CN116134148A - 用于判定骨骼肌成肌细胞的多核化状态的系统 - Google Patents
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Abstract
本发明的目的在于提供稳定且高效的、用于判定骨骼肌成肌细胞的多核化状态的手段。通过提供用于判定骨骼肌成肌细胞的多核化状态的系统等,从而实现上述课题,所述系统包含:收纳部,其收纳包含骨骼肌成肌细胞的细胞培养基材;测定部,其测定骨骼肌成肌细胞的形状;以及分析部,其基于参数算出各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量。
Description
技术领域
本发明涉及用于判定骨骼肌成肌细胞的多核化状态的系统等。
背景技术
近年来,为了修复损伤的组织等,进行了移植各种细胞的尝试。例如,为了修复因心绞痛、心肌梗塞等缺血性心脏病而损伤的心肌组织,尝试了利用胎儿心肌细胞、骨骼肌成肌细胞、间充质干细胞、心脏干细胞、ES细胞、iPS细胞等(非专利文献1)。
作为上述尝试的一环,开发了:利用支架而形成的细胞结构物;将细胞形成为片状而得的片状细胞培养物(非专利文献2)。
片状细胞培养物能够使所期望的细胞大量地固定于损伤部位,并且能够根据受体组织的特性移植已适度组织化的细胞群,因此对于损伤的组织等的修复极为有用。
片状细胞培养物通过下述方式制备:将所期望的细胞在细胞培养基材的表面上培养,形成由细胞构成的层结构,针对由此得到的片状的培养物,以不破坏其结构的方式从细胞培养基材剥离。
近年来,已知片状细胞培养物的品质依赖于构成片状细胞培养物的细胞的性质而会产生偏差。例如报道了,在骨骼肌成肌细胞的片状细胞培养物中,当将骨骼肌成肌细胞解离、并将解离的细胞在培养基中孵育时,在更多地形成多核细胞的组中,产生更多的促进心肌再生的细胞因子(专利文献1)。该文献中报道,基于上述见解,开发了能够提供品质高的片状细胞培养物的评价方法。
现有技术文献
专利文献
专利文献1:WO2012/023562
非专利文献
非专利文献1:Haraguchi Y.等人,StemCells Transl.Med.,1(2),136-141(2012)
非专利文献2:Sawa Y.等人,Surg.Today,42(2),181-184(2012)
发明内容
发明所要解决的课题
本发明的目的在于提供稳定且高效的、用于判定骨骼肌成肌细胞的多核化状态的手段。
用于解决课题的手段
本申请的发明人在研究用于防止片状细胞培养物的品质产生偏差的方法的过程中,认为在判定骨骼肌成肌细胞的多核化状态时,不得不依赖于操作者对染色的细胞的目视判断,在操作者之间目视判断的结果产生偏差,由此,骨骼肌成肌细胞的多核化状态的判定会产生偏差。于是,为了提供稳定且高效的、用于判定骨骼肌成肌细胞的多核化状态的手段而进行了深入研究,结果发现,通过测定骨骼肌成肌细胞的形状、并基于参数算出各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量,从而能够判定骨骼肌成肌细胞的多核化状态,基于该见解进一步持续研究,结果完成了本发明。
即本发明涉及以下的内容。
[1]用于判定骨骼肌成肌细胞的多核化状态的系统,其包含:收纳部,其收纳包含骨骼肌成肌细胞的细胞培养基材;测定部,其测定骨骼肌成肌细胞的形状;以及分析部,其基于参数算出各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量。
[2]如[1]所述的系统,其中,骨骼肌成肌细胞的形状为骨骼肌成肌细胞及核的轮廓的形状。
[3]如[1]或[2]所述的系统,其中,测定部包含拍摄部。
[4]如[2]或[3]所述的系统,其中,参数为骨骼肌成肌细胞的轮廓的形状及/或位置、核的轮廓的形状及/或位置、以及/或者骨骼肌成肌细胞或核的轮廓与骨骼肌成肌细胞或核的轮廓之间的距离。
[5]如[3]或[4]所述的系统,其中,分析部在来自拍摄部的图像数据中区分出骨骼肌成肌细胞及核的轮廓的形状,基于参数算出各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量。
[6]如[1]~[5]中任一项所述的系统,其中,骨骼肌成肌细胞及/或核未被染色。
[7]如[1]~[6]中任一项所述的系统,其中,其还包含学习部,所述学习部基于来自分析部的信息对参数的过与不足进行提取。
[8]如[7]所述的系统,其中,其还包含更新部,所述更新部基于由学习部提取到的参数的过与不足来更新参数。
[9]用于判定骨骼肌成肌细胞的多核化状态的方法,其包括:提供包含骨骼肌成肌细胞的细胞培养基材的步骤;测定骨骼肌成肌细胞的形状的步骤;以及基于参数算出各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量的步骤。
发明的效果
根据本发明,能够提供稳定且高效的、用于判定骨骼肌成肌细胞的多核化状态的手段。特别地,根据本发明,通过测定骨骼肌成肌细胞的形状、以及基于参数算出各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量,从而能够使得以往不得不依赖于操作者对染色的细胞的目视判断、在操作者之间目视判断的结果会产生偏差的多核化状态的判定系统化,实现操作的稳定化及效率化。另外,根据本发明,也能够省略以往的细胞培养后的细胞染色及细胞观察的过程,在细胞培养时直接地判定骨骼肌成肌细胞的多核化状态。由此,根据本发明,通过上述系统化,能够实现片状细胞培养物的优异的品质管理,稳定且高效地供给高品质的片状细胞培养物。
附图说明
[图1]图1示出一个方式中的、本发明的系统的处理的流程图。
本说明书中除非另有定义,则本说明书中使用的全部技术术语及科学术语具有与本领域技术人员通常理解的含义相同的含义。本说明书中参考的全部专利、申请及其他出版物、信息通过参考而整体援引至本说明书中。
具体实施方式
[用于判定骨骼肌成肌细胞的多核化状态的系统]
本发明的一个方面涉及用于判定骨骼肌成肌细胞的多核化状态的系统(有时记载为“本发明的系统”),其包含:收纳部,其收纳包含骨骼肌成肌细胞的细胞培养基材;测定部,其测定骨骼肌成肌细胞的形状;以及分析部,其基于参数算出各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量。本发明的系统可以还包含学习部,所述学习部基于来自分析部的信息对参数的过与不足进行提取。本发明的系统可以还包含更新部,所述更新部基于由学习部提取到的参数的过与不足来更新参数。
本发明中,“骨骼肌成肌细胞”是指从骨骼肌组织中分离的任意成肌细胞。骨骼肌成肌细胞为单核的细胞,是成为肌纤维的来源的细胞。骨骼肌成肌细胞彼此进行细胞融合,向多核细胞(或肌管细胞)分化,由此形成肌纤维。骨骼肌成肌细胞的融合可以为同种细胞间的融合,也可以为异种细胞间的融合。本发明中,方便起见,骨骼肌成肌细胞有时包括相同细胞彼此进行细胞融合而形成的多核细胞。
骨骼肌组织可以来自任意的生物。所述生物没有限定地包含例如人类、非人类灵长类、啮齿类(小鼠、大鼠、仓鼠、豚鼠等)、犬、猫、猪、马、牛、山羊、羊等。在将从骨骼肌组织分离的细胞用于移植的情况下,本发明中使用的骨骼肌组织通过使用自体细胞,能够避免排斥反应,所述自体细胞是使用从移植对象(受体)自身采集的骨骼肌组织进行分离而得的。然而,也可以利用源自异种的细胞、源自同种异体的细胞,所述细胞是使用异种、同种异体的骨骼肌组织进行分离而得的。
本发明中,“细胞培养基材”只要是骨骼肌成肌细胞能够在其上形成细胞培养物的基材即可,没有特别限定,例如,包括各种材质及/或形状的容器、容器中的固态或半固态的表面等。容器优选为不使培养液等液体透过的结构·材料。作为该材料,没有限定,例如,可举出聚乙烯、聚丙烯、Teflon(注册商标)、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚甲基丙烯酸甲酯、尼龙6,6、聚乙烯醇、纤维素、硅、聚苯乙烯、玻璃、聚丙烯酰胺、聚二甲基丙烯酰胺、金属(例如,铁、不锈钢、铝、铜、黄铜)等。另外,容器优选具有至少一个平坦的面。作为该容器的例子,没有限定,例如,可举出具备由可形成细胞培养物的细胞培养基材构成的底面、和非透液性的侧面的培养容器。作为该培养容器的特定例子,可没有限定地举出细胞培养皿、细胞培养瓶等。容器的底面可以为透明,也可以为不透明。容器的底面为透明时,能够从容器的背侧进行细胞的观察、计数等。另外,容器可以在其内部具有固态或半固态的表面。作为固态的表面,可举出上述那样的各种材料的板、容器等,作为半固态的表面,可举出凝胶、软质的聚合物基质等。细胞培养基材可以使用上述材料制作,也可以利用市售的基材。
本发明中,“收纳部”只要是能够收纳包含骨骼肌成肌细胞的细胞培养基材的部件即可,可以为任意的部件,例如,可以具有能够控制细胞培养基材的周边环境的控制部。所谓周边环境,例如可举出温度、压力、湿度、CO2浓度等,但不限于此。因此,控制部可以具有输入应当控制的设定的输入部、预先记录设定值的记录部、测定目前的周边环境的状态的测定部、将由测定部测得的信息等输出的输出部等。另外,该控制部可以与分析部共有CPU、输入部、输出部及/或记录部。
一个方式中,收纳部能够将细胞培养基材周边保持为适于细胞培养的环境。因此,该方式中的收纳部能够作为细胞培养孵育箱发挥功能。在该方式中,能够将收纳部用作孵育箱来进行细胞培养,与孵育并行地判定骨骼肌成肌细胞的多核化状态。
本发明中,“骨骼肌成肌细胞的形状”可以是捕捉到细胞、细胞膜、细胞质、细胞器、核等的结构性特征的任意形状,例如,为骨骼肌成肌细胞及核的轮廓的形状。骨骼肌成肌细胞及/或核可以未被染色,也可以被染色。
本发明中,“测定部”只要是能够测定骨骼肌成肌细胞的形状的部件即可,可以为任意的部件,例如,包含拍摄装置、透射光检测器、色相色差计等。从数据的通用性、处理的多样性等的观点考虑,测定部优选包含拍摄部,骨骼肌成肌细胞的形状作为图像数据被取得。
本发明中,“拍摄部”只要是能够拍摄骨骼肌成肌细胞的形状的部件即可,可以为任意的部件,例如,包括安装了相机的光学显微镜。光学显微镜只要是例如明视场显微镜、暗视场显微镜、相位差显微镜、微分干涉显微镜、偏光显微镜、荧光显微镜、共聚焦激光显微镜、全反射照明荧光显微镜、拉曼显微镜等适于拍摄骨骼肌成肌细胞的形状的显微镜,则可以为任意的显微镜。从数据的通用性、处理的多样性等的观点考虑,相机优选为数码相机,骨骼肌成肌细胞的形状作为图像数据被取得。
本发明中,“参数”可以为捕捉到细胞、细胞膜、细胞质、细胞器、核等的结构性特征的任意参数,例如,为骨骼肌成肌细胞的轮廓的形状及/或位置、核的轮廓的形状及/或位置、以及/或者骨骼肌成肌细胞或核的轮廓与细胞或核的轮廓之间的距离。
本发明中,“分析部”只要是能够基于参数算出各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量的部件即可,可以为任意的部件,例如,包含在计算机上运行的图像分析软件。利用分析部进行的分析可根据得到的数据的形式而变化。例如,可以对得到的图像数据进行处理而求出骨骼肌成肌细胞的形状,也可以在得到的图像数据中对一个视野中的骨骼肌成肌细胞的形状进行计数,但不限于此。
分析部可以在来自拍摄部的图像数据中区分出骨骼肌成肌细胞及核的轮廓的形状,基于参数算出各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量。
骨骼肌成肌细胞的形状可在被分析部分析之前记录于分析部内的记录介质中。因此,分析部可以具有记录部。作为记录部,例如,可以为磁带、磁盘、光盘、光磁盘、闪存等电子记录的部件,例如,也可以为纸、照片等物理记录的部件。
本发明的系统基于参数算出各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量,在各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量为2个以上的情况下,判定为骨骼肌成肌细胞被多核化(向肌管细胞分化)。
分析部也可以根据多核化状态的经时变化算出多核化状态的变化率。例如,多核化状态的变化率可以通过(从某时间点起经过规定的时间后的每1个细胞的核的数量)/(某时间点时的每1个细胞的核的数量)算出。每1个细胞的核的数量可以针对1个以上的细胞算出,另外,也可以针对1个以上的细胞群算出。在针对2个以上的细胞算出每1个细胞的核的数量的情况下,可以算出其平均值及标准偏差。此处,也可以设定例如2、3、4、5、6等规定的阈值,在多核化状态的变化率为阈值以上的情况下,作为骨骼肌成肌细胞整体判断为多核化。由此,也能够判定骨骼肌成肌细胞的多核化能力。例如,在变化率大于1的情况下,可判定为观察到骨骼肌成肌细胞的多核化能力,在变化率小于1的情况下,可判定为未观察到骨骼肌成肌细胞的多核化能力。
上述阈值的设定值可根据接种的骨骼肌成肌细胞的数量等而变化,可以为根据使用的形态输入的任意值,也可以为预先记录于上述记录部中的值。因此,分析部可以具备输入部。就输入部的形态而言,例如可使用键盘、传感器(该传感器可以与测定部的测定装置为同一装置)、触摸面板等本领域技术人员已知的所有输入部。设定值根据由测定部测得的值变化,因此设定值可以在使用时任意地输入。设定值的输入部可以与上述输入部共通,也可以不同。
分析部中,优选由测定部测得的骨骼肌成肌细胞的形状作为信息向外部输出。因此,分析部可以具备信息的输出部。作为信息的输出手段,例如,可以为外部监视器、灯、蜂鸣器、预先登记的移动电话、向互联网邮件地址的发信等将剥离完成的信息向操作人通知的手段,也可以为打印机等向记录部输出的部件。
本发明中,“骨骼肌成肌细胞的多核化状态”是指1个骨骼肌成肌细胞中存在2个以上的核的状态。该状态可以是2个以上的骨骼肌成肌细胞融合而形成的状态。
本发明中,“学习部”是指基于来自分析部的信息对参数的过与不足进行提取的部分。学习部通过将分析部的参数、与由分析部算出的各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量建立关联,从而提取参数的过与不足。例如,若骨骼肌成肌细胞的多核化状态的判定未适当地进行、连单核细胞也被判定为多核化状态,则学习部可判断为产生参数(例如,骨骼肌成肌细胞的轮廓的形状及/或位置、核的轮廓的形状及/或位置、以及/或者骨骼肌成肌细胞或核的轮廓与骨骼肌成肌细胞或核的轮廓之间的距离)的过与不足。需要说明的是,是否适当地进行了判定可通过对相同细胞的细胞染色及细胞观察来进行判断。
学习部可以还包含学习存储部。学习存储部是将分析部的参数、和该参数中的来自分析部的信息蓄积并保存的部分,与存储部同样地包含各种电子存储介质。学习部可以参考保存于学习存储部中的信息,以更高的精度对参数的过与不足进行提取。另外,学习部可以还包含学习输入部、学习输出部。学习输入部是本发明的系统的操作者、系统的其他部分或其他系统根据需要输入能够实现更高效、高精度的学习的信息的部分,学习输出部是基于提取的参数的过与不足来发出规定信号的部分。学习输入部、学习输出部分别可包含与输入部、输出部同样的接口。
本发明中,“更新部”是指基于由学习部提取到的参数的过与不足来更新参数的部分。更新部接收来自学习部的信息,生成反映该信息的新参数,利用该参数来更新分析部的参数。更新部可以具备用于向分析部输出的输出接口,或者也可以与分析部一体化。或者,更新部可以与学习部一体化,不接收来自学习部的信息而是基于来自分析部的信息,通过新型参数的生成、分析部的参数的更新来进行。
[用于判定骨骼肌成肌细胞的多核化状态的方法]
本发明的另一方面涉及用于判定骨骼肌成肌细胞的多核化状态的方法(有时记为“本发明的方法”),其包括:提供包含骨骼肌成肌细胞的细胞培养基材的步骤;测定骨骼肌成肌细胞的形状的步骤;以及基于参数算出各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量的步骤。
本发明的方法可以还包括在各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量为2个以上的情况下判定为细胞被多核化的步骤。
以下,参照附图更详细地说明本发明的系统,但其表示本发明的特定的具体例,本发明并不限于此。
图1为示出一个方式中的、本发明的系统的处理的流程图。本发明的系统输入信号时,利用测定部,开始收纳于收纳部的细胞培养基材中包含的骨骼肌成肌细胞的形状的测定。接着,本发明的系统确认、设定用于对测得的骨骼肌成肌细胞的形状进行分析的参数。本发明的系统基于参数算出各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量,在各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量为2个以上的情况下,判定为骨骼肌成肌细胞被多核化。在适当地进行了判定的情况下,本发明的系统可以输出信号,使流程结束。是否适当地进行了判定可通过对相同细胞的细胞染色及细胞观察来进行判断。
一个方式中,本发明的系统在开始骨骼肌成肌细胞的形状的测定之前,判断要测定的对象是否适合用于判定骨骼肌成肌细胞的多核化状态。
例如,本发明的系统在开始骨骼肌成肌细胞的形状的测定之前,判断细胞是否吸附或贴附于细胞培养基材。在细胞未吸附或贴附于细胞培养基材、细胞从细胞培养基材剥离的情况下,本发明的系统可以输出信号,使流程完全地或暂时地结束。
另外,例如,本发明的系统在开始骨骼肌成肌细胞的形状的测定之前,判断细胞是否过量地吸附或贴附于细胞培养基材。在因细胞过量地吸附或贴附于细胞培养基材而使得细胞在细胞培养基材上高密度化、层叠化等、可能难以识别各个细胞的情况下,本发明的系统可以输出信号,使流程完全地或暂时地结束。
另外,例如,本发明的系统在开始骨骼肌成肌细胞的形状的测定之前,判断细胞以外的固态物等污染物质是否混入细胞培养基材中。在细胞以外的固态物等污染物质混入细胞培养基材的情况下,本发明的系统可以输出信号,使流程完全地或暂时地结束
另外,在以经染色的细胞为测定对象的情况下,例如,本发明的系统在开始骨骼肌成肌细胞的形状的测定之前,判断细胞培养基材上的细胞是否被适当地染色。例如,可以从染色淡、染色不均匀、染色液的成分析出、染色时混入异物、由于染色中的物理因素而使细胞剥离等观点考虑进行该判断。在细胞未被适当地染色的情况下,本发明的系统可以输出信号,使流程完全地或暂时地结束。
在骨骼肌成肌细胞的轮廓的形状为细长的形状(长条的纺锤形、椭圆形、长方形、线状、带状、它们的大致形状等)、并且该形状中核的轮廓的形状处于2个以上的情况下,本发明的系统可判定为骨骼肌成肌细胞被多核化。此时,处于该形状中的2个以上的核的轮廓的形状可包括:其排列方式具有一定的方向性的情况;和没有该一定的方向性,2个以上的核的轮廓的形状只是聚集的情况,但在任意情况下,均可判定为骨骼肌成肌细胞被多核化。此处,“一定的方向性”是指在骨骼肌成肌细胞的轮廓的细长的形状(长条的纺锤形、椭圆形、长方形、线状、带状、它们的大致形状等)的长度方向上以接触及/或分开的方式配置有2个以上的核。
相对地,在骨骼肌成肌细胞的轮廓的形状并非为细长的形状(长条的纺锤形、椭圆形、长方形、线状、带状、它们的大致形状等)的情况、及/或该形状中核的轮廓的形状未处于2个以上的情况下,本发明的系统可判定为骨骼肌成肌细胞未被多核化。另外,对于骨骼肌成肌细胞及/或核的轮廓的形状叠合、乍一看可识别为多核细胞的情况,本发明的系统也可判定为骨骼肌成肌细胞未被多核化。
另外,在骨骼肌成肌细胞的轮廓的形状为细长的形状(长条的纺锤形、椭圆形、长方形、线状、带状、它们的大致形状等)、该形状中核的轮廓的形状处于2个以上、并且2个以上的核的轮廓的形状聚集的情况下,本发明的系统也可判定为骨骼肌成肌细胞被多核化。
此外,在骨骼肌成肌细胞的轮廓的形状为细长的形状(长条的纺锤形、椭圆形、长方形、线状、带状、它们的大致形状等)、该形状中核的轮廓的形状处于2个以上、2个以上的核的轮廓的形状聚集、并且该形状中聚集体处于2个以上的情况下,本发明的系统也可判定为骨骼肌成肌细胞被多核化。
在适当地进行了判定的情况下,本发明的系统可输出信号,使流程结束。是否适当地进行了判定可通过对相同细胞的细胞染色及细胞观察来进行判断。
在未适当地进行判定的情况下,本发明的系统输出信号,再次确认、设定用于对测得的骨骼肌成肌细胞的形状进行分析的参数。然后,本发明的系统基于参数算出各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量,在各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量为2个以上的情况下,判定为骨骼肌成肌细胞被多核化。在适当地进行了判定的情况下,本发明的系统可输出信号,使流程结束。在未适当地进行判定的情况下,再次重复上述的流程。
本发明的系统可以还具备学习部及更新部。可以从分析部向学习部输出信号,在这些部分中进行参数的变更、及向分析部的应用(更新)。学习部可以基于来自分析部的信息对参数的过与不足进行提取。更新部可以基于由学习部提取到的参数的过与不足来更新参数。
一个方式中,本发明的系统可以经时地判定骨骼肌成肌细胞的多核化状态。本发明的系统输入信号时,利用测定部,开始收纳于收纳部的细胞培养基材中包含的骨骼肌成肌细胞的形状的测定。接着,本发明的系统确认、设定用于对测得的骨骼肌成肌细胞的形状进行分析的参数。本发明的系统基于参数算出各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量,在各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量为2个以上的情况下,判定为骨骼肌成肌细胞被多核化。经过规定的时间后,本发明的系统再次利用测定部,开始收纳于收纳部的细胞培养基材中包含的骨骼肌成肌细胞的形状的测定,重复上述的流程。
分析部也可以根据多核化状态的经时变化而算出多核化状态的变化率。例如,多核化状态的变化率可以通过(从某时间点起经过规定的时间后的每1个细胞的核的数量)/(某时间点时的每1个细胞的核的数量)算出。每1个细胞的核的数量可以针对1个以上的细胞算出,另外,也可以针对1个以上的细胞群算出。在针对2个以上的细胞算出每1个细胞的核的数量的情况下,可以算出其平均值及标准偏差。此处,也可以设定例如2、3、4、5、6等规定的阈值,在多核化状态的变化率为阈值以上的情况下,作为骨骼肌成肌细胞整体判断为多核化。由此,也能够判定骨骼肌成肌细胞的多核化能力。例如,在变化率大于1的情况下,可判定为观察到骨骼肌成肌细胞的多核化能力,在变化率小于1的情况下,可判定为未观察到骨骼肌成肌细胞的多核化能力。
一个方式中,本发明的系统输入信号时,利用拍摄部,开始收纳于收纳部的细胞培养基材中包含的骨骼肌成肌细胞及核的轮廓的形状的测定。接着,本发明的系统确认、设定用于对测得的骨骼肌成肌细胞及核的轮廓的形状进行分析的参数(骨骼肌成肌细胞的轮廓的形状及/或位置、核的轮廓的形状及/或位置、以及/或者骨骼肌成肌细胞或核的轮廓与骨骼肌成肌细胞或核的轮廓之间的距离)。本发明的系统基于参数算出各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量,在各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量为2个以上的情况下,判定为骨骼肌成肌细胞被多核化。在适当地进行了判定的情况下,本发明的系统可以输出信号,使流程结束。是否适当地进行了判定可通过对相同骨骼肌成肌细胞的细胞染色及细胞观察来进行判断。
分析部可以在来自拍摄部的图像数据中区分出骨骼肌成肌细胞及核的轮廓的形状,基于参数算出各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量。骨骼肌成肌细胞及/或核可以未被染色。
通过以上的本发明的系统,能够确认细胞群中具有多核化能力的骨骼肌成肌细胞的存在及其比例,因此,能够稳定且有效地管理通过培养该细胞群而制备的细胞培养物(例如,包含骨骼肌成肌细胞的片状细胞培养物)的品质。
以上,对本发明的系统的一个方式进行了说明,但应当理解,也可以为上述以外的各种方式。因此,在不脱离本发明思想的范围内对上述方式进行改变而成的各种方式也包括在本发明的范围内,本领域技术人员可以理解这样的改变。
构成本发明的系统的各构成要素可以在能够实现规定目的的范围内以各种各样的方式配置,也可以根据需要组合、一体化。
Claims (9)
1.用于判定骨骼肌成肌细胞的多核化状态的系统,其包含:收纳部,其收纳包含骨骼肌成肌细胞的细胞培养基材;测定部,其测定骨骼肌成肌细胞的形状;以及分析部,其基于参数算出各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量。
2.如权利要求1所述的系统,其中,骨骼肌成肌细胞的形状为骨骼肌成肌细胞及核的轮廓的形状。
3.如权利要求1或2所述的系统,其中,测定部包含拍摄部。
4.如权利要求2或3所述的系统,其中,参数为骨骼肌成肌细胞的轮廓的形状及/或位置、核的轮廓的形状及/或位置、以及/或者骨骼肌成肌细胞或核的轮廓与骨骼肌成肌细胞或核的轮廓之间的距离。
5.如权利要求3或4所述的系统,其中,分析部在来自拍摄部的图像数据中区分出骨骼肌成肌细胞及核的轮廓的形状,基于参数算出各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量。
6.如权利要求1~5中任一项所述的系统,其中,骨骼肌成肌细胞及/或核未被染色。
7.如权利要求1~6中任一项所述的系统,其还包含学习部,所述学习部基于来自分析部的信息对参数的过与不足进行提取。
8.如权利要求7所述的系统,其还包含更新部,所述更新部基于由学习部提取到的参数的过与不足来更新参数。
9.用于判定骨骼肌成肌细胞的多核化状态的方法,其包括:提供包含骨骼肌成肌细胞的细胞培养基材的步骤;测定骨骼肌成肌细胞的形状的步骤;以及基于参数算出各个骨骼肌成肌细胞中的核的数量的步骤。
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