CN114929237A - 海藻糖制剂及其用途 - Google Patents

Abstract

本公开涉及通过向受试者施用海藻糖制剂来治疗或减轻所述受试者的黏多糖症的一种或多种症状的方法。

Description

海藻糖制剂及其用途

相关申请

本申请要求于2019年10月1日提交的美国临时申请62/908,784的权益，该申请全文以引用方式并入本文。

技术领域

本公开涉及新型海藻糖组合物、用于制备这些组合物的方法、以及这些组合物在疗法中的用途。更具体地，本公开涉及可用于治疗和/或改善黏多醣症症状的海藻糖组合物。

背景技术

黏多糖症(MPS)是一组遗传性溶酶体贮积症(LDS)，这些疾患的特征在于多器官系统异常和预期寿命缩短。MPS是异质性的进行性病患，其中受试者通常在出生时表现正常，但在童年早期会经历临床疾病(包括骨骼、关节、呼吸道和心脏症状，以及听力、视力和认知损害)的发作。MPS是由于糖胺聚糖(GAG)降解所需的单一特异性溶酶体酶活性不足引起的。参见Muenzer等人，Rheumatology，第50卷，增刊第5期，第v4-v12页(2011年)。

除透明质酸外的糖胺聚糖是细胞外基质中蛋白聚糖的降解产物。蛋白聚糖被蛋白酶裂解，产生GAG，这些GAG进入溶酶体以供细胞内消化。根据要降解的分子，存在四条不同的GAG溶酶体降解途径：硫酸皮肤素、硫酸乙酰肝素、硫酸角质素和硫酸软骨素。糖胺聚糖的逐步降解需要十种不同的酶。已经报道这些酶中的每一种酶的缺乏并且这些酶的缺乏导致七种不同的MPS，所有这些MPS在不同程度上共享一系列临床特征。参见Couthino等人，Biochem.Res.Intl.，第2012卷，文章ID 471325，第1-16页。

目前针对MPS的治疗选项包括造血干细胞移植(HSCT)和酶替代疗法(ERT)。然而，HSCT具有侵入性且价格昂贵，ERT也很昂贵并且提供的酶分布不均匀，使得某些区域诸如骨、肺和大脑未得到治疗。而且这两种治疗都需要使用先进的医疗护理设施。因此，需要有效且侵入性较小的MPS治疗。

发明内容

本文提供了治疗有需要的受试者的黏多糖症的方法，这些方法包括向受试者静脉内施用水性药物制剂，其中制剂包含基本上由实质性纯化的海藻糖组成的单一活性成分，其中：制剂的pH为约4.5至7.0；制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；制剂在约15分钟至约150分钟内施用；其中实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于制剂中；并且其中实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

本文还提供了减轻有需要的受试者的黏多糖症的一种或多种症状的方法，这些方法包括向受试者静脉内施用水性药物制剂，其中制剂包含基本上由实质性纯化的海藻糖组成的单一活性成分，其中：制剂的pH为约4.5至7.5；制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；制剂在约15分钟至约150分钟内施用；其中实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于制剂中；并且其中实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

本文还提供了治疗有需要的受试者的黏多糖症的方法，这些方法包括向受试者静脉内施用水性药物制剂，其中制剂包含实质性纯化的海藻糖和海藻糖酶抑制剂作为唯一的活性成分，其中：制剂的pH为约4.5至7.0；制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；制剂在约15分钟至约150分钟内施用；其中实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于制剂中；并且其中实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

本文还提供了减轻有需要的受试者的黏多糖症的一种或多种症状的方法，这些方法包括向受试者静脉内施用水性药物制剂，其中制剂包含实质性纯化的海藻糖和海藻糖酶抑制剂作为唯一的活性成分，其中：制剂的pH为约4.5至7.0；制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；制剂在约15分钟至约150分钟内施用；其中实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于制剂中；并且其中实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

本文还提供了治疗有需要的受试者的黏多糖症的方法，这些方法包括(a)确定受试者患有溶酶体酶缺乏症；以及(b)向受试者静脉内施用水性药物制剂，其中制剂包含基本上由实质性纯化的海藻糖组成的单一活性成分，其中：制剂的pH为约4.5至7.0；制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；制剂在约15分钟至约150分钟内施用；其中实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于制剂中；并且其中实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

本文还提供了减轻有需要的受试者的黏多糖症的一种或多种症状的方法，这些方法包括(a)确定受试者患有溶酶体酶缺乏症；以及(b)向受试者静脉内施用水性药物制剂，其中制剂包含基本上由实质性纯化的海藻糖组成的单一活性成分，其中：制剂的pH为约4.5至7.0；制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；制剂在约15分钟至约150分钟内施用；其中实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于制剂中；并且其中实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

本文还提供了治疗有需要的受试者的黏多糖症的方法，这些方法包括(a)确定受试者患有溶酶体酶缺乏症；以及(b)向受试者静脉内施用水性药物制剂，其中制剂包含实质性纯化的海藻糖和海藻糖酶抑制剂作为唯一的活性成分，其中：制剂的pH为约4.5至7.0；制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；制剂在约15分钟至约150分钟内施用；其中实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于制剂中；并且其中实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

本文还提供了减轻有需要的受试者的黏多糖症的一种或多种症状的方法，这些方法包括(a)确定受试者患有溶酶体酶缺乏症；以及(b)向受试者静脉内施用水性药物制剂，其中制剂包含实质性纯化的海藻糖和海藻糖酶抑制剂作为唯一的活性成分，其中：制剂的pH为约4.5至7.0；制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；制剂在约15分钟至约150分钟内施用；其中实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于制剂中；并且其中实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

除非另有定义，否则本文中所使用的所有技术术语和科学术语的含义与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同。本文描述了用于本发明的方法和材料；还可以使用其他在本领域已知的合适的方法和材料。材料、方法和实施例仅是说明性的并且不旨在是限制性的。本文所提及的所有出版物、专利申请、专利、序列、数据库条目和其他参考文献通过全文引用的方式并入。在发生冲突的情况下，应以本说明书(包含定义)为准。

本发明的其他特征和优点通过以下详细描述和附图以及通过权利要求变得显而易见。

附图说明

图1示出了不同的已知MPS、与每种MPS相关的基因和蛋白质，以及因MPS相关基因和/或MPS相关蛋白质的紊乱而聚集的糖类化合物。

具体实施方式

定义

如本文所用，术语“治疗”是指治疗性措施。有益的或期望的临床结果包括但不限于疾病状态稳定(即，不恶化)、疾病进展的延迟或减慢、以及缓解(无论是部分缓解还是完全缓解)，无论这些临床结果是可检测的还是不可检测的。“治疗”还可意指与未接受治疗的预期生存期相比延长生存期。在一些实施方案中，治疗包括减轻如本文所定义的疾病的一种或多种症状。

如本文所用，“减轻”是指与疾病或疾患或病症相关的症状部分减少或全部消失、疾病程度的减轻、以及疾病状态的改善或缓解(例如，疾病的一种或多种症状)。

如本文所用，术语“MPS相关”是指与黏多糖症相关的核酸(例如，DNA或RNA)和/或蛋白质，例如具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱导致罹患黏多糖症。MPS相关基因的非限制性实施例包括例如IDUA、IDS、SGSH、NAGLU、HGSNAT、GNS、GALNS、GLB1、ARSB、GUSB和HYAL1。MPS相关蛋白质的非限制性实施例包括例如α-L-艾杜糖醛酸酶、艾杜糖醛酸硫酸酯酶、乙酰肝素磺酰胺酶、N-乙酰基氨基葡糖苷酶、乙酰肝素-α-氨基葡糖苷-N-乙酰基转移酶、N-乙酰基氨基葡萄糖-6-硫酸酯酶、半乳糖-6-硫酸硫酸酯酶、β-半乳糖苷酶、N-乙酰基半乳糖胺-4-硫酸酯酶、β-葡萄糖醛酸酶和透明质酸酶。

如本文所用，术语“受试者”是指任何动物，包括哺乳动物诸如小鼠、大鼠、其他啮齿动物、兔、狗、猫、猪、牛、羊、马、灵长类动物和人类。在一些实施方案中，受试者是人类。在一些实施方案中，受试者已经历并且/或者表现出要治疗和/或减轻的疾病或病患的至少一种症状。在一些实施方案中，受试者已被鉴定或诊断为患有MPS，其中MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的活性或水平(例如，如使用监管机构批准的例如FDA批准的测定或试剂盒所确定的)紊乱。在一些实施方案中，受试者的样本中MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的活性或水平(例如，如使用监管机构批准的测定或试剂盒所确定的)紊乱呈阳性。在一些实施方案中，受试者疑似患有MPS。在一些实施方案中，受试者的临床记录表明，受试者的样本具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的活性或水平紊乱(并且任选地，临床记录表明，应当使用本文提供的组合物中的任何组合物治疗受试者)。在一些实施方案中，受试者是儿科受试者。

如本文所用，术语“儿科受试者”是指在诊断或治疗时未满21岁的受试者。术语“儿科”还可分为不同的亚群，包括：新生儿(从出生到出生后第一个月)；婴儿(1个月直至两岁)；儿童(两岁直至12岁)；和青少年(12岁到21岁(直至但不包括二十二岁生日))。BerhmanRE、Kliegman R、Arvin AM、Nelson WE，Nelson Textbook of Pediatrics，第15版，Philadelphia:W.B.Saunders Company，1996年；Rudolph AM等人，Rudolph’s Pediatrics，第21版，New York:McGraw-Hill，2002年；以及Avery MD、First LR，Pediatric Medicine，第2版，Baltimore:Williams&Wilkins，1994年。在一些实施方案中，儿科受试者为从出生到出生后28天、从29天日龄至两岁以下、从两岁至12岁以下、或从12岁到21岁(直至但不包括二十二岁生日)。在一些实施方案中，儿科受试者为从出生到出生后28天、从29天日龄至1岁以下、从一个月的月龄至四个月的月龄以下、从三个月的月龄至七个月的月龄以下、从六个月的月龄至1岁以下、从1岁至2岁以下、从2岁至3岁以下、从2岁至七岁以下、从3岁至5岁以下、从5岁至10岁以下、从6岁至13岁以下、从10岁至15岁以下、或从15岁至21岁以下。

短语“MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱”是指基因突变。例如，导致与野生型α-L-艾杜糖醛酸酶蛋白质相比包括至少一种氨基酸的缺失的α-L-艾杜糖醛酸酶蛋白质表达的IDUA基因的突变、导致与野生型α-L-艾杜糖醛酸酶蛋白质相比具有一个或多个点突变的α-L-艾杜糖醛酸酶蛋白质的表达的IDUA基因的突变、或导致与野生型α-L-艾杜糖醛酸酶蛋白质相比具有至少一种插入氨基酸的α-L-艾杜糖醛酸酶蛋白质的表达的IDUA基因的突变。特定MPS相关蛋白质点突变/插入/缺失的非限制性实施例描述于表1中。

术语“野生型”描述了存在于不患有MPS(并且任选地也不具有增加的患上MPS的风险)并且/或者不疑似患有MPS的受试者中，或存在于来自不患有MPS(并且任选地也不具有增加的患上MPS的风险)和/或不疑似患有MPS的受试者的细胞或组织中的核酸(例如，特定基因或mRNA，诸如IDUA)或蛋白质(例如α-L-艾杜糖醛酸酶)。

短语“基本上由……组成”或“由……组成”排除未指定的任何元素、步骤或成分，例如，排除除了所列举的通常与其相关的杂质之外的那些以外的材料。

术语“监管机构”是指对药物制剂在国家内的医疗用途进行审批的国家机构。例如，监管机构的非限制性实施例是美国食品药品管理局(FDA)。

治疗方法

一些实施方案提供了治疗有需要的受试者的黏多糖症的方法，这些方法包括向受试者静脉内施用水性药物制剂，其中制剂包含基本上由实质性纯化的海藻糖组成的单一活性成分，其中：

制剂的pH为约4.5至7.0；

制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；

制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；

制剂在约15分钟至约150分钟内施用；

其中实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于制剂中；并且

其中实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

一些实施方案提供了减轻有需要的受试者的黏多糖症的一种或多种症状的方法，这些方法包括向受试者静脉内施用水性药物制剂，其中制剂包含基本上由实质性纯化的海藻糖组成的单一活性成分，其中：

制剂的pH为约4.5至7.5；

制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；

制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；

制剂在约15分钟至约150分钟内施用；

其中实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于制剂中；并且

其中实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

一些实施方案提供了治疗有需要的受试者的黏多糖症的方法，这些方法包括向受试者静脉内施用水性药物制剂，其中制剂包含实质性纯化的海藻糖和海藻糖酶抑制剂作为唯一的活性成分，其中：

制剂的pH为约4.5至7.0；

制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；

制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；

制剂在约15分钟至约150分钟内施用；

其中实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于制剂中；并且

其中实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

一些实施方案提供了减轻有需要的受试者的黏多糖症的一种或多种症状的方法，这些方法包括向受试者静脉内施用水性药物制剂，其中制剂包含实质性纯化的海藻糖和海藻糖酶抑制剂作为唯一的活性成分，其中：

制剂的pH为约4.5至7.0；

制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；

制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；

制剂在约15分钟至约150分钟内施用；

其中实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于制剂中；并且

其中实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

一些实施方案提供了治疗有需要的受试者的黏多糖症的方法，这些方法包括

(a)确定受试者患有溶酶体酶缺乏症；以及

(b)向受试者静脉内施用水性药物制剂，其中制剂包含基本上由实质性纯化的海藻糖组成的单一活性成分，其中：

制剂的pH为约4.5至7.0；

制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；

制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；

制剂在约15分钟至约150分钟内施用；

其中实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于制剂中；并且

其中实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

一些实施方案提供了减轻有需要的受试者的黏多糖症的一种或多种症状的方法，这些方法包括

(a)确定受试者患有溶酶体酶缺乏症；以及

(b)向受试者静脉内施用水性药物制剂，其中制剂包含基本上由实质性纯化的海藻糖组成的单一活性成分，其中：

制剂的pH为约4.5至7.0；

制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；

制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；

制剂在约15分钟至约150分钟内施用；

其中实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于制剂中；并且

其中实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

一些实施方案提供了治疗有需要的受试者的黏多糖症的方法，这些方法包括

(a)确定受试者患有溶酶体酶缺乏症；以及

(b)向受试者静脉内施用水性药物制剂，其中制剂包含实质性纯化的海藻糖和海藻糖酶抑制剂作为唯一的活性成分，其中：

制剂的pH为约4.5至7.0；

制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；

制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；

制剂在约15分钟至约150分钟内施用；

其中实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于制剂中；并且

其中实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

一些实施方案提供了减轻有需要的受试者的黏多糖症的一种或多种症状的方法，这些方法包括

(a)确定受试者患有溶酶体酶缺乏症；以及

(b)向受试者静脉内施用水性药物制剂，其中制剂包含实质性纯化的海藻糖和海藻糖酶抑制剂作为唯一的活性成分，其中：

制剂的pH为约4.5至7.0；

制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；

制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；

制剂在约15分钟至约150分钟内施用；

其中实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于制剂中；并且

其中实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

一些实施方案提供了治疗有需要的受试者的黏多糖症的方法，这些方法包括向受试者静脉内施用水性药物制剂，其中制剂包含基本上由实质性纯化的海藻糖组成的单一活性成分，其中：制剂的pH为约5.0至6.0；制剂每mL含有少于约0.25个内毒素单位；制剂具有约300mOsm/kg至310mOsm/kg的渗透压；制剂在约15分钟至约60分钟内施用；其中实质性纯化的海藻糖以约8％(w/v)至约10％(w/v)的量存在于制剂中；并且其中实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。在一些实施方案中，黏多糖症选自：Sanfillippo综合征A(MPS IIIA)、Sanfillippo综合征B(MPS IIIB)、Sanfillippo综合征C(MPS IIIC)和Sanfillippo综合征D(MPS IIID)。其他实施方案提供了减轻有需要的受试者的黏多糖症的一种或多种症状的方法，这些方法包括向受试者静脉内施用水性药物制剂，其中制剂包含基本上由实质性纯化的海藻糖组成的单一活性成分，其中：制剂的pH为约5.0至6.0；制剂每mL含有少于约0.25个内毒素单位；制剂具有约300mOsm/kg至310mOsm/kg的渗透压；制剂在约15分钟至约60分钟内施用；其中实质性纯化的海藻糖以约8％(w/v)至约10％(w/v)的量存在于制剂中；并且其中实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。在一些实施方案中，黏多糖症选自：Sanfillippo综合征A(MPS IIIA)、Sanfillippo综合征B(MPS IIIB)、Sanfillippo综合征C(MPS IIIC)和Sanfillippo综合征D(MPS IIID)。

在一些实施方案中，制剂的pH为约4.5至7.0。在一些实施方案中，制剂的pH为约4.5、约4.8、约5、约5.3、约5.5、约5.8、约6、约6.3、约6.5、约6.8、约7或介于两者之间的任何值。在一些实施方案中，制剂的pH为约4.4至约6.6。在其他实施方案中，制剂的pH为约4.5至约6.5。在其他实施方案中，制剂的pH为约5至约6。在一些实施方案中，制剂的pH为约5.5。

在一些实施方案中，制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位，例如介于每mL不可检测水平的内毒素单位最多至每mL约0.75个内毒素单位之间，诸如每mL约0.05个内毒素单位、约0.10个内毒素单位、约0.15个内毒素单位、约0.20个内毒素单位、约0.25个内毒素单位、约0.30个内毒素单位、约0.35个内毒素单位、约0.40个内毒素单位、约0.45个内毒素单位、约0.50个内毒素单位、约0.55个内毒素单位、约0.60个内毒素单位、约0.65个内毒素单位或约0.70个内毒素单位。在一些实施方案中，制剂每mL含有少于约0.50个内毒素单位。在其他实施方案中，制剂每mL含有少于约0.25个内毒素单位。在其他实施方案中，制剂每mL含有少于约0.20个内毒素单位。在一些实施方案中，制剂每mL含有约0.01个内毒素单位至约0.15个内毒素单位，或介于两者之间的任何值。在一些实施方案中，制剂每mL含有少于约0.15个内毒素单位。在其他实施方案中，制剂每mL含有少于约0.10个内毒素单位。在其他实施方案中，制剂每mL含有少于约0.05个内毒素单位。在一些实施方案中，制剂每mL含有少于约0.02个内毒素单位。在其他实施方案中，制剂每mL含有少于约0.01个内毒素单位。在其他实施方案中，制剂每mL含有不可检测量的内毒素单位。用于检测内毒素水平的方法是本领域已知的，并且包括例如兔热原测试(USP<151>)、单核细胞活化测试、鲎变形细胞溶解物测定和基于HPLC的方法。

在一些实施方案中，制剂具有约290mOsm/kg至320mOsm/kg或介于两者之间的任何值例如约290mOsm/kg、约295mOsm/kg、约300mOsm/kg、约305mOsm/kg、约310mOsm/kg、约315mOsm/kg、或约320mOsm/kg的渗透压。在其他实施方案中，制剂具有约300mOsm/kg至约310mOsm/kg的渗透压。在一些实施方案中，制剂具有约290mOsm/kg、约300mOsm/kg、约310mOsm/kg或约320mOsm/kg的渗透压。

在一些实施方案中，制剂在约15分钟至约150分钟或两者之间的任何值内施用。在一些实施方案中，制剂在约15分钟至约90分钟内施用。在其他实施方案中，制剂在约15分钟至约60分钟内施用。在其他实施方案中，制剂在约15分钟至约45分钟内施用。在一些实施方案中，制剂在约15分钟至约30分钟内施用。在其他实施方案中，制剂在约120分钟至约150分钟内施用。在一些实施方案中，制剂在少于约150分钟、少于约120分钟、少于约90分钟、少于约60分钟、少于约45分钟或少于约30分钟内施用。

在一些实施方案中，制剂包含约5％(w/v)至约15％(w/v)的实质性纯化的海藻糖，或介于两者之间的任何值例如约5％(w/v)、约6％(w/v)、约7％(w/v)、约8％(w/v)、约9％(w/v)、约10％(w/v)、约11％(w/v)、约12％(w/v)、约13％(w/v)、约14％(w/v)或约15％(w/v)的实质性纯化的海藻糖。在一些实施方案中，制剂包含约6％(w/v)至约12％(w/v)的实质性纯化的海藻糖。在其他实施方案中，制剂包含约7％(w/v)至约11％(w/v)的实质性纯化的海藻糖。在其他实施方案中，制剂包含约8％(w/v)至约10％(w/v)的实质性纯化的海藻糖。在一些实施方案中，制剂包含约9％(w/v)的实质性纯化的海藻糖。在其他实施方案中，制剂包含约10％(w/v)的实质性纯化的海藻糖。在其他实施方案中，制剂包含约8％(w/v)的实质性纯化的海藻糖。

在一些实施方案中，实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物例如通过HPLC检测不到的水平的污染物至约0.5％的污染物，或介于两者之间的任何值的污染物。在一些实施方案中，实质性纯化的海藻糖含有约0.01％、约0.02％、约0.03％、约0.04％、约0.05％、约0.08％、约0.10％、约0.12％、约0.15％、约0.18％、约0.20％、约0.22％、约0.25％、约0.28％、约0.30％、约0.32％、约0.35％、约0.38％、约0.40％、约0.42％、约0.45％、约0.48％或约0.5％的污染物。在其他实施方案中，实质性纯化的海藻糖含有少于约0.25％的污染物。在其他实施方案中，实质性纯化的海藻糖含有少于约0.1％的污染物。在一些实施方案中，实质性纯化的海藻糖含有少于约0.08％的污染物。在其他实施方案中，实质性纯化的海藻糖含有少于约0.05％的污染物。在其他实施方案中，实质性纯化的海藻糖含有少于约0.02％的污染物。在一些实施方案中，实质性纯化的海藻糖含有少于约0.01％的污染物。在一些实施方案中，实质性纯化的海藻糖中的污染物包括葡萄糖、麦芽三糖或它们的组合。在一些实施方案中，制剂含有少于约0.01％的葡萄糖和少于约0.01％的麦芽三糖。

在一些实施方案中，受试者是儿科受试者。在其他实施方案中，受试者未满18岁。在其他实施方案中，受试者未满12岁。在一些实施方案中，受试者未满8岁。在其他实施方案中，受试者未满6岁。在其他实施方案中，受试者未满4岁。在一些实施方案中，受试者未满2岁。在其他实施方案中，受试者未满1岁。在其他实施方案中，受试者未满8个月的月龄。在一些实施方案中，受试者未满4个月的月龄。在其他实施方案中，受试者未满1个月的月龄。在其他实施方案中，受试者未满1周的周龄。在一些实施方案中，受试者处于约2岁和约6岁之间。在其他实施方案中，受试者为约4岁至约6岁。

在一些实施方案中，受试者在子宫内；并且其中静脉内施用给受试者包括静脉内施用给母亲。

本文所述的一些实施方案还包括向受试者施用酶替代疗法。在本文所述的一些实施方案中，先前已向受试者施用酶替代疗法。在一些实施方案中，酶替代疗法选自：拉罗尼酶、艾杜硫酶、阿加糖酶α、阿加糖酶β、伊米苷酶、他利苷酶α、维拉苷酶α、阿糖苷酶、塞贝利普酶(Sebelipase)α、拉罗尼酶、艾度硫酸酯酶、依洛硫酸酯酶α、加硫酶、阿糖苷酶α以及任何前述酶的组合。

本文所述的一些实施方案还包括向受试者施用底物减少疗法。在本文所述的一些实施方案中，先前已向受试者施用底物减少疗法。在一些实施方案中，底物减少疗法包括以下中的一者或多者：美格鲁特、米加司他、米格列醇、依利格鲁司特、染料木黄酮、(S)-(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸奎宁环-3-基酯(GZ161)、(2-(4'-氟-[1,1'-联苯]-3-基)丙-2-基)氨基甲酸奎宁环-3-基酯、伊比格鲁司他、文格鲁司他、依利格鲁司他；或任何前述物质的组合；或任何前述物质的药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，制剂包含实质性纯化的海藻糖和海藻糖酶抑制剂作为唯一的活性成分。在一些实施方案中，海藻糖酶抑制剂选自有效霉素A、海藻唑林、苦杏仁苷；或任何前述抑制剂的组合；或任何前述抑制剂的药学上可接受的盐。

一些实施方案还包括作为与包含基本上由实质性纯化的海藻糖组成的单一活性成分的药物制剂的非固定组合施用海藻糖酶抑制剂。在一些实施方案中，海藻糖酶抑制剂选自有效霉素A、海藻唑林、苦杏仁苷；或任何前述抑制剂的组合；或任何前述抑制剂的药学上可接受的盐。在一些实施方案中，海藻糖酶抑制剂与包含基本由实质性纯化的海藻糖组成的单一活性成分的药物制剂同时或按任意顺序依次施用。

一些实施方案提供了用于向受试者静脉内施用的即用型水性药物制剂，其中制剂包含基本上由实质性纯化的海藻糖组成的单一活性成分，其中：制剂的pH为约4.5至7.0；制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；其中实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于制剂中；其中实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物，其中制剂设置在密封容器内；并且其中制剂为无菌的。

在一些实施方案中，容器包括但不限于玻璃小瓶(例如，燧石玻璃小瓶)、安瓿瓶、塑料柔性容器诸如PVC(聚氯乙烯)容器、VisiV^TM塑料容器(Hospira,Inc.,Lake Forest,Ill.)和CR3弹性体共聚酯醚容器(Hospira,Inc.,Lake Forest,Ill.)、CZ树脂容器和聚丙烯容器。在一些实施方案中，容器不含BPA。

在一些实施方案中，容器选自玻璃容器或塑料容器。在一些实施方案中，容器是玻璃容器。在其他实施方案中，容器是塑料容器。在一些实施方案中，制剂被配制为10mL至100mL或介于两者之间的任何值的总体积。在一些实施方案中，制剂被配制为选自10mL、20mL、30mL或40mL的总体积。在其他实施方案中，制剂被配制为10mL的总体积。在其他实施方案中，制剂被配制为20mL的总体积。在一些实施方案中，制剂被配制为30mL的总体积。在其他实施方案中，制剂被配制为40mL的总体积。

在一些实施方案中，塑料容器是柔性的。在一些实施方案中，塑料容器包含乙烯和乙酸乙烯酯的共聚物。在其他实施方案中，塑料容器包含乙烯-丙烯和苯乙烯-乙烯-丁烯-苯乙烯(SEBS)的共聚物。在一些实施方案中，塑料容器包含聚丙烯。在一些实施方案中，塑料容器包括单个或多个聚丙烯层。在一些实施方案中，塑料容器为薄膜袋。在一些实施方案中，塑料容器还包括注射口和管口。在一些实施方案中，制剂已经在湿蒸汽中灭菌。在其他实施方案中，制剂已经无菌灭菌。

在一些实施方案中，本文所述的制剂设置在可保持制剂无菌或防止制剂污染的容器中。在一些实施方案中，容器为密封容器。在一些实施方案中，制剂设置在容器中，并且被配制为单次使用剂量。在其他实施方案中，制剂设置在容器中，并且被配制为多次使用剂量。

因此，本文提供了用于治疗被诊断患有(或被鉴定为患有)MPS的受试者的方法，这些方法包括向受试者施用如本文所述的海藻糖制剂。本文还提供了用于治疗被鉴定或诊断为患有MPS的受试者的方法，这些方法包括向受试者施用如本文所述的制剂。在一些实施方案中，通过使用监管机构批准的例如FDA批准的用于鉴定受试者或来自受试者的样本中特定MPS相关基因或MPS相关蛋白质或者它们的活性或水平紊乱的测试或测定，或通过执行本文所述测定的非限制性实施例中的任何非限制性实施例，该受试者已被鉴定或诊断为患有MPS。在一些实施方案中，测试或测定以试剂盒的形式提供。在其他实施方案中，通过测量体液例如血液或尿液中的聚集产物的水平，受试者已被鉴定或诊断为患有MPS。

还提供了用于治疗有需要的受试者的MPS的方法，这些方法包括：(a)检测受试者中MPS相关基因和/或MPS相关蛋白质的紊乱；以及(b)向受试者施用本文所述的制剂。在一些实施方案中，通过使用监管机构批准的例如FDA批准的用于鉴定受试者或来自受试者的样本中MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱的测试或测定，或通过执行本文所述测定的非限制性实施例中的任何非限制性实施例来确定受试者患有MPS。在一些实施方案中，测试或测定以试剂盒的形式提供。

还提供了治疗受试者的方法，这些方法包括对获自受试者的样本进行测定以确定受试者是否具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱，以及向经确定具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱的受试者施用(例如，特异性地或选择性地施用)如本文所述的海藻糖制剂。这些方法的一些实施方案还包括向受试者施用另一种疗法，诸如如本文所述的酶替代疗法或底物减少疗法。在一些实施方案中，受试者是疑似患有MPS的受试者、表现出MPS的一种或多种症状的受试者、或具有增加的患上MPS的风险的受试者。在一些实施方案中，测定是监管机构批准的测定，例如FDA批准的试剂盒。

还提供了用于治疗受试者的MPS的海藻糖制剂，通过对获自受试者的样本进行测定(例如体外测定)以确定受试者是否具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱的步骤，其中存在MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或者它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱指示受试者患有MPS，该受试者被鉴定或诊断为患有MPS。还提供了本文所述的海藻糖制剂用于制造用于治疗受试者的MPS的药剂的用途，通过对获自受试者的样本进行测定以确定受试者是否具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱的步骤，其中存在MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或者它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱指示受试者患有MPS，该受试者被鉴定或诊断为患有MPS。本文所述的方法或用途中的任何方法或用途的一些实施方案还包括在受试者的临床记录(例如，计算机可读介质)中记录，应当向通过测定的性能确定为具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱的受试者施用本文所述的海藻糖制剂。在一些实施方案中，测定是监管机构批准的测定，例如FDA批准的试剂盒。

还提供了本文所述的海藻糖制剂，其用于治疗有需要的受试者或被鉴定或诊断为患有MPS的受试者的MPS。还提供了本文所述的海藻糖制剂用于制造用于治疗被鉴定或诊断为患有MPS的受试者的MPS的药物的用途。在一些实施方案中，通过使用监管机构批准的例如FDA批准的试剂盒来鉴定受试者或来自受试者的样本中MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱，受试者被鉴定或诊断为患有MPS。

本文还提供了用于治疗被诊断患有(或鉴定为患有)MPS的儿科受试者的方法，这些方法包括向儿科受试者施用本文所述的海藻糖制剂。本文还提供了用于治疗被鉴定或诊断为患有MPS的儿科受试者的方法，这些方法包括向儿科受试者施用本文所述的海藻糖制剂。在一些实施方案中，通过使用监管机构批准的例如FDA批准的用于鉴定儿科受试者或来自儿科受试者的样本中MPS相关基因、MPS相关蛋白质或者它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱的测试或测定，或通过执行本文所述测定的非限制性实施例中的任何非限制性实施例，儿科受试者已被鉴定或诊断为患有MPS。在一些实施方案中，测试或测定以试剂盒的形式提供。

还提供了用于治疗有需要的儿科受试者的溶酶体贮积症的方法，这些方法包括：(a)确定儿科受试者的溶酶体贮积症是否为MPS；(b)如果确定溶酶体贮积症为MPS，则向儿科受试者施用本文所述的海藻糖制剂。这些方法的一些实施方案还包括向受试者施用另一种疗法，诸如酶替代疗法或底物减少疗法。在一些实施方案中，受试者先前已采用酶替代疗法(例如，拉罗尼酶、艾杜硫酶、阿加糖酶α、阿加糖酶β、伊米苷酶、他利苷酶α、维拉苷酶α、阿糖苷酶、塞贝利普酶α、拉罗尼酶、艾度硫酸酯酶、依洛硫酸酯酶α、加硫酶、阿糖苷酶α)或/或底物减少疗法(例如，美格鲁特、米加司他、米格列醇、依利格鲁司特、染料木黄酮、(S)-(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸奎宁环-3-基酯(GZ161)、(2-(4'-氟-[1,1'-联苯]-3-基)丙-2-基)氨基甲酸奎宁环-3-基酯、伊比格鲁司他、文格鲁司他、依利格鲁司他；或任何前述物质的组合；或任何前述物质的药学上可接受的盐)治疗。

在一些实施方案中，通过使用监管机构批准的例如FDA批准的用于鉴定儿科受试者或来自儿科受试者的样本中MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱的测试或测定，或通过执行本文所述测定的非限制性实施例中的任何非限制性实施例来确定儿科受试者患有MPS。在一些实施方案中，测试或测定以试剂盒的形式提供。

还提供了治疗儿科受试者的方法，这些方法包括对获自儿科受试者的样本进行测定以确定儿科受试者是否具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱，以及向经确定具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱的儿科受试者施用(例如，特异性地或选择性地施用)本文所述的海藻糖制剂。这些方法的一些实施方案还包括向儿科受试者施用另一种疗法，诸如酶替代疗法或底物减少疗法。在一些实施方案中，儿科受试者先前已采用酶替代疗法(例如，拉罗尼酶、艾杜硫酶、阿加糖酶α、阿加糖酶β、伊米苷酶、他利苷酶α、维拉苷酶α、阿糖苷酶、塞贝利普酶α、拉罗尼酶、艾度硫酸酯酶、依洛硫酸酯酶α、加硫酶、阿糖苷酶α)或/或底物减少疗法(例如，美格鲁特、米加司他、米格列醇、依利格鲁司特、染料木黄酮、(S)-(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸奎宁环-3-基酯(GZ161)、(2-(4'-氟-[1,1'-联苯]-3-基)丙-2-基)氨基甲酸奎宁环-3-基酯、伊比格鲁司他、文格鲁司他、依利格鲁司他；或任何前述物质的组合；或任何前述物质的药学上可接受的盐)治疗。在一些实施方案中，儿科受试者是疑似患有MPS的儿科受试者、表现出MPS的一种或多种症状的儿科受试者、或具有增加的患上MPS的风险的儿科受试者。在一些实施方案中，测定是监管机构批准的测定，例如FDA批准的试剂盒。附加的测定也是本领域已知的。

还提供了用于治疗儿科受试者的MPS的本文所述的海藻糖制剂，通过对获自儿科受试者的样本进行测定(例如体外测定)以确定儿科受试者是否具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱的步骤，其中存在MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或者它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱指示儿科受试者患有MPS，该儿科受试者被鉴定或诊断为患有MPS。还提供了本文所述的海藻糖制剂用于制造用于治疗儿科受试者的MPS的药剂的用途，通过对获自儿科受试者的样本进行测定以确定儿科受试者是否具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱的步骤，其中存在MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或者它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱指示儿科受试者患有MPS，该儿科受试者被鉴定或诊断为患有MPS。本文所述的方法或用途中的任何方法或用途的一些实施方案还包括在儿科受试者的临床记录(例如，计算机可读介质)中记录，应当向通过测定的性能确定为具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱的儿科受试者施用本文所述的海藻糖制剂。在一些实施方案中，测定是监管机构批准的测定，例如FDA批准的试剂盒。

还提供了本文所述的海藻糖制剂，其用于治疗有需要的儿科受试者或被鉴定或诊断为患有MPS的儿科受试者的MPS。还提供了本文所述的海藻糖制剂用于制造用于治疗被鉴定或诊断为患有MPS的儿科受试者的MPS的药物的用途。在一些实施方案中，通过使用监管机构批准的例如FDA批准的试剂盒来鉴定儿科受试者或来自儿科受试者的样本中MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱，儿科受试者被鉴定或诊断为患有MPS。

在本文所述的方法或用途中的任何方法或用途的一些实施方案中，受试者已被鉴定或诊断为患有MPS，并具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱。在本文所述的方法或用途中的任何方法或用途的一些实施方案中，受试者的样本中MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱呈阳性。在本文所述的方法或用途中的任何方法或用途的一些实施方案中，受试者可为样本中MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱呈阳性的受试者。在本文所述的方法或用途中的任何方法或用途的一些实施方案中，受试者可为具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱的受试者。在本文所述的方法或用途中的任何方法或用途的一些实施方案中，受试者疑似患有MPS(例如，如本文所述，MPS相关基因和/或MPS相关蛋白质中具有一个或多个突变)。在一些实施方案中，本文提供了用于治疗需要此类治疗的受试者的MPS的方法，该方法包括a)检测来自受试者的样本中MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱；以及b)施用本文所述的海藻糖制剂。在一些实施方案中，MPS相关基因、MPS相关蛋白质或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱包括一个或多个蛋白质点突变/插入/缺失。蛋白质点突变/插入/缺失的非限制性实施例描述于表1中。在一些实施方案中，点突变/插入/缺失选自表1中描述的那些蛋白质突变。

表1

使用由美国国家生物技术信息中心(NCBI)提供的ClinVar数据库来鉴定已知的致病性基因变体，如表1所示。参见Richards等人，Genet.Med.，17(5):405-24(2015)。如本文所用，“fs”是指导致移码的基因变体。例如，Val251Phefs是指导致从缬氨酸变为苯丙氨酸的第251位氨基酸的移码突变。

在本文所述的方法或用途中的任何方法或用途的一些实施方案中，受试者的临床记录表明，受试者具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱(例如，如本文所述，MPS相关基因和/或MPS相关蛋白质中具有一个或多个突变)。在一些实施方案中，临床记录表明，受试者应当用本文所述的海藻糖制剂治疗。在一些实施方案中，具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱的受试者是MPS相关基因和/或MPS相关蛋白质中具有一个或多个点突变的受试者。在一些实施方案中，使用监管机构批准的例如FDA批准的测定或试剂盒来确定具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱的受试者。在一些实施方案中，使用监管机构批准的例如FDA批准的测定或试剂盒来确定具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱的样本。

还提供了治疗受试者的方法，这些方法包括向受试者施用本文所述的海藻糖制剂，该受试者的临床记录表明，受试者具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱。还提供了本文所述的海藻糖制剂用于制造用于治疗受试者的MPS的药剂的用途，该受试者的临床记录表明，受试者具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱。这些方法和用途的一些实施方案还可包括：对获自受试者的样本进行测定以确定受试者是否具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱，以及在受试者的临床档案中记录受试者已被鉴定为具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱的步骤。在一些实施方案中，测定是体外测定。例如，利用基因技术(诸如下一代测序)或测量样本中的GAG水平或测量样本中一种或多种酶的活性的测定。在一些实施方案中，测定是监管机构批准的测定，例如FDA批准的试剂盒。

本文还提供了一种治疗受试者的方法。在一些实施方案中，该方法包括对获自受试者的样本进行测定以确定受试者是否具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或水平紊乱。在一些此类实施方案中，该方法还包括向经确定为具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或水平紊乱的受试者施用。在一些实施方案中，该方法包括经由对获自受试者的样本进行测定来确定受试者具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或水平紊乱。在此类实施方案中，该方法还包括向受试者施用本文所述的海藻糖制剂。在一些实施方案中，MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平的紊乱是MPS相关基因中的一个或多个点突变(例如，本文诸如表1所述的点突变中的一个或多个点突变中的任何点突变)。MPS相关基因中的一个或多个点突变可导致例如具有表1中所述的一个或多个氨基酸取代的MPS相关蛋白质的翻译。这些方法的一些实施方案还包括向受试者施用另一种疗法，诸如如本文所述的酶替代疗法或底物减少疗法。

在一些实施方案中，本文所述的方法提供表现出脑和/或中枢神经系统(CNS)渗透的海藻糖制剂。因此，本文所述的方法提供了能够穿过血脑屏障的海藻糖并在脑和/或其他CNS结构中提供治疗有效量的海藻糖。例如，患有对大脑和/或CNS有影响(诸如认知影响)的MPS的受试者的治疗。

在一些实施方案中，本文所述的方法提供表现出渗透到肌肉组织(包括骨骼肌和平滑肌)的海藻糖制剂。因此，本文所述的方法提供了能够渗透到肌肉组织的海藻糖，从而在肌肉纤维中提供治疗有效量的海藻糖。例如，患有对肌肉有影响(诸如肌肉运动知觉影响或运动影响)的MPS的受试者的治疗。

还提供了为被鉴定或诊断为患有MPS的受试者选择治疗的方法(例如，体外方法)。一些实施方案还可包括向被鉴定或诊断为患有MPS的受试者施用所选择的治疗。例如，所选择的治疗可包括施用本文所述的海藻糖制剂。一些实施方案还可包括对获自受试者的样本进行测定以确定受试者是否具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱，以及将经确定具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱的受试者鉴定并诊断为患有MPS的步骤。在一些实施方案中，通过使用监管机构批准的例如FDA批准的试剂盒来鉴定受试者或来自受试者的样本中MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱，受试者已被鉴定或诊断为患有MPS。在一些实施方案中，测定是体外测定。例如，利用基因技术(诸如下一代测序)或测量样本中的GAG水平或测量样本中一种或多种酶的活性的测定。在一些实施方案中，测定是监管机构批准的测定，例如FDA批准的试剂盒。

在本文所述的方法或用途中的任何方法或用途的一些实施方案中，使用来自受试者的样本，用于确定受试者是否具有MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱的测定可包括例如下一代测序、免疫组织化学、荧光显微法、Southern印迹法、Western印迹法、FACS分析、Northern印迹法、基于PCR的扩增(例如，RT-PCR和实时定量RT-PCR)、酶活性测定和用以测量样本中GAG水平的测定。测定可利用本领域已知的其他检测方法来检测MPS相关基因、MPS相关蛋白质、或它们中的任一者的表达或活性或水平紊乱。

在一些实施方案中，MPS相关基因选自IDUA、IDS、SGSH、NAGLU、HGSNAT、GNS、GALNS、GLB1、ARSB、GUSB和HYAL1。在一些实施方案中，MPS相关基因是IDUA。在其他实施方案中，MPS相关基因是IDS。在其他实施方案中，MPS相关基因是SGSH。在一些实施方案中，MPS相关基因是NAGLU。在其他实施方案中，MPS相关基因是HGSNAT。在其他实施方案中，MPS相关基因是GNS。在一些实施方案中，MPS相关基因是GALNS。在其他实施方案中，MPS相关基因是GLB1。在其他实施方案中，MPS相关基因是ARSB。在一些实施方案中，MPS相关基因是GUSB。在其他实施方案中，MPS相关基因是HYAL1。

在一些实施方案中，MPS相关蛋白质选自α-L-艾杜糖醛酸酶、艾杜糖醛酸硫酸酯酶、乙酰肝素磺酰胺酶、N-乙酰基氨基葡糖苷酶、乙酰肝素-α-氨基葡糖苷-N-乙酰基转移酶、N-乙酰基氨基葡萄糖-6-硫酸酯酶、半乳糖-6-硫酸硫酸酯酶、β-半乳糖苷酶、N-乙酰基半乳糖胺-4-硫酸酯酶、β-葡萄糖醛酸酶和透明质酸酶。在一些实施方案中，MPS相关蛋白质是α-L-艾杜糖醛酸酶。在其他实施方案中，MPS相关蛋白质是艾杜糖醛酸硫酸酯酶。在其他实施方案中，MPS相关蛋白质是N-乙酰基氨基葡糖苷酶。在一些实施方案中，MPS相关蛋白质是乙酰肝素-α-氨基葡糖苷-N-乙酰基转移酶。在其他实施方案中，MPS相关蛋白质是N-乙酰基氨基葡萄糖-6-硫酸酯酶。在其他实施方案中，MPS相关蛋白质是半乳糖-6-硫酸硫酸酯酶。在一些实施方案中，MPS相关蛋白质是β-半乳糖苷酶。在其他实施方案中，MPS相关蛋白质是N-乙酰基半乳糖胺-4-硫酸酯酶。在其他实施方案中，MPS相关蛋白质是β-葡萄糖醛酸酶。在一些实施方案中，MPS相关蛋白质是透明质酸酶。

在一些实施方案中，黏多糖症(或“MPS”)选自：Hurler综合征(MPS IH)、Hurler-Scheie综合征(MPS IH/S)、Scheie综合征(MPS IS或MPS V)、Hunter综合征(MPS II)、Sanfillippo综合征A(MPS IIIA)、Sanfillippo综合征B(MPS IIIB)、Sanfillippo综合征C(MPS IIIC)、Sanfillippo综合征D(MPS IIID)、Morquio综合征A(MPS IVA)、Morquio综合征B(MPS IVB)、Maroteaux-Lamy综合征(MPS VI)、Sly综合征(MPS VII)和Natowicz综合征(MPS IX)。

在一些实施方案中，黏多糖症(或“MPS”)是Hurler综合征(MPS IH)。在其他实施方案中，MPS是Hurler-Scheie综合征(MPS IH/S)。在其他实施方案中，MPS是Scheie综合征(MPS IS或MPS V)。在一些实施方案中，MPS是Hunter综合征(MPS II)。在一些实施方案中，MPS选自：Sanfillippo综合征A(MPS IIIA)、Sanfillippo综合征B(MPS IIIB)、Sanfillippo综合征C(MPS IIIC)和Sanfillippo综合征D(MPS IIID)。在一些实施方案中，MPS是Sanfillippo综合征A(MPS IIIA)。在其他实施方案中，MPS是Sanfillippo综合征B(MPSIIIB)。在其他实施方案中，MPS是Sanfillippo综合征C(MPS IIIC)。在一些实施方案中，MPS是Sanfillippo综合征D(MPS IIID)。在一些实施方案中，MPS是Morquio综合征A(MPS IVA)。在其他实施方案中，MPS是Morquio综合征B(MPS IVB)。在其他实施方案中，MPS是Maroteaux-Lamy综合征(MPS VI)。在一些实施方案中，MPS是Sly综合征(MPS VII)。在其他实施方案中，MPS是Natowicz综合征(MPS IX)。

本文所述的一些实施方案包括确定受试者患有溶酶体酶缺乏症，治疗已确定患有溶酶体酶缺乏症的受试者，或减轻已确定患有溶酶体酶缺乏症的受试者的一种或多种症状。确定受试者患有溶酶体酶缺乏症可包括各种测试，例如基因测试、血液测试、尿液测试、体外酶测定(例如，测试细胞和/或组织和/或体液样本的酶活性)，或任何前述测试的组合。在一些实施方案中，确定受试者患有溶酶体酶缺乏症包括基因测试。在其他实施方案中，确定受试者患有溶酶体酶缺乏症包括血液测试。在其他实施方案中，确定受试者患有溶酶体酶缺乏症包括尿液测试。在一些实施方案中，确定受试者患有溶酶体酶缺乏症包括体外酶测定。在一些实施方案中，确定受试者患有溶酶体酶缺乏症包括羊膜穿刺术、绒毛膜绒毛取样或它们的组合。

在一些实施方案中，减轻已确定患有溶酶体酶缺乏症的受试者的一种或多种症状可包括但不限于降低呼吸道感染、睡眠呼吸暂停、听力丧失、耳部感染、角膜浑浊、痢疾、皮肤肿瘤、骨骼形状和/或大小不规则、心脏瓣膜结构和/或功能不规则、声音嘶哑、关节僵硬、攻击行为、腹部饱胀、椎管狭窄和发育迟缓。

在一些实施方案中，酶缺乏症是选自以下各项的酶的缺乏症：α-L-艾杜糖醛酸酶、艾杜糖醛酸硫酸酯酶、乙酰肝素磺酰胺酶、N-乙酰基氨基葡糖苷酶、乙酰肝素-α-氨基葡糖苷-N-乙酰基转移酶、N-乙酰基氨基葡萄糖-6-硫酸酯酶、半乳糖-6-硫酸硫酸酯酶、β-半乳糖苷酶、N-乙酰基半乳糖胺-4-硫酸酯酶、β-葡萄糖醛酸酶和透明质酸酶。在一些实施方案中，酶缺乏症是α-L-艾杜糖醛酸酶的缺乏症。在其他实施方案中，酶缺乏症是艾杜糖醛酸硫酸酯酶的缺乏症。在其他实施方案中，酶缺乏症是N-乙酰基氨基葡糖苷酶的缺乏症。在一些实施方案中，酶缺乏症是乙酰肝素-α-氨基葡糖苷-N-乙酰基转移酶的缺乏症。在其他实施方案中，酶缺乏症是N-乙酰基氨基葡萄糖-6-硫酸酯酶的缺乏症。在其他实施方案中，酶缺乏症是半乳糖-6-硫酸硫酸酯酶的缺乏症。在一些实施方案中，酶缺乏症是β-半乳糖苷酶的缺乏症。在其他实施方案中，酶缺乏症是N-乙酰基半乳糖胺-4-硫酸酯酶的缺乏症。在其他实施方案中，酶缺乏症是β-葡萄糖醛酸酶的缺乏症。在一些实施方案中，酶缺乏症是透明质酸酶的缺乏症。

在一些实施方案中，本文所述的方法提供受试者中MPS的聚集产物中的一种或多种聚集产物(例如，硫酸乙酰肝素、硫酸皮肤素、硫酸角质素、硫酸软骨素和/或透明质酸中的一者或多者)的减少。例如，受试者中硫酸乙酰肝素、硫酸皮肤素、硫酸角质素、硫酸软骨素和/或透明质酸中的一者或多者的水平降低(例如，降低约20％至约99％、降低约20％至约95％、降低约20％至约90％、降低约20％至约85％、降低约20％至约80％、降低约20％至约75％、降低约20％至约70％、降低约20％至约65％、降低约20％至约60％、降低约20％至约55％、降低约20％至约50％、降低约20％至约45％、降低约20％至约40％、降低约20％至约35％、降低约1％至约30％、降低约20％至约25％、降低约20％至约99％、降低约25％至约99％、降低约30％至约99％、降低约35％至约99％、降低约40％至约99％、降低约45％至约99％、降低约50％至约99％、降低约55％至约99％、降低约60％至约99％、降低约65％至约99％、降低约70％至约99％、降低约75％至约95％、降低约80％至约99％、降低约90％至约99％、降低约95％至约99％、降低约20％至约40％、降低约25％至约50％、降低约35％至约55％、降低约40％至约60％、降低约50％至约75％、降低约60％至约80％、或降低约65％至约85％)。

实施例

以下实施例说明了本发明。

实施例1：用以评估患有A型或B型SANFILIPPO综合征的患者静脉注射海藻糖的安 全性和疗效的研究

方法：进行静脉注射90mg/mL海藻糖以用于治疗A型和B型Sanfilippo综合征的三部分研究。患有经遗传学确诊的A型或B型Sanfilippo综合征、尿液中GAG排泄量升高并且/或者血浆和/或尿液中HS水平升高的患者符合纳入条件。研究分三部分进行，如下所述。

第1部分：第1部分包括4周的筛选期，随后是30周的初始剂量递增期(7周的开放标签剂量递增期，随后是23周的治疗期)(表1)。该研究期用于评估海藻糖的静脉递增剂量水平的安全性和耐受性，以鉴定继续作为研究第2部分中在第30周使用MDRI的富集组的患者，并评估随时间推移神经认知和行为症状与生物标志物之间的关联。

在筛选期期间，尿液GAG以及尿液和血浆HS生物标志物收集3次，间隔7天，以确定基线排泄量和血浆浓度。患者接受以下基线评估：体格检查、实验室安全性测试、心电图(ECG)、用于测定体积的肝脏和脾脏CT扫描，以及ABR。使用VABS-3、BSID-III或KABC-II、以及SBRS进行神经认知和行为评估。使用PedsQL^TM评估生活质量。

活动能力的基线评估包括TUG测试。评估基线功能和运动能力，并且在评估期间对患者进行录像。评估包括9孔柱测试(9-HPT)、TUG测试、10米步行测试、和粗大运动功能测试量表(GMFM)的预先指定项目。随后，独立的理疗学家或其他合格临床医生审查患者完成评估的视频，并使用CGIC量表对患者进行评估的能力变化程度进行评分。

护理人员通过与理疗学家或其他合格临床医生面谈来管理CaGIS。吞咽的基线评估包括80mL冷水饮用测试和悉尼吞咽问卷。听力的基线评估将通过ABR测试进行。

剂量递增：剂量递增将从治疗第1周开始，其中0.25g/kg起始剂量的海藻糖在60分钟内静脉内施用，一周一次。在第3周(在前2周的0.25g/kg剂量后)，患者接受实验室安全性、选定的生物标志物(尿液GAG、尿液和血浆HS)和PK水平评估。召集由赞助商的首席医疗官或具有医学学位的指定人员、首席研究员(PI)、具有临床试验安全性数据审查经验的外部医师和PK专家组成的安全性审查委员会(SRC)。SRC在第3周剂量的1周内审查每名患者的安全性、PK和生物标志物数据。如果未发现安全性、PK或生物标志物问题，则在第4周将剂量增加至0.50g/kg。虽然委员会会提出建议，但增加剂量、继续相同剂量或中止治疗由当地PI考虑所有决策点后最终决定。在第6周(在2周的0.50g/kg剂量后)，患者接受实验室安全性、生物标志物和PK水平评估。SRC在第6周剂量的1周内审查每名患者的安全性、PK和生物标志物数据。如果SRC未发现安全性、PK或生物标志物问题，则在第7周将剂量增加至0.75g/kg。在第9周(在2周的0.75g/kg剂量后)，患者接受实验室安全性、生物标志物和PK水平评估。SRC在第9周剂量的1周内审查每名患者的安全性、PK和生物标志物数据。如果SRC未发现安全性、PK或生物标志物问题，则将剂量保持在0.75g/kg。

患者在第7周前达到最大耐受剂量(MTD)，并继续以MTD治疗至30周治疗期结束。在第30周，进行所有安全性和疗效测量，包括：不良事件、体格检查、实验室安全性、生物标志物、ECG、PK、肝脏和脾脏CT、ABR、神经认知和行为测试、吞咽、活动能力和视频评估，以及生活质量评估。

第2部分的治疗分配：一旦每名患者已在第30周完成安全性和疗效评估，就召集独立的DMC来审查患者数据。DMC由临床专家和独立的统计学家组成。使用先验定义的标准(MDRI)，DMC在研究的第2部分中分配患者接受安慰剂(富集组)或继续静脉接受海藻糖(积极治疗组)。

研究的纳入标准是，例如，受试者(i)在第30周时，以下生物标志物中的任一者(尿液GAG或HS、血浆HS)至少达到预先指定的最小程度上的减少；或(ii)在第30周时，有证据表明疾病进展减缓或稳定，或神经认知或行为评估有所改善。这些受试者在研究第2部分中接受安慰剂。该组患者构成研究第2部分的富集组。不符合预定义标准的患者继续静脉注射海藻糖治疗，作为研究第2部分中积极治疗组的一部分。

第2部分：第2部分是18周的评估期，其包括2周的过渡期，然后是16周的跨转期，跨转到安慰剂(富集组)和继续静脉海藻糖(积极治疗组)(表2)。这一阶段的研究用于评估富集组中在单向跨转到安慰剂后的效应丧失(恶化)，评估积极治疗组中继续静脉注射海藻糖的持续安全性和耐受性以及效应，以及确定如通过对患有A型和B型Sanfilippo综合征的患者中GAG和HS以及神经认知和行为症状的影响评估的静脉海藻糖的疗效。

在2周的过渡期期间，所有患者均静脉接受海藻糖。一旦分配了第2部分的治疗，患者将在16周的治疗期期间接受安慰剂或继续静脉注射海藻糖。

16周的治疗期出现在第33周到第48周，其中患者被分配到两个治疗组中的一个治疗组：(i)积极治疗组，以个体MTD每周接受一次静脉注射90mg/mL海藻糖；和(ii)富集组，每周接受静脉注射安慰剂(氯化钠注射液，0.9％，USP)。

在每个研究位点，向准备活性药物或安慰剂以供施用的非盲药剂师或指定人员提供盲化治疗分配。

在第40周和第48周进行实验室安全性、ECG和疗效评估(也在第34周进行实验室安全性评估)，而在治疗跨转期期间每2周进行一次生物标志物评估。所有结果由DMC主席监督。对于富集组中的患者来说，单向跨转到安慰剂旨在持续16周。为了在第2部分期间控制偏差，只有药剂师或指定人员、药房监督员和统计学家知晓研究药物的分配，因为分配到积极治疗组或富集组不会被披露。

将研究第2部分中的治疗分配盲化，以防止在研究48周后在确定用于评估疗效的MDRI时出现偏差。

第3部分：在最后24周开放标签延长期期间，所有患者均以个体MTD每周接受一次静脉给药90mg/mL海藻糖(表3)。实验室安全性评估在第50周和第56周进行，然后在开放标签延长期持续时间内每8周进行实验室安全性评估。前8周内每2周进行生物标志物评估，然后在开放标签延长期期间每4周进行生物标志物评估。在第72周(最后一次访视)进行ECG和所有疗效评估。

完成76周研究的患者可根据单独的治疗延长方案代替上市许可继续治疗。

下文列出了用于诊断的示例性标准以及用于纳入和排除的主要标准。

纳入：

1.提供由父母或法定监护人签署的书面知情同意书

2.经遗传学确诊的A型或B型Sanfilippo综合征

a.基因组DNA分析显示SGSH(A型)或NAGLU(B型)基因中的纯合子或复合杂合子致病性变体

3.筛选时尿液GAG和/或尿液或血浆HS排泄量升高(3次评估的平均值>正常值上限[ULN])

4.男性或女性；6至21岁(包括端值在内)

5.有生育潜能的女性患者在筛选时尿液或人绒毛膜促性腺激素β(β-hCG)妊娠结果呈阴性

6.愿意遵守性禁欲或所指示的避孕指南

排除：

1.先前针对A型或B型Sanfilippo综合征施用过干细胞或基因疗法或酶替代疗法(ERT)

2.以前被诊断患有糖尿病或在筛选时血红蛋白A1c(HgbA1c)结果>6.0％

3.癫痫发作控制欠佳，定义为过去4-6周内每周一次或多次癫痫发作

4.足以妨碍神经发育测试的视觉或听觉受损

5.研究人员认为会混淆对安全性或疗效数据的解释或将患者置于不当风险中的任何其他医疗病症

6.无法配合方案要求的评估或程序

7.先前用静脉注射海藻糖治疗

8.已知对海藻糖过敏

9.在签署同意书前30天内使用富含染料木黄酮的大豆异黄酮

10.在签署同意书前7天内使用口服海藻糖

11.筛选时血清学检测发现乙型肝炎或丙型肝炎感染

12.目前正在接受抗凝血剂治疗(例如华法林、依诺肝素)，而不是抗血小板治疗，抗血小板治疗不是排除原因

13.目前正参加另一项临床试验或在计划第一次给药前不到90天完成了干预试验

研究产品、剂量和施用模式：90mg/mL海藻糖溶液在第1部分中在60±5分钟内静脉内施用，每周一次，如上所述以剂量递增方式从0.25g/kg的剂量开始且最高至0.75g/kg的最大剂量。在第2部分中每周一次在60±5分钟内向患者静脉内施用海藻糖或安慰剂(分别为积极治疗组和富集组)，并且向第3部分中的所有患者静脉内施用海藻糖。不允许留置导管。

参考疗法、剂量和施用模式：安慰剂(氯化钠注射液，0.9％，USP静脉内施用)

限制用药：不存在已知的与静脉90mg/mL海藻糖的药物-药物相互作用。如果患者开始研究时服用美格鲁特，则剂量必须在整个研究过程中保持不变。研究期间不允许患者开始使用美格鲁特治疗。允许使用大麻二酚(CBD)油，但剂量必须在整个研究期间保持不变。如果患者在知情同意时服用行为药物，则允许使用行为药物(兴奋剂、非兴奋剂、精神药物)。如果可能的话，剂量和频率应当在整个研究过程中保持不变。研究期间不允许口服海藻糖和富含染料木黄酮的大豆异黄酮。患者在研究期间不应改变伴随药物，除非他(她)们经历癫痫症加重或急性疾病。患者可能接受仅作为标准护理的医学上治疗症状、AE、并发疾病并且预防疾病所必需的伴随药物，例如疫苗。如果患者在知情同意时服用非处方(OTC)药物(诸如维生素或草药补充剂)，则允许使用非处方药物。如果可能的话，剂量和频率应当在整个研究过程中保持不变。

统计方法：预计登记参加本临床研究的患者相对于他们的症状和临床表现代表异质群体。为了解释这些差异，对患者的评估使用多域响应者指数(MDRI)。将用于建立响应的标准记录在DMC章程中，因为批准患者参与研究第2部分的跨转部分并评估效应的丧失将在DMC的权限范围内。DMC对研究第2部分中的治疗分配不知情，以防止在患者内部确定MDRI时出现偏差。

对连续安全性和疗效数据的描述性总结(包括可评估受试者人数、平均值、中值、标准偏差(SD)、最大值和最小值)将通过治疗和预定访视提供。对分类变量的总结包括可评估的人数、频率和百分比。另外，在适当的情况下，为在每次基线后访视时自基线的变化和自基线的变化百分比提供相同的描述性统计值。

本研究定义了以下分析群体：

·安全性群体：所有接受过至少1剂研究药物(包括部分输注)的患者。

·全分析集(FAS)：在第1部分期间接受过至少1剂研究药物并且在研究第1部分期间已接受至少1次基线后疗效评估以确定MDRI的所有患者。检查该患者组响应以确定在第1部分和进入富集群体期间的响应。

·富集群体：进入研究第2部分的跨转部分以评估MDRI的患者。富集群体是用于确定疗效的主要群体。

·PK群体：所有接受过至少1剂研究药物并已收集至少一份可评估血液样本以供PK分析的患者。

安全性分析的重点在于安全性群体，该安全性群体由所有纳入研究并接受至少1剂研究药物的知情同意患者构成。安全性分析基于在研究过程中记录的AE、体格检查、ECG、生命体征和临床实验室评估。使用两种定义的治疗模式相对于时间来定义耐受性：在研究期间接受研究药物的安全性群体和在第2部分期间接受安慰剂的富集群体。为所有参数准备描述性统计值，并按疾病类型分级，包括2侧95％置信限。

实施例2：用以评估患有A型或B型SANFILIPPO综合征的患者中静脉注射海藻糖治 疗对功能性结果的安全性和疗效的研究

方法：进行82周的随机、双盲、安慰剂对照试验，以评估针对A型和B型Sanfilippo综合征的治疗，静脉注射90mg/mL海藻糖的安全性和疗效。患有经遗传学确诊的A型或B型Sanfilippo综合征的、基于特定突变或早期诊断(小于6岁)或者在Vineland-3上大于或等于24个月的AEq认为患有快速进行性疾病的、以及尿液中GAG排泄量升高并且/或者血浆和/或尿液中HS水平升高的3至12岁患者符合纳入条件。患者按1:1每周随机接受静脉输注海藻糖或安慰剂。随机化将按疾病类型(A或B)分级。

研究包括4周的筛选期。在筛选期期间，尿液GAG以及尿液和血浆HS生物标志物收集3次，间隔7天，以确定基线排泄量和血浆浓度。患者接受以下基线评估：体格检查、实验室安全性、CSF HS水平和心电图(ECG)。使用Vineland-3、BSID-III或KABC-II(基于Vineland-3上的AEq)、以及SBRS进行神经认知和行为评估。使用PedsQL^TM评估生活质量。

由理疗学家评估基线粗大运动和精细运动功能，并录制视频以进行评分。评估包括9孔柱测试(9-HPT)、行走计时测试(TUG)测试、10米步行测试、和粗大运动功能测试量表(GMFM)的预先指定项目。独立的理疗学家或其他合格临床医生审查患者完成评估的视频，并使用CGIC量表对患者进行评估的能力变化程度进行评分。

给药和剂量调整：筛选后，符合条件的患者在参与研究期间每周随机接受静脉输注海藻糖或安慰剂。在9周的剂量调整期期间，由安全性审查委员会(SRC)大约每3周监查一次参与研究的所有患者的安全性数据。

在9周的剂量调整期期间，随机静脉输注海藻糖的患者将调整至静脉输注0.75g/kg或MTD海藻糖。随机输注安慰剂(生理盐水)的患者接受基于体重相等体积的安慰剂。盲化剂量调整在治疗第1周开始，其中每周一次在60分钟内静脉内施用的所分配的起始剂量为0.25g/kg海藻糖或匹配的安慰剂。在第3周(在前2周的0.25g/kg剂量后)，患者接受实验室安全性评估。召集由赞助商的首席医疗官或指定人员、首席研究员(PI)(或指定的医师助理研究员)、具有临床试验安全性数据审查经验的外部医师和PK专家(非盲)组成的SRC。SRC在第3周剂量的1周内审查每位患者的安全性和PK数据(如果可用)。如果未发现安全性问题，则在第4周将剂量增加至0.50g/kg。虽然SRC会提出建议，但增加剂量、继续相同剂量或中止治疗由当地PI考虑所有决策点后最终决定。在第6周(在2周的0.50g/kg剂量后)，患者接受实验室安全性评估。SRC在第6周剂量的1周内审查每名患者的安全性数据。如果SRC未发现安全性问题，则在第7周将剂量增加至0.75g/kg。在第9周(对于静脉分配海藻糖的患者在2周的0.75g/kg剂量后)，患者接受实验室安全性评估。SRC在第9周剂量的1周内审查每名患者的安全性数据。如果SRC未发现安全性问题，则将剂量保持在0.75g/kg。

预计患者在第7周前达到MTD，并继续以MTD治疗至78周治疗期结束。

安全性和疗效：对安全性的主要评估是严重和不严重TEAE的发生率。

疗效评估将在第13、26、39、52、65和78周进行。对疗效的主要评估是在第78周评估的神经认知功能。主要终点是比较在第78周在静脉接受海藻糖治疗的患者对比静脉接受安慰剂治疗的患者之间在Vineland 3上的AEq(3个方面：社交、日常生活技能和运动功能)自基线的平均变化。

独立的数据监查委员会(DMC)将在DMC章程中限定的时间点审查安全性和PK数据。此外，当16名患者已达到第52周或已终止试验时，进行无效分析。

完成当前试验的患者可能符合扩展研究纳入条件。

下文列出了用于诊断的示例性标准以及用于纳入和排除的主要标准。

纳入：

1.提供由父母或法定监护人签署的书面知情同意书

2.经遗传学确诊的A型或B型Sanfilippo综合征

a.基因组DNA分析显示SGSH(A型)或NAGLU(B型)基因中的纯合子或复合杂合子致病性变体

3.筛选时尿液GAG和/或尿液或血浆HS排泄量升高(3次评估的平均值>正常值上限[ULN])

4.男性或女性；3至12岁(包括端值在内)

5.筛选时在Vineland-3上的年龄当量分数(AEq)大于或等于24个月。这将基于来自4个方面的分数总和来确定：交际、日常生活技能、社交和运动技能。

6.患有如通过基因型或6岁前诊断定义的快速进行性A型或B型Sanfilippo综合征的患者

7.有生育潜能的女性患者在筛选时尿液或血浆人绒毛膜促性腺激素β(β-hCG)妊娠结果呈阴性

8.愿意遵守性禁欲或所指示的避孕指南

排除：

1.先前针对A型或B型Sanfilippo综合征施用过干细胞或基因疗法或酶替代疗法(ERT)

a.有书面证据显示在过去12个月内，根据Vineland、BSID或KABC评估，AEq下降≥3个月的在知情同意时接受ERT疗法后至少一年的患者可能会被纳入

2.以前被诊断患有糖尿病或在筛选时血红蛋白A1c(HgbA1c)结果>6.0％

3.癫痫发作控制欠佳，定义为过去4-6周内每周一次或多次癫痫发作

4.足以妨碍神经发育测试的视觉或听觉受损

5.研究人员认为会混淆对安全性或疗效数据的解释或将患者置于不当风险中的任何其他医疗病症

6.无法配合方案要求的评估或程序

7.先前用静脉注射海藻糖治疗

8.已知对海藻糖过敏

9.在签署同意书前30天内使用富含染料木黄酮的大豆异黄酮

10.在签署同意书前7天内使用口服海藻糖

11.筛选时血清学检测发现乙型肝炎或丙型肝炎感染

12.目前正在接受抗凝血剂治疗(例如华法林、依诺肝素)，而不是抗血小板治疗，抗血小板治疗不是排除原因

13.目前正参加另一项临床试验或在计划第一次给药前不到90天完成了干预试验

研究产品、剂量和施用模式：90mg/mL海藻糖溶液在60±5分钟内静脉内施用，每周一次。以如上所述的剂量调整方式(第1周至第9周)从0.25g/kg的剂量开始且最高至0.75g/kg的最大剂量施用海藻糖。不允许留置导管。

参考疗法、剂量和施用模式：安慰剂(氯化钠注射液，0.9％，USP)在60±5分钟内静脉内施用，每周一次。以如上所述的剂量调整方式(第1周至第9周)从等同于0.25g/kg的基于重量的体积开始且最高至等同于0.75g/kg的最大基于重量的体积施用安慰剂。不允许留置导管。

限制用药：不存在已知的与静脉90mg/mL海藻糖的药物-药物相互作用。如果患者开始研究时服用美格鲁特，则剂量必须在整个研究过程中保持不变。研究期间不允许患者开始使用美格鲁特治疗。允许使用大麻二酚(CBD)油，但剂量必须在整个研究期间保持不变。如果患者在知情同意时服用行为药物，则允许使用行为药物(兴奋剂、非兴奋剂、精神药物)。如果可能的话，剂量和频率应当在整个研究过程中保持不变。研究期间不允许口服海藻糖和富含染料木黄酮的大豆异黄酮。患者在研究期间不应改变伴随药物，除非他(她)们经历癫痫症加重或急性疾病。患者可能接受作为标准护理的医学上治疗症状诸如AE、并发疾病、焦虑症并且预防疾病所必需的伴随药物，例如疫苗。如果患者在知情同意时服用非处方(OTC)药物(诸如维生素或草药补充剂)，则允许使用非处方药物。如果可能的话，剂量和频率应当在整个研究过程中保持不变。

统计方法：

分析群体：以下分析群体用于所有统计分析和演示：

·全分析集(FAS)包括所有接受任何研究药物的随机患者。

·符合方案集(PPS)包括FAS中的所有患者，但因严重违反方案而被排除在外的患者除外，其中严重违反方案是指可能会影响对研究结果的解释(违反纳入标准，在研究过程中接受少于指定量的研究药物，主要评估不可用)。

·安全性集(SAF)包括所有接受任何研究药物的患者。

·Pk分析集(PKS)包括SAF中的所有患者，其中足够数量的血浆海藻糖浓度可用于进行PK分析。被排除在PK分析之外的患者连同排除原因一起列在PK报告中。

FAS用于所有疗效假设测试。PPS用于支持性或敏感性疗效分析。SAF用于所有安全性分析。

样本量考虑：

样本量主要基于可行性；然而，据估计，使用2边α＝0.05并假设AEq自基线的变化标准偏差为2.9个月，16名患者(每个治疗组8名患者)具有80％把握度能够检测治疗组之间至少4.4个月的AEq差异。

统计方法：对研究的计划数据分析的详细描述记录在统计分析计划(SAP)中。除非SAP中另有说明，否则所有统计测试都是2边的，并使用0.05的整体研究性α。对疗效数据的分析进行分析并按照随机治疗分配呈现结果。按照所接受的实际治疗来汇总安全性数据。

主要疗效分析使用重复测量的主效应混合模型(MMRM)确定在第78周AEq自基线变化的主要终点。该模型包括治疗、疾病类型、访视(类别上)、治疗/访视相互作用作为固定效应，基线AEq作为协变量，以及患者作为随机效应。支持性建模包括MMRM主效应模型，该模型包括治疗、疾病类型、时间和患者。评估模型假设，并且如果参数假设不合适，则进行基于等级的分析。支持性敏感性分析包括在协方差主效应分析(ANCOVA)中处理缺失值的多重插补方法，其中基线AEq作为第78周自基线AEq变化的协变量。将相同的统计方法应用于次要连续终点的分析。基于AEq中3个月的进展时间的次要分析将通过对数秩检验呈现Kaplan-Meyer曲线和推断性治疗比较。通过Fisher精确检验和Cochran-Mantel-Haenszel检验进行对在第78周前进展的患者比例的次要分析。

次要疗效终点的多重性采用条件序列方法来控制α。首先测试主要终点的主要分析，并根据统计显著性进行次要终点分析。在次要终点的分析中关于控制I类错误的细节描述于SAP中。

连续终点的观察值和自基线的变化按照治疗组和访问使用平均值、中值、四分位数和标准偏差描述性地汇总。二元终点按照治疗组和访视使用频率和百分比汇总。

独立的数据监查委员会和期中分析：独立的外部数据监查委员会(DMC)将在DMC章程中限定的时间点审查安全性和PK数据。此外，DMC将审查疗效数据的期中分析(IA)的结果。

当16名患者已完成第52周访视或已终止试验时，对疗效无效进行非盲IA。IA由对(1)Aeq自基线的平均变化和(2)AEq中3个月的进展时间的分析组成。将分析结果提交给DMC，DMC就研究是否应按计划继续或因疗效无效而中止提出建议。未计划为了疗效成功而中止研究，也未计划向赞助商或参与进行研究的其他人提供早期非盲结果。IA统计方法的更多细节(包括建议的中止界限)将包括在DMC章程和期中分析计划(IAP)中。

实施例3：用以评估患有SANFILIPPO综合征的患者中静脉注射海藻糖治疗对功能性结果的安全性和疗效的研究

方法：进行78周的开放标签单臂研究，以评估针对Sanfilippo综合征的治疗，静脉注射90mg/mL海藻糖的安全性和疗效。患有经遗传学确诊的Sanfilippo综合征(任何类型)并具有在Vineland-3上≥12个月的AEq的3至25岁患者符合纳入条件。必须首先考虑将任何患有确诊的A型或B型Sanfilippo并具有在Vineland-3上≥24个月的AEq的3至12岁患者纳入上述实施例中描述的研究。如果此类患者未通过上述实施例中描述的研究的筛选，则可以考虑将他(她)们纳入本研究。此外，已完成上述实施例中描述的研究的患者符合当前研究纳入条件，而不论完成上述实施例中描述的研究时的AEq。

研究包括长达6周的新患者筛选期。在筛选期期间，尿液GAG以及尿液和血浆HS生物标志物收集3次，间隔7天，以确定基线排泄量和血浆浓度。患者接受以下基线评估：体格检查、实验室安全性和心电图(ECG)。使用Vineland 3和SBRS进行神经认知和行为评估。使用PedsQL^TM、CaGIS和CaGIC评估生活质量。使用10米步行测试评估基线粗大运动功能。未通过筛选的患者可重新筛选一次。

在本研究中向参与上述实施例中所述的研究的患者继续施用BSID-II或KABC II。对这些患者的最后评估(例如，实验室分析、筛选实验室、Vineland-3、BSID-III和/或KABC-II分数、10米步行测试、CaGIS和CaGIC)将作为当前研究的基线数据；因此，在当前研究中，对于这些患者，不存在筛选期。参与上述实施例中描述的研究的患者必须在完成上述实施例中描述的研究后的3周内纳入当前研究。

给药和剂量调整：筛选后，符合条件的患者在参与研究期间每周接受静脉输注海藻糖。在12周的剂量调整期期间，由安全性审查委员会(SRC)大约每3周监查一次参与研究的所有患者的安全性数据。

在12周剂量调整期期间，所有患者(包括完成上述实施例中所述研究的患者(以保持研究盲化))将调整至静脉输注0.75g/kg或MTD海藻糖。剂量调整从治疗第1周开始，其中0.25g/kg起始剂量的海藻糖在60分钟内静脉内施用。在第4周(在前3周的0.25g/kg剂量后)，抽取患者的PK样本并评估输注和实验室安全性。召集由赞助商的首席医疗官或指定人员、位点首席研究员(PI)(或指定的医师助理研究员)、具有临床研究安全性数据审查经验的外部医师和PK专家组成的SRC。SRC在第4周剂量的1周内审查每位患者的安全性和PK数据。如果未发现安全性问题，则在第5周将剂量增加至0.50g/kg。虽然SRC会提出建议，但增加剂量、继续相同剂量或中止治疗由当地PI考虑所有决策点后最终决定。在第8周(在3周的0.50g/kg剂量后)，抽取患者的PK样本并评估实验室安全性。SRC在第8周剂量的1周内审查每名患者的安全性数据。如果SRC未发现安全性问题，则在第9周将剂量增加至0.75g/kg。在第12周(对于静脉分配海藻糖的患者在3周的0.75g/kg剂量后)，抽取患者的PK样本并评估实验室安全性。SRC在第12周剂量的1周内审查每名患者的安全性数据。如果SRC未发现安全性问题，则将剂量保持在0.75g/kg。

预计患者在第12周前达到MTD，并继续以MTD治疗至72周治疗期结束。

安全性和疗效：主要安全性终点是严重和不严重TEAE的发生率。

疗效评估将在第12、24、48和72周进行。主要疗效终点是在第72周在Vineland 3上ABC分数自基线的变化。ABC是由交际、日常生活技能和社交方面的标准分数计算得出的。

下文列出了用于诊断的示例性标准以及用于纳入和排除的主要标准。

纳入：

1.提供由父母或法定监护人签署的书面知情同意书。

2.经遗传学确诊的A型、B型、C型或D型Sanfilippo综合征。

a.基因组DNA分析显示纯合子或复合杂合子致病性变体。

3.在Vineland-3上分数≥24个月的患者必须完成上述实施例中描述的研究，或者未能满足上述实施例中描述的研究的其他筛选标准。

4.男性或女性；3至25岁(包括端值在内)

5.AEq满足以下任一条件：

a.筛选时在Vineland-3上AEq≥12个月。这将基于来自3个子方面的AEq的平均值来确定：交际、日常生活技能和社交

b.任何AEq的前提是患者已完成上述实施例中描述的研究。

6.有生育潜能的女性患者在筛选时尿液或血浆人绒毛膜促性腺激素β(β-hCG)妊娠结果呈阴性

7.父母或法定授权代表监督并提供性禁欲的保证或接受所指示的避孕指南。

排除：

1.先前针对A型、B型、C型或D型Sanfilippo综合征施用过干细胞或基因疗法或酶替代疗法(ERT)。

a.如果无证据显示临床益处，则在知情同意时接受ERT疗法后至少一年的患者可纳入。

2.以前被诊断患有糖尿病或在筛选时血红蛋白A1c(HgbA1c)结果>6.0％。

3.癫痫发作控制欠佳，定义为过去4-6周内每周一次或多次癫痫发作。

4.足以妨碍神经发育测试的视觉或听觉受损。

5.研究人员认为会混淆对安全性或疗效数据的解释或将患者置于不当风险中的任何其他医疗病症。

6.无法配合方案要求的评估或程序。

7.先前采用静脉输注海藻糖进行治疗，除了先前纳入上述实施例中描述的研究的患者之外，其中上述实施例中描述的研究中的治疗分配在纳入当前研究时不会被披露。

8.已知对海藻糖过敏。

9.在签署同意书前30天内使用富含染料木黄酮的大豆异黄酮。

10.在签署同意书前7天内使用口服海藻糖。

11.筛选时血清学检测发现乙型肝炎或丙型肝炎感染。

12.目前正参加另一项临床试验或在当前研究中在计划第一次给药前不到90天完成了干预试验，除了完成了上述实施例中描述的研究并且在完成上述实施例中描述的研究后的3周内纳入当前研究的患者之外。

研究产品、剂量和施用模式：90mg/mL海藻糖溶液在60±5分钟内静脉内施用，每周一次。以如上所述的剂量调整方式(第1周至第12周)从0.25g/kg的剂量开始且最高至0.75g/kg的最大剂量施用海藻糖。不允许留置导管。

限制用药：不存在已知的与静脉90mg/mL海藻糖的药物-药物相互作用。如果患者开始研究时服用美格鲁特，则剂量必须在整个研究过程中保持不变。研究期间不允许患者开始使用美格鲁特治疗。允许使用大麻二酚(CBD)油，但剂量必须在整个研究期间保持不变。如果患者在知情同意时服用行为药物，则允许使用行为药物(兴奋剂、非兴奋剂、精神药物)。如果可能的话，剂量和频率应当在整个研究过程中保持不变。研究期间不允许口服海藻糖和富含染料木黄酮的大豆异黄酮。患者在研究期间不应改变伴随药物，除非他(她)们经历癫痫症加重或急性疾病。患者可能接受作为标准护理的医学上治疗症状诸如不良反应(AE)、并发疾病、焦虑症并且预防疾病所必需的伴随药物，例如疫苗。如果患者在知情同意时服用非处方(OTC)药物(诸如维生素或草药补充剂)，则允许使用非处方药物。如果可能的话，剂量和频率应当在整个研究过程中保持不变。

统计方法：

分析群体：以下分析群体用于所有分析和演示：

·全分析集(FAS)和安全性集(SAF)是相同的并包括所有在研究期间接受任何研究药物的所有患者。

·PK分析集(PKS)包括FAS/SAF中的所有患者，其中足够数量的血浆海藻糖浓度可用于进行PK分析。被排除在PK分析之外的患者连同排除原因一起列在PK报告中。

样本量考虑：该开放标签、单臂研究的样本量基于可行性。允许完成上述实施例中描述的研究的所有患者以及新的直接登记者纳入，总共最多24名患者。

统计方法：对研究的计划数据分析的详细描述记录在统计分析计划(SAP)中。

连续疗效和药效学终点的观察值和自基线的变化按照研究访问使用平均值、中值、四分位数、最大值、最小值、标准偏差、标准误差和95％置信区间描述性地汇总。二元终点按照访视使用频率和百分比汇总。为按类别录入定义的以下子组呈现描述性统计值：

·完成上述实施例中描述的研究的患者，这些患者在该研究期间接受双盲海藻糖

·完成上述实施例中描述的研究的患者，这些患者在该研究期间接受双盲安慰剂

·先前未纳入上述实施例中描述的研究的新患者。

按照对整个群体的研究访问以及按照上述子组来汇总安全性数据。

实施例4：静脉注射海藻糖对患有A型或B型SANFILIPPO综合征的患者中的功能性结果和生物标志物的安全性和疗效研究

方法：进行57周的开放标签试验，以评估静脉注射

90mg/mL海藻糖以用于治疗A型和B型Sanfilippo综合征的安全性和疗效。

患有经遗传学确诊的A型或B型Sanfilippo综合征的、基于特定突变或早期诊断(小于6岁)认为患有快速进行性疾病的、以及尿液中GAG排泄量升高并且/或者血浆和/或尿液中HS水平升高的3至16岁患者符合纳入条件。患者每周接受静脉输注海藻糖。

安全性群体由接受至少一次输注或部分输注海藻糖的所有患者组成。主要疗效群体由在知情同意时年龄为3至7岁的安全性群体中的患者亚组(组1)组成。

研究包括4周的筛选期。在筛选期期间，尿液GAG以及尿液和血浆HS生物标志物收集3次，间隔7天，以确定基线排泄量和血浆浓度。患者接受以下基线评估：体格检查、实验室安全性和心电图(ECG)。

使用Vineland 3、BSID-III和SBRS进行神经认知和行为评估。使用

父母代理睡眠障碍简表8A评估睡眠。评分员培训计划将概述对位点评分员的教育和

经验要求，以及用于培训和认证的过程。

给药和剂量调整：筛选后，符合条件的患者在52周内每周接受静脉输注海藻糖。在第53周，即最后一次输注后1周进行研究结束评估。

前9周是剂量调整期。将海藻糖的剂量从

0.25g/kg调整至0.75g/kg或最大耐受剂量(MTD)。剂量调整从治疗第1周开始，其中0.25g/kg起始剂量在60分钟内静脉内施用，一周一次。在第3周(在前2周的0.25g/kg剂量后)，患者接受实验室安全性评估。召集由赞助商的首席医疗官或指定人员、首席研究员(PI)(或指定的医师助理研究员)、具有临床试验安全性数据审查经验的外部医师和PK专家组成的安全性审查委员会(SRC)。SRC在第3周剂量的1周内审查每位患者的安全性和PK数据(如果可用)。如果未发现安全性问题，则在第4周将剂量增加至0.50g/kg。虽然SRC会提出建议，但增加剂量、继续相同剂量或中止治疗由当地PI考虑所有决策点后最终决定。在第6周(在2周的0.50g/kg剂量后)，患者接受实验室安全性评估。SRC在第6周剂量的1周内审查每名患者的安全性数据。如果SRC未发现安全性问题，则在第7周将剂量增加至0.75g/kg。在第9周(对于静脉分配海藻糖的患者在2周的0.75g/kg剂量后)，患者接受实验室安全性评估。SRC在第9周剂量的1周内审查每名患者的安全性数据。如果SRC未发现安全性问题，则将剂量保持在0.75g/kg。预计患者在第7周前达到MTD，并继续以MTD治疗至52周治疗期结束。在最后一次输注后1周(第53周)进行研究结束评估。

安全性和疗效：对安全性的主要评估是严重和不严重TEAE的发生率、体格检查发现、生命体征和临床实验室测试。

研究所纳入的3至16岁患者分成2组：3至7岁(组1)和8至16岁(组2)。使用Vineland-3、BSID-III和SBRS评估疗效。疗效评估在第13、26、39和52周在所有患者中进行。然而，由于这种疾病的快速进行性本质，对疗效的主要评估仅限于3至7岁的年龄组。基于对A型和B型Sanfilippo患者的两项自然史研究(Shapiro等人2016年和Whitely等人2018年)，预计69％的3至7岁之间的患者在Vineland-3上在12个月时间段内下降>3个月。因此，对疗效的主要评估是在Vineland-3上评估的神经认知功能(3个方面：社交、日常生活技能和运动功能)。主要终点是在Vineland-3上在52周的时间段内下降>3个月的患者百分比与自然史数据的比较。附加的次要疗效终点包括在Vineland-3上在不同时间点AEq自基线的变化和生物标志物的变化。探索性终点包括对BSID-III和SBRS自基线的变化的评估。此外，使用量表中每个量表自基线变化的描述性统计值来研究8至16岁组中的疗效。

在第3、6、9、13、26、39和52周监测血浆和尿液中所测量的生物标志物水平。

由于患有Sanfilippo的患者经历严重的睡眠障碍，因此在第13、26、39和52周使用

父母代理睡眠障碍简表8A来确定治疗对睡眠模式的影响。

除了SRC之外，独立的数据监查委员会(DMC)将在DMC章程中限定的时间点(至少在第13、26和39周)审查安全性数据。完成当前试验的患者可能符合扩展研究纳入条件。

样本量正当性：纳入多达20名患有A型或B型Sanfilippo的患者。因疾病的孤儿本质，样本量不基于统计考虑。然而，需要纳入至少10名3岁至7岁之间的患者以对疗效进行初步评估。

下文列出了用于诊断的示例性标准以及用于纳入和排除的主要标准。

纳入：

1.提供由父母或法定监护人签署的书面知情同意书

2.经遗传学确诊的A型或B型Sanfilippo综合征

a.基因组DNA分析显示SGSH(A型)或NAGLU(B型)基因中的纯合子或复合杂合子致病性变体

3.筛选时尿液GAG和/或尿液或血浆HS排泄量升高(3次评估的平均值>正常值上限[ULN])

4.男性或女性；3至16岁(包括端值在内)

5.患有如通过基因型或6岁前诊断定义的快速进行性A型或B型Sanfilippo综合征的患者

6.有生育潜能的女性患者在筛选时尿液或血浆人绒毛膜促性腺激素β(β-hCG)妊娠结果呈阴性

7.愿意遵守性禁欲或方案中所概述的避孕指南

排除：

1.先前

针对A型或B型Sanfilippo综合征施用过干细胞或基因疗法或者酶替代疗法(ERT)

a.若未表现出治疗效果，则在知情同意时接受ERT疗法后至少一年的患者可纳入。

2.以前被诊断患有糖尿病或在筛选时血红蛋白A1c(HgbA1c)结果>6.0％

3.癫痫发作控制欠佳，定义为过去

4-6周内每周一次或多次癫痫发作

4.足以妨碍神经发育测试的视觉或听觉受损

5.研究人员认为会混淆对安全性或疗效数据的解释或将患者置于不当风险中的任何其他医疗病症

6.无法配合方案要求的评估或程序

7.先前用静脉注射海藻糖治疗

8.已知对海藻糖过敏

9.在签署同意书前30天内使用富含染料木黄酮的大豆异黄酮

10.在签署同意书前7天内使用口服海藻糖

11.筛选时血清学检测发现乙型肝炎或丙型肝炎感染

12.目前正在接受抗凝血剂治疗(例如华法林、依诺肝素)，而不是抗血小板治疗，抗血小板治疗不是排除原因

13.目前正参加另一项临床试验或在计划第一次给药前不到90天完成了干预试验

研究产品、剂量和施用模式：90mg/mL海藻糖溶液在60±5分钟内静脉内施用，每周一次。

以如上所述的剂量调整方式(第1周至第9周)从0.25g/kg的剂量开始且最高至0.75g/kg的最大剂量施用海藻糖。不允许留置导管。

治疗持续时间：研究包括4周的筛选期和52周的治疗期，其中治疗期包括9周的剂量调整期。

限制用药：不存在已知的与静脉90mg/mL海藻糖的药物-药物相互作用。如果患者开始研究时服用美格鲁特，则剂量必须在整个研究过程中保持不变。研究期间不允许患者开始使用美格鲁特治疗。允许使用大麻二酚(CBD)油，但剂量必须在整个研究期间保持不变。如果患者在知情同意时服用行为药物，则允许使用行为药物(兴奋剂、非兴奋剂、精神药物)。如果可能的话，剂量和频率应当在整个研究过程中保持不变。研究期间不允许口服海藻糖和富含染料木黄酮的大豆异黄酮。患者在研究期间不应改变伴随药物，除非他(她)们经历癫痫症加重或急性疾病。患者可能接受作为标准护理的医学上治疗症状诸如AE、并发疾病、焦虑症并且预防疾病所必需的伴随药物，例如疫苗。如果患者在知情同意时服用非处方(OTC)药物(诸如维生素或草药补充剂)，则允许使用非处方药物。如果可能的话，剂量和频率应当在整个研究过程中保持不变。

统计方法：安全性群体由接受至少一次输注或部分输注海藻糖的所有患者组成。主要疗效群体由在签署知情同意时年龄为3至7岁的安全性群体中的患者亚组(组1)组成。

安全性分析包括对治疗中出现的不良事件的发生率和严重程度、严重不良事件的发生率、体格检查发现、生命体征和临床实验室测试的描述性总结。AE和SAE按系统器官类别、优选的术语、严重程度和与药物的关系制成表格。

主要疗效终点是第52周时Vineland-3年龄当量分数(AEq)下降至少3个月的患者(在签署同意书时为3-7岁)的比例。这将与从纵向自然史研究(如上所述)获得的历史对照组(16名患者)进行比较，在纵向自然史研究期间患者用标准护理治疗。主要分析是使用以疾病类型(A或B)作为分层变量的Cochran-Mantel-Haenszel、卡方检验的组之间的比较。如果任何治疗/层单元中的患者人数不足，则使用Fisher精确检验。

计划样本量主要基于可行性；然而，据估计，治疗组中的10名患者和历史对照组中的16名患者具有大约80％把握度能够检测分别为0.09和0.69的显著性(2边，α＝0.05)真实下降率(在第52周AEq下降至少3个点)。随着治疗组中的样本量增加到16，估计提供80％把握度的比例增加至0.16。这假设治疗组和历史对照组有效地从等效患者群体中取样，这些等效患者群体如果未经治疗，则具有相当的Vineland-3 AEq的下降率。在上述假设下，对于10和16的样本量，估计治疗组中最不显著性下降率分别为0.21和0.28。

对治疗组和历史对照组之间的AEq自基线的平均变化差异进行次要分析。这使用重复测量的混合效应模型(MMRM)，该模型包括治疗、疾病类型(A或B)、访视(类别上)和治疗/访视相互作用作为固定效应，基线AEq作为协变量，以及患者作为随机效应。另一个支持性模型使用包括治疗、疾病类型、时间(连续)和基线AEq的MMRM评估对AEq变化斜率的治疗效应。

描述性地呈现对次要和探索性终点的分析并使用上述相同的统计模型进行分析。

鉴于研究的小样本量，退出和缺失值的发生可能会对疗效推断和估计产生很大影响。因此，对所有接受治疗的患者进行第52周Vineland-3评估非常重要。尽一切努力将已终止试验的患者带回诊所进行第52周安全性和疗效评估。这些评估将用于主要疗效分析。对于已终止试验且第52周Vineland-3评估仍然缺失的患者，对于主要分析将AEq估算为下降3个月。对缺失数据对Vineland-3 AEq变化的主要和次要分析结论的影响进行附加的敏感性分析。用于这些分析的方法描述于SAP中。

Claims (118)

1.一种治疗有需要的受试者的黏多糖症的方法，所述方法包括向所述受试者静脉内施用水性药物制剂，所述水性药物制剂包含基本上由实质性纯化的海藻糖组成的单一活性成分，其中：

所述制剂的pH为约4.5至7.0；

所述制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；

所述制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；

所述制剂在约15分钟至约150分钟内施用；

其中所述实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于所述制剂中；并且

其中所述实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

2.一种减轻有需要的受试者的黏多糖症的一种或多种症状的方法，所述方法包括向所述受试者静脉内施用水性药物制剂，其中所述制剂包含基本上由实质性纯化的海藻糖组成的单一活性成分，其中：

所述制剂的pH为约4.5至7.5；

所述制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；

所述制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；

所述制剂在约15分钟至约150分钟内施用；

其中所述实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于所述制剂中；并且

其中所述实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

3.一种治疗有需要的受试者的黏多糖症的方法，所述方法包括向所述受试者静脉内施用水性药物制剂，所述水性药物制剂包含实质性纯化的海藻糖和海藻糖酶抑制剂作为唯一的活性成分，其中：

所述制剂的pH为约4.5至7.0；

所述制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；

所述制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；

所述制剂在约15分钟至约150分钟内施用；

其中所述实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于所述制剂中；并且

其中所述实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

4.一种减轻有需要的受试者的黏多糖症的一种或多种症状的方法，所述方法包括向所述受试者静脉内施用水性药物制剂，其中所述制剂包含实质性纯化的海藻糖和海藻糖酶抑制剂作为唯一的活性成分，其中：

所述制剂的pH为约4.5至7.0；

所述制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；

所述制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；

所述制剂在约15分钟至约150分钟内施用；

其中所述实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于所述制剂中；并且

其中所述实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

5.一种治疗有需要的受试者的黏多糖症的方法，所述方法包括

(a)确定所述受试者患有溶酶体酶缺乏症；以及

(b)向所述受试者静脉内施用水性药物制剂，其中所述制剂包含基本上由实质性纯化的海藻糖组成的单一活性成分，其中：

所述制剂的pH为约4.5至7.0；

所述制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；

所述制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；

所述制剂在约15分钟至约150分钟内静脉内施用；

其中所述实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于所述制剂中；并且

其中所述实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

6.一种减轻有需要的受试者的黏多糖症的一种或多种症状的方法，所述方法包括

(a)确定所述受试者患有溶酶体酶缺乏症；以及

(b)向所述受试者静脉内施用水性药物制剂，其中所述制剂包含基本上由实质性纯化的海藻糖组成的单一活性成分，其中：

所述制剂的pH为约4.5至7.0；

所述制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；

所述制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；

所述制剂在约15分钟至约150分钟内施用；

其中所述实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于所述制剂中；并且

其中所述实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

7.一种治疗有需要的受试者的黏多糖症的方法，所述方法包括

(a)确定所述受试者患有溶酶体酶缺乏症；以及

(b)向所述受试者静脉内施用水性药物制剂，其中所述制剂包含实质性纯化的海藻糖和海藻糖酶抑制剂作为唯一的活性成分，其中：

所述制剂的pH为约4.5至7.0；

所述制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；

所述制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；

所述制剂在约15分钟至约150分钟内施用；

其中所述实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于所述制剂中；并且

其中所述实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

8.一种减轻有需要的受试者的黏多糖症的一种或多种症状的方法，所述方法包括

(a)确定所述受试者患有溶酶体酶缺乏症；以及

(b)向所述受试者静脉内施用水性药物制剂，其中所述制剂包含实质性纯化的海藻糖和海藻糖酶抑制剂作为唯一的活性成分，其中：

所述制剂的pH为约4.5至7.0；

所述制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；

所述制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；

所述制剂在约15分钟至约150分钟内施用；

其中所述实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于所述制剂中；并且

其中所述实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述黏多糖症选自：Hurler综合征(MPS IH)、Hurler-Scheie综合征(MPS IH/S)、Scheie综合征(MPS IS或MPS V)、Hunter综合征(MPS II)、Sanfillippo综合征A(MPS IIIA)、Sanfillippo综合征B(MPS IIIB)、Sanfillippo综合征C(MPS IIIC)、Sanfillippo综合征D(MPS IIID)、Morquio综合征A(MPSIVA)、Morquio综合征B(MPS IVB)、Maroteaux-Lamy综合征(MPS VI)、Sly综合征(MPS VII)和Natowicz综合征(MPS IX)。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述黏多糖症是Hurler综合征(MPSIH)。

11.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述黏多糖症是Scheie综合征(MPSIS或MPS V)。

12.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述黏多糖症是Hunter综合征(MPSII)。

13.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述黏多糖症是Sanfillippo综合征A(MPS IIIA)。

14.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述黏多糖症是Sanfillippo综合征B(MPS IIIB)。

15.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述黏多糖症是Sanfillippo综合征C(MPS IIIC)。

16.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述黏多糖症是Sanfillippo综合征D(MPS IIID)。

17.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述黏多糖症是Morquio综合征A(MPS IVA)。

18.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述黏多糖症是Morquio综合征B(MPS IVB)。

19.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述黏多糖症是Maroteaux-Lamy综合征(MPS VI)。

20.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述黏多糖症是Sly综合征(MPSVII)。

21.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述黏多糖症是Natowicz综合征(MPS IX)。

22.根据权利要求1至21中任一项所述的方法，其中所述制剂的pH为约4.5至约6.5。

23.根据权利要求1至22中任一项所述的方法，其中所述制剂的pH为约5.5。

24.根据权利要求1至23中任一项所述的方法，其中所述制剂每mL含有少于约0.15个内毒素单位。

25.根据权利要求1至24中任一项所述的方法，其中所述制剂每mL含有少于约0.05个内毒素单位。

26.根据权利要求1至25中任一项所述的方法，其中所述制剂每mL含有少于约0.02个内毒素单位。

27.根据权利要求1至26中任一项所述的方法，其中所述制剂具有约290mOsm/kg至320mOsm/kg的渗透压。

28.根据权利要求1至27中任一项所述的方法，其中所述制剂具有约300mOsm/kg至310mOsm/kg的渗透压。

29.根据权利要求1至28中任一项所述的方法，其中所述制剂在约15分钟至约90分钟内施用。

30.根据权利要求1至29中任一项所述的方法，其中所述制剂在约15分钟至约60分钟内施用。

31.根据权利要求1至30中任一项所述的方法，其中所述制剂在约15分钟至约45分钟内施用。

32.根据权利要求1至31中任一项所述的方法，其中所述制剂在约15分钟至约30分钟内施用。

33.根据权利要求1至28中任一项所述的方法，其中所述制剂在约120分钟至约150分钟内施用。

34.根据权利要求1至33中任一项所述的方法，其中所述制剂包含约6％(w/v)至约12％(w/v)的实质性纯化的海藻糖。

35.根据权利要求1至34中任一项所述的方法，其中所述制剂包含约7％(w/v)至约11％(w/v)的实质性纯化的海藻糖。

36.根据权利要求1至35中任一项所述的方法，其中所述制剂包含约8％(w/v)至约10％(w/v)的实质性纯化的海藻糖。

37.根据权利要求1至36中任一项所述的方法，其中所述制剂包含约9％(w/v)的实质性纯化的海藻糖。

38.根据权利要求1至37中任一项所述的方法，其中所述实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

39.根据权利要求1至38中任一项所述的方法，其中所述实质性纯化的海藻糖含有少于约0.25％的污染物。

40.根据权利要求1至39中任一项所述的方法，其中所述实质性纯化的海藻糖含有少于约0.1％的污染物。

41.根据权利要求1至40中任一项所述的方法，其中所述实质性纯化的海藻糖含有少于约0.08％的污染物。

42.根据权利要求1至41中任一项所述的方法，其中所述实质性纯化的海藻糖含有少于约0.05％的污染物。

43.根据权利要求1至42中任一项所述的方法，其中所述污染物包括葡萄糖、麦芽三糖或它们的组合。

44.根据权利要求43所述的方法，其中所述制剂含有少于约0.01％的葡萄糖和少于约0.01％的麦芽三糖。

45.根据权利要求1至44中任一项所述的方法，其中所述受试者是儿科受试者。

46.根据权利要求1至45中任一项所述的方法，其中所述受试者未满18岁。

47.根据权利要求1至46中任一项所述的方法，其中所述受试者未满12岁。

48.根据权利要求1至47中任一项所述的方法，其中所述受试者未满8岁。

49.根据权利要求1至48中任一项所述的方法，其中所述受试者未满6岁。

50.根据权利要求1至49中任一项所述的方法，其中所述受试者未满4岁。

51.根据权利要求1至50中任一项所述的方法，其中所述受试者未满2岁。

52.根据权利要求1至51中任一项所述的方法，其中所述受试者未满1岁。

53.根据权利要求1至52中任一项所述的方法，其中所述受试者未满8个月的月龄。

54.根据权利要求1至53中任一项所述的方法，其中所述受试者未满4个月的月龄。

55.根据权利要求1至54中任一项所述的方法，其中所述受试者未满1个月的月龄。

56.根据权利要求1至55中任一项所述的方法，其中所述受试者未满1周的周龄。

57.根据权利要求1至44中任一项所述的方法，其中所述受试者在子宫内；并且其中施用给所述受试者包括施用给母亲。

58.根据权利要求1至44中任一项所述的方法，其中所述受试者处于约2岁和约6岁之间。

59.根据权利要求58所述的方法，其中所述受试者为约4岁至约6岁。

60.根据权利要求5至59中任一项所述的方法，其中确定受试者患有溶酶体酶缺乏症包括基因测试、血液测试、尿液测试、体外酶测定或任何前述测试的组合。

61.根据权利要求5至60中任一项所述的方法，其中确定受试者患有溶酶体酶缺乏症包括基因测试。

62.根据权利要求5至61中任一项所述的方法，其中确定受试者患有溶酶体酶缺乏症包括血液测试。

63.根据权利要求5至61中任一项所述的方法，其中确定受试者患有溶酶体酶缺乏症包括尿液测试。

64.根据权利要求5至61中任一项所述的方法，其中确定受试者患有溶酶体酶缺乏症包括体外酶测定。

65.根据权利要求5至46或59中任一项所述的方法，其中确定受试者患有溶酶体酶缺乏症包括羊膜穿刺术、绒毛膜绒毛取样或它们的组合。

66.根据权利要求5至9和22至65中任一项所述的方法，其中所述酶缺乏症是选自以下各项的酶的缺乏症：α-L-艾杜糖醛酸酶、艾杜糖醛酸硫酸酯酶、乙酰肝素磺酰胺酶、N-乙酰基氨基葡糖苷酶、乙酰肝素-α-氨基葡糖苷-N-乙酰基转移酶、N-乙酰基氨基葡萄糖-6-硫酸酯酶、半乳糖-6-硫酸硫酸酯酶、β-半乳糖苷酶、N-乙酰基半乳糖胺-4-硫酸酯酶、β-葡萄糖醛酸酶和透明质酸酶。

67.根据权利要求5至9和22至66中任一项所述的方法，其中所述酶缺乏症是α-L-艾杜糖醛酸酶的缺乏症。

68.根据权利要求5至9和22至66中任一项所述的方法，其中所述酶缺乏症是艾杜糖醛酸硫酸酯酶的缺乏症。

69.根据权利要求5至9和22至66中任一项所述的方法，其中所述酶缺乏症是乙酰肝素磺酰胺酶的缺乏症。

70.根据权利要求5至9和22至66中任一项所述的方法，其中所述酶缺乏症是N-乙酰基氨基葡糖苷酶的缺乏症。

71.根据权利要求5至9和22至66中任一项所述的方法，其中所述酶缺乏症是乙酰肝素-α-氨基葡糖苷-N-乙酰基转移酶的缺乏症。

72.根据权利要求5至9和22至66中任一项所述的方法，其中所述酶缺乏症是N-乙酰基氨基葡萄糖-6-硫酸酯酶的缺乏症。

73.根据权利要求5至9和22至66中任一项所述的方法，其中所述酶缺乏症是半乳糖-6-硫酸硫酸酯酶的缺乏症。

74.根据权利要求5至9和22至66中任一项所述的方法，其中所述酶缺乏症是β-半乳糖苷酶的缺乏症。

75.根据权利要求5至9和22至66中任一项所述的方法，其中所述酶缺乏症是N-乙酰基半乳糖胺-4-硫酸酯酶的缺乏症。

76.根据权利要求5至9和22至66中任一项所述的方法，其中所述酶缺乏症是β-葡萄糖醛酸酶的缺乏症。

77.根据权利要求5至9和22至66中任一项所述的方法，其中所述酶缺乏症是透明质酸酶的缺乏症。

78.根据权利要求1至77中任一项所述的方法，所述方法还包括向所述受试者施用酶替代疗法。

79.根据权利要求78所述的方法，其中所述酶替代疗法选自：拉罗尼酶、艾杜硫酶、阿加糖酶α、阿加糖酶β、伊米苷酶、他利苷酶α、维拉苷酶α、阿糖苷酶、塞贝利普酶α、拉罗尼酶、艾度硫酸酯酶、依洛硫酸酯酶α、加硫酶、阿糖苷酶α以及任何前述酶的组合。

80.根据权利要求1至79中任一项所述的方法，所述方法还包括向所述受试者施用底物减少疗法。

81.根据权利要求80所述的方法，其中所述底物减少疗法包括以下中的一者或多者：美格鲁特、米加司他、米格列醇、依利格鲁司特、染料木黄酮、(S)-(2-(2-(4-氟苯基)噻唑-4-基)丙-2-基)氨基甲酸奎宁环-3-基酯(GZ161)、(2-(4'-氟-[1,1'-联苯]-3-基)丙-2-基)氨基甲酸奎宁环-3-基酯、伊比格鲁司他、文格鲁司他、依利格鲁司他；或任何前述物质的组合；或任何前述物质的药学上可接受的盐。

82.根据权利要求3、4、7或8至81中任一项所述的方法，其中所述海藻糖酶抑制剂选自有效霉素A、海藻唑林、苦杏仁苷；或任何前述抑制剂的组合；或任何前述抑制剂的药学上可接受的盐。

83.根据权利要求1、2、5、6或9至81中任一项所述的方法，所述方法还包括作为与包含基本上由实质性纯化的海藻糖组成的单一活性成分的所述药物制剂的非固定组合施用海藻糖酶抑制剂。

84.根据权利要求83所述的方法，其中所述海藻糖酶抑制剂选自有效霉素A、海藻唑林、苦杏仁苷；或任何前述抑制剂的组合；或任何前述抑制剂的药学上可接受的盐。

85.根据权利要求83或84所述的方法，其中所述海藻糖酶抑制剂与包含基本由实质性纯化的海藻糖组成的单一活性成分的所述药物制剂同时或按任意顺序依次施用。

86.一种用于向受试者静脉内施用的即用型水性药物制剂，其中所述制剂包含基本上由实质性纯化的海藻糖组成的单一活性成分，其中：

所述制剂的pH为约4.5至7.0；

所述制剂每mL含有少于约0.75个内毒素单位；

所述制剂具有约280mOsm/kg至330mOsm/kg的渗透压；

其中所述实质性纯化的海藻糖以约5％(w/v)至约15％(w/v)的量存在于所述制剂中；

其中所述实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物；

其中所述制剂设置在密封容器内；并且

其中所述制剂为无菌的。

87.根据权利要求86所述的制剂，其中所述容器选自玻璃容器或塑料容器。

88.根据权利要求86或87所述的制剂，其中所述容器是玻璃容器。

89.根据权利要求86至88中任一项所述的制剂，其中所述制剂被配制为选自10mL、20mL、30mL或40mL的总体积。

90.根据权利要求86至89中任一项所述的制剂，其中所述制剂被配制为30mL的总体积。

91.根据权利要求86或87所述的制剂，其中所述容器是塑料容器。

92.根据权利要求91所述的制剂，其中所述塑料容器是柔性的。

93.根据权利要求91或92所述的制剂，其中所述塑料容器包含乙烯和乙酸乙烯酯的共聚物。

94.根据权利要求91或92所述的制剂，其中所述塑料容器包含乙烯-丙烯和苯乙烯-乙烯-丁烯-苯乙烯(SEBS)的共聚物。

95.根据权利要求91或92所述的制剂，其中所述塑料容器包含聚丙烯。

96.根据权利要求95所述的制剂，其中所述塑料容器包括单个或多个聚丙烯层。

97.根据权利要求91至96中任一项所述的制剂，其中所述塑料容器为薄膜袋。

98.根据权利要求91至97中任一项所述的制剂，其中所述塑料容器还包括注射口和管口。

99.根据权利要求86至98中任一项所述的制剂，其中所述制剂已经在湿蒸汽中灭菌。

100.根据权利要求86至98中任一项所述的制剂，其中所述制剂已经无菌灭菌。

101.根据权利要求86至100中任一项所述的制剂，其中所述制剂的pH为约4.5至约6.5。

102.根据权利要求86至101中任一项所述的制剂，其中所述制剂的pH为约5.5。

103.根据权利要求86至102中任一项所述的制剂，其中所述制剂每mL含有少于约0.15个内毒素单位。

104.根据权利要求86至103中任一项所述的制剂，其中所述制剂每mL含有少于约0.05个内毒素单位。

105.根据权利要求86至104中任一项所述的制剂，其中所述制剂每mL含有少于约0.02个内毒素单位。

106.根据权利要求86至105中任一项所述的制剂，其中所述制剂具有约290mOsm/kg至320mOsm/kg的渗透压。

107.根据权利要求86至106中任一项所述的制剂，其中所述制剂具有约300mOsm/kg至310mOsm/kg的渗透压。

108.根据权利要求86至107中任一项所述的制剂，其中所述制剂包含约6％(w/v)至约12％(w/v)的实质性纯化的海藻糖。

109.根据权利要求86至108中任一项所述的制剂，其中所述制剂包含约7％(w/v)至约11％(w/v)的实质性纯化的海藻糖。

110.根据权利要求86至109中任一项所述的制剂，其中所述制剂包含约8％(w/v)至约10％(w/v)的实质性纯化的海藻糖。

111.根据权利要求86至110中任一项所述的制剂，其中所述制剂包含约9％(w/v)的实质性纯化的海藻糖。

112.根据权利要求86至111中任一项所述的制剂，其中所述实质性纯化的海藻糖含有少于约0.5％的污染物。

113.根据权利要求86至112中任一项所述的制剂，其中所述实质性纯化的海藻糖含有少于约0.25％的污染物。

114.根据权利要求86至113中任一项所述的制剂，其中所述实质性纯化的海藻糖含有少于约0.1％的污染物。

115.根据权利要求86至114中任一项所述的制剂，其中所述实质性纯化的海藻糖含有少于约0.08％的污染物。

116.根据权利要求86至115中任一项所述的制剂，其中所述实质性纯化的海藻糖含有少于约0.05％的污染物。

117.根据权利要求86至116中任一项所述的制剂，其中所述污染物包括葡萄糖、麦芽三糖或它们的组合。

118.根据权利要求117所述的制剂，其中所述制剂含有少于约0.01％的葡萄糖和少于约0.01％的麦芽三糖。

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