CN112226345A - 海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置及收集方法 - Google Patents

海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置及收集方法 Download PDF

Info

Publication number
CN112226345A
CN112226345A CN202011020453.2A CN202011020453A CN112226345A CN 112226345 A CN112226345 A CN 112226345A CN 202011020453 A CN202011020453 A CN 202011020453A CN 112226345 A CN112226345 A CN 112226345A
Authority
CN
China
Prior art keywords
aerosol
culture
microorganisms
sea
microorganism
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202011020453.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN112226345B (zh
Inventor
林镇跃
王蔚
陈建明
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Minjiang University
Original Assignee
Minjiang University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Minjiang University filed Critical Minjiang University
Priority to CN202011020453.2A priority Critical patent/CN112226345B/zh
Publication of CN112226345A publication Critical patent/CN112226345A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN112226345B publication Critical patent/CN112226345B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/02Form or structure of the vessel
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/02Form or structure of the vessel
    • C12M23/08Flask, bottle or test tube
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/22Transparent or translucent parts
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/38Caps; Covers; Plugs; Pouring means
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/48Holding appliances; Racks; Supports
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/56Floating elements
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M33/00Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M33/00Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus
    • C12M33/14Means for introduction, transport, positioning, extraction, harvesting, peeling or sampling of biological material in or from the apparatus with filters, sieves or membranes
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/12Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of temperature
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/30Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration
    • C12M41/34Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of concentration of gas
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M41/00Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
    • C12M41/40Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of pressure
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/04Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/24Methods of sampling, or inoculating or spreading a sample; Methods of physically isolating an intact microorganisms

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Clinical Laboratory Science (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Thermal Sciences (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明属于海洋气溶胶微生物培养和收集技术领域,公开了一种海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置及收集方法,制透光微生物培养槽,特制透光培养槽盖,可调节角度的培养槽固定部件,多层可调高度的培养架,气溶胶收集器,气溶胶微生物收集瓶可自由组合用于收集及原位培养海气界面气溶胶微生物,海面风浪监测部件,温湿度监测部件,气压、气体成分检测部件用于实时监测海气界面的环境参数。本发明可以兼顾多种复杂海洋环境,多效组合装置用于收集或是原位培养气溶胶微生物,可以用来研究各种海气界面的微生物种类鉴定,区域分布及微生物传播特征等,未来还有希望运用于海滨浴场的传染病原体监测及海洋微生物传播的预报等。

Description

海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置及收集方法
技术领域
本发明属于海洋气溶胶微生物培养和收集技术领域,尤其涉及一种海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置及收集方法。
背景技术
目前:海洋衍生的空气传播微生物在地球气候系统和人类健康中扮演着重要角色,“海洋—大气”气溶胶微生物的传播和存活可能受到颗粒大小、相对湿度、温度、环境组成等的影响,但对控制微生物从海洋到大气传播的因素知之甚少。由于海洋覆盖了地球71%的面积,并包含了世界上60-90%的原核生物,因此,海洋气溶胶是一个重要的但在很大程度上尚未被研究的空气传播细菌和病毒来源。现在对海洋气溶胶的微生物种类,分布丰度和传播方式等缺乏相关的技术手段进行检测和评估。现缺乏“海洋—大气”界面气溶胶微生物的研究手段,并未有关于海洋气溶胶微生物相关的装置和技术,主要原因在于,现阶段我们对海洋微生物的重要性认识不够全面,特别是对于一些特殊或者极端环境下的海洋气溶胶微生物缺乏必要的研究手段,以致于我们长期对这类微生物在自然界中的存在没有进行广大的证实和报道,未能引起大众和科研人员的关注。然而,当前,人们对疫情防控和生物安全的意识已经上升到前所未有的高度,有必要加强和深入海洋气溶胶微生物领域的技术储备,以应对未来的不时之需。
通过上述分析,现有技术存在的问题及缺陷为:现有技术缺乏“海洋—大气”界面气溶胶微生物的研究手段,并未有关于海洋气溶胶微生物相关的装置和技术。
解决以上问题及缺陷的难度为:海洋气溶胶微生物的生存环境条件复杂,现在所能观测或者检测的环境参数较为有限,甚至,有许多海洋气溶胶微生物的生存法则已经超出我们现有知识水平。所以,我们很难在现有实验室条件下充分的模拟“海洋—大气”界面的气溶胶环境进行微生物的培养。传统的通过收集后再移到实验室或者培养箱的方法,也只能培养或者复苏一小部分的海洋气溶胶微生物种群,这是目前我们认识和研究海洋气溶胶微生物最大的技术缺陷。
解决以上问题及缺陷的意义为:为最大限度的解决上述问题和技术缺陷,本发明提出通过海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置及收集方法,充分利用现实的海洋气溶胶环境条件进行微生物的培养和收集。可较大幅度提高培养海洋气溶胶微生物种群和进行微生物收集的效率,可以未来我们对海洋气溶胶的微生物种类,分布丰度和传播方式的检测和评估提供更加有力的技术支持。
发明内容
针对现有技术存在的问题,本发明提供了一种海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置及收集方法。
本发明是这样实现的,一种海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置,所述海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置设置有:
浮筏搭载平台;
特制透光微生物培养槽,特制透光培养槽盖,可调节角度的培养槽固定部件,多层可调高度的培养架,气溶胶收集器,气溶胶微生物收集瓶,海面风浪监测部件,温湿度监测部件均呈开放式固定在浮筏搭载平台上;
特制透光微生物培养槽,特制透光培养槽盖,可调节角度的培养槽固定部件,多层可调高度的培养架,气溶胶收集器,气溶胶微生物收集瓶可自由组合用于收集及原位培养海气界面气溶胶微生物,海面风浪监测部件,温湿度监测部件,气压、气体成分检测部件用于实时监测海气界面的环境参数。
进一步,所述可调节角度的培养槽固定部件位于浮筏搭载平台四周的边缘,所述的制透光微生物培养槽通过固定部件连接,制透光微生物培养槽自带刻度标尺。
进一步,所述制透光微生物培养槽盖用于封闭培养槽内的固体培养基。
进一步,所述根多层可调高度的培养架固定于浮筏搭载平台的四角上。
进一步,所述多层可调高度的培养架底部为大尺寸内径筛网,固体培养平板可倒扣在培养架上;多层可调高度的培养架自带刻度标尺,自由组合根据需要设置不同高度。
进一步,所述气溶胶收集器固定于搭载平台的四面,用于收集四个方位的气溶胶微生物;气溶胶收集器呈喇叭口状,底部有导管连接气溶胶微生物收集瓶;
所述气溶胶微生物收集瓶由封闭的无菌收集瓶,设有进去导管和出去导管,收集瓶内装有无菌水用于沉降微生物颗粒,或者装有液体培养基用于原位培养气溶胶微生物;
所述气溶胶收集器由自带刻度标尺支撑架固定,自由组合根据需要设置不同高度。
进一步,海面风浪监测部件,温湿度监测部件,气压、气体成分检测部件、锚泊部件均设于浮筏搭载平台上,用于实时监测所在区域与气溶胶微生物相关的环境参数,包括风向、风速、浪高、温度、湿度、气压、气体成分。
本发明的另一目的在于提供一种所述海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置的收集方法,所述收集方法包括:
第一步,将特制透光微生物培养槽、多层可调高度的培养架、气溶胶收集器和气溶胶微生物收集瓶等按上述的搭载方式,呈对称开放的搭载于浮筏和搭载平台的四个方位;
跌入,浮筏搭载平台和装置可移动运输远海和近海,通过锚固定于海面,进行远海和近海海面的气溶胶微生物的监测评估。
本发明的另一目的在于提供一种海气界面的微生物种类鉴定、区域分布及微生物传播特征的方法,所述海气界面的微生物种类鉴定、区域分布及微生物传播特征的方法使用所述海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置。
本发明的另一目的在于提供一种海滨浴场的传染病原体监测及海洋微生物传播的预报方法,所述海滨浴场的传染病原体监测及海洋微生物传播的预报方法使用所述海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置。
结合上述的所有技术方案,本发明所具备的优点及积极效果为:本发明的可调节角度的培养槽固定部件位于浮筏搭载平台四周的边缘,制透光微生物培养槽通过固定部件连接,制透光微生物培养槽自带刻度标尺,呈倒扣并与海水界面保持一定角度,可自下而上,以不同高度的原位培养海气界面微生物。所述的制透光微生物培养槽盖可用于封闭培养槽内的固体培养基,方便于携带,减少运输过程的染及后期室内封闭培养等。
本发明的多层可调高度的培养架固定于浮筏搭载平台的四角上;多层可调高度的培养架底部为大尺寸内径筛网,微生物等颗粒可以自由通过筛网,固体培养平板可倒扣在培养架上;多层可调高度的培养架自带刻度标尺,可以自由组合根据需要设置不同高度,可自下而上,以不同高度的原位培养海气界面微生物。
本发明的气溶胶收集器固定于搭载平台的四面,用于收集四个方位的气溶胶微生物。气溶胶收集器呈喇叭口状,底部有导管连接气溶胶微生物收集瓶。所述的气溶胶微生物收集瓶由封闭的无菌收集瓶,设有进去导管和出去导管,收集瓶内装有无菌水用于沉降微生物颗粒,或者装有液体培养基用于原位培养气溶胶微生物。所述的气溶胶收集器由自带刻度标尺支撑架固定,可以自由组合根据需要设置不同高度,可自下而上,以不同高度的收集或者原位培养海气界面微生物。
本发明可以兼顾多种复杂海洋环境,多效组合装置用于收集或是原位培养气溶胶微生物,可以用来研究各种海气界面的微生物种类鉴定,区域分布及微生物传播特征等,未来还有希望运用于海滨浴场的传染病原体监测及海洋微生物传播的预报等。本发明可以有效的对不同高度海气界面的微生物进行原位培养,并实现海气界面不同高度空间区域的微生物收集,可填补海洋气溶胶微生物相关装置和方法的空白。后续可利用流式细胞仪和高通量DNA测序技术进一步较为系统的表征海气界面不同区域单元的微生物种类、大小分布、丰度表征,助于研究阐明海洋气溶胶化机制影响微生物和病毒传播方式,填补了海洋气溶胶微生物相关装置和方法的空白。
本发明搭建了可进行气溶胶微生物原位培养的多种方式。综合考虑到海面风向和浪高两个因素对气溶胶微生物的原位培养干扰最为明显,本发明所采用装置同时朝四个方向呈开发式搭载,可以有效消除风浪干扰的影响。现实运用中,可以依据不同的海洋环境条件,自由组合、相互搭配使用,可较系统全面的实现海气界面气溶胶微生物的培养。本发明所采用的浮筏搭载方式,便于移动运输,安装简单,操作简便,可运用于远海和近海的海洋气溶胶微生物的监测评估,填补海洋气溶胶微生物相关装置和方法的空白,值得推广。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案,下面将对本申请实施例中所需要使用的附图做简单的介绍,显而易见地,下面所描述的附图仅仅是本申请的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明实施例提供的海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置的结构示意图;
图2是本发明实施例提供的海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置的收集方法流程图。
图3是本发明实施例提供的特制透光微生物培养槽及特制透光培养槽盖示意图;
图中:A立体图;B正视图。
图4是本发明实施例提供的多层可调高度的培养架示意图;
图中:A立体图;B正视图。
图5是本发明实施例提供的气溶胶收集器和气溶胶微生物收集瓶示意图;
图6是本发明实施例提供的特制透光微生物培养槽的搭载方式示意图;
图7是本发明实施例提供的多层可调高度的培养架的搭载方式示意图;
图8是本发明实施例提供的气溶胶收集器和气溶胶微生物收集瓶的搭载方式示意图;
图9是本发明实施例提供的海洋赤潮爆发相关的气溶胶细菌和病毒的检测示意图;
图中:1、特制透光微生物培养槽;2、特制透光培养槽盖;3、带刻度标尺支撑架;4、大尺寸内径筛网;5、倒扣的装有固体培养基的培养皿;6、喇叭口状的收集器;7、带刻度标尺支撑架;8、进气导管;9、出气导管;10、封闭的收集瓶;11、用于沉降微生物的无菌水或者液体培养基;12、装收集瓶的样品盒;13、风速及风向测量仪;14、搭载的浪高、温度、湿度、气压、气体成分测量仪器部件;15、搭载的特制透光微生物培养槽;16、搭载平台;17、浮筏;18、锚;19、搭载的多层可调高度的培养架;20、搭载的气溶胶导入部件和气溶胶微生物收集部件。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
针对现有技术存在的问题,本发明提供了一种海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置及收集方法,下面结合附图对本发明作详细的描述。
如图1、图3-图8所示,本发明提供的海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置包括:特制透光微生物培养槽1、特制透光培养槽盖2、带刻度标尺支撑架3、大尺寸内径筛网4、倒扣的装有固体培养基的培养皿5、喇叭口状的收集器6、带刻度标尺支撑架7、进气导管8、出气导管9、封闭的收集瓶10、用于沉降微生物的无菌水或者液体培养基11、装收集瓶的样品盒12、风速及风向测量仪13、搭载的浪高、温度、湿度、气压、气体成分测量仪器部件14、搭载的特制透光微生物培养槽15、搭载平台16、浮筏17、锚18、搭载的多层可调高度的培养架19、搭载的气溶胶导入部件和气溶胶微生物收集部件20。
特制透光微生物培养槽1与特制透光培养槽盖2配套连接,构成搭载的特制透光微生物培养槽15。带刻度标尺支撑架3与大尺寸内径筛网4固定连接,用于盛放倒扣的装有固体培养基的培养皿5,并构成搭载的多层可调高度的培养架19。喇叭口状的收集器6连接进气导管8和出气导管9一端,进气导管8和出气导管9另一端连接于封闭的收集瓶10,用于沉降和收集获得微生物。多个不同高度的喇叭口状的收集器6用带刻度标尺支撑架7固定,多个封闭的收集瓶10用装收集瓶的样品盒12进行固定,共同构成搭载的气溶胶导入部件和气溶胶微生物收集部件20。以上搭载的特制透光微生物培养槽15,搭载的多层可调高度的培养架19和搭载的气溶胶导入部件和气溶胶微生物收集部件20等分布固定或者连接于搭载平台16的四个方位。风速及风向测量仪13,搭载的浪高、温度、湿度、气压、气体成分测量仪器部件14等固定或连接于搭载平台16上用于实时监测海洋气溶胶环境参数。搭载平台16与浮筏17和锚18连接,用于浮筏搭载平台和装置的移动和运输。
并已搭载其他全部检测部件,包括风速及风向测量仪13,浪高、温度、湿度、气压、气体成分测量仪器部件14等。
如图2所示,本发明提供的海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置的收集方法包括以下步骤:
S201:将特制透光微生物培养槽、多层可调高度的培养架、气溶胶收集器和气溶胶微生物收集瓶等按上述的搭载方式,呈对称开放的搭载于浮筏和搭载平台的四个方位;
S202:浮筏搭载平台和装置可移动运输远海和近海,通过锚固定于海面,进行远海和近海海面的气溶胶微生物的监测评估。
下面结合附图对本发明的技术方案作进一步的描述。
如图1所示,本发明实施例中涉及的海洋海气界面气溶胶微生物原位培养及收集装置的工作状态,并已搭载其他全部检测部件,包括风速及风向测量仪13,浪高、温度、湿度、气压、气体成分测量仪器部件14等。将特制透光微生物培养槽、多层可调高度的培养架、气溶胶收集器和气溶胶微生物收集瓶等按上述的搭载方式,呈对称开放的搭载于浮筏和搭载平台的四个方位,装置布局方式不受此限制。现实运用中,可以依据不同的海洋环境条件,自由组合、相互搭配使用。浮筏搭载平台和装置可移动运输远海和近海,通过锚固定于海面,进行远海和近海海面的气溶胶微生物的监测评估。装置中涉及的多种微生物气溶胶培养和收集装置,各有优点,可以相互弥补,以最全面系统的实现海气界面气溶胶微生物的培养。
如图3所示,本发明实施例中涉及的特制透光微生物培养槽1及特制透光培养槽盖2部分,其采用透明钢化玻璃或者耐高温塑料制成,规格200×5.0×1.0cm,但不限于此规格,培养槽带有刻度标尺。将普通海水固体培养基(如2216E培养基)高压灭菌后,待冷却至50℃,倒于特制培养槽内,制成长条状的海气界面微生物培养基,凝固后盖上特制透光培养槽盖,封闭后可方便携带,在后期室内微生物培养过程中可减少污染。
如图4所示,本发明实施例中涉及的多层可调高度的培养架,由3根带刻度标尺架支撑3,可根据需要调节、设置不同高度和层数,如设置6层,每层高度为20cm。每层嵌入大尺寸内径筛网4,筛网直径大小为16cm,规格为10目,但不限于此规格,规格要求只要不影响气溶胶微生物和颗粒的流动即可。将普通海水固体培养基(如2216E培养基)平板5,如直径9cm的培养皿倒扣在筛网内,即可进行气溶胶微生物培养。
如图5所示,本发明实施例中涉及的气溶胶收集器和气溶胶微生物收集瓶。喇叭口状的收集器6采用塑料材质,可采用圆形(如直径20cm)或者正方形口径,(如大小20×20cm),深度约15cm,但不限于此规格。为分别收集多个高度的气溶胶颗粒,喇叭口状的收集器可多个叠加使用,并用带刻度标尺支撑架7进行固定。气溶胶微生物由封闭的收集瓶10收集,收集瓶内装有无菌水用于沉降微生物,或者液体培养基进行微生物培养。收集瓶设有进气口和出气口,其中进气口通过进气导管8与喇叭口状的收集部件底部连接。多个收集瓶收置于样品盒内12,并固定于搭载平台。
如图6所示,本发明实施例中涉及的特制透光微生物培养槽的搭载方式,倒扣的培养槽通过夹具固定在浮筏搭载平台16的边缘,并保持与海面呈一定角度。为了便于换算与海面的高度,可以为45°或者30°等,但不限于此角度。经原位培养48小时后,取回微生物培养槽,封闭后,如有必要可在特定温度继续培养1-2天,可直接在显微镜下观察微生物菌落,并计算对应高度的微生物菌落数。随机挑取微生物菌落进行菌种的鉴定。
如图7所示,本发明实施例中涉及的多层可调高度的培养架的搭载方式,将设置好的多层培养架固定在浮筏搭载平台16的四角,并尽可能靠近海面的位置。固定好后,将普通海水固体培养基(如2216E培养基)平板倒扣与每层的筛网内,经原位培养48小时后,取回微生物培养皿,封闭后,如有必要可在特定温度继续培养1-2天,可直接在显微镜下观察微生物菌落,并用菌落数计数器进行菌落计算。随机挑取微生物菌落进行菌种的鉴定。
如图8所示,本发明实施例中涉及的气溶胶收集器和气溶胶微生物收集瓶的搭载方式。将设置好的多层气溶胶收集器固定在浮筏搭载平台16的四面,并尽可能靠近海面的位置,用于尽可能定点收集四个方向的气溶胶微生物,减少因为风浪所带来的干扰。固定好后,收集瓶内装有无菌水用于沉降微生物。经原位收集48小时后,取回各个高度的气溶胶微生物收集瓶,过滤后,可直接上机流式细胞仪进行分析气溶胶微生物细胞大小及个数分布。也可提取总DNA后进行高通量测序,进一步对气溶胶微生物种类和基因进行分析研究。
上述的特制透光微生物培养槽15,搭载的多层可调高度的培养架19和搭载的气溶胶导入部件和气溶胶微生物收集部件20等还可以但不限于固定在滨海湿地、海岸沙滩、河流、湖面等位置以及陆地等其他设施,进行气溶胶微生物的原位培养和收集。除此之外,本发明的涉及的其他装置还可以固定连接在船舶,观测站或者检测塔等设施,用于临时或者实时的进行海洋气溶胶微生物的数据监测。
下面结合具体实施例对本发明的技术方案作进一步的描述。
实施例一,海洋赤潮爆发相关气溶胶微生物的监测与赤潮的预警。
海洋赤潮爆发时,导致海水中某些浮游植物、细菌和病毒呈爆发性增殖或高度聚集,而引起水质的变化,对海洋渔业的重点灾害,目前对赤潮的监测与赤潮的技术也相关欠缺。利用本发明用本发明的气溶胶微生物收集装置进行赤潮气溶胶细菌和病毒的收集,同时采集赤潮表层海水进行比较。然后提取总DNA后进行高通量测序,进一步分析于赤潮相关的细菌和病毒种类和基因。分析结果如图9所示,表明赤潮表层海水与赤潮气溶胶细菌和病毒在物种分类和丰度上有较高的一致性,因此通过本发明的装置进行赤潮气溶胶细菌和病毒的收集在一定程度上可以体现赤潮海水的微生物状态。此外,我们发现通过监测赤潮爆发相关气溶胶微生物动态变化比监测表层海水更具有提前性,能提前发现气溶胶微生物种群的时空变化,因此未来有望利用本发明的装置可以用于赤潮的预警,在渔业上生产和病害检测中具有应用价值。
实施例二,海滨浴场白色念珠菌的原位培养与检疫应用。
白色念珠菌是常见的病原菌,可造成正常人口腔,上呼吸道,肠道及阴道感染,容易对机体免疫功能或一般防御力下降的人群引起疾病。通过对海滨浴场A和B进行气溶胶的原位培养和采集,A、B浴场分别设置6个采集点。利用本发明的3个装置进行气溶胶白色念珠菌原位培养,培养效率的分析结果,见表一,以气溶胶微生物收集装置的培养效率最高(浴场A和B的平均值分别为544.7和230CFU)>特制透光微生物培养槽装置的培养效率(浴场A和B的平均值分别为320.7和96CFU)>可调高度的培养皿装置(浴场A和B的平均值分别为284.3和89.5CFU)。经过浴场A和B的比较,3个装置均指出白色念珠菌在浴场A的丰度均显著高于浴场B,认为海滨浴场A可能存在较高的白色念珠菌的感染风险。应用本发明的装置可以提醒海滨浴场A的人群做好适当防护,并建议加强浴场卫生的清洁和消毒工作。
表一,海滨浴场A,B的气溶胶白色念珠菌的采集培养与CFU结果
Figure BDA0002700434810000111
在本发明的描述中,除非另有说明,“多个”的含义是两个或两个以上;术语“上”、“下”、“左”、“右”、“内”、“外”、“前端”、“后端”、“头部”、“尾部”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系,仅是为了便于描述本发明和简化描述,而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作,因此不能理解为对本发明的限制。此外,术语“第一”、“第二”、“第三”等仅用于描述目的,而不能理解为指示或暗示相对重要性。
以上所述,仅为本发明的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置,其特征在于,所述海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置设置有:
浮筏搭载平台;
特制透光微生物培养槽,特制透光培养槽盖,可调节角度的培养槽固定部件,多层可调高度的培养架,气溶胶收集器,气溶胶微生物收集瓶,海面风浪监测部件,温湿度监测部件均呈开放式固定在浮筏搭载平台上;
特制透光微生物培养槽,特制透光培养槽盖,可调节角度的培养槽固定部件,多层可调高度的培养架,气溶胶收集器,气溶胶微生物收集瓶可自由组合用于收集及原位培养海气界面气溶胶微生物,海面风浪监测部件,温湿度监测部件,气压、气体成分检测部件用于实时监测海气界面的环境参数。
2.如权利要求1所述的海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置,其特征在于,所述可调节角度的培养槽固定部件位于浮筏搭载平台四周的边缘,所述的制透光微生物培养槽通过固定部件连接,制透光微生物培养槽自带刻度标尺。
3.如权利要求1所述的海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置,其特征在于,所述制透光微生物培养槽盖用于封闭培养槽内的固体培养基。
4.如权利要求1所述的海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置,其特征在于,所述根多层可调高度的培养架固定于浮筏搭载平台的四角上。
5.如权利要求1所述的海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置,其特征在于,所述多层可调高度的培养架底部为大尺寸内径筛网,固体培养平板可倒扣在培养架上;多层可调高度的培养架自带刻度标尺,自由组合根据需要设置不同高度。
6.如权利要求1所述的海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置,其特征在于,所述气溶胶收集器固定于搭载平台的四面,用于收集四个方位的气溶胶微生物;气溶胶收集器呈喇叭口状,底部有导管连接气溶胶微生物收集瓶;
所述气溶胶微生物收集瓶由封闭的无菌收集瓶,设有进去导管和出去导管,收集瓶内装有无菌水用于沉降微生物颗粒,或者装有液体培养基用于原位培养气溶胶微生物;
所述气溶胶收集器由自带刻度标尺支撑架固定,自由组合根据需要设置不同高度。
7.如权利要求1所述的海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置,其特征在于,海面风浪监测部件,温湿度监测部件,气压、气体成分检测部件、锚泊部件均设于浮筏搭载平台上,用于实时监测所在区域与气溶胶微生物相关的环境参数,包括风向、风速、浪高、温度、湿度、气压、气体成分。
8.一种如权利要求1~7任意一项所述海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置的收集方法,其特征在于,所述收集方法包括:
第一步,将特制透光微生物培养槽、多层可调高度的培养架、气溶胶收集器和气溶胶微生物收集瓶等按上述的搭载方式,呈对称开放的搭载于浮筏和搭载平台的四个方位;
跌入,浮筏搭载平台和装置可移动运输远海和近海,通过锚固定于海面,进行远海和近海海面的气溶胶微生物的监测评估。
9.一种海气界面的微生物种类鉴定、区域分布及微生物传播特征的方法,其特征在于,所述海气界面的微生物种类鉴定、区域分布及微生物传播特征的方法使用权利要求1~7任意一项所述海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置。
10.一种海滨浴场的传染病原体监测及海洋微生物传播的预报方法,其特征在于,所述海滨浴场的传染病原体监测及海洋微生物传播的预报方法使用权利要求1~7任意一项所述海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置。
CN202011020453.2A 2020-09-25 2020-09-25 海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置及收集方法 Active CN112226345B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011020453.2A CN112226345B (zh) 2020-09-25 2020-09-25 海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置及收集方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011020453.2A CN112226345B (zh) 2020-09-25 2020-09-25 海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置及收集方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN112226345A true CN112226345A (zh) 2021-01-15
CN112226345B CN112226345B (zh) 2024-05-24

Family

ID=74108543

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202011020453.2A Active CN112226345B (zh) 2020-09-25 2020-09-25 海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置及收集方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112226345B (zh)

Citations (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES257971U (es) * 1981-04-30 1981-11-16 Covalca Plastici S.P.A. Una barrera flotante, anti-contaminante y anti-explosiva, que tiene elementos de flotacion principales para ser usadoscomo recipientes para la coleccion, transporte y botadura delas secciones de barrera
JP2008178365A (ja) * 2007-01-26 2008-08-07 Matsushita Electric Works Ltd 浮遊性海藻育成装置
KR100903691B1 (ko) * 2008-09-12 2009-06-18 한국농어촌공사 적조 및 녹조원인생물 및 이들을 포식할 수 있는 원생생물성 포식자의 배양 장치
CN104498322A (zh) * 2014-11-18 2015-04-08 中国海洋大学 一种用于海洋微生物原位高通量培养的装置
CN105181399A (zh) * 2015-09-30 2015-12-23 国家海洋局第三海洋研究所 海上浮标载体上海洋气溶胶采集装置及其采样方法
US20170023599A1 (en) * 2015-03-30 2017-01-26 Accelerate Diagnostics, Inc. Instrument and system for rapid microorganism identification and antimicrobial agent susceptibility testing
CN106482988A (zh) * 2016-12-13 2017-03-08 北京大学 一种便携式大流量空气采样器
CN110184322A (zh) * 2019-06-18 2019-08-30 电子科技大学中山学院 一种生物气溶胶样品采集培养方法及装置
CN110592179A (zh) * 2019-09-16 2019-12-20 中国科学院微生物研究所 一种基于旋转液腔的生物气溶胶收集方法
CN111115956A (zh) * 2019-12-30 2020-05-08 中国科学院广州地球化学研究所 一种海洋水体污染治理的装置及修复方法
CN111134016A (zh) * 2020-01-17 2020-05-12 山东省果树研究所 一种可折叠多功能组织培养架及其应用
CN211185320U (zh) * 2019-07-01 2020-08-07 谢玉平 一种可调节高度的光照培养架

Patent Citations (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES257971U (es) * 1981-04-30 1981-11-16 Covalca Plastici S.P.A. Una barrera flotante, anti-contaminante y anti-explosiva, que tiene elementos de flotacion principales para ser usadoscomo recipientes para la coleccion, transporte y botadura delas secciones de barrera
JP2008178365A (ja) * 2007-01-26 2008-08-07 Matsushita Electric Works Ltd 浮遊性海藻育成装置
KR100903691B1 (ko) * 2008-09-12 2009-06-18 한국농어촌공사 적조 및 녹조원인생물 및 이들을 포식할 수 있는 원생생물성 포식자의 배양 장치
CN104498322A (zh) * 2014-11-18 2015-04-08 中国海洋大学 一种用于海洋微生物原位高通量培养的装置
US20170023599A1 (en) * 2015-03-30 2017-01-26 Accelerate Diagnostics, Inc. Instrument and system for rapid microorganism identification and antimicrobial agent susceptibility testing
CN105181399A (zh) * 2015-09-30 2015-12-23 国家海洋局第三海洋研究所 海上浮标载体上海洋气溶胶采集装置及其采样方法
CN106482988A (zh) * 2016-12-13 2017-03-08 北京大学 一种便携式大流量空气采样器
CN110184322A (zh) * 2019-06-18 2019-08-30 电子科技大学中山学院 一种生物气溶胶样品采集培养方法及装置
CN211185320U (zh) * 2019-07-01 2020-08-07 谢玉平 一种可调节高度的光照培养架
CN110592179A (zh) * 2019-09-16 2019-12-20 中国科学院微生物研究所 一种基于旋转液腔的生物气溶胶收集方法
CN111115956A (zh) * 2019-12-30 2020-05-08 中国科学院广州地球化学研究所 一种海洋水体污染治理的装置及修复方法
CN111134016A (zh) * 2020-01-17 2020-05-12 山东省果树研究所 一种可折叠多功能组织培养架及其应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
廖雷 北京:中国环境科学出版社: "大气污染控制工程", pages: 229 - 230 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN112226345B (zh) 2024-05-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Alpert et al. The influence of marine microbial activities on aerosol production: A laboratory mesocosm study
CN102023130B (zh) 一种流道式海洋生物附着力测试装置
Tyrrell et al. Monitoring for Heterosigma akashiwo using a sandwich hybridization assay
Gardner Fluxes, dynamics and chemistry of particulates in the ocean
CN104569068B (zh) 一种雾霾污染物毒性评价方法
CN101435751B (zh) 一种扇贝养殖笼内水样的采集方法及装置
CN112226345B (zh) 海洋海气界面气溶胶微生物的原位培养装置及收集方法
CN107957490A (zh) 海水微塑料生态位原位研究的实验装置及使用方法
CN105368949A (zh) 一种城市污水处理厂/处理站微生物气溶胶的检测方法
WO2023221509A1 (zh) 一种土壤/底泥活体藻细胞分离提取与快速分类计数方法
CN208087626U (zh) 一种快速、高效的厌氧菌培养简易装置
CN219024245U (zh) 一种生物气溶胶发生装置
CN110036991B (zh) 一种定量采集底泥中大型底栖动物的装置及采集方法
CN204670122U (zh) 贝类能量收支原位测定器
CN102204515B (zh) 养殖海绵生物量的测量方法及其装置
Owens et al. Phytoplankton cages for the measurement in situ of the growth rates of mixed natural populations
Kruczalak et al. Airborne microorganisms fluctuations over the Gulf of Gdansk Coastal zone (Southern Baltic)
CN112011590A (zh) 一种用于饮用水的细菌检测的方法
Bagaev et al. Local changes of physical and biological parameters of the Sevastopol bay surface waters under the influence of rain drainage
CN112945822A (zh) 一种大气环境微生物气溶胶监测方法
Fukami et al. A microbiological study on the decline process of a phytoplankton bloom in Aburatsubo inlet, Kanagawa, Japan.
CN206970593U (zh) 一种厌氧菌培养装置
CN104686428B (zh) 贝类能量收支原位测定器
CN205917274U (zh) 一种空气细菌浓度测试装置
CN208517211U (zh) 一种水体检测净化设备

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant