CN113274160A - 一种鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法及建立系统 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法及建立系统，其中，所述鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法包括以下步骤：麻醉鼠类动物，将鼠类动物的四肢扩张并禁锢，确定鼠类动物的椎间盘位置，调整鼠类动物姿势至椎间盘位置朝向手术位，对椎间盘位置进行手术操作及穿刺操作，在手术操作及穿刺操作完成后，验证预设时间内鼠类动物的椎间盘退变情况，当鼠类动物的椎间盘的信号出现明显降低时，则穿刺操作造成的椎间盘退变，鼠类动物模型造模成功。以实现在穿刺时避开了对腹部脏器以及肌肉的存在路线，减少腹部脏器造成干扰，且避免了损伤肌肉的情况。
Description
技术领域
本发明涉及医学实验技术领域，特别涉及一种鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法及建立系统。
背景技术
目前的研究构建动物椎间盘退变模型的动物从啮齿类的小鼠、大鼠到兔子、狗、山羊、绵羊到灵长类动物均有涉及，但考虑到经济问题，通常选择了大鼠进行研究，以上动物的研究模型构建一般可分为三类:自发型、机械型、结构型，其中，结构型模型构建包括：空针穿刺模型。目前对空针穿刺的腰椎间盘退变模型入路有腹膜前入路、经皮后外侧入路，然而，腹膜前入路以及经皮后外侧入路的空针穿刺模型在手术时容易对腹部脏器造成干扰，且容易损伤肌肉。
发明内容
本发明的主要目的是提供一种鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法及建立系统，旨在解决了腹膜前入路以及经皮后外侧入路的空针穿刺模型在手术时容易对腹部脏器造成干扰，且容易损伤肌肉的技术问题。
为实现上述目的，本发明提供一种鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法，所述鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法包括以下步骤：
麻醉鼠类动物；
将鼠类动物的四肢扩张并禁锢；
确定鼠类动物的椎间盘位置；
调整鼠类动物姿势至椎间盘位置朝向手术位；
对椎间盘位置进行手术操作及穿刺操作；
在手术操作及穿刺操作完成后，验证预设时间内鼠类动物的椎间盘退变情况；
当鼠类动物的椎间盘的信号出现明显降低时，则穿刺操作造成的椎间盘退变，鼠类动物模型造模成功。
优选地，所述对椎间盘位置进行手术操作及穿刺操作的步骤包括：
调整鼠类动物的姿势为右侧卧位；
取髂嵴、最下肋中点处；
紧贴后侧竖脊肌外缘处经皮肤开纵切口；
依次分离表皮、真皮、肌筋膜、腹外斜肌、腹内斜肌、腹横机至腹膜外脂肪层；
将腹膜外脂肪拉向腹侧，则呈现下方腰大肌与后方竖脊肌；
在触及邻近的上下腰椎横突处，抓取镊子与剪刀分离腰大肌，其中，露出的白色区域即为椎间盘；
预设空针穿刺组区域，并在所述空针穿刺组区域进行穿刺操作，其中，所述穿刺操作包括将18G空针头的穿刺针全层贯穿椎间盘并旋转360°两次后，停留30s后拔出穿刺针；
逐层缝合切口并消毒。
优选地，所述在触及邻近的上下腰椎横突处，抓取镊子与剪刀分离腰大肌，其中，露出的白色区域即为椎间盘的步骤之后，所述鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法还包括：
预设假手术组区域，并将所述假手术组区域逐层缝合切口并消毒。
优选地，所述对椎间盘位置进行手术操作及穿刺操作的步骤包括：
调整鼠类动物的姿势为平卧位；
采用X线放射机定位鼠类动物的7/8尾椎间盘；
将20G空针头的穿刺针腹背贯通穿刺7/8尾椎间盘旋转360°并停留30s后拔出穿刺针；
消毒扎针口。
优选地，所述验证预设时间内鼠类动物的椎间盘情况的步骤，包括：
当穿刺实验鼠并继续培育预设时间之后，麻醉鼠类动物；
将鼠类动物的四肢扩张并禁锢；
调整鼠类动物的姿势为仰卧位；
影像采集矢状位和轴状位的磁共振成像；
根据磁共振成像确定椎间盘的退变情况。
优选地，所述影像采集矢状位和轴状位的磁共振成像的步骤之后，所述鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法还包括：
用过量苯巴比妥钠盐麻醉处死鼠类动物，其中，过量苯巴比妥钠盐为超过5.9g的苯巴比妥钠盐；
解剖鼠类动物并获取假手术组和空针穿刺组的椎旁肌肉以及水平节段的椎间盘；
将椎旁肌肉与椎间盘在4％多聚甲醛中固定24小时，之后在15％乙二胺四乙酸(EDTA)中脱钙15天；
将脱钙后的椎旁肌肉与椎间盘经脱水以及透明后，浸入熔化的石蜡中进行包埋；
对包埋后的椎旁肌肉与椎间盘进行切片，并切片的厚度不超过5μm；
染色切片后的椎旁肌肉与椎间盘，其中，切片后的椎旁肌肉与椎间盘采用苏木精和伊红(HE)染色，而切片后的椎间盘还采用阿尔新蓝染色；
观察染色后的椎旁肌肉的肌纤维横截面积和间隙的情况与椎间盘的组织学结构、蛋白多糖含量的变化情况；
根据染色后的椎旁肌肉的肌纤维横截面积和间隙的情况与椎间盘的组织学结构、蛋白多糖含量的变化情况推测空针穿刺造成的椎间盘退变，鼠类动物模型造模成功。
优选地，所述观察染色后的椎旁肌肉的肌纤维横截面积和间隙的情况与椎间盘的组织学结构、蛋白多糖含量的变化情况的步骤包括：
当染色后的切片的椎旁肌肉出现红色与蓝紫色时，观察红色区域与蓝紫色区域；
根据切片的椎旁肌肉染色后呈现的红色区域与蓝紫色区域确定切片的椎旁肌肉的肌纤维横截面积和间隙的情况。
优选地，所述观察染色后的椎旁肌肉的肌纤维横截面积和间隙的情况与椎间盘的组织学结构、蛋白多糖含量的变化情况的步骤包括：
当染色后的切片的椎间盘出现蓝色，观察蓝色区域；
根据切片的椎间盘染色后呈现的蓝色区域确定切片的椎间盘的组织学结构、蛋白多糖含量的变化情况。
为实现上述目的，本发明还提供一种一种鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立系统，所述鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立系统包括：
麻醉模块，麻醉鼠类动物；
禁锢模块，将鼠类动物的四肢扩张并禁锢；
确定位置模块，确定鼠类动物的椎间盘位置；
调整姿势模块，调整鼠类动物姿势至椎间盘位置朝向手术位；
操作模块，对椎间盘位置进行手术操作及穿刺操作；
验证模块，在手术操作及穿刺操作完成后，验证预设时间内鼠类动物的椎间盘退变情况；
结果模块，当鼠类动物的椎间盘的信号出现明显降低时，则穿刺操作造成的椎间盘退变，鼠类动物模型造模成功。
本发明提出的鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法及其系统，所述鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法包括以下步骤：麻醉鼠类动物，将鼠类动物的四肢扩张并禁锢，确定鼠类动物的椎间盘位置，调整鼠类动物姿势至椎间盘位置朝向手术位，对椎间盘位置进行手术操作及穿刺操作，在手术操作及穿刺操作完成后，验证预设时间内鼠类动物的椎间盘退变情况，当鼠类动物的椎间盘的信号出现明显降低时，则穿刺操作造成的椎间盘退变，鼠类动物模型造模成功。本发明技术方案在穿刺时避开了对腹部脏器以及肌肉的存在路线，减少腹部脏器造成干扰，且避免了损伤肌肉的情况。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或示例性中的技术方案，下面将对实施例或示例性描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以按照这些附图示出的获得其他的附图。
图1为本发明鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法的流程示意图；
图2为本发明鼠类动物椎间盘穿刺退变模型中的磁共振成像；
图3为本发明鼠类动物椎间盘穿刺退变模型中的苏木精和伊红(HE)染色结果；
图4为本发明鼠类动物椎间盘穿刺退变模型中的阿尔新蓝染色结果；
图5为本发明鼠类动物椎间盘穿刺退变模型中的手术操作的实操图；
图6为本发明鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立系统的结构示意图。
本发明目的的实现、功能特点及优点将结合实施例，参照附图做进一步说明。
具体实施方式
应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例一
请参阅图1-5，本申请实施例公开一种鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法。如图1-5所示，本申请实施例的方法包括
步骤S100，麻醉鼠类动物；
步骤S110，将鼠类动物的四肢扩张并禁锢；由四个夹子分别抓住鼠类动物的四只爪子，并将四只爪子向四向扩张。
步骤S120，确定鼠类动物的椎间盘位置；具体采用X线放射机定位鼠类动物的尾椎间盘，或者通过手术剥离开肌肉以及表皮组织进而准确的找到椎间盘位置。
步骤S130，调整鼠类动物姿势至椎间盘位置朝向手术位；手术位为正对操作者的位置，具体地，根据鼠类动物的姿势调整椎间盘朝向手术位的位置，有鼠类动物的姿势为右侧卧位，亦有鼠类动物的姿势为平卧位。
步骤S140，对椎间盘位置进行手术操作及穿刺操作；
所述对椎间盘位置进行手术操作及穿刺操作的步骤包括：调整鼠类动物的姿势为右侧卧位；取髂嵴、最下肋中点处；紧贴后侧竖脊肌外缘处经皮肤开纵切口；依次分离表皮、真皮、肌筋膜、腹外斜肌、腹内斜肌、腹横机至腹膜外脂肪层；将腹膜外脂肪拉向腹侧，则呈现下方腰大肌与后方竖脊肌；在触及邻近的上下腰椎横突处，抓取镊子与剪刀分离腰大肌，其中，露出的白色区域即为椎间盘；预设空针穿刺组区域，并在所述空针穿刺组区域进行穿刺操作，其中，所述穿刺操作包括将18G空针头的穿刺针全层贯穿椎间盘并旋转360°两次后，停留30s后拔出穿刺针；逐层缝合切口并消毒。需要说明的是，该操作步骤能够有效的避开腹部脏器位置以及肌肉，使得后续空针穿刺操作中能够操作更加准确。所述在触及邻近的上下腰椎横突处，抓取镊子与剪刀分离腰大肌，其中，露出的白色区域即为椎间盘的步骤之后，所述鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法还包括：预设假手术组区域，并将所述假手术组区域逐层缝合切口并消毒。通过对空针穿刺组预以及假手术组二者部分的设置，方便于后续验证时，以假手术组为正常状态下的参照物，并与空针穿刺组进行对比，进而判定空针穿刺组是否进行退化。
所述对椎间盘位置进行手术操作及穿刺操作的步骤还包括：调整鼠类动物的姿势为平卧位；采用X线放射机定位鼠类动物的7/8尾椎间盘；将20G空针头的穿刺针腹背贯通穿刺7/8尾椎间盘旋转360°并停留30s后拔出穿刺针；消毒扎针口。需要说明的是，该步骤较为方便与快速完成对鼠类动物的穿刺操作，但该步骤对实验者的技术要求较高，稍微一点偏差就会对腹部脏器以及肌肉造成影响。
步骤S150，在手术操作及穿刺操作完成后，验证预设时间内鼠类动物的椎间盘退变情况；
所述验证预设时间内鼠类动物的椎间盘情况的步骤，包括：当穿刺实验鼠并继续培育预设时间之后，麻醉鼠类动物；将鼠类动物的四肢扩张并禁锢；调整鼠类动物的姿势为仰卧位；影像采集矢状位和轴状位的磁共振成像；根据磁共振成像确定椎间盘的退变情况。在本实施例中，预设时间为60天，在鼠类动物穿刺操作的60天后在对鼠类动物进行MRI检测，通过MRI检测中获取的影像采集矢状位和轴状位的磁共振成像确定椎间盘的退变情况。
具体地，所述影像采集矢状位和轴状位的磁共振成像的步骤之后，所述鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法还包括：用过量苯巴比妥钠盐麻醉处死鼠类动物，其中，过量苯巴比妥钠盐为超过5.9g的苯巴比妥钠盐；解剖鼠类动物并获取假手术组和空针穿刺组的椎旁肌肉以及水平节段的椎间盘；将椎旁肌肉与椎间盘在4％多聚甲醛中固定24小时，之后在15％乙二胺四乙酸(EDTA)中脱钙15天；将脱钙后的椎旁肌肉与椎间盘经脱水以及透明后，浸入熔化的石蜡中进行包埋；对包埋后的椎旁肌肉与椎间盘进行切片，并切片的厚度不超过5μm；染色切片后的椎旁肌肉与椎间盘，其中，切片后的椎旁肌肉与椎间盘采用苏木精和伊红(HE)染色，而切片后的椎间盘还采用阿尔新蓝染色；观察染色后的椎旁肌肉的肌纤维横截面积和间隙的情况与椎间盘的组织学结构、蛋白多糖含量的变化情况；根据染色后的椎旁肌肉的肌纤维横截面积和间隙的情况与椎间盘的组织学结构、蛋白多糖含量的变化情况推测空针穿刺造成的椎间盘退变，鼠类动物模型造模成功。
而所述观察染色后的椎旁肌肉的肌纤维横截面积和间隙的情况与椎间盘的组织学结构、蛋白多糖含量的变化情况的步骤包括：当染色后的切片的椎旁肌肉出现红色与蓝紫色时，观察红色区域与蓝紫色区域；根据切片的椎旁肌肉染色后呈现的红色区域与蓝紫色区域确定切片的椎旁肌肉的肌纤维横截面积和间隙的情况。
所述观察染色后的椎旁肌肉的肌纤维横截面积和间隙的情况与椎间盘的组织学结构、蛋白多糖含量的变化情况的步骤包括：当染色后的切片的椎间盘出现蓝色，观察蓝色区域；根据切片的椎间盘染色后呈现的蓝色区域确定切片的椎间盘的组织学结构、蛋白多糖含量的变化情况。
步骤S160，当鼠类动物的椎间盘的信号出现明显降低时，则穿刺操作造成的椎间盘退变，鼠类动物模型造模成功。
本实施例通过以下技术方案实现，其中技术方案包括如下步骤：麻醉鼠类动物，将鼠类动物的四肢扩张并禁锢，确定鼠类动物的椎间盘位置，调整鼠类动物姿势至椎间盘位置朝向手术位，对椎间盘位置进行手术操作及穿刺操作，在手术操作及穿刺操作完成后，验证预设时间内鼠类动物的椎间盘退变情况，当鼠类动物的椎间盘的信号出现明显降低时，则穿刺操作造成的椎间盘退变，鼠类动物模型造模成功。本发明技术方案在穿刺时避开了对腹部脏器以及肌肉的存在路线，减少腹部脏器造成干扰，且避免了损伤肌肉的情况。
实施例二
请参阅图6，如图6所示，本申请实施例公开一种鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立系统的结构示意图。本申请实施例的建立系统包括：
麻醉模块10，麻醉鼠类动物；
禁锢模块20，将鼠类动物的四肢扩张并禁锢；由四个夹子分别抓住鼠类动物的四只爪子，并将四只爪子向四向扩张。
确定位置模块30，确定鼠类动物的椎间盘位置；，或者通过手术剥离开肌肉以及表皮组织进而准确的找到椎间盘位置。
调整姿势模块40，调整鼠类动物姿势至椎间盘位置朝向手术位；手术位为正对操作者的位置，具体地，根据鼠类动物的姿势调整椎间盘朝向手术位的位置，有鼠类动物的姿势为右侧卧位，亦有鼠类动物的姿势为平卧位。
操作模块50，对椎间盘位置进行手术操作及穿刺操作；
所述对椎间盘位置进行手术操作及穿刺操作的步骤包括：调整鼠类动物的姿势为右侧卧位；取髂嵴、最下肋中点处；紧贴后侧竖脊肌外缘处经皮肤开纵切口；依次分离表皮、真皮、肌筋膜、腹外斜肌、腹内斜肌、腹横机至腹膜外脂肪层；将腹膜外脂肪拉向腹侧，则呈现下方腰大肌与后方竖脊肌；在触及邻近的上下腰椎横突处，抓取镊子与剪刀分离腰大肌，其中，露出的白色区域即为椎间盘；预设空针穿刺组区域，并在所述空针穿刺组区域进行穿刺操作，其中，所述穿刺操作包括将18G空针头的穿刺针全层贯穿椎间盘并旋转360°两次后，停留30s后拔出穿刺针；逐层缝合切口并消毒。需要说明的是，该操作步骤能够有效的避开腹部脏器位置以及肌肉，使得后续空针穿刺操作中能够操作更加准确。所述在触及邻近的上下腰椎横突处，抓取镊子与剪刀分离腰大肌，其中，露出的白色区域即为椎间盘的步骤之后，所述鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法还包括：预设假手术组区域，并将所述假手术组区域逐层缝合切口并消毒。通过对空针穿刺组预以及假手术组二者部分的设置，方便于后续验证时，以假手术组为正常状态下的参照物，并与空针穿刺组进行对比，进而判定空针穿刺组是否进行退化。
所述对椎间盘位置进行手术操作及穿刺操作的步骤还包括：调整鼠类动物的姿势为平卧位；采用X线放射机定位鼠类动物的7/8尾椎间盘；将20G空针头的穿刺针腹背贯通穿刺7/8尾椎间盘旋转360°并停留30s后拔出穿刺针；消毒扎针口。需要说明的是，该步骤较为方便与快速完成对鼠类动物的穿刺操作，但该步骤对实验者的技术要求较高，稍微一点偏差就会对腹部脏器以及肌肉造成影响。
验证模块60，在手术操作及穿刺操作完成后，验证预设时间内鼠类动物的椎间盘退变情况；
所述验证预设时间内鼠类动物的椎间盘情况的步骤，包括：当穿刺实验鼠并继续培育预设时间之后，麻醉鼠类动物；将鼠类动物的四肢扩张并禁锢；调整鼠类动物的姿势为仰卧位；影像采集矢状位和轴状位的磁共振成像；根据磁共振成像确定椎间盘的退变情况。在本实施例中，预设时间为60天，在鼠类动物穿刺操作的60天后在对鼠类动物进行MRI检测，通过MRI检测中获取的影像采集矢状位和轴状位的磁共振成像确定椎间盘的退变情况。
具体地，所述影像采集矢状位和轴状位的磁共振成像的步骤之后，所述鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法还包括：用过量苯巴比妥钠盐麻醉处死鼠类动物，其中，过量苯巴比妥钠盐为超过5.9g的苯巴比妥钠盐；解剖鼠类动物并获取假手术组和空针穿刺组的椎旁肌肉以及水平节段的椎间盘；将椎旁肌肉与椎间盘在4％多聚甲醛中固定24小时，之后在15％乙二胺四乙酸(EDTA)中脱钙15天；将脱钙后的椎旁肌肉与椎间盘经脱水以及透明后，浸入熔化的石蜡中进行包埋；对包埋后的椎旁肌肉与椎间盘进行切片，并切片的厚度不超过5μm；染色切片后的椎旁肌肉与椎间盘，其中，切片后的椎旁肌肉与椎间盘采用苏木精和伊红(HE)染色，而切片后的椎间盘还采用阿尔新蓝染色；观察染色后的椎旁肌肉的肌纤维横截面积和间隙的情况与椎间盘的组织学结构、蛋白多糖含量的变化情况；根据染色后的椎旁肌肉的肌纤维横截面积和间隙的情况与椎间盘的组织学结构、蛋白多糖含量的变化情况推测空针穿刺造成的椎间盘退变，鼠类动物模型造模成功。
而所述观察染色后的椎旁肌肉的肌纤维横截面积和间隙的情况与椎间盘的组织学结构、蛋白多糖含量的变化情况的步骤包括：当染色后的切片的椎旁肌肉出现红色与蓝紫色时，观察红色区域与蓝紫色区域；根据切片的椎旁肌肉染色后呈现的红色区域与蓝紫色区域确定切片的椎旁肌肉的肌纤维横截面积和间隙的情况。
所述观察染色后的椎旁肌肉的肌纤维横截面积和间隙的情况与椎间盘的组织学结构、蛋白多糖含量的变化情况的步骤包括：当染色后的切片的椎间盘出现蓝色，观察蓝色区域；根据切片的椎间盘染色后呈现的蓝色区域确定切片的椎间盘的组织学结构、蛋白多糖含量的变化情况。
结果模块70，当鼠类动物的椎间盘的信号出现明显降低时，则穿刺操作造成的椎间盘退变，鼠类动物模型造模成功。
本实施例鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立系统通过以下技术方案实现，其中技术方案包括如下：麻醉模块，麻醉鼠类动物；禁锢模块，将鼠类动物的四肢扩张并禁锢；确定位置模块，确定鼠类动物的椎间盘位置；调整姿势模块，调整鼠类动物姿势至椎间盘位置朝向手术位；操作模块，对椎间盘位置进行手术操作及穿刺操作；验证模块，在手术操作及穿刺操作完成后，验证预设时间内鼠类动物的椎间盘退变情况；结果模块，当鼠类动物的椎间盘的信号出现明显降低时，则穿刺操作造成的椎间盘退变，鼠类动物模型造模成功。本发明技术方案在穿刺时避开了对腹部脏器以及肌肉的存在路线，减少腹部脏器造成干扰，且避免了损伤肌肉的情况。
在本申请所提供的实施例中，应该理解到，所揭露装置和方法，可以通过其它的方式实现。以上所描述的装置实施例仅仅是示意性的，例如，所述单元的划分，仅仅为一种逻辑功能划分，实际实现时可以有另外的划分方式，又例如，多个单元或组件可以结合或者可以集成到另一个系统，或一些特征可以忽略，或不执行。另一点，所显示或讨论的相互之间的耦合或直接耦合或通信连接可以是通过一些通信接口，装置或单元的间接耦合或通信连接，可以是电性，机械或其它的形式。
另外，作为分离部件说明的单元可以是或者也可以不是物理上分开的，作为单元显示的部件可以是或者也可以不是物理单元，即可以位于一个地方，或者也可以分布到多个网络单元上。可以根据实际的需要选择其中的部分或者全部单元来实现本实施例方案的目的。
再者，在本申请各个实施例中的各功能模块可以集成在一起形成一个独立的部分，也可以是各个模块单独存在，也可以两个或两个以上模块集成形成一个独立的部分。
需要说明的是，功能如果以软件功能模块的形式实现并作为独立的产品销售或使用时，可以存储在一个计算机可读取存储介质中。基于这样的理解，本申请的技术方案本质上或者说对现有技术做出贡献的部分或者该技术方案的部分可以以软件产品的形式体现出来，该计算机软件产品存储在一个存储介质中，包括若干指令用以使得一台计算机设备(可以是个人计算机，服务器，或者网络设备等)执行本申请各个实施例所述方法的全部或部分步骤。而前述的存储介质包括：U盘、移动硬盘、只读存储器(Read-On ly Memory，ROM)随机存取存储器(Random Access Memory，RAM)、磁碟或者光盘等各种可以存储程序代码的介质。
在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。
以上所述仅为本申请的实施例而已，并不用于限制本申请的保护范围，对于本领域的技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法，其特征在于，所述鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法包括以下步骤：
麻醉鼠类动物；
将鼠类动物的四肢扩张并禁锢；
确定鼠类动物的椎间盘位置；
调整鼠类动物姿势至椎间盘位置朝向手术位；
对椎间盘位置进行手术操作及穿刺操作；
在手术操作及穿刺操作完成后，验证预设时间内鼠类动物的椎间盘退变情况；
当鼠类动物的椎间盘的信号出现明显降低时，则穿刺操作造成的椎间盘退变，鼠类动物模型造模成功。
2.如权利要求1所述的鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法，其特征在于，所述对椎间盘位置进行手术操作及穿刺操作的步骤包括：
调整鼠类动物的姿势为右侧卧位；
取髂嵴、最下肋中点处；
紧贴后侧竖脊肌外缘处经皮肤开纵切口；
依次分离表皮、真皮、肌筋膜、腹外斜肌、腹内斜肌、腹横机至腹膜外脂肪层；
将腹膜外脂肪拉向腹侧，则呈现下方腰大肌与后方竖脊肌；
在触及邻近的上下腰椎横突处，抓取镊子与剪刀分离腰大肌，其中，露出的白色区域即为椎间盘；
预设空针穿刺组区域，并在所述空针穿刺组区域进行穿刺操作，其中，所述穿刺操作包括将18G空针头的穿刺针全层贯穿椎间盘并旋转360°两次后，停留30s后拔出穿刺针；
逐层缝合切口并消毒。
3.如权利要求2所述的鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法，其特征在于，所述在触及邻近的上下腰椎横突处，抓取镊子与剪刀分离腰大肌，其中，露出的白色区域即为椎间盘的步骤之后，所述鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法还包括：
预设假手术组区域，并将所述假手术组区域逐层缝合切口并消毒。
4.如权利要求1所述的鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法，其特征在于，所述对椎间盘位置进行手术操作及穿刺操作的步骤包括：
调整鼠类动物的姿势为平卧位；
采用X线放射机定位鼠类动物的7/8尾椎间盘；
将20G空针头的穿刺针腹背贯通穿刺7/8尾椎间盘旋转360°并停留30s后拔出穿刺针；
消毒扎针口。
5.如权利要求3所述的鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法，其特征在于，所述验证预设时间内鼠类动物的椎间盘情况的步骤，包括：
当穿刺实验鼠并继续培育预设时间之后，麻醉鼠类动物；
将鼠类动物的四肢扩张并禁锢；
调整鼠类动物的姿势为仰卧位；
影像采集矢状位和轴状位的磁共振成像；
根据磁共振成像确定椎间盘的退变情况。
6.如权利要求5所述的鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法，其特征在于，所述影像采集矢状位和轴状位的磁共振成像的步骤之后，所述鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法还包括：
用过量苯巴比妥钠盐麻醉处死鼠类动物，其中，过量苯巴比妥钠盐为超过5.9g的苯巴比妥钠盐；
解剖鼠类动物并获取假手术组和空针穿刺组的椎旁肌肉以及水平节段的椎间盘；
将椎旁肌肉与椎间盘在4％多聚甲醛中固定24小时，之后在15％乙二胺四乙酸(EDTA)中脱钙15天；
将脱钙后的椎旁肌肉与椎间盘经脱水以及透明后，浸入熔化的石蜡中进行包埋；
对包埋后的椎旁肌肉与椎间盘进行切片，并切片的厚度不超过5μm；
染色切片后的椎旁肌肉与椎间盘，其中，切片后的椎旁肌肉与椎间盘采用苏木精和伊红(HE)染色，而切片后的椎间盘还采用阿尔新蓝染色；
观察染色后的椎旁肌肉的肌纤维横截面积和间隙的情况与椎间盘的组织学结构、蛋白多糖含量的变化情况；
根据染色后的椎旁肌肉的肌纤维横截面积和间隙的情况与椎间盘的组织学结构、蛋白多糖含量的变化情况推测空针穿刺造成的椎间盘退变，鼠类动物模型造模成功。
7.如权利要求6所述的鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法，其特征在于，所述观察染色后的椎旁肌肉的肌纤维横截面积和间隙的情况与椎间盘的组织学结构、蛋白多糖含量的变化情况的步骤包括：
当染色后的切片的椎旁肌肉出现红色与蓝紫色时，观察红色区域与蓝紫色区域；
根据切片的椎旁肌肉染色后呈现的红色区域与蓝紫色区域确定切片的椎旁肌肉的肌纤维横截面积和间隙的情况。
8.如权利要求6所述的鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法，其特征在于，所述观察染色后的椎旁肌肉的肌纤维横截面积和间隙的情况与椎间盘的组织学结构、蛋白多糖含量的变化情况的步骤包括：
当染色后的切片的椎间盘出现蓝色，观察蓝色区域；
根据切片的椎间盘染色后呈现的蓝色区域确定切片的椎间盘的组织学结构、蛋白多糖含量的变化情况。
9.一种鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立系统，其特征在于，所述鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立系统包括：
麻醉模块，麻醉鼠类动物；
禁锢模块，将鼠类动物的四肢扩张并禁锢；
确定位置模块，确定鼠类动物的椎间盘位置；
调整姿势模块，调整鼠类动物姿势至椎间盘位置朝向手术位；
操作模块，对椎间盘位置进行手术操作及穿刺操作；
验证模块，在手术操作及穿刺操作完成后，验证预设时间内鼠类动物的椎间盘退变情况；
结果模块，当鼠类动物的椎间盘的信号出现明显降低时，则穿刺操作造成的椎间盘退变，鼠类动物模型造模成功。
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| CN202110497152.7A CN113274160A (zh) | 2021-05-07 | 2021-05-07 | 一种鼠类动物椎间盘穿刺退变模型的建立方法及建立系统 |
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Citations (3)
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|---|---|---|---|---|
| CN202313631U (zh) * | 2011-10-31 | 2012-07-11 | 浙江大学 | 一种大鼠尾椎间盘经皮穿刺造模器 |
| CN112190359A (zh) * | 2020-10-13 | 2021-01-08 | 浙江省立同德医院 | 一种经皮穿刺纤维环切除椎间盘退变造模器及其操作方法 |
| CN112293348A (zh) * | 2019-07-29 | 2021-02-02 | 王跃 | 一种腰椎间盘突出症小鼠模型的构建方法 |
-
2021
- 2021-05-07 CN CN202110497152.7A patent/CN113274160A/zh active Pending
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| 洪国斌等: "大鼠腰椎间盘针刺退变模型的建立及影像学评价", 《中国医学影像技术》 * |
| 谭延林: "人重组骨形态发生蛋白在大鼠尾椎间盘退变模型中的修复作用", 《中国博士学位论文全文数据库（电子期刊）医药卫生科技辑》 * |
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