于ATG5(其涉及自噬)。

在其他的实施方式中，可用于与如本发明所描述的化合物的组合疗法所述的方法中的药剂包括但不限于：厄洛替尼、阿法替尼、艾瑞莎、GDC0941、MLN1117、BYL719(阿博利布)、BKM120(布帕利布)、CYT387、GLPG0634、巴瑞替尼、雷他替尼、莫罗替尼、帕瑞替尼、鲁索利替尼、TG101348、克唑替尼、堤凡替尼、AMG337、卡博替尼、福替尼、昂妥珠单抗、NVP-AEW541、达莎替尼、波那替尼、萨拉卡替尼、博舒替尼、曲美替尼、司露美替尼、寇比替尼、PD0325901、RO5126766、安希替尼、贝伐珠单抗、波司替尼、西妥昔单抗、克唑替尼、福斯马替尼、吉非替尼、伊马替尼、拉帕替尼、乐伐替尼、依鲁替尼、尼罗替尼、帕尼单抗、帕唑帕尼、培加他尼、兰尼珠单抗、鲁索利替尼、索拉非尼、舒尼替尼、SU6656、曲妥珠单抗、托法替尼、凡德替尼、威罗非尼、伊立替康、紫杉醇、欧洲紫杉醇、雷帕霉素或MLN0128。

在实施方式中，如本发明所描述的化合物与表皮生长因子受体酪氨酸激酶(EGFR)抑制剂组合施用。EGFR抑制剂的实例包括厄洛替尼、奥希替尼、西妥昔单抗、吉非替尼、奈昔木单抗、拉帕替尼、乃拉替尼、帕尼单抗、凡德替尼和奈昔木单抗。如本发明所描述的化合物与EGFR抑制剂的组合可用于例如治疗与EGFR失调有关的癌症，诸如非小细胞肺癌(NSCLC)、胰腺癌、乳腺癌和结肠癌症。EGFR可能例如由于活化在外显子18、19，20或21中的突变而失调。在某些实施方式中，EGFR抑制剂为厄洛替尼或奥希替尼。在某些实施方式中，如本发明所描述的化合物与EGFR抑制剂的组合用于治疗经EGFR突变的NSCLC。在某些实施方式中，如本发明所描述的化合物与EGFR抑制剂的组合用于治疗EGFR抑制剂抗性癌症，且如本发明所描述的化合物使癌症对EGFR抑制剂敏感。在某些实施方式中，EGFR抗体为西妥昔单抗

在某些实施方式中，如本发明所描述的化合物与厄洛替尼组合施用。在一些实施方式中，此组合用于治疗胰腺癌。在其他的实施方式中，此组合用于治疗肺癌。在进一步的实施方式中，肺癌为非小细胞肺癌。

在某些实施方式中，如本发明所描述的化合物与奥希替尼(osmertinib)组合施用。在一些实施方式中，此组合用于治疗肺癌。在进一步的实施方式中，肺癌具有EGFR突变。

在本发明所描述的组合疗法中的额外的治疗剂的施用剂量、给药时程和方案和/或途径可由本领域技术人员确定，且在一些实施方式中如本发明有关的组合物所描述。

编号的实施方式

1.式(I)的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

R¹为C₁-C₅烷基或C₃-C₅碳环或卤素；

R³为-H、-F或-Cl；

R⁴为-H或卤素或各自任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基；

R⁵为-H或-F或各自任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基；且

R²为至少6个碳原子的芳基或至少6个原子的含氮杂芳基，各自任选地经下列者取代：

(i)一个或多个卤素；

(ii)部分，其为任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；且其中当选择为大于C₃的烷基或大于环丙基的碳环时，该部分存在于R²的该芳基或杂芳基的位置上，该位置为相对于连接R²的该芳基或杂芳基的该氨基键的间位或对位；

(iii)磺酰胺；

(iv)单环、双环或螺环碳环，其任选地被一个或多个任选地被羟基或一个或多个卤素取代的至多6个碳原子的直链、支链或环状烷基取代，且其中该碳环当存在时在R²的该芳基或杂芳基的位置上，该位置为相对于连接R²的该芳基或杂芳基的该氨基键的间位或对位；

(v)单环、双环或螺环杂环，其可含有至多3个独立地选自N和O的杂原子且其任选地及独立地被一个或多个任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环取代，且其中该杂环当存在时在R²的该芳基的位置上，该位置为相对于连接该芳基的该氨基键的间位或对位；

(vi)下式的部分：

其中：

G为>N-或>C(H)-；且

E为-O-或>C(H)-R¹³，其中R¹³为-H或各自任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；或

(vii)下式的部分：

其中：

R⁸为-H或任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；

A为>N-或>C(H)-；且

X、Y和Z如下所定义者：

Z为>CH₂，且X和Y独立地为>CH₂或>C(CH₃)₂，或X和Y两者都为>CH-且通过亚甲基或乙撑基桥键合在一起；或Y为>CH₂或>C(CH₃)₂，且X和Z两者都为>CH-且通过亚甲基或乙撑基桥连接在一起。

2.实施方式1的化合物，其中R¹为C₁-C₅烷基或C₃-C₅碳环。

3.实施方式2的化合物，其中R¹为-CH₃。

4.实施方式2的化合物，其中R¹为环丙基。

5.实施方式1的化合物，其中R¹为-Cl或-F。

6.实施方式1至5中任一者的化合物，其中R³为-H。

7.实施方式1至5中任一者的化合物，其中R³为-F或-Cl。

8.实施方式1至5中任一者的化合物，其中R³为-F。

9.实施方式1至5中任一者的化合物，其中R³为-Cl。

10.实施方式1至9中任一者的化合物，其中R⁴为C₁-C₃烷基或环丙基，各自任选地被一个或多个-F取代。

11.实施方式1至9中任一者的化合物，其中R⁴为卤素。

12.实施方式1至9中任一者的化合物，其中R⁴为-CF₃。

13.实施方式1至9中任一者的化合物，其中R⁴为-CH₃。

14.实施方式1至9中任一者的化合物，其中R⁴为-H。

15.实施方式1至9中任一者的化合物，其中R⁴为-Cl。

16.实施方式1至9中任一者的化合物，其中R⁴为-F。

17.实施方式1至16中任一者的化合物，其中R⁵为C₁-C₃烷基或环丙基，各自任选地被一个或多个-F取代。

18.实施方式1至16中任一者的化合物，其中R⁵为-H。

19.实施方式1至16中任一者的化合物，其中R⁵为-CH₃。

20.实施方式1至16中任一者的化合物，其中R⁵为-CF₃。

21.实施方式1至16中任一者的化合物，其中R⁵为-F。

22.实施方式1至21中任一者的化合物，其中R²为下式的部分：

其中，

R⁶为：-H、-F、-Cl或任选地及独立地被一个或多个卤素取代的C₁-C₃烷基或环丙基；

R^7A和R^7B中一者为-H且另一者为：

(i)卤素；

(ii)-SO₂NR^7F ₂，其中各R^7F独立为-H或至多4个碳原子的直链或支链烷基；

(iii)任选地被一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；

(iv)下式的部分：

其中：

G为>N-或>C(H)-；且

E为-O-或>C(H)-R¹³，其中R¹³为-H或各自任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；或

(v)下式的部分：

其中：

R⁸为-H或任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；

A为>N-或>C(H)-；且

X、Y和Z如下所定义者：

Z为>CH₂，且X和Y独立为>CH₂或>C(CH₃)₂，或X和Y两者都为>CH-且通过亚甲基或乙撑基桥键合在一起；或

Y为>CH₂或>C(CH₃)₂，且X和Z两者都为>CH-且通过亚甲基或乙撑基桥连接在一起。

23.实施方式22的化合物，其中R^7A和R^7B中一者为-H且另一者为：

(i)下式结构的部分：

/>

各自在其一个或多个碳原子上任选地经独立地选自卤素或任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₄烷基或C₃-C₄碳环的取代基取代；或

(ii)-SO₂N(R^7F)₂。

24.实施方式22或23的化合物，其中R¹为甲基。

25.实施方式22或23的化合物，其中R¹为-Cl。

26.实施方式22或23的化合物，其中R¹为环丙基。

27.实施方式24至26中任一者的化合物，其中R³为-H。

28.实施方式1至21中任一者的化合物，其中R²为式AB、AC或AD的杂芳基部分：

其中：

各R¹⁰独立为-H、-F、-Cl或各自任选地被一个或多个卤素取代的C₁-C₃烷基或环丙基；且

R¹¹键合在相对于连接该杂芳基部分的该氨基键的间位或对位，且为：

(i)-SO₂N(R^10F)₂，其中各R^10F独立为-H或C₁-C₄烷基；

(ii)C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环，各自任选地被一个或多个卤素取代；

(iii)下式的部分：

其中

R¹²为-H或各自任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；

A为>N-或>C(H)-；且

X、Y和Z如下所定义者：

Z为>CH₂，且X和Y独立为>CH₂或>C(CH₃)₂，或X和Y两者都为>CH-且通过亚甲基或乙撑基桥连接在一起；或

Y为>CH₂或>C(CH₃)₂，且X和Z两者都为>CH-且通过亚甲基或乙撑基桥连接在一起；或

(iv)下式的部分：

其中，

G为>N-或>C(H)-；且

E为-O-或>C(H)-R¹³，其中R¹³为-H或各自任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环。

29.实施方式28的化合物，其中R¹¹为：

(i)下式结构的部分：

各自在其一个或多个碳原子上任选地经卤素取代或经部分取代，该部分为C₁-C₄烷基或C₃-C₄碳环的部分，各自在其一个或多个碳原子上任选地经：卤素；或部分取代，该部分为C₁-C₄烷基或C₃-C₄碳环，各自任选地被羟基或一个或多个卤素取代；或

(ii)-SO₂N(R^10F)₂。

30.一种式(II)的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

R¹为：-CH₃或-Cl；

R⁴为-H或-CH₃；

R⁵为-H或-F；且

R²为：

d)下式的部分：

其中，

R^6A和R^6B中一者为-H且另一者为：-H、-F、-Cl、-CH₃或CF₃；

R^7C和R^7D中一者为-H且另一者为：

(i)-F；

(ii)-Cl；

(iii)-SO₂NH₂；

(iv)环己基；

(v)叔丁基；或

(vi)下式的部分：

e)下式的部分：

或

f)下式的部分：

31.实施方式1的化合物，其具有式(III)的结构：

或其药学上可接受的盐，

其中：

R^1A为甲基或环丙基；

R^6B为-H、-F或-Cl；且

R^7D和R^7E中一者为-H且另一者为下式的杂环：

32.实施方式31的化合物，其中R^7D和R^7E中一者为-H且另一者为下式的部分：

33.一种式(IV)的化合物：

或其药学上可接受的盐，

其中Q、R或G的一为＝N-，且

当Q不选自N时，其为C-R^10A，

当R不选自N时，其为C-R^11A，

当G不选自N时，其为C-R^11A，且其中

R^10A在各情况下独立地选自-H、-F、-Cl或各自任选地被一个或多个卤素取代的C₁-C₃烷基或环丙基；

R^11A在各情况下独立地选自：

(i)-H；

(ii)-F或-Cl；

(iii)C₁-C₃烷基或环丙基，各自任选地被一个或多个卤素取代；

(iv)-SO₂N(R^10F)₂，其中各R^10F独立为-H或C₁-C₄烷基；

(v)C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；

(vi)下式的部分：

其中：

R¹²为-H或任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；

A为>N-或>C(H)-；且

X、Y和Z如下所定义者：

Z为>CH₂，且X和Y独立为>CH₂或>C(CH₃)₂，或X和Y两者都为>CH-且通过亚甲基或乙撑基桥连接在一起；或

Y为>CH₂或>C(CH₃)₂，且X和Z两者都为>CH-且通过亚甲基或乙撑基桥连接在一起；或

(vii)下式的部分：

其中：

G为>N-或>C(H)-；且

E为-O-或>C(H)-R¹³，其中R¹³为-H或任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环，

其先决条件为存在的R^11A的一不选自为-H、-F、-Cl或任选地在一个或多个位置上经卤素取代的C₁-C₃烷基或C₃碳环。

34.一种式(I)、(II)、(III)或(IV)中任一者的化合物，表1(下文)中所引述的化合物，例如示例性化合物Ex-10、Ex-11、Ex-12、Ex-13、Ex-33、Ex-34、Ex-57或Ex-58或这些呈药学上可接受的盐形式中任一者。

35.实施方式31的化合物，其中化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

36.实施方式31的化合物，其中化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

37.实施方式31的化合物，其中化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

38.实施方式31的化合物，其中化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

39.实施方式31的化合物，其中化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

40.实施方式31的化合物，其中化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

41.实施方式31的化合物，其中化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

42.实施方式31的化合物，其中化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

43.实施方式31的化合物，其中化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

44.一种药物组合物，其包括实施方式1至43及实施方式96至108中任一者的化合物或呈药学上可接受的盐形式的该化合物及至少一种药学上可接受的赋形剂。

45.一种治疗受试者的增殖性疾病的方法，该方法包括向受试者施用实施方式1至43及实施方式96至108中任一者的化合物或呈药学上可接受的盐形式的该化合物或实施方式44的药物组合物。

46.实施方式45所述的方法，其中增殖性疾病为癌症。

47.实施方式46所述的方法，其中癌症为：肺癌、脑癌、甲状腺癌、间变性星状细胞瘤、肝癌、胰腺癌、皮肤癌、黑色素瘤、转移性黑色素瘤、结直肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肾癌、肝细胞癌、卵巢癌、HPV相关性癌症、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征、血液癌或骨髓纤维化。

48.实施方式47所述的方法，其中癌症为非小细胞肺癌(NSCLC)。

49.实施方式47所述的方法，其中癌症为神经母细胞瘤或胶质母细胞瘤。

50.实施方式47所述的方法，其中癌症为间变性甲状腺癌(ATC)。

51.实施方式47所述的方法，其中癌症为结肠癌。

52.实施方式47所述的方法，其中癌症为肝细胞癌(HCC)。

53.实施方式47所述的方法，其中癌症为胰腺癌。

54.实施方式47所述的方法，其中癌症为退行性大细胞淋巴瘤(ALCL)或骨髓增生异常综合征。

55.实施方式47所述的方法，其中癌症为间变性星状细胞瘤。

56.实施方式47所述的方法，其中癌症为胰腺导管腺癌。

57.实施方式47所述的方法，其中癌症为相关性CAF癌、转移性黑色素瘤、结直肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肾癌、肝细胞癌、卵巢癌、HPV相关性癌症、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征或骨髓纤维化。

58.实施方式47所述的方法，其中HPV相关性癌症选自：宫颈癌、口咽癌、肛门癌、外阴/阴道癌或阴茎癌。

59.实施方式47至58中任一者所述的方法，其中该癌症以TGFβ信号传导驱动。

60.实施方式45所述的方法，其中增殖性疾病为纤维化病症。

61.实施方式60所述的方法，其中纤维化病症为特发性肺纤维化、肝纤维化、肝硬化、非酒精性脂肪肝炎、佩罗尼氏病、囊性纤维化、β型地中海贫血、光化性角化病、高血压、一般炎症性疾患、干眼症、溃疡、角膜纤维化、湿性老年性黄斑变性、银屑病、伤口闭合、慢性肾疾病、肾纤维化、全身性硬化症或慢性查加斯氏心脏病。

62.一种抑制受试者的肿瘤生长所述的方法，该方法包括向受试者施用实施方式1至43中任一者的化合物、或其药学上可接受的盐或实施方式44的药物组合物。

63.实施方式45至62中任一者所述的方法，其进一步包括向受试者施用一种或多种额外的治疗剂。

64.实施方式63所述的方法，其中额外的治疗剂中至少一者为抗癌剂。

65.实施方式63或64所述的方法，其中额外的治疗剂中至少一者为PD-1或PD-L1抑制剂。

66.实施方式45至62中任一者所述的方法，其进一步包括以放射疗法或手术治疗受试者。

67.一种抑制体内或体外ALK-5活性所述的方法，该方法包括使ALK-5与实施方式1至43及96至108中任一者的化合物、或其药学上可接受的盐或实施方式44的药物组合物接触。

68.实施方式67所述的方法，其中抑制发生于受试者活体内。

69.实施方式67所述的方法，其中抑制发生于试管内。

70.实施方式45至66及68中任一者所述的方法，其中受试者为人类。

71.一种治疗易感受TGFβ信号传导路径抑制的纤维化、炎症性或增殖性疾病或病症所述的方法，该方法包括对遭受该纤维化、炎症性或增殖性疾病或病症的受试者施用抑制TGFβ信号传导有效量的实施方式1至43及96至108中任一者的化合物、或其药学上可接受的盐形式或实施方式44的医药制剂。

72.实施方式71所述的方法，其中该化合物或该化合物的药学上可接受的盐形式为实施方式34至43中任一者的化合物或呈药学上可接受的盐形式的化合物。

73.实施方式71所述的方法，其中该化合物或该化合物的药学上可接受的盐形式为实施方式34的化合物、或其药学上可接受的盐形式。

74.实施方式71所述的方法，其中该化合物或该化合物的药学上可接受的盐形式为实施方式35的化合物、或其药学上可接受的盐形式。

75.实施方式71所述的方法，其中该化合物或该化合物的药学上可接受的盐形式为实施方式36的化合物、或其药学上可接受的盐形式。

76.实施方式71所述的方法，其中该化合物或该化合物的药学上可接受的盐形式为实施方式37的化合物、或其药学上可接受的盐形式。

77.实施方式71所述的方法，其中该化合物或该化合物的药学上可接受的盐形式为实施方式38的化合物、或其药学上可接受的盐形式。

78.实施方式71所述的方法，其中该化合物或该化合物的药学上可接受的盐形式为实施方式39的化合物、或其药学上可接受的盐形式。

79.实施方式71所述的方法，其中该化合物或该化合物的药学上可接受的盐形式为实施方式40的化合物、或其药学上可接受的盐形式。

80.实施方式71所述的方法，其中该化合物或该化合物的药学上可接受的盐形式为实施方式41的化合物、或其药学上可接受的盐形式。

81.实施方式71所述的方法，其中该化合物或该化合物的药学上可接受的盐形式为实施方式42的化合物、或其药学上可接受的盐形式。

82.实施方式71所述的方法，其中该化合物或该化合物的药学上可接受的盐形式为实施方式43的化合物、或其药学上可接受的盐形式。

83.实施方式71至82中任一者所述的方法，其中该疾病或病症为纤维化疾病或病症。

84.实施方式71至82中任一者所述的方法，其中该疾病或病症为炎症性疾病或病症。

85.实施方式83所述的方法，其中该纤维化疾病或病症选自特发性肺纤维化、肝纤维化、肝硬化、非酒精性脂肪肝炎、佩罗尼氏病、囊性纤维化、β型地中海贫血、光化性角化病、高血压、一般炎症性疾患、干眼症、溃疡、角膜纤维化、湿性老年性黄斑变性、银屑病、伤口闭合、慢性肾疾病、肾纤维化、全身性硬化症或慢性查加斯氏心脏病。

86.实施方式85所述的方法，其中该纤维化疾病或病症为特发性肺纤维化。

87.实施方式71至82中任一者所述的方法，其中疾病或病症为选自下列的增殖性疾病或病症：间变性星状细胞瘤、胰腺癌、转移性黑色素瘤、结直肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肾癌、肝细胞癌、卵巢癌、HPV相关性癌症、宫颈癌、口咽癌、肛门癌、外阴/阴道癌、阴茎癌、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征或骨髓纤维化。

88.一种抑制遭受以TGFβ信号传导促进的疾病或病症的受试者的TGFβ信号传导所述的方法，其包括施用有效充分抑制TGFβ信号传导以改变疾病或病症过程的量的至少一种实施方式1至43及96至108中任一者的化合物、或其药学上可接受的盐或实施方式44的药物组合物。

89.一种式Int-A5化合物：

或其盐，其中：

R¹为C₁-C₅烷基或C₃-C₅碳环或卤素；

R³为-H、-F或-Cl；且

R⁴为-H、卤素或各自任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基。

90.一种式Int-B2化合物：

或其盐，其中：

R¹为C₁-C₅烷基或C₃-C₅碳环或卤素；

R³为-H、-F或-Cl；

R⁴为-H、卤素或各自任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基，且

R⁵为-H、-F或各自任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基。

91.一种用于制备实施方式89的化合物或其盐所述的方法，其包括：

(a)提供式Int-A4化合物：

且使用经钯催化的还原反应将叠氮官能团还原成氨基官能团，

其中：

R¹为C₁-C₅烷基或C₃-C₅碳环或卤素；

R³为-H、-F或-Cl；且

R⁴为-H、卤素或各自任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或C₃碳环。

92.实施方式91所述的方法，其进一步包括制备式Int-A4化合物，其通过将式Int-A3化合物：

以叠氮化钠处理，其中R¹、R³和R⁴如式Int-A4化合物所定义者。

93.实施方式92所述的方法，其进一步包括制备式Int-A3化合物，其通过将式Int-A2化合物：

以三氯氧化磷处理，其中R¹、R³和R⁴如式Int-A4化合物所定义者。

94.实施方式93所述的方法，其进一步包括制备化合物Int-A2，其通过将式Int-A1化合物：

或其盐，以酸溶液中的亚硝酸钠处理，其中R¹、R³和R⁴如式Int-A4化合物所定义者。

95.一种制备实施方式90的化合物或其盐所述的方法，其包括：

(a)提供式IntB-1化合物：

且与式Int-A5化合物：

在钯偶联催化剂的存在下反应，

其中：

R¹为C₁-C₅烷基或C₃-C₅碳环或卤素；

R³为-H、-F或-Cl；

R⁴为-H、卤素或各自任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基；且

R⁵为-H、-F或各自任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基。

96.实施方式24至26中任一者的化合物，其中R³为-F，R⁴为-H或-CH₃，R⁵为-H，且R⁶为-H。

97.实施方式27的化合物，其中R⁴为-H、-Cl、-F、-CF₃或-CH₃，R⁵为-H、-CH₃、-CF₃、-Cl或-F，且R⁶为-H、-F、-Cl、-CH₃或-CF₃。

98.实施方式97的化合物，其中R⁴为-H或-CH₃，R⁵为-H或-F，且R⁶为-H、-F、-Cl或-CF₃。

99.实施方式24至27及96至98中任一者的化合物，其中R^7A和R^7B中一者为氢且其他为C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环，各自任选地被一个或多个卤素取代。

100.实施方式28或实施方式29的化合物，其中R¹为-Cl。

101.实施方式28或实施方式29的化合物，其中R¹为-CH₃。

102.实施方式28或实施方式29的化合物，其中R¹为环丙基。

103.实施方式28或实施方式29的化合物，其中R¹为-CF₃。

104.实施方式100至103中任一者的化合物，其中R³为-H或-F。

105.实施方式100至104中任一者的化合物，其中R⁴为-H、-Cl或CH₃。

106.实施方式100至105中任一者的化合物，其中R⁵为-H或-F。

107.实施方式28、29及100至106中任一者的化合物，其中各R¹⁰独立为C₁-C₃烷基或环丙基，各自任选地及独立地被一个或多个卤素取代。

108.实施方式28、29及100至106中任一者的化合物，其中各R¹⁰独立为-H、-CH₃、-CF₃、-Cl或-F。

实施例

中间体的合成流程：

路线-1：

1-(2-氨基-6-氟-3-甲基苯基)乙-1-酮(AA-2)的合成

将MeLi(1.6M于二乙醚中)(129.43mL，207.1mmol)在0℃下添加至四氢呋喃(50mL)中的2-氨基-6-氟-3-甲基苯甲酸(AA-1)(10g，59.10mmol)的悬浮液中，且将所得混合物在0℃温度下搅拌3h。将反应混合物以氯化铵溶液(100mL)淬灭且以EtOAc(2x 100mL)萃取。将合并的有机层以盐水(50mL)清洗，经硫酸钠干燥且在减压下浓缩以提供粗制化合物，将其与正戊烷(2x 25mL)湿磨以产出AA-2。LCMS(M+H)：168.3。

5-氟-8-甲基噌啉-4-醇(AA-3)的合成

将水(10mL)中的NaNO₂(1.81g，68.99mmol)在-5℃下逐滴添加至浓缩HCl(32mL)中的1-(2-氨基-6-氟-3-甲基苯基)乙-1-酮(AA-2)(4.0g，23.92mmol)的搅拌溶液中，且在70℃下搅拌3h。将反应混合物过滤，以二乙醚(20mL)清洗。将过滤物以饱和碳酸氢钠中和至pH＝7，将沉淀的固体过滤且干燥以提供(AA-3)。LCMS(M+H)：179.07。

4-氯-5-氟-8-甲基噌啉(AA-4)的合成

将POCl₃(21mL)添加至室温下的化合物5-氟-8-甲基噌啉-4-醇(AA-3)(2.1g，11.79mmol)中且容许在100℃下搅拌8h。将反应混合物冷却至室温且滤出POCl₃。将残余物倒入冰水(75mL)中且以饱和碳酸氢钠碱化至pH＝7。将沉淀的固体过滤且在真空下干燥以提供(AA-4)。LCMS(M+H)：197.0。

4-叠氮基-5-氟-8-甲基噌啉(AA-5)的合成

将NaN₃(2.62g，40.8mmol)添加至乙醇及水(80mL，1：1)中的4-氯-5-氟-8-甲基噌啉(AA-4)(1.6g，8.16mmol)的搅拌溶液中，且在90℃下搅拌4h。将反应混合物冷却至室温且在真空下浓缩。将残余物以水(100mL)稀释，将沉淀的固体过滤且在真空下干燥以提供(AA-5)：LCMS(M+H)：204.10。

5-氟-8-甲基噌啉-4-胺(AA-6)的合成

将10％的Pd/C(50％的水分)(0.4g)添加至乙醇及THF(75mL，25mL)中的4-叠氮基-5-氟-8-甲基噌啉(AA-5)(1.4g，6.89mmol)的搅拌溶液中，且将反应混合物在氢par装置下搅拌1h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤且以甲醇(100L)清洗。将过滤物在真空下浓缩且与甲苯(10mL)共蒸馏以提供粗制化合物，将其与醚(10mL)湿磨以提供(AA-6)。LCMS(M+H)：178.06。

N-(2-氯嘧啶-4-基)-5-氟-8-甲基噌啉-4-胺(B3)的合成

将1,4-二噁烷(40mL)、水(10mL)中的5-氟-8-甲基噌啉-4-胺(AA-6)(1g，5.64mmol)、2,4-二氯嘧啶(AA-7)(1.25g，8.47mmol)及Na₂CO₃(1.79g，16.94mmol)的混合物脱气20min且添加Pd₂(dba)₃(0.51g，0.564mmol)、Xantphos(0.32g，0.564mmol)，将所得反应混合物在90℃下搅拌3h。将反应混合物冷却至室温且在真空下浓缩。将残余物以水(100mL)稀释，将沉淀的固体过滤且与乙酸乙酯(200mL)湿磨以提供(B3)。LCMS(M+H)：290.10。

路线-2：

1-(2-氨基-4-氟-3-甲基苯基)乙-1-酮(AB-2)

将MeLi(1.6M于二乙醚中，45mL，236.68mmol)在0℃下添加至四氢呋喃(200mL)中的2-氨基-4-氟-3-甲基苯甲酸(AB-1)(3.0g，59.17mmol)的悬浮液中，且将所得反应混合物在25℃下搅拌5h。将反应混合物以氯化铵溶液(50mL)缓慢淬灭，以乙酸乙酯(2x 200mL)萃取。将合并的有机层以水(100mL)、盐水(100mL)清洗，经硫酸钠干燥且在真空下浓缩以提供粗制化合物，将其在硅胶(100至200筛目)上以使用30％的乙酸乙酯及己烷作为洗脱剂的快速柱层析纯化以提供AB-2。LCMS(M+H)：168.1。

4-氯-7-氟-8-甲基噌啉(AB-4)的合成

将POCl₃(30mL)添加至室温下的化合物7-氟-8-甲基噌啉-4-醇(AB-3)(2.5g，14.97mmol)中且容许在100℃下搅拌6h。将反应混合物在减压下蒸馏，将残余物倒入冰水(50mL)中且以碳酸氢钠饱和溶液碱化至pH＝7。将沉淀的固体过滤且在真空下干燥以提供(AB-4)。1HNMR CDCl₃，400MHz)：δ9.36(s,1H),8.10-8.06(m,1H),7.64(t,J＝9.2Hz,1H),2.94(s,3H)。LCMS(M+H)：197.0。

4-叠氮基-7-氟-8-甲基噌啉(AB-5)的合成

将NaN₃(2.0g，30.61mmol)添加至乙醇(30mL)、水(5mL)中的4-氯-7-氟-8-甲基噌啉(AB-4)(2.0g，10.20mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物在75℃下搅拌6h。将反应混合物冷却至室温且在真空下浓缩。将残余物以水(50mL)稀释，将沉淀的固体过滤且在真空下干燥以提供(AB-5)。1H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ9.23(s,1H),7.94-7.90(m,1H)7.50(t,J＝9.2Hz,1H),2.90(s,3H)。LCMS(M+H)：204.1。

7-氟-8-甲基噌啉-4-胺(AB-6)的合成

将10％的Pd/C(50％的水分)(0.5g)添加至乙醇(50mL)中的4-叠氮基-7-氟-8-甲基噌啉(AB-5)(1.9g，9.35mmol)的搅拌溶液中，且在par装置中于氢气下搅拌16h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤且将残余物以甲醇(2x 100mL)清洗。将过滤物在减压下浓缩且与甲苯(2x 25mL)共蒸馏以给出粗制化合物，将其与醚(2x 25mL)湿磨以提供(AB-6)。1H NMR(CDCl₃，500MHz)：δ8.77(s,1H),7.63-7.60(m,1H)7.38(t,J＝11.0Hz,1H),4.72(bs,2H),2.84(s,3H)。LCMS(M+H)：178.10。

N-(2-氯嘧啶-4-基)-7-氟-8-甲基噌啉-4-胺(B4)的合成

将1,4-二噁烷(50mL)、水(10mL)中的7-氟-8-甲基噌啉-4-胺(AB-6)(1.2g，6.77mmol)、2,4-二氯嘧啶(7)(1.5g，10.15mmol)及Na₂CO₃(2.15g，20.31mmol)的混合物脱气20min，且添加Pd₂(dba)₃(0.620g，0.677mmol)、Xantphos(0.392g，0.677mmol)，将所得反应混合物在90℃下搅拌6h。将反应混合物冷却至室温且在真空下浓缩，将残余物以水(50mL)稀释，将沉淀的固体过滤且以乙酸乙酯(2x 20mL)清洗以提供(B4)。1H NMR DMSO-d₆，400MHz)：δ10.53(s,1H),10.13(s,1H),8.44(d,J＝6.0Hz,1H),8.37-8.34(m,1H),7.85-7.78(m,1H),7.25(d,J＝6.0Hz,1H)2.90(s,3H)，LCMS(M+H)：290.12。

路线-3

1-(2-氨基-3-氯苯基)乙-1-酮(AC-2)

将MeLi(1.6M于二乙醚中，293mL，467.83mmol)在0℃下添加至四氢呋喃(300mL)中的2-氨基-3-氯苯甲酸(AC-1)(20.0g，116.95mmol)的悬浮液中，且将所得反应混合物在25℃温度下搅拌2h。将反应混合物以氯化铵饱和溶液(50mL)淬灭且以乙酸乙酯(2x 200mL)萃取。将合并的有机层以水(100mL)、盐水(100mL)清洗，经硫酸钠干燥且在真空下浓缩以提供粗制产物，将其在硅胶(100至200筛目)上以使用30％的乙酸乙酯及己烷的快速柱层析纯化以提供(AC-2)。LCMS(M+H)：170.06。

8-氯噌啉-4-醇(AC-3)的合成

将水(25mL)中的NaNO₂(7.40g，106.50mmol)的溶液在-5℃下逐滴添加至浓缩HCl(100mL)中的1-(2-氨基-3-氯苯基)乙-1-酮(AC-2)(15.0g，88.75mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物在70℃下搅拌3h。将反应混合物冷却至室温且过滤，将残余物以二乙醚(1.5L)清洗且将过滤物以饱和碳酸氢钠中和至pH＝7，将沉淀的固体过滤且在真空下干燥以提供(AC-3)。1H NMR(CDCl₃，300MHz)：δ10.40(bs,1H),8.18(d,J＝6.0Hz,1H),7.88(s,1H),7.77-7.74(m,1H),7.34(t,J＝8.1Hz,1H)。LCMS(M-H)：181.7。

4,8-二氯噌啉(AC-4)的合成

将POCl₃(50mL)添加至室温下的化合物8-氯噌啉-4-醇(AC-3)(4.5g，25.0mmol)中且容许在100℃下搅拌8h。将反应混合物冷却至室温且蒸馏出过量POCl₃。将残余物倒入冰水(50mL)中且以碳酸氢钠饱和溶液碱化至pH＝7，将沉淀的固体过滤且在真空下干燥以提供(AC-4)：1H NMR CDCl₃，400MHz)：δ9.46(s,1H),8.17-8.13(m,1H),8.02-8.00(m,1H),7.81-7.34(m,1H)。LCMS(M+H)：198.97。

4-叠氮基-8-氯噌啉(AC-5)的合成

将NaN₃(7.10g，109.13mmol)添加至乙醇(50mL)、水(5mL)中的4,8-二氯噌啉(AC-4)(4.3g，21.82mmol)的搅拌溶液中，且在75℃下搅拌6h。将反应混合物冷却至室温且在真空下浓缩。将残余物以水(50mL)稀释，将沉淀的固体过滤且在真空下干燥以提供(5)。1HNMR(CDCl₃，400MHz)：δ9.31(s,1H),7.99-7.95(m,2H)7.68-7.63(m,1H)。LCMS(M+H)：205.95。

8-氯噌啉-4-胺(AC-6)的合成

将10％的Pd/C(50％的水分)(0.5g)添加至乙酸乙酯(100mL)中的4-叠氮基-8-氯噌啉(AC-5)(4.0g，19.51mmol)的搅拌溶液中，且在20PSI的par装置中于氢气下搅拌16h。将反应混合物通过硅藻土过滤且以甲醇(2x 100mL)清洗，将过滤物在减压下浓缩，与甲苯(2x25mL)共蒸馏且以醚(2x 25mL)清洗以提供AC-6。1H NMR(CDCl₃，300MHz)：δ8.71(s,1H),8.18(dd J＝7.8Hz,1.2Hz,1H)7.91(dd J＝6.6Hz,6.0Hz,1H)7.56-7.51(m,1H),7.45(bs,2H)。LCMS(M+H)：180.11。8-氯-N-(2-氯嘧啶-4-基)噌啉-4-胺(B5)的合成

将1,4-二噁烷(50mL)、水(5mL)中的8-氯噌啉-4-胺(AC-6)(1.0g，5.58mmol)、2,4-二氯嘧啶(AA-7)(1.0g，6.70mmol)及Na₂CO₃(1.78g，16.74mmol)的溶液脱气20min，且添加Pd₂(dba)₃(0.510g，0.558mmol)、Xantphos(0.323g，0.558mmol)，将所得反应混合物在90℃下搅拌6h。将反应混合物冷却至室温且在真空下浓缩，将残余物以水(50mL)稀释，将沉淀的固体过滤，以乙酸乙酯(2x 20mL)清洗且在真空下干燥以提供(B5)。LCMS(M+H)：292.01。

路线-4：

1-(2-氨基-3-甲基苯基)丙-1-酮(AD-2)

将EtMgBr(1M于二乙醚中，760mL，757.55mmol)在0℃下添加至四氢呋喃(400mL)中的2-氨基-3-甲基苯甲腈(AD-1)(20g，151.51mmol)的悬浮液中，且将所得反应混合物在RT下搅拌4h。将反应混合物以氯化铵饱和溶液(400mL)淬灭且以EtOAc(2x 500mL)萃取。将合并的有机层以盐水(300mL)清洗，经硫酸钠干燥且在真空下浓缩以提供粗制化合物，将其与正戊烷(2x 200mL)湿磨以提供(AD-2)。1HNMR(CDCl₃，400MHz)：δ7.67(dd,J＝8.4,0.8Hz,1H),7.18(dd,J＝7.2,0.8Hz,1H),6.61-6.57(m,1H),2.99(q,J＝7.2Hz,2H),2.16(s,3H),1.22(t,J＝7.2Hz,3H)。LCMS(M+H)：164.08。

3,8-二甲基噌啉-4-醇(AD-3)的合成

将水(40mL)中的NaNO₂(11.49g，165.64mmol)的溶液在-5℃下逐滴添加至浓缩HCl(290mL)中的1-(2-氨基-3-甲基苯基)丙-1-酮(AD-2)(18g，110.42mmol)的搅拌溶液中，且在70℃下搅拌3h。将反应混合物冷却至室温，过滤且将残余物以二乙醚(500mL)清洗。将过滤物以碳酸氢钠饱和溶液中和至pH＝7，且将沉淀的固体过滤且在真空下干燥以提供(AD-3)。1H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ9.94(br s,1H),8.15(dd,J＝8.4,0.8Hz,1H),7.48(d,J＝7.2Hz,1H),7.27-7.23(m,1H),2.52(s,3H),2.43(s,3H)。LCMS(M+H)：175.1。

4-氯-3,8-二甲基噌啉(AD-4)的合成

将POCl₃(65mL)添加至室温下的化合物3,8-二甲基噌啉-4-醇(AD-3)(4.5g，25.86mmol)中且容许在100℃下搅拌8h。将反应混合物冷却至室温且蒸馏出过量POCl₃。将残余物倒入冰水(100mL)中且以碳酸氢钠饱和溶液碱化至pH＝7，将沉淀的固体过滤且在真空下干燥以提供(AD-4)。1H NMR CDCl₃，400MHz)：δ8.0(d,J＝8.8Hz,1H),7.71-7.69(m,1H),7.62-7.60(m,1H),3.04(s,3H),3.01(s,3H)。LCMS(M+H)：193.06。

4-叠氮基-3,8-二甲基噌啉(AD-5)的合成

将NaN₃(4.57g，70.31mmol)添加至乙醇(60mL)、水(10mL)中的4-氯-3,8-二甲基噌啉(AD-4)(4.5g，23.43mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物在90℃下搅拌5h。将反应混合物冷却至室温且在真空下浓缩。将残余物以水(50mL)稀释，将沉淀的固体过滤且在真空下干燥以提供(AD-5)。1H NMR(CDCl₃，400MHz)：7.96-7.93(m,1H),7.67-7.57(m,2H),3.07(s,3H),2.98(s,3H)。LCMS(M+H)：200.08。

3,8-甲基噌啉-4-胺(AD-6)的合成

将10％的Pd/C(2g)添加至乙醇(40mL)中的4-叠氮基-3,8-二甲基噌啉(AD-5)(4g，20.10mmol)的搅拌溶液中，且在par装置中于氢气下搅拌16h。将反应混合物通过硅藻土过滤且以乙醇(20mL)清洗。将过滤物在真空下浓缩以给出粗制物，将其与二乙醚(2x 20mL)湿磨以提供AD-6。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ8.01(d,J＝8.4Hz,1H),7.56(d,J＝6.8Hz,1H),7.45(t,J＝8.0Hz,1H),7.08(bs,2H),3.1(s,3H),2.76(s,3H)。LCMS(M+H)：174.09。

N-(2-氯嘧啶-4-基)-3,8-二甲基噌啉-4-胺(B6)的合成

将1,4-二噁烷(40mL)、水(10mL)中的3,8-甲基噌啉-4-胺(AD-6)(2g，11.56mmol)、2,4-二氯嘧啶(7)(2.58g，17.34mmol)及Na₂CO₃(3.67g，34.68mmol)的混合物脱气20min，且添加Pd₂(dba)₃(1.05g，1.15mmol)、Xantphos(0.8g，1.38mmol)，将所得反应混合物在90℃下搅拌3h。将反应混合物冷却至室温且在真空下浓缩，将残余物以水(50mL)稀释，将沉淀的固体过滤且与乙酸乙酯(2x 50mL)湿磨以提供(B6)。LCMS(M+H)：286.14。

路线-5：

步骤1：1-(2-氨基-3-甲基苯基)乙-1-酮(AE-2)：

将MeLi(3.1M于DME中)(0.972mL，33013.22mmol)在0℃下添加至二甲氧基乙烷(DME)(1.5L)中的2-氨基-3-甲基苯甲酸(65g，430.46mmol)(AE-1)的悬浮液中，且将所得混合物在0℃温度下搅拌3h。将反应混合物以氯化铵溶液(200mL)淬灭。在真空下蒸发溶剂，将所得残余物以水清洗且以EtOAc(2x 200mL)萃取。将合并的有机层以水(100mL)、盐水(100mL)清洗，经硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩，且将残余物在硅胶(100至200筛目)上以使用3％的乙酸乙酯/己烷的快速柱层析纯化以提供AE-2：1H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ7.65(d,J＝8.4Hz,1H),7.21(d,J＝6.8Hz,1H),6.59(t,J＝8.0Hz,1H),6.41(bs,2H),2.16(s,3H)；LCMS(M+H)：150.1。

步骤2：8-甲基噌啉-4-醇(AE-3)的合成：

将水(75mL)中的NaNO₂(25.469g，369.12mmol)在-5℃下逐滴添加至1-(2-氨基-3-甲基苯基)乙-1-酮(50g，0.335mmol)(AE-2)及浓缩HCl(275mL)的搅拌溶液中，且在70下搅拌3h。将反应混合物过滤，以醚(50mL)清洗。将过滤物以饱和碳酸氢钠中和(pH＝7)，将沉淀的固体过滤且在减压下干燥以提供AE-3；1H NMR(CDCl₃，500MHz)：δ10.06(bs,1H),8.14(d,J＝8.0Hz,1H),7.87(s,1H),7.54(d,J＝7.0Hz,1H),7.32-7.29(m,1H),2.56(s,3H)。LCMS(M+H)：161.1。

步骤3：4-氯-8-甲基噌啉(AE-4)的合成：

将POCl₃(220mL)添加至室温下的化合物8-甲基噌啉-4-醇(10.5g，65.62mmol)(AE-3)中且容许在100℃下搅拌8h，将反应混合物冷却至室温且在减压下浓缩。将残余物以水(50mL)稀释，以饱和碳酸氢钠碱化(pH＝7)且以EtOAc(2x 200mL)萃取两次。将合并的有机层以水(120mL)、盐水(120mL)清洗，经硫酸钠干燥，过滤且在真空下浓缩以提供AE-4；1HNMR(CDCl₃，400MHz)：δ9.35(s,1H),8.05(d,J＝7.6Hz,1H),7.77-7.71(m,2H),3.05(s,3H)LCMS(M+H)：179.1。

步骤4：4-叠氮基-8-甲基噌啉(AE-5)的合成：

将NaN₃(9.5g，145.45mmole)添加至乙醇(100mL)、水(25mL)中的4-氯-8-甲基噌啉(8.0g，48.48mmol)(AE-4)的搅拌溶液中，且在80℃下搅拌5h。将反应混合物冷却至室温且在减压下浓缩。将残余物以水(50mL)稀释，将沉淀的固体过滤且在真空下干燥以提供AE-5：1H NMR(CDCl3，400MHz)：δ9.23(s,1H),7.89(d,J＝8.4Hz,1H),7.69-7.61(m,2H),3.02(s,3H)。LCMS(M+H)：186.1。

步骤5：8-甲基噌啉-4-胺(AE-6)的合成：

将10％的Pd/C(50％的水分)(3.4g)添加至乙醇(100mL)中的4-叠氮基-8-甲基噌啉(6.0g，32.43mmol)(AE-5)的搅拌溶液中，且在氢气球压力下搅拌24h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤且将残余物以甲醇(2x 50mL)清洗。将过滤物在减压下浓缩以提供AE-6。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ8.63(s,1H),8.01(d,J＝8.4Hz,1H),7.56(d,J＝6.8Hz,1H),7.45(t,J＝8.0Hz,1H),7.08(bs,2H),2.76(s,3H)。LCMS(M+H)：160.1。

步骤6：N-(2-氯嘧啶-4-基)-8-甲基噌啉-4-胺(8)的合成：

将1,4-二噁烷(75mL)、水(15mL)中的8-甲基噌啉-4-胺(3.0g，48.48mmol)(AE-6)、2,4-二氯嘧啶(5.62g，37.73mmole)(AA-7)及Na₂CO₃(6.0g，56.58mmol)的搅拌溶液脱气20min，且添加Pd₂(dba)₃(1.72g，1.886mmol)、Xantphos(1.09g，1.886mmol)且在120℃下搅拌5h。将反应混合物冷却至室温且在减压下浓缩。将残余物以水(50mL)稀释且将沉淀的固体过滤，以乙酸乙酯(50mL)清洗且在减压下干燥以提供B7：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ10.50(s,1H),10.03(s,1H),8.36(d,J＝6.0Hz,1H),8.26(d,J＝9.6Hz,1H),7.75-7.73(m,2H),7.19(d,J＝5.6Hz,1H)2.90(s,3H),LCMS(M+H)：272.0。

路线-6：

4-(2-氟-5-硝苯基)吗啉(BB-3)的合成

将吗啉(2)(0.79g，9.0mmol)及Cs₂CO₃(8.78g，2.70mmol)添加至1,4-二噁烷(50mL)中的2-溴-1-氟-4-硝苯(BB-1)(2.0g，9.0mmol)的搅拌溶液中且脱气15min，接着添加Pd₂(dba)₃(0.82g，0.90mmol)、Xantphos(0.520g，0.90mmol)且将所得反应混合物在120℃下搅拌16h。将反应混合物冷却至室温，以水(20mL)稀释且以乙酸乙酯(2x 40mL)萃取。将合并的有机层以盐水(25mL)清洗，经硫酸钠干燥且在真空下浓缩以给出粗制化合物，将其在硅胶(100至200筛目)上以使用5至10％的乙酸乙酯及己烷作为洗脱剂的快速柱层析纯化以提供(BB-3)。LCMS(M+H)：227.18。

4-氟-3-吗啉基苯胺(A1)的合成

将10％的Pd/C(0.250g)(50mL)添加至甲醇中的4-(2-氟-5-硝苯基)吗啉(BB-3)(0.5g，15.76mmol)的搅拌溶液中，且在25℃下于氢气球压力下搅拌16h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤且以甲醇(100mL)清洗，将过滤物在真空下浓缩以提供(A1)。1H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ6.84-6.79(m,1H),6.27-622(m,2H),3.85(t,J＝4.4Hz,4H),3.57(bs,2H),3.05-3.03(m,4H)。LCMS(M+H)：197.20。

路线-7：

4-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)吗啉(BC-3)的合成

将1-氟-3-硝基-5-(三氟甲基)苯(BC-1)(2.0g，9.56mmol)、吗啉(BB-2)(1.5mL，14.35mmol)的混合物在100℃下搅拌5h。将反应混合物冷却至室温，以水(20mL)稀释，将沉淀的固体过滤且干燥以给出粗制化合物，将其在硅胶(100至200筛目)上以使用5至10％的乙酸乙酯及己烷作为洗脱剂的快速柱层析纯化以提供(BC-3)。1H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ7.90(s,1H),7.85(t,J＝2.0Hz,1H)7.35(s,1H),3.91-388(m,4H),3.33-3.30(m,4H)。LCMS(M+H)：277.03。

3-吗啉基-5-(三氟甲基)苯胺(A2)的合成

将10％的Pd/C(0.5g)添加至甲醇(50mL)中的4-(3-硝基-5-(三氟甲基)苯基)吗啉(BC-3)(1.5g，5.43mmol)的搅拌溶液中，且在25℃下于氢气球压力下搅拌16h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤且以甲醇(100mL)清洗，将过滤物在真空下浓缩以提供(A2)。LCMS(M+H)：247.16。

路线-8：

4-(3-硝基苯甲基)吗啉(BD-3)的合成

将吗啉(0576mL，6.221mmol)及Na(OAc)₃BH(4.192g，19.86mmol)、催化量乙酸添加至DCE(20mL)中的2,3-硝基苯甲醛(BD-1)(1.0g，6.221mmol)的搅拌溶液中，将所得反应混合物在25℃下搅拌16h。将反应混合物以水(25mL)稀释且以二氯甲烷(2x 100mL)萃取。将合并的有机层以盐水(25mL)清洗，经硫酸钠干燥且在减压下浓缩，以提供粗制化合物，将其在硅胶(100至200筛目)上以使用5至10％的乙酸乙酯及己烷作为洗脱剂的快速柱层析纯化以提供(BD-3)：LCMS(M+H)：223.1。

3-(吗啉基甲基)苯胺(A3)的合成

将Zn粉(2.0g，45.04mmol)及氯化铵(2.3g，45.04mmol)添加至甲醇(10mL)、水(2.0mL)中的4-(3-硝基苯甲基)吗啉(BD-3)(1.0g，4.50mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物在25℃下搅拌3h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤且以甲醇(100mL)清洗，将过滤物在真空下浓缩，以水(20mL)稀释且以乙酸乙酯(2x 100mL)萃取。将合并的有机层以盐水(25mL)清洗，经硫酸钠干燥且在真空下浓缩以提供粗制化合物，将其在硅胶(100至200筛目)上以使用30至40％的乙酸乙酯及己烷作为洗脱剂快速柱层析纯化以提供(A3)：LCMS(M+H)：193.1。路线-9：

4-(溴甲基)-1-氟-2-硝苯(BE-2)的合成

将NBS(6.0g，38.68mmol)及过氧化苯(0.780g，3.223mmol)添加至CCl₄(100mL)中的1-氟-4-甲基-2-硝苯(BE-1)(5.0g，32.23mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物在80℃下搅拌16h。将反应混合物以水(25mL)稀释且以二氯甲烷(2x 250mL)萃取。将合并的有机层以盐水(50mL)清洗，经硫酸钠干燥且在真空下浓缩以给出粗制化合物，将其在硅胶(100至200筛目)上以使用2至5％的乙酸乙酯及己烷作为洗脱剂的快速柱层析纯化以提供(BE-2)。LCMS(M+H)：339.1。

4-(4-氟-3-硝基苯甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(BE-4)的合成

将哌嗪-1-甲酸叔丁酯(BE-3)(1.19g，10.30mmol)及三乙胺(1.94mL，19.23mmol)添加至DCM(20mL)中的4-(溴甲基)-1-氟-2-硝苯(BE-2)(1.56g，6.410mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物在25℃下搅拌16h。将反应混合物以水(25mL)稀释且以二氯甲烷(2x100mL)萃取。将合并的有机层以盐水(25mL)清洗，经硫酸钠干燥且在真空下浓缩以提供粗制化合物，将其在硅胶(100至200筛目)上以使用5至10％的乙酸乙酯及己烷作为洗脱剂的快速柱层析纯化以提供(BE-4)。LCMS(M+H)：340.1。

4-(3-氨基-4-氟苯甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(A4)的合成

将Zn粉(1.91g，29.49mmol)及氯化铵(1.56g，29.49mmol)添加至甲醇(20mL)、水(5mL)中的4-(4-氟-3-硝基苯甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(BE-4)(1.12g，2.94mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物在25℃下搅拌2h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤且以甲醇(100mL)清洗，将过滤物在真空下浓缩，以水(20mL)稀释且以乙酸乙酯(2x 100mL)萃取。将合并的有机层以盐水(25mL)清洗，经硫酸钠干燥且在减压下浓缩以给出粗制化合物，将其在硅胶(100至200筛目)上以使用20至30％的乙酸乙酯及己烷的快速柱层析纯化以提供(A4)。LCMS(M+H)：310.2。

路线-10：

5-(4-硝苯基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(BF-3)的合成

将2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(BF-2)(0.702g，3.546mmol)及K₂CO₃(1.468g，10.63)添加至DMF(5mL)中的1-氟-4-硝苯(BF-1)(0.5g，3.546mmol)的搅拌溶液中，将所得反应混合物在80℃下搅拌16h。将反应混合物冷却至RT，以水(20mL)稀释，将沉淀的固体过滤且在真空下干燥以提供(BF-3)。1H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ8.12(d,J＝8.8Hz,2H),6.49(d,J＝9.2Hz,2H)4.71-4.53(m,2H),3.60-3.26(m,4H),2.0(s,2H),1.42(s,9H)。LCMS(M+H)：320.25。

2-(4-硝苯基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷(BF-4)的合成

将TFA(2.0mL)添加至DCM(10mL)中的5-(4-硝苯基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯(BF-3)(1.0g，3.125mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物在RT下搅拌3h。将反应混合物在真空下浓缩，以水(25mL)稀释，以碳酸氢钠饱和溶液中和且以乙酸乙酯(2x 100mL)萃取两次。将合并的有机层以盐水(125mL)清洗，经硫酸钠干燥且在减压下浓缩以提供粗制化合物，将其在硅胶(100至200筛目)上以使用20至30％的乙酸乙酯及己烷作为洗脱剂的快速柱层析纯化以提供(BF-4)。1H NMR(CDCl₃，300MHz)：δ8.11(d,J＝9.0Hz,2H),6.47(d,J＝9.6Hz,2H),4.45(s,1H),3.89(s,1H),3.66-3.62(m,1H),3.14-3.03(m,3H),1.95-1.91(m,2H)。LCMS(M+H)：220.11。

2-甲基-5-(4-硝苯基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷(BF-5)的合成

将37％的HCHO(0.307mL，10.22mmol)及Na(OAc)₃BH(1.2g，6.135mmol)添加至MeOH(8mL)中的2-(4-硝苯基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷(BF-4)(0.45g，3.125mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物在25℃下搅拌16h。将反应混合物在真空下浓缩，以(25mL)水稀释且以碳酸氢钠饱和溶液中和，将沉淀的固体过滤且在真空下干燥以提供(BF-5)。

1H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ8.12-8.10(m,2H),6.49-6.46(m,2H)4.75(s,1H),3.60(s,1H),3.60-3.40(m,2H),3.02-2.99(m,1H),266-2.64(m,1H),2.42(s,3H),2.09-2.03(m,1H),1.92-1.90(m,1H)。LCMS(M+H)：234.17。

4-(5-甲基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基)苯胺(A5)的合成

将Zn粉(1.33g，20.512mmol)及氯化铵(1.087g，20.152mmol)添加至甲醇(50mL)及(2.5mL)中的2-甲基-5-(4-硝苯基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷(BF-5)(0.48g，2.051mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物在25℃下搅拌2h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤且以甲醇(100mL)清洗，将过滤物在减压下浓缩，以水(20mL)稀释且以乙酸乙酯(2x 100mL)萃取。将合并的有机层以盐水(25mL)清洗，经硫酸钠干燥且在减压下浓缩以提供粗制化合物，将其在硅胶(100至200筛目)上以使用50至60％的乙酸乙酯及己烷作为洗脱剂的快速柱层析纯化以提供(A5)。LCMS(M+H)：204.18。

路线-11：

4-(3-氟-5-硝苯基)吗啉(BG-3)的合成

将吗啉(BB-2)(2.73g，31.44mmol)及K₂CO₃(26.03g，18.86)添加至DMF(15mL)中的1,3-二氟-5-硝苯(BG-1)(5.0g，31.44mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物在120℃下搅拌16h。将反应混合物冷却至室温，以水(25mL)稀释且以乙酸乙酯(2x 100mL)萃取两次。将合并的有机层以盐水(125mL)清洗，经硫酸钠干燥且在减压下浓缩以提供粗制化合物，将其在硅胶(100至200筛目)上以使用10至20％的乙酸乙酯及己烷作为洗脱剂的快速柱层析纯化以提供(BG-3)。(LCMS(M+H):227.18。

3-氟-5-吗啉基苯胺(A6)的合成

将10％的Pd/C(50％的水分)(1.5g)添加至乙醇(30mL)中的4-(3-氟-5-硝苯基)吗啉(BG-3)(2.7g，11.94mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物在par装置中于氢气下搅拌16h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤且以甲醇(2x 100mL)清洗。将过滤物在减压下浓缩，与甲苯(2x 25mL)共蒸馏且与二乙醚(2x 25mL)湿磨以提供(A6)。LCMS(M+H)：197.08。

路线-12：

1-(溴甲基)-3-氟-5-硝苯(BH-2)的合成

将NBS(9.1g，51.57mmol)及过氧化苯(1.56g，6.44mmol)添加至CCl₄(1000mL)中的1-氟-3-甲基-5-硝苯(BH-1)(10.0g，64.47mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物在80℃下搅拌16h。将反应混合物冷却至室温，以水(25mL)稀释且以二氯甲烷(2x 250mL)萃取。将合并的有机层以盐水(125mL)清洗，经硫酸钠干燥且在减压下浓缩以提供粗制化合物，将其在硅胶(100至200筛目)上以使用1至2％的乙酸乙酯及己烷的快速柱层析纯化以提供(BH-2)。1H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ8.08(s,1H),7.92-7.86(m,1H)7.48-7.45(m,1H),4.50(s,2H)。GCMS(M):232.1。

1-(3-氟-5-硝基苯甲基)-4-甲基哌嗪(BH-4)

将1-甲基哌嗪(BH-3)(1.03g，10.30mmol)及三乙胺(3.8mL，25.75mmol)添加至DCM(20mL)中的1-(溴甲基)-3-氟-5-硝苯(BH-2)(2.0g，8.58mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物在25℃下搅拌16h。将反应混合物以水(25mL)稀释且以二氯甲烷(2x 100mL)萃取两次。将合并的有机层以盐水(25mL)清洗，经硫酸钠干燥且在真空下浓缩以提供粗制材料，将其在硅胶(100至200筛目)上以使用10至20％的乙酸乙酯及己烷的快速柱层析纯化以提供(BH-4)。LCMS(M+H)：254.18。3-氟-5-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯胺(A7)

将硼氢化钠(2.3g，63.24mmol)及NiCl₂.6H₂O(0.45g，1.89mmol)在0℃下添加至甲醇(50mL)中的1-(3-氟-5-硝基苯甲基)-4-甲基哌嗪(BH-4)(1.6g，6.32mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物在RT下搅拌3h。将反应混合物经由硅藻土过滤且以甲醇(100mL)清洗，将过滤物在真空下浓缩，以水(20mL)稀释且以二氯甲烷(2x 100mL)萃取。将合并的有机层以盐水(25mL)清洗，经硫酸钠干燥且在减压下浓缩以提供(A7)：1H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ6.91(d,J＝8.0Hz,2H),6.49(d,J＝8.4Hz,1H),4.95(s,2H),3.53(t,J＝4.4Hz,4H),3.25(s,3H),2.29-2.26(m,4H)。LCMS(M+H)：224.18。

路线-13：

(3-氟-5-硝基苯甲基)膦酸二乙酯(BI-3)的合成

将磷酸三乙酯(1.4g，8.58mmol)添加至1-(溴甲基)-3-氟-5-硝苯(BI-1)(2.0g，8.58mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物在80℃下搅拌3h。将反应冷却至室温，以水(25mL)稀释且以二氯甲烷(2x100mL)萃取。将合并的有机层以盐水(125mL)清洗，经硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩以提供粗制化合物，将其在硅胶(100至200筛目)上以使用10％的乙酸乙酯及己烷作为洗脱剂的快速柱层析纯化以提供(BI-3)。1H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ7.98(s,1H),7.985-7.81(m,1H)7.42-7.38(m,1H),4.15-4.05(m,4H),3.25(s,1H),3.20(s,1H),136-1.27(m,6H)。LCMS(M+H)：292.17。

4-(3-氟-5-硝基苯亚甲基)-1-甲基哌啶(BI-4)的合成

将(3-氟-5-硝基苯甲基)膦酸二乙酯(BI-2)(1.9g，6.52mmol)及1-甲基哌啶-4-酮(BI-3)(0.73g，6.52mmol)的溶液在0℃下添加至四氢呋喃(20mL)中的氢化钠(0.26g，9.14mmol)的悬浮液中，将所得反应混合物在室温下搅拌3h。将反应混合物以冷水(20mL)稀释，以乙酸乙酯(2x 100mL)萃取。将合并的有机层以盐水(25mL)清洗，经硫酸钠干燥且在真空下浓缩以提供粗制化合物，将其在硅胶(100至200筛目)上以使用乙酸乙酯及己烷作为洗脱剂的快速柱层析纯化以提供(BI-4)。LCMS(M+H)：340.27。

3-氟-5-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯胺(A8)

将硼氢化钠(1.8g，63.24mmol)及NiCl₂.6H₂O(0.340g，1.89mmol)在0℃下添加至甲醇(50mL)中的1-(3-氟-5-硝基苯甲基)-4-甲基哌嗪(BI-4)(1.2g，4.8mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物通过硅藻土过滤且以甲醇(100mL)清洗，将过滤物在减压下浓缩，以水(20mL)稀释且以二氯甲烷(2x 100mL)萃取。将合并的有机层以盐水(25mL)清洗，经硫酸钠干燥且在真空下浓缩以提供(A8)。(LCMS(M+H)：223.24。

路线-14：

步骤1：4-(4-硝基苯甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(BJ-3)的合成：

将K₂CO₃(3.87g，28.02mmol)添加至DMF(10mL)中的1-(溴甲基)-4-硝苯(BJ-1)(2.0g，9.34mmol)、哌嗪-1-甲酸叔丁酯(BE-3)(1.72g，9.34mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物在100℃下搅拌4h。将反应混合物冷却至室温且以水(750mL)稀释，将沉淀的固体过滤且在真空下干燥以提供(BJ-3)。

步骤2：4-(4-氨基苯甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(A9)的合成：

将Fe(1.04g，18.67mmol)及氯化铵(0.4g，7.46mmol)添加至乙醇(5mL)、水(5mL)中的4-(4-硝基苯甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(BJ-3)(1.2g，3.73mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物在100℃下搅拌5h。将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土垫过滤且以甲醇(100mL)清洗，将过滤物在减压下浓缩且以水(20mL)稀释，以乙酸乙酯(2x 100mL)萃取。将合并的有机层以盐水(25mL)清洗，经硫酸钠干燥，在减压下浓缩以给出粗制化合物，将其在硅胶(100至200筛目)上以使用己烷中的60至70％的乙酸乙酯作为洗脱剂的快速柱层析纯化以提供(A9)：LCMS(M+H)：292.20。

路线-15：

(4-硝基苯甲基)膦酸二乙酯(BK-3)的合成：

将1-(溴甲基)-4-硝苯(BK-1)(5.0g，23.14mmol)、磷酸三乙酯(BI-2)(3.8g，23.14mmol)的混合物在80℃下搅拌3h。将反应冷却至室温，以水(50mL)稀释且以二氯甲烷(2x 100mL)萃取。将合并的有机层以盐水(20mL)清洗，经硫酸钠干燥且在减压下浓缩以提供粗制化合物，将其在硅胶(100至200筛目)上以使用10％的乙酸乙酯及己烷作为洗脱剂的快速柱层析纯化以提供(BK-3)。LCMS(M+H)：274.10。4-(4-硝基苯亚甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(BK-5)的合成：

将(4-硝基苯甲基)膦酸二乙酯(BK-3)(4.0g，14.65mmol)及4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(BK-4)(2.9g，14.65mmol)的溶液在0℃下添加至四氢呋喃(40mL)中的氢化钠(0.8g，21.97mmol)的悬浮液中，将所得反应混合物在室温下搅拌3h。将反应混合物以冷水(20mL)稀释，以乙酸乙酯(2x 100mL)萃取。将合并的有机层以盐水(25mL)清洗，经硫酸钠干燥且在真空下浓缩以提供粗制化合物，将其在硅胶(100至200筛目)上以使用20％的乙酸乙酯及己烷作为洗脱剂的快速柱层析纯化以提供(BK-5)。LCMS(M+H)：263.0[M-58]。

4-(4-氨基苯甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(A10)的合成：

将硼氢化钠(4.4g，78.61mmol)及NiCl₂.6H₂O(1.86g，7.86mmol)在0℃下添加至甲醇(25mL)中的4-(4-硝基苯亚甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(BK-5)(2.5g，7.86mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物在RT下搅拌1h。将反应混合物通过硅藻土过滤且以甲醇(100mL)清洗，将过滤物在减压下浓缩，以水(20mL)稀释且以二氯甲烷(2x 100mL)萃取。将合并的有机层以盐水(25mL)清洗，经硫酸钠干燥且在真空下浓缩以提供(A10)。(LCMS(M+H)：235.1[M-58]。

路线-16：

(4-氟-3-硝基苯甲基)膦酸二乙酯(BL-3)的合成：

将磷酸三乙酯(BI-2)(5.01g，30.16mmol)添加至4-(溴甲基)-1-氟-2-硝苯(BL-1)(5.0g，21.36mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物在80℃下搅拌3h。将反应冷却至室温，以水(50mL)稀释且以二氯甲烷(2x 100mL)萃取。将合并的有机层以盐水(20mL)清洗，经硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩以提供粗制化合物，将其在硅胶(100至200筛目)上以使用10％的乙酸乙酯及己烷作为洗脱剂的快速柱层析纯化以提供(BL-3)。LCMS(M+H)：292.0。

4-(4-氟-3-硝基苯亚甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(BL-5)的合成：

将(4-氟-3-硝基苯甲基)膦酸二乙酯(BL-3)(4.0g，13.73mmol)及4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(BL-4)(2.73g，13.73mmol)的溶液在0℃下添加至四氢呋喃(40mL)中的氢化钠(0.82g，20.60mmol)的悬浮液中，将所得反应混合物在室温下搅拌3h。将反应混合物以冷水(20mL)稀释，以乙酸乙酯(2x 100mL)萃取。将合并的有机层以盐水(25mL)清洗，经硫酸钠干燥且在真空下浓缩以提供粗制化合物，将其在硅胶(100至200筛目)上以使用20％的乙酸乙酯及己烷作为洗脱剂的快速柱层析纯化以提供(BL-5)。LCMS(M+H)：281.1[M-58]。

4-(3-氨基-4-氟苯甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(A11)的合成：

将10％的Pd/C(50％的水分)(0.82g)添加至甲醇(30mL)：THF(5mL)中的4-(4-氟-3-硝基苯亚甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(BL-5)(1.2g，2.97mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物在60psi氢压力下搅伴16h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤且以甲醇(100L)清洗。将过滤物在减压下浓缩，与甲苯(10mL)共蒸馏且以醚(10mL)清洗以提供A11。(LCMS(M+H)：209.1[M-100]。

路线-17：

N-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-8-甲基噌啉-4-胺(BJ-3)的合成

将1,4-二噁烷(50mL)及水(5mL)中的8-甲基噌啉-4-胺(BJ-1)(0.5g，3.14mmol)、2,4-二氯-5-氟嘧啶(BJ-2)(1.55g，9.42mmol)、K₂CO₃(0.87g，6.28mmol)的混合物脱气5min，且添加Pd₂(dba)₃(0.145g，0.14mmol)、Xantphos(0.080g，0.314mmol)且将所得反应混合物在100℃下搅拌1h。将反应混合物冷却至室温，以水(20mL)稀释且以乙酸乙酯(2x 100mL)萃取。将合并的有机层以盐水(25mL)清洗，经硫酸钠干燥且在真空下浓缩以提供粗制化合物，将其在100至200筛目硅胶上以使用30％的乙酸乙酯及己烷的快速柱层析纯化以提供(BJ-3)。LCMS(M-H)：288.0。

b)实施例化合物的合成

根据本发明的化合物可以下文实施例中所描述所述的方法制造。然而，这些实施例仅以例证为目的，且根据本发明的化合物不以任何方式限制成下文述及的特定实施例。

通用合成程序

使用本发明所描述的通用且特定的合成流程的上述通用合成流程及类似流程，且以上文通用合成流程中标示为“反应物A”的适当选择的试剂，例如下列中的一者。

4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺；4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯；4-(3-氨基-4-氟苯甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯；3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯胺；4-(4-氨基苯甲基)啶-1-甲酸叔丁酯；4-(3-氨基-5-氟苯甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯；4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺；4-(4-氨基-2-氟苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯；4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯；4-吗啉基苯胺；3-吗啉基苯胺；3-氯-4-吗啉基苯胺；3-氟-4-吗啉基苯胺；4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯；4-(3-氨基-4-氟苯甲基)啶-1-甲酸叔丁酯；4-(4-(2,2,2-三氟乙基)哌嗪-1-基)苯胺；4-(4-氨基苯甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯；2-氟-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺；4-(4-氨基-3-氟苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯；6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-胺；4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺；4-(吗啉基甲基)苯胺；4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯胺；4-(8-甲基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)苯胺；4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯胺；4-氯苯胺；4-(3-氨基苯甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯；4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺；4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺；3-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺；3-氨基苯磺酰胺；4-(3-氨基苯基)啶-1-甲酸叔丁酯；2-(4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-基)乙-1-醇；4-氟-3-吗啉基苯胺；3-吗啉基-5-(三氟甲基)苯胺；3-吗啉基苯胺；4-吗啉基苯胺；3-氟-5-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯胺；3-氟-5-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯胺；3-氟-5-吗啉基苯胺；4-(5-甲基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基)苯胺；4-(四氢-2H-吡喃-4-基)苯胺；3-(吗啉基甲基)苯胺；4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯；4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺；4-(4-氨基苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯；3-吗啉基苯胺；4-吗啉基苯胺；3-氟-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺；或4-(叔丁基)苯胺；4-(哌啶-1-基)苯胺；4-环己基苯胺，

在表1中列出的实施例化合物如所示方式制备及表征：

表1：本发明的实施例化合物

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某些实施例化合物的合成

路线-1：

1)1-(2-氨基-3-溴苯基)乙-1-酮(I-2)的合成：

将MeLi(1.6M于二乙醚中)(203mL，325.58mmol)在0℃下添加至THF(400mL)中的2-氨基-3-溴苯甲酸(1)(20g，93mmol)的悬浮液中，将所得反应混合物在25℃温度下搅拌3h，接着以氯化铵饱和溶液(2000mL)淬灭且以EtOAc(2x 500mL)萃取。将有机层合并，以水(150mL)、盐水(150mL)清洗，经硫酸钠干燥且在真空下浓缩以提供粗制化合物，将其与正戊烷(2x 100mL)湿磨以提供化合物(I-2)，其以LCMS(M+1)：214特征化。

2)8-溴噌啉-4-醇(I-3)的合成：

将水(10.5mL)中的NaNO₂(7.77g，112.68mmol)的溶液在-5℃下添加至浓缩HCl(140mL)中的1-(2-氨基-3-溴苯基)乙-1-酮(2)(14g，93.9mmol)的搅拌溶液中，且在70℃下搅拌3h。将反应混合物冷却至室温，过滤且将残余物以二乙醚(100mL)清洗。将过滤物以饱和碳酸氢钠中和至pH＝7，将沉淀的固体过滤且在真空下干燥以提供化合物(I-3)，将其以LCMS(M+H)：224.88特征化。

3)8-溴-4-氯噌啉(I-4)的合成：

将化合物8-溴噌啉-4-醇(I-3)(10.5g，46.69mmol)取入250ml两颈RBF中且在RT下逐滴添加POCl₃(100mL)，且容许在100℃下搅拌2h。将反应混合物冷却至RT且蒸馏出过量POCl₃，将残余物倒入冰水(250mL)中且以碳酸氢钠饱和溶液中和至pH＝7，将沉淀的固体滤出且在真空下干燥以提供化合物(I-4)，将其以LCMS(M+H)：243.25特征化。

4)4-叠氮基-8-溴噌啉(I-5)的合成：

将NaN₃(4.50g，65.3mmol)添加至乙醇(80mL)、水(16mL)中的8-溴-4-氯噌啉(4)(8g，32.6mmol)的搅拌溶液中，且在75℃下搅拌4h。将反应混合物冷却至室温且在减压下浓缩。将残余物以水(100mL)稀释，将沉淀的固体滤出且在真空下干燥以提供化合物(I-5)，将其以LCMS(M+2H)：252.02特征化。

5)8-溴噌啉-4-胺(I-6)的合成：

将10％的Pd/C(50％的水分)(0.400g)添加至乙醇、THF(50、100mL)中的4-叠氮基-8-溴噌啉(I-5)(2.5g，9.96mmol)的搅拌溶液中，且容许反应在氢气下搅拌1h。将反应混合物通过硅藻土过滤，将残余物以甲醇(2x 200mL)清洗。将过滤物在减压下浓缩，与甲苯(2x500mL)共蒸馏且与醚(2x 50mL)湿磨以提供化合物(I-6)，将其以LCMS(M+2H)：226.10特征化。

6)8-环丙基噌啉-4-胺(I-8)的合成：

将1,4-二噁烷(50mL)、水(15mL)中的8-溴噌啉-4-胺(I-6)(1.5g，6.72mmol)、环丙基硼酸(I-7)(0.867g，10.08mmol)及K₃PO₄(4.98g，23.52mmol)的混合物脱气10min，且添加PdCl₂[P(cy)₃]₂(2.5g，3.36mmol)。将所得反应混合物在密封的试管中于130℃下搅拌48h。将反应混合物冷却至室温，在真空下浓缩且以水(50mL)稀释，将沉淀的固体过滤且在真空下干燥，以提供标题化合物(8)，将其以LCMS(M+H)：186.07特征化。

7)N-(2-氯嘧啶-4-基)-8-环丙基噌啉-4-胺(I-10)的合成：

将1,4-二噁烷(45mL)、水(5mL)中的8-环丙基噌啉-4-胺(I-8)(1.5g，10.2mmol)、2,4-二氯嘧啶(I-9)(1.92g，10.2mmol)及Na₂CO₃(2.16g，20.4mmol)的混合物脱气10min，且添加Pd₂(dba)₃(0.933g，1.02mmol)、Xantphos(0.59g，1.02mmol)，将所得反应混合物在90℃下搅拌3h。将反应混合物冷却至室温，在真空下浓缩且以水(50mL)稀释，将沉淀的固体过滤，以乙酸乙酯(2x 50mL)清洗且在真空下干燥以提供化合物(I-10)，将其以LCMS(M+H)：298.20特征化。因此获得的粗制物无需纯化而用于下一步骤。

N4-(8-环丙基噌啉-4-基)-N2-(4-吗啉基苯基)嘧啶-2,4-二胺(Ex-58)的合成：

将Pd₂(dba)₃(0.103g，0.168mmol)及Xantphos(0.1g，0.168mmol)添加至脱气(10min.)DMSO(10mL)中的N-(2-氯嘧啶-4-基)-8-环丙基噌啉-4-胺(0.5g，1.68mmol)(I-10)、4-吗啉基苯胺(I-11)(0.3g，1.68mmol)及碳酸钾(0.695g，5.04mmol)的混合物中，且将所得反应混合物在130℃下搅拌3h。接着将反应混合物冷却至室温且以水(50mL)稀释，将沉淀的固体过滤且在真空下干燥以提供粗制化合物，将其以prep HPLC纯化以给出化合物(Ex-58)，将其以下列特征化：

1H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ10.25(s,1H),9.69(s,1H),9.01(s,1H),8.24(d,J＝4.4Hz,1H),8.05(d,J＝4.4Hz,1H),7.61-7.55(m,3H),7.23(d,J＝6.4Hz,1H),6.83(d,J＝9.2Hz,2H),6.47(s,1H),3.73(t,J＝4.4Hz,4H),3.43-3.39(m,1H),3.01(t,J＝4.4Hz,4H),1.16-1.13(m,2H),0.90-.088(m,2H)；LCMS(M+H)：440.46；HPLC：98.98％。

N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(3-吗啉基苯基)嘧啶-2,4-二胺(Ex-57)的制备：

将TFA(0.518mL，6.73mmol)添加至IPA(10mL)中的N-(2-氯嘧啶-4-基)-8-环丙基噌啉-4-胺(I-10)(0.2g，0.673mmol)、3-吗啉基苯胺(I-12)(0.119g，0.673mmol)的搅拌溶液中，且将所得反应混合物在120℃下搅拌3h。将反应混合物冷却至室温，在真空下浓缩且将沉淀的固体以prep HPLC纯化以给出化合物(Ex-57)，将其如下特征化：

1H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ10.50(s,1H),9.73(s,1H),9.39(s,1H),8.28-8.25(m,2H),7.74(t,J＝7.6Hz,1H),7.38-7.35(m,2H),7.25(d,J＝8.8Hz,1H),7.10(t,J＝8.0Hz,1H),6.72(d,J＝5.6Hz,1H),6.28(s,1H),3.67(t,J＝4.0Hz,4H),3.48-3.45(m,1H),2.98-2.97(m,4H),1.23-1.18(m,2H),0.97-0.94(m,2H)；LCMS(M+H)：440.45；HPLC：97.15％。

N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(4-吗啉基苯基)嘧啶-2,4-二胺(Ex-10)的合成：

将DMSO(250mL)中的N-(2-氯嘧啶-4-基)-8-甲基噌啉-4-胺(B7)(20g，73.80mmol)、4-吗啉基苯胺(13.13g，73.80mmole)及碳酸钾(30.55g，221.40mmol)的搅拌溶液脱气20min，接着添加Pd₂(dba)₃(6.75g，7.380mmole)、Xantphos(4.26g，7.380mmole)，在130℃下搅拌3h。将反应混合物冷却且将残余物以水(750mL)稀释。将所得沉淀固体过滤，在减压下干燥且以使用甲醇及二氯甲烷的快速柱层析纯化以提供化合物Ex-10，将其与(1：1)醚(2x 250mL)：DCM(2x 250mL)、ACN(2x 250Ml)、戊烷(2x 250mL)及己烷(2x 250mL)湿磨，接着干燥。分析纯化的材料以得出下列数据：

1H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ10.56(s,1H),9.68(s,1H),9.32(s,1H),8.36(t,J＝5.2Hz,1H),8.21(d,J＝5.6Hz,1H),7.76-7.73(m,2H),7.59(d,J＝8.8Hz,2H),6.88(d,J＝9.2Hz,2H),6.70(d,J＝5.6Hz,1H),3.76(t,J＝4.4Hz,4H),3.05(t,J＝4.4Hz,4H),2.91(s,3H)，LCMS(M+H)：414.21，HPLC纯度：98.73％。

N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(3-吗啉基苯基)嘧啶-2,4-二胺(Ex-11)的合成：路线-2：

1)1-(2-氨基-3-甲基苯基)乙-1-酮(II-2)的合成：

将MeLi(1.6M于二乙醚中)(2.48L，3973.5mmol)添加至0℃下在THF(2.5L)中的2-氨基-3-甲基苯甲酸(II-1)(150g，993.37mmol)的悬浮液中，且将反应混合物在25℃下搅拌3h。将反应混合物以氯化铵饱和溶液(2000mL)淬灭且以EtOAc(2x 10L)萃取两次。将合并的有机层以水(1.0L)及盐水(1.0L)清洗，经硫酸钠干燥且在真空下浓缩以提供粗制化合物，将其与正戊烷(2x 500mL)湿磨以提供标题化合物(II-2)。1H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ7.65(d,J＝8.4Hz,1H),7.21(d,J＝6.8Hz,1H),6.59(t,J＝8.0Hz,1H),6.41(bs,2H),2.59(s,3H),2.16(s,3H)。LCMS(M+H)：150.1。

2)8-甲基噌啉-4-醇(II-3)的合成：

将水(95mL)中的NaNO₂(70g，1014.7mmol)逐滴添加至-5℃下在浓缩HCl(1.26L)中的1-(2-氨基-3-甲基苯基)乙-1-酮(II-2)(126g，845.6mmol)的搅拌溶液中，且将反应混合物在70℃下搅拌3h。将反应混合物冷却至室温，过滤且将残余物以二乙醚(1.5L)清洗。将过滤物以饱和碳酸氢钠中和(至pH＝7)，将沉淀的固体过滤且在真空下干燥以提供标题化合物(II-3)。1H NMR(CDCl₃，500MHz)：δ10.06(bs,1H),8.14(d,J＝8.0Hz,1H),7.87(s,1H),7.54(d,J＝7.0Hz,1H),7.32-7.29(m,1H),2.56(s,3H)。LCMS(M+H)：161.1。

3)4-氯-8-甲基噌啉(II-4)的合成：

将POCl₃(380mL)添加至室温下的化合物(II-3)(38g，187.0mmol)中且容许在100℃下搅拌8h。将反应混合物冷却至室温且蒸馏出过量POCl₃。将残余物倒入冰水(750mL)中且以饱和碳酸氢钠中和(至pH＝7)。将沉淀的固体滤出且在真空下干燥以提供标题化合物(II-4)。1HNMR(CDCl₃，400MHz)：δ9.35(s,1H),8.05(d,J＝7.6Hz,1H),7.77-7.71(m,2H),3.05(s,3H)。LCMS(M+H)：179.1。

4)4-叠氮基-8-甲基噌啉(II-5)的合成：

将NaN₃(54.77g，842.69mmol)添加至乙醇(400mL)及水(100mL)中的化合物(II-4)(30g，168.5mmol)的搅拌溶液中，且将反应混合物在75℃下搅拌5h。将反应混合物冷却至室温且在真空下浓缩。将残余物以水(500mL)稀释，将沉淀的固体滤出且在真空下干燥以提供标题化合物(II-5)。1H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ9.23(s,1H),7.89(d,J＝8.4Hz,1H),7.69-7.61(m,2H),3.02(s,3H)。LCMS(M+H)：186.1。

5)8-甲基噌啉-4-胺(II-6)的合成：

将10％的Pd/C(50％的水分)(5.0g)添加至乙醇(750mL)及THF(500mL)中的4-叠氮基-8-甲基噌啉(II-5)(25g，135.13mmol)的搅拌溶液中，且容许反应混合物在氢气下搅拌1h。将反应混合物通过硅藻土塞过滤且将残余物以甲醇(2x 1.0L)清洗。将过滤物在真空下浓缩，与甲苯(2x 500mL)共蒸馏且与醚(2x 500mL)湿磨以提供标题化合物II-6。1H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ8.63(s,1H),8.01(d,J＝8.4Hz,1H),7.56(d,J＝6.8Hz,1H),7.45(t,J＝8.0Hz,1H),7.08(bs,2H),2.76(s,3H)。LCMS(M+H)：160.1。

6)N-(2-氯嘧啶-4-基)-8-甲基噌啉-4-胺(II-8)的合成：

将1,4-二噁烷(800mL)及水(200mL)中的8-甲基噌啉-4-胺(II-6)(21g，132.02mmol)、2,4-二氯嘧啶(II-7)(14.66g，199.05mmol)及Na₂CO₃(42.80g，396.60mmol)的混合物脱气20min。将Pd₂(dba)₃(12.0g，13.20mmol)及Xantphos(7.64g，13.202mmol)添加至反应混合物中，接着在90℃下搅拌3h。将反应混合物冷却至室温，在真空下浓缩且以水(500mL)稀释。将沉淀的固体过滤，以乙酸乙酯(2x 750mL)清洗且在真空下干燥以提供标题化合物(II-8)。1H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ10.50(s,1H),10.03(s,1H),8.36(d,J＝6.0Hz,1H),8.26(d,J＝9.6Hz,1H),7.75-7.73(m,2H),7.19(d,J＝5.6Hz,1H)2.90(s,3H)。LCMS(M+H)：272.0。

7)N4-(8-甲基噌啉-4-基)-N2-(3-吗啉基苯基)嘧啶-2,4-二胺(Ex-11)：

将DMSO(250mL)中的N-(2-氯嘧啶-4-基)-8-甲基噌啉-4-胺(II-8)(15.0g，55.35mmol)、3-吗啉基苯胺(II-9)(10.85g，55.35mmol)(13.13g，73.80mmol)及碳酸钾(23.0g，166.05mmol)的混合物脱气20min。将Pd₂(dba)₃(5.10g，5.535mmol)及Xantphos(2.95g，5.535mmol)添加至反应混合物中，接着将其在130℃下搅拌3h。将反应混合物冷却至室温且以水(500mL)稀释。将沉淀的固体过滤且在真空下干燥以提供粗制产物，将其以使用1至5％的甲醇/二氯甲烷作为洗脱剂的快速柱层析(100至200硅胶筛目)纯化以给出标题化合物Ex-11。1H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ10.51(s,1H),9.75(s,1H),9.40(s,1H),8.35(t,J＝5.2Hz,1H),8.27(d,J＝5.6Hz,1H),7.75-7.72(m,2H),7.34(s,1H),7.27(d,J＝8.0Hz,1H),7.11(t,J＝8.0Hz,1H),6.70(d,J＝5.6Hz,1H),6.56(dd,J₁＝2.0Hz,J₂＝8.0Hz,1H),3.67(t,J＝4.8Hz,4H),2.98(t,J＝4.4Hz,4H),2.91(s,3H)。LCMS(M+H)：414.23。HPLC：98.87％。

N2-(3-氯-4-吗啉基苯基)-N4-(8-甲基噌啉-4-基)-嘧啶-2,4-二胺(Ex-12)的合成：

路线-3：

将DMSO(250mL)中的N-(2-氯嘧啶-4-基)-8-甲基噌啉-4-胺(II-8)(15.0g，55.35mmol)、4-氯-3-吗啉基苯胺(II-10)(11.7g，55.35mmol))及碳酸钾(23.0g，166.05mmol)的混合物脱气20min。将Pd₂(dba)₃(5.10g，5.535mmol)及Xantphos(2.95g，5.54mmol)添加至反应混合物中，接着将其在130℃下搅拌3h。将反应混合物冷却至室温且以水(500mL)稀释。将沉淀的固体过滤且在真空下干燥，以提供粗制产物，将其以使用1至5％的甲醇/二氯甲烷作为洗脱剂的快速柱层析(100至200硅胶筛目)纯化以给出标题化合物(Ex-12)。1H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ10.55(s,1H),9.76(s,1H),9.60(s,1H),8.35(t,J＝5.2Hz,1H),8.28(d,J＝6.0Hz,1H),7.95(s,1H),7.75-7.74(m,2H),7.63(dd,J₁＝2.4Hz,J₂＝2.4Hz,1H),7.10(d,J＝8.8Hz,1H),6.77(d,J＝5.6Hz,1H),3.74(t,J＝4.8Hz,4H),2.92-2.91(m,4H),2.90(s,3H)。LCMS(M+H)：448.18。HPLC：97.58％。

N2-(3-氟-4-吗啉基苯基)-N4-(8-甲基噌啉-4-基)-嘧啶-2,4-二胺(Ex-13)的合成：

路线-4：

将DMSO(250mL)中的N-(2-氯嘧啶-4-基)-8-甲基噌啉-4-胺(II-8)(15.0g，55.35mmol)与3-氟-4-吗啉基苯胺(II-11)(10.8g，55.35mmol)及碳酸钾(23.0g，166.05mmol)的混合物脱气20min。将Pd₂(dba)₃(5.10g，5.535mmol)及Xantphos(2.95g，5.535mmol)添加至反应混合物中，接着将其在130℃下搅拌3h。将反应混合物冷却至室温且以水(500mL)稀释。将沉淀的固体过滤且在真空下干燥以提供粗制产物，将其以使用5至10％的甲醇/二氯甲烷作为洗脱剂的快速柱层析(100至200硅胶筛目)纯化以给出标题化合物(Ex-13)。(1H NMR DMSO-d₆，400MHz)：δ10.54(s,1H),9.76(s,1H),9.58(s,1H),8.35(t,J＝5.2Hz,1H),8.27(d,J＝5.6Hz,1H),7.76-7.72(m,3H),7.39(dd,J₁＝2.0Hz,J₂＝1.6Hz1H),6.98(t,J＝9.2Hz,1H),6.76(d,J＝6.0Hz,1H),3.74(t,J＝5.2Hz,4H),2.95-2.94(m,4H),2.92(s,3H)。LCMS(M+H)：432.23。HPLC：96.01％。

N⁴-(8-甲基噌啉-4-基)-N²-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺(Ex-33)的合成：

将TFA(1.68mL，11.07mmole)添加至IPA(40mL)中的N-(2-氯嘧啶-4-基)-8-甲基噌啉-4-胺(1.0g，3.69mmol)(B7)、4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺(0.705g，3.69mmole)的搅拌溶液中，且将混合物在120℃下搅拌16h。接着将反应混合物冷却至室温且在减压下浓缩。将因此形成的固体过滤，以醚(25mL)清洗且在减压下干燥以提供粗制化合物，接着将其以prepHPLC纯化以提供化合物Ex-33，将其分析：1H NMR(DMSO-d6，500MHz)：δ10.35(s,1H),9.69(bs,1H),9.07(bs,1H),8.33(d,J＝8.0Hz,1H),8.10(d,J＝5.0Hz,1H),7.64-7.57(m,4H),6.84(d,J＝9.0Hz,1H),6.53(s,1H),3.05(t,J＝4.5Hz,4H),2.86(s,3H),2.45(t,J＝5.0Hz,4H),2.20(s,3H)，LCMS：m/z：425.2[M-H]+，RT：1.895min，HPLC纯度：99.36％。

在前述合成中所使用的Prep HPLC方法

移动相A：在H2O(Aq)中的0.1％的FA，移动相B：ACN，

管柱：X-SELECT-C18(150x 30)

方法：0/5、1/5、8/40、10/50、10.1/98、13/98、13.1/5、16/5。

流速：22ml/min稀释剂：

溶解度：ACN+THF+水+MEOH，及温度：周围温度。

N2-(3-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-N4-(8-甲基噌啉-4-基)嘧啶-2,4-二胺(Ex-34)的合成：

将TFA(0.26mL，2.22mmol)添加至IPA(10mL)中的N-(2-氯嘧啶-4-基)-8-甲基噌啉-4-胺(0.2g，0.74mmol)(B7)、3-氯-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺(0.168g，0.740mmol)的搅拌溶液中，且将所得混合物在120℃下搅拌16h。接着将反应混合物冷却至室温且在减压下浓缩。将因此获得的沉淀固体过滤，以醚(25mL)清洗且在减压下干燥以提供粗制化合物，将其以prep HPLC纯化以提供化合物Ex-34，将其以NMR、LC/MS及HPLC分析以得出下列数据：1HNMR(DMSO-d6，400MHz)：δ10.14(s,1H),10.11(bs,1H),9.11(bs,1H),8.29(d,J＝8.4Hz,1H),8.01(s,1H),7.96(d,J＝2.4Hz,1H),7.66-7.63(m,1H),7.63-7.47(m,3H),7.03(d,J＝8.8Hz,1H),6.42(s,1H),2.89-2.87(m,4H),2.81(s,3H),2.49-2.46(m,4H),2.22(s,3H)，LCMS：m/z：459.1[M-H]+，RT：1.58min，HPLC纯度：95.21％。

在前述合成中所使用的Prep HPLC方法：

移动相A：在H₂O(Aq)中的0.1％的FA，移动相B：ACN，

管柱：KROMOSIL-C18(150x 25MM)

方法：0/10、/33、7.1/98、9/98、9.1/10、11/10

流速：20ml/min

溶解度：ACN+THF+水+MEOH，及温度：周围温度。

检验方法

检验本发明的选定化合物的活性。

活性测定及选择性由Thermo Fisher Scientific"SelectScreen^TMBiochemicalKinase Profiling Service"使用彼的"LanthaScreen^TM Eu Kinase Binding AssayScreening"(www.thermofisher.com/selectscreen)进行。

检验理论

LanthaScreen Eu激酶结合检验的原理如图4中所示。Alexa Fluor^TM共轭体或”示踪剂”与激酶的结合通过添加经Eu标记的抗卷标抗体来检测。示踪剂及抗体与激酶的结合导致高度的FRET，而以激酶抑制剂置换示踪剂导致FRET失去。此检验通过将测试的化合物与试剂混合且读取来进行，不需要显影步骤。

Life Technologies的激酶示踪剂基于ATP竞争性激酶抑制剂，使其适合于检测与ATP位点结合的任何化合物。与ATP位点结合的抑制剂包括仅与ATP位点结合的I型激酶抑制剂及与ATP位点和常称为别构位点的第二位点的该两个位点结合的II型抑制剂(例如/伊马替尼、索拉非尼、BIRB-796)。

使用以下方案进行检验：

试验化合物在孔中于1％的DMSO(最终)中筛选。用于10点滴定的3倍列稀释自起始浓度进行(参见以下表2)。

表2.激酶检验方案细节：

将所有的激酶/抗体混合物在指定的激酶缓冲液中稀释至2X工作浓度。经4XAlexaFluor标记的示踪剂在激酶缓冲液中制备。

检验方案

条形码、低容量、白色384孔盘(Greiner Cat.#784207)

1. 160nL-在100％的DMSO中的100X试验化合物

2. 3.84μL-激酶缓冲液

3. 8.0μL-2X激酶/抗体混合物

4. 4.0μL-4X示踪剂

5.摇动盘30秒

6.在室温下孵育60分钟

7.在荧光盘读取机上读取且分析数据

以下的对照以各单独的激酶进行且位于与激酶相同的盘上：

0％的置换对照：最大发射比由0％的置换对照孔建立，其在反应中不含有已知的抑制剂且因此未展现示踪剂的置换。

100％的置换对照：最小发射比由100％的置换对照孔建立，其含有在此检验中所使用的已知的抑制剂的最高浓度。

已知的抑制剂对照方案：已知的抑制剂对照标准曲线，10点滴定在与激酶相同的盘上对各单独的激酶运行，以确保抑制剂在先前确定的预期的IC50范围内进行置换。

LanthaScreen Eu激酶结合检验数据使用表3中的公式以各组数据点进行分析。

表3.以下公式用于各组数据点：

所产生的数据使用来自IDBS的绘图软件XLfit绘制。剂量反应曲线为拟合型号205的曲线。若曲线底部在-20％与20％抑制之间不拟合，则将其设定为0％抑制。若曲线顶部在70％与130％抑制之间不拟合，则将其设定为100％抑制。

TGFβ(也称作TGFβ1)为多功能、高度保守型细胞因子，在发育、细胞生长、细胞凋亡方面具有许多关键功能，以及在组织修复反应方面扮演关键作用且作为有效力的免疫调节剂起作用。TGFβ信号传导在经活化的TGFβ同源二聚体结合至TGFβ受体2时触发，其进而导致TGFβ受体1(ALK5)的募集及磷酸化。经活化的TGFβ受体1使信号转导分子SMAD2和SMAD3邻酸化。这些结合至常见的介质SMAD4且易位至细胞核，在此结合至称为SMAD结合组件的短保守型DNA序列且诱导各种靶基因转录。产生稳定的细胞报导子以测试本发明化合物在细胞环境中抑制经典型的经TGFβ1诱导的SMAD信号传导路径的能力，该测试使用以下方案执行。

特定的实施例化合物亦或另一选择地使用RDSR细胞报导子检验法检验。

综述及设计：RD SMAD报导子(RDSR)细胞通过将SMAD细胞报导子质体(Promega，pGL4.48[luc2P/SBE/Hygro])稳定地整合至人类横纹肌肉瘤细胞RD(ATCC，CCL-136)中而产生。一旦以例如添加TGFβ1来触发SMAD信号传导，则经受体活化的SMAD结合SMAD结合组件(SBE)，导致细胞内荧光素酶表达。为了测定化合物抑制经TGFβ诱导的SMAD信号传导的效力，利用RDSR报导子统。

方法：

将横纹肌肉瘤RD(ATCC，CCL-136)以SMAD报导子载体(Promega，E3671)转染且使用潮霉素B选择多克隆稳定的细胞。经转染的载体含有三个复制的SMAD结合组件(SBE)，其驱动荧光素酶报导基因luc2P(北美萤火虫(Photinus pyralis))的转录。luc2P为经合成衍生的荧光素酶序列，具有人源化密码子优化，其经设计用于高表达及降低的异常转录。luc2P基因含有hPEST(蛋白质去稳定序列)，其容许luc2P蛋白质水平比luc2更快反应转录诱导。细胞内荧光素酶通过添加等体积((100μl)的ONE-GLO受质(Promega，E6120)进行量化且在十分钟内于Envision读盘器上读数。稳定的RDSR细胞通过在24小时刺激的后以浓度依赖性方式评估对人类TGFβ1(R&D Systems，7754-BH-005)以及人类肌肉生长抑制素(R&DSystems，788-G8-010/CF)的反应来测试。使用人类IL-1作为阴性对照物且显示没有反应(未显示数据)。包括工具药物Galunisertib和vactosertib作为化合物评估的阳性对照物。在以200pg/ml的rhTGFβ1刺激24小时的前，将欲测试的工具药物及本发明化合物全部在37℃下以细胞孵育1小时。报导子的活性以添加ONE-GLO(Promega)受质及在Envision读盘基(Perkin Elmer)上收集的发光计数测定。使用此方法测定vactosertib对照化合物具有约7.9nM的活性及Galunisertib对照化合物具有约365nM的活性。使用此方法所测定的本发明化合物的活性报告在下表1的第三栏中。本发明化合物通常具有在介于Galunisertib与vactosertib之间的范围内的活性。

本发明的选定化合物使用上文程序检验活性及选择性。ALK-5及ALK-2的试管内激酶抑制数据显示于以下表4中。抑制数据IC₅₀(nM)表示。本文公开的化合物为ALK-5的选择性抑制剂。对ALK-5的选择性以ALK2 IC₅₀/ALK5 IC₅₀表示。活性的关键于表4中报告：

ALK5IC₅₀活性(nM)：

≤10＝[+++]；10<Alk5IC₅₀(nM)<100＝[++]；100≤Alk5IC₅₀(nM)＝[+]

选择性(nM)ALK2/ALK5

≤10＝[+]；10<ALK2/ALK5<100＝[++]；100≤ALK2/ALK5＝[+++]

TGFβ-R1抑制(RD-SMAD活性，nM)：

≤100＝[+++]；100<RD-SMAD活性<1000＝[++]；1000≤RD-SMAD活性＝[+]

表4：所选的本发明化合物的检验数据

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作为与本发明化合物比较而提供的以下实施例使用所描述的程序合成及依照本发明所描述的方法检验。

本发明的选定化合物的用途

实施例A-纤维母细胞组织研究-纤维母细胞至肌纤维母细胞转化(FMT)检验

特发性肺纤维化(IPF)为以肺的异常纤维母细胞活化及进行性纤维化重塑为特征的呼吸性疾病。尽管IPF确切的病理生理学机制仍然未知，但是TGFβ1被认为是通过介导纤维母细胞至肌纤维母细胞转型(FMT)而成为疾病的主要驱动者起作用。由于细胞外基质的过度沉积，使TGFβ1诱导的肌纤维母细胞被认为在纤维化中扮演主要作用。为了测试本发明化合物在IPF的相关疾病模型中抑制纤维母细胞至肌纤维母细胞的TGFβ1依赖性转移的能力，使用FMT测定进行研究，其使用来自IPF患者的肺纤维母细胞。在此模型中，纤维母细胞至肌纤维母细胞的转型以生物标志物α平滑肌肌动蛋白(SMA)的表达来测定。

方法：总体检验程序以图1例证，其描述由Charles River实验室执行的此类型的常规商业化检验。将源自IPF患者的原发性人类支气管纤维母细胞(3种细胞，供体1，IPF05、供体2，IPF06和供体3，IPF08)在第0天接种且在第2天更新培养基。在第5天，添加各种稀释的实施例化合物EX-10和EX-11的等分试样及对照物Galunisertib、vactosertib和尼达尼布(参见图3，以10μM开始的八点浓度半对数稀释液产生的反应曲线)。各药物浓度条件以生物学重复评估。在添加化合物的后1小时，将细胞以1.25ng/ml的TGFβ1刺激且随后培养72小时。在72小时结束时，将细胞使用甲醛固定。在使用核染色剂DAPI染色细胞以及评估αSMA的表达的后，使用高内涵成像(high content imaging)产生结果。下列的对照物与使用化合物EX-10和EX-11进行的测定一起运行：1μM选择性ALK5抑制剂SB525334(取自Sigma-Aldrich)以及经批准的IPF药物尼达尼布(八点半对数曲线，10μM起始浓度)。使用与处理过的孔中的DMSO浓度匹配的0.1％的DMSO作为阴性对照物。将用于测定细胞数目以及αSMA表达抑制百分比的下列计算呈现于以下表6中：

表6：纤维化抑制检验中使用的计算

来自这些检验的结果显示于以下表7中，且来自Ex 11的选定的标准化数据显示在图3中(参见上文的标准化计算)。测试的化合物EX-10和EX 11通过诱导在至少两个供体中完全抑制经TGFβ1介导的α-SMA表达(最大的PIN大于75)而显示出高效率。化合物(Ex-11)的一在所有三个供体中显示完全浓度依赖性抑制的经TGFβ介导的αSMA表达(在图3中以图形方式呈现出抑制百分比(PIN)及其余细胞(％)的标准化数据)。此数据表明测试的化合物阻断与疾病发病机制有牵连的FMT且因此具有用作为IPF的治疗剂的潜力。

表7.IPF生长研究结果

实施例B-A549异种移植研究

为了测试化合物的活体内靶上活性(ALK5/TGFβR1抑制)，使用A549鼠科异种移植模型完成研究。使用此模型，因为预期ALK5抑制剂减少A549异种移植细胞中的关键信号传导分子磷酸化SMAD2的量。在A549细胞中的经TGFβ介导的磷酸化发生在氨基酸残基465和467上(两者都为丝胺酸残基)。

对八周龄的雌性无胸腺裸鼠(Charles River)注射约400万个A549细胞(ATCC，CCL-185)。收获所使用的细胞且将其以一比一再悬浮于纯RPMI培养基(未添加酚红)及基质胶(matrigel)(Fisher Scientific)中。注射包括将200微升样品注入各小鼠的右后腹。每三天以卡尺测量一次所产生的肿瘤，且当肿瘤达到平均130立方毫米时，将小鼠随机分成三组。

将所有的化合物再悬浮于水(90％)中加上20％的Solutol的1-甲基-2-吡咯烷酮(10％)中。包括Galunisertib作为阳性对照物且以每公斤75毫克给予三只小鼠。在施用受试者的前，将药物悬浮液经超声波处理15分钟以产生细粒子悬浮液。以100mg/Kg、75mg/Kg、50mg/Kg和10mg/Kg的药剂量水平给药小鼠(每次口服管饲)，每组三只小鼠。使用具有三只小鼠的载体对照组建立肿瘤异种移植物中的磷酸化SMAD2的基线水平。在药物施用的后3小时，收获肿瘤且将其储存在-80℃下，直到进一步处理。磷酸化SMAD2水平使用来自Biorad的BioPlex Pro抗磷酸化SMAD2(Ser 465/467)小球测定，且将此信号使用来自各样品的GAPDH水平(Milliplex MAP GAPDH小球，Sigma/Millipore)标准化。肿瘤根据套件用法说明处理且小球使用Luminex的MagPix仪器分析。

所有测试的化合物(Ex-10、Ex-11、Ex-12和Ex-13)以剂量依赖方式降低磷酸化SMAD2水平(p-SMAD2)。将所有报告的pSMAD2水平标准化成GAPDH检测。

图2A显示在处理过的样品中观察到的p-SMAD2量仅以载体组观察到的p-SMAD2水平百分比表示。以下表8以载体组观察到的p-SMAD2水平百分比表示p-SMAD2抑制量，例如以载体观察到80％水平时的p-SMAD2观察值等于20％的p-SMAD2抑制。参考表8，可看出以每公斤75毫克(75mg/Kg)的Ex-11给药的样品基于仅载体对照组中观察到的平均p-SMAD2水平而展现92.5％的抑制，例如参考图2A，在75mg/Kg的Ex-11给药组中观察到的p-SMAD2水平为仅载体组中观察到的7.5％的p-SMAD2水平。再参考表8，在以100mg/Kg水平的Ex-12给药的组中，p-SMAD2水平受到55.5％抑制，例如参考图2A，观察到的p-SMAD2量为载体组中观察到的45.5％的p-SMAD2水平。

表8：与载体对照相比的p-SMAD2抑制百分比(相对于载体观察到的p-SMAD2的100％抑制结果)

可如表8和图2A所呈现的数据看出，本公开的选定化合物的施用抑制异种移植肿瘤中的p-SMAD2表达，据信其为抑制其中的TGFβR1信号传导表达，表明化合物可用于治疗疾病。

图2B和2C显示不同剂量的各化合物分别在血浆中(图2B)及肿瘤中(图2C)的浓度。所有的化合物显示测量浓度随剂量增加而呈剂量依赖性增加的总体趋势。在血浆及肿瘤中的药物浓度亦很好地相互关联。

图2D至F分别显示Ex-10(图2D)、Ex-11(图2E)和Ex-13(图2F)的PK/PD关。总体而言，血浆PK及肿瘤PK相互反映，且PK及肿瘤PD(p-SMAD2水平)呈负相关。

实施例C–体内T_reg分化研究

EX-11对Treg分化的效应使用来自Lonza的人类CD4⁺CD45RA⁺原态T细胞评估。将CD4⁺/CD45RA⁺原态T细胞在ImmunoCult^TM-XF T细胞扩增培养基中以有或没有5ng/ml的TGFβ(R&D Systems)的EX-11、CD3/CD28(STEMCELL Technologies)及10ng/ml的IL-2(Thermo Fisher Scientific)处理5天。流动式细胞测量术使用抗人类FoxP3染色套件(BDbiosciences)执行以评估CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg细胞的频率。与未经TGFβ处理的细胞相比，经TGFβ处理的CD4⁺CD45RA⁺原态T细胞显示增加573％的Treg频率。图5显示EX-11以剂量依赖性方式抑制Treg频率(以30、300和3000nM分别抑制480、342和126％；图5)。

实施例D-在A549异种移植小鼠模型中的p-SMAD2的纵向PK/PD分析

EX-10和EX-11随时间抑制TGFβ信号传导的能力使用以类似于实施例B中所描述的方式进行的异种移植研究来例证。因此，纵向、24小时、单一剂量研究在A549异种移植小鼠模型中使用Ex-10和Ex-11执行。在此研究中，p-SMAD2(Ser465/Ser467)及持家基因(GAPDH)在自零(使用经载体处理的动物建立)至每一受试者以每公斤75毫克的单一药物剂量给药后24小时以六个时间点测量(每一给药组三位受试者)。

用于此研究的异种移植物如下制备且植入小鼠中。对五周龄的雌性无胸腺裸鼠(购自Charles River)注射约320万个A549细胞(ATCC，CCL-185)。收获所使用的细胞且将其以一比一再悬浮于纯RPMI培养基(未添加酚红)及基质胶(Corning 356237)中，且将200微升细胞悬浮液注入各小鼠的右后腹。每三天以卡尺测量一次肿瘤，且当肿瘤达到平均90立方毫米时，将小鼠随机分成三组。将试验化合物(Ex-10和Ex-11)的各自再悬浮于水(90％)中加上20％的Solutol的(Sigma42966)1-甲基-2-吡咯烷酮(Sigma，494496)(10％)中。将药物悬浮液经超声波处理15分钟以产生细粒子悬浮液，然后给予试验受试者。受试者以悬浮液给药(每次口服管饲)。使用具有三只小鼠的载体对照组建立肿瘤异种移植物中的磷酸化SMAD-2的基线及零时间点。将试验化合物以每公斤75毫克施用个别的受试者组。在施用试验化合物的后20分钟、1小时、2小时、4小时和24小时获得样品。收获肿瘤，急速冷冻且将其储存在-80℃下，直到进一步处理。经由心脏穿刺收集全血，随后在含有EDTA的试管(BD，微量试管(microtainer tube)，365974)中离心而自所有动物收集血浆。接收载体的一组三只小鼠仅作为两种药物组的零时间点。磷酸化SMAD-2水平使用Bio-Plex Pro^TMPhospho-Smad2(Ser465/Ser467)组(BioRad 171V50019M)测定。将来自各样品的磷酸化SMAD-2水平标准化成GAPDH(MILLIPLEX MAP GAPDH Total Magnetic Bead MAPmate^TM，Millipore 46-667MAG)水平。将所有的分析物以Bio-Plex Pro Cell Signaling试剂套件(BioRad171304006M)以多重方式分析。将冷冻的肿瘤样品(15至30毫克)溶解在100μl的溶解缓冲液中，在珠磨管中处理且离心。将所得溶解物根据制造商的用法说明以1：50的稀释用于检验。将小球悬浮液使用Luminex统(MAGPIX)分析。

如图6A看出，Ex-10和Ex-11在药物施用的后逐渐降低p-SMAD2水平且在药物施用的后2小时至4小时达到最大抑制。与载体组相比，Ex-10和Ex-11在药物施用的后4小时分别导致74.3％和92.3％的p-SMAD2抑制。在药物施用的后24小时，两种化合物的p-SMAD2水平回升至药物施用的前的基线水平。

图6B和6C显示Ex-10(图6B)和Ex-11(图6C)的PK/PD关。总体而言，血浆PK及肿瘤PK相互反映，且PK及肿瘤PD(p-SMAD2水平)呈负相关。在血浆及肿瘤中的Ex-10浓度在药物施用的后20分钟至1小时飙升且在药物施用的后达4小时保持高值。这些动力学与该时段期间内的肿瘤中的最大p-SMAD2抑制一致。在药物施用的后24小时，Ex-10完全自统清除，导致肿瘤p-SMAD2恢复至基线水平(图6B)。Ex-11观察到类似的趋势，其中在血浆及肿瘤中的药物浓度在药物施用的后增加且在药物施用的后约4小时达到最大值。Ex-11在药物施用的后24小时自统清除，导致肿瘤p-SMAD2恢复至基线水平(图6C)。

实施例E-ES-2存活率研究(卵巢癌异种移植)

卵巢癌仍然与不良预后相关联且仍为女性中与肿瘤相关死亡的主要原因的一。高复发率、对化学疗法的抗性及微不足道的结果突显对改进的疗法的需求，这些疗法源自于对卵巢恶性肿瘤复杂及多因子病因的了解。在肿瘤微环境内的TGFβ1信号传导调节卵巢癌进展的重要步骤，诸如上皮至间质转换、散布和转移。TGFβ1信号传导路径的抑制显示作为卵巢恶性肿瘤的医药标靶的潜力。使用ES-2卵巢癌小鼠异种移植模型测试EX-11在卵巢癌中的功效，如以改进的存活率来测量。

对16周龄的雌性无胸腺裸鼠注射200万个ES-2-luc细胞。收获所使用的细胞且将其再悬浮于400微升PBS中且经由i.p.注射植入。在细胞植入后五天，将小鼠随机分配且每组10只动物入选至试验组或载体对照组。随机分配基于体重执行。在第5天开始给药的前，在研究动物中验证生物发光以确认疾病进展。

将所有的化合物溶解在水中的TWEEN20(10％)中且经由口服管饲施用。包括vactosertib作为TGFβ1信号传导抑制及竞争化合物的比较功效试验的阳性对照物。vactosertib每天以每公斤25毫克给予一次，在第二次给药期间施用载体以匹配载体体积的BID给药及EX-11组处置(表9)。在施用的前，将药物悬浮液经超声波处理15分钟以产生细粒子悬浮液。对小鼠每天以150毫克/公斤水平的EX-11给药两次。

记录在笼子中发现死亡的动物的死亡率，且基于主要三个标准的人道终点而处死的动物的死亡率-活动力和反应丧失、伴有明显的腹水积聚的消瘦及可触知的体温下降(当戴手套处置时被评定为冷触感的动物)。

在研究的第22天，确定在载体组中其余的存活动物濒临死亡且基于人道终点标准终止研究。在最后的药物施用的后两小时，处死动物，收获组织且储存在-80℃下，直到进一步处理。

表9.用于ES-存活率研究的研究组及给药时程

将存活率研究的结果总结于图7中。经EX-11处理的动物的总体存活率与经载体处理的动物相比而显著地增加。存活率效应与目测观察的疾病进展延迟相关联，如以改进的活动力及明显消瘦的肌肉和脂肪量展现。

实施例F-FOXL2细胞生存力检验

EX-11在KGN及COV434细胞中进行细胞生存力检验。KGN细胞源自于患有复发的转移性GCT的69岁女性的FOXL2^C134W AGCT。COV434细胞源自于患有复发的转移性GCT的27岁女性的FOXL2WT JGCT。将细胞以一式三份接种在96孔培养盘中且以EX-11的9个3倍稀释液或DMSO处理6天(KGN)或3天(Cov434)，分别代表3次细胞倍增。生存力以Cell Titer Glo(Promega)评定。

图8显示表达FOXL2^C134W的KGN细胞对以EX-11处理的敏感性比表达野生型FOXL2的COV434细胞>70倍以上。EX-11在KGN细胞中的IC₅₀值为140nM，而EX-11在COV434细胞中的IC₅₀值大于10,000nM。这些数据显示EX-11可抑制经FOXL2^C134W驱动的生长。

实施例G-在KGN细胞中的pSmad2Luminex检验

将KGN细胞与EX-11的三个10倍稀释液或DMSO孵育2小时。收获且溶解细胞，且以BCA量化蛋白质浓度。将10μg的总蛋白质添加至Milliplex TGFβ6-plex套件中提供的具有GAPDH MapMate小球的检验盘中，且遵循制造商的方案。在MagPix Xmap(Luminex)上收集数据。

图9显示剂量依赖性降低的pSmad2，以10、100和1,000nM的EX-11分别观察到17、74和97％的路径抑制。这些数据显示以EX-11的靶上抑制及TGFβ路径抑制与细胞死亡之间的相互关(来自实施例F，IC50＝140nM)。

实施例H-在KGN细胞中经TGFβ诱导的增生

将KGN及COV434细胞以一式三份接种在96孔培养盘中，且在TGFβ(1ng/mL)存在或不存在下分别孵育6或7天。以Cell Titer Glo测量增生。

图10显示KGN细胞(FoxL2突变体)的增生随着TGFβ刺激而显著地增加。FoxL2野生型COV434没有变化。这些数据示意TGFβ路径信号传导增加FoxL2 C134W突变的致癌潜力且可能自EX-11干预而获益。

实施例I-TMA分析

购买以下适应症的组织微数组的五个连续切片：NSCLC(US Biolabs)、间皮瘤(USBiolabs)、卵巢癌(US Biolabs and US BioMax)、乳腺癌(US Biolabs)和胰腺癌(USBioMax)。将各适应症的三个切片烘烤、脱蜡且经历表位修复。接着将连续切片在4℃下与TGFβ路径的生物标志物的抗体：pSmad2(CST)、αVβ6(ProteinTech)和αSMA(CST)经隔夜孵育。接着清洗切片且将其在室温下以经AF-647共轭的二级抗体染色1小时，清洗，以DAPI染色且加上盖片。将切片在Olympus VS200玻片扫描仪中成像，且将各患者样品的MFI在CellSens软件上以各标靶量化。

表10和11显示TMA分析的结果。在表10中的”X”表示与该适应症中的正常组织相比，在肿瘤切片中的标志物过度表达。乳腺癌在所有亚型中显示高的pSmad2和αVβ6，示意高的TGFβ信号传导。胃癌和胰腺癌显示高的αSMA，示意样品中有大的基质/纤维化组分。AGCT显示高的pSmad2及αSMA，以及在所有三种生物标志物之间最高的相互关(r²)，示意高的TGFβ信号传导及高的纤维化。

表10.生物标志物信号

表11.生物标志物的相互关系(“+”为≤0.1；“++”为>0.1≤0.5；及“+++”为>0.5)

实施例J-在初代肺纤维母细胞中的GAF基因抑制检验法

将人类初代真皮纤维母细胞(ATCC)分为四组：DMSO-TGFβ、DMSO+TGFβ(1ng/mL)、30nM EX-11+TGFβ(1ng/mL)及300nM EX-11+TGFβ(1ng/mL)。将细胞处理24小时，接着提取、量化及逆转录mRNA。使用Quant Studio中的TaqMan统对下列癌相关纤维母细胞(CAF)基因进行qPCR：ACTA2、FAP、ITGB1、CD9、TAGLN、ANTXR1、SOC1、Lamp5、Col1A2和TGFβ1。

如图11中所示，除了CD9以外的所有基因皆遵循相同的趋势。以TGFβ刺激观察到调升的基因表达，其以EX-11经剂量依赖性逆转(且在一些例子中，自基线降低)。TAGLN、Lamp5和TGFβ1具有以TGFβ刺激的最高的倍数变化表达(约2至3倍)；以300nM的EX-11使全部返回基线。FAP、SDC1和Col1A2以300nM的EX-11使表达自基线降低约20至30％。

实施例K-EMT6同基因的TNBC模型

此研究的目的临床前评估EX-11与抗PD-L1和/或抗PD-1疗法组合用于治疗在雌性Balb/C小鼠的乳脂垫中经原位植入的EMT6肿瘤的活体内治疗功效。

将Balb/C小鼠(7至9周龄)以0.1ml的PBS中的EMT6乳腺癌细胞(2.5x 10⁵)经原位接种在右乳脂垫中。经由数字卡尺执行肿瘤测量。一旦平均肿瘤大小达到约85mm³(第11天)，将120只小鼠随机分配至8个治疗分组(每一分组15只小鼠)。将小鼠根据表12中列出的参数治疗。

表12.用于EMT6同基因的TNBC模型的治疗参数

在此研究中所使用的抗PD-L1抑制剂为BioXcell的产品(Cat#：BE0101，Clone#：10F.9G2)。用于抗PD-L1抑制剂的载体为PBS。在此研究中所使用的抗PD-1抑制剂为BioXcell的产品(Cat#：BE0146，Clone#：RMP1-14)。用于抗PD-1抑制剂的载体为PBS。将这些抑制剂每两周(BIW)经腹膜内(i.p.)注入，为期3周。用于EX-11的载体为WFI(用于注射的水)(90％)中的NMP(10％)+20％的Solutol。用于EX-11的载体亦用于研究的”载体”分组。将EX-11及载体每两天(BID)经由口服管饲(p.o.)递送，为期21天。

体重及肿瘤体积每周测量两次。肿瘤体积使用卡尺以二维测量，且使用以下公式的体积以mm³表示：V＝(L x W x W)/2，其中V为肿瘤体积，L为肿瘤长度(最长的肿瘤尺寸)及W为肿瘤宽度(垂直于L的最长肿瘤尺寸)。所报告的肿瘤生长抑制(TGI)为最后研究日的TGI，且以平均％Δ抑制表示及使用以下公式计算：[(C-C0)-(T-T0)/(C-C0)]*100％，其中C指载体组在最后研究日的肿瘤体积，C0指载体组在给药第一天的肿瘤体积，T指治疗组在特定的给药日的肿瘤体积，及T0指治疗组在给药第一天的肿瘤体积。

研究的第一阶段为给药阶段且在第21天终止，在此将3只动物处死且收集血浆及肿瘤样品用于生物标志物分析。监测其余12只动物而不给药以测定平均存活率。在50天的前的终点如下：1)肿瘤体积超过3000mm³，2)自治疗第一天起连续3天的体重减轻超过20％，3)在肿瘤表面上具有约25％或更大的肿瘤溃疡的小鼠，及4)严重的脱水、体温过低、呼吸异常/乏力、嗜睡、明显的疼痛、腹泻、皮肤损伤、神经统症状、由于显著的腹水和腹部肿大而导致受损的活动力(不能进食或饮水)、跛行、持续的俯卧或侧卧位置、肌肉萎缩的体征、麻痹性步态、阵挛性抽搐、强直性抽搐、自体孔持续出血。

各治疗组的受试者肿瘤生长曲线显示于图13A至13H中。与载体相比，以抗PD-L1或抗PD-1的单一剂治疗不导致显著的肿瘤生长抑制(TGI)。以75mg/kg的EX-11的单一剂治疗不导致显著的TGI，但是以150mg/kg的EX-11的单一剂治疗导致37％的显著的TGI(p＝0.04)(图12I)。抗PD-L1与75mg/kg的EX-11的组合未导致显著的TGI，但是抗PD-L1与150mg/kg的EX-11的组合导致65％的显著的肿瘤生长抑制(p<0.0001)(图12I)，且相对于载体而导致17％的显著增加的平均存活率(p＝0.0136)(图12J和表13)。抗PD-1与150mg/kg的EX-11的组合相对于载体而导致34％的显著的TGI(p＝0.049)，但是与EX-11单一剂治疗相比而不显著(图12K)。然而，抗PD-1与150mg/kg的EX-11的组合相对于载体而导致26％的显著增加的平均存活率(p＝0.0011)及相对于抗PD-1单一剂而导致38％的显著增加的平均存活率(p＝0.00256)，如图12L和表13中所示。接受EX-11治疗的所有组中的肿瘤明显比接受载体、抗PD-L1单一剂或抗PD-1单一剂的组中的肿瘤更柔软，示意降低的肿瘤内压力。这通过测量沿着长肿瘤轴可达到的肿瘤压缩量与原始未压缩的量度相比来量化，如图12M中所示。图形以GraphPad Prism产生。

表13.在各种治疗组中的小鼠的平均存活天数

组	平均存活(天数)
		载体	23
PD-L1	25
		EX-11 150mpk	25
EX-11+PD-L1	29(相对于aPD-L1而增加16％)(p＝0.0136)
		PD-1	21
EX-11 150mpk+PD-1	29(相对于aPD-1而增加38％)(p＝0.0025)

实施例L-4T1同基因的TNBC模型

此研究的目的临床前评估EX-11与抗PD-1疗法组合用于治疗在雌性Balb/C小鼠的乳脂垫中经原位植入的荧光素酶表达4T1(4T1-luc)肿瘤的活体内治疗功效。

将雌性Balb/C小鼠(6至8周龄)以0.1ml的PBS中的4T1乳腺癌细胞(3x 10⁵)经原位接种在右乳脂垫中。经由数字卡尺执行肿瘤测量。一旦平均肿瘤大小达到约90mm³(第11天)，将60只小鼠随机分配至6个治疗分组(每一分组10只小鼠)。将小鼠根据表14中列出的参数治疗。

表14.用于4T1同基因的TNBC模型的治疗参数

在此研究中所使用的抗PD-1抑制剂为BioXcell的产品(Cat#：BE0146，Clone#：RMP1-14)。用于抗PD-1抑制剂的载体为PBS。将药物每两周(BIW)经腹膜内(i.p.)注入，为期3周。用于EX-11的载体为WFI(用于注射的水)(90％)中的NMP(10％)+20％的Solutol。用于EX-11的载体亦用于研究的”载体”分组。将EX-11及载体每两天(BID)经由口服管饲(p.o.)递送，为期21天。

体重及肿瘤体积每周测量两次。肿瘤体积使用卡尺以二维测量，且使用以下公式的体积以mm³表示：V＝(L x W x W)/2，其中V为肿瘤体积，L为肿瘤长度(最长的肿瘤尺寸)及W为肿瘤宽度(垂直于L的最长肿瘤尺寸)。所报告的肿瘤生长抑制(TGI)为最后研究日的TGI，且以平均％Δ抑制表示，使用以下公式计算：[(C-C0)-(T-T0)/(C-C0)]*100％，其中C指载体组在最后研究日的肿瘤体积，C0指载体组在给药第一天的肿瘤体积，T指治疗组在特定的给药日的肿瘤体积，及T0指治疗组在给药第一天的肿瘤体积。

研究的给药阶段为21天。在研究结束时，对动物注射荧光素，接着处死。执行肺及肝组织的活体外成像以评定转移。在21天的前的终点如下：1)肿瘤体积超过2000mm³，2)自治疗第一天起连续3天的体重减轻超过20％，3)在肿瘤表面上具有约25％或更大的肿瘤溃疡的小鼠，及4)严重的脱水、体温过低、呼吸异常/乏力、嗜睡、明显的疼痛、腹泻、皮肤损伤、神经统症状、由于显著的腹水和腹部肿大而导致受损的活动力(不能进食或饮水)、跛行、持续的俯卧或侧卧位置、肌肉萎缩的体征、麻痹性步态、阵挛性抽搐、强直性抽搐、自体孔持续出血。

治疗组的受试者肿瘤生长曲线显示于图13A至13F中。以抗PD-1的单一剂治疗与载体相比而不导致显著的肿瘤生长抑制(TGI)。以75mg/kg的EX-11的单一剂治疗不导致显著的TGI，但是以150mg/kg的EX-11的单一剂治疗导致38％的显著的TGI(p＝0.0254)。抗PD-1与75mg/kg的EX-11的组合与载体相比而不导致显著的TGI，但是抗PD-1与150mg/kg的EX-11的组合相对于载体而导致50％的显著的TGI(p＝0.0002)。

如图13G中所示，肺的活体外分析显示与载体相比而以单一剂抗PD-1治疗和抗PD-1与150mg/kg的EX-11的组合显著降低发光(分别为p＝0.0014和0.0056)。如图13H中所示，肝的活体外分析显示与载体相比而以单一剂抗PD-1治疗显著降低发光(p＝0.0322)及与载体相比而以单一剂150mg/kg的EX-11更强降低发光(p＝0.004)。抗PD-1与75mg/kg但不与150mg/kg的EX-11的组合与载体相比亦显示显著降低的发光(p＝0.0208)。图形以GraphPadPrism产生。

实施例M-克劳德曼(Cloudman)S91黑色素瘤同基因研究

此研究的目的临床前评估EX-11+/-抗PD-1疗法用于治疗DBA/2小鼠中的皮下克劳德曼S91黑色素瘤模型的活体内治疗功效。

将雌性DBA/2小鼠(7至9周龄)以0.1ml的PBS中的克劳德曼S91黑色素瘤细胞(2x10⁵)经皮下接种在右腹区中。一旦平均肿瘤大小达到约100mm³(第19天)，将60只小鼠随机分配至6个治疗分组(每一分组10只小鼠)。将小鼠根据表15中列出的参数治疗。

表15.用于Cloudman S91黑色素瘤同基因研究的治疗参数

在此研究中所使用的抗PD-1抑制剂为Crownbio/OEM的产物(Cat#：CVP033，Lot#：0920L765)。用于抗BD-1抑制剂的载体为PBS。将药物每两周(BIW)经腹膜内(i.p.)注入，为期3周。用于EX-11的载体为10％的tween-20、90％的ddH₂O。用于EX-11的载体亦用于研究的”载体”分组。将EX-11及载体每两天(BID)经由口服管饲(p.o.)递送，为期21天。

体重及肿瘤体积每周测量3次。肿瘤体积使用卡尺以二维测量，且使用以下公式的体积以mm³表示：V＝(L x W x W)/2，其中V为肿瘤体积，L为肿瘤长度(最长的肿瘤尺寸)及W为肿瘤宽度(垂直于L的最长肿瘤尺寸)。

研究在接种的后50天终止。在各组中的平均肿瘤体积及总体存活率的差异的统计学分析在GraphPad Prism中执行。在50天的前的终点如下：1)肿瘤体积超过3000mm³，2)自治疗第一天起连续3天的体重减轻超过20％，3)在肿瘤表面上具有约25％或更大的肿瘤溃疡的小鼠，及4)严重的脱水、体温过低、呼吸异常/乏力、嗜睡、明显的疼痛、腹泻、皮肤损伤、神经统症状、由于显著的腹水和腹部肿大而导致受损的活动力(不能进食或饮水)、跛行、持续的俯卧或侧卧位置、肌肉萎缩的体征、麻痹性步态、阵挛性抽搐、强直性抽搐、自体孔持续出血。

与载体对照组相比，发现在EX-11(75mg/kg)+抗PD-1组中的存活率增加(P＝0.0055)(图14A)。与载体对照组相比，这对EX-11(150mg/kg)+抗PD-1组亦是如此(P＝0.0377)。与载体对照组相比，接受单独的EX-11或单独的抗PD-1的小鼠未展现增加的存活率。与这些发现一致，在EX-11+抗PD-1组中的一支组小鼠对治疗有反应，因为彼的肿瘤生长速率与同一组内无反应的小鼠相比而降低(图14F和14G)。无反应的小鼠的肿瘤生长速率与载体组、单独的EX-11组和单独的抗PD-1组中的肿瘤的肿瘤生长速率非常相似。图形以GraphPad Prism产生。

实施例N-恶病质模型

TGFβ1信号传导在初始癌变、肿瘤散布及腹水通过腹膜腔重建期间调节卵巢癌进展。透明细胞癌为上皮卵巢癌的特异性侵袭及抗治疗亚型。使用ES-2透明细胞癌活体内模型测试EX-11减少卵巢肿瘤负荷的功效，如通过腹水体积评定来测定。因为ALK5信号传导可调节肌肉生长及消瘦，所以测试EX-11预防经卵巢癌诱导的恶病质的功效。肌肉健康使用心肌组织的组织学评估及通过比较不同的治疗组之间的后肢总重量来评定。

对16周龄的雌性无胸腺裸鼠注射约200万个ES-2-luc细胞。收获所使用的细胞且将其再悬浮于400微升PBS中且经由i.p.注射植入。在细胞植入的后五天，将小鼠随机分配且每组10只动物入选至试验组或载体对照组。随机分配基于体重执行。在第5天开始给药的前，在研究动物中验证生物发光以确认疾病进展。

将所有的化合物溶解在水中的TWEEN20(10％)中且经由口服管饲施用。在施用的前，将药物悬浮液经超声波处理15分钟以产生细粒子悬浮液。对小鼠每天以150毫克/公斤水平的EX-11给药两次。

记录在笼子中发现死亡的动物的死亡率，且基于主要三个标准的人道终点而处死的动物的死亡率-活动力和反应丧失、伴有明显的腹水积聚的消瘦及可触知的体温下降(当戴手套处置时被评定为冷触感的动物)。

在研究的第22天，确定在载体组中其余的存活动物濒临死亡且基于人道终点标准终止研究。在最后的药物施用的后两小时处死动物，使用配备有21G针的1mL注射器收集腹水，且将其分配至预秤重的15mL锥形管中用于重量评定。收获组织且经福尔马林固定而用于组织学评估，且亦将代表性样品急速冷冻及储存在-80℃下，直到进一步处理。将整个右后肢在髋关节处分开，去除皮肤且将样品冷冻及储存而用于重量分析。使用未植入的同窝仔鼠与无病组织(诸如肌肉和心脏)比较。

图15A和15B总结出结果，其表明以150mg/Kg的EX-11治疗可推迟使用ES-2-luc细胞植入无胸腺裸雌性小鼠的卵巢透明细胞癌模型中的疾病进展。比较自EX-11和载体处理的动物收集的腹水体积显示在EX-11治疗组中减少总腹水体积(图15A)。与载体治疗的动物相比，以EX-11治疗组纪录的全肢重量更重(图15B)。

实施例O-耐受性模型

vactosertib和PF-06952229为两种另外的ALK5小分子抑制剂，彼等为EX-11的竞争者。该两种化合物目前于临床试验中。此研究的目的在临床前评估EX-11与vactosertib和PF-06952229在无胸腺裸鼠中相比的活体内耐受性，且估计各药物的安全界限。

将雌性无胸腺裸鼠(6至8周龄)随机分配至12个研究分组的一(每一分组n＝3)(表16)且在给药的前秤重。对小鼠每天经由口服管饲给药一次(QD)或两次(BID)，为期五天。用于EX-11和vactosertib(Vacto)的载体为10％的tween-20、90％的ddH₂O。用于PF-06952229(PF)的载体为10％的DMSO、40％的PEG300、5％的tween-80、45％的盐水。使用PF-06952229载体为此研究中单独的载体组。在为期10天的每天结束时，将小鼠秤重且记录毒性症状(若存在)。基于各组队的症状数目及严重程度进行总体毒性的定性测定。在10天结束时，基于以下公式测定安全界限：(最大耐受剂量)/(最小有效剂量)。

表16.研究分组

剂量	EX-11(BID)	Vacto(QD)	Vacto(BID)	PF(BID)
					1,000mpk	X
300mpk	X	X	X	X
					150mpk		X	X	X
50mpk		X	X	X
					载体				X

除了vactosertib300 mg/kg(BID)组队中的小鼠#3以外，在任何分组的任何小鼠中未观察到显著的体重减轻。这只小鼠在第4天展现剂量限制毒性(DLT)，体重减轻18％。给予老鼠给药假期且在第10天回弹至其原始体重的5.5％的内。在EX-11分组中，以300或1,000mg/kg(BID)的任何小鼠中未观察到可检测的毒性。

基于以EX-11的先前研究，EX-11的最小有效剂量为150mg/kg(BID)。这意指EX-11的安全界限在此模型中大于或等于自最小有效剂量(MED)增加6.7倍(1000/150＝6.7)。

在vactosertib分组中，小鼠在150和300mg/kg(QD)时很好地活着。在150mg/kg(BID)时观察到轻微但是可耐受的毒性。小鼠在300mg/kg(BID)时经历DLT。基于动物研究的vactosertib的最小有效剂量在25至40mg/kg(QD)的范围内，尽管人类在临床试验中以mg/kg为基础的可相比浓度经BID给药。这意指vactosertib的安全界限在此模型中有可能在介于自MED增加3.75与6倍(150/40＝3.75)(150/25＝6)之间的范围内。

在PF-06952229分组中，小鼠在150mg/kg(BID)及更高时经历DLT。在动物研究中的最小有效剂量经显示为30mg/kg(BID)。因为PF-06952229在吾等的研究中仅耐受50mg/kg(BID)时，所以数据示意此药物的安全界限在此模型中具有自MED增加约1.7倍(50/30＝1.7)。在载体对照分组中未观察到可检测的毒性。

总的，在5天的给药窗口及10天的检查期，EX-11似乎具有比vactosertib和PF-06952229更大的安全界限。

实施例P-Nanostring分析

此研究的目的测定经EX-11+免疫检查点抑制剂(ICI)、单独的EX-11、单独的ICI或载体对照物治疗的4T1、EMT6和S91肿瘤的差异性基因表达(DGE)图案。出于此研究的目的，ICI＝抗PD-1或抗PD-L1，如所示。

用于NanoString检验的来自癌的三种同基因模型的肿瘤：

研究编号	细胞系	小鼠模式
			1	4T1(三阴性乳腺癌[TNBC])	Balb/c小鼠
2	EMT6(TNBC)	C3H小鼠
			3	S91(黑色素瘤)	DBA/2小鼠

使用Direct-Zol RNAMiniprep(Zymo Research)自每组≥3只小鼠的冷冻肿瘤分离出DNA。用于下游应用的治疗分组及小鼠/肿瘤数目概述于表17中(R＝反应者，NS＝无反应者)。

表17.各项研究的小鼠的治疗分组及数目

汇集各组内的各肿瘤的相等浓度的RNA。每一组200ng的RNA用于下游应用。各方案使用三个单独的NanoString nCounter盘：1)纤维化，2)泛癌(PanCancer)路径，3)免疫学。将RCC原始数据档案上传至nCounter 4.0软件中，其中将计数标准化成持家基因。将各盘中的基因列表合并至单一电子表格中用于下游分析。关于在≥1个盘中发现的基因，使用平均计数值。使用RStudio软件产生在各组的各项研究内的DGE签章的热图。使用Ingenuity路径分析(IPA)识别在各组的各项研究内失调的信号传导路径。

关于RStudio分析，热图在各项研究内及各组之间产生明显的DGE图案。最突出的发现可认为是与S91 EX-11+ICI(无反应者)相比的S91 EX-11+抗PD-1或抗PD-L1(ICI)(反应者)。无反应者与载体对照组紧密地丛聚，而反应者与无反应者和对照组的丛聚比研究中的所有其他组更远。此示意反应者的肿瘤生长速率降低为由EX-11+ICI组合所诱导的差异性基因表达图案的结果-在无反应者中未看到此结果，原因尚不清楚。

关于IPA分析，与单独的载体和/或ICI组相比，抗原呈递路径(APP)经确定为受制于单独的EX-11和/或EX-11+ICI(取决于研究)的最高度失调的信号传导路径。此为所有三项研究中的共同主题。这些数据示意EX-11调升肿瘤中的APP及添加ICI时常增强此效应(图16)。

总的，这些结果得出以EX-11调升的APP使ICI反应敏感而引发抗肿瘤免疫的假设。

实施例Q-经博莱霉素诱导的肺纤维化研究

纤维化(引起基质硬化及结疤形成的过度的结缔组织形成)为癌症的标志。高达20％的癌症与慢性炎症性相关的纤维化连结，包括肝细胞癌、胃癌、食管癌、头颈癌、结肠癌、胰腺癌、宫颈癌和外阴癌。纤维化促成早期的癌症发展仍不清楚；然而，在一些晚期实体瘤中，据信纤维化组织像屏障一样起作用，阻止治疗剂(如化学疗法或生物制剂)穿透肿瘤组织。另外，强纤维化组织被认为有助于排除免疫细胞进入肿瘤核心，产生免疫排除或免疫沙漠表型。为了评估Ex-11的抗纤维化性质，利用在雄性C57BL/6小鼠中经博莱霉素诱导的肺纤维化的预防模型且评估各种终点。

在此研究中的所有小鼠皆购自Taconic的8周龄雄性C57BL/6小鼠。在施用博来霉素的前第-2天，将所有动物秤重且分配至每组10只小鼠的组中(表18)，使得每组动物包括体重相似的动物。

表18.用于研究的治疗组及参数

在第0天，将动物以1.5U/kg的博莱霉素(博来霉素(Blenoxane)目录号NDC 61703-323-22，Hospira Pharmaceutical)经气管内治疗，除了经由口咽途径施用生理盐水以充当为健康的原态对照组的第1组以外。预防性治疗自施用博来霉素的前1天至施用博来霉素的后第21天施用。在第21天，仅施用早晨剂量。在第21天收获动物且测量肺重量。在第-2天开始及在收获当天(第21天)结束，每周记录至少3次所有的小鼠体重。使用吡非尼酮作为阳性对照化合物，因为其为经FDA批准用于治疗人类特发性肺纤维化(IPF)的药物。所有的化合物在水中的10％的Tween-20中制备；使用磁搅拌棒调配均匀的悬浮液。

在研究期间仅失去一只在吡非尼酮组中的动物；所有的其他动物皆存活。在研究结束时，将总个肺组织秤重且固定用于组织学检查，其由经受训的病理学家进行，对治疗组遮盲。具体而言，将来自各小鼠的整个肺以石蜡包埋成单一块。来自各块的两个载片切片至主支气管的深度(靠近各肺叶的中心)且以苏木精和伊红(H&E)或马森氏三色(MT)染色。将玻璃载片由董事会认证的兽医病理学家使用光学显微镜评估。肺切片根据下述方法评分，评估在各组织中随机选择的五个区域。将固定的肺切片且将连续的组织切片以H&E或MT染色。使用各种病理评分参数测定平均阿希克夫分数，以及表明纤维化的平均炎症性及胶原蛋白沉积。

评分经福尔马林固定的肺的参数：

经修饰的阿希克夫分数：经H&E染色的肺切片根据经修饰的阿希克夫分数评分。将每一样品的五个代表性200x显微视野的分数平均以获得各动物的平均分数。

0级＝正常肺

1级＝最小可检测的肺泡壁增厚

2级＝肺泡壁轻度增厚

3级＝壁中度连续增厚，伴有纤维结节

4级＝增厚的隔膜和融合的纤维化肿块，总计小于显微视野的10％

5级＝纤维化增加，伴有明显的肺结构损伤，且形成介于10至50％的显微视野的纤维带或小纤维肿块

6级＝大的连续纤维化肿块，收创超过50％的显微视野

7级＝结构严重变形及大的纤维区域

8级＝在显微视野内肺完全纤维性闭塞

炎症性：此特征包括淋巴细胞、巨噬细胞和嗜中性球的浸润/聚集。炎症性细胞浸润在H&E染色切片中评分且以0至5分对严重程度分级：

0＝不存在

1＝最小

2＝轻度

3＝中度

4＝显著

5＝严重

胶原蛋白(纤维化)：此特征根据高于基线水平的胶原蛋白沉积程度及基于其丰度而在经MT染色的切片中评分：

0＝正常的胶原蛋白水平

1＝增加最少(<10％的肺部受影响)

2＝轻度增加(10至25％的肺部受影响)

3＝中度增加(26至50％的肺部受影响)

4＝显著增加(51至75％的肺部受影响)

5＝严重增加(>75％的肺部受影响)

所有动物在第21天达成研究结束，除了第4组(吡非尼酮组)中的一只动物以外。所有研究动物在整个研究过程中的体重显示在图19A中。在任何治疗组中均未报告超过5至10％的严重的体重减轻，包括在此模型中每天以75mg/kg的Ex-11给药两次时。以第4组在第9天观察到最大的体重百分比变化，平均为-1.2％。总体而言，所有治疗组具有良好的耐受性。

在研究完成后，测定总肺重量。患病的肺重量显著地更重(第2组)，而当动物以Ex-11或比较化合物吡非尼酮治疗时，观察到显著减少的肺重量(图18B)。当肺重量以总动物重量标准化时(也称作肺重量指数)，介于博来霉素/载体组与博来霉素/Ex-11组之间的差异仍具有高度统计学意义(图18C)。

图18D显示当评估各肺组织随机选择的五个区域时，评估来自研究动物的所有可用的肺的平均分数。经受训的病理学家使用经H&E染色的组织测定阿希克夫分数以及平均的炎症性。平均纤维化/胶原蛋白沉积使用经用于角蛋白和肌肉纤维染色的红染色、用于胶原蛋白的蓝或绿、用于细胞质的浅红或粉红色及深棕至黑色细胞核的马森氏三色染色的组织来测定。当使用单向ANOVA试验时，在第2组(博来霉素/载体)与第3组(博来霉素/Ex-11)之间的差异显示高度统计学上显著降低的平均分数(阿希克夫分数：经调整的p值：0.0002，平均肺炎症性：经调整的p值：<0.0001，平均肺纤维化/胶原蛋白沉积：经调整的p值：0.0002)。图19E至L分别显示当使用H&E和MT染色时各治疗组以40X放大的代表性图像。

实施例R-在KGN细胞中的HLA表达

将KGN细胞在1ng/mL的TGFβ不存在或存在下以30nM EX-11、300nM EX-11或DMSO处理72小时。接着清洗细胞、收集且在4℃下与PE共轭的泛HLA第I型抗体(BD Pharmingencat#560168)于黑暗中孵育1小时。清洗细胞且在Attune NxT上以流动式细胞测量术分析。

如图19中所示，HLA第I型表达受到TGFβ刺激而抑制，以EX-11治疗逆转其抑制。在TGFβ不存在下，EX-11剂量依赖性地增加达2倍的HLA第I型表达。

实施例S-TMA的免疫表型

购买以下适应症的组织微数组的五个连续切片：NSCLC(US Biolabs)、间皮瘤、卵巢癌、乳腺癌和胰腺癌(US BioMax)。将各适应症的一个切片烘烤、脱蜡且经历表位修复。接着将切片在4℃下与下列的一级抗体：CD8(CST)和αSMA(CST)经隔夜双重染色。接着清洗切片，将其在室温下以经AF-647(CD8)-或AF-488(αSMA)共轭的二级抗体染色1小时，清洗，以DAPI染色且加上盖片。将切片在Olympus VS200玻片扫描仪中成像，且评估各患者样品，且将其分组成以下四类的一：炎症性(在整个肿瘤和基质切片中的CD8信号)、排除(局限于基质切片的CD8染色)、沙漠(很少至没有CD8染色)或NA(由于失去样品或没有肿瘤/基质组织存在而不可评估)。

如图20中所示，AGCT&Theca样品具有最强的沙漠表型(80％)及仅一个炎症性样品，示意TGFβ路径抑制可能有益于这些适应症。卵巢浆液性腺癌及弥漫性胃癌具有最高的炎症性样品百分比(50至60％)。PR+乳腺癌具有最高的排除核心百分比(50％)。

实施例T-在EMT6三阴性乳腺癌同基因模型中的EX-11与abraxane的双重组合

此研究的目的临床前评估若组合EX-11与化学治疗剂是否增加肿瘤生长抑制。

将雌性Balb/C小鼠(6至8周龄)以0.1ml的PBS中的EMT6乳腺癌(1.0x10⁶个细胞)经原位接种在左乳脂垫中。经由数字卡尺执行肿瘤测量。一旦平均肿瘤大小达到约77mm³(第6天)，将32只小鼠随机分配至4个治疗分组(每一分组8只小鼠)。将小鼠根据表19中列出的参数治疗。

表19.

Abraxane(Bristol Myers Squibb的产品)购自St JosefHospital(Freiburg，Germany)。用于abraxane的载体为0.9％的NaCl。用于EX-11的载体为WFI(用于注射的水)(90％)中的NMP(10％)+20％的Solutol。用于EX-11的载体亦用于研究的”载体”分组。将EX-11及载体每两天(BID)经由口服管饲(p.o.)递送，为期21天。

体重及肿瘤体积每周测量两次。肿瘤体积使用卡尺以二维测量，且使用以下公式的体积以mm³表示：V＝(L x W x W)/2，其中V为肿瘤体积，L为肿瘤长度(最长的肿瘤尺寸)及W为肿瘤宽度(垂直于L的最长肿瘤尺寸)。

研究的第一阶段为在第6天开始的给药阶段，且由于在施用第三剂量的abraxane的后过多死亡而在第20天终止。在第20天前的终点如下：1)肿瘤体积超过2000mm³，2)自治疗第一天起连续3天的体重减轻超过20％，3)在肿瘤表面上具有约25％或更大的肿瘤溃疡的小鼠，及4)严重的脱水、体温过低、呼吸异常/乏力、嗜睡、明显的疼痛、腹泻、皮肤损伤、神经统症状、由于显著的腹水和腹部肿大而导致受损的活动力(不能进食或饮水)、跛行、持续的俯卧或侧卧位置、肌肉萎缩的体征、麻痹性步态、阵挛性抽搐、强直性抽搐、自体孔持续出血。

各治疗组的个别肿瘤生长曲线显示于图17B至17E中。与载体相比，以abraxane及EX-11的单一剂治疗未显示出功效，如图17A中所示。abraxane与EX-11的组合导致在最后一天更小的平均肿瘤体积，如图17F中所示。图形以GraphPad Prism产生。

将此实验使用最优化剂量的abraxane重复以降低毒性。预期以使用最优化剂量的abraxane重复实验时将观察到显著的治疗效应。

实施例U-免疫组织化学(IHC)

实施例K、L和M证明当与免疫检查点抑制剂(ICI)组合时，EX-11既延长存活期又降低肿瘤生长速率。EX-11为ALK5抑制剂，已提出其通过调降TGFβ信号传导来影响肿瘤微环境中的多个过程，包括血管分布重塑和白血球浸润。此研究的目的比较在4T1、EMT6和S91肿瘤中受制不同的治疗条件的CD31和CD45的水平。CD31为经建立的血管分化标志物，及CD45为经建立的白细胞标志物。

以来自三种同基因的癌模型的肿瘤用于IHC分析：

1)实施例L：4T1(三重阴性乳腺癌[TNBC])；Balb/c小鼠

2)实施例K：EMT6(TNBC)；Balb/C小鼠

3)实施例M：S91(黑色素瘤)；DBA/2小鼠

将肿瘤固定在福尔马林中48小时，接着在石蜡包埋的前储存在70％的EtOH中。将包埋块以5μM切片且放置在玻璃载片上用于IHC染色。表20例证用于IHC染色的肿瘤(R＝反应者，NR＝无反应者)。表21例证用于各标志物的抗体。

表20.

肿瘤	处理	n
			4T1	载体	3
4T1	EX-11	3
			4T1	抗PD-1	3
4T1	抗-PD-1+EX-11	3
			EMT6	载体	3
EMT6	EX-11	3
			EMT6	抗PD-1	3
EMT6	抗PD-1+EX-11	3
			EMT6	抗PD-1	3
EMT6	抗PD-1+EX-11	3
			S91	载体	3
S91	EX-11	3
			S91	抗PD-1	3
S91	抗PD-1+EX-11(R)	3
			S91	抗PD-1+EX-11(NR)	3

表21.

Leica Biosystems Bond软件及Leica Bond Rx Research Stainerv依照方案用于染色组织切片。Olympus VS200 ASW软件及扫描仪用于扫描图像。图像由病理学家以人为评分，遮盲治疗讯息。评分使用Olympus OlyVIA虚拟图像示波器进行。CD45通过计算CD45阳性细胞数目除以整个肿瘤区域内活的有核细胞总数目来评分。CD31密度通过计算CD31阳性血管总数目除以整个肿瘤面积(mm²)来评分。

在EMT6肿瘤中，在组之间未观察到CD31染色差异(图21A)。然而，与抗PD-1和载体组相比，CD45于所有的EX-11组中皆增加(图21A)。在S91肿瘤中，与单独的药物或载体对照组相比，CD31于抗PD-1+EX-11组中增加(图21C)。这与抗PD-1+EX-11组队内的反应率无关。与所有其他的组相比，CD45于抗PD-1+EX-11反应性(R)肿瘤中戏剧性地增加，包括抗PD-1+EX-11无反应性(NR)肿瘤(图21C)。

总的，这些数据表明EX-11在EMT6模型的背景下增加CD45肿瘤浸润。这些数据亦显示在S91模型的背景下，在抗PD-1+EX-11(R)肿瘤中的白细胞浸润增加与减少的小鼠肿瘤生长及改进的小鼠存活率高度相关联。

等效性及范围

在申请专利范围中，诸如”一(a)”、”一(an)”及”该(the)”的冠词可意指一或大于一，除非有相反的指示或以其他方式自上下文显而易见。若一个、超过一个或所有群组成员存在于、用于给出的产物或方法中或以其他方式与给出的产物或方法有关，则在该群组的一个或多个成员之间包括”或”的申请专利范围或说明内容被视为符合的，除非有相反的指示或以其他方式自上下文显而易见。本发明包括其中群组中恰好一个成员存在于、用于给出的产物或方法中或以其他方式与给出的产物或方法有关的实施方式。本发明包括其中超过一个或所有群组成员存在于、用于给出的产物或方法中或以其他方式与给出的产物或方法有关的实施方式。

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本领域技术人员将认可或能够仅使用常规的实验来确定本发明所描述的特定实施方式的许多等效物。本发明所描述的本发明实施方式的范围不意欲受限于上文发明内容，而是如所附申请专利范围中所阐述。本技术的那些普通技能者将认知在不背离本发明的精神或范围下可对本说明内容进行各种改变及修饰，如下列申请专利范围中所定义者。

Claims (123)

1.一种式(I)的化合物，

或其药学上可接受的盐，其中：

R¹为C₁-C₅烷基或C₃-C₅碳环或卤素；

R²为至少6个碳原子的芳基或至少6个原子的含氮杂芳基，其任选地被以下的一个或多个取代：

(i)一个或多个卤素；

(ii)任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基，其中当选择为大于C₃的烷基时，该烷基位于R²的芳基或杂芳基上的位置是相对于连接R²的芳基或杂芳基的氨基键的间位或对位；

(iii)磺酰胺；

(iv)单环、双环或螺环碳环，其任选地被羟基、一个或多个卤素或一个或多个任选地被羟基或一个或多个卤素取代的至多6个碳原子的直链、支链或环状烷基取代，其中所述碳环通过单键或亚甲基或乙撑基连接基团与R²的芳基或杂芳基连接，且其中当存在且选择为大于环丙基的碳环时，该碳环位于R²的芳基或杂芳基上的位置是相对于连接R²的芳基或杂芳基的氨基键的间位或对位；或

(v)单环、双环或螺环杂环，其可含有至多3个独立地选自N和O的杂原子且任选地及独立地被一个或多个任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环取代，其中所述杂环通过单键或亚甲基或乙撑基连接基团与R²的芳基或杂芳基连接，且其中当存在时，所述杂环位于R²的芳基上的位置是相对于连接所述芳基的氨基键的间位或对位；

R³为-H、-F或-Cl；

R⁴为-H或卤素或任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基；且

R⁵为-H或-F或任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基。

2.根据权利要求1所述的化合物，其中R¹为C₁-C₅烷基或C₃-C₅碳环。

3.根据权利要求2所述的化合物，其中R¹为-CH₃。

4.根据权利要求2所述的化合物，其中R¹为环丙基。

5.根据权利要求1所述的化合物，其中R¹为-Cl或-F。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中R²为任选地被以下的一个或多个取代的苯基或吡啶基：

(i)一个或多个卤素；

(ii)任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基，其中当选择为大于C₃的烷基时，该烷基位于R²的芳基或杂芳基上的位置是连接R²的芳基或杂芳基的氨基键的间位或对位；

(iii)磺酰胺；

(iv)单环、双环或螺环碳环，其任选地被羟基、一个或多个卤素或一个或多个任选地被羟基或一个或多个卤素取代的至多6个碳原子的直链、支链或环状烷基取代，其中所述碳环通过单键或亚甲基或乙撑基连接基团与R²的芳基或杂芳基连接，且其中当存在且选择为大于环丙基的碳环时，该碳环位于R²的芳基或杂芳基上的位置是相对于连接R²的芳基或杂芳基的氨基键的间位或对位；或

(v)单环、双环或螺环杂环，其可含有至多3个独立地选自N和O的杂原子且任选地及独立地被一个或多个任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环取代，其中所述杂环通过单键或亚甲基或乙撑基连接基团与R²的芳基或杂芳基连接，且其中当存在时，所述杂环位于R²的芳基上的位置是相对于连接所述芳基的氨基键的间位或对位。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的化合物，其中R²为被以下的一个或多个取代的苯基或吡啶基：

(i)一个或多个卤素；

(ii)任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基，其中当选择为大于C₃的烷基时，该烷基位于R²的芳基或杂芳基上的位置是相对于连接R²的芳基或杂芳基的氨基键的间位或对位；

(iii)磺酰胺；

(iv)单环、双环或螺环碳环，其任选地被羟基、一个或多个卤素或一个或多个任选地被羟基或一个或多个卤素取代的至多6个碳原子的直链、支链或环状烷基取代，其中所述碳环通过单键或亚甲基或乙撑基连接基团与R²的芳基或杂芳基连接，且其中当存在且选择为大于环丙基的碳环时，该碳环系位于R²的芳基或杂芳基上的位置是相对于连接R²的芳基或杂芳基的氨基键的间位或对位；或

(v)单环、双环或螺环杂环，其可含有至多3个独立地选自N和O的杂原子且任选地及独立地被一个或多个任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环取代，其中所述杂环通过单键或亚甲基或乙撑基连接基团与R²的芳基或杂芳基连接，且其中当存在时，所述杂环位于R²的芳基上的位置是相对于连接所述芳基的氨基键的间位或对位。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的化合物，其中R²被一个或多个卤素取代。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的化合物，其中R²被磺酰胺取代。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的化合物，其中R²被任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基取代，其中当选择为大于C₃的烷基时，该烷基位于R²的芳基或杂芳基上的位置是相对于连接R²的芳基或杂芳基的氨基键的间位或对位。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的化合物，其中R²被单环、双环或螺环碳环取代，该碳环任选地被羟基、一个或多个卤素或一个或多个任选地被羟基或一个或多个卤素取代的至多6个碳原子的直链、支链或环状烷基取代，其中所述碳环通过单键或亚甲基或乙撑基连接基团与R²的芳基或杂芳基连接，且其中当存在且选择为大于环丙基的碳环时，该碳环在R²的芳基或杂芳基上的位置是相对于连接R²的芳基或杂芳基的氨基键的间位或对位。

12.根据权利要求1至10中任一项所述的化合物，其中R²被单环、双环或螺环杂环取代，该杂环可含有至多3个独立地选自N和O的杂原子且任选地及独立地被一个或多个任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环取代，其中所述杂环通过单键或亚甲基或乙撑基连接基团与R²的芳基或杂芳基连接，且其中当存在时，所述杂环在R²的芳基上的位置是相对于连接所述芳基的氨基键的间位或对位。

13.根据权利要求12所述的化合物，其中所述杂环为哌嗪基、吗啉基、哌啶基、二氮杂双环辛基、二氮杂双环庚基或氧杂环己烷基，其任选地及独立地被一个或多个任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基取代。

14.根据权利要求13所述的化合物，其中所述杂环为

15.根据权利要求1至14中任一项所述的化合物，其中连接R²的芳基或杂芳基的碳环或杂环通过单键或亚甲基连接基团与R²的芳基或杂芳基连接。

16.根据权利要求15所述的化合物，其中连接R²的芳基或杂芳基的碳环或杂环通过单键与R²的芳基或杂芳基连接。

17.根据权利要求1至16中任一项所述的化合物，其中连接R²的芳基或杂芳基的碳环或杂环在R²上与R²的芳基或杂芳基连接的位置是相对于连接R²的氨基键之间位。

18.根据权利要求1至16中任一项所述的化合物，其中连接R²的芳基或杂芳基的碳环或杂环在R²上与R²的芳基或杂芳基连接的位置是相对于连接R²的氨基键的对位。

19.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中R²为：

其中：

R⁶为-H、-F、-Cl或任选地及独立地被一个或多个卤素取代的C₁-C₃烷基或环丙基；

R^7A和R^7B中一者为-H且另一者为：

(i)卤素；

(ii)-SO₂NR^7F ₂，其中各R^7F独立地为-H或至多4个碳原子的直链或支链烷基；

(iii)任选地被一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基；或

(iv)其中：

A为>N-或>C(H)-；

E为-O-、>N(R⁸)或>C(H)-R¹³；

R⁸为-H或任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；

R¹³为-H或任选地被羟基或一个或多个卤素取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₆碳环；且

n为0、1或2，且

当E为>N(R⁸)，X、Y和Z如下所定义：

Z为>CH₂，且X和Y独立地为>CH₂或>C(CH₃)₂，或X和Y两者都为>CH-且通过亚甲基或乙撑基桥连接在一起；或

Y为>CH₂或>C(CH₃)₂，且X和Z两者都为>CH-且通过亚甲基或乙撑基桥连接在一起，且

当E为-O-或>C(H)-R¹³时，X、Y和Z为>CH₂。

20.根据权利要求19所述的化合物，其中R⁶为-H、-F、-Cl、-CH₃或-CF₃。

21.根据权利要求19或20所述的化合物，其中n为0或1。

22.根据权利要求21所述的化合物，其中n为0。

23.根据权利要求19至22中任一项所述的化合物，其中R^7A和R^7B中一者为-H且另一者为：

24.根据权利要求1至23中任一项所述的化合物，其中R³为-H。

25.根据权利要求1至23中任一项所述的化合物，其中R³为-F或-Cl。

26.根据权利要求1至23中任一项所述的化合物，其中R³为-F。

27.根据权利要求1至23中任一项所述的化合物，其中R³为-Cl。

28.根据权利要求1至27中任一项所述的化合物，其中R⁴为任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基。

29.根据权利要求1至27中任一项所述的化合物，其中R⁴为卤素。

30.根据权利要求1至27中任一项所述的化合物，其中R⁴为-CF₃。

31.根据权利要求1至27中任一项所述的化合物，其中R⁴为-CH₃。

32.根据权利要求1至27中任一项所述的化合物，其中R⁴为-H。

33.根据权利要求1至27中任一项所述的化合物，其中R⁴为-Cl。

34.根据权利要求1至27中任一项所述的化合物，其中R⁴为-F。

35.根据权利要求1至34中任一项所述的化合物，其中R⁵为任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基。

36.根据权利要求1至34中任一项所述的化合物，其中R⁵为-H。

37.根据权利要求1至34中任一项所述的化合物，其中R⁵为-CH₃。

38.根据权利要求1至34中任一项所述的化合物，其中R⁵为-CF₃。

39.根据权利要求1至34中任一项所述的化合物，其中R⁵为-F或-Cl。

40.根据权利要求1所述的化合物，其具有式(II)：

或其药学上可接受的盐，其中：

R¹为-CH₃或-Cl；

R²为：

a)其中：

R^6A和R^6B中一者为-H且另一者为-H、-F、-Cl、-CH₃或CF₃；

R^7C和R^7D中一者为-H且另一者为：

(i)-F；

(ii)-Cl；

(iii)-SO₂NH₂；

(iv)环己基；

(v)叔丁基；或

(vi)

b)或

c)

R⁴为-H或-CH₃；且

R⁵为-H或-F。

41.根据权利要求1所述的化合物，其具有式(III)：

或其药学上可接受的盐，其中：

R^1A为甲基或环丙基；

R^6B为-H、-F或-Cl；且

R^7D和R^7E中一者为-H且另一者为下式的杂环：

42.根据权利要求41所述的化合物，其中R^7D和R^7E中一者为-H且另一者为下式的杂环：

43.根据权利要求1所述的化合物，其具有下式结构：

或其药学上可接受的盐，其中R'为H或F；且R"位于相对于氨基键的间位或对位，且为任选地被-CH₃、-CH₂CF₃或-CH₂CH₂OH N-取代的吗啉基或哌嗪基。

44.一种具有下式结构的化合物、或其药学上可接受的盐：

/>

/>

/>

/>

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45.根据权利要求44所述的化合物，其中该化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

46.根据权利要求44所述的化合物，其中该化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

47.根据权利要求44所述的化合物，其中该化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

48.根据权利要求44所述的化合物，其中该化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

49.根据权利要求44所述的化合物，其中该化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

50.根据权利要求44所述的化合物，其中该化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

51.根据权利要求44所述的化合物，其中该化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

52.根据权利要求44的化合物，其中该化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

53.根据权利要求44的化合物，其中该化合物具有下式：

或其药学上可接受的盐。

54.一种药物组合物，其包括根据权利要求1至53中任一项所述的化合物、或其药学上可接受的盐及至少一种药学上可接受的赋形剂。

55.一种药物的组合，其包括根据权利要求1至53中任一项所述的化合物、或其药学上可接受的盐或根据权利要求54所述的药物组合物及至少一种额外的治疗剂。

56.一种治疗有其需要的受试者中增殖性疾病的方法，该方法包括向受试者施用有效量的根据权利要求1至53中任一项所述的化合物、或其药学上可接受的盐或根据权利要求54所述的药物组合物。

57.根据权利要求56所述的方法，其中所述增殖性疾病为癌症。

58.根据权利要求57所述的方法，其中所述癌症为血液癌。

59.根据权利要求58所述的方法，其中所述癌症为白血病。

60.根据权利要求59所述的方法，其中所述癌症为急性白血病。

61.根据权利要求60所述的方法，其中所述急性白血病为急性骨髓性白血病或急性淋巴细胞性白血病。

62.根据权利要求59所述的方法，其中所述癌症为慢性白血病。

63.根据权利要求62所述的方法，其中所述慢性白血病为慢性骨髓性白血病或慢性淋巴细胞性白血病。

64.根据权利要求58所述的方法，其中所述癌症为淋巴瘤。

65.根据权利要求64所述的方法，其中所述癌症为霍奇金氏淋巴瘤。

66.根据权利要求64所述的方法，其中所述癌症为非霍奇金氏淋巴瘤。

67.根据权利要求58所述的方法，其中所述癌症为多发性骨髓瘤。

68.根据权利要求57所述的方法，其中所述癌症包括实体瘤。

69.根据权利要求57所述的方法，其中所述癌症为：肺癌、脑癌、甲状腺癌、间变性星状细胞瘤、肝癌、胰腺癌、皮肤癌、黑色素瘤、转移性黑色素瘤、结直肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肾癌、肝细胞癌、卵巢癌、HPV相关性癌症、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征、血液癌或骨髓纤维化。

70.根据权利要求57、68或69所述的方法，其中所述癌症为非小细胞肺癌(NSCLC)。

71.根据权利要求57、68或69所述的方法，其中所述癌症为神经母细胞瘤或胶质母细胞瘤。

72.根据权利要求57、68或69所述的方法，其中所述癌症为间变性甲状腺癌(ATC)。

73.根据权利要求57、68或69所述的方法，其中所述癌症为结肠癌。

74.根据权利要求57、68或69所述的方法，其中所述癌症为肝细胞癌(HCC)。

75.根据权利要求57、68或69所述的方法，其中所述癌症为胰腺癌。

76.根据权利要求57、68或69所述的方法，其中所述癌症为间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)或骨髓增生异常综合征。

77.根据权利要求57、68或69所述的方法，其中所述癌症为间变性星状细胞瘤。

78.根据权利要求57、68或69所述的方法，其中所述癌症为胰腺导管腺癌。

79.根据权利要求57或68所述的方法，其中所述癌症为胃癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌或间皮瘤。

80.根据权利要求57或68所述的方法，其中所述癌症为卵巢癌。

81.根据权利要求80所述的方法，其中所述卵巢癌为成人型粒层细胞瘤。

82.根据权利要求57、68或69所述的方法，其中所述癌症为选自宫颈癌、口咽癌、肛门癌、外阴/阴道癌或阴茎癌的HPV相关性癌症。

83.一种治疗有其需要的受试者中纤维化疾病、疾患或病症的方法，该方法包括向所述受试者施用治疗有效量的根据权利要求1至53中任一项所述的化合物、或其药学上可接受的盐或根据权利要求54所述的药物组合物。

84.根据权利要求83所述的方法，其中所述纤维化疾病、疾患或病症为肺纤维化、肝纤维化、心脏病、心脏纤维化或再狭窄、血管纤维化、肾纤维化、皮肤纤维化、胃肠道纤维化、骨髓纤维化、关节纤维化、掌筋膜挛缩症、纵隔纤维化、佩罗尼氏病、腹膜后纤维化、全身性硬化症、自体免疫性肝炎、非酒精性脂肪性肝炎、囊性纤维化、β型地中海贫血、光化性角化病、高血压、慢性肾疾病、查加斯氏心脏病、干眼症、溃疡、角膜纤维化、湿性老年性黄斑变性、慢性创伤或银屑病。

85.一种抑制有其需要的受试者中肿瘤生长的方法，该方法包括向所述受试者施用有效量的根据权利要求1至53中任一项所述的化合物、或其药学上可接受的盐或根据权利要求54所述的药物组合物。

86.一种在体内或体外抑制ALK-5活性的方法，该方法包括使ALK-5与根据权利要求1至53中任一项所述的化合物、或其药学上可接受的盐或根据权利要求54所述的药物组合物接触。

87.根据权利要求86所述的方法，其中所述抑制在受试者体内发生。

88.根据权利要求86所述的方法，其中所述抑制在体外发生。

89.一种治疗有其需要的受试者中炎症性疾病、疾患或病症的方法，其包括向所述受试者施用治疗有效量的根据权利要求1至53中任一项所述的化合物、或其药学上可接受的盐或根据权利要求54的药物组合物。

90.根据权利要求89所述的方法，其中所述炎症性疾病、疾患或病症为非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD)、酒精性脂肪性肝炎(ASH)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、原发性胆汁性胆管炎(PBC)、原发性硬化性胆管炎、自体免疫性肝炎、皮肤炎症或银屑病。

91.根据权利要求89或90所述的方法，其中所述炎症性疾病、疾患或病症为自体免疫性疾病、疾患或病症。

92.根据权利要求91所述的方法，其中所述自体免疫性疾病、疾患或病症为骨关节炎、类风湿性关节炎、疼痛、炎症性肠道疾病、呼吸系统疾病或皮肤疾病。

93.一种治疗受试者中恶病质的方法，该方法包括向受试者施用有效量的根据权利要求1至53中任一项所述的化合物、或其药学上可接受的盐或根据权利要求54所述的药物组合物。

94.一种促进有其需要的受试者中肿瘤免疫微环境的免疫浸润的方法，其包括向所述受试者施用有效量的根据权利要求1至53中任一项所述的化合物、或其药学上可接受的盐或根据权利要求54所述的药物组合物。

95.一种抑制有其需要的受试者中肿瘤的上皮细胞向间充质细胞转化的方法，其包括向所述受试者施用有效量的根据权利要求1至53中任一项所述的化合物、或其药学上可接受的盐或根据权利要求54所述的药物组合物。

96.一种调节有其需要的受试者中肿瘤免疫微环境的方法，其包括向所述受试者施用有效量的根据权利要求1至53中任一项所述的化合物、或其药学上可接受的盐或根据权利要求54所述的药物组合物。

97.一种增加有其需要的受试者中肿瘤血管或流向肿瘤的血液或两者的方法，其包括向所述受试者施用有效量的根据权利要求1至53中任一项所述的化合物、或其药学上可接受的盐或根据权利要求54所述的药物组合物。

98.一种抑制有其需要的受试者中癌症转移的方法，其包括向所述受试者施用有效量的根据权利要求1至53中任一项所述的化合物、或其药学上可接受的盐或根据权利要求54所述的药物组合物。

99.一种治疗对抑制TGFβ信号传导路径敏感的纤维化、炎症性或增殖性疾病或病症的方法，所述方法包括向遭受所述纤维化、炎症性或增殖性疾病或病症的受试者施用抑制TGFβ信号传导有效量的根据权利要求1至53中任一项所述的化合物、或其药学上可接受的盐或根据权利要求54所述的药物组合物。

100.根据权利要求56至87和89至99中任一项所述的方法，其中所述受试者为人类。

101.根据权利要求56至84、89至92和96至100中任一项所述的方法，其中所述癌症、纤维化疾病、疾患或病症、炎症性疾病、疾患或病症、或增殖性疾病、疾患或病症是TGF-β信号传导驱动的，或者疾病进展利用TGF-β信号传导路径。

102.根据权利要求56至84、89至92和96至101中任一项所述的方法，其中所述癌症、纤维化疾病、疾患或病症、炎症性疾病、疾患或病症、或增殖性疾病、疾患或病症表达或具有突变的L2(FOXL2)或FOXL2。

103.根据权利要求56至84、89至92和96至102中任一项所述的方法，其中所述癌症、纤维化疾病、疾患或病症、炎症性疾病、疾患或病症、或增殖性疾病、疾患或病症与升高的磷酸化SMAD 2(pSMAD2)水平或α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平相关联。

104.根据权利要求57至82、96和99至103中任一项所述的方法，其中所述癌症表现出排除或沙漠表型。

105.根据权利要求56至87和89至103中任一项所述的方法，其进一步包括向所述受试者施用一种或多种额外的治疗剂。

106.根据权利要求105所述的方法，其中所述额外的治疗剂中至少一者为抗癌剂。

107.根据权利要求106所述的方法，其中所述额外的治疗剂中至少一者为紫杉醇或abraxane或其药学上可接受的盐。

108.根据权利要求105至107中任一项所述的方法，其中所述额外的治疗剂中至少一者为免疫检查点抑制剂。

109.根据权利要求105至108中任一项所述的方法，其中所述额外的治疗剂中至少一者为PD-1或PD-L1抑制剂。

110.根据权利要求56至87及89至109中任一项所述的方法，其进一步包括以放射疗法或手术治疗该受试者。

111.一种增强有其需要的受试者中一种或多种用于治疗癌症的治疗剂的活性的方法，其包括向所述受试者施用有效量的根据权利要求1至53中任一项所述的化合物、或其药学上可接受的盐或根据权利要求54所述的药物组合物。

112.根据权利要求111所述的方法，其进一步包括向所述受试者施用一种或多种治疗剂。

113.根据权利要求111或112所述的方法，其中所述治疗剂中至少一者为抗癌剂。

114.根据权利要求111至113中任一项所述的方法，其中治疗剂中至少一者为紫杉醇或abraxane或其药学上可接受的盐。

115.根据权利要求111至114中任一项所述的方法，其中治疗剂中至少一者为免疫检查点抑制剂。

116.根据权利要求111至115中任一项所述的方法，其中额外的治疗剂中至少一者为PD-1或PD-L1抑制剂。

117.一种式Int-A5化合物，

或其盐，其中：

R¹为C₁-C₅烷基或C₃-C₅碳环或卤素；

R³为-H、-F或-Cl；且

R⁴为-H、卤素或任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基。

118.一种制备根据权利要求117所述的化合物或其盐的方法，其包括：

(a)提供式Int-A4化合物：

且使用钯催化的还原反应将叠氮官能团还原成氨基官能团，

其中：

R¹为C₁-C₅烷基或C₃-C₅碳环或卤素；

R³为-H、-F或-Cl；且

R⁴为-H、卤素或任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或C₃碳环。

119.根据权利要求118所述的方法，其进一步包括通过将式Int-A3化合物：

用叠氮化钠处理，制备式Int-A4化合物，其中R¹、R³和R⁴如对于Int-A4化合物所定义者。

120.根据权利要求119所述的方法，其进一步包括通过将式Int-A2化合物：

用三氯氧化磷处理，制备式Int-A3化合物，其中R¹、R³和R⁴如对于式Int-A4化合物所定义者。

121.根据权利要求120所述的方法，其进一步包括通过将式Int-A1化合物：

或其盐在酸溶液中用亚硝酸钠处理，制备化合物Int-A2，其中R¹、R³和R⁴如对于式Int-A4化合物所定义者。

122.一种式Int-B2化合物，

或其盐，其中：

R¹为C₁-C₅烷基或C₃-C₅碳环或卤素；

R³为-H、-F或-Cl；

R⁴为-H、卤素或任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基；且

R⁵为-H、-F或任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基。

123.一种制备根据权利要求122所述的化合物或其盐的方法，其包括：

(a)提供式IntB-1化合物：

且将其与式Int-A5化合物：

在钯偶联催化剂的存在下反应，

其中：

R¹为C₁-C₅烷基或C₃-C₅碳环或卤素；

R³为-H、-F或-Cl；

R⁴为-H、卤素或任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基；且

R⁵为-H、-F或任选地被一个或多个-F取代的C₁-C₃烷基或环丙基。