CN112568217B - 一种无毒性虹鳟和鲈鱼剥制标本的制作、保存和标本个体鉴定的方法 - Google Patents

一种无毒性虹鳟和鲈鱼剥制标本的制作、保存和标本个体鉴定的方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种无毒性虹鳟和鲈鱼剥制标本的制作、保存和标本个体鉴定的方法，该方法包括剥制标本的制作过程、保存和标本个体的鉴定。将鱼固定为设计好的运动状态，制作鱼头模型；用保鲜膜包被标本的整个表面，向容器内倒入调制好的石膏，待石膏固化后，将固态石膏分成多块，取出鱼标本；将固态石膏合拼在一起，向其内注入发泡料，制作鱼标本的形状，取出鱼模型；根据展示方式选择鱼的侧面或者腹部进行切口，剥离皮张；对鱼皮进行脱脂，将皮张放入溶有洗衣粉的水中，将表面的油脂去除，然后用酸性白土和锯末进行脱脂，风干；将鱼皮和鱼头模型安装在鱼模型上。本发明提供的制作虹鳟和鲈鱼标本的方法对标本制作人员和参观人员都无身体损害。

Description

一种无毒性虹鳟和鲈鱼剥制标本的制作、保存和标本个体鉴 定的方法
技术领域
本发明属于虹鳟和鲈鱼标本制作领域，涉及一种无毒性虹鳟和鲈鱼剥制标本的制作、保存和标本个体鉴定的方法。
背景技术
虹鳟和鲈鱼标本在科研展示和教学展示中具有较大的利用价值。虹鳟和鲈鱼标本可以让更多的人了解该标本鱼的外形特征、生活习性和生长状态，可以有效促进水产养殖产业的发展。目前，虹鳟和鲈鱼标本制作技术还不够成熟，几乎所有的虹鳟和鲈鱼标本制作过程都添加了有毒的化学药剂。最早制作标本添加的是三氧化二砷(俗称，砒霜)，三氧化二砷具有剧毒性。随着标本制作的技术越来越成熟，毒性较小的化学药品(比如硼酸、明矾等)慢慢取代了三氧化二砷，这表明标本的制作技术有了质的飞跃。但这并不能满足人们对标本的需求，因为现有的制作技术采用硼酸和明矾对剥制标本外皮进行防腐。但是，这也就意味着剥制标本的外皮也是微毒的。亟待一种新型无毒的标本制作技术，以满足人们对标本的需求。
进一步，随着标本行业的发展，同一鱼类物种标本的数量逐渐增多，标本个体之间容易出现混乱。而标本同时具有较高的科研价值，因为不同的标本个体的采集时间、采集地点、采集人、标本大小、标本图片、遗传多样性、生活习性各不相同。同一物种的不同个体在不同地点表现出的生活习性不尽相同，甚至在同一地点不同季节和不同时间表现处的生活习性也不相同，比如许多鱼类物种身体皮肤颜色在不同季节会出现变化。而鱼类标本可以很好的体现鱼体活着时候的状态。但是，如果鱼类标本个体之间出现混乱，则该标本失去科研价值。亟待一种可以鉴定标本个体的有效方法。
发明内容
为解决上述技术问题，提供一种无毒性虹鳟和鲈鱼剥制标本的制作、保存和标本个体鉴定的方法。
本发明的技术方案是：
一种无毒性虹鳟和鲈鱼剥制标本的制作、保存和标本个体鉴定的方法，所述方法包括以下步骤：
S1：将待制作的鱼标本窒息而死，将鱼表面清洗干净，保存在标本制作过程中脱落的鱼鳞；
S2：将待制作标本的鱼进行拍照，制作标本前要对鱼进行详细拍照，作为制作图片，以便标本制作和喷漆；并测量鱼的各项指标：虹鳟和鲈鱼的全长(嘴尖到尾端的距离)、体长、体宽(鱼的厚度)、体高(鱼的高度)、头长、头高、头宽、吻长、眼径、眼间距、尾柄长，两眼中间到背鳍前缘的距离、两眼中间到胸鳍的距离、眼中间到腹鳍的距离、眼中间到臀鳍的距离、眼中间到尾鳍的距离、鱼眼的长度和高度；
S3：固定鱼头的形态，调节好鱼口张开的大小，把鱼头放入藻酸盐印模内，等待藻酸盐印模彻底凝固，将鱼从藻酸盐印模中取出，母模制作完成；制作玻璃胶树脂和原子灰树脂混合物；将混合物缓慢倒入到母模内，使混合物凝固在母模的内壁上，鱼头模型制作完成；将鱼头的模型从母模中取出，根据鱼头进行修补和上色，使鱼头模型逼真于鱼头；
S4：把鱼固定为设计好的运动状态，固定鱼鳍在该运动状态下的伸展程度大小，并用保鲜膜包被标本的整个表面；将被保鲜膜包被的鱼放入长方体容器内，向容器内倒入调制好的石膏，待石膏固化后，将固态石膏分成多块，取出鱼标本；
S5：将固态石膏合拼在一起，在固态石膏的内测涂抹石蜡，然后向其内注入发泡料，制作鱼标本的形状，取出鱼模型，根据之前测量鱼的各项指标的大小打磨鱼模型的大小，将鱼模型的大小和鱼大小一致；
S6：根据展示方式选择鱼的侧面或者腹部进行切口，剥离皮张；对鱼皮进行脱脂，用小刀刮掉皮张表面的脂肪，然后用酸性白土和锯末进行脱脂，然后将皮张自然风干，干燥过程中会有油脂溢出，将皮张放入溶有洗衣粉的水中，将表面的油脂去除，然后在放入食盐水内浸泡两小时；浸泡期间，每小时搅拌2-4次，每次8-12分钟；
S7：在鱼模型的鱼皮开口处，挖出一长方形缺口，其内放置大小一致的木板，鱼标本制作完成后，其上可以安装铁钉，用于方便悬挂标本；木板和鱼模型之间放入樟脑和白灰粉，用于除虫和防潮；
S8：将鱼皮张包被在鱼模型表面，调整皮张的位置，对皮张的切口进行缝合，缝合标本应从皮张开口的端头顺尾部的走向缝合，缝合线应平整、均匀；缝合结束后重新调整皮张的位置，把脱落的鱼鳞用胶水粘回原位置；把鱼头模型安装在鱼模型上，然后进行自然风干；
S9：安装鱼标本义眼，仪眼的安装务必确保到位并对称；
S10：根据之前鱼的照片在鱼的表面喷相应颜色的油漆，使鱼标本和鱼外貌一致，标本整形固定后，放置在通风阴凉处；待躯体干燥后，用稀清漆、松香水、树脂涂在躯体表面，以增加光泽；完成虹鳟和鲈鱼无毒性剥制标本的制作。
S11：将制作好的标本保存于透明的真空装置内，待标本用时，可将标本拿出进行展示，标本不用时，保存于透明的真空装置内，可进行展览。
S12：在制作虹鳟和鲈鱼剥制标本的过程中，提取这两种鱼类的肌肉DNA，用虹鳟和鲈鱼的微卫星引物对该标本DNA进行PCR扩增，将PCR产物在12％的聚丙烯酰胺凝胶上跑电泳，在照胶仪上面记录实验结果，保存该标本的遗传信息。
S13：待标本制作完成后，出现多条虹鳟或者鲈鱼的标本个体混乱时候，提取该剥制标本的鳍条DNA，用该物种的微卫星引物对其进行PCR扩增，将PCR产物在12％的聚丙烯酰胺凝胶上跑电泳，在照胶仪上面记录实验结果，将得出的遗传信息和之前保存的标本遗传信息进行比对，确认该标本的具体个体信息，从而实现标本的个体鉴定。
所述步骤(12)和步骤(13)虹鳟和鲈鱼的微卫星引物信息为：
表1虹鳟剥制标本个体鉴定微卫星引物信息
Figure GDA0003517399800000031
Figure GDA0003517399800000041
表2鲈鱼剥制标本个体鉴定微卫星引物信息
Figure GDA0003517399800000042
Figure GDA0003517399800000051
所述步骤(12)和步骤(13)所述的PCR反应体系为25ul，具体反映体系为：PCR Mix12.5ul、上下游引物各1ul、DNA 1ul、水9.5ul。
所述步骤(12)和步骤(13)所述的PCR反应程序为：95℃3分钟；95℃30秒，56℃30秒，72℃30秒，30个循环；72℃延伸10分钟；4℃保存。
优选地，所述步骤(1)中，温度需为4-10℃，操作时间为10分钟以内。
优选地，所述步骤(2)测量数据需准确，精确到毫米。在进行测量虹鳟和鲈鱼各项指标前，可在鱼体表面涂抹硼砂，可有助于减少鱼鳞的脱落。
优选地，所述步骤(3)所述藻酸盐：水为1:1，水必须为蒸馏水。藻酸盐混合物制作过程必须为藻酸盐倒入水中，而不是把水加入藻酸盐中。先用手搅拌，再用真空搅拌机搅拌，搅拌方向一致，否则会有气泡。玻璃胶树脂和原子灰树脂混合物制作过程中玻璃胶树脂：原子灰树脂为5:1，顺时针搅拌均匀。玻璃胶树脂和原子灰树脂混合物凝固在母模的内壁时的外界温度需为4-10℃。
优选地，所述步骤(4)固定鱼鳍形状的时候，把每个鳍条伸缩的角度伸展到最大角度。把硬纸片剪成鳍条的形状，每个鳍条的两侧用两张硬纸片固定住，分别夹在鳍的上下或左右，用回形针固定鳍条伸展的状态；石膏固化后取出鱼标本时不可破坏鱼的完整性，石膏可掰成数块，但后期须能拼成原样。
优选地，所述步骤(5)制作鱼模型结束后，在剥离鱼皮张前，根据鱼的各项指标在鱼模型上画出各个器官的位置，包括各个鳍条、测线、肛门等，方便安装鱼皮时提高准确性。
优选地，所述步骤(6)在给鱼进行剥皮的时候先从鱼眼开始，将眼取出，用刀在鰓下划一周，将里面的肉取出；剥离鱼皮张的时候，要逆鱼鳞顺序方向进行剥离，可有效防止鱼鳞脱落；剥离的皮张要放入食盐水中进行浸泡两小时，食盐水的温度为4-10摄氏度，食盐的浓度为1L水加入食盐50克；对鱼进行切口，剥离皮张时，应从尾到头的方向进行剪切；对鱼皮进行风干时，保持风速为1米/秒，外界温度为4-10摄氏度，风干时间为12小时。
优选地，所述步骤(7)在鱼模型上安装的木板的四周须挫平，保持鱼模型表面光滑。樟脑和白灰粉放于木板和鱼模型之间，不能和鱼皮接触。
优选地，所述步骤(8)把皮张包被在鱼模型表面后，用大头针把鱼皮张的各个器官固定住，防止鱼皮张移位；皮张要频繁喷水，防止皮张过度干裂；鱼皮张可以纵向拉伸，不能横向拉伸；清理完鱼皮张脂肪后，鳍条是空的，用纸黏土填充；如果鱼尾或鳍条尾端断裂，可用擦镜纸和胶水进行修补；把擦镜纸黏附在鳍条上，然后沿着鱼鳍尖剪掉；在安装鱼皮的时候，鱼鳍的位置须和设计好的鱼的状态一致；给鱼模型安装鱼皮张后，须进行多次测试，然后和鱼照片进行对比，如果有凹陷，则用AB补土进行修补，如果有突起，则进行挫平；标本制作后期，用一块纸板，剪切出两个鱼鳍的形状，用该纸板把鱼鳍夹住，防止鱼鳍在风干的时候卷曲；纸板不能太光滑。鱼鳍一定要清洗干净，不能有黏液；在制作过程中，如果有鳍条脱落，在制作后期，用鳍条根部的鱼体上安装两个大头针，去掉大头针的头部，然后把鱼鳍插入大头针上，用502粘住；在标本的切口处，缝合后会留下印记，则用原子灰进行补上，使标本整体圆润光滑；在进行标本切口缝合时，须用大头针将鱼的各个器官固定在鱼模型的相应位置。在安装鱼头模型时，鱼头模型和鱼身接触的地方要打磨圆滑，并用502把鱼头模型固定在鱼身上。
优选地，所述步骤(9)安装义眼和皮张时，如果制作的鱼模型有凹陷的部分可用AB补土进行修补；在安装鱼义眼时，义眼的瞳孔尖方向须朝向鱼鼻子。
优选地，所述步骤(10)给鱼标本上色的时候先喷一层无色底漆；鱼标本制作好后，须向鱼鳍涂抹一层光亮剂；喷漆的时候先将鱼眼用纸黏土覆盖，避免油漆喷到义眼上，给鱼鳍喷色的时候，要用一张纸隔开。
本发明有益效果：
1、制作出的标本无毒性，无刺激性气味，对标本制作者和使用者均无身体的损伤；本制作方法采用发泡剂，制作出的标本不受潮，质量轻，使用时间长；
2、本制作方法制作的鱼模型大小和鱼标本本身尺寸大小一致，可以较高程度还原鱼的原貌。
3、本方法使用翻模制作鱼头模型，制作出的鱼头模型和鱼标本大小一致。
4、使用本方法处理鱼皮，不会有任何的毒性，标本使用者不会有任何损伤，真正实现了标本无毒化处理。
5、本方法使用樟脑进行驱虫，但是樟脑不和鱼皮有任何接触，既起到了驱虫的效果，又不会有任何的毒性。
6、本方法对标本进行开口的位置位于标本展示的隐秘一面，参观人员不会看到标本的开口，很好的保证了标本的完整性。
7、本方法可以有效的鉴定鱼类剥制标本个体，防止不同鱼类剥制标本出现混乱。
附图说明
图1为虹鳟标本的图片；
图2为鲈鱼标本的图片。
具体实施方式
本发明将通过以下实施例作进一步说明。实施例仅用于说明本发明而不限制本发明的范围。除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记录内容相似或均等的方法及材料皆可用于本发明中，文中所述的较佳实施方法仅作示范之用。
实施例1
一种淡水虹鳟和鲈鱼(虹鳟)进行制作标本，具体步骤如下：
(1)选择一条体型较好，鳞片脱落较少健康的虹鳟，用保鲜膜把该虹鳟窒息而死。清洗该鱼表面的黏液。
(2)对虹鳟的外貌进行拍照，测量虹鳟的全长、体长、体宽、体高、头长、头高、头宽、吻长、眼径、眼间距、尾柄长，具体数据如下表1。
(3)固定虹鳟头的形态，调节好鱼口张开的大小，把虹鳟头放入藻酸盐印模内，等待藻酸盐印模彻底凝固，将虹鳟从藻酸盐印模中取出，母模制作完成。制作玻璃胶树脂和原子灰树脂混合物。将混合物缓慢倒入到母模内，使混合物凝固在母模的内壁上，虹鳟头模型制作完成。将虹鳟头的模型从母模中取出，根据虹鳟头进行修补和上色，使虹鳟头模型逼真于虹鳟头。
(4)把虹鳟固定为设计好的运动状态，固定鱼鳍在该运动状态下的伸展程度，并用保鲜膜包被标本的整个表面。
(5)将被保鲜膜包被的虹鳟放入长方体容器内，向容器内倒入调制好的石膏，待石膏固化后，将固态石膏分成多块，取出鱼标本。
(6)将固态石膏合拼在一起，向其内注入发泡料，制作鱼标本的形状，取出虹鳟模型，根据之前测量虹鳟的各项指标的大小打磨虹鳟模型的大小。
(7)根据展示方式选择虹鳟的侧面或者腹部进行切口，剥离皮张。在工作台上铺一块湿巾或抹布，以减少死体与工作台的摩擦，避免皮肤的损伤。将鱼体横卧于工作台上，用解剖刀由躯干部腹部向后直线剖开，绕开肛门直至尾柄基部。继续用解剖刀沿剖口两侧腹面的皮肤与肌肉之间逐渐剖开分离，在剖割时道口应稍偏向肌肉，宁可割坏肌肉，也要力求避免割破皮肤。剥至腹鳍和臀鳍时，可于体内把腹鳍和臀鳍的基部剪断，接着用解剖刀沿着躯体和尾柄的两侧剖割，直至尾的基部时，在尾椎末端剪断，这时尾部的皮肤与肌肉大部分已分离。接着由躯体两侧解剖至背鳍基部，也就是至鱼体背脊部，即用剪刀由尾部背脊向前逐渐把鳍棘基剪断，直至头部后侧肩带位置时，再用解剖刀从头的后侧切断颈椎，并把剥离的肌肉割下。肩带的锁骨、乌喙骨等因与皮肤紧密相连，不能切除，可将与皮肤不相连的部分骨骼以及附在上面的肌肉出去。宁可让骨头多留一些在皮上，不可强取其骨，否则极易造成皮肤破裂。喉部的肌肉只能用剪刀或刀剔除，不能往前剥离。后去除脑髓，挖去眼球。
(8)对虹鳟鱼皮进行脱脂，用小刀小心刮掉皮张表面的脂肪，然后将皮张自然风干，干燥过程中会有油脂溢出，将皮张放入溶有洗衣粉的水中，将表面的油脂去除。在制作中必须用刀细心地将脂肪清除干净。尽量多的去除皮下脂肪，再用酸性白土和锯末进行脱脂。若3次脱脂不干净，可反复进行，然后在放入食盐水内浸泡两小时。浸泡期间，每小时搅拌3次，每次10分钟，使皮肤较完整、均匀地得到浸泡，起到凝固皮张蛋白质和脱水、防腐的效果。
(9)在虹鳟模型的鱼皮开口处，挖出一长方形缺口，其内放置大小一致的木板，鱼标本制作完成后，其上可以安装铁钉，用于方便悬挂标本。
(10)在发泡料鱼模型表面涂抹糊精，将虹鳟鱼皮张包被在鱼模型表面，调整皮张的位置，对皮张的切口进行缝合，缝合结束后重新调整皮张的位置，然后进行自然风干。
(11)安装鱼标本义眼。
(12)根据之前虹鳟的照片在虹鳟的表面喷各种颜色的油漆，使鱼标本和鱼外貌一致。在鱼标本上喷无色底漆；用白纸遮挡住鱼鳍；腹部喷白色油漆；鱼体头部、背部、鱼鳍。尾部喷绿色油漆；在鱼的中线喷亮银色；沿着背部从头向尾的方向多次少量的喷褐色油漆；眼部以下和腮部喷银色；在中间位置喷红色；在全身喷少量白色油漆；然后用黑色记号笔进行点鱼癍；改善虹鳟的腮部和鼻孔的颜色；最后用吹风机把油漆吹干。
(13)将制作好的标本保存于透明的真空装置内，待标本用时，可将标本拿出进行展示，标本不用时，保存于透明的真空装置内，可进行展览。
表1.鲈鱼的外貌特征的测量数据
Figure GDA0003517399800000091
实施例2
一种海水性虹鳟和鲈鱼(鲈鱼)进行制作标本，具体步骤如下：
(1)选择一条体型较好，鳞片脱落较少健康的鲈鱼，用保鲜膜把该鱼窒息而死。清洗鲈鱼表面的黏液。
(2)对鲈鱼的外貌进行拍照，测量鲈鱼的全长、体长、体宽、体高、头长、头高、头宽、吻长、眼径、眼间距、尾柄长，具体数据如下表1。
(3)固定鲈鱼头的形态，调节好鲈鱼口张开的大小，把鲈鱼头放入藻酸盐印模内，等待藻酸盐印模彻底凝固，将鲈鱼从藻酸盐印模中取出，母模制作完成。制作玻璃胶树脂和原子灰树脂混合物。将混合物缓慢倒入到母模内，使混合物凝固在母模的内壁上，鲈鱼头模型制作完成。将鲈鱼头的模型从母模中取出，根据鲈鱼头进行修补和上色，使鲈鱼头模型逼真于鲈鱼头。
(4)把鲈鱼固定为设计好的运动状态，固定鱼鳍在该运动状态下的伸展程度，并用保鲜膜包被标本的整个表面。
(5)将被保鲜膜包被的鲈鱼放入长方体容器内，向容器内倒入调制好的石膏，待石膏固化后，将固态石膏分成多块，取出鱼标本。
(6)将固态石膏合拼在一起，向其内注入发泡料，制作鲈鱼标本的形状，取出鲈鱼模型，根据之前测量鲈鱼的各项指标的大小打磨鱼模型的大小。
(7)根据展示方式选择鲈鱼的侧面或者腹部进行切口，剥离皮张。在工作台上铺一块湿巾或抹布，以减少死体与工作台的摩擦，避免皮肤的损伤。将鱼体横卧于工作台上，用解剖刀由躯干部腹部向后直线剖开，绕开肛门直至尾柄基部。继续用解剖刀沿剖口两侧腹面的皮肤与肌肉之间逐渐剖开分离，在剖割时道口应稍偏向肌肉，宁可割坏肌肉，也要力求避免割破皮肤。剥至腹鳍和臀鳍时，可于体内把腹鳍和臀鳍的基部剪断，接着用解剖刀沿着躯体和尾柄的两侧剖割，直至尾的基部时，在尾椎末端剪断，这时尾部的皮肤与肌肉大部分已分离。接着由躯体两侧解剖至背鳍基部，也就是至鱼体背脊部，即用剪刀由尾部背脊向前逐渐把鳍棘基剪断，直至头部后侧肩带位置时，再用解剖刀从头的后侧切断颈椎，并把剥离的肌肉割下。肩带的锁骨、乌喙骨等因与皮肤紧密相连，不能切除，可将与皮肤不相连的部分骨骼以及附在上面的肌肉出去。宁可让骨头多留一些在皮上，不可强取其骨，否则极易造成皮肤破裂。喉部的肌肉只能用剪刀或刀剔除，不能往前剥离。后去除脑髓，挖去眼球。
(8)对鱼皮进行脱脂，用小刀小心刮掉皮张表面的脂肪，然后将皮张自然风干，干燥过程中会有油脂溢出，将皮张放入溶有洗衣粉的水中，将表面的油脂去除，尽量多的去除皮下脂肪，再用酸性白土和锯末进行脱脂。若3次脱脂不干净，可反复进行。然后在放入食盐水内浸泡两小时。浸泡期间，每小时搅拌3次，每次10分钟，使皮肤较完整、均匀地得到浸泡，起到凝固皮张蛋白质和脱水、防腐的效果。
(9)在鲈鱼模型的鱼皮开口处，挖出一长方形缺口，其内放置大小一致的木板，鱼标本制作完成后，其上可以安装铁钉，用于方便悬挂标本。
(10)在发泡料鱼模型表面涂抹糊精，将鲈鱼鱼皮张包被在鱼模型表面，调整皮张的位置，对皮张的切口进行缝合，缝合结束后重新调整皮张的位置，然后进行自然风干。
(11)安装鱼标本义眼。
(12)根据之前鲈鱼的照片在鱼的表面喷各种颜色的油漆，使鱼标本和鱼外貌一致。鲈鱼的背部喷黑色油漆，腹部喷白色油漆，测线附近喷黄色油漆，鱼鳍尾部喷黄色油漆。
(13)将制作好的标本保存于透明的真空装置内，待标本用时，可将标本拿出进行展示，标本不用时，保存于透明的真空装置内，可进行展览
表2.鲈鱼的外貌特征的测量数据
性状 全长 体长 体高 头长 吻长 眼径 胸围
数据 36.5 31.5 10.6 4.5 2.6 1.5 24.5
实施例3
在制作虹鳟剥制标本的过程中，提取虹鳟肌肉DNA，用虹鳟微卫星引物对该标本DNA进行PCR扩增，将PCR产物在12％的聚丙烯酰胺凝胶上跑电泳，在凝胶成像系统上面记录实验结果，保存该标本的遗传信息。
待标本制作完成后，出现多条虹鳟标本个体混乱时候，提取该剥制标本的鳍条DNA，用该物种的微卫星引物对其进行PCR扩增，将PCR产物在12％的聚丙烯酰胺凝胶上跑电泳，在凝胶成像系统上面记录实验结果，将得出的遗传信息和之前保存的标本遗传信息进行比对，确认该标本的具体个体信息，从而实现虹鳟标本的个体鉴定。
所述的PCR反应体系为25ul，具体反映体系为：PCR Mix 12.5ul、上下游引物各1ul、DNA 1ul、水9.5ul。
所述的PCR反应程序为：95℃3分钟；95℃30秒，56℃30秒，72℃30秒，30个循环；72℃延伸10分钟；4℃保存。
表1虹鳟剥制标本个体鉴定微卫星引物信息
Figure GDA0003517399800000111
Figure GDA0003517399800000121
实施例4
在制作鲈鱼剥制标本的过程中，提取鲈鱼肌肉DNA，用鲈鱼的微卫星引物对该标本DNA进行PCR扩增，将PCR产物在12％的聚丙烯酰胺凝胶上跑电泳，在凝胶成像系统上面记录实验结果，保存该标本的遗传信息。
待标本制作完成后，出现多条鲈鱼的标本个体混乱时候，提取该剥制标本的鳍条DNA，用该物种的微卫星引物对其进行PCR扩增，将PCR产物在12％的聚丙烯酰胺凝胶上跑电泳，在凝胶成像系统上面记录实验结果，将得出的遗传信息和之前保存的标本遗传信息进行比对，确认该标本的具体个体信息，从而实现标本的个体鉴定。
所述的PCR反应体系为25ul，具体反映体系为：PCR Mix 12.5ul、上下游引物各1ul、DNA 1ul、水9.5ul。
所述的PCR反应程序为：95℃3分钟；95℃30秒，56℃30秒，72℃30秒，30个循环；72℃延伸10分钟；4℃保存。
表2鲈鱼剥制标本个体鉴定微卫星引物信息
Figure GDA0003517399800000122
Figure GDA0003517399800000131
上述的实施例仅为本发明的优选技术方案，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种无毒性虹鳟和鲈鱼剥制标本的制作、保存和标本个体鉴定的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
S1：将待制作的鱼标本表面清洗干净，保存在标本制作过程中脱落的鱼鳞；
S2：将待制作标本的鱼进行拍照，制作标本前要对鱼进行详细拍照，作为制作图片，以便标本制作和喷漆；并测量鱼的各项指标：虹鳟和鲈鱼的全长、体长、体宽、体高、头长、头高、头宽、吻长、眼径、眼间距、尾柄长，两眼中间到背鳍前缘的距离、两眼中间到胸鳍的距离、眼中间到腹鳍的距离、眼中间到臀鳍的距离、眼中间到尾鳍的距离、鱼眼的长度和高度；
S3：固定鱼头的形态，调节好鱼口张开的大小，把鱼头放入藻酸盐印模内，等待藻酸盐印模彻底凝固，将鱼从藻酸盐印模中取出，母模制作完成；制作玻璃胶树脂和原子灰树脂混合物，将混合物缓慢倒入到母模内，使混合物凝固在母模的内壁上，鱼头模型制作完成；将鱼头的模型从母模中取出，根据鱼头进行修补和上色，使鱼头模型逼真于鱼头；
S3中，藻酸盐：水为1:(0.8-1.5)，水为蒸馏水；玻璃胶树脂和原子灰树脂混合物制作过程中玻璃胶树脂：原子灰树脂为(4-6):1，顺时针搅拌均匀，玻璃胶树脂和原子灰树脂混合物凝固在母模的内壁时的外界温度需为4-10℃；
S4：把鱼固定为设计好的运动状态，固定鱼鳍在该运动状态下的伸展程度大小，并用保鲜膜包被标本的整个表面；将被保鲜膜包被的鱼放入长方体容器内，向容器内倒入调制好的石膏，待石膏固化后，将固态石膏分成多块，取出鱼标本；
S5：将固态石膏合拼在一起，在固态石膏的内测涂抹石蜡，然后向其内注入发泡料，制作鱼标本的形状，取出鱼模型，根据之前测量鱼的各项指标的大小打磨鱼模型的大小，将鱼模型的大小和鱼标本大小打磨一致；
S6：根据展示方式选择鱼的侧面或者腹部进行切口，剥离皮张；对鱼皮进行脱脂，用小刀刮掉皮张表面的脂肪，然后用酸性白土和锯末进行脱脂，然后将皮张自然风干，干燥过程中会有油脂溢出，将皮张放入溶有洗衣粉的水中，将表面的油脂去除，然后在放入食盐水内浸泡两小时；浸泡期间，每小时搅拌2-4次，每次8-12分钟；
S7：在鱼模型的鱼皮开口处，挖出一长方形缺口，其内放置大小一致的木板，鱼标本制作完成后，其上可以安装铁钉，用于方便悬挂标本；木板和鱼模型之间放入樟脑和白灰粉，用于除虫和防潮；
S8：将鱼皮张包被在鱼模型表面，调整皮张的位置，对皮张的切口进行缝合，缝合标本应从皮张开口的端头顺尾部的走向缝合，缝合线应平整、均匀；缝合结束后重新调整皮张的位置，把脱落的鱼鳞用胶水粘回原位置；把鱼头模型安装在鱼模型上，然后进行自然风干；
S9：安装鱼标本义眼，义眼的安装务必确保到位并对称；
S10：根据之前鱼的照片在鱼的表面喷相应颜色的油漆，使鱼标本和鱼外貌一致，标本整形固定后，放置在通风阴凉处；待躯体干燥后，用稀清漆、松香水、树脂涂在躯体表面，以增加光泽；完成虹鳟和鲈鱼无毒性剥制标本的制作；
S11：将制作好的标本保存于透明的真空装置内，待标本用时，可将标本拿出进行展示，标本不用时，保存于透明的真空装置内，可进行展览；
S12：在制作虹鳟和鲈鱼剥制标本的过程中，提取这两种鱼类的肌肉DNA，用虹鳟和鲈鱼的微卫星引物对该标本DNA进行PCR扩增，将PCR产物在12％的聚丙烯酰胺凝胶上跑电泳，在照胶仪上面记录实验结果，保存该标本的遗传信息；
S13：待标本制作完成后，出现多条虹鳟或者鲈鱼的标本个体混乱时候，提取该剥制标本的鳍条DNA，用该物种的微卫星引物对其进行PCR扩增，将PCR产物在12％的聚丙烯酰胺凝胶上跑电泳，在照胶仪上面记录实验结果，将得出的遗传信息和之前保存的标本遗传信息进行比对，确认该标本的具体个体信息，从而实现标本的个体鉴定。
2.根据权利要求1所述的一种无毒性虹鳟和鲈鱼剥制标本的制作、保存和标本个体鉴定的方法，其特征在于，所述步骤S1中，温度需为4-10℃，操作时间为10分钟以内。
3.根据权利要求1所述的一种无毒性虹鳟和鲈鱼剥制标本的制作、保存和标本个体鉴定的方法，其特征在于，所述步骤S2测量数据需准确，精确到毫米，在进行测量虹鳟和鲈鱼各项指标前，可在鱼体表面涂抹硼砂，可有助于减少鱼鳞的脱落。
4.根据权利要求1所述的一种无毒性虹鳟和鲈鱼剥制标本的制作、保存和标本个体鉴定的方法，其特征在于，所述步骤S4固定鱼鳍形状的时候，把每个鳍条伸缩的角度伸展到最大角度；把硬纸片剪成鳍条的形状，每个鳍条的两侧用两张硬纸片固定住，分别夹在鳍的上下或左右，用回形针固定鳍条伸展的状态；石膏固化后取出鱼标本时不可破坏鱼的完整性，石膏可掰成数块，但后期须能拼成原样。
5.根据权利要求1所述的一种无毒性虹鳟和鲈鱼剥制标本的制作、保存和标本个体鉴定的方法，其特征在于，所述步骤S5制作鱼模型结束后，在剥离鱼皮张前，根据鱼的各项指标在鱼模型上画出各个器官的位置，包括各个鳍条、测线、肛门等，方便安装鱼皮时提高准确性；所述步骤S6在给鱼进行剥皮的时候先从鱼眼开始，将眼取出，用刀在鰓下划一周，将里面的肉取出；剥离鱼皮张的时候，要逆鱼鳞顺序方向进行剥离，可有效防止鱼鳞脱落；去除皮张油脂的洗衣粉水的浓度为100-200g洗衣粉加入一升水中；剥离的皮张要放入食盐水中进行浸泡两小时，食盐水的温度为4-10摄氏度，食盐的浓度为1L水加入食盐50-100克；对鱼进行切口，剥离皮张时，应从尾到头的方向进行剪切；对鱼皮进行风干时，保持风速为1-2米/秒，外界温度为4-10摄氏度，风干时间为12-15小时。
6.根据权利要求1所述的一种无毒性虹鳟和鲈鱼剥制标本的制作、保存和标本个体鉴定的方法，其特征在于，所述步骤S7在鱼模型上安装的木板的四周须挫平，保持鱼模型表面光滑，樟脑和白灰粉放于木板和鱼模型之间，不能和鱼皮接触，放入的樟脑的体积需为鱼标本体积的十分之一；
所述步骤S8把皮张包被在鱼模型表面后，用大头针把鱼皮张的各个器官固定住，防止鱼皮张移位；皮张要频繁喷水，防止皮张过度干裂；鱼皮张可以纵向拉伸，不能横向拉伸；清理完鱼皮张脂肪后，鳍条是空的，用纸黏土填充；在安装鱼皮的时候，鱼鳍的位置须和设计好的鱼的状态一致；给鱼模型安装鱼皮张后，进行测试，然后和鱼照片进行对比，如果有凹陷，则用AB补土进行修补，如果有突起，则进行挫平；标本制作后期，用一块纸板，剪切出两个鱼鳍的形状，用该纸板把鱼鳍夹住，防止鱼鳍在风干的时候卷曲；在制作过程中，如果有鳍条脱落，在制作后期，用鳍条根部的鱼体上安装两个大头针，去掉大头针的头部，然后把鱼鳍插入大头针上，用502粘住；在标本的切口处，缝合后会留下印记，则用原子灰进行补上，使标本整体圆润光滑；
在进行标本切口缝合时，用大头针将鱼的各个器官固定在鱼模型的相应位置；在安装鱼头模型时，鱼头模型和鱼身接触的地方要打磨圆滑，并用502把鱼头模型固定在鱼身上；
所述步骤S9在安装鱼义眼时，义眼的瞳孔尖方向须朝向鱼鼻子；
所述步骤S10给鱼标本上色的时候先喷一层无色底漆；鱼标本制作好后，须向鱼鳍涂抹一层光亮剂；喷漆的时候先将鱼眼用纸黏土覆盖，避免油漆喷到义眼上，给鱼鳍喷色的时候，要用一张纸隔开。
7.根据权利要求1所述的一种无毒性虹鳟和鲈鱼剥制标本的制作、保存和标本个体鉴定的方法，其特征在于，所述步骤S12虹鳟的微卫星引物信息为：
Figure FDA0003517399790000041
Figure FDA0003517399790000051
所述步骤S13鲈鱼的微卫星引物信息为：
Figure FDA0003517399790000052
8.根据权利要求1所述的一种无毒性虹鳟和鲈鱼剥制标本的制作、保存和标本个体鉴定的方法，其特征在于，所述步骤S12和步骤S13所述的PCR反应体系为25ul，具体反映体系为：PCR Mix 12.5ul、上下游引物各1ul、DNA 1ul、水9.5ul。
9.根据权利要求1所述的一种无毒性虹鳟和鲈鱼剥制标本的制作、保存和标本个体鉴定的方法，其特征在于，所述步骤S12和步骤S13所述的PCR反应程序为：95℃3分钟；95℃30秒，56℃30秒，72℃30秒，30个循环；72℃延伸10分钟；4℃保存。
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