CN112608824A - 一种一体式检测基因的封闭型pcr扩增管 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种一体式检测基因的封闭型PCR扩增管，包括扩增外管和扩增内管；所述扩增外管顶面通过粘结、旋接或嵌合密封固定有封盖；所述封盖包括双端中空的管仓，所述管仓一端固定有封板；所述封板于管仓内侧固定有过渡仓；所述管仓另一端通过旋接或嵌合密封固定有格栅板；所述格栅板远离管仓一面压合有检测波板；所述过渡仓远离封板一面固定有与过渡仓连通的检测管阵列；本发明的一体式检测基因的封闭型PCR扩增管，采用统一进样和特异性基因独立检测方式完成检测，且整个进样过程能够顺利完成。

Description

一种一体式检测基因的封闭型PCR扩增管

技术领域

本发明涉及一种PCR扩增管，具体涉及一种一体式检测基因的封闭型PCR扩增管，属于PCR扩增管技术领域。

背景技术

PCR扩增检测在是现有的基因检测应用最普遍的方法，扩增方法灵敏度极高，可以将原本浓度很低的待测基因扩增到数万至数百万倍的浓度，其扩增产物一般可以使用电泳的方法来检测；正因为PCR扩增的高灵敏度，在扩增过程中很容易发生交叉污染，而且该污染很容易被放大，出现“假阳性”的现象；其次，一次PCR反应一般情况下只能检测一个基因的信息，不能实现对多个基因的高通量检测，因此，还无法满足人们对于多基因同时检测的需求；尽管利用基因芯片可以高通量地获得基因的信息，同时检测多个基因，但是其待测基因的扩增、扩增产物转移以及杂交都是在不同的体系中完成，每个过程的衔接中难免都增大了污染的可能性，从而降低了实验检测的可靠性；为此，中国专利申请号：201310132465.8，公开了一种基因检测一体完成的封闭型PCR扩增管，其能够使得加样更加简便，但其使用过程容易存在内部负压或等压问题，造成进样不全面，同时，其也无法完成一些特异性或变应性基因检测。

发明内容

为解决上述问题，本发明提出了一种一体式检测基因的封闭型PCR扩增管，采用统一进样和特异性基因独立检测方式完成检测，且整个进样过程能够顺利完成。

本发明的一体式检测基因的封闭型PCR扩增管，包括扩增外管和扩增内管；所述扩增外管顶面通过粘结、旋接或嵌合密封固定有封盖；

所述封盖包括双端中空的管仓，所述管仓一端固定有封板；所述封板于管仓内侧固定有过渡仓；所述管仓另一端通过旋接或嵌合密封固定有格栅板；所述格栅板远离管仓一面压合有检测波板；所述过渡仓远离封板一面固定有与过渡仓连通的检测管阵列；所述检测管阵列另一端一体制成有检测斗；所述检测斗底部设置有滴样管；所述检测斗远离滴样管一侧一体制成有盛液仓；所述滴样管延伸至格栅板其格栅内侧；所述检测波板包括板体；所述板体上设置有与滴样管正对的核酸探针；所述板体于核酸探针边侧设置有透液孔；所述板体远离核酸探针一面粘结有封闭仓；

所述扩增内管包括一端中空，另一端封闭的管体，及设置于管体内侧的细径渗透管段；及与细径渗透管段连通的多个斜仓；所述斜仓交替设置于细径渗透管段或呈倒V型设置于细径渗透管段；所述细径渗透管段顶部设置有与其连通的嵌柱；所述嵌柱固定于管体其封闭端外部；所述嵌柱轴心处设置有直槽；所述嵌柱密封嵌入到检测斗；所述管体外部设置有导流斗；所述导流斗外沿与扩增外管内壁压合；所述导流斗通过导流通道连接到细径渗透管段；

所述扩增外管内侧注有PCR扩增体系液；所述斜仓内注有公共杂交体系液；所述检测斗内侧注有特异性杂交体系液。

进一步地，所述封闭仓内设置有吸液垫。

进一步地，所述透液孔顶面设置有抬高沿；且其内侧嵌有一吸液柱。

进一步地，所述细径渗透管段、斜仓和导流通道一体制成于管体上。

进一步地，所述细径渗透管段、斜仓固定于管体内，所述导流通道开设于管体和细径渗透管段上。

进一步地，所述检测斗注液时，先将特异性杂交体系液抽取到注射器内，接着，将注射器其注射头嵌入到滴样管，特异性杂交体系液通过检测斗进入到盛液仓内，所述斜仓注液时，先将细径渗透管段底部封闭，将公共杂交体系液对管体进行满管填充，完成填充后，公共杂交体系液进入到斜仓内，接着，将细径渗透管段底塞拔出，从而将多余公共杂交体系液回收。

进一步地，所述检测波板制备时，先进行打透液孔，并在透液孔外部粘结或加工出抬高沿；接着，对检测波板进行清洗、等离子处理和化学修饰后形成活性基团，并通过点样仪将对应的核酸探针按照一定的阵列固定到检测波板上。

进一步地，所述检测波板进行荧光检测时，将格栅板和管仓分离，并将格栅板进行荧光检测；另外，还可直接将检测波板和封闭仓脱离格栅板，即可进行荧光检测。

进一步地，所述扩增管其扩增工艺具体如下：

首先，将扩增外管内注入待扩增的PCR扩增体系，并送入到交PCR扩增仪上扩增，完成扩增后，将整个扩增管倒置，通过导流斗和导流通道将扩增液导入到细径渗透管段，利用细径渗透管段的毛细流动性，从而将扩增液与公共的杂交体系液进行一次杂交混合，接着将混合液送入到过渡仓进行缓冲和过渡，接着，通过检测管阵列将混合液送入到各个特异性基因的检测斗，检测斗内侧的特异性杂交体系液与混合液二次混合，形成独立的扩增反应液，最后，利用滴液管向检测波板缓释，从而进行持续性供液检测，使检测液和其对应的核酸探针能够精确接触；最后，将检测玻片送至荧光检测设备进行荧光检测。

本发明与现有技术相比较，本发明的一体式检测基因的封闭型PCR扩增管，利用吸液垫或吸液柱的毛细作用，给检测玻片处施加引力，并通过将进样管设置细径结构，能够实现持续稳定进样，且预先将异性杂交体系液或结合液送入到检测仓存储，当液体完成扩增倒置后，能够直接进入到各个检测仓形成独立的结合液，且PCR扩增仪对PCR混合液扩增时，不影响斜仓和检测仓储液。

附图说明

图1是本发明的扩增外管一实施例结构示意图。

图2是本发明的扩增外管另一实施例结构示意图。

图3是本发明的扩增内管一实施例结构示意图。

图4是本发明的扩增内管另一实施例结构示意图。

图5是本发明的整体结构示意图。

具体实施方式

实施例1：

如图1、图3和图5所示的一体式检测基因的封闭型PCR扩增管，包括扩增外管A和扩增内管；所述扩增外管顶面通过粘结、旋接或嵌合密封固定有封盖；

所述封盖包括双端中空的管仓1，所述管仓1一端固定有封板2；所述封板2于管仓内侧固定有过渡仓3；所述管仓3另一端通过旋接或嵌合密封固定有格栅板4；所述格栅板4远离管仓一面压合有检测波板5；所述过渡仓3远离封板一面固定有与过渡仓连通的检测管阵列6；所述检测管阵列6另一端一体制成有检测斗7；所述检测斗7底部设置有滴样管8；所述检测斗7远离滴样管一侧一体制成有盛液仓9；所述滴样管8延伸至格栅板4其格栅内侧；所述检测波板5包括板体51；所述板体上设置有与滴样管正对的核酸探针；所述板体于核酸探针边侧设置有透液孔52；所述板体51远离核酸探针一面粘结有封闭仓53；

所述扩增内管包括一端中空，另一端封闭的管体10，及设置于管体内侧的细径渗透管段11；及与细径渗透管段连通的多个斜仓12；所述斜仓12交替设置于细径渗透管段或呈倒V型设置于细径渗透管段；所述细径渗透管段11顶部设置有与其连通的嵌柱13；所述嵌柱13固定于管体10其封闭端外部；所述嵌柱13轴心处设置有直槽14；所述嵌柱13密封嵌入到检测斗7；所述管体10外部设置有导流斗15；所述导流斗15外沿与扩增外管A内壁压合；所述导流斗15通过导流通道16连接到细径渗透管段11；

所述扩增外管A内侧注有PCR扩增体系液；所述斜仓12内注有公共杂交体系液；所述检测斗7内侧注有特异性杂交体系液。

再一实施例中，所述封闭仓53内设置有吸液垫54；所述细径渗透管段11、斜仓12和导流通道16一体制成于管体10上。

如图2所示，再一实施例中，所述透液孔52顶面设置有抬高沿55；且其内侧嵌有一吸液柱56。

如图4所示，再一实施例中，所述细径渗透管段11、斜仓12固定于管体10内，所述导流通道16开设于管体和细径渗透管段11上。

其中，所述检测斗注液时，先将特异性杂交体系液抽取到注射器内，接着，将注射器其注射头嵌入到滴样管，特异性杂交体系液通过检测斗进入到盛液仓内，所述斜仓注液时，先将细径渗透管段底部封闭，将公共杂交体系液对管体进行满管填充，完成填充后，公共杂交体系液进入到斜仓内，接着，将细径渗透管段底塞拔出，从而将多余公共杂交体系液回收。

其中，所述检测波板制备时，先进行打透液孔，并在透液孔外部粘结或加工出抬高沿；接着，对检测波板进行清洗、等离子处理和化学修饰后形成活性基团，并通过点样仪将对应的核酸探针按照一定的阵列固定到检测波板上。

其中，所述检测波板进行荧光检测时，将格栅板和管仓分离，并将格栅板进行荧光检测；另外，还可直接将检测波板和封闭仓脱离格栅板，即可进行荧光检测。

其中，所述扩增管其扩增工艺具体如下：

首先，将扩增外管内注入待扩增的PCR扩增体系，并送入到交PCR扩增仪上扩增，完成扩增后，将整个扩增管倒置，通过导流斗和导流通道将扩增液导入到细径渗透管段，利用细径渗透管段的毛细流动性，从而将扩增液与公共的杂交体系液进行一次杂交混合，接着将混合液送入到过渡仓进行缓冲和过渡，接着，通过检测管阵列将混合液送入到各个特异性基因的检测斗，检测斗内侧的特异性杂交体系液与混合液二次混合，形成独立的扩增反应液，最后，利用滴液管向检测波板缓释，从而进行持续性供液检测，使检测液和其对应的核酸探针能够精确接触；最后，将检测玻片送至荧光检测设备进行荧光检测。

上述实施例，仅是本发明的较佳实施方式，故凡依本发明专利申请范围所述的构造、特征及原理所做的等效变化或修饰，均包括于本发明专利申请范围内。

Claims (9)

1.一种一体式检测基因的封闭型PCR扩增管，其特征在于：包括扩增外管和扩增内管；所述扩增外管顶面通过粘结、旋接或嵌合密封固定有封盖；

所述封盖包括双端中空的管仓，所述管仓一端固定有封板；所述封板于管仓内侧固定有过渡仓；所述管仓另一端通过旋接或嵌合密封固定有格栅板；所述格栅板远离管仓一面压合有检测波板；所述过渡仓远离封板一面固定有与过渡仓连通的检测管阵列；所述检测管阵列另一端一体制成有检测斗；所述检测斗底部设置有滴样管；所述检测斗远离滴样管一侧一体制成有盛液仓；所述滴样管延伸至格栅板其格栅内侧；所述检测波板包括板体；所述板体上设置有与滴样管正对的核酸探针；所述板体于核酸探针边侧设置有透液孔；所述板体远离核酸探针一面粘结有封闭仓；

所述扩增内管包括一端中空，另一端封闭的管体，及设置于管体内侧的细径渗透管段；及与细径渗透管段连通的多个斜仓；所述斜仓交替设置于细径渗透管段或呈倒V型设置于细径渗透管段；所述细径渗透管段顶部设置有与其连通的嵌柱；所述嵌柱固定于管体其封闭端外部；所述嵌柱轴心处设置有直槽；所述嵌柱密封嵌入到检测斗；所述管体外部设置有导流斗；所述导流斗外沿与扩增外管内壁压合；所述导流斗通过导流通道连接到细径渗透管段；

所述扩增外管内侧注有PCR扩增体系液；所述斜仓内注有公共杂交体系液；所述检测斗内侧注有特异性杂交体系液。

2.根据权利要求1所述的一体式检测基因的封闭型PCR扩增管，其特征在于：所述封闭仓内设置有吸液垫。

3.根据权利要求1所述的一体式检测基因的封闭型PCR扩增管，其特征在于：所述透液孔顶面设置有抬高沿；且其内侧嵌有一吸液柱。

4.根据权利要求1所述的一体式检测基因的封闭型PCR扩增管，其特征在于：所述细径渗透管段、斜仓和导流通道一体制成于管体上。

5.根据权利要求1所述的一体式检测基因的封闭型PCR扩增管，其特征在于：所述细径渗透管段、斜仓固定于管体内，所述导流通道开设于管体和细径渗透管段上。

6.根据权利要求1所述的一体式检测基因的封闭型PCR扩增管，其特征在于：所述检测斗注液时，先将特异性杂交体系液抽取到注射器内，接着，将注射器其注射头嵌入到滴样管，特异性杂交体系液通过检测斗进入到盛液仓内，所述斜仓注液时，先将细径渗透管段底部封闭，将公共杂交体系液对管体进行满管填充，完成填充后，公共杂交体系液进入到斜仓内，接着，将细径渗透管段底塞拔出，从而将多余公共杂交体系液回收。

7.根据权利要求1所述的一体式检测基因的封闭型PCR扩增管，其特征在于：所述检测波板制备时，先进行打透液孔，并在透液孔外部粘结或加工出抬高沿；接着，对检测波板进行清洗、等离子处理和化学修饰后形成活性基团，并通过点样仪将对应的核酸探针按照一定的阵列固定到检测波板上。

8.根据权利要求1所述的一体式检测基因的封闭型PCR扩增管，其特征在于：所述检测波板进行荧光检测时，将格栅板和管仓分离，并将格栅板进行荧光检测；另外，还可直接将检测波板和封闭仓脱离格栅板，即可进行荧光检测。

9.根据权利要求1所述的一体式检测基因的封闭型PCR扩增管，其特征在于：所述扩增管其扩增工艺具体如下：

首先，将扩增外管内注入待扩增的PCR扩增体系，并送入到交PCR扩增仪上扩增，完成扩增后，将整个扩增管倒置，通过导流斗和导流通道将扩增液导入到细径渗透管段，利用细径渗透管段的毛细流动性，从而将扩增液与公共的杂交体系液进行一次杂交混合，接着将混合液送入到过渡仓进行缓冲和过渡，接着，通过检测管阵列将混合液送入到各个特异性基因的检测斗，检测斗内侧的特异性杂交体系液与混合液二次混合，形成独立的扩增反应液，最后，利用滴液管向检测波板缓释，从而进行持续性供液检测，使检测液和其对应的核酸探针能够精确接触；最后，将检测玻片送至荧光检测设备进行荧光检测。

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