CN113660945A - 抗cd55抗体和相关组合物和方法 - Google Patents

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Abstract

提供了特异性结合CD55的抗体。还提供了编码本公开的抗体的可变链多肽之一或两者的核酸，以及包含此类核酸的细胞。还提供了包含本公开的抗体的组合物，在一些情况下包括药物组合物。还提供了制备和使用本公开的抗体的方法。在某些方面，提供了包括向患有细胞增殖性病症的个体施用治疗有效量的本公开的抗体的方法，其中向所述个体施用所述抗体以增强对细胞增殖性病症的异常增殖细胞的T细胞应答。

Description

抗CD55抗体和相关组合物和方法
相关申请的交叉引用
本申请要求2019年2月20日提交的美国临时专利申请62/808,146的权益，所述申请通过引用以其全部并入本文。
背景技术
T细胞介导的免疫包含多个连续步骤，涉及抗原特异性细胞的克隆选择、抗原特异性细胞在次级淋巴组织中的激活和增殖、抗原特异性细胞向抗原和炎症部位的转运、直接效应子功能的执行以及向大量效应子免疫细胞提供帮助(通过细胞因子和膜配体)。通过平衡对应答进行微调的刺激信号和抑制信号来调节这些步骤中的每一个步骤。尽管实际上免疫应答中的所有抑制信号最终均会影响细胞内信号传导通路，但许多抑制信号是通过膜受体引发的，所述膜受体的配体是膜结合的或可溶性的(细胞因子)。
作为所有癌症的特征的遗传和表观遗传学改变提供了多种抗原，免疫系统可以使用这些抗原来区分肿瘤细胞和正常细胞。在T细胞的情况下，通过T细胞受体(TCR)的抗原识别引发的应答的最终幅度和质量由共刺激信号与抑制信号(即，免疫检查点)之间的平衡进行调节。在正常的生理条件下，免疫检查点对于维持自身耐受性(即，预防自身免疫)至关重要，并且当免疫系统对病原体感染作出应答时也能保护组织免受损害。
作为重要的免疫抵抗机制，免疫检查点蛋白的表达可能会被肿瘤异常调节。由于以下原因，T细胞一直是治疗上操纵内源性抗肿瘤免疫的主要工作重点：T细胞在所有细胞区室中选择性识别衍生自蛋白质的肽的能力；T细胞直接识别并且杀死抗原表达性细胞的能力(通过CD8+效应T细胞—也称为细胞毒性T淋巴细胞(CTL))；以及T细胞协调不同免疫应答的能力(通过CD4+辅助性T细胞)，这整合了适应性和先天效应机制。因此，导致抗原特异性T细胞应答的扩增的共刺激受体的激动剂或抑制信号的拮抗剂两者均是具有特殊临床意义的试剂。
CD55(UniProtKB-P08174(人)；也称为衰变促进因子，简称“DAF”)是通过糖磷脂酰肌醇(GPI)锚点附着在细胞膜上的70kDa的膜蛋白。这种蛋白含有四个补体控制蛋白(CCP)重复序列，其中单个N连接的聚糖位于CCP1与CCP2之间。CCP2、CCP3、CCP4和CCP2与CCP3之间带正电荷的囊中的三个连续赖氨酸残基均参与其对交替补体通路的抑制。仅CCP2和CCP3参与其对经典通路的抑制。
当在C4和C3激活期间局部地生成新生C4b和C3b时，CD55识别与细胞表面羟基或氨基进行缩合的C4b和C3b片段。CD55与细胞相关性C4b和C3b多肽的相互作用干扰了其催化C2和因子B转化为酶活性C2a和Bb的能力，从而阻止了补体级联的扩增转化酶C4b2a和C3bBb的形成。CD55进一步充当柯萨奇病毒(coxsackievirus)A21、柯萨奇病毒B1、B3和B5以及人类艾柯病毒(human echoviruses)6、7、11、12、20和21的受体。
已经在包含肺腺癌和肺鳞状细胞癌的多种人类肿瘤组织上观察到了CD55的过表达，例如，参见Niehans等人,《美国病理学杂志(Am.J.Path.)》149:129-142(1996)。美国专利第7,288,249号描述了向被鉴定为过表达CD55或表达与癌症相关的CD55变体的癌症患者亚群施用抗CD55抗体。根据′249专利，向癌症患者亚群施用的抗体可用于抗体依赖性细胞毒性(ADCC)，并且可以缀合到细胞毒性试剂，以增强对过表达CD55的癌细胞的杀伤力。
发明内容
提供了特异性结合CD55的抗体。还提供了编码本公开的抗体的可变链多肽之一或两者的核酸，以及包含此类核酸的细胞。还提供了包含本公开内容的抗体的组合物，在一些情况下包括药物组合物。还提供了制备和使用本公开的抗体的方法。在某些方面，提供了包括向患有细胞增殖性病症的个体施用治疗有效量的本公开的抗体的方法，其中向所述个体施用所述抗体以增强对细胞增殖性病症的异常增殖细胞的T细胞应答。
附图说明
图1：测试抗体与亚阈值抗CD3抗体联合共刺激人类CD4 T细胞增殖的能力，其中所有抗体均与平板结合。小图A：抗体P5-1、P5-2、P5-3、P5-10B、P5-34、P5-37的共刺激活性。小图B：P5-1、P5-1J、P5-2-2A、P5-4的共刺激活性。实心符号表示仅识别人CD55的抗体，空心符号表示识别小鼠和人CD55两者的抗体。市售的抗CD55抗体JS11作为阳性对照包含在小图B中。每种抗体都在不同程度上共刺激CD4 T细胞增殖。P5-1、P5-1J、P5-2-2A和P5-4抗体在该测定中的不同生物学有效性并未通过它们的相对亲和力反映出来(参见图2，小图A)。
图2：结合小鼠和人CD55(P5-1、P5-1J、P5-2-2A和P5-4)的抗体的ELISA数据。人CD55和小鼠CD55的相对亲和力分别显示在小图A和B中。EC50值是使用PRISM通过拟合sigmoid非线性方程获得的。这些人抗体包含用于体内小鼠肿瘤模型的小鼠IgG2A Fc结构域，并通过HRP抗小鼠二抗进行检测。测试的抗体对人CD55具有非常相似的亲和力(约4ng/ml)，但对小鼠CD55具有不同的亲和力(约3-22ng/ml)。
图3：用于比较小鼠+人CD55结合抗体的表位的竞争ELISA数据。由于P5-1和P5-1J共享它们的表位，因此未检查P5-1。平板结合的CD55与未标记的P5-1J、P5-2-2A和P5-4抗体以1μg/ml温育。洗涤平板，然后用指定浓度的生物素化P5-1J温育。链霉亲和素-HRP用于检测结合的P5-1J。EC50值显示在图的下方。P5-2-2A和P5-4阻断了生物素化的P5-1J结合(EC50偏移20倍)，但未达到未标记的P5-1J阻断它的程度(EC50偏移100倍)。数据表明P5-1J、P5-2-2A和P5-4表位相同、重叠或接近足以引起空间干扰。
图4：用于比较小鼠+人CD55结合抗体的表位的竞争性细胞结合数据。将人外周血单核细胞(PBMC)与横坐标上指示的P5抗体浓度一起温育，洗涤，然后用生物素化的P5-1J标记，之后用链霉亲和素-PE标记，最后通过流式细胞术进行分析。平均荧光强度(MFI)是对与细胞结合的生物素化P5-1J的度量。与细胞结合比与纯化蛋白结合更具生物学相关性。P5-2-2A和P5-4都显著降低了P5-1J与CD55的结合，这次是在细胞上，并且与表明CD55上的P5-1J、P5-2-2A和P5-4抗体表位相同或接近的ELISA结果一致。
图5：抗CD55抗体对体内肿瘤生长的影响。在第0天给小鼠皮下接种4e5 MCA 205肿瘤细胞。每周测量肿瘤大小2-3次。在第9、12和15天用200μg仓鼠IgG对照抗体或200μg抗PD1i.p.与200μg小鼠IgG对照抗体或抗体P5-1J i.p.同时处理小鼠。单药抗PD-1治疗的小鼠有2/10的小鼠排斥其肿瘤。抗PD-1和P5-1J联合治疗组有5/10的小鼠排斥其肿瘤。显示了每个处理组的蜘蛛图，其中每条线代表一只小鼠。生存曲线显示在右下角。
图6：抗CD55抗体对体内肿瘤生长的影响。在第0天给小鼠皮下接种4e5 MCA 205肿瘤细胞。每周测量肿瘤大小2-3次。在第12、14和16天用10μl盐水i.t.或30μg CpG i.t.单独或与200μg抗体P5-1J i.p.同时处理小鼠。单一治疗剂CpG治疗的小鼠有1/5的小鼠排斥它们的肿瘤。CpG和P5-1J联合治疗组有2/5的小鼠排斥其肿瘤。显示了每个处理组的蜘蛛图，每条线代表一只小鼠。生存曲线显示在右下角。
图7：抗CD55抗体对体内肿瘤生长的影响。在第0天给小鼠皮下接种4e5 MCA 205肿瘤细胞。每周测量肿瘤大小2-3次。在第7、9和11天用200μg同种型对照抗体或250μg抗OX40i.p.与200μg小鼠IgG对照抗体或抗体P5-1、P5-2-2a或P5-4 i.p.同时处理小鼠。没有同种型对照抗体处理的小鼠排斥它们的肿瘤。单一治疗剂抗OX40治疗的小鼠有0/5的小鼠排斥它们的肿瘤。P5-1和抗OX40联合治疗组有2/10的小鼠排斥它们的肿瘤。P5-2-2a和抗OX40联合治疗组有3/10的小鼠排斥它们的肿瘤。P5-4和抗OX40联合治疗组有6/10的小鼠排斥它们的肿瘤。显示了每个处理组的蜘蛛图，每条线代表一只小鼠。生存曲线显示在右下角。
图8：抗CD55抗体对体内肿瘤生长的影响。在第0天给小鼠皮下接种4e5 MCA 205肿瘤细胞。每周测量肿瘤大小2-3次。在第6、8和10天用200μg同种型对照抗体或200μg抗PD-1i.p.与200μg小鼠IgG对照抗体或抗体P5-1或P5-4 i.p.同时处理小鼠。没有同种型对照抗体处理的小鼠排斥它们的肿瘤。单治疗剂抗PD-1治疗的小鼠有2/10的小鼠排斥其肿瘤。P5-1和抗PD-1联合治疗组有3/10的小鼠排斥其肿瘤。P5-4和抗PD-1联合治疗组有4/10的小鼠排斥其肿瘤。显示了每个处理组(仅同种型的组除外)的蜘蛛图，每条线代表一只小鼠。生存曲线显示在右下角。
具体实施方式
如上概述，提供了特异性结合CD55的抗体。还提供了编码本公开的抗体的可变链多肽之一或两者的核酸，以及包含此类核酸的细胞。还提供了包含本公开内容的抗体的组合物，在一些情况下包括药物组合物。还提供了制备和使用本公开的抗体的方法。在某些方面，提供了包括向患有细胞增殖性病症的个体施用治疗有效量的本公开的抗体的方法，其中向所述个体施用所述抗体以增强对细胞增殖性病症的异常增殖细胞的T细胞应答。
在更详细地描述本公开的抗体、组合物和方法之前，应理解抗体、组合物和方法不限于所描述的特定实施方案，因此当然可以对其进行改变。还应理解，本文使用的术语仅用于描述特定实施方案，并不旨在限制，因为抗体、组合物和方法的范围仅受所附权利要求的限制。
在提供值的范围的情况下，应理解的是，除非上下文另有明确规定，否则在该范围的上限和下限之间的每个中间值，至下限单位的十分之一和所述范围内的任何其它所述或中间值均涵盖在抗体、组合物和方法中。这些较小范围的上限和下限可以独立地包括在较小范围内，并且还涵盖在抗体、组合物和方法中，受所述范围内的任何具体排除的界限。在所述范围包括一个或两个界限的情况下，排除那些包括的界限之一或两者的范围也包括在抗体、组合物和方法中。
本文给出的某些范围的数值前面有术语“约”。术语“约”在本文中用于提供对其之前的确切数字以及接近或近似该术语之前的数字的文字支持。在确定一个数字是否接近或近似一个具体列举的数字时，接近或近似的未列举的数字可以是在其出现的上下文中提供该具体列举的数字的实质等同物的数字。
除非另外定义，否则本文使用的所有技术和科学术语均具有与抗体、组合物和方法所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。尽管任何与本文所述那些相似或等同的抗体、组合物和方法也可用于抗体、组合物和方法的实践或测试，但现在描述代表性的示例性抗体、组合物和方法。
在本说明书中引用的所有公开和专利通过引用并入本文，如同每个单独的公开或专利被具体和单独地指示通过引用并入并且通过引用并入本文以公开和描述与所引用的公开有关的材料和/或方法。任何出版物的引用均为其在申请日之前的公开，并且不应被解释为承认本抗体、组合物和方法无权先于此类出版物，因为所提供的出版日期可能与可能需要独立确认的实际出版日期不同。
注意，如本文和所附权利要求书中所使用的，除非上下文另有明确指示，否则单数形式“一(a)”、“一种(an)”和“所述(the)”包括复数指示物。还应当注意，权利要求书可以被起草为排除任何任选的元素。因此，所述陈述旨在用作前置基础，用于结合权利要求要素的叙述使用诸如“单独地”、“仅”等排他性术语或使用“负面”限制。
应理解，为了清楚起见，在单独的实施方案的上下文中描述的抗体、组合物和方法的某些特征也可以以组合形式提供在单个实施方案中。相反，为了简洁起见，在单个实施方案的上下文中描述的抗体、组合物和方法的各种特征也可以单独提供或以任何合适的子组合提供。本发明具体包含实施方案的所有组合，并在本文中公开，如同单独且明确地公开了每个组合一样，只要这些组合包含可操作的过程和/或组合物。另外，描述这种变量的实施方案中列出的所有子组合也由本抗体、组合物和方法具体包括，并且在本文中公开，就好像每一个这种子组合在本文中单独和明确地公开。
正如对于本领域的技术人员而言在阅读本公开后将显而易见的，本文描述和展示的每个单独实施方案具有分立的组分和特征，这些组分和特征在不脱离本抗体、组合物和方法的范围或精神的前提下，可以容易地与任何其他几个实施方案的特征分离或组合。任何所述的方法可以以所述的事件的顺序或以逻辑上可能的任何其它顺序执行。
抗体
如上概述，本公开提供了抗CD55抗体。如以下实验部分所示，鉴定了结合小鼠和人CD55的人抗体，并且发现此类抗体共刺激人CD4 T细胞增殖。此外，发现所述抗体增强体内肿瘤生长的抑制，例如，与单独的T细胞激活剂或单独的先天免疫系统刺激剂对肿瘤生长的抑制相比。所述抗体可用于多种研究和治疗应用，包括用于执行国际专利申请PCT/US2018/047356中描述的任何方法，其公开内容出于所有目的通过引用整体并入本文。
在某些实施方案中，本公开的抗体特异性结合CD55并且是CD55的激动剂。可用于确定抗CD55抗体是否为CD55激动剂的示例测定法是评估CD4 T细胞的共刺激的平板结合的抗CD55抗体和相应的可溶性抗CD55抗体的测定法。当与板结合而非可溶时，抗CD55抗体的共刺激(或与可溶时相比，当与板结合时，抗CD55抗体的共刺激更大)表明抗CD55抗体是激动剂，例如，因为板结合的抗CD55抗体能够将CD55分子集中在细胞表面，从而促进通过CD55的信号传导。进一步的细节可以在国际专利申请PCT/US2018/047356中找到，其公开内容出于所有目的通过引用整体并入本文。
根据一些实施方案，本公开的抗体与CD55特异性结合，是CD55的激动剂，并增强体内肿瘤生长的抑制，例如，与不存在抗CD55抗体时T细胞激活剂的肿瘤生长的抑制相比。例如，可以使用体内小鼠肿瘤模型(例如，使用MCA 205肿瘤细胞或其他合适的肿瘤细胞)等评估这种增强。这种增强的非限制性实例在下面的实验部分中提供。在一些实施方案中，与不存在抗CD55抗体时T细胞激活剂对肿瘤生长的抑制相比，抗CD55抗体将体内肿瘤生长的抑制增强10％或更高、20％或更高、30％或更高、40％或更高、50％或更高、60％或更高、70％或更高、80％或更高、90％或更高、100％或更高、110％或更高、120％或更高、130％或更高、140％或更高、150％或更高、160％或更高、170％或更高、180％或更高、190％或更高、或200％或更高。
根据一些实施方案，本公开的抗体与CD55特异性结合，是CD55的激动剂，并增强体内肿瘤生长的抑制，例如，与不存在抗CD55抗体时先天免疫系统刺激剂的肿瘤生长抑制相比。例如，可以使用体内小鼠肿瘤模型(例如，使用MCA 205肿瘤细胞或其他合适的肿瘤细胞)等评估这种增强。这种增强的非限制性实例在下面的实验部分中提供。在一些实施方案中，与不存在抗CD55抗体时先天免疫系统刺激剂对肿瘤生长的抑制相比，抗CD55抗体将体内肿瘤生长的抑制增强10％或更高、20％或更高、30％或更高、40％或更高、50％或更高、60％或更高、70％或更高、80％或更高、90％或更高、100％或更高、110％或更高、120％或更高、130％或更高、140％或更高、150％或更高、160％或更高、170％或更高、180％或更高、190％或更高、或200％或更高。
在某些实施方案中，本公开的抗体与CD55特异性结合并与具有抗CD55抗体的一种或多种(在本文中指定为P5-1、P5-1J、P5-2、P5-2-2A、P5-3、P5-4、P5-10B、P5-34和P5-37)的一个、两个、三个、四个、五个或所有六个互补决定区(CDR)的抗体竞争结合CD55。P5-1、P5-1J、P5-2、P5-2-2A、P5-3、P5-4、P5-10B、P5-34和P5-37抗体的可变重链(VH)多肽、可变轻链(VL)多肽以及CDR的氨基酸序列在下表1中提供。
表1-实例抗CD55抗体的氨基酸序列
Figure BDA0003256359430000071
Figure BDA0003256359430000081
Figure BDA0003256359430000091
Figure BDA0003256359430000101
Figure BDA0003256359430000111
Figure BDA0003256359430000121
Figure BDA0003256359430000131
Figure BDA0003256359430000141
Figure BDA0003256359430000151
Figure BDA0003256359430000161
Figure BDA0003256359430000171
Figure BDA0003256359430000181
根据一些实施方案，本公开的抗体特异性结合CD55并与包含以下的抗体竞争结合CD55：
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:2)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AISSSSGSTYYADS(SEQ ID NO:3)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CARERYFYGDFVFDYWGQG(SEQ ID NO:4)；以及
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:6)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:7)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYSSPL(SEQ ID NO:8)。
在某些实施方案，本公开的抗体特异性结合CD55并与包含以下的抗体竞争结合CD55：
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSHHYIH(SEQ ID NO:10)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AISTGGGTTYYADS(SEQ ID NO:11)，
VH CDR3，其包含氨基酸序列CARERYFNGDFIYDYWGQG(SEQ ID NO:12)，可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:14)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:15)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYSTPL(SEQ ID NO:16)。
根据一些实施方案，本公开的抗体特异性结合CD55并与包含以下的抗体竞争结合CD55：
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:18)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AISSSSGSTYYADS(SEQ ID NO:19)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CAREVRIHGDFVLDYWGQG(SEQ ID NO:20)；以及
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:22)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:23)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYSSPL(SEQ ID NO:24)。
在某些实施方案，本公开的抗体特异性结合CD55并与包含以下的抗体竞争结合CD55：
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:26)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AAISSSSGSTYYADS(SEQ ID NO:27)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CAREARFHGDFILDYWGQG(SEQ ID NO:28)；和
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:30)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:31)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYITPL(SEQ ID NO:32)。
根据一些实施方案，本公开的抗体特异性结合CD55并与包含以下的抗体竞争结合CD55：
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:34)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AAISSSSGSTYYADS(SEQ ID NO:35)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CAREDWHRYERRFYEGFDYWGQG(SEQ ID
NO:36)，
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:38)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:39)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYSSPL(SEQ ID NO:40)。
在某些实施方案，本公开的抗体特异性结合CD55并与包含以下的抗体竞争结合CD55：
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:42)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AAISSSSGSTYYADS(SEQ ID NO:43)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CAREDYYWGDFVFDYWGQG(SEQ ID NO:44)；
和
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:46)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:47)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYSSPL(SEQ ID NO:48)。
根据一些实施方案，本公开的抗体特异性结合CD55并与包含以下的抗体竞争结合CD55：
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFTDYDIH(SEQ ID NO:50)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AGWINPYNGYTDYADS(SEQ ID NO:51)，
VH CDR3，其包含氨基酸序列CARPLSWALDYWGQG(SEQ ID NO:52)；和
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQDVNTAVA(SEQ ID NO:54)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASFLYS(SEQ ID NO:55)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列HYTTPP(SEQ ID NO:56)。
在某些实施方案，本公开的抗体特异性结合CD55并与包含以下的抗体竞争结合CD55：
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:58)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AYIRPSGSKTSYADS(SEQ ID NO:59)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CARKVYARSGLDYWGQG(SEQ ID NO:60)；和
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:62)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:63)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列GESTPY(SEQ ID NO:64)。
根据一些实施方案，本公开的抗体特异性结合CD55并与包含以下的抗体竞争结合CD55：
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYGIH(SEQ ID NO:66)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AYIYSRGTVTSYADS(SEQ ID NO:67)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CARGAGGVMDYWGQG(SEQ ID NO:68)；和
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:70)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:71)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列AKSSLR(SEQ ID NO:72)。
可以使用用于确定第一抗体是否与第二抗体竞争结合CD55的任何合适的方法。此类方法的非限制性实例包括竞争ELISA(例如，如下面实施例4中所述)、竞争性细胞结合测定(例如，如下面实施例5中所述)等。
使用直接结合或竞争性结合测定的方法可用于测量抗CD55抗体对在细胞(例如，T细胞)表面表达的CD55的亲和力。在直接结合测定中，可以使用缀合到荧光团或放射性同位素的候选抗CD55抗体或含有供标记抗体检测的N端或C端表位标签的候选抗CD55抗体来测量平衡结合常数(KD)。如果标记或标签不可行或不合需要，则可以使用竞争性结合测定来确定半数最大抑制浓度(IC50)，即可检测到标记的竞争剂的最大信号的50％的未标记候选抗CD55抗体的量。然后可以从测得的IC50值计算出KD值。当在较低浓度范围内测量高亲和力相互作用时，配体耗竭将更为明显，并且可以通过减少实验中添加的细胞数量或通过增加结合反应体积来避免配体耗竭或使配体耗竭最小化。
根据一些实施方案，本公开的抗体与CD55特异性结合并且包含：
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:2)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AISSSSGSTYYADS(SEQ ID NO:3)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CARERYFYGDFVFDYWGQG(SEQ ID NO:4)；以及
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:6)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:7)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYSSPL(SEQ ID NO:8)。
在某些实施方案中，本公开的抗体与CD55特异性结合并且包含：
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSHHYIH(SEQ ID NO:10)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AISTGGGTTYYADS(SEQ ID NO:11)，
VH CDR3，其包含氨基酸序列CARERYFNGDFIYDYWGQG(SEQ ID NO:12)，可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:14)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:15)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYSTPL(SEQ ID NO:16)。
根据一些实施方案，本公开的抗体与CD55特异性结合并且包含：
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:18)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AISSSSGSTYYADS(SEQ ID NO:19)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CAREVRIHGDFVLDYWGQG(SEQ ID NO:20)；以及
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:22)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:23)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYSSPL(SEQ ID NO:24)。
在某些实施方案中，本公开的抗体与CD55特异性结合并且包含：
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:26)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AAISSSSGSTYYADS(SEQ ID NO:27)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CAREARFHGDFILDYWGQG(SEQ ID NO:28)；和可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:30)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:31)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYITPL(SEQ ID NO:32)。
根据一些实施方案，本公开的抗体与CD55特异性结合并且包含：
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:34)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AAISSSSGSTYYADS(SEQ ID NO:35)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CAREDWHRYERRFYEGFDYWGQG(SEQ ID
NO:36)，可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:38)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:39)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYSSPL(SEQ ID NO:40)。
在某些实施方案中，本公开的抗体与CD55特异性结合并且包含：
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:42)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AAISSSSGSTYYADS(SEQ ID NO:43)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CAREDYYWGDFVFDYWGQG(SEQ ID NO:44)；
和
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:46)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:47)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYSSPL(SEQ ID NO:48)。
根据一些实施方案，本公开的抗体与CD55特异性结合并且包含：
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFTDYDIH(SEQ ID NO:50)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AGWINPYNGYTDYADS(SEQ ID NO:51)，
VH CDR3，其包含氨基酸序列CARPLSWALDYWGQG(SEQ ID NO:52)；和可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQDVNTAVA(SEQ ID NO:54)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASFLYS(SEQ ID NO:55)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列HYTTPP(SEQ ID NO:56)。
在某些实施方案中，本公开的抗体与CD55特异性结合并且包含：
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:58)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AYIRPSGSKTSYADS(SEQ ID NO:59)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CARKVYARSGLDYWGQG(SEQ ID NO:60)；和可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:62)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:63)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列GESTPY(SEQ ID NO:64)。
根据一些实施方案，本公开的抗体与CD55特异性结合并且包含：
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYGIH(SEQ ID NO:66)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AYIYSRGTVTSYADS(SEQ ID NO:67)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CARGAGGVMDYWGQG(SEQ ID NO:68)；和
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:70)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:71)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列AKSSLR(SEQ ID NO:72)。
在某些实施方案中，本公开的抗体与CD55特异性结合，与包含本文指定为P5-1的抗体的1、2、3、4、5或所有6个CDR的抗体竞争结合CD55，并且其中所述抗体包含：
可变重链(VH)多肽，其包含与SEQ ID NO:1中列出的氨基酸序列具有70％或更高、75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、95％或更高、或99％或更高同一性的氨基酸序列；和
可变轻链(VL)多肽，其包含与SEQ ID NO:5中列出的氨基酸序列具有70％或更高、75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、95％或更高、或99％或更高同一性的氨基酸序列。
在一些实施方案中，此类抗体包含本文指定为P5-1的抗体的一个、两个、三个、四个、五个或所有六个CDR，包括其任何组合。
根据一些实施方案，本公开的抗体与CD55特异性结合，与包含本文指定为P5-1J的抗体的1、2、3、4、5或所有6个CDR的抗体竞争结合CD55，并且其中所述抗体包含：
可变重链(VH)多肽，其包含与SEQ ID NO:9中列出的氨基酸序列具有70％或更高、75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、95％或更高、或99％或更高同一性的氨基酸序列；和
可变轻链(VL)多肽，其包含与SEQ ID NO:13中列出的氨基酸序列具有70％或更高、75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、95％或更高、或99％或更高同一性的氨基酸序列。
在一些实施方案中，此类抗体包含本文指定为P5-1J的抗体的一个、两个、三个、四个、五个或所有六个CDR，包括其任何组合。
在某些实施方案中，本公开的抗体与CD55特异性结合，与包含本文指定为P5-2的抗体的1、2、3、4、5或所有6个CDR的抗体竞争结合CD55，并且其中所述抗体包含：
可变重链(VH)多肽，其包含与SEQ ID NO:17中列出的氨基酸序列具有70％或更高、75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、95％或更高、或99％或更高同一性的氨基酸序列；和
可变轻链(VL)多肽，其包含与SEQ ID NO:21中列出的氨基酸序列具有70％或更高、75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、95％或更高、或99％或更高同一性的氨基酸序列。
在一些实施方案中，此类抗体包含本文指定为P5-2的抗体的一个、两个、三个、四个、五个或所有六个CDR，包括其任何组合。
根据一些实施方案，本公开的抗体与CD55特异性结合，与包含本文指定为P5-2-2A的抗体的1、2、3、4、5或所有6个CDR的抗体竞争结合CD55，并且其中所述抗体包含：
可变重链(VH)多肽，其包含与SEQ ID NO:25中列出的氨基酸序列具有70％或更高、75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、95％或更高、或99％或更高同一性的氨基酸序列；和
可变轻链(VL)多肽，其包含与SEQ ID NO:29中列出的氨基酸序列具有70％或更高、75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、95％或更高、或99％或更高同一性的氨基酸序列。
在一些实施方案中，此类抗体包含本文指定为P5-2-2A的抗体的一个、两个、三个、四个、五个或所有六个CDR，包括其任何组合。
在某些实施方案中，本公开的抗体与CD55特异性结合，与包含本文指定为P5-3的抗体的1、2、3、4、5或所有6个CDR的抗体竞争结合CD55，并且其中所述抗体包含：
可变重链(VH)多肽，其包含与SEQ ID NO:33中列出的氨基酸序列具有70％或更高、75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、95％或更高、或99％或更高同一性的氨基酸序列；和
可变轻链(VL)多肽，其包含与SEQ ID NO:37中列出的氨基酸序列具有70％或更高、75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、95％或更高、或99％或更高同一性的氨基酸序列。
在一些实施方案中，此类抗体包含本文指定为P5-3的抗体的一个、两个、三个、四个、五个或所有六个CDR，包括其任何组合。
根据一些实施方案，本公开的抗体与CD55特异性结合，与包含本文指定为P5-4的抗体的1、2、3、4、5或所有6个CDR的抗体竞争结合CD55，并且其中所述抗体包含：
可变重链(VH)多肽，其包含与SEQ ID NO:41中列出的氨基酸序列具有70％或更高、75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、95％或更高、或99％或更高同一性的氨基酸序列；和
可变轻链(VL)多肽，其包含与SEQ ID NO:45中列出的氨基酸序列具有70％或更高、75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、95％或更高、或99％或更高同一性的氨基酸序列。
在一些实施方案中，此类抗体包含本文指定为P5-4的抗体的一个、两个、三个、四个、五个或所有六个CDR，包括其任何组合。
在某些实施方案中，本公开的抗体与CD55特异性结合，与包含本文指定为P5-10B的抗体的1、2、3、4、5或所有6个CDR的抗体竞争结合CD55，并且其中所述抗体包含：
可变重链(VH)多肽，其包含与SEQ ID NO:49中列出的氨基酸序列具有70％或更高、75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、95％或更高、或99％或更高同一性的氨基酸序列；和
可变轻链(VL)多肽，其包含与SEQ ID NO:53中列出的氨基酸序列具有70％或更高、75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、95％或更高、或99％或更高同一性的氨基酸序列。
在一些实施方案中，此类抗体包含本文指定为P5-10B的抗体的一个、两个、三个、四个、五个或所有六个CDR，包括其任何组合。
根据一些实施方案，本公开的抗体与CD55特异性结合，与包含本文指定为P5-34的抗体的1、2、3、4、5或所有6个CDR的抗体竞争结合CD55，并且其中所述抗体包含：
可变重链(VH)多肽，其包含与SEQ ID NO:57中列出的氨基酸序列具有70％或更高、75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、95％或更高、或99％或更高同一性的氨基酸序列；和
可变轻链(VL)多肽，其包含与SEQ ID NO:61中列出的氨基酸序列具有70％或更高、75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、95％或更高、或99％或更高同一性的氨基酸序列。
在一些实施方案中，此类抗体包含本文指定为P5-34的抗体的一个、两个、三个、四个、五个或所有六个CDR，包括其任何组合。
在某些实施方案中，本公开的抗体与CD55特异性结合，与包含本文指定为P5-37的抗体的1、2、3、4、5或所有6个CDR的抗体竞争结合CD55，并且其中所述抗体包含：
可变重链(VH)多肽，其包含与SEQ ID NO:65中列出的氨基酸序列具有70％或更高、75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、95％或更高、或99％或更高同一性的氨基酸序列；和
可变轻链(VL)多肽，其包含与SEQ ID NO:69中列出的氨基酸序列具有70％或更高、75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、95％或更高、或99％或更高同一性的氨基酸序列。
在一些实施方案中，此类抗体包含本文指定为P5-37的抗体的一个、两个、三个、四个、五个或所有六个CDR，包括其任何组合。
术语“抗体”可包括任何同种型的抗体或免疫球蛋白(例如，IgG(例如，IgG1、IgG2、IgG3或IgG4)、IgE、IgD、IgA、IgM等)，全抗体(例如，由四聚体构成的抗体，所述四聚体又由重链和轻链多肽的两个二聚体构成)；单链抗体(例如scFv)；抗体片段(例如，全链或单链抗体的片段)，其保留与靶细胞的细胞表面分子的特异性结合，包括但不限于单链Fv(scFv)、Fab、(Fab’)2、(scFv’)2和双体；嵌合抗体；单克隆抗体、人抗体、人源化抗体(例如，人源化全抗体、人源化半抗体或人源化抗体片段例如人源化scFv)；和融合蛋白，其包含抗体的抗原结合部分和非抗体蛋白。在一些实施方案中，抗体选自IgG、Fv、单链抗体、scFv、Fab、F(ab')2或Fab'。抗体可以被可检测地标记，例如，被体内显像剂、放射性同位素、产生可检测产物的酶、荧光蛋白等标记。抗体可以进一步与其它部分缀合，例如特异性结合对的成员，例如生物素(生物素-亲和素特异性结合对的成员)等。
免疫球蛋白轻链或重链可变区由被三个高变区(也称为“互补决定区”或“CDR”)中断的“框架”区(FR)组成。框架区和CDR的范围可以基于本领域已知的数据库限定。参见，例如，E.Kabat等人“Sequences of Proteins of Immunological Interest”，Sequences ofproteins of immunological interest，第4版，美国卫生与人类服务部、公共卫生服务部，Bethesda，MD(1987)，Lefranc等人IMGT,the international ImMunoGeneTicsinformation
Figure BDA0003256359430000291
Nucl.Acids Res.,2005,33:D593-D597(www.imgt.org/textes/IMGTScientificChart/)，和/或在vbase.mrc-cpe.cam.ac.uk/的V Base)。不同轻链或重链的框架区的序列在一个物种内相对保守。抗体的框架区，即组成轻链和重链的组合框架区，用于定位和比对CDR。CDR主要负责结合抗原的表位。
当提及抗体时，短语“特异性结合”、“特异于”、“免疫反应的”和“免疫反应性”以及“抗原结合特异性”是指与抗原的结合反应，该反应对于抗原或其片段高度优先，以便在异质抗原群体(例如，蛋白质和其他生物制剂，例如，在组织中)存在的情况下确定抗原的存在。因此，在指定的免疫分析条件下，指定的抗体与特定抗原结合，并且基本上不与样品中存在的其它抗原大量结合。在此类条件下特异性结合到抗原可能需要根据其针对特定抗原的特异性来选择抗体。例如，抗CD55抗体可以与CD55特异性结合，并且不表现出与组织样品中存在的其他蛋白质相当的结合(例如，不表现出可检测的结合)。
在一些实施方案中，如果本公开的抗体以例如大于或等于约105M-1的亲和力或Ka(即，与1/M为单位的特定结合相互作用的平衡缔合常数)结合或缔合CD55，则本公开的抗体“特异性结合”CD55。在某些实施方案中，抗体结合CD55的Ka大于或等于约106M-1、107M-1、108M-1、109M-1、1010M-1、1011M-1、1012M-1或1013M-1。“高亲和力”结合是指以至少107M-1、至少108M-1、至少109M-1、至少1010M-1、至少1011M-1、至少1012M-1、至少1013M-1或更大的Ka进行结合。替代地，亲和力可以定义为以M为单位(例如，10-5M至10-13M，或更小)进行的特定结合相互作用的平衡解离常数(KD)。在一些方面，特异性结合是指抗体与CD55结合的KD小于或等于约10-5M、小于或等于约10-6M、小于或等于约10-7M、小于或等于约10-8M、或者小于或等于约10- 9M、10-10M、10-11M或10-12M或更小。抗体与CD55的结合亲和力可以使用常规技术容易地确定，例如，通过竞争性ELISA(酶联免疫吸附测定法)、平衡透析，通过使用表面等离子体共振(SPR)技术(例如，BIAcore 2000仪器，使用制造商概述的一般程序)；通过放射免疫测定法等。
“表位”是抗体结合的抗原上的位点(例如，CD55上的位点)。表位可以由通过蛋白质折叠(例如，三级折叠)并列的连续氨基酸或非连续氨基酸形成。由连续氨基酸形成的表位通常在暴露于变性溶剂时保留，而通过折叠形成的表位通常在用变性溶剂处理时丢失。表位通常包括线性或空间构象的至少3个，更通常至少5或8-10个氨基酸。确定表位的空间构象的方法包括例如X射线晶体学和2维核磁共振。参见例如Epitope Mapping Protocolsin Methods in Molecular Biology第66卷，Glenn E.Morris编辑(1996)。几个商业实验室提供表位作图服务。与膜相关抗原发生免疫反应的抗体结合的表位可位于细胞表面(例如跨膜蛋白的细胞外区域)，使得此类表位被认为是细胞表面可及的、溶剂可及的和/或细胞-表面暴露的。
还提供了缀合物。缀合物包括本公开的抗CD55抗体和缀合至所述抗体的试剂。术语“缀合的”通常是指化学键，共价或非共价的，通常是共价的，其将一个感兴趣的分子与第二个感兴趣的分子紧密结合。在一些实施方案中，试剂选自半衰期延长部分、标记剂和治疗剂。例如，对于半衰期延长，本公开的抗体可以任选地被修饰以提供改善的药代动力学特征(例如，通过PEG化、高糖基化等)。可以提高血清半衰期的修饰是令人感兴趣的。主题抗体可以是“PEG化的”，因为含有一个或多个聚(乙二醇)(PEG)部分。适用于蛋白质PEG化的方法和试剂是本领域公知的并且可以在美国专利5,849,860中找到。适合与蛋白质结合的PEG在室温下通常可溶于水，并具有通式R(O-CH2-CH2)nO-R，其中R是氢或保护基团，例如烷基或烷醇基团，其中n是1到1000之间的整数。当R是保护基团时，它通常具有1至8个碳。与主题蛋白质缀合的PEG可以是线性的。与主题蛋白质缀合的PEG也可以是支链的。支链PEG衍生物，例如美国专利5,643,575中描述的那些，“星形PEG”和多臂PEG。星形PEG在本领域中有描述，包括例如美国专利6,046,305。
当要从来源分离主题抗体时，主题蛋白质可以缀合到有助于纯化的部分，例如特异性结合对的成员，例如生物素(生物素-亲和素特异性结合对的成员)、凝集素和类似物。抗体还可以结合(例如，固定到)固体支撑物，包括但不限于聚苯乙烯板或珠、磁珠、测试条、膜等。
在测定中检测抗体的情况下，抗体可包含可检测标记，例如放射性同位素(例如125I；35S等)、产生可检测产物的酶(例如荧光素酶、β-半乳糖苷酶、辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等)、荧光蛋白、显色蛋白、染料(例如异硫氰酸荧光素、罗丹明、藻红蛋白等)；发射荧光的金属，例如152Eu或镧系元素的其他金属，其通过金属螯合基团(例如EDTA)连接到蛋白质上；化学发光化合物，例如鲁米诺、异鲁米诺、吖啶盐等；生物发光化合物，例如荧光素；荧光蛋白；等等。间接标记包括对主题蛋白特异的抗体，其中该抗体可通过二抗进行检测；和特异性结合对的成员，例如生物素-亲和素等。
用于修饰主题抗体的任何上述元件可以通过接头例如柔性接头连接至抗体。如果存在，接头分子通常具有足够的长度以允许抗体和连接的载体允许抗体和载体之间的一些柔性移动。接头分子通常长约6-50个原子。接头分子还可以是例如芳基乙炔、含有2-10个单体单元的乙二醇低聚物、二胺、二酸、氨基酸或其组合。
当接头是肽时，接头可以具有任何合适的不同长度，例如1个氨基酸(例如Gly)到20个或更多个氨基酸、2个氨基酸到15个氨基酸、3个氨基酸至12个氨基酸，包括4个氨基酸至10个氨基酸、5个氨基酸至9个氨基酸、6个氨基酸至8个氨基酸或7个氨基酸至8个氨基酸，并且可以是1、2、3、4、5、6或7个氨基酸。
柔性接头包括甘氨酸聚合物(G)n、甘氨酸-丝氨酸聚合物、甘氨酸-丙氨酸聚合物、丙氨酸-丝氨酸聚合物和本领域已知的其他柔性接头。甘氨酸和甘氨酸-丝氨酸聚合物可用于感兴趣的相对非结构化的氨基酸，并可用作组分之间的中性系链。普通技术人员将认识到，与上文描述的任何要素缀合的肽的设计可以包含完全或部分柔性的接头，使得所述接头可以包含柔性接头以及赋予较少柔性结构的一个或多个部分。
根据一些实施方案，抗体通过不可切割的接头与试剂缀合。感兴趣的不可切割的接头包括但不限于硫醚接头。可以采用的硫醚接头的实例包括4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺基酯(SMCC)接头。
在某些实施方案中，抗体通过可切割的接头与试剂缀合。根据一些实施方案，该接头是化学不稳定接头，诸如在中性pH(血流pH 7.3-7.5)下稳定但在内化到弱酸性胞内体(pH 5.0-6.5)以及靶细胞(例如，癌细胞)的溶酶体(pH 4.5-5.0)中时发生水解的酸可裂解接头。化学不稳定接头包括但不限于腙基接头、肟基接头、碳酸酯基接头、酯基接头等。在某些实施方案中，该接头是酶不稳定接头，诸如这样一种酶不稳定接头，其在血流中是稳定的，但在内化到靶细胞中时进行酶切(例如，通过靶细胞(例如，癌细胞)的溶酶体中的溶酶体蛋白酶(诸如组织蛋白酶或纤溶酶))。酶不稳定接头包括但不限于包括肽键的接头，例如，二肽基接头，诸如缬氨酸-瓜氨酸(VC)接头，诸如马来酰亚胺己酰基-缬氨酸-瓜氨酸-对氨基苄基(MC-vc-PAB)接头、缬氨酰-丙氨酰基-对氨基苄氧基(Val-Ala-PAB)接头等。化学不稳定接头、酶不稳定的和不可切割的接头是已知的并且详细描述于例如Ducry&Stump(2010)Bioconjugate Chem.)21:5-13；Nolting,B.(2013)Methods Mol Biol.1045:71-100；Tsuchikama和An(2018)Protein&Cell 9(1):33-46；以及其他地方。
许多策略可用于将试剂直接或通过接头间接连接到抗体。例如，可以通过将接头共价附接至试剂来衍生该试剂，其中接头具有能够与抗体上的“化学柄”反应的官能团。接头上的官能团可以变化，并且可以基于与抗体上的化学柄的相容性来选择。根据一个实施方案，通过将具有化学柄的非天然氨基酸掺入抗体中来提供抗体上的化学柄。可以用于制备本公开的缀合物的非天然氨基酸包括具有选自以下中的官能团的那些：叠氮化物、炔烃、烯烃、氨基-氧基、肼、醛(例如，甲酰甘氨酸，例如，来自康泰伦特药业(Catalent PharmaSolutions)的SMARTagTM技术)、硝酮、氧化腈、环丙烯、降冰片烯、异氰化物、芳基卤化物和硼酸官能团。可以被并入本公开的缀合物的抗体的非天然氨基酸(可以选择该非天然氨基酸以提供感兴趣的官能团)是已知的并且描述于例如Maza等人(2015)Bioconjug.Chem.26(9):1884-9；Patterson等人(2014)ACS Chem.Biol.9:592-605；Adumeau等人(2016)Mol.Imaging Biol.(2):153-65；以及其他地方。非天然氨基酸可以通过化学合成或重组方法掺入抗体(例如，使用合适的正交氨基酰基tRNA合成酶-tRNA在宿主细胞中在抗体的翻译期间掺入非天然氨基酸)。
存在于抗体中的非天然氨基酸的官能团可以是叠氮化物、炔烃、烯烃、氨基氧基、肼、醛、asaldehyde、硝酮、氧化腈、环丙烯、降冰片烯、异氰化物、芳基卤化物、硼酸、重氮、四嗪、四唑、四环烷、碘苯或其它合适的官能团，并选择接头上的官能团与非天然氨基酸的官能团反应(或反之亦然)。仅作为一个实例，可将带有叠氮基的非天然氨基酸(例如，5-叠氮基-L-正缬氨酸等)并入抗体，并且接头-唾液酸调节剂部分的接头部分可包括炔官能团，使得抗体和接头-唾液酸调节剂部分通过叠氮化物-炔环加成共价缀合。可以使用例如铜催化的叠氮化物-炔环加成反应进行缀合。
在一些实施方案中，抗体上的化学柄不涉及非天然氨基酸。通过利用例如抗体的亲核官能团(例如赖氨酸的N-末端胺或伯胺，或任何其它亲核氨基酸残基)作为在与带有反应性离去基团或其它亲电子基团的部分的取代反应中的亲核试剂，可以将不含非天然氨基酸的抗体缀合至试剂。一个例子会是制备带有N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)酯的唾液酸调节剂-接头或药物-接头部分，并使其在水性条件下在升高的pH(～10)下或在添加非亲核碱例如N,N-二异丙基乙胺的极性有机溶剂例如DMSO中与抗体反应。
应当理解，用于将接头、试剂和/或抗体彼此连接的具体方法可以取决于具体接头、试剂/或抗体和为将各种组分彼此缀合而选择和采用的官能团而变化。
还提供了融合蛋白。融合蛋白包括与异源氨基酸序列融合的本公开的抗体的可变重链(VH)多肽、可变轻链(VL)多肽或两者。在核酸或多肽的上下文中使用的“异源”通常是指该核酸或多肽来自与该核酸或多肽所缔合或连接的来源不同的来源(例如，不同序列的分子、不同物种来源等)，使得该核酸或多肽是自然界中未发现的核酸或多肽。例如，在融合蛋白中，轻链多肽和报告多肽(例如，GFP、萤光素酶等)被称为彼此“异源”。类似地，来自小鼠抗体的CDR和来自人抗体的恒定区被称为彼此“异源”。
产生抗体的方法
使用本文提供的信息，本公开的抗CD55抗体可以使用本领域技术人员熟知的标准技术制备。例如，编码本公开的抗体的氨基酸序列的核酸序列可用于表达抗体。本文提供的多肽序列(参见例如表1)可用于确定编码抗体的合适核酸序列，然后该核酸序列用于表达一种或多种对CD55具有特异性的抗体。根据本领域技术人员熟知的标准方法，可以优化核酸序列以反映各种表达系统的特定密码子“偏好”。
使用提供的序列信息，可以根据本领域技术人员已知的多种标准方法合成核酸。寡核苷酸合成优选在可商购的固相寡核苷酸合成机器上进行或使用例如固相亚磷酰胺三酯方法手动合成。
一旦合成了编码主题抗体的核酸，就可以根据标准方法对其进行扩增和/或克隆。实现这些目的的分子克隆技术是本领域已知的。适用于构建重组核酸的多种克隆和体外扩增方法是本领域技术人员已知的并且是许多教科书和实验室手册的主题。
编码本公开的抗体的天然或合成核酸的表达可以通过将编码抗体的核酸可操作地连接至启动子(其是组成型的或诱导型的)并将构建体掺入表达载体中以产生重组表达载体来实现。载体可适用于原核生物、真核生物或两者中的复制和整合。典型的克隆载体包含功能上适当定向的转录和翻译终止子、起始序列和可用于调节编码抗体的核酸的表达的启动子。载体任选地包含含有至少一个独立终止子序列的通用表达盒、允许所述盒在真核生物和原核生物中复制的序列，例如在穿梭载体中发现的，以及用于原核和真核系统二者的选择标记。
为了获得克隆核酸的高水平表达，通常构建表达质粒，该质粒通常包含指导转录的强启动子、用于翻译起始的核糖体结合位点和转录/翻译终止子，每个都功能取向于彼此和蛋白质编码序列。在大肠杆菌中适用于此目的的调控区的例子是大肠杆菌色氨酸生物合成途径的启动子和操纵子区——噬菌体λ的左侧启动子(PL)和L-阿拉伯糖(araBAD)操纵子。在大肠杆菌中转化的DNA载体中包含选择标记也是有用的。此类标记的实例包括指定对氨苄青霉素、四环素或氯霉素抗性的基因。使用例如大肠杆菌、芽孢杆菌属和沙门氏菌，用于表达抗体的表达系统是可用的。也可以使用大肠杆菌系统。
还可以将抗体基因亚克隆到允许在抗体(例如IgG、Fab、scFv等)的C-末端或N-末端添加标签(例如FLAG、六组氨酸等)的表达载体中以促进纯化。在哺乳动物细胞中转染和表达基因的方法是本领域已知的。用核酸转导细胞可以包括，例如，将含有核酸的脂质微粒与细胞温育或将含有核酸的病毒载体与载体宿主范围内的细胞温育。本公开中使用的细胞培养物，包括来自组织(例如，肿瘤)或血液样品的细胞系和培养的细胞，是本领域公知的。
一旦分离并克隆了编码主题抗体的核酸，就可以在本领域技术人员已知的各种重组工程细胞中表达该核酸。此类细胞的实例包括细菌、酵母、丝状真菌、昆虫(例如使用杆状病毒载体的那些)和哺乳动物细胞。
可以根据本领域已知的方法完成主题抗体的分离和纯化。例如，可以通过免疫亲和纯化(或使用蛋白质L或A沉淀)，洗涤以去除非-特异性结合的材料，并洗脱特异性结合的抗体，从经基因修饰以组成型和/或诱导表达蛋白质的细胞的裂解物中，或从合成反应混合物中，分离蛋白质。分离的抗体可以通过透析和其他通常用于蛋白质纯化方法的方法进一步纯化。在一个实施方案中，可以使用金属螯合层析方法分离抗体。本公开的抗体可以包含修饰以促进分离，如上所述。
可以以基本上纯的或分离的形式(例如，不含其他多肽)制备主题抗体。蛋白质可以存在于相对于可能存在的其他组分(例如，其他多肽或其他宿主细胞组分)富含多肽的组合物中。可以提供纯化的抗体，使得抗体存在于基本上不含其他表达蛋白的组合物中，例如组合物的低于90％，通常低于60％，更通常低于50％由其他表达的蛋白组成。
原核细胞产生的抗体可能需要暴露于离液剂以便正确折叠。例如，在从大肠杆菌中纯化期间，表达的蛋白质可以任选地变性然后复性。这可以例如通过将细菌产生的抗体溶解在离液剂例如盐酸胍中来实现。然后通过缓慢透析或凝胶过滤使抗体复性。或者，编码抗体的核酸可以与分泌信号序列例如pelB可操作地连接，使得抗体以正确折叠的形式分泌到周质中。
本公开还提供产生本公开的抗体的细胞，其中合适的细胞包括真核细胞，例如哺乳动物细胞。细胞可以是能够在体外复制抗体(例如单克隆抗体，例如IgG)的杂交细胞或“杂交瘤”。例如，本公开提供了一种重组宿主细胞(在本文中也称为“遗传修饰的宿主细胞”)，其用一种或多种核酸进行遗传修饰，所述核酸包含编码本公开的抗体的重链和/或轻链的核苷酸序列。
本文还考虑了用于产生绕过杂交瘤产生的抗体分子的抗原结合区的重组DNA形式的技术。DNA被克隆到例如细菌(例如噬菌体)、酵母(例如酵母属或毕赤酵母属)昆虫或哺乳动物表达系统中。合适技术的一个实例使用具有前导序列的噬菌体λ载体系统，该前导序列导致表达的抗体(例如Fab或scFv)迁移至周质空间(细菌细胞膜和细胞壁之间)或被分泌。对于结合肿瘤相关抗原的那些，可以快速产生大量的功能片段(例如，Fab或scFv)。
可以使用本领域已知的多种技术(包含使用杂交瘤、重组、噬菌体展示技术或其组合)制备特异性结合CD55的抗体。例如，可以使用噬菌体展示的方法来制备和分离抗体。噬菌体展示用于蛋白质相互作用的高通量筛选。噬菌体可以用于展示从库或组合抗体文库(例如，人或鼠)表达的抗原结合结构域。可以用CD55(例如，使用结合或捕获到固体表面或珠粒上的标记的CD55)选择或鉴定表达结合CD55的抗原结合结构域的噬菌体。这些方法中使用的噬菌体通常是丝状噬菌体，包含从噬菌体中用Fab、Fv(来自轻链或重链的单个Fv区)表达的fd和M13结合结构域，或与噬菌体基因III或基因VIII蛋白重组融合的二硫键稳定的Fv抗体结构域。示例性方法阐述于以下文献中：例如，美国专利第5,969,108号,Hoogenboom,H.R.和Chames,《今日免疫学(Immunol.Today)》2000,21:371；Nagy等人.《自然医学(Nat.Med.)》2002,8:801；Huie等人.《美国国家科学院院刊(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)》2001,98:2682；Lui等人,《分子生物学杂志(J.Mol.Biol.)》2002,315:1063，所述文献中的每一个文献均通过引用并入本文。一些出版物(例如，Marks等人,《生物/技术(Bio/Technology)》1992,10:779-783)已经描述了通过链改组以及组合感染和体内重组产生高亲和力人抗体作为构建大噬菌体文库的策略。在另一个实施方案中，核糖体展示可以用于替代噬菌体作为展示平台(参见，例如，Hanes等人,《国家生物技术(Nat.Biotechnol)》2000,18:1287；Wilson等人,《美国国家科学院院刊》2001,98:3750；或Irving等人,《免疫学方法杂志(J Immunol.Methods)》2001,248:31)。可以对细胞表面文库进行抗体筛选(Boder等人,《美国国家科学院院刊》2000,97:10701；Daugherty等人,《免疫学方法杂志》2000,243:211)。此类程序提供了传统杂交瘤技术的替代性方法，用于分离和随后的克隆单克隆抗体。
选择噬菌体之后，可以分离来自噬菌体的抗体编码区，并用于产生完整抗体(包含人抗体或任何期望的抗原结合片段)，并在任何期望的宿主(包含哺乳动物细胞、昆虫细胞、植物细胞、酵母和细菌)中表达所述抗体编码区。例如，可以使用本领域中已知的方法，采用重组产生Fv、scFv、Fab、F(ab')2和Fab'片段的技术。
双特异性抗体
还提供了双特异性抗体。根据一些实施方案，本公开的双特异性抗体包括特异性结合CD55的第一抗原结合结构域(例如Fab臂、scFv等)，其中第一抗原结合结构域包括本公开的抗体的VH多肽和VL多肽。在某些实施方案中，双特异性抗体包括特异性结合CD55的第二抗原结合结构域(例如，Fab臂、scFv等)。根据一些实施方案中，双特异性抗体包括特异性结合CD55以外的抗原的第二抗原结合结构域(例如，Fab臂、scFv等)。第二抗原结合结构域可特异性结合的CD55以外的抗原的实例包括但不限于与细胞表面上的CD55共表达的细胞表面抗原。例如，第二抗原结合结构域可以特异性结合T细胞表面抗原。第二抗原结合结构域可特异性结合的CD55以外的抗原的其他实例包括但不限于在不共表达CD55的细胞表面上表达的细胞表面抗原。
本公开的双特异性抗体包括具有全长抗体结构的抗体和双特异性抗体片段。如本文所用，“全长”是指具有两条全长抗体重链和两条全长抗体轻链的抗体。全长抗体重链(HC)由众所周知的重链可变结构域和恒定结构域VH、CH1、CH2和CH3组成。全长抗体轻链(LC)由众所周知的轻链可变结构域和恒定结构域VL和CL组成。全长抗体可在一条或两条重链中缺少C端赖氨酸。术语“Fab臂”是指特异性结合抗原的一对重链-轻链。
全长双特异性抗体可以例如使用在两个单特异性二价抗体之间的Fab臂交换(或半分子交换)通过在每个半分子中的重链CH3界面处引入取代以有利于具有不同特异性的两个抗体半分子在无细胞环境中体外或使用共表达形成异二聚体来产生。Fab臂交换反应是CH3结构域的二硫键异构化反应和解离-缔合的结果。亲本单特异性抗体的铰链区的重链二硫键减少。亲本单特异性抗体之一的所得游离半胱氨酸与第二亲本单特异性抗体分子的半胱氨酸残基形成重链间二硫键，同时亲本抗体的CH3结构域通过解离-缔合而释放和重新形成。Fab臂的CH3结构域可以设计成相比于同二聚化有利于异二聚化。所得产物是具有两个Fab臂或半分子的双特异性抗体，每个分子结合不同的表位。
“臼中杵(knob-in-hole)”策略(参见，例如，PCT国际公开WO 2006/028936)可用于产生全长双特异性抗体。简而言之，可以在影响CH3结构域相互作用的位置突变形成人IgG中CHS结构域界面的选定氨基酸，以促进异二聚体形成。具有小侧链(臼)的氨基酸被引入特异性结合第一抗原的抗体的重链中，具有大侧链(杵)的氨基酸被引入特异性结合第二抗原的抗体的重链。两种抗体共表达后，由于带有“臼”的重链与带有“杵”的重链优先相互作用而形成异二聚体。形成杵和臼的示例性CH3取代对是(表示为第一重链的第一CH3结构域中的修饰位置/第二重链的第二CH3结构域中的修饰位置)：T366Y7F405A、T366W/F405W、F405W/Y407A、T394W/Y407T、T3945/Y407A、T366W/T394S、F405W/T394S和T366W/T366S_L368A_Y407V。
可以使用其他策略，例如通过在一个CH3表面取代带正电荷的残基和在第二个CH3表面取代带负电荷的残基，使用静电相互作用促进重链异二聚化，如美国专利公开US2010/0015133；美国专利公开US2009/0182127；美国专利公开U82010/028637或美国专利公开US2011/0123532中描述的。在其他策略中，异二聚化可以通过以下取代(表示为第一重链的第一CH3结构域中的修饰位置/第二重链的第二CH3结构域中的修饰位置)促进：L351Y_F405A_Y407V T394W、T366I_K392M_T394W/F405A_Y407V、T366L_K392M_T394W/F405A_Y407V、L351 Y_Y407A'T366A_K409F、L351Y_Y407A/T366V_K409F、Y407A/T366A_K409F或T350V_L351Y_F405A_Y407V/T350V_T366L_K392L_T394W，如在美国专利公开US2012/0149876或美国专利公开US2013/0195849中描述的。
还提供了单链双特异性抗体。在一些实施方案中，本公开的单链双特异性抗体是双特异性scFv。关于双特异性scFv的细节可以在例如Zhou等人(2017)J Cancer 8(18):3689-3696中找到。
核酸、表达载体和细胞
鉴于以上关于产生本公开的抗体的方法的部分，将理解本公开还提供核酸、表达载体和细胞。
在某些实施方案中，提供了编码本公开的抗体的可变重链(VH)多肽、可变轻链(VL)多肽或两者的核酸。根据一些实施方案，抗体是单链抗体(例如scFv)，并且核酸编码单链抗体。
还提供了包含本公开的任何核酸的表达载体。
还提供了包含本公开的任何核酸和/或表达载体的细胞。根据一些实施方案，本公开的细胞包括编码抗体的VH多肽和抗体的VL多肽的核酸。在某些此类实施方案中，抗体是单链抗体(例如scFv)，并且核酸编码单链抗体。根据一些实施方案，提供了包含编码本公开的抗体的可变重链(VH)多肽的第一核酸和编码所述抗体的可变轻链(VL)多肽的第二核酸的细胞。在某些实施方案中，此类细胞包括包含第一核酸的第一表达载体和包含第二核酸的第二表达载体。
还提供了制备本公开的抗体的方法，该方法包括在适合细胞表达抗体的条件下培养本公开的细胞，其中产生抗体。适合细胞表达抗体的条件可以不同。此类条件的非限制性实例包括在合适的容器(例如细胞培养板或其孔)中、在合适的培养基(例如细胞培养基，例如DMEM、RPMI、MEM、IMDM、DMEM/F-12等)中、在合适的温度(例如，32℃-42℃，例如37℃)和pH值(例如，pH 7.0-7.7，例如pH 7.4)下、在具有合适CO2百分比例如3％到10％如5％的环境中培养细胞。
组合物
本公开还提供了组合物。在某些实施方案中，该组合物可用于例如实践本公开的方法。
根据一些实施方案，本公开的组合物包括本公开的抗体。例如，抗体可以是上文抗体部分中描述的任何抗体，出于简洁的目的，将其并入但本文不再重复。根据一些实施方案，本公开的组合物包括本公开的缀合物。在一些实施方案中，本公开的组合物包括本公开的融合蛋白。本公开的任何组合物还可包括T细胞激活剂和/或先天免疫系统刺激剂。
在某些方面，本公开的组合物包含存在于液体介质中的抗体。液体介质可以是水性液体介质，例如水、缓冲溶液等。一种或多种添加剂，如盐(例如NaCl、MgCl2、KCl、MgSO4)、缓冲剂(Tris缓冲剂、N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-(2-乙磺酸)(HEPES)、2-(N-吗啉)乙磺酸(MES)、2-(N-吗啉)乙磺酸钠盐(MES)、3-(N-吗啉)丙磺酸(MOPS)、N-三[羟基甲基]甲基-3-氨基丙磺酸(TAPS)等)、增溶剂、洗涤剂(例如，非离子型洗涤剂，如吐温(Tween)-20等)、核酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂、甘油、螯合剂等可以存在于此类组合物中。
如上文所概述的，本公开的方面包含药物组合物。在一些实施方案中，本公开的药物组合物包含本公开的抗CD55抗体(或包含其的缀合物或融合蛋白)和药学上可接受的载体。在某些方面，本公开的药物组合物包括抗体(或包含其的缀合物或融合蛋白)、T细胞激活剂(例如，本文所述的任何T细胞激活剂)和药学上可接受的载体。在某些方面，本公开的药物组合物包括抗体(或包含其的缀合物或融合蛋白)、先天免疫系统刺激物(例如，本文所述的任何先天免疫系统刺激物)和药学上可接受的载体。
应当理解，本公开的药物组合物可以包含本文在抗体和方法部分中描述的任何试剂和特征，出于简洁的目的，将其并入但本文不再详细重复。
当本公开的药物组合物包含T细胞激活剂时，在某些方面，所述T细胞激活剂是免疫检查点抑制剂。所关注的免疫检查点抑制剂包含但不限于T细胞共刺激受体的激动剂、T细胞抑制信号的拮抗剂等。在一些实施方案中，免疫检查点抑制剂选自：细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)抑制剂、程序性细胞死亡1(PD-1)抑制剂、程序性细胞死亡配体1(PD-L1)抑制剂、淋巴细胞激活基因3(LAG-3)抑制剂、T细胞免疫球蛋白结构域和粘蛋白结构域3(TIM-3)抑制剂、吲哚胺(2,3)-双加氧酶(IDO)抑制剂、OX40激动剂、糖皮质激素诱导的TNFR相关型蛋白(GITR)激动剂、CD137激动剂和CD40激动剂。
当本公开的药物组合物包含T细胞激活剂时，在某些方面，所述T细胞激活剂是细胞因子。在一些实施方案中，当本公开的药物组合物包含T细胞激活剂时，所述T细胞激活剂是抑制性免疫受体的拮抗剂。在某些方面，本公开的药物组合物包含本文所描述的任何T细胞激活剂的组合(即，两种或超过两种)。
可以将抗体(和任选的T细胞激活剂和/或先天免疫系统刺激剂)掺入多种用于治疗性施用的制剂中。更具体地，(一种或多种)试剂(即，抗CD55抗体和任选地T细胞激活剂和/或先天免疫系统刺激剂)可以通过与适当的药学上可接受的赋形剂或稀释剂组合配制成药物组合物，并且可以配制成固体、半固体、液体或气体形式的制剂，如片剂、胶囊、粉末、颗粒、软膏、溶液、注射剂、吸入剂和气溶胶。
用于向个体施用的试剂的制剂(例如，适合于人类施用的制剂)通常是无菌的，并且可以进一步不含可检测的热原或根据选定的施用途径禁止向患者施用的其它污染物。
在药物剂型中，一种或多种试剂可以以其药学上可接受的盐的形式施用，或者所述一种或多种试剂也可以单独使用或以适当的关联以及组合形式与其它药学活性化合物一起使用。以下方法和载剂/赋形剂仅仅是实例，而决不是限制性的。
对于口服制剂，一种或多种试剂可以单独使用或以组合形式与适当的添加剂一起使用，以制备片剂、粉剂、颗粒或胶囊，例如，与常规添加剂(如乳糖、甘露醇、玉米淀粉或马铃薯淀粉)一起使用；与粘合剂(如结晶纤维素、纤维素衍生物、阿拉伯树胶、玉米淀粉或明胶)一起使用；与崩解剂(如玉米淀粉、马铃薯淀粉或羧甲基纤维素钠)一起使用；与润滑剂(如滑石粉或硬脂酸镁)一起使用；并且如果需要的话，与稀释剂、缓冲剂、润湿剂、防腐剂和调味剂一起使用。
可以配制用于肠胃外(例如，静脉内、动脉内、骨内、肌内、脑内、脑室内、鞘内、皮下等)施用的一种或多种试剂。在某些方面，通过将一种或多种试剂溶解、悬浮或乳化在水性或非水性溶剂(如植物油或其它类似的油、合成脂肪酸甘油酯、高级脂肪酸酯或丙二醇)中来配制用于注射的一种或多种试剂；并且如果需要的话，使用如增溶剂、等渗剂、悬浮剂、乳化剂、稳定剂和防腐剂等常规添加剂。
可以通过将具有期望纯度的一种或多种试剂与任选的生理学上可接受的载剂、赋形剂、稳定剂、表面活性剂、缓冲剂和/或张力剂混合来制备包含所述一种或多种试剂的药物组合物。可接受的载剂、赋形剂和/或稳定剂在所用的剂量和浓度下对接受者无毒，并且包含：缓冲剂，如磷酸盐、柠檬酸盐和其它有机酸；抗氧化剂，包含抗坏血酸、谷胱甘肽、半胱氨酸、蛋氨酸和柠檬酸；防腐剂(如乙醇、苯甲醇、苯酚、间甲酚、对氯间甲酚、对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯、苯扎氯铵或其组合)；氨基酸，如精氨酸、甘氨酸、鸟氨酸、赖氨酸、组氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、蛋氨酸、丝氨酸、脯氨酸及其组合；单糖、二糖和其它碳水化合物；低分子量(少于约10个残基)多肽；蛋白质，如明胶或血清白蛋白；螯合剂，如EDTA；糖，如海藻糖、蔗糖、乳糖、葡萄糖、甘露糖、麦芽糖、半乳糖、果糖、山梨糖、棉子糖、葡糖胺、N-甲基葡糖胺、半乳糖胺和神经氨酸；和/或非离子表面活性剂，如Tween、Brij Pluronics、Triton-X或聚乙二醇(PEG)。
药物组合物可以是液体形式、冻干形式或从冻干形式重构的液体形式，其中在施用之前用无菌溶液重构冻干制剂。重构冻干组合物的标准程序是加回一定体积的纯水(通常相当于冻干期间移除的体积)；然而，包括抗菌剂的溶液可以用于产生用于肠胃外施用的药物组合物。
可以在pH缓冲溶液中，例如，在约4.0到约7.0、或约5.0到约6.0、或可替代地约5.5的pH范围下，制备一种或多种试剂的水性制剂。适合于此范围内pH的缓冲液的实例包含磷酸盐-、组氨酸-、柠檬酸盐-、琥珀酸盐-、乙酸盐-缓冲液和其它有机酸缓冲液。缓冲液浓度可以为约1mM到约100mM或约5mM到约50mM，这取决于例如缓冲液和制剂的所需张力。
可以包含张力剂来调节制剂的张力。示例张力剂包含氯化钠、氯化钾、甘油和来自氨基酸、糖以及其组合的组的任何组分。在一些实施方案中，水性制剂是等渗的，尽管高渗或低渗溶液可能是合适的。术语“等渗”表示具有与其比较的一些其它溶液相同的张力的溶液，如生理盐溶液或血清。可以以约5mM到约350mM的量使用张力剂，例如以100mM到350mM的量使用。
还可以将表面活性剂添加到制剂中以减少聚集和/或使所述制剂中颗粒的形成最小化和/或减少吸附。表面活性剂实例包含聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯(吐温)、聚氧乙烯烷基醚(Brij)、烷基苯基聚氧乙烯醚(Triton-X)、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物(泊洛沙姆，Pluronic)和十二烷基硫酸钠(SDS)。合适的聚氧乙烯山梨糖醇酐-脂肪酸酯的实例是聚山梨醇酯20(以商标Tween 20TM销售)和聚山梨醇酯80(以商标Tween 80TM销售)。合适的聚乙烯-聚丙烯共聚物的实例是以名称
Figure BDA0003256359430000401
F68或Poloxamer 188TM销售的聚乙烯-聚丙烯共聚物。合适的聚氧乙烯烷基醚的实例是以商标BrijTM销售的聚氧乙烯烷基醚。表面活性剂的实例浓度范围可以为约0.001％到约1％w/v。
也可以添加冻干保护剂以保护抗体和/或T细胞激活剂在冻干过程中免受不稳定条件的影响。例如，已知的冻干保护剂包含糖(包含葡萄糖和蔗糖)；多元醇(包含甘露醇、山梨醇和甘油)；和氨基酸(包含丙氨酸、甘氨酸和谷氨酸)。可以包含约10mM到500nM的量的冻干保护剂。
在一些实施方案中，药物组合物包含抗体和/或T细胞激活剂，以及上述组分(例如，表面活性剂、缓冲剂、稳定剂、张力剂)中的一种或多种，并且基本上不含一种或多种防腐剂，如乙醇、苯甲醇、苯酚、间甲酚、对氯间甲酚、对羟基苯甲酸甲酯或丙酯、苯扎氯铵及其组合。在其它实施方案中，制剂中包含防腐剂，例如，以约0.001到约2％(w/v)的浓度范围。
方法
本公开的方面包括包含向有需要的个体施用本公开的抗CD55抗体(或包含其的缀合物或融合蛋白)的方法。
在某些实施方案中，提供了治疗细胞增殖性疾病的方法。根据一些实施方案，此类方法包含向患有细胞增殖性病症的个体施用治疗有效量的本公开的抗CD55抗体，其中在所述施用时，并未怀疑所述细胞增殖性疾病的异常增殖细胞表现出CD55过表达。“并未怀疑表现CD55过表达”意指与第二细胞群(例如，与异常增殖细胞具有相同组织类型的非异常增殖(例如，非癌)细胞)相比，并未怀疑CD55在异常增殖细胞(例如，癌细胞)上以更高水平表达。在一些实施方案中，在所述施用时，已经确定所述细胞增殖性疾病的异常增殖细胞不过表达CD55。在某些方面，所述方法包含做出此种确定。
在一些实施方案中，提供了包括向患有细胞增殖性病症的个体施用治疗有效量的本公开的抗CD55抗体的方法，其中向所述个体施用所述抗体以增强对细胞增殖性病症的异常增殖细胞的T细胞应答。
本公开的方法至少部分基于发明人的惊人发现，即CD55结合剂增强了对细胞增殖性疾病(例如，癌症)的异常增殖细胞的T细胞应答，无论异常增殖细胞是否过表达CD55。进一步的细节可以在国际专利申请PCT/US2018/047356中找到，其公开内容出于所有目的通过引用整体并入本文。因此，在一些实施方案中，本公开的方法是增强对细胞增殖性疾病(例如，癌症)的异常增殖细胞的T细胞应答的方法。类似地，本公开的方面包含向患有细胞增殖性病症的个体施用抗CD55抗体，其中施用CD55结合剂的目的不是诱导而是增强抗体依赖性细胞毒性(ADCC)。在一些实施方案中，所述方法包含向接受抗体疗法的个体(例如，接受旨在通过诱导ADCC来治疗细胞增殖性疾病(例如，癌症)的抗体疗法的个体)施用抗CD55抗体，其中施用抗CD55抗体增强了抗体疗法的ADCC。
可以将抗CD55抗体施用于多个受试者中的任何一个受试者。在某些方面，个体是“哺乳动物”或“哺乳动物类”，其中这些术语广泛用于描述哺乳动物类内的生物体，包含食肉动物(例如狗和猫)、啮齿目动物(例如小鼠、豚鼠和大鼠)和灵长类动物(例如人类、黑猩猩和猴子)。在一些实施方案中，个体是人。在某些方面，个体是细胞增殖性疾病(例如，癌症)的动物模型(例如，小鼠模型、灵长类动物模型等)。
如上概述，有需要的个体可能患有细胞增殖性病症。“细胞增殖性疾病”意指其中多细胞生物中的一个或多个细胞亚群发生不希望的细胞增殖，从而导致伤害(例如，疼痛或生物体预期寿命缩短)的疾病。细胞增殖性疾病包含但不限于癌症、癌症前期、良性肿瘤、血管增殖性疾病(例如，关节炎、再狭窄等)、纤维化疾病(例如，肝硬化、动脉粥样硬化等)、银屑病、表皮囊肿和皮样囊肿、脂肪瘤、腺瘤、毛细血管瘤和皮肤血管瘤、淋巴管瘤、痣病变、畸胎瘤、肾瘤、肌纤维瘤病、成骨肿瘤、发育不良性肿块、系膜细胞增殖性疾病等。
在一些实施方案中，个体患有癌症。由于所获得的增强的抗癌T细胞应答，本主题的方法可以用于治疗多种癌症。在一些实施方案中，个体患有疑似通过例如选择一个或多个免疫检查点通路来逃避免疫系统(例如，效应T细胞)的癌症。如本文所用，“肿瘤”是指所有肿瘤细胞的生长和增殖，无论是恶性的还是良性的，以及所有癌前和癌性细胞和组织。术语“癌症”和“癌性”是指或描述哺乳动物中通常以不受调节的细胞生长/增殖为特征的生理状况。可以使用本主题方法治疗的癌症的实例包含但不限于癌、淋巴瘤、母细胞瘤和肉瘤。这种癌症的更具体的实例包含鳞状细胞癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞状细胞癌、腹膜癌、肝细胞癌、胃肠癌、胰腺癌、胶质母细胞瘤、宫颈癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、肝瘤、乳腺癌、结肠癌、结直肠癌、子宫内膜癌或子宫癌、唾液腺癌、肾癌、前列腺癌、外阴癌、甲状腺癌、肝癌、各种类型的头颈癌等。在某些方面，个体患有选自以下的癌症：黑素瘤、霍奇金淋巴瘤、肾细胞癌(RCC)、膀胱癌、非小细胞肺癌(NSCLC)和头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)。在一些实施方案中，个体患有已经由美国食品和药物管理局(FDA)批准施用T细胞激活剂(例如，共刺激受体的激动剂、免疫检查点抑制剂(例如，CTLA-4抑制剂、PD-1抑制剂等))来治疗(单独或与第二种抗癌剂组合使用)的癌症。
如上文所概述的，在某些方面，施用了所述抗CD55抗体的个体正在接受抗体疗法。如本文所用，“抗体疗法”意指抗体(非抗CD55抗体)将被施用于个体、已经施用于个体和/或正在施用于个体，用于治疗目的。抗体疗法将根据正在治疗的个体的状况而变化。在一些实施方案中，抗体疗法包含施用特异性结合与个体的医疗状况相关的细胞表面上的抗原(例如，细胞表面抗原，如蛋白质或非蛋白质细胞表面抗原)的抗体(例如IgG，如IgG1)。例如，作为抗体疗法的一部分施用的抗体可以结合存在于有助于医疗状况的细胞(例如，患有癌症的个体中的癌细胞)表面上的抗原，其中抗体与抗原的结合减少或消除细胞对医疗疾病的贡献。在一些实施方案中，个体患有癌症，并且可以作为抗体疗法的一部分施用的抗体选自阿德卡单抗(Adecatumumab)、阿斯喹瓦单抗(Ascrinvacumab)、西妥木单抗、康纳图单抗(Conatumumab)、达拉图单抗(Daratumumab)、卓兹单抗(Drozitumab)、杜里啯单抗(Duligotumab)、杜瓦鲁单抗(Durvalumab)、杜斯基单抗(Dusigitumab)、因伏单抗(Enfortumab)、因诺汀单抗(Enoticumab)、非吉图单抗(Figitumumab)、甘尼图单抗(Ganitumab)、格莱巴单抗(Glembatumumab)、因特图单抗(Intetumumab)、易普利姆玛、伊拉图单抗(Iratumumab)、伊库单抗(Icrucumab)、沙木单抗、鲁卡单抗(Lucatumumab)、马帕木、纳纳图单抗(Narnatumab)、奈昔、奈斯瓦单抗(Nesvacumab)、奥法木单抗、奥拉诺单抗(Olaratumab)、帕尼、帕处图单抗(Patritumab)、普睿图单抗(Pritumumab)、若蔗单抗(Radretumab)、拉木斯单抗(Ramucirumab)、利妥木单抗、若巴图单抗(Robatumumab)、赛睿斑单抗(Seribantumab)、塔若图单抗(Tarextumab)、泰若单抗(Teprotumumab)、妥弗单抗(Tovetumab)、凡迪单抗(Vantictumab)、沃森单抗(Vesencumab)、沃图单抗(Votumumab)、扎妥木单抗、弗兰沃单抗(Flanvotumab)、阿图单抗(Altumomab)、阿纳单抗(Anatumomab)、阿西单抗(Arcitumomab)、贝图单抗(Bectumomab)、布啉纳单抗(Blinatumomab)、地莫单抗、替伊莫单抗、明瑞莫单抗、米妥莫单抗、莫西姆单抗(Moxetumomab)、纳图单抗(Naptumomab)、若莫单抗、派图单抗(Pemtumomab)、品图单抗(Pintumomab)、拉图单抗(Racotumomab)、沙妥莫单抗、索里图单抗(Solitomab)、它普利单抗(Taplitumomab)、泰纳单抗(Tenatumomab)、托西莫、特雷梅里单抗(Tremelimumab)、阿巴伏单抗、伊戈伏单抗、奥戈伏单抗、卡罗单抗、依决可单抗、纳扣罗单抗(Nacolomab)、阿玛图单抗(Amatuximab)、巴维昔单抗、布伦单抗(Brentuximab)、西妥昔单抗、德罗单抗(Derlotuximab)、地努图单抗(Dinutuximab)、恩斯图单抗(Ensituximab)、弗图单抗(Futuximab)、热仁图单抗(Girentuximab)、因达单抗(Indatuximab)、艾萨单抗(Isatuximab)、玛格单抗(Margetuximab)、利妥昔单抗、西图单抗(Siltuximab)、优布利单抗(Ublituximab)、艾可若单抗(Ecromeximab)、阿芘单抗(Abituzumab)、阿仑单抗、贝伐单抗、芘瓦单抗(Bivatuzumab)、布润替单抗(Brontictuzumab)、卡图单抗(Cantuzumab)、卡图单抗(Cantuzumab)、次它单抗(Citatuzumab)、可利瓦单抗(Clivatuzumab)、达斯单抗(Dacetuzumab)、德斯单抗(Demcizumab)、达罗单抗(Dalotuzumab)、德宁单抗(Denintuzumab)、艾罗单抗(Elotuzumab)、艾玛单抗(Emactuzumab)、艾密贝单抗(Emibetuzumab)、艾诺利单抗(Enoblituzumab)、艾它若单抗(Etaracizumab)、发乐图单抗(Farletuzumab)、非拉单抗(Ficlatuzumab)、吉妥单抗、因加单抗(Imgatuzumab)、艾诺单抗(Inotuzumab)、拉贝单抗(Labetuzumab)、利发单抗(Lifastuzumab)、林妥珠单抗、罗沃单抗(Lorvotuzumab)、鲁睿单抗(Lumretuzumab)、马妥珠单抗、密拉单抗(Milatuzumab)、尼妥珠单抗、奥冰单抗(Obinutuzumab)、奥卡拉单抗(Ocaratuzumab)、奥特乐单抗(Otlertuzumab)、奥纳阻单抗(Onartuzumab)、奥普单抗(Oportuzumab)、帕萨单抗(Parsatuzumab)、派图单抗(Pertuzumab)、品纳单抗(Pinatuzumab)、坡拉单抗(Polatuzumab)、斯若单抗(Sibrotuzumab)、斯图单抗(Simtuzumab)、塔卡单抗(Tacatuzumab)、替加单抗(Tigatuzumab)、曲妥珠单抗、图扣单抗(Tucotuzumab)、凡多单抗(Vandortuzumab)、凡努西单抗(Vanucizumab)、外图单抗(Veltuzumab)、法塞单抗(Vorsetuzumab)、缩非单抗(Sofituzumab)、卡图单抗(Catumaxomab)、艾图单抗(Ertumaxomab)、德帕单抗(Depatuxizumab)、奥图单抗(Ontuxizumab)、布朗单抗(Blontuvetmab)、它图单抗(Tamtuvetmab)和其肿瘤抗原结合变体。在一些实施方案中，抗体疗法的抗体是美国食品和药物管理局和/或欧洲药品管理局(EMA)批准用作治疗性抗体(例如，用于靶向患者中某些疾病相关细胞，等等)或其片段(例如，这种抗体的单链形式，例如抗体的scFv形式)的抗体，其保留了特异性结合靶抗原的能力。
在一些实施方案中，提供了包含施用抗CD55抗体和T细胞激活剂的组合的方法。根据此类方法，可以对患有细胞增殖性病症的个体进行施用。任选地，在施用(例如，初始施用抗CD55抗体、T细胞激活剂或两者(如果存在于单个制剂中))时，并未怀疑细胞增殖性疾病的异常增殖细胞表现出CD55过表达。
如本文所用，“T细胞激活剂”是刺激T细胞或T细胞群中的免疫应答的试剂。此种免疫应答涉及存在于T细胞表面的T细胞受体(TCR)与非共价地存在于抗原呈递细胞(APC)表面的小型肽抗原通过主要组织相容性复合物(MHC；在人体中也被称为人类白细胞抗原(HLA)复合物)结合。这种结合表示免疫系统的靶向机制，并且是T细胞激活和效应子功能所必需的分子相互作用。在靶向表位特异性细胞后，通过将APC上的共刺激蛋白与T细胞上的对应共刺激蛋白结合，对靶向的T细胞进行激活。这两种信号—表位/TCR结合以及APC共刺激蛋白与T细胞共刺激蛋白的结合—均是驱动T细胞特异性和激活所必需的。TCR对给定的表位具有特异性；然而，共刺激蛋白不是表位特异性的，而是通常在所有T细胞或大的T细胞亚群上表达。
可以使用各种测定，以便确定是否已经在T细胞或T细胞群中刺激了免疫应答，即，T细胞或T细胞群是否已经被“激活”。在某些方面，可以通过测量T细胞的抗原诱导的细胞因子的产生来确定T细胞中免疫应答的刺激。在一些实施方案中，可以通过测量T细胞的抗原诱导的IFNγ、IL-4、IL-2、IL-10、IL-17和/或TNFα的产生来确定T细胞中免疫应答的刺激。在一些实施方案中，可以通过细胞内细胞因子染色然后通过流式细胞术来测量T细胞的抗原产生的细胞因子的产生。在一些实施方案中，可以通过表面捕获染色然后通过流式细胞术来测量T细胞的抗原诱导的细胞因子的产生。在一些实施方案中，可以通过确定激活的T细胞培养物的上清液中的细胞因子浓度来测量T细胞的抗原诱导的细胞因子的产生。在一些实施方案中，可以通过ELISA进行这种测量。
在一些实施方案中，可以通过ELISPOT测定来测量T细胞的抗原产生的细胞因子的产生。通常，ELISPOT测定所采用的技术非常类似于夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)技术。将抗体(例如，单克隆抗体、多克隆抗体等)无菌地涂覆在PVDF(聚偏二氟乙烯)支持的微板上。根据抗体对所讨论的细胞因子的特异性选择抗体。将板封闭(例如，用与测定中的任何抗体不反应的血清蛋白)。将所关注的细胞与抗原或有丝分裂原一起以不同的密度铺板，并且然后置于潮湿的37℃下的CO2培养箱中，持续指定的时间段。通过高表面积PVDF膜上的包被抗体局部地捕获激活细胞分泌的细胞因子。在洗涤孔以去除细胞、碎片和培养基组分之后，将特异于细胞因子的二抗(例如，生物素化的多克隆抗体)加入孔中。这种抗体与靶细胞因子的独特表位发生反应，并且因此被用于检测捕获的细胞因子。在洗涤以去除任何未结合的生物素化抗体后，然后使用抗生物素蛋白-HRP和沉淀底物(例如，AEC、BCIP/NBT)使检测到的细胞因子可视化。有色的终产物(斑点，通常是深蓝色)通常表示单个产生细胞因子的细胞。可以手动对斑点进行计数(例如，使用解剖显微镜)或使用自动读取器对斑点进行计数，以捕获微孔图像并分析斑点的数量和大小。在一些实施方案中，每个斑点与单个产生细胞因子的细胞相关。
在一些情况下，由T细胞激活剂激活的T细胞对存在于细胞增殖性疾病基础上的异常增殖细胞(例如，患有癌症的个体中的癌细胞)上的表位具有特异性，并且使此类T细胞与T细胞激活剂接触增加了T细胞对异常增殖细胞的细胞毒性活性、增加了此类表位特异性T细胞的数量，或其组合。
可以将多种已知的试剂用作T细胞激活剂。在一些实施方案中，T细胞激活剂是免疫检查点抑制剂。如本文所用，“免疫检查点抑制剂”是防止抑制免疫系统中任何组分(如MHC类呈递、T细胞呈递和/或分化、用于免疫细胞增殖和/或分化的任何细胞因子、趋化因子或信号传导)的任何试剂(例如，小分子、核酸、蛋白质(例如，抗体))。在某些方面，免疫检查点抑制剂是T细胞共刺激受体的激动剂。此类共刺激受体的非限制性实例包含CD28、ICOS、CD137、OX40、CD27等。在一些实施方案中，免疫检查点抑制剂是T细胞抑制信号的拮抗剂。T细胞抑制信号可以是通过例如PD-1、PD-L1、CTLA4、BTLA、KIR、LAG-3、TIM-3、A2aR等及其任何组合发射的信号。
在一些实施方案中，T细胞激活剂是选自以下的免疫检查点抑制剂：细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)抑制剂、程序性细胞死亡1(PD-1)抑制剂、程序性细胞死亡配体1(PD-L1)抑制剂、淋巴细胞激活基因3(LAG-3)抑制剂、T细胞免疫球蛋白结构域和粘蛋白结构域3(TIM-3)抑制剂、吲哚胺(2,3)-双加氧酶(IDO)抑制剂、OX40激动剂、糖皮质激素诱导的TNFR相关型蛋白(GITR)激动剂、CD137激动剂、CD40激动剂及其任何组合。
在某些方面，T细胞激活剂是细胞因子。在本公开的上下文中，所关注的细胞因子是促进T细胞激活(例如，IL-1等)、促进激活的T细胞(例如，IL-2等)的增殖等的细胞因子。可以与抗CD55抗体一起施用的细胞因子的非限制性实例包含IL-1、IL-2、IL-4、IL-15及其任何组合。
在一些实施方案中，T细胞激活剂是抑制性免疫受体的拮抗剂。在某些方面，此种拮抗剂直接结合到抑制性免疫受体，从而例如通过防止受体结合到其配体来阻断抑制性免疫受体的激活。在其它方面，此种拮抗剂结合到抑制性免疫受体的配体，从而通过防止受体结合到其配体来阻断抑制性免疫受体的激活。可以与抗CD55抗体一起施用的抑制性免疫受体的拮抗剂包含但不限于TGF-β。
在一些实施方案中，将抗CD55抗体与阻断免疫抑制性细胞因子的试剂一起施用于个体。在一个非限制性实例中，这种试剂是TGF-β受体抑制剂。
在一些实施方案中，提供了包括施用抗CD55抗体和先天免疫系统刺激剂的组合的方法。根据此类方法，可以对患有细胞增殖性病症的个体进行施用。任选地，在施用(例如，初始施用抗CD55抗体、T细胞激活剂或两者(如果存在于单个制剂中))时，并未怀疑细胞增殖性疾病的异常增殖细胞表现出CD55过表达。
如本文所用，“先天免疫系统刺激剂”是在个体中刺激先天免疫系统应答的试剂。可用于刺激先天免疫系统的试剂的实例包括但不限于结合一种或多种Toll样受体(TLR)，例如一种或多种TLR1-TLR9的试剂。大多数哺乳动物物种有10-13种类型的TLR，并且每种受体都能识别特定的配体并诱导广泛的炎症级联反应。
在一些实施方案中，先天免疫系统刺激剂是包括未甲基化的CpG二核苷酸的试剂。现在了解到，细菌DNA的免疫刺激作用是特定碱环境(CpG基序)中存在未甲基化的CpG二核苷酸的结果，这在细菌DNA中常见，但在脊椎动物DNA中是甲基化的且代表性不足(Krieg等，1995Nature 374:546-549；Krieg，1999Biochim.Biophys.Acta 93321:1-10)。细菌DNA的免疫刺激作用可以用含有这些CpG基序的合成寡脱氧核苷酸(ODN)模拟。这种CpG ODN对以下具有高度刺激作用：人和鼠白细胞，其诱导B细胞增殖；细胞因子和免疫球蛋白分泌；自然杀伤(NK)细胞裂解活性和IFN-γ分泌；和激活树突细胞(DC)和其他抗原呈递细胞以表达共刺激分子并分泌细胞因子，尤其是Th1样细胞因子，该细胞因子对促进Th1样T细胞反应的发展是重要的。天然磷酸二酯骨架CpG ODN的这些免疫刺激作用是高度CpG特异性的，因为如果CpG基序被甲基化、改变为GpC或以其他方式被消除或改变，则所述作用显著降低(Krieg等，1995Nature 374:546-549；Hartmann等，1999Proc.Natl.Acad.Sci USA 96:9305-10)。
抗CD55抗体以及如果也施用的话，T细胞激活剂和/或先天免疫系统刺激剂以治疗有效量施用。“治疗有效量”意指足以产生期望的结果的剂量，例如，与对照相比，足以实现有益或期望的治疗(包含预防)结果(如使增殖性疾病的症状减轻)的量。当细胞增殖性疾病是癌症时，在一些实施方案中，治疗有效量足以减慢肿瘤的生长、减小肿瘤的大小等。可以以一次或多次施用的方式来施用有效量。
当所述方法包括施用抗CD55抗体和第二试剂(例如，T细胞激活剂和/或先天免疫系统刺激剂)的组合时，可以同时施用抗CD55抗体和第二试剂(例如，在相同或不同的制剂中)、顺序施用或两者兼有。例如，根据某些实施方案，在施用抗CD55抗体之前、与施用抗CD55抗体同时或两者兼有，向个体施用第二试剂。在一些实施方案中，在施用第二试剂之前、与施用第二试剂同时或两者兼有，向个体施用抗CD55抗体。
在某些方面，根据批准用于个体用途的给药方案来施用一种或多种试剂。在一些实施方案中，与在不施用抗CD55抗体的情况下施用第二试剂时所使用的给药方案相比，施用抗CD55抗体允许根据涉及一种或多种较低和/或较少频率的剂量和/或减少的周期数的给药方案来施用第二试剂。在一些实施方案中，与在不施用第二试剂的情况下施用抗CD55抗体时所使用的给药方案相比，施用第二试剂允许根据涉及一种或多种较低和/或较少频率的剂量和/或减少的周期数的给药方案来施用抗CD55抗体。
如上文所指出，在某些方面，同时施用一剂或多剂的抗CD55抗体和第二试剂；在一些这种实施方案中，可以以相同的药物组合物形式施用此类试剂。然而，在一些实施方案中，抗CD55抗体和第二试剂以不同组合物和/或在不同时间施用于个体。例如，可以在施用第二试剂之前(例如，在特定周期中)施用抗CD55抗体。可选地，可以在施用抗CD55抗体之前(例如，在特定周期中)施用第二试剂。待施用的第二试剂的施用时间可以始于施用第一试剂之后至少1小时、3小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时或长达5天或更久。
在一个实例中，在施用第二试剂之前将抗CD55抗体施用给个体达期望的时间段。在某些方面，此种方案“引发”免疫系统例如以通过T细胞激活剂使T细胞激活和/或通过先天免疫系统刺激剂刺激先天免疫系统。在另一个实例中，在施用抗CD55抗体之前，将第二试剂施用给个体达期望的时间段。在某些方面，此种方案“引发”免疫系统以通过抗CD55抗体使T细胞激活。
在一些实施方案中，相对于另一种试剂的施用，对一种试剂的施用进行具体地定时。例如，在一些实施方案中，施用第一试剂，以便观察到特定效果(或预期观察到特定效果，例如基于示出给定的给药方案与所关注的特定效果之间的相关性的群体研究)。
在某些方面，可以根据经验(例如使用离体、体内和/或体外模型)评估或确定以组合形式施用的试剂的期望的相对给药方案；在一些实施方案中，在体内进行此种评估或经验性确定、在患者群体中进行此种评估或经验性确定(例如，以便建立相关性)或者可替代地在所关注的特定受试者中进行此种评估或经验性确定。
例如，可以在施用T细胞激活剂和/或先天免疫系统刺激剂后一段时间施用抗CD55抗体。可以将时间段选择为与分别由T细胞激活剂和/或先天免疫系统刺激剂引起的T细胞激活和/或先天免疫系统刺激的增加相关联。在一些实施方案中，分别与施用T细胞激活剂和/或先天免疫系统刺激剂之前(或施用时)观察到的T细胞激活和/或先天免疫系统刺激相比，相关时间段允许(例如，与之相关)T细胞激活和/或先天免疫系统刺激增加10％或更多、20％或更多、30％或更多、40％或更多、50％或更多、60％或更多、70％或更多、80％或更多、90％或更多、100％或更多、150％或更多、200％或更多、250％或更多、300％或更多、350％或更多、400％或更多、450％或更多或500％或更多。
在一些实施方案中，根据包含至少两个周期的间歇性给药方案施用抗CD55抗体和第二试剂。当两种或超过两种试剂组合施用且每种试剂通过这种间歇的周期性方案施用时，不同试剂的单独剂量可以彼此相互交叉。在某些方面，在第一试剂的一个剂量之后的一段时间施用第二试剂的一个或多个剂量。在一些实施方案中，在第一试剂的一个剂量之后的一段时间施用第二试剂的每个剂量。在某些方面，在施用第二试剂的一个剂量一段时间之后，接着施用第一试剂的每个剂量。在一些实施方案中，在第二试剂的至少一对剂量之间施用第一试剂的两个或更多个剂量；在某些方面，在第一试剂的至少一对剂量之间施用第二试剂的两个或更多个剂量。在一些实施方案中，相同试剂的不同剂量以共同的时间间隔分开；在一些实施方案中，相同试剂的不同剂量之间的时间间隔变化。在某些方面，不同试剂的不同剂量以共同的时间间隔彼此分开；在一些实施方案中，不同试剂的不同剂量以不同的时间间隔彼此分开。
用于使两种间歇的周期性给药方案(例如，用于增强抗CD55抗体、T细胞激活剂或两者的效果)相互交叉的一个示例性方案可以包含：(a)第一给药期，在此期间向个体施用治疗有效量的第一试剂；(b)第一休息期；(c)第二给药期，在此期间向个体施用治疗有效量的第二试剂和任选的第三试剂；以及(d)第二休息期。
在一些实施方案中，第一休息期和第二休息期可以对应于相同的小时数或天数。可替代地，在一些实施方案中，第一休息期和第二休息期是不同的，第一休息期比第二休息期长，或者反之亦然。在一些实施方案中，休息期中的每一个对应于120小时、96小时、72小时、48小时、24小时、12小时、6小时、30小时、1小时或更短时间。在一些实施方案中，如果第二休息期长于第一休息期，则可以将其定义为数天或数周而不是数小时(例如1天、3天、5天、1周、2周、4周或更长时间)。
如果第一休息期的长度是由特定的生物学事件或治疗事件的存在或发展确定的(例如，增加的T细胞活性)，则第二休息期的长度可以根据不同的因素，单独或组合地确定。示例性的此类因素可以包含施用试剂所针对的癌症的类型和/或阶段；第一试剂的特性和/或性质(例如，药代动力学性质)；和/或患者对用第一试剂疗法的响应的一个或多个特征。在一些实施方案中，可以根据所施用的试剂中的一种或另一种试剂(或两者)的药代动力学性质(例如，通过血浆浓度水平评估的药代动力学性质)来调节一个或两个休息期的长度。例如，当相关试剂的血浆浓度低于约1μg/ml、0.1μg/ml、0.01μg/ml或0.001μg/ml时，任选地在对个体响应的一个或多个特征进行评估或其它考虑时，可以认为相关的休息期完成了。
在某些方面，可以凭经验确定施用特定试剂的周期数。而且，在一些实施方案中，与一个或多个其它周期相比，一个或多个周期所遵循的精确方案(例如，剂量的数量、剂量的间隔(例如，相对于彼此或相对于另一个事件，如施用另一种疗法)、剂量的量等)可以是不同的。
可以通过独立地选自口服、肠胃外(例如，通过静脉内、动脉内、皮下、肌内或硬膜外注射)、局部或鼻内施用的施用途径来施用抗CD55抗体和第二试剂(如果也施用的话)(例如T细胞激活剂和/或先天免疫系统刺激剂)。根据某些实施方案，同时(在同一药物组合物或单独的药物组合物中)或按顺序地经肠胃外施用抗CD55抗体和第二试剂两者。
如上所述，本公开的方面包括用于治疗细胞增殖性病症(例如，癌症)的方法。治疗意指至少改善一种或多种与个体的细胞增殖性疾病相关联的症状，其中改善是广义上的，是指至少降低与所治疗的细胞增殖性疾病(例如，癌症)相关联的参数(例如，症状)的幅度。因此，治疗还包含完全抑制细胞增殖性疾病或与其相关联的至少一种或多种症状的情况，例如，防止疾病或症状发生或停止(例如，终止)所述疾病或症状，从而使得个体不再患有细胞增殖性疾病，或者至少不再患有表征细胞增殖性的症状。
试剂盒
如上文所概述的，本公开提供了试剂盒。试剂盒可用于例如实践本公开的方法。在一些实施方案中，本主题的试剂盒包含药物组合物，所述药物组合物包含本公开的抗CD55抗体(例如，本文其他地方所述的CD55结合剂中的任何一种)。在某些方面，提供了包含本文所述的药物组合物中的任何一种的试剂盒，所述试剂盒包含上文在与本公开的组合物相关的部分中描述的药物组合物中的任何一种。本公开的试剂盒可以包含用于向有需要的个体，包括但不限于患有细胞增殖性疾病(例如，癌症)的个体施用所述药物组合物的说明书。在一些实施方案中，本公开的试剂盒包含用于向患有细胞增殖性疾病的个体施用所述药物组合物的说明书，其中并未怀疑所述细胞增殖性疾病的异常增殖细胞表现出CD55过表达。在一些实施方案中，本公开的试剂盒包含用于向患有细胞增殖性疾病的个体施用所述药物组合物以增强对所述细胞增殖性疾病的异常增殖细胞的T细胞应答的说明书。在某些方面，本公开的试剂盒包含用于向接受抗体疗法的个体施用所述药物组合物的说明书。在一些实施方案中，向所述个体施用所述抗体疗法以通过诱导抗体依赖性细胞毒性(ADCC)来治疗所述细胞增殖性疾病，并且所述说明书用于向所述个体施用所述抗CD55抗体以增强所述抗体疗法的ADCC。
在一些实施方案中，提供了试剂盒，其包括本公开的抗CD55抗体、T细胞激活剂和用于将抗CD55抗体和T细胞激活剂施用于患有细胞增殖性病症例如癌症的个体的说明书。所述说明书可以进一步包含上述试剂盒说明书中的任何一个说明书，例如，用于向患有细胞增殖性疾病的个体施用所述药物组合物以增强对细胞增殖性疾病(例如，癌症)的异常增殖细胞的T细胞应答，用于向接受抗体疗法的个体施用所述药物组合物等。所述抗CD55抗体和T细胞激活剂可以存在于同一容器中，或者可以存在于不同容器中。
本主题的试剂盒可以包含以单位剂量(例如，安瓿)或多剂量形式存在的一定量的组合物。因此，在某些实施方案中，试剂盒可以包含一种或多种(例如，两种或超过两种)单位剂量(例如，安瓿)的组合物，所述组合物包含本公开的抗CD55抗体、T细胞激活剂或两者。如本文中所使用的，术语“单位剂量”是指适合作为用于人和动物受试者的单位剂量的物理上离散的单位，每个单位包含按足以产生期望效果的量计算的预定量的组合物。单位剂量的量取决于各种因素，如用于个体的特定抗CD55抗体和/或T细胞激活剂、要达到的效果以及与抗CD55抗体和/或T细胞激活剂相关的药效学。在又其它实施方案中，试剂盒可以包含单个多剂量的组合物。
应当理解的是，本公开的试剂盒可以包含上文在与本主题的方法和组合物相关的部分中描述的任何试剂和特征，出于简洁的目的，本文不再详细重复。
当本公开的试剂盒包含T细胞激活剂时，在某些方面，所述T细胞激活剂是免疫检查点抑制剂。所关注的免疫检查点抑制剂包含但不限于T细胞共刺激受体的激动剂、T细胞抑制信号的拮抗剂等。在一些实施方案中，免疫检查点抑制剂选自：细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)抑制剂、程序性细胞死亡1(PD-1)抑制剂、程序性细胞死亡配体1(PD-L1)抑制剂、淋巴细胞激活基因3(LAG-3)抑制剂、T细胞免疫球蛋白结构域和粘蛋白结构域3(TIM-3)抑制剂、吲哚胺(2,3)-双加氧酶(IDO)抑制剂、OX40激动剂、糖皮质激素诱导的TNFR相关型蛋白(GITR)激动剂、CD137激动剂和CD40激动剂。当本公开的试剂盒包含T细胞激活剂时，在某些方面，所述T细胞激活剂是细胞因子。在一些实施方案中，当本公开的试剂盒包含T细胞激活剂时，所述T细胞激活剂是抑制性免疫受体的拮抗剂。在某些方面，本公开的试剂盒包含本文所描述的任何T细胞激活剂的组合(即，两种或超过两种)。
试剂盒的组分可以存在于不同容器中，或者多个组分可以存在于单一容器中。合适的容器包含单个管(例如，小瓶)、安瓿、板(例如，96孔板、384孔板等)的一个或多个孔等。
试剂盒中包含的说明书(例如，使用说明书(IFU))可以记录在合适的记录介质上。例如，说明书可以印刷在如纸或塑料等基材上。因此，说明书可以作为包装插页存在于试剂盒中、存在于试剂盒的容器或其组分的标签中(即与包装或次包装有关联)等。在其它实施方案中，说明书作为存在于合适的计算机可读存储介质(例如，便携式闪存驱动器、DVD、CD-ROM，软盘等)上的电子存储数据文件存在。在又其它实施方案中，试剂盒中不存在实际说明书，但是提供了用于从远程源，例如通过因特网，获得说明书的手段。该实施方案的一个实例是包括网址的试剂盒，可以在所述网址中查看说明书和/或可以从所述网址下载说明书。与说明书一样，用于获得说明书的手段记录在合适的基材上。
以下实施例以说明性方式而不是以限制性方式提供。
实验
实施例1–鉴定结合小鼠和人CD55的人类抗体
筛选人类抗体文库与人类和小鼠CD55的结合，重点是结合小鼠和人类CD55二者的抗体。发现两种亲本抗体结合小鼠和人CD55二者，并且发现五种亲本抗体仅结合人CD55。P5-1J是亲本Ab P5-1的亲和力成熟形式。P5-2-2A是通过突变亲本Ab P5-2获得与小鼠和人CD55的结合而衍生的。结果的汇总在下表2中提供。
表2–人类抗CD55抗体
Figure BDA0003256359430000521
*P5-1的亲和力成熟
**P5-2的突变以实现对小鼠CD55的识别
实施例2–人CD4 T细胞增殖的共刺激
基于它们与亚阈值抗-CD3抗体组合共刺激人CD4 T细胞增殖的能力，测试实施例1中描述的抗体的功能，其中所有抗体均与平板结合。结果示于图1中。小图A：抗体P5-1、P5-2、P5-3、P5-10B、P5-34、P5-37的共刺激活性。小图B：P5-1、P5-1J、P5-2-2A、P5-4的共刺激活性。实心符号表示仅识别人CD55的抗体，空心符号表示识别小鼠和人CD55两者的抗体。市售的抗CD55抗体JS11作为阳性对照包含在小图B中。每种抗体都在不同程度上共刺激CD4 T细胞增殖。P5-1、P5-1J、P5-2-2A和P5-4抗体在该测定中的不同生物学有效性并未通过它们的相对亲和力反映出来(参见图2，小图A)。
实施例3–小鼠和人CD55的相对结合亲和力
通过ELISA分析结合小鼠和人CD55的抗体(P5-1、P5-1J、P5-2-2A和P5-4)的它们对人CD55(图2，小图A)和小鼠CD55(图2，小图B)的相对亲和力。EC50值是使用PRISM通过拟合sigmoid非线性方程获得的。这些人抗体包含用于体内小鼠肿瘤模型的小鼠IgG2A Fc结构域，并通过HRP抗小鼠二抗进行检测。测试的抗体对人CD55具有非常相似的亲和力(约4ng/ml)，但对小鼠CD55具有不同的亲和力(约3-22ng/ml)。
实施例4–通过竞争ELISA对结合小鼠和人CD55的抗体进行表位比较
通过竞争ELISA进行小鼠+人CD55结合抗体的表位的比较。由于P5-1和P5-1J共享它们的表位，因此未检查P5-1。平板结合的CD55与未标记的P5-1J、P5-2-2A和P5-4抗体以1μg/ml温育。洗涤平板，然后用指定浓度的生物素化P5-1J温育。链霉亲和素-HRP用于检测结合的P5-1J。结果示于图3中。EC50值显示在图的下方。P5-2-2A和P5-4阻断了生物素化的P5-1J结合(EC50偏移20倍)，但未达到未标记的P5-1J阻断它的程度(EC50偏移100倍)。数据表明P5-1J、P5-2-2A和P5-4表位相同、重叠或接近足以引起空间干扰。
实施例5–通过竞争性细胞结合对结合小鼠和人CD55的抗体进行表位比较
通过竞争性细胞结合进行小鼠+人CD55结合抗体的表位的比较。结果示于图4中。将人外周血单核细胞(PBMC)与横坐标上指示的P5抗体浓度一起温育，洗涤，然后用生物素化的P5-1J标记，之后用链霉亲和素-PE标记，最后通过流式细胞术进行分析。平均荧光强度(MFI)是对与细胞结合的生物素化P5-1J的度量。与细胞结合比与纯化蛋白结合更具生物学相关性。P5-2-2A和P5-4都显著降低了P5-1J与CD55的结合，这次是在细胞上，并且与表明CD55上的P5-1J、P5-2-2A和P5-4抗体表位相同或接近的ELISA结果一致。
实施例6–抗CD55抗体对体内肿瘤生长的影响。
在第一项研究中，在第0天给小鼠皮下接种4e5 MCA 205肿瘤细胞。每周测量肿瘤大小2-3次。在第9、12和15天用200μg仓鼠IgG对照抗体或200μg抗PD1 i.p.与200μg小鼠IgG对照抗体或抗体P5-1J i.p.同时处理小鼠。结果示于图5中。单药抗PD-1治疗的小鼠有2/10的小鼠排斥其肿瘤。抗PD-1和P5-1J联合治疗组有5/10的小鼠排斥其肿瘤。显示了每个处理组的蜘蛛图，其中每条线代表一只小鼠。生存曲线显示在右下角。
在第二项研究中，在第0天给小鼠皮下接种4e5 MCA 205肿瘤细胞。每周测量肿瘤大小2-3次。在第12、14和16天用10μl盐水i.t.或30μg CpG i.t.单独或与200μg抗体P5-1Ji.p.同时处理小鼠。结果示于图6中。单一治疗剂CpG治疗的小鼠有1/5的小鼠排斥它们的肿瘤。CpG和P5-1J联合治疗组有2/5的小鼠排斥其肿瘤。显示了每个处理组的蜘蛛图，每条线代表一只小鼠。生存曲线显示在右下角。
在进一步的研究中，在第0天给小鼠皮下接种4e5 MCA 205肿瘤细胞。每周测量肿瘤大小2-3次。在第7、9和11天用200μg同种型对照抗体或250μg抗OX40 i.p.与200μg小鼠IgG对照抗体或抗体P5-1、P5-2-2a或P5-4 i.p.同时处理小鼠。结果示于图7中。没有同种型对照抗体处理的小鼠排斥它们的肿瘤。单一治疗剂抗OX40治疗的小鼠有0/5的小鼠排斥它们的肿瘤。P5-1和抗OX40联合治疗组有2/10的小鼠排斥它们的肿瘤。P5-2-2a和抗OX40联合治疗组有3/10的小鼠排斥它们的肿瘤。P5-4和抗OX40联合治疗组有6/10的小鼠排斥它们的肿瘤。显示了每个处理组的蜘蛛图，每条线代表一只小鼠。生存曲线显示在右下角。
在进一步的研究中，在第0天给小鼠皮下接种4e5 MCA 205肿瘤细胞。每周测量肿瘤大小2-3次。在第6、8和10天用200μg同种型对照抗体或200μg抗PD-1i.p.与200μg小鼠IgG对照抗体或抗体P5-1或P5-4 i.p.同时处理小鼠。结果示于图8中。没有同种型对照抗体处理的小鼠排斥它们的肿瘤。单治疗剂抗PD-1治疗的小鼠有2/10的小鼠排斥其肿瘤。P5-1和抗PD-1联合治疗组有3/10的小鼠排斥其肿瘤。P5-4和抗PD-1联合治疗组有4/10的小鼠排斥其肿瘤。显示了每个处理组(仅同种型的组除外)的蜘蛛图，每条线代表一只小鼠。生存曲线显示在右下角。
因此，以上仅说明本公开的原理。应当理解的是，本领域技术人员能够设计各种布置，尽管未在本文明确描述或示出，但所述各种布置体现了本发明的原理并且包括在本发明的精神和范围内。此外，本文列举的所有实施例和条件性语言主要旨在帮助读者理解本发明的原理和发明人为促进本领域的发展而贡献的概念，并且被解释为不限于这些具体列举的实例和条件。此外，本文叙述本发明的原理、方面和实施方案以及其具体实施例的所有陈述旨在涵盖其结构和功能等同物。另外，预期此类等同物包括当前已知的等同物以及未来开发的等同物，即，开发的不论结构如何执行相同功能的任何要素。因此，本发明的范围不旨在限于本文中示出和描述的示例性实施方案。相反，本发明的范围和精神由所附的权利要求书体现。
序列表
<110> 艾根奥克思公司
瑞恩·蒙勒
安德鲁·温伯格
尼古拉斯·莫里斯
科林·塔尔霍费尔
<120> 抗CD55抗体和相关组合物和方法
<130> AGNX-002WO
<150> US 62/808,146
<151> 2019-02-20
<160> 72
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 451
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成序列
<400> 1
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Ala Ile Ser Ser Ser Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Ala Asp Thr Ser Lys Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Arg Tyr Phe Tyr Gly Asp Phe Val Phe Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser
115 120 125
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Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
245 250 255
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
260 265 270
Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp
275 280 285
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr
290 295 300
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
305 310 315 320
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu
325 330 335
Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
340 345 350
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys
355 360 365
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
370 375 380
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
385 390 395 400
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
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Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser
420 425 430
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
435 440 445
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
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<220>
<223> 合成序列
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<220>
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Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ala
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Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
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Tyr Ser Ala Ser Ser Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
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Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
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Ala Ala Ile Ser Ser Ser Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
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Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met
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260 265 270
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val
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Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly
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Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile
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Gly Gln Gly
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Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
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Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ala
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Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
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Tyr Ser Ala Ser Ser Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
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Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Asp Tyr
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Ala Gly Trp Ile Asn Pro Tyr Asn Gly Tyr Thr Asp Tyr Ala Asp Ser
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Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
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Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly
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Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
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Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
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Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu
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<223> 合成序列
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1 5 10 15
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<213> 人工序列
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<223> 合成序列
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1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala
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Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
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Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
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Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
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Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
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Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
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Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
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Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
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Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
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Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
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Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
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Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
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Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
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Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
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Gly Lys
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<400> 61
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Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
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Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
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Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ala Val Ala
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165 170 175
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195 200 205
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Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr
325 330 335
Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu
340 345 350
Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys
355 360 365
Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
370 375 380
Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp
385 390 395 400
Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser
405 410 415
Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
420 425 430
Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
435 440 445
<210> 66
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成序列
<400> 66
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Ile His
1 5 10
<210> 67
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成序列
<400> 67
Ala Tyr Ile Tyr Ser Arg Gly Thr Val Thr Ser Tyr Ala Asp Ser
1 5 10 15
<210> 68
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成序列
<400> 68
Cys Ala Arg Gly Ala Gly Gly Val Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly
1 5 10 15
<210> 69
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成序列
<400> 69
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ala
20 25 30
Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ser Ala Ser Ser Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Arg Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Lys Ser Ser Leu Arg
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala
100 105 110
Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Ser Gln Leu Lys Ser Gly
115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala
130 135 140
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln
145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser
165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr
180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser
195 200 205
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210
<210> 70
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成序列
<400> 70
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ala Val Ala
1 5 10
<210> 71
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成序列
<400> 71
Ser Ala Ser Ser Leu Tyr Ser
1 5
<210> 72
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成序列
<400> 72
Ala Lys Ser Ser Leu Arg
1 5

Claims (103)

1.一种抗体，其特异性结合CD55并与包含以下的抗体竞争结合CD55：
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:2)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AISSSSGSTYYADS(SEQ ID NO:3)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CARERYFYGDFVFDYWGQG(SEQ ID NO:4)；以及
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:6)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:7)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYSSPL(SEQ ID NO:8)；
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSHHYIH(SEQ ID NO:10)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AISTGGGTTYYADS(SEQ ID NO:11)，
VH CDR3，其包含氨基酸序列CARERYFNGDFIYDYWGQG(SEQ ID NO:12)，
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:14)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:15)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYSTPL(SEQ ID NO:16)；
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:18)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AISSSSGSTYYADS(SEQ ID NO:19)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CAREVRIHGDFVLDYWGQG(SEQ ID NO:20)；以及
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:22)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:23)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYSSPL(SEQ ID NO:24)；
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:26)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AAISSSSGSTYYADS(SEQ ID NO:27)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CAREARFHGDFILDYWGQG(SEQ ID NO:28)；和
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:30)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:31)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYITPL(SEQ ID NO:32)；
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:34)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AAISSSSGSTYYADS(SEQ ID NO:35)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CAREDWHRYERRFYEGFDYWGQG(SEQ ID NO:36)，
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:38)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:39)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYSSPL(SEQ ID NO:40)；
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:42)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AAISSSSGSTYYADS(SEQ ID NO:43)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CAREDYYWGDFVFDYWGQG(SEQ ID NO:44)；和
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:46)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:47)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYSSPL(SEQ ID NO:48)；
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFTDYDIH(SEQ ID NO:50)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AGWINPYNGYTDYADS(SEQ ID NO:51)，
VH CDR3，其包含氨基酸序列CARPLSWALDYWGQG(SEQ ID NO:52)；和
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQDVNTAVA(SEQ ID NO:54)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASFLYS(SEQ ID NO:55)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列HYTTPP(SEQ ID NO:56)；
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:58)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AYIRPSGSKTSYADS(SEQ ID NO:59)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CARKVYARSGLDYWGQG(SEQ ID NO:60)；和
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:62)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:63)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列GESTPY(SEQ ID NO:64)；或
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYGIH(SEQ ID NO:66)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AYIYSRGTVTSYADS(SEQ ID NO:67)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CARGAGGVMDYWGQG(SEQ ID NO:68)；和
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:70)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:71)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列AKSSLR(SEQ ID NO:72)。
2.根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包含：
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:2)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AISSSSGSTYYADS(SEQ ID NO:3)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CARERYFYGDFVFDYWGQG(SEQ ID NO:4)；以及
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:6)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:7)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYSSPL(SEQ ID NO:8)；
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSHHYIH(SEQ ID NO:10)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AISTGGGTTYYADS(SEQ ID NO:11)，
VH CDR3，其包含氨基酸序列CARERYFNGDFIYDYWGQG(SEQ ID NO:12)，
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:14)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:15)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYSTPL(SEQ ID NO:16)；
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:18)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AISSSSGSTYYADS(SEQ ID NO:19)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CAREVRIHGDFVLDYWGQG(SEQ ID NO:20)；以及
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:22)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:23)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYSSPL(SEQ ID NO:24)；
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:26)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AAISSSSGSTYYADS(SEQ ID NO:27)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CAREARFHGDFILDYWGQG(SEQ ID NO:28)；和
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:30)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:31)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYITPL(SEQ ID NO:32)；
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:34)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AAISSSSGSTYYADS(SEQ ID NO:35)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CAREDWHRYERRFYEGFDYWGQG(SEQ ID NO:36)，
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:38)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:39)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYSSPL(SEQ ID NO:40)；
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:42)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AAISSSSGSTYYADS(SEQ ID NO:43)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CAREDYYWGDFVFDYWGQG(SEQ ID NO:44)；和
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:46)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:47)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列YYSSPL(SEQ ID NO:48)；
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFTDYDIH(SEQ ID NO:50)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AGWINPYNGYTDYADS(SEQ ID NO:51)，
VH CDR3，其包含氨基酸序列CARPLSWALDYWGQG(SEQ ID NO:52)；和
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQDVNTAVA(SEQ ID NO:54)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASFLYS(SEQ ID NO:55)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列HYTTPP(SEQ ID NO:56)；
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYYIH(SEQ ID NO:58)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AYIRPSGSKTSYADS(SEQ ID NO:59)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CARKVYARSGLDYWGQG(SEQ ID NO:60)；和
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:62)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:63)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列GESTPY(SEQ ID NO:64)；或
可变重链(VH)多肽，其包括
VH CDR1，其包含氨基酸序列GFTFSSYGIH(SEQ ID NO:66)，
VH CDR2，其包含氨基酸序列AYIYSRGTVTSYADS(SEQ ID NO:67)，和
VH CDR3，其包含氨基酸序列CARGAGGVMDYWGQG(SEQ ID NO:68)；和
可变轻链(VL)多肽，其包括
VL CDR1，其包含氨基酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:70)，
VL CDR2，其包含氨基酸序列SASSLYS(SEQ ID NO:71)，和
VL CDR3，其包含氨基酸序列AKSSLR(SEQ ID NO:72)。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的抗体，其中所述抗体包含：
可变重链(VH)多肽，其包含与SEQ ID NO:1中列出的氨基酸序列具有70％或更高同一性的氨基酸序列；和
可变轻链(VL)多肽，其包含与SEQ ID NO:5中列出的氨基酸序列具有70％或更高同一性的氨基酸序列。
4.根据权利要求1或权利要求2所述的抗体，其中所述抗体包含：
可变重链(VH)多肽，其包含与SEQ ID NO:9中列出的氨基酸序列具有70％或更高同一性的氨基酸序列；和
可变轻链(VL)多肽，其包含与SEQ ID NO:13中列出的氨基酸序列具有70％或更高同一性的氨基酸序列。
5.根据权利要求1或权利要求2所述的抗体，其中所述抗体包含：
可变重链(VH)多肽，其包含与SEQ ID NO:17中列出的氨基酸序列具有70％或更高同一性的氨基酸序列；和
可变轻链(VL)多肽，其包含与SEQ ID NO:21中列出的氨基酸序列具有70％或更高同一性的氨基酸序列。
6.根据权利要求1或权利要求2所述的抗体，其中所述抗体包含：
可变重链(VH)多肽，其包含与SEQ ID NO:25中列出的氨基酸序列具有70％或更高同一性的氨基酸序列；和
可变轻链(VL)多肽，其包含与SEQ ID NO:29中列出的氨基酸序列具有70％或更高同一性的氨基酸序列。
7.根据权利要求1或权利要求2所述的抗体，其中所述抗体包含：
可变重链(VH)多肽，其包含与SEQ ID NO:33中列出的氨基酸序列具有70％或更高同一性的氨基酸序列；和
可变轻链(VL)多肽，其包含与SEQ ID NO:37中列出的氨基酸序列具有70％或更高同一性的氨基酸序列。
8.根据权利要求1或权利要求2所述的抗体，其中所述抗体包含：
可变重链(VH)多肽，其包含与SEQ ID NO:41中列出的氨基酸序列具有70％或更高同一性的氨基酸序列；和
可变轻链(VL)多肽，其包含与SEQ ID NO:45中列出的氨基酸序列具有70％或更高同一性的氨基酸序列。
9.根据权利要求1或权利要求2所述的抗体，其中所述抗体包含：
可变重链(VH)多肽，其包含与SEQ ID NO:49中列出的氨基酸序列具有70％或更高同一性的氨基酸序列；和
可变轻链(VL)多肽，其包含与SEQ ID NO:53中列出的氨基酸序列具有70％或更高同一性的氨基酸序列。
10.根据权利要求1或权利要求2所述的抗体，其中所述抗体包含：
可变重链(VH)多肽，其包含与SEQ ID NO:57中列出的氨基酸序列具有70％或更高同一性的氨基酸序列；和
可变轻链(VL)多肽，其包含与SEQ ID NO:61中列出的氨基酸序列具有70％或更高同一性的氨基酸序列。
11.根据权利要求1或权利要求2所述的抗体，其中所述抗体包含：
可变重链(VH)多肽，其包含与SEQ ID NO:65中列出的氨基酸序列具有70％或更高同一性的氨基酸序列；和
可变轻链(VL)多肽，其包含与SEQ ID NO:69中列出的氨基酸序列具有70％或更高同一性的氨基酸序列。
12.根据权利要求1-11中任一项所述的抗体，其中所述抗体是人源化抗体。
13.根据权利要求1-12中任一项所述的抗体，其中所述抗体选自：IgG、Fv、单链抗体、scFv、Fab、F(ab')2或Fab'。
14.根据权利要求1-12中任一项所述的抗体，其中所述抗体是IgG。
15.根据权利要求14所述的抗体，其中所述抗体是IgG1。
16.根据权利要求1-12中任一项所述的抗体，其中所述抗体是Fab。
17.根据权利要求1-12中任一项所述的抗体，其中所述抗体是单链抗体。
18.根据权利要求17所述的抗体，其中所述抗体是scFv。
19.根据权利要求1-18中任一项所述的抗体，其中所述抗体是包含特异性结合CD55的第一抗原结合结构域的双特异性抗体，并且其中所述第一抗原结合结构域包含权利要求1-11中任一项中限定的VH多肽-VL多肽对。
20.根据权利要求19所述的抗体，其中所述双特异性抗体包含特异性结合CD55的第二抗原结合结构域。
21.根据权利要求19所述的抗体，其中所述双特异性抗体包含特异性结合除CD55以外的抗原的第二抗原结合结构域。
22.根据权利要求21所述的抗体，其中所述除CD55以外的抗原是T细胞表面抗原。
23.一种核酸，其编码权利要求1-22中任一项所述的抗体的可变重链(VH)多肽、可变轻链(VL)多肽或两者。
24.根据权利要求23所述的核酸，其中所述抗体是单链抗体，并且其中所述核酸编码所述单链抗体。
25.根据权利要求24所述的核酸，其中所述单链抗体是scFv。
26.一种表达载体，其包含权利要求23-25中任一项所述的核酸。
27.一种细胞，其包含权利要求23-25中任一项所述的核酸或权利要求26所述的表达载体。
28.根据权利要求27所述的细胞，其中所述核酸编码所述抗体的VH多肽和所述抗体的VL多肽。
29.根据权利要求28所述的细胞，其中所述抗体是单链抗体，并且其中所述核酸编码所述单链抗体。
30.根据权利要求29所述的细胞，其中所述单链抗体是scFv。
31.一种细胞，其包含：
第一核酸，其编码权利要求1-22中任一项所述的抗体的可变重链(VH)多肽；和
第二核酸，其编码所述抗体的可变轻链(VL)多肽。
32.根据权利要求31所述的细胞，其包含：
包含所述第一核酸的第一表达载体；和
包含所述第二核酸的第二表达载体。
33.一种制备权利要求1-22中任一项所述的抗体的方法，包括在适合细胞表达所述抗体的条件下培养权利要求27-32中任一项所述的细胞，其中产生了所述抗体。
34.一种缀合物，其包含：
权利要求1-22中任一项所述的抗体；和
与所述抗体缀合的试剂。
35.根据权利要求34所述的缀合物，其中所述试剂选自半衰期延长部分、标记剂和治疗剂。
36.一种融合蛋白，其包括：
权利要求1-22中任一项所述的抗体的可变重链(VH)多肽、可变轻链(VL)多肽或两者；其融合至
异源氨基酸序列。
37.一种药物组合物，其包括：
权利要求1-22中任一项所述的抗体；和
药学上可接受的载体。
38.一种药物组合物，其包括：
权利要求34或35所述的缀合物；和
药学上可接受的载体。
39.一种药物组合物，其包括：
权利要求36所述的融合蛋白；和
药学上可接受的载体。
40.根据权利要求37-39中任一项所述的药物组合物，进一步包括T细胞激活剂。
41.根据权利要求40所述的药物组合物，其中所述T细胞激活剂选自：免疫检查点抑制剂、细胞因子和抑制性免疫受体的拮抗剂。
42.根据权利要求40所述的药物组合物，其中所述T细胞激活剂是免疫检查点抑制剂。
43.根据权利要求42所述的药物组合物，其中所述免疫检查点抑制剂是T细胞共刺激受体的激动剂。
44.根据权利要求42所述的药物组合物，其中所述免疫检查点抑制剂是T细胞抑制信号的拮抗剂。
45.根据权利要求42所述的药物组合物，其中所述免疫检查点抑制剂选自由以下组成的组：细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)抑制剂、程序性细胞死亡1(PD-1)抑制剂、程序性细胞死亡配体1(PD-L1)抑制剂、淋巴细胞激活基因3(LAG-3)抑制剂、T细胞免疫球蛋白结构域和粘蛋白结构域3(TIM-3)抑制剂、吲哚胺(2,3)-双加氧酶(IDO)抑制剂、OX40激动剂、糖皮质激素诱导的TNFR相关型蛋白(GITR)激动剂、CD137激动剂和CD40激动剂。
46.根据权利要求40所述的药物组合物，其中所述T细胞激活剂是细胞因子。
47.根据权利要求40所述的药物组合物，其中所述T细胞激活剂是抑制性免疫受体的拮抗剂。
48.根据权利要求37-47中任一项所述的药物组合物，进一步包括先天免疫系统刺激剂。
49.根据权利要求48所述的药物组合物，其中所述先天免疫系统刺激剂是与Toll样受体(TLR)结合的试剂。
50.根据权利要求49所述的药物组合物，其中所述试剂包括未甲基化的CpG二核苷酸。
51.一种试剂盒，其包括：
权利要求37-50中任一项所述的药物组合物；以及
用于将所述药物组合物施用至有需要的个体的说明书。
52.根据权利要求51所述的试剂盒，其中所述药物组合物以一个或多个单位剂量存在。
53.根据权利要求51或52所述的试剂盒，其进一步包括T细胞激活剂。
54.根据权利要求53所述的试剂盒，其中所述T细胞激活剂选自：免疫检查点抑制剂、细胞因子和抑制性免疫受体的拮抗剂。
55.根据权利要求53所述的试剂盒，其中所述T细胞激活剂是免疫检查点抑制剂。
56.根据权利要求55所述的试剂盒，其中所述免疫检查点抑制剂是T细胞共刺激受体的激动剂。
57.根据权利要求55所述的试剂盒，其中所述免疫检查点抑制剂是T细胞抑制信号的拮抗剂。
58.根据权利要求55所述的试剂盒，其中所述免疫检查点抑制剂选自由以下组成的组：细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)抑制剂、程序性细胞死亡1(PD-1)抑制剂、程序性细胞死亡配体1(PD-L1)抑制剂、淋巴细胞激活基因3(LAG-3)抑制剂、T细胞免疫球蛋白结构域和粘蛋白结构域3(TIM-3)抑制剂、吲哚胺(2,3)-双加氧酶(IDO)抑制剂、OX40激动剂、糖皮质激素诱导的TNFR相关型蛋白(GITR)激动剂、CD137激动剂和CD40激动剂。
59.根据权利要求53所述的试剂盒，其中所述T细胞激活剂是细胞因子。
60.根据权利要求53所述的试剂盒，其中所述T细胞激活剂是抑制性免疫受体的拮抗剂。
61.根据权利要求51-60中任一项所述的试剂盒，进一步包括先天免疫系统刺激剂。
62.根据权利要求61所述的试剂盒，其中所述先天免疫系统刺激剂是与Toll样受体(TLR)结合的试剂。
63.根据权利要求62所述的试剂盒，其中所述试剂包括未甲基化的CpG二核苷酸。
64.根据权利要求51-60中任一项所述的试剂盒，其中所述有需要的个体患有细胞增殖性病症。
65.根据权利要求64所述的试剂盒，包括用于施用所述药物组合物以增强对所述细胞增殖性病症的异常增殖细胞的T细胞应答的说明书。
66.根据权利要求51-65中任一项所述的试剂盒，其包括用于向患有细胞增殖性病症的个体施用所述药物组合物的说明书，其中未怀疑所述细胞增殖性病症的异常增殖细胞表现出CD55过表达。
67.一种治疗细胞增殖性病症的方法，其包括：
向患有细胞增殖性病症的个体施用治疗有效量的权利要求1-22中任一项所述的抗体，
其中在所述施用时，未怀疑所述细胞增殖性病症的异常增殖细胞表现出CD55过表达。
68.根据权利要求67所述的方法，其中在所述施用时，已经确定所述细胞增殖性病症的异常增殖细胞不过表达CD55。
69.根据权利要求68所述的方法，其包括确定所述细胞增殖性病症的异常增殖细胞不过表达CD55。
70.根据权利要求67-69中任一项所述的方法，其中施用了所述抗体的所述个体正在接受抗体疗法。
71.根据权利要求70所述的方法，其中向所述个体施用所述抗体疗法以通过诱导抗体依赖性细胞毒性(ADCC)来治疗所述细胞增殖性病症，并且其中向所述个体施用所述抗体以增强所述抗体疗法的ADCC。
72.一种治疗细胞增殖性病症的方法，其包括：
向患有细胞增殖性病症的个体施用治疗有效量的权利要求1-22中任一项所述的抗体，
其中向所述个体施用所述抗体以增强对所述细胞增殖性病症的异常增殖细胞的T细胞应答。
73.根据权利要求72所述的方法，其中施用了所述抗体的所述个体正在接受抗体疗法。
74.根据权利要求73所述的方法，其中向所述个体施用所述抗体疗法以通过诱导抗体依赖性细胞毒性(ADCC)来治疗所述细胞增殖性病症，并且其中向所述个体施用所述抗体以增强所述抗体疗法的ADCC。
75.根据权利要求67-74中任一项所述的方法，其进一步包括向所述个体施用T细胞激活剂。
76.根据权利要求75所述的方法，其中所述T细胞激活剂是免疫检查点抑制剂。
77.根据权利要求76所述的方法，其中所述免疫检查点抑制剂是T细胞共刺激受体的激动剂。
78.根据权利要求76所述的方法，其中所述免疫检查点抑制剂是T细胞抑制信号的拮抗剂。
79.根据权利要求76所述的方法，其中所述免疫检查点抑制剂选自由以下组成的组：细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)抑制剂、程序性细胞死亡1(PD-1)抑制剂、程序性细胞死亡配体1(PD-L1)抑制剂、淋巴细胞激活基因3(LAG-3)抑制剂、T细胞免疫球蛋白结构域和粘蛋白结构域3(TIM-3)抑制剂、吲哚胺(2,3)-双加氧酶(IDO)抑制剂、OX40激动剂、糖皮质激素诱导的TNFR相关型蛋白(GITR)激动剂、CD137激动剂和CD40激动剂。
80.根据权利要求75所述的方法，其中所述T细胞激活剂是细胞因子。
81.根据权利要求75所述的方法，其中所述T细胞激活剂是抑制性免疫受体的拮抗剂。
82.根据权利要求75-81中任一项所述的方法，其中同时施用所述抗体和所述T细胞激活剂。
83.根据权利要求75-81中任一项所述的方法，其中顺序施用所述抗体和所述T细胞激活剂。
84.根据权利要求67-83中任一项所述的方法，其进一步包括向所述个体施用先天免疫系统刺激剂。
85.根据权利要求84所述的方法，其中所述先天免疫系统刺激剂是与Toll样受体(TLR)结合的试剂。
86.根据权利要求85所述的方法，其中所述试剂包括未甲基化的CpG二核苷酸。
87.根据权利要求67-86中任一项所述的方法，其中所述细胞增殖性病症是癌症。
88.一种治疗细胞增殖性病症的方法，其包括：
向患有细胞增殖性病症的个体施用：
治疗有效量的权利要求1-22中任一项所述的抗体；和
治疗有效量的T细胞激活剂。
89.根据权利要求88所述的方法，其中在所述施用时，未怀疑所述细胞增殖性病症的异常增殖细胞表现出CD55过表达。
90.根据权利要求89所述的方法，其中在所述施用时，已经确定所述细胞增殖性病症的异常增殖细胞不过表达CD55。
91.根据权利要求90所述的方法，其包括确定所述细胞增殖性病症的异常增殖细胞不过表达CD55。
92.根据权利要求88-91中任一项所述的方法，其中施用了所述抗体的所述个体正在接受抗体疗法。
93.根据权利要求92所述的方法，其中向所述个体施用所述抗体疗法以通过诱导抗体依赖性细胞毒性(ADCC)来治疗所述细胞增殖性病症，并且其中向所述个体施用所述抗体以增强所述抗体疗法的ADCC。
94.根据权利要求88-93中任一项所述的方法，其中向所述个体施用所述抗体以增强对所述细胞增殖性病症的异常增殖细胞的T细胞应答。
95.根据权利要求88-94中任一项所述的方法，其中所述T细胞激活剂是免疫检查点抑制剂。
96.根据权利要求95所述的方法，其中所述免疫检查点抑制剂是T细胞共刺激受体的激动剂。
97.根据权利要求95所述的方法，其中所述免疫检查点抑制剂是T细胞抑制信号的拮抗剂。
98.根据权利要求95所述的方法，其中所述免疫检查点抑制剂选自由以下组成的组：细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)抑制剂、程序性细胞死亡1(PD-1)抑制剂、程序性细胞死亡配体1(PD-L1)抑制剂、淋巴细胞激活基因3(LAG-3)抑制剂、T细胞免疫球蛋白结构域和粘蛋白结构域3(TIM-3)抑制剂、吲哚胺(2,3)-双加氧酶(IDO)抑制剂、OX40激动剂、糖皮质激素诱导的TNFR相关型蛋白(GITR)激动剂、CD137激动剂和CD40激动剂。
99.根据权利要求88-94中任一项所述的方法，其中所述T细胞激活剂是细胞因子。
100.根据权利要求88-94中任一项所述的方法，其中所述T细胞激活剂是抑制性免疫受体的拮抗剂。
101.根据权利要求88-100中任一项所述的方法，其中同时施用所述抗体和所述T细胞激活剂。
102.根据权利要求88-100中任一项所述的方法，其中顺序施用所述抗体和所述T细胞激活剂。
103.根据权利要求88-102中任一项所述的方法，其中所述细胞增殖性病症是癌症。
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