CN112684174B - Linc00305自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途 - Google Patents

Linc00305自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途 Download PDF

Info

Publication number
CN112684174B
CN112684174B CN202110083102.4A CN202110083102A CN112684174B CN 112684174 B CN112684174 B CN 112684174B CN 202110083102 A CN202110083102 A CN 202110083102A CN 112684174 B CN112684174 B CN 112684174B
Authority
CN
China
Prior art keywords
linc00305
reagent
lung cancer
protein
autoantibody
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202110083102.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN112684174A (zh
Inventor
周斌
张�林
王艳云
宋雅平
粟闵
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
West China Second University Hospital of Sichuan University
Original Assignee
West China Second University Hospital of Sichuan University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by West China Second University Hospital of Sichuan University filed Critical West China Second University Hospital of Sichuan University
Priority to CN202110083102.4A priority Critical patent/CN112684174B/zh
Publication of CN112684174A publication Critical patent/CN112684174A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN112684174B publication Critical patent/CN112684174B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

本发明涉及体外诊断试剂领域，具体涉及LINC00305自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途。本发明首次发现肺癌患者血清中LINC00305蛋白的自身抗体水平显著高于健康患者。本发明将检测LINC00305蛋白自身抗体的试剂用于制备肺癌筛查试剂盒，能够实现肺癌的有效筛查。

Description

LINC00305自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的 用途
技术领域
本发明属于生物体外诊断试剂领域，具体涉及LINC00305自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途。
背景技术
肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率呈逐年上升趋势，目前发病率居世界首位，严重威胁着人类健康和生命。肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。近50年来许多国家都报道肺癌的发病率和死亡率均明显增高，男性肺癌发病率和死亡率均占所有恶性肿瘤的第一位，女性发病率占第二位，死亡率占第二位。
肺癌是一种善于隐匿的疾病，经常在疾病发展到晚期才表现出临床症状，70～80％的肺癌患者在诊断出患有肺癌症状时已是中、晚期，癌细胞已经扩散，错过了最佳治愈时机，五年生存率低。对于早期的肺癌患者，经过及时治疗可大大提高患者的5年及以上生存率和生存质量。因此肺癌的早期诊断和进行有效的筛查至关重要。
肺癌的筛查，是指对那些没有肺癌相关症状的人群进行常规体检，在出现症状前及时发现肺癌。如果可以找到肺癌分子标志物，用于提示临床医生早期对患者采取相关的治疗措施或者决策具有重要的意义。
目前已有大量研究公开了多种肺癌标记物，然而，目前还未见LINC00305(longintergenic non-protein coding RNA 305)(基因ID：221241，蛋白Q7Z4B0)用于肺癌检测和诊断，以及检测LINC00305表达水平的试剂盒的报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种新的自身抗体类的肺癌标志物，以及该标志物的检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途。
本发明的技术方案包括：
检测LINC00305蛋白自身抗体的试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途。
如前述的用途，所述检测LINC00305蛋白自身抗体的试剂为酶联免疫吸附试验用试剂或联免疫分析试剂。
如前述的用途，所述检测LINC00305蛋白自身抗体的试剂为western blot试剂。
如前述的用途，所述检测LINC00305蛋白自身抗体的试剂为蛋白芯片检测方法用试剂。
如前述的用途，所述检测LINC00305蛋白自身抗体的试剂是检测人血清中LINC00305蛋白自身抗体的试剂。
一种肺癌筛查试剂盒，它包括用于检测LINC00305蛋白自身抗体的试剂。
如前述的试剂盒，所述检测LINC00305蛋白自身抗体的试剂为酶联免疫吸附试验用试剂或酶联免疫分析试剂。
如前述的试剂盒，所述检测LINC00305蛋白自身抗体的试剂为western blot试剂。
如前述的试剂盒，所述检测LINC00305蛋白自身抗体的试剂为蛋白芯片检测方法用试剂。
如前述的试剂盒，所述检测LINC00305蛋白自身抗体的试剂是检测人血清中LINC00305蛋白自身抗体的试剂。
实验结果表明，本发明具有如下有益效果：
本发明试剂盒通过检测LINC00305蛋白自身抗体，可以有效筛查肺癌，且用血清作为检测样品，对患者伤害很低，可用于临床肺癌的辅助诊断，为患者采取相关的治疗措施或者决策提供有效的依据，临床应用前景良好。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
下文中“LINC00305自身抗体”，指的是“LINC00305蛋白自身抗体”。
附图说明
图1为肺癌患者(LC)、肺部良性疾病(DC)、健康对照(NC)血清浆中ALKBH3自身抗体水平对比。
图2为肺癌患者(LC)与肺部良性疾病(DC)ROC分析。
图3为肺癌患者(LC)与健康对照(NC)ROC分析。
具体实施方式
一、临床资料
选取肺癌患者30例，肺部良性疾病(结核、错构瘤等非恶性肿瘤)29例，健康对照30例，基本信息如下：
基本信息 肺癌患者 肺部良性疾病 健康对照
人数 30 29 30
年龄 58±10.5 46.5±10.0 42±8.9
男性比例 20(66.7) 12(41.4％) 13(46.7％)
二、检测原理
HuProtTM人类蛋白质定制芯片上固定有LINC00305蛋白(UniProtKB数据库蛋白Q7Z4B0的第二异形体(isoform 2)：Q7Z4B0-2)的全长序列，加血清孵育后，血清中LINC00305自身抗体(主要包括IgG、IgM型抗体，也有一些其它类型的抗体)会结合上去，清洗去除未结合的抗体和其它蛋白质，再用抗人IgM荧光标记二抗(cy5标记，呈现红色)和抗人IgG荧光二抗(cy3标记，呈现绿色)检测，通过荧光扫描仪读取信号，信号的强弱与抗体的亲和力和数量呈正相关。
三、方法
1)复温：将芯片从-80℃冰箱取出，置于4℃冰箱复温半小时，然后置于室温复温15min；
2)封闭：复温后的芯片，固定14个blocks围栏，固定好之后，向每个block中加入封闭液，并放置侧摆摇床上，室温封闭3hr；
3)血清样本孵育：封闭完成后，倒尽封闭液，然后迅速加入预先准备好的血清孵育液，每张芯片可孵育14个血清样本，每个血清样本的上样体积为200μL，侧摆摇床20rpm，4℃过夜孵育(血清样本先放在4℃层析柜冻融，加孵育液以1:50比例稀释，得血清孵育液)；
4)清洗：将芯片及芯片围栏一同取出，吸去样本，然后迅速加入等体积的PBST，如此循环数次，保证在拆除芯片围栏时血清样本间无交叉污染。拆除芯片围栏后，将芯片置于加有清洗液的芯片清洗盒，水平摇床，室温80rpm，清洗3次，每次10min；
5)二抗孵育：将芯片转移到加入了3mL二抗孵育液的孵育盒中，侧摆摇床40rpm，避光，室温1hr；
6)清洗：将芯片取出(注意不能触及或划破芯片的上表面)，置于加有清洗液的芯片清洗盒，水平摇床，室温80rpm，清洗3次，每次10min。完成后用ddH2O清洗2次，每次10min；
7)干燥；
8)扫描：使用晶芯LuxScan 10K微阵列芯片扫描仪扫描；
9)数据提取：将对应GAL文件(记录了芯片中蛋白所在位置)打开，将芯片图像和GAL文件每个阵列整体对齐，按下自动对齐按钮，提取数据并保存。
四、结果
肺癌患者血清中的LINC00305自身抗体的平均表达水平为32.2SNR(荧光信号相对定量比值)，肺部良性疾病血清中LINC00305自身抗体的平均表达水平为50.8SNR，健康对照血清中LINC00305自身抗体的平均表达水平为42.5SNR。肺癌组与肺部良性疾病组(p<0.05)和健康对照组(p<0.05)相比均有统计学意义(图1)。肺癌组与良性疾病的ROC分析结果特异性为93.1％，敏感性为16.7％(图2)；肺癌组与健康对照的ROC分析结果特异性为93.1％，敏感性为20.0％(图3)，表明LINC00305自身抗体可特异地区分肺癌与肺部良性疾病和健康对照。
由以上结果可知，肺癌患者与非肺癌患者的血清中LINC00305自身抗体的水平差异显著，通过检测血清中LINC00305自身抗体的水平，能够达到肺癌筛查的目的。
实施例2本发明的检测试剂盒的组成及其使用方法
一、试剂盒组成
检测试剂盒(14人份)：
Figure BDA0002909816080000041
二、试剂盒使用方法
同实施例1第三部分——“血清中LINC00305自身抗体的检测”。
综上，本发明提供了一种肺癌筛查试剂盒。本发明试剂盒通过检测血清中LINC00305自身抗体的水平，可以筛查待检人群患肺癌的风险：若LINC00305自身抗体水平高(相对于健康人而言)，则患肺癌的风险高，若LINC00305自身抗体水平低，则患肺癌的风险低。可用于临床肺癌的辅助诊断，为患者采取相关的治疗措施或者决策提供有效的依据，临床应用前景良好。

Claims (10)

1.检测LINC00305蛋白自身抗体的试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途。
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述检测LINC00305蛋白自身抗体的试剂为酶联免疫分析试剂。
3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述检测LINC00305蛋白自身抗体的试剂为Western Blot检测方法用试剂。
4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述检测LINC00305蛋白自身抗体的试剂为蛋白芯片检测方法用试剂。
5.如权利要求1~4任一项所述的用途，其特征在于，所述检测LINC00305蛋白自身抗体的试剂是检测人血清中LINC00305蛋白自身抗体的试剂。
6.一种肺癌筛查试剂盒，其特征在于，它包括用于检测LINC00305蛋白自身抗体的试剂。
7.如权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述检测LINC00305蛋白自身抗体的试剂为酶联免疫分析试剂。
8.如权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述检测LINC00305蛋白自身抗体的试剂为Western Blot检测方法用试剂。
9.如权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述检测LINC00305蛋白自身抗体的试剂为蛋白芯片检测方法用试剂。
10.如权利要求6~9任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述检测LINC00305蛋白自身抗体的试剂为检测人血清中LINC00305蛋白自身抗体的试剂。
CN202110083102.4A 2021-01-21 2021-01-21 Linc00305自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途 Active CN112684174B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110083102.4A CN112684174B (zh) 2021-01-21 2021-01-21 Linc00305自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110083102.4A CN112684174B (zh) 2021-01-21 2021-01-21 Linc00305自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN112684174A CN112684174A (zh) 2021-04-20
CN112684174B true CN112684174B (zh) 2022-05-24

Family

ID=75458841

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110083102.4A Active CN112684174B (zh) 2021-01-21 2021-01-21 Linc00305自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112684174B (zh)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101516401A (zh) * 2006-08-21 2009-08-26 诺瓦提斯公司 阿尔茨海默病进展的生物标记
WO2016004387A1 (en) * 2014-07-02 2016-01-07 H. Lee Moffitt Cancer Center And Research Institute, Inc. Gene expression signature for cancer prognosis

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007006858A2 (en) * 2005-07-12 2007-01-18 Oy Jurilab Ltd Method for treatment of cardiovascular and metabolic diseases and detecting the risk of the same

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101516401A (zh) * 2006-08-21 2009-08-26 诺瓦提斯公司 阿尔茨海默病进展的生物标记
WO2016004387A1 (en) * 2014-07-02 2016-01-07 H. Lee Moffitt Cancer Center And Research Institute, Inc. Gene expression signature for cancer prognosis

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
LINC00305通过激活AHRR-NF-κB通路促进动脉粥样硬化过程中单核细胞炎性反应;张丹丹 等;《中国解剖学会2019年年会论文文摘汇编》;20191231;第166-167页 *
lncRNA在动脉粥样硬化病变中的作用研究进展;李丽娟等;《中国医药导报》;20180825(第24期);第28-31页 *
Serum LINC00305 expression and its genetic variant rs2850711 are associated with clinical and laboratory features of rheumatoid arthritis;Wahba, A. S 等;《BRITISH JOURNAL OF BIOMEDICAL SCIENCE》;20200430;第77卷;第142-147页 *
丙型肝炎患者干扰素治疗期间甲状腺功能异常的危险因素分析;王永素 等;《中国基层医药》;20151231;第22卷(第11期);第1712-1715页 *
长链非编码RNA在冠状动脉粥样硬化性心脏病中的研究进展;吴丽苹等;《诊断学理论与实践》;20171225(第06期);第103-106页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN112684174A (zh) 2021-04-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110108879B (zh) Erp27自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110836968A (zh) C9orf45自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110456064B (zh) Sars2自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110412274B (zh) C6orf106自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110596389B (zh) Esrp1自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN112684174B (zh) Linc00305自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110632317A (zh) Samhd自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110632315A (zh) Msi1自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110850088A (zh) Gtf2ird2自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110554192B (zh) Limch1自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110596386B (zh) Egflam自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110456079B (zh) Tapbp自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110412272B (zh) Alkbh3自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110632312B (zh) A1cf自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110412273B (zh) Caap1自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110850089B (zh) Sars自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110596387B (zh) Cox10自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110456065B (zh) Ccdc130自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110554191B (zh) Fam120b自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110749733B (zh) Tgif2ly自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110456060B (zh) Efcab13自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110412271B (zh) Ncam1自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110456061B (zh) Rundc3a自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110780073B (zh) Spanxn3自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途
CN110412299B (zh) Hectd3自身抗体检测试剂在制备肺癌筛查试剂盒中的用途

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant