CN115960707A - 用于免疫荧光检测的试剂盒及使用方法、荧光免疫检测装置 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种用于免疫荧光检测的试剂盒,包括盒本体,盒本体包括:贮存室、转运腔;外力施加于转运腔,以通过增大转运腔内空气的体积以在转运腔内形成负压,使得贮存室内的微量试剂流入转运腔;和/或外力施加于转运腔,以通过缩小转运腔内空气的体积以在转运腔内形成正压,使得转运腔内的微量试剂回吸至贮存室。本发明还涉及一种通过改变转运腔体积转运液体的方法、试剂盒的使用方法、荧光免疫检测装置。通过操纵该动力装置,在封闭环境下转运液体,所需样本量小,操作简便,无需专业的实验室及操作人员,即可在短时间内完成转移。
Description
【技术领域】
本发明涉及荧光检测技术领域,具体涉及一种用于免疫荧光检测的试剂盒及使用方法、荧光免疫检测装置。
【背景技术】
传统的核酸检测包含样本前处理、核酸提取、扩增放大、核酸检测等,每个测试环节都需要特定的仪器或是人工步骤进行操作,整个流程需要在专业的P2实验室,由专业的操作人员完成。从样本接收登记、实验室环境准备、个人防护装备、废弃物无害化处理,整个检测流程需要数小时,如果将排队等待、样本采集、样本运送的时间并入计算,可能需要数天的时间才能得到检测结果报告,检测成本也随之增加。
面对突发的新冠疫情,许多医疗机构由于没有专业的实验室,也没有配备专业的检测仪器及操作人员,进而导致检测速度暂缓,从而影响疫情控制。为此,需要迫切研发出一款便携式POCT核酸实时检测装置,不需要专业的实验室及操作人员,即可在短时间内完成核酸检测步骤,既可满足疫情特殊时期的检测需求,亦可普及基层使用。
因此,有必要对现有技术予以改良以克服现有技术中的所述缺陷。
【发明内容】
针对现有技术的不足之处,本发明的目的在于提供一种用于免疫荧光检测的试剂盒,包括盒本体,所述盒本体包括:
贮存室,所述贮存室用于存储微量试剂,所述微量试剂包括各类溶剂、待测样本;
转运腔,其用以将所述微量试剂于所述转运腔、所述贮存室内互相转运;
外力施加于所述转运腔,以通过增大所述转运腔内空气的体积以在所述转运腔内形成负压,使得所述贮存室内的微量试剂流入所述转运腔;
和/或
外力施加于所述转运腔,以通过缩小所述转运腔内空气的体积以在所述转运腔内形成正压,使得所述转运腔内的微量试剂回吸至所述贮存室。
优选地,所述转运腔的腔壁包括至少一可活动的活塞端面。
优选地,所述盒本体上还设有至少一电磁开关,以用于控制流经电磁开关所在位置处的磁珠流动。
优选地,所述贮存室还包括裂解液存放区、磁珠溶液存放区、洗涤液存放区、洗脱液存放区中的至少一种。
优选地,外力施加于所述转运腔,以使得所述转运腔可在若干贮存室之间移动。
本发明还提供一种用于免疫荧光检测的试剂盒,包括用于提供微量试剂流动场所的盒本体,所述盒本体包括:
若干贮存室,用于存储微量试剂;其中,所述贮存室至少包括转运腔、荧光检测区;
转运腔,其用以有条件的连通所述贮存室;
在外力驱使下,所述转运腔可在若干贮存室之间移动,以实现微量试剂在所述转运腔与所述荧光检测区之间转移。
优选地,所述转运腔的腔壁包括至少一可活动的活塞端面。
优选地,所述盒本体上还设有至少一电磁开关,以用于控制流经电磁开关所在位置处的磁珠流动。
优选地,所述贮存室还包括裂解液存放区、磁珠溶液存放区、洗涤液存放区、洗脱液存放区中的至少一种。
本发明还涉及一种如上所述的试剂盒的使用方法,包括以下步骤:
当转运腔位于一所述贮存室位置时,配置外部驱动装置运动,以增大转运腔的体积,使转运腔内形成负压,以将贮存室内的微量试剂注入转运腔;
和/或
当转运腔位于一所述贮存室位置时,配置外部驱动装置运动,以缩小转运腔的体积,使转运腔内形成正压,以将转运腔内的微量试剂注入至贮存室。
优选地,包括以下步骤:
可重复执行外力驱动增大转运腔的体积和/或外力驱动缩小转运腔的体积,以实现微量试剂在所述转运腔与一所述贮存室之间反复运动。
优选地,当转运腔内贮存有磁珠溶液时,还包括以下步骤:
控制触发电磁开关以固定住转运腔内的磁珠;
驱动缩小转运腔的体积,转运腔内形成正压以使得转运腔内的微量试剂注入至贮存室。
本发明还提供一种如上所述的试剂盒的使用方法,包括以下步骤:
驱使转运腔在若干贮存室之间移动,直至转运腔运动至荧光检测区所在位置。
优选地,转运腔可在若干贮存室之间往复运动。
优选地,还包括步骤:
获取转运腔位于盒本体内的位置;
当所述转运腔位于可用于贮存废液的贮存室时,控制触发电磁开关以固定住转运腔内的磁珠;
控制微量试剂注入所述用于贮存废液的贮存室;
控制转运腔运动至下一贮存室并与该贮存室内的微量试剂混合后,再控制转运腔回到所述用于贮存废液的贮存室所在位置;
控制断开电磁开关以使得磁珠与所述转运腔内的液体混合;再配置转运腔将混合液转运至下一目标贮存室。
优选地,还包括步骤:
获取转运腔位于盒本体内的位置;
当所述转运腔位于可用于贮存废液的贮存室时,控制触发电磁开关以固定住转运腔内的磁珠;
控制微量试剂注入所述用于贮存废液的贮存室;
控制断开电磁开关,以配置转运腔带动其内的磁珠运动至下一贮存室并与该贮存室内的微量试剂混合;再配置转运腔将混合液转运至下一目标贮存室。
本发明还提供一种荧光免疫检测装置,包括壳体,所述壳体内包括检测装置、显示装置以及安装位,所述安装位用于对如上所述的试剂盒执行荧光检测。
相比现有技术,本发明的有益效果在于:
本发明涉及一种用于免疫荧光检测的试剂盒,包括盒本体,盒本体包括:贮存室、转运腔;外力施加于转运腔,以通过增大转运腔内空气的体积以在转运腔内形成负压,使得贮存室内的微量试剂流入转运腔;和/或外力施加于转运腔,以通过缩小转运腔内空气的体积以在转运腔内形成正压,使得转运腔内的微量试剂回吸至贮存室。本发明还涉及一种通过改变转运腔体积转运液体的方法、试剂盒的使用方法、荧光免疫检测装置。通过操纵该动力装置,在封闭环境下转运液体,所需样本量小,操作简便,无需专业的实验室及操作人员,即可在短时间内完成转移。
上述说明仅是本发明技术方案的概述,为了能够更清楚了解本发明的技术手段,并可依照说明书的内容予以实施,以下以本发明的较佳实施例并配合附图详细说明如后。本发明的具体实施方式由以下实施例及其附图详细给出。
【附图说明】
此处所说明的附图用来提供对本发明的进一步理解,构成本申请的一部分,本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明,并不构成对本发明的不当限定。在附图中:
图1为本发明的包括动力装置用于免疫荧光检测的微量试剂转移装置的结构示意图;
图2为本发明的不包括动力装置用于免疫荧光检测的微量试剂转移装置的结构示意图;
图3为本发明的荧光免疫检测装置的结构示意图;
图4为本发明一种包括磁珠溶液时试剂盒的使用方法流程图;
图5为本发明一种用于洗脱过程的免疫荧光检测的试剂盒的使用方法流程图;
图6为本发明另一种用于洗脱过程的免疫荧光检测的试剂盒的使用方法流程图。
附图标记说明:
100、荧光免疫检测装置;
110、壳体;120、安装位;130、显示装置;
200、盒本体;
201、转运腔;202、裂解液存放区;203、磁珠溶液存放区;204、洗涤液存放区;205、洗脱液存放区;206、PCR扩增及荧光检测区;207、活塞;208、微流阀门;209、电磁开关。
【具体实施方式】
下面结合附图对本发明做进一步的详细说明,本发明的前述和其它目的、特征、方面和优点将变得更加明显,以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。在附图中,为清晰起见,可对形状和尺寸进行放大,并将在所有图中使用相同的附图标记来指示相同或相似的部件。在下列描述中,诸如中心、厚度、高度、长度、前部、背部、后部、左边、右边、顶部、底部、上部、下部等用词为基于附图所示的方位或位置关系。特别地,“高度”相当于从顶部到底部的尺寸,“宽度”相当于从左边到右边的尺寸,“深度”相当于从前到后的尺寸。这些相对术语是为了说明方便起见并且通常并不旨在需要具体取向。涉及附接、联接等的术语(例如,“连接”和“附接”)是指这些结构通过中间结构彼此直接或间接固定或附接的关系、以及可动或刚性附接或关系,除非以其他方式明确地说明。
接下来,结合附图以及具体实施方式,对本发明做进一步描述,需要说明的是,在不相冲突的前提下,以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可以任意组合形成新的实施例。应当理解,本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。
实施例一
如图1-2所示,一种用于免疫荧光检测的试剂盒,包括盒本体200,该盒本体200包括:
贮存室,贮存室用于存储微量试剂,微量试剂包括各类溶剂、待测样本;
转运腔210,其用以将微量试剂于转运腔210、贮存室内互相转运;
外力施加于转运腔210,以通过增大转运腔210内空气的体积以在转运腔210内负压,使得贮存室内的微量试剂流入转运腔210;
和/或
外力施加于转运腔210,以通过缩小转运腔210内空气的体积以在转运腔210内形成正压,使得转运腔210内的微量试剂回吸至贮存室。该外力可为人力,该外力也可由动力装置提供,该动力装置可为本领域常见的可提供动力的装置。即本方案的试剂盒的贮存室即可释放微量试剂,也可用于回吸微量试剂,丰富试剂盒内贮存室的用途;应当理解,由于本方案的试剂盒可用于回吸微量试剂,因此,该试剂盒可用于回吸废液,避免废液影响最终的检测结果。
进一步地,盒本体200内可设置两个以上贮存室,以用于存放或者加入不同的微量试剂,丰富试剂盒的用途。当用于免疫荧光检测时,贮存室至少包括转运腔201、PCR扩增及荧光检测区206,此时,还可包括裂解液存放区202、磁珠溶液存放区203、洗涤液存放区204、洗脱液存放区205中的至少一种。
进一步地,其中,转运腔201由人工加入样本后进行入口封闭;裂解液存放区202、磁珠溶液存放区203、洗涤液存放区204、洗脱液存放区205提前进行液体试剂预封装;PCR扩增及荧光检测区206提前进行引物/固体试剂预封装。
在一些实施例中,动力装置为活塞207,此时,转运腔210的腔壁包括至少一可活动的活塞端面。进一步地,动力装置还包括两相对设置的活塞207,两活塞207可相对运动,两活塞207的相对面之间形成转运腔210,两活塞207相对运动时,压缩转运腔210内的空气体积,以在转运腔210内形成正压,利于转运腔210内的微量试剂回吸至贮存室;两活塞207背向运动时,拉伸转运腔210内的空气体积,以在转运腔210内形成负压,利用将贮存室内的微量试剂压入转运腔210内。选用活塞是因为其相较于其他动力装置,操作简单,成本低,且可控性好。应当理解,该动力装置也可选用本领域常见的其他空气压力改变装置。
进一步地,两活塞207之间的相对距离小于两相邻贮存室之间的间距;通过限制两活塞207之间的相对距离,避免由于两活塞207之间的间距过大,转运腔210同时对两个贮存室内的微量试剂造成压迫。
进一步地,盒本体200上还设有至少一电磁开关209,以用于控制流经电磁开关209所在位置处的磁珠流动。应当理解,可根据实际洗脱需求,可在盒本体200上设置两个以及两个以上电磁开关,以在执行洗脱操作时固定住磁珠。
进一步地,外力施加于转运腔210,以使得转运腔210可在若干贮存室之间移动;即本方案的试剂盒除了可用于注入和回吸微量试剂外,还可用于转移微量试剂。在一些实施例中,对活塞207施加外力,以推动转运腔210于不同贮存室之间运动,直至到达荧光检测区。
实施例二
如图1-2所示,一种用于免疫荧光检测的试剂盒,包括用于提供微量试剂流动场所的盒本体200,该盒本体200包括:
若干贮存室,用于存储微量试剂;其中,贮存室至少包括转运腔201、检测区(PCR扩增及荧光检测区206);以对转运腔201内的待测样本进行检测;
转运腔210,其用以有条件的连通贮存室;
在外力驱使下,转运腔210可在若干贮存室之间移动,以实现微量试剂在转运腔201与荧光检测区(PCR扩增及荧光检测区206)之间转移。
该外力可为人力,该外力也可由动力装置提供,该动力装置可为本领域常见的可提供动力的装置。若干贮存室沿动力装置的运动方向一一排列,外力驱使转运腔210与转运腔201发生相对运动;转运腔201内的样本进入转运腔210后,外力驱使转运腔210内的样本移动,直至样本中加入PCR扩增及荧光检测区206内的检测试剂。即通过转运腔使得样本往目标位置(PCR扩增及荧光检测区206)运动,以使得样本至少混合检测试剂以进行相关检测试验。本方案涉及的试剂盒为封闭式转移装置,污染小,设备体积小,所需试剂、样本量小,操作简单,可在短时间内完成微量试剂的转移。
进一步地,转运腔210,其用以有条件的连通贮存室是指转运腔210常规条件下不连通,但有连通需求时,可通过外力使得贮存室与转运腔210连通。在一些实施例中,外力施加于转运腔210,以通过增大转运腔210内空气的体积以在转运腔210内形成负压,使得贮存室内的微量试剂流入转运腔210;
和/或
外力施加于转运腔210,以通过缩小转运腔210内空气的体积以在转运腔210内形成正压,使得转运腔210内的微量试剂回吸至贮存室。应当理解,也可通过其他方式实现转运腔210与贮存室互通,如使用蜡阀等开关装置。
进一步地,贮存室还包括裂解液存放区、磁珠溶液存放区、洗涤液存放区、洗脱液存放区中的至少一种,以对待测样本进行处理后再与检测剂混合,提升检测准确性。具体地,样本进入转运腔201后,也可随着其运动方向,使样本流至下一贮存室所在位置并与其内的微量试剂,以通过不同类别的微量试剂对样本进行相关化学处理后,最终与PCR扩增及荧光检测区206的混合,以提高最终的检测结果。具体地,在一些实施例中,如图1、2所示,贮存室包括转运腔201、裂解液存放区202、磁珠溶液存放区203、洗涤液存放区204、洗脱液存放区205、PCR扩增及荧光检测区206;其中,转运腔201由人工加入样本后进行入口封闭;裂解液存放区202、磁珠溶液存放区203、洗涤液存放区204、洗脱液存放区205提前进行液体试剂预封装;PCR扩增及荧光检测区206提前进行引物/固体试剂预封装。动力装置沿其运动方向首先迫使转运腔201内的待测样本转移至动力装置的转运腔210内,给动力装置施加压力,以使得转运腔210带动其内的待测样本运动至裂解液存放区202,释放裂解液存放区202中的试剂以使得裂解液与待测样本混合;动力装置继续推动该混合液运动且依序与磁珠溶液存放区203、洗涤液存放区204、洗脱液存放区205、PCR扩增及荧光检测区206内的试剂混合。应当理解,贮存室内的微量试剂的释放顺序并非一定要按照转运腔201、裂解液存放区202、磁珠溶液存放区203、洗涤液存放区204、洗脱液存放区205、PCR扩增及荧光检测区206的顺序释放,其可根据实际混合的需求进行选择。如可通过改变转运腔210的方向使得转运腔210内的微量试剂可实现双向运动,如可沿着远离转运腔201方向运动,也可沿着靠近转运腔201方向运动。
在一些实施例中,动力装置为活塞207,此时,转运腔210的腔壁包括至少一可活动的活塞端面。进一步地,动力装置还包括两相对设置的活塞207,两活塞207可相对运动,两活塞207的相对面之间形成转运腔210。选用活塞是因为其相较于其他动力装置,操作简单,且可控性好。应当理解,该动力装置也可选用本领域常见的其他空气压力改变装置。
进一步地,当两活塞207往靠近转运腔201方向运动时,两活塞207之间的相对距离小于两相邻贮存室之间的间距,一方面可稳定操作转运腔210的位移,另一方面避免两活塞207之间的相对距离过大,导致转运腔210提前接触其他贮存室内的微量试剂,造成转运腔210内混合液体的污染。
进一步地,盒本体200上还设有至少一电磁开关209,以用于控制流经电磁开关209所在位置处的磁珠流动。应当理解,可根据实际洗脱需求,可在盒本体200上设置两个以及两个以上电磁开关,以在执行洗脱操作时固定住磁珠。
进一步地,盒本体200包括至少两个用于存储待测样本的贮存室;该方案适用于不适合一次性混合的待测样本,通过分批次加样,提高最终的微量试剂混合效率,以最终提高检测结果。
实施例三
如图1-3所示,一种荧光免疫检测装置100,包括壳体110,壳体110形成一荧光免疫检测用腔室,壳体110内包括检测装置、显示装置130以及安装位120,该安装位120用于对如上实施例(实施例一、实施例二)中的试剂盒执行荧光检测。
进一步地,安装位120分设于显示装置130两侧,以最大化利用壳体110的有限空间,且提高壳体110的整体视觉效果。该荧光免疫检测装置100为便携式检测装置,能在短时间内自动完成核酸检测,包含核酸提取、序列放大、核酸扩增、荧光PCR检测等;该检测设备为封闭式检测,设备体积小、操作简便,无需专业的实验室及操作人员,即可在短时间内完成核酸检测步骤,且可同时进行多样本或是多项检测项目。
实施例四
一种用于实施例一中免疫荧光检测的试剂盒的使用方法,包括以下步骤:
步骤110:当转运腔210位于一贮存室位置时,配置外部驱动装置运动,以增大转运腔210的体积,使转运腔210内形成负压,以将贮存室内的微量试剂注入转运腔210;
和/或
当转运腔210位于一贮存室(可为同一贮存室或为不同贮存室)位置时,配置外部驱动装置运动,以缩小转运腔210的体积,使转运腔210内形成正压,以将转运腔210内的微量试剂注入至贮存室。
进一步地,可重复执行外力驱动增大转运腔的体积和/或外力驱动缩小转运腔的体积,以实现微量试剂在转运腔210与一贮存室之间反复运动;即微量试剂可根据需求在贮存室与转运腔210内自由转运。
进一步地,当转运腔210内贮存有磁珠溶液时,还包括以下步骤,如图4所示:
S111:控制触发电磁开关以固定住转运腔210内的磁珠;
S112:驱动缩小转运腔210的体积,转运腔210内形成正压以使得转运腔210内的微量试剂注入至贮存室。此场景可应用于当磁珠经过洗脱液和/或洗涤液洗涤后,可通过执行S111-S112将磁珠洗涤后的废液注入至可用于贮存废液的贮存室中,避免废液影响最终的检测结果。
实施例五
一种用于实施例二中免疫荧光检测的试剂盒的使用方法,包括以下步骤:
步骤120:驱使转运腔210在若干贮存室之间移动,直至转运腔210运动至荧光检测区所在位置。即驱动动力装置与转运腔201发生相对运动,以带动转运腔210内的待测样本离开转运腔201所在位置,直至流至检测区(PCR扩增及荧光检测区206)所在位置。具体地,驱动转运腔沿着贮存室的排列路径运动,以带动转运腔210内的待测样本陆续运动至不同贮存室正下方,此时可通过人力或机械力损坏转运腔210上方的贮存室以使得待测样本与贮存室内的微量试剂混合;直至转运腔210运动至PCR扩增及荧光检测区206正下方,人力或机械力损坏转运腔210上方的PCR扩增及荧光检测区206,以使得检测试剂至少与待测样本混合,以便于荧光免疫检测装置对试剂盒内的混合微量试剂进行荧光检测。
应当理解,转运腔210可沿远离转运腔201方向运动,也可沿靠近转运腔201方向运动。此外,转运腔210可在若干贮存室之间往复运动。
进一步地,还包括步骤,如图5所示:
S121:获取转运腔210位于盒本体200内的位置;可通过位置传感器或其他传感器获取转运腔210的位置;也可通过人为视觉判断转运腔210的位置。
S122:当转运腔210位于可用于贮存废液的贮存室时,控制触发电磁开关以固定住转运腔210内的磁珠;
S123:控制微量试剂注入用于贮存废液的贮存室;控制S122步骤中转运腔内的混合液体注入用于贮存废液的贮存室,具体方法可参考S110。
S124:控制转运腔210运动至下一贮存室并与该贮存室内的微量试剂混合后,再控制转运腔210回到用于贮存废液的贮存室所在位置;
S125:控制断开电磁开关以使得磁珠与转运腔210内的液体混合,再配置转运腔210将混合液转运至下一目标贮存室。通过执行S121-S125,以使得磁珠经过洗脱后可及时将洗脱废液排出,避免影响最终检测结果,该方案通过将其他贮存室内的微量试剂带回磁珠所在位置后,再带动含有磁珠的微量试剂运动至下一目标贮存室,该方案确保磁珠在运动过程中具有较好的流动性,避免磁珠上生物信息的缺失。
进一步地,还包括步骤,如图6所示:
S126:获取转运腔210位于盒本体200内的位置;可通过位置传感器或其他传感器获取转运腔210的位置;也可通过人为视觉判断转运腔210的位置。
S127:当转运腔210位于可用于贮存废液的贮存室时,控制触发电磁开关以固定住转运腔210内的磁珠;
S128:控制微量试剂注入用于贮存废液的贮存室;控制S127步骤中转运腔210内的混合液体注入用于贮存废液的贮存室,具体方法可参考S110。
S129:控制断开电磁开关,以配置转运腔210带动其内的磁珠运动至下一贮存室并与该贮存室内的微量试剂混合,再配置转运腔将混合液转运至下一目标贮存室。通过执行S126-S129。在执行磁珠洗脱排废液过程中,无需操纵转运腔往复运动,即可使得洗脱后的磁珠继续与其他微量试剂混合,以完成最终反应。
人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒(PCR荧光探针法)
取宫颈细胞样本(48岁、女性样本)转移至1mL/细胞保存液,13,000RPM离心10分钟,弃去上清液,吸取管底的细胞沉淀,透过人工手动操作,将50μL的细胞沉淀液加入至盒本体200。事先将150μL的裂解液预封装于裂解液存放区202;50μL的磁珠溶液预封装于磁珠溶液存放区203;200μL的洗涤液预封装于洗涤液存放区204;50μL的洗脱液预封装于洗脱液存放区205;25μL的引物冻干小球预封装于PCR扩增及荧光检测区206。透过微流阀门208的使用(宽度200微米、深度200微米),在没有活塞驱动空气的压力下,预封装液体不会径自进入到活塞区域。
手工加入50μL的样本至转运腔201后进行封闭,将盒本体200置放于检测装置,即可自动完成以下步骤:
第一步:将活塞207移动至转运腔201位置,向两侧扩张移动(拉伸总距离为3.5mm),藉由空气填充的动力将50μL的样本自转运腔201转移至活塞207区域。
第二步:将活塞207移动至裂解液存放区202,向两侧扩张移动(拉伸总距离为12.4mm),藉由空气填充的动力将150μL的裂解液自裂解液存放区202转移至活塞207区域,藉由不断的拉伸压缩(拉伸距离为12.4mm至18.2mm,总计拉伸次数为20次,反应时间10分钟),以达到充分的混合(细胞裂解)。
第三步:将活塞207移动至磁珠溶液存放区203,向两侧扩张移动(拉伸总距离为15.2mm),藉由空气填充的动力将50μL的磁珠溶液自磁珠溶液存放区203转移至活塞207区域,藉由不断的拉伸压缩(拉伸距离为15.2mm至20.4mm,总计拉伸次数为20次,反应时间20分钟),以达到充分的混合。
第四步:待反应完成后,打开磁珠溶液存放区203下方的电磁开关209,可将磁珠吸附于活塞底部。再将活塞向中间挤压(拉伸总距离为2.3mm),可将废液传送至磁珠溶液存放区203进行存放。
第五步:将活塞207移动至洗涤液存放区204,向两侧扩张移动(拉伸总距离为14.4mm),藉由空气填充的动力将200μL的洗涤液自洗涤液存放区204转移至活塞207区域。将活塞207移动至磁珠溶液存放区,关闭电磁开关209,将磁珠释放至洗涤液中,将活塞207移动至洗涤液存放区204,藉由不断的拉伸压缩(拉伸距离为14.4mm至22.2mm,总计拉伸次数为15次,反应时间15分钟),以达到充分的洗涤。
第六步:待洗涤完成后,打开洗涤液存放区204下方的电磁开关209,可将磁珠吸附于活塞底部,再将活塞向中间挤压(拉伸总距离为2.3mm),可将废液传送至洗涤液存放区204进行存放。
第七步:将活塞207移动至洗脱液存放区205,向两侧扩张移动(拉伸总距离为5.5mm),藉由空气填充的动力将50μL的洗脱液自洗脱液存放区205转移至活塞207区域。再将活塞207移动至洗涤液存放区204,关闭电磁开关209,将磁珠释放至洗脱液中,将活塞207移动至洗脱液存放区205,藉由不断的拉伸压缩(拉伸距离为5.5mm至10.1mm,总计拉伸次数为15次,反应时间25分钟),以达到充分的洗脱。
第八步:打开洗脱液存放区205下方的电磁开关209,可将磁珠吸附于活塞底部,再将活塞207移动至PCR扩增及荧光检测区206,将活塞向中间挤压(拉伸总距离为0mm),可将洗脱液传送至PCR扩增及荧光检测区(206)。静置1分钟后即可将引物进行溶解。
第九步:启动PCR步骤:UNG酶反应50℃、2分钟/1各循环;预变性95℃、10分钟/1各循环;变性95℃、10秒钟/45各循环;退火延伸55℃、45秒钟/45各循环。报告荧光采用FAM、VIC,Ct值为45,报告结果为高危HPV阴性(检测基因型为HPV26、39、51、59、68、82)。
验证活塞转移液体的操作精准度
实验参数:移动体积10微升、20微升、50微升、100微升、200微升。实验分析:驱动活塞207移动至试剂预封装区域,向两侧扩张移动,把试剂预封装区域的液体转移至活塞207区域,再将活塞207移动至另一个试剂预封装区域,将液体取出后进行称重,藉此反推转移液体的体积,该体积若在V±5%,则视为转移成功,纪录测试拉伸距离。实验结果:原有体积10微升,标准为9.5微升-10.5微升,实验结果显示转移体积为9.8微升,符合实验标准,拉伸距离为3.2mm;原有体积20微升,标准为19微升-21微升,实验结果显示转移体积为19.3微升,符合实验标准,拉伸距离为6.3mm;原有体积50微升,标准为47.5微升-52.5微升,实验结果显示转移体积为49.8微升,符合实验标准,拉伸距离为14.8mm;实验结果显示转移体积为19.3微升,符合实验标准,拉伸距离为6.3mm;原有体积100微升,标准为95微升-105微升,实验结果显示转移体积为102微升,符合实验标准,拉伸距离为30.5mm;原有体积200微升,标准为190微升-210微升,实验结果显示转移体积为201微升,符合实验标准,拉伸距离为60.4mm。上述结果显示该本发明能够精准的操控液体转移。
本说明书中的各个实施例均采用递进的方式描述,各个实施例之间相同相似的部分互相参见即可,每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处。尤其,对于系统实施例而言,由于其基本相似于方法实施例,所以描述的比较简单,相关之处参见方法实施例的部分说明即可。
Claims (17)
1.一种用于免疫荧光检测的试剂盒,包括盒本体,其特征在于,所述盒本体包括:
贮存室,所述贮存室用于存储微量试剂,所述微量试剂包括各类溶剂、待测样本;
转运腔,其用以将所述微量试剂于所述转运腔、所述贮存室内互相转运;
外力施加于所述转运腔,以通过增大所述转运腔内空气的体积以在所述转运腔内形成负压,使得所述贮存室内的微量试剂流入所述转运腔;
和/或
外力施加于所述转运腔,以通过缩小所述转运腔内空气的体积以在所述转运腔内形成正压,使得所述转运腔内的微量试剂回吸至所述贮存室。
2.如权利要求1所述的用于免疫荧光检测的试剂盒,其特征在于,所述转运腔的腔壁包括至少一可活动的活塞端面。
3.如权利要求1或2所述的用于免疫荧光检测的试剂盒,其特征在于,所述盒本体上还设有至少一电磁开关,以用于控制流经电磁开关所在位置处的磁珠流动。
4.如权利要求1或2所述的用于免疫荧光检测的试剂盒,其特征在于,所述贮存室还包括裂解液存放区、磁珠溶液存放区、洗涤液存放区、洗脱液存放区中的至少一种。
5.如权利要求1或2所述的用于免疫荧光检测的试剂盒,其特征在于,外力施加于所述转运腔,以使得所述转运腔可在若干贮存室之间移动。
6.一种用于免疫荧光检测的试剂盒,包括用于提供微量试剂流动场所的盒本体,其特征在于,所述盒本体包括:
若干贮存室,用于存储微量试剂;其中,所述贮存室至少包括转运腔、荧光检测区;
转运腔,其用以有条件的连通所述贮存室;
在外力驱使下,所述转运腔可在若干贮存室之间移动,以实现微量试剂在所述转运腔与所述荧光检测区之间转移。
7.如权利要求6所述的用于免疫荧光检测的试剂盒,其特征在于,所述转运腔的腔壁包括至少一可活动的活塞端面。
8.如权利要求6或7所述的用于免疫荧光检测的试剂盒,其特征在于,所述盒本体上还设有至少一电磁开关,以用于控制流经电磁开关所在位置处的磁珠流动。
9.如权利要求6或7所述的用于免疫荧光检测的试剂盒,其特征在于,所述贮存室还包括裂解液存放区、磁珠溶液存放区、洗涤液存放区、洗脱液存放区中的至少一种。
10.一种如权利要求1所述的试剂盒的使用方法,其特征在于,包括以下步骤:
当转运腔位于一所述贮存室位置时,配置外部驱动装置运动,以增大转运腔的体积,使转运腔内形成负压,以将贮存室内的微量试剂注入转运腔;
和/或
当转运腔位于一所述贮存室位置时,配置外部驱动装置运动,以缩小转运腔的体积,使转运腔内形成正压,以将转运腔内的微量试剂注入至贮存室。
11.如权利要求10所述的用于免疫荧光检测的试剂盒的使用方法,其特征在于,包括以下步骤:
可重复执行外力驱动增大转运腔的体积和/或外力驱动缩小转运腔的体积,以实现微量试剂在所述转运腔与一所述贮存室之间反复运动。
12.如权利要求10所述的用于免疫荧光检测的试剂盒的使用方法,其特征在于,当转运腔内贮存有磁珠溶液时,还包括以下步骤:
控制触发电磁开关以固定住转运腔内的磁珠;
驱动缩小转运腔的体积,转运腔内形成正压以使得转运腔内的微量试剂注入至贮存室。
13.一种如权利要求6所述的试剂盒的使用方法,其特征在于,包括以下步骤:
驱使转运腔在若干贮存室之间移动,直至转运腔运动至荧光检测区所在位置。
14.如权利要求13所述的试剂盒的使用方法,其特征在于,转运腔可在若干贮存室之间往复运动。
15.如权利要求13所述的试剂盒的使用方法,其特征在于,还包括步骤:
获取转运腔位于盒本体内的位置;
当所述转运腔位于可用于贮存废液的贮存室时,控制触发电磁开关以固定住转运腔内的磁珠;
控制微量试剂注入所述用于贮存废液的贮存室;
控制转运腔运动至下一贮存室并与该贮存室内的微量试剂混合后,再控制转运腔回到所述用于贮存废液的贮存室所在位置;
控制断开电磁开关以使得磁珠与所述转运腔内的液体混合;再配置转运腔将混合液转运至下一目标贮存室。
16.如权利要求13所述的试剂盒的使用方法,其特征在于,还包括步骤:
获取转运腔位于盒本体内的位置;
当所述转运腔位于可用于贮存废液的贮存室时,控制触发电磁开关以固定住转运腔内的磁珠;
控制微量试剂注入所述用于贮存废液的贮存室;
控制断开电磁开关,以配置转运腔带动其内的磁珠运动至下一贮存室并与该贮存室内的微量试剂混合;再配置转运腔将混合液转运至下一目标贮存室。
17.一种荧光免疫检测装置,包括壳体,其特征在于,所述壳体内包括检测装置、显示装置以及安装位,所述安装位用于对如权利要求1或权利要求6所述的试剂盒执行荧光检测。
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