CN114062691B - 一种稀释液以及钙卫蛋白校准品 - Google Patents

一种稀释液以及钙卫蛋白校准品 Download PDF

Info

Publication number
CN114062691B
CN114062691B CN202210029728.1A CN202210029728A CN114062691B CN 114062691 B CN114062691 B CN 114062691B CN 202210029728 A CN202210029728 A CN 202210029728A CN 114062691 B CN114062691 B CN 114062691B
Authority
CN
China
Prior art keywords
calprotectin
calibrator
measurement
diluent
results
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202210029728.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN114062691A (zh
Inventor
王莹
陈菲
霍如松
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Suzhou Herui Biotechnology Co ltd
Original Assignee
Suzhou Herui Biotechnology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Suzhou Herui Biotechnology Co ltd filed Critical Suzhou Herui Biotechnology Co ltd
Priority to CN202210029728.1A priority Critical patent/CN114062691B/zh
Publication of CN114062691A publication Critical patent/CN114062691A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN114062691B publication Critical patent/CN114062691B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/96—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood or serum control standard
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/46—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from vertebrates
    • G01N2333/47—Assays involving proteins of known structure or function as defined in the subgroups
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/06—Gastro-intestinal diseases
    • G01N2800/065—Bowel diseases, e.g. Crohn, ulcerative colitis, IBS

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

本发明公开了一种稀释液以及钙卫蛋白校准品，涉及医学检测技术领域，本发明提供了一种用于配制钙卫蛋白校准品的稀释液，包括以下组分：2g/L~50g/L的蛋白类物质、1g/L~20g/L的钙离子、0.1g/L~10g/L的锰离子或锌离子、质量体积比为0.01%~0.05%的防腐剂以及缓冲液。一方面，该稀释液能够有效稳定的维持钙卫蛋白四聚体的空间结构；另一方面，将其应用于钙卫蛋白校准品的配制，能够显著提高钙卫蛋白的抗菌活性和耐热性，使得钙卫蛋白能够在缓冲液的环境中稳定长期地保存。

Description

一种稀释液以及钙卫蛋白校准品
技术领域
本发明涉及医学检测技术领域，具体而言，涉及一种稀释液以及钙卫蛋白校准品。
背景技术
粪便钙卫蛋白（faecal calprotectin，FC）是一种分子量为36 kDa的钙和锌的结合蛋白，是S100A8/A9结合蛋白基因的表达。其成分在中性粒细胞的细胞质所含比例最高，占30%~40%，是急性炎性细胞活化的标志物。其中，粪便钙卫蛋白定量检测成为炎症性肠病、肠癌等肠道器质性疾病的重要标志物。检测粪便中的钙卫蛋白可以区分炎症性肠病、结肠癌和肠易激综合征，并用来监测炎症性肠病的活动性，对疾病的复发、治疗效果具有重要指导意义。
钙卫蛋白是由两条分子量14 kD的重链（MRP14）和一条分子量为8kD的轻链（MRP8）以共价键连接而成的异聚体蛋白，每条链可以结合两个钙离子，在钙离子存在的情况下具有抗蛋白酶的活性，并因具有螯合锌离子的能力而具有抗热性，这些特性使得钙卫蛋白在肠腔和外界环境中可以长期保持稳定而不被各种酶和细菌破坏。钙卫蛋白在粪便中容易测得，且其成分稳定，但是脱离了粪便的环境，在一般的缓冲液中，钙卫蛋白稳定性较差。
目前，用于检测钙卫蛋白的方法主要是酶联免疫吸附试验（ELISA）及胶体金免疫层析法和免疫比浊法等。检测时均需要性能稳定可靠的校准品进行校准，才能确保检测结果的准确性。而且，免疫学定量检测时需要检测到四聚体，确保检验结果的准确性。
天然蛋白提取价格昂贵，不适合工业化生产。现有技术大部分厂家采用钙卫蛋白重组蛋白制备校准品，但配置的校准品与粪便基质的区别导致检测结果偏差较大，另一方面，重组蛋白制备的校准品稳定性差，测值不准确。有厂家做成冻干粉的状态，于2-8℃的条件下保存，溶解后保持稳定性的时间仅1h，于15-30℃的条件下保存，溶解后保持稳定性的时间仅30min。保质期非常短，不适合实验室或医院定期校准使用。
鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的目的在于提供一种稀释液以及钙卫蛋白校准品。
本发明是这样实现的：
第一方面，本发明实施例提供了一种稀释液，应用于配制钙卫蛋白校准品，所述稀释液包括以下组分：2g/L~50g/L的蛋白类物质、1g/L~20g/L的钙离子、0.1g/L~10g/L的锰离子或锌离子、质量体积比为0.01%~0.05%的防腐剂以及缓冲液。
第二方面，本发明实施例提供了一种钙卫蛋白校准品，其采用如前述实施例所述的稀释液稀释钙卫蛋白获得。
第三方面，本发明实施例提供了前述实施例所述的稀释液在制备钙卫蛋白校准品中的应用。
第四方面，本发明实施例提供了如前述实施例所述的稀释液或如前述实施例所述的钙卫蛋白校准品在检测钙卫蛋白中的应用，所述应用不以疾病的诊断或治疗为直接目的。
本发明具有以下有益效果：
本发明提供了一种用于配制钙卫蛋白校准品的稀释液，一方面，其能够有效稳定的维持钙卫蛋白四聚体的空间结构，另一方面，将其应用于钙卫蛋白校准品的配制，能够显著提高钙卫蛋白的抗菌活性和耐热性，使得钙卫蛋白能够在缓冲液的环境中稳定长期地保存。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为实施例2中的校准曲线；
图2为实施例9的校准曲线；
图3为实施例11的校准曲线；
图4为实施例15的校准曲线；
图5为对比例4的校准曲线；
图6为对比例5的校准曲线；
图7为对比例6的校准曲线；
图8为实施例2的基质效应分析图；
图9为实施例9的基质效应分析图；
图10为实施例11的基质效应分析图；
图11为实施例15的基质效应分析图；
图12为对比例4的基质效应分析图；
图13为对比例5的基质效应分析图；
图14为对比例6的基质效应分析图；
图8~14中，实线为临床样本测定的回归曲线，虚线为其预测值y的95%置信区间；“□”代表临床样本，“+”代表校准品，凡是落在虚线范围外的“+”，均判断为有基质效应。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
本发明实施例提供了一种稀释液，所述稀释液包括以下组分：2g/L~50g/L的蛋白类物质、1g/L~20g/L的钙离子、0.1g/L~10g/L的锰离子或锌离子、质量体积比为0.01%~0.05%的防腐剂以及缓冲液。
上述稀释液能够有效稳定的维持钙卫蛋白四聚体的空间结构，将其应用于钙卫蛋白校准品的配制，能够显著提高钙卫蛋白的抗菌活性和耐热性，使得钙卫蛋白能够在缓冲液的环境中稳定长期地保存。
具体地，蛋白类物质在稀释液中的浓度可以在上述限定范围下任意选择，例如2g/L、5g/L、10g/L、15g/L、20g/L、25g/L、30g/L、35g/L、40g/L、45g/L和50g/L中的任意一项或任意两项之间的范围。
钙离子在稀释液中的浓度可以在上述限定范围下任意选择，例如1g/L、5g/L、10g/L、15g/L和20g/L中的任意一项或任意两项之间的范围。钙卫蛋白是由S100A8(93个氨基酸，10.8 kDa，α)和S100A9(114个氨基酸，13.2 kDa，β)的异二聚体和四聚体。钙卫蛋白是否以αβ或α2β2的形式存在取决于钙离子。在没有钙离子的情况下，αβ二聚体占主导地位，而钙离子结合导致α2β2四聚体的形成，优选地，1.5g/L~2g/L的配比下，能够更好的促进α2β2四聚体的形成，提高钙卫蛋白的稳定性。
锰离子或锌离子的浓度可以在上述限定范围下任意选择，例如0.1g/L、0.5g/L、1g/L、1.5g/L、2.0g/L、2.5g/L、3.5g/L、4g/L、4.5g/L、5g/L、5.5g/L、6g/L、6.5g/L、7g/L、7.5g/L、8g/L、8.5g/L、9g/L、9.5g/L和10g/L中的任意一项或任意两项之间的范围。钙卫蛋白螯合钙离子后，钙卫蛋白对锰和锌具有高亲和力，在本申请的特定配比下，结合锰和/或锌后，能够使得钙卫蛋白具有良好的抗菌活性。
在优选的实施方案中，所述稀释液包括以下组分：5g/L~20g/L的蛋白类物质、2g/L~3g/L的钙离子、0.5g/L~5g/L的锰离子或锌离子、质量体积比为0.01%~0.05%的防腐剂以及缓冲液。优选配比能够对应获得更好的技术效果。
在优选的实施方案中，所述缓冲液选自0.01M~0.5M Tris-HCl缓冲液和0.01M~0.2M硼酸盐缓冲液中的任意一种。优选地，Tris-HCl的终浓度可以在上述限定的范围下任意选择，例如0.01M、0.5M、1M、1.5M、2M、2.5M、3M、3.5M、4M、4.5M和5M中的任意一项或任意两项之间的范围。硼酸盐的终浓度可以在上述限定的范围下任意选择，例如0.01M、0.02M、0.04M、0.06M、0.08M、0.1M、0.12M、0.14M、0.16M、0.18M和0.2M中的任意一项或任意两项之间的范围。
在优选的实施方案中，所述缓冲液的pH为6~9，具体可以为6、7、8和9中的任意一项或任意两项之间的范围。
在优选的实施方案中，所述蛋白类物质选自血清白蛋白、小牛血清、胎牛血清和鸡卵白蛋白中的任意一种。
不对防腐剂的种类进行限定，在优选的实施方案中，所述防腐剂选自叠氮钠和Proclin300中的任意一种。
本发明实施例提供了一种钙卫蛋白校准品，其包括采用如前述任意实施例所述的稀释液稀释钙卫蛋白获得。
本发明实施例提供了前述任意实施例所述的稀释液在制备钙卫蛋白校准品中的应用。
所述钙卫蛋白校准品由所述稀释液稀释钙卫蛋白获得。
可以理解的是，所述稀释液可以同前述任意实施例中的所述的稀释液，在此不再赘述。
本发明实施例提供了如前述任意实施例所述的稀释液或如前述任意实施例所述的钙卫蛋白校准品在检测钙卫蛋白中的应用，所述应用不以疾病的诊断或治疗为直接目的。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
一种钙卫蛋白校准品，其由钙卫蛋白稀释液稀释重组钙卫蛋白获得，本实施例稀释得到5个浓度（20μg/ml、5μg/ml、1.2μg/ml、0.3μg/ml和0.1μg/ml）的钙卫蛋白校准品溶液，钙卫蛋白稀释液的组分及其配比如表1所示。
实施例2~实施例15，以及对比例1~8也提供了一种钙卫蛋白校准品，均与实施例1大致相同，区别在于钙卫蛋白稀释液的组分以及配比的不同，其组分及其配比如表1所示。
表1 钙卫蛋白稀释液
实施例 缓冲液 pH 蛋白类物质 钙离子 锰/锌 防腐剂
实施例1 0.05M Tris-HCl缓冲液 8.5 小牛血清0.5% 氯化钙10g/L 氯化锰0.5g/L 叠氮钠0.03%
实施例2 0.02M硼酸盐缓冲液 7.4 BSA10g/L 氯化钙2.5g/L 氯化锌5g/L p3000.04%
实施例3 0.05M硼酸盐缓冲液 8 OVA20g/L 氯化钙5g/L 氯化锌0.5g/L p3000.04%
实施例4 0.05M磷酸盐缓冲液 6.8 BSA5g/L 氯化钙0.5g/L 氯化锰0.1g/L 叠氮钠0.03%
实施例5 0.02M硼酸盐缓冲液 7.4 BSA10g/L 氯化钙1g/L 氯化锌5g/L p3000.04%
实施例6 0.02M硼酸盐缓冲液 7.4 BSA10g/L 氯化钙2g/L 氯化锌5g/L p3000.04%
实施例7 0.02M硼酸盐缓冲液 7.4 BSA10g/L 氯化钙3g/L 氯化锌5g/L p3000.04%
实施例8 0.02M硼酸盐缓冲液 7.4 BSA10g/L 氯化钙2.5g/L 氯化锌1.5g/L p3000.04%
实施例9 0.02M硼酸盐缓冲液 7.4 BSA10g/L 氯化钙2.5g/L 氯化锌2.5g/L p3000.04%
实施例10 0.02M硼酸盐缓冲液 7.4 BSA10g/L 氯化钙2.5g/L 氯化锌7.5g/L p3000.04%
实施例11 0.02M硼酸盐缓冲液 7.4 BSA10g/L 氯化钙2.5g/L 氯化锰2.5g/L p3000.04%
实施例12 0.02M硼酸盐缓冲液 7.4 BSA10g/L 氯化钙2.5g/L 氯化锰5g/L p3000.04%
实施例13 0.05M硼酸盐缓冲液 7.4 BSA40g/L 氯化钙2.5g/L 氯化锌5g/L p3000.04%
实施例14 0.05M硼酸盐缓冲液 7.4 BSA5g/L 氯化钙2.5g/L 氯化锌5g/L p3000.04%
实施例15 0.02M硼酸盐缓冲液 7.4 小牛血清1% 氯化钙2.5g/L 氯化锌5g/L p3000.04%
对比例1 0.02M硼酸盐缓冲液 8.5 BSA20g/L / / p3000.04%
对比例2 0.02M磷酸盐缓冲液 7 OVA10g/L / / p3000.04%
对比例3 0.05M Tris -HCl缓冲液 6.5 BSA10g/L / / p3000.04%
对比例4 生理盐水 7 小牛血清1% / / 叠氮钠0.03%
对比例5 0.02M硼酸盐缓冲液 7.4 BSA10g/L 氯化钙2.5g/L 氯化铁5g/L p3000.04%
对比例6 0.02M硼酸盐缓冲液 7.4 BSA10g/L 氯化钙2.5g/L / p3000.04%
对比例7 0.02M硼酸盐缓冲液 7.4 BSA10g/L / 氯化锌5g/L p3000.04%
对比例8 0.02M硼酸盐缓冲液 7.4 / 氯化钙2.5g/L 氯化锌5g/L p3000.04%
试验例1：稳定性
采用钙卫蛋白检测试剂盒（酶联免疫吸附法，铂尔曼）对制备的钙卫蛋白校准品进行实时稳定性、热稳定实验来评价实施例1~15以及对比例1~8的钙卫蛋白校准品的稳定性。
分别在校准品配置完成当天（0天）、2-8℃ 1个月、6个月、12个月、18个月、24个月及37℃放置3天、37℃7天、37℃14天，每次每个点平行检测3次，取平均值，与配制当天（0天）进行对比分析，计算相对偏差，相对偏差应不大于15%。
计算公式：相对偏差B（%）=（平均测值-第0天测值）/第0天测值×100%。
实施例1的校准品稳定性评价数据见表2。
表2 稳定性结果
Figure T_220111181324335_335088002
实施例2的校准品稳定性评价数据见表3。
表3 稳定性结果
Figure T_220111181324523_523562003
实施例3的校准品稳定性评价数据见表4。
表4 稳定性结果
Figure T_220111181324717_717898004
实施例4的校准品稳定性评价数据见表5。
表5 稳定性结果
Figure T_220111181324893_893705005
实施例5的校准品稳定性评价数据见表6。
表6 稳定性结果
Figure T_220111181325161_161255006
实施例6的校准品稳定性评价数据见表7。
表7 稳定性结果
Figure T_220111181325334_334590007
实施例7的校准品稳定性评价数据见表8。
表8 稳定性结果
Figure T_220111181325586_586065008
实施例8的校准品稳定性评价数据见表9。
表9 稳定性结果
Figure T_220111181325989_989847009
实施例9的校准品稳定性评价数据见表10。
表10 稳定性结果
Figure T_220111181326194_194494010
实施例10的校准品稳定性评价数据见表11。
表11 稳定性结果
Figure T_220111181326380_380493011
实施例11的校准品稳定性评价数据见表12。
表12 稳定性结果
Figure T_220111181326583_583621012
实施例12的校准品稳定性评价数据见表13。
表13 稳定性结果
Figure T_220111181326773_773566013
实施例13的校准品稳定性评价数据见表14。
表14 稳定性结果
Figure T_220111181326963_963044014
实施例14的校准品稳定性评价数据见表15。
表15 稳定性结果
Figure T_220111181327167_167602015
实施例15的校准品稳定性评价数据见表16。
表16 稳定性结果
Figure T_220111181327443_443478016
对比例1的校准品稳定性评价数据见表17。
表17 稳定性结果
Figure T_220111181327635_635396017
对比例2的校准品稳定性评价数据见表18。
表18 稳定性结果
Figure T_220111181327824_824409018
对比例3的校准品稳定性评价数据见表19。
表19 稳定性结果
Figure T_220111181328060_060180019
对比例4的校准品稳定性评价数据见表20。
表20 稳定性结果
Figure T_220111181328272_272595020
对比例5的校准品稳定性评价数据见表21。
表21 稳定性结果
Figure T_220111181328446_446905021
对比例6的校准品稳定性评价数据见表22。
表22 稳定性结果
Figure T_220111181328708_708606022
对比例7的校准品稳定性评价数据见表23。
表23 稳定性结果
Figure T_220111181328896_896089023
对比例8的校准品稳定性评价数据见表24。
表24 稳定性结果
Figure T_220111181329099_099268024
以相对偏差-15%~15%的时间作为稳定时间对实验结果进行汇总分析如表25所示。
表25 稳定性试验结果汇总
Figure P_220111181329443_443024001
Figure P_220111181329583_583612001
表25（续） 稳定性试验结果汇总
Figure P_220111181329772_772633001
由结果可知，实施例1、2、3、6、7、10、15中的校准品均可在4℃冷藏环境下稳定保存24个月，实施例4、5、8、9、11、12、13、14中的校准品均可在4℃冷藏环境下保存18个月。而对比例中仅对比例5中的校准品可在4℃冷藏环境下保存12个月，其余对比例中的校准品仅可在4℃冷藏环境下保存1-6个月不等。实施例提供的校准品稀释液中添加钙离子能更好的维持钙卫蛋白四聚体的空间结构，锰离子或锌离子可因其抗菌活性和耐热性可在缓冲液的环境中长期稳定保存。
试验例2：均一性
对实施例2~3，对比例1~2的校准品，用钙卫蛋白检测试剂盒（酶联免疫吸附法，铂尔曼）进行均一性评价。
实验方案：对实施例2、3、6、9、11、13、15，对比例1、4、5、6、7、8得到的校准品，分别连续测定10次，按照计算平均值M和标准差SD，计算变异系数CV（瓶内），CV应≤5%。计算公式如下：CV(%)=SD/M×100%。
实施例2校准品的均一性实验结果见表26。
表26 均一性实验结果
测值 20μg/ml 5μg/ml 1.2μg/ml 0.3μg/ml 0.1μg/ml
测定1 19.6 5 1.22 0.28 0.078
测定2 19.2 4.8 1.23 0.31 0.088
测定3 19.6 4.6 1.28 0.29 0.079
测定4 18.9 5.2 1.21 0.31 0.078
测定5 19 4.8 1.26 0.32 0.081
测定6 19.6 4.9 1.23 0.29 0.084
测定7 19.4 5.1 1.18 0.28 0.085
测定8 19.4 4.8 1.19 0.29 0.078
测定9 19.6 4.9 1.23 0.29 0.087
测定10 19.6 5.1 1.15 0.29 0.081
平均值 19.39 4.92 1.22 0.30 0.08
标准差 0.2685 0.1814 0.0379 0.0135 0.0038
变异系数CV 1.4% 3.7% 3.1% 4.6% 4.7%
实施例3校准品的均一性实验结果见表27。
表27 均一性实验结果
测值 20μg/ml 5μg/ml 1.2μg/ml 0.3μg/ml 0.1μg/ml
测定1 20.1 5.1 1.29 0.31 0.080
测定2 19.9 5 1.22 0.32 0.079
测定3 19.5 4.8 1.23 0.31 0.075
测定4 19.9 5.1 1.28 0.29 0.079
测定5 19.1 4.9 1.23 0.32 0.086
测定6 19.6 5.1 1.19 0.29 0.083
测定7 19.8 4.9 1.17 0.32 0.085
测定8 19.4 5.1 1.21 0.29 0.076
测定9 20.1 5.0 1.23 0.30 0.082
测定10 19.6 5.1 1.21 0.30 0.081
平均值 19.70 5.01 1.23 0.31 0.08
标准差 0.3197 0.1101 0.0366 0.0127 0.0036
变异系数CV 1.6% 2.2% 3.0% 4.2% 4.4%
实施例6校准品的均一性实验结果见表28。
表28 均一性实验结果
测值 20μg/ml 5μg/ml 1.2μg/ml 0.3μg/ml 0.1μg/ml
测定1 18.9 5.1 1.29 0.31 0.085
测定2 19.7 5.2 1.22 0.33 0.089
测定3 19.4 5.5 1.23 0.31 0.086
测定4 19.1 5.1 1.28 0.32 0.093
测定5 20 5.2 1.23 0.3 0.089
测定6 20 5.5 1.19 0.33 0.086
测定7 19.2 5.3 1.17 0.32 0.088
测定8 20.9 5.1 1.21 0.32 0.092
测定9 19.4 5.2 1.23 0.31 0.087
测定10 19.6 5.3 1.21 0.32 0.091
平均值 19.62 5.25 1.23 0.32 0.09
标准差 0.5770 0.1509 0.0366 0.0095 0.0027
变异系数CV 2.9% 2.9% 3.0% 3.0% 3.1%
实施例9校准品的均一性实验结果见表29。
表29 均一性实验结果
测值 20μg/ml 5μg/ml 1.2μg/ml 0.3μg/ml 0.1μg/ml
测定1 20.1 5.3 1.29 0.31 0.089
测定2 19.5 5 1.23 0.29 0.088
测定3 20.4 5.1 1.16 0.31 0.092
测定4 21.1 5.2 1.26 0.32 0.092
测定5 20.3 5.3 1.33 0.29 0.096
测定6 19.1 5 1.21 0.31 0.094
测定7 20.6 5 1.25 0.29 0.093
测定8 20.5 5.1 1.27 0.31 0.089
测定9 20.5 5.2 1.23 0.32 0.089
测定10 20.8 4.9 1.24 0.31 0.091
平均值 20.29 5.11 1.25 0.31 0.09
标准差 0.5953 0.1370 0.0460 0.0117 0.0026
变异系数CV 2.9% 2.7% 3.7% 3.8% 2.8%
实施例11校准品的均一性实验结果见表30。
表30 均一性实验结果
测值 20μg/ml 5μg/ml 1.2μg/ml 0.3μg/ml 0.1μg/ml
测定1 20.6 5.1 1.22 0.28 0.096
测定2 21.4 4.7 1.25 0.29 0.088
测定3 19.6 5.1 1.22 0.32 0.092
测定4 19.9 5 1.27 0.31 0.093
测定5 21.4 5.1 1.24 0.31 0.088
测定6 21.2 4.9 1.29 0.29 0.087
测定7 19.7 4.7 1.21 0.31 0.089
测定8 20.9 5.1 1.35 0.3 0.087
测定9 21.1 4.9 1.23 0.30 0.094
测定10 19.6 5 1.21 0.30 0.094
平均值 20.54 4.96 1.25 0.30 0.09
标准差 0.7633 0.1578 0.0441 0.0120 0.0034
变异系数CV 3.7% 3.2% 3.5% 4.0% 3.7%
实施例13校准品的均一性实验结果见表31。
表31 均一性实验结果
测值 20μg/ml 5μg/ml 1.2μg/ml 0.3μg/ml 0.1μg/ml
测定1 19.8 4.8 1.21 0.3 0.083
测定2 20.6 4.8 1.28 0.29 0.092
测定3 19.8 5 1.25 0.31 0.088
测定4 20.8 5.1 1.23 0.3 0.089
测定5 19.5 5.1 1.15 0.29 0.089
测定6 19.8 5.2 1.21 0.31 0.087
测定7 20.2 5 1.23 0.29 0.092
测定8 19.7 5.1 1.24 0.29 0.092
测定9 21 5.0 1.21 0.28 0.087
测定10 19.9 4.8 1.21 0.30 0.094
平均值 20.11 4.99 1.22 0.30 0.09
标准差 0.5152 0.1449 0.0339 0.0097 0.0033
变异系数CV 2.6% 2.9% 2.8% 3.3% 3.7%
实施例15校准品的均一性实验结果见表32。
表32 均一性实验结果
测值 20μg/ml 5μg/ml 1.2μg/ml 0.3μg/ml 0.1μg/ml
测定1 19.7 5 1.32 0.3 0.077
测定2 19.7 4.9 1.21 0.3 0.077
测定3 19.1 5.2 1.3 0.29 0.077
测定4 20.5 5.2 1.24 0.29 0.085
测定5 21.8 4.9 1.29 0.32 0.081
测定6 20.5 5.3 1.28 0.29 0.082
测定7 20.8 5.3 1.22 0.29 0.073
测定8 19.6 4.7 1.17 0.31 0.079
测定9 19.8 5.0 1.23 0.29 0.077
测定10 19.6 5.1 1.21 0.30 0.081
平均值 20.11 5.06 1.25 0.30 0.08
标准差 0.7894 0.1955 0.0481 0.0103 0.0034
变异系数CV 3.9% 3.9% 3.9% 3.5% 4.3%
对比例1校准品的均一性实验结果见表33。
表33 均一性实验结果
测值 20μg/ml 5μg/ml 1.2μg/ml 0.3μg/ml 0.1μg/ml
测定1 19.6 5 1.25 0.29 0.085
测定2 19.9 5.2 1.23 0.31 0.079
测定3 21.2 5.1 1.19 0.29 0.089
测定4 21 4.9 1.25 0.28 0.082
测定5 21.6 4.8 1.19 0.32 0.083
测定6 20.2 5.1 1.32 0.29 0.075
测定7 20.6 4.9 1.35 0.31 0.086
测定8 19 4.7 1.29 0.29 0.08
测定9 20 5.2 1.26 0.28 0.076
测定10 19.6 4.8 1.15 0.31 0.084
平均值 20.27 4.97 1.25 0.30 0.081
标准差 0.8166 0.1767 0.0616 0.0142 0.0044
变异系数CV 4.0% 3.6% 4.9% 4.8% 5.5%
对比例4校准品的均一性实验结果见表34。
表34 均一性实验结果
测值 20μg/ml 5μg/ml 1.2μg/ml 0.3μg/ml 0.1μg/ml
测定1 19.6 5 1.23 0.28 0.088
测定2 19.7 4.8 1.23 0.31 0.085
测定3 20.6 4.7 1.24 0.31 0.092
测定4 18.3 5.2 1.24 0.29 0.086
测定5 19.4 4.6 1.14 0.29 0.087
测定6 20.5 5.1 1.23 0.31 0.084
测定7 19.2 5 1.23 0.29 0.089
测定8 19.5 4.9 1.15 0.28 0.096
测定9 19.1 4.9 1.34 0.32 0.086
测定10 20.3 4.8 1.15 0.31 0.081
平均值 19.62 4.90 1.22 0.30 0.09
标准差 0.7036 0.1826 0.0594 0.0145 0.0042
变异系数CV 3.6% 3.7% 4.9% 4.8% 4.8%
对比例5校准品的均一性实验结果见表35。
表35 均一性实验结果
测值 20μg/ml 5μg/ml 1.2μg/ml 0.3μg/ml 0.1μg/ml
测定1 20.5 5.1 1.25 0.33 0.076
测定2 19.8 5.1 1.17 0.31 0.087
测定3 21.4 4.9 1.27 0.31 0.078
测定4 21.2 4.6 1.19 0.32 0.081
测定5 19.7 5.2 1.14 0.33 0.086
测定6 21.2 4.6 1.16 0.31 0.087
测定7 19.8 4.7 1.17 0.32 0.077
测定8 21.1 4.9 1.12 0.3 0.078
测定9 19.7 4.9 1.11 0.29 0.076
测定10 18.3 4.9 1.24 0.32 0.084
平均值 20.27 4.89 1.18 0.31 0.081
标准差 0.9844 0.2079 0.0551 0.0126 0.0046
变异系数CV 4.9% 4.3% 4.7% 4.0% 5.7%
对比例6校准品的均一性实验结果见表36。
表36 均一性实验结果
测值 20μg/ml 5μg/ml 1.2μg/ml 0.3μg/ml 0.1μg/ml
测定1 21.3 5.1 1.26 0.31 0.093
测定2 18.9 5.4 1.31 0.32 0.098
测定3 18.6 5.1 1.23 0.32 0.097
测定4 20 4.9 1.21 0.3 0.095
测定5 19.7 5.2 1.21 0.29 0.092
测定6 20.1 5.5 1.22 0.32 0.096
测定7 19.6 5.1 1.32 0.33 0.093
测定8 19.6 5.3 1.27 0.32 0.097
测定9 20.1 5 1.26 0.31 0.095
测定10 20.2 4.8 1.25 0.33 0.086
平均值 19.81 5.14 1.25 0.32 0.081
标准差 0.7430 0.2171 0.0386 0.0127 0.0035
变异系数CV 3.8% 4.2% 3.1% 4.0% 4.3%
对比例7校准品的均一性实验结果见表37。
表37均一性实验结果
测值 20μg/ml 5μg/ml 1.2μg/ml 0.3μg/ml 0.1μg/ml
测定1 19.7 5 1.19 0.32 0.085
测定2 19.2 4.5 1.24 0.32 0.082
测定3 20.8 5 1.19 0.31 0.081
测定4 19.1 4.8 1.23 0.28 0.084
测定5 18.6 4.6 1.21 0.29 0.085
测定6 18.8 5 1.17 0.3 0.081
测定7 18.9 5.1 1.27 0.31 0.079
测定8 20.8 5.3 1.25 0.29 0.075
测定9 18.3 5 1.32 0.31 0.076
测定10 19.6 4.8 1.21 0.31 0.084
平均值 19.38 4.91 1.23 0.30 0.081
标准差 0.8587 0.2378 0.0444 0.0135 0.0036
变异系数CV 4.4% 4.8% 3.6% 4.4% 4.4%
对比例8校准品的均一性实验结果见表38。
表38 均一性实验结果
测值 20μg/ml 5μg/ml 1.2μg/ml 0.3μg/ml 0.1μg/ml
测定1 19.1 4.7 1.34 0.29 0.087
测定2 21.3 4.9 1.30 0.33 0.085
测定3 19.5 5.1 1.22 0.31 0.079
测定4 18.9 5.3 1.27 0.3 0.086
测定5 21.8 5.1 1.19 0.27 0.077
测定6 20.5 5.3 1.17 0.29 0.082
测定7 19.7 5.5 1.22 0.33 0.073
测定8 20.3 5.3 1.36 0.28 0.078
测定9 20.5 4.9 1.32 0.31 0.073
测定10 19.7 4.9 1.21 0.31 0.088
平均值 20.13 5.10 1.26 0.30 0.081
标准差 0.9310 0.2494 0.0670 0.0199 0.0056
变异系数CV 4.6% 4.9% 5.3% 6.6% 6.9%
实验结果汇总如表39所示。
表39 均一性实验结果汇总
浓度 20μg/ml 5μg/ml 1.2μg/ml 0.3μg/ml 0.1μg/ml
实施例2 1.4% 3.7% 3.1% 4.6% 4.7%
实施例3 1.6% 2.2% 3.0% 4.2% 4.4%
实施例6 2.9% 2.9% 3.0% 3.0% 3.1%
实施例9 2.9% 2.7% 3.7% 3.8% 2.8%
实施例11 3.7% 3.2% 3.5% 4.0% 3.7%
实施例13 2.6% 2.9% 2.8% 3.3% 3.7%
实施例15 3.9% 3.9% 3.9% 3.5% 4.3%
对比例1 4.0% 3.6% 4.9% 4.8% 5.5%
对比例4 3.6% 3.7% 4.9% 4.8% 4.8%
对比例5 4.9% 4.3% 4.7% 4.0% 5.7%
对比例6 3.8% 4.2% 3.1% 4.0% 4.3%
对比例7 4.4% 4.8% 3.6% 4.4% 4.4%
对比例8 4.6% 4.9% 5.3% 6.6% 6.9%
由结果可知，实施例2、3、6、9、11、13、15及对比例4、6、7均一性较好，CV均＜5%，对比例1和对比例5仅最低值0.1μg/ml的均一性稍差（CV5.5%），其余4个点校准品均一性较好。分析原因可能为几种校准品稀释液中均含有不同浓度的蛋白，蛋白类物质对蛋白有一定的保护作用，对比例8缺少蛋白类保护，均一性稍差。实施例2、3、6、9、11、13、15中均含有蛋白及含钙离子及锌（锰）离子，对比例4中含钠离子，均有一定的离子浓度，对钙卫蛋白的均一性起到正向的作用。
试验例3：基质效应
采用实施例2、9、11、15的校准品及对比例4、5、6的校准品应用于钙卫蛋白检测试剂盒（胶体金法或免疫比浊法）。并对校准品的基质效应进行评估。
以钙卫蛋白检测试剂盒（胶体金法）对校准品进行检测，每个点平行测定5次制备校准曲线，校准品浓度为10μg/ml、5μg/ml、1.2μg/ml、0.3μg/ml和0.1μg/ml，根据样本稀释倍数，样本的检测范围为2000μg/g、1000μg/g、240μg/g、60μg/g和20μg/g。拟合R2均＞0.99。校准曲线如图1~图7所示。
参考WST356-2011对制备的校准品进行基质效应评价：对临床样本和制备的校准品进行分析，利用试剂盒原曲线测值为比对方法，制备的校准品的新曲线测值为评估方法，测定临床样品的结果建立数学关系（回归）。制备样品测定的结果偏离这一数学关系的程度即反映其基质效应的大小。将制备校准品与20份新鲜临床样品随机穿插排列，分别使用评估方法与比对方法测定所有样品，重复测定3次，每次测定都需校准，评估方法与比对方法宜同步进行。
利用新鲜临床样品及制备样品重复测定结果的均值（使用不同符号）作散点图。y轴为评估方法结果，x轴为对比方法结果。
根据以下公式计算给定x值下（重复测量均值），新鲜临床样本评估方法测定均值y的双侧95%置信区间。
Figure F_220111181307382_382429001
；
式中：
Figure F_220111181307537_537267002
——根据回归曲线，计算出来的在
Figure F_220111181307646_646091003
值的
Figure F_220111181307864_864917004
值；
Figure F_220111181307989_989857005
——新鲜患者样本数量；
Figure F_220111181308114_114890006
——常数项，线性回归时为2，二次回归时为3；
Figure F_220111181308224_224289007
——回归标准误，计算公式为：
Figure F_220111181308536_536770008
；
Figure F_220111181308929_929694009
——X轴上第
Figure F_220111181309036_036782010
个值（某样本比对方法测定均值）；
Figure F_220111181309177_177369011
——Y轴上第
Figure F_220111181309318_318017012
个值（某样本评估方法测定均值）；
Figure F_220111181309427_427363013
——所有样本比对方法测定均值的整体均值。
利用以上方程，将比对方法测定均值作为x轴，计算每个制备样本的y值的95%置信区间，如果评估方法的测定均值落在该区间内，说明该制备样本对评估方法无基质效应，表明该物质在比对方法和评估方法间具有互通性。需要注意的是，若两种测定方法间的特异性差异较大，测定结果间的相关性将会受到影响，从而导致计算出来的置信区间偏大，以至于无法检出不太显著的基质效应，影响最终的结论。
在散点图上，将一系列临床样本的比对方法测定的均值（x）与对应的y值的95%预测区间在回归线两边标记出来。若制备样品的点落在预测区间线条之外则说明存在基质效应。若制备样品的点在置信区间内，则表明不存在基质效应。
实施例2的钙卫蛋白校准品的评估结果见表40、表41和图8。
表40 钙卫蛋白校准品基质效应评估结果-直线回归数据分析表
Figure P_220111181330055_055390001
Figure P_220111181330228_228655001
表40（续） 钙卫蛋白校准品基质效应评估结果-直线回归数据分析表
Figure P_220111181330458_458575001
Figure P_220111181330702_702280001
表41 实施例2的钙卫蛋白校准品基质效应评估
Figure T_220111181330804_804795039
实施例9的钙卫蛋白校准品的评估结果见表42、表43和图9。
表42 钙卫蛋白校准品基质效应评估结果-直线回归数据分析表
Figure P_220111181331021_021104001
表42（续） 钙卫蛋白校准品基质效应评估结果-直线回归数据分析表
Figure P_220111181331286_286767001
表42（续） 钙卫蛋白校准品基质效应评估结果-直线回归数据分析表
Figure P_220111181331537_537748001
表43 实施例9的钙卫蛋白校准品基质效应评估
Figure T_220111181331678_678836040
实施例11的钙卫蛋白校准品的评估结果见表44、表45和图10。
表44 钙卫蛋白校准品基质效应评估结果-直线回归数据分析表
Figure P_220111181331899_899116001
表44（续） 钙卫蛋白校准品基质效应评估结果-直线回归数据分析表
Figure P_220111181332150_150581001
Figure P_220111181332443_443011001
表45 实施例11的钙卫蛋白校准品基质效应评估
Figure T_220111181332552_552386041
实施例15的钙卫蛋白校准品的评估结果见表46、表47和图11。
表46 钙卫蛋白校准品基质效应评估结果-直线回归数据分析表
Figure P_220111181332905_905398001
表46（续） 钙卫蛋白校准品基质效应评估结果-直线回归数据分析表
Figure P_220111181333141_141793001
表46（续） 钙卫蛋白校准品基质效应评估结果-直线回归数据分析表
Figure P_220111181333409_409611001
表46（续） 钙卫蛋白校准品基质效应评估结果-直线回归数据分析表
Figure P_220111181333644_644710001
表47 实施例15的钙卫蛋白校准品基质效应评估
Figure T_220111181333707_707658042
对比例4的钙卫蛋白校准品的评估结果见表48、表49和图12。
表48 钙卫蛋白校准品基质效应评估结果-直线回归数据分析表
Figure P_220111181333932_932783001
Figure P_220111181334173_173049001
表48（续） 钙卫蛋白校准品基质效应评估结果-直线回归数据分析表
Figure P_220111181334407_407316001
表49 对比例4的钙卫蛋白校准品基质效应评估
Figure T_220111181334470_470338043
对比例5的钙卫蛋白校准品的评估结果见表50、表51和图13。
表50 钙卫蛋白校准品基质效应评估结果-直线回归数据分析表
Figure P_220111181334721_721802001
表50（续） 钙卫蛋白校准品基质效应评估结果-直线回归数据分析表
Figure P_220111181334943_943586001
表50（续） 钙卫蛋白校准品基质效应评估结果-直线回归数据分析表
Figure P_220111181335149_149120001
表51 对比例5的钙卫蛋白校准品基质效应评估
Figure T_220111181335235_235061044
对比例6的钙卫蛋白校准品的评估结果见表52、表53和图14。
表52 钙卫蛋白校准品基质效应评估结果-直线回归数据分析表
Figure P_220111181335470_470893001
Figure P_220111181335691_691109001
表52（续） 钙卫蛋白校准品基质效应评估结果-直线回归数据分析表
Figure P_220111181335927_927342001
表52（续） 钙卫蛋白校准品基质效应评估结果-直线回归数据分析表
Figure P_220111181336177_177362001
表53 对比例6的钙卫蛋白校准品基质效应评估
Figure T_220111181336239_239829045
实验结果汇总如表54所示。
表54 基质效应实验结果汇总
校准品 20μg/ml 5μg/ml 1.2μg/ml 0.3μg/ml 0.1μg/ml 拟合R<sup>2</sup>
实施例2 无 无 无 无 无 0.9996
实施例9 无 无 无 无 无 0.9974
实施例11 无 无 无 无 无 0.9939
实施例15 无 无 无 无 无 0.9974
对比例4 负 负 负 正 无 0.9991
对比例5 正 无 负 无 无 0.9989
对比例6 无 无 无 无 无 0.9966
表中：无：无基质效应；正：正基质效应；负：负基质效应。
结果可知，实施例2、9、11、15及对比例6制备的钙卫蛋白校准品，经验证无基质效应，可较好地用于钙卫蛋白检测试剂盒（不同检测系统）的校准及验证。对比例5可能由于氯化铁的存在导致有两个校准品有基质效应，而对比例4仅含有小牛血清，成分过于单一导致四个校准品有基质效应。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种稀释液，应用于配制钙卫蛋白校准品，其特征在于，所述稀释液包括以下组分：2g/L~50g/L的蛋白类物质、1g/L~20g/L的钙离子、0.1g/L~10g/L的锰离子或锌离子、质量体积比为0.01%~0.05%的防腐剂以及缓冲液；所述蛋白类物质选自血清白蛋白、小牛血清、胎牛血清和鸡卵白蛋白中的任意一种。
2.根据权利要求1所述的稀释液，其特征在于，所述稀释液包括以下组分：5g/L~20g/L的蛋白类物质、2g/L~3g/L的钙离子、0.5g/L~5g/L的锰离子或锌离子、质量体积比为0.01%~0.05%的防腐剂以及缓冲液。
3.根据权利要求1所述的稀释液，其特征在于，所述缓冲液选自Tris-HCl缓冲液和硼酸盐缓冲液中的任意一种。
4.根据权利要求3所述的稀释液，其特征在于，所述缓冲液的pH为6~9。
5.一种钙卫蛋白校准品，其特征在于，其采用如权利要求1~4任一项所述的稀释液稀释钙卫蛋白获得。
6.如权利要求1~4任一项所述的稀释液在制备钙卫蛋白校准品中的应用。
7.如权利要求1~4任一项所述的稀释液或如权利要求5所述的钙卫蛋白校准品在检测钙卫蛋白中的应用，所述应用不以疾病的诊断或治疗为直接目的。
CN202210029728.1A 2022-01-12 2022-01-12 一种稀释液以及钙卫蛋白校准品 Active CN114062691B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210029728.1A CN114062691B (zh) 2022-01-12 2022-01-12 一种稀释液以及钙卫蛋白校准品

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210029728.1A CN114062691B (zh) 2022-01-12 2022-01-12 一种稀释液以及钙卫蛋白校准品

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN114062691A CN114062691A (zh) 2022-02-18
CN114062691B true CN114062691B (zh) 2022-04-01

Family

ID=80230827

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210029728.1A Active CN114062691B (zh) 2022-01-12 2022-01-12 一种稀释液以及钙卫蛋白校准品

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114062691B (zh)

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006014911A2 (en) * 2004-07-26 2006-02-09 Kossor David C Treatment of inflammatory, autoimmune, or other disorders, using agents that reduce the sequestering of zinc by calprotectin
CN106771232A (zh) * 2016-12-05 2017-05-31 深圳市鸿美诊断技术有限公司 一种纳米胶乳增强免疫比浊法测定钙卫蛋白的试剂盒
CN110609143A (zh) * 2019-10-31 2019-12-24 苏州普瑞森基因科技有限公司 一种钙卫蛋白异二聚体检测试剂盒及其应用
WO2020165456A1 (en) * 2019-02-15 2020-08-20 Immundiagnostik Ag Rapid test for diagnosis of bacterial infections in neonates
CN112268868A (zh) * 2020-10-16 2021-01-26 深圳市鸿美诊断技术有限公司 乳胶免疫比浊法测定钙卫蛋白的试剂盒
WO2021170678A1 (en) * 2020-02-24 2021-09-02 Bühlmann Laboratories Ag Recombinant calprotectin

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK2947459T3 (en) * 2014-05-21 2017-10-23 Bühlmann Laboratories Ag Method for Determining a Protein
EP3248015A1 (en) * 2015-01-23 2017-11-29 Westfälische Wilhelms-Universität Münster Compounds and methods for the detection of calprotectin
WO2018209318A2 (en) * 2017-05-12 2018-11-15 Baylor College Of Medicine Development of microbial biosensors for intestinal inflammation
WO2020140071A1 (en) * 2018-12-28 2020-07-02 Abbott Laboratories Direct detection of single molecules on microparticles

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006014911A2 (en) * 2004-07-26 2006-02-09 Kossor David C Treatment of inflammatory, autoimmune, or other disorders, using agents that reduce the sequestering of zinc by calprotectin
CN106771232A (zh) * 2016-12-05 2017-05-31 深圳市鸿美诊断技术有限公司 一种纳米胶乳增强免疫比浊法测定钙卫蛋白的试剂盒
WO2020165456A1 (en) * 2019-02-15 2020-08-20 Immundiagnostik Ag Rapid test for diagnosis of bacterial infections in neonates
CN110609143A (zh) * 2019-10-31 2019-12-24 苏州普瑞森基因科技有限公司 一种钙卫蛋白异二聚体检测试剂盒及其应用
WO2021170678A1 (en) * 2020-02-24 2021-09-02 Bühlmann Laboratories Ag Recombinant calprotectin
CN112268868A (zh) * 2020-10-16 2021-01-26 深圳市鸿美诊断技术有限公司 乳胶免疫比浊法测定钙卫蛋白的试剂盒

Also Published As

Publication number Publication date
CN114062691A (zh) 2022-02-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104237525B (zh) 一种用于测定降钙素原的胶乳增强免疫比浊试剂盒及其制备方法和应用
Merle et al. Serum ceruloplasmin oxidase activity is a sensitive and highly specific diagnostic marker for Wilson’s disease
CN106814193B (zh) 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白含量检测试剂盒
El-Maouche et al. Stability and degradation of fibroblast growth factor 23 (FGF23): the effect of time and temperature and assay type
RU2701684C2 (ru) Анализ конкурентного связывания с лигандом для обнаружения нейтрализирующих антител
EP0064274B1 (en) Method for assaying antigen-antibody reactions and reagent therefor
BR112019023210A2 (pt) Método para determinação de membros da família s100 de proteínas de ligação ao cálcio por meio de imunoturbidimetria
US20230221337A1 (en) Method for testing aggravation risk of person infected with novel coronavirus, test kit therefor, companion diagnostic drug and aggravation risk marker thereof
US20040219597A1 (en) Use of soluble cytokeratin-1-fragments in diagnostics and therapy
CN112014577B (zh) 一种提高gpc3检测灵敏度的试剂盒及其制备方法
Ziccardi et al. Development of an immunochemical test to assess C1 inactivator function in human serum and its use for the diagnosis of hereditary angioedema
Steiner et al. Stability of canine pancreatic lipase immunoreactivity concentration in serum samples and effects of long-term administration of prednisone to dogs on serum canine pancreatic lipase immunoreactivity concentrations
CN202916286U (zh) 一种定量检测降钙素原pct的胶乳增强免疫比浊试剂盒
EP3002588B1 (en) Use of a biomarker for diagnosing schizophrenia
Banks et al. Measurement of the ‘fast’or complexed form of α2 macroglobulin in biological fluids using a sandwich enzyme immunoassay
Öztürk et al. The actin‐bundling protein L‐plastin: a novel local inflammatory marker associated with periodontitis
CN114062691B (zh) 一种稀释液以及钙卫蛋白校准品
Tamura et al. A new sensitive method for determining endotoxin in whole blood
CN111638374B (zh) 一种用于测定凝血酶原时间的体外诊断试剂盒
US20090011431A1 (en) Diagnosis of Sepsis by the Selective Determination of the Concentration of Cu/Zn Superoxide Dismutase (Cu/Zn Sod) in Patient Samples
Park et al. The relationship between serum neutrophil gelatinase-associated lipocalin and renal function in patients with vancomycin treatment
Grützmeier et al. Four immunochemical methods for measuring C-reactive protein in plasma compared.
CN116008569A (zh) 一种检测胃泌素17的试剂盒及其制备方法
US20230258660A1 (en) A method for distinguishing healthy individuals from individuals having infectious or inflammatory conditions
EP2972384B1 (en) Use of acy-1 as a marker of ischaemia/reperfusion, delayed graft function and graft viability as well as method thereof

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant