CN116519646A - 一种单分子检测校准方法及检测校准电路 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种单分子检测校准方法及检测校准电路,所述检测校准方法包括如下步骤:S1、检测电路自检;S2、激光器的功率调节;及S3、对和样本孵育后的微球溶液进行检测;其中,所述检测电路包括激光光源、荧光探测器、散射光探测器及处理单元,所述荧光探测器依次通过第一跨阻放大模块、第一交流耦合模块及第一放大模块连接至所述处理单元,所述散射光探测器依次通过第二跨阻放大模块、第二交流耦合模块及第二放大模块连接至所述处理单元,本发明的单分子检测校准方法及检测校准电路,能够定量检测目标单分子的浓度,同时准确性较高,且能够快速可靠地校准检测电路。
Description
技术领域
本发明涉及生物检测领域,具体涉及一种单分子检测校准方法及检测校准电路。
背景技术
单分子检测达到了分子检测灵敏度的极限,能检测非均匀聚集体中的单个分子,并对它们进行识别、分类和定量描述。单分子检测时,配合化学发光技术,通过光学检测机构探测目标物上的荧光信号,将光信号处理电信号,从而能够定量或定性地检测目标物中的单分子含量,例如进行免疫蛋白检测。然而,每个检测环境中存在环境光且环境光存在差异,激光器的功率会过小或过大,使得捕捉到的荧光信号会受到环境光干扰而较难捕捉或不够灵敏,导致检测结果存在误差。虽然,目前可以通过手动调激光器功率,但效率较低,可靠性不高。
发明内容
针对上述技术问题,本发明提供一种单分子检测校准方法及检测校准电路,能够定量检测目标单分子的浓度,同时准确性较高,且能够快速可靠地校准检测电路。
本发明采用如下技术方案:
一种单分子检测校准方法,包括如下步骤:
S1、检测电路自检;
S2、激光器的功率调节;及
S3、对和样本孵育后的微球溶液进行检测;
其中,所述检测电路包括激光光源、荧光探测器、散射光探测器及处理单元,所述荧光探测器依次通过第一跨阻放大模块、第一交流耦合模块及第一放大模块连接至所述处理单元,所述散射光探测器依次通过第二跨阻放大模块、第二交流耦合模块及第二放大模块连接至所述处理单元;
步骤S1具体包括:
S11、所述处理单元发出第一标准信号,所述第一标准信号转换为第一脉冲信号并送入所述第一交流耦合模块并经所述第一放大模块输出至所述处理单元,判断所述第一放大模块的输出是否满足第一预设标准;
S12、所述处理单元发出第二标准信号,所述第二标准信号转换为第二脉冲信号并送入所述第二交流耦合模块并经所述第二放大模块输出至所述处理单元,判断所述第二放大模块的输出是否满足第二预设标准;
当步骤S11和S12的判断结果均为真时,执行步骤S2或S3;
步骤S2具体包括:
S21、所述第一跨阻放大模块的输出端还依次通过第三放大模块连接至所述处理单元,以将所述荧光探测器获取的光信号中的环境光和杂散光转换为偏置电压信号并放大处理后送至所述处理单元,获得第一偏置电压信号值;
S22、所述第二跨阻放大模块的输出端还依次通过第四放大模块连接至所述处理单元,以将所述散射光探测器获取的光信号中的环境光和杂散光转换为偏置电压信号并放大处理后送至所述处理单元,获得第二偏置电压信号值;
S23、根据所述第一偏置电压信号值和/或所述第二偏置电压信号值调节所述激光光源的功率。
在一优选的实施例中,步骤S1、S2和S3顺序执行。
在一优选的实施例中,步骤S11中,若判断结果为否,则调节所述第一放大模块的放大系数;步骤S12中,若判断结果为否,则调节所述第二放大模块的放大系数。
在一更优选的实施例中,步骤S11中,所述处理单元将所述第一标准信号发送至第一可控开关,再经过第五放大模块转换为所述第一脉冲信号,所述第五放大模块的输出端和所述第一交流耦合模块的输入端连接;步骤S21中,所述处理单元将所述第二标准信号发送至第二可控开关,再经过第六放大模块转换为所述第二脉冲信号,所述第六放大模块的输出端和所述第二交流耦合模块的输入端连接。
在一优选的实施例中,步骤S3具体包括
S31、使所述荧光探测器和所述散射光探测器同步且逐个检测微球;
S32、所述处理单元根据所述第一放大模块的输出获取带有荧光的微球数量;
S33、所述处理单元根据所述第二放大模块的输出获取不带荧光而散射激光的微球数量;
S34、所述处理单元根据带有荧光的微球数量和不带荧光而散射激光的微球数量计算出带有荧光的微球的浓度。
本发明还采用如下技术方案:
一种单分子检测校准电路,包括激光光源、荧光探测器、散射光探测器及处理单元,所述荧光探测器依次通过第一跨阻放大模块、第一交流耦合模块及第一放大模块连接至所述处理单元,所述散射光探测器依次通过第二跨阻放大模块、第二交流耦合模块及第二放大模块连接至所述处理单元;
所述单分子检测校准电路还包括第一可控开关和第五放大模块,所述第一可控开关连接于所述处理单元的标准信号输出端口和所述第五放大模块的输入端之间,所述第五放大模块的输出端和所述第一交流耦合模块的输入端连接;
所述单分子检测校准电路还包括第二可控开关和第六放大模块,所述第二可控开关连接于所述处理单元的标准信号输出端口和所述第六放大模块的输入端之间,所述第六放大模块的输出端和所述第二交流耦合模块的输入端连接。
在一优选的实施例中,所述单分子检测校准电路还包括第三放大模块,所述第三放大模块的输入端和所述第一跨阻放大模块的输出端连接,所述第三放大模块的输出端连接于所述处理单元连接;所述单分子检测校准电路还包括第四放大模块,所述第四放大模块的输入端和所述第二跨阻放大模块的输出端连接,所述第四放大模块的输出端连接于所述处理单元连接。
在一优选的实施例中,所述第三放大模块的输出端通过第一ADC模块连接所述处理单元;所述第四放大模块的输出端通过第二ADC模块连接所述处理单元。
在一优选的实施例中,所述激光光源和所述处理单元的控制输出端口连接。
在另一优选的实施例中,所述单分子检测校准电路还包括用于将所述第一放大模块输出的信号整形为方波的第一比较模块,所述第一比较模块的输入端和所述第一放大模块的输出端连接,所述第一比较模块的输出端和所述处理单元连接;所述单分子检测校准电路还包括用于将所述第二放大模块输出的信号整形为方波的第二比较模块,所述第二比较模块的输入端和所述第二放大模块的输出端连接,所述第二比较模块的输出端和所述处理单元连接;所述处理单元根据所述第一比较模块和所述第二比较模块输出的方波分别获取据带有荧光的微球数量和不带荧光散射激光的微球数量。
在一优选的实施例中,所述第一放大模块和所述第二放大模块分别包括依次串接的反相放大器和同相放大器;所述第一交流耦合模块和所述第二交流耦合模块分别包括电容;所述第一跨阻放大模块和所述第二跨阻放大模块分别包括放大器及和所述放大器并联的电阻;所述荧光探测器包括雪崩光电二极管,所述散射光探测器包括光敏二极管。
本发明采用以上方案,相比现有技术具有如下优点:
本发明的单分子检测校准方法,先进行检测电路自检以确保第一放大模块和第二放大模块的功能正常且满足要求,然后根据环境光自动调节进行激光器的功率,确保放大电路功能正常且激光器功率合适后,再对和样本孵育后的微球溶液进行检测,能够定量检测目标单分子的浓度,同时准确性较高,其中检测电路的校准调节能够快速可靠地进行,能够自动进行自检和激光功率调节。
附图说明
为了更清楚地说明本发明的技术方案,下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为根据本发明实施例1的检测校准电路的示意图;
图2为根据本发明实施例1的单分子检测校准方法流程图;
图3为根据本发明实施例1的检测电路自检流程图;
图4为根据本发明实施例1的激光器进行功率调节的流程图;
图5为根据本发明实施例1的对和样本孵育后的微球溶液进行检测的流程图;
图6为根据本发明实施例1检测微球溶液的示意图;
图7为根据本发明实施例2的检测校准电路的示意图。
其中,
1、第一放大模块;2、第二放大模块;3、第一跨阻放大模块;4、第二跨阻放大模块;
8、微流控芯片;91、激光光源;92、反射镜;921、透光孔;922、第一反射面;93、二向色镜;931、第二反射面;94、第一透镜;95、第二透镜;97、第三透镜;99、荧光滤光片;991、发射光滤光片;992、第一遮光材料;993、第二遮光材料;10、柱透镜;101、激发光斑。
具体实施方式
下面结合附图对本发明的较佳实施例进行详细阐述,以使本发明的优点和特征能更易于被本领域的技术人员理解。在此需要说明的是,对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明,但并不构成对本发明的限定。
实施例1
参照图1所示,本实施例提供一种单分子检测校准电路,其用于定性检测免疫蛋白分子。该单分子检测校准电路包括激光光源LASER、荧光探测器APD、散射光探测器PD及处理单元MCU,荧光探测器APD依次通过第一跨阻放大模块3、第一交流耦合模块cap1及第一放大模块1连接至处理单元MCU,散射光探测器PD依次通过第二跨阻放大模块4、第二交流耦合模块cap2及第二放大模块2连接至处理单元MCU,激光光源LASER和处理单元MCU的控制输出端口连接。其中,处理单元MCU具体为MCU芯片。
进一步地,第一放大模块1包括依次串接的反相放大器AMP7和同相放大器AMP8,第二放大模块2包括依次串接的反相放大器AMP2和同相放大器AMP3;第一交流耦合模块cap1和第二交流耦合模块cap2分别包括电容;第一跨阻放大模块3包括放大器AMP6及和放大器AMP6并联的电阻RESISTOR,第二跨阻放大模块4分别包括放大器AMP1及和放大器AMP1并联的电阻RESISTOR;荧光探测器APD为雪崩光电二极管,散射光探测器PD为光敏二极管。
该单分子检测校准电路还包括第一可控开关SWITCH2、第三放大模块AMP9、第四放大模块AMP5、第五放大模块AMP10、第二可控开关SWITCH1和第六放大模块AMP4。其中,放大模块AMP4、AMP5、AMP9及AMP10均采用反向放大器。
进一步地,第一可控开关SWITCH2连接于处理单元MCU的标准信号输出端口和第五放大模块AMP10的输入端之间,第五放大模块AMP10的输出端和第一交流耦合模块cap1的输入端连接;第二可控开关SWITCH1连接于处理单元MCU的标准信号输出端口和第六放大模块AMP4的输入端之间,第六放大模块AMP4的输出端和第二交流耦合模块cap2的输入端连接。
第三放大模块AMP9的输入端和第一跨阻放大模块3的输出端连接,第三放大模块AMP9的输出端连接于处理单元MCU连接;第四放大模块AMP5的输入端和第二跨阻放大模块4的输出端连接,第四放大模块AMP5的输出端连接于处理单元MCU连接。具体地,第三放大模块AMP9的输出端通过第一ADC模块连接处理单元MCU,第四放大模块AMP5的输出端通过第二ADC模块连接处理单元MCU。
参照图2至图5所示,上述的单分子检测电路的单分子检测校准方法包括如下步骤:S1、检测电路自检;S2、激光器的功率调节;及S3、对和样本孵育后的微球溶液进行检测。
如图3所示,步骤S1具体包括:
S11、处理单元MCU发出第一标准信号,第一标准信号转换为第一脉冲信号并送入第一交流耦合模块cap1并经第一放大模块1输出至处理单元MCU,判断第一放大模块1的输出是否满足第一预设标准;第一标准信号具体为PWM信号。
S12、处理单元MCU发出第二标准信号,第二标准信号转换为第二脉冲信号并送入第二交流耦合模块cap2并经第二放大模块2输出至处理单元MCU,判断第二放大模块2的输出是否满足第二预设标准;第二标准信号具体为PWM信号。
更具体地,步骤S11中,处理单元MCU将第一标准信号发送至第一可控开关SWITCH2,再经过第五放大模块AMP10转换为第一脉冲信号,第五放大模块AMP10的输出端和第一交流耦合模块cap1的输入端连接;步骤S21中,处理单元MCU将第二标准信号发送至第二可控开关SWITCH1再经过第六放大模块AMP4转换为第二脉冲信号,第六放大模块AMP4的输出端和第二交流耦合模块cap2的输入端连接。
当步骤S11和S12的判断结果均为真时,执行接下来的步骤S2或S3;
步骤S11中,若判断结果为否,则调节第一放大模块1的放大系数;步骤S12中,若判断结果为否,则调节第二放大模块2的放大系数。
如图4所示,步骤S2具体包括:
S21、第一跨阻放大模块3的输出端还依次通过第三放大模块AMP9连接至处理单元MCU,以将荧光探测器APD获取的光信号中的环境光和杂散光转换为偏置电压信号并放大处理后送至处理单元MCU,获得第一偏置电压信号值;
S22、第二跨阻放大模块4的输出端还依次通过第四放大模块AMP5连接至处理单元MCU,以将散射光探测器PD获取的光信号中的环境光和杂散光转换为偏置电压信号并放大处理后送至处理单元MCU,获得第二偏置电压信号值;
S23、根据第一偏置电压信号值和/或第二偏置电压信号值调节激光光源LASER的功率。
更具体地,步骤S21中,荧光探测器APD采集到光信号后经第一跨阻放大器3转换为电信号,环境光和杂散光将产生偏置电压;第三放大模块AMP9的输出端通过第一ADC模块连接处理单元MCU;步骤S22中,散射光探测器PD采集到光信号后经第二跨阻放大器4转换为电信号,环境光和杂散光将产生偏置电压;第四放大模块AMP5的输出端通过第二ADC模块连接处理单元MCU;步骤S23中,处理单元MCU控制输出端口通过RS232通信线连接至激光光源LASER。
步骤S1、S2和S3顺序执行。
如图5所示,步骤S3具体包括
S31、使荧光探测器APD和散射光探测器PD同步且逐个检测微球;
S32、处理单元MCU根据第一放大模块1的输出获取带有荧光的微球数量;
S33、处理单元MCU根据第二放大模块2的输出获取不带荧光而散射激光的微球数量;
S34、处理单元MCU根据带有荧光的微球数量和不带荧光而散射激光的微球数量计算出带有荧光的微球的浓度。
如图6所示,上述的单分子检测校准电路及单分子检测校准方法基于流式检测技术,微球溶液中的微球逐个流过检测位点,检测位点处的微球上的荧光或散射的激光被荧光探测器APD或散射光探测器PD捕捉到,并仅由上述检测校准电路处理后对带荧光的微球、不带荧光的微球进行计数;本实施例中,单分子具体为免疫蛋白分子。在检测微球之前,需先提供微球溶液,微球溶液中包含多个微球,微球的表面偶联有蛋白捕获抗体,且微球经过和样本及荧光物质偶联抗体的混合孵育以及和发光底物的反应。进一步地,微球为磁性微球或磁珠,通过双抗夹心法原理,其表面可吸附有免疫蛋白,和发光底物反应后,和免疫蛋白偶联的荧光物质可在激光的照射下发出荧光。
参照图6所示,荧光探测器APD和散射光探测器PD同步并逐个检测微球,具体步骤如下:激光光源LASER发出发射光束并透过柱透镜10后,穿过反射镜92的透光孔921,然后再透过荧光滤光片99,接着经二向色镜93反射再经过第一透镜94后聚焦到微流控芯片8的检测微通道上。微球沿微流控芯片8的检测微通道流过激发光斑101,表面偶联有目标蛋白的微球被激发出荧光,表面未偶联目标蛋白的微球将发射光束散射形成散射光,散射光的波长和激光相同,荧光的波长比激光长。荧光和散射光向各个方向发射,其中部分光被第一透镜94收集后打到二向色镜93上。由于荧光波长较长,可以透过二向色镜93,然后被发射光滤光片991再次过滤,以去除发射光。荧光被第二透镜95聚集在荧光探测器APD上。散射光由于波长较短,会被二向色镜93反射,通过荧光滤光片99后再被反射镜92反射,然后透过第三透镜97聚集到散射光探测器PD上。该系统中,微球逐个通过激光光斑101并利用荧光探测器APD和散射光探测器PD进行探测,减少了微球的曝光时间,信噪比较高,且检测的数值更加准确。
本实施例为避免分析失效的信号,首先对检测电路进行自检,处理单元MCU将第一标准信号发送至第一可控开关SWITCH2,再经过第五放大模块AMP10转换为第一脉冲信号,第五放大模块AMP10的输出端和第一交流耦合模块cap1的输入端连接,经第一放大模块1输出至处理单元MCU,判断第一放大模块1是否符合预设标准,若不符合标准,则调节第一放大模块1的系数;处理单元MCU将第二标准信号发送至第二可控开关SWITCH1,再经过第六放大模块AMP4转换为第二脉冲信号,第六放大模块AMP4的输出端和第二交流耦合模块cap2的输入端连接,经第二放大模块2输出至处理单元MCU,判断第二放大模块2是否符合预设标准,若不符合标准,则调节第二放大模块2的系数;
若符合标准,则通过处理单元MCU获得的偏置电压信号值调节激光光源LASER的功率。采集回路可以将光路信号的环境光及有用信号同时采集,通过处理单元MCU判断采集结果判断有用信号电平是否在可操作的范围内,并可以自动调节激光光源的功率,保证采集的有用信号不失真,放大区间合理,将检测光的功率调节到最好状态,选择最优的环境光水平得到最优的采集信号,提高整个光路系统的电信号信噪比,给出的信号便于MCU处理,整个自检校准完全自动判断,表现出高效、可靠、稳定的特性,从而提升质量和效率;最后对和样本孵育后的微球溶液进行检测,第一放大模块1输出获取带有荧光的微球数量,第二放大模块2输出获取不带有荧光而散射激光的微球数量,处理单元MCU计算带有荧光的微球的浓度,能够定量检测目标单分子的浓度,同时准确性较高。
本实施例从荧光探测器APD或散射光探测器PD引出一段电路经反向处理成系统能处理的电压,进行ADC(模数转换器)实时采集杂散光及有用信号,为了保证采集的有用信号不失真,处理单元MCU将采集到的杂散光电平判断后通过对激光光源LASER功率调节。同时通过处理单元MCU发出的标准信号,标准信号转换为脉冲信号之后送入交流耦合模块并经放大模块输出至处理单元,判断输出值是否满足预设标准,实现自检确保放大电路功能正常。
本实施例利用高灵敏度的采集闭环处理回路实现了采集,检测电路自检能够自动判断放大模块的输出是否满足预设标准,还可以自动进行激光器的功率调节,大大提高电路的校准效率,实现了整个采样系统电路的自校准。
实施例2
参照图7所示,本实施例和实施例1的区别在于该单分子检测校准电路还包括用于将第一放大模块1输出的信号整形为方波的第一比较模块CMP2以及用于将第二放大模块2输出的信号整形为方波的第二比较模块CMP1,第一比较模块CMP2的输入端和第一放大模块1的输出端连接,第一比较模块CMP2的输出端和处理单元MCU连接;第二比较模块CMP1的输入端和第二放大模块2的输出端连接,第二比较模块CMP1的输出端和处理单元MCU连接。处理单元MCU根据第一比较模块CMP2和第二比较模块CMP1输出的方波分别获取据带有荧光的微球数量和不带荧光散射激光的微球数量。该实施例能够节约处理单元MCU的算例,减小内存占用,便于系统轻量化。
上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点,是一种优选的实施例,其目的在于熟悉此项技术的人士能够了解本发明的内容并据以实施,并不能以此限定本发明的保护范围。凡根据本发明的原理所作的等效变换或修饰,都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种单分子检测校准方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、检测电路自检;
S2、激光器的功率调节;及
S3、对和样本孵育后的微球溶液进行检测;
其中,所述检测电路包括激光光源、荧光探测器、散射光探测器及处理单元,所述荧光探测器依次通过第一跨阻放大模块、第一交流耦合模块及第一放大模块连接至所述处理单元,所述散射光探测器依次通过第二跨阻放大模块、第二交流耦合模块及第二放大模块连接至所述处理单元;
步骤S1具体包括:
S11、所述处理单元发出第一标准信号,所述第一标准信号转换为第一脉冲信号并送入所述第一交流耦合模块并经所述第一放大模块输出至所述处理单元,判断所述第一放大模块的输出是否满足第一预设标准;
S12、所述处理单元发出第二标准信号,所述第二标准信号转换为第二脉冲信号并送入所述第二交流耦合模块并经所述第二放大模块输出至所述处理单元,判断所述第二放大模块的输出是否满足第二预设标准;
当步骤S11和S12的判断结果均为真时,执行步骤S2或S3;
步骤S2具体包括:
S21、所述第一跨阻放大模块的输出端还依次通过第三放大模块连接至所述处理单元,以将所述荧光探测器获取的光信号中的环境光和杂散光转换为偏置电压信号并放大处理后送至所述处理单元,获得第一偏置电压信号值;
S22、所述第二跨阻放大模块的输出端还依次通过第四放大模块连接至所述处理单元,以将所述散射光探测器获取的光信号中的环境光和杂散光转换为偏置电压信号并放大处理后送至所述处理单元,获得第二偏置电压信号值;
S23、根据所述第一偏置电压信号值和/或所述第二偏置电压信号值调节所述激光光源的功率。
2.根据权利要求1所述的单分子检测校准方法,其特征在于,步骤S1、S2和S3顺序执行。
3.根据权利要求1所述的单分子检测校准方法,其特征在于,步骤S11中,若判断结果为否,则调节所述第一放大模块的放大系数;步骤S12中,若判断结果为否,则调节所述第二放大模块的放大系数。
4.根据权利要求1所述的单分子检测校准方法,其特征在于,步骤S11中,所述处理单元将所述第一标准信号发送至第一可控开关,再经过第五放大模块转换为所述第一脉冲信号,所述第五放大模块的输出端和所述第一交流耦合模块的输入端连接;步骤S21中,所述处理单元将所述第二标准信号发送至第二可控开关,再经过第六放大模块转换为所述第二脉冲信号,所述第六放大模块的输出端和所述第二交流耦合模块的输入端连接。
5.根据权利要求1所述的单分子检测校准方法,其特征在于,步骤S3具体包括
S31、使所述荧光探测器和所述散射光探测器同步且逐个检测微球;
S32、所述处理单元根据所述第一放大模块的输出获取带有荧光的微球数量;
S33、所述处理单元根据所述第二放大模块的输出获取不带荧光而散射激光的微球数量;
S34、所述处理单元根据带有荧光的微球数量和不带荧光而散射激光的微球数量计算出带有荧光的微球的浓度。
6.一种单分子检测校准电路,其特征在于,包括激光光源、荧光探测器、散射光探测器及处理单元,所述荧光探测器依次通过第一跨阻放大模块、第一交流耦合模块及第一放大模块连接至所述处理单元,所述散射光探测器依次通过第二跨阻放大模块、第二交流耦合模块及第二放大模块连接至所述处理单元;
所述单分子检测校准电路还包括第一可控开关和第五放大模块,所述第一可控开关连接于所述处理单元的标准信号输出端口和所述第五放大模块的输入端之间,所述第五放大模块的输出端和所述第一交流耦合模块的输入端连接;
所述单分子检测校准电路还包括第二可控开关和第六放大模块,所述第二可控开关连接于所述处理单元的标准信号输出端口和所述第六放大模块的输入端之间,所述第六放大模块的输出端和所述第二交流耦合模块的输入端连接。
7.根据权利要求6所述的单分子检测校准电路,其特征在于,所述单分子检测校准电路还包括第三放大模块,所述第三放大模块的输入端和所述第一跨阻放大模块的输出端连接,所述第三放大模块的输出端连接于所述处理单元连接;所述单分子检测校准电路还包括第四放大模块,所述第四放大模块的输入端和所述第二跨阻放大模块的输出端连接,所述第四放大模块的输出端连接于所述处理单元连接;所述第三放大模块的输出端通过第一ADC模块连接所述处理单元;所述第四放大模块的输出端通过第二ADC模块连接所述处理单元。
8.根据权利要求6或7所述的单分子检测校准电路,其特征在于,所述激光光源和所述处理单元的控制输出端口连接。
9.根据权利要求6所述的单分子检测校准电路,其特征在于,所述单分子检测校准电路还包括用于将所述第一放大模块输出的信号整形为方波的第一比较模块,所述第一比较模块的输入端和所述第一放大模块的输出端连接,所述第一比较模块的输出端和所述处理单元连接;所述单分子检测校准电路还包括用于将所述第二放大模块输出的信号整形为方波的第二比较模块,所述第二比较模块的输入端和所述第二放大模块的输出端连接,所述第二比较模块的输出端和所述处理单元连接;所述处理单元根据所述第一比较模块和所述第二比较模块输出的方波分别获取据带有荧光的微球数量和不带荧光散射激光的微球数量。
10.根据权利要求6所述的单分子检测校准电路,其特征在于,所述第一放大模块和所述第二放大模块分别包括依次串接的反相放大器和同相放大器;所述第一交流耦合模块和所述第二交流耦合模块分别包括电容;所述第一跨阻放大模块和所述第二跨阻放大模块分别包括放大器及和所述放大器并联的电阻;所述荧光探测器包括雪崩光电二极管,所述散射光探测器包括光敏二极管。
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