CN115452521A - 用于肝棘球蚴病鉴别的标志物、产品及系统 - Google Patents

用于肝棘球蚴病鉴别的标志物、产品及系统 Download PDF

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CN115452521A CN202211167213.4A CN202211167213A CN115452521A CN 115452521 A CN115452521 A CN 115452521A CN 202211167213 A CN202211167213 A CN 202211167213A CN 115452521 A CN115452521 A CN 115452521A
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Abstract

本发明属于生物医学技术领域，具体为一种用于肝棘球蚴病鉴别标志物、产品及系统。本发明首次提供一种对肝棘球蚴病进行鉴别的标志物，具体为血液免疫球蛋白G表面双天线复杂型N糖链末端半乳糖指标。该指标对肝棘球蚴病的鉴别诊断具有高特异性、高灵敏性和高准确性，在临床上具有重要意义。本发明涉及基于该标志物的产品，包括试剂盒、设备、可操作系统和/或它们的组合；包括基于该标志物鉴别模块和系统。本发明有助于改变肝棘球蚴病诊断的现状，对肝棘球蚴病的诊断与鉴别具有重要的临床价值。

Description

用于肝棘球蚴病鉴别的标志物、产品及系统
技术领域
本发明属于生物医学技术领域，具体涉及肝棘球蚴病鉴别标志物、产品及系统。
背景技术
棘球蚴病（又名包虫病，echinococcosis）是一种人畜共患寄生虫病，其对人体危害最为严重的是由细粒棘球蚴和多房棘球蚴引起的囊型棘球蚴病( cysticechinococcosis，CE)和泡型棘球蚴病( alveolar echinococcosis，AE)。肝脏是棘球蚴病发病率最高的器官，患者早期无临床症状，大多数患者在肝棘球蚴病筛查中才被发现，严重影响牧区人民的身体健康；在影像学诊断泡型肝棘球蚴病时，易与肝癌混淆，发生误诊。
糖基化是生物体中广泛存在的一种翻译后修饰(PTM)，对蛋白质的化学和生物学特性有着重要的影响。血清免疫球蛋白G（IgG）是可溶性血清糖蛋白，约占外周血免疫球蛋白总量的75%，其Fc(结晶段)和Fab(抗原结合段)均可含有保守的N-糖基化修饰。根据免疫球蛋白IgG 糖基化位点和糖基化形式不同，其免疫学特征显著不同。一些研究已经报道了IgG在卵巢癌、前列腺癌、胃癌和肺癌中的半乳糖化N-聚糖水平具有下降趋势。因此IgG 糖基化修饰与疾病的发生发展密切相关，是一种潜在的且具有较高临床应用价值的生物标志物，可应用于辅助相关疾病的诊断及预后评价。
因此，本领域急需开发一种高灵敏、高特异性的鉴别标志物，用于鉴别肝棘球蚴病与健康对照以及泡型肝棘球蚴病与肝癌，以达到精准诊断的目的。
发明内容
本发明的目的是针对肝棘球蚴病鉴别诊断标志物敏感性和特异性的不足，提供一种高特异性、高灵敏性和高准确性鉴别诊断肝棘球蚴病（囊型和泡型）的标志物血液IgG表面双天线复杂型N糖链末端半乳糖指标以及产品，用于鉴别肝棘球蚴病（囊型和泡型）与健康对照以及泡型肝棘球蚴病与肝癌，以改变肝棘球蚴病鉴别诊断的现状。
本发明首先提供一种对肝棘球蚴病（包括囊型和泡型）进行鉴别的标志物，具体为血液IgG表面双天线复杂型N糖链末端半乳糖指标，记为Gal，其中，Gal=G0/(G1+2G2)，G0代表双天线复杂型N-糖链HexNAc(4)Hex(3)Fuc(1)，G1代表双天线复杂型N-糖链HexNAc(4)Hex(4)Fuc(1)，G2代表双天线复杂型N-糖链HexNAc(4)Hex(5)Fuc(1)，HexNAc代表N-乙酰葡糖胺（GlcNAc），Hex代表六碳糖（高甘露糖Man或半乳糖Gal），Fuc代表岩藻糖，结构示例见图1所示。
本发明还进一步提供用于对肝棘球蚴病（囊型和泡型）进行鉴别及其泡型肝棘球蚴病与肝癌进行区分鉴别的产品，所述产品可为例如试剂盒、设备、可操作系统和/或它们的组合，所述产品包括：
（A）用于测定血液免疫球蛋白G表面双天线复杂型N糖链末端半乳糖基化的试剂、仪器和/或系统，其用于测定IgG表面末端无半乳糖连接的双天线复杂型N糖链G0，末端连有1个半乳糖连接的双天线复杂型N糖链G1，末端连有2个半乳糖连接的双天线复杂型N糖链G2；
例如，用于选自下组的一种或多种方法的试剂、仪器和/或系统：基质辅助激光解析飞行时间质谱法（MALDI-MS）、快原子轰击质谱法（FAB-MS）、电喷雾质谱法（ES-MS）；液相色谱法；超高效液相色谱法；液相色谱-质谱联用法、糖芯片技术；微流控技术；酶联免疫吸附测定；液相芯片技术；核磁共振NMR，优选超高效液相色谱法；
（B）用于计算Gal的模块和/或处理器；
（C）可选的，用于根据Gal鉴别肝棘球蚴病（囊型和泡型）与健康对照以及泡型肝棘球蚴病与肝癌患者鉴别的模块和/或处理器。
在一些实施方式中，所述产品还包括选自下组中的一种或多种：
（a）用于采集和/或处理对象血液样品的试剂和/或仪器；
（b）用于采集和/或纯化对象血清和/或血浆样品的试剂和/或仪器；
（c）用于采集和/或纯化对象血清和/或血浆IgG的试剂和/或仪器；
（d）用于分离、纯化和/或富集血清/血浆IgG表面N-糖链的试剂和/或仪器；
例如，选自下组的分离纯化N糖链方法的试剂和/或仪器：HILIC萃取法（优选采用水活化两性离子型亲水相互作用反相色谱柱（ZIC-HILIC）填料，采用乙腈:水:三氟乙酸=80:19.9:0.1平衡ZIC-HILIC填料，采用乙腈:水:三氟乙酸=10:89.95:0.05的混合溶剂洗脱糖链）、多孔石墨化碳PGC固定萃取法、多糖纯化柱、凝集素亲合法、毛细管电泳、高效液相色谱；
（e）用于标记（如荧光标记）IgG表面N-糖链的试剂和/或仪器；
（f）用于存储和/或处理对象血液的双天线复杂型N糖链末端去半乳糖与单乳糖和双乳糖链丰度比值作为IgG表面半乳糖化程度指标的数据库、模块和/或处理器；
（g）用于根据血液免疫球蛋白G半乳糖化指标判断肝棘球蚴病（囊型和泡型）以及鉴别泡型肝棘球蚴病与肝癌患者的模块和/或处理器；
（h）用于提供检测结果和/或报告的模块和/或处理器。
本发明还提供对肝棘球蚴病进行鉴别的模块，包括：
（ⅰ）肝棘球蚴病（囊型和泡型）与健康对照鉴别子模块：当血液IgG半乳糖化指标Gal高于预先设定的范围（例如5%～50%或该范围内的任意点或子范围），则确定该受试者存在肝棘球蚴病（囊型和泡型）的可能性；
（ⅱ）用于囊型肝棘球蚴病与泡型肝棘球蚴病的鉴别诊断子模块：当血液IgG半乳糖化指标Gal高于囊型肝棘球蚴病预先血清IgG半乳糖化指标Gal的范围（例如5%～50%或该范围内的任意点或子范围），则确定该受试者存在泡型肝棘球蚴病的可能性；
（ⅲ）用于泡型肝棘球蚴病与肝癌的鉴别诊断子模块：当血液IgG半乳糖化指标Gal高于肝癌组预先设定血清IgG半乳糖化指标Gal的范围（例如5%～50%或该范围内的任意点或子范围），则确定该受试者存在泡型肝棘球蚴病的可能性。
所述鉴别模块由软件系统实现，包括Gal的计算和判别。
本发明中，可采集的血液样本为常规方法分离和保存的全血、血清和/或血浆，优选血清；所述对象是哺乳动物，优选人、猴、狗、马、牛、羊、猪、鼠、兔等。
本发明中，所述标志物和应用包括如下步骤的检测方法中：
用IgG亲和纯化柱从对象血液样品中分离和/或纯化血清或血液IgG，优选采用与纯化柱配套的平衡缓冲液、结合缓冲液和洗脱缓冲液；
用糖苷酶酶切处理IgG的N糖链，优选采用PNGaseF；
用两性离子型亲水相互作用（ZIC-HILIC）填料纯化N糖链，优选采用纯水活化ZIC-HILIC填料，采用乙腈:水:三氟乙酸=80:19.9:0.1平衡ZIC-HILIC填料，采用乙腈:水:三氟乙酸=10:89.95:0.05的混合溶剂洗脱糖链。
本发明中，所述Gal计算采用选自下组的公式进行：Gal比值= G0/(G1+2G2)，或其倒数、对数等其他变换形式。
基于对象血清或血液IgG半乳糖化指标Gal 判断该受试者是否患有肝棘球蚴病（囊型和泡型）（含二者鉴别诊断）以及鉴别泡型肝棘球蚴病患者与肝癌患者。
本发明还提供一种对肝棘球蚴病（包括囊型和泡型）进行鉴别的系统，该系统包括：
（a）血液样品采集模块，用于采集和/或处理对象血液样品；
（b）血液样品纯化模块，用于采集和/或纯化对象血清和/或血浆样品；
（c）IgG采集和/或纯化模块，用于采集和/或纯化对象血清和/或血浆IgG；
（d）IgG表面N-糖链分离、纯化模块，用于分离、纯化和/或富集血清/血浆IgG表面N-糖链；
（e）标记模块，用于标记（如荧光标记）IgG表面N-糖链；
（f）存储模块，用于存储和/或处理对象血液的双天线复杂型N糖链末端去半乳糖与单乳糖和双乳糖链丰度比值作为IgG表面半乳糖化程度指标；
（g）鉴别模块，用于根据血液免疫球蛋白G半乳糖化指标判断肝棘球蚴病（囊型和泡型）以及鉴别泡型肝棘球蚴病与肝癌患者；其中包括： Gal计算模块和判别模块；Gal计算模块用于计算血液免疫球蛋白G半乳糖化指标Gal；判别模块用Gal鉴别肝棘球蚴病状况：
（1）Gal对肝棘球蚴病（囊型和泡型）组和正常健康组的区分：
Gal鉴别囊型肝棘球蚴病组和正常健康组情况：囊型肝棘球蚴病组血清IgG表面半乳糖化指标Gal高于正常健康组范围（例如5%～50%或该范围内的任意点或子范围），则确定该受试者存在囊型肝棘球蚴病的可能性；
Gal鉴别泡型肝棘球蚴病组和正常健康组情况：泡型肝棘球蚴病组血清IgG表面半乳糖化指标Gal高于正常健康组范围（例如5%～50%或该范围内的任意点或子范围），则确定该受试者存在泡型肝棘球蚴病的可能性；
（2）Gal鉴别囊型肝棘球蚴病组和泡型肝棘球蚴病组情况：泡型肝棘球蚴病组血清IgG表面半乳糖化指标Gal高于囊型肝棘球蚴病组范围（例如5%～50%或该范围内的任意点或子范围），则确定该受试者存在泡型肝棘球蚴病的可能性；
（3）Gal鉴别泡型肝棘球蚴病组和肝癌组情况：泡型肝棘球蚴病组血清IgG表面半乳糖化指标Gal高于肝癌组范围（例如5%～50%或该范围内的任意点或子范围），则确定该受试者存在泡型肝棘球蚴病的可能性；
（h）显示模块，用于显示、提供检测结果和/或报告。
本发明实现了在肝棘球蚴病（囊型和泡型）（含二者鉴别诊断）以及鉴别泡型肝棘球蚴病患者与肝癌患者之间血清或血液IgG半乳糖化指标Gal的确定以及对前述技术方案和技术特征及性能任意组合而不脱离本发明的构思和保护范围。
本发明的有益效果为：本发明为肝棘球蚴病（囊型和泡型）的血液诊断（含二者鉴别诊断）以及泡型肝棘球蚴病与肝癌的鉴别提供了血清或血液IgG半乳糖化指标Gal，这一潜在鉴别指标可以提升临床诊断能力，有助于改变肝棘球蚴病的诊断现状，对肝棘球蚴病的早发现、早治疗具有重要的临床价值。
具体而言，本发明进行了如下测试并得出相应的结论：
（1）对100例囊型肝棘球蚴病患者样本和29例健康对照样本进行检测，证明了IgG半乳糖化指标Gal对囊型肝棘球蚴病的敏感性筛查具有高特异性、灵敏性和准确性；
（2）对26例泡型肝棘球蚴病患者样本和29例健康对照样本进行检测，证明了IgG半乳糖化指标Gal对泡型肝棘球蚴病的敏感性筛查具有高特异性、灵敏性和准确性；
（3）对100例囊型肝棘球蚴病患者和26例泡型肝棘球蚴病患者样本进行检测，证明了IgG半乳糖化指标Gal对囊型和泡型肝棘球蚴病鉴别诊断具有高特异性、灵敏性和准确性；
（4）对26例泡型肝棘球蚴病患者和24例肝癌患者样本进行检测，证明了IgG半乳糖化指标Gal对泡型肝棘球蚴病和肝癌鉴别诊断具有高特异性、灵敏性和准确性。
本发明具有如下优点：
（1）适用于囊型和泡型肝棘球蚴病的诊断与鉴别；
（2）可对超声影像学诊断混淆的泡型肝棘球蚴病和肝癌进行鉴别诊断；
（3）检测便捷，耗时短；针对单个样本检测重复性好；可进行高通量检测。
附图说明
图1为Gal结构示例。
图2为血清IgG双天线复杂型N糖链末端半乳糖基化质谱图。
图3为肝棘球蚴病（囊型和泡型）患者血清IgG半乳糖化指标Gal诊断的ROC曲线。
图4为泡型肝棘球蚴病患者与肝癌患者血清IgG半乳糖化指标Gal鉴别的ROC曲线。
下面将结合具体的实施例对本发明作进一步的详细说明，以使本领域的技术人员更加清楚地理解本发明。但以下内容不应理解为是对本发明的权利要求书请求保护范围的限制。
实施例1
采用含有IgG半乳糖化指标Gal筛查方法检测了100例囊型肝棘球蚴病患者、26例泡型肝棘球蚴病患者、24例肝癌患者和29例健康对照血清中IgG N糖链，通过IgG双天线复杂型N糖链末端半乳糖基化指标Gal的计算和分析，最终确定了具有一定区分能力的IgG半乳糖化指标Gal。
实施例中所使用的化学试剂和溶剂均为分析纯。
（一）病例样本情况
（1）2014～2016年间棘球蚴病患者126例，其中包括100例囊型肝棘球蚴病患者（CE）和26例泡型肝棘球蚴病患者（AE）均经超声病理影像和验证血清学检测确诊；
（2）24例肝癌患者，均经病理，CT和肿瘤标志物检测确诊；
（3）健康体检者29例，均无肿瘤及近期炎症，同时EB病毒和吸虫病均为阴性的体检健康者。
（二）实验操作步骤
（1）纯化血清IgG：使用Thermo Fisher Scientific Protein A spin plate进行高通量IgG纯化，具体流程如下：
a，室温下96孔纯化富集板分别在洗脱溶液和结合溶液中分别平衡30分钟后，500g转速离心2分钟；重复操作1～2次；
b，混合50ul血清与100ul结合溶液后，转移至96孔纯化富集板，室温孵育60分钟；结合IgG后的富集板先在500g转速离心2分钟，收集样品溶液，重复上样1～2次；
c，最后将富集板放在收集板上，每孔加入300ul结合溶液进行清洗，500g离心2分钟，重复本步骤3次；
d，收集板中加入20ul平衡缓冲液，将富集板放在新的收集板上，并在每个孔中加入200ul洗脱溶液，孵育5分钟，500g转速离心2分钟，收集纯化后的IgG蛋白，并用BCA试剂盒检测样本浓度。
（2）N糖链的分离和纯化
a，采用糖苷酶处理，从IgG中分离出N糖链；将纯化后的IgG样本与PNGaseF酶按（1：1000， m/m）进行混合，37℃下酶解12～24小时；
b，用纯水活化含ZIC-HILIC填料的96孔板后，再用含0.1%三氟乙酸的80%乙腈水溶液平衡含ZIC-HILIC填料的96孔板10分钟，将上述酶解获得IgG N糖链转移至96孔板中孵育1小时；经0.1%三氟乙酸的80%乙腈水溶液清洗3次后，最终用含0.05%三氟乙酸的10%乙腈水溶液洗脱糖链2次并收集洗脱液。
（3）荧光标记N糖链
将上述糖链样品溶于二甲亚砜和冰醋酸的7:3 (v/v)混合溶液，并向其中快速加入50μL5mM 2-氨基苯甲酰胺和10mM氰基硼氢化钠，涡旋均匀；在65℃反应2 h后，加入50 μL水终止标记反应，离心10分钟，纯化后的衍生化糖链干燥后进行超高效液相分析。
（4）荧光标记N糖链的基质辅助激光解析质谱分析
仪器及参数设置：采用5800蛋白质组学分析仪（Applied Biosystems,Framingham, MA, USA）完成；该仪器配置355 nm Nd:YAG激光器，加速电压20 kV，激光脉冲频率400 Hz；操作模式为反射正离子模式，扫描范围根据实际设定，每张质谱图由1000张亚谱累积；用马心肌红蛋白胰酶酶解肽段作为外标进行质量校正。
（5）数据分析
采用Data Explorer 4.5软件进行数据收集和处理，根据谱图中目标峰的相应强度进行血液IgG双天线复杂型N糖链末端去半乳糖G0与单乳糖G1和双乳糖链G2计算，并根据计算公式：Gal比值= G0/(G1+2G2)，计算丰度IgG表面半乳糖化程度指标；血液IgG双天线复杂型N糖链末端去半乳糖与单乳糖和双乳糖链对应峰根据前期质谱串级方法确认；所有数据采用SPSS 25进行数据统计分析。
（三）实验结果
（1）血清IgG N糖链的色谱峰见图2，其中血液IgG双天线复杂型N糖链末端去半乳糖[G0+Na]+（m/z=1485.49Da）与单乳糖[G1+Na]+（m/z=1647.53Da）和双乳糖链[G2+Na]+（m/z=1809.57Da）；IgG表面半乳糖化程度指标Gal见表1；
表1. 各组血清IgG表面半乳糖化程度指标Gal
Figure 622143DEST_PATH_IMAGE001
。
（2）血清IgG表面半乳糖化指标Gal对肝棘球蚴病（囊型和泡型）组和正常健康组的区分
采用血清IgG表面半乳糖化指标Gal鉴别囊型肝棘球蚴病组和正常健康组情况：囊型肝棘球蚴病组血清IgG表面半乳糖化指标Gal高于正常健康组范围（例如5%～50%或该范围内的任意点或子范围），则确定该受试者存在囊型肝棘球蚴病的可能性；受试者工作特征曲线（ROC）的分析结果表明IgG半乳糖化指标Gal的AUC为0.8610（95%CI：0.7851-0.9370），灵敏度为87.0%，特异性为93.1%（参见图3）；结果表明，血清IgG半乳糖化指标Gal能够很好的区分囊型肝棘球蚴病组和健康组，该指标可以用于囊型肝棘球蚴病的诊断。
采用血清IgG表面半乳糖化指标Gal鉴别泡型肝棘球蚴病组和正常健康组情况：泡型肝棘球蚴病组血清IgG表面半乳糖化指标Gal高于正常健康组范围（例如5%～50%或该范围内的任意点或子范围），则确定该受试者存在泡型肝棘球蚴病的可能性；受试者工作特征曲线（ROC）的分析结果表明IgG表面半乳糖化指标Gal的AUC为0.9814（95%CI：0.9552-1.008），具有更高的灵敏度100%和特异性100%（参见图3）。结果表明，血清IgG表面半乳糖化指标Gal能够很好的区分泡型肝棘球蚴病组和健康组，该指标可以用于泡型肝棘球蚴病的诊断。
采用血清IgG表面半乳糖化指标Gal鉴别囊型肝棘球蚴病组和泡型肝棘球蚴病组情况：泡型肝棘球蚴病组血清IgG表面半乳糖化指标Gal高于囊型肝棘球蚴病组范围（例如5%～50%或该范围内的任意点或子范围），则确定该受试者存在泡型肝棘球蚴病的可能性；受试者工作特征曲线（ROC）的分析结果表明IgG表面半乳糖化指标Gal的AUC为0.8346（95%CI：0.7457-0.9236），灵敏度和特异性分别为92.3%和83.3%（参见图3）。结果表明，血清IgG表面半乳糖化指标Gal能够很好的区分囊型肝棘球蚴病组和泡型肝棘球蚴病组，该指标可以用于囊型肝棘球蚴病和泡型肝棘球蚴病的鉴别诊断。
（3）血清IgG表面半乳糖化指标Gal对泡型肝棘球蚴病组和肝癌组的区分
采用血清IgG表面半乳糖化指标Gal鉴别泡型肝棘球蚴病组和肝癌组情况：泡型肝棘球蚴病组血清IgG表面半乳糖化指标Gal高于肝癌组范围（例如指标Gal在泡型肝棘球蚴病组中的平均值为1.656±0.2201，而在肝癌组中的平均值为0.3343±0.02699），则确定该受试者存在泡型肝棘球蚴病的可能性；受试者工作特征曲线（ROC）的分析结果表明IgG表面半乳糖化指标Gal的AUC为0.9904（95%CI：0.9697-1.011），灵敏度为100%，特异性为100%（参见图4）。结果表明，血清IgG表面半乳糖化指标Gal能够很好的鉴别泡型肝棘球蚴病组和肝癌组，该指标可以用于超声影像学混淆的泡型肝棘球蚴病和肝癌的鉴别诊断。

Claims (5)

1.一种对肝棘球蚴病进行鉴别的标志物，具体为血液IgG表面双天线复杂型N糖链末端半乳糖指标，记为Gal，其中，Gal=G0/(G1+2G2)，G0代表双天线复杂型N-糖链HexNAc(4)Hex(3)Fuc(1)，G1代表双天线复杂型N-糖链HexNAc(4)Hex(4)Fuc(1)，G2代表双天线复杂型N-糖链HexNAc(4)Hex(5)Fuc(1)，HexNAc代表N-乙酰葡糖胺，Hex代表六碳糖，Fuc代表岩藻糖；所述肝棘球蚴病包括囊型和泡型。
2.一种用于对肝棘球蚴病进行鉴别，以及泡型肝棘球蚴病与肝癌进行区分鉴别的产品，所述产品为试剂盒、设备、可操作系统和/或它们的组合，所述产品包括：
（A）用于测定血液免疫球蛋白G表面双天线复杂型N糖链末端半乳糖基化的试剂、仪器和/或系统，其用于测定IgG表面末端无半乳糖连接的双天线复杂型N糖链G0，末端连有1个半乳糖连接的双天线复杂型N糖链G1，末端连有2个半乳糖连接的双天线复杂型N糖链G2；
（B）用于计算Gal的模块和/或处理器；
（C）用于根据Gal鉴别肝棘球蚴病与健康对照以及泡型肝棘球蚴病与肝癌患者鉴别的模块和/或处理器。
3.根据权利要求2所述的产品，其特征在于，还包括选自下组中的一种或多种：
（a）用于采集和/或处理对象血液样品的试剂和/或仪器；
（b）用于采集和/或纯化对象血清和/或血浆样品的试剂和/或仪器；
（c）用于采集和/或纯化对象血清和/或血浆IgG的试剂和/或仪器；
（d）用于分离、纯化和/或富集血清/血浆IgG表面N-糖链的试剂和/或仪器；
（e）用于标记IgG表面N-糖链的试剂和/或仪器；
（f）用于存储和/或处理对象血液的双天线复杂型N糖链末端去半乳糖与单乳糖和双乳糖链丰度比值作为IgG表面半乳糖化程度指标的数据库、模块和/或处理器；
（g）用于根据血液免疫球蛋白G半乳糖化指标判断肝棘球蚴病以及鉴别泡型肝棘球蚴病与肝癌患者的模块和/或处理器；
（h）用于提供检测结果和/或报告的模块和/或处理器。
4.一种对肝棘球蚴病进行鉴别的模块，其特征在于，包括：
（ⅰ）肝棘球蚴病与健康对照鉴别子模块：当血液IgG半乳糖化指标Gal高于预先设定的范围，则确定该受试者存在肝棘球蚴病的可能性；
（ⅱ）用于囊型肝棘球蚴病与泡型肝棘球蚴病的鉴别诊断子模块：当血液IgG半乳糖化指标Gal高于囊型肝棘球蚴病预先血清IgG半乳糖化指标Gal的范围，则确定该受试者存在泡型肝棘球蚴病的可能性；
（ⅲ）用于泡型肝棘球蚴病与肝癌的鉴别诊断子模块：当血液IgG半乳糖化指标Gal高于肝癌组预先设定血清IgG半乳糖化指标Gal的范围，则确定该受试者存在泡型肝棘球蚴病的可能性。
5.一种对肝棘球蚴病进行鉴别的系统，其特征在于，包括：
（a）血液样品采集模块，用于采集和/或处理对象血液样品；
（b）血液样品纯化模块，用于采集和/或纯化对象血清和/或血浆样品；
（c）IgG采集和/或纯化模块，用于采集和/或纯化对象血清和/或血浆IgG；
（d）IgG表面N-糖链分离、纯化模块，用于分离、纯化和/或富集血清/血浆IgG表面N-糖链；
（e）标记模块，用于标记IgG表面N-糖链；
（f）存储模块，用于存储和/或处理对象血液的双天线复杂型N糖链末端去半乳糖与单乳糖和双乳糖链丰度比值作为IgG表面半乳糖化程度指标；
（g）鉴别模块，用于根据血液免疫球蛋白G半乳糖化指标判断肝棘球蚴病以及鉴别泡型肝棘球蚴病与肝癌患者；其中包括： Gal计算模块和判别模块；Gal计算模块用于计算血液免疫球蛋白G半乳糖化指标Gal；判别模块用Gal鉴别肝棘球蚴病状况：
（1）Gal对肝棘球蚴病组和正常健康组的区分：
Gal鉴别囊型肝棘球蚴病组和正常健康组情况：囊型肝棘球蚴病组血清IgG表面半乳糖化指标Gal高于正常健康组范围，则确定该受试者存在囊型肝棘球蚴病的可能性；
Gal鉴别泡型肝棘球蚴病组和正常健康组情况：泡型肝棘球蚴病组血清IgG表面半乳糖化指标Gal高于正常健康组范围，则确定该受试者存在泡型肝棘球蚴病的可能性；
（2）Gal鉴别囊型肝棘球蚴病组和泡型肝棘球蚴病组情况：泡型肝棘球蚴病组血清IgG表面半乳糖化指标Gal高于囊型肝棘球蚴病组范围，则确定该受试者存在泡型肝棘球蚴病的可能性；
（3）Gal鉴别泡型肝棘球蚴病组和肝癌组情况：泡型肝棘球蚴病组血清IgG表面半乳糖化指标Gal高于肝癌组范围，则确定该受试者存在泡型肝棘球蚴病的可能性；
（h）显示模块，用于显示、提供检测结果和/或报告。
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