CN115500348B - 一种丝瓜花粉的贮藏方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种丝瓜花粉的贮藏方法，涉及植物花粉贮藏技术领域，包括以下步骤：将所述丝瓜花依次进行日光处理、干燥处理和超低温贮藏；所述日光处理过程中加入无水氯化钙。本发明的贮藏方法，先采用日光和无水氯化钙处理使丝瓜花散粉，再对丝瓜花粉利用无水氯化钙进行进一步干燥处理，从而有效降低丝瓜花粉中含水量；最后将丝瓜花粉进行超低温贮藏，从而实现了对丝瓜花粉活力的控制，进一步延长了丝瓜花粉的贮藏期限和授粉坐果率。
Description
技术领域
本发明属于植物花粉贮藏技术领域，具体是一种丝瓜花粉的贮藏方法。
背景技术
花粉是植物种质的主要形式之一。在自然条件下，大部分植物的花粉活力易丧失。为延长花粉的寿命，相关技术中采用了如下保存方法：低温干燥、液氮保存、真空贮藏和有机溶剂贮藏。相关技术中部分作物(如水稻、玉米、辣椒等)花粉保存技术已比较成熟。而瓜类作物中，西瓜和黄瓜的花粉的保存方法较多，而对含水量较高的丝瓜花粉(丝瓜花为半日花，花粉在自然条件下易丧失活力)保存方法较少。
丝瓜(Luffa，2n＝2x＝26)系葫芦科(Cucurbitaceae)丝瓜属一年生攀缘性草本植物。嫩丝瓜不仅具有较高的营养价值，还具有清热化痰和凉血解毒等医疗保健作用及消除雀斑和美白去皱的美容价值。相关技术中栽培的丝瓜主要有普通丝瓜(Luffa cylindrica(L.)M.J.Roem.)和有棱丝瓜(Luffa acutangula(L.)Roxb.)两个栽培种。
丝瓜属于异花授粉作物，在自然环境下寿命很短，通常只有6h～8h；开花当日中午12点后，授粉坐果率比较低；下午花冠开始凋萎，雄蕊萎缩，花粉丧失生活力。在丝瓜品种选育和杂交制种过程中，常遇见父母本花期不遇、父本花粉暂时保存和异地远距离传送花粉困难的问题。
相关技术中针对普通丝瓜与有棱丝瓜花期不遇的问题，采取上午采集普通丝瓜花粉，放置于4℃冰箱冷藏9h，下午与有棱丝瓜杂交创制种质的方式，打破了丝瓜种间杂交时间和空间上的限制；但相关技术中贮藏时间较短。
因此，本发明提供了一种丝瓜花粉的贮藏方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种丝瓜花粉的贮藏方法，以解决上述背景技术中提出的问题和缺陷的至少一个方面。
具体如下，本发明提供了一种丝瓜花粉的贮藏方法，包括以下步骤：
将所述丝瓜花依次进行日光处理、干燥处理和超低温贮藏；
所述日光处理过程中加入无水氯化钙。
根据本发明贮藏方法技术方案中的一种技术方案，至少具备如下有益效果：
本发明的贮藏方法，先采用日光处理对丝瓜花进行初步处理，使丝瓜花散粉，并对丝瓜花粉中水分进行初步处理；再对丝瓜花粉进行干燥处理，从而进一步降低丝瓜花粉中含水量；最后将丝瓜花粉进行低温贮藏，从而实现了对丝瓜花粉活力的控制，进一步延长了丝瓜花粉的贮藏期限和授粉坐果率。
而无水氯化钙可以结合结晶水，还能吸收大量的水分，具有无毒、无味和吸湿率高的优点。
根据本发明的一些实施方式，所述日光处理采用白炽灯；所述白炽灯的功率为50W～70W。
根据本发明的一些实施方式，所述丝瓜花为普通丝瓜(Luffa cylindrica(L.)M.J.Roem.)花。
根据本发明的一些实施方式，所述白炽灯的功率为60W。
根据本发明的一些实施方式，所述日光处理的时间为2.5h～3.5h。
根据本发明的一些实施方式，所述日光处理的时间为3h。
根据本发明的一些实施方式，所述干燥处理选用的干燥剂为无水氯化钙。
根据本发明的一些实施方式，所述干燥处理的时间为0.5h～1.5h。
根据本发明的一些实施方式，所述干燥处理的时间为1h。
根据本发明的一些实施方式，所述超低温贮藏的温度为-200℃～-190℃。
根据本发明的一些实施方式，所述超低温贮藏的时间为1天～120天。
根据本发明的一些实施方式，所述超低温贮藏的时间为1天～90天。
根据本发明的一些实施方式，所述丝瓜花粉的采集方法，包括以下步骤：将丝瓜花苞保湿后，剥离花瓣和花萼。
根据本发明的一些实施方式，所述保湿操作为：采用湿毛巾对丝瓜花苞进行包裹。
根据本发明的一些实施方式，所述保湿操作在20℃～30℃下进行。
根据本发明的一些实施方式，所述保湿的时间为10h～20h。
根据本发明的一些实施方式，所述丝瓜花苞的采摘时间为丝瓜开花前12h～20h。
根据本发明的一些实施方式，所述丝瓜花苞的采摘时间为丝瓜开花前一天12:00～18:00。
例如，丝瓜开花日期为9月20日；那么丝瓜花苞的采摘时间为9月19日12:00～18:00。
根据本发明的一些实施方式，所述花瓣的剥离方法为采用镊子剥离。
根据本发明的一些实施方式，所述花萼的剥离方法为采用镊子剥离。
附图说明
为了便于本领域技术人员理解，下面结合附图对本发明作进一步的说明。
图1为本发明实施例1中丝瓜花粉醋酸洋红的染色结果。
图2为本发明实施例1中丝瓜花粉的花粉管萌发结果。
具体实施方式
以下将结合实施例对本发明的构思及产生的技术效果进行清楚、完整地描述，以充分地理解本发明的目的、特征和效果。显然，所描述的实施例只是本发明的一部分实施例，而不是全部实施例，基于本发明的实施例，本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例，均属于本发明保护的范围。
本发明的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示意性实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
如无特别说明，本发明中常温均为25℃。
本发明中“约”代表±1％；例如：约100为100±100*1％，即99～101。
本发明实施方式中丝瓜为普通肉丝瓜纯系S383和S354，种子由湖南省蔬菜研究所培育，试验在湖南省长沙市长沙县高桥镇湖南省农业科学院蔬菜研究所科研试验基地进行。
实施例1
本实施例为一种丝瓜花粉的贮藏方法，由以下步骤组成：
S1、保湿处理：
在丝瓜开花前一天下午，采集次日开放的丝瓜高代自交系S383花蕾，利用打湿后的毛巾包裹，自然温度下透气、保湿至第二天早上5点，利用小镊子剥掉丝瓜花瓣及花萼，得丝瓜雄蕊；
S2、日光处理：
采用60W的白炽灯对步骤S1所得的丝瓜雄蕊进行日光处理；收集丝瓜花粉；
本步骤日光处理在密闭容器中进行，密闭容器底部铺设有无水氯化钙层，无水氯化钙层中铺设有白色光皮纸；本步骤日光处理过程的时间3h；
S3、干燥处理：
将步骤S2干燥的花粉，利用网筛除去杂质，收集后的花粉采用光皮白纸包裹，置于无水氯化钙中干燥1h，得干燥处理后的丝瓜花粉；
S4、低温贮藏：
将步骤S3干燥处理后的丝瓜花粉在液氮环境(-196℃)下进行低温贮藏处理，低温贮藏处理的时间设置为三组(第一组为7天、第二组为15天，第三组为90天)。
实施例2
本实施例为一种丝瓜花粉的贮藏方法，与实施例1的差异在于：本实施例步骤S4中低温贮藏的温度为-20℃。
对比例1
本对比例为一种丝瓜花粉的贮藏方法，由以下步骤组成：
S1、保湿处理：
在丝瓜开花前一天下午，采集未开放的丝瓜高代自交系S383花蕾，保湿至第二天早上5点，利用小镊子剥掉丝瓜花瓣及花萼，得丝瓜雄蕊；
S2、低温贮藏：
将步骤S1所得丝瓜雄蕊在液氮环境(-196℃)下进行低温贮藏处理，低温贮藏处理的时间设置为三组(第一组为7天、第二组为15天，第三组为90天)。
对比例2
本对比例为一种丝瓜花粉的贮藏方法，由以下步骤组成：
S1、保湿处理：
在丝瓜开花前一天下午，采集未开放的丝瓜高代自交系S383花蕾，保湿至第二天早上5点，利用小镊子剥掉丝瓜花瓣及花萼，得丝瓜雄蕊；
S2、日光处理：
采用60W的白炽灯对步骤S1所得的丝瓜雄蕊进行日光处理；收集丝瓜花粉；
本步骤日光处理在25℃下进行(采用空调冷风风干)；本步骤日光处理过程的时间3h；
S3、干燥处理：
将步骤S2收集到的丝瓜花粉采用无水氯化钙干燥1h，得干燥处理后的丝瓜花粉；
S4、低温贮藏：
将步骤S3干燥处理后的丝瓜花粉在液氮环境(-196℃)下进行低温贮藏处理，低温贮藏处理的时间设置为三组(第一组为7天、第二组为15天，第三组为90天)。
对比例3
本对比例为一种丝瓜花粉的贮藏方法，与对比例2的差异在于：本对比例步骤S4中低温贮藏的温度为-20℃。
对比例4
本对比例为一种丝瓜花粉的贮藏方法，与对比例2的差异在于：本对比例步骤S4中低温贮藏的温度为25℃。
对比例5
本对比例为一种丝瓜花粉的贮藏方法，与实施例1的差异在于：本对比例将步骤S2和步骤S3中无水氯化钙替换为硅胶。
对比例6
本对比例为一种丝瓜花粉的贮藏方法，与对比例5的差异在于：本对比例步骤S4中低温贮藏的温度为-20℃。
对比例7
本对比例为一种丝瓜花粉的贮藏方法，与对比例5的差异在于：本对比例步骤S4中低温贮藏的温度为25℃。
对比例8
本对比例为一种丝瓜花粉的贮藏方法，与实施例1的差异在于：本对比例将步骤S2和步骤S3中无水氯化钙替换为生石灰。
对比例9
本对比例为一种丝瓜花粉的贮藏方法，与对比例8的差异在于：本对比例步骤S4中低温贮藏的温度为-20℃。
对比例10
本对比例为一种丝瓜花粉的贮藏方法，与对比例8的差异在于：本对比例步骤S4中低温贮藏的温度为25℃。
对比例11
本对比例为一种丝瓜花粉的贮藏方法，与实施例1的差异在于：本对比例步骤S4中低温贮藏的温度为25℃。
本发明实施例1～2和对比例1～11中贮藏后丝瓜花粉的性能测试结果参照如下方法：
花粉活力测定：
将实施例1～2和对比例1～11中贮藏的丝瓜花粉利用醋酸洋红染色进行花粉活力检测。
具体操作：用镊子剥除丝瓜花萼及花瓣，露出花药，或者用棉签粘取花粉，轻轻将花粉抖落在载玻片上，加1滴醋酸洋红染色，使染色液充分浸泡花粉，染色10min～20min后在莱卡(LAICA)显微镜观察染色情况。其中颜色深红为有活力花粉，淡红色为无活力，无色者为空瘪或者不育。
每组处理3次，重复取5次平均值，每次处理重复观察3视野。
花粉发芽率测定：
取实施例1～2和对比例1～11中贮藏的丝瓜花粉，在自然条件下解冻1.5h(针对-20℃贮藏和液氮环境下贮藏的花粉)，置于萌发培养基内，培养基配方为硼酸20mg/L和蔗糖10％(质量分数)的液体培养基；在温度为30℃，转速为100rpm/s的恒温摇床上培养。
以花粉管长度超过花粉粒直径2倍计的标准统计发芽率。培养6h后，镜检观察萌发情况并统计花粉萌发率，每组处理3次，重复取平均值.每次处理重复观察3个视野。
坐果率及单瓜种子数统计：
在丝瓜花粉保存第7天、15天和90天，取日光灯+无水氯化钙液氮保存(实施例1)和-20℃保存处理花粉(实施例2)，利用冰块维持低温条件下解冻大约1.5h，然后用棉签粘取解冻花粉给丝瓜高代自交系354授粉.尽量选择主蔓雌花授粉，有利于后期做坐果率统计。每个处理每次授粉20朵雌花。以当日开放的新鲜雄花授粉植株为对照。授粉挂牌，标明处理方式及日期。在丝瓜种子成熟后，收获整瓜，并观察瓜形、种子形状，统计坐果率和单瓜种子数量。
经过本发明贮藏方法贮藏的丝瓜花粉的部分性能测试结果见表1～2和图1～2。
保存7天时，通过未经处理的样品(对比例1)、日光灯+空调+常温(对比例4)、日光灯+空调+-20℃(对比例3)、日光灯+空调+液氮(对比例2)、日光灯+硅胶+常温(对比例7)、日光灯+硅胶+-20℃(对比例6)、日光灯+硅胶+液氮(对比例5)、日光灯+生石灰+常温(对比例10)、日光灯+生石灰+-20℃(对比例9)、日光灯+生石灰+液氮(对比例8)及日光灯+无水氯化钙+常温(对比例11)、日光灯+无水氯化钙+-20℃(实施例2)、日光灯+无水氯化钙+液氮(实施例1)的丝瓜花粉质量检测结果表明：日光灯+空调(即对比例2～4)、日光灯+硅胶(即对比例5～7)和未经处理的样品(对比例1)中丝瓜花粉，利用醋酸洋红染色法检测花粉活力均为零，离体萌发实验均未检测到萌发。
丝瓜花粉未经处理直接放超低温，花粉因含水量较高，细胞内形成冰晶，使细胞膜授到机械损伤导致细胞死亡，花粉失去活力。
保存7天时，在-20℃条件下贮存条件，日光灯+生石灰(对比例9)和日光灯+无水氯化钙(实施例2)方式干燥样品的花粉活力分别是31.15％±10.07％和69.61％±8.35％，萌发率分别26.98％±7.11％和49.83％±8.74％；在液氮贮存条件下，日光灯+生石灰(对比例8)和日光灯+无水氯化钙(实施例1)方式干燥样品的花粉活力分别为36.52％±7.87％和73.77％±9.20％，萌发率分别为34.87％±5.48％和66.72％±8.12％，新鲜未处理花粉的花粉活力为85.19±5.12％，萌发率为79.44±6.39％。(见图1和表1)
所有处理中，以日光灯+无水氯化钙干燥的花粉在超低温贮藏条件下，其花粉活力和萌发率最高。其次是日光灯+无水氯化钙干燥的花粉在低温贮藏条件下花粉活力与萌发率较高，该处理与日光灯+无水氯化钙干燥的花粉在超低温贮藏条件下相比，其花粉活力差异不显著，萌发率差异极显著。日光灯+生石灰干燥的花粉在低温和超低温贮藏条件下，花粉活力和萌发率较低，两种贮藏条件下花粉活力差异不显著，萌发率差异显著。新鲜花粉与所有处理比，其花粉活力与萌发率差异均极显著。(见表1)。
表1实施例1～2和对比例8～11中丝瓜花粉保存7天后活力和萌发率测试结果
注：表中所有数据均为平均值±标准差，**表示在1％水平上差异极显著。
表2本发明实施例1～2中不同贮藏时间授粉坐果率和单瓜种子数测试结果
从表2可以看出，日光灯+无水氯化钙干燥的花粉在-20℃贮藏条件下保存7天时授粉，其坐果率为30.0％；保存15天时授粉，其坐果率为15.0％；保存90天时授粉，其坐果率为0，其授粉坐果率随着时间的延长明显下降，对照新鲜花粉的授粉坐果率在70.0％以上。
日光灯+无水氯化钙干燥的花粉在液氮贮藏下，保存7天时和15天时授粉，其坐果率均为80.0％；保存90天时授粉，其坐果率为65.0％，其授粉坐果率随着时间的延长呈下降趋势，对照新鲜花粉的授粉坐果率在73.3％以上。
花粉保存时间长短对其授粉植株的瓜形、种子形状及数量无影响；贮藏花粉授粉植株的单瓜种子数与新鲜花粉授粉植株的种子数差异不显著(见表2)。
本发明实施方式中以普通肉丝瓜中高代自交系383花粉为试材，研究了不同干燥方式、不同贮藏温度对丝瓜花粉生活力变化及田间授粉效果的影响，以探究不同干燥、贮藏条件下丝瓜花粉的贮藏能力。本发明实施方式中结果表明：干燥处理后的丝瓜花粉活力在低温或者液氮贮藏后活力下降缓慢，未经干燥处理的花粉贮藏后无活力；所有处理中以日光灯+无水氯化钙干燥在液氮条件下贮藏效果最佳，授粉坐果率在65％～80％之间；从而实现了丝瓜花粉的短中期保存，且有效解决了品种选育及杂交制种工作中雌雄花花期不遇、花粉贮藏及异地远距离花粉传送等技术难题，在生产实践中具有极佳的应用前景。
综上所述，本发明的贮藏方法，先采用日光和无水氯化钙处理使丝瓜花散粉，再对丝瓜花粉利用无水氯化钙进行进一步干燥处理，从而有效降低丝瓜花粉中含水量；最后将丝瓜花粉进行超低温贮藏，从而实现了对丝瓜花粉活力的控制，进一步延长了丝瓜花粉的贮藏期限和授粉坐果率。
以上所述的具体实施例，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明，所应理解的是，以上所述仅为本发明的具体实施例而已，并不用于限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (4)
1.一种丝瓜花粉的贮藏方法，其特征在于，包括以下步骤：
将所述丝瓜花依次进行日光处理、干燥处理和超低温贮藏；
所述日光处理过程中加入无水氯化钙；
所述日光处理采用白炽灯；所述白炽灯的功率为50W~70W；
所述日光处理的时间为2.5h~3.5h；
所述干燥处理选用的干燥剂为无水氯化钙；
所述干燥处理的时间为0.5h~1.5h；
所述超低温贮藏的温度为-200℃~-190℃；
所述低温贮藏的时间为1天~120天。
2.根据权利要求1所述的丝瓜花粉的贮藏方法，其特征在于，所述丝瓜花粉的采集方法，包括以下步骤：将丝瓜花苞，保湿后，剥离花瓣和花萼。
3.根据权利要求2所述的丝瓜花粉的贮藏方法，其特征在于，所述保湿的时间为10h~20h。
4.根据权利要求2所述的丝瓜花粉的贮藏方法，其特征在于，所述丝瓜花苞的采摘时间为丝瓜开花前12h~20h。
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Citations (2)
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| JPH06157201A (ja) * | 1992-11-30 | 1994-06-03 | Japan Tobacco Inc | アブラナ科植物の花粉の貯蔵方法 |
| CN1118650A (zh) * | 1994-09-15 | 1996-03-20 | 湖南师范大学 | 农作物花粉的贮藏方法 |
-
2022
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Patent Citations (2)
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| CN1118650A (zh) * | 1994-09-15 | 1996-03-20 | 湖南师范大学 | 农作物花粉的贮藏方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 干燥和贮藏方式对丝瓜花粉活力保持效果的影响;韩小霞;辣椒杂志;参见摘要和1.3试验方法 * |
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