CN114680011B - 一种基于小批量选择的菊花品种复壮方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种基于小批量选择的菊花品种复壮方法。所述方法包括如下步骤：1)选优：将从母株上采集的插穗扦插种植，于始花期按照30选1的比例进行优株选择，得到初始母株；2)低温复壮：将初始母株在夜间温度为‑2℃‑5℃的环境中培育30天以上；3)扩繁：采穗扦插繁殖，反复扩繁；4)除劣：待开花时淘汰劣变植株和细弱株，得到一级母株；5)低温复壮：将一级母株在夜间温度为‑2℃‑5℃的环境中培育30天以上；6)扩繁：采穗扦插种植，得到二级母株，作为商品苗的采穗母株。试验结果表明：母株经过本发明方法复壮的植株长势强壮，高度、性状与花期一致，没有叶色失绿、花朵失色的植株，商品花良品率达98％。

Description

一种基于小批量选择的菊花品种复壮方法

技术领域

本发明涉及菊花种植技术领域，具体涉及一种基于小批量选择的菊花品种复壮方法。

背景技术

菊花(Chrysanthemum Morifolium Ramat)是菊科(Compositae)菊属(Chrysanthemum L.)多年生草本植物，是世界四大切花之一，具有较高的经济和观赏价值。根据菊花的生态习性和自然花期，可以分为花期为5-6月的夏菊，7-9月的夏秋菊，10-11月的秋菊和12月的寒菊。

菊花的商业化栽培生产主要通过扦插繁殖，但是年复一年的扦插容易造成品种退化：栽培中部分菊花容易产生变异，导致品种不纯；或因昆虫等传播容易感染菊花B病毒(CVB)、番茄不孕病毒(TAV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、烟草花叶病毒(TMV)、马铃薯Y病毒(PVY)等病毒以及菊花矮化类病毒(CSVD)、菊花褪绿斑驳类病毒(CChMVD)等类病毒，使得植株叶色失绿、花朵失色、长势衰弱(图1)，失去商品价值。

目前，国际上菊花种苗供应商主要采用组织培养的方式生产脱毒苗，翻种扩繁采穗，从而实现复壮(SEE-EE-E)，其中E级苗为商业生产的一级母株，用于扩繁采穗母株(二级母株)，但国内的菊花种植者或种苗公司还不能完全掌握该方法。另外，由于国外种苗公司销售的E级插穗并不对所有种植者供应，且部分品种国外种苗公司不提供，所以国内大多数种植者一般采用反复扦插的方法进行繁殖，存在所产插穗品质较差的问题。因此高质量的母本已成为限制国内菊花种植产业发展的一个“卡脖子”问题。

浙江海丰生物科技股份有限公司作为国内菊花主要的种植公司，建有浙江省级菊花种质资源圃，构建了由浙江平水平地基地、浙江磐安高山基地、海南东方热带基地、云南弥勒高原基地等组成的立体基地体系；拥有夏菊、夏秋菊、秋菊、寒菊组成的周年生产品种体系，年产菊花切花6000多万支，对日本市场周年出口菊花切花及相关产品。

发明内容

本发明要解决的技术问题是如何获得高质量和/或高品质的菊花母株(或母本)。

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种菊花母株(或母本)的复壮方法。

本发明提供的菊花母株(或母本)的复壮方法包括如下步骤：

1)选优

于9月初，将从母株上采集的插穗进行扦插种植，培育至始花期时进行优株选择，并对所述优株进行标记；待标记的优株开花后剪去离地5厘米以上的枝条，得到初始母株；所述优株选择的方法如下：

1-1)根据植株的开花时间和性状(表型)，选留光反应周期处于正态分布高峰区且性状(表型)具有本品种固有特征的三分之一植株，淘汰其余植株；

1-2)测量步骤1-1)中保留植株的高度，并选留最高的五分之一植株，淘汰其余植株；

1-3)测量步骤1-2)中保留植株的从植株顶部往下三分之一处的叶片宽度，并选留叶片宽度最大的一半植株；

2)第一次低温复壮

将所述初始母株在夜间温度为-2℃-5℃，白天温度为5℃-10℃的环境中培育30天以上；

3)第一次扩繁

于第2年2月底至3月初，待所述初始母株长出3-5个新枝时，将其移栽至夜间温度为18℃-22℃的环境中，然后进行摘心；待所述初始母株侧枝长度为6-20厘米时，留基部1-10片叶，采穗进行扦插繁殖，反复扩繁；

4)除劣

于第2年9月初，将从初始母株扩繁而来的植株上采集的插穗进行扦插种植，待开花时淘汰性状(表型)与本品种固有特征不相符的植株和细弱株，剩余植株剪去离地5厘米以上的枝条，得到一级母株；

5)第二次低温复壮

将所述一级母株在夜间温度为-2℃-5℃，白天温度为5℃-10℃的环境中培育30天以上；

6)第二次扩繁

于第3年2月底至3月初，待所述一级母株抽生新枝，留基部1-10片叶，然后进行摘心；待所述一级母株再抽生新枝，留基部1-10片叶，采穗进行扦插种植，得到二级母株。

上述方法中，所述步骤1)中，种植前还包括对土壤进行消毒的步骤。所述消毒所使用的消毒剂可为本领域中常见的消毒剂，如棉隆或威百亩等消毒剂。

上述方法中，所述步骤1)中，选择健壮、无病虫的插穗进行扦插。

上述方法中，所述步骤1)还包括如下步骤：连根拔除淘汰的植株。

上述方法中，所述步骤1-1)中，所述性状(表型)可为叶片和/或花朵的大小、形状和/或颜色。

上述方法中，所述步骤1-1)中，菊花的光反应周期受温度、光照、植株成熟度、肥料、水分等许多因素影响，通常在相同时间进行种植和停止补光的同一菊花品种不同植株的光反应周期(从停光到开花的日数)呈正态分布(钟形曲线)，保留光反应周期处于正态分布高峰区的植株。如对于日本小菊红昌来说，不同植株的光反应周期范围为42-48天，在浙江省绍兴市平水基地11月下旬多数植株开花所需的光反应周期为45天，因此处于正态分布高峰区的天数为45天。

上述方法中，所述步骤2)中，将所述初始母株在夜间温度为-2℃-5℃，白天温度为5℃-10℃的环境中培育70天，所述培育过程中保持通风。

上述方法中，所述步骤3)中，待所述初始母株长出3-5个新枝时，将其带土团挖起后移栽至夜间温度为18℃-22℃的环境中。所述夜间温度为18℃-22℃的环境可为夜间温度为18℃-22℃的高山或高原地区。

上述方法中，所述步骤3)中，待所述初始母株侧枝长度为6-20厘米时，留基部1-10叶可为待所述初始母株侧枝长度为8-12厘米时，留基部2-3叶，具体可为待所述初始母株侧枝长度为10厘米时，留基部3片叶。

上述方法中，所述步骤4)中，所述性状(表型)为叶片和/或花朵的大小、形状和/或颜色。

上述方法中，所述步骤5)中，将所述一级母株在夜间温度为-2℃-5℃，白天温度为5℃-10℃的环境中培育70天，所述培育过程中保持通风。

上述方法中，所述步骤6)中，所述留基部1-10片叶可为留基部2-3片叶，具体可为留基部3片叶。

上述方法中，所述初始母株和所述一级母株的比例可为1:(400-500)，具体可为1:500。

所述一级母株和所述二级母株的比例可为1:(15-20)，具体可为1:20。

上述方法中，所述菊花可为秋菊或寒菊。

上述方法中，所述菊花可为小菊；进一步的，所述小菊可为日本小菊；更进一步的，所述日本小菊品种可为红昌。

按照上述方法获得的二级母株也属于本发明的保护范围。

为了解决上述技术问题，本发明还提供了如下M1)-M4)任一种应用：

M1)上述方法在提高菊花母株或母本质量和/或品质中的应用；

M2)上述方法在制备高质量和/或高品质菊花母株或母本中的应用；

M3)上述方法在菊花种植或菊花扩繁或菊花加工品制备中的应用；

M4)上述二级母株作为采穗圃母株在菊花种植或菊花扩繁或菊花加工品制备中的应用。

所述提高菊花母株或母本质量和/或品质体现为与母株未经本发明方法复壮的植株相比，母株经本发明方法复壮的植株长势更强壮，高度、性状(叶片和花朵大小、形状与颜色)和花期更一致，商品花良品率更高，没有叶色失绿和花朵失色植株，具有品种典型花色。

所述高质量和/或高品质菊花母株或母本是指植株长势强壮，高度、性状(叶片和花朵大小、形状与颜色)和花期一致、没有叶色失绿和花朵失色植株且具有品种典型花色的菊花母株或母本。

本发明的有益效果如下：

1：在本发明提供的复壮方法中，一轮母本制作包含两次选择(一次选优，一次除劣)，两次低温复壮。涉及三级母本制作体系(初始母株、一级母株、二级母株)。第一年选优，第二年除劣，第三年使用。

2：本发明提供的复壮方法在保持品种特性的同时，不仅关注叶片和花朵的大小、颜色与形状等病毒、类病毒感染指征的选择，还注重品种的稳定性、一致性(花期整齐)，区别于其他只注重长势的选种方法。通过该复壮方法，所产切花整齐度高，一致性好，商品花良品率高。

3：本发明提供的复壮方法中包含“平地选优低温复壮-高山(高原)基地扩繁-平地除劣低温复壮”模式。先利用平地基地的冬季低温实现复壮，再利用高山(高原)基地的凉爽气候实现快速扩繁，有效避免了高温无芽、生长弱化的问题。

4：由本发明复壮方法得到的采穗圃母株(二级母株)由少量初始母株繁殖而来(一株初始母株对应约6000-10000株二级母株)，将其作为商品苗的采穗母株，遗传背景趋同，后代一致性高。

5：现有技术中的其他复壮方法多强调利用特定部位的芽(例如脚芽)复壮，但有的菊花品种脚芽很少发生。而本发明复壮方法并不强调芽的发生位置，侧重优株的选择和劣株的淘汰。

附图说明

图1为感染菊花矮化类病毒的植株(病株)与健株的叶片与花朵对比图。左：病株；右：健株。

图2为初始母株的图片。A为挑选并标记的优株。B为挑选并修剪后的单株老桩。C为挑选并修剪后作为初始母株的老桩群体。

图3为初始母株定植于高山基地的图片。A为定植后的带抽生新枝的初始母株。B为定植后的若干初始母株。C为扩繁中的初始母株。

图4为一级母株的图片。A为用于挑选一级母株的幼苗。B为用于挑选一级母株的植株。C为除劣并修剪后作为一级母株的老桩。

图5为母株经本发明方法复壮的不同时期植株图片。A为2021年9月在浙江省绍兴市平水基地的小苗。B和C均为2021年10月在浙江省绍兴市平水基地的生长中期植株。D为2021年11月26日在浙江省绍兴市平水基地的采收期植株。

图6为母株经本发明方法复壮的植株图片。母株经本发明方法复壮的植株整齐、健壮，无花、叶失色株。

图7为母株未经本发明方法复壮的植株图片。母株未经本发明方法复壮的植株高矮不齐，有部分植株矮小，叶色浅，花色失色。

图8为对比例1中的母株经复壮后的植株图片。

图9为对比例2中的母株经复壮后的植株图片。

图10为对比例3中的母株经复壮后的植株图片。

图11为对比例4中的母株经复壮后的植株图片。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本发明的限制。

下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

下述实施例中的菊花品种红昌是日本精兴园的产品，产品目录号为030-2133。

本发明申请人浙江海丰生物科技股份有限公司在生产实践中通过多年摸索，总结得到一种基于小批量选择的针对秋菊和寒菊类群的菊花母株或母本的复壮方法。具体步骤如下：

一、优选(小比例选留)

1、种植前温室土壤用棉隆或威百亩等消毒剂进行消毒。

2、第1年9月初，选择健壮、无病虫的插穗在平地基地进行扦插种植。种植过程中按照普通苗30选1优株的比例进行优株选择。

普通苗30选1优株的方法具体如下：

1)在相同时间进行种植和停止补光的同一菊花品种不同植株的光反应周期(从停光到开花的日数)呈正态分布。在始花期淘汰早开花、迟开花以及叶片或花朵大小、形状与颜色等性状不具有本品种固有特征的植株，保留光反应周期处于正态分布高峰区且叶片和花朵大小、形状与颜色等性状具有本品种固有特征的三分之一植株。以种植30个植株为例，此处剩余10株。

2)测量步骤1)中保留植株的高度，选留最高的五分之一植株，淘汰其余植株。这时只剩下最初种植数量的十五分之一植株。以种植30个植株为例，此处剩余2株。

3)测量步骤2)中保留植株的从植株顶部往下三分之一处的叶片宽度，选留叶片宽度最大的一半植株。以种植30个植株为例，此处剩余1株。

上述步骤1)-3)中淘汰的植株均连根拔除。

3、经过上述优选，保留下来的是长势健壮，叶片、花朵的大小、形状与颜色等本品种固有特征明显，花期一致。将按最初种植量30选1的比例选择的优株用记号牌做好标记。其中秋菊控制花期在11月下旬开放；寒菊在自然花期开放，待其开花后剪去标有记号牌的优株离地5厘米以上的老枝，留其老桩在土壤中作为初始母株。

二、第一次低温复壮

菊花植株经历夏天高温后长势会变弱，为了恢复强壮的生长势，让初始母株在有活性的状态下经历充分的低温(初始母株越冬)，具体方法如下：将步骤一获得的初始母株在夜间温度为-2℃-5℃，白天温度为5℃-10℃的环境中培育30天以上，保持通风。

三、第一次扩繁

1、第2年2月底至3月初，待初始母株长出3-5个新枝时，带土团挖起后移栽至高山(高原)基地(夜间温度为18-22℃)，并及时摘心。

2、待初始母株侧枝长度为6-20厘米时，留基部1-10叶，采穗进行扦插繁殖，反复扩繁。

四、除劣(小比例筛除)

1、第2年9月初，将从初始母株扩繁而来的植株上采集的插穗在平地基地进行扦插种植，秋菊控制花期在11月下旬开花，寒菊在自然花期开花。

2、待开花时进行除劣，除劣具体方法如下：连根拔除叶片或花朵大小、颜色与形状等性状不符合本品种固有特征的植株和细弱株。剩余的植株剪去离地5厘米以上的老枝，留其老桩在土壤中作为一级母株。

五、第二次低温复壮

按照步骤二中的方法对步骤四获得的一级母株进行低温复壮。

六、第二次扩繁

第3年2月底至3月初，待一级母株抽生新枝，留基部1-10片叶，然后进行摘心。待一级母株再抽生新枝，留基部1-10片叶，采穗在平地基地进行扦插种植，得到采穗圃母株(二级母株)，作为商品苗的采穗母株。

以上整个过程中需注意病虫害防控、施肥、水分管理。如无特殊说明均按照常规方法进行操作。

实施例1、本发明复壮方法在菊花品种“红昌”中的应用

(一)菊花品种“红昌”复壮方法

试验地点：浙江省绍兴市平水基地，种植前温室土壤用棉隆进行消毒。

试验时间：2019年9月-2021年9月。

试验材料：从扩繁的日本小菊红昌(秋菊系)的母株上采收长度约为6-7cm的健壮、无病虫的枝条。

一、优选(小比例选留)

1、扦插：2019年9月3号将长度约为6-7cm的枝条扦插至128孔的穴盘(整张穴盘的长为56厘米，宽为28厘米，穴盘中的基质为育苗泥炭)，每穴扦插一枝，插入深度为2厘米，合计扦插390枝。

2、育苗：扦插后立即浇水，在空气湿度为90-100％、环境温度为18-25℃、光照(自然日照加补光)时间为14h/天、光照强度为2-3万Lux的条件下育苗10-12天，得到小菊幼苗。

3、选优：培育小菊幼苗，待小菊幼苗进入始花期时，按照30：1的比例从普通苗中选择优株。具体选择方法如下：

1)淘汰早开花、迟开花以及叶片或花朵大小、形状与颜色等性状不具有红昌固有特征的植株，保留光反应周期处于正态分布高峰区(光反应周期处于正态分布高峰区的天数为45天)且叶片和花朵大小、形状与颜色等性状具有红昌固有特征的三分之一植株。

2)测量步骤1)中保留植株的高度，选留最高的五分之一植株，淘汰其余植株。

3)测量步骤2)中保留植株的从植株顶部往下三分之一处的叶片宽度，选留叶片宽度最大的一半植株。

上述步骤1)-3)中淘汰的植株均连根拔除。

3、用记号牌对优株做好标记(图2A)，待其开花后，剪去标有记号牌的优株离地5厘米以上的老枝(图2B)，留其老桩在土壤中作为初始母株(图2C)。

二、第一次低温复壮

将步骤一获得的初始母株在夜间温度为-2℃-5℃，白天温度为5℃-10℃的环境中中培育70天，温室保持通风。

三、第一次扩繁

1、2020年2月底，待初始母株长出3-5个新枝时，带土团挖起后移栽至高山基地(浙江金华市磐安县秧田坑基地，夜间温度为20℃左右)(图3A和图3B)，并及时摘心。

2、待初始母株侧枝长度为10厘米时，留基部3片叶，采穗进行扦插繁殖(图3C)，反复扩繁。

四、除劣(小比例筛除)

2020年9月初，将从初始母株扩繁而来的植株上采集的插穗在平地基地(浙江省绍兴市平水基地)进行扦插种植，种植方法如下：

1、扦插：将长度约为6-7cm的枝条扦插至128孔的穴盘(整张穴盘的长为56厘米，宽为28厘米，穴盘中的基质为育苗泥炭)，每穴扦插一枝，插入深度为2厘米，合计扦插6500枝。

2、育苗：扦插后立即浇水，在空气湿度为90-100％、环境温度为18-25℃、光照(自然日照加补光)时间为14h/天、光照强度为2-3万Lux的条件下育苗10-12天，得到小菊幼苗(图4A)。

3、除劣：培育小菊幼苗，待开花时进行除劣(图4B)，除劣具体方法如下：连根拔除叶片或花朵大小、颜色与形状等性状不符合红昌固有特征的植株和细弱株。剩余的植株剪去离地5厘米以上的老枝，留其老桩在土壤中作为一级母株(图4C)。初始母株和一级母株的比例为1:500。

五、第二次低温复壮

按照步骤二中的方法对步骤四获得的一级母株进行低温复壮。

六、第二次扩繁

2021年2月底，待一级母株抽生新枝时，留基部3片叶，然后进行摘心。待一级母株再抽生新枝，留基部3片叶，采穗在平地基地(浙江绍兴市平水基地)进行扦插和培育，得到采穗圃母株(二级母株)，作为商品苗的采穗母株。一级母株和二级母株的比例为1:20。

以上整个过程中需注意病虫害防控、施肥、水分管理。如无特殊说明均按照常规方法进行操作。

(二)复壮效果

2021年9月在浙江省绍兴市平水基地从采穗母株(二级母株)上采收长度约为6-7cm的枝条，然后将采收的枝条进行扦插和培育，花朵开放度为2度时进行采收并进行田间抽样调查，统计商品花良品率。商品花良品率＝(良品商品花数量/采收花总数量)×100％，其中，良品商品花是指植株长势强壮，高度、性状(叶片和花朵大小、形状与颜色)和花期一致，没有叶色失绿和花朵失色，具有品种典型花色特征的采收花。同时以母株未经本发明方法复壮的枝条作为对照。

经过田间抽样调查结果表明：母株经过本发明方法复壮的植株长势强壮，高度一致(高度差小于株高的10％)、性状(叶片和花朵大小、形状与颜色)一致、花期一致，未发现叶色失绿，花朵失色的植株，具有品种典型花色紫红色(图5和图6)，从开始采花到结束只要5-7天，商品花良品率平均为98％。而多年反复扦插种植、母株未经过复壮的植株长势衰弱，参差不齐，部分植株矮化(高度只有正常植株的50-60％)，有45-60％的植株茎杆明显细弱，花期比正常植株早3-7天，叶色失绿，花色明显变成粉白色(区别于本品种正常植株紫红色的花色)(图7)，从开始采花到结束要12-14天，商品花良品率平均为53％，其余均为次品或废品。

对比例1、

(一)复壮方法

试验地点：浙江省绍兴市平水基地，种植前温室土壤用棉隆进行消毒。

试验时间：2015年9月-2020年11月。

试验材料：从扩繁的日本小菊红昌(秋菊系)的母株上采收长度约为6-7cm的健壮、无病虫的枝条。

一、除劣

2015年9月将长度约为6-7cm的枝条进行扦插种植，待开花时进行除劣，除劣具体方法如下：连根拔除叶片或花朵大小、颜色与形状等性状不符合红昌固有特征的植株和细弱株。用记号牌对剩余植株进行标记，并剪去标有记号牌的优株离地5厘米以上的老枝，留其老桩在土壤中作为一级母株。

二、低温复壮

将步骤一获得的一级母株在夜间温度为-2℃-5℃，白天温度为5℃-10℃的环境中中培育70天，温室保持通风。

三、扩繁

2016年2月底3月初，待一级母株抽生新枝时，留基部3片叶，然后进行摘心。待一级植株再抽生新枝，留基部3片叶，采穗进行扦插和培育，得到采穗圃母株(二级母株)，作为商品苗的采穗母株。

(二)复壮效果

2017年9月从采穗母株(二级母株)上采收长度约为6-7cm的枝条，然后将采收的枝条进行扦插和培育，生殖生长期结束后进行采收并进行田间抽样调查。

结果表明：母株经过上述方法复壮的植株中始终有劣变株(图8)。即便母株多次除劣，在母株采穗前的生长过程中每周巡检剔除可疑株，扩繁出来的植株仍然有一定比例劣变株，能够采收合格商品花的采收率只有70-80％。

对比例2、

(一)复壮方法

试验地点：浙江省绍兴市平水基地，种植前温室土壤用棉隆进行消毒。

试验时间：2018年1月-2018年11月。

试验材料：从扩繁的日本小菊红昌(秋菊系)的母株上采收长度约为6-7cm的健壮、无病虫的枝条。

试验方法：

1、2018年1月16日将长度约为6-7cm的枝条进行扦插种植。

2、2018年3月20日开始遮黑处理：每日下午17：00至次日早上7：00遮黑。

3、2018年5月5日开花，挑选优株30株，用泥炭假植于塑料框，在冷库(1-3℃)中保存2个月。

4、2018年7月种植，当年9月采穗进行扦插种植。

(二)复壮效果

2018年9月采收长度约为6-7cm的枝条，然后将采收的枝条进行扦插和培育，生殖生长期结束后进行采收并进行田间抽样调查。

结果表明：后代植株高度有差异(图9)，没有得到健壮、一致的后代。

对比例3、

(一)复壮方法

试验地点：浙江省绍兴市平水基地，种植前温室土壤用棉隆进行消毒。

试验时间：2019年5月-2020年6月。

试验材料：日本小菊夏姬(夏菊系)。

试验方法：

1、2019年5月以挑选的优株花瓣为外植体通过组织培养的方法扩繁制作母本。组织培养所使用的培养基及培养具体如下：

初代培养基：MS+6BA 2.0mg/L+NAA 1.0mg/L+白糖30g/L+琼脂5g/L，PH为6.0；

分化培养基：MS+6BA 3.0mg/L+NAA 0.1mg/L+白糖30g/L+琼脂5g/L，PH为6.0；

增殖培养基：MS+6BA 0.2mg/L+白糖30g/L+琼脂5g/L，PH为6.0；

生根培养基：MS+6BA 0.2mg/L+活性炭0.5mg/L+白糖30g/L+琼脂5g/L，PH为6.0。

2、2019年11月组培苗炼苗下地。

3、2020年3月采穗试种。

4、2020年6月开花。

(二)复壮效果

2020年3月采收长度约为6-7cm的枝条，然后将采收的枝条进行扦插和培育，生殖生长期结束后进行田间抽样调查。

结果表明：组织培养在夏姬上仍然有弱化、花色褪色株，没有得到健壮、一致的后代(图10)。

对比例4、

(一)复壮方法

试验地点：浙江省绍兴市平水基地，种植前温室土壤用棉隆进行消毒。

试验时间：2017年11月-2018年11月。

试验材料：2017年11月26日在平水基地种植的红昌中挑选3株在同批次开花植株中高度最高，茎杆粗壮，叶色深绿，花色紫红色，花期在群体中段开花的植株，分别记作红昌1、红昌2、红昌3。留老根，过冬后扩繁成3个株系。将对比例2中的插穗繁殖的植株记作红昌S；对比例1中除劣所得的插穗繁殖的植株记作红昌D。同时将未处理的母本所取得的插穗繁殖的植株记作对照红昌。

试验方法：2018年9月5日采穗扦插，2018年11月底开花观察。

(二)复壮效果

对不同单株繁殖的群体后代和不同除劣方法的群体后代的生长情况进行了对比。结果如下：3个单株系：红昌1、红昌2、红昌3中没有出现明显矮化，叶色失绿，花期提早的植株。从植株高度、茎杆粗度、叶片宽度、叶色、花朵直径、花色、花期等指标上看一致性高(图11)。对照红昌、红昌S、红昌D中都出现了植株明显矮化、叶色失绿、花色变浅、花期提早的植株。说明优良单株扩繁的后代一致性高。

以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说，在不脱离本发明的宗旨和范围，以及无需进行不必要的实验情况下，可在等同参数、浓度和条件下，在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例，应该理解为，可以对本发明作进一步的改进。总之，按本发明的原理，本申请欲包括任何变更、用途或对本发明的改进，包括脱离了本申请中已公开范围，而用本领域已知的常规技术进行的改变。按以下附带的权利要求的范围，可以进行一些基本特征的应用。

Claims (13)

1.一种菊花母株的复壮方法，包括如下步骤：

1）选优

于9月初，将从母株上采集的插穗进行扦插种植，培育至始花期时进行优株选择，并对所述优株进行标记；待标记的优株开花后剪去离地5厘米以上的枝条，得到初始母株；所述优株选择的方法如下：

1-1）根据植株的开花时间和性状，选留光反应周期处于正态分布高峰区且性状具有本品种固有特征的三分之一植株，淘汰其余植株；所述性状为叶片和/或花朵的大小、形状和/或颜色；

1-2）测量步骤1-1）中保留植株的高度，并选留最高的五分之一植株，淘汰其余植株；

1-3）测量步骤1-2）中保留植株的从植株顶部往下三分之一处的叶片宽度，并选留叶片宽度最大的一半植株；

2）第一次低温复壮

将所述初始母株在夜间温度为-2℃-5℃，白天温度为5℃-10℃的环境中培育30天以上；将所述初始母株在夜间温度为-2℃-5℃，白天温度为5℃-10℃的环境中培育70天，所述培育期间保持通风；

3）第一次扩繁

于第2年2月底至3月初，待所述初始母株长出3-5个新枝时，将其移栽至夜间温度为18℃-22 ℃的环境中，然后进行摘心；待所述初始母株侧枝长度为6-20厘米时，留基部1-10片叶，采穗进行扦插繁殖，反复扩繁；所述第一次扩繁在高山或高原基地进行；

4）除劣

于第2年9月初，将从初始母株扩繁而来的植株上采集的插穗进行扦插种植，待开花时淘汰性状（表型）与本品种固有特征不相符的植株和细弱株，剩余植株剪去离地5厘米以上的枝条，得到一级母株；

5）第二次低温复壮

将所述一级母株在夜间温度为-2℃-5℃，白天温度为5℃-10℃的环境中培育30天以上；

6）第二次扩繁

于第3年2月底至3月初，待所述一级母株抽生新枝，留基部1-10片叶，然后进行摘心；待所述一级母株再抽生新枝，留基部1-10片叶，采穗进行扦插种植，得到二级母株；所述第二次扩繁在平原基地进行。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤1）中，种植前还包括对土壤进行消毒的步骤。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤1）中，选择健壮、无病虫的插穗进行扦插。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤1）包括如下步骤：连根拔除淘汰的植株。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述菊花为秋菊或寒菊。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述菊花为小菊。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述小菊为日本小菊。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述日本小菊的品种为红昌。

9.按照权利要求1-8任一所述方法获得的二级母株。

10.权利要求1-8任一所述方法在提高菊花母株或母本质量和/或品质中的应用。

11.权利要求1-8任一所述方法在制备高质量和/或高品质菊花母株或母本中的应用。

12.权利要求1-8任一所述方法在菊花种植或菊花扩繁或菊花加工品制备中的应用。

13.权利要求9所述的二级母株作为采穗圃母株在菊花种植或菊花扩繁或菊花加工品制备中的应用。

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