CN112955157A - 用于降低接受基于铂的化学疗法的小儿患者的耳毒性的方法 - Google Patents

Abstract

本文描述了一种用于消除或降低接受基于铂的化学治疗药物的患者的耳毒性的方法。具体地，描述了降低小儿患者的耳毒性的方法。本文所描述的方法包含向有需要的患者施用有效量的硫代硫酸钠以降低耳毒性。

Description

用于降低接受基于铂的化学疗法的小儿患者的耳毒性的方法

相关申请的交叉引用

本申请要求于2017年11月29日提交的美国专利申请第15/826,243号的权益，所述美国专利申请的全部内容通过引用的方式并入本文。

技术领域

本文描述了一种用于消除或降低接受基于铂的化学治疗药物的患者的耳毒性的方法。具体地，描述了降低小儿患者的耳毒性的方法。

政府利益

本发明是在美国国立卫生研究院(National Institutes of Health)授予的R01-CA137488和R01-NS044687下由美国政府支持完成的。美国政府享有本发明的一定权利。

背景技术

基于铂的治疗药物是在各种小儿恶性肿瘤中使用的治疗方案的非常重要的组成部分，所述小儿恶性肿瘤包含神经母细胞瘤、肝母细胞瘤、髓母细胞瘤、骨肉瘤、恶性生殖细胞肿瘤和鼻咽癌。不幸的是，在常用的剂量和时间表下，如顺铂(cisplatin)和卡铂(carboplatin)等基于铂的治疗药物频繁地引起进行性、双侧、不可逆且常常伴有耳鸣的听力损失。由于耳蜗外毛细胞的死亡，基于铂化学治疗药物的听力损失可能会影响所有听力频率。

这些毒性可以受剂量限制，并且在临床上常常是显著的，特别是对于严重依赖正常听力进行认知、心理和言语发育的幼儿来说。大约40％的儿童发展为顺铂诱导的听力损失，其中某些弱势群体的发生率接近100％。即使是轻度听力损失对小儿的影响也是很大的，尤其是降低了语言习得、学习、学业表现、社交和情绪发展以及生活质量。因此，需要安全且有效的方法来治疗小儿患者以降低这些患者的耳毒性和听力损失，而又不损害基于铂的治疗药物的功效。

发明内容

本文描述了用于降低已经接受基于铂的化学治疗药物的患者的耳毒性的方法。具体地，描述了用于降低小儿患者的耳毒性的方法。所述方法包含在施用基于铂的化学治疗药物之后向患者施用有效量的硫代硫酸钠(STS)。如本文所描述的，发现施用STS不会对基于铂的化学治疗药物的功效产生不利影响并且降低了小儿患者的耳毒性的发生率和严重程度。

一个实施例是一种降低患有癌症并接受基于铂的化学治疗药物的患者的耳毒性的方法，所述方法包括向所述患者施用有效量的硫代硫酸钠。

另一个实施例是一种预防性地治疗患有癌症并接受基于铂的化学治疗药物的患者以降低所述患者招致耳毒性的可能性的方法，所述方法包括向所述患者施用有效量的硫代硫酸钠。

另一个实施例是一种降低患有癌症并接受基于铂的化学治疗药物的患者的长期耳毒性的方法，所述方法包括向所述患者施用有效量的硫代硫酸钠。

另一个实施例是一种降低患有癌症并接受基于铂的化学治疗药物的患者的耳腔中的顺铂的浓度的方法，所述方法包括向所述患者施用有效量的硫代硫酸钠，其中在所述耳腔中基本上检测不到顺铂，并且其中被施用所述硫代硫酸钠的所述患者更不易于因所述基于铂的化学治疗药物而招致耳毒性。

另一个实施例是一种抑制与在患者体内施用基于铂的化学治疗化合物相关的耳毒性效应的方法，所述方法包括向所述患者施用有效量的硫代硫酸钠。

在本文所描述的一些实施例中，所述患者在基因座rsl872328处的基因ACYP2中携带有单核苷酸多态性。在一些实施例中，被施用硫代硫酸钠的所述患者经历耳毒性的可能性比未施用硫代硫酸钠的患者低约20％到约75％。在一些实施例中，被施用硫代硫酸钠的所述患者经历耳毒性的可能性比未施用硫代硫酸钠的患者低约50％。在一些实施例中，耳毒性包括听力损失、平衡失调、耳鸣或听力敏感性或其组合。

在本文所描述的一些实施例中，所述基于铂的化学治疗药物选自顺铂、卡铂、奥沙利铂(oxaliplatin)、奈达铂(nedaplatin)、四硝酸三铂(triplatin tetranitrate)、菲铂(phenanthriplatin)、吡铂(picoplatin)和赛特铂(satraplatin)。在一些实施例中，所述基于铂的化学治疗药物是顺铂。

在一些实施例中，所治疗的所述癌症是局部的或播散的。

在一些实施例中，所治疗的所述癌症是局部的。在一些实施例中，所治疗的所述癌症选自生殖细胞肿瘤、肝母细胞瘤、髓母细胞瘤、神经母细胞瘤和骨肉瘤。在一些实施例中，所治疗的所述癌症是肝母细胞瘤。在一些实施例中，所治疗的所述癌症是标准风险癌症、中等风险癌症或高风险癌症。在一些实施例中，所治疗的所述癌症是标准风险癌症或中等风险癌症。在一些实施例中，所治疗的所述癌症是标准风险肝母细胞瘤或中等风险肝母细胞瘤。

在一些实施例中，所述硫代硫酸钠在施用所述基于铂的化学治疗药物之前、同时或之后施用。在一些实施例中，所述硫代硫酸钠在施用所述基于铂的化学治疗药物之后约0.5小时到约10小时施用。在一些实施例中，所述硫代硫酸钠是静脉内施用的。在一些实施例中，在所述基于铂的化学治疗药物的每个周期，硫代硫酸钠的所述有效量为约5g/m²到约25g/m²。在一些实施例中，在每个周期用剂量为约1mg/kg到约5mg/kg或约10mg/m²到约300mg/m²的所述基于铂的化学治疗药物来治疗所述患者。

在本文所描述的一些实施例中，所述耳毒性由包括以下的一个或多个标准确定：耳鸣功能指数、布罗克分级(Brock grading)、美国言语语言听力协会标准(AmericanSpeech-Language-Hearing Association criteria)或国际儿科肿瘤学会波士顿耳毒性量表(International Society of Pediatric Oncology Boston Ototoxicity Scale)。在一些实施例中，所述耳毒性通过测量在包括500Hz、1,000Hz、2,000Hz、4,000Hz或8,000Hz或其频率组合的一个或多个频率下的听力损失来确定，其中相对于在所述患者接受基于铂的化学治疗药物或硫代硫酸钠或两者之前的基线量度来计算听力变化。

在本文所描述的一些实施例中，所述耳毒性由包括以下的一个或多个标准确定：a).以在单个频率下损失20dB来量度的听力下降；b).以在两个连续频率下损失10dB来量度的听力下降；c).在先前获得响应的三个连续测试频率下失去响应；d).双侧高频听力下降，其特征在于：i).在所有频率下听力损失均<40dB，这指示0级或最小听力损失；ii).在仅8,000Hz下听力损失≥40dB，这指示1级或轻度听力损失；iii).在4,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示2级或中度听力损失；iv).在2,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示3级或明显听力损失；v).在1,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示4级或重度听力损失；或者e).听力下降，其特征在于：i).在所有频率下听力损失均≤20dB，这指示0级听力损失；ii)在高于4,000Hz下HL>20dB，这指示1级听力损失；iii).在4,000Hz和更高频率下HL>20dB，这指示2级听力损失；iv).在2,000Hz或3,000Hz下HL>20dB，这指示3级听力损失；v).在2,000Hz和更高频率下HL>40dB，这指示1级听力损失；或者f).耳鸣功能指数提高；并且其中相对于在所述患者接受基于铂的化学治疗药物或硫代硫酸钠或两者之前的基线量度来计算听力变化。在一些实施例中，与未施用硫代硫酸钠的小儿患者相比，被施用硫代硫酸钠的所述小儿患者的耳毒性经上文所描述的标准d)评估有所降低。

在本文所描述的一些实施例中，与未施用硫代硫酸钠的患者相比，向患者施用硫代硫酸钠不会导致血清肌酐升高或肾小球滤过率降低。

在一些实施例中，与未施用硫代硫酸钠的患者相比，向患者施用硫代硫酸钠不影响无复发生存率或总生存率。在一些实施例中，向患者施用硫代硫酸钠不会导致包括发热性嗜中性白血球减少症、感染、低镁症、高钠血症、呕吐或恶心的一种或多种不良事件的发生率增加。

在本文所描述的一些实施例中，在向患者施用所述基于铂的化学治疗药物和所述硫代硫酸钠之后至少4周的时间测量耳毒性。

在本文所描述的一些实施例中，所述患者是小儿患者。在本文所描述的一些实施例中，所述小儿患者为1周到18岁。在一些实施例中，所述小儿患者为约12岁或更小。

在一些实施例中，所述小儿患者为约5岁或更小。在一些实施例中，所述小儿患者为约2岁或更小。在一些实施例中，所述小儿患者为约1岁或更小。

另一个实施例是一种用于治疗小儿患者的肝母细胞瘤的给药方案，所述给药方案包括：a).每个周期施用剂量为约1mg/kg到约5mg/kg或约10mg/m²到约300mg/m²的顺铂；b).在所述顺铂的每个周期施用约5g/m²到约25g/m²的硫代硫酸钠，其中所述硫代硫酸钠在施用所述顺铂后约2小时到约6小时施用；并且其中当向小儿患者给药时，所述给药方案与向小儿患者给药的不包含所述硫代硫酸钠的给药方案相比降低了耳毒性，其中耳毒性由选自以下的一个或多个标准确定：a).以在单个频率下损失20dB来量度的听力下降；b).以在两个连续频率下损失10dB来量度的听力下降；c).在先前获得响应的三个连续测试频率下失去响应；d).双侧高频听力下降，其特征在于以下标准：i).在所有频率下听力损失均<40dB，这指示0级或最小听力损失；ii).在仅8,000Hz下听力损失≥40dB，这指示1级或轻度听力损失；iii).在4,0Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示2级或中度听力损失；iv).在2,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示3级或明显听力损失；v).在1,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示4级或重度听力损失；或者e).听力下降，其特征在于以下标准：i).在所有频率下听力损失均≤20dB，这指示0级听力损失；ii)在高于4,000Hz下HL>20dB，这指示1级听力损失；iii).在4,000Hz和更高频率下HL>20dB，这指示2级听力损失；iv).在2,000Hz或3,000Hz下HL>20dB，这指示3级听力损失；v).在2,000Hz和更高频率下HL>40dB，这指示1级听力损失；其中相对于在所述患者接受基于铂的化学治疗药物或硫代硫酸钠或两者之前的基线量度来计算听力变化。

另一个实施例是一种降低患有标准风险或中度风险肝母细胞瘤并接受每个周期剂量为约1mg/kg到约5mg/kg或约10mg/m²到约300mg/m²的顺铂的约12岁和更小的小儿患者的耳毒性的方法，所述方法包括在所述顺铂的每个周期，在施用所述顺铂后约六小时施用约5g/m²到约25g/m²的硫代硫酸钠，其中耳毒性由选自以下的一个或多个标准确定：a).以在单个频率下损失20dB来量度的听力下降；b).以在两个连续频率下损失10dB来量度的听力下降；c).在先前获得响应的三个连续测试频率下失去响应；d).双侧高频听力下降，其特征在于以下标准：i).在所有频率下听力损失均<40dB，这指示0级或最小听力损失；ii).在仅8,000Hz下听力损失≥40dB，这指示1级或轻度听力损失；iii).在4,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示2级或中度听力损失；iv).在2,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示3级或明显听力损失；v).在1,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示4级或重度听力损失；或者e).听力下降，其特征在于以下标准：i).在所有频率下听力损失均≤20dB，这指示0级听力损失；ii)在高于4,000Hz下HL>20dB，这指示1级听力损失；iii).在4,000Hz和更高频率下HL>20dB，这指示2级听力损失；iv).在2,000Hz或3,000Hz下HL>20dB，这指示3级听力损失；v).在2,000Hz和更高频率下HL>40dB，这指示1级听力损失；其中相对于在所述患者接受基于铂的化学治疗药物或硫代硫酸钠或两者之前的基线量度来计算听力变化；并且其中与未施用硫代硫酸钠的小儿患者相比，施用硫代硫酸钠实质上不影响无复发生存率或总生存率；并且其中施用硫代硫酸钠不会导致包括发热性嗜中性白血球减少症、感染、低镁症、高钠血症、呕吐或恶心的一种或多种不良事件的发生率实质上增加。

附图说明

图1是实例1的研究的患者资格和测试组(对照组或经STS治疗组)以及在主要端点分析中包含的患者数量的流程图。

图2是提供了纳入实例1的研究中的患者的人口统计特征的表。

图3是提供了对实例1的研究的对照(观察)组和STS组两组中的患者肿瘤类型的分类的表。

图4是提供了实例1的研究的对照(观察)组和STS组两组中的患者肿瘤类型以及相关的无事件生存率(EFS)和总生存率(OS)的另外的分类信息的表。

图5A是示出了实例1的研究的所有126名患者的无事件生存率和总生存率的卡普兰-迈耶(Kaplan-Meier)曲线；平均随访时间为2.9年。

图5B是示出了实例1的研究的所有126名患者的无事件生存率和总生存率的卡普兰-迈耶曲线；平均随访时间为2.9年。

图6是示出了实例1的研究的观察(对照)组或STS治疗组的听力损失的条形图。

图7是示出了实例1的研究的观察(对照)组或STS治疗组的听力损失的条形图，其中按年龄<5岁或≥5岁对患者进行了细分。

图8是示出了实例1的研究的观察(对照)组或STS治疗组的听力损失的条形图，其中根据局部或播散性肿瘤对患者进行了细分。

图9是示出了实例1的研究的观察(对照)组或STS治疗组的听力损失的条形图，其中根据肿瘤类型对患者进行了细分。

图10是示出了实例1的研究的观察(对照)组或STS治疗组的平均听力阈值(以dB为单位)的曲线图，示出了治疗前和治疗后的听力阈值。

图11是提供了纳入实例1的研究的患有局部肿瘤的患者的人口统计特征的表。

图12是提供了纳入实例1的研究的患有局部肿瘤的患者的人口统计特征的表。

图13A是示出了实例1的研究的通过仅患有局部肿瘤的患者细分的无事件生存率和总生存率的卡普兰-迈耶曲线。

图13B是示出了实例1的研究的通过仅患有局部肿瘤的患者细分的无事件生存率和总生存率的卡普兰-迈耶曲线。

图14是提供了纳入实例1的研究的患有播散性疾病的患者的肿瘤的特性的表。

图15是提供了纳入实例1的研究的患有播散性疾病的患者的人口统计特征的表。

图16A是示出了实例1的研究的通过仅患有播散性肿瘤的患者细分的无事件生存率的卡普兰-迈耶曲线。

图16B是示出了实例1的研究的通过仅患有播散性肿瘤的患者细分的事件总生存率的卡普兰-迈耶曲线。

图17是示出了对实例1的研究的所有患者的将其它肿瘤的组排除在外的无事件生存率的事后分析的卡普兰-迈耶曲线。

图18是示出了对实例1的研究的所有患者的将其它肿瘤的组排除在外的总生存率的事后分析的卡普兰-迈耶曲线。

图19是提供了纳入实例1的研究的患有生殖细胞肿瘤的患者的人口统计特征的表。

图20A是示出了对实例1的研究的患有生殖细胞肿瘤的患者的无事件生存率的分析的卡普兰-迈耶曲线。

图20B是示出了对实例1的研究的患有生殖细胞肿瘤的患者的总生存率的分析的卡普兰-迈耶曲线。

图21是提供了纳入实例1的研究的患有肝母细胞瘤肿瘤的患者的人口统计特征的表。

图22A是示出了对实例1的研究的患有肝母细胞瘤肿瘤的患者的无事件生存率的分析的卡普兰-迈耶曲线。

图22B是示出了对实例1的研究的患有肝母细胞瘤肿瘤的患者的总生存率的分析的卡普兰-迈耶曲线。

图23是提供了纳入实例1的研究的患有髓母细胞瘤肿瘤的患者的人口统计特征的表。

图24A是示出了对实例1的研究的患有髓母细胞瘤肿瘤的患者的无事件生存率的分析的卡普兰-迈耶曲线。

图24B是示出了对实例1的研究的患有髓母细胞瘤肿瘤的患者的总生存率的分析的卡普兰-迈耶曲线。

图25是提供了纳入实例1的研究的患有神经母细胞瘤肿瘤的患者的人口统计特征的表。

图26A是示出了对实例1的研究的患有神经母细胞瘤肿瘤的患者的无事件生存率的分析的卡普兰-迈耶曲线。

图26B是示出了对实例1的研究的患有神经母细胞瘤肿瘤的患者的总生存率的分析的卡普兰-迈耶曲线。

图27是提供了纳入实例1的研究的患有骨肉瘤肿瘤的患者的人口统计特征的表。

图28A是示出了对实例1的研究的患有骨肉瘤肿瘤的患者的无事件生存率的分析的卡普兰-迈耶曲线。

图28B是示出了对实例1的研究的患有骨肉瘤肿瘤的患者的总生存率的分析的卡普兰-迈耶曲线。

图29A是示出了对实例1的研究的所有患者的将其它肿瘤的组排除在外的无事件生存率的事后分析的卡普兰-迈耶曲线。

图29B是示出了对实例1的研究的所有患者的将其它肿瘤的组排除在外的总生存率的事后分析的卡普兰-迈耶曲线。

图30是提供了纳入实例1的研究的5岁以下患者的人口统计特征的表。

图31是提供了纳入实例1的研究的5岁以上患者的肿瘤的特性的表。

图32A是示出了对实例1的研究的5岁以上患者的无事件生存率的分析的卡普兰-迈耶曲线。

图32B是示出了对实例1的研究的5岁以下患者的总生存率的分析的卡普兰-迈耶曲线。

图33是提供了纳入实例1的研究的大于或等于5岁患者的人口统计特征的表。

图34是提供了纳入实例1的研究的大于或等于5岁患者的肿瘤的特性的表。

图35A是示出了对实例1的研究的大于或等于5岁患者的无事件生存率的分析的卡普兰-迈耶曲线。

图35B是示出了对实例1的研究的大于或等于5岁患者的总生存率的分析的卡普兰-迈耶曲线。

图36是示出了实例2的研究的研究设计的示意图。

图37是实例2的研究的患者资格和测试组(对照组或经STS治疗组)以及在主要端点分析中包含的患者数量的流程图。

图38是提供了纳入实例2的研究中的患者的人口统计特征的表。

图39是示出了实例2的研究的对照组(仅用顺铂治疗)和顺铂+STS组两组的包含3或4级发热性嗜中性白血球减少症、本发明、低镁症、高钠血症、呕吐或恶心的不良事件的发生率的表。

图40是示出了实例2的研究的顺铂或顺铂+STS治疗组的根据布罗克等级≥1的听力结果的条形图。

图41是示出了实例2的研究的顺铂或顺铂+STS治疗组的根据布罗克等级0-4的听力结果的条形图。

图42A是示出了对纳入实例2的研究的通过治疗组分隔开的患者的无事件生存率的分析的卡普兰-迈耶曲线；中值随访时间为52个月。

图42B是示出了对纳入实例2的研究的通过治疗组分隔开的患者的总生存率的分析的卡普兰-迈耶曲线；中值随访时间为52个月。

具体实施方式

术语“患者”是指包含哺乳动物和人的任何受试者。患者可以患有疾病或疑似患有疾病并且因此正在用药物治疗。在一些情况下，患者是哺乳动物，如狗、鸡、猫、马或灵长类动物。在一些情况下，如本文所使用的，术语“患者”是指人(例如，男人、女人或儿童)。在一些情况下，如本文所使用的，术语“患者”是指动物模型研究的实验动物。患者或受试者可以是任何年龄、性别或其组合。在如本文进一步描述的一些实施例中，用如顺铂等基于铂的化学治疗药物来治疗患者，然后施用药物硫代硫酸钠。

术语“小儿患者”是指小儿哺乳动物和人。在一些情况下，患者是哺乳动物，如狗、鸡、猫、马或灵长类动物或小狗、小鸡、小猫、小马或小雌马或婴儿。小儿患者可以是任何种族或性别。小儿患者可以是任何年龄，所述年龄将会被本领域的技术人员理解为医学上和兽医学上的小儿患者。例如，人类小儿患者可以是新生儿一直到21岁。新生小儿应理解为出生到1个月大；婴儿为1个月大到2岁；儿童为2岁到12岁；并且青少年为12岁到21岁。小儿患者可以患有疾病或疑似患有疾病并且因此正在用药物治疗。在如本文进一步描述的一些实施例中，用如顺铂等基于铂的化学治疗药物来治疗小儿患者，然后施用药物硫代硫酸钠。

术语“耳毒性”是指影响耳朵的任何类型的毒性。毒性可以是针对耳蜗(例如，耳蜗毒性)、耳蜗毛细胞、听觉神经或前庭系统或在耳朵中发现的这些系统中的任何系统或这些系统中的任何系统的组合。毒性可以表现为包括听力损失、感觉神经性听力损失、平衡失调、耳鸣或听力敏感性或其组合。当提及听力损失时，引起听力损失的毒性的量可以是轻度、中度、重度、极大或导致完全性耳聋的完全毒性。可替代地，听力损失可以在包含高频和低频两者以及对哺乳动物听力正常的频率的所有迭代的特定频率下出现。毒性可以是单侧的、双侧的、双侧对称的或双侧不对称的(一只耳朵比另一只耳朵受影响更大)。

如本文所使用的术语“生物样品”或“样品”是指获自或源自患者的样品。举例来说，生物样品包括选自由以下组成的组的材料：体液、血液、全血、血浆、血清、粘液分泌物、唾液、脑脊液(CSF)、支气管肺泡灌洗液(BALF)、尿液、眼液(例如，玻璃状液、房水)、淋巴液、淋巴结组织、脾组织、骨髓和来自听觉腔的流体。

如本文所描述的，发现STS降低了用基于铂的化学治疗药物治疗的小儿患者的耳毒性。进一步令人惊讶地发现，12岁以下儿童有耳毒性的比率较高，并且5岁以下儿童面临的风险甚至更大。进一步发现，在基于铂的化学治疗药物(即，顺铂)后施用STS能够显著降低这些小儿患者的耳毒性。具体地，发现STS可以降低耳毒性的严重程度，如布罗克2级和3级耳毒性。进一步地，已鉴别出顺铂暴露总量或累积剂量不会干扰STS介导的耳保护作用。另外，发现当与局部(未播散)癌症一起使用时，STS非常适合作为耳保护性药物。

STS是具有还原剂性质的水溶性硫醇化合物并且作为急性氰化物中毒的既定解毒剂可商购获得。STS是还原剂并且已经在肿瘤学中用于预防顺铂肾毒性、卡铂耳毒性并用作各种化学治疗剂外渗的解毒剂。硫代硫酸钠降低由顺铂引起的肾毒性和由卡铂引起的耳毒性的机制尚不完全清楚。提议的作用机制涉及其硫醇基，所述硫醇基使其充当自由基清除剂和/或通过共价结合来使铂化合物失活。当同时或紧密接近地给予药物时，硫代硫酸钠与顺铂不可逆地反应以形成Pt(S₂O₃)₄。还据信，硫代硫酸钠通过减少向肾脏递送顺铂并通过中和硫代硫酸钠高度集中的肾脏中的顺铂来防止肾毒性。在IV注射之后，硫代硫酸钠分布于整个细胞外液中。一些硫代硫酸钠在肝脏中转化为硫酸盐。高达95％原样排泄于尿液中。生物学半衰期为0.65小时(范围：取决于剂量，16.5-182分钟)。当静脉内给予时，STS快速地被肾脏排泄。

虽然不受任何理论束缚，但据信STS在预防顺铂诱导的耳毒性方面的生物效应包含STS与亲电性铂分子结合、清除活性氧类以及STS集中在耳蜗内淋巴中。因此，单次有效剂量清除了所有剩余的铂化学治疗药物，使得其无法累积并且不会损坏耳蜗毛。尽管其具有顺铂结合性质，但两项III期临床试验的结果进一步证明，当在施用顺铂后施用STS时，基于顺铂的化学治疗药物在小儿患者体内的功效不受影响。

另外，STS不会对包含阿霉素(doxorubicin)和依托泊苷(etoposide)在内的几种其它基于非铂的化学治疗药物的功效产生不利影响。小细胞肺癌细胞培养物的体外研究表明，立即或延迟添加STS、然后温育72小时没有降低依托泊苷的细胞毒性。类似的研究表明，通过STS没有降低阿霉素、卡莫司汀(carmustine)(BCNU)、紫杉醇(paclitaxel)或甲氨蝶呤(methotrexate)的抗肿瘤活性。由于STS能够清除游离的含铂化合物，因此STS如本文的实例中进一步所描述的在临床上进行了广泛测试，并且发现STS是用于小儿患者的非常有效的耳保护性化合物。

本文描述了用于降低患有癌症并且正在接受用于治疗癌症的基于铂的化学治疗药物的患者(即，小儿患者)的耳毒性的方法。所述方法包含向患者施用有效量的STS。发现STS显著降低了耳毒性的风险，特别是在小儿患者群体中。因此，本文所描述的一个实施例是一种用于降低患有癌症并接受基于铂的化学治疗药物的小儿患者的耳毒性的方法，所述方法包括向小儿患者施用有效量的STS。在一些方面，小儿患者已经招致耳毒性，并且STS的施用减少了小儿患者未来招致的耳毒性的量。

通过在施用基于顺铂的化学治疗药物之后用STS治疗显著降低了小儿患者具有可检测到的耳毒性，例如通过布罗克量表测得的听力损失≥1的风险。耳毒性的风险与小儿患者未接受STS有关。因此，在一些实施例中，通过STS施用，小儿患者招致任何耳毒性的可能性降低了约10％到约100％、约30％到约90％或约40％到约70％，包含指定范围内的每个整数。在一些实施例中，通过STS施用，小儿患者招致任何耳毒性的风险降低了约10％、约20％、约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约90％或甚至约100％。在一些方面，根据ASHA定义的听力损失标准，小儿患者招致耳毒性的风险为约50％。

类似地，用STS治疗小儿患者可以进一步降低患有癌症并接受基于铂的化学治疗药物的小儿患者的长期耳毒性。已知的是，用STS治疗后，小儿患者可能在用基于铂的化学治疗药物连续治疗后数周、数月或甚至数年表现出耳毒性。因此，本文所描述的另一个实施例是一种降低患有癌症并接受基于铂的化学治疗药物的小儿患者的长期耳毒性的方法，所述方法包括向小儿患者施用有效量的硫代硫酸钠。

如上文所描述的，认为如顺铂等基于铂的化学治疗剂通过集中在患者(例如，小儿患者)的耳腔中来发挥耳毒性效应。本文进一步预期STS可以通过与基于铂的化学治疗剂结合并减少其在耳腔中的累积来减少耳腔中的药剂的量。本文所描述的另一个实施例是一种降低患有癌症并接受基于铂的化学治疗药物的小儿患者的耳腔中的顺铂的浓度的方法，所述方法包括向小儿患者施用有效量的硫代硫酸钠。在一些方面，与接受基于铂的化学治疗药物但没有接受STS的小儿患者相比，顺铂在耳腔中的浓度降低了约50％、约60％、约70％、约80％、约90％或约100％。在一些方面，在耳腔中检测不到顺铂的浓度。在一些方面，因为减少了耳腔中的基于铂的化学治疗药物的量，所以被施用STS的患者更不易于招致耳毒性。用于检测耳腔中的顺铂的方法包含从耳腔中提取样品并测量存在于样品中的顺铂的量，例如，通过高效液相色谱法(HPLC)或本领域已知的其它方法。

本文所描述的方法还可用于预防或抑制患有癌症并且正在接受用于治疗癌症的基于铂的化学治疗药物的小儿患者的耳毒性。发现小儿患者特别易于招致耳毒性，并且预防性地治疗小儿患者可以降低小儿患者的耳毒性。因此，本文所描述的另一个实施例是一种用有效量的STS预防性地治疗患有癌症并接受基于铂的化学治疗药物的小儿患者的方法，其中所述治疗降低了小儿患者招致耳毒性的可能性。

已经确定某些基因变体可能导致小儿患者具有耳毒性的可能性增加并且患者的耳毒性的严重程度增加。已经示出TPMT、COMT和ABCC3基因使小儿患者面临招致耳毒性的更大风险(参见Ross,C.J.等人,TPMT和COMT的基因变体与接受顺铂化疗的儿童的听力损失有关(Genetic variants in TPMT and COMT are associated with hearing loss inchildren receiving cisplatin chemotherapy)《自然遗传学(Nat.Genet.)》41,1345-1349(2009)；以及Pussegoda,K.等人,TPMT和ABCC3基因变体的复制与顺铂诱导的儿童听力损失高度相关(Replication of TPMT and ABCC3 genetic variants is highlyassociated with cisplatin-induced hearing loss in children)《临床药理学与治疗学(Clin.Pharmacol.Ther.)》94,243-251(2013))。另外，最近示出了，在基因座rsl872328处的ACYP2基因的单核苷酸多态性与基于顺铂的耳毒性相关(参见Xu,K.等人,ACYP2的常见变体会影响对顺铂诱导的听力损失的易感性(Common variants in ACYP2 influencesusceptibility to cisplatin-induced hearing loss)《自然遗传学》47(3),263-266(2015))。因此，在一些实施例中，接受基于顺铂的化学治疗药物的小儿患者被鉴别为面临在基因TPMT、COMT、ABCC3和ACYP2中的一个或多个中具有基因变异的高风险，并用STS进行治疗以降低可能性、预防、抑制或治疗耳毒性。

在本文所描述的一些实施例中，小儿患者患有癌症并且正在接受基于铂的化学治疗药物。在其它一些实施例中，小儿患者尚未患有确诊的癌症，但正在用基于铂的化学治疗药物治疗。任何基于铂的药物将会期望通过STS来清除并降低耳毒性。因此，在一些实施例中，基于铂的化学治疗药物包括顺铂、卡铂、奥沙利铂、奈达铂、四硝酸三铂、菲铂、吡铂和赛特铂。在一些方面，基于铂的化学治疗药物是顺铂。

小儿患者接受的基于铂的化学治疗药物的量由治疗医师、所治疗的疾病或癌症的类型以及小儿患者的年龄或体重确定。在一些方面，每个施用周期基于铂的化学治疗药物(例如，顺铂)的量为约1mg/kg到约5mg/kg，包含指定范围内的每个整数。在一些方面，每个施用周期基于铂的化学治疗药物(例如，顺铂)的量为约10mg/m²到约300mg/m²、10mg/m²到约100mg/m²或约40mg/m²到约80mg/m²，包含指定范围内的每个整数。

用基于铂的化学治疗药物来治疗可以被施用STS的小儿患者的许多癌症。在本文所描述的实施例的一些方面，小儿患者患有正在用基于铂的化学治疗药物然后用STS治疗的癌症，其中所述癌症是局部的或播散的。在一些方面，癌症是低风险、中等风险或高风险(例如，转移性)癌症。在一些方面，癌症是低风险或中等风险。在一些方面，用基于铂的化学治疗药物治疗的癌症是局部的，并且不是播散性的或转移性的。可以用基于铂的化学治疗药物然后用STS治疗的非限制性和示例性癌症包括生殖细胞肿瘤(例如，睾丸癌或卵巢癌)、肝母细胞瘤、髓母细胞瘤、神经母细胞瘤和骨肉瘤。在一些方面，小儿患者患有肝母细胞瘤癌症并且正在用基于铂的化学治疗药物和STS治疗。在一些方面，小儿患者患有低风险肝母细胞瘤癌症或中等风险肝母细胞瘤癌症并且正在用基于铂的化学治疗药物和STS治疗。

在一些实施例中，在施用基于铂的化学治疗药物之前、同时或之后，向接受基于铂的化学治疗药物的治疗的小儿患者施用STS。在一些方面，在施用基于铂的化学治疗药物后0分钟或约5分钟到约96小时施用STS，包含指定范围内的每个时间整数。在一些方面，在施用基于铂的化学治疗药物后约30分钟到约24小时、约1小时到约24小时、约1小时到约12小时、约1小时到约8小时或约4小时到约7小时施用STS，包含指定范围内的每个时间整数。一方面，STS在施用基于铂的化学治疗药物之后约6小时施用。

STS的施用可以以已知的用于施用STS的任何方式进行。例如，STS可以肠胃外或肠内施用。如果肠胃外施用，则STS可以静脉内(IV)、皮下(SC)或肌肉内(IM)施用。肠内施用包含口服、舌下或直肠。在实施例中，STS是静脉内施用的。

STS的有效量是STS的可以预防、降低或抑制接受基于铂的化学治疗药物的小儿患者的耳毒性的量。在一些实施例中，施用的STS的量为约5g/m²到约50g/m²、约1g/m²到约25g/m²或15g/m²到约25g/m²，包含指定范围内的每个整数。在一些实施例中，施用的STS的量为约1g/m²、约2g/m²、约4g/m²、约6g/m²、约8g/m²、约10g/m²、约15g/m²、约20g/m²、约25g/m²、约30g/m²、约40g/m²或约50g/m²。有效量的STS在每个周期的基于铂的化学疗法之前、同时或之后施用。

本文所描述的另外的一些实施例是用于治疗小儿患者的癌症的给药方案，所述给药方案包含施用基于铂的化学治疗药物和STS。一个实施例是一种用于治疗小儿患者的肝母细胞瘤的给药方案，所述给药方案包含每个周期施用剂量为约1mg/kg到约5mg/kg或约10mg/m²到约300mg/m²的基于铂的化学治疗药物，包含所述范围内的每个整数；并且在基于铂的化学治疗药物的每个周期还施用约5g/m²到约25g/m²的STS，包含指定范围内的每个整数。一方面，在施用基于铂的化学治疗药物后约2小时到约6小时施用STS，包含所述范围内的每个整数。

应当在用基于铂的化学治疗药物和STS进行最后一次治疗后一段时间之后，对施用基于铂的化学治疗药物和STS之后的耳毒性进行测量。在一些方面，在用基于铂的化学治疗药物和STS进行最后一次治疗后至少3天到约3个月、1周到约3个月、1周到约2个月或1周到约4周的时间段后测量耳毒性，包含指定时间范围内的每个整数。一方面，在从用基于铂的化学治疗药物和STS进行最后一次治疗至少4周的时间段之后测量耳毒性。

可以在最后一次施用STS和基于铂的化学治疗药物之后多次且长达数年地对施用基于铂的化学治疗药物和STS之后的耳毒性进行测量。用于测量听力损失的听力测定方法是本领域普通技术人员熟知的并且与各种量表结合使用以评估耳毒性。评估耳毒性允许例如评估任何潜在的耳毒性或通过STS对耳毒性的长期预防。对耳毒性的评估可以通过本领域已知的一个或多个标准来确定。例如，耳毒性可以包含通过以下进行的评估：耳鸣功能指数、布罗克分级、儿童癌症小组1996年研究量表(Children's Cancer Group 1996studyscale)、波士顿儿童医院量表(Children's Hospital Boston scale)、Chang和Chinosomvatana量表、美国言语语言听力协会标准、不良事件量表通用术语标准(CommonTerminology Criteria for Adverse Events scale)(CTCAE儿科分级)或国际儿科肿瘤学会波士顿耳毒性量表或这些量表的组合(参见Gurney,J.G.等人,肿瘤学(Oncology),《临床肿瘤学杂志(J.Clin.One.)》30(19),2303-2306(2012))。在大多数情况下，应当在用如顺铂或另一种基于铂的化学治疗药物等耳毒性药物治疗之前完成对听力功能的测量。这建立了听力功能的可以将任何潜在的耳毒性效应与之进行比较的基线量度。因此，相对于在患者接受基于铂的化学治疗药物或硫代硫酸钠或两者之前的基线量度来计算听力变化或耳毒性的增加或减少。

布罗克量表定义如下：在所有频率下听力损失均<40dB，这指示0级或最小听力损失；在仅8,000Hz下听力损失≥40dB，这指示1级或轻度听力损失；在4,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示2级或中度听力损失；在2,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示3级或明显听力损失；或者在1,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示4级或重度听力损失。

CTCAE量表基于在1、2、3、4、6和8kHz下的听力。1级是至少1只耳朵在8kHZ下的阈值偏移>20dB；2级是至少1只耳朵在4kHz和更高频率下的阈值偏移>20dB；3级是足以指示包含助听器在内的治疗性干预的听力损失、至少1只耳朵在3kHz和更高频率下的阈值偏移>20dB；所指示的言语和语言svcs；并且4级是耳蜗植入的听力学适应症以及所指示的言语和语言svcs。

儿童癌症小组1996年研究量表定义如下：在6,000和/或8,000Hz下HL损失>40dB指示1级；在3,000和/或4,000Hz下HL损失>25dB指示2级；在2,000Hz下HL损失>25dB指示3级；并且在2,000Hz下HL损失≥40dB指示4级。波士顿儿童医院量表定义如下：在500-8,000Hz频率下听力损失≤20dB；无功能性听力损失；在高于4,000Hz下听力损失>20dB；功能性损失：可能会导致音乐欣赏力下降的轻微听力损失，指示1级；在4,000Hz和更高频率下听力损失>20dB；功能性损失：具有教育意义的显著听力损失，指示2级；在2,000Hz和更高频率下听力损失>20dB；功能性损失：需要使用助听器的重度听力损失，指示3级。

Chang和Chinosomvatana量表定义为在1、2和4kHz下≤20dB指示正常听力；(1a)在6到12kHz的任何频率下≥40dB；(1b)在4kHz下>20dB和<40dB分别指示1a级和1b级；(2a)在4kHz和更高频率下≥40dB；(2b)在低于4kHz的任何频率下>20dB和<40dB分别指示2a级和2b级；在2或3kHz和更高频率下≥40dB指示3级；并且在1kHz和更高频率下≥40dB指示4级。

美国言语语言听力协会标准定义如下：(1)在任何一个频率下降低≥20dB；(2)在两个或更多个相邻频率下降低≥10dB；或者(3)在先前获得响应的三个相邻频率下失去响应。ASHA进一步规定，听力敏感性的显著变化必须通过重复测试进行确认才被视为有效。

国际儿科肿瘤学会波士顿耳毒性量表定义如下：在所有频率下均≤20dB HL指示为听力正常；在高于4,000Hz(即，6或8kHz)下>20dB HL(即，25dB HL或更高)SNHL指示为1级；在4,000Hz和更高频率下>20dB HL SNHL指示为2级；在2,000Hz或3,000Hz和更高频率下>20dB HL SNHL指示为3级；并且在2,000Hz下>40dB HL(即，45dBHL或更高)SNHL指示为4级。

耳鸣功能指数是对耳鸣症状的严重程度进行定量的基于问卷的指数(参见HenryJA.等人,《今日听力学(Audiology Today)》26(6),第40-48页(2014))。指数定义如下：平均评分为14(范围为0-17)是没有耳鸣；平均评分为21指示低耳鸣等级；平均评分为42是中度耳鸣；平均评分为65是高耳鸣等级；并且平均评分为78是极高级耳鸣。可以将范围分解为<25是相对轻度耳鸣或无耳鸣；25-50指示显著的耳鸣问题；>50指示需要积极干预的耳鸣等级。

在一些实施例中，耳毒性通过测量在包括500Hz、1,000Hz、2,000Hz、4,000Hz或8,000Hz或其频率组合的一个或多个频率下的听力损失来测量，其中相对于在患者接受基于铂的化学治疗药物或硫代硫酸钠或两者之前的基线量度来计算听力变化。在一些方面，耳毒性的增加可以确定为以在单个频率下损失20dB来量度的听力下降；以在两个连续频率下损失10dB来量度的听力下降；或者在先前获得响应的三个连续测试频率下失去响应。在另外的一些方面，耳毒性的增加被测量为双侧高频听力下降，其特征在于：在所有频率下听力损失均<40dB，这指示0级或最小听力损失；在仅8,000Hz下听力损失≥40dB，这指示1级或轻度听力损失；在4,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示2级或中度听力损失；在2,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示3级或明显听力损失；或者在1,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示4级或重度听力损失。在又另外的一些方面，耳毒性的增加被测量为听力下降，其特征在于：在所有频率下听力损失均≤20dB，这指示0级听力损失；在高于4,000Hz下HL>20dB，这指示1级听力损失；在4,000Hz和更高频率下HL>20dB，这指示2级听力损失；在2,000Hz或3,000Hz下HL>20dB，这指示3级听力损失；或者在2,000Hz和更高频率下HL>40dB，这指示4级听力损失。在其它一些方面，耳毒性的增加可以通过耳鸣功能指数的下降来测量。

发现向用基于铂的化学治疗药物治疗的小儿患者施用STS不会加重肾脏或其它毒性。因此，在一些方面，与未施用STS的患者相比，接受STS的患者没有经历更严重的不良事件或没有经历不良事件的发生率增加。这些不良事件包括3级或4级嗜中性白血球减少症、肾小球滤过率降低、血清肌酐升高、感染、低镁症、高钠血症、呕吐或恶心。在其它一些方面，与未施用STS的患者相比，施用STS的小儿患者的无复发生存率或总生存率未降低。

本文所描述的方法非常适合于降低或预防任何年龄的任何小儿患者的耳毒性或降低在任何年龄的任何小儿患者体内招致耳毒性的可能性。因此，在描述的一些实施例中，根据本文所描述的方法治疗的小儿患者可以是新生儿，或者小儿患者可以是约1个月大、约2个月大、约3个月大、约4个月大、约5个月大、约6个月大、约7个月大、约8个月大、约9个月大、约10个月大、约11个月大、约12个月大、约1岁、约1.5岁、约2岁、约2.5岁、约3岁、约3.5岁、约4岁、约4.5岁、约5岁、约5.5岁、约6岁、约6.5岁、约7岁、约7.5岁、约8岁、约8.5岁、约9岁、约9.5岁、约10岁、约10.5岁、约11岁、约11.5岁、约12岁、约12.5岁、约13岁、约13.5岁、约14岁、约14.5岁、约15岁、约15.5岁、约16岁、约16.5岁、约17岁、约17.5岁、约18岁、约18.5岁、约19岁、约19.5岁、约20岁、约20.5岁或约21岁。

在一些方面，小儿患者为约12岁或更小、约5岁或更小、约2岁或更小或约1岁或更小。

对相关领域普通技术人员而言将显而易见的是，在不脱离任何实施例或其方面的范围的情况下，可以对本文所描述的组合物、调配物、方法、过程和应用作出适合的修改和调整。所提供的组合物和方法是示例性的并且不旨在限制指定的实施例中的任何指定实施例的范围。本文公开的所有各个实施例、方面和选项可以以任何和所有变型或迭代进行组合。本文所描述的组合物、调配物、方法和过程的范围包含本文所描述的实施例、方面、选项、实例和偏好的所有实际或潜在组合。本文所描述的示例性组合物和调配物可以省略任何组分、取代本文所公开的任何组分或包含本文其它地方公开的任何组分。在此公开了本文所公开的组合物或调配物中的任何组合物或调配物的任何组分的质量与调配物中的任何其它组分的质量之比或与调配物中的其它组分的总质量之比，就好像所述比率已被明确公开一样。如果通过引用的方式并入的任何专利或出版物中的任何术语的含义与本公开中使用的术语的含义相冲突，则以本公开中的术语或短语的含义为准。此外，上述讨论仅公开和描述了示例性实施例。本文引用的所有专利和出版物均通过引用的方式并入其具体教导。

实例

实例1对硫代硫酸钠降低接受顺铂的小儿患者的耳毒性的研究

本研究被设计为多中心、随机、开放标签的3期临床试验。在美国和加拿大的38所参与的儿童肿瘤小组(COG)医院纳入患者。在登记前获得参与者或其法定监护人的书面同意书或许可。本研究经美国国家癌症研究所(NCI)中央机构审查委员会(USNationalCancer Institute Central Institutional Review Board)和现场机构审查委员会(siteinstitutional review boards)批准。必须一起纳入耳毒性分级量表的伴随观察性队列研究中。本研究的参与者在加入研究时的年龄为1-18岁，并被新诊断为患有肝母细胞瘤、生殖细胞肿瘤、髓母细胞瘤或CNS原发性神经外胚层肿瘤、神经母细胞瘤、骨肉瘤或用顺铂治疗的其它癌症。

关键的资格标准包含计划的累积的顺铂剂量为200mg/m²或更高并且输注持续时间为6小时或更短；通过卡诺夫斯基(Karnofsky)(>16岁)或兰斯基(Lansky)(≤16岁)量表得到50分或更高的表现评分；先前未进行过顺铂或卡铂治疗；没有已知的硫醇超敏性；以及反映血液学、肾脏和肝功能的正常机构实验室值。纳入前需要有正常听力，所述正常听力如在500-8000Hz下的听力阈值当用耳机测量时为20dB听力级(HL)或更小或者当在声场中测量时为25dB HL或更小所定义的，或如等于20dB HL或更小的行为阈值的脑干听觉诱发反应阈值所定义的。根据方案修正案(2010年3月31日)，最初不允许但后来准许进行先前的颅骨照射，前提是听力正常，以扩大试验募集范围。如果在癌症定向性COG治疗性研究中登记了患者以避免通过ACCL0431随机化可能混淆主要目的，则患者不符合资格。

患者随机化

纳入患者，并在患者接受任何顺铂前最多5天将患者随机分配到硫代硫酸钠组或观察组(对照组)。根据排列块算法生成每个层的分配序列，其中每四块包含两个硫代硫酸钠组和两个对照随机化组。由COG试验管理系统在中央计算机生成随机化。对所有调查人员、临床医生和参与者都以电子方式隐藏分配。现场研究人员进行了纳入，从而将资格确认和分层因素的说明输入到COG试验管理系统中并接受以电子方式生成的现场分配。随机化为1:1并且最初分为按年龄(<5岁或≥5岁)和顺铂输注持续时间(<2小时或≥2小时)定义的四组。之后，我们为先前已接受颅骨照射的符合资格的参与者添加了一个单独的层，而不管年龄或顺铂输注持续时间如何。对于听力测定数据的中央审查者，进行随机化遮掩，但是对于参与者或治疗临床医生并没有进行安慰剂对照，以最小化参与现场的复杂性和成本。

程序

如每个参与者的癌症治疗计划所指定的施用顺铂。对于随机分配到对照组的参与者，应当单独施用含顺铂的治疗方案。硫代硫酸钠组的参与者在完成每个顺铂剂量后的6小时开始在15分钟内每天接受硫代硫酸钠。方案指定的16g/m²(533mg/kg，其中顺铂剂量通过体重计算)硫代硫酸钠作为12.5％溶液施用。选择此硫代硫酸钠剂量是因为它在已公开的有效剂量范围内并且对儿童来说耐受性良好。对于接受多日顺铂方案的参与者，每个硫代硫酸钠剂量之前需要记载的血清钠浓度低于145mEq/L，并且硫代硫酸钠与下一个顺铂剂量之间应当经过至少10小时。否则，不对硫代硫酸钠或其它化学疗法药物的剂量或施用进行修改。用于硫代硫酸钠输注期间的支持性护理的方案指南包含止吐药的常规施用、有限的血压监测以及(如果适用的话)低剂量哌替啶(meperidine)的施用以管理与输注有关的僵直。对于所有参与者，同时使用其它耳毒性药物(例如，氨基糖苷类和髓袢利尿剂是方案所不鼓励的，但在数据报告中捕获到。

由于参与者没有根据指定的方案接受癌症治疗，因此未捕获到顺铂剂量修改。在基线处、在每个顺铂疗程之前最多8天、在最后一个顺铂疗程完成之后4周以及在1年后进行听力评估。听力测定包含使用儿科听力评估方法用耳机或在声场中测量500-8000Hz下的双侧纯音空气传导阈值；耳镜检查；对中耳功能的导抗评价；以及诱发的耳声发射(如果有的话)。对于因年龄太小、发育性残疾或医疗状况而无法配合的参与者，应当测量脑干听觉诱发反应阈值代替。

使用标准的临床听度计、中耳分析仪、诱发电位系统和诱发耳声发射OAE系统(如果有的话)来完成听力学测试。所有设备均根据美国言语语言听力协会阐述的指南进行校准。在基线处(在第一个顺铂剂量之前)、在每个顺铂疗程之前以及在完成最后一个顺铂疗程后4周和1年两个时间进行听力学评价。在包含顺铂的诱导期后进行造血干细胞移植的患者在诱导期期间、在诱导期间完成最后一个顺铂疗程后4周(即，移植前)以及在移植后4周和1年两个时间如上进行听力学评价。

在每次顺铂输注之前的8天内并且优选地在72小时内进行听力学评价。听力学测试包含：(a)测量0.5-8kHz下的双侧纯音空气传导阈值；(b)由听力学家或其它医疗保健专业人士进行耳镜检查；(c)导抗评价；以及(d)测量诱发的OAE(如果有的话)。对于太年幼而无法配合标准听力测定测量的患者，应当获得BAER代替。另外，将在所述模式可用的机构中对5岁或更大的患者进行UHF听力测定。UHF测量的将是9-16kHz下的双侧纯音空气传导阈值。除了所有必要的听力测定数据的机构电子录入之外，还传真每个听力图的副本以供对其进行随机化遮掩的两名专业的儿科听力学家(KK，BB)进行独立审查；解释上的差异通过协商解决。采用针对局部对播散的方案特异性二元分类根据美国言语语言听力协会(ASHA)事后确定听力损失。

从每个选择评估TPMT和COMT基因中的突变的参与者获得唾液或血液样本。结束方案治疗的标准包含完成癌症治疗方案、过早停用顺铂、在纳入后但在测量主要端点之前施用颅骨照射以及无法继续施用硫代硫酸钠。在所有端点对停止方案治疗的参与者进行随访。

从研究中去除的标准包含死亡、失去随访或加入另一项针对潜在癌症的COG治疗性研究(在这种情况下，我们从所述治疗性研究获得生存率数据)。

效果

根据经过验证的耳毒性标准，主要端点在是最终顺铂治疗后4周但在任何造血细胞移植之前的听力损失。如果在中央审查期间发现在基线处或在治疗后源自耳机、声场或脑干听觉诱发反应测试的听力测定数据丢失、不完整或技术上不令人满意，则认为无法评估参与者的此效果。

次要端点是在4周(500Hz、1000Hz、2000Hz、4000Hz和8000Hz)时的频率特异性听力损失、血液学和肾脏毒性、无事件生存期(定义为从研究纳入一直到疾病复发或进展、诊断出第二个恶性新生物或死亡(以先到者为准)开始的时间)和总生存期(定义为从纳入到死亡或确认活着的最后日期开始的时间)。按照2010年3月31日的方案修正案，我们添加了探索性的次要目的以评估TPMT和COMT基因中的突变与顺铂诱导的听力损失和硫代硫酸钠效应的关联。

统计分析

根据ASHA标准，听力损失的主要端点将纳入时(即，基线)的听力测定评价与在最终顺铂剂量后(即，治疗后)至少4周进行的首次评估进行了比较。使用改良的意向性治疗方法，我们基于患者的随机分配对患者进行了分析，而不管接受的治疗如何，但仅包含完成基线和治疗后听力评估两者的符合资格的参与者。应计目标是108名参与者的完整听力评价平均分配到两个研究组。我们使用单侧χ²检验比较了治疗组发生听力损失的比例。我们认为0.05或更小的p值具有显著性。假设对照组的4周累积听力损失发生率为45％并且硫代硫酸钠组的发生率为22.5％，那么研究如设计的那样将会提供80％的效能。对照组中的患者中听力损失的概率基于涉及多种肿瘤类型的当代儿科报告。此概率降低一半被认为是临床上相关的。由于已经接受先前的颅骨照射的参与者是通过修正案添加的，因此我们进行了仅包含未纳入新层的参与者的事后敏感性分析。我们还对具有可解释的听力测定数据但没有生存事件或造血细胞移植的参与者在1年的时间点的听力损失进行了事后分析；这些参与者由于无法控制另外的耳毒性暴露而被排除在外。

我们使用优势比(OR)估算硫代硫酸钠分配与听力损失之间的关联的量级；使用瓦尔德(Wald)测试针对与逻辑模型的随机化治疗分配相关的参数得出OR＝1时测试的p值和对应的95％CI。根据用于随机化的层对逻辑模型进行分层。我们使用有听力损失的特定层中的可评估参与者的观察到的比例来估算层特异性听力损失概率；我们还计算了精确的95％CI。

我们计划对硫代硫酸钠的耳保护效应的无用性进行临时监测。在我们确定了前60名患者的主要效果量度后，我们基于当时观察到的听力损失以及未来的参与者的听力损失的发展将会遵循替代性假说的假设来计算在计划的纳入结束时拒绝零假说的概率。如果此条件概率为0.10或更小，则由于缺乏功效，应将本研究鉴别给COG数据与安全监测委员会(COG Data and Safety Monitoring Committee)以进行结案。

通过平均值变化来确定在不同频率(500Hz、1000Hz、2000Hz、4000Hz和8000Hz)下基线与治疗后时间点之间的听力阈值变化，并使用威尔科克森(Wilcoxon)双样品测试针对非参数数据评估各组之间无差异的假设。我们认为0.05或更小的单侧p值具有显著性；我们没有对此评估的多个比较进行任何调整。

对于血液学和肾脏毒性，分母代表在每个周期期间完成所需毒性评估的参与者数量。对于两种类型的毒性，我们使用比例的χ²检验对发生率无差异的假设进行了评估。

对于无事件生存率和总生存率，在最后一次接触时对无事件发生的患者进行检查。我们使用卡普兰和迈耶的方法估算剩余无事件作为纳入后时间的函数的概率。我们使用对数秩统计比较了随机方案所定义的各组中的事件的风险。我们使用模型包含感兴趣的特性作为唯一变量的偏似然函数通过拟合相对风险回归模型来生成相对危害比(RHR)和95％CI。我们将生存率估算值计算为3年无事件生存率和3年总生存率。我们使用相同的方法通过疾病的程度对无事件生存率和总生存率进行了事后分析。我们通过意向性治疗来考虑生存率分析中所有符合资格的参与者。我们使用SAS(版本9.4)或Stata(版本14)进行了所有统计计算。

结果

在2008年6月23日与2012年9月28日之间，将来自38个机构的131名参与者纳入本研究中，从而达到了计划的应计目标(参见图1的方案)。六名参与者被认为不符合资格；四名是因为他们共同纳入了疾病定向性COG治疗性研究中(其中三名参与者被随机分配到硫代硫酸钠组，而另一名分配到对照组)；一名是因为在到达主要端点之前施用了颅骨照射(被随机分配到对照组)；并且一名是因为没有正常基线血清电解质值的源记载(随机分配到硫代硫酸钠组)。在125名符合资格的参与者中，有38名在方案修正之前纳入并且87名在方案修正之后纳入，所述方案修正允许纳入先前接受过颅骨照射的参与者(n＝9)。将64名参与者随机分配到对照组并且将61名参与者随机分配到硫代硫酸钠组。临时监测产生了按计划继续进行试验的建议。此分析中使用了截至2015年3月31日的当前数据。

治疗组之间的基线特性类似。在加入研究时患有播散性疾病的符合资格的参与者的总体比例是类似的；每组中有四名符合资格的参与者先前接受过颅骨照射。在各组之间平衡了随机化分组的患者关于年龄和疾病程度的疾病特异性特性。对照组的累积的顺铂的中值剂量为387mg/m²(IQR 305-466)，而硫代硫酸钠组为393mg/m²(290-420)。累积的硫代硫酸钠的中值剂量为95.8g/m²(60.1-127.6)。在对照组(64名参与者中的17名[27％])和硫代硫酸钠组(61名受试者中的17名[28％])中，接受过髓袢利尿剂或氨基糖苷类抗生素的参与者的比例类似。在主要端点进行评估之前，没有参与者进行造血细胞移植。

在4周时，可评估104名参与者的治疗后听力损失(对照组中的64名参与者中的55名以及硫代硫酸钠组中的61名中的49名)。在这些可评估的参与者中，硫代硫酸钠组中有14名(29％)并且对照组中有15名(27％)未满5岁。鉴别出硫代硫酸钠组中的14名(28.6％；95％CI 16.6-43.3)参与者有听力损失，而相比之下在对照组中为31名(56.4％；42.3-69.7)(p＝0.00022)。

对于不满5岁的参与者，硫代硫酸钠组中的听力损失发生率出乎意料地且基本上低于对照组(14名参与者中的三名[21.4％][95％CI 4.7-50.8]对比15名中的11名[73.3％][44.9-92.2])；而两组之间的发生率差异不像年长患者那么大(35名中的11名[31.4％；16 9-49.3]对比40名中的20名[50.0％；33.8-66.2])。在顺铂输注2-6小时后(24名中的十名[41.7％；95％CI 22.1-63.4]对比30名中的21名[70.0％；50.6-85.2]并且在顺铂输注不到2小时后(25名中的四名[16.0％；4.5-36.1]对比25名中的十名[40.0％；21.1-61.3])硫代硫酸钠组中的参与者的听力损失发生率比对照组低。先前的颅骨照射的层仅包含八名可评估的参与者；四名用硫代硫酸钠治疗的参与者中有两名(50％)发生听力损失，而对照组中的四名患者中有四名(100％)发生了听力损失。当在事后分析中排除了这八名受照射的参与者时，注意到硫代硫酸钠组中的45名参与者中的12名(26.7％；95％CI14.6-41.9)有听力损失，而相比之下在对照组中51名中的27名(52.9％；38.5-67.1)有听力损失(p＝0.0045)。通过调整了分层变量的逻辑测试，与对照组相比，硫代硫酸钠组中听力损失的可能性显著更低(OR 0.31，95％CI 0.13-0.73；p＝0.0036)。当从分析中去除所述八名受照射的参与者时，未经调整的OR为0.32(95％CI 0.13-0.76；p＝0.010)。在主要端点可评估听力损失的104名参与者中，有67名在事后分析中在1年时也可评估；在这些参与者中，接受硫代硫酸钠的32名参与者中有九名(28％)患有ASHA定义的听力损失，而相比之下在35名对照患者中有19名(54％)患有ASHA定义的听力损失(p＝0.0015)。对于先前接受过颅骨照射的所述八名可评估参与者，从4周的时间点开始，他们在1年时的听力效果均未改变。

下表中示出了关键频率内听力阈值的平均值变化。尽管各组之间无显著差异，但是对于硫代硫酸钠组，在顺铂治疗后从基线到4周的听力阈值变化小于对照组。

血液学毒性在治疗组之间无显著差异，硫代硫酸钠组中的177个参与者周期中的137个(77％)和对照组中的223个参与者周期中的172个(77％)出现了血液学毒性(p＝0.95)。聚合的肾毒性在硫代硫酸钠组中更为常见，其中147个参与者周期中的37个(25％)受影响，对比187个对照中的25个(13％)受影响(p＝0.0059)。低磷血症和低钾血症在硫代硫酸钠组中比在对照组中更为常见。值得注意的是，两组中均无肌酐升高或肾小球滤过率下降的病例满足CTCAE 3级阈值。

不管归因如何，最常见的3-4级血液学不良事件是嗜中性白血球减少症(硫代硫酸钠组中的177个参与者周期中的117个[66％]对比对照组中的223个中的145个[65％])，而最常见的非血液学不良事件是低钾血症(147个中的25个[17％]对比187个中的22个[12％])。作为NCI不良事件报告系统的一部分，本研究包含对严重不良事件的快速报告。只有随机分配到硫代硫酸钠组的参与者才需要报告。在26名患者中，报告有194例严重不良事件；在这些严重不良事件中，112例被认为与硫代硫酸钠无关、62例不太可能与硫代硫酸钠有关、20例可能与硫代硫酸钠有关并且没有一例很可能或确定与硫代硫酸钠有关。非血液学不良事件有85例，其中49例被认为与硫代硫酸钠无关、25例不太可能与硫代硫酸钠有关、11例可能与硫代硫酸钠有关并且没有一例很可能或确定与硫代硫酸钠有关；血液学不良事件有70例，其中53例被认为与硫代硫酸钠无关、13例被认为不太可能与硫代硫酸钠有关、四例可能与硫代硫酸钠相关并且没有一例很可能或确定与硫代硫酸钠有关。在这194例严重不良事件中，最常见的三个事件是嗜中性白血球计数减少(14名参与者中的26例[13％])、血小板计数减少(12名参与者中的23例[12％])和贫血(十名参与者中的21例[11％]))。

将所有125名符合资格的患者均包含在无事件生存率和总生存率的分析中。无事件生存率的中值随访时间为3.5年(IQR 1.4-4.5)(硫代硫酸钠组的中值随访时间为3.4年[IQR 2.9 4 3]，而对照组为3.8年[3.1-4.5])并且总生存率的中值随访时间为3.5年(1.5-4.5)(硫代硫酸钠组的中值随访时间为3.4年[2.9-4.3]，而对照组为3.8年[3.1-4.7])。在分配给硫代硫酸钠组的61名参与者中，发生了26例事件和17例死亡；在对照组中的64名参与者中，发生了24例事件和十例死亡。除了硫代硫酸钠组的一名参与者发展有第二恶性肿瘤之外，所有事件均为复发。如由现场研究者分类的，除了硫代硫酸钠组中的一例死亡归因于与癌症治疗相关的脓毒症但与硫代硫酸钠无关之外，所有死亡均被认为是由疾病引起的。考虑到整个样品，没有注意到硫代硫酸钠组与对照组之间在无事件生存率或总生存率方面存在显著差异(图2)。硫代硫酸钠组的3年无事件生存率为54％(95％CI 40-66)，而对照组为64％(50-74)；硫代硫酸钠组的3年总生存率为70％(56-80)，而对照组为87％(76-93)。

由于硫代硫酸钠可能对生存率产生针对样品作为整体时出现的影响，因此我们按照纳入时的疾病程度对样品进行了事后分层。在被认为患有局部疾病的组中(n＝77)，我们发现治疗组之间在无事件生存率(硫代硫酸钠组的中值随访时间为3.4年[IQR3.2-4.3]，而对照组为3.7年[IQR 3.1-4.5])或总生存率方面无显著差异(硫代硫酸钠组的中值随访时间为3.5年[3.2-4.3]，而对照组为3.8年[3,0-4,8]；图3)。硫代硫酸钠组的3年无事件生存率为60％(95％CI 42-74)，而对照组为66％(48-78)；硫代硫酸钠组的3年总生存率为83％(66-92)，而对照组为89％(74-96)。在患有局部疾病的参与者中，对照组和硫代硫酸钠组中均发生了14例事件和六例死亡。在被认为患有播散性疾病的参与者中(n＝47)，我们发现治疗组之间在无事件生存率方面无显著差异(硫代硫酸钠组的中值随访时间为3.2年[IQR3.0-4.3]，而对照组为4.1年[IQR 3.1-4.5])，但与对照组相比，硫代硫酸钠组的总生存率显著更低(硫代硫酸钠组的中值随访时间为3.2年[3.0-4.5]，而对照组为3.8年[3.1-4.5]；图3)。硫代硫酸钠组的3年无事件生存率为42％(95％CI 21-61)，而对照组为61％(39-77)；硫代硫酸钠组的3年总生存率为45％(23-65)，而对照组为84％(62-94)。在患有播散性疾病的参与者中，硫代硫酸钠组中发生了12例事件和11例死亡，而对照组中发生了十例事件和四例死亡。除了按癌症亚型和患者年龄分层的结果之外，还可以发现示出了患者的人口统计特征、两个治疗组中的听力损失以及整个研究的卡普兰-迈耶生存率曲线的研究数据(图2-35)。

实例2：硫代硫酸钠(STS)作为耳保护剂用于针对标准风险肝母细胞瘤降低顺铂诱导的听力损失的发生率

本研究被设计为多中心开放标签的随机III期试验，以测试硫代硫酸钠(STS)在降低接受针对标准风险肝母细胞瘤的顺铂化学疗法的患者的耳毒性方面的功效。全世界有11个国家的总共52个中心参与其中，包含英国、法国、比利时、日本、意大利、西班牙、澳大利亚、新西兰、爱尔兰、瑞士和美国。对照组包含仅用顺铂治疗的患者，并且测试组包含用顺铂治疗然后施用STS的患者。

端点

本研究的主要端点是在试验治疗结束后或在至少3.5岁时(以较晚者为准)确定的布罗克等级≥1的听力损失率。

次要端点包含：对术前化疗的响应、完全切除、完全缓解、无事件生存率(EFS)、总生存率(OS)、如按CTCAE v 3.0分级的毒性、长期肾脏清除率以及中央听力学检查的可行性

患者入选标准

如果患者根据以下标准患有组织学上确认的新诊断的肝母细胞瘤，则所述患者入选本研究：

·标准风险肝母细胞瘤：

治疗前肿瘤扩增(PRETEXT)I、II或III(参见下表Pretext)

血清甲胎蛋白(AFP)>100μg//L

无另外的PRETEXT标准

·年龄≤18岁且>1个月

·书面知情同意书以及国家/地方伦理委员会和监管机构批准

·中心/国家愿意并能够以最低要求的质量标准组织听力测定

·能够遵守提交材料以进行中央审查的要求(放射学、病理学和听力学)

·对于有生育潜能的女性，需要在研究治疗前进行阴性妊娠测试

·处于生育年龄的任何患者必须同意在试验的持续时间内使用适当避孕(男性必须始终使用避孕套，而女性必须确保其伴侣使用了避孕套，并在化疗时期的持续时间内使用另外的避孕方法)

患者排除标准

如果患者符合以下排除标准中的任何排除标准，则将所述患者从本研究中排除：

·高风险肝母细胞瘤：

血清甲胎蛋白(AFP)≤100μg/L

涉及全部4个肝部分的肿瘤-PRETEXT IV

另外的PRETEXT标准

肝外腹部疾病(E1、E1a、E2、E2a)

腹腔内出血或肿瘤破裂(H1)

远处转移，任何部位(M1)

淋巴结转移(N1、N2)

涉及门静脉主干(P2、P2a)

涉及所有三个肝静脉和/或IVC(V3、V3a)

·肝细胞癌

·从书面活检报告开始治疗超过15天

·肾脏功能异常被定义为计算的GFR<诊断时正常年龄下限的75％，所述GFR在超过2岁时为<60毫升/分钟/1.73平方米

·任何先前的化疗

·复发性疾病

·先前对STS具有超敏性

·患者由于任何原因而无法遵循方案

随机化

纳入符合上述资格标准的患者，并在接受顺铂之前将其随机分配到硫代硫酸钠组或观察组(对照组)。图36和图37中提供了随机化图和患者纳入图。图38中提供了纳入的患者的特性。

试验治疗

在本试验中研究的研究性药品(IMP)是硫代硫酸钠(STS)和顺铂。STS由Adherex科技公司(Adherex Technologies)提供。试验治疗由以下阶段组成：

·术前随机1:1化疗(每两周进行4个顺铂疗程，有或没有STS)

·手术摘除所有剩余的肿瘤病变。如果必须推迟手术，则可以在手术前给予1或2个周期的术后化疗。

·术后化疗(每两周进行2个顺铂疗程，有或没有STS)

·对在2或更多个顺铂疗程(有或没有STS)后患有进行性疾病的患者停止试验治疗

治疗和随访计划

·术前化疗，4个疗程的顺铂+/-STS

·术前化疗后进行决定性手术(与所有先前的SIOPEL试验一样)

·术后化疗，2个疗程的顺铂+/-STS(如果出于有效的实际原因而必须推迟手术，则这可以在术前给予)

·长期随访

治疗失败

·对在2或更多个顺铂疗程(有或没有STS)后患有进行性疾病的患者停止治疗

·没有另外的STS

·建议使用2-4个疗程的顺铂-阿霉素(PLADO)，然后在响应充分时进行决定性手术

·理想地，2个疗程

化疗指南和施用的治疗

顺铂

顺铂在含有1mg/ml溶液调配物的10ml、50ml和100ml小瓶中供应并且任选地供应为粉末以用于在50mg小瓶中重构。顺铂调配物的稳定性遵循以下：

·预稀释：依据制造商的产品特性总结

·稀释后：顺铂可以在氯化钠溶液中稳定最多7天。遵循了制造商的产品特性总结。

硫代硫酸钠(STS)来源和药理学

STS是具有还原剂性质的水溶性硫醇化合物。在IV注射之后，硫代硫酸钠分布于整个细胞外液中。一些硫代硫酸钠在肝脏中转化为硫酸盐。

高达95％原样排泄于尿液中。生物学半衰期为0.65小时(范围：取决于剂量，16.5-182分钟)。

包装和标记

将每个小瓶放入有六个小瓶的试剂盒中。用多语言试剂盒标签来标记每个盒子。在GMP条件下制造、标记和包装STS药物产品，并作为25％(250mg/mL)的不含防腐剂的无菌溶液供应。药物产品调配物含有五水合硫代硫酸钠和硼酸钠。小瓶标签指示了药物产品的批号和最初的发布日期。

制备

在含有25％(250mg/ml或12.5克/小瓶)溶液的50ml小瓶中供应STS。将每毫升25％STS用一毫升无菌注射用水稀释(1:1稀释)至125mg/ml的浓度以用于直接施用。(这与2.3％氯化钠溶液的等渗度大致相当)。将用于所述剂量的适当数量的小瓶的体积组合到PVC IV输液袋中。

用于施用的重构的STS由澄清溶液组成。调配物中没有防腐剂。稀释后，将含有给药溶液的PVC输液袋在室温下颠倒地放置(将顶部的注入口和填充口倒置)，并在八小时内使用。小瓶中剩余的任何溶液均根据机构程序进行销毁。

治疗时间表

对于所有患者，均在第1天、第15天、第29天和第43天给予术前疗程(例外地，如果手术延迟，也可以在第57天和第71天给予疗程)。术后疗程尽快开始，但在21天内，其中两个疗程在第1天和第15天给予。在开始每个化疗周期之前，确立了以下测量：儿童的排尿量是否正常、血清电解质和肌酐是否处于该年龄的正常范围内并且血压是否稳定地小于该年龄的第97个百分位数、神经系统是否正常以及儿童是否发热。遵循以下治疗时间表：

顺铂

对于>10kg的儿童：	6小时内IV输注80mg/m<sup>2</sup>
		对于5-10kg的婴儿和儿童：	6小时内IV输注2.7mg/kg
对于<5kg的婴儿：	6时内IV输注1.8mg/kg

硫代硫酸钠

对于随机接受STS的儿童：

对于>10kg的儿童：	15分钟内IV输注20g/m<sup>2</sup>
		对于5-10kg的婴儿和儿童：	15分钟内IV输注15g/m<sup>2</sup>
对于<5kg的婴儿：	15分钟内IV输注10g/m<sup>2</sup>

施用

预水合

·用2.5％葡萄糖/0.45％盐水预水合至少3小时

·以200毫升/平方米/小时运行(总体积为600ml/m²)

6小时内的顺铂输注

·含顺铂的0.9％氯化钠建议的6小时内输注量：

·60ml中<60mg、120ml中60mg-120mg并且240ml中>120mg

·除氯化钠以外，没有其它流体用作顺铂的媒剂，以防止氯化物耗竭，氯化物耗竭将会导致增加肾毒性的风险。

在顺铂施用期间且直到施用后6小时的水合(即，总共12小时)

·2.5％葡萄糖/0.45％氯化钠

·每500ml加6g甘露醇

·每500ml加10mmol氯化钾

·以125毫升/平方米/小时运行

施用顺铂后6小时施用硫代硫酸钠

·将每毫升25％STS用1ml无菌注射用水稀释(1:1稀释)至125mg/ml的浓度以用于直接施用。(这与2.3％氯化钠溶液的等渗度大致相当)

·输注15分钟

·在STS输注期间停止顺铂水合流体15分钟。之后立即重新开始顺铂水合

随后进行18小时的水合(即，直到顺铂输注结束后24小时)

·2.5％葡萄糖/0.45％氯化钠

·每500ml加10mmol氯化钾

·每500ml加5mmol硫酸镁

·每500ml加0.3mmol葡萄糖酸钙

·以125毫升/平方米/小时运行

总结

·-3小时开始预水合

·0小时完成预水合、开始6小时内的顺铂输注+水合

·6小时完成顺铂输注、继续水合另外6小时

·12小时完成水合、开始STS输注

·12小时15分钟完成STS输注、开始后水合(post hydration)

·30小时15分钟完成后水合

提供了床边护理工作表，以帮助安排顺铂、硫代硫酸钠(STS)、水合和止吐药施用的时间。将工作表适配成适于当地的实际情况。将工作表的纸质副本保存在准备在给予化疗时填写的儿童笔记中。工作表还包含用于记录接受STS的患者的血压和电解质监测的表。

毒性监测

试验治疗被认为具有潜在毒性，并且儿童面临发展为骨髓毒性、粘膜毒性或其它可逆毒性以及不可逆的耳毒性和肾脏毒性的风险。因此，在整个试验治疗期间，需要以定期的随访间隔对每个儿童进行毒性监测。需要报告特定的肾脏毒性和耳毒性作为不良事件。立即报告严重不良事件以了解事件。试验委员会定期地评价毒性报告并且如果识别出具有不可接受率的严重毒性则有权停止试验。在方案中指定了由于毒性引起的剂量和治疗修改。另外，本试验中对患者的长期随访应当包含任何晚期毒性。图39中示出了不良事件的发生。

监测不良药物反应并将其定义为不良事件，所述不良事件可能、很可能或确定与试验治疗有关并根据NCI CTCAE v 3.0进行评估。严重不良事件是根据《ICH良好临床实践的协调三方指南(ICH Harmonised Tripartite Guideline for Good ClinicalPractice)》的定义定义的并且另外如导致死亡(注意：对于这些患者，因肿瘤进展而导致的死亡不被视为SAE)的任何不利的医疗事件定义的。严重不良事件是危及生命、需要住院治疗或延长现有的住院治疗、引起疾病的进展、给药过量、第二原发性恶性肿瘤、导致持续或显著的残疾/无行为能力、先天性异常、任何意外的3级和4级毒性的事件。

研究完成的定义

当最后一名患者完成自己的听力学测试或达到3.5岁时(以较晚者为准)，到达主要端点。然后根据国家指南对患者进行次要端点随访。

听力测定

本试验旨在降低患有肝母细胞瘤的非常年轻的患者的耳毒性。为了不必拒绝患者加入试验，端点仅要求在儿童停止治疗的3.5岁时进行纯音听力测定。在一些情况下，这意味着儿童移动到另一个中心以接受测试。

为了使中央审查有意义，所有听力学评价均使用标准的临床听度计、中耳分析仪和诱发耳声发射(OAE)系统完成。所有设备均根据国际指南进行校准。尽可能在第一剂顺铂之前完成基线听力评价。对所有3.5岁的儿童完成了明确的听力学评价(或一可以获得可靠的听力测试就完成)。加入本试验的最低标准是，可以直接在治疗结束时或当儿童达到3.5岁时(如果治疗结束时年龄更小的话)完成纯音听力测定以及耳镜检查和鼓室导抗测试。听力学测试需要在所测试幼儿熟悉的主管部门中进行。父母在试验同意书上以书面形式同意在必要时前往其国家的另一个城镇的中心以完成这项工作。然后提供治疗结束听力学审查以用于中央审查。要求所有参与中心提供负责协调和监督被认为有能力在其国家进行此治疗结束听力学评估的中心的质量的顾问听力学家或耳鼻喉外科医师的联系方式。

听力学评价包含：在此设备可用的设施中进行从高频开始8、6、4、2、1和0.5kHz下的双侧纯音空气传导阈值测量、耳镜检查、导抗评价或鼓室导抗测试、TEOAE和DPOAE测量。如果儿童不合作或太不舒服以至于无法在行为评估中给出可靠的响应并且有中耳积液并且因此无法进行TEOAE和DPOAE，则使用骨传导听觉脑干反应(ABR)获得阈值。理想情况下使用猝发音，但是短声诱发的ABR也将会有所帮助。

用于获得纯音阈值的程序包含适合儿童的年龄和发育的标准行为测量技术，包含条件化游戏听力测定和视觉强化听力测定。在本研究期间，建议对所有儿童进行从8000Hz开始的降序测试程序，并且降序测试程序对于合作程度有限的儿童尤为重要，因为听觉敏感性的任何下降都很可能会在较高频率下发生。建议在0.5kHz下获得，因为测试仪可以重新评估响应的可靠性。尽可能使用插入的耳机或头戴式耳机来获得耳朵特异性阈值。如果基线测试指示预先存在听力损失、如果在明确的评价中儿童的听力有显著下降和/或如果导抗结果指示传导性中耳病理学，则对骨传导阈值进行测量。当无法可靠地获得行为测试结果时，使用电生理学测试程序特别是短声或猝发音诱发的ABR估算听觉阈值。

导抗评价包含中耳压力和依从性以及声反射阈值的测量。探测音等于或大于660Hz，而不是婴儿的226Hz。如果静态导纳为0.2mmho或更大、峰值压力介于-150到+200daPa之间并且鼓室导抗测试宽度小于160daPa，则将鼓室导抗图分类为正常。在两只耳朵处在身体同侧在500、1000、2000和4000Hz下测量声反射阈值。

当设备可用时，在设施中收集瞬态诱发耳声发射(TEOAE)和畸变产物耳声发射(DPOAE)。如果儿童表现出活动性中耳疾病的证据，如通过异常鼓室导抗测试和/或传导性听力损失证明的)，则推迟耳声发射(OAE)测量，直到中耳病理学解决。对于TEOAE，短声刺激出现在80dB峰值等效的SPL处。用于比较结果的两个TEOAE参数是总发射等级(平均响应)和在1000-4000Hz频率范围内波形的再现性。对于DPOAE，至少在四个频率下完成了L1和L265/55dB SPL中的一个等级。TEOAE被认为是更好的低频预测因子，而DPOAE则被认为具有高频敏感性。

基于小儿患者的年龄使用以下测试方案：

对不满12个月的儿童的评价包含：优选地用插入式耳机通过视觉强化听力测定(VRA)来测量最小阈值，如果儿童不接受所述测量，则由中央听力学委员会在具有dBA加权的声场环境中将所述阈值转化为等同于听力级(HL)以与纯音相当。另外，进行了鼓室导抗测试以及TEOAE和DPOAE的测量。如果可能，使用短声或猝发音诱发的ABR来估算听觉阈值。如果ABR不可用，则测量声反射阈值。

对不满12-42个月的儿童的评价包含：

通过VRA或条件化游戏听力测定进行评价，如果在以dBA加权的声场环境中估算阈值，则将所述阈值转化为HL。另外，进行了鼓室导抗测试以及TEOAE和DPOAE的测量。如果可能，使用短声或猝发音诱发的ABR来估算听觉阈值。如果ABR不可用，则测量声反射阈值。

如果无法通过行为测试获得可靠的结果，则建议进行ABR或声反射阈值测量。

对3.5岁和更大的儿童的评价包含：使用如上文所描述的游戏听力测定或标准纯音阈值、加成、鼓室导抗测试以及TEOAE和DPOAE的测量进行评价。

包含视觉强化听力测定(VRA)指南的视觉强化听力测定是用于获得介于6个月大到30个月大之间的儿童的频率和耳朵特异性听力阈值的标准的接受的方法。使用动画和/或发光的玩具来调节和强化对声音的转头响应。应当尽可能使用插入式耳机。如果儿童不能忍受佩戴耳机，则可以使用经过校准的声场扬声器所呈现的经过调频的纯音来完成测试。出于本研究的目的，应当将测量为dBA的这些阈值转化为dB HL。

包含听觉脑干反应(ABR)指南的空气传导(AC)阈值估算测试对于不配合行为评估或OAE的非常年幼的儿童来说是困难的。对听觉诱发脑干电位的测量是电生理学程序，所述电生理学程序允许评价由于合作或健康状况而无法参加行为测试的受试者的外周听觉功能和阈值测定。尽管ABR不测量听力敏感性，但ABR阈值与听力敏感性阈值高度相关并允许估算听觉阈值。

尽可能针对500、1000、2000和4000Hz刺激使用频率特异性猝发音刺激来测量ABR阈值。

如果用频率特异性刺激进行评价不可用，则获得短声刺激阈值。ABR阈值将被确定为获得可检测的、可重复的V波响应的最低等级。仅在可复制时标记响应，并将响应与规范的儿科数据进行比较。

通过耳机传递频率特异性刺激，即，低频、中频和高频猝发音或短声诱发的ABR。如果AC阈值升高，即，大于20dB nHL，或者在由于时间限制而无法进行全面的听力学评价的情况下，则进行骨传导(BC)测试以测定听力更好的耳朵的阈值。应当使用10dB的步长来测定阈值直到20dB nHL。使用转化表将以dB nHL为单位获得的所有阈值转化为以HL。

OAE指南

耳声发射是由健康的耳朵响应于声刺激而产生的声音。它们是耳蜗中的外毛细胞的活动的副产物。通过经由插入耳道外侧三分之一的探针向耳朵发出一系列非常短暂的声音刺激(短声)来测量OAE。探针包含产生短声的扬声器和测量在耳蜗中产生并且然后通过中耳反射回外耳道的所产生的OAE的麦克风。通过专门设计的硬件和软件对由麦克风拾取的所产生的声音进行数字化和处理。通过软件将非常低等级的OAE与背景噪声和诱发的短声的污染两者分开。

在治疗期间的监测

在开始治疗之前如建议的进行初步基线听力学评价后，建议在每两个顺铂周期之后进行临时听力测定。强烈建议在不满3.5岁的儿童中进行临时听力测定。

当所有儿童完成治疗并且年龄为3.5岁或更大时，对他们进行明确的评价。如果儿童足够大，则在最后一剂顺铂后的6-12周内完成评价。只要化疗前的听力阈值可用，就使用如本文定义的布罗克分级以及ASHA指南评估耳毒性。如果儿童在明确的听力学评价中听力损失等于或大于布罗克1级，则这被视为耳毒性为阳性。

无论在哪里可以应用ASHA标准，当出现以下听力损失时，耳毒性被定义为阳性：如ASHA标准所描述的，在任何一个测试频率下下降20db或在任何两个相邻频率下下降10db或在先前获得响应的三个连续测试频率(这是指高频)下失去响应。

在非对称性听力损失的情况下，将报告双耳的结果。

在中央审查了所有听力学数据。收集每个儿童的数据，并以HL加权提交。进行测试后，尽快提交数据以用于中央审查。下面描述了本研究中遵循的ASHA标准和OAE指南以及布罗克分级指南。

布罗克分级和ASHA标准

布罗克分级

使用布罗克分级系统监测顺铂诱导的双侧高频听力损失(1-4级)

双侧听力损失	等级	名称
			在所有频率下<40dB	0	最小
仅在8,000Hz下≥40dB	1	轻度
			在4,000Hz和更高频率下≥40dB	2	中度
在2,000Hz和更高频率下≥40dB	3	明显
			在1,000Hz和更高频率下≥40dB	4	重度

ASHA标准和指南：

来自美国言语语言听力协会针对接受耳蜗毒性药物疗法的个体的听力学管理的指南以及针对从出生到5岁的儿童的听力学评估指南。

监测要素：

在研究地点的耳蜗毒性监测计划需要(a)用于鉴别毒性的具体标准，(b)对有风险患者的及时鉴别，(c)关于潜在的耳蜗毒性效应的治疗前咨询，(d)有效的基线量度(在治疗前或在治疗早期)，(e)以足够的间隔监测评价以记载听力损失的进展或敏感性的波动，以及(f)随访评价以确定治疗后的效果。

耳蜗毒性的听力学标准：

在本研究中，构建了标准以鉴别和检测真正耳毒性的大多数情况。将标准设置为保守的，因为偶发的假阳性鉴别比其它方法更优选，这可能会延迟对耳毒性过程的检测。

在听力测定阈值的两次测试法正常变化的研究中，正常变化由在随机频率下的独立偏移反映出来。因此，已知在相邻测试频率下的偏移指示更多的系统变化并增加了敏感性真正降低的可能性。提倡频率平均化(即，计算某个频率范围内阈值的平均值)以用于检测降低的敏感性，并且相邻频率的使用等同于对那些频率进行平均化。另一个基本概念是在重复测试中观察到的降低是有效的变化。因此，至少两次观察到的相对于基线的偏移可能代表真正的偏移而不是正常的变化。

相对于基线量度计算听力敏感性的变化。将用于指示在耳毒性监测期间的听力下降的标准定义为(a)在任何一个测试频率下下降20dB，(b)在任何两个相邻频率下下降10dB，或(c)在先前获得响应的三个连续测试频率下失去响应(第三个标准特别是指测试的最高频率，其中较早的响应是在接近听力测定输出的极限时获得的，而较晚的响应则无法在听度计的极限处获得)。最后，通过重复测试来确认任何变化。

基线测试

在基线处对患者的听力进行测试。基线测试的目的是记载治疗前的听力状态。有风险的个体接受基线评价，所述基线评价尽可能完整。建议将语词辨析包含在听力学实践的理想范围内。建议在基线期间通过重复评价的所选部分来评估行为响应的可靠性。另外，应当评价基线之后的首次测试的结果的测试间可靠性。

基线测试的最佳时机在很大程度上取决于患者所接受的一种或多种药物。例如，已知接受大剂量卡那霉素(kanamycin)丸药的动物直到72小时后才显示出耳蜗毒性的组织学证据。因此，在缺乏更精确的数据的情况下，应当在第一治疗剂量之前或72小时内对接受氨基糖苷类的患者进行基线听力测定评价。在单个治疗疗程之后，顺铂可能引起可观察到的耳蜗毒性。因此，在第一剂顺铂之前获得基线量度。

监测时间表和随访测试

以实现对耳蜗毒性效应的尽早(在合理范围内)检测的间隔安排监测测试。建议立即进行治疗后测试以记载药物治疗结束时的听觉状态。建议以适当的间隔完成随访测试，以检测治疗后的耳蜗毒性或记载恢复情况。

用于阈值估算的ABR测试

刺激：频率特异性刺激(低频、中频和高频的猝发音)。

换能器：除非有禁忌，否则建议使用插入式耳机进行空气传导测试。如果空气传导增加，则需要骨传导换能器(即，如果空气传导阈值大于20dB nHL，则建议完成骨传导测试以评估听力损失的类型)。

方案：尝试将响应降到20dB nHL。尝试以至少10dB的步长定义阈值。为使婴儿具有足够的ABR阈值检测量度，特别是在使用声调刺激时，需要记录的时间为20-25毫秒。利用测试期期间协调的小睡时间和喂食时间进行睡眠剥夺，在无镇静的情况下在自然睡眠期间对出生到4个月大的年龄组中的许多儿童进行测试。然而，在一些情况下，活泼的或年龄较大的婴儿需要镇静，以允许有足够的时间来获取高质量的记录和足够的频率特异性信息。

耳声发射(OAE)

有限的

瞬态诱发耳声发射(TEOAE)：完成一个等级的(例如，80dB pSPL)短声刺激。此条件下正常听力的正态分布是已知的(参见Hussain DM,Gorga MP,Neely ST,Keefe DH,PetersJ.,听力正常的患者和听力损失的患者的瞬态诱发耳声发射(Transient evokedotoacoustic emissions in patients with normal hearing and in patients withhearing loss)《耳与听力(Ear Hear)》1998；19(6):434-49)。

畸变产物耳声发射(DPOAE)：至少在四个频率下完成了L₁和L₂65/55dB SPL中的一个等级。此条件下的正态分布是已知的(参见Gorga MP,Neely ST,Ohlrich B,Hoover B,Redner J,Peters J.,从实验室到临床：对听力正常的耳朵和听力损失的耳朵中的畸变产物耳声发射的大规模研究(From laboratory to clinic:a large scale study ofdistortion product otoacoustic emissions in ears with normal hearing and earswith hearing loss)《耳与听力》1997；18(6):440-55)。

综合的

TEOAE：使用短声和多个频率进行刺激完成两个等级(例如，80dB pSPL和更低等级)和/或一个等级，或DPOAE：完成三个等级中的其它等级(例如，如Kummer等人(18-19)所示的65/55和更低等级)以获得DPOAE输入-输出功能，或者在多个(多于四个)频率下完成一个等级，或者比较TEOAE(例如，单级，单刺激)和DPOAE(例如，单级)：TEOAE是更好的低频听力敏感性预预测因子，而DPOAE是更好的高频敏感性预测因子。

声导抗评估

由于在此年龄组使用低频探测音时鼓室导抗测试的有效性较差并且在高频探测音下证明了鼓室导抗测试的诊断值，因此使用等于或大于660Hz的探测音。

无响应患者

在无响应患者中，客观的听力量度(例如，听觉诱发电位和诱发耳声发射)是获得听觉信息的唯一方式。尽管客观的程序仅提供有关听力敏感性的总体信息，但它们仍然能够检测耳毒性听力损失。

肿瘤评价标准

对于所有端点，在试验治疗结束时，分析所有接受治疗的患者(即，接受至少一剂试验药物治疗的患者)以用于评价对术前化疗的响应和肿瘤状态。对治疗的响应定义如下：全响应(CR)：无疾病证据，并且血清AFP值正常(适龄)。部分响应(PR)：与血清AFP值减小>1log相关的任何肿瘤体积收缩均低于原始测量值。稳定疾病(SD)：肿瘤体积无变化，并且血清AFP浓度无变化或下降<1log。进行性疾病(PD)：即使没有肿瘤再生长的临床(物理和/或放射学)证据，也有1个或多个维度的明确增加和/或血清AFP浓度的任何明确增加(三个连续的1-2周测定)。

肿瘤复发定义如下：通过成像技术和血清AFP的连续升高(至少3个连续的上升值，以每周一次的间隔取得)检测到的一个或多个复发性肿瘤病变(局部或转移性)。在这些患者中，建议对肿瘤进行活检，但不是必须的。通过活检确认为在组织学上具有正常AFP的一个或多个复发性肿瘤病变(局部或转移性)。

从随机化到死亡时间计算总生存率。

将从随机化到以下事件中的第一个事件的时间进行计算无事件生存率：进展、复发、继发性原发性恶性肿瘤或死亡。

统计考虑因素

本试验被设计成通过卡方检验来检测布罗克等级≥1的听力损失的比率降低25％，从仅顺铂组的60％听力损失降到顺铂+STS组的35％听力损失。本研究具有统计效能以回答本试验的主要目标，所述主要目标是研究在施用顺铂的同时施用STS是否显著降低了一定年龄时的听力障碍。

将主要端点分析的结果呈现为具有95％置信区间(CI)的比率和95％CI的相对风险。另外，对听力图进行了详细评价。将事件时间端点呈现为卡普兰-迈耶估算量和对应的曲线图。通过将潜在的预后因素考虑在内的多变量Cox回归以探索性方式分析总生存率(OS)和无事件生存率(EFS)。通过卡方检验或费舍尔精确检验(Fisher's exact test)比较比率。

一旦102名患者可获得明确的听力障碍评估或在纳入最后一名患者后3年可获得明确的听力障碍评估，即完成了最终分析。在研究端点评价OS和EFS端点，并且将继续评价OS和EFS端点，直到从纳入最后一名患者起随访时间为至少5年。

结果

完成研究后，确定用顺铂但不用STS治疗的肝母细胞瘤患者的布罗克≥1的听力损失发生率为67％。用STS进行治疗使此数字大大降低了一半，降到37％(p值＝0.0033；95％CI；参见图40)。相反，对于本研究的STS组，布罗克0级或几乎没有听力损失的患者高于60％，而对于仅用顺铂治疗的组，则低于40％。对于布罗克2级和3级听力损失，听力损失下降最为显著，这代表用STS治疗能够预防的听力功能显著下降衰(参见图41)。在52个月的中值随访时间之后，观察到任一治疗组的无事件生存率或无复发生存率均无差异(参见图42A和图42B)。

这些结果表明，STS能够显著降低患有肝母细胞瘤的小儿患者的听力损失。布罗克2级和3级患者的听力损失下降最为显著，这表明STS能够预防这些小儿患者的听力显著下降。

Claims (38)

1.一种降低患有癌症并接受基于铂的化学治疗药物的小儿患者的耳毒性的方法，所述方法包括向所述小儿患者施用有效量的硫代硫酸钠。

2.一种预防性地治疗患有癌症并接受基于铂的化学治疗药物的小儿患者以降低所述小儿患者招致耳毒性的可能性的方法，所述方法包括向所述小儿患者施用有效量的硫代硫酸钠。

3.一种降低患有癌症并接受基于铂的化学治疗药物的小儿患者的长期耳毒性的方法，所述方法包括向所述小儿患者施用有效量的硫代硫酸钠。

4.一种降低患有癌症并接受基于铂的化学治疗药物的小儿患者的耳腔中的顺铂(cisplatin)的浓度的方法，所述方法包括向所述小儿患者施用有效量的硫代硫酸钠，其中在所述耳腔中基本上检测不到顺铂，并且其中被施用所述硫代硫酸钠的所述小儿患者更不易于因所述基于铂的化学治疗药物而招致耳毒性。

5.一种抑制与在小儿患者体内施用基于铂的化学治疗化合物相关的耳毒性效应的方法，所述方法包括向所述小儿患者施用有效量的硫代硫酸钠。

6.根据权利要求1到5所述的方法，其中所述小儿患者在基因座rsl872328处的基因ACYP2中携带有单核苷酸多态性。

7.根据权利要求2所述的方法，其中被施用硫代硫酸钠的所述小儿患者经历耳毒性的可能性比未施用硫代硫酸钠的小儿患者低约20％到约75％。

8.根据权利要求2所述的方法，其中被施用硫代硫酸钠的所述小儿患者经历耳毒性的可能性比未施用硫代硫酸钠的小儿患者低约50％。

9.根据权利要求1到8所述的方法，其中所述耳毒性包括听力损失、平衡失调、耳鸣或听力敏感性或其组合。

10.根据权利要求1到9所述的方法，其中所述基于铂的化学治疗药物选自顺铂、卡铂(carboplatin)、奥沙利铂(oxaliplatin)、奈达铂(nedaplatin)、四硝酸三铂(triplatintetranitrate)、菲铂(phenanthriplatin)、吡铂(picoplatin)和赛特铂(satraplatin)。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述基于铂的化学治疗药物是顺铂。

12.根据权利要求1到11所述的方法，其中所述癌症是局部的或播散的。

13.根据权利要求1到12所述的方法，其中所述癌症是局部的。

14.根据权利要求1到13所述的方法，其中所述癌症选自生殖细胞肿瘤、肝母细胞瘤、髓母细胞瘤、神经母细胞瘤和骨肉瘤。

15.根据权利要求1到14所述的方法，其中所述癌症是肝母细胞瘤。

16.根据权利要求1到15所述的方法，其中所述癌症是标准风险癌症、中等风险癌症或高风险癌症。

17.根据权利要求1到16所述的方法，其中所述癌症是标准风险癌症或中等风险癌症。

18.根据权利要求1到17所述的方法，其中所述癌症是标准风险肝母细胞瘤或中等风险肝母细胞瘤。

19.根据权利要求1到18所述的方法，其中所述小儿患者为1周到18岁。

20.根据权利要求1到19所述的方法，其中所述小儿患者为约12岁或更小。

21.根据权利要求1到20所述的方法，其中所述小儿患者为约5岁或更小。

22.根据权利要求1到21所述的方法，其中所述小儿患者为约2岁或更小。

23.根据权利要求1到22所述的方法，其中所述小儿患者为约1岁或更小。

24.根据权利要求1到23所述的方法，其中所述硫代硫酸钠在施用所述基于铂的化学治疗药物之前、同时或之后施用。

25.根据权利要求1到24所述的方法，其中所述硫代硫酸钠在施用所述基于铂的化学治疗药物之后约0.5小时到约10小时施用。

26.根据权利要求1到25所述的方法，其中所述硫代硫酸钠是静脉内施用的。

27.根据权利要求1到26所述的方法，其中在所述基于铂的化学治疗药物的每个周期，硫代硫酸钠的所述有效量为约5g/m²到约25g/m²。

28.根据权利要求1到27所述的方法，其中在每个周期用剂量为约1mg/kg到约5mg/kg或约10mg/m²到约300mg/m²的所述基于铂的化学治疗药物来治疗所述小儿患者。

29.根据权利要求1到28所述的方法，其中所述耳毒性由包括以下的一个或多个标准确定：耳鸣功能指数、布罗克分级(Brock grading)、美国言语语言听力协会标准(AmericanSpeech-Language-Hearing Association criteria)或国际儿科肿瘤学会波士顿耳毒性量表(International Society of Pediatric Oncology Boston Ototoxicity Scale)。

30.根据权利要求1到28所述的方法，其中所述耳毒性通过测量在包括500Hz、1,000Hz、2,000Hz、4,000Hz或8,000Hz或其频率组合的一个或多个频率下的听力损失来确定，其中相对于在所述患者接受基于铂的化学治疗药物或硫代硫酸钠或两者之前的基线量度来计算听力变化。

31.根据权利要求1到28所述的方法，其中所述耳毒性由包括以下的一个或多个标准确定：

a).以在单个频率下损失20dB来量度的听力下降；

b).以在两个连续频率下损失10dB来量度的听力下降；

c).在先前获得响应的三个连续测试频率下失去响应；

d).双侧高频听力下降，其特征在于：

i).在所有频率下听力损失均<40dB，这指示0级或最小听力损失；

ii).在仅8,000Hz下听力损失≥40dB，这指示1级或轻度听力损失；

iii).在4,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示2级或中度听力损失；

iv).在2,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示3级或明显听力损失；

v).在1,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示4级或重度听力损失；或

者

e).听力下降，其特征在于：

i).在所有频率下听力损失均≤20dB，这指示0级听力损失；

ii)在高于4,000Hz下HL>20dB，这指示1级听力损失；

iii).在4,000Hz和更高频率下HL>20dB，这指示2级听力损失；

iv).在2,000Hz或3,000Hz下HL>20dB，这指示3级听力损失；

v).在2,000Hz和更高频率下HL>40dB，这指示1级听力损失；或者

f).耳鸣功能指数提高；并且

其中相对于在所述患者接受基于铂的化学治疗药物或硫代硫酸钠或两者之前的基线量度来计算听力变化。

32.根据权利要求1到31所述的方法，其中与未施用硫代硫酸钠的小儿患者相比，被施用硫代硫酸钠的所述小儿患者的耳毒性经标准d)评估有所降低。

33.根据权利要求1到32所述的方法，其中与未施用硫代硫酸钠的小儿患者相比，施用硫代硫酸钠不会导致血清肌酐升高或肾小球滤过率降低。

34.根据权利要求1到33所述的方法，其中与未施用硫代硫酸钠的小儿患者相比，施用硫代硫酸钠不影响无复发生存率或总生存率。

35.根据权利要求1到34所述的方法，其中施用硫代硫酸钠不会导致包括发热性嗜中性白血球减少症、感染、低镁症、高钠血症、呕吐或恶心的一种或多种不良事件的发生率增加。

36.根据权利要求1到35所述的方法，其中在施用所述基于铂的化学治疗药物和所述硫代硫酸钠之后至少4周的时间测量耳毒性。

37.一种用于治疗小儿患者的肝母细胞瘤的给药方案，所述给药方案包括：

a).每个周期施用剂量为约1mg/kg到约5mg/kg或约10mg/m²到约300mg/m²的顺铂；

b).在所述顺铂的每个周期施用约5g/m²到约25g/m²的硫代硫酸钠，其中所述硫代硫酸钠在施用所述顺铂后约2小时到约6小时施用；并且

其中当向小儿患者给药时，所述给药方案与向小儿患者给药的不包含所述硫代硫酸钠的给药方案相比降低了耳毒性，其中耳毒性由选自以下的一个或多个标准确定：

a).以在单个频率下损失20dB来量度的听力下降；

b).以在两个连续频率下损失10dB来量度的听力下降；

c).在先前获得响应的三个连续测试频率下失去响应；

d).双侧高频听力下降，其特征在于以下标准：

i).在所有频率下听力损失均<40dB，这指示0级或最小听力损失；

ii).在仅8,000Hz下听力损失≥40dB，这指示1级或轻度听力损失；

iii).在4,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示2级或中度听力损失；

iv).在2,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示3级或明显听力损失；

v).在1,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示4级或重度听力损失；或

者

e).听力下降，其特征在于以下标准：

i).在所有频率下听力损失均≤20dB，这指示0级听力损失；

ii)在高于4,000Hz下HL>20dB，这指示1级听力损失；

iii).在4,000Hz和更高频率下HL>20dB，这指示2级听力损失；

iv).在2,000Hz或3,000Hz下HL>20dB，这指示3级听力损失；

v).在2,000Hz和更高频率下HL>40dB，这指示1级听力损失；

其中相对于在所述患者接受基于铂的化学治疗药物或硫代硫酸钠或两者之前的基线量度来计算听力变化。

38.一种降低患有标准风险或中度风险肝母细胞瘤并接受每个周期剂量为约1mg/kg到约5mg/kg或约10mg/m²到约300mg/m²的顺铂的约12岁和更小的小儿患者的耳毒性的方法，所述方法包括在所述顺铂的每个周期，在施用所述顺铂后约六小时施用约5g/m²到约25g/m²的硫代硫酸钠，其中耳毒性由选自以下的一个或多个标准确定：

a).以在单个频率下损失20dB来量度的听力下降；

b).以在两个连续频率下损失10dB来量度的听力下降；

c).在先前获得响应的三个连续测试频率下失去响应；

d).双侧高频听力下降，其特征在于以下标准：

i).在所有频率下听力损失均<40dB，这指示0级或最小听力损失；

ii).在仅8,000Hz下听力损失≥40dB，这指示1级或轻度听力损失；

iii).在4,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示2级或中度听力损失；

iv).在2,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示3级或明显听力损失；

v).在1,000Hz和更高频率下听力损失≥40dB，这指示4级或重度听力损失；或者

e).听力下降，其特征在于以下标准：

i).在所有频率下听力损失均≤20dB，这指示0级听力损失；

ii)在高于4,000Hz下HL>20dB，这指示1级听力损失；

iii).在4,000Hz和更高频率下HL>20dB，这指示2级听力损失；

iv).在2,000Hz或3,000Hz下HL>20dB，这指示3级听力损失；

v).在2,000Hz和更高频率下HL>40dB，这指示1级听力损失；

其中相对于在所述患者接受基于铂的化学治疗药物或硫代硫酸钠或两者之前的基线量度来计算听力变化；并且

其中与未施用硫代硫酸钠的小儿患者相比，施用硫代硫酸钠实质上不影响无复发生存率或总生存率；并且

其中施用硫代硫酸钠不会导致包括发热性嗜中性白血球减少症、感染、低镁症、高钠血症、呕吐或恶心的一种或多种不良事件的发生率实质上增加。

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