CN113230177A - 抗衰老护肤精华液及其制备方法 - Google Patents

抗衰老护肤精华液及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了抗衰老护肤精华液及其制备方法，由保湿剂、抗衰老成分、增稠剂、乳化剂、稳定剂、pH调节剂、防腐剂、水组成；其中的抗衰老成分为咖啡酸、角鲨烷和由特定方法制得的油柑提取物复配组成。本发明所得到的抗衰老护肤精华液能够有效清除细胞中的自由基、提高肌肤免疫力、改善皮肤含水量、对于抗皱抗衰老具有明显功效。

Description

抗衰老护肤精华液及其制备方法
技术领域
本发明涉及护肤品技术领域，具体涉及抗衰老护肤精华液及其制备方法。
背景技术
在细胞新陈代谢代谢活动过程中会产生非常多的自由基，这些自由基可以单独、游离地存在，具有极强的氧化能力。自由基作为中间代谢物，存在于人体组织中，并且参与许多生化反应，还会对包括肌肤细胞在内的人体细胞造成不可轻视的损伤。正常情況下人体内的自由基处于不断产生和不断消除的动态平衡，但当发生炎症或是受到外界因子，如日光照射等，则会打破该平衡，使得自由基的生成速度大于它的消减速度，此时就会对人体组织造成不可估量的损伤，造成包含光老化在内的多种衰老现象发生，从而导致机体加速衰老和各种炎症疾病发生。胶原蛋白会在自由基的触发下发生变性反应，使皮肤失去足够的营养供应，结果就是肌肤免疫力下降，表现为皮肤失去弹性，产生大量皱纹，全身皮肤老化，使得肤色暗沉、长斑、气色差等问题频繁发生。不仅如此，随着生理年龄日益增长、自由基越来越多，脂褐素日积月累将导致色斑形成并加深。
油柑中含有丰富的油柑多糖、山油柑碱等具有强效抗氧化能力的生物活性物质，可用于消除皮肤中由新陈代谢活动产生的自由基，提高人的皮肤细胞的抗氧化能力和免疫力，由此达到使皮肤抗衰老的目的。目前，现有技术中尚未有将油柑用于抗衰老类型护肤品的报道。
专利CN110251443A提供了一种护肤品抗衰老护肤精华液及其应用的抗衰老护肤品，其原料包括含有袋鼠爪提取物、棕榈酰三肽-5和盐生杜氏藻提取物，但它的抗衰能力较差，而且也没有解决改善皮肤含水量的问题。
发明内容
针对上述现有技术中存在的不足，本发明提供了抗衰老护肤精华液及其制备方法。
油柑中含有丰富的油柑多糖、山油柑碱等具有强效抗氧化能力的生物活性物质，可用于消除皮肤中由新陈代谢活动产生的自由基，提高人的皮肤细胞的抗氧化能力和免疫力，由此达到使皮肤抗衰老的目的。目前，现有技术中尚未有将油柑用于抗衰老类型护肤品的报道。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：
抗衰老护肤精华液，由以下原料组成：保湿剂、抗衰老成分、增稠剂、乳化剂、稳定剂、pH调节剂、防腐剂、水。
作为一种优选的方案，抗衰老护肤精华液，由以下质量百分比原料组成：10-16％保湿剂、6-9％抗衰老成分、1.5-1.8％增稠剂、1.2-1.45％乳化剂、0.2-0.5％稳定剂、0.15-0.3％pH调节剂、0.02-0.08％防腐剂、余量为水。
所述抗衰老护肤精华液的制备方法为：按原料配方将保湿剂、抗衰老成分、增稠剂、乳化剂、稳定剂、pH调节剂、防腐剂、水混合并均质处理，得到所述抗衰老护肤精华液。
作为一种优选的方案，所述抗衰老护肤精华液的制备方法为：在15-22℃按原料配方将保湿剂、抗衰老成分、增稠剂、乳化剂、稳定剂、pH调节剂、防腐剂、水混合并以6000-10000rpm的转速均质处理3-6min后，得到所述抗衰老护肤精华液。
所述保湿剂为1,3-丁二醇、肌醇、透明质酸中的至少一种。
肌醇可参与皮肤细胞的新陈代谢活动，具有免疫、预防和治疗某些疾病等多种作用。透明质酸具有高度粘弹性和良好的生物相容性，在具备良好保湿能力的同时不会给肌肤带来油腻感或是阻塞皮肤毛孔，还可以渗透至真皮层参与调节皮肤的新陈代谢过程，起到保湿、抗皱、抗衰老的美容效果。
作为一种优选的方案，所述保湿剂为1,3-丁二醇、肌醇、透明质酸以质量比(1-7):(1-7):(1-7)组成的混合物。
所述抗衰老成分为咖啡酸、角鲨烷、油柑提取物中的至少一种。
油柑中含有丰富的油柑多糖、山油柑碱等具有强效抗氧化能力的生物活性物质，可用于消除皮肤中由新陈代谢活动产生的自由基，提高人的皮肤细胞的抗氧化能力和免疫力，由此达到使皮肤抗衰老的目的。咖啡酸具有抗炎、舒缓、镇定肌肤的作用；角鲨烷能够修护受损表皮，形成天然保护膜，辅助肌肤与皮脂间的平衡，还能抑制皮肤脂质过氧化现象有效渗透入肌肤并促进皮肤基底细胞增殖，对延缓皮肤老化，改善并消除黄褐斑均有明显的生理效果；将二者与由本发明特定方法制得的油柑提取物复配联用可以极大增强所述抗衰老护肤精华液的抗氧化、锁水保湿、抗皱抗衰老的功效。
作为一种优选的方案，所述抗衰老成分为咖啡酸、角鲨烷、油柑提取物以质量比(1-2):(0.5-1.2):(6-12)组成的混合物。
所述增稠剂为1,2-丙二醇、槐豆胶中的至少一种。
1,2丙二醇，槐豆胶具有优异的保湿能力，还有显著的抗菌和增溶能力，还可改善所述抗衰老护肤精华液的产品外观与质地，提升肤感与使用感。
作为一种优选的方案，所述增稠剂为1,2-丙二醇、槐豆胶以质量比(1.5-5):(0.1-1.2)组成的混合物。
所述乳化剂为氢化卵磷脂、二乙二醇单十六醚中的至少一种。
氢化卵磷脂在所述抗衰老护肤精华液的特定原料体系中能够有效协同各组分，起到良好的乳化、稳定、融合作用。
作为一种优选的方案，所述乳化剂为氢化卵磷脂、二乙二醇单十六醚以质量比(1-6):(1-6)组成的混合物。
所述稳定剂为乙二醇二甲基丙烯酸酯、EDTA二钠中的至少一种。
EDTA二钠作为螯合剂可以稳定所述抗衰老护肤精华液原料体系的稳定性，并且与所述原料体系的抗氧化、防腐有一定的协同增效作用。
作为一种优选的方案，所述稳定剂为乙二醇二甲基丙烯酸酯、EDTA二钠按质量比(1-3):(1-4)的混合物。
所述pH调节剂为氨甲基丙醇、4-羟乙基哌嗪乙磺酸中的至少一种。
作为一种优选的方案，所述pH调节剂为氨甲基丙醇、4-羟乙基哌嗪乙磺酸以质量比(0.5-2):(1-5)组成的混合物。
所述防腐剂为苯氧乙醇、脱氢乙酸钠中的至少一种。
作为一种优选的方案，所述防腐剂为苯氧乙醇、脱氢乙酸钠以质量比(1-8):(1-6)组成的混合物。
所述油柑提取物的制备方法为：
X1用盐水清洗油柑、沥干；
X2将油柑切成小块，放到醇提剂中，经过高压醇提和过滤，得到油柑醇提液；
X3对所述油柑醇提液进行层析提纯后得到层析液，经过真空冻干和粉碎，得到所述油柑提取物。
本发明采用依次高压醇提、改性聚丙烯酰胺层析提纯、真空冻干技术制备可用于抗衰老护肤精华液的油柑提取物。其中，高压醇提过程中采用乙醇和乳酸乙酯作为醇提剂，乳酸乙酯中羟基和酯基的相对位向可使其在与乙醇复配时在高压下分子极性增强，更有效地破坏油柑果肉细胞的外膜，提高果肉细胞内活性成分的渗出率并保证其活性不受损。
所述X1操作中：所述盐水中含有质量百分比为10-17％的氯化钠和质量百分比为10-16％的柠檬酸钠；所述油柑、盐水的浴比为1kg:(2.5-4)L；所述盐水的温度为20-25℃，清洗时长为15-30min；所述清洗处理中采用功率为380-400W、频率为36-38kHz的超声波进行辅助清洗。
所述X2操作中：所述小块的尺寸为(1-3)mm×(1-3)mm×(1-3)mm；所述醇提剂为无水乙醇、乳酸乙酯的混合物；所述小块、醇提剂的质量比为1:(11-14)；所述高压醇提中，温度为48-52℃，加载压力大小为320-350MPa，时长为40-50min。
所述X3操作中：所述真空冻干的冷阱温度为(-60)-(-50)℃、气压为12-15Pa、冻干时长为120-160min；所述粉碎操作中采用规格为200-250目的滤筛。
所述层析提纯的步骤为：
C1用无水乙醇冲洗改性聚丙烯酰胺；
C2将所述改性聚丙烯酰胺装入层析柱，加入无水乙醇并使其刚好淹没所述改性聚丙烯酰胺；
C3将所述油柑醇提液装入所述层析柱，收集所述层析液。
所述C1操作中：冲洗流速为300-400mL/min，冲洗时长为8-12min；冲洗温度为30-35℃。
所述C2操作中：所述层析柱的底部直径与高度的比值为1:(12-14)；所述改性聚丙烯酰胺的装载量为所述层析柱容积的(80-85)％。
所述C3操作中：所述油柑醇提液的装入速度为8-15mL/min，层析时的温度为20-24℃。
所述改性聚丙烯酰胺的制备方法为：
将聚丙烯酰胺、蒙脱土、改性剂、正丙醇、水混合，经过均质处理后，得到中间产物A；然后用紫外线照射所述中间产物A，得到中间产物B；对所述中间产物B减压干燥后，得到所述改性聚丙烯酰胺；所述改性剂为硫酸软骨素、葡糖酸内酯中的一种或者两种的混合物。
一般的醇提或是榨汁手段得到的油柑提取物中会含有不少的蛋白质和脂质等杂质，这些杂质在添加到所述抗衰老护肤精华液体系中时会与当中的原料发生络合甚至沉淀，这会极大削弱各原料的功效，也就是无法达到预期的抗衰老效果，因此本发明提供了一种改性聚丙烯酰胺及其制备方法并将其用于层析提纯手段，制得了一种能够有效吸附包含蛋白质、脂质在内等各种杂质，同时对于油柑多糖、山油柑碱等活性成分具有极高选择性通过率的改性聚丙烯酰胺。
作为一种优选的方案，所述改性聚丙烯酰胺的制备方法为：
在20-25℃，将聚丙烯酰胺、蒙脱土、改性剂、正丙醇、水混合，经过均质处理后，得到中间产物A；然后用紫外线照射所述中间产物A，得到中间产物B；对所述中间产物B减压干燥后，得到所述改性聚丙烯酰胺；所述改性剂为硫酸软骨素、葡糖酸内酯的混合物。
所述聚丙烯酰胺、蒙脱土、改性剂、正丙醇、水的质量比为(7-10):(0.7-1.2):(1.8-2.2):(2.8-3.3):(2.8-3.6)；所述均质处理的转速为7000-10000rpm，时长为3-6min；所述紫外线照射的功率480-520W、采用波长为43-46nm的紫外线，照射时长为65-80min；所述减压干燥的温度为73-78℃、气压为50-65kPa，时长为3-5h。
作为一种优选的方案，所述硫酸软骨素、葡糖酸内酯的质量比为(1-3):(1-3)。
作为一种优选的方案，所述硫酸软骨素、葡糖酸内酯的质量比为2:1。
蒙脱土具有很强的吸附能力和离子交换能力，硫酸软骨素的拓扑分子极性表面积和氢键受体数目，葡糖酸内酯中的羟基-含氧杂环结构，使得这三者在紫外线的高能光子的激发-跃迁作用下与聚丙烯酰胺中的醛基-氨基结构结合，由此极大提高了聚丙烯酰胺对于包括蛋白质、脂质在内等杂质的吸附能力，同时也不会增大对于上述活性成分的吸附，使得所述油柑醇提物在经过所述改性聚丙烯胺层析提纯之后具有更低的含杂率和更高的活性成分浓度，保证其具有极高的抗氧化能力，也就使得最终所得抗衰老护肤精华液具有良好的抗氧化能力、提高肌肤细胞免疫力、提高皮肤含水量、增强皮肤弹性等能力。
本发明的有益效果：
1、提供了一种抗衰老护肤精华液及其制备方法，以咖啡酸、角鲨烷、油柑提取物复配联用作为抗衰老成分，获得了能够有效清除皮肤中由各项新陈代谢活动产生的自由基、提高肌肤细胞免疫力、改善皮肤含水量、抚平皱纹延缓老化的抗衰老护肤精华液；
2、提供了一种改性聚丙烯酰胺及其制备方法，将其与高压醇提、真空冻干手段联用后获得了能够在有效吸附包含蛋白质、脂质等在内各种杂质的同时获得高浓度和良好活性的包括山油柑碱、油柑多糖在内等具有抗氧化抗衰老提高肌肤细胞免疫力功效的油柑提取物。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明的上述发明内容作进一步详细描述，但不该将此理解成本发明上述主题的范围仅限于下述实施例。
本申请中部分原料的介绍：
1,3-丁二醇，由上海迈瑞尔化学技术有限公司提供，CAS：107-88-0，规格：化妆品级。
肌醇，由上海迈瑞尔化学技术有限公司提供，CAS：87-89-8，规格：化妆品级。
透明质酸，由上海迈瑞尔化学技术有限公司提供，CAS：9004-61-9，规格：化妆品级。
咖啡酸，由南京狄尔格医药科技有限公司提供，CAS：331-39-5，规格：化妆品级。
角鲨烷，由南京狄尔格医药科技有限公司提供，CAS：111-01-3，规格：化妆品级。
1,2-丙二醇，由湖北信康医药化工有限公司提供，CAS：57-55-6，规格：化妆品级。
槐豆胶，由湖北广奥生物科技有限公司提供，CAS：9000-40-2，规格：化妆品级。
氢化卵磷脂，由湖北广奥生物科技有限公司提供，CAS：92128-87-5，规格：化妆品级。
二乙二醇单十六醚，由百灵威科技有限公司提供，CAS：5274-61-3，规格：化妆品级。
乙二醇二甲基丙烯酸酯，由百灵威科技有限公司提供，CAS：97-90-5，规格：化妆品级。
EDTA二钠，由上海迈瑞尔化学技术有限公司提供，CAS：6381-92-6，规格：化妆品级。
氨甲基丙醇，由湖北永阔科技有限公司提供，CAS：124-68-5，规格：化妆品级。
4-羟乙基哌嗪乙磺酸，由湖北永阔科技有限公司提供，CAS：7365-45-9，规格：化妆品级。
苯氧乙醇，由上海迈瑞尔化学技术有限公司，CAS：122-99-6，规格：化妆品级。
脱氢乙酸钠，由上海迈瑞尔化学技术有限公司，CAS：4418-26-2，规格：化妆品级。
油柑：Phyllanthus Emblica，由广东省陆河县河口镇田墩日耀油柑基地提供。
乳酸乙酯，由百灵威科技有限公司提供，CAS：97-64-3。
聚丙烯酰胺，由上海迈瑞尔化学技术有限公司提供，CAS：9003-05-8，分子量：200万。
聚酰胺，由上海迈瑞尔化学技术有限公司提供，CAS：63428-84-2，分子量：18000。
蒙脱土，由济南云佰汇生物科技有限公司提供，CAS：1318-93-0，纯度：98％，粒径：80μm，密度：1.7g/cm3。
正丙醇，由四川省维克奇生物科技有限公司提供，CAS：71-23-8。
硫酸软骨素，由湖北广奥生物科技有限公司提供，CAS：9007-28-7。
葡糖酸内酯，由湖北广奥生物科技有限公司提供，CAS：4253-68-3。
实施例1
抗衰老护肤精华液，由以下质量百分比原料组成：15.2％保湿剂、8.7％抗衰老成分、1.6％增稠剂、1.4％乳化剂、0.4％稳定剂、0.2％pH调节剂、0.06％防腐剂、余量为水。
所述抗衰老护肤精华液的制备方法为：在20℃按原料配方将保湿剂、抗衰老成分、增稠剂、乳化剂、稳定剂、pH调节剂、防腐剂、水混合并以8000rpm的转速均质处理5min后，得到所述抗衰老护肤精华液。
所述保湿剂为1,3-丁二醇、肌醇、透明质酸以质量比4.5:3.1:1.2组成的混合物。
所述抗衰老成分为咖啡酸、角鲨烷、油柑提取物以质量比1.3:0.7:8.6组成的混合物。
所述增稠剂为1,2-丙二醇、槐豆胶以质量比2.2:0.7组成的混合物。
所述乳化剂为氢化卵磷脂、二乙二醇单十六醚以质量比4.2:1.3组成的混合物。
所述稳定剂为乙二醇二甲基丙烯酸酯、EDTA二钠按质量比1.5:2.8的混合物。
所述pH调节剂为氨甲基丙醇、4-羟乙基哌嗪乙磺酸以质量比0.8:3.3组成的混合物。
所述防腐剂为苯氧乙醇、脱氢乙酸钠以质量比1.7:4.2组成的混合物。
所述油柑提取物的制备方法为：
X1用盐水清洗油柑、沥干；
X2将油柑切成小块，放到醇提剂中，经过高压醇提和过滤，得到油柑醇提液；
X3对所述油柑醇提液进行层析提纯后得到层析液，经过真空冻干和粉碎，得到所述油柑提取物。
所述X1操作中：所述盐水中含有质量百分比为15％的氯化钠和质量百分比为15％的柠檬酸钠；所述油柑、盐水的浴比为1kg:3L；所述盐水的温度为25℃，清洗时长为20min；所述清洗处理中采用功率为400W、频率为38kHz的超声波进行辅助清洗。
所述X2操作中：所述小块的尺寸为2mm×2mm×2mm；所述醇提剂为无水乙醇、乳酸乙酯以质量比5:1组成的混合物；所述小块、醇提剂的质量比为1:12；所述高压醇提中，温度为50℃，加载压力大小为330MPa，时长为45min。
所述X3操作中：所述真空冻干的冷阱温度为-60℃、气压为15Pa、冻干时长为150min；所述粉碎操作中采用规格为250目的滤筛。
所述层析提纯的步骤为：
C1用无水乙醇冲洗改性聚丙烯酰胺；
C2将所述改性聚丙烯酰胺装入层析柱，加入无水乙醇并使其刚好淹没所述改性聚丙烯酰胺；
C3将所述油柑醇提液装入所述层析柱，收集所述层析液。
所述C1操作中：冲洗流速为400mL/min，冲洗时长为10min；冲洗温度为35℃。
所述C2操作中：所述层析柱的底部直径与高度的比值为1:14；所述改性聚丙烯酰胺的装载量为所述层析柱容积的85％。
所述C3操作中：所述油柑醇提液的装入速度为10mL/min，层析时的温度为22℃。
所述改性聚丙烯酰胺的制备方法为：
在25℃，将聚丙烯酰胺、蒙脱土、改性剂、正丙醇、水混合，经过均质处理后，得到中间产物A；然后用紫外线照射所述中间产物A，得到中间产物B；对所述中间产物B减压干燥后，得到所述改性聚丙烯酰胺；所述改性剂为硫酸软骨素、葡糖酸内酯的混合物；所述硫酸软骨素、葡糖酸内酯的质量比为2:1。
所述聚丙烯酰胺、蒙脱土、改性剂、正丙醇、水的质量比为9:1:2:3:3；所述均质处理的转速为8000rpm，时长为5min；所述紫外线照射的功率500W、采用波长为45nm的紫外线，照射时长为70min；所述减压干燥的温度为75℃、气压为60kPa，时长为4h。
实施例2
与实施例1相同，区别仅在于：所述改性剂为硫酸软骨素。
实施例3
与实施例1相同，区别仅在于：所述改性剂为葡糖酸内酯。
实施例4
与实施例1相同，区别仅在于：
所述改性聚丙烯酰胺的制备方法为：
在25℃，将聚丙烯酰胺、改性剂、正丙醇、水混合，经过均质处理后，得到中间产物A；然后用紫外线照射所述中间产物A，得到中间产物B；对所述中间产物B减压干燥后，得到所述改性聚丙烯酰胺；所述改性剂为硫酸软骨素、葡糖酸内酯的混合物；所述硫酸软骨素、葡糖酸内酯的质量比为2:1。
所述聚丙烯酰胺、改性剂、正丙醇、水的质量比为9:2:3:3；所述均质处理的转速为8000rpm，时长为5min；所述紫外线照射的功率500W、采用波长为45nm的紫外线，照射时长为70min；所述减压干燥的温度为75℃、气压为60kPa，时长为4h。
实施例5
与实施例1相同，区别仅在于：
所述改性聚丙烯酰胺的制备方法为：
在25℃，将聚丙烯酰胺、蒙脱土、改性剂、正丙醇、水混合，经过均质处理后，得到中间产物A；静置所述中间产物A，得到中间产物B；对所述中间产物B减压干燥后，得到所述改性聚丙烯酰胺；所述改性剂为硫酸软骨素、葡糖酸内酯的混合物；所述硫酸软骨素、葡糖酸内酯的质量比为2:1。
所述聚丙烯酰胺、蒙脱土、改性剂、正丙醇、水的质量比为9:1:2:3:3；所述均质处理的转速为8000rpm，时长为5min；所述静置时长为70min；所述减压干燥的温度为75℃、气压为60kPa，时长为4h。
实施例6
与实施例1相同，区别仅在于：
所述层析提纯的步骤为：
C1用无水乙醇冲洗改性聚酰胺；
C2将所述改性聚酰胺装入层析柱，加入无水乙醇并使其刚好淹没所述改性聚酰胺；
C3将所述油柑醇提液装入所述层析柱，收集所述层析液。
所述C1操作中：冲洗流速为400mL/min，冲洗时长为10min；冲洗温度为35℃。
所述C2操作中：所述层析柱的底部直径与高度的比值为1:14；所述改性聚酰胺的装载量为所述层析柱容积的85％。
所述C3操作中：所述油柑醇提液的装入速度为10mL/min，层析时的温度为22℃。
所述改性聚酰胺的制备方法为：
在25℃，将聚酰胺、蒙脱土、改性剂、正丙醇、水混合，经过均质处理后，得到中间产物A；然后用紫外线照射所述中间产物A，得到中间产物B；对所述中间产物B减压干燥后，得到所述改性聚酰胺；所述改性剂为硫酸软骨素、葡糖酸内酯的混合物；所述硫酸软骨素、葡糖酸内酯的质量比为2:1。
所述聚酰胺、蒙脱土、改性剂、正丙醇、水的质量比为9:1:2:3:3；所述均质处理的转速为8000rpm，时长为5min；所述紫外线照射的功率500W、采用波长为45nm的紫外线，照射时长为70min；所述减压干燥的温度为75℃、气压为60kPa，时长为4h。
实施例7
与实施例1相同，区别仅在于：
所述层析提纯的步骤为：
C1用无水乙醇冲洗聚丙烯酰胺；
C2将所述聚丙烯酰胺装入层析柱，加入无水乙醇并使其刚好淹没所述聚丙烯酰胺；
C3将所述油柑醇提液装入所述层析柱，收集所述层析液。
所述C1操作中：冲洗流速为400mL/min，冲洗时长为10min；冲洗温度为35℃。
所述C2操作中：所述层析柱的底部直径与高度的比值为1:14；所述聚丙烯酰胺的装载量为所述层析柱容积的85％。
所述C3操作中：所述油柑醇提液的装入速度为10mL/min，层析时的温度为22℃。
实施例8
与实施例1相同，区别仅在于：
所述油柑提取物的制备方法为：
X1用盐水清洗油柑、沥干；
X2将油柑切成小块，放到醇提剂中，经过高压醇提和过滤，得到油柑醇提液；
X3对所述油柑醇提液进行层析提纯后得到层析液，经过真空冻干和粉碎，得到所述油柑提取物。
所述X1操作中：所述盐水中含有质量百分比为15％的氯化钠和质量百分比为15％的柠檬酸钠；所述油柑、盐水的浴比为1kg:3L；所述盐水的温度为25℃，清洗时长为20min；所述清洗处理中采用功率为400W、频率为38kHz的超声波进行辅助清洗。
所述X2操作中：所述小块的尺寸为2mm×2mm×2mm；所述醇提剂为无水乙醇；所述小块、醇提剂的质量比为1:12；所述高压醇提中，温度为50℃，加载压力大小为330MPa，时长为45min。
所述X3操作中：所述真空冻干的冷阱温度为-60℃、气压为15Pa、冻干时长为150min；所述粉碎操作中采用规格为250目的滤筛。
所述层析提纯的步骤为：
C1用无水乙醇冲洗改性聚丙烯酰胺；
C2将所述改性聚丙烯酰胺装入层析柱，加入无水乙醇并使其刚好淹没所述改性聚丙烯酰胺；
C3将所述油柑醇提液装入所述层析柱，收集所述层析液。
所述C1操作中：冲洗流速为400mL/min，冲洗时长为10min；冲洗温度为35℃。
所述C2操作中：所述层析柱的底部直径与高度的比值为1:14；所述改性聚丙烯酰胺的装载量为所述层析柱容积的85％。
所述C3操作中：所述油柑醇提液的装入速度为10mL/min，层析时的温度为22℃。
所述改性聚丙烯酰胺的制备方法为：
在25℃，将聚丙烯酰胺、蒙脱土、改性剂、正丙醇、水混合，经过均质处理后，得到中间产物A；然后用紫外线照射所述中间产物A，得到中间产物B；对所述中间产物B减压干燥后，得到所述改性聚丙烯酰胺；所述改性剂为硫酸软骨素、葡糖酸内酯的混合物；所述硫酸软骨素、葡糖酸内酯的质量比为2:1。
所述聚丙烯酰胺、蒙脱土、改性剂、正丙醇、水的质量比为9:1:2:3:3；所述均质处理的转速为8000rpm，时长为5min；所述紫外线照射的功率500W、采用波长为45nm的紫外线，照射时长为70min；所述减压干燥的温度为75℃、气压为60kPa，时长为4h。
实施例9
与实施例1相同，区别仅在于：
所述油柑提取物的制备方法为：
X1用盐水清洗油柑、沥干；
X2将油柑切成小块，放到醇提剂中，经过高压醇提和过滤，得到油柑醇提液；
X3对所述油柑醇提液进行真空冻干和粉碎，得到所述油柑提取物。
所述X1操作中：所述盐水中含有质量百分比为15％的氯化钠和质量百分比为15％的柠檬酸钠；所述油柑、盐水的浴比为1kg:3L；所述盐水的温度为25℃，清洗时长为20min；所述清洗处理中采用功率为400W、频率为38kHz的超声波进行辅助清洗。
所述X2操作中：所述小块的尺寸为2mm×2mm×2mm；所述醇提剂为无水乙醇、乳酸乙酯以质量比5:1组成的混合物；所述小块、醇提剂的质量比为1:12；所述高压醇提中，温度为50℃，加载压力大小为330MPa，时长为45min。
所述X3操作中：所述真空冻干的冷阱温度为-60℃、气压为15Pa、冻干时长为150min；所述粉碎操作中采用规格为250目的滤筛。
实施例10
与实施例1相同，区别仅在于：
所述抗衰老成分为咖啡酸、角鲨烷以质量比1.3:0.7组成的混合物。
测试例1
抗氧化能力测试：用DPPH清除率来衡量由本发明各例所得油柑提取物的抗氧化能力。配制浓度为0.0256g/L的DPPH标准液；在试管中吸入体积分别为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10mL所述DPPH标准液，用无水乙醇补齐不足10mL的试管；设置一个仅含有无水乙醇的空白对照组；测定各试管内溶液在波长为517nm处的吸光度。所述DPPH液吸光度与浓度的关系曲线回归方程为y＝0.0259x+0.0018(R2＝0.9996)；其中，在浓度为2.56～25.60mg/L的范围内，所述DPPH液的浓度与吸光度之间呈显著的线性关系，说明所述DPPH液的吸光度在上述范围内可作为衡量溶液中DPPH浓度大小的指标。然后，以无水乙醇作溶剂，分别配制出浓度为0.004、0.012、0.016、0.024、0.050、0.100、0.150mg/mL和0.300mg/mL由本发明各例所得油柑提取物并作为样品；吸取5mL所述样品并加入5mL所述DPPH标准液，混匀，反应30min，然后测其吸光度。DPPH清除率(％)＝1-(DPPHt/DPPH0)×l00％；其中：DPPH0为DPPH的起始浓度；DPPHt为体系中的DPPH在与由本发明所得油柑提取物反应20min后的浓度。
表1油柑提取物的DPPH清除率
DPPH清除率(％)
实施例1 96.7
实施例2 95.4
实施例3 95.1
实施例4 92.0
实施例5 91.2
实施例6 85.4
实施例7 88.7
实施例8 90.0
实施例9 86.3
测试例2
角质层含水量测试：选取200名生理年龄在18至35岁之间的志愿者，并将他们分成10个对照组，每组由10个男性和10个女性构成。各对照组成员在用温水清洁完面部之后，分别将由本发明各例所得抗衰老护肤精华液涂抹在脸部，每次的涂抹量均为2mL，使用频率为每天两次，实验周期总共28天，期间不得使用其他护肤品。使用型号为CorneometerCM825的皮肤水分测试仪测试双颊皮肤在使用前(0d)、第14天(14d)和第28天(28d)的角质层含水量。测试结果取各个对照组内的平均值。
表2双颊皮肤角质层含水量在使用抗衰老护肤精华液前后的变化
Figure BDA0003107056410000161
测试例3
皮肤弹性测试：选取200名生理年龄在18至35岁之间的志愿者，并将他们分成10个对照组，每组由10个男性和10个女性构成。各对照组成员在用温水清洁完面部之后，分别将由本发明各例所得抗衰老护肤精华液涂抹在脸部，每次的涂抹量均为2mL，使用频率为每天两次，实验周期总共28天，期间不得使用其他护肤品。选用由德国CK公司生产的、型号为PVM600的皮肤弹性探头测量使用产品后0d、14d、28d的双颊处皮肤弹性度的变化，测量结果用一个无量纲且范围在0～1之间的数值表示，数值越大，说明皮肤弹性越好。
表3双颊皮肤弹性在使用抗衰老护肤精华液前后的变化
Figure BDA0003107056410000171
油柑中含有丰富的油柑多糖、山油柑碱等具有强效抗氧化能力的生物活性物质，可用于消除皮肤中由新陈代谢活动产生的自由基，提高人的皮肤细胞的抗氧化能力和免疫力，由此达到使皮肤抗衰老的目的。
本发明采用依次高压醇提、改性聚丙烯酰胺层析提纯、真空冻干技术制备可用于抗衰老护肤精华液的油柑提取物。其中，高压醇提过程中采用乙醇和乳酸乙酯作为醇提剂，乳酸乙酯中羟基和酯基的相对位向可使其在与乙醇复配时在高压下分子极性增强，更有效地破坏油柑果肉细胞的外膜，提高果肉细胞内活性成分的渗出率并保证其活性不受损。一般的醇提或是榨汁手段得到的油柑提取物中会含有不少的蛋白质和脂质等杂质，这些杂质在添加到所述抗衰老护肤精华液体系中时会与当中的原料发生络合甚至沉淀，这会极大削弱各原料的功效，也就是无法达到预期的抗衰老效果，因此本发明提供了一种改性聚丙烯酰胺及其制备方法并将其用于层析提纯手段，制得了一种能够有效吸附包含蛋白质、脂质在内等各种杂质，同时对于油柑多糖、山油柑碱等活性成分具有极高选择性通过率的改性聚丙烯酰胺。蒙脱土具有很强的吸附能力和离子交换能力，硫酸软骨素的拓扑分子极性表面积和氢键受体数目，葡糖酸内酯中的羟基-含氧杂环结构，使得这三者在紫外线的高能光子的激发-跃迁作用下与聚丙烯酰胺中的醛基-氨基结构结合，由此极大提高了聚丙烯酰胺对于包括蛋白质、脂质在内等杂质的吸附能力，同时也不会增大对于上述活性成分的吸附，使得所述油柑醇提物在经过所述改性聚丙烯胺层析提纯之后具有更低的含杂率和更高的活性成分浓度，保证其具有极高的抗氧化能力，也就使得最终所得抗衰老护肤精华液具有良好的抗氧化能力、提高肌肤细胞免疫力、提高皮肤含水量、增强皮肤弹性等能力。
肌醇可参与皮肤细胞的新陈代谢活动，具有免疫、预防和治疗某些疾病等多种作用。透明质酸具有高度粘弹性和良好的生物相容性，在具备良好保湿能力的同时不会给肌肤带来油腻感或是阻塞皮肤毛孔，还可以渗透至真皮层参与调节皮肤的新陈代谢过程，起到保湿、抗皱、抗衰老的美容效果。咖啡酸具有抗炎、舒缓、镇定肌肤的作用；角鲨烷能够修护受损表皮，形成天然保护膜，辅助肌肤与皮脂间的平衡，还能抑制皮肤脂质过氧化现象有效渗透入肌肤并促进皮肤基底细胞增殖，对延缓皮肤老化，改善并消除黄褐斑均有明显的生理效果；将二者与由本发明特定方法制得的油柑提取物复配联用可以极大增强所述抗衰老护肤精华液的抗氧化、锁水保湿、抗皱抗衰老的功效。1,2丙二醇，槐豆胶具有优异的保湿能力，还有显著的抗菌和增溶能力，还可改善所述抗衰老护肤精华液的产品外观与质地，提升肤感与使用感。氢化卵磷脂在所述抗衰老护肤精华液的特定原料体系中能够有效协同各组分，起到良好的乳化、稳定、融合作用。EDTA二钠作为螯合剂可以稳定所述抗衰老护肤精华液原料体系的稳定性，并且与所述原料体系的抗氧化、防腐有一定的协同增效作用。

Claims (10)

1.抗衰老护肤精华液，其特征在于，由以下原料组成：保湿剂、抗衰老成分、增稠剂、乳化剂、稳定剂、pH调节剂、防腐剂、水。
2.如权利要求1所述抗衰老护肤精华液，其特征在于：所述保湿剂为1,3-丁二醇、肌醇、透明质酸中的至少一种。
3.如权利要求1所述抗衰老护肤精华液，其特征在于：所述抗衰老成分为咖啡酸、角鲨烷、油柑提取物中的至少一种。
4.如权利要求1所述抗衰老护肤精华液，其特征在于：所述增稠剂为1,2-丙二醇、槐豆胶中的至少一种。
5.如权利要求1所述抗衰老护肤精华液，其特征在于：所述乳化剂为氢化卵磷脂、二乙二醇单十六醚中的至少一种。
6.如权利要求1所述抗衰老护肤精华液，其特征在于：所述稳定剂为乙二醇二甲基丙烯酸酯、EDTA二钠中的至少一种；
所述pH调节剂为氨甲基丙醇、4-羟乙基哌嗪乙磺酸中的至少一种；
所述防腐剂为苯氧乙醇、脱氢乙酸钠中的至少一种。
7.如权利要求3所述抗衰老护肤精华液，其特征在于，所述油柑提取物的制备方法为：
X1用盐水清洗油柑、沥干；
X2将油柑切成小块，放到醇提剂中，经过高压醇提和过滤，得到油柑醇提液；
X3对所述油柑醇提液进行层析提纯后得到层析液，经过真空冻干和粉碎，得到所述油柑提取物。
8.如权利要求7所述抗衰老护肤精华液，其特征在于，所述层析提纯的步骤为：
C1用无水乙醇冲洗改性聚丙烯酰胺；
C2将所述改性聚丙烯酰胺装入层析柱，加入无水乙醇并使其刚好淹没所述改性聚丙烯酰胺；
C3将所述油柑醇提液装入所述层析柱，收集所述层析液。
9.如权利要求8所述抗衰老护肤精华液，其特征在于，所述改性聚丙烯酰胺的制备方法为：
将聚丙烯酰胺、蒙脱土、改性剂、正丙醇、水混合，经过均质处理后，得到中间产物A；然后用紫外线照射所述中间产物A，得到中间产物B；对所述中间产物B减压干燥后，得到所述改性聚丙烯酰胺；所述改性剂为硫酸软骨素、葡糖酸内酯中的一种或者两种的混合物。
10.如权利要求1-9任一项所述抗衰老护肤精华液的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：按原料配方将保湿剂、抗衰老成分、增稠剂、乳化剂、稳定剂、pH调节剂、防腐剂、水混合并均质处理，得到所述抗衰老护肤精华液。
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