CN115039536A - 一种木地肤种子生活力的四唑测定方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及草种子质量检验技术领域，尤其涉及一种木地肤种子生活力的四唑测定方法，包括如下步骤：将木地肤净种子浸泡在清水中3‑6小时，滤出备用；浸泡预湿的种子将种胚从外面包裹的种皮中分离出来；将分离出的种胚放入由磷酸缓冲液配置的质量浓度为1.0％的四唑溶液中，于30℃‑35℃恒温条件下避光染色1‑3小时；染色结束后，自来水冲洗，立即观察种胚着色情况，判断种子有无生活力，本发明采用四唑溶液对木地肤种子在适宜的预湿浸泡时间、染色液浓度、染色温度、染色时间等条件下进行染色，通过观察种胚着色判断种子生活力，对于准确判断种子质量特别是休眠种子的最大发芽潜力具有重要意义，在草地利用和生态建设用种等方面具有重要的实践意义。
Description
技术领域
本发明涉及草种子质量检验技术领域，尤其涉及一种木地肤种子生活力的四唑测定方法。
背景技术
木地肤隶属于藜科地肤属，是一种抗寒、抗旱、耐盐碱、耐瘠薄、品质优良的野生牧草，分布于荒漠、山坡、沙地等处，其适口性好、营养价值较高，家畜均喜食，是干旱地区的重要饲用植物之一，同时，木地肤也是荒漠地区补播、改良盐碱地和防风固沙等生态建设的较好草种，可见，该植物具有很好的生态价值、饲用价值和潜在的经济价值。
种子生活力是指种子发芽的潜在能力或种胚具有的生命力，是预期具有长成正常幼苗的潜力，种子生活力测定对于显现种子的生命现象，并判断其长出正常幼苗和植株的潜在能力，从而快速预测种子发芽率具有重要意义，其中四唑测定是一种实用方便、省时快捷、结果可靠的种子生活力测定方法，已广泛应用于草种子质量检验检测中。
研究发现不同品种，不同收获日期，干燥方式，贮藏时间长短和贮藏时的温度均对木地肤种子的萌发率有显著影响，而且，木地肤种子萌发受到原产地材料收获条件的限制，野外收获的新鲜种子具有生理性休眠现象，在实验室环境下，收获一天后的种子仅有20％～30％萌发，现有的发芽试验技术不能够保证所有有生活力的种子全部发芽，不能够准确评价木地肤种子的生活力。
发明内容
本发明的目的是解决现有技术存在的以下问题：现有的发芽试验技术不能够保证所有有生活力的种子全部发芽，不能够准确评价木地肤种子的生活力。
为解决现有技术存在的问题，本发明提供一种木地肤种子生活力的四唑测定方法，包括如下步骤：
A、将木地肤净种子浸泡在清水中3-6小时，滤出备用；
B、浸泡预湿的种子将种胚从外面包裹的种皮中分离出来；
C、将分离出的种胚放入由磷酸缓冲液配置的质量浓度为1.0％的四唑溶液中，于30℃-35℃恒温条件下避光染色1-3小时；
D、染色结束后，自来水冲洗，立即观察种胚着色情况，判断种子有无生活力。
优选的，所述步骤B中浸泡预湿的种子将种胚从外面包裹的种皮中分离出来，分离出来的种胚保持结构完整。
优选的，所述步骤C中1.0％的四唑溶液制备如下：
a、在1000mL蒸馏水中溶解9.078g磷酸二氢钾KH2PO4配置成溶液Ⅰ；
b、在1000mL蒸馏水中溶解9.472g磷酸氢二钠Na2HPO4或11.876g二水磷酸氢二钠Na2HPO4·2H2O配置成溶液Ⅱ；
c、取溶液Ⅰ两份和溶液Ⅱ三份混合而得缓冲液，缓冲液pH值6.5～7.5；
d、称取1.0g 2,3,5—氯化三苯基四唑或溴化三苯基四唑用缓冲液溶解定容至100mL。
优选的，所述步骤D中的观察种胚着色判断种子生活力标准如下：所述种胚全部染色或少于三分之一胚根不被染色、染色较弱或者坏死的鉴定为有生活力的种子；所述种胚全部不被染色、染色较弱或者坏死或超过三分之一胚根不被染色、染色较弱或者坏死的鉴定为无生活力或死种子。
与相关技术相比较，本发明提供的木地肤种子生活力的四唑测定方法具有如下有益效果：
本发明采用四唑溶液对木地肤种子在适宜的预湿浸泡时间、染色液浓度、染色温度、染色时间等条件下进行染色，通过观察种胚着色判断种子生活力，简便易行，结果可靠，对于准确判断种子质量特别是休眠种子的最大发芽潜力具有重要意义，在草地利用和生态建设用种等方面具有重要的实践意义。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
以下结合具体实施例对本发明的具体实现进行详细描述。
实施例1
种子生活力测定：选取农业农村部牧草与草坪草种子质量监督检验测试中心(乌鲁木齐)于2020年在新疆塔城地区采集的编号为001的木地肤种子，将净种子预湿浸泡在清水中4小时后取出，随机数取400粒，分为4个重复，每个重复100粒种子；预湿的种子将种胚从外面包裹的种皮中完整分离出来；将分离出的种胚放入由磷酸缓冲液配置的质量浓度为1.0％的四唑溶液中，于32℃恒温条件下避光染色3小时；染色结束后，用自来水冲洗种子3次，立即观察种胚着色情况判断种子有无生活力。
分别统计各重复中有生活力种子的数目，计算每个重复有生活力种子百分率，然后计算出4个重复的平均百分率，以整数表示，再与表1中相应生活力平均值所对应的最大容许差距进行比较。
判断种子有无生活力，判断标准为：种胚全部染色，或少于三分之一胚根不被染色、染色较弱或者坏死的鉴定为有生活力的种子；种胚全部不被染色、染色较弱或者坏死，或超过三分之一胚根不被染色、染色较弱或者坏死的鉴定为无生活力或死种子；
有生活力种子百分率＝(n/N)×100％，式中：n代表有生活力的种子数，N代表参试的种子数；
表1为同一四唑测定试验的四个重复间最大容许差距(2.5％显著水平的两尾检验)。
表1
发芽试验：将该批次种子进行发芽试验，从净种子中随机数取4个重复，每个重复100粒种子，分别置于放有2层湿润滤纸的培养皿中；将培养皿置于25℃恒温光照培养箱中，且每日光照8小时；每天检查培养皿，保持滤纸湿润；发芽试验时间为14天，按照正常幼苗、新鲜未发芽种子、不正常幼苗和死种子统计发芽结果。
实施例2
重复实施例1进行生活力测定，有以下不同：净种子预湿浸泡时间为5小时，染色温度为35℃，染色时间为2小时。
实施例3
以农业农村部牧草与草坪草种子质量监督检验测试中心(乌鲁木齐)于2021年在新疆呼图壁县采集的编号为002的木地肤种子为试验材料，重复实施例1进行生活力测定和发芽试验，有以下不同：净种子预湿浸泡时间为5小时，染色温度为31℃，染色时间为2小时。
实施例4
重复实施例3进行生活力测定，有以下不同：净种子预湿浸泡时间为6小时，染色温度为35℃，染色时间为1小时。
实施例5
以农业农村部牧草与草坪草种子质量监督检验测试中心(乌鲁木齐)于2021年在新疆呼图壁县采集的编号为003的木地肤种子为试验材料，重复实施例1进行生活力测定和发芽试验，有以下不同：净种子预湿浸泡时间为3小时，染色温度为30℃，染色时间为3小时。
实施例6
重复实施例5进行生活力测定，有以下不同：净种子预湿浸泡时间为4小时，染色温度为33℃，染色时间为2小时。
实施例7
以农业农村部牧草与草坪草种子质量监督检验测试中心(乌鲁木齐)于2021年在新疆伊犁霍城县采集的编号为004的木地肤种子为试验材料，重复实施例1进行生活力测定和发芽试验，有以下不同：净种子预湿浸泡时间为6小时，染色温度为30℃，染色时间为3小时。
实施例8
重复实施例7进行生活力测定，有以下不同：净种子预湿浸泡时间为4小时，染色温度为34℃，染色时间为1小时。
实施例1-8中每个重复有生活力种子百分率及平均百分率，容许差距和实际差距见表2。
表2
从表2中可以看出，各实施例中4个重复的实际差距未超过容许差距，说明测定数据准确，可重复性好。
实施例1和2，实施例3和4，实施例5和6，实施例7和8，分别选取同一批种子为试验材料进行生活力测定，但预湿浸泡时间、染色温度和染色时间不一样，两个独立测定结果的差距与表3中相应生活力平均值所对应的最大容许差距进行比较。
表3为同一实验室相同送验样品生活力测定结果的最大容许差距(2.5％显著水平的两尾检验)。
表3
实施例1-8中，选取同一批种子，采用不同方法测定生活力的两个独立测定结果的平均值、容许差距和实际差距见表4。
表4
从表4中可以看出，相同样品两次测定结果的实际差距未超过两次测定结果平均值所对应的最大容许差距，说明两次测定结果可靠。
实施例1-8的生活力测定结果和发芽试验结果见表5。
表5
从表5可以看出，本发明提供的方法同种子发芽试验结果成明显正相关，说明用该方法测定木地肤种子生活力的结果准确有效。
Claims (4)
1.一种木地肤种子生活力的四唑测定方法，其特征在于，包括如下步骤：
A、将木地肤净种子浸泡在清水中3-6小时，滤出备用；
B、浸泡预湿的种子将种胚从外面包裹的种皮中分离出来；
C、将分离出的种胚放入由磷酸缓冲液配置的质量浓度为1.0％的四唑溶液中，于30℃-35℃恒温条件下避光染色1-3小时；
D、染色结束后，自来水冲洗，立即观察种胚着色情况，判断种子有无生活力。
2.根据权利要求1所述的木地肤种子生活力的四唑测定方法，其特征在于，所述步骤B中浸泡预湿的种子将种胚从外面包裹的种皮中分离出来，分离出来的种胚保持结构完整。
3.根据权利要求1所述的木地肤种子生活力的四唑测定方法，其特征在于，所述步骤C中1.0％的四唑溶液制备如下：
a、在1000mL蒸馏水中溶解9.078g磷酸二氢钾KH2PO4配置成溶液Ⅰ；
b、在1000mL蒸馏水中溶解9.472g磷酸氢二钠Na2HPO4或11.876g二水磷酸氢二钠Na2HPO4·2H2O配置成溶液Ⅱ；
c、取溶液Ⅰ两份和溶液Ⅱ三份混合而得缓冲液，缓冲液pH值6.5～7.5；
d、称取1.0g 2,3,5—氯化三苯基四唑或溴化三苯基四唑用缓冲液溶解定容至100mL。
4.根据权利要求1所述的木地肤种子生活力的四唑测定方法，其特征在于，所述步骤D中的观察种胚着色判断种子生活力标准如下：
所述种胚全部染色或少于三分之一胚根不被染色、染色较弱或者坏死的鉴定为有生活力的种子；所述种胚全部不被染色、染色较弱或者坏死或超过三分之一胚根不被染色、染色较弱或者坏死的鉴定为无生活力或死种子。
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Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110073760A (zh) * | 2019-05-31 | 2019-08-02 | 兰州大学 | 一种用于细叶鸢尾种子生活力快速测定的预湿液、染色液及方法 |
| CN112930760A (zh) * | 2021-04-05 | 2021-06-11 | 兰州大学 | 一种甜椒种子生活力的四唑测定方法 |
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Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110073760A (zh) * | 2019-05-31 | 2019-08-02 | 兰州大学 | 一种用于细叶鸢尾种子生活力快速测定的预湿液、染色液及方法 |
| CN112930760A (zh) * | 2021-04-05 | 2021-06-11 | 兰州大学 | 一种甜椒种子生活力的四唑测定方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 刘涛;李柱;安沙舟;许帼英;: "干旱胁迫对木地肤幼苗生理生化特性的影响" * |
| 张西西;董爱香;张华丽;: "四唑法测定几种草花种子生活力标准的研究" * |
| 谭伟东;朱艳霞;柯芳;叶志文;钟一雄;董青松;: "毛鸡骨草种子四唑染色法的研究" * |
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