CN115843923A - 杰丁塞伯林德纳氏酵母在犬科动物养殖中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了杰丁塞伯林德纳氏酵母在犬科动物养殖中的应用，涉及微生物应用技术领域。所述应用包括以下方面：(a)制备饲料添加剂；(b)制备用于调节肠道菌群的药物。本发明通过在饲粮中添加不同水平的杰丁塞伯林德纳氏酵母，发现杰丁塞伯林德纳氏酵母对犬科动物的营养物质消化率、氮代谢及血清免疫指标和肠道真菌具有重要影响，可用于犬科动物养殖，本发明为杰丁塞伯林德纳氏酵母在生产中的应用以及犬科动物的产品开发提供理论依据。
Description
技术领域
本发明涉及微生物应用技术领域，尤其是涉及杰丁塞伯林德纳氏酵母在犬科动物养殖中的应用。
背景技术
随着畜牧业的进一步发展，微生态制剂的应用越来越受到生产市场的关注。杰丁塞伯林德纳氏酵母(Cyberlindnerajadinii)又称为产朊假丝酵母(Candida utilis)或杰丁毕赤酵母(Pichia jadinii)广泛应用于食品和饲料工业(BUERTH，2016；SOUSA-SILVA，2021)
杰丁塞伯林德纳氏酵母被美国食品药品监督管理局(Food and DrugAdministration，FDA)认为是一种富含细胞蛋白和B族维生素且安全的微生物(BIERLA，2017；SANTOS，2013；SOUSA-SILVA，2021)酵母菌或酵母产品已被证明可促进仔猪生长性能，调节肠道微生物群落，并积极影响免疫系统，从而减少断奶后仔猪的腹泻(LAGOS，2020)。更重要的是，饲粮中添加杰丁塞伯林德纳氏酵母能够提高湖羊饲料转化效率和饲料蛋白质消化率(仇武松，2017)，增加断奶仔猪盲肠微生物区系的多样性(王瑶，2018)。
然而，杰丁塞伯林德纳氏酵母在犬科动物上的应用尚未有研究。乌苏里貉作为犬科动物，其对营养物质的利用及肠道菌群组成不同于草食动物或其他单胃动物，近年来对益生菌对乌苏里貉影响方面的研究也在逐年增加，但对杰丁塞伯林德纳氏酵母对其的研究较少。
鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的目的在于提供杰丁塞伯林德纳氏酵母在犬科动物养殖中的应用。本发明通过在饲粮中添加不同水平的杰丁塞伯林德纳氏酵母，研究其对乌苏里貉营养物质消化率，氮代谢及血清生化指标和肠道真菌的影响，为其在貉生产中的应用以及犬科动物的产品开发提供理论依据。
本发明提供的技术方案如下：
本发明提供了杰丁塞伯林德纳氏酵母(Cyberlindnera jadinii)在犬科动物养殖中的应用，所述应用包括以下方面：
(a)制备饲料添加剂；和/或(b)制备用于调节肠道菌群的药物。
目前关于犬科动物有益微生物的开发和研究非常有限，并且不同的菌种应用效果差异巨大且不稳定。本发明基于大量实验研究发现，杰丁塞伯林德纳氏酵母(Cyberlindnera jadinii)对于犬科动物的饲养具有有益的作用。
在一个实施方案中，所述饲料添加剂包括1×109至5×109CFU/g或1×109至5×109CFU/mL的所述杰丁塞伯林德纳氏酵母。
在本发明中，所述杰丁塞伯林德纳氏酵母可以以固体菌粉或液体菌液的形式添加到饲料中。
在一个实施方案中，所述杰丁塞伯林德纳氏酵母采用马铃薯葡萄糖培养基(葡萄糖20g/kg，蛋白胨20g/kg，酵母浸粉10g/kg)复苏，28℃条件下传代培养24h，获得发酵菌液。
在一个实施方案中，所述饲料添加剂改善犬科动物对营养物质的消化利用率。
在一个实施方案中，所述饲料添加剂提高犬科动物对粗脂肪和蛋白质的消化率。
本发明的饲料添加剂可以与其他成分组合，形成复合制剂。本发明的饲料添加剂还可包含其他犬科常用饲料添加剂，只有不影响本申请的菌株功能即可。
在一个实施方案中，所述饲料添加剂降低粪氮排出量，提高氮沉积和净蛋白利用率；和/或所述饲料添加剂提高血清IgA和IgG水平。
在一个实施方案中，所述饲料添加剂与基础饲粮一起使用；优选地，将所述饲料添加剂与基础饲粮混匀后，每天饲喂2-3次。
在一个实施方案中，所述基础饲粮参照NRC(1982)进行配制。饲喂期包括预试期7d，正试期30d，实验动物单笼饲养，自由饮水；试验组按设定的菌液添加量与基础饲粮充分混匀，每天在07:00和18:00各饲喂一次。
在一个实施方案中，所述调节肠道菌群为调节肠道真菌菌群的比例。
在一个实施方案中，所述调节肠道菌群为降低肠道有害真菌的比例；优选地，所述低肠道有害真菌为曲霉菌属、篮状菌属或芽枝霉属真菌中的一种或多种。
在一个实施方案中，所述犬科动物为乌苏里貉；优选为育成期乌苏里貉。
需要说明的是，本发明中所描述的杰丁塞伯林德纳氏酵母(Cyberlindnerajadinii)菌、含有其的饲料添加剂以及饲料可以用于不同的犬科动物中，包括但不限于乌苏里貉，还可用于例如宠物犬饲养方面。
在另一个方面，本发明同时提供一种提高营养物质消化率、降低氮排放并提高免疫力的饲养方法，所述方法包括对所饲养动物个体施用包含杰丁塞伯林德纳氏酵母(Cyberlindnera jadinii)菌的饲料。
本发明的杰丁塞伯林德纳氏酵母(Cyberlindnerajadinii)菌、含有其的饲料添加剂以及饲料可用于改善犬科动物的肠道功能、促进消化吸收；提高对营养物质消化率中的应用；提高生长性能，促进饲料转化率中的应用。
本发明的杰丁塞伯林德纳氏酵母(Cyberlindnerajadinii)菌株、含有其的组合物可用于制备调理犬科动物胃肠道健康和/或提高免疫力的药物中、用于制备改善犬科动物肠胃道不适症状、降低排泄物中氨氮水平的药物。
本发明使用的杰丁塞伯林德纳氏酵母(Cyberlindnera jadinii)菌株为常规可商购菌株，公众可通过商购获得。
有益效果：
本发明提供了杰丁塞伯林德纳氏酵母(Cyberlindnera jadinii)的一种新的应用方向，可用于提高育成期乌苏里貉粗脂肪、蛋白质和碳水化合物的消化率、提高氮沉积和净蛋白利用率，降低肠道有害真菌的比例；
本发明首次研究证实杰丁塞伯林德纳氏酵母对于犬科动物的饲养具有有益的作用，为貉生产以及犬科动物的产品开发提供理论依据。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例提供的高通量测序及多样性分析结果；
图2为本发明实施例提供的采用PCoA法研究了肠道细菌群落组成和结构差异结果；
图3为本发明实施例提供的肠道细菌菌群的组成及差异的结果图；
图4为本发明实施例提供的肠道真菌菌群的组成及差异的结果图。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例
1.材料与方法
1.1试验菌株
杰丁塞伯林德纳氏酵母菌种采用PDB培养基(马铃薯浸出粉12g/L，葡萄糖20g/L，水1L)复苏、传代培养并计数。
1.2试验设计
选取60±5日龄的健康的体重相近(1.98±0.15kg)乌苏里公貉45只，随机分为3组，每组15个重复，每个重复1只。对照组(N组)饲喂基础饲粮，试验组分别在基础饲粮中添加1×109(L组)和5×109CFU/g(H组)杰丁塞伯林德纳氏酵母菌液，基础饲粮参照NRC(1982)进行配制，饲粮组成及营养水平见表1。预试期7d，正试期30d，实验动物单笼饲养，自由饮水。各试验组按设定的菌液添加量与基础饲粮充分混匀，每天在07:00和18:00各饲喂一次。
表1.基础饲粮组成及营养水平(风干基础)
1)预混料为每千克饲粮提供：VA 18 997IU，VB1 53mg，VB2 23mg，VB6 23mg，VB120.08mg，VD3 2 658IU，VE 152mg，VK3 2.3mg，生物素0.66mg，叶酸1.2mg，D-泛酸21mg，烟酰胺，抗氧化剂0.6mg，Cu 31mg，Fe 114mg，Mn 60mg，Zn 97mg，I 0.3mg，Se 0.23mg。
2)代谢能为计算值，其余为实测值。
1.3测定指标及方法
1.3.1生长性能、营养物质消化率和氮代谢测定
在实验开始和结束时测量体重，每天记录每只动物的采食量。根据以下公式计算平均日增重、平均日采食量和料重比(F/G)：平均日增重(g/d)＝(最终体重-初始体重)(g)/日(d)；平均日采食量(ADFI)(g/d)＝总采食量(g)/日(d)；料重比(F/G)＝平均日采食量(g)/平均日增重(g)。
各组分别挑选8只体重相近且健康状况良好的公貉，采用全收粪的方法，使用粪尿分离的集粪盘进行消化代谢试验并记录每天的采食量，试验期3天。尿液收集桶中提前加入20mL 10％浓度的硫酸以固氮及防腐，将消化代谢试验期间收集的全部粪样混合均匀后，称重并按照鲜重的5％喷洒，65℃烘箱中烘干，粉碎过40目筛后，检测其中营养物质含量；全部尿样混合均匀称量总体积后，过滤取样，-20℃保存待检。
依据GB/T 6435-2014测定干物质的含量，依据GB/T 6438-2007测定粗灰分含量，依据GB/T 6433-2006测定粗脂肪含量，采用凯氏定氮法测定(GB/T 6432-2018)粗蛋白质含量，采用乙二胺四乙酸二钠络合滴定法测定(GB/T 6436-2018)钙含量，采用分光光度法测定(GB/T 6437-2018)磷含量。相关计算公式如下：
营养物质消化率(％)＝[(营养物质摄入量-粪便中营养物质含量)/营养物质摄入量]×100；
食入氮(g/d)＝饲粮干物质采食量×饲粮粗蛋白质含量/6.25；
粪氮(g/d)＝日平均粪便干物质量×粪便粗蛋白质含量/6.25；
尿氮(g/d)＝日平均尿体积×尿液粗蛋白质含量/6.25；
氮沉积(g/d)＝食入氮-(粪氮+尿氮)；
净蛋白质利用率(％)＝(氮沉积/食入氮)×100；
蛋白质生物学价值(％)＝[氮沉积/(食入氮-粪氮)]×100。
1.3.2血清生化指标测定
育成期试验结束时，各组分别随机选取8只公貉并于早晨空腹时进行后肢静脉采血，3000r/min，离心10min，收集血清，血清免疫球蛋白(IG)A、IgM和IgG用ELISA试剂盒(上海双赢生物技术有限公司，中国上海)检测。
1.4细菌和真菌菌群的分析
每组选择6只乌苏里貉新鲜粪便样本进行微生物分析，使用天根磁珠法提取试剂盒从约0.25g粪便中提取样本总DNA，严格按照试剂盒说明书进行操作。
利用引物341F(5’-CCTAYGGGRBGCASCAG-3’，SEQ ID No.1)和806R(5’-GGACTACNNGGGTATCTAAT-3’，SEQ ID No.2)用于扩增细菌16S rRNA基因的V3-V4区域。利用引物2024F(5’-GCATCGATGAAGAACGCAGC-3’，SEQ ID No.3)和2409R(5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’，SEQ ID No.4)扩增真菌ITS2区基因。扩增产物经检测纯化后，在Illumina Nova Seq 6000平台上测序，产生250bp的配对端reads。使用FLASH(V1.2.7)对每个样本的reads进行拼接，得到原始Tags数据，经过严格的过滤处理得到高质量的Tags数据。Tags序列通过与物种注释数据库进行比对检测嵌合体序列，并最终去除其中的嵌合体序列，得到最终的有效数据。利用Uparse算法(Uparse v7.0.100)对所有样本的全部有效数据进行聚类，默认以97％的一致性将序列聚类成为OTUs(Operational Taxonomic Units，操作分类单元)，依据其算法原则，筛选OTUs中出现频数最高的序列作为OTUs的代表序列。使用Qiime软件(Version 1.9.1)计算Observed otus、Chao1、ACE、Shannon、Simpson和Goods-coverage指数。使用R软件(Version 2.15.3)绘制PCoA图。PCoA分析使用R软件的ade4包和ggplot2软件包。Adonis分析使用R vegan包的adonis函数。STAMP(t-test)软件用于分析细菌菌群之间的差异，Benjamini-Hochberg FDR多重检验校准方法用于控制假阳性。
1.5数据统计及分析
应用Excel 2021整理数据，对数据进行正态分布检验。采用SPASS26.0单因素方差分析(one-way ANOVA)进行差异显著性检验，Bofferroni检验进行组间多重比较，试验的结果用“平均数±标准误”表示，P<0.05表示差异显著，P>0.05表示差异不显著。
2.试验结果分析
2.1杰丁塞伯林德纳氏酵母对育成期乌苏里貉生长性能的影响
如表2所示，三组间IBW、FBW和ADFI无显著差异(P>0.05)。与N组相比，L组和H组的日增重提高，F/G降低(P<0.05)。
表2.杰丁塞伯林德纳氏酵母对育成期乌苏里貉生长性能的影响
研究结果表明，饲粮中添加杰丁塞伯林德纳氏酵母提高了乌苏里貉日增重，降低了料重比。
2.2杰丁塞伯林德纳氏酵母对育成期乌苏里貉营养物质表观消化率的影响
如表3所示，各组间在干物质消化率无显著差异(P>0.05)。L组粗脂肪消化率显著高于N组(P<0.05)，而蛋白质消化率显著高于N组和H组(P<0.05)。
表3.杰丁塞伯林德纳氏酵母对育成期乌苏里貉营养物质消化率的影响
注：同行数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，下表同。
2.3杰丁塞伯林德纳氏酵母对育成期乌苏里貉氮代谢的影响
如表4所示，各组间食入氮、尿氮排出量，蛋白质生物学利用价值均无显著差异(P>0.05)，L组的粪氮排出量显著低于H组和N组(P<0.05)。L组和H组的氮沉积和净蛋白利用率显著高于N组(P<0.05)。
表4.杰丁塞伯林德纳氏酵母对育成期乌苏里貉氮代谢的影响
本发明研究发现，饲粮中添加杰丁塞伯林德纳氏酵母能够提高育成期乌苏里貉粗蛋白和粗脂肪消化率。本发明研究显示杰丁塞伯林德纳氏酵母显著降低了育成期乌苏里貉粪氮排出量，提高氮沉积和净蛋白利用率，这说明育成期貉添加杰丁塞伯林德纳氏酵母，可保持动物在饲料摄入量不变的情况下，提高其对蛋白质高的利用效率。
2.4杰丁塞伯林德纳氏酵母对育成期乌苏里貉血清免疫指标的影响
如表5所示，与对照组相比，L组和H组的血清IgA和IgG水平升高(P<0.05)。三组间血清IgM水平无差异(P>0.05)。
表5.杰丁塞伯林德纳氏酵母对育成期乌苏里貉血清免疫的影响
血清免疫球蛋白可以用作参数反映动物的免疫状态。结果表明，添加杰丁塞伯林德纳氏酵母提高了乌苏里貉血清IgA和IgG的水平。这可能与酵母细胞壁中发现的β-葡聚糖有关，其具有免疫调节特性(RAGHEBIAN，2016)。β-葡聚糖通过激活补体系统和增强巨噬细胞和自然杀伤细胞功能来增强宿主免疫防御(AKRAMIENE，2007)。
2.5高通量测序及多样性分析
细菌菌群中，本发明在97％相似性下鉴定了共1,346个OTUs。Good的覆盖率范围为0.998至0.999，证明所有样品的测序深度足够。如图1所示，与L和H组相比，对照组的Shannon和Simpson指数值增加(P<0.05)。三组间Chao1、ACE指数差异不显著(P>0.05)。
真菌菌群中，本发明在97％的序列相似性下鉴定了总共2,042个OTUs，其中，1,160个OUTs注释到门水平，1156个OUTs注释到属水平。Goods_coverage的范围从0.995到0.999，表明所有样品都有足够的测序深度。如表6所示，H组Chao1和ACE指数显著低于N组(P<0.05)，而Shannon和Simpson指数在三组间无显著差异(P>0.05)。
表6.乌苏里貉肠道微生物α-多样性的比较
2.7肠道细菌菌群的组成及差异
采用PCoA法研究了肠道细菌群落组成和结构差异。基于Bray-Curtis距离(图2中A)和加权UniFrac距离(图2中B)的PCoA显示，N组与L和H组分离(表7，P<0.05)。而基于二元Jaccard距离(图2中C)和未加权UniFrac距离(图2中D)的PCoA显示H组与N和L组分离(表7，P<0.05)。
在门水平上，拟杆菌门(Bacteroidota)，厚壁菌门(Firmicutes)，放线菌门(Actinobacteriota)，未鉴定细菌门(unidentified_Bacteria)，变形菌门(Proteobacteria)是N组和L组中最丰富的门，而厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidota)、放线菌门(Actinobacteriota)、变形菌门(Proteobacteria)和梭杆菌门(Fusobacteria)是H组中最丰富的5个门(图2中E)。厚壁菌门与拟杆菌门的比例(L＝3.09±0.60，H＝3.41±0.90)显著高于N组(0.73±0.07)。在属水平上，普氏菌属(Prevotella)是三个类群的优势属。N组中巨球形菌属(Megasphaera)、拟普雷沃氏菌属(Alloprevotella)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)和布劳特氏属(Blautia)最丰富。L组中双歧杆菌属(Bifidobacterium)、巨球形菌属(Megasphaera)、乳杆菌属(Lactobacillus)和拟普雷沃氏菌属(Alloprevotella)最丰富，巨球形菌属(Megasphaera)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)、链球菌属(Streptococcus)和乳杆菌属(Lactobacillus)是H组中最丰富的属(图2中F)。
此外，我们还比较了三组之间的细菌分类群。与N组相比，L组和H组厚壁菌门(Firmicutes)和放线菌门(Actinobacteriota)的相对丰度增加，而与N组相比，L组和H组拟杆菌门(Bacteroidota)和未鉴定细菌门(unidentified_Bacteria)的相对丰度降低(P<0.05)(图3中A、B)。此外，与N组和L组相比，H组中变形菌门(Proteobacteria)和蓝藻门(Cyanobacteria)的相对丰度有所增加(P<0.05)(图3中B、C)。在属水平上，与N组相比，L组和H组双歧杆菌属(Bifidobacterium)和巨球形菌属(Megasphaera)的相对丰度增加，而普雷沃氏菌属(Prevotella)的相对丰度降低(P<0.05)(图3中D、E)。与N组相比，H组不动杆菌属(Agathobacter)的相对丰度降低(P<0.05)(图3中E)。与N和L组相比，H组中小杆菌属(Dialister)的相对丰度增加，而布劳特氏属(Blautia)的相对丰度降低(P<0.05)(图3中E、F)。
表7.细菌菌群的Adonis分析
育成期乌苏里貉的肠道细菌主要由厚壁菌门、拟杆菌门、放线菌门和变形菌门组成，这与其他食肉动物肠道细菌的组成相似，如水貂、欧亚水獭、豹猫、蓝狐和银(AN，2017；PENG，2019；LIU，2020；NAN，2021)。我们的研究结果表明，日粮中添加杰丁塞伯林德纳氏酵母菌可增加壁厚菌门和放线菌门的相对丰度，减少拟杆菌门的相对丰度。此外，5×109CFU/g杰丁塞伯林德纳氏酵母增加了变形菌门和蓝藻菌门的相对丰度。此外，杰丁塞伯林德纳氏酵母增加了厚壁菌门和拟杆菌门的比率(F/B)。研究表明，日粮补充1×109CFU/g杰丁塞伯林德纳氏酵母或许是对肠道菌群最有益的剂量。
在属水平上，杰丁塞伯林德纳氏酵母使巨球形菌属和双歧杆菌属的相对丰度增加，而普氏菌属的相对丰度降低。巨球形菌属的一些菌株可以产生几种短链脂肪酸，例如乙酸酯、丙酸酯、丁酸酯和戊酸酯，这些SCFA可为动物生长提供能量来源。添加杰丁塞伯林德纳氏酵母后，肠道菌群中纤维素降解菌的丰度较低，这可能更符合肉食动物的日粮组成习惯。另外，饲料中添加5×109CFU/g的杰丁塞伯林德纳氏酵母也能提高小杆菌属的相对丰度，降低布劳特氏属和不动杆菌属的相对丰度。小杆菌属是一种潜在的疾病活动性微生物标记，已显示出与疾病活动性呈正相关(TITO，2017)。布劳特氏属是一种具有益生特性的厌氧菌属，广泛存在于哺乳动物的粪便和肠道中。布劳特氏属已被证明在代谢疾病、炎性疾病和生物转化中起作用(LIU，2021)。不动杆菌属的主要发酵产物是丁酸盐(HUA，2020)。丁酸是一种短链脂肪酸，在肠道中发挥重要作用，丁酸盐可增强肠道的屏障功能，并通过抑制NF-kB激活抑制炎症反应(MACFARLANE and MACFARLANE，2011)。本研究结果表明，饲粮中添加5×109CFU/g的杰丁塞伯林德纳氏酵母可能会降低肠道有益菌的丰度，增加肠道炎症相关微生物群的丰度。因此，杰丁塞伯林德纳氏酵母可能通过调节肠道菌群而对育成期乌苏里貉生长性能产生积极影响，且添加量为1×109CFU/g时，这种影响更大。
2.8肠道真菌菌群的组成及差异
PCoA被用于检测乌苏里貉肠道中真菌分类群落组成和结构的差异。基于weighted_unifrac距离的PcoA结果显示三组明显分开(图4中A和表8)(P>0.05)，而基于和unweighted_unifrac距离的PcoA结果显示三组明显分开(图4中B和表8)(P<0.05)。
在门的水平上，如图4中C和表9所示，三组优势菌门主要是子囊菌门(Ascomycota)和担子菌门(Basidiomycota)，相对丰度超过90％。在属水平上，如图4中D和表10所示，平脐蠕孢属(Bipolaris)、曲霉菌属(Aspergillus)、篮状菌属(Talaromyces)、茎点霉属(Phoma)和链格孢属(Alternaria)是N组中最丰富的菌属；而与N组相比，L组和H组的优势菌属为：(L组)念珠菌属(Candida)、平脐蠕孢属(Bipolaris)、赛伯林德纳氏酵母属(Cyberlindnera)、篮状菌属(Talaromyces)和曲霉菌属(Aspergillus)；(H组)念珠菌属(Candida)、平脐蠕孢属(Bipolaris)、曲霉菌属(Aspergillus)、茎点霉属(Phoma)、和篮状菌属(Talaromyces)。
如表9所示，在门水平上，各组间差异不显著(P>0.05)。如表10所示，在属水平上，L组和H组中曲霉菌属(Aspergillus)和篮状菌属(Talaromyces)的相对丰度显著低于N组(P<0.05)。此外，与N组相比，H组中芽枝霉属(Cladosporium)的相对丰度显著降低(P<0.05)。
表8.真菌菌群的Adonis分析
表9.门水平相对丰度
表10.属水平相对丰度
肠道微生物影响动物机体的健康，而肠道真菌是肠道微生物的重要组成部分。本发明结果显示，在门水平上，子囊菌门和担子菌门为3组共有的优势菌门，但它们的相对丰度在各组间差异不显著。多种不同日粮成分可以非叠加性地相互作用，影响肠道微生物多样性(BOLNICK，2014)在本发明中，添加杰丁塞伯德林纳氏酵母降低肠道菌群的α-多样性，包括Chao1和ACE指数。这可能是杰丁塞伯德林纳氏酵母对乌苏里貉的生理和免疫有间接影响，从而调节肠道菌群的多样性。另一方面，添加杰丁塞伯德林纳氏酵母可能会抑制某些真菌的活性。例如，在属水平上，饲粮中添加杰丁塞伯德林纳氏酵母，显著降低曲霉菌属和篮状菌属的相对丰度，此外，与对照组相比，高添加组芽枝霉属的相对丰度显著减少。曲霉菌属的物种能够引起高死亡率的侵袭性真菌病(KNIEMUYER，2016)。篮状菌属能引起全身性感染，与健康牦牛相比，腹泻牦牛中篮状菌属的丰度明显更高(CARPOURON，2022；LI，2018)，这说明饲粮中添加杰丁塞伯德林纳氏酵母能够减少肠道有害菌群的比例。此外，芽枝霉属主要是一种普遍存在的环境腐生真菌或植物内生菌，少数物种被记录为包括人类在内的脊椎动物宿主的病原体(SANDOVAL-DENIS，2016)导致这些菌属减少的原因可能是杰丁塞伯德林纳氏酵母改善了乌苏里貉肠道菌群的结构，从而影响潜在有害真菌存活能力，具体机制有待进一步研究。因此，饲粮中添加杰丁塞伯德林纳氏酵母能够改善肠道真菌菌群，减少有害真菌的相对比例。
总结：本发明通过在本实验条件下的综合分析发现，饲粮中添加杰丁塞伯林德纳氏酵母可提高育成期乌苏里貉生长性能和机体免疫。饲粮中添加1×109CFU/g的杰丁塞伯德林纳氏酵母能提高育成期乌苏里貉粗脂肪和蛋白质的消化率，饲粮中添加1×109和5×109CFU/g的杰丁塞伯德林纳氏酵母可以提高氮沉积和净蛋白利用率，改善肠道细菌菌群，降低肠道有害真菌的比例。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
Claims (10)
1.杰丁塞伯林德纳氏酵母(Cyberlindnera jadinii)在犬科动物养殖中的应用，其特征在于，所述应用包括以下方面：
(a)制备饲料添加剂；和/或(b)制备用于调节肠道菌群的药物。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述饲料添加剂包括1×109至5×109CFU/g或1×109至5×109CFU/mL的所述杰丁塞伯林德纳氏酵母。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述饲料添加剂改善犬科动物对营养物质的消化利用率。
4.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述饲料添加剂提高犬科动物对粗脂肪和蛋白质的消化率。
5.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述饲料添加剂降低粪氮排出量，提高氮沉积和净蛋白利用率；和/或所述饲料添加剂提高血清血清IgA和IgG水平。
6.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述饲料添加剂与基础饲粮一起使用；优选地，将所述饲料添加剂与基础饲粮混匀后，每天饲喂2-3次。
7.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述调节肠道菌群为调节肠道真菌菌群的比例。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述调节肠道菌群为降低肠道有害真菌的比例；优选地，所述低肠道有害真菌为曲霉菌属、篮状菌属、芽枝霉属真菌中的一种或多种。
9.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述犬科动物为乌苏里貉；优选为育成期乌苏里貉。
10.一种提高营养物质消化率、降低氮排放并提高免疫力的饲养方法，其特征在于，所述方法包括对所饲养动物个体施用包含杰丁塞伯林德纳氏酵母(Cyberlindnera jadinii)菌的饲料；优选地，所述动物个体为育成期乌苏里貉。
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Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ZHAO ETAL: "Dietary supplementation with Cyberlindnera jadinii improved growth performance, serum biochemcal indices, antioxidantstatus, and intestinal health in growing raccoondogs(Nyctereutesprocyonoides)", FRONTIERS IN MICROBIOLOGY, 21 September 2022 (2022-09-21), pages 02 - 03 * |
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