CN112997972B - 一种适宜于规模化繁育的东亚小花蝽卵保藏方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于虫害防治技术领域，具体为一种适宜于规模化繁育的东亚小花蝽卵保藏方法，包括产卵基质选择的研究和低温保藏方法的研究，低温保藏方法的研究包括恒温条件保藏的研究和变温条件保的研究；本发明，通过选取孵化率高、保鲜性好、耐腐烂、耐冷藏的芸豆角作为产卵基质，并通过变温保藏的方式提高了东亚小花蝽孵化率，加快了东亚小花蝽商品化和推广应用进程，有利于我国害虫的防治，是一种易获取、成本低、能补水、保鲜性好、耐冷藏、着卵多、孵化率高、可长期保藏的产卵基质及低温保藏方法，更好的为东亚小花蝽规模化繁育提供了技术支撑。
Description
技术领域
本发明属于虫害防治技术领域，具体涉及一种适宜于规模化繁育的东亚小花蝽卵保藏方法。
背景技术
东亚小花蝽属半翅目花蝽科小花蝽属，是农、林小型害虫的优势天敌，其成虫和若虫均可捕食蓟马、蚜虫、叶螨、粉虱等小型节肢动物，以及多种鳞翅目昆虫卵和初孵幼虫。该虫具有对环境适应性强、分布范围广、发生数量大、食性杂等优点，被普遍认为是一种具有较高利用价值和生防潜力的捕食性天敌昆虫。目前，东亚小花蝽已被广泛应用于蔬菜、果树、花卉等农田和温室生态系统中，对害虫发挥了良好的控制作用。国外已将东亚小花蝽作为生物产品进行登记，并在多种作物上进行害虫的防治，但我国商品化的开发和应用相对滞后，对东亚小花蝽规模化生产和应用关键技术研究不够系统，大部分仅停留在实验室阶段，无法满足产品化开发和应用的需求。
研究表明东亚小花蝽卵在温度为25℃±1℃，相对湿度为75%±5%，光周期为16L﹕8D的条件下4d左右即可孵化出若虫，短暂的孵化时间制约了东亚小花蝽的规模化繁育和运输。因此，为了进一步加快东亚小花蝽商品化和推广应用进程，在小花蝽工厂化饲养的不断扩大的情况下，如何提高卵的货架期成为大家关注的热点，影响东亚小花规模化繁育和应用的因素很多，其中卵的低温保藏其中关键因素之一，低温贮藏也是天敌昆虫商品化生产、运输和释放应用的重要环节，通过低温贮藏能延长东亚小花蝽卵的货架期，因此研究东亚小花蝽卵的低温贮藏条件对东亚小花蝽人工扩繁具有现实的指导意义。
选择有效的产卵基质是东亚小花蝽卵低温保藏的前提条件，国内外学者开展了大量的工作，研究发现用发芽的蚕豆种子可以作为东亚小花蝽的产卵基质。于毅等1997年对东亚小花蝽在果园中常见植物的产卵选择性进行了研究，结果表明，春季东亚小花蝽在夏至草上的产卵量显著高于其它植物。郭建英等2001年比较了东亚小花蝽对黄豆芽、寿星花和燕子掌叶片的产卵选择性，发现寿星花是一种较理想的产卵基质。王广鹏等2006年对比菜豆芽、菜豆叶、蚕豆芽、黄豆芽4种产卵基质，发现东亚小花蝽对菜豆芽的选择性最佳。周伟儒等1991年利用黄豆芽作为东亚小花蝽的产卵基质。杨丽文等2014年研究了白芸豆嫩茎、白芸豆叶片、发芽的蚕豆种子、夏至草嫩茎作为产卵基质，研究发现，东亚小花蝽更喜欢在白芸豆叶片上产卵。但以上报道的产卵基质在东亚小花蝽规模化繁育及卵低温保藏中均存在一定的局限性，主要问题包括卵孵化率低、保鲜性差、易腐烂、不耐冷藏等。
前人对小花蝽卵的低温保藏进行了相关的研究，邹卫辉等2004年以蚕豆嫩茎为产卵基质，发现东亚小花蝽卵在10℃冷藏11d以内其卵孵化率保持在50%以上。郭建英等2001年将产有东亚小花蝽卵的寿星花嫩茎、黄豆芽和燕子掌叶片置于4-6℃冰箱内进行低温保藏，研究发现，当用燕子掌叶片作为产卵基质时，冷藏1-9d，产于燕子掌叶片上的小花蝽卵的孵化率均在70%左右，但冷藏到11d的孵化率为33.3%，且冷藏15d以上，卵即不能孵化；当用寿星花嫩茎作为产卵基质时，冷藏15d时，产于寿星花嫩茎上的小花蝽卵的孵化率为25%，冷藏21d以上，卵即不能孵化。当用黄豆芽作为产卵基质时产于黄豆芽上的小花蝽卵较耐冷藏，冷藏20-27d时仍有50%左右的卵得以孵化。随后，郭建英等2002年以黄豆芽为产卵基质，发现东亚小花蝽卵在5℃冷藏19d内，卵孵化率保持75%以上，冷藏30d仍有40%的卵可以孵化。
但以上报道的燕子掌叶片、黄豆芽、寿星花嫩茎作为产卵基质在东亚小花蝽规模化实际生产中有一定的局限性，一是3种产卵基质保鲜性差，需要在东亚小花蝽成虫产卵和卵孵化的过程中用脱脂棉补水，否则容易干瘪，影响产卵量和孵化率，同时也增加操作的环节，提高了成本，效率也大大降低。二是在卵低温保藏的过程中也需要保湿才能维持产卵基质的新鲜程度，稳定性差，程序复杂。三是对东亚小花蝽卵保藏的时间较短，燕子掌叶片和寿星花嫩茎保藏超过15d后孵化率就不理想。虽然黄豆芽角燕子掌叶片和寿星花嫩茎保藏时间长，但黄豆芽作为产卵基质的产卵量较低，同时，实验数据主要是停留在研究层面，实际生产中操作性不强。
发明内容
为解决上述背景技术中提出的问题，本发明提供了一种适宜于规模化繁育的东亚小花蝽卵保藏方法，基于目前东亚小花蝽产卵基质及卵保藏中存在的问题及制约的因素，探索易获取、成本低、能补水、保鲜性好、耐冷藏、着卵多、孵化率高、可长期保藏的产卵基质及低温保藏方法，更好的为东亚小花蝽规模化繁育提供技术支撑。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种适宜于规模化繁育的东亚小花蝽卵保藏方法，包括产卵基质选择的研究和低温保藏方法的研究，产卵基质选择的研究方法如下：
A、在市场上购买新鲜的芸豆角、龙豆角和长豇豆角，清洗后用酒精对芸豆角、龙豆角和长豇豆角表面擦拭消毒，消毒晾干后待用；
B、虫种筛选，将采集来的东亚小花蝽成虫饲养建立出稳定种群后，筛选出东亚小花蝽1000对，每个养虫箱置入刚羽化的雌雄成虫20-25对；
C、在温度为25℃±1℃，相对湿度为75%±5%，光周期为16L﹕8D的条件下，以处理后的芸豆角、龙豆角和长豇豆角饲养虫种，观察东亚小花蝽的单雌产卵量，其中，芸豆角的平均单雌产卵量68.65粒，其次是龙豆角的平均单雌产卵量63.99粒，长豇豆角的单雌平均产卵量60.64粒；
D、孵化率观察，其中：芸豆角和龙豆角上卵在25℃条件下的孵化率和经10℃低温冷藏后孵化率均显著高于长豇豆角，因此，芸豆角和龙豆角作为东亚小花蝽人工规模化繁育、保藏和运输的产卵基质适合性更好，而芸豆角稍好于龙豆角，因此选定芸豆角为产卵基质；
低温保藏方法的研究包括恒温条件保藏的研究和变温条件保藏的研究， 以东亚小花蝽卵发育起点温度11.8℃为依据，以孵化率为评价指标，以芸豆角为产卵基质和贮藏对象，系统评价了5℃、8℃、11℃下贮藏不同时间对东亚小花蝽卵低温贮藏的影响；
恒温条件保藏的研究过程如下：
将东亚小花蝽卵块进行不同温度的低温贮藏处理后，其孵化率结果如图1所示，贮藏温度及时间对东亚小花蝽卵的孵化率影响极其显著，本试验中东亚小花蝽同期卵块在温度25℃±1℃，相对湿度为75%±5%，光周期为16L﹕8D的条件下的孵化率为90.04%；在11℃贮藏不同时间的卵孵化率最高，其次是8℃，而5℃的卵孵化率最低，且与8℃和11℃存在显著的差异，由此说明5℃低温影响了卵活力，不适于东亚小花蝽卵长期贮藏，而8-11℃低温均可储藏东亚小花蝽卵，卵在冷藏20d内，孵化率可达70％以上，各处理保藏20d后孵化率显著降低，25d时5℃、8℃、11℃保藏条件下的孵化率分别为7.24%、43.40%、42.06%；
变温条件保藏的研究过程如下：
为了进一步提高卵保藏25d以后卵的孵化率，对东亚小花蝽进行变温贮藏处理后，卵孵化率结果表明：变温处理对东亚小花蝽卵的孵化率影响极其显著，东亚小花蝽卵在11℃条件下保藏一定时间后转入14℃下保藏能显著提高卵孵化率，其中从变温保藏25d结果来看，11℃条件下保藏15d后转入14℃保藏10d的孵化率为79.20%，显著高于定温11℃条件下保藏25d的42.06%，孵化率提高近1倍；从变温保藏30d结果来看，11℃条件下保藏15d后转入14℃保藏15d的孵化率为60.17%，显著高于定温11℃条件下保藏30d的36.34%，孵化率提高近1倍；
基于上述低温保藏方法的研究，得出保藏温度及孵化率参照表，如图4所示，参照保藏温度及孵化率参照表的保藏方法如下：
E、收集带有当天新鲜产东亚小花蝽卵的产卵基质，用报纸包裹后装于保藏塑料瓶中，每瓶20根左右；
F、将保藏塑料瓶放于8℃-11℃的冷藏箱中；
G、根据东亚小花蝽实际生产需求和东亚小花蝽孵化率，在一定时间内取出带有卵的芸豆角放入饲养塑料瓶中进行孵化；
H、孵化时在饲养塑料瓶中放入1根新鲜的芸豆角增加瓶内湿度，同时为小花蝽补水，直至小花蝽孵化完成。
优选的，所述保藏塑料瓶瓶底直径为13.5cm、高21cm、瓶口直径为11.5cm的塑料瓶，保藏塑料瓶盖开设直径为10cm的圆口，并用100目的纱网密封用于透气，瓶壁和瓶底用小直径为1mm的电转转孔，保持保藏塑料瓶内外通气，防止芸豆角在低温下呼吸导致水珠产生。
优选的，所述饲养塑料瓶为直径8.5cm、高15cm的塑料瓶，塑料瓶盖开设直径为5cm的圆口，并100目的纱网密封，防止若虫逃逸和透气。
优选的，所述冷藏箱湿度为60%左右。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明，通过选取孵化率高、保鲜性好、耐腐烂、耐冷藏的芸豆角作为产卵基质，并通过变温保藏的方式提高了东亚小花蝽孵化率，加快了东亚小花蝽商品化和推广应用进程，有利于我国害虫的防治，是一种易获取、成本低、能补水、保鲜性好、耐冷藏、着卵多、孵化率高、可长期保藏的产卵基质及低温保藏方法，更好的为东亚小花蝽规模化繁育提供了技术支撑。
附图说明
附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。在附图中：
图1为本发明不同低温贮藏条件下东亚小花蝽卵孵化率的结果示意图；
图2为本发明变温贮藏25 d处理对东亚小花蝽卵孵化率的影响结果示意图；
图3为本发明变温贮藏30 d处理对东亚小花蝽卵孵化率的影响结果示意图；
图4为本发明保藏温度及孵化率参照表示意图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例
请参阅图1-4，本发明提供以下技术方案：一种适宜于规模化繁育的东亚小花蝽卵保藏方法，包括产卵基质选择的研究和低温保藏方法的研究，产卵基质选择的研究方法如下：
A、在市场上购买新鲜的芸豆角、龙豆角和长豇豆角，清洗后用酒精对芸豆角、龙豆角和长豇豆角表面擦拭消毒，消毒晾干后待用；
B、虫种筛选，将采集来的东亚小花蝽成虫饲养建立出稳定种群后，筛选出东亚小花蝽1000对，每个养虫箱置入刚羽化的雌雄成虫20-25对；
C、在温度为25℃±1℃，相对湿度为75%±5%，光周期为16L﹕8D的条件下，以处理后的芸豆角、龙豆角和长豇豆角饲养虫种，观察东亚小花蝽的单雌产卵量，其中，芸豆角的平均单雌产卵量68.65粒，其次是龙豆角的平均单雌产卵量63.99粒，长豇豆角的单雌平均产卵量60.64粒；
D、孵化率观察，其中：芸豆角和龙豆角上卵在25℃条件下的孵化率和经10℃低温冷藏后孵化率均显著高于长豇豆角，因此，芸豆角和龙豆角作为东亚小花蝽人工规模化繁育、保藏和运输的产卵基质适合性更好，而芸豆角稍好于龙豆角，因此选定芸豆角为产卵基质；
低温保藏方法的研究包括恒温条件保藏的研究和变温条件保藏的研究， 以东亚小花蝽卵发育起点温度11.8℃为依据，以孵化率为评价指标，以芸豆角为产卵基质和贮藏对象，系统评价了5℃、8℃、11℃下贮藏不同时间对东亚小花蝽卵低温贮藏的影响；
恒温条件保藏的研究过程如下：
将东亚小花蝽卵块进行不同温度的低温贮藏处理后，其孵化率结果如图1所示，贮藏温度及时间对东亚小花蝽卵的孵化率影响极其显著，本试验中东亚小花蝽同期卵块在温度25℃±1℃，相对湿度为75%±5%，光周期为16L﹕8D的条件下的孵化率为90.04%；在11℃贮藏不同时间的卵孵化率最高，其次是8℃，而5℃的卵孵化率最低，且与8℃和11℃存在显著的差异，由此说明5℃低温影响了卵活力，不适于东亚小花蝽卵长期贮藏，而8-11℃低温均可储藏东亚小花蝽卵，卵在冷藏20d内，孵化率可达70％以上，各处理保藏20d后孵化率显著降低，25d时5℃、8℃、11℃保藏条件下的孵化率分别为7.24%、43.40%、42.06%；
变温条件保藏的研究过程如下：
为了进一步提高卵保藏25d以后卵的孵化率，对东亚小花蝽进行变温贮藏处理后，卵孵化率结果表明：变温处理对东亚小花蝽卵的孵化率影响极其显著，东亚小花蝽卵在11℃条件下保藏一定时间后转入14℃下保藏能显著提高卵孵化率，其中从变温保藏25d结果来看，11℃条件下保藏15d后转入14℃保藏10d的孵化率为79.20%，显著高于定温11℃条件下保藏25d的42.06%，孵化率提高近1倍；从变温保藏30d结果来看，11℃条件下保藏15d后转入14℃保藏15d的孵化率为60.17%，显著高于定温11℃条件下保藏30d的36.34%，孵化率提高近1倍；
基于上述低温保藏方法的研究，得出保藏温度及孵化率参照表，如图4所示，参照保藏温度及孵化率参照表的保藏方法如下：
E、收集带有当天新鲜产东亚小花蝽卵的产卵基质，用报纸包裹后装于保藏塑料瓶中，每瓶20根左右；
F、将保藏塑料瓶放于8℃-11℃的冷藏箱中；
G、根据东亚小花蝽实际生产需求和东亚小花蝽孵化率，在一定时间内取出带有卵的芸豆角放入饲养塑料瓶中进行孵化；
H、孵化时在饲养塑料瓶中放入1根新鲜的芸豆角增加瓶内湿度，同时为小花蝽补水，直至小花蝽孵化完成。
具体的，所述保藏塑料瓶瓶底直径为13.5cm、高21cm、瓶口直径为11.5cm的塑料瓶，保藏塑料瓶盖开设直径为10cm的圆口，并用100目的纱网密封用于透气，瓶壁和瓶底用小直径为1mm的电转转孔，保持保藏塑料瓶内外通气，防止芸豆角在低温下呼吸导致水珠产生。
具体的，所述饲养塑料瓶为直径8.5cm、高15cm的塑料瓶，塑料瓶盖开设直径为5cm的圆口，并100目的纱网密封，防止若虫逃逸和透气。
具体的，所述冷藏箱湿度为60%左右。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (4)
1.一种适宜于规模化繁育的东亚小花蝽卵保藏方法，其特征在于：包括产卵基质选择的研究和低温保藏方法的研究，产卵基质选择的研究方法如下：
A、在市场上购买新鲜的芸豆角、龙豆角和长豇豆角，清洗后用酒精对芸豆角、龙豆角和长豇豆角表面擦拭消毒，消毒晾干后待用；
B、虫种筛选，将采集来的东亚小花蝽成虫饲养建立出稳定种群后，筛选出东亚小花蝽1000对，每个养虫箱置入刚羽化的雌雄成虫20-25对；
C、在温度为25℃±1℃，相对湿度为75%±5%，光周期为16L﹕8D的条件下，以处理后的芸豆角、龙豆角和长豇豆角饲养虫种，观察东亚小花蝽的单雌产卵量，其中芸豆角的平均单雌产卵量68.65粒，其次是龙豆角的平均单雌产卵量63.99粒，长豇豆角的单雌平均产卵量60.64粒；
D、孵化率观察，其中：芸豆角和龙豆角上卵在25℃条件下的孵化率和经10℃低温冷藏后孵化率均显著高于长豇豆角，因此，芸豆角和龙豆角作为东亚小花蝽人工规模化繁育、保藏和运输的产卵基质适合性更好，而芸豆角稍好于龙豆角，因此选定芸豆角为产卵基质；
低温保藏方法的研究包括恒温条件保藏的研究和变温条件保藏的研究， 以东亚小花蝽卵发育起点温度11.8℃为依据，以孵化率为评价指标，以芸豆角为产卵基质和贮藏对象，系统评价了5℃、8℃、11℃下贮藏不同时间对东亚小花蝽卵低温贮藏的影响；
恒温条件保藏的研究过程如下：
将东亚小花蝽卵块进行不同温度的低温贮藏处理后，孵化率结果表明，贮藏温度及时间对东亚小花蝽卵的孵化率影响极其显著，东亚小花蝽同期卵块在温度25℃±1℃，相对湿度为75%±5%，光周期为16L﹕8D的条件下的孵化率为90.04%；在11℃贮藏不同时间的卵孵化率最高，其次是8℃，而5℃的卵孵化率最低，且与8℃和11℃存在显著的差异，由此说明5℃低温影响了卵活力，不适于东亚小花蝽卵长期贮藏，而8-11℃低温均可储藏东亚小花蝽卵，卵在冷藏20d内，孵化率可达70％以上，各处理保藏20d后孵化率显著降低，25d时5℃、8℃、11℃保藏条件下的孵化率分别为7.24%、43.40%、42.06%；
变温条件保藏的研究过程如下：
为了进一步提高卵保藏25d以后卵的孵化率，对东亚小花蝽进行变温贮藏处理后，卵孵化率结果表明：变温处理对东亚小花蝽卵的孵化率影响极其显著，东亚小花蝽卵在11℃条件下保藏一定时间后转入14℃下保藏能显著提高卵孵化率，其中从变温保藏25d结果来看，11℃条件下保藏15d后转入14℃保藏10d的孵化率为79.20%，显著高于定温11℃条件下保藏25d的42.06%，孵化率提高近1倍；从变温保藏30d结果来看，11℃条件下保藏15d后转入14℃保藏15d的孵化率为60.17%，显著高于定温11℃条件下保藏30d的36.34%，孵化率提高近1倍；
基于上述低温保藏方法的研究，得出保藏温度及孵化率参照表，参照保藏温度及孵化率参照表的保藏方法如下：
E、收集带有当天新鲜产东亚小花蝽卵的产卵基质，用报纸包裹后装于保藏塑料瓶中，每瓶20根左右；
F、将保藏塑料瓶放于8℃-11℃的冷藏箱中；
G、根据东亚小花蝽实际生产需求和东亚小花蝽孵化率，在一定时间内取出带有卵的芸豆角放入饲养塑料瓶中进行孵化；
H、孵化时在饲养塑料瓶中放入1根新鲜的芸豆角增加瓶内湿度，同时为小花蝽补水，直至小花蝽孵化完成。
2.根据权利要求1所述的一种适宜于规模化繁育的东亚小花蝽卵保藏方法，其特征在于：所述保藏塑料瓶瓶底直径为13.5cm、高21cm、瓶口直径为11.5cm的塑料瓶，保藏塑料瓶盖开设直径为10cm的圆口，并用100目的纱网密封用于透气，瓶壁和瓶底用小直径为1mm的电转转孔，保持保藏塑料瓶内外通气，防止芸豆角在低温下呼吸导致水珠产生。
3.根据权利要求1所述的一种适宜于规模化繁育的东亚小花蝽卵保藏方法，其特征在于：所述饲养塑料瓶为直径8.5cm、高15cm的塑料瓶，塑料瓶盖开设直径为5cm的圆口，并100目的纱网密封，防止若虫逃逸和透气。
4.根据权利要求1所述的一种适宜于规模化繁育的东亚小花蝽卵保藏方法，其特征在于：所述冷藏箱湿度为60%左右。
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