CN112533702A - 多重样品板 - Google Patents

Abstract

公开了一种包括样品孔的多重样品板。在使用中，将多个基本上圆柱形的试剂珠粒2500插入到样品孔的孔洞或孔口内。这些基本上圆柱形的试剂珠粒被定位成不突出超过基部的上表面。

Description

多重样品板

相关申请的交叉引用

无

背景技术

本发明涉及一种样品板、一种多重样品板、一种用于测定一种或更多种感兴趣分析物的方法、一种自动化装置、一种用于执行酶联免疫吸附测定程序的试剂盒、一种用于执行核酸探针程序的试剂盒、一种制造样品板的方法、一种制造基本上或大致圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件的方法，以及一种多重分析的方法。

公开了可以用于进行诊断测试如酶联免疫吸附测定(“ELISA”)程序或其他免疫测定程序的样品板或多重样品板。可替代地，可以使用样品板或多重样品板进行针对DNA或RNA序列的测试。

免疫测定程序是测试生物制品的优选方式。这些程序利用了由机体产生的抗体识别和结合特异性抗原的能力，例如这些特异性抗原可以与外来体(如细菌或病毒)或与其他机体产物(如激素)相关联。一旦发生特异性抗原-抗体结合，可以使用生色、荧光或化学发光物质或较不优选地使用放射性物质来检测。由于从环境和安全方面对放射性物质的处理、储存和处置的考虑，放射性物质是较不优选的。可以使用相同的原理来检测或确定可以形成特异性结合对的任何物质，例如使用凝集素、类风湿因子、蛋白质A或核酸作为结合配偶体之一。

ELISA是一种特别优选的免疫测定程序的形式，其中结合对的一个成员连接至不溶性载体表面(“固相”)，如样品容器，并且在反应后，通过使用与酶缀合的另外的特异性结合剂(“缀合物”)来检测结合对。ELISA的程序是本领域熟知的，并且在研究和商业目的二者中已使用多年。大量书籍和评论文章描述了免疫测定的理论和实践。例如，建议了用于捕获测定的固相的特性和选择、用捕获组分包被固相的方法和试剂、标记物的性质和选择以及用于标记组分的方法。标准教科书的一个例子是“ELISA and Other Solid PhaseImmunoassays,Theoretical and Practical Aspects”，由D.M.Kemeny和S.J.Challacombe编辑，由John Wiley于1988年出版。这种建议也可以应用于其他特异性结合对的测定。

在最常见的ELISA类型中，固相被结合对的一个成员所包被。将一等份待测样本与固体包被的固相一起温育，可能存在的任何分析物被捕获到固相上。在洗涤以除去固相可能含有的残余样本和任何干扰材料之后，将对分析物具有特异性并与酶缀合的第二结合剂加入该固相中。在第二次温育期间，被捕获到固相上的任何分析物将与缀合物结合。在第二次洗涤以除去任何未结合的缀合物之后，向固相加入酶的生色底物。任何存在的酶将开始将底物转化为生色产物。在指定的时间之后，可以直接使用分光光度计测量或在停止反应之后测量所形成的产物量。

应当认识到，以上是生物测定的一般程序的概述，并且本领域已知许多变化形式，包括将荧光底物和发光底物用于ELISA，使用荧光或发光分子直接标记结合对的第二成员(在这种情况下，该方法并不称为ELISA，但过程步骤非常类似)，以及用核酸或其他特异性配对试剂代替抗体作为结合剂。然而，所有的测定都需要从样品管中抽吸流体样品，例如血液、血清、尿液等，然后将其分配到固相中。可以在分配到固相之前稀释样品，或者样品可以分配到深孔板中，原位稀释，然后可以将稀释的分析物转移到功能性固相。

最常见的固相类型是称为微孔板的标准样品容器，其易于储存并且可以与各种生物样品一起使用。自从20世纪60年代以来，微孔板已经在商业上可用，由例如聚苯乙烯、PVC、Perspex或Lucite制成，并且尺寸为大约5英寸(12.7cm)长、3.3英寸(8.5cm)宽、0.55英寸(1.4cm)深。由聚苯乙烯制成的微孔板是特别优选的，因为聚苯乙烯具有增强的光学透明度，有助于对任何反应结果的目视判读。聚苯乙烯微孔板还结构紧凑、重量轻且容易清洗。由本申请人制造的微孔板以名称“MICROTITRE”(RTM)出售。已知的微孔板包括以8×12阵列对称布置的96个孔(通常也称为“微孔”)。典型地，微孔的最大体积容量约为350pi。然而，通常仅向微孔中分配10-200μl流体。在某些布置形式的微孔板中，微孔可以布置成8个或12个孔的条带，这些条带可以在载体中移动和组合以使得完成后的板具有常规尺寸。

阳性和阴性对照组通常随市售试剂盒一起提供，用于质量控制以及提供相对临界值。对处理后的微孔板进行读取之后，对照制造商的验证值来检查对照组的结果，以确保分析已正确操作，然后使用该值区分阳性样本和阴性样本，并计算临界值。通常提供标准物以用于定量测定，并用于建立标准曲线，根据该标准曲线可以对样品中的分析物的浓度进行插值(interpolated)。

应当认识到，以上概述的ELISA程序包括多个步骤，包括移液、温育、洗涤、在活动中间转移微孔板、读取以及数据分析。近年来，已经开发了ELISA程序中涉及的步骤(或“阶段”)自动化的系统，例如样品分配、稀释、在特定温度下温育、洗涤、酶缀合物添加、试剂添加、反应停止以及结果分析。用于抽吸和分配流体样品的移液管机构使用一次性尖端，一次性尖端在使用后被弹出以防止患者样品的交叉污染。设置多种仪器控制措施以确保采用适当的体积、时间、波长和温度，对数据传递和分析进行充分的验证和监控。用于进行ELISA程序的自动免疫测定装置现在广泛用于例如制药公司的实验室、兽医和植物学实验室、医院和大学，以用于体外诊断应用，如疾病和感染的测试，并且用于帮助新疫苗和药物的生产。

ELISA试剂盒是市售的，其由具有微孔的微孔板组成，制造商已经用特异性抗体(或抗原)包被微孔。例如，对于乙型肝炎抗原诊断试剂盒，试剂盒制造商将已经悬浮在流体中的抗乙型肝炎抗体分配到微孔板的微孔中。然后将微孔板温育一段时间，在此期间，抗体粘附到微孔的壁上直至流体液位(通常约为微孔最大流体容量的一半)。然后洗涤微孔，使得微孔板的微孔的壁均匀地覆盖有抗乙型肝炎抗体直至流体液位。

测试实验室将接收多个包含例如来自多个患者的体液的样品管。然后，使用移液管机构将特定量的流体吸出样品管，然后分配到由制造商如上所述预先制备的微孔板的一个或更多个微孔中。如果需要测试患者的多种不同疾病，那么必须将来自患者的流体分配到多个单独的微孔板中，每个微孔板由制造商用不同的结合剂包被。然后，每个微孔板必须单独处理以检测不同疾病的存在。应当理解，为了分析若干种不同的分析物，需要多个微孔板并将同一样品的等分试样转移至不同的微孔板。这导致需要大量的处理步骤、温育器和洗涤站，它们可以几乎同时处理许多微孔板。在自动化系统中，这需要仪器具有多个温育器，并且需要复杂的编程以避免具有不同要求的微孔板之间的冲突。对于手工操作来说，要么需要多名技术人员，要么样本处理速度较慢。可以将包被有不同物质的微孔条带组合成单个载体，将单一样本的等分试样加入不同类型的孔中，然后在该组合的微孔板中进行ELISA。然而，对测定方法开发的限制使得难以实现这种组合，并且众所周知的是，若用户以这种方式组合条带，则可能导致分配结果的误差，而制造在不同微孔中具有若干种不同包被的微孔板，在质量控制方面则尚有难度。

常规的ELISA技术集中在对每个微孔板的多个患者样品进行相同的单一测试时，或者检测这些患者的多种分析物中的一种或更多种的存在而不区分实际存在的是哪种可能的分析物。例如，常见的是在单个微孔中确定患者是否具有HIV-1或HIV-2抗体、或HIV-1或HIV-2抗原，而不需要确定存在的是哪种分析物，并且对于HCV抗体和抗原也是类似的。

然而，正在开发能够进行多重测试的新一代测定方法。多重测试使得能够对同一患者样品同时执行多项不同的测试。

一种最近的多重测试方法是提供包括96个样品孔的微孔板，其中在每个样品孔中设置不同捕获抗体的阵列。该阵列包括20nl点的阵列，每个点的直径为350μm。所述点按650μm的间距来布置。每个点对应不同的捕获抗体。

与常规的ELISA技术相比，多重测试使得每次测定能够获得更多的数据点和更多的信息，在常规的ELISA技术中，每个样品板对所关注的单一分析物进行测试。能够将多个单独的测试组合在同一测定中的能力可以节省相当可观的时间和成本。多重测试还能够减小自动化装置的总体占用面积。

尽管对于目前已知的ELISA技术和目前正在开发的新的多重测试技术存在许多有利的方面，但是仍然需要提供在形式上有所改进并且比现有技术的ELISA布置的灵活性更高的样品板和相关的自动化装置。

除了ELISA程序以外，使用杂交探针来测试DNA或RNA序列的存在也是众所周知的。杂交探针通常包含DNA或RNA的片段，其用于检测与探针上的DNA或RNA序列互补的核苷酸序列的存在。杂交探针可以与单链核酸(例如DNA或RNA)杂交，由于杂交探针和被分析样品之间的互补性，其碱基序列允许配对。杂交探针可以用分子标记物(例如放射性分子或更优选地荧光分子)示踪或标记。探针在杂交之前是无活性的，在杂交时存在构象变化并且分子复合物变得有活性，然后将发出荧光(其可在UV光下得以测出)，然后通过在UV光下目测来检测与探针具有中度至高度序列相似性的DNA序列或RNA转录物。

在美国专利US-5620853(Chiron公司)中公开了一种用于检测液体样品中的分析物的测定装置和组件。该测定装置包括模制孔，模制孔包括从该孔的底部向上伸出的多个指状件，并且在指状件中分配试剂珠粒。试剂珠粒被捕获在指状件中，但仍可以在指状件的高度以内上下移动。测定装置被布置成使该试剂珠粒暴露至使尽可能多的流体流动，并且依靠来自该试剂珠粒下侧的信号来产生结果。

在美国专利US-5620853(Chiron公司)中公开的布置存在许多问题。首先，由于试剂珠粒在指状件的高度以内自由地上下移动，所以在处理或读取步骤期间，试剂珠粒可能卡在不期望的高度。特别地，孔的设计是相对精细和复杂的，指状件的任何移动或对指状件的损坏可能导致试剂珠粒被卡在不期望的高度。另外，指状件从底座伸出，这使得它们容易损坏，特别是在移液和洗涤阶段期间。如果试剂珠粒被卡在指状件内的不期望的高度处，那么这很可能对测试程序的准确性造成不利影响。

其次，指状件被布置成接收单个试剂珠粒的孔的设计使得流体被移液到珠粒旁边，而珠粒被孔中的上升的流体覆盖。单个孔需要大约300pi的流体。美国专利US-5620853(Chiron公司)还公开了一种多个孔彼此流体连通的布置。对于这种多孔布置，每个孔将需要大约300μl的流体。因此，很明显，相对于传统的系统，该多孔布置需要分配过量的流体。

第三，对于给定尺寸的样品板，指状件的布置减小了孔的最大组装密度，以致于使得对给定样品板进行的测试相对较少。

第四，在美国专利US-5620853(Chiron公司)中公开的多孔布置特别容易串扰。

第五，在美国专利US-5620853(Chiron公司)中公开的布置使得当使用单个珠粒时，流体的均匀性仅受到突出的指状件的影响。孔可能存在将会捕集未混合流体的区域。多孔布置还会遭受一个严重的问题，即任何需要越过所有珠粒的流体必须穿过一个曲折的路径以从一个孔到达另一个孔。这将引起在流体混合和珠粒与珠粒的可重复性方面的严重问题。单孔布置与美国专利US-5620853(Chiron公司)公开的直列多孔布置完全不同，因此这两种不同的布置将具有完全不同的流体特性。取决于所使用的布置，这可能导致不同的流体行为，因此，取决于所使用的是单孔还是多孔形式，结果可能存在显著变化。尽管在理论上，可以独立地验证这两种不同的布置，但是这将导致成本增加以及工作量降低。

最后，在美国专利US-5620853(Chiron公司)中公开的样品孔制造相对复杂，并且在制造期间可能存在可靠性差的问题。细长的指状件难以通过模制形成，并且在制造或使用期间容易损坏。这些指状件在顶部还具有一个特征，该特征在模制工具中将是一个凹切。当该零件从工具中弹出时，指状件必须弯曲以使该特征越过工具物(tool material)。通常，这种制造工艺因可靠性差的问题而不主张采用。此外，工艺参数的任何变化都可能影响将零件从工具释放并且使零件保持完好达到正确的机械公差的能力。指状件相对于彼此的位置对于使得试剂珠粒能够正确地上下移动并且确保试剂珠粒不会从指状件的顶部出来是至关重要的。实际上，这在大规模生产环境下是非常难以控制的。还应该注意，单个珠粒布置的设计完全不同于多孔布置的设计。因此，将需要完全不同的工具设计，这又将极大地增加制造的复杂性。在大批量制造环境中，将设计特征和质量保证结合起来考虑使得样品板的生产成本过于昂贵。

美国专利US 2009/0069200(Yu)公开了一种用于制备生物分子阵列的系统。根据US 2009/0069200(Yu)中公开的布置，将球形珠粒布置在具有方形横截面的子孔内。球形珠粒不与子孔的壁形成周向密封，因此流体流经子孔的底部向上、超过珠粒并越过珠粒的顶部，使得珠粒被完全浸入或浸没。这种布置存在许多问题，其将在本申请的后面更详细地讨论。

已知包括多个样品孔的多重样品板，其中每个样品孔包括基部，并且其中在基部中设置多个开口通孔。在使用中，球形试剂珠粒或微球基本上被保持或固定在每个通孔内，以便与围成通孔的基部的壁形成基本上不透流体的周向密封。每个球形试剂珠粒突出于基部上方进入样品孔中。

已知的利用球形试剂珠粒的样品板的一个问题是，当在板读取阶段确定试剂珠粒的发光度时，已知的布置受到相邻珠粒之间串扰问题的影响。下面将更详细地讨论这个问题。

期望提供一种改进的样品板或多重样品板，其在读取时不会受到串扰问题的影响。

发明内容

根据一个方面，提供了一种样品板或多重样品板，其包括一个或更多个样品孔，其中，样品孔中的一个或更多个包括：

基部，其具有形成样品孔的底部的上表面；以及

一个或更多个孔洞或孔口，其设置在基部中；

其中，一个或更多个非球形试剂珠粒、插塞或插入件在使用中基本上被保持或固定在一个或更多个孔洞或孔口内，以便与限定孔洞或孔口的基部的壁形成基本上不透流体的周向密封。

一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的上表面基本上不突出高于或超过基部的上表面。

考虑了其他较不优选的实施例，其中，一个或更多个非球形试剂珠粒、插塞或插入件可以突出高于并超过基部的上表面，例如，≤1mm、≤2mm、≤3mm、≤4mm或≤5mm。

根据另一实施例，一个或更多个非球形试剂珠粒、插塞或插入件可以凹入低于基部的上表面，例如，≤1mm、≤2mm、≤3mm、≤4mm或≤5mm。

优选的样品板或多重样品板的特别有利之处在于，当读板器读取位于样品板或多重样品板中的试剂珠粒、插塞或插入件时，试剂珠粒、插塞或插入件之间的串扰得以显著减少或消除。具体地，可无须再使用串扰校正算法来校正在读板器读取样品孔以确定试剂珠粒、插塞或插入件的发光度时样品孔中的相邻试剂珠粒、插塞或插入件之间的串扰的影响。

应当理解，可以通过读板器或微孔板光度计读取样品板、多重样品板或微孔板。根据实施例，可以由具有特定波长的光(任选地，由滤光器或单色仪选择)照射样品板的样品孔中的试剂珠粒、插塞或插入件。照射的结果是，被捕获在试剂珠粒、插塞或插入件上的样品可以吸收光，然后要么反射该光，然后由分光光度计检测到该光，要么发射可以由光检测器检测到的光(即荧光)。根据特别优选的实施例，读板器可以使用光检测器来检测发光。特别地，已经检测到感兴趣分析物的试剂珠粒可以通过化学发光过程发光。从试剂珠粒、插塞或插入件发射的光的强度将随时间缓慢降低，而所确定的强度也可以通过检测从一个或更多个对照试剂珠粒、插塞或插入件发射的光的强度来进行归一化。

已知多种不同类型的读板器，包括生色、化学发光和化学发光成像板检测器。化学发光读板器是特别优选的。

根据优选实施例的样品板有利地通过基本上防止从一个试剂珠粒、插塞或插入件发射的光能够影响相邻试剂珠粒、插塞或插入件来减少在读板器读取试剂珠粒、插塞或插入件时相邻的试剂珠粒、插塞或插入件之间的串扰。

此外，与已知的包括球形试剂珠粒的样品板或多重样品板相比，根据优选实施例的样品板的特别有利之处还在于，在摇晃优选的样品板时，可防止形成流体死区，由此使得分子更均匀地从样品流体转移到试剂珠粒、插塞或插入件，并且其中，分子均匀地转移到试剂珠粒、插塞或插入件与试剂珠粒、插塞或插入件的位置无关。

优选实施例的另一个优点是，优选试剂珠粒、插塞或插入件可以被定位成使得它们与样品孔的底表面齐平，从而使得分子能够更均匀地从样本流体转移到试剂珠粒、插塞或插入件。

根据其他实施例，非球形(例如，大致或基本上圆柱形)试剂珠粒、插塞或插入件可以被插入成使得它们的位置略微突出(或可替代地，凹入)样品孔的底表面。例如，设想在某些情况下，可能有利的是，试剂珠粒、插塞或插入件延伸或突出高于样品孔的底表面(或者可替代地，试剂珠粒、插塞或插入件的上表面凹入低于样品孔的下表面)。

优选实施例的另一个优点是优选的试剂珠粒、插塞或插入件可以通过注塑成型工艺生产，注塑成型工艺比研磨球形试剂珠粒的常规方法更有成本效益。此外，根据优选实施例生产优选的试剂珠粒、插塞或插入件，减少了制造过程中由于试剂珠粒的潜在污染而引起的任何影响。

优选实施例的另一个优点是，可以使用相对简单的插入器将优选的非球形试剂珠粒、插塞或插入件插入到设置在样品孔的基部中的孔洞或孔口中。有利地，根据各种实施例，不必使用相对复杂的机器人试剂珠粒插入器来将试剂珠粒精确地定位在样品孔的基部内的设定高度处。相反，根据优选实施例，试剂珠粒、插塞或插入件可以更简单地插入，直到试剂珠粒、插塞或插入件的上表面与样品孔的底部齐平。

一个或更多个通孔优选从样品孔的底部直到样品板的后表面或底表面。因此，如果试剂珠粒、插塞或插入件没有被保持或固定在开口通孔内，那么样品孔中的任何流体都可以经由该通孔从样品孔泄出。

应当理解，位于具有方形横截面的孔洞、钻孔或凹部内的圆形试剂珠粒、插塞或插入件将不会与限定孔洞、钻孔或凹部的壁形成不透流体的周向密封。不透流体的周向密封应当理解为是指围绕珠粒、插塞或插入件的整个圆周和限定孔洞、钻孔或凹部的壁形成屏障。根据优选实施例，试剂珠粒、插塞或插入件被保持或固定在形成于样品板的基部中的孔洞、钻孔或凹部内。每个试剂珠粒、插塞或插入件优选地在试剂珠粒、插塞或插入件的整个外径或圆周周围形成不透流体且/或不透水且/或不透空气的密封。应当理解，US 2009/0069200(Yu)中公开的布置中的球形试剂珠粒未与限定子孔的方形壁形成不透流体的周向密封。

一旦试剂珠粒、插塞或插入件位于孔洞、孔口或凹部内，那么通过试剂珠粒、插塞或插入件基本上防止流体能够从孔洞、孔口或凹部的一侧穿过到另一侧，围绕试剂珠粒、插塞或插入件的整个圆周形成紧密密封。

设置在样品孔的基部中的开口通孔或凹部可以基本上是圆柱形的，并且其直径可以具有小于置于通孔或凹部中的优选非球形试剂珠粒、插塞或插入件的直径，使得根据优选实施例的非球形试剂珠粒、插塞或插入件通过过盈配合或摩擦配合被保持或固定在通孔内或凹部内。

根据另一实施例，开口通孔或凹部可以是圆锥形的，并且具有第一直径和第二直径，第一直径大于放置在通孔中或凹部中的优选试剂珠粒、插塞或插入件的直径，第二直径小于放置在通孔中或凹部中的优选试剂珠粒、插塞或插入件的直径。因此，试剂珠粒、插塞或插入件通过锥度被固定在通孔内。

一个或更多个非球形试剂珠粒、插塞或插入件可以在使用中基本上被保持或固定在一个或更多个孔洞或孔口内，使得一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的上表面基本上与基部的上表面齐平或共面。

一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件可以包括一个或更多个基本上或大致圆柱形试剂珠粒、插塞或插入件。

一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件可以具有基本上或大致圆形、圆状、椭圆形、弧形、正方形、矩形、多边形的规则或不规则的横截面轮廓。

一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件可以包括一个或更多个基本上棱柱状或棱柱形试剂珠粒、插塞或插入件。

一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的横截面轮廓可以满足以下任一者：(i)沿着试剂珠粒、插塞或插入件的整个纵向长度保持基本恒定；或(ii)沿着试剂珠粒、插塞或插入件的纵向长度的一个或更多个部分变化、改变或渐缩。

一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件可以具有基本上或大致圆形的横截面轮廓，其中，一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件在试剂珠粒、插塞或插入件的中间部分中的直径大于在试剂珠粒、插塞或插入件的一个或两个端部处的直径。

一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件可以具有基本上圆形的横截面轮廓，并且其中，一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的直径朝向试剂珠粒、插塞或插入件的一个或两个端部渐缩或减小。

一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件可以具有第一端面和相对的第二端面，其中，第一端面和/或第二端面包被有试剂或包含试剂。

一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件优选地能够以第一取向或第二不同的取向插入一个或更多个孔洞或孔口中。

优选地，不管一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件是以第一取向还是以第二取向插入设置在样品板的基部中的一个或更多个孔洞或孔口中，一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件是有效的。

一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件可以具有第一端面，其中，第一端面包被有试剂或包含试剂。

优选地，一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件能够以第一取向插入一个或更多个孔洞或孔口中。

如果一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件以第一取向插入一个或更多个孔洞或孔口中，则一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件可以是有效的。根据一个实施例，该一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件可以旨在仅以一个取向插入到样品孔的基部中的孔洞或孔口中。

根据另一个方面，提供了一种样品板或多重样品板，包括一个或更多个样品孔，其中，样品孔中的一个或更多个包括：

基部，其具有形成样品孔的底部的上表面；

一个或更多个孔洞或孔口，其设置在基部中；以及

一个或更多个隆起部分、凸缘、外缘或颈圈，其围绕一个或更多个孔洞或孔口；

其中，一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件在使用中基本上被保持或固定在一个或更多个孔洞或孔口内，以便与限定孔洞或孔口的基部的壁和/或一个或更多个隆起部分、凸缘、外缘或颈圈形成基本上不透流体的周向密封。

根据实施例，如果提供了一种样品板，其具有围绕设置在样品板的基部中的一个或更多个孔洞或孔口的一个或更多个隆起部分、凸缘、外缘或颈圈，则一个或更多个球形试剂珠粒可以被插入一个或更多个孔洞或孔口内。

一个或更多个孔洞或孔口可以包括一个或更多个开口通孔。

一个或更多个孔洞或孔口可以是基本上或大致圆柱形的。

一个或更多个孔洞或孔口可以具有基本上或大致圆形、圆状、椭圆形、弧形、正方形、矩形、多边形的规则或不规则的横截面轮廓。

一个或更多个孔洞或孔口的横截面轮廓可以满足以下任一者：(i)沿着孔洞或孔口的整个纵向长度保持基本恒定；或(ii)沿着孔洞或孔口的纵向长度的一个或更多个部分变化、改变或渐缩。

一个或更多个孔洞或孔口的直径可以小于放置在孔洞或孔口内的试剂珠粒、插塞或插入件的直径，使得试剂珠粒、插塞或插入件通过过盈配合或摩擦配合被保持或固定在孔洞或孔口内。

一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件可以具有周向台阶部分、凸缘或止挡件特征。

一个或更多个孔洞或孔口具有直径缩小部分，并且一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的周向台阶部分、凸缘或止挡件特征可以布置成抵靠直径缩小部分，以便将试剂珠粒、插塞或插入件定位成使得试剂珠粒、插塞或插入件的上表面基本上不突出高于或超过基部的上表面。可以涵盖其他实施例，其中一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的周向台阶部分、凸缘或止挡件特征可以被布置成抵靠直径缩小部分，以便将试剂珠粒、插塞或插入件定位成使得试剂珠粒、插塞或插入件的上表面突出超过基部的上表面或凹入低于基部的上表面。

一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的周向台阶部分、凸缘或止挡件特征在使用中可以抵靠直径缩小部分，以便将试剂珠粒、插塞或插入件定位成使得试剂珠粒、插塞或插入件的上表面基本上与基部的上表面齐平或共面。

一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件可以具有方形上边缘或在使用中与限定一个或更多个孔洞或孔口的基部的对应表面基本上平行或齐平地邻接的边缘。

一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的上表面或第一表面和/或下表面或第二表面的至少一部分或基本上全部可以具有第一表面光洁度或第一表面粗糙度。

接触限定孔洞或孔口的壁的一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的密封面、侧壁或表面的至少一部分或基本上全部可以具有第二不同的表面光洁度或第二不同的表面粗糙度。

第二表面光洁度可以比第一表面光洁度更光滑。

第二表面粗糙度可以小于第一表面粗糙度。

一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件可以通过注塑成型工艺形成。

注塑成型工艺可以在试剂珠粒、插塞或插入件中的至少一些上留下接缝。

试剂珠粒、插塞或插入件可以在使用中插入样品板的一个或更多个孔洞或孔口中，使得试剂珠粒、插塞或插入件中的至少一些上的接缝位于接触限定孔洞或孔口的壁的密封面、侧壁或表面上面、上方或下方。

试剂珠粒、插塞或插入件可以在使用中插入一个或更多个孔洞或孔口中，使得试剂珠粒、插塞或插入件中的至少一些上的接缝是试剂珠粒、插塞或插入件的与限定孔洞或孔口的基部的壁形成基本上不透流体的周向密封的那部分的一部分。

注塑成型工艺可以在试剂珠粒、插塞或插入件中的至少一些上留下浇口。

试剂珠粒、插塞或插入件可以在使用中插入一个或更多个孔洞或孔口中，使得试剂珠粒、插塞或插入件中的至少一些上的浇口位于接触限定孔洞或孔口的壁的密封面、侧壁或表面上面、上方或下方。

试剂珠粒、插塞或插入件可以在使用中插入一个或更多个孔洞或孔口中，使得试剂珠粒、插塞或插入件中的至少一些上的浇口形成试剂珠粒、插塞或插入件的与限定孔洞或孔口的基部的壁形成基本上不透流体密封的周向密封的那部分的一部分。

样品板可以包括免疫测定样品板。

样品板可以包含用于检测互补DNA或RNA样品的存在的杂交探针。

根据另一个方面，提供了如上所述的样品板或多重样品板与插入或定位在一个或更多个样品孔的孔洞或孔口中的一个或更多个中的一个或更多个非球形、球形或基本上或大致圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件的组合。

试剂珠粒、插塞或插入件中的至少一些或基本上全部携带、包含或以其他方式包被有相同或不同的试剂，其中试剂被布置并适于分析样品液体中的相同或不同的感兴趣分析物。

试剂珠粒、插塞或插入件中的至少一些或基本上全部携带、包含或以其他方式包被有核酸探针，其中核酸探针被布置并适于与单链核酸、DNA或RNA杂交。

根据另一个方面，提供了一种板框固持器与如上所述的样品板或多重样品板的组合。

根据另一个方面，提供了一种自动化装置，包括：

一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件插入器；

如上所述的样品板或多重样品板；以及

控制系统，该控制系统被设置成并适于对试剂珠粒、插塞或插入件插入到样品板或多重样品板的一个或更多个样品孔中进行控制。

根据另一个方面，提供了用于针对一个或更多个感兴趣分析物来测定液体的装置，该装置包括：

一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件插入器；以及

如上所述的样品板或多重样品板。

根据另一个方面，提供了一种用于从一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件读取光学信号或其他信号的读取器，试剂珠粒、插塞或插入件被保持或固定在如上所述的样品板或多重样品板的基部中设置的一个或更多个孔洞或孔口内。

根据另一个方面，提供了一种方法，包括：

提供样品板或多重样品板，样品板或多重样品板包括一个或更多个样品孔，其中，样品孔中的一个或更多个包括基部，基部具有形成样品孔的底部的上表面，以及设置在基部中的一个或更多个孔洞或孔口；以及

将一个或更多个非球形试剂珠粒、插塞或插入件保持或固定在一个或更多个孔洞或孔口内，以便与限定孔洞或孔口的基部的壁形成基本上不透流体的周向密封。

优选一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的上表面基本上不突出高于或超过基部的上表面。

根据另一个方面，提供了一种方法，包括：

提供样品板或多重样品板，样品板或多重样品板包括一个或更多个样品孔，其中，样品孔中的一个或更多个包括基部，基部具有形成样品孔的底部的上表面、设置在基部中的一个或更多个孔洞或孔口以及围绕该一个或更多个孔洞或孔口的一个或更多个隆起部分、凸缘、外缘或颈圈；以及

将一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件保持或固定在一个或更多个孔洞或孔口内，以便与限定孔洞或孔口的基部的壁和/或一个或更多个隆起部分、凸缘、外缘或颈圈形成基本上不透流体的周向密封。

根据另一个方面，提供了一种利用样品板分析样品中的多种分析物的方法，包括：

提供如上所述的样品板或多重样品板；

任选地将一个或更多个不同的试剂珠粒、插塞或插入件插入到样品孔的一个或更多个不同的孔洞或孔口中；以及

向样品孔中加入样品。

根据另一个方面，提供了一种用于使用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测样品中的抗原或抗体的方法，包括：

提供如上所述的样品板或多重样品板；

任选地将一个或更多个不同的试剂珠粒、插塞或插入件插入到样品孔的一个或更多个不同的孔洞或孔口中；以及

向样品孔中加入样品。

根据另一个方面，提供了一种利用核酸探针检测样品中的DNA或RNA序列的方法，包括：

提供如上所述的样品板或多重样品板；

任选地将一个或更多个不同的试剂珠粒、插塞或插入件插入到样品孔的一个或更多个不同的孔洞或孔口中；以及

向样品孔中加入样品。

根据另一个方面，提供了一种用于测定样品中的一种或更多种感兴趣分析物的方法，包括：

将一个或更多个非球形试剂珠粒、插塞或插入件插入到样品板的一个或更多个样品孔的一个或更多个孔洞或孔口中，以便将试剂珠粒、插塞或插入件保持或固定在孔洞或孔口内，以便与限定孔洞或孔口的基部的壁形成基本上不透流体的周向密封。

优选一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的上表面基本上不突出高于或超过基部的上表面。

根据另一个方面，提供了一种用于测定样品中的一种或更多种感兴趣分析物的方法，包括：

将一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件插入到样品板或多重样品板的一个或更多个样品孔的一个或更多个孔洞或孔口中，样品板或多重样品板具有围绕一个或更多个孔洞或孔口的一个或更多个隆起部分、凸缘、外缘或颈圈，以便将试剂珠粒、插塞或插入件保持或固定在孔洞或孔口内，以便与限定孔洞或孔口的基部的壁和/或一个或更多个隆起部分、凸缘、外缘或颈圈形成基本上不透流体的周向密封。

根据另一个方面，提供了一种检测分析物的方法，包括：

提供如上所述的样品板或多重样品板，其中一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件被保持或固定在设置在样品板的基部中的一个或更多个孔洞或孔口内；

向样品板或多重样品板中加入样品；以及

检测样品中的分析物与试剂珠粒、插塞或插入件的结合。

优选地，该方法进一步包括以下步骤中的一个或更多个：

(i)温育样品板或多重样品板；和/或

(ii)洗涤样品板或多重样品板；和/或

(iii)抽吸样品板或多重样品板；和/或

(iv)向样品板或多重样品板中加入酶缀合物；和/或

(v)向样品板或多重样品板中加入可视化试剂；和/或

(vi)目视分析样品板或多重样品板；和/或

(vii)读取或测定从样品孔中的各个试剂珠粒、插塞或插入件反射、透射或发射的光的强度。

根据另一个方面，提供了一种用于进行酶联免疫吸附测定(ELISA)程序的试剂盒，包括：

如上所述的一个或更多个样品板或多重样品板；以及

多个试剂珠粒、插塞或插入件，其中，试剂珠粒、插塞或插入件包被有或包含相同或不同的包含抗体、抗原或另一种生物分子的试剂。

根据另一个方面，提供了用于进行核酸探针程序的试剂盒，包括：

如上所述的一个或更多个样品板或多重样品板；以及

多个试剂珠粒、插塞或插入件，其中，试剂珠粒、插塞或插入件包被有或包含相同或不同的DNA或RNA序列。

优选地，一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件被保持或固定在设置在样品板的基部中的一个或更多个孔洞或孔口内。

根据另一个方面，提供了一种用于检测分析物的试剂盒，包括：

如上所述的一个或更多个样品板或多重样品板；以及

多个试剂珠粒、插塞或插入件，其保持或固定在设置在样品板或多重样品板的基部中的一个或更多个通孔或孔口内，使得多个试剂珠粒、插塞或插入件与限定孔洞或孔口的基部的壁形成基本上不透流体的周向密封。

根据另一个方面，提供了一种用于通过注塑成型制造样品板或多重样品板的方法，包括：

将基质注入模具中以形成如上所述的样品板或多重样品板。

根据另一个方面，提供了一种用于制造如上所述的样品板或多重样品板的方法，进一步包括：将一个或更多个相同或不同的试剂珠粒、插塞或插入件插入到一个或更多个孔洞或孔口中，使得一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件与限定孔洞或孔口的基部的壁形成基本上不透流体的周向密封。

根据另一个方面，提供了一种用于插入珠粒、插塞或插入件的方法，包括：

提供珠粒、插塞或插入件插入器；

提供包括样品孔的样品板或多重样品板，其中，样品孔包括基部，其中基部包括一个或更多个孔洞或孔口，其中一个或更多个孔洞的直径小于珠粒、插塞或插入件的直径；以及

对一个或更多个非球形试剂珠粒、插塞或插入件插入到样品板或多重样品板中进行控制。

优选地，插入步骤自动执行。

根据另一个方面，提供了一种用于检测一种或更多种分析物的试剂盒，包括：

多个非球形珠粒、插塞或插入件；以及

包括样品孔的样品板或多重样品板，其中，样品孔包括基部，其中基部包括一个或更多个孔洞或孔口，其中一个或更多个孔洞或孔口的直径小于非球形珠粒、插塞或插入件的直径。

优选地，多个试剂珠粒、插塞或插入件包含一种或更多种探针。

探针可以为核酸、抗体、抗体片段、蛋白质、肽、适体或化合物。

探针可以是寡核苷酸。

根据另一个方面，提供了一种用于检测一种或更多种分析物或生物分子的方法，包括：

向包含样品孔的样品板或多重样品板中加入样品，其中，样品孔包括基部，其中基部包括一个或更多个凹部，其中每个凹部包含探针并且每个凹部的直径小于包含探针的非球形试剂珠粒、插塞或插入件的直径；以及

检测样品中的一种或更多种分析物或生物分子与一种或更多种探针的结合。

样品板或多重样品板可以包含多种探针并且可以检测多种分析物或生物分子。

可以向样品板中加入多个样品。

根据另一个方面，提供了一种样品板或多重样品板，包括一个或更多个样品孔，其中，样品孔中的一个或更多个包括：

基部；以及

一个或更多个凹部，其设置在基部中；

其中，一个或更多个凹部中的每一个具有用于将置于或插入该孔中的非球形珠粒、插塞或插入件基本上保持或固定在凹部内的尺寸，并且非球形珠粒、插塞或插入件与限定凹部的基部的壁形成基本上不透流体的周向密封。

根据另一个方面，提供了一种用于检测分析物的试剂盒，包括：

多个试剂珠粒、插塞或插入件；以及

包括样品孔的样品板或多重样品板，其中，样品孔包括基部，其中基部包括一个或更多个凹部，其中，一个或更多个凹部中的每一个具有用于将置于或插入孔中的非球形珠粒、插塞或插入件基本上保持或固定在凹部内的尺寸，并且珠粒、插塞或插入件与限定凹部的基部的壁形成基本上不透流体的周向密封。

根据另一个方面，提供了一种用于检测一种或更多种分析物或生物分子的方法，包括：

向包括样品孔的样品板加入样品，其中，样品孔包括基部，其中基部包括一个或更多个凹部，其中，一个或更多个凹部中的每一个具有用于将置于或插入孔中的非球形珠粒、插塞或插入件基本上保持、插入或固定在凹部内的尺寸，并且珠粒、插塞或插入件与限定凹部的基部的壁形成基本上不透流体的周向密封；以及

检测样品中的一种或更多种分析物或生物分子与一种或更多种探针的结合。

根据另一个方面，提供了一种制造方法，包括：

将树脂注入模具中以形成一个或更多个大致或基本上圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件，其中，一个或更多个大致或基本上圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件可以被插入如上所述的样品板的一个或更多个孔洞或孔口内。

根据另一个方面，提供了一种读板器，用于测定被保持、插入或固定在如上所述的样品板的一个或更多个孔洞或孔口内的一个或更多个非球形试剂珠粒、插塞或插入件的强度或发光度。

根据另一个方面，提供了一种读板器，用于测定被保持、插入或固定在如上所述的样品板的一个或更多个孔洞或孔口内的一个或更多个球形试剂珠粒、插塞或插入件的强度或发光度。

根据另一个方面，提供了一种用于将一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件插入到样品板中的方法，包括：

提供包括样品孔的样品板，其中，样品孔包括基部，其中基部包括一个或更多个孔洞或孔口，其中一个或更多个孔洞或孔口的直径小于试剂珠粒、插塞或插入件的直径；以及以串行或并行方式将一个或更多个非球形试剂珠粒、插塞或插入件部分地插入到孔洞或孔口中的一个或更多个中；以及然后

使用压入工具同时将一个或更多个非球形试剂珠粒、插塞或插入件压入孔洞或孔口中的一个或更多个中。

该方法可以进一步包括使用压入工具同时将一个或更多个非球形试剂珠粒、插塞或插入件压入至孔洞或孔口中的一个或更多个中，使得一个或更多个非球形试剂珠粒、插塞或插入件的上表面与样品孔的底表面基本上齐平或共面。

根据另一个方面，提供了一种多重样品板，包括一个或更多个样品孔，其中样品孔中的一个或更多个包括：

基部，基部具有形成样品孔的底部的上表面；以及

设置在基部中的多个孔洞或孔口；

多重样品板进一步包括：

一个或更多个第一非球形试剂珠粒、插塞或插入件，其基本上被保持、插入或固定在一个或更多个孔洞或孔口内，以便与限定孔洞或孔口的基部的壁形成基本上不透流体的周向密封；以及

一个或更多个不同的第二非球形试剂珠粒、插塞或插入件，其基本上被保持、插入或固定在一个或更多个孔洞或孔口内，以便与限定孔洞或孔口的基部的壁形成基本上不透流体的周向密封；

其中，一个或更多个第一试剂珠粒、插塞或插入件和一个或更多个第二试剂珠粒、插塞或插入件的上表面基本上不突出高于或超过基部的上表面。

优选地，一个或更多个第一非球形试剂珠粒、插塞或插入件被布置成用于测试第一物质的存在，并且一个或更多个第二非球形试剂珠粒、插塞或插入件被布置成用于测试不同的第二物质、分析物或生物分子的存在。

多重样品板还可以包括一个或更多个第三非球形试剂珠粒、插塞或插入件，一个或更多个第三非球形试剂珠粒、插塞或插入件基本上被保持或固定在一个或更多个孔洞或孔口内，以便与限定孔洞或孔口的基部的壁形成基本上不透流体的周向密封，其中，一个或更多个第三非球形试剂珠粒、插塞或插入件被布置成用于测试不同的第三物质、分析物或生物分子的存在。

多重样品板还可以包括一个或更多个第四或另外的非球形试剂珠粒、插塞或插入件，一个或更多个第四或另外的非球形试剂珠粒、插塞或插入件基本上被保持或固定在一个或更多个孔洞或孔口内，以便与限定孔洞或孔口的基部的壁形成基本上不透流体的周向密封，其中，一个或更多个第四非球形试剂珠粒、插塞或插入件被布置成用于测试不同的第四物质、分析物或生物分子的存在。

根据另一个方面，提供了一种用于制造组装多重样品板的方法，包括：

将一个或更多个第一非球形试剂珠粒、插塞或插入件和一个或更多个第二非球形试剂珠粒、插塞或插入件插入至包括样品孔的样品板，其中，样品孔包括基部，其中基部包括一个或更多个孔洞或孔口，其中一个或更多个孔洞或孔口的直径小于试剂珠粒、插塞或插入件的直径；

其中，一个或更多个第一非球形试剂珠粒、插塞或插入件被布置为测试第一物质、分析物或生物分子的存在，并且一个或更多个第二非球形试剂珠粒、插塞或插入件被布置为测试不同的第二物质、分析物或生物分子的存在。

通孔或凹部可以具有选自以下的锥度：(i)<0.5°；(ii)0.5°；(iii)0.5至1°；(iv)1至2°；(v)2至4°；(vi)4至6°；(vii)6至8°；(viii)8至10°；以及(ix)>10°。

通向通孔或凹部的开口优选地是圆形的。

通孔或凹部可以具有圆形截面形状或轮廓。通孔或凹部沿着通孔或凹部的长度或深度的至少5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％处可以具有圆形横截面。

通孔的直径可以选自：(i)<0.5mm；(ii)0.5至1.0mm；(iii)1.0至1.5mm；(iv)1.5至2.0mm；(v)2.0至2.5mm；(vi)2.5至3.0mm；(vii)3.0至3.5mm；(viii)3.5至4.0mm；(ix)4.0至4.5mm；(x)4.5至5.0mm；(xi)<5.0mm；以及(xii)>5.0mm。

通孔的深度可以选自：(i)<0.5mm；(ii)0.5至1.0mm；(iii)1.0至1.5mm；(iv)1.5至2.0mm；(v)2.0至2.5mm；(vi)2.5至3.0mm；(vii)3.0至3.5mm；(viii)3.5至4.0mm；(ix)4.0至4.5mm；(x)4.5至5.0mm；(xi)<5.0mm；以及(xii)>5.0mm。

根据实施例，在至少一个样品孔中(或在所有样品孔中)，基部可以包括多个开口通孔，其中多个开口通孔中的至少一些(或全部)被布置成使得在被保持或固定在相邻开口通孔中的试剂珠粒、插塞或插入件之间不存在直接的可视通路。

一个或更多个开口通孔可以包括埋头孔或扩大部分，以便于将试剂珠粒、插塞或插入件插入到通孔或凹部的一个或更多个中。

优选地，一个或更多个样品孔包括至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或21个通孔，这些通孔各自被布置并适于在使用中接纳试剂珠粒、插塞或插入件。

设置在基部中的一个或更多个通孔可以布置成：(i)周向围绕样品孔的中央部分；或(ii)具有围绕中央通孔或凹部周向布置的多个通孔或凹部；或(iii)以基本上密堆积的方式；或(iv)以基本上对称或不对称的方式；或(v)以基本上线性或弧形的方式；或(vi)以基本上规则或不规则的方式；或(vii)形成阵列；或(viii)形成一个圆或两个或更多个同心圆，在基部的中心没有通孔或凹部。

样品板可以包括以A×B版式布置的样品孔，其中：A选自：(i)1；(ii)2；(iii)3；(iv)4；(v)5；(vi)6；(vii)7；(viii)8；(ix)9；(x)10；以及(xi)>10；并且B选自：(i)1；(ii)2；(iii)3；(iv)4；(v)5；(vi)6；(vii)7；(viii)8；(ix)9；(x)10；以及(xi)>10。

样品板可以包括免疫测定样品板。

样品板可以包含用于检测互补DNA或RNA样品的存在的杂交探针。

样品板可以包括基部，基部具有凹形、凸形或其他对接部分，以用于将样品板固定到板框固持器的对应的凸形、凹形或其他对接部分。

根据一个方面，提供了如上所述的样品板或多重样品板与被插入或位于一个或更多个样品孔的一个或更多个通孔或凹部中的一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的组合。

优选地，试剂珠粒、插塞或插入件中的至少一些或基本上全部携带、包含或以其他方式包被有试剂，其中试剂被布置并适于分析样品液体中的感兴趣分析物。

优选地，试剂珠粒、插塞或插入件中的至少一些或基本上全部携带、包含或以其他方式包被有核酸探针，其中核酸探针被布置并适于与单链核酸、DNA或RNA杂交。

根据另一个方面，提供了一种板框固持器与如上所述的样品板或多重样品板的组合。

板框保持器可以包括凸形、凹形或其他对接部分，以用于将样品板牢固地固定于板框保持器。

试剂珠粒、插塞或插入件可以由样品板制造商或终端用户插入到样品孔的一个或更多个钻孔中。

在使用中，通过与凹部或钻孔或与凹部或钻孔的圆周的过盈配合或摩擦配合，珠粒、插塞或插入件基本上被保持或固定在一个或更多个凹部内。

预设的力可以压缩试剂珠粒、插塞或插入件和/或使凹部变形，以便形成或增强与凹部或钻孔的过盈配合或摩擦配合。

试剂珠粒、插塞或插入件与凹部形成基本上不透流体的密封。

优选地，一个或更多个凹部不包括渐缩状部分。

样品孔可以包括2至20个凹部。

根据实施例，样品孔可以包括至少10个凹部。

多个凹部可以围绕样品孔的中央部分周向布置。

根据较不优选的实施例，中央部分可以包括中央凹部。

根据优选实施例，中央部分不包括凹部。

优选地，多个凹部以基本上对称或规则的方式布置。

根据较不优选的实施例，多个凹部以基本上不对称或不规则的方式布置。

根据实施例，多个凹部以基本上线性的方式布置。

根据实施例，多个凹部以基本上弧形的方式布置。

多个样品孔优选以A×B版式布置，其中A和B是垂直轴线，并且沿着A轴的孔的数量可以大于、小于或等于沿着B轴的孔的数量。

根据实施例，沿着A轴或B轴的孔的数目至少为2。

沿着A轴或B轴的孔的数量优选在2至15之间。

根据实施例，多个样品孔中的至少一个通过易折区连接到多个样品孔中的另一个样品孔。

样品板可以包括基部，基部包括对接部分，以用于将样品板固定到板框固持器的对应的对接部分。

根据实施例，样品板还包括珠粒。

优选地，珠粒附接到探针上。

优选地，探针为为核酸、抗体、抗体片段、蛋白质、肽、适体或化合物。根据实施例，探针为寡核苷酸。

具有渐缩状部分的钻孔不应当被误认为是例如可以将试剂珠粒或微球简单地搁置在其中而是将试剂珠粒或微球无法基本上保持或固定在其中的浅的或小的低洼部。与美国专利US-5620853(Chiron公司)中公开的样品板相比，根据本发明的样品板是特别有利的。

根据各种实施例，在使用中，试剂珠粒、插塞或插入件通过与钻孔的渐缩状部分的过盈配合或摩擦配合而基本上被保持或固定在钻孔内。

试剂珠粒、插塞或插入件可以被插入到具有多个渐缩状孔洞或渐缩状部分的样品板中，渐缩状孔洞或渐缩状部分用于在试剂珠粒一旦被插入则将试剂珠牢固地固定或锁定就位。可以使用预设的力来插入试剂珠粒、插塞或插入件。预设的力可以足以压缩试剂珠粒、插塞或插入件和/或使钻孔的渐缩状部分变形，以便形成或增强与钻孔的渐缩状部分的过盈配合或摩擦配合。

样品板或多重样品板在制造过程中以及在后续的处理阶段中是特别坚固的，后续的处理阶段包括将试剂珠粒、插塞或插入件插入到渐缩状孔洞中的阶段以及样品板或多重样品板的后续操纵和处理。一旦试剂珠粒、插塞或插入件已经被插入到样品板或多重样品板中，则优选它们不能在任何方向上自由移动，并且基本上成为样品板或多重样品板的固定部分。

锥度的角度可以被布置成使得试剂珠粒被锁定或以其他方式牢固地固定在孔洞中，使得该布置极为牢靠。

若样品板(即样品板的平面)相对于水平方向倾斜超过10°、20°、30°、40°、50°、60°、70°、80°或90°，或者反转，而试剂珠粒、插塞或插入件仍可以基本上被保持或固定在钻孔内。

通向钻孔的开口和/或钻孔的横截面形状(即，在通向钻孔的开口与钻孔的基部之间的位置处)可以是圆形的。然而，根据其他实施例，钻孔的开口和/或横截面形状可以是基本上圆形、椭圆形、长方形、三角形、正方形、矩形、五边形、六边形、七边形、八边形、九边形、十边形或更多边形的。

钻孔的开口的直径可以选自：(i)<0.5mm；(ii)0.5至1.0mm；(iii)1.0至1.5mm；(iv)1.5至2.0mm；(v)2.0至2.5mm；(vi)2.5至3.0mm；(vii)3.0至3.5mm；(viii)3.5至4.0mm；(ix)4.0至4.5mm；(x)4.5至5.0mm；(xi)<5.0mm；以及(xii)>5.0mm。

根据优选实施例，优选地在介于钻孔的开口与钻孔的基部之间的位置处，钻孔的直径优选地比试剂珠粒、插塞或插入件的直径小至少5％，和/或优选地比钻孔的开口的直径小至少5％。如果钻孔的横截面形状不是圆形，则钻孔的横截面形状的最小跨度(优选地在介于钻孔的开口与钻孔的基部之间的位置处)优选比试剂珠粒或微球的直径小至少5％，和/或优选比钻孔的开口的直径小至少5％。

根据多个实施例，优选地在介于钻孔的开口与钻孔的基部之间的位置处，钻孔的直径优选地选自：(i)<0.5mm；(ii)0.5至1.0mm；(iii)1.0至1.5mm；(iv)1.5至2.0mm；(v)2.0至2.5mm；(vi)2.5至3.0mm；(vii)3.0至3.5mm；(viii)3.5至4.0mm；(ix)4.0至4.5mm；(x)4.5至5.0mm；(xi)<5.0mm；以及(xii)>5.0mm。

钻孔的渐缩状部分可以是基本上线性渐缩的。例如，钻孔的直径或圆周优选地随着钻孔的深度基本上线性地变化(例如减小)。如果钻孔的横截面形状不是圆形的，则钻孔的横截面形状的横截面尺寸(例如，钻孔的横截面形状的最小跨度)或周长优选地随钻孔的深度基本上线性地变化(例如，减小)。

试剂珠粒、插塞或插入件优选是不透明的，并且信号优选仅取自珠粒、插塞或插入件的顶部。在压配合或过盈配合线下方的珠粒、插塞或插入件的底部优选地不与样品流体接触。在优选实施例中，在使用中，试剂珠粒、插塞或插入件优选地与钻孔的圆柱形或渐缩状部分形成基本上不透流体的密封，优选地以便基本上防止流体从样品孔流过试剂珠粒。因此，根据各种实施例的带有插入的试剂珠粒、插塞或插入件的样品板类似于空的常规样品孔。

优选地，试剂珠粒、插塞或插入件不突出高于样品孔的底部，从而避免在珠粒的上部周围形成可能捕集流体的壕沟区域。

试剂珠粒、插塞或插入件可以被布置成不突出高于样品孔的底部，在这种情况下它们还优选地受到保护并且不易受到操纵、移液或洗涤的损坏。

将珠粒、插塞或插入件压入或插入形成于样品孔的基部中的囊袋、凹部或钻孔中。试剂珠粒、插塞或插入件一旦被插入，其顶部优选地与样品孔的底部齐平或等高(level)。

钻孔的深度可以选自：(i)<0.5mm；(ii)0.5至1.0mm；(iii)1.0至1.5mm；(iv)1.5至2.0mm；(v)2.0至2.5mm；(vi)2.5至3.0mm；(vii)3.0至3.5mm；(viii)3.5至4.0mm；(ix)4.0至4.5mm；(x)4.5至5.0mm；(xi)<5.0mm；以及(xii)>5.0mm。

所公开的实施例的有利方面在于，由于试剂珠粒、插塞或插入件可以被布置成插入成使得它们与孔的底部齐平，因此样品板或多重样品板可以与已知的自动微孔板处理系统一起使用，而仅需要最小的硬件修改。此外，根据这样的实施例的样品孔或多重样品板基本上是具有类似于常规微孔板的孔的比例的圆柱，因此样品孔的流体和其他操纵特性是公知的。根据这样的实施例的处理步骤例如移液、混合、洗涤和温育优选遵循与常规微孔板所经受的相同类型的流体特性。

根据优选实施例的样品板或多重样品板优选地具有大约800pi的流体容量，但是有利地，在使用中，仅需要样品孔的总流体容量的一小部分，来覆盖布置在样品板的基部中的所有试剂珠粒、插塞或插入件。

根据优选实施例的样品板或多重样品板的另一个有利特征是，流体可以被直接分配到样品孔的中心或中央区域中，并且根据优选实施例，样品板可以被布置成使得在样品孔的中央区域中没有布置用于固定试剂珠粒的囊袋、凹部或钻孔。这样的布置是特别有利的，因为不会无意地由于洗涤头或移液管尖端喷射的流体的力而将试剂(优选地包被试剂珠粒、插塞或插入件)从试剂珠粒上洗去。

根据各种实施例的样品板或多重样品板优选地使得能够在单个样品孔中进行多个测试。这通过将不同的试剂珠粒、插塞或插入件插入同一样品孔中的不同钻孔中、从而能够进行多重测试来实现。可以根据需要将试剂珠粒、插塞或插入件压入孔的基部的渐缩状或非渐缩状孔洞中，从而获得高度的灵活性以及高效使用整个样品孔的能力。

根据各种实施例的样品板或多重样品板可以包括一个或更多个12mm直径的样品孔。每个样品孔可以具有58mm²的横截面表面积，并且总共54个这种尺寸的样品孔可以装入常规微孔板的占用面上。在每个样品孔内可以插入不同数量的珠粒、插塞或插入件。如果需要，样品孔中的钻孔可以具有不同的直径以容纳不同尺寸的试剂珠粒、插塞或插入件。

根据其他实施例，一个或更多个样品孔可以包括6×3.0mm直径的囊袋、凹部或钻孔，10×2.0mm直径的囊袋、凹部或钻孔，或21×1.75mm的囊袋、凹部或钻孔。样品孔的中央区域优选地保持没有囊袋、凹部或钻孔。囊袋、凹部或钻孔可以沿样品孔的中央区域布置成一个圆或两个或更多个同心圆或其他图案。

可以提供具有9×6个样品孔的阵列的样品板或多重样品板。如果每个样品孔设置六个囊袋、凹部或钻孔，则样品板可以每个板容纳324个试剂珠粒。如果每个样品设置10个囊袋、凹部或钻孔，则样品板可以每个板容纳540个试剂珠粒。如果每个样品设置21个囊袋、凹部或钻孔，则样品板可以每个板容纳1134个试剂珠粒。

本发明的另一个有利方面是，与其他已知的布置相比，根据本发明的样品板或多重样品板的制造相对简单。样品板或多重样品板可以使用极简单工具(open and shuttool)通过模制制造，因此工艺性高并且可靠。用于形成样品板或多重样品板的注塑模具设计简单，并且不需要使用底切或薄特征来模制。因此，可以容易地实现具有不同版式的样品板或多重样品板的生产。生产具有六个囊袋或钻孔的样品孔的工具可以容易适应于生产具有不同数目(例如21个)囊袋的样品孔。

优选实施例的另一个优点是，不同的孔设计和版式的验证可以简单地实现，因为测试协议可以基本上保持相同。移液和温育不改变，而洗涤程序最多只需要对吸出常规操作(aspirate routine)进行微小的改变。

因此，很明显，根据本发明的样品板或多重样品板与其他已知的样品板(如在US-5620853(Chiron公司)中公开的样品板)相比是特别有利的。

渐缩状部分或钻孔可以具有选自以下的锥度：(i)<0.5°；(ii)0.5°；(iii)0.5至1°；(iv)1至2°；(v)2至4°；(vi)4至6°；(vii)6至8°；(viii)8至10°；以及(ix)>10°。可替代地，设置在基部中的通孔或钻孔可以是圆筒形的并且是非渐缩状的。

设置在基部中的囊袋或凹部可以包括具有保持构件、膜、唇缘或环形部分的腔室。在使用中，试剂珠粒、插塞或插入件可以经过或穿过保持构件、膜、唇缘或环形部分而插入到腔室中，并且可以通过保持构件、膜、唇缘或环形部分基本上被保持或固定在腔室内。

一个或更多个囊袋、凹部或钻孔可以包括埋头孔或扩大部分，以便于将试剂珠粒或微球插入到囊袋、凹部或钻孔中的一个或更多个中。

优选地，一个或更多个样品孔包括至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或21个囊袋或凹部，这些囊袋或凹部均包括具有渐缩状或非渐缩状部分的钻孔并且均被布置并适于在使用中接纳试剂珠粒、插塞或插入件。

设置在基部中的一个或更多个囊袋、凹部或钻孔优选地被布置成：(i)周向围绕样品孔的中央部分；和/或(ii)具有围绕一个以上中央囊袋或凹部周向布置的多个囊袋或凹部；和/或(iii)以基本上密堆积的方式；和/或(iv)以基本上对称或不对称的方式；和/或(v)以基本上线性或弧形的方式；和/或(vi)以基本上规则或不规则的方式；和/或(vii)形成阵列；和/或(viii)形成一个圆或两个或更多个同心圆，在该基部的中心没有囊袋、凹部或钻孔。

优选地，样品板由聚苯乙烯制造或由聚苯乙烯以其他方式制成。

样品板可以包括条带或阵列版式。例如，根据优选实施例，样品板可以包括一个样品孔的6×1条带。根据另一优选实施例，样品板可以包括9个样品孔的6×1样品条带。

根据实施例，样品孔中的一个或更多个可以通过一个或更多个易折区域或易折连接与一个或更多个其他样品孔互连，使得用户可以将样品板分离成多个较小的样品板、样品条带或单独的样品孔。这使得样品板能够被拉断或折断成多个较小的样品板。例如，可以将6×1的样品孔条带拉断成六个单独的样品孔或拉断成两个3×1的样品条带。

根据实施例，单独的样品孔、样品条带和样品板可以由聚丙烯制成。样品孔、样品条带和样品板优选地由非结合性材料例如聚丙烯制成，以确保孔中的非特异性结合保持最小。

可以提供板框，其布置成固持多个样品孔、样品条带或一个或更多个样品板或多重样品板。板框可以由塑料如丙烯腈丁二烯苯乙烯(“ABS”)制成。板框优选地由高刚度材料制成，该材料确保在样品孔、样品条带或样品板被固定到板框中之后，样品孔、样品条带或一个或更多个样品板被牢固地固持就位并且保持平坦。板框足够坚固以承受使用者的操纵。

样品孔中的一个或更多个可以通过一个或更多个易折区域或易折连接与一个或更多个其他样品孔互连，使得用户可以将样品板分离成多个较小的样品板、样品条带或单独的样品孔。

根据一个方面，提供了一种能够由自动化装置的控制系统执行的计算机程序，自动化装置包括一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件插入器，其中，计算机程序配置为使控制系统：

(i)对试剂珠粒、插塞或插入件插入到如上所述的样品板或多重样品板的一个或更多个样品孔中进行控制。

根据一个方面，提供了一种计算机可读介质，该计算机可读介质包括存储在计算机可读介质上的计算机可执行指令，指令配置为可由自动化装置的控制系统执行，自动化装置包括一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件插入器，其中，计算机程序配置为使控制系统：

(i)对试剂珠粒、插塞或插入件插入到如上所述的样品板或多重样品板的一个或更多个样品孔中进行控制。

优选地，计算机可读介质选自：(i)ROM；(ii)EAROM；(iii)EPROM；(iv)EEPROM；(v)闪存；(vi)光盘；(vii)RAM；以及(viii)硬盘驱动器。

在使用中被插入到囊袋、凹部或钻孔中的一个或更多个中的试剂珠粒、插塞或插入件中的至少一些或基本上全部携带或包含试剂，其中该试剂被布置并适于：(i)分析样品；和/或(ii)通过核酸扩增反应分析样品；和/或(iii)通过聚合酶链反应(PCR)分析样品；和/或(iv)通过免疫测定法分析样品；和/或(v)通过使用杂交探针技术分析样品。根据优选实施例，将不同的试剂珠粒、插塞或插入件插入到样品板或多重样品板中，使得放置在样品孔中的样品可针对多种不同的感兴趣的分析物、物质或生物分子而进行测试。

在使用中被插入到囊袋、凹部或钻孔中的一个或更多个中的至少一些或基本上全部试剂珠粒或微球包含聚苯乙烯、塑料或聚合物。

本文公开的样品板或多重样品板优选地包含多个珠粒、插塞或插入件，它们可以包被有不同的试剂。珠粒、插塞或插入件的组成取决于所进行的测定的类型。珠粒、插塞或插入件可以由塑料、陶瓷、玻璃、聚苯乙烯、甲基苯乙烯、丙烯酸聚合物、顺磁材料、氧化钍溶胶、碳石墨、二氧化钛、胶乳或交联葡聚糖如琼脂糖、纤维素、尼龙、交联胶束、特氟龙(Teflon(RTM))或其任何组合组成。在一个实施例中，珠粒、插塞或插入件可以包含聚苯乙烯、塑料、聚合物或其组合。在另一个实施例中，珠粒、插塞或插入件可以包含含铁的或磁性的包被，或者可以具有铁的或磁性的性质。可替代地，珠粒、插塞或插入件可以包括抗静电包被或具有抗静电性质。珠粒、插塞或插入件可以是半透明的、略微半透明的或不透明的。

珠粒、插塞或插入件可以具有不规则的形状。另外，珠粒、插塞或插入件可以是多孔的。珠粒、插塞或插入件尺寸可以在纳米至毫米的范围内。珠粒、插塞或插入件可以具有至少0.1mm的直径。珠粒、插塞或插入件可以具有至少0.1mm至10mm之间的直径。在一个实施例中，珠粒、插塞或插入件可以具有大于约0.5mm、0.5至1.0mm、1.0至1.5mm、1.5至2.0mm、2.0至2.5mm、2.5至3.0mm、3.0至3.5mm、3.5至4.0mm、4.0至4.5mm、4.5至5.0mm或大于约5.0mm的直径。珠粒、插塞或插入件的直径可以大于、等于或小于样品孔的凹部、囊袋或钻孔的直径。例如，珠粒、插塞或插入件的直径可以小于样品孔的凹部、囊袋或钻孔的直径，其中凹部、囊袋或钻孔包括渐缩状部分。在又一个实施例中，珠粒、插塞或插入件的直径可以大于样品孔的凹部、囊袋或钻孔的直径。例如，凹部、囊袋或钻孔可以不包括渐缩状部分。待放置在或存在于样品板中的珠粒、插塞或插入件的直径可以比样品板的凹部的直径大至少约5％、10％、15％、20％、35％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％。在一个实施例中，存在于样品板中的珠粒、插塞或插入件不接触样品板的底部，如样品孔的基部。

样品板或多重样品板内的珠粒、插塞或插入件可以包含试剂或探针，或者可以包被有试剂或探针。试剂或探针可以用于分析样品，如通过检测一种或更多种分析物、生物分子或物质。探针或试剂可以附接于珠粒、插塞或插入件。可以通过共价或非共价相互作用进行附接。探针可以包括核酸、抗体、抗体片段、蛋白质、肽、适体或化合物。例如，探针可以是寡核苷酸。在一个实施例中，探针可以用于检测生物样品中的一种或更多种分析物、生物分子或物质。在又一个实施例中，探针可以用于药物筛选。例如，可以针对化合物或抗体与蛋白质或核酸探针的结合能力来筛选化合物或抗体的库。根据各种实施例，提供了一种多重样品板，包括多个不同的试剂珠粒、插塞或插入件，试剂珠粒、插塞或插入件被布置成测试不同分析物、生物分子或物质的存在。

探针可以用于提供检测用于疾病或病症、药物响应或潜在药物响应的诊断或预后或用于监测疾病或病症的进展的生物标志物。例如，探针可以是用于检测作为癌症生物标志物的抗原的抗体或其片段。在另一个实施例中，探针可以是抗原、肽或蛋白质，其用于检测样品中的抗体，抗体可以指示疾病或病症。因此，可以提供可以测试不同生物标记物或生物分子的多重样品板。

本文公开的样品板或多重样品板可以包含多个探针，其中多个探针的一个子集不同于多个探针的另一个子集。多个探针可以附接于珠粒、插塞或插入件。不同的探针可以用于检测不同的分析物，从而能够使用本文公开的样品板或多重样品板进行多重测试。样品板或多重样品板可以包含至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20种不同的探针。探针可以是相同类型的(例如，不同的抗体)或不同类型的(例如，核酸探针和抗原的组合)。

该装置优选地还包括平移台，平移台用于相对于一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入器或其他设备移动样品板或多重样品板。

控制系统优选地被布置并适于控制平移台，使得通过相对于插入器移动样品板，将来自试剂珠粒、微球、插塞或插入件插入器的一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件依次插入到样品板或多重样品板中的不同孔洞或孔口中。

根据实施例，该装置还可以包括用于将流体分配到样品板或多重样品板的样品孔中的流体分配设备。

流体分配设备可以被布置并适于一次将x ml的流体分配到一个或更多个样品孔的一个或更多个流体接收区域中，其中x优选地选自：(i)<10；(ii)10至20；(iii)20至30；(iv)30至40；(v)40至50；(vi)50至60；(vii)60至70；(viii)70至80；(ix)80至90；(x)90至100；(xi)100至110；(xii)110至120；(xiii)120至130；(xiv)130至140；(xv)140至150；(xvi)150至160；(xvii)160至170；(xviii)170至ISO；(xix)180至190；(xx)190至200；以及(xxi)>200。

该装置优选地还包括图像分析设备或相机，用于判断试剂珠粒、插塞或插入件是否已经被插入到样品板的囊袋、凹部或钻孔中。

样品板可以具有第一颜色(或可以是透明的)，并且试剂珠粒、插塞或插入件可以具有第二不同的颜色，第二颜色优选地与第一颜色(或透明)形成对比以便于目视检测在样品板的囊袋、凹部或钻孔中是否存在试剂珠粒、插塞或插入件。

根据实施例，样品板还可以包括发光或荧光标记物。

该装置还可以包括发光或荧光检测设备，用于通过确定试剂珠粒、插塞或插入件是否阻碍或部分阻碍发光或荧光标记物来判断试剂珠粒、插塞或插入件是否已经插入到样品板的囊袋、凹部或钻孔中。

该装置还可以包括磁性传感器和/或电传感器和/或电容传感器和/或机械传感器，用于感测试剂珠粒、插塞或插入件是否已经被分配或以其他方式存在于样品板的囊袋、凹部或钻孔中。

控制系统可以确定存在的试剂珠粒、插塞或插入件的数量和/或不存在的试剂珠粒、插塞或插入件的数量和/或已插入的试剂珠粒、插塞或插入件的数量和/或期望(或剩余)待插入到样品孔中的试剂珠粒、插塞或插入件的数量。

控制系统可以根据确定存在和/或不存在和/或已插入和/或期望插入到样品孔中的试剂珠粒、插塞或插入件的数量来测量和/或调节被分配到或期望被分配到样品孔中的流体的体积。

控制系统可以被配置且适于确保当一种流体被分配到样品孔中时，位于该样品孔的钻孔中的至少一些或基本上全部试剂珠粒、插塞或插入件的上表面至少部分地或完全地被该流体浸没。

控制系统可以被配置且适于确保被分配到样品孔中的流体的高度保持基本上恒定，而与存在的、不存在的、已插入的或期望插入到样品孔中的试剂珠粒、插塞或插入件的数量无关。

附图说明

现在将仅以举例的方式并参考附图来描述本发明的各种实施例以及仅出于说明性目的而给出的其他布置，在附图中：

图1示出了已知样品板的样品孔；

图2A示出了已知样品板的样品孔的平面图，图2B更详细地示出了已知样品孔的底部，

图2C示出了分配在已知样品孔的囊袋中的试剂珠粒或微球；

图3示出了已知的微阵列仪或自动化装置；

图4A示出了一种已知的布置，包括九个样品条带装载到板框中，其中每个样品条带包括样品孔的6×1阵列，图4B示出了已知的板框，样品板或一个或更多个样品条带可以装载到板框；

图5A更详细地示出了一种包括六个样品孔的已知样品条带，图5B示出了被装载到板框中的包括六个样品孔的已知样品条带；

图6A示出了装载到板框中的单个孔，图6B更详细地示出了通过断开特征连接的两个样品孔，图6C示出了具有端特征的样品孔，图6D示出了具有ID和取向凸舌的样品孔；

图7A示出了样品孔条带的下面，图7B示出了有助于将样品条带或样品孔与板框对准的凹形对准和保持特征，图7C示出了设置在板框的基部中的对应的凸形对准和保持特征；

图8示出了已知的样品孔条带的横截面视图，并且示出了一种布置，其中样品孔具有多个渐缩状钻孔，其中锥度的角度是6.0°；

图9A示出了一种已知的布置，其中在样品板的基部中设置有锥形通孔，并且试剂珠粒从样品板的后部装载，图9B示出了一种样品板，其中样品板具有圆筒形非渐缩状通孔，使得试剂珠粒可以从顶部装载或插入穿过样品孔，并且通过过盈配合固定在通孔内；

图10示出了包括六个样品孔的已知样品条带，其中试剂珠粒从样品板的下面装配；

图11示出了已知布置的横截面3D视图，示出了位于通孔的凹入端部内的试剂珠粒；

图12示出了已知的套筒保持组件；

图13示出了穿过已知套筒保持组件的横截面；

图14示出了已知的试剂珠粒套筒；

图15示出了已知的试剂珠粒套筒的内部；

图16更详细地示出了在已知的试剂珠粒套筒的基部中的有机硅膜；

图17示出了推杆和套筒保持组件；

图18更详细地示出了位于推杆下端的连接凸台；

图19更详细地示出了推杆的上端；

图20更详细地示出了推杆的端部；

图21示出了提升机构中的已知的套筒保持组件；

图22更详细地示出了提升机构如何移动成与推杆的连接凸台接合；

图23更详细地示出了被夹持到提升机构的推杆；

图24示出了根据常规布置的相邻球形试剂珠粒之间的串扰问题；

图25示出了根据优选实施例的被插入到样品板的钻孔或通孔内的圆柱形试剂珠粒、插塞或插入件，并且其中从圆柱形试剂珠粒、插塞或插入件反射的光不影响或妨碍相邻的试剂珠粒、插塞或插入件；

图26示出了比较数据，该数据表明位于常规样品板的钻孔或通孔中的球形试剂珠粒如何吸收大约0.44％的杂散光，并示出了根据优选实施例，通过使用被插入成与样品孔的基部齐平的圆柱形试剂珠粒、插塞或插入件，获得了显著的改进，其中圆柱形试剂珠粒、插塞或插入件仅吸收0.04％的杂散光；

图27示出了根据优选实施例的圆柱形珠粒；

图28示出了根据优选实施例的被插入到样品孔的钻孔内的圆柱形珠粒；

图29示出了根据实施例的被插入在样品孔的钻孔内的阶梯状珠粒、插塞或插入件；

图30示出了常规布置，其中球形珠粒延伸高于样品孔的基部0.6858mm的距离或高度；图31示出了一个实施例，其中样品孔的基部包括附加凸缘，该附加凸缘用于减小试剂珠粒的珠粒高度或暴露高度；

图32A示出了用于说明目的样品孔的剖视图，其中圆柱形珠粒、插塞或插入件最初部分插入，图32B示出了用于说明目的样品孔的剖视图，其中使用压入工具将圆柱形珠粒、插塞或插入件完全插入；

图33示出了用于说明目的的样品孔的剖视图，其中根据优选实施例，圆柱形珠粒、插塞或插入件被插入成与样品孔的基部齐平或共面；

图34示出了突出到样品孔的底部中的球形珠粒；

图35示出了正在被搅拌的球形珠粒；以及

图36示出了搅拌后的常规球形试剂珠粒周围的死区。

具体实施方式

常规样品板

首先将参考图1描述已知的布置。图1显示了包括多个样品孔19的常规样品板。样品板可以包括例如样品孔19的9×6阵列。为了便于说明，在图1中示出了单个样品孔19。样品板可以包括样品孔19的条带，例如样品板可以包括例如包括样品孔19的1×9或1×6阵列的样品条带。

每个样品孔19包括设置在样品孔19的底部中的多个囊袋、凹部或钻孔21。在图1所示的特定布置中，样品孔19包括形成或以其他方式设置在样品孔19的基部中的10个囊袋、凹部或钻孔21。

囊袋、凹部或钻孔口21可以沿样品孔19的边缘或周边设置，并且样品孔19的基部的中心或中央区域可以是基本上平坦的并且没有囊袋、凹部或钻孔21。

可以将各自具有1.75或2mm直径的多个试剂珠粒或微球装入试剂珠粒或微球分配器中。可以提供试剂珠粒或微球分配器，其配置为操纵直径不同于1.75mm或2mm的试剂珠粒或微球。还考虑了这样的布置，其中装载到特定试剂珠粒或微球分配器中的试剂珠粒或微球可以包括多个不同的直径或其混合。

试剂珠粒或微球可以由样品板制造商预先装载或预先插入到囊袋、凹部或钻孔21中。可替代地，终端用户可以将试剂珠粒或微球装载或插入到囊袋、凹部或钻孔21中。

试剂珠粒或微球可以包含聚苯乙烯、塑料或聚合物核。试剂珠粒或微球可以包被有优选用于分析样品的试剂(例如抗体或抗原)。试剂可以用于通过聚合酶链反应(“PCR”)来分析样品或作为免疫测定程序的一部分。可替代地，试剂可以包含用作杂交探针以检测样品中互补DNA或RNA序列的存在的DNA或RNA序列。试剂珠粒或微球也可以包被有抗静电涂层或者可以具有抗静电性质。为了测试不同的分析物、生物分子或物质，可以将不同的试剂珠粒或微球插入到样品孔19的不同钻孔21中。因此，可以提供多重样品板。

可以将待测试的流体或样品分配到样品板的样品孔19中。例如，流体可以包括取自患者的血液、血清、唾液或尿液的样品。

根据一种布置，可以将10至200ml的流体样品分配到样品板的每个样品孔19中。

控制系统可以用于确定已经被分配或插入到样品孔19的钻孔21中的试剂珠粒或微球的位置和/或类型。可替代地，试剂珠粒或微球可以由制造商预先装载到样品孔19的钻孔21中。控制系统还可以确定需要将另外的试剂珠粒或微球分配或插入到哪些钻孔21(如果有的话)中。一旦样品流体已经被分配到样品孔19中，控制系统就可以核定已经分配了适当量的样品流体并且所有的试剂珠粒或微球至少部分地或完全地被样品流体浸没。

待分配到样品孔19中的样品流体的体积可以取决于在样品孔19内形成的钻孔21的数量、被分配、插入或预装载到钻孔21中的试剂珠粒或微球的直径以及试剂珠粒或微球突出到样品孔19的底部中的程度。控制系统可以用于改变被分配到样品孔19中的样品流体的量，使得试剂珠粒或微球被浸没在样品流体中至基本上恒定的深度，而与样品孔19中存在的钻孔的数量、试剂珠粒或微球的直径或试剂珠粒或微球突出到样品孔19的基部中的程度无关。

可以使用不同版式的样品板。例如，样品板可以包括样品孔19的二维阵列，例如样品板可以包括样品孔19的4×4、4×6、4×8、4×10、4×12、6×6、6×8、6×10、6×12、8×8、8×10、8×12、10×10、10×12或12×12阵列。可替代地，样品板可以包括样品孔19的一维条带，例如样品板可以包括样品孔19的4×1、6×1、8×1、10×1或12×1条带。

设置在样品孔19的基部中的囊袋、凹部或钻孔21中的至少一些或全部可以包括可以沿着其长度的至少一部分或基本上整个长度渐缩的钻孔。囊袋、凹部或钻孔21可以例如被布置成具有6°的锥度。渐缩状孔的顶部(或试剂珠粒或微球接纳部分)可以具有1.82mm的直径。围绕钻孔的样品孔19的基部可以被布置成具有埋头孔部分，以便于将试剂珠粒或微球插入到囊袋、凹部或钻孔21中。根据实施例，埋头孔部分的外径可以为2.25mm。

图2A示出了设置在样品板中的样品孔19和两个相邻的样品孔19的部分的平面图。图2A所示的样品孔形成设置于样品板中的样品孔19的阵列的一部分。图2A所示的样品孔19中的每一个包括设置在样品孔19的底部或基部中的10个囊袋、凹部或钻孔21。在使用中，试剂珠粒或微球优选地插入到样品孔19的囊袋、凹部或钻孔21中的每一个中，并且在图2A至2C所示的实施例中，试剂珠粒或微球优选通过钻孔的直径渐缩并变得受限而被固定在囊袋、凹部或钻孔21中。

图2B更详细地示出了样品孔19的底部，并示出了设置在样品孔19的底部中的多个囊袋、凹部或钻孔21，囊袋、凹部或钻孔21中的每一个被布置并适于容纳试剂珠粒或微球。优选地，设置在样品孔19的基部中的囊袋、凹部或钻孔21中的每一个还包括位于每个渐缩状钻孔的入口处的埋头孔部分或区域。

单个试剂珠粒或微球被分配并插入到每个囊袋、凹部或钻孔21中。

图2C更详细地示出了试剂珠粒或微球20A，试剂珠粒或微球20A被设置并牢固地设于设置在样品孔19的基部中的囊袋、凹部或钻孔21中。试剂珠粒或微球20A被固定在囊袋、凹部或钻孔21内。根据图2C所示的实施例，当被固定、插入或定位在囊袋、凹部或钻孔21内时，试剂珠粒或微球20A的上表面被定位或设于低于孔底表面约0.3mm处。因此，根据该实施例，位于并固定在设置在样品孔19的底部中的囊袋、凹部或钻孔21中的试剂珠粒或微球20A不突起高于通向囊袋、凹部或钻孔21的入口或其表面，因此不会突起高于样品孔19的底面。然而，根据其他实施例，一个或更多个试剂珠粒或微球可以位于设置在样品孔19的基部中的一个或更多个囊袋、凹部或钻孔21中，并且可以位于相对较浅的囊袋、凹部或钻孔21中或者可以位于具有锥度的一个或更多个囊袋、凹部或钻孔21中，使得当试剂珠粒或微球20A被牢固地定位或插入在囊袋、凹部或钻孔21内时，则试剂珠粒或微球突起高于囊袋、凹部或钻孔21的入口或表面，因此突起高于样品孔19的底表面。试剂珠粒或微球20A可以被布置成使得它们突出高于样品孔的底表面达其直径的20-40％。

可以借助于试剂珠粒或微球分配器或插入器将试剂珠粒或微球分配或插入到设置在样品板的样品孔19的底部中的囊袋、凹部或钻孔21中。

微阵列仪概述

在图3中示出了微阵列仪或自动化装置，其可以包括多个装载到托盘或托盒36上的注射器本体37，然后将托盘或托盒36自动装载到微阵列仪或自动化装置中。托盘或托盒36包括多个注射器本体37并且可以通过三轴平移机构或机器人臂移动到微阵列仪或自动化装置的试剂珠粒或微球分配工作区域。

微阵列机或自动化装置可以包括三轴平移机构，该三轴平移机构可以包括第一平移台，第一平移台包括导轨31，第一臂32可以沿着导轨31在第一(x)水平方向上平移。优选地，提供第二平移台，其包括优选地包围或围绕第一臂32的安装块33。安装块33可以在第二(y)水平方向(优选地与第一(x)水平方向正交)上平移并且可以沿着第一臂32前后移动。优选地，提供第三平移台，并且第三平移台可以包括本体或注射器驱动机构34，本体或注射器驱动机构34优选容纳线性致动器(未示出)。优选地，本体或注射器驱动机构34可滑动地安装在安装块33上并且可以在竖直(z)方向上升高或降低。

优选地，三轴线平移机构还包括可伸缩臂22，可伸缩臂22优选地从安装块33延伸。三轴平移机构优选地被编程为从包括多个试剂珠粒或微球分配器37的托盘或托盒36中选择并拾取试剂珠粒或微球分配器37。本体或注射器驱动机构34包括渐缩状插口，该渐缩状插口弹性地安装在管状壳体内。插口被布置成与设置在试剂珠粒或微球分配器37的注射器盖23上的渐缩状部分相接合。当试剂珠粒或微球分配器37位于托盘或托盒36中时，插口可以降低到试剂珠粒或微球分配器37的注射器盖23上，从而以可拆卸的方式将试剂珠粒或微球分配器37固定到本体或注射器驱动机构34上。然后，可以将本体或注射器驱动机构34和所附接的试剂珠粒或微球分配器37升高至使得可伸缩臂22(其最初缩回到安装块33的本体内)之后可以延伸到的高度。然后，本体或注射器驱动机构34降低试剂珠粒或微球分配器37，使得注射器本体的上部被可伸缩臂22固定。可伸缩臂22优选具有孔口，该孔口的内径优选小于注射器本体的上部的外缘的最外侧直径。

每个试剂珠粒或微球分配器37可以包括多个相同的试剂珠粒或微球。根据实施例，多达15个单独的试剂珠粒或微球分配器37可以被装载或设置在单个托盘或托盒36中，并且试剂珠粒或微球分配器37中的每一个可以具有多达约2000个试剂珠粒或微球的容量。

注射器驱动机构34可以布置成从托盘或托盒36中拾取出试剂珠粒或微球分配器37，并将试剂珠粒或微球分配器37的筒体定位并降低，使得其直接位于设置在样品板的样品孔19中的期望试剂珠粒或微球囊袋或凹部21的上方。然后，注射器驱动机构34可以被致动，使得试剂珠粒或微球分配器37的致动器或柱塞凸台被压下，这又依序使得柱塞将试剂珠粒或微球从腔室推动通过硅酮构件、通过筒体并进入样品孔19的期望的试剂珠粒或微球囊袋或凹部21。注射器驱动机构34可以被布置成用所需大小的力按下致动器凸台和柱塞，而不是将致动器或柱塞凸台和柱塞移动到某个竖直位置。因此，以恒定的力将试剂珠粒或微球紧密且一致地压入样品孔19的试剂珠粒或微球囊袋或凹部21中。

进行测试，其中提供包括9个样品孔19的样品板。每个样品孔19包括10个囊袋、凹部或钻孔21，其围绕样品孔19的中央部分布置成圆形。每个囊袋、凹部或钻孔21装载包被有不同浓度的试剂的试剂珠粒或微球。第一样品孔中的10个珠粒包被有浓度为10μg/ml的试剂，第二样品孔中的10个珠粒包被有浓度为8pg/ml的试剂。第三样品孔中的10个珠粒包被有浓度为4pg/ml的试剂，第四个样品孔中的10个珠粒包被有浓度为2pg/ml的试剂。第五样品孔中的10个珠粒包被有浓度为1pg/ml的试剂，以及第六样品孔中的10个珠粒包被有浓度为0.5pg/ml的试剂。第七样品孔中的10个珠粒未包被有试剂，即浓度为0pg/ml。第八样品孔中的10个珠粒包被有不同浓度的试剂，浓度包括10pg/ml、8pg/ml、4pg/ml、2pg/ml、1pg/ml、0.5pg/ml、0pg/ml、0pg/ml、0pg/ml以及0pg/ml。第九样品孔中的10个珠粒与第八样品孔中的试剂珠粒或微球具有相同的浓度，并且以与第八样品孔中的试剂珠粒或微球相同的方式排列。

试剂珠粒或微球包被有包含绵羊IgG的捕获抗体，并在含有0.02％Kathon(RTM)防腐剂的碳酸氢盐缓冲液中运输。

样品板的样品孔19排空在其中运输试剂珠粒或微球的防腐剂，并向每个样品孔19中加入400pi的1/1000稀释的驴抗-绵羊IgG过氧化物酶缀合物的Tris缓冲盐水(“TBS”)缀合物稀释缓冲液。然后，将样品板在环境温度下温育并进行45分钟的中等强度振动。然后，使用微阵列仪(DS2(RTM)，可从Dynex Technologies(RTM)购得)的单通道清洗头从样品孔19中抽吸任何未结合的缀合物。一旦从样品孔19中吸出任何未结合的缀合物，然后立即向每个样品孔19中加入500pi的1/20稀释的Tris缓冲盐水洗涤液。然后从样品孔19抽吸洗涤液，并将从样品孔19洗涤和抽吸洗涤液的过程再重复两次以上。在完成包括抽吸洗涤液的第三洗涤步骤之后，将300μl鲁米诺(化学发光标记物)立即加入到每个样品孔19中。然后将样品板在黑暗中于环境温度下温育同时经受中等强度振动持续15分钟。然后将样品板立即转移至读取室。

将相机设定为6分钟30秒的曝光时间，增益为x20。在加入鲁米诺后22分钟和29分钟拍摄图像。然后将相机曝光时间改为8分37秒。在加入鲁米诺后38分钟、47分钟、56分钟和65分钟拍摄进一步的图像。图像分析表明，加入鲁米诺后15至22分钟观察到的信号强度最大，这与鲁米诺衰减曲线一致。

一旦已经将试剂珠粒或微球分配或插入到样品板的囊袋、凹部或钻孔中，可以进行以下步骤。首先，可以将样品流体加入到样品板的一个或更多个样品孔中。样品流体可以包含一种或更多种分析物，如特异性抗原，其可以与包被在一个或更多个试剂珠粒或微球上的试剂进行反应。优选地，试剂珠粒或微球包被有特异性捕获抗体。

一旦将样品流体加入到样品孔中，则优选对样品板进行温育步骤。在对样品板进行温育步骤以形成抗原-抗体复合物之后，优选对样品板进行一个或更多个洗涤和抽吸步骤以除去任何未结合的样品流体并除去任何洗涤液。然后加入酶缀合物，其将与任何抗原-抗体复合物的抗原部分结合，所述抗原-抗体复合物的抗原部分已经形成但不与抗体或抗原-抗体复合物的抗体部分结合。然后将样品板在经受一个或更多个洗涤和抽吸步骤之前温育。一旦样品板已经经受一个或更多个洗涤和抽吸步骤，优选地添加鲁米诺(或另一种可视化试剂)。然后优选地抽吸样品板以去除任何过量的鲁米诺(或其他可视化试剂)。当与附接于抗原-抗体复合物的抗原部分的酶接触时，鲁米诺(或其他可视化试剂)将分解，导致产生独特的颜色。在最后阶段，分析样品板并优选进行终点测定。

常规样品板

图4A示出了被装载到板框中的9个样品条带。图4A所示的样品条带中的每一个包括样品孔的6×1条带。样品条可以可移除地装载到板框中。9个样品条带中的每一个包括6个样品孔，并且每个样品孔可以包括10个(任选地渐缩状的)钻孔，其在使用中被布置为接纳试剂珠粒。试剂珠粒优选地被装载或预装载到钻孔中，使得试剂珠粒突出高于样品孔的基部。图4B更详细地示出了可以装载样品板的板框。

图5A更详细地示出了包括六个样品孔的样品条带。条带中的样品孔可以被分离或以其他方式分开。根据一个实施例，可以将样品板或条带分离或分成单个样品孔。图5B示出了被装载到板框中的包括六个样品孔的样品条带。

图6A示出了被装载到板框中的单个样品孔(其已经与样品孔条带分离)。样品孔优选地包括凹形部分，该凹形部分优选地被布置成与优选地设置在板框的基部上的凸形部分相接合或互锁。样品板或样品条带优选地被布置成在被装载到板框上时牢固地紧固并固定到该板框上。

图6B更详细地示出了通过断开特征47连接的两个样品孔。断开特征47优选地允许用户分离相邻的样品孔。根据实施例，样品孔可以彼此分离，但仍可以放置在板框上彼此相邻而不彼此干扰。断开特征47可以包括一个、两个或更多于两个断点46。根据一个实施例，两个样品孔之间的连接件47可以在第一断点46处与样品孔分离。然后，可以通过在第二断点46处从样品孔中断开连接件47来将连接件47从其所附接的单个样品孔断开或以其他方式移除。

图6C示出了具有端部断开特征48的样品孔。端部断开特征48允许端部孔在板框中单独使用而不干扰另一样品孔。端部断开特征48为使用者提供了用于固持以便从板框移除样品孔条带或单个样品孔的物件。

图6D示出了具有ID和取向凸舌49的样品孔。凸舌49允许将标识符印刷到凸舌49上或以其他方式附接到凸舌49上。标识符可以包括2D或3D条形码和/或人类可读文本。当使用单个样品孔时，通过与板框中和/或其他样品孔上的特征对准，凸舌49优选地帮助使用者定向样品孔。

图7A示出了样品孔条带的下面，并且示出了每个样品孔包括十个钻孔或凹部，在使用中试剂珠粒优选地插入这些钻孔或凹部中。每个样品孔的基部或下侧优选地还包括凹形部分，凹形部分优选地布置成在使用中与设置在板框的基部中的凸形部分配合。

图7B更详细地示出了有助于将样品孔条带与板框对准的凹形对准及保持特征50。图7C示出了优选地设置在板框的基部中的对应的凸形对准及保持特征51。根据一个实施例，凸形部分51可以包括多个柔性突出部，柔性突出部优选地随着样品孔设于凸形部分51上方而向内变形。板框上的突出部优选地移动或靠近在一起以确保样品孔被保持就位而不必施加过度的力以将样品孔安装或固定到板框上和/或从板框上卸下样品孔。

图8示出了样品孔条带的横截面视图，并且示出了样品孔可以包括多个渐缩状钻孔52。渐缩状钻孔52用作在使用中试剂珠粒插入其中的囊袋。在图8所示的布置中，锥度的角度是6.0°。

尽管上述各种布置重点针对在包被有生物分子的用于免疫测定或ELISA程序的试剂珠粒上，但本发明同样适用于包含核酸序列或以其他方式包被有核酸序列的试剂珠粒，试剂珠粒用作检测与试剂珠粒上所设的DNA或RNA序列互补的DNA或RNA序列的杂交探针。如本领域技术人员所理解的，杂交探针在杂交之前是无活性的，此时存在构象变化并且分子复合物变得有活性，然后在UV光下发荧光。因此，上述所有各种实施例和上述实施例的所有各个方面同样适用于使用包含或以其他方式包被有DNA或RNA序列(或其他核苷酸序列)的试剂珠粒，以用作杂交探针来检测互补的DNA或RNA序列。

许多变化形式，包括将荧光和发光底物用于ELISA，使用荧光或发光分子直接标记结合对的第二成员(在这种情况下，该方法不称为ELISA，但过程步骤非常类似)，以及可以用核酸或其他特异性配对试剂代替抗体作为探针。可以使用相同的原理来检测或确定可以形成特异性结合对的任何物质，例如使用凝集素、类风湿因子、蛋白质A或核酸作为结合配偶体之一。

因此，根据本发明的样品板或多重样品板可以用于检测一种或更多种分析物，如一种或更多种生物标记物，其可以指示疾病或病症。疾病或病症可以是肿瘤、赘生物或癌症，如乳腺癌、卵巢癌、肺癌、结肠癌、增生性息肉、腺瘤、结肠直肠癌、高级别发育异常、低级别发育异常、前列腺增生、前列腺癌、黑素瘤、胰腺癌、脑癌(如成胶质细胞瘤)、血液学恶性肿瘤、肝细胞癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、头颈部癌、食管癌、胃肠道间质瘤(GIST)、肾细胞癌(RCC)或胃癌。疾病或病症还可以是炎性疾病、免疫性疾病或自身免疫性疾病，如炎性肠病(IBD)、克罗恩氏病(CD)、溃疡性结肠炎(UC)、盆腔炎、血管炎、银屑病、糖尿病、自身免疫性肝炎、多发性硬化症、重症肌无力、I型糖尿病、类风湿性关节炎、银屑病、系统性红斑狼疮(SLE)、甲状腺炎、Grave病、强直性脊柱炎舍格伦病、CREST综合征、硬皮病、风湿性疾病、器官排斥、原发性硬化性胆管炎或脓毒症。疾病或病症还可以是心血管疾病，如动脉粥样硬化、充血性心力衰竭、易损斑块、中风、局部缺血、高血压、(器官)狭窄(stenosis)、血管闭塞或血栓事件。疾病或病症还可以是神经疾病、如多发性硬化(MS)、帕金森病(PD)、阿尔茨海默病(AD)、精神分裂症、双相型障碍、抑郁症、自闭症、朊病毒病、皮克病、亨廷顿舞蹈病(HD)、唐氏综合征、脑血管疾病、拉斯姆森脑炎、病毒性脑膜炎、神经精神性系统性红斑狼疮(NPSLE)、肌萎缩性侧索硬化、Creutzfeldt-Jacob病、Gerstmann-Straussler-Scheinker病、传染性海绵状脑病、缺血性再灌注损伤(例如中风)、脑外伤、微生物感染或慢性疲劳综合征。表型还可以是诸如纤维肌痛、慢性神经性疼痛或外周神经性疼痛的病症。疾病或病症还可以是感染性疾病，如细菌、病毒或酵母感染。例如，疾病或病症可以是惠普尔病、朊病毒病、肝硬化、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、HIV、肝炎、梅毒、脑膜炎、疟疾、肺结核或流感。可以在外来体中评价病毒蛋白如HIV或HCV样颗粒，以表征病毒状况。

样品板或多重样品板可以用于检测一种或更多种用于检测疾病或病症的生物标记物、生物分子或分析物。例如，生物标记物的检测可以用于检测或提供疾病或病症的诊断、预后。例如，样品板或多重样品板可以包含针对一种或更多种癌症标记物的一种或更多种探针，并且可以用于检测来自个体的样品中的一种或更多种癌症标记物。样品中癌症标记物的存在、不存在或水平可以指示个体中的癌症。在另一个实施例中，样品板或多重样品板可以用于监测疾病或病症。例如，与对照相比，或与来自同一个体的一种或更多种癌症标记物的较早测定相比，一种或更多种癌症标记物的水平升高可以指示癌症的进展。在又一个实施例中，样品板或多重样品板可以用于确定病症的治疗或作用过程。例如，个体可能具有导致个体不能代谢某些药物的遗传变异体。样品板或多重样品板可以用于检测遗传变异体。在另一个实施例中，样品板或多重样品板可以用于检测化合物，其可指示药物未被代谢。样品板或多重样品板也可用于检测某些药物或化合物的摄入，如通过检测药物或药物的副产物，这可用于药物测试。

样品板和多重样品板也可以用于药物的筛选。例如，样品板或多重样品板可以包含作为药物开发的靶标的一种或更多种探针。然后，可以使用样品板或多重样品板筛选化合物库。可替代地，样品板或多重样品板可以包含多种探针，探针包含作为潜在药物的化合物库。样品可以包含药物靶标，其被加入到样品板中。

本文还提供了包含本文公开的样品板或多重样品板的试剂盒。试剂盒可以包含用于检测分析物或用于进行测定的一种或更多种组分。在一个实施例中，一种用于检测分析物的试剂盒包括一个或更多个样品板以及多个珠粒、插塞或插入件。多个珠粒、插塞或插入件可以包含一种或更多种探针，诸如为核酸、抗体、抗体片段、蛋白质、肽、适体或化合物的探针。在另一个实施例中，提供了一种用于进行酶联免疫吸附测定(ELISA)程序的试剂盒。试剂盒可以包括本文所述的一个或更多个样品板或多重样品板；以及多个珠粒、插塞或插入件，其中，珠粒、插塞或插入件包被有包含抗体、抗原或另一种生物分子的试剂。在又一个实施例中，试剂盒可以包含用于进行核酸探针程序的组分，其中试剂盒包含如本文所述的一个或更多个样品板或多重样品板；以及包被有核酸如DNA或RNA探针或序列的多个珠粒、插塞或插入件。

图9A示出了试剂珠粒53如何可以从样品板的下面或后侧装载到样品板中。样品板可以包括根据图9A所示的布置成渐缩形的钻孔或通孔54。然而，如将在下面讨论的，还可以想到的是，钻孔或通孔可以不是渐缩的，并且可以替代地包括具有基本上恒定的横截面直径和/或面积和/或轮廓的基本上圆筒形的通孔或钻孔54。图9B示出了其中试剂珠粒或微球被固定在圆筒形钻孔或通孔54内的样品板。试剂珠粒或微球可以从顶部或从底部插入到圆筒形钻孔或通孔54中。试剂珠粒或微球优选通过过盈配合固定在钻孔或通孔54内，并且试剂珠粒或微球沿试剂珠粒或微球的整个圆周、周长或闭环形成基本上不透流体的密封。

关于图10所示的布置并返回参照图9A，样品孔中的钻孔或通孔54可以从样品孔56的基部55的最下部或底部处的第一直径向朝向基部55的最上部或顶部的第二较窄直径渐缩。基部55的最上部或顶部是基部55在使用中优选地与样品流体接触的部分。

在钻孔或通孔54的顶部，在与样品流体接触的基部55的那部分的正下方，钻孔或通孔54可以成形为与试剂珠粒53形成紧配合。钻孔或通孔的最上部可以包括部分球形轮廓、球根状区域、弧形部分或凹入区域，使得从样品板的下面插入钻孔或通孔54中的试剂珠粒53紧密地装配在钻孔或通孔54的顶部处的部分球形轮廓、球根状区域、弧形部分或凹入区域内，如图9A所示。

试剂珠粒53的一部分突起到样品孔的基部或底部中，实际上形成样品孔56的基部的一部分。因此，试剂珠粒53的顶部(在珠粒与通孔的壁形成不透流体的周向密封的区域上方)布置成在使用中与样品流体接触。试剂珠粒53围绕珠粒53的整个圆周与钻孔或通孔54的部分球形轮廓、球根状区域、弧形部分或凹入区域形成不透流体的密封。

大尺寸珠粒53可以装配到样品板的样品孔56中，使得仅试剂珠粒53的顶部或上部暴露于流体。应当注意，发光读取过程是2D操作，并且仅考虑来自试剂珠粒53的面向相机的可见部分的信号。如将在下面更详细地讨论的，如果样品孔被搅动，则使试剂珠突起到样品孔的底部中可能由于串扰和由于死区的产生而带来问题。

多重孔与装载到通孔中的试剂珠粒一起优选地模拟了成熟的微孔板ELISA类型的过程。多重孔在版式上可以基本上类似于微孔板孔。

在微孔板中进行ELISA测试的主要因素之一是每个步骤的效率或清洁度。来自这些步骤的任何残余流体可以对该测试的性能具有总体影响，例如，如果缀合物没有通过洗涤完全去除，则残余缀合物将在珠粒上产生错误信号。这将增加背景信号而降低测试的灵敏度。

测试的有效处理的关键是在孔中没有任何流体捕集。任何拐角、囊袋或底切可捕集流体，从而降低样品板的性能。样品板允许以与常规微孔板孔类似的方式进行有效的洗涤、混合和抽吸，并且优选地未出现捕集流体的问题。

珠粒53以均一的高度装配在样品孔56中，其优选地确保每个珠粒53进行相同的处理。每个珠粒53在通孔的囊袋中的具体定位而形成不透流体的密封配合，以确保在珠粒53下面或下方没有捕集流体。

通孔54可以包括渐缩的锥形孔洞，如图9A所示，珠粒锁定在该孔洞中，或者通孔54可以包括减尺寸的圆筒形孔，如图9B所示，珠粒被机械地压入该孔洞中。这两种布置都实现了防止流体经过珠粒53并被捕集在珠粒53下面或下方的目的。

如果样品板包括一个或更多个渐缩状通孔54，如图9A所示，则可以以高精度和一致性制造通孔，以确保珠粒以均一高度固定在样品板中(因为试剂珠粒53优选地以设定的力压入通孔54中，而不是设定的高度)。如图9B所示的使用减尺寸的圆筒形通孔的替代布置不需要制造到如此高的准确度，因为试剂珠粒53被压入通孔到设定的高度并且不使用设定的力。

在上述的一些布置中，试剂珠粒可以装配到样品孔的盲袋细节中，即配合到封闭的凹部中。然而，更优选地，如以上参考图9A和9B所示和所述，可以提供在基部中具有通孔的样品板。

可以对在生产或制造期间装载有试剂珠粒的样品板或多重样品板的组装进行质量控制检查，以确保所有珠粒被密封到样品板或多重样品板上。如上所述装入盲袋中的珠粒将确保流体不会从孔中泄漏出。然而，流体仍然可能在珠粒下面泄漏，并且这样的泄漏将难以检测。

如图9A和9B所示，包括通孔的样品板或多重样品板允许进行压力检查来作为珠粒与板的组装、制造和质量控制检查的一部分。这确保珠粒与板的密封良好。有缺陷的珠粒或损坏的孔洞将在制造中而不是当使用者进行测试时才显示为失效。

根据如图9A中所示或任选地还在图9B中所示的布置的样品板(其中试剂珠粒从下面装入钻孔中)出于多种原因是特别有利的。首先，压入工具与珠粒53之间的接触是与试剂珠粒53的底部或下面部分接触，因此任何参考标记也将在试剂珠粒53的底部或下面部分上，即不是将与样品流体接触的试剂珠粒53的任何部分。其次，在图9A所示的实例中，样品孔的基部55中的通孔53的顶部可以被制成与试剂珠粒53的轮廓或形状相匹配，使得在珠粒53的突出到样品板的基部中的部分周围没有形成壕沟部分。因此，该设计排除了在试剂珠粒53下方捕集流体的任何可能性。第三，由于压入工具将仅与试剂珠粒53的下面或底部接触，因此压入工具的尖端是否有效地交叉污染其他珠粒无关紧要。压入工具不与试剂珠粒53的顶部(即，试剂珠粒53的将与样品流体接触的部分)接触。第四，在图9A所示的实施例中，试剂珠粒53可以不形成壕沟区域并且以降低串扰风险的方式来配合在基部中较低处。

在US2009/0069200中公开了用于制备生物分子阵列的系统。US2009/0069200的图2和图3示出了位于方形子孔8中的球形试剂珠粒9。因此，显然，放置在方形子孔中的圆形珠粒未与子孔的壁形成不透流体的密封。在US2009/0069200中公开的布置与所公开的布置的不同之处还在于，流体被布置成向上穿过多个子孔并且越过珠粒。相反，根据所公开的布置，流体仅布置成与试剂珠粒53的顶表面接触。防止流体经过固定在通孔54或凹部内的试剂珠粒53向下到达通孔54或凹口。

有利地，根据所公开的布置的样品板可以在处理步骤期间容易地清洁，而不在试剂珠粒53下面捕集流体。珠粒53优选地以使其尽可能接近圆柱形孔的版式来制备并且还可以易于从顶部接近。

在US2009/0069200中公开的布置利用分配进入其中的珠粒下面的共用填充室或储器，以便使流体上升到这些单独的孔中。圆形珠粒容纳在方形渐缩状子孔中，即珠粒不与子孔形成流体密封。实际上，在方形孔中设置球形珠粒使得流体能够向上流动、流过珠粒并围绕珠粒流动。

如US2009/0069200中公开的样品板将需要被制造成两个分开的部分，原因在于不可能将包括储器的样品板模制为单件。样品板的下部被示出为包括离散的板底部11，其在制造过程中需要被密封到包含多个孔7的样品板的上部。每个孔7必须被密封至板底部11以确保其不会泄漏。因此，必须可靠地密封下部板底部11与上部样品孔7之间的整个格面。其结果是，制造过程相对复杂并且易于产生制造问题。

如US2009/0069200中公开的样品板在流体流动动力学方面也是特别复杂的。将流体初始分配到样品板中必须通过这些子孔之一进行分配。因此，必须将流体精确地分配到小于1.7mm的小的目标区域中，其基本上小于样品孔的直径。此外，一旦已经将流体分配到子孔之一中，则在均匀上升到每个孔中之前，流体必须流入样品板底部的室或储器12中，以确保所有的珠粒被充分浸没。因此，将理解的是，与US2009/0069200中公开的布置相关联的流体动力学是复杂的并且涉及曲折路径，该曲折路径不适合于可再现的结果。

在US2009/0069200中公开的布置中，一旦样品或缀合物流体已经被分配并且已经流过或越过珠粒，则流体必须以某种方式在商业产品中被移除。然而，这特别成问题，因为只能从顶部接近样品板。即使矩形真空管紧靠孔的顶部密封，也不能保证样品板底部的室或储器中的所有流体都将被移除。因此，有可能一些流体残余物将留在储器中，这可能导致孔中的错误信号。

因此，应当理解，US2009/0069200中公开的布置存在许多明显问题。

相反，根据本公开的布置的样品板则没有上述问题，并且表现出相对于如US2009/0069200中公开的已知布置的显著改进。

图10示出了6个样品孔的条带，其中每个样品孔中的通孔中装载5个3mm试剂珠粒。试剂珠粒从样品板底部或下面装入通孔。试剂珠粒通过形成在通孔中的上部凹入区域而被保持在通孔内。

图11示出了如上参照图9A和图10所示和所述的布置的三维横截面视图。

试剂珠粒、插塞或插入件插入器

试剂珠粒、插塞或插入件可以用于将试剂珠粒、大珠粒、插塞或插入件插入到样品板或多重样品板的一个或更多个钻孔中。

所公开的样品板或多重样品板能够在样品板或多重样品板的单个孔中进行多个测试。该技术可以使用包被有特定抗原或抗体的大尺寸(例如mm尺寸)试剂珠粒、插塞或插入件。样品板或多重样品板的每个孔包括样品板或多重样品板的基部中的多个钻孔。可以通过过盈配合将试剂珠粒、大珠粒、插塞或插入件挤压并保持在每个孔的钻孔中，使得试剂珠粒、插塞或插入件的顶部暴露于测定测试。

US-6074609公开了一种用于排列微珠粒的系统。US-6074609中公开的微珠粒为5至300pm的数量级，即，比根据所公开的布置使用的大珠粒小一个数量级。微珠粒储存在容纳液体介质的储器中。转移构件的远端下降到液体介质中，并且在管腔内产生真空以将微珠粒吸引到转移构件的远端上。然后将转移构件从储器提升，同时将微珠粒保持在远端上。然后将转移构件定位在保持另一种液体介质的测试孔中。然后在转移构件位于液体介质内的同时，除去真空并从转移构件释放微珠粒。然后使微珠粒在重力作用下于液体介质中落入。

US-6074609中公开的布置存在许多问题。在US-6074609中公开的布置的一个问题是，当微珠粒被吸向转移构件的远端时，管腔将至少部分地填充有流体。这可能导致严重的交叉污染问题。

US-6074609中公开的装置的另一个问题是微珠粒、特别是微珠粒上的任何敏感涂层在微珠粒被转移构件转移时可能被损坏。

期望大量生产样品板并改进在样品板的钻孔中定位试剂或大珠粒的方法。

参考图12，公开了试剂珠粒插入器，其中，试剂珠粒或大珠粒可以由操作者装载到一个或更多个套筒101中，并且可以存储或直接放置在试剂珠粒插入设备上。操作者可以从套筒101移除上盖102，将珠粒倾倒到套筒101中，然后替换盖102。可替代地，制造商可以供应预先装载的套筒101。

上盖102可以包括一个或更多个孔口。操作者可以将胶带条或另一闭合装置施加到盖102中的一些或所有孔口上，以防止试剂珠粒从套筒101中掉落。可替代地，盖102中的孔洞可以具有防止珠粒掉落的硅胶膜。

操作者可以将条形码标签标识施加到套筒101的一端上，或者套筒可以由制造商提供条形码标签标识。然后操作者将填充好的套筒101装入套筒保持器103中。套筒保持器103可以邻近插入设备定位。可替代地，套筒保持器103可以位于插入设备的远侧，并且套筒保持器103可以手动地或自动地定位在插入设备附近。孔口或检查窗口106优选地设置在套筒保持器103中并且使得套筒101上的条形码标签能够被检查。

珠粒插入设备可以包括多个推杆104，推杆被安排成用于在下端处接合提升驱动机构。推杆104的底端或下端优选地各自包括连接凸台105。连接凸台被牢固地保持在升降驱动机构中，使得推杆104随后可靠地在上下方向上被线性驱动。连接凸台105的底面被布置成在接合过程中对提升驱动机构予以密封。

推杆104包括在推杆104的整个长度上延伸的一个或更多个轴向钻孔。在推杆104的下端处，延伸穿过连接凸台105的钻孔优选地允许真空压力通过推杆104到达推杆的端部105。在推杆104的上端处产生的真空或低压区域用于在插入过程期间将试剂珠粒或大珠粒固定和保持在推杆104的端部上。

在珠粒套筒101的基部处可以提供一个或更多个柔软的硅胶膜，硅胶膜允许推杆104进入套筒101而不使珠粒落出套筒101。当推杆104向上行进并穿过珠粒套筒101时，推杆104各自将试剂或大珠粒收集到推杆104的端部上。真空压力将单个珠粒吸到每个推杆104的端部，并将珠粒保持在推杆104的端部上的限定位置中。

系统被布置成感测由被吸到推杆104的端部并密封推杆104的开口端的珠粒引起的真空压力的变化。

推杆104继续向上移动穿过套筒1并且优选地延伸出套筒盖102中的孔洞。样品板或大板(未示出)优选位于套筒101上方，使得样品板中的特定孔囊袋或钻孔与穿过套筒101向上并经由套筒盖102离开的推杆104对准。推杆104将试剂或大珠粒经由样品板或大板的后表面或下表面压入在样品板或大板内形成的钻孔中。推杆104确保试剂或大珠粒插入到样品板的钻孔中位于所需的高度。一旦将试剂珠粒插入或压入样品孔的钻孔中，则沿相反方向驱动插入杆104，并穿过套筒盖102、套筒101的本体和套筒101的基部向下返回。推杆104还借助于推杆返回弹簧107返回到它们的初始位置。该系统优选地被布置并且适于通过感测真空压力的变化来确定何时试剂珠粒已经被插入到样品板的孔中的钻孔中，并因此确定何时试剂珠粒已经离开插入杆的端部。

将试剂珠粒插入到样品板的样品孔中的循环重复一次或更多次，直到样品板或大板载有所需数量的第一特定类型的试剂或大珠粒。该系统可以包括多个容纳套筒101的套筒保持器103，每个套筒保持器包含不同的特定珠粒类型。该系统可以插入或装配所有期望的第一类型的试剂珠粒，然后脱离保持含有第一类型的珠粒的套筒101的套筒保持器103。然后，该系统可以接合保持含有第二不同类型的珠粒的套筒101的套筒保持器103。该系统可以将所有期望的第二类型的试剂珠粒插入或装配到样品板中。该过程可以通过包含第三不同类型的珠粒的第三套筒和/或包含第四不同类型的珠粒的套筒等来重复进行，直到样品板装载有所有期望类型的试剂珠粒。

图13示出了穿过套筒保持组件103的截面图。套筒保持器103可以包括推杆引导衬套108。推杆调节器109与真空入口110一起设置在推杆104的一端。图13示出了尚未进入套筒101的推杆端部111。套筒101可以包括入口孔口112和珠粒出口孔口113。入口孔口112位于套筒101的一个(即，下)侧部上，并且珠粒出口孔口113位于套筒101的一个相对(即，上)侧部上。

图14和图15示出了珠粒套筒101，珠粒套筒101可以包括注射成型的一次性壳体。该组件由套筒本体101、具有盖孔116的套筒盖102以及围绕套筒本体101的基部中的孔口设置的多个硅胶膜114组成。任选地，多个硅胶膜(未示出)也可以设置在套筒盖102中的孔口116周围。硅胶膜114优选地使用包覆模制工艺模制到套筒本体101和/或套筒盖102上。可以在套筒101的壳体中设置一个或更多个套筒通风孔115。

图16更详细地示出了围绕套筒101的基部中的孔口设置的多个硅胶膜114。覆盖套筒1的基部中的孔洞或孔口的那部分膜114优选地具有模制于其中的切口或切缝。模制的切口或切缝例如可以是十字的形状，当推杆104行进穿过它时，允许膜向旁边卷折。当推杆104从套筒101的基部退出时，膜回复到它们的初始形状，并防止珠粒被拉动通过膜而因此离开套筒101。硅胶膜114足够硬以移除无意中搁置在推杆104的端部上的任何珠粒。

图18更详细地示出了套筒保持组件103的基部，并示出了被布置成穿过套筒保持器103的六个推杆104。然而，可以考虑其他布置，其中可以提供不同数量的推杆104。具体地，可以提供八个推杆104。推杆104在位于套筒保持器103的下表面中的轴承衬套108中滑动。轴承衬套108确保推杆104的端部相对于优选地布置在套筒保持器103上方的大板或样品板位于正确的位置。复位弹簧107确保推杆104处于其行程的范围内。这确保推杆104始终处于设备接合的正确高度。

图18更详细地示出了位于推杆104底部的连接凸台105。连接凸台105螺纹连接在推杆104的端部。在组装过程中，连接凸台105被调节到正确的总长度，并通过一个或更多个锁紧螺母117锁定就位。连接凸台105的端部具有渐缩状零件118，渐缩状零件118便于将连接凸台105接合到设备的提升机构。连接凸台105的下凸缘119允许设备中的夹持机构夹持在连接凸台105上，以确保连接凸台105的表面120压靠在密封件上。

图19和图20更详细地示出了推杆104的上端111。推杆104可以包含不锈钢以获得强度、耐磨性和耐腐蚀性。推杆104可以具有拧接式推杆端部111，端部111包含不锈钢并且可以涂覆有氮化钛以便耐磨损。上杆端部111的形状允许推杆104的上端111经过套筒101内的珠粒而不损坏珠粒。推杆104可以具有在直径上略大于推杆104的其余部分的直径的端部。这防止推杆104滑动通过轴承衬套108。在推杆端部111的基部，弧形121可以与弧形端部122一起设置，以确保当推杆104完全缩回时试剂珠粒不被捕集和/或损坏。

图21示出了与提升机构接合的套筒保持器103。提升机构可以包括与推杆104相接合的夹持机构。

图22和图23更详细地示出了旋转就位的提升机构，以便与设置在推杆104下端的连接凸台105相接合。图22示出了连接凸台105，其处于连接凸台105尚未被夹持到提升机构上的位置。图23示出了与提升机构接合的连接凸台105。

圆柱形珠粒

根据特别优选的实施例，可以使用基本上圆柱形的珠粒设计作为使用球形试剂珠粒的替代方案。

已知的样品板和使用球形试剂珠粒的一个问题是球形试剂珠粒突出高于样品孔的基部进入样品孔中，如图24所示。因此，球形试剂珠粒在被照射时(为了确定与试剂珠粒相关的强度)可以发射杂散光2401或使得光被反射到一个或更多个邻近的球形试剂珠粒上，从而引起串扰。杂散光可以照射到图24中2402所示位置处的其他试剂珠粒的表面。将来自一个试剂珠粒的光2401反射到一个或更多个相邻试剂珠粒上的效果是将无关光信号添加到样品孔中的相邻试剂珠粒。从图24可以理解，突出于样品孔底部的球形试剂珠粒的整个可见表面将发射基本上呈球形图案的光2401，如部分所示。从一个试剂珠粒反射到相邻试剂珠粒上的一些光2401将直接照射到位于同一样品孔中的相邻球形试剂珠粒的非水平面2402上。珠粒上的该附加信号被不利地包括在来自或针对特定试剂珠粒的总信号中。

可以使用软件算法来减少或以其他方式减轻无关杂散光2401的影响。然而，应当理解，简化过程并避免使用软件算法来消除串扰影响的需要将是有利的。

现在将参考图25更详细地描述，使用根据特别优选的实施例的基本上圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件以减少串扰和其他不利影响而。

图25显示了一个实施例，其中将具有基本上平坦的顶部或基本上平坦的上表面的基本上圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件2500装配到样品板的样品孔中，使得圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件2500的顶部或上表面基本上与样品孔的流体表面的底部等高或齐平。因此，基本上圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件2500基本上未突出到样品孔的内部空间中。

根据优选实施例，使用基本上圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件2500的特别有利的特征是可以从圆柱形试剂珠粒、插塞或插入件2500的表面发射或反射的任何杂散光或反射光2501不直接照射或影响相邻的圆柱形试剂珠粒、插塞或插入件2502，因为基本上圆柱形的珠粒、插塞或插入件的上表面基本上位于同一平面中。基本上圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件2500优选以类似于常规球形珠粒的方式密封到样品孔的钻孔或通孔中。因此，优选地形成不透液体的密封，其中将基本上圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件2500压入样品孔中的钻孔或通孔中，并且优选地通过过盈配合抵靠钻孔或通孔的内表面予以密封。基本上圆柱形的试剂珠粒、插入件或插塞2500与钻孔或通孔的壁之间的密封优选地是基本上不透流体的，这样使得优选地防止流体越过或绕过不透流体的密封。

图26示出了进行实验的结果，以说明根据优选实施例的具有平坦上表面的基本上圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件2500是如何特别有效地实质性减少和/或有效消除串扰的。根据优选的实施例，使用常规的球形珠粒和基本上圆柱形的平顶珠粒2500使含有5个空白珠粒和1个明亮珠粒的样品孔成像。读取5个空白珠粒的强度值，并比较各孔的结果。

结果示出在图26中，其示出了常规的球形珠粒接收大约0.44％的杂散光，而根据优选实施例的基本上圆柱形的平坦试剂珠粒2500仅接收大约0.04％的杂散光。

圆柱形珠粒的珠粒制造改进

使用研磨工艺制造常规的球形试剂珠粒或微珠粒以实现均匀的抛光。为了确保珠粒形成不透液体的密封，必须保持抛光至低于一定的粗糙度水平，即成品试剂珠粒或微珠粒必须具有高光滑度。

下表1详述了表面光洁度和相关粗糙度的一些不同类别。

表1-粗糙度

由于注塑成型工艺留下接缝(此处为分型线)，因此不可能使用注塑成型工艺在商业基础上生产常规的球形试剂珠粒或微珠粒。此外，注塑成型工艺还留下注入塑料的浇口痕迹。

与用于制造常规球形试剂珠粒或微珠的研磨方法相反，根据优选实施例，可以使用注塑模制工艺有利地制造非球形或基本上圆柱形的珠粒、插塞或插入件2500。使用注塑成型工艺的一个优点是注塑成型工艺允许在密封面(即，弧形的侧壁面)上形成光滑的抛光，并且还允许在待形成的端部(即，上圆形面和下圆形面或表面)上形成最佳的结合光洁度(finish)。因此，使用注射成型工艺制造的优选的基本上圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件2500使得能够提供具有良好密封性质的试剂珠粒、插塞或插入件2500，其中密封性质与端面性质无关。这允许端面或上/下表面上的抛光的灵活性，使得可以进行不同的抛光以适合使用珠粒的测定。

根据一个实施例，可以使用具有纹理化的空腔端部的注塑模具，以在非球形或基本上圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件2500的端部上形成所希望的光洁度。因此，在非球形或基本上圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件2500的端部上的期望的光洁度可以在所有空腔上均匀地产生并且优选地在每个模制周期上是一致的，从而得到高水平的珠粒与珠粒以及批次与批次的一致性。

注塑成型工艺通常用于制造标准微量滴定板。使用注塑成型的一个重要优点是最终产品不太可能被制造过程污染。使用研磨工艺生产的常规试剂微珠使用需要流体洗去研磨材料并防止堵塞的工艺来生产。在研磨过程中使用的流体可能成为导致产生受污染珠粒的污染源。

有利地，根据优选实施例优选使用的注模成型工艺使得仅树脂原料与注模工具和压力机接触。因此，可以简单地控制树脂材料和注塑模具以及压力机以避免污染。

图27示出了使用根据优选实施例的注模成型工艺制造的优选的基本上圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件2700。如图27所示，优选的试剂珠粒、插塞或插入件2700具有第一或上端面或表面2701a和第二或下端面或表面2701b。优选的基本上圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件2700可以具有由注塑成型工艺产生的接缝2702和缺陷或浇口标记2703。试剂珠粒、插塞或插入件2700优选地具有上密封面或表面2704a以及下密封面或表面2704b。

优选的试剂珠粒、插塞或插入件2700优选提供以下特征：(i)用于密封到孔的囊袋中的光滑侧壁表面；(ii)可以具有用于结合试剂的最佳纹理光洁度的端面或表面2701a、2701b；(iii)接缝2702和浇口2703位置，其优选地不影响端面或表面2701a、2701b的密封或端部光洁度；以及(iv)任选地对称设计，使得试剂珠粒、插塞或插入件2700可以围绕任何路径装配到样品孔的钻孔或通孔中。

当根据优选实施例的基本上圆柱形的试剂珠粒2700装配到优选样品板的样品孔中时，基本上圆柱形的试剂珠粒2700优选地通过过盈配合密封在样品孔的钻孔、孔口、孔洞或凹部中。试剂珠粒、插塞或插入件2700的上端面或表面2701a可以被布置成基本上与样品孔的底部齐平定位。

图28示出了优选的试剂珠粒、插塞或插入件2700，其优选位于样品板的钻孔、孔口、孔洞或凹部中，使得接缝2702和浇口标记2703不影响优选通过上侧壁密封面2704a而实现的密封性能。

使用阶梯形珠粒设计获得的珠粒与孔的组装之改进

根据优选实施例，常规的球形试剂珠粒和基本上圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件2700都依赖于试剂珠粒的精确插入，以确保试剂珠粒定位于样品孔中的精确或期望的高度、位置或深度。在优选的基本上圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件2700的情况下，必须确保将优选的基本上圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件2700插入到设置在样品孔的基部中的孔洞、孔口或凹部中，使得试剂珠粒、插塞或插入件的第一或上表面2701a基本上不突出高于或超过该基部的上表面。然而，需要将球形的常规试剂珠粒或优选的基本上圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件2700定位在设置于样品孔的基部中的孔洞或孔口内的精确位置、定位或高度处，这可能需要使用相对复杂的机器人珠粒插入设备。使用相对复杂的机器人珠粒插入设备的要求会增加总体制造成本(或终端用户成本)。

根据如图29所示的进一步优选的实施例，可以提供根据优选实施例的试剂珠粒、插塞或插入件2900，其被设计成使得试剂珠粒、插塞或插入件2900在样品孔中的高度、位置或深度由试剂珠粒、插塞或插入件2900上的特征2901设定。当制造试剂珠粒、插塞或插入件2900时，特征2901可以通过注塑成型工艺精确地控制。

图29示出了根据优选实施例的阶梯状试剂珠粒、插塞或插入件2900如何可以实现具有阶梯状特征2901，阶梯状特征2901设定或以其他方式确定试剂珠粒、插塞或插入件2900在样品孔的基部中的组装高度、位置或深度。

阶梯状珠粒2900可具有端面2902，端面2902具有针对测定性能的最佳纹理。阶梯状珠粒2900可以具有用于密封到孔中的光滑圆柱形侧壁以及用于控制插入高度、位置或深度的阶梯特征2901。阶梯状珠粒2900优选是对称的，并且端面2902和侧密封面2903a、2903b优选是相同的，使得珠粒、插塞或插入件2900可以围绕任一路径插入到设置在样品板的样品孔中的孔洞、孔口或凹部中。

珠粒插入设备可以用于设定的力，以便将一个或更多个具有台阶特征2901的大致圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件2900插入到设置在样品板的样品孔中的孔洞、孔口或凹部中，使得当试剂珠粒的台阶2901、插塞或插入件2900碰到孔的囊袋中的对应水平面时，大致圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件2900被止挡。插入设备可以使用简单的弹簧力来插入珠粒、插塞或插入件2900，并且可以不需要依赖于插入末端件的精确定位。

使用带凸缘的珠粒囊袋减少串扰

根据利用常规球形试剂珠粒的各种已知布置，如图30所示，球形试剂珠粒可以被压入至样品孔的通孔中使得珠粒的顶部高于样品孔的底部0.6858mm(0.027″)的高度。球形试剂珠粒的高度最初设定为0.50mm，但是发现如果试剂珠粒进一步延伸到样品孔的基部上方，则测定精度提高。更高地突出进入孔中的珠粒与样品孔中的流体具有更多的接触，这使得反应更均匀。

然而，如上所述，使试剂珠粒更高地延伸到样品孔中的缺点是随后更多的试剂珠粒被暴露，在样品孔中产生更多的串扰。

根据图31所示的实施例，可以使用球形试剂珠粒，其中，在一个或更多个样品孔的基部中模制或以其他方式形成附加的凸缘、外缘、颈圈或隆起部分3100，从而允许球形试剂珠粒保持在高于样品孔的基部0.6858mm的珠粒高度3101处，以便保持与样品孔中的流体相同量的接触，但是其中凸缘、外缘、颈圈或隆起部分3100阻挡一部分在试剂珠粒下部的杂散光，仍然留下0.5mm的试剂珠粒暴露于样品流体，即试剂珠粒具有0.5mm的暴露高度3102。

渐缩状圆柱形试剂珠粒或插入件

根据优选实施例的常规球形试剂珠粒和基本上圆柱形的试剂珠粒都依赖于试剂珠粒的精确插入，以确保珠粒在样品孔中定位在精确的高度。这可能增加相关的珠粒插入设备的复杂性，并因此增加相关的珠粒插入设备的成本。根据如图32A所示的实施例，可以提供渐缩状珠粒，渐缩状珠粒可以从顶部插入(与如图29所示的具有台阶特征2901的试剂珠粒、插塞或插入件2900的情况中经由样品板的下面插入相反)。

根据实施例，可以提供自动化的珠粒插入设备，其中渐缩状试剂珠粒、插塞或插入件最初掉落或部分插入样品孔中的珠粒钻孔、孔洞或孔口中，然后使用压入工具将试剂珠粒、插塞或插入件一起压入就位。试剂珠粒、插塞或插入件优选地被压入使得珠粒、插塞或插入件优选地与孔的底部齐平，从而消除对精确插入方法的需要。图32A示出了根据实施例的落入或部分地插入到孔的囊袋或凹部中之后的渐缩状试剂珠粒、插塞或插入件，并且示出了试剂珠粒、插塞或插入件落入或插入到样品孔的基底上方一定高度。图32B示出了根据实施例的将渐缩状试剂珠粒、插塞或插入件完全压入就位的压入工具，其中珠粒、插塞或插入件被压入到与样品孔的底部齐平3201。

根据实施例，如图32B所示的平端压入工具可用于与渐缩状珠粒、插塞或插入件的整个顶面接触，从而防止对试剂珠粒、插塞或插入件上的任何试剂或其他涂层的任何损坏。由于用于给定测定的不同珠粒、插塞或插入件类型优选地总是进入相同位置，因此压入工具的接触试剂珠粒、插塞或插入件的顶部的部分可以保持恒定，从而避免由插入试剂珠粒、插塞或插入件的过程引起的任何交叉污染。

根据实施例，渐缩状试剂珠粒可以被布置成具有到顶部的方形边缘3300，如图33所示，使得当被按压时，试剂珠粒、插塞或插入件不会在试剂珠粒、插塞或插入件的圆周周围产生流体捕集。渐缩状试剂珠粒、插塞或插入件可以与位于朝向渐缩状端部的浇口标记一起注射模制，使得当试剂珠粒、插塞或插入件被插入到样品孔的基部中的孔洞、孔口或凹部中时，浇口标记不影响试剂珠粒、插塞或插入件的性能。试剂珠粒、插塞或插入件的上端面或表面3301可以具有与侧面不同的光洁度。例如，根据实施例，可以在侧面或侧密封面3302上设置光滑表面以提供良好的密封。渐缩状试剂珠粒、插塞或插入件可以具有相对粗糙的端面3301，其对于测定性能更加适合。端面3301可以具有如以上表1中所示的粗糙度。试剂珠粒、插塞或插入件可以呈渐缩状3303以便于组装，并且可以在一端具有半径3304以便于组装。

使用圆柱形或阶梯状珠粒改善测定性能

在测定过程中，可以搅动(即摇晃)样品孔，以确保样品流体在样品孔底部内四处移动，从而在试剂珠粒、插塞或插入件上实现流体分子的均匀分布。对于如图30所示的常规布置，其中球形珠粒突出到样品孔的底部，由于球形珠粒3400突出到样品孔中，则样品孔底部的内部形状或轮廓如图34所示是不平坦的。

如果使用或进行线性摇晃，则样品孔的基部中的流体沿摇晃方向3500来回移动，如图35所示。

尽管球形珠粒在孔的底部产生非平坦形状或轮廓，但其在所有孔上仍是均匀且一致的。由于流体流动的反复进行，线性摇晃将随时间而产生图案，使得每个珠粒上的流体流量将不同，导致最终结果将根据试剂珠粒的位置而不同。

在球形珠粒突出到样品孔的底部中的情况下，流体流动被中断，这可以产生流体不流动的区域(即，死区)。死区的产生会使得从流体转移到试剂珠粒上的分子变少，从而与流体流动的区域相比导致信号减弱。

图36示出了突出到样品孔中的球形珠粒如何产生流体死区的实例，其中这些区域将根据珠粒的位置而不同。如图36中所示，位于中心的试剂珠将产生较小的死区3501，而相对地，位于样品孔的基部的圆周周围的试剂珠粒将产生较大的死区3502。

相反，根据如上所述的各优选实施例的圆柱形或阶梯状珠粒、插塞或插入件优选地不会突出超过样品孔的底部而进入样品孔中。根据优选实施例，样品孔的基部因此基本上是平坦的或平面的，没有试剂珠粒、插塞或插入件的部分突出高于样品孔的基部。有利地，流体流动因此不被中断。因此，基本上防止形成流体流动死区。这有利地导致分子从流体更均匀地转移到试剂珠粒、插塞或插入件，而与试剂珠粒、插塞或插入件的位置无关。

因此，显然，使用根据优选实施例的非球形试剂珠粒、插塞或插入件带来了本领域的显著进步。

虽然已经参考优选实施例描述了本发明，但是本领域的技术人员将理解，在不脱离如所附权利要求中阐述的本发明的范围的情况下，可以进行形式和细节上的各种改变。

Claims (82)

1.一种样品板，其包括一个或更多个样品孔，其中，所述样品孔中的一个或更多个包括：

基部，其具有形成所述样品孔的底部的上表面；以及

一个或更多个孔洞或孔口，其设置在所述基部中；

其中，一个或更多个非球形试剂珠粒、插塞或插入件在使用中基本上被保持或固定在所述一个或更多个孔洞或孔口内，以便与限定所述孔洞或孔口的所述基部的壁形成基本上不透流体的周向密封，并且其中，所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的上表面基本上不突出高于或超过所述基部的上表面。

2.如权利要求1所述的样品板，其中，所述一个或更多个非球形试剂珠粒、插塞或插入件在使用中基本上被保持或固定在所述一个或更多个孔洞或孔口内，使得所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的上表面基本上与所述基部的上表面齐平或共面。

3.如权利要求1或2所述的样品板，其中，所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件包括一个或更多个基本上或大致圆柱形试剂珠粒、插塞或插入件。

4.如权利要求1、2或3所述的样品板，其中，所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件具有基本上或大致圆形、圆状、椭圆形、弧形、正方形、矩形、多边形的规则或不规则的横截面轮廓。

5.如任一前述权利要求所述的样品板，其中，所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件包括一个或更多个基本上棱柱状或棱柱形试剂珠粒、插塞或插入件。

6.如任一前述权利要求所述的样品板，其中，所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的横截面轮廓满足以下任一者：(i)沿着所述试剂珠粒、插塞或插入件的整个纵向长度保持基本恒定；或(ii)所述试剂珠粒、插塞或插入件的纵向长度的一个或更多个部分变化、改变或渐缩。

7.如任一前述权利要求所述的样品板，其中，所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件具有基本上或大致圆形的横截面轮廓，并且其中，所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件在所述试剂珠粒、插塞或插入件的中间部分中的直径大于在所述试剂珠粒、插塞或插入件的一个端部或两个端部处的直径。

8.如任一前述权利要求所述的样品板，其中，所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件具有基本上或大致圆形的横截面轮廓，并且其中，所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的直径朝向所述试剂珠粒、插塞或插入件的一个端部或两个端部渐缩或减小。

9.如任一前述权利要求所述的样品板，其中，所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件具有第一端面和相对的第二端面，其中，所述第一端面和/或所述第二端面包被有试剂或包含试剂。

10.如任一前述权利要求所述的样品板，其中，所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件能够以第一取向或不同的第二取向插入所述一个或更多个孔洞或孔口中。

11.如权利要求10所述的样品板，其中，不管所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件是以所述第一取向还是以所述第二取向插入所述一个或更多个孔洞或孔口中，所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件是有效的。

12.如权利要求1至8中任一项所述的样品板，其中，所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件具有第一端面，其中，所述第一端面包被有试剂或包含试剂。

13.如权利要求12所述的样品板，其中，所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件能够以第一取向插入所述一个或更多个孔洞或孔口中。

14.如权利要求13所述的样品板，其中，如果所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件以所述第一取向插入所述一个或更多个孔洞或孔口中，则所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件是有效的。

15.一种样品板，包括一个或更多个样品孔，其中，所述样品孔中的一个或更多个包括：

基部，其具有形成所述样品孔的底部的上表面；

一个或更多个孔洞或孔口，其设置在所述基部中；以及

一个或更多个隆起部分、凸缘、外缘或颈圈，其围绕所述一个或更多个孔洞或孔口；

其中，一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件在使用中基本上被保持或固定在所述一个或更多个孔洞或孔口内，以便与限定所述孔洞或孔口的所述基部的壁和/或所述一个或更多个隆起部分、凸缘、外缘或颈圈形成基本上不透流体的周向密封。

16.如权利要求15所述的样品板，其中，所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件是基本上或大致球形的。

17.如任一前述权利要求所述的样品板，其中，所述一个或更多个孔洞或孔口包括一个或更多个开口通孔。

18.如任一前述权利要求所述的样品板，其中，所述一个或更多个孔洞或孔口是基本上或大致圆柱形的。

19.如任一前述权利要求所述的样品板，其中，所述一个或更多个孔洞或孔口具有基本上或大致圆形、圆状、椭圆形、弧形、正方形、矩形、多边形的规则或不规则的横截面轮廓。

20.如任一前述权利要求所述的样品板，其中，所述一个或更多个孔洞或孔口的横截面轮廓满足以下任一者：(i)沿着所述孔洞或孔口的整个纵向长度保持基本恒定；或(ii)沿着所述孔洞或孔口的纵向长度的一个或更多个部分变化、改变或渐缩。

21.如任一前述权利要求所述的样品板，其中，所述一个或更多个孔洞或孔口的直径小于放置在所述孔洞或孔口内的试剂珠粒、插塞或插入件的直径，使得所述试剂珠粒、插塞或插入件通过过盈配合或摩擦配合被保持或固定在所述孔洞或孔口内。

22.如任一前述权利要求所述的样品板，其中，所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件具有周向台阶部分、凸缘或止挡件特征。

23.如权利要求22所述的样品板，其中，所述一个或更多个孔洞或孔口具有直径缩小部分，并且所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的所述周向台阶部分、凸缘或止挡件特征抵靠所述直径缩小部分，以便将所述试剂珠粒、插塞或插入件定位成使得所述试剂珠粒、插塞或插入件的上表面基本上不突出高于或超过所述基部的上表面。

24.如权利要求23所述的样品板，其中，所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的所述周向台阶部分、凸缘或止挡件特征在使用中抵靠所述直径缩小部分，以便将所述试剂珠粒、插塞或插入件定位成使得所述试剂珠粒、插塞或插入件的上表面基本上与所述基部的上表面齐平或共面。

25.如任一前述权利要求所述的样品板，其中，所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件具有方形上边缘或在使用中与限定所述一个或更多个孔洞或孔口的所述基部的对应表面基本上平行或齐平地邻接的边缘。

26.如任一前述权利要求所述的样品板，其中，所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的上表面或第一表面和/或下表面或第二表面的至少一部分或基本上全部具有第一表面光洁度或第一表面粗糙度。

27.如权利要求26所述的样品板，其中，在使用中接触限定所述孔洞或孔口的壁的所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的密封面、侧壁或表面的至少一部分或基本上全部具有不同的第二表面光洁度或不同的第二表面粗糙度。

28.如权利要求27所述的样品板，其中，所述第二表面光洁度比所述第一表面光洁度更光滑。

29.如权利要求27或28所述的样品板，其中，所述第二表面粗糙度小于所述第一表面粗糙度。

30.如任一前述权利要求所述的样品板，其中，所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件通过注塑成型工艺形成。

31.如权利要求30所述的样品板，其中，所述注塑成型工艺在所述试剂珠粒、插塞或插入件中的至少一些上留下接缝。

32.如权利要求31所述的样品板，其中，所述试剂珠粒、插塞或插入件在使用中插入所述一个或更多个孔洞或孔口中，使得所述试剂珠粒、插塞或插入件中的至少一些上的所述接缝位于接触限定所述孔洞或孔口的壁的密封面、侧壁或表面上面、上方或下方。

33.如权利要求31或32所述的样品板，其中，所述试剂珠粒、插塞或插入件在使用中插入所述一个或更多个孔洞或孔口中，使得所述试剂珠粒、插塞或插入件中的至少一些上的所述接缝是所述试剂珠粒、插塞或插入件的与限定所述孔洞或孔口的基部的壁形成基本上不透流体密封的周向密封的那部分的一部分。

34.如权利要求30至33中任一项所述的样品板，其中，所述注塑成型工艺在所述试剂珠粒、插塞或插入件中的至少一些上留下浇口。

35.如权利要求34所述的样品板，其中，所述试剂珠粒、插塞或插入件在使用中插入所述一个或更多个孔洞或孔口中，使得所述试剂珠粒、插塞或插入件中的至少一些上的所述浇口位于接触限定所述孔洞或孔口的壁的密封面、侧壁或表面上面、上方或下方。

36.如权利要求34或35所述的样品板，其中，所述试剂珠粒、插塞或插入件在使用中插入所述一个或更多个孔洞或孔口中，使得所述试剂珠粒、插塞或插入件中的至少一些上的所述浇口形成所述试剂珠粒、插塞或插入件的与限定所述孔洞或孔口的基部的壁形成基本上不透流体密封的周向密封的那部分的一部分。

37.如任一前述权利要求所述的样品板，其中，所述样品板包括免疫测定样品板。

38.如权利要求1至36中任一项所述的样品板，其中所述样品板包含用于检测互补DNA或RNA样品的存在的杂交探针。

39.如任一前述权利要求所述的样品板与插入或定位在所述一个或更多个样品孔的所述孔洞或孔口中的一个或更多个中的一个或更多个非球形、球形或基本上或大致圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件的组合。

40.如权利要求39所述的组合，其中，所述试剂珠粒、插塞或插入件中的至少一些或基本上全部携带、包含或以其他方式包被有相同或不同的试剂，其中所述试剂被布置并适于分析样品液体中的相同或不同的感兴趣分析物。

41.如权利要求39所述的组合，其中，所述试剂珠粒、插塞或插入件中的至少一些或基本上全部携带、包含或以其他方式包被有核酸探针，其中所述核酸探针被布置并适于与单链核酸、DNA或RNA杂交。

42.板框固持器与如权利要求1至38中任一项所述的样品板的组合。

43.一种自动化装置，包括：

一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件插入器；

如权利要求1至38中任一项所述的样品板；以及

控制系统，所述控制系统被布置并且适于控制所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件插入器，以便对所述试剂珠粒、插塞或插入件插入到所述样品板的一个或更多个样品孔中进行控制。

44.一种用于针对一种或更多种感兴趣分析物的测定液体的装置，所述装置包括：

一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件插入器；以及

如权利要求1至38中任一项所述的样品板。

45.一种用于读取来自一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的光学信号或其他信号的读取器，所述试剂珠粒、插塞或插入件被保持或固定在如权利要求1至38中任一项所述的样品板的基部中设置的一个或更多个孔洞或孔口内。

46.一种方法，包括：

提供样品板，所述样品板包括一个或更多个样品孔，其中，所述样品孔中的一个或更多个包括基部，所述基部具有形成所述样品孔的底部的上表面，以及设置在所述基部中的一个或更多个孔洞或孔口；以及

将一个或更多个非球形试剂珠粒、插塞或插入件保持或固定在所述一个或更多个孔洞或孔口内，以便与限定所述孔洞或孔口的所述基部的壁形成基本上不透流体的周向密封，并且其中，所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的上表面基本上不突出高于或超过所述基部的上表面。

47.一种方法，包括：

提供样品板，所述样品板包括一个或更多个样品孔，其中，所述样品孔中的一个或更多个包括基部，所述基部具有形成所述样品孔的底部的上表面，以及设置在所述基部中的一个或更多个孔洞或孔口，以及围绕所述一个或更多个孔洞或孔口的一个或更多个隆起部分、凸缘、外缘或颈圈；以及

将一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件保持或固定在所述一个或更多个孔洞或孔口内，以便与限定所述孔洞或孔口的所述基部的壁和/或所述一个或更多个隆起部分、凸缘、外缘或颈圈形成基本上不透流体的周向密封。

48.一种利用样品板或多重样品板针对多种分析物来分析样品的方法，包括：

提供如权利要求1至38中任一项所述的样品板；

任选地将一个或更多个不同的试剂珠粒、插塞或插入件插入到样品孔的一个或更多个不同的孔洞或孔口中；以及

向所述样品孔中加入样品。

49.一种利用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测样品中的抗原或抗体的方法，包括：

提供如权利要求1至38中任一项所述的样品板；

任选地将一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件插入到样品孔的一个或更多个孔洞或孔口中；以及

向所述样品孔中加入样品。

50.一种利用核酸探针检测样品中的DNA或RNA序列的方法，包括：

提供如权利要求1至38中任一项所述的样品板；

任选地将一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件插入到样品孔的一个或更多个孔洞或孔口中；以及

向所述样品孔中加入样品。

51.一种用于测定样品中的一种或更多种感兴趣分析物的方法，包括：

将一个或更多个非球形试剂珠粒、插塞或插入件插入到样品板的一个或更多个样品孔的一个或更多个孔洞或孔口中，以便将试剂珠粒、插塞或插入件保持或固定在所述孔洞或孔口内，以便与限定所述孔洞或孔口的所述基部的壁形成基本上不透流体的周向密封，并且其中，所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件的上表面基本上不突出高于或超过所述基部的上表面。

52.一种用于测定样品中的一种或更多种感兴趣分析物的方法，包括：

将一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件插入到样品板的一个或更多个样品孔的一个或更多个孔洞或孔口中，所述样品板具有围绕所述一个或更多个孔洞或孔口的一个或更多个隆起部分、凸缘、外缘或颈圈，以便将试剂珠粒、插塞或插入件保持或固定在所述孔洞或孔口内，以便与限定所述孔洞或孔口的所述基部的壁和/或所述一个或更多个隆起部分、凸缘、外缘或颈圈形成基本上不透流体的周向密封。

53.一种检测分析物的方法，包括：

提供如权利要求1至38中任一项所述的样品板或多重样品板，其中一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件被保持或固定在设置于所述样品板的基部中的一个或更多个孔洞或孔口内；

向所述样品板中加入样品；以及

检测所述样品中的分析物与试剂珠粒、插塞或插入件的结合。

54.如权利要求46至53中任一项所述的方法，进一步包括以下步骤中的一个或更多个：

(i)温育所述样品板；和/或

(ii)洗涤所述样品板；和/或

(iii)抽吸所述样品板；和/或

(iv)向所述样品板中加入酶缀合物；和/或

(v)向所述样品板中加入可视化试剂；和/或

(vi)目视分析所述样品板；和/或

(vii)读取或测定从所述样品孔中的各个试剂珠粒、插塞或插入件反射、透射或发射的光的强度。

55.一种用于进行酶联免疫吸附测定(ELISA)程序的试剂盒，包括：

一个或更多个如权利要求1至38中任一项所述的样品板；以及

多个试剂珠粒、插塞或插入件，其中，所述试剂珠粒、插塞或插入件包被有或包含相同或不同的包含抗体、抗原或另一种生物分子的试剂。

56.一种用于进行核酸探针程序的试剂盒，包括：

一个或更多个如权利要求1至38中任一项所述的样品板；以及

多个试剂珠粒、插塞或插入件，其中，所述试剂珠粒、插塞或插入件包被有或包含相同或不同的DNA或RNA序列。

57.如权利要求55或56所述的试剂盒，其中，一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件被保持或固定在设置在所述样品板的基部中的一个或更多个孔洞或孔口内。

58.一种用于检测一种或更多种分析物的试剂盒，包括：

一个或更多个如权利要求1至38中任一项所述的样品板；以及

多个试剂珠粒、插塞或插入件，所述多个试剂珠粒、插塞或插入件被保持或固定在设置于所述样品板的基部中的一个或更多个通孔或孔口内，使得所述多个试剂珠粒、插塞或插入件与限定所述通孔或孔口的所述基部的壁形成基本上不透流体的周向密封。

59.一种通过注塑成型制造样品板或多重样品板的方法，包括：

将树脂注入模具中，以形成如权利要求1至38中任一项所述的样品板。

60.如权利要求59所述的制造样品板或多重样品板的方法，进一步包括：将一个或更多个相同或不同的试剂珠粒、插塞或插入件插入到所述一个或更多个孔洞或孔口中，使得所述一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件与限定所述孔洞或孔口的所述基部的壁形成基本上不透流体的周向密封。

61.一种插入试剂珠粒、插塞或插入件的方法，包括：

提供试剂珠粒、插塞或插入件插入器；

提供包括样品孔的样品板，其中，所述样品孔包括基部，其中所述基部包括一个或更多个孔洞或孔口，其中所述一个或更多个孔洞或孔口的直径小于试剂珠粒、插塞或插入件的直径；以及

对一个或更多个非球形试剂珠粒、插塞或插入件插入到所述样品板中进行控制。

62.如权利要求61所述的方法，其中，所述一个或更多个珠粒、插塞或插入件由所述试剂珠粒、插塞或插入件插入器自动地插入到所述样品板中。

63.一种用于检测一种或更多种分析物的试剂盒，包括：

多个相同或不同的非球形试剂珠粒、插塞或插入件；以及

包括样品孔的样品板，其中，所述样品孔包括基部，其中所述基部包括一个或更多个孔洞或孔口，其中所述一个或更多个孔洞或孔口的直径小于所述非球形试剂珠粒、插塞或插入件的直径。

64.如权利要求63所述的试剂盒，其中，所述多个试剂珠粒、插塞或插入件包含一种或更多种探针。

65.如权利要求64所述的试剂盒，其中，所述探针为核酸、抗体、抗体片段、蛋白质、肽、适体或化合物。

66.如权利要求64所述的试剂盒，其中，所述探针为寡核苷酸。

67.一种检测一种或更多种分析物或生物分子的方法，包括：

向包含样品孔的样品板中加入样品，其中，所述样品孔包括基部，其中所述基部包括一个或更多个凹部，其中每个凹部包含探针并且每个凹部的直径小于包含所述探针的非球形试剂珠粒、插塞或插入件的直径；以及

检测所述样品中的一种或更多种分析物或生物分子与所述一种或更多种探针的结合。

68.如权利要求67所述的方法，其中，所述样品板包含多种探针，并且其中，所述方法进一步包括检测多种分析物或生物分子。

69.如权利要求67或68所述的方法，进一步包括向所述样品板加入多个样品，其中向不同的样品孔加入不同的样品。

70.一种样品板，包括一个或更多个样品孔，其中，所述样品孔中的一个或更多个包括：

基部；以及

一个或更多个凹部，其设置在所述基部中；

其中，所述一个或更多个凹部中的每一个具有用于将置于或插入所述孔中的非球形珠粒、插塞或插入件基本上保持或固定在所述凹部内的尺寸，并且所述非球形珠粒、插塞或插入件与限定所述凹部的所述基部的壁形成基本上不透流体的周向密封。

71.一种用于检测分析物的试剂盒，包括：

多个试剂珠粒、插塞或插入件；以及

包括样品孔的样品板，其中，所述样品孔包括基部，其中所述基部包括一个或更多个凹部，其中，所述一个或更多个凹部中的每一个具有用于将置于或插入所述孔中的非球形珠粒、插塞或插入件基本上保持或固定在所述凹部内的尺寸，并且所述珠粒、插塞或插入件与限定所述凹部的所述基部的壁形成基本上不透流体的周向密封。

72.一种检测分析物的方法，包括：

向包括样品孔的样品板中加入样品，其中，所述样品孔包括基部，其中所述基部包括一个或更多个凹部，其中，所述一个或更多个凹部中的每一个具有用于将置于或插入所述孔中的非球形珠粒、插塞或插入件基本上保持或固定在所述凹部内的尺寸，并且所述珠粒、插塞或插入件与限定所述凹部的所述基部的壁形成基本上不透流体的周向密封；以及

检测所述样品中的分析物与所述探针的结合。

73.一种制造方法，包括：

将树脂注入模具中以形成一个或更多个大致或基本上圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件，其中，所述一个或更多个大致或基本上圆柱形的试剂珠粒、插塞或插入件能够被插入如权利要求1至38中任一项所述的样品板的所述一个或更多个孔洞或孔口内。

74.一种读板器，用于确定被保持、插入或固定在如权利要求1至14或17至38中任一项所述的样品板的一个或更多个孔洞或孔口内的一个或更多个非球形试剂珠粒、插塞或插入件的强度或发光度。

75.一种读板器，用于确定被保持、插入或固定在如权利要求15至38中任一项所述的样品板的一个或更多个孔洞或孔口内的一个或更多个球形试剂珠粒、插塞或插入件的强度或发光度。

76.一种将一个或更多个试剂珠粒、插塞或插入件插入到样品板中的方法，包括：

提供包括样品孔的样品板，其中，所述样品孔包括基部，其中所述基部包括一个或更多个孔洞或孔口，其中所述一个或更多个孔洞或孔口的直径小于试剂珠粒、插塞或插入件的直径；以及

以串行或并行方式将一个或更多个非球形试剂珠粒、插塞或插入件部分地插入到所述孔洞或孔口中的一个或更多个中；并且然后

使用压入工具同时将所述一个或更多个非球形试剂珠粒、插塞或插入件压入所述孔洞或孔口中的一个或更多个中。

77.如权利要求76所述的方法，进一步包括使用所述压入工具同时将所述一个或更多个非球形试剂珠粒、插塞或插入件压入所述孔洞或孔口中的一个或更多个中，使得所述一个或更多个非球形试剂珠粒、插塞或插入件的上表面与所述样品孔的底表面基本上齐平或共面。

78.一种多重样品板，包括一个或更多个样品孔，其中，所述样品孔中的一个或更多个包括：

基部，所述基部具有形成所述样品孔的底部的上表面；以及

多个孔洞或孔口，其设置在所述基部中；

所述多重样品板进一步包括：

一个或更多个第一非球形试剂珠粒、插塞或插入件，所述一个或更多个第一非球形试剂珠粒、插塞或插入件基本上被保持、插入或固定在一个或更多个孔洞或孔口内，以便与限定所述孔洞或孔口的所述基部的壁形成基本上不透流体的周向密封；以及

一个或更多个不同的第二非球形试剂珠粒、插塞或插入件，所述一个或更多个第二非球形试剂珠粒、插塞或插入件基本上被保持、插入或固定在一个或更多个孔洞或孔口内，以便与限定所述孔洞或孔口的所述基部的壁形成基本上不透流体的周向密封；

其中，所述一个或更多个第一试剂珠粒、插塞或插入件和所述一个或更多个第二试剂珠粒、插塞或插入件的上表面基本上不突出高于或超过所述基部的上表面。

79.如权利要求78所述的多重样品板，其中，所述一个或更多个第一非球形试剂珠粒、插塞或插入件被布置成用于测试第一物质、分析物或生物分子的存在，并且所述一个或更多个第二非球形试剂珠粒、插塞或插入件被布置成用于测试不同的第二物质、分析物或生物分子的存在。

80.如权利要求78或79所述的多重样品板，进一步包括：一个或更多个第三非球形试剂珠粒、插塞或插入件，所述一个或更多个第三非球形试剂珠粒、插塞或插入件基本上被保持、插入或固定在一个或更多个孔洞或孔口内，以便与限定所述孔洞或孔口的所述基部的壁形成基本上不透流体的周向密封，其中，所述一个或更多个第三非球形试剂珠粒、插塞或插入件被布置成用于测试不同的第三物质、分析物或生物分子的存在。

81.如权利要求78、79或80所述的多重样品板，进一步包括：一个或更多个第四或另外的非球形试剂珠粒、插塞或插入件，所述一个或更多个第四或另外的非球形试剂珠粒、插塞或插入件基本上被保持、插入或固定在一个或更多个孔洞或孔口内，以便与限定所述孔洞或孔口的所述基部的壁形成基本上不透流体的周向密封，其中，所述一个或更多个第四非球形试剂珠粒、插塞或插入件被布置成用于测试不同的第四物质、分析物或生物分子的存在。

82.一种制造或组装多重样品板的方法，包括：

将一个或更多个第一非球形试剂珠粒、插塞或插入件和一个或更多个第二非球形试剂珠粒、插塞或插入件插入到包括样品孔的样品板中，其中，所述样品孔包括基部，其中所述基部包括一个或更多个孔洞或孔口，其中所述一个或更多个孔洞或孔口的直径小于试剂珠粒、插塞或插入件的直径；

其中，所述一个或更多个第一非球形试剂珠粒、插塞或插入件被布置为测试第一物质、分析物或生物分子的存在，并且所述一个或更多个第二非球形试剂珠粒、插塞或插入件被布置为测试不同的第二物质、分析物或生物分子的存在。

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