CN112675188A

CN112675188A - 一种5-Methylcytidine在制备促生精药物中的应用

Info

Publication number: CN112675188A
Application number: CN202110035992.1A
Authority: CN
Inventors: 唐冲; 张滢
Original assignee: Dalian Sanbo Biotechnology Co ltd
Current assignee: Dalian Sanbo Biotechnology Co ltd
Priority date: 2021-01-12
Filing date: 2021-01-12
Publication date: 2021-04-20

Abstract

本发明公开一种5‑Methylcytidine在制备促生精药物中的应用，5‑Methylcytidine在治疗无精症或少精症具有独特的疗效。

Description

一种5-Methylcytidine在制备促生精药物中的应用

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及一种5-Methylcytidine在制备促生精药物中的应用。

背景技术

不孕不育约占育龄人口15％，其中男性因素占50％，无精子症占10％。无精子症可分为梗阻性无精子症和非梗阻性无精子症，其中梗阻性无精子症是由于炎症、先天畸形或肿瘤压迫等导致的附睾或输精管梗阻而使得精子无法正常排放而引起的，其本身的精子发生并未受到影响，因此临床上是可治愈的。而非梗阻性无精子症及少弱精子症则是由于精子发生障碍而导致的无成熟精子产生而导致不育。临床上针对非梗阻性无精子症及少弱精子症而导致的不育症，除少部分由于激素分泌异常引起的可给予激素治疗之外，其余无精子症均由遗传因素导致，因而没有有效治疗药物，唯一解决方案就是辅助生殖技术，即试管婴儿。

精子发生过程是指精原细胞通过有丝分裂、减数分裂以及变形，最终形成成熟精子的过程，该过程受到多种基因协同调控，其中任何一种调控失调都会导致生精障碍，最终导致临床中的无精子症或少弱精子症。从病理分型角度，生精障碍主要可以分为唯支持细胞综合征(生精小管内只有支持细胞，没有生精细胞)、生精停滞于精原细胞、生精停滞于精母细胞(减数分裂障碍)、生精停滞于精子细胞(精子变形障碍)。临床中最多见的是生精停滞于精子细胞时期，即精子后期的变形失调，无法产生正常形态的延长型精子。目前临床针对唯支持细胞综合征以及生精停滞于精原细胞和精母细胞的无精子症没有任何有效治疗手段，辅助生殖技术也只能使用供精，而对于生精停滞于精子细胞的无精子症还可进行显微取精手术，寻找可能存在的单倍体精子而进行自体精子辅助生殖。无论哪种方式，临床对于无精子症及少弱精子症患者的治疗手段都是进行人工辅助生殖，无法做到恢复自身生精进而自然受孕。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新的生精药物。

为了解决上述的技术问题，本发明提供一种5-Methylcytidine在制备促生精药物中的应用。

优选的，所述的促生精药物为治疗无精症的药物。

优选的，所述的促生精药物为治疗少弱精子症的药物。

优选的，所述的促生精药物为促进无精子症患者恢复生精能力。

优选的，5-Methylcytidine提高生精细胞的RNA的甲基化水平。

优选的，所述的促生精药物为非梗阻性无精子症及少弱精症治疗的药物。

另外，提供一种5-Methylcytidine在促进睾丸产生精子中的应用。

及，一种5-Methylcytidine在恢复睾丸产生精子中的应用。

5.Methylcytidine的结构式如下所示：

生精停滞源于精子发生过程中基因调控异常，尤其是精子发生特异表达基因的“延迟翻译”异常。所谓“延迟翻译”现象，是精子发生过程中特有的基因表达调控方式，由于精子发生后期圆形精子向延长型精子转化过程中发生细胞核浓缩而导致转录停止，即无新的RNA生成，因而后期延长型精子中蛋白翻译所需的模板RNA均来源于早期生精细胞中存储的RNA，这种转录与翻译非偶联的现象称为“延迟翻译”。这些在早期生精细胞中被存储的RNA为了保持自身不被降解和提前翻译，需要与相应的RNA结合蛋白绑定成为复合物存储于亚细胞单位RNP(核糖核蛋白)中，如若这一过程失调，则“延迟翻译”失控，进而导致生精障碍。RNA的延迟翻译最重要的环节在于RNA在RNP中的存储，这一过程依赖于RNA与RNA结合蛋白之间的相互作用，而这一相互作用依赖于RNA自身的修饰，尤其是甲基化修饰，即RNA上的甲基化修饰位点可特异性招募相关的RNA结合蛋白并形成复合物将RNA存储于RNP，保护RNA不被降解与翻译，留待后期的延迟翻译，促使精子发生正常进行。

因此，5-Methylcytidine促进生精的机理是：

1. 5-Methylcytidine是一种胞苷，可以无障碍进入生精细胞并整合进细胞RNA。

2.整合进生精细胞RNA可以提高相应RNA的甲基化水平，增加RNA甲基化位点，从而促使RNA存储于RNP中，扭转RNA延迟翻译异常，促进恢复精子发生。

附图说明

图1为精子浓度及精子形态结果。

图2为睾丸大小照片对比图。

图3为睾丸重量对比图。

图4为睾丸组织切片染色形态图。

图5为35天的繁殖对比图。

图6位70天的繁殖对比图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所述的实施例只是本发明的部分具有代表性的实施例，而不是全部实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的其他所有实施例都属于本发明的保护范围。

实施例1

成年ICR雄鼠分三组，分别为对照组(野生型WT)，模型组(白消安造模组)与给药组，其中对照组与模型组每组8只，给药组实行梯度浓度给药，共分三个浓度梯度，分别为1mg/kg，2mg/kg和4mg/kg，每组8只。模型组与给药组所有小鼠均使用35mg/kg白消安灌胃造模无精子症模型。造模40天后，无精子症表型达到顶峰，睾丸生精小管内生精细胞大幅减少，无成熟精子产生，小鼠不育。造模第40天开始，给药组开始腹腔注射5-Methylcytidine，剂量分别为1mg/kg，2mg/kg和4mg/kg溶于PBS溶液，连续每日腹腔注射给药35天(一个生精周期)；模型组同样条件与频率给PBS溶液。35天后，每组取6只小鼠附睾尾精子做精子活力分析，同时取小鼠睾丸做形态学分析；每组留2只小鼠与野生型雌鼠做交配实验。结果如下：

1.如图1所示，精子分析结果：与对照组野生型小鼠精子参数相比，模型组精子密度、活动力均显著下降；三个给药浓度组精子密度、活力虽尚未恢复至对照组水平，但相比模型组均显著增加，且三个给药浓度组之间精子参数无明显差异。

2.如图2和图3所示，睾丸大小及重量结果：对照组小鼠睾丸质量平均数为138mg，模型组睾丸明显缩小，质量平均数为31mg；给药组睾丸大小与模型组相比显著恢复，其中1mg/kg浓度给药组睾丸质量平均数为48mg，2mg/kg浓度给药组睾丸质量平均数为44mg，4mg/kg浓度给药组睾丸质量平均数为51mg，三个浓度组之间无明显差异。

3.如图4所示，睾丸组织切片染色形态学分析结果：与对照组相比，模型组睾丸生精小管内生精破坏严重，呈空泡状，很少见到生精细胞，完全无成熟精子细胞；三个浓度给药组睾丸大部分生精小管生精完全恢复，管腔内生精细胞充盈，可见成熟精子细胞，三个浓度组之间无显著差异，均恢复生精。

4.如图5和图6所示，交配实验结果：在模型组和给药组给予白消安处理40天后，即无精症达到顶峰时开始，对照组、模型组和三个浓度给药组分别取两只雄鼠各自与两只雌鼠合笼，观察繁育情况两个生精周期(70天)。我们分别在35天和70天的时候记录每个交配笼产仔情况，与模型组相比，给药组恢复生精情况显著。

本领域的技术人员在不脱离权利要求书确定的本发明的精神和范围的条件下，还可以对以上内容进行各种各样的修改。因此本发明的范围并不仅限于以上的说明，而是由权利要求书的范围来确定的。但本发明不限于所描述的实施方式。对于本领域的技术人员而言，在不脱离本发明原理和精神的情况下，对这些实施方式进行多种变化、修改、替换和变型，仍落入本发明的保护范围内。

Claims

1.一种5-Methylcytidine在制备促生精药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的5-Methylcytidine在制备促生精药物中的应用，其特征在于，所述的促生精药物为治疗无精症的药物。

3.根据权利要求1所述的5-Methylcytidine在制备促生精药物中的应用，其特征在于，所述的促生精药物为治疗少弱精子症的药物。

4.根据权利要求1所述的5-Methylcytidine在制备促生精药物中的应用，其特征在于，所述的促生精药物为促进无精子症患者恢复生精能力。

5.根据权利要求1所述的5-Methylcytidine在制备促生精药物中的应用，其特征在于，所述的生精药物为提高生精细胞的RNA的甲基化水平的药物。

6.根据权利要求1所述的5-Methylcytidine在制备促生精药物中的应用，其特征在于，所述的促生精药物为非梗阻性无精子症及少弱精症治疗的药物。

7.一种5-Methylcytidine在促进睾丸产生精子中的应用。

8.一种5-Methylcytidine在恢复睾丸产生精子中的应用。