CN114901664B - 吡啶酮化合物及应用 - Google Patents

吡啶酮化合物及应用

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CN114901664B CN202180007672.3A CN202180007672A CN114901664B CN 114901664 B CN114901664 B CN 114901664B CN 202180007672 A CN202180007672 A CN 202180007672A CN 114901664 B CN114901664 B CN 114901664B
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Abstract

本发明提供了通式(A)所示化合物或其药学上可接受的盐、药物组合物及其制备方法，以及作为MAT2A抑制剂的用途。

Description

吡啶酮化合物及应用
本申请要求以下五件在先申请的优先权，以下在先申请的全文通过引用的方式结合于本申请中：
2020年1月10日向中国国家知识产权局提交的，专利申请号为202010026786.X，发明名称为“吡啶酮化合物”的在先申请；
2020年4月30日向中国国家知识产权局提交的，专利申请号为202010362378.1，发明名称为“吡啶酮化合物及应用”的在先申请；
2020年7月9日向中国国家知识产权局提交的，专利申请号为202010658579.6，发明名称为“吡啶酮化合物及应用”的在先申请；
2020年8月26日向中国国家知识产权局提交的，专利申请号为202010871227.9，发明名称为“吡啶酮化合物及应用”的在先申请；
2020年9月14日向中国国家知识产权局提交的，专利申请号为202010958603.8，发明名称为“吡啶酮化合物及应用”的在先申请。
技术领域
本发明涉及一种新型的吡啶酮类化合物或药学可接受的盐，含有它们的药物组合物以及作为MAT2A抑制剂的用途。
背景技术
甲硫氨酸腺苷转移酶(methionine adenosyltransferase,MAT)，又称S-腺苷甲硫氨酸合成酶，是能够催化甲硫氨酸(methionine,Met)与ATP反应生成S-腺苷甲硫氨酸(S-Adenosyl-L-methionine,SAM)的一类酶。SAM是体内主要的甲基供体，能够通过转甲基反应调控基因的表达、转录与翻译，进而对细胞的生长、死亡及分化产生重要影响。不仅如此，SAM还参与多胺以及谷胱甘肽的生物合成。
MAT酶主要有三个亚型，MAT1A、MAT2A与MAT2B。MAT1A主要存在于正常肝细胞中，而MAT2A则广泛分布于肝外细胞。这两个亚型在催化效率及调控方式上存在差异。MAT2B不具有催化合成SAM的能力，而是作为MAT2A的调节亚基，与MAT2A形成复合物后，调节MAT2A的催化活性。
研究指出，在肝癌细胞中，MAT1A的表达水平下调和MAT2A的表达增加，进而促进肝癌细胞的增殖。除此以外，MAT2A表达水平异常升高的现象同样存在于多类其他肿瘤，并且通过沉默编码MAT2A的基因能够导致癌细胞的死亡。进一步，Marjon等人(Cell Reports 15(3)(2016)574–587)发现MTAP缺失的癌细胞系对MAT2A抑制敏感。MTAP又称甲硫腺苷磷酸化酶，其在正常的组织细胞中广泛表达。该酶能够催化甲硫腺苷(MTA)转化为5-甲基硫代核糖-1-磷酸及腺嘌呤。这一过程也是人体内甲硫氨酸补偿途径的重要环节。当MTAP缺失后，MTA的代谢途径受到抑制，进而导致体内MTA大量蓄积，最终造成癌细胞对MAT2A抑制的敏感性增强。
编码人MTAP的基因位于染色体9p21区域(chr9p21)，其在所有肿瘤中纯合缺失的频率约为15％左右，且在不同肿瘤中的缺失频率有所不同。缺失频率较高的瘤种包括胶质瘤、间皮瘤、黑色素瘤、胃癌、食管癌、膀胱癌、胰腺癌、非小细胞肺癌、星形细胞瘤、骨肉瘤、头颈癌、粘液性软骨肉瘤、卵巢癌、子宫内膜癌、乳腺癌、软组织肉瘤、非霍奇金淋巴瘤等。
在人染色体9p21区域不仅包含编码MTAP的基因，该区域还包含肿瘤抑制基因p16INK4A(又称CDKN2A)及p15INK4B。在80％-90％的CDKN2A缺失的肿瘤中，MTAP也同样处于缺失的状态。
鉴于MAT2A的表达水平在多类肿瘤中异常升高，包括胃癌，结肠癌，肝癌和胰腺癌等，并且选择性抑制MAT2A能够降低MTAP缺失癌细胞的增殖活性。因此，选择性抑制MAT2A能够作为一种有效的肿瘤治疗手段。
WO2018039972、WO2018045071和WO2019191470公开了用于治疗肿瘤的MAT2A抑制剂杂环化合物。
发明内容
本发明提供一种通式(A)所示化合物或其药学上可接受的盐：
其中，环Q为5-6元杂环基、C6-C10芳基或5-10元杂芳基，所述5-6元杂环基、C6-C10芳基或5-10元杂芳基任选被Ra取代，所述Ra选自F、Cl、Br、I、OH、CN或任选被Rb取代的下列基团：C1-C10烷基、C3-C10环烷基、C1-C10烷氧基；
Rb选自F、Cl、Br、I、OH或CN；
环W为苯基、吡啶基、吡啶酮基或9-10元杂芳基，所述苯基、吡啶基、吡啶酮基或9-10元杂芳基任选被Rc取代，所述Rc选自OH或任选被Rc1取代的下列基团：C1-C10烷基、C1-C10烷氧基、C3-C10环烷基、P(O)(C1-C3烷基)2、4-6元杂环烷基；
Rc1选自F、Cl、Br、I、CN、OH、NH2或任选被Rc2取代的下列基团：C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、NHC(O)O(C1-C6烷基)、(C1-C6烷基)NHC(O)O、NH(C1-C3烷基)、N(C1-C3烷基)2、S(O)2(C1-C3烷基)、4-10元杂环基、4-10元杂环基氧基、(C3-C10环烷基)CH2O、5-6元杂芳基、5-6元杂芳基氧基；
Rc2选自4-6元杂环烷基、＝O、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、卤代C1-C3烷基、F、Cl、Br、I、CN、OH、CH2OH或NH2；
R1选自H、C1-C10烷基或C3-C10环烷基，所述C1-C10烷基或C3-C10环烷基任选被Rd取代，所述Rd选自F、Cl、Br、I、OH、CN或C1-C3烷基；
X选自N或者CH；
L选自O或NH；
条件是，
当环W为任选被Rc取代的苯基时，环Q为被一个或多个Ra取代的苯基或吡啶基，所述Ra为C1-C10烷氧基，所述C1-C10烷氧基任选被所述Rb取代，且当环Q为被一个或多个Ra取代的苯基时，其中一个Ra与苯基的4位连接；
当环Q为5-6元杂环基时，L选自O。
在一些实施方案中，环Q为5-6元杂环基、C6-C10芳基或5-10元杂芳基，所述5-6元杂环基、C6-C10芳基或5-10元杂芳基任选被Ra取代，所述Ra选自F、Cl、Br、I、OH、CN或任选被Rb取代的下列基团：C1-C10烷基、C3-C10环烷基、C1-C10烷氧基；
Rb选自F、Cl、Br、I、OH或CN；
环W为苯基、吡啶基、吡啶酮基或9-10元杂芳基，所述苯基、吡啶基、吡啶酮基或9-10元杂芳基任选被Rc取代，所述Rc选自OH或任选被Rc1取代的下列基团：C1-C10烷基、C1-C10烷氧基、C3-C10环烷基、P(O)(C1-C3烷基)2、4-6元杂环烷基；
Rc1选自F、Cl、Br、I、CN、OH、NH2或任选被Rc2取代的下列基团：C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、NHC(O)O(C1-C6烷基)、(C1-C6烷基)NHC(O)O、NH(C1-C3烷基)、N(C1-C3烷基)2、S(O)2(C1-C3烷基)、4-10元杂环基、4-10元杂环基氧基、(C3-C10环烷基)CH2O、5-6元杂芳基、5-6元杂芳基氧基；
Rc2选自4-6元杂环烷基、＝O、C1-C3烷基、卤代C1-C3烷基、F、Cl、Br、I、CN、OH、CH2OH或NH2；
R1选自H、C1-C10烷基或C3-C10环烷基，所述C1-C10烷基或C3-C10环烷基任选被Rd取代，所述Rd选自F、Cl、Br、I、OH、CN或C1-C3烷基；
X选自N或者CH；
L选自O或NH；
条件是，
当环W为任选被Rc取代的苯基时，环Q为被一个或多个Ra取代的苯基或吡啶基，所述Ra为C1-C10烷氧基，所述C1-C10烷氧基任选被所述Rb取代，且当环Q为被一个或多个Ra取代的苯基时，其中一个Ra与苯基的4位连接；
当环Q为5-6元杂环基时，L选自O。
在一些实施方案中，环Q为5-6元杂环基、C6-C10芳基或5-10元杂芳基，所述5-6元杂环基、C6-C10芳基或5-10元杂芳基任选被Ra取代，所述Ra选自F、Cl、Br、I、OH、CN或任选被Rb取代的下列基团：C1-C10烷基、C3-C10环烷基、C1-C10烷氧基；
Rb选自F、Cl、Br、I、OH或CN；
环W为苯基、吡啶基、吡啶酮基或9-10元杂芳基，所述苯基、吡啶基、吡啶酮基或9-10元杂芳基任选被Rc取代，所述Rc选自OH或任选被Rc1取代的下列基团：C1-C10烷基、C1-C10烷氧基、C3-C10环烷基、P(O)(C1-C3烷基)2、4-6元杂环烷基；
Rc1选自F、Cl、Br、I、CN、OH、NH2或任选被Rc2取代的下列基团：C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、NHC(O)O(C1-C6烷基)、NH(C1-C3烷基)、N(C1-C3烷基)2、S(O)2(C1-C3烷基)、4-10元杂环基、4-10元杂环基氧基、5-6元杂芳基、5-6元杂芳基氧基；
Rc2选自4-6元杂环烷基、＝O、C1-C3烷基、F、Cl、Br、I、CN、OH或NH2；
R1选自H、C1-C10烷基或C3-C10环烷基，所述C1-C10烷基或C3-C10环烷基任选被Rd取代，所述Rd选自F、Cl、Br、I、OH、CN或C1-C3烷基；
X选自N或者CH；
L选自O或NH；
条件是，
当环W为任选被Rc取代的苯基时，环Q为被一个或多个Ra取代的苯基或吡啶基，所述Ra为C1-C10烷氧基，所述C1-C10烷氧基任选被所述Rb取代，且当环Q为被一个或多个Ra取代的苯基时，其中一个Ra与苯基的4位连接；
当环Q为5-6元杂环基时，L选自O。
在一些实施方案中，环Q为5-6元杂环基、C6-C10芳基或5-10元杂芳基，所述5-6元杂环基、C6-C10芳基或5-10元杂芳基任选被Ra取代，所述Ra选自F、Cl、Br、I、OH、CN或任选被Rb取代的下列基团：C1-C10烷基、C3-C10环烷基、C1-C10烷氧基；
Rb选自F、Cl、Br、I、OH或CN；
环W为苯基、吡啶基、吡啶酮基或9-10元杂芳基，所述苯基、吡啶基、吡啶酮基或9-10元杂芳基任选被Rc取代，所述Rc选自任选被Rc1取代的下列基团：C1-C10烷基、C1-C10烷氧基、C3-C10环烷基、P(O)(C1-C3烷基)2；
Rc1选自F、Cl、Br、I、CN、OH、C1-C3烷氧基、NH2、NH(C1-C3烷基)、N(C1-C3烷基)2、S(O)2(C1-C3烷基)；
R1选自H、C1-C10烷基或C3-C10环烷基，所述C1-C10烷基或C3-C10环烷基任选被Rd取代，所述Rd选自F、Cl、Br、I、OH、CN或C1-C3烷基；
X选自N或者CH；
L选自O或NH；
条件是，
当环W为任选被Rc取代的苯基时，环Q为被一个或多个Ra取代的苯基或吡啶基，所述Ra为C1-C10烷氧基，所述C1-C10烷氧基任选被所述Rb取代，且当环Q为被一个或多个Ra取代的苯基时，其中一个Ra与苯基的4位连接；
当环Q为5-6元杂环基时，L选自O。
在一些实施方案中，环Q为C6-C10芳基或5-10元杂芳基，所述C6-C10芳基或5-10元杂芳基任选被Ra取代，所述Ra选自F、Cl、Br、I、OH、CN或任选被Rb取代的下列基团：C3-C10环烷基、C1-C10烷氧基；
Rb选自F、Cl、Br、I、OH或CN；
环W为苯基或9-10元杂芳基，所述苯基或9-10元杂芳基任选被Rc取代，所述Rc选自C1-C10烷基或C1-C10烷氧基；
R1选自H、C1-C10烷基或C3-C10环烷基，所述C1-C10烷基或C3-C10环烷基任选被Rd取代，所述Rd选自F、Cl、Br、I、OH、CN或C1-C3烷基；
X选自N或者CH；
L选自O或NH；
条件是，当环W为任选被Rc取代的苯基时，环Q为被一个或多个Ra取代的苯基或吡啶基，所述Ra为C1-C10烷氧基，所述C1-C10烷氧基任选被所述Rb取代，且当环Q为被一个或多个Ra取代的苯基时，其中一个Ra与苯基的4位连接。
在一些实施方案中，环Q为C6-C10芳基或5-10元杂芳基，所述C6-C10芳基或5-10元杂芳基任选被Ra取代，所述Ra选自F、Cl、Br、I、OH、CN或任选被Rb取代的下列基团：C3-C10环烷基、C1-C10烷氧基；
Rb选自F、Cl、Br、I、OH或CN；
环W为苯基或9-10元杂芳基，所述苯基或9-10元杂芳基任选被Rc取代，所述Rc选自C1-C10烷基或C1-C10烷氧基；
R1选自C1-C10烷基或C3-C10环烷基，所述C1-C10烷基或C3-C10环烷基任选被Rd取代，所述Rd选自F、Cl、Br、I、OH或CN；
X选自N或者CH；
L选自O或NH；
条件是，当环W为任选被Rc取代的苯基时，环Q为被一个或多个Ra取代的苯基或吡啶基，所述Ra为C1-C10烷氧基，所述C1-C10烷氧基任选被所述Rb取代，且当环Q为被一个或多个Ra取代的苯基时，其中一个Ra与苯基的4位连接。
在一些实施方案中，环Q为哌啶基、苯基或吡啶基，所述哌啶基、苯基或吡啶基任选被Ra取代。
在一些实施方案中，环Q为任选被Ra取代的哌啶基。
在一些实施方案中，环Q为任选被Ra取代的苯基或任选被Ra取代的吡啶基。
在一些实施方案中，环Q为任选被Ra取代的苯基或任选被Ra取代的吡啶-3-基。
在一些实施方案中，Ra为F、Cl、Br、I、C1-C6烷基、C3-C6环烷基或任选被F取代的C1-C6烷氧基。
在一些实施方案中，Ra为F、Cl、Br、I、C3-C6环烷基或任选被F取代的C1-C6烷氧基。
在一些实施方案中，Ra为F、Cl、Br、I、甲基、环丙基或任选被F取代的甲氧基。
在一些实施方案中，Ra为F、Cl、Br、I、环丙基或任选被F取代的甲氧基。
在一些实施方案中，环Q选自
在一些实施方案中，环Q选自
在一些实施方案中，环Q选自
在一些实施方案中，环W为苯基、吡啶基、2-吡啶酮基或9-10元杂芳基，所述苯基、2-吡啶酮基、吡啶基或9-10元杂芳基任选被Rc取代。
在一些实施方案中，环W为任选被Rc取代的
在一些实施方案中，环W为任选被Rc取代的苯基或任选被Rc取代的9-10元杂芳基。
在一些实施方案中，环W为任选被Rc取代的吡啶基。
在一些实施方案中，环W为其中环M为5-6元杂芳基，所述环M任选被Rc取代。
在一些实施方案中，环W为任选被Rc取代的
在一些实施方案中，环W为任选被Rc取代的
在一些实施方案中，Rc选自OH或任选被Rc1取代的下列基团：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C6环烷基、P(O)(C1-C3烷基)2、4-6元杂环烷基。
在一些实施方案中，Rc选自OH或任选被Rc1取代的下列基团：C1-C3烷基、C1-C4烷氧基、C3-C6环烷基、P(O)(C1-C3烷基)2、4-5元杂环烷基。
在一些实施方案中，Rc选自OH或任选被Rc1取代的下列基团：C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、C3-C6环烷基、P(O)(C1-C3烷基)2、4-5元杂环烷基。
在一些实施方案中，Rc选自OH或任选被Rc1取代的下列基团：甲基、乙基、异丁基、甲氧基、乙氧基、异丁基氧基、环丙基、P(O)(CH3)2、
在一些实施方案中，Rc选自OH或任选被Rc1取代的下列基团：甲基、乙基、异丁基、甲氧基、乙氧基、环丙基、P(O)(CH3)2、
在一些实施方案中，Rc选自任选被Rc1取代的下列基团：甲基、乙基、甲氧基、环丙基、P(O)(CH3)2。
在一些实施方案中，Rc1选自F、CN、OH、NH2或任选被Rc2取代的下列基团：C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、NHC(O)OC(CH3)3、(CH3)2CHNHC(O)O、NH(C1-C3烷基)、N(C1-C3烷基)2、S(O)2(C1-C3烷基)、4-10元杂环基、4-10元杂环基氧基、(C3-C6环烷基)-CH2-O、6元杂芳基、6元杂芳基氧基。
在一些实施方案中，Rc1选自F、CN、OH、NH2或任选被Rc2取代的下列基团：C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、NHC(O)OC(CH3)3、NH(C1-C3烷基)、N(C1-C3烷基)2、S(O)2(C1-C3烷基)、4-10元杂环基、4-10元杂环基氧基、6元杂芳基、6元杂芳基氧基。
在一些实施方案中，Rc2选自氧杂环丁基、＝O、甲基、甲氧基、OH、CH2CH2CH2F、CH2OH。
在一些实施方案中，Rc2选自氧杂环丁基、＝O、甲基、OH、CH2CH2CH2F、CH2OH。
在一些实施方案中，Rc2选自氧杂环丁基、＝O、甲基、OH。
在一些实施方案中，Rc选自C1-C3烷基。
在一些实施方案中，环W选自
在一些实施方案中，环W选自
在一些实施方案中，环W选自
在一些实施方案中，Rc选自任选被Rc1取代的下列基团：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C6环烷基、P(O)(C1-C3烷基)2。
在一些实施方案中，Rc选自任选被Rc1取代的下列基团：C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、C3-C6环烷基、P(O)(C1-C3烷基)2。
在一些实施方案中，Rc选自任选被Rc1取代的下列基团：甲基、乙基、甲氧基、环丙基、P(O)(CH3)2。
在一些实施方案中，Rc1选自OH、C1-C3烷氧基、NH2、NH(C1-C3烷基)、N(C1-C3烷基)2、S(O)2(C1-C3烷基)。
在一些实施方案中，Rc1选自OH、甲氧基、NH2、N(CH3)2、S(O)2CH3。
在一些实施方案中，Rc为C1-C6烷氧基或C1-C6烷基。
在一些实施方案中，Rc为C1-C3烷氧基或C1-C3烷基。
在一些实施方案中，Rc为甲氧基或甲基。在一些实施方案中，环W选自
在一些实施方案中，环W选自
在一些实施方案中，环W为任选被Rc取代的苯基，环Q为被一个或多个Ra取代的吡啶基，所述Ra为任选被Rb取代的C1-C6烷氧基，所述Rb选自F、Cl、Br、I、OH或CN。
在一些实施方案中，环W为任选被Rc取代的苯基，环Q为被一个或多个Ra取代的吡啶基，所述Ra为任选被Rb取代的甲氧基，所述Rb选自F、Cl、Br、I、OH或CN。
在一些实施方案中，当环W为任选被Rc取代的苯基时，环Q为被一个或多个Ra取代的苯基，且其中一个Ra与苯基的4位连接，所述Ra为任选被Rb取代的C1-C6烷氧基，所述Rb选自F、Cl、Br、I、OH或CN。
在一些实施方案中，当环W为任选被Rc取代的苯基时，环Q为被C1-C6烷氧基取代的苯基，所述C1-C6烷氧基与环Q苯基的4位连接，所述C1-C6烷氧基任选被F取代。
在一些实施方案中，环W为任选被Rc取代的苯基，环Q为4-二氟甲氧基取代的苯基或6-三氟甲氧基取代的吡啶-3-基。
在一些实施方案中，当环Q为时，L选自O。
在一些实施方案中，R1为H、任选被C1-C3烷基取代的C3-C6环烷基或任选被F取代的C1-C6烷基。
在一些实施方案中，R1为H、任选被甲基取代的环丙基、异丙基或任选被F取代的乙基。
在一些实施方案中，R1为H、环丙基、异丙基、CH2CF3或CH2CH3。
在一些实施方案中，R1为C3-C6环烷基或任选被F取代的C1-C6烷基。
在一些实施方案中，R1为环丙基或任选被F取代的乙基。
在一些实施方案中，R1为乙基。
在一些实施方案中，所述通式(A)所示化合物或其药学上可接受的盐选自式(B)化合物或药学上可接受的盐：
其中环W、X如上文定义。
在一些实施方案中，所述通式(A)所示的化合物或药学可接受的盐，选自以下化合物或药学可接受的盐：
本发明还提供药物组合物，其包含式(A)所示化合物或其药学可接受的盐和药学上可接受的辅料。
进一步，本发明涉及通式(A)所示的化合物或其药学上可接受的盐，或其药物组合物在制备预防或者治疗MTAP缺失的肿瘤的药物中的用途。
进一步，本发明涉及通式(A)所示的化合物或其药学上可接受的盐，或其药物组合物在预防或者治疗MTAP缺失的肿瘤的用途。
进一步，本发明涉及预防或者治疗MTAP缺失的肿瘤的通式(A)化合物或其药学上可接受的盐，或其药物组合物。
本发明还涉及治疗MTAP缺失的肿瘤的方法，该方法包括给以患者治疗上有效剂量的包含本发明所述的通式(A)化合物或其药学上可接受的盐的药物制剂。
本发明的优选方案，其中所述的MTAP缺失的肿瘤包括但不限于胶质瘤、间皮瘤、黑色素瘤、胃癌、食管癌、膀胱癌、胰腺癌、非小细胞肺癌、星形细胞瘤、骨肉瘤、头颈癌、粘液性软骨肉瘤、卵巢癌、子宫内膜癌、乳腺癌、软组织肉瘤、非霍奇金淋巴瘤等。
本发明还涉及治疗MTAP缺失的肿瘤的方法，该方法包括给以患者治疗上有效剂量的包含本发明所述的通式(A)化合物或其药学上可接受的盐的药物制剂。
术语定义和说明
除非另有说明，本申请说明书和权利要求书中记载的基团和术语定义，包括其作为实例的定义、示例性的定义、优选的定义、表格中记载的定义、实施例中具体化合物的定义等，可以彼此之间任意组合和结合。这样的组合和结合后的基团定义及化合物结构，应当属于本申请说明书记载的范围内。
术语“药学上可接受的盐”是指药学上可接受的无毒酸或碱的盐，包括无机酸和碱、有机酸和碱的盐。
术语“立体异构体”是指由分子中原子在空间上排列方式不同所产生的异构体，包括顺反异构体、对映异构体、非对应异构体和构象异构体。
本发明的化合物可以具有不对称碳原子(光学中心)或双键。外消旋体、非对映异构体、几何异构体和单个的异构体都包括在本发明的范围之内。
本文中消旋体或者对映体纯的化合物的图示法来自Maehr，J.Chem.Ed.1985，62:114-120。除非另有说明，用楔形键和虚线键表示一个立体中心的绝对构型。当本文所述化合物含有烯属双键或其它几何不对称中心，除非另有规定，它们包括E、Z几何异构体。同样地，所有的互变异构形式均包括在本发明的范围之内。
本发明的化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式。本发明设想所有的这类化合物，包括顺式和反式异构体、(-)-和(+)-对对映体、(R)-和(S)-对映体、非对映异构体、(D)-异构体、(L)-异构体，及其外消旋混合物和其他混合物，例如对映异构体或非对映体富集的混合物，所有这些混合物都属于本发明的范围之内。烷基等取代基中可存在另外的不对称碳原子。所有这些异构体以及它们的混合物，均包括在本发明的范围之内。
术语“互变异构体”是指因分子中某一原子在两个位置迅速移动而产生的官能团异构体。本发明化合物可表现出互变异构现象。互变异构的化合物可以存在两种或多种可相互转化的种类。质子移变互变异构体来自两个原子之间共价键合的氢原子的迁移。互变异构体一般以平衡形式存在，尝试分离单一互变异构体时通常产生一种混合物，其理化性质与化合物的混合物是一致的。平衡的位置取决于分子内的化学特性。例如，在很多脂族醛和酮如乙醛中，酮型占优势；而在酚中，烯醇型占优势。本发明包含化合物的所有互变异构形式。
术语“药物组合物”表示一种或多种文本所述化合物或其生理学/药学上可接受的盐或前体药物与其它化学组分的混合物，其它组分例如生理学/药学上可接受的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进化合物对生物体的给药。
术语“被取代”是指特定原子上的任意一个或多个氢原子被取代基取代，只要特定原子的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。当取代基为氧代(即＝O)时，意味着两个氢原子被取代，氧代不会发生在芳香基上。
术语“任选”或“任选地”是指随后描述的事件或情况可以发生或不发生，该描述包括发生所述事件或情况和不发生所述事件或情况。例如，乙基“任选”被卤素取代，指乙基可以是未被取代的(CH2CH3)、单取代的(如CH2CH2F)、多取代的(如CHFCH2F、CH2CHF2等)或完全被取代的(CF2CF3)。本领域技术人员可理解，对于包含一个或多个取代基的任何基团，不会引入任何在空间上不可能存在和/或不能合成的取代或取代模式。
术语“C1-C10烷基”应理解为表示具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子的直链或支链饱和一价烃基。所述烷基是例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、异戊基、2-甲基丁基、1-甲基丁基、1-乙基丙基、1，2-二甲基丙基、新戊基、1，1-二甲基丙基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、2-乙基丁基、1-乙基丁基、3，3-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，1-二甲基丁基、2，3-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基或1，2-二甲基丁基等；“C1-C6烷基”应理解为表示具有1、2、3、4、5、6个碳原子的直链或支链饱和一价烃基；“C1-C3烷基”应理解为表示具有1、2、3个碳原子的直链或支链饱和一价烃基。
术语“C1-C10烷氧基”可理解为“C1-C10烷基氧基”或“C1-C10烷基-O-”，指直链状或支链状醇类失去羟基上的氢原子产生的一价基团；优选地，“C1-C10烷氧基”可以包含“C1-C6烷氧基”和“C1-C3烷氧基”。
术语“卤代C1-C3烷基”包括单卤代的C1-C3烷基或多卤代的C1-C3烷基，包括但不限于三氟甲基、2，2，2-三氯乙基、和3-氟丙基等。
术语“C3-C10环烷基”应理解为表示饱和的一价单环或双环烃环，其具有3～10个碳原子。如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基或环癸基，或者是双环烃基如十氢化萘环。术语“C3-C6环烷基”应理解为表示饱和的一价单环或双环烃环，其具有3～6个碳原子。
术语“4-10元杂环基”意指饱和的或部分饱和的一价单环、并环、螺环或桥环，其包含1-4个，优选1-2个选自N、O、B和S的杂原子。包括但不限于：4元环，如氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基；5元环，如四氢呋喃基、二氧杂环戊烯基、吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、吡咯啉基、1,3,2-二氧杂硼戊烷基；或6元环，如四氢吡喃基、哌啶基、吗啉基、二噻烷基、硫代吗啉基、哌嗪基或三噻烷基，或部分饱和的6元环如二氢吡啶基、四氢吡啶基；或5,5元并环，如六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-基环；或者5,6元双环，如六氢吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基环、5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪基环，。优选地，“4-10元杂环基”包括“5-6元杂环基”；任选地，所述“4-10元杂环基”还可以是上述4元杂环基、5元杂环基或6元杂环基的苯并稠合环基；优选地，“4-10元杂环基”包括4-10元杂环烷基；优选地，“5-6元杂环基”包括5-6元杂环烷基。
术语“C6-C10芳基”应理解为优选表示具有6～10个碳原子的一价芳香性或部分芳香性的单环或双环烃环。特别是具有6个碳原子的环(“C6芳基”)，例如苯基；或者具有9个碳原子的环(“C9芳基”)，例如茚满基或茚基，或者具有10个碳原子的环(“C10芳基”)，例如四氢化萘基、二氢萘基或萘基。
术语“5-10元杂芳基”应理解为包括这样的一价单环或双环芳族环系：其具有5、6、7、8、9或10个环原子，特别是5或6或9或10个环原子，且其包含1-5个，优选1-3各独立选自N、O和S的杂原子。并且，另外在每一种情况下可为苯并稠合的。特别地，杂芳基选自噻吩基、呋喃基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基等以及它们的苯并衍生物，例如苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基、吲唑基、吲哚基、异吲哚基等；或吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基等，以及它们的苯并衍生物，例如喹啉基、喹唑啉基、异喹啉基等；或吖辛因基、吲嗪基、嘌呤基等以及它们的苯并衍生物；或噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基、蝶啶基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基等。术语“5-6元杂芳基”指具有5或6个环原子的芳族环系，且其包含1-3个，优选1-2各独立选自N、O和S的杂原子。术语“9-10元杂芳基”指具有9或10个环原子的芳族环系，且其包含1-5个，优选1-3各独立选自N、O和S的杂原子。
术语“苯基的4位”是指该苯基与结构单元连接位点的对位。
术语“辅料”是指可药用惰性成分。术语“赋形剂”的种类实例非限制性地包括粘合剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、稳定剂、填充剂和稀释剂等。赋形剂能增强药物制剂的操作特性，即通过增加流动性和/或粘着性使制剂更适于直接压缩。适用于上述制剂的典型的“药学上可接受的载体”的实例为：糖类，淀粉类，纤维素及其衍生物等在药物制剂中常用到的辅料。
术语“治疗”意为将本申请所述化合物或制剂进行给药以预防、改善或消除疾病或与所述疾病相关的一个或多个症状，且包括：
(i)预防疾病或疾病状态在哺乳动物中出现，特别是当这类哺乳动物易患有该疾病状态，但尚未被诊断为已患有该疾病状态时；
(ii)抑制疾病或疾病状态，即遏制其发展；
(iii)缓解疾病或疾病状态，即使该疾病或疾病状态消退。
术语“治疗有效量”意指(i)治疗或预防特定疾病、病况或障碍，(ii)减轻、改善或消除特定疾病、病况或障碍的一种或多种症状，或(iii)预防或延迟本文中所述的特定疾病、病况或障碍的一种或多种症状发作的本发明化合物的用量。构成“治疗有效量”的本发明化合物的量取决于该化合物、疾病状态及其严重性、给药方式以及待被治疗的哺乳动物的年龄而改变，但可例行性地由本领域技术人员根据其自身的知识及本公开内容而确定。
术语“药学上可接受的辅料”是指对有机体无明显刺激作用，而且不会损害该活性化合物的生物活性及性能的那些辅料。合适的辅料是本领域技术人员熟知的，例如碳水化合物、蜡、水溶性和/或水可膨胀的聚合物、亲水性或疏水性材料、明胶、油、溶剂、水等。
词语“包括(comprise)”、“含有(comprise)”或“包含(comprise)”及其英文变体例如comprises或comprising应理解为开放的、非排他性的意义，即“包括但不限于”。
本发明的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的多种合成方法来制备，包括下面列举的具体实施方式、其与其他化学合成方法的结合所形成的实施方式以及本领域技术上人员所熟知的等同替换方式，优选的实施方式包括但不限于本发明的实施例。
本申请还包括与本文中记载的那些相同的，但一个或多个原子被原子量或质量数不同于自然中通常发现的原子量或质量数的原子置换的同位素标记的本申请化合物。可结合到本申请化合物的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、碘和氯的同位素，诸如分别为2H、3H、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、31P、32P、35S、18F、123I、125I和36Cl等。
某些同位素标记的本申请化合物(例如用3H及14C标记的那些)可用于化合物和/或底物组织分布分析中。氚化(即3H)和碳-14(即14C)同位素对于由于它们易于制备和可检测性是尤其优选的。正电子发射同位素，诸如15O、13N、11C和18F可用于正电子发射断层扫描(PET)研究以测定底物占有率。通常可以通过与公开于下文的方案和/或实施例中的那些类似的下列程序，通过同位素标记试剂取代未经同位素标记的试剂来制备同位素标记的本申请化合物。
此外，用较重同位素(诸如氘(即2H))取代可以提供某些由更高的代谢稳定性产生的治疗优点(例如增加的体内半衰期或降低的剂量需求)，并且因此在某些情形下可能是优选的，其中氘取代可以是部分或完全的，部分氘取代是指至少一个氢被至少一个氘取代。
本申请的药物组合物可通过将本申请的化合物与适宜的药学上可接受的辅料组合而制备，例如可配制成固态、半固态、液态或气态制剂，如片剂、丸剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、膏剂、乳剂、悬浮剂、栓剂、注射剂、吸入剂、凝胶剂、微球及气溶胶等。
给予本申请化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物的典型途径包括但不限于口服、直肠、局部、吸入、肠胃外、舌下、阴道内、鼻内、眼内、腹膜内、肌内、皮下、静脉内给药。
本申请的药物组合物可以采用本领域众所周知的方法制造，如常规的混合法、溶解法、制粒法、制糖衣药丸法、磨细法、乳化法、冷冻干燥法等。
在一些实施方案中，药物组合物是口服形式。对于口服给药，可以通过将活性化合物与本领域熟知的药学上可接受的辅料混合，来配制该药物组合物。这些辅料能使本申请的化合物被配制成片剂、丸剂、锭剂、糖衣剂、胶囊剂、液体、凝胶剂、浆剂、悬浮剂等，用于对患者的口服给药。
可以通过常规的混合、填充或压片方法来制备固体口服组合物。例如，可通过下述方法获得：将所述的活性化合物与固体辅料混合，任选地碾磨所得的混合物，如果需要则加入其它合适的辅料，然后将该混合物加工成颗粒，得到了片剂或糖衣剂的核心。适合的辅料包括但不限于：粘合剂、稀释剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、甜味剂或矫味剂等。
药物组合物还可适用于肠胃外给药，如合适的单位剂型的无菌溶液剂、混悬剂或冻干产品。
本文所述的通式Ⅰ化合物的所有施用方法中，每天给药的剂量为0.01到100mg/kg体重，优选为0.05到50mg/kg体重，更优选0.1到30mg/kg体重，以单独或分开剂量的形式。
本发明具体实施方式的化学反应是在合适的溶剂中完成的，所述的溶剂须适合于本发明的化学变化及其所需的试剂和物料。为了获得本发明的化合物，有时需要本领域技术人员在已有实施方式的基础上对合成步骤或者反应流程进行修改或选择。
具体实施方式
以下实施例详细说明发明的技术方案，但本发明的保护范围包括但不限于此。
化合物的结构是通过核磁共振(NMR)和/或质谱(MS)来确定的。NMR位移的单位为10-6(ppm)。NMR测定的溶剂为氘代二甲基亚砜、氘代氯仿、氘代甲醇等，内标为四甲基硅烷(TMS)；“IC50”指半数抑制浓度，指达到最大抑制效果一半时的浓度；“DCM”指二氯甲烷；“m-CPBA”指间氯过氧苯甲酸；下文的洗脱剂可由两种或多种溶剂形成混合洗脱剂，其比值为各溶剂的体积比，如”0～10％甲醇/二氯甲烷”表示梯度洗脱过程中，混合洗脱剂中的甲醇：二氯甲烷的体积用量为0:100～10:100。
实施例1化合物001的制备
8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-((2,2,2-三氟乙基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮
合成路线及具体合成步骤：
步骤1：4-((4-(二氟甲氧基)苯基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯(中间体1-3)的合成
将反应物1-1(5g,21.49mmol),1-2(3.42g,21.49mmol)和三乙胺(4.35g,42.98mmol)溶于1,4-二氧六环(40mL)中。反应液于60℃搅拌反应16h。TLC检测反应完毕后，将反应液倒入水(50mL)中，乙酸乙酯萃取三次(50mL*3)，有机层用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩，残留物经柱层析纯化(SiO2,石油醚/乙酸乙酯＝100/1-10/1)，得标题化合物(7.3g)。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.71(s,1H),7.72(d,J＝9.0Hz,2H),7.18(d,J＝9.0Hz,2H),6.82(t,J＝74Hz,1H),4.42(q,J＝7.1Hz,2H),2.53(s,3H),1.43(t,J＝7.2Hz,3H).
MS m/z(ESI):356.1[M+H]+。
步骤2：(4-((4-(二氟甲氧基)苯基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-基)甲醇(中间体1-4)的合成
将中间体1-3(3g,8.44mmol)溶于四氢呋喃(30mL)中，冰浴降温至0℃。加入四氢铝锂(640.76mg,16.88mmol)，反应液于25℃搅拌反应3h。反应完毕后，在冰浴条件下，向反应液依次滴加水(0.6mL)，氢氧化钠水溶液(20％aq,1.2mL)和水(1.8mL)，有机层用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤饼以乙酸乙酯洗三次(10mL*3)，滤液减压浓缩，残留物经柱层析纯化(SiO2,石油醚/乙酸乙酯＝1/1)，得标题化合物(1.6g)。
MS m/z(ESI):313.9[M+H]+。
步骤3：4-((4-(二氟甲氧基)苯基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲醛(中间体1-5)的合成
将中间体1-4(1.3g,4.15mmol)溶于二氯甲烷(20mL)中，加入活性二氧化锰(3.61g,41.49mmol)，反应液于20℃搅拌反应16h。TLC检测反应完毕后，减压过滤，滤饼用乙酸乙酯淋洗，滤液减压浓缩至干，得标题化合物(1.16g,3.73mmol)。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ9.82(s,1H),8.57(s,1H),7.78-7.73(m,2H),7.19-7.17(m,2H),6.82(t,J＝74Hz,1H),2.54(s,3H).
步骤4：6-氯-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-(甲硫基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体1-6)的合成
将中间体1-5(400mg,1.28mmol)溶于四氢呋喃(8mL)中，冰浴降温至0℃。加入氢化钠(256.98mg,6.42mmol,60％wt/wt)。反应液于0℃搅拌反应10min，向其中加入氯乙酰氯(188.66mg,1.67mmol)。反应液升至25℃搅拌反应3h。反应完毕后，在冰浴条件下，向反应液滴加水淬灭反应，加水(30mL)稀释反应液，乙酸乙酯萃取三次(20mL*3)。有机层减压浓缩，残留物经柱层析纯化(SiO2,石油醚/乙酸乙酯＝3/1)，得标题化合物(200mg)。
MS m/z(ESI):370.0[M+H]+。
步骤5：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-(甲硫基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体1-7)的合成
将中间体1-6(200mg,540.87μmol)和1-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(209.42mg,811.31μmol,参考专利WO 2017176960和WO2015200677所报道的方法合成)溶于1,4-二氧六环(3.2mL)和水(0.8mL)中，加入碳酸铯(352.45mg,1.08mmol)，Pd(dtbpf)Cl2(35.25mg,54.09μmol)。反应液于氮气保护下，105℃搅拌反应15h。反应完毕后，将反应液过滤，滤液减压浓缩，残留物经柱层析纯化(SiO2,乙酸乙酯/甲醇＝10/1)，得标题化合物(200mg)。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ9.01(s,1H),8.30(s,1H),8.25(s,1H),7.98(s,1H),7.71(d,J＝8.4Hz,1H),7.60-7.56(m,1.25H),7.52-7.47(m,2H),7.40-7.35(m,2.5H),7.19(s,0.25H),3.86(s,3H),2.24(s,3H).
MS m/z(ESI):466.2[M+H]+。
步骤6：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-(甲基亚磺酰基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体1-8)的合成
将中间体1-7(180mg,386.70μmol)溶于二氯甲烷(3mL)中，冰浴降温至0℃，加入间氯过氧苯甲酸(117.76mg,580.05μmol)。反应液升至25℃搅拌反应15h。反应完毕后，向反应液加入饱和亚硫酸钠水溶液，乙酸乙酯萃取两次(20mL*2)。有机层减压浓缩至干，得到标题化合物(150mg)。
MS m/z(ESI):482.3[M+H]+。
步骤7：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-((2,2,2-三氟乙基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物001)的合成
将中间体1-8(96.78mg,201.02μmol)溶于四氢呋喃(0.5mL)中，向其中加入2,2,2-三氟乙胺(39.82mg,402.04μmol)。反应液升至50℃搅拌反应2h后，50℃下向反应液中加入2,2,2-三氟乙胺(59.74mg,603.06μmol)，反应液于50℃搅拌反应15h。反应完毕后，反应液减压浓缩，残留物经制备HPLC纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:45％-65％,10min)得标题化合物(13.3mg)。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.84(s,1H),8.33(br s,0.5H),8.22(s,1H),8.17(s,1H),8.03(br s,0.5H),7.94(s,1H),7.68(d,J＝8.5Hz,1H),7.53(d,J＝8.5Hz,1H),7.43-7.36(m,2H),7.38-7.15(m,3H),4.23-4.02(m,1H),3.85(s,3H),3.75(br s,1H).
MS m/z(ESI):517.1[M+H]+。
实施例2、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(2-甲基-2H-吲唑-5-基)-2-((2,2,2-三氟乙基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物002)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(2-甲基-2H-吲唑-5-基)-2-(甲硫基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体2-2)的合成
将中间体1-6(90mg,243.39μmol)和中间体2-1(94.24mg,365.09μmol,参考专利WO2018118734和WO 2016180536进行合成)溶于1,4-二氧六环(1.6mL)和水(0.4mL)中，加入碳酸铯(158.60mg,486.78μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(15.86mg,24.34μmol)。在氮气保护下，反应液100℃搅拌反应15h。反应完毕后，反应液减压过滤，滤液减压浓缩，残留物经柱层析纯化(SiO2,石油醚/乙酸乙酯＝1/5)，得标题化合物(63mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.99(s,1H),8.43(s,1H),8.27(s,1H),8.14(s,1H),7.66-7.62(m,1H),7.59-7.54(m,1H),7.51-7.46(m,2H),7.40-7.34(m,3H),4.19(s,3H),2.24(s,3H)；
MS m/z(ESI):466.2[M+H]+。
步骤2：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(2-甲基-2H-吲唑-5-基)-2-(甲基磺酰基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体2-3)的合成
将中间体2-2(50mg,107.42μmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，冰浴降温至0℃，加入间氯过氧苯甲酸(32.71mg,161.13μmol,85％纯度)。反应液于0℃搅拌10min后，升至25℃，继续搅拌反应1h。反应完毕后，向反应液中加入二氯甲烷(20mL)，饱和亚硫酸钠水溶液洗有机层，有机层用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩至干，得标题化合物(50mg)。
MS m/z(ESI):498.2[M+H]+。
步骤3：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(2-甲基-2H-吲唑-5-基)-2-((2,2,2-三氟乙基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物2)的合成
将中间体2-3(50mg,100.51μmol)溶于四氢呋喃(1mL)中，加入2,2,2-三氟乙胺(19.91mg,201.02μmol)。反应液于50℃搅拌15h。反应完毕后，反应液减压浓缩，残留物经制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC Triart C18 150*25mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:46％-66％,10min)，得标题化合物(1.1mg)。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.76(s,1H),8.26(s,1H),8.10-8.04(m,2H),7.63(s,2H),7.40-7.34(m,4H),6.94(s,1H),4.24(s,3H),4.15(s,1H),3.78(s,1H)；
MS m/z(ESI):517.2[M+H]+。
实施例3、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(4-甲氧苯基)-2-((2,2,2-三氟乙基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物003)
步骤1：6-氯-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-(甲基磺酰基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体3-1)的合成
将中间体1-6(210mg,567.92μmol)溶于DCM(10mL)中，在0℃下加m-CPBA(288.24mg,1.42mmol)，将反应液升温到15℃并在15℃下搅拌反应16小时。LC-MS检测反应完毕。将反应液用DCM(10mL)稀释，饱和碳酸氢钠水溶液洗有机层三次(20mL*3)，有机层用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩至干，得标题化合物(209.9mg)。
MS m/z(ESI):402.1[M+H]+。
步骤2：6-氯-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-((2,2,2-三氟乙基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体3-2)的合成
将中间体3-1(150mg,373.35μmol)溶于THF(7mL)中，在15℃下滴加2,2,2-三氟乙胺(739.67mg,7.47mmol)，将反应液升温到63℃并在63℃下反应15小时。LC-MS检测反应完毕。反应液减压浓缩,得到标题化合物(150mg)，直接用于下一步反应。
MS m/z(ESI):421.2[M+H]+。
步骤3：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(4-甲氧苯基)-2-((2,2,2-三氟乙基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物003)的合成
将中间体3-2(50mg,118.84μmol)溶于1,4-二氧六环(4mL)中依次加入Pd(dtbpf)Cl2(15.49mg,23.77μmol)，4-甲氧基苯硼酸酯(36.12mg,237.69μmol)，K2CO3(32.85mg,237.69μmol)和水(1mL)，反应液于氮气保护下，95℃搅拌反应15小时。LCMS检测反应完毕。反应液加入乙酸乙酯稀释，水洗有机层，有机层用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩至干，经制备液相色谱纯化(色谱柱类型：YMC Triart C18150*25mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:56％-76％,10min)，得标题化合物(15mg)。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.73(s,1H),7.97(s,1H),7.64(d,J＝8.9Hz,2H),7.35(s,4H),6.94(d,J＝8.8Hz,2H),6.93(t,J＝73.6Hz,1H),4.32-3.99(m,1H),3.84(s,3H),3.77(br s,1H)
MS m/z(ESI):493.2[M+H]+。
实施例4、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(2,3-二甲基-2H-吲唑-5-基)-2-((2,2,2-三氟乙基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物004)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(2,3-二甲基-2H-吲唑-5-基)-2-((2,2,2-三氟乙基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物004)的合成
将中间体3-2(50mg,118.84μmol)和2,3-二甲基-2H-吲唑-5-硼酸频哪醇酯(48.51mg,178.26μmol)溶于1,4-二氧六环(4mL)和水(1mL)中，加入碳酸铯(77.44mg,237.68μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(15.49mg,23.77μmol)。在氮气保护下，反应液100℃搅拌反应16小时。LCMS检测反应完毕。将反应液用二氯甲烷(30mL)稀释，水洗有机层三次(30mL)，经制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18100*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:20％-60％,10min)，然后减压浓缩至干。将有机层用乙酸乙酯抽滤，滤饼减压缩至干，得标题化合物(25.5mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 8.90-8.74(m,1H),8.30(br s,0.5H),8.13(s,1H),8.02(s,1H),8.01(br s,0.5H),7.50(s,2H),7.45-7.38(m,2H),7.36-7.27(m,2H),7.34(t,J＝70.0Hz,1H),4.13(br s,1H),4.06(s,3H),3.73(br s,1H),2.61(s,3H).
MS m/z(ESI):531.2[M+H]+。
实施例5、6-(苯并[d]噻唑-6-基)-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-((2,2,2-三氟乙基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物005)
步骤1：6-(苯并[d]噻唑-6-基)-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-((2,2,2-三氟乙基)氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物005)的合成
将中间体3-2(50mg,118.84μmol)溶于1,4-二氧六环(4mL)中依次加入Pd(dtbpf)Cl2(15.49mg,23.77μmol)，苯并[d]噻唑-6-基硼酸(42.55mg,237.69μmol)，K2CO3(32.85mg,237.69μmol)和水(1mL)，反应液于氮气保护下，95℃搅拌反应5小时。LCMS检测反应完毕。反应液减压浓缩至干，经制备液相色谱纯化(色谱柱类型：YMC Triart C18 150*25mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:50％-70％,10min)，得标题化合物(12.6mg)。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ9.29(s,1H),8.78(br s,1H),8.45(s,1H),8.17(s,1H),8.13(d,J＝8.6Hz,1H),7.92-7.87(m,1H),7.43-7.32(m,4H),6.97(t,J＝73.6,1H),4.17(br s,1H),3.79(br s,1H)
MS m/z(ESI):520.1[M+H]+。
实施例6、6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-((2,2,2-三氟乙基)氨基)-8-(6-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物006)
步骤1：6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-(甲硫基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体6-2)的合成
将中间体6-1(100mg,367.48μmol,可根据专利WO 2018153373报道方法制备)和1-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(142.28mg,551.22μmol)溶于1,4-二氧六环(4mL)和水(1mL)中，加入碳酸铯(239.47mg,734.97μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(23.95mg,36.75μmol)。在氮气保护下，反应液95℃搅拌反应16小时。LC-MS检测反应完毕。将反应液加水(20mL)稀释，用二氯甲烷萃取三次(20mL)，有机层减压浓缩至干，得标题化合物(80mg)。
MS m/z(ESI):324.2[M+H]+。
步骤2：6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-(甲硫基)-8-(6-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体6-3)的合成
将中间体6-2(70mg,216.47μmol)和(6-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)硼酸(44.79mg,216.47μmol)溶于无水二氯甲烷(2mL)，加入醋酸铜(43.25mg,238.12μmol)，吡啶(51.37mg,649.41μmol)。在氧气下，反应液于40℃搅拌反应16小时。LC-MS检测反应完毕。将反应液加水(30mL)稀释，加入二氯甲烷(30mL)萃取三次，有机层减压浓缩至干。经制薄层制备色谱纯化(二氯甲烷/甲醇20：1)，有机层减压浓缩至干，得标题化合物(30mg)。
MS m/z(ESI):485.2[M+H]+。
步骤3：6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-(甲基亚磺酰基)-8-(6-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体6-4)的合成
将中间体6-4(20mg,41.28μmol)溶于二氯甲烷(1.5mL)中，加入间氯过氧苯甲酸(8.38mg,41.28μmol)，继续搅拌反应16小时。LCMS检测反应完毕。向反应液中加入二氯甲饱和碳酸氢钠水溶液(2mL)洗有机层，有机层滤液减压浓缩至干，得标题化合物(5mg)。
MS m/z(ESI):501.2[M+H]+。
步骤4：6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-((2,2,2-三氟乙基)氨基)-8-(6-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物006)的合成
将中间体6-4(5mg,9.99μmol)溶于四氢呋喃(1mL)中，加入2,2,2-三氟乙胺(1.98mg,19.98μmol)。反应液于40℃搅拌16h。LCMS检测反应完毕。反应液减压浓缩至干，经制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC Triart C18 150*25mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:46％-66％,10min),得标题化合物(1.4mg)。
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.80(br s,1H),8.37(s,1H),8.20(s,1H),8.16(s,1H),8.03(d,J＝6.5Hz,1H),7.97(s,1H),7.74(d,J＝8.5Hz,1H),7.63(d,J＝8.5Hz,1H),7.40(d,J＝8.3Hz,1H),3.95(s,3H),3.87-3.59(m,2H).
MS m/z(ESI):536.3[M+H]+。
实施例7、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(2-甲基-2H-吲唑-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物011)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(2-甲基-2H-吲唑-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物011)的合成
将中间体2-3(21.61mg,43.44μmol)溶于THF(2.5mL)，在25℃下加EtONa(14.78mg,217.19μmol)。反应液在25℃搅拌反应16小时。LCMS检测反应完毕。反应液减压浓缩至干，经制备液相色谱纯化(色谱柱类型：YMC Triart C18 100*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:30％-70％,10min)，得标题化合物(7.5mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.01(s,1H),8.42(s,1H),8.27(s,1H),8.11(s,1H),7.68-7.59(m,1H),7.56-7.52(m,1H),7.47(d,J＝8.8Hz,2H),7.38(t,J＝74Hz,1H),7.36(d,J＝8.8Hz,2H),4.24-4.16(m,5H),1.22(t,J＝7.0Hz,3H)。
MS m/z(ESI):464.2[M+H]+。
实施例8、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物024)与8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-羟基-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物025)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-(甲基磺酰基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体24-1)的合成
将中间体1-7(76mg,163.27μmol)溶于DCM(4mL)，在0℃下加m-CPBA(132.59mg,653.10μmol)，反应液15℃搅拌反应16小时。LCMS检测反应完毕。反应液用DCM(20mL)稀释饱和碳酸氢钠水溶液洗三遍(20mL*3)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干减压浓缩至干，得标题化合物(100mg)，直接用下一步反应。
步骤2：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物024)与8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-羟基-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物025)的合成
将中间体24-1(100mg,201.02μmol)溶于THF(4mL)，在15℃下加EtONa(27.36mg,402.03μmol)，反应液在15℃搅拌反应15小时。LCMS检测反应完毕。反应液减压浓缩至干，用制备液相色谱纯化(column:Phenomenex Gemini C18 250*50mm*10μm；流动相:[water(0.05％ammonia hydroxide v/v)-ACN]；B％:40％-60％,10min)，得化合物024(12.9mg)。残余物进一步用制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC Triart C18 150*25mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:10％-30％,10min)得化合物025(6mg)。
1H NMR-024(400MHz,Methanol-d4)δ8.93(s,1H),8.22(s,1H),8.18(s,1H),7.97(d,J＝1.0Hz,1H),7.75-7.71(m,1H),7.62(dd,J＝1.6,8.5Hz,1H),7.45-7.40(m,2H),7.38-7.34(m,2H),6.96(t,J＝73.6Hz,1H),4.17(q,J＝7.1Hz,2H),3.93(s,3H),1.25(t,J＝7.1Hz,3H)。
MS-024m/z(ESI):464.2[M+H]+。
1H NMR-025(400MHz,Methanol-d4)δ8.54(s,1H),8.17(s,1H),7.98(s,1H),7.90(s,1H),7.71(d,J＝8.5Hz,1H),7.55(dd,J＝1.5,8.5Hz,1H),7.40-7.33(m,2H),7.33-7.28(m,2H),6.92(t,J＝74Hz,1H),3.92(s,3H)。
MS-025m/z(ESI):436.1[M+H]+。
实施例9、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-(1-甲基环丙氧基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物026)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-(1-甲基环丙氧基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物026)的合成
将1-甲基环丙醇(1.50mg,20.77μmol)溶于四氢呋喃(0.5mL)中，降温到0℃加入叔丁醇钠(2.00mg,20.77μmol)，搅拌10min。将中间体1-8(10mg,20.77μmol)溶于四氢呋喃(2mL)，加到反应液中。在0℃搅拌30分钟之后升到室温反应16h，LCMS检测反应完毕。经制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 100*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:48％-68％,10min)，得标题化合物(0.9mg)。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δppm 8.92(s,1H),8.23(s,1H),8.19(s,1H),7.99(s,1H),7.74(d,J＝8.8Hz,1H),7.68-7.60(m,1H),7.49-7.44(m,2H),7.42-7.35(m,2H),6.94(t,J＝73.6Hz,1H),3.94(s,3H),1.32(s,3H),0.83(s,2H),0.46(s,2H)。
MS m/z(ESI):490.2[M+H]+。
实施例10、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-(乙基氨基)-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物027)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-(乙基氨基)-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物027)的合成
将中间体1-8(50mg，103.85μmol)溶于THF(0.5mL)中，加入无水乙胺(1.03g，22.84mmol)。将反应液升温至50℃，搅拌反应16h，LCMS检测反应完毕。将反应液减压蒸干，经制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 100*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:44％-64％,10min)。标题化合物(2.1mg)。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.75-8.60(m,1H),8.12(s,1H),8.04(s,1H),7.92(s,1H),7.72(d,J＝8.5Hz,1H),7.59(d,J＝8.5Hz,1H),7.43-7.28(m,4H),6.88(t,J＝76Hz,1H),3.93(s,3H),3.50-3.41(m,1H),3.20-3.00(m,1H),1.17-1.05(m,1H),1.04-0.90(m,2H)。
MS m/z(ESI):463.3[M+H]+。
实施例11、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-(异丙基氨基)-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物028)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-(异丙基氨基)-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物028)的合成
将中间体1-8(50mg，103.85μmol)溶于THF(0.5mL)中，加入异丙胺(1.03g，17.46mmol，)。将反应液升温至50℃，搅拌反应16h，LCMS检测反应完毕。将反应液减压蒸干，经制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 100*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:48％-68％，10min)。得标题化合物(13.8mg)。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.75-8.60(m,1H),8.14(s,1H),8.04(s,1H),7.91(s,1H),7.69(d,J＝8.5Hz,1H),7.58(dd,J＝1.5,8.5Hz,1H),7.44-7.27(m,4H),6.93(t,J＝76Hz,1H),4.25-4.10(m,0.5H),3.91(s,3H),3.70-3.50(m,0.5H),1.25-0.99(m,6H).
MS m/z(ESI):477.3[M+H]+。
实施例12、2-(环丙基氨基)-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物029)
步骤1：2-(环丙基氨基)-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物029)的合成
将中间体1-8(50mg,103.85μmol)溶于THF(0.5mL)中，加入环丙胺(1.24g，21.65mmol)。将反应液升温至50℃，搅拌反应16h，LCMS检测反应完毕。将反应液减压蒸干，经制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 100*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:44％-64％,10min)，得标题化合物(5.8mg)。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.80-8.60(m,1H),8.14(s,1H),8.07(s,1H),7.92(s,1H),7.72(d,J＝8.5Hz,1H),7.59(dd,J＝1.5,8.5Hz,1H),7.42-7.29(m,4H),6.90(t,J＝76Hz,1H),3.93(s,3H),2.84-2.65(m,0.5H),2.63-2.18(m,0.5H),0.65-0.25(m,4H)。
MS m/z(ESI):475.3[M+H]+。
实施例13、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物030)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物030)的合成
将三氟乙醇(6.23mg,62.31μmol)溶于四氢呋喃(0.5mL)中，降温0℃加入叔丁醇钠(5.99mg,62.31μmol)，搅拌10min。将中间体1-8(30mg,62.31μmol)溶于四氢呋喃(2mL)中，再加入反应液中，在0℃搅拌30分钟之后升到室温反应16h，LCMS检测反应完毕。经制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:50％-70％,10min)，得标题化合物(4.3mg)。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ9.02(s,1H),8.34-8.17(m,2H),8.07-7.96(m,1H),7.82-7.72(m,1H),7.66(d,J＝8.3Hz,1H),7.51-7.35(m,4H),6.98(t,J＝73.2Hz,1H),4.70(q,J＝8.4Hz,2H),3.96(s,3H)。
MS m/z(ESI):518.1[M+H]+。
实施例14、2-乙氧基-6-(4-甲氧苯基)-8-(6-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物031)
步骤1：6-(4-甲氧苯基)-2-(甲硫基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体31-1)的合成
将中间体6-1(140mg,514.48μmol)和(4-甲氧苯基)硼酸(117.27mg,771.71μmol)溶于1,4-二氧六环(2mL)和水(0.5mL)中，加入碳酸铯(335.25mg,1.03mmol)和Pd(dtbpf)Cl2(33.53mg,51.45μmol)。氮气保护下，反应液100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。将反应液加水(30mL)稀释，用二氯甲烷萃取三次(30mL)，有机层减压浓缩至干。经制薄层制备色谱纯化(二氯甲烷/甲醇10：1)，有机层减压浓缩至干，得标题化合物(42mg)。
MS m/z(ESI):300.1[M+H]+。
步骤2：6-(4-甲氧苯基)-2-(甲硫基)-8-(6-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体31-2)的合成
将中间体31-1(27mg,90.20μmol)和(6-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)硼酸(18.66mg,90.20μmol)溶于无水二氯甲烷(9mL)，加入醋酸铜(18.02mg,99.22μmol)，吡啶(21.40mg,270.59μmol)。在氧气下，反应液于40℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。将反应液加水(50mL)稀释，加入二氯甲烷(50mL)萃取三次，有机层减压浓缩至干。经制薄层制备色谱纯化(二氯甲烷/甲醇20：1)，有机层减压浓缩至干，得标题化合物(48mg)。
MS m/z(ESI):461.0[M+H]+。
步骤3：6-(4-甲氧苯基)-2-(甲基磺酰基)-8-(6-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体31-3)的合成
将中间体31-2(40mg,86.88μmol)溶于二氯甲烷(4mL)中，加入间氯过氧苯甲酸(52.91mg,260.63μmol)室温搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。向反应液中加入二氯甲烷(20mL)稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)洗有机层，有机层滤液减压浓缩至干，得标题化合物(69mg)。
MS m/z(ESI):493.0[M+H]+。
步骤4：2-乙氧基-6-(4-甲氧苯基)-8-(6-(三氟甲氧基)吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物031)的合成
将中间体31-3(59mg,119.81μmol)溶于无水四氢呋喃(1.5mL)中，加入乙醇钠(24.46mg,359.44μmol)，室温搅拌3h，LCMS检测反应完毕。经制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:56％-76％,10min)，得标题化合物(1.2mg)。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.93(s,1H),8.39(d,J＝2.5Hz,1H),8.12(s,1H),8.04(dd,J＝2.6,8.7Hz,1H),7.79-7.61(m,2H),7.40(d,J＝8.5Hz,1H),7.01(d,J＝9.0Hz,2H),4.21(q,J＝7.0Hz,2H),3.86(s,3H),1.28(t,J＝7.0Hz,3H)。
MS m/z(ESI):459.1[M+H]+。
实施例15、8-(4-氯苯基)-2-乙氧基-6-(2-甲基-2H-吲唑-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物013)
步骤1：6-溴-2-(甲基亚磺酰基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体13-1)的合成
将反应物6-1(0.5g,1.84mmol)溶于二氯甲烷(40mL)中，在0℃下加入间氯过氧化苯甲酸(932.57mg,4.59mmol,85％纯度)。反应液于20℃，搅拌反应12小时。TLC检测反应完毕。将反应液倒到硅胶上(30g)，柱层析纯化(SiO2,四氢呋喃/石油醚＝0-100％至乙醇/二氯甲烷＝1:1)，得标题化合物(0.36g)。
MS m/z(ESI):288.0[M+H]+。
步骤2：6-溴-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体13-2)的合成
将中间体13-1(0.36g,1.25mmol)溶于乙醇(5mL)中，在0℃下加入乙醇钠的乙醇溶液(3M,624.74μL)。反应液于20℃，搅拌反应3h。LCMS检测反应完毕。反应液减压浓缩，得标题化合物粗品(0.45g)，直接用于下步反应。
MS m/z(ESI):269.9[M+H]+。
步骤3：2-乙氧基-6-(2-甲基-2H-吲唑-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体13-3)的合成
将中间体13-2(450mg,1.67mmol)溶于1,4-二氧六环(18mL)和水(6mL)中，依次加入2-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-2H-吲唑(516.09mg,2.00mmol),Pd(dppf)Cl2(34.02mg,41.65μmol)和碳酸钠(441.48mg,4.17mmol)。反应液于氮气保护下，100℃搅拌反应12h。LCMS检测反应完毕。反应液减压浓缩至干，柱层析纯化(SiO2,石油醚/四氢呋喃＝5/1至0:1)，得标题化合物(300mg)。
MS m/z(ESI):322.2[M+H]+。
步骤4：8-(4-氯苯基)-2-乙氧基-6-(2-甲基-2H-吲唑-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物013)的合成
将中间体13-3(40mg,124.48μmol)和(4-氯苯基)硼酸(58.40mg,373.44μmol)溶于二氯甲烷(10mL)，再加入醋酸铜(45.22mg,248.96μmol)和吡啶(29.54mg,373.44μmol,30.14μL)，反应在氧气气氛下(15Psi)40℃搅拌12小时。LCMS显示原料已经完全反应。反应液直接浓缩并进行高效液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:50％-70％,10min)，冻干后得到标题化合物(8.1mg)。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ8.88(s,1H),8.19(s,1H),8.12(s,1H),8.07(s,1H),7.67-7.59(m,2H),7.57-7.45(m,2H),7.33(s,1H),7.31(s,1H),4.22(s,3H),4.16(d,J＝7.0Hz,2H),1.25(t,J＝6.8Hz,3H)。
MS m/z(ESI):432.1[M+H]+。
实施例16、6-(1H-苯并[d]咪唑-6-基)-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物032)
步骤1：6-氯-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体32-1)的合成
将中间体3-1(1.5g,3.73mmol)溶解于乙醇(15mL)中，加入乙醇钠(762.19mg,11.20mmol),室温25℃搅拌1h。LCMS检测反应完毕。将反应液用乙酸乙酯(50mL)稀释，水洗有机层三次(50mL)，有机层减压浓缩至干。经柱层析纯化(SiO2,石油醚/乙酸乙酯＝3/1～1/1)，得标题化合物(575mg)。
MS m/z(ESI):368.1[M+H]+。
步骤2：6-(1H-苯并[d]咪唑-6-基)-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物032)的合成
将6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(39.83mg,163.16μmol)和反应物2(30mg,81.58μmol)溶于二氧六环(2mL)和水(0.5mL)中，向其中加入碳酸铯(53.16mg,163.16μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(5.32mg,8.16μmol)，反应液于氮气保护下90℃搅拌16h。LC-MS检测反应完毕。反应液减压浓缩至干，经制备HPLC纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:45％-65％,10min)得标题化合物(13.4mg)。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.94(s,1H),8.24(s,1H),8.20(s,1H),8.03(s,1H),7.75-7.62(m,2H),7.50-7.41(m,2H),7.40-7.35(m,2H),6.975(t,J＝74Hz,1H),4.19(d,J＝7.0Hz,2H),1.26(t,J＝7.0Hz,3H).
MS m/z(ESI):450.2[M+H]+。
实施例17、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(4-甲氧苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物033)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(4-甲氧苯基)-2-(甲硫基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体33-1)的合成
将中间体1-6(113mg,305.59μmol)，(4-甲氧基苯基)硼酸(69.65mg,458.39μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(19.92mg,30.56μmol)溶于1,4-二氧六环(2mL)，25℃在氮气保护下滴加碳酸钾(84.47mg,611.19μmol)溶于水(0.5mL)的溶液，反应液100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。反应液用10mL水和10mL乙酸乙酯稀释，乙酸乙酯萃取三遍30mL(10mL*3)。有机相合并用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，经硅胶板纯化(SiO2,石油醚/乙酸乙酯＝2/1)，得标题化合物(107.3mg)。
MS m/z(ESI):441.8[M+H]+。
步骤2：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(4-甲氧苯基)-2-(甲磺酰基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体33-2)的合成
将中间体33-1(107mg,242.38μmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，冰浴降温至0℃，氮气保护下加入间氯过氧苯甲酸(196.84mg,969.53μmol,85％纯度)。反应液升至25℃，继续搅拌反应15h。LCMS检测反应完毕。反应液中加入二氯甲烷(50mL)，饱和亚硫酸钠水溶液(50mL*3)洗有机层，有机层用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩至干，得标题化合物粗品(145mg)，直接用于下一步反应。
MS m/z(ESI):474.2[M+H]+。
步骤3：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(4-甲氧苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物033)的合成
将中间体33-2(145mg,306.26μmol)溶于四氢呋喃(2mL)中，氮气保护下加入乙醇钠(41.68mg,612.53μmol)。反应液于25℃搅拌15h。LCMS检测反应完毕。反应液中加入二氯甲烷50mL和水50mL，然后用二氯甲烷萃取三遍150mL(50mL*3)，有机层用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩至干，经液相色谱纯化(碱性色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；mobile phase:[water(0.05％ammonia hydroxide v/v)-ACN]；B％:53％-73％,10min)，得标题化合物(15.2mg)。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ＝8.85(s,1H),8.01(s,1H),7.63(d,J＝8.8Hz,2H),7.37-7.30(m,4H),6.96(d,J＝8.8Hz,2H),6.83(t,J＝73.6Hz,1H),4.14(q,J＝7.0Hz,2H),3.83(s,3H),1.23(t,J＝7.1Hz,3H)
MS m/z(ESI):439.9[M+H]+。
实施例18、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(喹啉-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物034)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(喹啉-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物034)的合成
将中间体32-1(10mg,27.19μmol)和6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)喹啉(13.88mg,54.39μmol)溶于1,4-二氧六环(0.2mL),氮气保护下加入Pd(dtbpf)Cl2(1.77mg,2.72μmol),碳酸钾(7.52mg,54.39μmol)和水(0.05mL)的溶液，反应液100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。反应液减压旋蒸浓缩，经液相色谱纯化(色谱柱:YMC-ActusTriart C18 150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:50％-70％,10min)得到标题化合物(1.7mg)。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ＝8.95(s,1H),8.87(dd,J＝1.7,4.3Hz,1H),8.41(d,J＝7.8Hz,1H),8.36-8.29(m,2H),8.15-8.04(m,2H),7.57(dd,J＝4.4,8.3Hz,1H),7.45-7.31(m,4H),6.91(t,74Hz,1H),4.18(q,J＝7.1Hz,2H),1.25(t,J＝7.1Hz,3H)
MS m/z(ESI):461.2[M+H]+。
实施例19、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物035)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(1,2-二甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物035)的合成
将中间体32-1(30mg,110.23μmol)和1,2-二甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(27.72mg,72.75μmol,可根据专利WO 2016057834报道方法合成)溶于1,4-二氧六环(0.8mL)和水(0.2mL)中，加入碳酸铯(71.83mg,220.47μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(7.18mg,11.02μmol)。在氮气保护下，反应液100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。反应液减压浓缩至干，经制备液相色谱纯化两次(第一次色谱柱:YMC-ActusTriart C18 150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:45％-65％,10min；第二次色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:46％-66％,10min)。得标题化合物(9.2mg)。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δppm 8.94(s,1H),8.22(s,1H),7.88(s,1H),7.65-7.60(m,1H),7.60-7.56(m,1H),7.47-7.42(m,2H),7.41-7.36(m,2H),6.98(t,J＝73.8Hz,1H),4.19(q,J＝7.2Hz,2H),3.83(s,3H),2.64(s,3H),1.26(t,J＝7.0Hz,3H).
MS m/z(ESI):478.2[M+H]+。
实施例20、2-乙氧基-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-8-(1-甲基哌啶-4-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物036)
步骤1：4-((1-(叔-丁氧基羰基)哌啶-4-基)氨基)-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯(中间体36-1)的合成
将4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(10.0g,50.10mmol),起始原料1-1(10.5g,45.45mmol)和K2CO3(11.89g,86.20mmol)溶于1,4-二氧六环(100mL)中。反应液于60℃搅拌反应16h。TLC检测反应完毕。反应液倒入水(50mL)中，乙酸乙酯萃取三次(50mL*3)，有机层用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩至干，柱层析纯化(SiO2,石油醚/乙酸乙酯＝100/1-10/1)，得标题化合物(13.02g)。
步骤2：4-((5-(羟基甲基)-2-(甲硫基)嘧啶-4-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(中间体36-2)的合成
将中间体36-1(13.02g,32.87mmol)溶于四氢呋喃(30mL)中。将反应液用冰水浴降温至0℃，加入四氢铝锂(640.76mg,16.88mmol)，于0℃下搅拌反应8h。LC-MS检测反应完毕。在冰浴下，向反应液中加入Na2SO4.10H2O(50g)淬灭，加入无水硫酸钠干燥，抽滤，滤饼以乙酸乙酯洗三次(100mL*3)，滤液减压浓缩至干，柱层析纯化(SiO2,石油醚/乙酸乙酯＝1/1)，得标题化合物(9g)。
MS m/z(ESI):355.1[M+H]+。
步骤3：4-((5-甲酰基-2-(甲硫基)嘧啶-4-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(中间体36-3)的合成
将中间体36-2(9g,25.56mmol)溶于THF(20mL)中，加入活性二氧化锰(22g,25.56mmol,10.00eq)。反应液于60℃搅拌反应16h。TLC检测反应完毕。减压过滤，滤饼用乙酸乙酯淋洗，滤液减压浓缩至干，得标题化合物(7g)。
MS m/z(ESI):353.1[M+H]+。
步骤4：4-((5-(3-乙氧基-3-羰基丙-1-烯-1-基)-2-(甲硫基)嘧啶-4-基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(中间体36-4)的合成
在冰水浴下，将2-(二乙氧基磷基)乙酸乙酯(4.5g,20.33mmol)溶于四氢呋喃(20mL)中，加入氢化钠(803mg,20.08mmol,60％wt/wt)。反应液于0℃搅拌反应10min，向其中加入中间体36-3(6g,16.94mmol)。反应液升至70℃搅拌反应18h。LC-MS检测反应完毕。在冰水浴下，向反应液中缓慢滴加水(1ml)淬灭反应，随后加水(30mL)稀释，乙酸乙酯萃取三次(50mL*3)。有机层经无水硫酸钠干燥后减压浓缩至干，得标题化合物粗品(7g)。粗品直接用于下步反应。
MS m/z(ESI):423.1[M+H]+。
步骤5：4-(2-(甲硫基)-7-羰基吡啶并[2,3-d]嘧啶-8(7H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(中间体36-5)的合成
将中间体36-4(7g,crude)溶于乙醇(20mL)中，冰浴降温至0℃，加入乙醇钠(3.38g,49.76mmol)。将反应液于25℃搅拌下反应7h。TLC检测反应完毕。向反应液中加入水(100ml)稀释，用乙酸乙酯萃取三次(200mL*3)。有机层经无水硫酸钠干燥后减压浓缩至干，浓缩后的残余物通过柱层析纯化(SiO2,石油醚/乙酸乙酯＝1/1)，得标题化合物(2.9g)。
步骤6：4-(6-溴-2-(甲硫基)-7-羰基吡啶并[2,3-d]嘧啶-8(7H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(中间体36-6)的合成
将中间体36-5(1g,26.52mmol)溶于乙腈(10mL)中，加入NBS(533mg,39.78mmol)，于20℃下搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。向反应液中加入水(100ml)稀释，用乙酸乙酯萃取三次(50mL*3)。有机层经无水硫酸钠干燥后减压浓缩至干，浓缩后的残余物通过柱层析纯化(SiO2,石油醚/乙酸乙酯＝1/1)，得标题化合物(500mg)。
MS m/z(ESI):455.1[M+H]+。
步骤7：4-(6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-(甲硫基)-7-羰基吡啶并[2,3-d]嘧啶-8(7H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(中间体36-7)的合成
在氮气氛围下，将中间体36-6(300mg,659.34μmol)和1-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(256mg,989mmol)溶于1,4-二氧六环(3.2mL)和水(0.8mL)中，加入碳酸铯(428mg,1318.68μmol)，Pd(dtbpf)Cl2(48.19mg,65.93μmol)。将反应液于105℃下搅拌反应15h。LC-MS检测反应完毕。将反应液过滤，滤液减压浓缩至干。浓缩后的残余物通过柱层析纯化(SiO2,乙酸乙酯/甲醇＝10/1)，得标题化合物(320mg)。
MS m/z(ESI):507.2[M+H]+。
步骤8：4-(6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-2-(甲磺酰基)-7-羰基吡啶并[2,3-d]嘧啶-8(7H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(中间体36-8)的合成
将中间体36-7(320mg,631.16μmol)溶于二氯甲烷(3mL)中，冰浴降温至0℃，加入间氯过氧苯甲酸(271.40mg,1577.90μmol,85％纯度)。反应液升至25℃搅拌反应2h。LC-MS检测反应完毕。向反应液加入饱和亚硫酸钠水溶液(10ml)，搅拌30分钟。将混合液用乙酸乙酯萃取两次(100mL*2)。有机层经无水硫酸钠干燥后减压浓缩至干，得标题化合物粗品(350mg)。粗品直接用于下步反应。
步骤9：4-(2-乙氧基-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-7-羰基吡啶并[2,3-d]嘧啶-8(7H)-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(中间体36-9)的合成
将中间体36-8(350mg,crude)溶于乙醇(5mL)中，冰浴降温至0℃，加入乙醇钠(132.46mg,1948.05μmol)。随后，将反应液升至25℃搅拌反应3h。TLC检测反应完毕。向反应液中加入水(30ml)稀释，用乙酸乙酯萃取三次(20mL*3)。有机层经无水硫酸钠干燥后减压浓缩至干，浓缩后的残余物通过柱层析纯化(SiO2,DCM/MeOH＝10/1)，得标题化合物(180mg)。
MS m/z(ESI):505.2[M+H]+。
步骤10：2-乙氧基-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-8-(哌啶-4-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体36-10)的合成
将中间体36-9(100mg,198.01μmol)溶于氯化氢的二氧六环(3ml,4N,12mmol)中。反应液在20℃搅拌反应0.5h后，加水(20ml)稀释。冰水浴下，向上述混合物中加入饱和氢氧化钠溶液调节pH＝11，用乙酸乙酯萃取三次(20mL*3)。有机层经无水硫酸钠干燥后减压浓缩至干，得标题化合物粗品(80mg,crude)。粗品直接用于下步反应。
MS m/z(ESI):405.2[M+H]+。
步骤11：2-乙氧基-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-8-(1-甲基哌啶-4-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物036)的合成
将中间体36-10(80mg,crude)溶于甲酸(1mL)中，加入甲醛水溶液(49.38mg,591.32μmol)。反应液升至100℃搅拌反应2h后，LC-MS检测反应完毕。反应液过滤，滤液经制备液相色谱纯化[YMC-Actus Triart C18柱5μm二氧化硅，30mm直径，150mm长度；用水(含有0.05％NH4HCO3)和乙腈的极性递减的混合物作为洗脱液；乙腈梯度比例30％-42％,洗脱时间12分钟]，得到标题化合物(12.4mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.95(s,1H),8.24(s,1H),8.12(s,1H),7.90(d,J＝1.9Hz,1H),7.69(d,J＝8.4Hz,1H),7.50(dd,J＝8.5,1.7Hz,1H),5.35(s,1H),4.52-4.45(m,2H),3.88(s,3H),2.95(t,J＝11.1Hz,4H),2.23(s,3H),2.02(t,J＝11.3Hz,2H),1.58(d,J＝10.5Hz,2H),1.42(t,J＝7.0Hz,3H).
MS m/z(ESI):419.1[M+H]+。
实施例21、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氨基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物037)
步骤1：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氨基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物037)的合成
将中间体32-1(20mg,135.89μmol)和1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-胺(49.97mg,135.89μmol)溶于甲苯(0.7mL)，加入BrettPhos Pd G3(12.32mg,13.59μmol),BrettPhos(7.29mg,13.59μmol)和叔丁醇钠(39.18mg,407.67μmol)。反应液升温至100℃搅拌20h。反应液减压浓缩至干，经制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:46％-66％,10min)，得标题化合物(2.2mg)。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δppm 8.64(s,1H),8.16(s,1H),7.67(d,J＝1.6Hz,1H),7.61(d,J＝8.6Hz,1H),7.46-7.41(m,2H),7.39(s,2H),7.35(d,J＝1.9Hz,1H),7.29(s,1H),6.98(t,J＝73.8Hz,1H),4.11(q,J＝7.1Hz,2H),3.95(s,3H),1.23(t,J＝7.1Hz,3H)
MS m/z(ESI):479.1[M+H]+。
实施例22、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物038)
步骤1：3-溴-7-氯-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(中间体38-2)的合成
将起始原料38-1(0.2g,1.11mmol)溶于10mL吡啶，0℃下逐滴滴加液溴(707.93mg,4.43mmol)，滴加完毕反应液加热到65℃，搅拌反应16小时。反应完成后，冷却至室温，加入30mL水，然后用乙酸乙酯萃取3次(10ml*3),收集萃取后的有机相并用无水硫酸钠干燥，过滤将滤液旋干，得到标题化合物(0.17g)，粗品直接用于下一步反应。
MS m/z(ESI):258.7[M+H]+。
步骤2：3-溴-7-乙氧基-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(中间体38-3)的合成
将中间体38-2(0.15g,578.06μmol)溶于5mL乙醇中，得黄色溶液，向其中一次性加入乙醇钠(786.74mg,11.56mmol)。此反应液加热到80℃，搅拌过夜反应16小时。反应完成，减压旋干，向其中加入10ml水并用乙酸乙酯萃取3次，每次3ml。得到的有机相减压旋干，得黄色油状物。该油状物通过反相制备柱色谱纯化(YMC-Actus Triart C18柱5μm二氧化硅，30mm直径，150mm长度；用水(含有0.05％甲酸)和乙腈的极性递减的混合物作为洗脱液；乙腈梯度比例33％-53％,洗脱时间10分钟)得标题化合物(23mg)。
MS m/z(ESI):269.1[M+H]+。
步骤3：3-溴-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(中间体38-4)的合成
将中间体38-3(23mg,85.47μmol)和(4-(二氟甲氧基)苯基)硼酸(48.19mg,256.42μmol)溶解于1ml二氯甲烷。向其中滴加吡啶(20.28mg,256.42μmol)然后加入乙酸铜(17.08mg,94.02μmol)，该反应液加热到40℃，搅拌16小时。反应完成后，冷却至室温，并向其中加入1ml水，用二氯甲烷萃取三次，每次1毫升。得到的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤得滤液，旋干滤液，得到黄色油状物。该油状物用制备层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1体积比)，收集主点，得标题化合物(0.030g)。
MS m/z(ESI):410.8[M+H]+。
步骤4：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物038)的合成
将中间体38-4(30mg,72.96μmol)和1-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(28.25mg,109.44μmol)溶解于2ml二氧六环和1ml水中。氮气保护下向其中加入碳酸铯(71.31mg,218.87μmol)，随后加入Pd(dtbpf)Cl2(4.75mg,7.30μmol)。反应液加热到100℃，反应16小时。反应完成后，冷却至室温，向其中加入2ml水，并用乙酸乙酯萃取3次，每次1ml。得到的有机相，减压浓缩至干，得黄色油状物。该油状物用制备柱色谱纯化(YMC-Actus Triart C18柱5μm二氧化硅，30mm直径，150mm长度；用水(含有0.05％氨水)和乙腈的极性递减的混合物作为洗脱液；乙腈梯度比例53％-73％,洗脱时间10分钟)，得到标题化合物(13.9mg)。
MS m/z(ESI):462.9[M+H]+。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ＝8.18(d,J＝5.99Hz,2H),8.08(d,J＝8.44Hz,1H),7.98(s,1H),7.69-7.78(m,1H),7.64(d,J＝8.44Hz,1H),7.32-7.46(m,4H),6.96(t,J＝76Hz,1H),6.70(d,J＝8.44Hz,1H),4.03(q,J＝7.05Hz,2H),3.94(s,3H),1.17(t,J＝7.03Hz,3H)。
实施例23、2-乙氧基-8-(4-甲氧苯基)-6-(2-甲基-2H-吲唑-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物039)
步骤1：2-乙氧基-8-(4-甲氧苯基)-6-(2-甲基-2H-吲唑-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物039)的合成
将中间体13-3(40mg,124.48μmol)和(4-甲氧苯基)硼酸(56.75mg,373.44μmol)溶于二氯甲烷(10mL)，再加入醋酸铜(45.22mg,248.96μmol)和吡啶(29.54mg,373.44μmol)，反应在氧气气氛下40℃搅拌12小时。LCMS显示原料已经完全反应。反应液直接浓缩并进行高效液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:43％-63％,10min)，冻干后得到标题化合物(1.8mg)。
1H NMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ8.78(s,1H),8.18(s,1H),7.94(s,1H),7.91(s,1H),7.75(d,J＝8.8Hz,1H),7.60(d,J＝8.8Hz,1H),7.25-7.20(m,2H),7.11-7.07(m,2H),4.26(s,3H),4.23-4.20(m,2H),3.91(s,3H),1.32(t,J＝7.5Hz,3H)。
MS m/z(ESI):428.2[M+H]+。
实施例24、2-乙氧基-6-(2-甲基-2H-吲唑-5-基)-8-(4-(三氟甲氧基)苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物040)
步骤1：2-乙氧基-6-(2-甲基-2H-吲唑-5-基)-8-(4-(三氟甲氧基)苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物040)的合成
将中间体13-3(40mg,124.48μmol)和(4-三氟甲氧苯基)硼酸(76.90mg,373.44μmol)溶于二氯甲烷(10mL)，再加入醋酸铜(45.22mg,248.96μmol)和吡啶(29.54mg,373.44μmol)，反应在氧气气氛下40℃搅拌12小时。LCMS显示原料已经完全反应。反应液直接浓缩并进行高效液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相:(A水(0.225％FA)，B:ACN；B％:58％-78％,10min)，冻干后得到标题化合物(1.3mg)。
1H NMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ8.82(s,1H),8.18(s,1H),7.97(s,1H),7.94(s,1H),7.76(s,1H),7.62-7.56(m,1H),7.46-7.41(m,2H),7.40-7.36(m,2H),4.27(s,3H),4.25-4.18(m,2H),1.33-1.29(m,3H).
MS m/z(ESI):482.1[M+H]+。
实施例25、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(4-(二甲基磷基)苯基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物041)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(4-(二甲基磷基)苯基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物041)的合成
将二甲基(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)氧化膦(27.42mg,97.90μmol)和中间体32-1(30mg,81.58μmol)溶于二氧六环(2mL)和水(0.5mL)中，向其中加入碳酸铯(53.16mg,163.16μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(5.32mg,8.16μmol)，反应液于氮气保护下90℃搅拌16h。LC-MS检测反应完毕。反应液减压浓缩至干，经制备HPLC纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:45％-65％,10min)得标题化合物(9.7mg)。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.95(s,1H),8.26(s,1H),7.98-7.82(m,4H),7.47-7.32(m,4H),6.97(t,J＝73.6Hz,1H),4.19(q,J＝7.0Hz,2H),1.86(s,3H),1.82(s,3H),1.26(t,J＝7.1Hz,3H).
MS m/z(ESI):486.1[M+H]+。
实施例26、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-(2-羟基乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物042)
步骤1：2-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-1-基)乙烷-1-醇(中间体42-2)的合成
将中间体42-1(75mg,311.09μmol,可根据专利WO 2017043636报道方法合成),KOAc(183.19mg,1.87mmol),Pd(dppf)Cl2(11.38mg,15.55μmol),B2Pin2(118.50mg,466.64μmol)溶于dioxane(5mL)中。在氮气环境下100℃搅拌反应12小时。LC-MS检测反应完毕。将反应液用乙酸乙酯30mL(10mL*3)萃取。有机相用无水硫酸钠干燥之后，减压蒸干后经制备薄层色谱(SiO2,PE:EA＝1:1)纯化，得标题化合物(25mg)。
MS m/z(ESI):289.2[M+H]+。
步骤2：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-(2-羟基乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物042)的合成
将中间体42-2(25mg,86.76μmol)溶于dioxane/H2O(4:1)(2mL)中，加入KOAc(183.19mg,1.87mmol),Pd(dppf)Cl2(11.38mg,15.55μmol)，B2Pin2(118.50mg)。在氮气环境下90℃搅拌反应15小时。LC-MS检测反应完毕。将反应液用乙酸乙酯15mL(5mL*3)萃取。有机相用无水硫酸钠干燥之后，减压蒸干后制备SFC(色谱柱:DAICEL CHIRALCEL OJ-H(250mm*30mm,5μm)；mobile phase:[0.1％NH3H2O EtOH]；B％:35％-35％,10min)，得标题化合物(5.9mg)。
MS m/z(ESI):494.3[M+H]+。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ＝8.93(s,1H),8.24(s,1H),8.22(s,1H),8.02(d,J＝1.0Hz,1H),7.74(d,J＝8.4Hz,1H),7.63(dd,J＝1.5,8.4Hz,1H),7.49-7.41(m,2H),7.41-7.33(m,2H),7.20-6.76(m,1H),4.42(t,J＝5.1Hz,2H),4.19(q,J＝7.1Hz,2H),3.94(t,J＝5.1Hz,2H),1.26(t,J＝7.1Hz,3H)。
实施例27、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(2-(2-(甲磺酰)乙基)-2H-吲唑-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物043)
步骤1：5-溴-2-(2-(甲磺酰基)乙基)-2H-吲唑(中间体43-2)的合成
将起始原料43-1(3g,15.23mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中，加入(甲磺酰基)乙烯(1.94g,18.27mmol)，和碳酸钾(2.10g,15.23mmol),反应液于50℃搅拌反应16h。LC-MS检测反应完毕。将反应液用乙酸乙酯(50mL)稀释，加入水(50mL)洗有机层三次，有机层滤液减压浓缩至干。经柱层析纯化(80g硅胶柱,乙酸乙酯/石油醚＝0～65％@50mL/分钟)。得标题化合物(720mg)。
MS m/z(ESI):304.8[M+H]+。
步骤2：2-(2-(甲磺酰基)乙基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-2H-吲唑(中间体43-3)的合成
将中间体43-2(200mg,659.68μmol)溶于1,4-二氧六环(2mL)加入双联频哪醇硼酸酯(251.28mg,989.53μmol)，醋酸钾(194.23mg,1.98mmol)和Pd(dppf)Cl2(24.13mg,32.98μmol)。氮气保护下，反应液于100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。将反应液用乙酸乙酯(50mL)稀释，水洗有机层三次(50mL)，有机层减压浓缩至干，得标题化合物(200mg)。
MS m/z(ESI):351.5[M+H]+。
步骤3：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(2-(2-(甲磺酰)乙基)-2H-吲唑-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物043)的合成
将中间体43-3(50mg,142.76μmol)和中间体32-1(52.50mg,142.76μmol)溶于1,4-二氧六环(0.8mL)和水(0.2mL)中，加入碳酸铯(93.03mg,285.52μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(9.30mg,14.28μmol)。在氮气保护下，反应液100℃搅拌反应16小时。LC-MS检测反应完毕。将有机层减压浓缩至干，经制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；mobile phase:[water(0.225％FA)-ACN]；B％:45％-65％,10min)，得标题化合物(10.2mg)。
MS m/z(ESI):556.2[M+H]+。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δppm 8.93(s,1H),8.42(s,1H),8.19(s,1H),8.12(s,1H),7.71-7.68(m,1H),7.67-7.63(m,1H),7.46-7.41(m,2H),7.41-7.35(m,2H),6.98(t,J＝73.8Hz,1H),5.01-4.94(m,2H),4.19(q,J＝7.0Hz,2H),3.90(t,J＝6.4Hz,2H),2.79(s,3H),1.26(t,J＝7.1Hz,3H)
实施例28、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-(2-(甲磺酰)乙基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物044)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-(2-(甲磺酰)乙基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物044)的合成
将起始原料44-1(30mg,91.69μmol,可根据专利WO 2008141119报道方法进行合成)和中间体32-1(23.60mg,64.18μmol)溶于1,4-二氧六环(2.8mL)和水(0.7mL)中，加入碳酸铯(59.75mg,183.37μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(5.98mg,9.17μmol)。在氮气保护下，反应液100℃搅拌反应16小时。LC-MS检测反应完毕。将有机层减压浓缩至干，经制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:38％-58％,10min)，得标题化合物(1.4mg)。
MS m/z(ESI):533.2[M+H]+。
1H NMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δppm 8.71(s,1H),8.12(d,J＝2.5Hz,1H),7.74(s,1H),7.69(dd,J＝2.6,9.6Hz,1H),7.27-7.20(m,4H),6.58(d,J＝9.5Hz,1H),6.53(t,J＝73.4Hz,1H),4.34(t,J＝6.5Hz,2H),4.13(q,J＝7.0Hz,2H),3.50(t,J＝6.5Hz,2H),2.85(s,3H),1.22(t,J＝7.1Hz,3H).
实施例29、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(2-(羟甲基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物045)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(2-(羟甲基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物045)的合成
将中间体45-1(20mg,69.41μmol,可根据专利JP 2013189395报道方法合成)和中间体32-1(30.63mg,83.29μmol)溶于二氧六环(2mL)和水(0.5mL)中，向其中加入碳酸铯(67.84mg,208.23μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(4.52mg,6.94μmol)，反应液于氮气保护下100℃搅拌16h。LC-MS检测反应完毕。反应液减压浓缩至干，经制备HPLC纯化(色谱柱:YMC-ActusTriart C18 150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:45％-65％,10min)得标题化合物(3.0mg)。
MS m/z(ESI):494.2[M+H]+。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δppm 8.78(s,1H),7.94(s,1H),7.91(s,1H),7.71(d,J＝8.5Hz,1H),7.52(d,J＝8.5Hz,1H),7.31-7.29(m,4H),6.60(t,J＝72Hz,1H),4.83(s,2H),4.16(q,J＝7.0Hz,2H),3.86(s,3H),1.26(t,J＝7.2Hz,3H)
实施例30、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(4-甲氧基-3-甲基苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物046)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(4-甲氧基-3-甲基苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物046)的合成
将中间体32-1(30mg,81.58μmol)和(4-甲氧基-3-甲基苯基)硼酸(20.31mg,122.37μmol)溶于1,4-二氧六环(0.4mL)，25℃在氮气保护下加入Pd(dtbpf)Cl2(5.32mg,8.16μmol)和碳酸钾(22.55mg,163.16μmol)溶于水(0.1mL)的溶液，反应液100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。反应液减压浓缩，经液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus TriartC18 150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:58％-78％,10min)得到标题化合物(10.5mg)。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ＝8.87(s,1H),8.05(s,1H),7.53(dd,J＝2.3,8.5Hz,1H),7.49(d,J＝1.6Hz,1H),7.41-7.32(m,4H),6.96(d,J＝8.4Hz,1H),6.95(t,J＝74Hz 1H),4.15(q,J＝7.0Hz,2H),3.86(s,3H),2.23(s,3H),1.23(t,J＝7.0Hz,3H)。
MS m/z(ESI):454.2[M+H]+。
实施例31、6-(苯并[d]异噻唑-5-基)-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物047)
步骤1：6-(苯并[d]异噻唑-5-基)-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物047)的合成
将中间体32-1(30mg,81.58μmol)和5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)苯并[d]异噻唑(29.99mg,122.37μmol)溶于1,4-二氧六环(1mL)，25℃在氮气保护下加入Pd(dtbpf)Cl2(5.32mg,8.16μmol),碳酸钾(22.55mg,163.16μmol)和水(0.25mL)的溶液，反应液100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。反应液减压旋蒸浓缩，经液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:26％-46％,10min)得到标题化合物(14.2mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝12.31-10.59(m,1H),8.97(s,1H),8.28(s,1H),7.97(d,J＝2.3Hz,1H),7.87(dd,J＝2.4,8.9Hz,1H),7.47-7.41(m,2H),7.37(t,J＝74Hz,1H),7.37-7.34(m,2H),7.08(d,J＝8.8Hz,1H),4.19(d,J＝7.0Hz,2H),1.21(t,J＝7.0Hz,3H)
MS m/z(ESI):451.1[M+H]+。
实施例32、6-(苯并[d]噁唑-5-基)-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物048)
步骤1：6-(苯并[d]噁唑-5-基)-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物048)的合成
将中间体32-1(30mg,81.58μmol)和5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)苯并[d]噁唑(29.99mg,122.37μmol)溶于1,4-二氧六环(0.4mL),25℃在氮气保护下加入Pd(dtbpf)Cl2(5.32mg,8.16μmol),碳酸钾(22.55mg,163.16μmol)和水(0.1mL)的溶液，反应液100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。反应液减压旋蒸浓缩，经液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；；B％:48％-68％,10min)得到标题化合物(2.5mg)。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ＝8.95(s,1H),8.54(s,1H),8.24(s,1H),8.13(s,1H),7.83-7.79(m,1H),7.78-7.75(m,1H),7.46-7.42(m,2H),7.40-7.36(m,2H),7.16(t,J＝73.6Hz,1H),4.19(q,J＝6.9Hz,2H),1.26(t,J＝7.0Hz,3H)
MS m/z(ESI):451.1[M+H]+。
实施例33、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(2-甲基-2H-吲唑-5-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物049)
步骤1：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(2-甲基-2H-吲唑-5-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物049)的合成
在氮气保护下，将中间体38-4(87mg)和2-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-2H-吲唑(75.6mg,0.293mmol)溶解于2ml二氧六环和1ml水的混合溶液中。随后，向反应液中加入碳酸铯(190.6mg,0.585mmol)以及Pd(dtbpf)Cl2(13mg,0.02mmol)。将上述反应液加热至100℃并搅拌16小时。TLC检测反应完成，将反应液冷却至室温，向其中加入2ml水，并用乙酸乙酯萃取(3ml*3)。将萃取相经无水硫酸钠干燥，减压浓缩至干。后通过柱层析纯化(PE：EA＝10：1-2：1)，得标题化合物(35mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.39(s,1H),8.22(s,1H),8.17-8.11(m,2H),7.60-7.54(m,2H),7.44-7.42(m,2H),7.36-7.17(m,3H),6.72(d,J＝8.0Hz,1H),4.18(s,3H),3.96-3.94(m,2H),3.94(s,3H),1.09(t,J＝8.0Hz,3H).
MS m/z(ESI):463.0[M+H]+。
实施例34、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(4-甲氧苯基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物050)
在氮气氛围下，将中间体38-4(40mg,97.32μmol)和2-(4-甲氧苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环(34.2mg,146.34μmol)溶解于2.00mL二氧六环和1.00mL水中，向上述反应液中加入碳酸铯(95.1mg,292.68μmol)以及Pd(dtbpf)Cl2(8mg,10.02μmol)。将上述反应液加热到90℃，搅拌15小时。TLC监控反应完成后，冷却至室温，将反应液过滤，通过HPLC-PREP纯化，得到标题化合物(7.0mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.15(t,J＝4.2Hz,2H),7.75–7.66(m,2H),7.46–7.32(m,5H),7.05–6.97(m,2H),6.72(d,J＝8.4Hz,1H),4.07–3.95(m,2H),3.81(s,3H),1.09(t,J＝7.0Hz,3H).
MS m/z(ESI):439.1[M+H]+。
实施例35、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物051)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(6-甲氧基吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物051)的合成
将起始原料51-1(45.00mg,294.23μmol)和中间体32-1(36.07mg,98.08μmol)溶于1,4-二氧六环(0.8mL)和水(0.2mL)中，室温加入碳酸铯(63.91mg,196.15μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(6.39mg,9.81μmol)。在氮气保护下，将反应液升温至100℃搅拌反应16小时。LCMS检测反应完毕,反应液减压浓缩至干。经制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC Triart C18150*30mm*5μm；mobile phase:[water(0.225％FA v/v)-ACN]；B％:48％-68％,10min)，得标题化合物(2.2mg)。
MS m/z(ESI):441.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δppm 8.93(s,1H),8.50(d,J＝2.3Hz,1H),8.19(s,1H),8.07(dd,J＝2.3,8.8Hz,1H),7.45-7.39(m,2H),7.39-7.34(m,2H),6.97(t,J＝73.8Hz,1H),6.89(d,J＝8.8Hz,1H),4.18(q,J＝7.0Hz,2H),3.97(s,3H),1.25(t,J＝7.0Hz,3H).
实施例36、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(2-(2-羟基乙基)-2H-吲唑-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物052)
步骤1：2-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-2H-吲唑-2-基)乙烷-1-醇(中间体52-2)的合成
将中间体52-1(200mg,829.59μmol,可根据专利WO 2015036964报道方法合成)溶于1,4-二氧六环(7mL)中，加入双联频哪醇硼酸酯(231.73mg,912.54μmol)，醋酸钾(244.25mg,2.49mmol)和Pd(dppf)Cl2(60.70mg,82.96μmol)。氮气保护下，反应液于100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。将反应液用乙酸乙酯(50mL)稀释，水洗有机层三次(50mL)，有机层减压浓缩至干。经制备薄层色谱纯化(SiO2,乙酸乙酯＝100％)，得标题化合物(110mg)。
MS m/z(ESI):289.1[M+H]+。
步骤2：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(2-(2-羟基乙基)-2H-吲唑-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物052)的合成
将中间体52-2(110mg,381.75μmol)和中间体32-1(140.38mg,381.75μmol)溶于1,4-二氧六环(2mL)和水(0.5mL)中，加入碳酸铯(248.76mg,763.49μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(24.88mg,38.17μmol)。在氮气保护下，反应液100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。反应液减压过滤，滤液减压浓缩至干.经制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:40％-60％,10min).得标题化合物(37.8mg)。
MS m/z(ESI):494.2[M+H]+。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ8.93(s,1H),8.34(s,1H),8.20(s,1H),8.13(s,1H),7.70-7.61(m,2H),7.48-7.42(m,2H),7.40-7.34(m,2H),6.98(t,J＝73.8Hz,1H),4.57(t,J＝5.3Hz,2H),4.19(q,J＝7.0Hz,2H),4.06(t,J＝5.3Hz,2H),1.26(t,J＝7.0Hz,3H).
实施例37、6-(2-(2-氨基乙基)-2H-吲唑-5-基)-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物053)
步骤1：2-(5-(8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-7-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)-2H-吲唑-2-基)乙基甲磺酸酯(中间体53-1)的合成
将化合物052(180mg,364.77μmol)溶于二氯甲烷中(4mL)，冰浴降温至0℃，加入三乙胺(73.82mg,729.54μmol)和甲磺酰氯(45.96mg,401.25μmol),反应液于0℃搅拌10min后，升至25℃。继续搅拌反应30min。LCMS检测反应完毕。向反应液中加入二氯甲烷(50mL)，用饱和亚硫酸钠水溶液(50mL)洗有机层三次，有机层滤液减压浓缩至干，得标题化合物(600mg)，粗品直接用于下步反应。
MS m/z(ESI):572.1[M+H]+。
步骤2：6-(2-(2-氨基乙基)-2H-吲唑-5-基)-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物053)的合成
将中间体53-1(300mg,524.89μmol)溶于甲醇(3mL)中，加入氨水(89.39mg,5.25mmol)，试室温搅拌10min,将反应液升温至60℃，继续搅拌20h。LCMS检测反应完毕。反应液减压浓缩至干，经制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；mobile phase:[water(0.225％FA)-ACN]；B％:33％-53％,10min),得标题化合物(5.5mg)。
MS m/z(ESI):493.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.03(s,1H),8.53-8.44(m,1H),8.28(s,1H),8.14(s,1H),7.67(d,J＝8.3Hz,1H),7.58(s,1H),7.49(d,J＝8.8Hz,2H),7.40(s,1H),7.39(t,J＝68.9Hz,1H),7.37(s,1H),4.49(s,2H),4.22(q,J＝7.2Hz,2H),3.20-3.08(m,2H),1.26-1.22(m,3H)
实施例38、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(2-(2-(二甲氨基)乙基)-2H-吲唑-5-基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物054)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-6-(2-(2-(二甲氨基)乙基)-2H-吲唑-5-基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物054)的合成
将二甲胺盐酸盐(142.67mg,1.75mmol)和三乙胺(106.23mg,1.05mmol,146.11μL,3eq)在室温搅拌10min，再将中间体53-1(200mg,349.92μmol)溶于甲醇(3mL)中加入反应体系。室温搅拌10min后，升温至60℃，继续搅拌20h。LCMS检测反应完毕，反应液减压浓缩至干。经制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:50％-70％,10min)，得标题化合物(4.7mg)。
MS m/z(ESI):521.2[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 9.01(s,1H),8.46(s,1H),8.26(s,1H),8.10(s,1H),7.64(d,J＝9.0Hz,1H),7.57-7.52(m,1H),7.47(d,J＝8.9Hz,2H),7.39-7.34(m,2H),7.37(t,J＝72.6Hz,1H),4.53(t,J＝6.5Hz,2H),4.20(q,J＝7.1Hz,2H),2.80(t,J＝6.2Hz,2H),2.18(s,6H),1.22(t,J＝7.1Hz,3H)
实施例39、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物055)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物055)的合成
将起始原料55-1(28.77mg,122.37μmol)和中间体32-1(30mg,81.58μmol)溶于1,4-二氧六环(0.4mL)和水(0.1mL)中，加入碳酸铯(53.16mg,163.16μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(5.32mg,8.16μmol)。在氮气保护下，反应液100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。反应液减压过滤，滤液减压浓缩至干，经制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:38％-58％,10min)，得标题化合物(22.2mg)。
MS m/z(ESI):441.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δppm 8.91(s,1H),8.28(d,J＝2.4Hz,1H),8.19(s,1H),7.96(dd,J＝2.5,9.2Hz,1H),7.43-7.39(m,2H),7.39-7.35(m,2H),6.97(t,J＝73.8Hz,1H),6.64(d,J＝9.4Hz,1H),4.18(q,J＝7.1Hz,2H),3.66(s,3H),1.25(t,J＝7.1Hz,3H).
实施例40、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(4-甲氧基-2-甲基苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物056)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(4-甲氧基-2-甲基苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物056)的合成
将起始原料56-1(20.31mg,122.37μmol)和中间体32-1(30mg,81.58μmol)溶于1,4-二氧六环(0.4mL)和水(0.1mL)中，加入碳酸铯(53.16mg,163.16μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(5.32mg,8.16μmol)。在氮气保护下，反应液100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。反应液减压过滤，滤液减压浓缩至干，经制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:56％-76％,10min)，得标题化合物(12.3mg)。
MS m/z(ESI):454.2[M+H]+。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δppm 8.90(s,1H),7.93(s,1H),7.43-7.38(m,2H),7.38-7.34(m,2H),7.21(d,J＝8.3Hz,1H),6.96(t,J＝73.8Hz,1H),6.88-6.80(m,2H),4.18(q,J＝7.0Hz,2H),3.83(s,3H),2.25(s,3H),1.26(t,J＝7.1Hz,3H).
实施例41、6-(苯并[d]噁唑-6-基)-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物057)
步骤1：6-(苯并[d]噁唑-6-基)-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物057)的合成
将起始原料57-1(30mg,122.41μmol)和中间体32-1(45.01mg,122.41μmol)溶于二氧六环(2mL)和水(0.5mL)中，向其中加入碳酸铯(119.65mg,367.22μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(7.98mg,12.24μmol)，反应液于氮气保护下90℃搅拌16h。LC-MS检测反应完毕。反应液用乙酸乙酯(6mL)和水(6mL)进行萃取，用水洗涤有机相(2mL x3)，向有机相中加适量无水硫酸钠，过滤并减压浓缩至干反应液减压浓缩至干，经制备HPLC纯化(色谱柱:YMC-ActusTriart C18 150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:45％-65％,10min)得标题化合物(6.3mg)。
MS m/z(ESI):451.2[M+H]+。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δppm 8.96(s,1H),8.55(s,1H),8.27(s,1H),8.11(d,J＝1.0Hz,1H),7.88-7.82(m,1H),7.81-7.76(m,1H),7.50-7.43(m,2H),7.41-7.36(m,2H),7.19-6.77(t,J＝74Hz,1H),4.20(q,J＝7.0Hz,2H),1.27(t,J＝7.0Hz,3H).
实施例42、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(2-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物058)
步骤1：2-(甲氧基甲基)-1-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(中间体58-2)的合成
将中间体58-1(75mg,293.99μmol,可根据专利WO 2013105676报道方法合成)和双联频哪醇硼酸酯(82.12mg,323.39μmol)溶于无水二氧六环(2mL)中，向其中加入乙酸钾(86.56mg,881.97μmol)和Pd(dppf)Cl2(21.51mg,29.40μmol)，反应液于氮气保护下100℃搅拌15h。LC-MS检测反应完毕。待反应冷却至室温，依次加入水(5mL)和乙酸乙酯(5mL)，有机相用水(2mL*2)洗涤，洗涤后的有机相用适量无水硫酸钠干燥。经制备薄层色谱法(二氧化硅，二氯甲烷：甲醇＝10:1)得标题化合物(85mg)。
MS m/z(ESI):303.1[M+H]+。
步骤2：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(2-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物058)的合成
将中间体58-2(85mg,281.29μmol)和中间体32-1(68.96mg,187.53μmol)溶于二氧六环(2mL)和水(0.5mL)中，向其中加入碳酸铯(122.20mg,375.06μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(12.22mg,18.75μmol)，反应液于氮气保护下90℃搅拌16h。LC-MS检测反应完毕。反应液过滤，减压浓缩至干，经制备高效液相色谱纯化(色谱柱:Gemini NX C18 5μm*10*150mm；mobile phase:water(0.225％FA)-ACN；B％:30％-50％,11min)得标题化合物(16.6mg)。
MS m/z(ESI):508.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.95(s,1H),8.25(s,1H),7.96(s,1H),7.75-7.69(m,1H),7.66-7.61(m,1H),7.48-7.42(m,2H),7.41-7.35(m,2H),6.98(t,J＝74Hz 1H),4.80(s,2H),4.19(q,J＝7.0Hz,2H),3.93(s,3H),3.45(s,3H),1.27(t,J＝7.0Hz,3H)
实施例43、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-乙基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物060)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(2-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物060)的合成
将中间体60-1(33.30mg,122.37μmol),中间体32-1(30mg,81.58μmol)，Cs2CO3(53.16mg,163.16μmol),Pd(dtbpf)Cl2(5.32mg,8.16μmol)溶于dioxane/H2O(4:1)(5mL)中。在氮气环境下90℃搅拌反应12小时。LC-MS检测反应完毕。将反应液减压浓缩至干，制备HPLC纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:48％-68％,10min)。得标题化合物(5mg)。
MS m/z(ESI):478.2[M+H]+。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ＝8.94(s,1H),8.25(d,J＝9.5Hz,2H),8.01(s,1H),7.75(d,J＝8.4Hz,1H),7.63(d,J＝8.4Hz,1H),7.51-7.41(m,2H),7.39(s,2H),7.21-6.72(m,1H),4.38(q,J＝7.0Hz,2H),4.19(q,J＝6.9Hz,2H),1.55(t,J＝7.3Hz,3H),1.26(t,J＝7.0Hz,3H)。
实施例44、6-(1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物061)
步骤1：6-(1-环丙基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物061)的合成
将起始原料61-1(46.36mg,163.16μmol，可根据专利WO 2016057834报道方法合成)，中间体32-1(50mg,135.97μmol)，碳酸铯(88.60mg,271.94μmol)，Pd(dtbpf)Cl2(8.86mg,13.60μmol)溶于二氧六环/水(4:1)(5mL)。在氮气环境下90℃搅拌反应12小时。LC-MS检测反应完毕。将反应液减压蒸干后，高效液相制备色谱(色谱柱：Gemini NX C18 5μm*10*150mm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％：48％-68％，2min)得标题化合物(11mg)。
MS m/z(ESI):490.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ8.83(s,1H),8.13(s,1H),7.99(s,1H),7.96(s,1H),7.85(d,J＝8.5Hz,1H),7.62-7.51(m,1H),7.43-7.32(m,4H),6.62(t,J＝74Hz,1H),4.23(q,J＝7.0Hz,2H),3.54-3.33(m,1H),1.35-1.30(m,3H),1.18(d,J＝5.5Hz,2H),1.08(s,2H)
实施例45、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-甲基-1H-苯并[d][1,2,3]三唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物062)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-甲基-1H-苯并[d][1,2,3]三唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物062)的合成
将起始原料62-1(35.23mg,135.97μmol,可根据专利WO 2019000237报道方法合成)和中间体32-1(50mg,135.97μmol)溶于1,4-二氧六环(0.8mL)和水(0.2mL)中，加入碳酸铯(88.60mg,271.94μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(8.86mg,13.60μmol)。在氮气保护下，反应液100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。反应液减压过滤，滤液减压浓缩至干.经制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％：45％-65％，11min).得标题化合物(16.3mg)。
MS m/z(ESI):465.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 9.04(s,1H),8.39(s,1H),8.20(s,1H),8.09(d,J＝8.8Hz,1H),7.73(d,J＝9.3Hz,1H),7.47(d,J＝8.3Hz,2H),7.37(d,J＝7.0Hz,2H),7.36(t,J＝73.6Hz,1H),4.33(s,3H),4.25-4.16(m,2H),1.22(t,J＝6.9Hz,3H).
实施例46、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物063)
步骤1：6-(8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-7-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-1-甲酸叔丁酯(中间体63-2)的合成
将起始原料63-1(58.45mg,163.16μmol,可根据专利WO 2011055215报道方法合成)，中间体32-1(50mg,135.97μmol,1eq)，碳酸铯(88.60mg,271.94μmol,2eq)，Pd(dtbpf)Cl2(8.86mg,13.60μmol,0.1eq)溶于二氧六环/水(4:1)(5mL)。在氮气环境下90℃搅拌反应12小时。LC-MS检测反应完毕。将反应液减压浓缩后，制备薄层色谱(二氧化硅,DCM:MeOH＝7:1)。得标题化合物(30mg)。
MS m/z(ESI):564.2[M+H]+。
步骤2：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物063)的合成
将中间体63-2(25mg,44.36μmol)溶于二氯甲烷(1mL)中，滴加三氟乙酸(1.54g,13.51mmol)。室温搅拌反应3小时。LC-MS检测反应完毕。将反应液减压浓缩后，高效液相制备色谱(色谱柱：YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相:[water(0.05％ammoniahydroxide v/v)-ACN]；B％:40％-60％,11分钟).得标题化合物(2.3mg)。
MS m/z(ESI):464.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ8.94(s,1H),8.18(s,1H),7.89(m,1H),7.56(s,2H),7.46-7.41(m,2H),7.40-7.34(m,2H),6.97(t,J＝74Hz，1H),4.19(m,J＝7.0Hz,2H),2.61(s,3H),1.26(s,3H)
实施例47、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(2-(2-吗啉基乙基)-2H-吲唑-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物064)
步骤1：2-(5-(8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-7-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)-2H-吲唑-2-基)乙基甲磺酸酯(中间体64-1)的合成
将化合物052(100mg,202.65μmol)溶于二氯甲烷(2mL)中，反应液降温至0℃加入甲磺酰氯(25.54mg,222.92μmol)和三乙胺(41.01mg,405.30μmol)。反应液在0℃搅拌10min后升至25℃搅拌反应30min。LCMS检测反应完毕。将反应液加饱和食盐水(50mL)稀释，加入二氯甲烷(50mL)萃取三次，有机层减压浓缩至干。得标题化合物粗品(300mg)，直接用于下一步。
MS m/z(ESI):572.3[M+H]+。
步骤2：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(2-(2-吗啉基乙基)-2H-吲唑-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物064)的合成
将中间体64-1(300mg,524.89μmol)溶于无水甲醇(3mL)中，室温加入吗啡啉(457.28mg,5.25mmol)，室温搅拌10min升温至60℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。反应液减压过滤，滤液减压浓缩至干.经制备液相色谱纯化(色谱柱：Gemini NX C18 5μm*10*150mm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％：24％-64％，9min)得标题化合物(6.4mg)。
MS m/z(ESI):563.2[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.00(s,1H),8.47(s,1H),8.25(s,1H),8.10(s,1H),7.64(d,J＝9.3Hz,1H),7.57-7.51(m,1H),7.49-7.42(m,2H),7.36(t,J＝74Hz,1H),7.39-7.33(m,2H),4.56(t,J＝6.3Hz,2H),4.20(q,J＝7.0Hz,2H),3.56-3.50(m,4H),2.94-2.82(m,2H),2.43(s,4H),1.26-1.17(m,3H)
实施例48、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(2-(2-羟基乙基)-2H-吲唑-5-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物065)
步骤1：2-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-2H-吲唑-2-基)乙烷-1-醇(中间体65-2)的合成
将起始原料65-1(100mg,414.79μmol,可根据专利WO 2015036964报道方法合成)溶于1,4-二氧六环(1mL)中，加入双联频哪醇硼酸酯(115.87mg,456.27μmol)，醋酸钾(122.12mg,1.24mmol)和Pd(dppf)Cl2(30.35mg,41.48μmol)。氮气保护下，反应液于100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。将反应液用乙酸乙酯(50mL)稀释，水洗有机层三次(50mL)，有机层减压浓缩至干。经制备薄层色谱纯化(二氧化硅,乙酸乙酯＝100％)，得标题化合物(60mg)。
MS m/z(ESI):289.1[M+H]+。
步骤2：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(2-(2-羟基乙基)-2H-吲唑-5-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物065)的合成
将中间体65-2(52.56mg,182.39μmol)和中间体38-4(50mg,121.60μmol)溶于1,4-二氧六环(0.8mL)和水(0.2mL)中，加入碳酸铯(79.24mg,243.19μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(7.92mg,12.16μmol)。在氮气保护下，反应液100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。反应液减压过滤，滤液减压浓缩至干。经制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18150*30mm*5μm；流动相:[water(0.05％ammonia hydroxide v/v)-ACN]；B％：50％-70％，11min)得标题化合物(21.9mg)。
MS m/z(ESI):493.3[M+H]+。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ8.32(s,1H),8.15(s,1H),8.11-8.05(m,2H),7.66(s,2H),7.45-7.32(m,4H),6.96(t,J＝74Hz,1H),6.71(d,J＝8.5Hz,1H),4.56(t,J＝5.4Hz,2H),4.09-3.97(m,4H),1.17(t,J＝7.0Hz,3H).
实施例49、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(2-(羟甲基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物066)
步骤1：(1-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)甲醇(中间体66-2)的合成
将起始原料66-1(300mg,1.24mmol,可根据WO 2007135527报道方法合成)和双联频哪醇硼酸酯(473mg,1.87mmol)溶于无水二氧六环(6mL)中，向其中加入乙酸钾(366.38mg,3.73mmol)和Pd(dppf)Cl2(101.2mg,124.44μmol)，反应液于氮气保护下100℃搅拌16h。LC-MS检测反应完毕。待反应冷却至室温，依次加入水(20mL)和乙酸乙酯(20mL),有机相用水(10mL*2)洗涤，洗涤后的有机相用适量无水硫酸钠干燥。经制备薄层色谱法(二氧化硅，二氯甲烷：甲醇＝10:1)得标题化合物(56mg)。
MS m/z(ESI):289.2[M+H]+。
步骤2：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(2-(羟甲基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物066)的合成
将中间体66-2(52.56mg,182.39μmol)和中间体38-4(50mg,121.60μmol)溶于二氧六环(2mL)和水(0.5mL)中，向其中加入碳酸铯(79.24mg,243.19μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(7.92mg,12.16μmol)，反应液于氮气保护下90℃搅拌16h。LC-MS检测反应完毕。反应液过滤，减压浓缩至干，经制备HPLC纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:45％-65％，10分钟)得标题化合物(3.0mg)。
MS m/z(ESI):493.2[M+H]+。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.20(s,1H),8.10(d,J＝8.5Hz,1H),7.95(s,1H),7.73-7.68(m,1H),7.65-7.60(m,1H),7.44-7.38(m,4H),6.96(t,J＝74Hz,1H),6.72(d,J＝8.5Hz,1H),5.00-4.99(m,2H),4.04(q,J＝7.0Hz,2H),3.97(s,3H),1.19-1.15(m,3H).
实施例50、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-3-(2-((二甲氨基)甲基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-7-乙氧基-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物069)
步骤1：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-3-(2-((二甲氨基)甲基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-7-乙氧基-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物069)的合成
将中间体69-1(40mg,126.90μmol,可参考WO2016057834A1第412页实施例365-366，且将起始原料二甲胺替代吡咯烷得到)和中间体38-4(52.18mg,126.90μmol)溶于无水二氧六环(2mL)和水(0.5mL)中，向其中加入碳酸铯(82.69mg,253.80μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(8.27mg,12.69μmol)。反应液于氮气保护下90℃搅拌16h。LC-MS检测反应完毕。反应液减压浓缩至干，经制备HPLC纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:25％-45％,11min)得标题化合物(1.4mg)。
MS m/z(ESI):520.2[M+H]+。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.52(br s,1H,HCOOH)，8.19(s,1H),8.10(d,J＝8.5Hz,1H),7.94(s,1H),7.74-7.68(m,1H),7.64-7.58(m,1H),7.45-7.34(m,4H),7.16-6.77(m,1H),6.72(d,J＝8.5Hz,1H),4.04(d,J＝7.0Hz,2H),3.95(s,3H),3.83(s,2H),2.36(s,6H),1.17(t,J＝7.0Hz,3H).
实施例51、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物072)
步骤1：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物072)的合成
在氮气氛围下，将中间体38-4(50mg,121.95μmol)和起始原料72-1(42.9mg,182.92μmol)溶解于0.8mL二氧六环和0.4mL水的混合溶液中。随后，向其中依次加入碳酸铯(118.9mg,365.85μmol)以及Pd(dtbpf)Cl2(10mg,12.36μmol)。将反应液加热到90℃反应15小时。通过TLC监控，反应完全。将反应液冷却至室温，过滤，收集滤液。滤液经制备高压制备纯化[YMC-Actus Triart C18柱5μm二氧化硅，30mm直径，150mm长度；用水(含有0.05％NH4HCO3)和乙腈的极性递减的混合物作为洗脱液；乙腈梯度比例70％-82％,洗脱时间12分钟]，得到标题化合物(9.10mg)。
MS m/z(ESI):440.3[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.34(d,J＝2.6Hz,1H),8.21(s,1H),8.10(d,J＝8.5Hz,1H),7.90–7.85(m,1H),7.44–7.29(m,5H),6.73(d,J＝8.4Hz,1H),6.47(d,J＝9.5Hz,1H),4.03–3.94(m,2H),3.49(s,3H),1.08(t,J＝7.0Hz,3H).
实施例52、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(2-(2-吗啉基乙基)-2H-吲唑-5-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物080)
步骤1：4-(2-(5-溴-2H-吲唑-2-基)乙基)吗啉(中间体80-2)的合成
将起始原料80-1(1g,4.35mmol)和N-(2-氨基乙基)吗啉(622.59mg,4.78mmol)溶于异丙醇(50mL)中，反应液于80℃搅拌反应4h。冷却到25℃之后加入三丁基磷(2.64g,13.04mmol,3.22mL)，反应液于80℃搅拌反应16小时。LCMS检测反应完毕。将反应液用乙酸乙酯(100mL)稀释，水洗有机层三次(100mL)，有机层减压浓缩至干，得标题化合物粗品(900mg)，直接用于下步反应。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.36(s,1H),7.99-7.94(m,1H),7.59(d,J＝9.0Hz,1H),7.31(dd,J＝1.9,9.2Hz,1H),4.59(t,J＝5.3Hz,2H),3.29(t,J＝5.6Hz,2H),3.23(s,3H)
步骤2：4-(2-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-2H-吲唑-2-基)乙基)吗啉(中间体80-3)的合成
将中间体80-2(200mg,644.77μmol)溶于1,4-二氧六环(2.5mL)中，加入双联频哪醇硼酸酯(245.60mg,967.15μmol)，醋酸钾(189.84mg,1.93mmol)和Pd(dppf)Cl2(47.18mg,64.48μmol)。氮气保护下，反应液于100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。将反应液用乙酸乙酯(50mL)稀释，水洗有机层三次(50mL)，有机层减压浓缩至干。经制备薄层色谱纯化(二氧化硅,乙酸乙酯:甲醇＝30:1)，得标题化合物(130mg,430.21μmol)。
MS m/z(ESI):358.2[M+H]+。
步骤3：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(2-(2-吗啉基乙基)-2H-吲唑-5-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物080)的合成
将中间体80-3(130.32mg,364.79μmol)和中间体38-4(100mg,243.19μmol)溶于1,4-二氧六环(1.2mL)和水(0.3mL)中，加入碳酸铯(158.47mg,486.38μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(15.85mg,24.32μmol)。在氮气保护下，反应液100℃搅拌反应16小时。LCMS检测反应完毕。反应液减压过滤，滤液减压浓缩至干.经制备液相色谱纯化(色谱柱:Phenomenex GeminiC18 250*50mm*10μm；流动相:[A:水(0.05％氨水v/v),B:乙腈]；B％:53％-73％,9分钟).得标题化合物(33.9mg)。
MS m/z(ESI):562.2[M+H]+。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δppm 8.35(s,1H),8.15(s,1H),8.12-8.05(m,2H),7.66(d,J＝1.0Hz,2H),7.43-7.33(m,4H),6.96(t,J＝74Hz,1H),6.71(d,J＝8.3Hz,1H),4.88-4.66(m,2H),4.03(q,J＝7.0Hz,2H),3.70-3.63(m,4H),2.98(t,J＝6.4Hz,2H),2.56-2.48(m,4H),1.17(t,J＝7.0Hz,3H)。
实施例53、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(1-甲基-2-(((氧杂环丁-3-基甲基)氨基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物081)
步骤1：(6-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-2-氧代-1,2-二氢-1,8-二氮杂萘-3-基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)甲基乙磺酸酯(中间体81-1)的合成
将化合物066(30.0mg,0.061mmol)溶于THF(0.3mL)中，向上述反应液中依次加入三乙胺(12.34mg,0.122mmol)和乙磺酰氯(11.82mg,0.092mmol)。加完，室温搅拌2h。TLC检测反应完毕，反应液倒入水(1mL)中，乙酸乙酯萃取三次(0.5mL*3)。将合并后的有机相用饱和食盐水(1mL)洗涤，有机层用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液减压浓缩至干得标题化合物粗品(35.6mg)，直接投入下一步。
步骤2：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(1-甲基-2-(((氧杂环丁-3-基甲基)氨基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物081)的合成
将中间体81-1(35.6mg,crude)溶于MeCN(0.5mL)中，加入K2CO3(16.86mg,0.122mmol)和3-氨甲基氧杂环丁烷(8.02mg,0.092mmol),加完反应液室温搅拌2h。LC-MS检测反应完毕。将反应液过滤，滤液经制备高压制备纯化[YMC-Actus Triart C18柱5μm二氧化硅，30mm直径，150mm长度；用水(含有0.05％NH4HCO3)和乙腈的极性递减的混合物作为洗脱液；乙腈梯度比例20％-60％,洗脱时间12分钟]，得标题化合物(10.0mg)。
MS m/z(ESI):562.2[M+H]+。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.17(s,1H),8.07(d,J＝8.5Hz,1H),7.94(d,J＝1.6Hz,1H),7.69(d,J＝8.4Hz,1H),7.61(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),7.42–7.31(m,4H),6.94(t,J＝73.8Hz,1H),6.69(d,J＝8.4Hz,1H),4.62-4.53(m,2H),4.46(t,J＝5.7Hz,2H),4.32(s,2H),4.01(q,J＝7.0Hz,2H),3.89(s,3H),3.26–3.20(m,2H),1.38–1.24(m,1H),1.15(t,J＝7.0Hz,3H).
实施例54、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(2-异丁基-2H-吲唑-5-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物082)
步骤1：5-溴-2-异丁基-2H-吲唑(中间体82-2)的合成
在25℃下，往起始原料82-1(1g,4.35mmol)的异丙醇(50mL)溶液中加入异丁胺(349.76mg,4.78mmol)，氮气保护。混合物在25℃搅拌10分钟，然后加热到80℃反应4小时。然后降温到25℃后加入三丁基膦(2.64g,13.04mmol)。反应在80℃反应16小时。LC-MS显示原料已经全部反应完。反应液以乙酸乙酯(150mL)和水(150mL)萃取分层.有机相旋干，残留物以柱层析纯化(二氧化硅，石油醚/乙酸乙酯＝1/0到5/1)，得标题化合物(0.93g)。
MS m/z(ESI):253.1[M+H]+。
步骤2：2-异丁基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-2H-吲唑(中间体82-3)的合成
将中间体82-2(320.00mg,1.26mmol)，Pd(dppf)Cl2(92.50mg,126.41μmol)，醋酸钾(372.19mg,3.79mmol)和双联频哪醇硼酸酯(353.11mg,1.39mmol)溶解于二氧六环(10mL)，反应在氮气氛下，100℃搅拌反应15小时。LC-MS监测已完全反应。反应液以水(20ml)稀释，乙酸乙酯60mL(20mL*3)萃取，有机相以硫酸钠干燥后，过滤，旋干。残留物以柱层析纯化(二氧化硅,石油醚/乙酸乙酯＝1/0到10/1)，得标题化合物(287mg)。
MS m/z(ESI):301.2[M+H]+。
步骤3：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(2-异丁基-2H-吲唑-5-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物082)的合成
将中间体82-3(116.81mg,389.11μmol)和中间体38-4(80mg,194.55μmol)的混合溶液水(1.25mL)和二氧六环(5mL)中加入碳酸铯(126.78mg,389.11μmol)和催化剂Pd(dtbpf)Cl2(12.68mg,19.46μmol)，90℃反应15h。LC-MS监测已完全反应。反应液以水20ml淬灭，以乙酸乙酯(10mL*3)萃取，合并有机相旋干，残留物以高效液相色谱法纯化(碱性条件,色谱柱:Phenomenex Gemini C18 250*50mm*10μm；流动相:[A:水(0.05％氨水v/v),B:乙腈]；B％:60％-80％,9分钟)，得标题化合物(48.5mg)。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ8.28(s,1H),8.15(s,1H),8.10(d,J＝1.0Hz,1H),8.08(d,J＝8.5Hz,1H),7.66(d,J＝1.3Hz,2H),7.44-7.38(m,2H),7.38-7.34(m,2H),7.18-6.96(t,J＝76Hz,1H),6.71(d,J＝8.5Hz,1H),4.28(d,J＝7.5Hz,2H),4.03(q,J＝7.0Hz,2H),2.45-2.32(m,J＝6.8,13.7Hz,1H),1.17(t,J＝7.0Hz,3H),0.97(d,J＝6.8Hz,6H)。
MS m/z(ESI):505.2[M+H]+。
实施例55、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(2-(2-甲氧基乙基)-2H-吲唑-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物059)
步骤1：2-(2-甲氧基乙基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-2H-吲唑(中间体59-2)的合成
将起始原料59-1(250mg,979.97μmol,可根据专利WO 2012002577报道方法合成)溶于1,4-二氧六环(4mL)中，加入双联频哪醇硼酸酯(273.74mg,1.08mmol)，醋酸钾(288.52mg,2.94mmol)和Pd(dppf)Cl2(71.70mg,98.00μmol)。氮气保护下，反应液于100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。将反应液用乙酸乙酯(100mL)稀释，有机层用水萃洗三次(100mL)，有机层减压浓缩至干。经柱层析纯化得标题化合物(130mg)。
MS m/z(ESI):303.1[M+H]+。
步骤2：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(2-(2-甲氧基乙基)-2H-吲唑-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物059)的合成
将中间体59-2(61.63mg,203.95μmol)和中间体32-1(50mg,135.97μmol)溶于1,4-二氧六环(1.2mL)和水(0.3mL)中，加入碳酸铯(88.60mg,271.94μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(8.86mg,13.60μmol)。在氮气保护下，反应液100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。反应液减压过滤，滤液减压浓缩至干.经制备液相色谱纯化(色谱柱:Phenomenex Gemini C18250*50mm*10μm；流动相:([A:水(0.05％氨水v/v),B:乙腈]；B％:45％-65％,9分钟).得标题化合物(39.3mg)。
MS m/z(ESI):508.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ8.93(s,1H),8.32(s,1H),8.19(s,1H),8.11(s,1H),7.70-7.62(m,2H),7.48-7.41(m,2H),7.41-7.33(m,2H),6.97(t,J＝73.8,1H),4.66-4.63(m,2H),4.19(q,J＝7.2Hz,2H),3.90(t,J＝5.1Hz,2H),3.34(s,3H),1.26(t,J＝7.2Hz,3H).
实施例56、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(2-羟基-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物070)
步骤1：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(2-羟基-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物070)的合成
将中间体70-1(50.00mg,182.39μmol)和中间体38-4(50mg,121.60μmol)溶于1,4-二氧六环(0.8mL)和水(0.2mL)中，加入碳酸铯(79.24mg,243.19μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(7.92mg,12.16μmol)。在氮气保护下，反应液100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。反应液减压过滤，滤液减压浓缩至干.经制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18150*30mm*5μm；流动相:([A:水(0.05％氨水v/v),B:乙腈]；B％:50％-70％,11分钟).得标题化合物(22.6mg)。
MS m/z(ESI):479.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ8.12(s,1H),8.07(d,J＝8.5Hz,1H),7.52(s,1H),7.47-7.42(m,1H),7.41-7.35(m,4H),7.16-7.12(m,1H),6.96(t,J＝73.6Hz,1H),6.70(d,J＝8.5Hz,1H),4.03(q,J＝7.0Hz,2H),3.44(s,3H),1.16(t,J＝7.0Hz,3H)
实施例57、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物077)
步骤1：3-((5-溴-2-硝基苯基)氨基)氮杂环丁烷-1-甲酸苄酯(中间体77-2)的合成
将起始原料77-1(1.07g,4.85mmol)和3-氨基氮杂环丁烷-1-甲酸苄酯(1g,4.85mmol)溶于四氢呋喃(15mL)中，加入三乙胺(490.64mg,4.85mmol)，反应液在25℃搅拌反应20h。LCMS检测反应完毕。将反应液加水(100mL)稀释，加入乙酸乙酯(100mL)萃取三次，有机层减压浓缩至干。得标题化合物(2g)。
MS m/z(ESI):406.0[M+H]+。
步骤2：3-(6-溴-1H-苯并[d]咪唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸苄酯(中间体77-3)的合成
将中间体77-2(650mg,1.60mmol)溶于无水异丙醇(7mL)中，室温加入铁粉(893.56mg,16.00mmol)，氯化铵(855.90mg,16.00mmol)和甲酸(3.76g,80.00mmol)。室温搅拌10min升温至100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。反应液减压过滤，滤液减压浓缩至干。经柱层析纯化(12g硅胶柱，0～100％乙酸乙酯/石油醚:50毫升/分钟)。得标题化合物(300mg)。
MS m/z(ESI):386.0[M+H]+。
步骤3：3-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸苄酯(中间体77-4)的合成
将中间体77-3(300mg,776.72μmol)溶于1,4-二氧六环(4mL)中，加入双联频哪醇硼酸酯(295.86mg,1.17mmol)，醋酸钾(228.69mg,2.33mmol)和Pd(dppf)Cl2(56.83mg,77.67μmol)。氮气保护下，反应液于100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。将反应液用乙酸乙酯(50mL)稀释，有机层用水萃洗三次(50mL)，有机层减压浓缩至干。经柱层析纯化(12g硅胶柱，0～100％乙酸乙酯/石油醚:50毫升/分钟)，得标题化合物(160mg)。
MS m/z(ESI):434.1[M+H]+。
步骤4：3-(6-(8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-7-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)-1H-苯并[d]咪唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸苄酯(中间体77-5)的合成
将中间体77-4(160mg,369.25μmol)和中间体32-1(100mg,271.94μmol)溶于1,4-二氧六环(2mL)和水(0.5mL)中，加入碳酸铯(177.20mg,543.87μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(17.72mg,27.19μmol)。在氮气保护下，反应液100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。反应液减压过滤，滤液减压浓缩至干.经制备薄层色谱纯化(二氧化硅,乙酸乙酯:甲醇＝30:1)得标题化合物(100mg)。
MS m/z(ESI):639.5[M+H]+。
步骤5：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物077)的合成
将中间体77-5(90mg,140.93μmol)溶于甲醇(2mL)中，加入钯碳(8.99mg,8.44μmol,10％纯度)，在氢气氛下，反应液在25℃搅拌反应32h。LCMS检测反应完毕。反应液减压过滤，滤液减压浓缩至干。经制备液相色谱纯化(色谱柱:Phenomenex Gemini C18 250*50mm*10μm；流动相:[水(0.05％氨水v/v)-乙腈]；B％:40％-60％,9分钟)，得标题化合物(9.8mg)。
MS m/z(ESI):519.2[M+H]+。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ8.95(s,1H),8.50(s,1H),8.25(s,1H),8.05(s,1H),7.77(d,J＝8.0Hz,1H),7.66(d,J＝8.0Hz,1H),7.47-7.42(m,2H),7.41-7.35(m,2H),6.98(t,J＝73.8Hz,1H),5.23-5.16(m,1H),4.19(q,J＝7.0Hz,2H),4.03-3.96(m,2H),3.74-3.65(m,2H),2.52(s,3H),1.32-1.22(m,3H)
实施例58、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-甲基-2-(2-吗啉基乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物084)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-甲基-2-(2-吗啉基乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物084)的合成
将起始原料84-1(75.72mg,203.95μmol，可根据专利WO 2016057834报道方法合成)和中间体32-1(50mg,135.97μmol)溶于二氧六环(2mL)和水(0.5mL)中，向反应液中加入碳酸铯(88.60mg,271.94μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(8.86mg,13.60μmol)，反应液于氮气保护下90℃搅拌16h。LC-MS检测反应完毕。反应液过滤，减压浓缩至干，经制备HPLC纯化(色谱柱:Boston Prime C18 150*30mm*5μm；流动相:[A:水(0.05％氨水v/v),B:乙腈]；B％:45％-68％，9分钟)得标题化合物(15mg)。
MS m/z(ESI):577.2[M+H]+。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δppm 8.93(s,1H),8.21(s,1H),7.90(s,1H),7.69-7.63(m,1H),7.62-7.55(m,1H),7.48-7.41(m,2H),7.40-7.33(m,2H),6.80(t,J＝74Hz,1H),4.20-4.15(m,2H),3.87(s,3H),3.79-3.70(m,4H),3.19(t,J＝7.5Hz,2H),2.92(t,J＝7.5Hz,2H),2.78-2.60(m,4H),1.26(t,J＝7.2Hz,3H).
实施例59、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(1-甲基-2-(2-吗啉基乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物085)
步骤1：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(1-甲基-2-(2-吗啉基乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物085)的合成
将起始原料84-1(67.72mg,182.39μmol)和中间体38-4(50mg,121.60μmol)溶于二氧六环(2mL)和水(0.5mL)中，向反应液中加入碳酸铯(79.24mg,243.19μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(7.92mg,12.16μmol)，反应液于氮气保护下90℃搅拌16h。LC-MS检测反应完毕。反应液过滤，减压浓缩至干，经制备HPLC纯化(色谱柱:Gemini NX C18 5μm*10*150mm；流动相:(A:0.05％氨水(v/v),B:乙腈；B％:53％-73％，9分钟)，得标题化合物(28.1mg)。
MS m/z(ESI):576.3[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.22(s,1H),8.16(d,J＝8.5Hz,1H),7.90(s,1H),7.60-7.54(m,1H),7.52-7.48(m,1H),7.46-7.39(m,2H),7.34(d,J＝74Hz,1H),7.39-7.30(m,2H),6.72(d,J＝8.3Hz,1H),3.95(q,J＝7.0Hz,2H),3.76(s,3H),3.61-3.56(m,4H),3.11-3.02(m,2H),2.82-2.75(m,2H),2.49-2.45(m,4H),1.09(t,J＝7.0Hz,3H)。
实施例60、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(2-(2-(3-羟基吡咯烷-1-基)乙基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物086)
步骤1：2-(6-溴-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基甲磺酸酯(中间体86-2)的合成
将起始原料86-1(2g,7.84mmol)溶于二氯甲烷(28mL)中，向混合液中加入三乙胺(1.59g,15.68mmol)，待反应液温度降低至0℃，向反应液中缓慢加入甲基磺酰氯(1.08g,9.41mmol)反应液于氮气保护下25℃搅拌1h。LC-MS检测反应完毕。反应液用二氯甲烷和水萃取，有机相用水洗涤三次，并用无水硫酸钠除去多余水分后，减压浓缩至干得化合物2(2.6g)。
MS m/z(ESI):333.0[M+H]+。
步骤2：1-(2-(6-溴-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)吡咯烷-3-醇(中间体86-3)的合成
将中间体86-2(1.3g,3.90mmol)和3-羟基吡咯烷(679.81mg,7.80mmol)溶于甲醇(17mL)中，向混合物中加入三乙胺(789.59mg,7.80mmol)反应液于氮气保护下40℃搅拌16h。LC-MS检测反应完毕。待反应冷却至室温，减压浓缩除去甲醇后，用乙酸乙酯(30mL)和水(60mL)萃取,有机相用水洗涤三次(20mL X 3)。经制备柱层析法(二氯甲烷：甲醇＝50：1至10：1)得标题化合物(1.18g)。
MS m/z(ESI):324.1[M+H]+。
步骤3：6-溴-2-(2-(3-((叔丁基二苯基硅基)氧代)吡咯烷-1-基)乙基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(中间体86-4)的合成
将中间体86-3(500mg,1.54mmol)溶于无水二氯甲烷(7mL)中，向其中加入三乙胺(1.59g,15.68mmol)，4-二甲氨基吡啶(18.84mg,154.22μmol)和叔丁基二苯基氯硅烷(508.66mg,1.85mmol)，反应液于氮气保护下25℃搅拌16h。LC-MS检测反应完毕。反应液用水(60mL)和二氯甲烷(20mL)萃取，有机相用水(20mL*2)洗涤两次，洗涤后的有机相用适量无水硫酸钠干燥，减压浓缩至干。经制备柱层析法(二氧化硅，二氯甲烷：甲醇＝100：1至10:1)得标题化合物(600mg)。
MS m/z(ESI):562.2[M+H]+。
步骤4：2-(2-(3-((叔丁基二苯基硅基)氧代)吡咯烷-1-基)乙基)-1-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(中间体86-5)的合成
将中间体86-4(590mg,1.05mmol)和双联频哪醇硼酸酯(532.60mg,2.10mmol)溶于无水1，4-二氧六环(10mL)中，向混合物中加入Pd(dppf)Cl2(38.37mg,52.43μmol)和乙酸钾(308.76mg,3.15mmol)，反应液于氮气保护下100℃搅拌16h。LC-MS检测反应完毕。待反应冷却至室温，用水(100mL)和乙酸乙酯(50mL)萃取，有机相用水(100mL*2)洗涤两次，洗涤后的有机相用适量无水硫酸钠干燥，减压浓缩至干。经制备柱层析法(二氧化硅，二氯甲烷：甲醇＝40：1至10:1)得标题化合物(350mg)。
MS m/z(ESI):610.4[M+H]+。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δppm 7.69-7.61(m,6H),7.48-7.35(m,7H),4.52-4.43(m,1H),3.83(s,3H),3.19-2.94(m,5H),2.83-2.68(m,3H),2.08-1.98(m,1H),1.94-1.83(m,1H),1.39(s,12H),1.07(s,9H).
步骤5：3-(2-(2-(3-((叔丁基二苯基硅基)氧代)吡咯烷-1-基)乙基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(中间体86-6)的合成
将中间体86-5(111.20mg,182.39μmol)和中间体38-4(50mg,121.60μmol)溶于无水二氧六环(2mL)和水(0.5mL)中，向混合物中加入碳酸铯(79.24mg,243.19μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(7.92mg,12.16μmol)，反应液于氮气保护下，90℃搅拌16h。LC-MS检测反应完毕。待反应冷却至室温，依次加入水(40mL)和乙酸乙酯(20mL),有机相用水(20mL*2)洗涤，洗涤后的有机相用适量无水硫酸钠干燥，减压浓缩至干得标题化合物(98mg)。
MS m/z(ESI):814.4[M+H]+。
步骤6：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(2-(2-(3-羟基吡咯烷-1-基)乙基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物086)的合成
将中间体86-6(98mg,120.39μmol)和无水四氢呋喃(2mL)中，向反应液中加入四丁基氟化氨(1M,180.59μL)，反应液于氮气保护下25℃搅拌16h。LC-MS检测反应完毕。反应液减压浓缩至干，经制备HPLC纯化(色谱柱:Boston Prime C18 150*30mm*5μm；流动相:水(0.05％氨水v/v)-乙腈；B为乙腈,B％:55％-78％，9分钟)得标题化合物(4.1mg)。
MS m/z(ESI):576.2[M+H]+。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ8.17(s,1H),8.08(d,J＝8.5Hz,1H),7.90(s,1H),7.70-7.63(m,1H),7.60-7.55(m,1H),7.45-7.32(m,4H),6.96(t,J＝74.4Hz,1H),6.71(d,J＝8.5Hz,1H),4.45-4.34(m,1H),4.03(q,J＝7.0Hz,2H),3.87(s,3H),3.27-3.16(m,2H),3.10-3.05(m,2H),2.99-2.89(m,2H),2.76-2.66(m,2H),2.25-2.16(m,1H),1.82-1.77(m,1H),1.17(t,J＝7.0Hz,3H).
实施例61、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(2-(2-(3-羟基吡咯烷-1-基)乙基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物091)
步骤1：1-(2-(1-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)吡咯烷-3-醇(中间体91-1)的合成
将中间体86-3(300mg,925.31μmol)和双联频哪醇硼酸酯(352.46mg,1.39mmol)溶于1，4-二氧六环(7mL)中，向混合液中加入Pd(dppf)Cl2(67.71mg,92.53μmol)和乙酸钾(272.44mg,2.78mmol)，反应液于氮气保护下100℃搅拌16h。LC-MS检测反应完毕。反应液用乙酸乙酯(20mL)和水(40mL)萃取，有机相用水(20mL*2)洗涤两次，并用无水硫酸钠除去多余水分后，减压浓缩至干，经制备薄层色谱法(乙酸乙酯：甲醇＝20：1)得标题化合物(60mg)。
MS m/z(ESI):372.2[M+H]+。
步骤2：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(2-(2-(3-羟基吡咯烷-1-基)乙基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物091)的合成
将中间体91-1(45mg,121.20μmol)和中间体32-1(37.14mg,101.00μmol)溶于1，4-二氧六环(2mL)和水(0.5mL)中，向混合物中加入Pd(dtbpf)Cl2(6.58mg,10.10μmol)和碳酸铯(65.82mg,202.00μmol)，反应液于氮气保护下90℃搅拌16小时。LC-MS检测反应完毕。待反应冷却至室温，减压浓缩除去二氧六环后，用乙酸乙酯(5mL)和水(15mL)萃取,有机相用水洗涤三次(5mL*3)。经HPLC纯化(色谱柱：Gemini-NX 150*30mm*5μm；流动相：水(0.225％甲酸)-乙腈；B为乙腈,B％:35％-55％,保留时间：9min)得标题化合物(2.2mg)。
MS m/z(ESI):577.2[M+H]+。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4):δ8.89(s,1H),8.54(s,0.65H，HCOOH),8.18(s,1H),7.90(s,1H),7.71-7.64(m,1H),7.61-7.55(m,1H),7.45-7.40(m,2H),7.39-7.34(m,2H),6.98(t,J＝74Hz,1H),4.18(q,J＝7.0Hz,2H),3.85(s,3H),3.55-3.47(m,2H),3.46-3.39(m,1H),3.39-3.33(m,2H),3.32-3.16(m,4H),2.32-2.25(m,1H),2.06-1.94(m,1H),1.26(t,J＝7.1Hz,3H).
实施例62、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(2-羟基-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物067)
步骤1：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(2-羟基-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物067)的合成
将反应物67-1(55.91mg,203.95μmol)和反应物32-1(50mg,135.97μmol)溶于1,4-二氧六环(0.8mL)和水(0.2mL)中，加入碳酸铯(88.60mg,271.94μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(8.86mg,13.60μmol)。在氮气保护下，反应液100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。反应液减压过滤，滤液减压浓缩至干。残余物经制备液相色谱纯化(色谱柱:YMC-Actus TriartC18 150*30mm*5μm；流动相:[A:水(0.05％氨水v/v),B:乙腈]；B为乙腈,B％:42％-62％,11分钟).得标题化合物(14.8mg)。
MS m/z(ESI):＝480[M+H]+。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δppm 8.93(s,1H),8.17(s,1H),7.52(s,1H),7.47-7.41(m,3H),7.40-7.35(m,2H),7.17-7.14(m,1H),6.97(t,J＝72Hz,1H),4.18(q,J＝7.0Hz,2H),3.44(s,3H),1.26(t,J＝7.2Hz,3H)
实施例63、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-甲氧基-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物068)
步骤1：6-氯-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-甲氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体63-1)的合成
将反应物3-1(480mg,1.197mmol)溶于甲醇(5ml)中，向其中缓慢滴入甲醇钠的甲醇溶液(0.44mL,2.40mmol)。25℃搅拌反应30min。LCMS监测，反应完成，减压浓缩后，向其中加入水稀释(10ml)并用乙酸乙酯萃取(5ml*3)。得到的有机相干燥，减压浓缩，得到标题化合物粗品(380mg)。直接用于下一步反应。
MS m/z(ESI):＝354[M+H]+。
步骤2：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-甲氧基-6-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物063)的合成
将中间体63-1(100mg,0.283mmol)和中间体63-2(87.8mg,0.34mmol)溶解于二氧六环(2ml)和水(1ml)中。氮气保护下向其中加入碳酸铯(277.0mg,0.849mmol)，随后加入Pd(dtbpf)Cl2(18.44mg,0.028mmol)。反应液加热到90℃，反应15小时。反应完成后，冷却至室温，向其中加入水(2ml)，并用乙酸乙酯萃取(5mL*3)。得到的有机相，减压旋干，得黄色油状物。通过HPLC-PREP[YMC-Actus Triart C18柱5μm二氧化硅，30mm直径，150mm长度；用水(含有0.05％NH4HCO3)和乙腈的极性递减的混合物作为洗脱液；乙腈梯度比例60％-72％,洗脱时间12分钟]纯化，得到标题化合物(41mg)。
MS m/z(ESI):＝450.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.06(s,1H),8.33(s,1H),8.27(s,1H),7.99-7.98(m,1H),7.74-7.72(m,1H),7.60-7.21(m,6H),3.88(s,3H),3.80(s,3H).
实施例64、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物071)
步骤1：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物071)的合成
在氮气气氛下，将中间体38-4(50mg,121.95μmol)和反应物71-1(42.9mg,182.92μmol)溶解于二氧六环(0.8mL)和水(0.4mL)中。向其中加入碳酸铯(118.9mg,365.85μmol)，随后加入Pd(dtbpf)Cl2(10mg,12.36μmol)。反应液于90℃搅拌15小时。TLC监控反应完成，将反应液冷却至室温，过滤，滤液通过HPLC-PREP[YMC-Actus Triart C18柱5μm二氧化硅，30mm直径，150mm长度；用水(含有0.05％NH4HCO3)和乙腈的极性递减的混合物作为洗脱液；乙腈梯度比例60％-72％,洗脱时间12分钟]纯化，得到标题化合物(7.2mg)。
MS m/z(ESI):＝440.2[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.55(d,J＝2.4Hz,1H),8.26(s,1H),8.16(d,J＝8.4Hz,1H),8.09(dd,J＝8.7,2.5Hz,1H),7.49–7.40(m,2H),7.36(d,J＝8.4Hz,3H),6.91(d,J＝8.6Hz,1H),6.75(d,J＝8.4Hz,1H),4.05–3.97(m,2H),3.92(s,3H),1.11(t,J＝7.0Hz,3H).
实施例65、3-(苯并[d]噁唑-6-基)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物073)
步骤1：3-(苯并[d]噁唑-6-基)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物073)的合成
在氮气氛围下，将反应物73-1(89.5mg,0.37mmol)和中间体38-4(100mg,0.24mmol)溶于二氧六环溶液中(5mL)中,加入水(1mL)，碳酸铯(158.6mg，0.48mmol)和Pd(dtbpf)Cl2(15mg，0.02mmol)，加完升温至100度搅拌12h。LCMS显示反应结束，将反应体系过滤，滤液减压浓缩后，残余物用MeCN(2mL)溶解后过滤，通过高压制备纯化[YMC-ActusTriart C18柱5μm二氧化硅，30mm直径，150mm长度；用水(含有0.05％NH4HCO3)和乙腈的极性递减的混合物作为洗脱液；乙腈梯度比例50％-82％,洗脱时间14分钟]，得标题化合物(7mg)。
MS m/z(ESI):＝450.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.23–8.03(m,1H),7.92(s,1H),7.83(dd,J＝11.4,8.4Hz,1H),7.72(d,J＝1.6Hz,1H),7.32(q,J＝9.0Hz,3H),6.77–6.40(m,3H),4.00(q,J＝7.1Hz,2H),1.18(t,J＝7.0Hz,3H).
实施例66、6-(1-(2-氨基乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物074)
步骤1：(2-(6-(8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-7-羰基-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)-1H-苯并[d]咪唑-1-基)乙基)氨基甲酸苄酯(中间体74-2)的合成
将反应物74-1(171.85mg,407.90μmol,可根据专利WO 2010027500类似方法合成)和中间体32-1(100mg,271.94μmol)溶于1,4-二氧六环(2mL)和水(0.5mL)中，加入碳酸铯(177.20mg,543.87μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(17.72mg,27.19μmol)。在氮气保护下，反应液100℃搅拌反应16h。LCMS检测反应完毕。反应液减压过滤，滤液减压浓缩至干.经制备薄层色谱纯化(二氧化硅,乙酸乙酯:甲醇＝30:1)得标题化合物(100mg)。
MS m/z(ESI):＝627[M+H]+。
步骤2：6-(1-(2-氨基乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物074)的合成
将反应物74-2(90mg,140.93μmol)溶于四氢呋喃(1.5mL)中，加入湿钯碳(200.00mg,187.93μmol,10％纯度)，室温在反应体系内加氢气(15psi)，反应液25℃搅拌反应48小时。LCMS检测反应完毕。反应液减压过滤，滤液减压浓缩至干。经制备液相色谱纯化(色谱柱:Phenomenex Gemini C18 250*50mm*10μm；流动相:[A:水(0.05％氨水v/v),B:乙腈]；B为乙腈,B％:38％-58％,9分钟)，得标题化合物(5.9mg)。
MS m/z(ESI):＝493[M+H]+。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ8.95(s,1H),8.26(d,J＝5.5Hz,2H),8.05(s,1H),7.77(d,J＝8.5Hz,1H),7.65(dd,J＝1.6,8.4Hz,1H),7.47-7.42(m,2H),7.41-7.35(m,2H),6.98(t,J＝73.8Hz,1H),4.40(t,J＝6.3Hz,2H),4.20(q,J＝7.0Hz,2H),3.15(t,J＝6.3Hz,2H),1.27(t,J＝7.2Hz,3H)
实施例67、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(4-(2-(甲基氨基)乙氧基)苯基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物078)
步骤1：(2-(4-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-2-羰基-1,2-二氢-1,8-二氮杂萘-3-基)苯氧基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(中间体76-2)的合成
在氮气气氛下，将反应物38-4(110mg,0.26mmol),反应物78-1(140mg,0.37mmol,可根据专利WO2013183578报道方法制备合成),Pd(dtbpf)Cl2(20mg,0.03mmoL)和Cs2CO3(240mg，0.78mmol)加入到dioxane(1mL)和H2O(0.2mL)中。反应液于100℃搅拌1h。TLC检测反应完毕。向反应液中加水(10mL)稀释，使用乙酸乙酯(20mL*3)萃取，合并有机相，干燥，柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝1：1)纯化，收集产品，减压浓缩得标题化合物(100mg)。
MS m/z(ESI):＝582[M+H]+。
步骤2：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(4-(2-(甲基氨基)乙氧基)苯基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物078)的合成
将反应物78-2(100mg,0.17mmol)溶于TFA(0.5mL)和DCM(0.5mL)中。室温搅拌1h，TLC检测反应完毕。将反应液减压浓缩，残余物通过HPLC-PREP(YMC-Actus Triart C18柱5μm二氧化硅，30mm直径，150mm长度；用水(含有0.05％NH4HCO3)和乙腈的极性递减的混合物作为洗脱液；乙腈梯度比例60％-75％,洗脱时间12分钟)纯化，得到标题化合物(13.2mg)。
MS m/z(ESI):＝482[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.17–8.10(m,2H),7.73–7.65(m,2H),7.45–7.31(m,5H),7.04–6.96(m,2H),6.72(d,J＝8.4Hz,1H),4.07(t,J＝5.6Hz,2H),4.00–3.89(m,2H),2.87(t,J＝5.6Hz,2H),2.37(s,3H),1.09(t,J＝7.0Hz,3H).
实施例68、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-3-(4-(2-(二甲氨基)乙氧基)苯基)-7-乙氧基-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物079)
步骤1：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-3-(4-(2-(二甲氨基)乙氧基)苯基)-7-乙氧基-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物079)的合成
将中间体38-4(60mg,0.146mmol)和反应物79-1(51.1mg,0.176mmol)溶解于二氧六环(1ml)和水(0.5ml)中。氮气保护下向其中加入碳酸铯(144.0mg,0.442mmol)，随后加入Pd(dtbpf)Cl2(12.0mg,0.018mmol)。反应液升温至90℃，搅拌15小时。反应完成后，冷却至室温，向其中加入水(2ml)，并用乙酸乙酯萃取(5mL*3)。将合并后的有机相，减压浓缩，残余物通过HPLC-PREP[YMC-Actus Triart C18柱5μm二氧化硅，30mm直径，150mm长度；用水(含有0.05％NH4HCO3)和乙腈的极性递减的混合物作为洗脱液；乙腈梯度比例60％-72％,洗脱时间12分钟]纯化，得标题化合物(25mg)。
MS m/z(ESI):＝496[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.16-8.15(m,2H),7.71-7.69(m,2H),7.56-7.19(m,5H),7.03-7.00(m,2H),6.73(d,J＝8.4Hz,1H),4.11(t,J＝5.8Hz,2H),3.96-3.95(m,2H),2.66(t,J＝5.8Hz,2H),2.25(s,6H),1.10(t,J＝7.0Hz,3H).
实施例69、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(1-甲基-2-((甲基(噁丁环-3-基甲基)氨基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物089)
步骤1：((6-溴-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)甲氧基)乙基磺酸酯(中间体89-2)的合成
将反应物89-1(100mg,0.415mmol)溶于四氢呋喃溶液(5mL)，加入三乙胺(62.9mg,0.622mmol)。冰水浴下，向上述反应液中加入乙基磺酰氯(79.99mg，3.79mmol)，加完20度搅拌4h。LCMS显示反应结束，将反应液倒入水(10mL)中，EA(15mL*2)萃取，有机相用饱和食盐水(20mL*2)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得标题化合物粗品(137.8mg)，直接用于下一步反应。
MS m/z(ESI):＝330[M+H]+。
步骤2：1-(6-溴-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-N-甲基-N-(噁丁环-3-基甲基)甲胺(中间体89-4)的合成
将反应物89-2(137.8mg,粗品)，碳酸钾(114.7mg，0.83mmol)和反应物89-3(63mg,0.623mmol)溶于乙腈溶液(2mL)中。加毕，25度搅拌4h。LCMS显示反应结束，将反应液过滤，滤液减压浓缩，得标题化合物粗品(134.5mg)。
MS m/z(ESI):＝324[M+H]+。
步骤3：N-甲基-1-(1-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-N-(噁丁环-3-基甲基)甲胺(中间体89-5)的合成
在氮气氛围下，将反应物89-4(134.5mg,粗品)溶于二氧六环溶液(2mL)中，加入双联频呐醇硼酸酯(158mg，0.623mmol)，醋酸钾(122.2mg，1.245mmol)和Pd(dppf)Cl2(45.36mg,0.062mmol),加完升温至100度搅拌4h。TLC显示反应结束，将反应液过滤，滤液旋干，柱层析(DCM/MeOH＝20/1-10/1)，滤液减压浓缩，得标题化合物(30mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.23–8.03(m,1H),7.92(s,1H),7.83(dd,J＝11.4,8.4Hz,1H),7.72(d,J＝1.6Hz,1H),7.32(q,J＝9.0Hz,3H),6.77–6.40(m,3H),4.00(q,J＝7.1Hz,2H),1.18(t,J＝7.0Hz,3H).
步骤4：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(1-甲基-2-((甲基(噁丁环-3-基甲基)氨基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物089)的合成
氮气氛围下，将反应物89-5(28.0mg,0.075mmol)溶于二氧六环溶液(0.4mL)中，加入反应物38-4(35.0mg，0.083mmol)，碳酸铯(48.87mg，0.15mmol),水(0.1mL)和Pd(dtbpf)Cl2(7.33mg,0.011mmol),加完升温至100度搅拌2h。LCMS显示反应结束，将反应液过滤，滤液减压浓缩，残余物经高压制备纯化[YMC-Actus Triart C18柱5μm二氧化硅，30mm直径，150mm长度；用水(含有0.05％NH4HCO3)和乙腈的极性递减的混合物作为洗脱液；乙腈梯度比例45％-72％,洗脱时间12分钟]，得标题化合物(10mg)
MS m/z(ESI):＝576.2[M+H]+。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.17(s,1H),8.07(d,J＝8.5Hz,1H),7.93(d,J＝1.5Hz,1H),7.68(d,J＝8.4Hz,1H),7.62(d,J＝1.6Hz,1H),7.49–7.21(m,4H),6.94(t,J＝73.8Hz,1H),6.69(d,J＝8.5Hz,1H),4.77(dd,J＝7.8,6.0Hz,2H),4.78(s,1H),4.34(t,J＝6.1Hz,2H),4.01(q,J＝7.0Hz,2H),3.89(d,J＝6.2Hz,5H),2.85(d,J＝7.6Hz,2H),2.26(s,3H),1.15(t,J＝7.0Hz,3H).
实施例70、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(1-甲基-2-(((四氢呋喃-3-基)氧代)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物090)
步骤1：6-溴-2-(氯甲基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(中间体90-2)的合成
将反应物90-1(500mg,2.07mmol)溶于四氢呋喃溶液中(5mL)。冰水浴下，向上述反应液中依次加入加入三乙胺(418.9mg,4.14mmol)，乙基磺酰氯(399.9mg，3.11mmol)。随后，移至20度下继续搅拌4h。LCMS显示反应结束，将反应液倒入水(15mL)中,用EA(20mL*2)萃取。合并后的有机相用饱和食盐水(20mL*2)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得标题化合物粗品(200.0mg)。
MS m/z(ESI):＝259[M+H]+。
步骤2：6-溴-1-甲基-2-(((四氢呋喃-3-基)氧代)甲基)-1H-苯并[d]咪唑(中间体90-4)的合成
将反应物90-2(200.0mg，粗品)溶于甲苯溶液(2mL)中，于0-10度加NaH(46.5mg,60％wt,1.16mmol),加毕搅拌0.5h，加入反应物90-3(81.96mg,0.93mmol)。随后，升温至100度搅拌4h。LCMS显示反应结束，将反应液倒入饱和氯化铵(100mL)中，EA(100mL*2)萃取。合并后的有机相用饱和食盐水(200mL*2)洗涤，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得标题化合物粗品(240.0mg)。
MS m/z(ESI):＝311[M+H]+。
步骤3：1-甲基-2-(((四氢呋喃-3-基)氧代)甲基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(中间体90-5)的合成
在氮气氛围下，将反应物90-4(240.0mg，粗品)溶于二氧六环溶液(3mL)中，加入双联频呐醇硼酸酯(295.3mg，1.163mmol)，醋酸钾(152mg，1.55mmol)和Pd(dppf)Cl2(84.85mg,0.116mmol)。加毕，升温至100度搅拌4h。TLC监测显示反应结束，将反应液过滤，滤液旋干，浓缩后的残余物通过柱层析(DCM/MeOH＝20/1-10/1)纯化，减压浓缩，得标题化合物(250mg)。
步骤4：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(1-甲基-2-(((四氢呋喃-3-基)氧代)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物090)的合成
在氮气氛围下，将反应物90-5(100.0mg,0.279mmol)溶于二氧六环中(2mL)中。随后，加入反应物38-4(126.3mg，0.307mmol)，碳酸铯(181.8mg，0.558mmol),水(0.5mL)和Pd(dtbpf)Cl2(27.3mg,0.042mmol)。加毕，升温至100度搅拌2h。LCMS显示反应结束，将反应液过滤，减压浓缩后，残余物通过高压制备纯化得到标题化合物(12mg)。
MS m/z(ESI):＝563[M+H]+。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.16(s,1H),8.06(d,J＝8.5Hz,1H),7.93(dd,J＝1.6,0.7Hz,1H),7.68(dd,J＝8.5,0.7Hz,1H),7.61(dd,J＝8.5,1.6Hz,1H),7.42–7.30(m,4H),6.93(t,J＝73.9Hz,1H),6.68(d,J＝8.4Hz,1H),4.93–4.82(m,2H),4.32(dd,J＝4.2,1.7Hz,1H),4.01(q,J＝7.0Hz,2H),3.89–3.73(m,7H),2.06–2.04(m,2H),1.15(t,J＝7.1Hz,3H).
实施例71、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-3-(2-(2-((2R,6S)-2,6-二甲基吗啉代)乙基)-2H-吲唑-5-基)-7-乙氧基-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物092)
步骤1：2-((2S,6R)-2,6-二甲基吗啉代)乙腈(中间体92-2)的合成
将反应物92-1(5g,43.41mmol)和碳酸钾(6.60g,47.75mmol)溶于乙腈(150mL)中，0℃氮气保护下滴加2-溴乙腈(5.21g,43.41mmol)并在0℃下搅拌反应30分钟。将反应体系温度升到25℃并在25℃下搅拌反应16小时。LC-MS显示反应完成。反应液用水(150mL)稀释，乙酸乙酯450mL(150mL*3)萃取三次，有机相用硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干。得到标题化合物粗品(5.95g)。
MS m/z(ESI):＝155.0[M+H]+。
步骤2：2-((2S,6R)-2,6-二甲基吗啉代)乙胺(中间体92-3)的合成
将中间体92-2(1g,6.48mmol)溶于四氢呋喃(30mL)中，0℃～5℃氮气保护下加入四氢锂铝(738.37mg,19.45mmol)并在0℃下搅拌反应1小时,将反应体系温度升到25℃，搅拌反应3小时。LC-MS显示反应完成。反应液用水(1mL)在0℃下淬灭、搅拌20分钟，接着加入20％氢氧化钠水溶液(2mL)和水(1mL)，0℃下搅拌20分钟，过滤，减压浓缩至干，得到标题化合物粗品(1.09g)。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ＝3.62-3.51(m,2H),2.71-2.60(m,4H),2.32(t,J＝6.6Hz,2H),1.62(t,J＝10.9Hz,2H),1.04(s,3H),1.02(s,3H)。
步骤3：(2S,6R)-4-(2-(5-溴-2H-吲唑-2-基)乙基)-2,6-二甲基吗啉(中间体92-4)的合成
将中间体92-3(1.09g,6.89mmol)和5-溴-2-硝基苯甲醛(1.74g,7.58mmol)溶于异丙醇(25mL)中，将反应体系温度升到80℃并在80℃下搅拌反应4小时。25℃下滴加三丁基膦(4.18g,20.66mmol,5.10mL)，80℃下搅拌反应16小时。LC-MS显示反应完成。反应液减压除去异丙醇，经柱色谱分离(40g 快速硅胶柱，洗脱剂0～28％乙酸乙酯/石油醚，梯度@50毫升/分钟)得到标题化合物(2.33g)。
MS m/z(ESI):＝340.0[M+H]+。
步骤4：(2S,6R)-2,6-二甲基-4-(2-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-2H-吲唑-2-基)乙基)吗啉(中间体92-5)的合成
将中间体92-4(200mg,591.29μmol)和B2Pin2(180.18mg,709.55μmol)溶于二氧六环(6mL)中，氮气保护25℃下加入Pd(dppf)Cl2(43.27mg,59.13μmol)和KOAc(174.09mg,1.77mmol)，将体系温度升到100℃并在100℃下搅拌反应16小时，LC-MS显示反应完成。反应液用水(20mL)稀释，乙酸乙酯60mL(20mL*3)萃取三次，有机相用硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，经柱色谱分离(12g 快速硅胶，洗脱剂0～6％乙酸乙酯/石油醚，梯度@40毫升/分钟)得标题化合物(227mg)。
MS m/z(ESI):＝386.2[M+H]+。
步骤5：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-3-(2-(2-((2R,6S)-2,6-二甲基吗啉代)乙基)-2H-吲唑-5-基)-7-乙氧基-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物092)的合成
将中间体38-4(50mg,121.60μmol)和中间体92-5(124.94mg,243.19μmol,75％纯度)溶于二氧六环(1mL)中，氮气保护下加入Pd(dtbpf)Cl2(7.92mg,12.16umol)、碳酸铯(79.24mg,243.19μmol)溶于水(0.25mL)中，将体系温度升到90℃并在90℃下搅拌反应16小时，LC-MS显示反应完成。反应液用水(10mL)稀释，乙酸乙酯30mL(10mL*3)萃取三次，有机相用硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，浓缩物经高效液相色谱纯化(色谱柱:Boston PrimeC18 150*30mm*5μm；流动相:水(0.05％氨水v/v)-乙腈；B为乙腈,B％:53％-73％,9分钟)得到标题化合物(20.8mg)。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ＝8.32(s,1H),8.11(s,1H),8.08(s,1H),8.05(d,J＝8.5Hz,1H),7.64(s,2H),7.41-7.33(m,4H),6.95(t,J＝73.6Hz,1H),6.68(d,J＝8.5Hz,1H),4.59(t,J＝6.4Hz,2H),4.01(q,J＝7.0Hz,2H),3.69-3.58(m,2H),2.94(t,J＝6.5Hz,2H),2.80(d,J＝10.5Hz,2H),1.83(t,J＝10.8Hz,2H),1.16(t,J＝7.0Hz,3H),1.13(s,3H),1.11(s,3H)。
MS m/z(ESI):＝590.2[M+H]+。
实施例72、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-3-(2-(2-((2S,6S)-2,6-二甲基吗啉代)乙基)-2H-吲唑-5-基)-7-乙氧基-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物093)
步骤1：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-3-(2-(2-((2S,6S)-2,6-二甲基吗啉代)乙基)-2H-吲唑-5-基)-7-乙氧基-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物093)的合成
将中间体93-1(70.28mg,182.39μmol,可根据中间体92-5合成方法制备)和中间体38-4(50mg,121.60μmol)溶于1,4-二氧六环(2mL)和水(0.5mL)中，加入碳酸铯(79.24mg,243.19μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(8.86mg,13.60μmol)。在氮气保护下，反应液100℃搅拌反应16小时。LCMS检测反应完毕。反应液减压过滤，滤液减压浓缩至干.经制备液相色谱纯化(色谱柱:Phenomenex Gemini-NX150*30mm*5μm；流动相:[水(0.04％氨水+10mM碳酸氢铵)-甲醇]；B为乙腈,B％:70％-90％,9分钟).得标题化合物(16.2mg)。
MS m/z(ESI):＝590[M+H]+。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δppm 8.34(s,1H),8.15(s,1H),8.12-8.06(m,2H),7.66(s,2H),7.43-7.34(m,4H),6.96(t,J＝74Hz 1H),6.71(d,J＝8.5Hz,1H),4.59(t,J＝6.1Hz,2H),4.03(q,J＝7.0Hz,2H),3.95(dt,J＝3.1,6.2Hz,2H),3.04-2.77(m,2H),2.55(dd,J＝3.1,10.9Hz,2H),2.23(dd,J＝5.6,10.9Hz,2H),1.20-1.13(m,9H)。
实施例73、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(1-异丁基-6-羰基-1,6-二氢吡啶-3-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物094)
步骤1：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(1-异丁基-6-羰基-1,6-二氢吡啶-3-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物094)的合成
氮气氛围下，将反应物94-1(678.0mg,可根据专利WO 2019102256报道方法合成)溶于二氧六环溶液(8mL)中，加入中间体38-4(1.0g，2.45mmol)，碳酸铯(1.6g，4.9mmol),水(2mL)和Pd(dtbpf)Cl2(240mg,0.37mmol),加毕升温至90度搅拌12h。LCMS监测显示反应结束，将反应液过滤，滤液旋干，通过高压制备纯化[YMC-Actus Triart C18柱5μm二氧化硅，30mm直径，150mm长度；用水(含有0.05％NH4HCO3)和乙腈的极性递减的混合物作为洗脱液；乙腈梯度比例55％-80％,洗脱时间13分钟]，得标题化合物(80mg)。
MS m/z(ESI):＝482[M+H]+。
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.24(d,J＝2.6Hz,1H),8.12(s,1H),8.04(d,J＝8.5Hz,1H),7.94(dd,J＝9.4,2.6Hz,1H),7.34(s,4H),6.93(t,J＝73.8Hz,1H),6.68(d,J＝8.5Hz,1H),6.61(d,J＝9.4Hz,1H),3.99(d,J＝7.0Hz,2H),3.86(d,J＝7.4Hz,2H),2.19(dt,J＝13.7,6.8Hz,1H),1.13(t,J＝7.0Hz,3H),0.96(d,J＝6.7Hz,6H).
实施例74、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(6-氧亚基-1-((四氢呋喃-3-基)甲基)-1,6-二氢吡啶-3-基)-1,8-萘啶-2(1H)-酮(化合物095)
步骤1：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(6-氧亚基-1,6-二氢吡啶-3-基)-1,8-萘啶-2(1H)-酮(中间体95-2)的合成
将反应物95-1(100mg,243.19μmol)和中间体98-4(107.52mg,486.38μmol)溶于1,4-二氧六环和水中，随后向反应液中加入碳酸铯(158.47mg,486.38μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(15.85mg,24.32μmol)。反应液于氮气保护下，100℃搅拌反应15小时。LC-MS监测原料全部反应。将反应液用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗有机层，有机层减压浓缩至干，残余物经TLC制备纯化(二氧化硅，乙酸乙酯/乙醇/石油醚＝3/1/4)，得标题化合物(21.5mg)。
MS m/z(ESI):＝426.2[M+H]+。
步骤2：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(6-氧亚基-1-((四氢呋喃-3-基)甲基)-1,6-二氢吡啶-3-基)-1,8-萘啶-2(1H)-酮(化合物095)的合成
将中间体95-2(20mg,47.02μmol)和中间体95-3(23.2mg，141.06μmol)溶于DMF中，降温到20℃时加入钠氢(60％纯度，9.40mg，235.10μmol)，反应液于氮气保护下40℃搅拌反应16小时。LC-MS监测原料已经全部反应完全，目标产物形成。反应液用0℃的水淬灭，乙酸乙酯萃取三次，有机层减压浓缩至干，经高效液相色谱法纯化(色谱柱:YMC-Actus TriartC18 150*30mm*5μm；流动相：[水(0.05％氨水v/v)-乙腈]；B为乙腈,B％:53％-73％，11分钟)，得标题化合物(9.9mg)
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ＝8.31(d,J＝2.5Hz,1H),8.17(s,1H),8.07(d,J＝8.5Hz,1H),7.97(dd,J＝2.5,9.3Hz,1H),7.37(s,4H),7.17-6.76(m,1H),6.71(d,J＝8.5Hz,1H),6.65(d,J＝9.3Hz,1H),4.17-4.05(m,2H),4.02(q,J＝7.0Hz,2H),3.95(dt,J＝5.5,8.2Hz,1H),3.85-3.74(m,2H),3.65(dd,J＝5.8,8.8Hz,1H),2.85(td,J＝6.8,14.1Hz,1H),2.12-1.98(m,1H),1.87-1.73(m,1H),1.16(t,J＝7.2Hz,3H)。
MS m/z(ESI):＝510.3[M+H]+
实施例75、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(6-羰基-1-(2-(四氢呋喃-2-基)乙基)-1,6-二氢吡啶-3-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物097)
步骤1：5-溴-1-(2-(四氢呋喃-2-基)乙基)吡啶-2(1H)-酮(中间体97-3)的合成
将反应物97-2(1.46g,8.38mmol)溶于DMF(35mL)中，0℃～5℃氮气保护下加钠氢(670.34mg,16.76mmol,60％有效含量)，0℃下搅拌反应30分钟，氮气保护下加入反应物97-1(1.5g,8.38mmol)将，反应体系温度升到25℃并在25℃下搅拌反应16小时。LC-MS显示反应完成。反应液用水(50mL)稀释、乙酸乙酯150mL(50mL*3)萃取三次，有机相用饱和食盐水洗450mL(150mL*3)三遍，无水硫酸钠干燥、过滤、减压浓缩至干，经柱色谱分离(25g快速硅胶柱，洗脱剂梯度11～100％乙酸乙酯/石油醚，流速50mL/分钟)得标题化合物(1g)。
MS m/z(ESI):＝271.8[M+H]+。
步骤2：1-(2-(四氢呋喃-2-基)乙基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡啶-2(1H)-酮(中间体97-4)的合成
将中间体97-3(200mg,734.92μmol)和双联频哪醇硼酸酯(279.94mg,1.10mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护25℃下加入Pd(dppf)Cl2(53.77mg,73.49μmol)和乙酸钾(216.38mg,2.20mmol)，将体系温度升到90℃并在90℃下搅拌反应2小时，LC-MS显示反应完成。反应液用水(10mL)稀释，乙酸乙酯30mL(10mL*3)萃取三次，有机相用硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，经薄层色谱分离(二氧化硅，石油醚/乙酸乙酯＝2/1)得到标题化合物(76mg)。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ8.01-7.89(m,1H),7.77(d,J＝7.9Hz,1H),7.72-7.61(m,1H),4.23-4.14(m,1H),4.07-3.98(m,1H),3.93-3.80(m,2H),3.78-3.70(m,1H),2.10-1.83(m,5H),1.61-1.51(m,1H),1.22(s,12H)。
步骤3：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(6-羰基-1-(2-(四氢呋喃-2-基)乙基)-1,6-二氢吡啶-3-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物097)的合成
将中间体97-4(69.86mg,218.87μmol)和中间体38-4(45mg,109.44μmol)溶于二氧六环(4mL)中，氮气保护下加入Pd(dtbpf)Cl2(7.13mg,10.94μmol)、碳酸铯(71.31mg,218.87μmol)溶于水(1mL)中，将体系温度升到90℃并在90℃下搅拌反应2小时，LC-MS显示反应完成。反应液用水(10mL)稀释，乙酸乙酯30mL(10mL*3)萃取三次，有机相用硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，浓缩物经高效液相色谱纯化(0.05％氨水v/v)-乙腈；B为乙腈,B％:50％-70％,11分钟)得到标题化合物(15mg)。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ＝8.28(d,J＝2.4Hz,1H),8.15(s,1H),8.07(d,J＝8.4Hz,1H),7.96(dd,J＝2.6,9.4Hz,1H),7.37(s,4H),6.96(t,J＝74Hz,1H),6.71(d,J＝8.4Hz,1H),6.63(d,J＝9.4Hz,1H),4.28-4.2(m,1H),4.13-4.05(m,1H),4.02(q,J＝7.0Hz,2H),3.94-3.85(m,2H),3.77-3.71(m,1H),2.12-2.00(m,2H),2.00-1.86(m,3H),1.63-1.51(m,1H),1.16(t,J＝7.0Hz,3H)。
MS m/z(ESI):＝524.1[M+H]+。
实施例76、6-(2-(2-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛烷-3-基)乙基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物098)
步骤1：6-(2-(2-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛烷-3-基)乙基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物098)的合成
将反应物98-1(108.04mg,271.94μmol,可根据中间体84-1相似方法，以8-氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷替换吗啉为反应物进行合成)，中间体38-4(50mg，135.97μmol)，碳酸铯(88.6mg，271.94μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(8.86mg，13.6μmol)溶于水和1,4-二氧六环中，反应液于氮气保护下升温至90℃搅拌反应16小时。LC-MS监测原料已经全部反应完全，目标产物形成。反应液乙酸乙酯萃取三次，有机层减压浓缩至干，经高效液相色谱法纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相：[水(0.225％甲酸v/v)-乙腈]；B为乙腈,B％:35％-55％，11分钟)，得标题化合物(11.4mg)。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ＝8.91(s,1H),8.48(s,0.398H,HCO2H),8.20(s,1H),7.91-7.87(m,1H),7.68-7.56(m,2H),7.46-7.34(m,4H),7.17-6.76(m,1H),4.18(q,J＝7.1Hz,2H),3.85(s,3H),3.21-3.14(m,2H),2.93(t,J＝7.2Hz,2H),2.83(d,J＝11.0Hz,2H),2.49(d,J＝10.3Hz,2H),1.92-1.77(m,4H),1.26(t,J＝7.1Hz,3H)。
MS m/z(ESI):＝603.0[M+H]+。
实施例77、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-甲基-2-((吡啶-3-氧基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物099)
步骤1：6-溴-1-甲基-2-((吡啶-3-氧基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑(中间体99-2)的合成
将反应物99-1(500mg,2.07mmol)和3-羟基吡啶(197.23mg,2.07mmol)溶于四氢呋喃(2mL)中，在0℃加入三叔丁基膦(419.60mg,2.07mmol),DIAD(419.38mg,2.07mmol)。将反应液升温至50℃搅拌反应12小时。LC-MS检测反应完毕。用乙酸乙酯30mL(10mL*3)萃取。有机相用无水硫酸钠干燥之后，减压蒸干后制备柱层析(25g快速硅胶柱,洗脱剂：乙酸乙酯和石油醚@45mL/分钟)得标题化合物(120mg)。
MS m/z(ESI):＝317.9[M+H]+。
步骤2：1-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼酯-2-基)-2-(2,2,2-三氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑(中间体99-3)的合成
将中间体99-2(120mg,377.16μmol),双联频哪醇硼酸酯(143.66mg,565.74μmol)溶于二氧六环(3mL)中。加入醋酸钾(111.04mg,1.13mmol)，Pd(dppf)Cl2(13.80mg,18.86μmol)。氮气保护下，在90℃搅拌反应12小时，LC-MS检测反应完毕。将反应液过滤后用乙酸乙酯30mL(10mL*3)萃取。有机相用无水硫酸钠干燥之后，减压蒸干后以制备薄层色谱纯化(二氧化硅，二氯甲烷：甲醇＝10：1)得标题化合物(61mg)。
MS m/z(ESI):＝366.0[M+H]+。
步骤3：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-甲基-2-((吡啶-3-氧基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物099)的合成
将中间体99-3((30mg,82.14μmol)，中间体38-4(30.21mg,82.14μmol)，碳酸铯(53.53mg,164.28μmol)，Pd(dtbpf)Cl2(5.35mg,8.21μmol)溶于二氧六环/水(4:1)(1mL)中。在氮气环境下90℃搅拌反应12小时。LC-MS检测反应完毕。将反应液减压蒸干后，制备高效液相色谱(色谱柱：YMC-Actus Triart C18150*30mm*5μm；流动相：[水(0.05％氨水v/v)-乙腈]；B为乙腈,B％：48％-68％，11分钟)得标题化合物(4.8mg)。
MS m/z(ESI):＝571.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ＝8.95(s,1H),8.43(d,J＝2.9Hz,1H),8.25(s,1H),8.22(d,J＝4.8Hz,1H),7.99(s,1H),7.80-7.73(m,1H),7.69-7.65(m,2H),7.47-7.45(m,1H),7.45-7.41(m,2H),7.40-7.36(m,2H),6.97(t,J＝74Hz,1H),5.56(s,2H),4.20(q,J＝7.1Hz,2H),3.99(s,3H),1.27(t,J＝7.1Hz,3H)。
实施例78、6-(2-(2-(8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物101)
步骤1：2-(1-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙醇(中间体101-2)的合成
将反应物101-1(300mg,1.18mmol)，双联频哪醇硼酸酯(447.93mg，1.76mmol)，Pd(dppf)Cl2(43.02mg，58.8μmol)和乙酸钾(346.23mg，3.53mmol)溶于1,4-二氧六环中。反应液于氮气保护下，升温至90℃搅拌反应0.5小时。LC-MS监测全部反应完全，目标产物形成。将反应液用乙酸乙酯萃取三次，有机层减压浓缩至干，得标题化合物粗品(326.53mg)。
MS m/z(ESI):＝303.2[M+H]+。
步骤2：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(2-(2-羟基乙基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(中间体101-3)的合成
将中间体101-2(82.17mg,271.94μmol)，中间体32-1(50mg，135.97μmol)，碳酸铯(88.6mg，271.94μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(8.86mg，13.6μmol)溶于水和1,4-二氧六环中。反应液于氮气保护下，升温至90℃，搅拌反应5小时。LC-MS监测原料已经全部反应完全，目标产物形成。反应液用乙酸乙酯萃取三次，有机层减压浓缩至干，得标题化合物粗品(69mg)。
MS m/z(ESI):＝508.1[M+H]+。
步骤3：2-(6-(8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-7-氧亚基-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基甲磺酸酯(中间体101-4)的合成
将中间体101-3(69mg,135.96μmol)加入二氯甲烷中，加入三乙胺(27.52mg，271.93μmol)，在0℃加入甲基磺酰氯(17.13mg,149.56μmol)。反应液于氮气保护下，25℃搅拌反应2小时。LC-MS监测原料部分反应，目标产物形成。将反应液用0℃的饱和碳酸氢钠溶液淬灭，乙酸乙酯萃取三次，有机层减压浓缩至干，得标题化合物粗品(69mg)。
MS m/z(ESI):＝398.0[M+H]+。
步骤4：6-(2-(2-(8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)乙基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物101)的合成
将中间体101-4(69mg,117.83μmol)，中间体101-5(19.05mg，134.91μmol)和三乙胺(40.95mg，404.73μmol)溶于乙腈中，反应液于氮气保护下升温至40℃搅拌反应16小时。LC-MS监测原料已经全部反应完全，目标产物形成。反应液乙酸乙酯萃取三次，有机层使用硫酸钠干燥后减压浓缩至干，经高效液相色谱法纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18150*30mm*5μm；流动相：[水(0.05％氨水v/v)-乙腈]；B为乙腈,B％:60％-80％，11分钟)，得标题化合物(3.7mg)。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ＝8.94(s,1H),8.23(s,1H),7.94(s,1H),7.73-7.67(m,1H),7.65-7.60(m,1H),7.46-7.42(m,2H),7.40-7.37(m,2H),7.18-6.77(m,1H),4.19(q,J＝7.1Hz,2H),3.89(s,3H),3.72-3.69(m,4H),3.62-3.51(m,2H),3.40(s,4H),3.22(s,2H),2.08-2.00(m,2H),1.75-1.66(m,4H),1.26(t,J＝7.0Hz,3H)
MS m/z(ESI):＝631.5[M+H]+。
实施例79、3-(6-(8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-7-羰基-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙腈(化合物102)
步骤1：2-(6-溴-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基甲磺酸酯(中间体102-2)的合成
将反应物102-1(500mg,1.96mmol)溶于二氯甲烷(8mL)中，向混合液中加入三乙胺(396.65mg,3.92mmol)，待反应液温度降低至0℃，向反应液中缓慢加入甲烷磺酰氯(269.41mg,2.35mmol)反应液于氮气保护下25℃搅拌1小时。LC-MS检测反应完毕。反应液用二氯甲烷和水萃取，有机相用水洗涤三次，并用无水硫酸钠干燥后，减压浓缩至干得标题化合物(650mg)。
MS m/z(ESI):＝333.0[M+H]+。
步骤2：3-(6-溴-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙腈(中间体102-3)的合成
将中间体102-2(650mg,1.95mmol)和氰化钠(114.72mg,2.34mmol)溶于甲醇(10mL)中，向混合物中加入三乙胺(394.79mg,3.90mmol)，反应液于氮气保护下40℃搅拌16小时。LC-MS检测反应完毕。待反应冷却至室温，减压浓缩除去甲醇后，用乙酸乙酯(30mL)和水(60mL)萃取,有机相用水洗涤三次(20mL X 3)。经制备柱层析法(石油醚：乙酸乙酯＝8：1至0：1)得标题化合物(270mg)。
MS m/z(ESI):＝264.0[M+H]+。
步骤3：3-(1-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙腈(中间体102-4)的合成
将中间体102-3(150mg,567.92μmol)和双联频哪醇硼酸酯(216.32mg,851.88μmol)溶于无水1，4-二氧六环(3mL)中，向混合物中加入Pd(dppf)Cl2(20.78mg,28.40μmol)和乙酸钾(167.21mg,1.70mmol)，反应液于氮气保护下100℃搅拌16小时。LC-MS检测反应完毕。待反应冷却至室温，用水(60mL)和乙酸乙酯(20mL)萃取，有机相用水(20mL*2)洗涤，洗涤后的有机相用适量无水硫酸钠干燥，减压浓缩至干。经制备薄层色谱法(二氧化硅，二氯甲烷：甲醇＝10：1)得标题化合物(98mg)。
MS m/z(ESI):＝312.1[M+H]+。
步骤4：3-(6-(8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-7-羰基-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)丙腈(化合物102)的合成
将中间体102-4(98mg,314.92μmol)和中间体32-1(77.21mg,209.95μmol)溶于无水二氧六环(2mL)和水(0.5mL)中，向混合物中加入碳酸铯(136.81mg,419.90μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(6.84mg,10.50μmol)，反应液于氮气保护下90℃搅拌16小时。LC-MS检测反应完毕。待反应冷却至室温，依次加入水(20mL)和乙酸乙酯(10mL)，有机相用水(20mL*2)洗涤，洗涤后的有机相用适量无水硫酸钠干燥，减压浓缩至干。经制备HPLC纯化(色谱柱:BostonPrime C18 150*30mm*5μm；流动相:水(0.05％氨水v/v)-氨水；B为乙腈,B％:55％-78％，9分钟)得标题化合物(42.2mg)。
1H NMR:(400MHz,Methanol-d4)δ＝9.02(s,1H),8.29(s,1H),7.99(s,1H),7.79-7.73(m,1H),7.69-7.64(m,1H),7.57-7.50(m,2H),7.48-7.40(m,2H),7.18(t,J＝74Hz,1H),4.26(s,2H),3.91(s,3H),3.46-3.38(m,2H),3.17-3.10(m,2H),1.32(t,J＝7.0Hz,3H).
MS m/z(ESI):＝517.3[M+H]+。
实施例80、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-甲基-2-(吡啶-3-基甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物105)
步骤1：6-溴-1-甲基-2-(吡啶-3-基甲基)-1H-苯并[d]咪唑(中间体105-2)的合成
将反应物105-1(500mg,2.49mmol)和2-(吡啶-3-基)乙酸(1.02g，7.46mmol)溶于盐酸水溶液中。反应液于氮气保护下，升温至100℃，搅拌反应16小时。LC-MS监测原料已经全部反应完全。反应液用饱和氢氧化钠溶液调节pH＝8，乙酸乙酯萃取三次，硫酸钠干燥有机层，有机层减压浓缩至干。残留物以柱层析纯化(二氧化硅,甲醇/二氯甲烷＝0/1到1/10)，得标题化合物(400mg)。
MS m/z(ESI):＝304.0[M+H]+。
步骤2：甲基-2-(吡啶-3-基甲基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(中间体105-3)的合成
将中间体105-2(230mg,761.16μmol)，双联频哪醇硼酸酯(289.93mg，1.14mmol)，Pd(dppf)Cl2(289.93mg，1.14mmol)和乙酸钾(98.14mg，2.28mmol)溶于1,4-二氧六环中。反应液于氮气保护下，升温至100℃搅拌反应16小时。LC-MS监测全部反应完全。将反应液用乙酸乙酯萃取三次，硫酸钠干燥有机层，有机层经减压浓缩至干，残留物以柱层析纯化(二氧化硅,甲醇/二氯甲烷＝0/1到1/10)，得标题化合物(211.9mg)。
MS m/z(ESI):＝350.0[M+H]+。
步骤3：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-甲基-2-(吡啶-3-基甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物103)的合成
将中间体105-3(94.9mg,271.94μmol)，中间体32-1(50mg，135.97μmol)，碳酸铯(88.6mg，271.94μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(8.86mg，13.6μmol)溶于水和1,4-二氧六环中，反应液于氮气保护下升温至90℃搅拌反应16小时。LC-MS监测原料已经全部反应完全，目标产物形成。反应液乙酸乙酯萃取三次，有机层减压浓缩至干，经高效液相色谱法纯化(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相：[水(0.05％氨水v/v)-乙腈]；B为乙腈,B％:46％-66％，11分钟)，得标题化合物(8.1mg)。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ＝8.94(s,1H),8.56(d,J＝1.6Hz,1H),8.51-8.45(m,1H),8.22(s,1H),7.91(d,J＝1.0Hz,1H),7.78(d,J＝7.9Hz,1H),7.73-7.66(m,1H),7.64-7.58(m,1H),7.47-7.34(m,5H),7.21-6.75(m,1H),4.46(s,2H),4.19(d,J＝7.1Hz,2H),3.82(s,3H),1.29-1.25(m,3H)。
MS m/z(ESI):＝555.4[M+H]+。
实施例81、2-(5-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-2-羰基-1,2-二氢-1,8-二氮杂萘-3-基)-2H-吲唑-2-基)乙基乙酸酯(化合物107)
步骤1：2-(5-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-2-羰基-1,2-二氢-1,8-二氮杂萘-3-基)-2H-吲唑-2-基)乙基乙酸酯(化合物107)的合成
将化合物065(50mg,101.53μmol)溶于乙腈(3mL)中，降温至0℃，加入DMAP(1.24mg,10.15μmol)，TEA(20.55mg,203.06μmol,28.26μL),乙酸酐(15.55mg,152.29μmol,14.26μL),室温搅拌16小时。LCMS检测反应完毕。反应液减压浓缩至干，经制备液相色谱纯化(色谱柱:Phenomenex Gemini-NX150*30mm*5μm；流动相:[0.05％氨水(v/v)-乙腈]；B为乙腈,B％:55％-75％,11分钟),得标题化合物(14.5mg)。
MS m/z(ESI):＝535[M+H]+。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δppm 8.34(s,1H),8.15(s,1H),8.13-8.05(m,2H),7.67(s,2H),7.43-7.33(m,4H),6.96(s,J＝73.8Hz,1H),6.71(d,J＝8.3Hz,1H),4.76-4.71(m,2H),4.61-4.57(m,2H),4.03(q,J＝7.0Hz,2H),2.01(s,3H),1.17(t,J＝7.0Hz,3H)
实施例82、2-(5-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-2-羰基-1,2-二氢-1,8-二氮杂萘-3-基)-2H-吲唑-2-基)乙基异丙基氨基甲酸酯(化合物108)
步骤1：2-(5-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-2-羰基-1,2-二氢-1,8-二氮杂萘-3-基)-2H-吲唑-2-基)乙基异丙基氨基甲酸酯(化合物108)的合成
将化合物065(50mg,101.53μmol)溶于乙腈(3mL)中，加入2-异氰酸基丙烷(12.96mg,152.29μmol)，室温搅拌16小时。LCMS检测反应完毕。反应液减压浓缩至干，经制备液相色谱纯化(色谱柱:Gemini NX C18 5μm*10*150mm；流动相:[水(0.05％氨水v/v)-乙腈]；B为乙腈,B％:55％-75％,11分钟),得标题化合物(18.4mg)。
MS m/z(ESI):＝578[M+H]+。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δppm 8.32(s,1H),8.15(s,1H),8.12-8.05(m,2H),7.66(d,J＝1.0Hz,2H),7.46-7.32(m,4H),6.96(s,J＝74Hz,1H),6.71(d,J＝8.5Hz,1H),4.74-4.68(m,2H),4.61(s,1H),4.54(d,J＝4.5Hz,2H),4.03(q,J＝7.0Hz,2H),1.17(t,J＝7.2Hz,3H),1.10(d,J＝6.5Hz,6H)。
实施例83、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-甲基-2-(((1-甲基环丙基)甲氧基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-7(8H)酮(化合物109)
步骤1：6-溴-1-甲基-2-(((1-甲基环丙基)甲氧基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑(中间体109-2)的合成
将(1-甲基环丙基)甲醇(100mg,1.16mmo)溶于DMF中,在0℃下加入NaH(92.79mg,2.32mmol，搅拌反应30分钟，滴加反应物109-1的DMF溶液，室温搅拌反应12小时，LCMS检测反应完毕，在0℃下，加水淬灭反应后，用乙酸乙酯6mL(2mL*3)萃取。有机相用无水硫酸钠干燥之后，减压蒸干后制备薄层色谱(二氧化硅,二氯甲烷/甲醇＝10/1)得标题化合物(50mg)
MS m/z(ESI):＝309.1[M+H]+。
步骤2：1-甲基-2-(((1-甲基环丙基)甲氧基)甲基)-6-(4,4,5,5-4甲基-1,3,2-二氧硼酯-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(中间体109-3)的合成
将中间体109-2(50mg,161.71μmol)溶于二氧六环中，加入双联频哪醇硼酸酯((61.60mg,242.56μmol)，醋酸钾(47.61mg,485.12μmo)，Pd(dppf)Cl2(5.92mg,8.09μmol)。反应液于氮气保护下，90℃搅拌反应1小时。LC-MS监测原料已经全部反应完全，目标产物形成。反应液减压浓缩至干，减压蒸干后制备薄层色谱(二氧化硅,石油醚/乙酸乙酯＝1/1)得标题化合物(30mg)
MS m/z(ESI):＝357.2[M+H]+。
步骤3：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-甲基-2-(((1-甲基环丙基)甲氧基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-7(8H)酮(化合物109)的合成
将中间体109-3(30mg,84.21μmol)溶于二氧六环/水中，加入中间体32-1(30mg,81.58μmol)，碳酸铯(53.16mg,163.16μmol)，Pd(dtpf)Cl2(5.32mg,8.16μmol)。反应液于氮气保护下，90℃搅拌反应12小时。LC-MS监测原料已经全部反应完全，目标产物形成。反应液减压浓缩至干，减压蒸干后制备高效液相色谱柱(色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相:[A:水(0.05％氨水v/v),B:乙腈]；B为乙腈,B％:56％-76％,11分钟).得标题化合物(1.8mg)。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ＝8.96(s,1H),8.25(s,1H),7.96(s,1H),7.76-7.69(m,1H),7.66-7.62(m,1H),7.48-7.43(m,2H),7.41-7.36(m,2H),6.98(t,J＝74Hz,1H),4.85(s,2H),4.20(q,J＝7.1Hz,2H),3.97(s,3H),3.37(s,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,3H),1.15(s,3H),0.47-0.40(m,2H),0.35(m,2H)
MS m/z(ESI):＝562.1[M+H]+。
实施例84、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(6-((四氢呋喃-3-基)甲氧基)吡啶-3-基)-1,8-萘啶-2(1H)-酮(化合物111)
步骤1：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(6-((四氢呋喃-3-基)甲氧基)吡啶-3-基)-1,8-萘啶-2(1H)-酮(化合物111)的合成
将中间体97-4(69.86mg,218.87μmol)和中间体38-4(45mg,109.44μmol)溶于二氧六环(4mL)中，氮气保护下加入Pd(dtbpf)Cl2(7.13mg,10.94μmol)、碳酸铯(71.31mg,218.87μmol)溶于水(1mL)中，将体系温度升到90℃并在90℃下搅拌反应2小时，LC-MS显示反应完成。反应液用水(10mL)稀释，乙酸乙酯30mL(10mL*3)萃取三次，有机相用硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩至干，浓缩物经高效液相色谱纯化(0.05％氨水v/v)-乙腈；B为乙腈,B％:50％-70％,11分钟)得到标题化合物(15mg)。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ＝8.48(d,J＝2.3Hz,1H),8.14(s,1H),8.08(d,J＝8.5Hz,2H),7.41-7.33(m,4H),6.96(s,1H),6.88(d,J＝8.8Hz,1H),6.71(d,J＝8.5Hz,1H),4.37-4.21(m,2H),4.02(q,J＝7.0Hz,2H),3.96-3.88(m,2H),3.84-3.68(m,2H),2.80(td,J＝6.5,13.2Hz,1H),2.20-2.10(m,1H),1.80(dt,J＝7.2,13.1Hz,1H),1.16(t,J＝7.2Hz,3H)。
MS m/z(ESI):＝510.4[M+H]+
实施例85、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(1-异丙基-6-羰基-1,6-二氢吡啶-3-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物112)
步骤1：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(1-异丙基-6-羰基-1,6-二氢吡啶-3-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物112)的合成
在氮气气氛下，将中间体38-4(50mg,121.95μmol)和中间体112-1(45.22mg,182.92μmol)溶解于二氧六环(0.8mL)和水(0.4mL)中。向其中加入碳酸铯(119.9mg,368.92μmol)，随后加入Pd(dtbpf)Cl2(10mg,12.36μmol)。将反应液于90℃搅拌15小时。TLC监控反应完成，将反应液冷却至室温，过滤，滤液通过HPLC-PREP(YMC-Actus Triart C18柱5μm二氧化硅，30mm直径，150mm长度；用水(含有0.05％NH4HCO3)和乙腈的极性递减的混合物作为洗脱液；乙腈梯度比例60％-82％,洗脱时间12分钟)纯化，标题化合物(25.5mg)。
MS m/z(ESI):＝468[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.39(d,J＝2.6Hz,1H),8.25(s,1H),8.11(d,J＝8.4Hz,1H),7.87–7.78(m,1H),7.44–7.31(m,5H),6.73(d,J＝8.4Hz,1H),6.47(d,J＝9.5Hz,1H),5.16–5.04(m,1H),3.99–3.89(m,2H),1.32(d,J＝6.8Hz,6H),1.08(t,J＝7.0Hz,3H).
实施例86、8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-甲基-2-(2-(2-氧代吡啶-1(2H)-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡咯[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物116)
步骤1：1-(2-(6-溴-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)吡啶-2(1H)-酮(中间体116-2)的合成
将反应物116-1(500mg,1.96mmol)和2-羟基吡啶(186.39mg,1.96mmol)溶于四氢呋喃中，在0℃加入三丁基膦(396.53mg,1.96mmol)和偶氮二甲酸二异丙酯(396.32mg,1.96mmol)。反应液于氮气保护下，90℃搅拌反应15小时。LC-MS监测部分原料剩余，目标产物形成。将反应液用乙酸乙酯萃取三次，饱和食盐水洗有机层，有机层减压浓缩至干，残余物柱层析纯化(二氧化硅,二氯甲烷/甲醇＝7/1，得标题化合物(240mg)。
MS m/z(ESI):＝333.9[M+H]+。
步骤2：1-(2-(1-甲基-6-(4,4,5,5四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)乙基)吡啶-2(1H)-酮(中间体116-3)的合成
将中间体116-2(50mg,150.51μmol)溶于二氧六环中，加入双联频哪醇硼酸酯(57.33mg,225.77μmol)，醋酸钾(44.31mg,451.54μmol)，Pd(dppf)Cl2(5.51mg,7.53μmol)，将反应液升至90℃，搅拌反应12小时。LC-MS监测原料已经全部反应完全，目标产物形成。将反应液体减压蒸干之后，用乙酸乙酯30mL(10mL*3)萃取。有机相用无水硫酸钠干燥之后，减压蒸干后制备柱层析(二氧化硅,石油醚/乙酸乙酯＝1/1)得标题化合物(28mg)
MS m/z(ESI):＝380.1[M+H]+。
步骤3：8-(4-(二氟甲氧基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-甲基-2-(2-(2-氧代吡啶-1(2H)-基)乙基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)吡咯[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物116)的合成
将中间体116-3(28mg,73.83μmol)溶于二氧六环/水中，加入中间体32-1(27.15mg,73.83μmol)，碳酸铯(48.11mg,147.66μmol)，Pd(dtbpf)Cl2((4.81mg,7.38μmol)。反应液于氮气保护下，90℃搅拌反应12小时。LC-MS监测原料已经全部反应完全，目标产物形成。反应液减压浓缩至干，制备高效液相色谱柱(色谱柱:Phenomenex Gemini-NX150*30mm*5μm；流动相:[A:水(0.05％氨水v/v),B:乙腈]；B为乙腈,B％:45％-65％，11分钟)，得标题化合物(5.5mg)。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ＝8.95(s,1H),8.22(s,1H),7.89(s,1H),7.69-7.64(m,1H),7.63-7.59(m,1H),7.56-7.49(m,2H),7.47-7.41(m,2H),7.41-7.36(m,2H),7.17-6.77(t,J＝74Hz,1H),6.59-6.54(m,1H),6.35-6.28(m,1H),4.49(t,J＝7.2Hz,2H),4.19(d,J＝7.0Hz,2H),3.81(s,3H),3.46(t,J＝7.0Hz,2H),1.26(t,J＝7.0Hz,3H)。
MS m/z(ESI):＝585.1[M+H]+。
实施例87、8-(4-(二氟甲基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑l-6-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物117)
步骤1：6-溴-1-甲基-2-(2,2,2-三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑(中间体117-2)的合成
将反应物117-1(2g,9.95mmol)溶于水(30mL)中，滴加3,3,3-三氟乙酸(2.55g,19.89mmol)和盐酸(6M,20mL)。升温至100℃搅拌反应12小时。LC-MS检测反应完毕。在0℃向反应液中滴加氢氧化钠溶液至pH为8，用乙酸乙酯600mL(200mL*3)萃取。有机相用无水硫酸钠干燥之后，减压蒸干后得标题化合物(620mg)。
MS m/z(ESI):＝292.9[M+H]+。
步骤2：1-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼酯-2-yl)-2-(2,2,2-三氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑(中间体117-3)的合成
将中间体117-2(220mg,750.64μmol)，双联频哪醇硼酸酯(381.23mg,1.50mmol)溶于二氧六环(5mL)中。加入醋酸钾(221.00mg,2.25mmol)，Pd(dppf)Cl2(27.46mg,37.53μmol)。氮气保护下，在100℃搅拌反应12小时，LC-MS检测反应完毕。将反应液过滤后用乙酸乙酯30mL(10mL*3)萃取。有机相用无水硫酸钠干燥之后，减压蒸干后制备薄层色谱(二氧化硅,二氯甲烷:甲醇＝9:1)得标题化合物(44mg)。
MS m/z(ESI):＝341.0[M+H]+。
步骤3：8-(4-(二氟甲基)苯基)-2-乙氧基-6-(1-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1H-苯并[d]咪唑l-6-基)吡啶[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(化合物117)的合成
将中间体117-3(20mg,58.80μmol),中间体32-1(21.62mg,58.80μmol)，磷酸钾(24.96mg,117.60μmol)，Pd(dtbpf)Cl2(3.83mg,5.88μmol)溶于二氧六环/水(4:1)(1mL)中。在氮气环境下90℃搅拌反应1小时。LC-MS检测反应完毕。将反应液减压蒸干后，制备高效液相色谱(色谱柱：YMC-Actus Triart C18150*30mm*5μm；流动相：[水(0.05％氨水v/v)-乙腈]；B为乙腈,B％：50％-70％，11分钟)得标题化合物(4.1mg)。
MS m/z(ESI):＝546.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ＝8.96(s,1H),8.26(s,1H),7.98(s,1H),7.81-7.72(m,1H),7.69-7.63(m,1H),7.47-7.42(m,2H),7.42-7.36(m,2H),7.19-6.75(t,J＝74Hz,1H),4.19(q,J＝7.1Hz,2H),4.08(q,J＝10.3Hz,2H),3.94(s,3H),1.26(t,J＝7.0Hz,3H)。
实施例88、8-[4-(二氟甲氧基)苯基]-2-乙氧基-6-2-[2-[(3R)-3-甲氧基吡咯烷-1-基]乙基]-3-甲基-苯并咪唑-5-基]吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(化合物118)
步骤1：8-[4-(二氟甲氧基)苯基]-2-乙氧基-6-2-[2-[(3R)-3-甲氧基吡咯烷-1-基]乙基]-3-甲基-苯并咪唑-5-基]吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(化合物118)的合成
氮气保护下，在20℃时，往中间体32-1(20mg,54.39μmol)和中间体118-1(31.43mg,81.58μmol,可根据中间体91-1合成路线，以(R)-3-甲氧基吡咯烷为原料进行合成)的混合溶液水(0.5mL)和二氧六环(2mL)中加入碳酸铯(35.44mg,108.77μmol)和催化剂Pd(dtbpf)Cl2(3.54mg,5.44μmol)，90℃反应16小时。LC-MS显示已完全反应，目标产物生成。反应结束后，反应物经减压浓缩除去溶剂。残留物以高效液相色谱法纯化(碱性条件,色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相:[水(0.225％甲酸v/v)-乙腈]；B为乙腈,B％:25％-45％,11分钟)，标题化合物(3.5mg)。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ＝8.93(s,1H),8.56(s,0.44H,HCOOH),8.24-8.20(m,1H),7.95-7.89(m,1H),7.64-7.63(m,1H),7.72-7.63(m,1H),7.48-7.41(m,2H),7.40-7.34(m,2H),6.98(t,J＝73.8Hz,1H),4.19(q,J＝7.0Hz,2H),4.06(s,1H),3.93-3.83(m,3H),3.36(s,2H),3.24(d,J＝5.3Hz,4H),3.13-3.02(m,2H),3.00(d,J＝4.5Hz,1H),2.84(d,J＝8.3Hz,1H),2.19(m,J＝6.4,13.9Hz,1H),1.98(s,1H),1.28-1.25(m,3H)。
MS m/z(ESI):＝591.5[M+H]+。
实施例89、8-[4-(二氟甲氧基)苯基]-2-乙氧基-6-2-[2-[(3S)-3-甲氧基吡咯烷-1-基]乙基]-3-甲基-苯并咪唑-5-基]吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(化合物119)
步骤1：8-[4-(二氟甲氧基)苯基]-2-乙氧基-6-2-[2-[(3S)-3-甲氧基吡咯烷-1-基]乙基]-3-甲基-苯并咪唑-5-基]吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(化合物119)的合成
在90℃时，向中间体119-1(41.91mg,108.77μmol)和中间体32-1(20mg,54.39μmol)的混合溶液(水(0.5mL)和二氧六环(2mL))中加入碳酸铯(35.44mg,108.77μmol)和催化剂Pd(dtbpf)Cl2(3.54mg,5.44μmol)，在氮气保护下，反应液在90℃时搅拌反应16小时。LC-MS显示中间体4已完全反应，目标产物生成。反应结束后，将反应物减压浓缩除去溶剂。残留物以高效液相色谱法纯化(碱性条件,色谱柱:YMC-Actus Triart C18 150*30mm*5μm；流动相:[水(0.225％甲酸v/v)-乙腈]；B为乙腈,B％:25％-45％,11分钟)，得标题化合物(3mg)。
1H NMR(400MHz,METHANOL-d)δ＝8.94(s,1H),8.55(s,0.275H,HCOOH),8.22(s,1H),7.91(s,1H),7.72-7.64(m,1H),7.63-7.56(m,1H),7.47-7.42(m,2H),7.41-7.34(m,2H),6.98(t,J＝73.8Hz,1H),4.19(q,J＝7.0Hz,2H),4.05(s,1H),3.88(s,3H),3.38-3.34(m,2H),3.24(s,4H),3.03(d,J＝16.6Hz,3H),2.81(s,1H),2.19(s,1H),1.95(s,1H),1.26(t,J＝7.0Hz,3H).
MS m/z(ESI):＝591.5[M+H]+。
实施例90、1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(2-(2-(3-羟基吖丁啶-1-基)乙基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物120)
步骤1：3-(2-(2-(3-((叔-丁基二苯基甲硅烷基)氧代)吖丁啶-1-基)乙基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(中间体120-2)的合成
将反应物120-1(86.91mg,145.92μmol,可根据中间体84-1相似方法，以替3-((叔丁基二苯基甲硅基)氧代)氮杂环丁胺替换吗啉为反应物进行合成)和中间体38-4(30mg,72.96μmol)溶于无水二氧六环(2mL)和水(0.5mL)中，向混合物中加入碳酸铯(47.54mg,145.92μmol)和Pd(dtbpf)Cl2(4.75mg,7.30μmol)，反应液于氮气保护下90℃搅拌16小时。LC-MS检测反应完毕。待反应冷却至室温，依次加入水(40mL)和乙酸乙酯(20mL),有机相用水(20mL*2)洗涤，洗涤后的有机相用适量无水硫酸钠干燥，减压浓缩至干。经制备薄层色谱法(二氧化硅，石油醚：乙酸乙酯＝0：1)得标题化合物(22mg)。
MS m/z(ESI):＝800.3[M+H]+。
步骤2：1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-乙氧基-3-(2-(2-(3-羟基吖丁啶-1-基)乙基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-6-基)-1,8-二氮杂萘-2(1H)-酮(化合物120)的合成
将中间体120-2(22mg,27.50μmol)加入甲醇(5mL)氟化钾(15.98mg,275.01μmol,6.44μL)中,反应液于氮气保护下25℃搅拌16小时。LC-MS检测反应完毕。反应液减压浓缩至干，经制备HPLC纯化(色谱柱:Phenomenex Gemini-NX 150*30mm*5μm；流动相:0.05％氨水(v/v)-乙腈；B为乙腈,B％:45％-65％，11分钟)得标题化合物(1.9mg)。
1H NMR:(400MHz,Methanol-d4)δppm 8.18(s,1H),8.09(d,J＝8.5Hz,1H),7.91(s,1H),7.71-7.64(m,1H),7.61-7.53(m,1H),7.43-7.40(m,2H),7.39-7.35(m,2H),7.15-6.77(m,1H),6.71(d,J＝8.5Hz,1H),4.41-4.32(m,1H),4.03(q,J＝7.2Hz,2H),3.86(s,3H),3.80-3.68(m,2H),3.05(s,4H),3.04-2.97(m,2H),1.17(t,J＝7.0Hz,3H)。
MS m/z(ESI):＝562.2[M+H]+。
生物学活性及相关性质测试例
测试例1、生物化学测试
试验原理简介：L-甲硫氨酸和ATP能够在MAT2A酶催化条件下转化为SAM、无机磷酸盐和无机二磷酸盐。通过向酶促反应混合物中加入显色剂，如钼酸铵等，可以定量地检测样品中无机磷酸盐的含量，进而反应MAT2A的酶活性。
材料：MAT2A筛选试剂盒购于BPS bioscience公司(美国)；384孔板购于康宁公司(美国)。
1.MAT2a蛋白(康龙化成(北京)新药技术股份有限公司)；
2.L-甲硫氨酸(Sigma#M9625-5G)
3.ATP(Sigma#A7699-1G)
4.KCL(Sigma#60142-500ML-F)
5.Tris(Sigma#T2663-1L)
6.MgCl2(Sigma#M1028)
7.EDTA(Invitrogen#AM9260G)
8.BSA(Sangon Biotech#A500023-0100)
9.PiColorLock(abcam#ab270004)
检测方法：
DMSO溶解化合物，利用Echo将化合物稀释至终浓度10μM，3倍稀释，并转移80nL至384孔板中。
配置实验缓冲液(50mM Tris，50mM KCl，15mM MgCl2,100μM EDTA，0.005％BSA)。用实验缓冲液稀释MAT2a蛋白(终浓度为4ug/mL)。于384孔板中加入40μL 2X的MAT2a溶液，1000rpm离心1分钟，重温孵育120分钟。
用实验缓冲液稀释L-甲硫氨酸和ATP(L-甲硫氨酸终浓度为200μM，ATP终浓度为400μM)。加入40μL 2X的L-甲硫氨酸和ATP溶液启动反应，1000rpm离心1分钟，重温孵育90分钟。
按照说明书将PiColorLockTM反应催化剂与PiColorLockTM缓冲液1:100混匀，每孔加入20μL后振荡30秒。加入8μL稳定试剂，振荡30秒。常温孵育30分钟后检测信号值。
数据分析：
计算％Compound inhibition并拟合得到化合物的IC50
Compound inhibition＝(100-100*(Signal-Bottom)/(Top-Bottom))％
实验结果：
在本实验条件下，待测化合物对MAT2A的抑制作用可以用对酶促反应过程中磷酸产生水平抑制的IC50值表示。待测化合物的MAT2A抑制活性具体见表1。
表1
测试例2、细胞内SAM水平检测
试验原理简介：将待测MAT2A抑制剂与癌细胞共孵育一段时间后，用终止试剂裂解细胞，淬灭MAT2A酶活性。通过LC-MS/MS的方法对细胞裂解液中的MAT2A催化产物SAM进行定量测定，进而反应细胞内MAT2A的活性。
材料与细胞：HCT116 MTAP-/-细胞购于康源博创；胎牛血清、McCoy's 5a培养基和青霉素-链霉素购于Gibco公司(美国)，96孔板购于康宁公司(美国)。
细胞培养：HCT116 MTAP-/-细胞用含10％胎牛血清+1％青霉素-链霉素的McCoy's5a培养液于37℃、5％CO2条件下培养。处于对数生长期细胞方可用于实验。
LC-MS/MS检测：利用LC-MS/MS检测化合物对HCT116 MTAP-/-细胞株中SAM生成水平的影响。调整细胞浓度为每孔50000个，接种96孔板，置于37℃、5％CO2条件下培养过夜。DMSO溶解化合物，依次用DMSO和培养基稀释化合物并转移至细胞板中，终浓度为10uM，3倍稀释。置于37℃、5％CO2条件下继续培养6小时。吸去上清，PBS洗一遍后，加入冰醋酸裂解细胞。裂解液经过处理后，通过LC-MS/MS进样分析，测定SAM浓度。数据分析：
计算％Compound inhibition并拟合得到化合物的IC50
％Compound inhibition＝1-100％*(Signal-Bottom)/(Top-Bottom)
实验结果：
在本实验条件下，待测化合物对HCT116 MTAP-/-细胞株内MAT2A酶的抑制活性表示为待测化合物对细胞内SAM生成抑制的IC50值。待测化合物对细胞内SAM生成抑制活性具体见表2。
表2
测试例3、人结肠癌HCT116细胞增殖抑制试验
试验原理简介：将待测MAT2A抑制剂与癌细胞共孵育一段时间后，采用基于ATP含量的细胞增殖计数方法来测量待测化合物对细胞增殖的影响。
材料与细胞：HCT116 MTAP+/+细胞和HCT116 MTAP-/-细胞购于康源博创；胎牛血清、McCoy's 5a培养基和青霉素-链霉素购于Gibco公司(美国)，96孔板购于康宁公司(美国)，Cell-Titer Glo试剂购于普洛麦格公司(美国)。
细胞培养：HCT116 MTAP+/+细胞和HCT116 MTAP-/-细胞均用含10％胎牛血清+1％青霉素-链霉素的McCoy's 5a培养液于37℃、5％CO2条件下培养。处于对数生长期细胞方可用于实验。
细胞增殖活性检测：利用Cell-Titer Glo试剂检测化合物对HCT116 MTAP+/+和HCT116 MTAP-/-两细胞株增殖的抑制活性。调整细胞浓度为每孔400个，接种96孔板，置于37℃、5％CO2条件下培养过夜。DMSO溶解化合物，依次用DMSO和培养基稀释化合物并转移至细胞板中，终浓度为10uM，3倍稀释。置于37℃、5％CO2条件下继续培养6天。加入Cell-TiterGlo试剂，检测细胞活性。
数据分析：
计算％Compound inhibition并拟合得到化合物的IC50
％Compound inhibition＝1-100％*(Signal-Bottom)/(Top-Bottom)
实验结果：
在本实验条件下，待测化合物对HCT116 MTAP-/-细胞展现出了较强的增殖抑制活性，并且相比于HCT116 MTAP+/+细胞表现出一定的选择性。待测化合物相应的抗细胞增殖活性具体见表3。
表3
在上表中，用于指示结合活性的符号所表示含义为：
-表示待测化合物对细胞抗增殖活性IC50范围为>10000nmol/L或最大抑制率<50％；
N/A表示尚未测试。
测试例4、人UGT1A1酶活性的抑制作用测试
本发明化合物对人UGT1A1酶活性的抑制采用如下试验方法测定。
一、试验材料及仪器
1.Tris(沪试30188206)
2.UGT1A1重组酶(SPMED SBU01A010)
3.UDPGA(Sigma U6751)
4.UGT探针底物β-estradiol(J&K 228703)和阳性对照化合物水飞蓟宾(SigmaS0417)
5.丙甲菌素(J&K 622045)
6.MgCl2(沪试10012817)
7.AB Sciex API5000液质联用仪
二、试验步骤
1.用Tris-MgCl2缓冲液分别将UGT1A1、本发明化合物、探针底物以及UDPGA稀释至5×浓度的工作液浓度。
2.取20μL 1.25mg/mL的UGT1A1工作液与20μL 125μg/ml的丙甲菌素工作液及20μL本发明化合物工作液，在冰上预孵育15分钟，而后转至37℃预孵育15分钟。15分钟后，加入20μL的50μM探针底物β-estradiol工作液和20μL的25mM UDPGA工作液，启动反应。阴性对照组用20μL含等量溶媒的缓冲液代替本发明化合物。
3.孵育30分钟后，加入400μL预冷的含内标的甲醇终止反应，涡旋混合后12000rpm下离心5分钟，取上清用于LC-MS/MS分析。
经Microsoft Excel软件计算得到的本发明化合物对UGT1A1酶活性的抑制率和经Graphpad Prism计算得到的本发明化合物对UGT1A1酶活性抑制的IC50值见表8。
表4本发明化合物对UGT1A1酶活性的抑制率或IC50值

Claims (4)

1.一种通式(A)所示化合物或其药学上可接受的盐：
环Q为
环W为
R1选自任选被F取代的C1-C6烷基；
X选自N或者CH；
L选自O或NH。
2.以下化合物或其药学上可接受的盐：
3.一种药物组合物，所述组合物包含权利要求1至2任一项的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的辅料。
4.权利要求1至2任一项的化合物或其药学上可接受的盐、或权利要求3所述的药物组合物在制备预防或者治疗MTAP缺失的肿瘤的药物中的用途，所述MTAP缺失的肿瘤为MTAP缺失的结肠癌。
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