CN111758673B - 一种保鲜草地贪夜蛾卵块用于扩繁夜蛾黑卵蜂的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种保鲜草地贪夜蛾卵块用于扩繁夜蛾黑卵蜂的方法；它主要是以牛皮纸作为草地贪夜蛾卵块的承载介质，并对其进行气密、避光和恒定低温等限制条件保存，在抑制草地贪夜蛾卵孵化同时，确保了卵块在较长时间内可供夜蛾黑卵蜂寄生，达到了集中大量扩繁夜蛾黑卵蜂种群的目的，便于适时在田间释放寄生蜂防治草地贪夜的生物防控效果。其操作流程简单，安全可靠，为方便快捷地利用草地贪夜蛾卵大量扩繁夜蛾黑卵蜂，防治草地贪夜蛾的生物防治技术应用，提供了大量的寄生蜂蜂源。
Description
技术领域
本发明属于农林业生物技术领域，涉及一种保存寄主害虫的卵，用以室内大量扩繁其天敌寄生蜂的方法，具体涉及一种保鲜草地贪夜蛾卵并利用其大量扩繁天敌夜蛾黑卵蜂的方法。
背景技术
草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda，俗称秋黏虫(Fall armyworm)，属于鳞翅目夜蛾科灰翅夜蛾属，原产于美洲热带和亚热带地区，是一种严重威胁农业生产的重大危险性迁飞害虫。草地贪夜蛾幼虫食量大、食性杂，可为害76科353种寄主植物。自2019年1月草地贪夜蛾入侵我国云南省江城县以来，因其有迁飞习性已逐步扩散至全国26个省区，2019年玉米发生面积约106.5万hm2，并对其它作物如甘蔗、高粱、谷子和小麦等14种作物造成为害。可以预见的是，未来在我国玉米、甘蔗和小麦等农作物生产将进一步受到严重威胁，防控形势严峻。
依据经典的生物防治理论，利用天敌防治草地贪夜蛾是一条有效途径。夜蛾黑卵蜂Telenomus remus属膜翅目缘腹细蜂科Scelionidae是多种鳞翅目夜蛾科昆虫卵期重要的寄生性天敌，由于该蜂具有很高的寄生效能，且容易进行大量繁殖，使得它成为防治鳞翅目夜蛾科害虫主要生物因子之一。早在80年代，委内瑞拉就扩繁夜蛾黑卵蜂用于防治草地贪夜蛾，其中在湿度较高的Túren地区,在玉米地的卵最高寄生率可达90％。在墨西哥，在玉米-大豆、玉米-南瓜、玉米-大豆-南瓜和单玉米种植区通过定量释放夜蛾黑卵蜂，分析夜蛾黑卵蜂对草地贪夜蛾卵的寄生率情况表明，发现寄生率与释放量符合泊松回归Poissonregression关系，具有显著的生物防治作用。在拉丁美洲和中美洲地区，如洪都拉斯、多米尼加、秘鲁、玻利维亚和古巴等国家，夜蛾黑卵蜂被广泛地应用于草地贪夜蛾的防治，其中在委内瑞拉和哥伦比亚地区，夜蛾黑卵蜂作为一种重要的生物防治产品，用于防治草地贪夜蛾。草地贪夜蛾入侵非洲以后，通过对南非、东非和西非等地区卵分子鉴定和种群调查表明，夜蛾黑卵蜂是非洲地区草地贪夜蛾重要卵寄生蜂，可作为防治草地贪夜蛾重要的生物防治寄生蜂。
然而，受草地贪夜蛾产卵量限制，且卵发育迅速孵化的特点，室内条件下很难累积一定规模和数量的生理指标一致的卵源，用于扩繁夜蛾黑卵蜂。因此，急需一种利用草地贪夜蛾卵大量扩繁夜蛾黑卵蜂，防治草地贪夜蛾的生物防治技术应用，提供了大量的寄生蜂蜂源的方法。
发明内容
本发明的目的是提供了一种在室内条件下保鲜草地贪夜蛾的卵，并利用其大量扩繁天敌夜蛾黑卵蜂的方法。它主要是以牛皮纸作为草地贪夜蛾卵块的承载介质，并对其进行气密、避光和恒定低温等限制条件保存，在抑制草地贪夜蛾卵孵化同时，确保了卵块在较长时间内可供夜蛾黑卵蜂寄生，达到了集中大量扩繁夜蛾黑卵蜂种群的目的，便于适时在田间释放寄生蜂防治草地贪夜的生物防控效果。其操作流程简单，安全可靠，为方便快捷地利用草地贪夜蛾卵大量扩繁夜蛾黑卵蜂，防治草地贪夜蛾的生物防治技术应用，提供了大量的寄生蜂蜂源。
为了实现上述目的，本发明的技术方案为：提供一种保鲜草地贪夜蛾卵块用于扩繁夜蛾黑卵蜂的方法，包括以下步骤：
(1)牛皮纸作为草地贪夜蛾成虫产卵的承载介质
(1-1)将刚羽化草地贪夜蛾成虫引入至养虫笼中，投入含蜜糖水的棉花球或棉花棒为补充营养，并在养虫笼内挂上牛皮纸，其面积大小随着养虫笼体积和成虫密度而定，作为诱集草地贪夜蛾成虫产卵承载介质；
(1-2)每天清晨更替一次牛皮纸，检查并沿卵块外边缘剪下含卵块的纸片，并使用生理盐水或纯净水小心冲刷卵块，去除可能病原物，晾干后待保存；
(2)草地贪夜蛾卵的保鲜处理流程
(2-1)取气密良好并烘干处理后的玻璃密封罐，将粘有承载卵块纸张小心折叠并避免相互挤压，投置于玻璃密封罐中气密封存；
(2-2)使用深色遮蔽物如黑色塑料袋遮光包裹密封罐，放置于恒定低温的冰箱中，保存待用；
(3)夜蛾黑卵蜂寄生草地贪夜蛾的卵块及其释放前保存
(3-1)从冰箱中取出粘有承载卵块纸张，将卵块一面向外卷成纸桶状，使卵块暴露在外，有利于夜蛾黑卵蜂发现并寄生，小心放入到另一只密封罐中；
(3-2)引入羽化后1～2天的夜蛾黑卵蜂，并投入含蜜糖水的半干棉花球或棉花棒作为寄生蜂补充营养，密封罐体并放置于室温环境下10～12小时，供夜蛾黑卵蜂寄生草地贪夜蛾的卵；
(3-3)将粘有承载卵块纸张取出，小心折叠并避免相互挤压，投置于另一只密封罐中，室温下密封遮光保存，在1～7天内取出用于释放防治。
进一步地，步骤(1-1)中，蜜糖水为浓度10～20％蜜糖水。
进一步地，步骤(1-2)中，在卵块外边缘0.5～1cm处剪下含卵块的纸片。
进一步地，步骤(2-1)前，使用毛笔蘸取少量的胶水或固体胶，将已晾干承载卵块的牛皮纸碎片粘附在纸上，并在含卵的纸片上记录产卵的日期或批次信息。
进一步地，步骤(2-2)中，冰箱设置4～8℃恒定低温，是设定在指在4至8℃之间(包括)的某一恒定温度。
进一步地，步骤(2-2)中，保存7～25天待用。
进一步地，步骤(3-2)中，蜜糖水为浓度10～20％蜜糖水。
进一步地，所述卵块是指草地贪夜蛾产卵后黏结成的块状物，由大量的卵堆积而成。
进一步地，所述密封罐均为材质是玻璃的密封罐，具有气密性能，以确保草地贪夜蛾卵块不会因为气流交换造成失水干瘪或污染霉变。
进一步地，所述的胶水或固体胶是市售产品。
进一步地，所述生理盐水为浓度0.9％氯化钠溶液。
进一步地，所述纯净水为双蒸水或经过灭菌处理后的无菌水，也包含市售的可饮用的瓶装水。
进一步地，所述1～7天取出用于释放防治，是因为寄生了草地贪夜蛾卵的夜蛾黑卵蜂一般会在9～11天羽化出成蜂，在此前投置于田间便于保证寄生蜂的寄生效能与防治效果。
本发明一种保鲜草地贪夜蛾卵块来扩繁天敌夜蛾黑卵蜂的方法，具有以下有益效果：
1.本发明利用牛皮纸作为草地贪夜蛾成虫的产卵承载介质，牛皮纸的坚韧疏水的性能，确保了卵块在其表明的完整性和黏合性，降低了独立玉米叶等植物叶片作为卵块承载介质，枯萎收缩造成对卵块的挤压，也避免了冲刷卵块时造成的损伤。且物料成本低，有利于操作标准化。
2.本发明使用玻璃密封罐来隔绝气流对卵块的影响，并使用深色遮蔽物和低温环境等条件抑制卵块的发育孵化，避免了其它复杂化学和物理灭活操作，并对提高卵块的寄生率具有积极的作用。且操作流程简单，方法可靠。
3.本发明有利于大量扩繁夜蛾黑卵蜂种群，通过长达25天卵块的保鲜期，可累积不同时段的草地贪夜蛾卵块，供夜蛾黑卵蜂寄生生产下一代寄生蜂种群，游刃有余地策划和选择释放防治时机。促使夜蛾黑卵蜂防治草地贪夜蛾的定量化、规划化和集约化，也更有利于各种综合防治措施如杀虫剂防治、化学诱杀的制定与实施。
具体实施方式
实施例1
本发明一种保鲜草地贪夜蛾卵块用于扩繁夜蛾黑卵蜂的方法，包括以下步骤：
(1)牛皮纸作为草地贪夜蛾成虫产卵的承载介质
a、将刚羽化草地贪夜蛾成虫引入至30×30×30cm养虫笼中，投入含10％蜜糖水的棉花球为补充营养，2天后，在笼子顶中央悬挂一张约15×15cm牛皮纸作诱集产卵用，作为诱集草地贪夜蛾成虫产卵承载介质；
b、每天清晨更替一次牛皮纸，检查并沿卵块外边缘1cm处剪下含卵块的纸片，用含生理盐水的注射器冲洗卵块并晾干，去除可能病原物，晾干后待保存；
(2)草地贪夜蛾卵的保鲜处理流程
a、使用毛笔蘸取少量的胶水，将已晾干承载卵块的牛皮纸碎片粘附在半张大小的A4打印纸上，在并在含卵的纸片上记录产卵的日期；
b、取气密良好并烘干处理后的体积为500ml玻璃密封罐，将粘有承载卵块纸张小心折叠并避免相互挤压，投置于玻璃密封罐中气密封存；
c、使用黑色塑料袋遮光包裹密封罐，放置于5℃恒定低温的冰箱中，可保存7天待用；
(3)夜蛾黑卵蜂寄生草地贪夜蛾的卵块及其释放前保存
a、从冰箱中取出保存了7天粘有承载卵块纸张(累计约3000粒卵)，将卵块一面向外卷成纸桶状，使卵块暴露在外，有利于夜蛾黑卵蜂发现并寄生，小心放入到另一只体积约为2L密封罐中；
b、引入羽化后1天的夜蛾黑卵蜂约100头，并投入含20％蜜糖水半干棉花棒作为寄生蜂补充营养，密封罐体并放置于室温环境下12小时，供夜蛾黑卵蜂寄生草地贪夜蛾的卵；
c、将粘有承载卵块纸张取出，小心折叠并避免相互挤压，投置于另一只500ml密封罐中，室温下密封遮光保存。
实施例2
本发明保鲜草地贪夜蛾卵块用于扩繁夜蛾黑卵蜂的方法，包括以下步骤：
(1)牛皮纸作为草地贪夜蛾成虫产卵的承载介质
a、将刚羽化草地贪夜蛾成虫引入至30×30×30cm养虫笼中，投入含10％蜜糖水的棉花球为补充营养，2天后，在笼子顶中央悬挂一张约15×15cm牛皮纸作诱集产卵用，作为诱集草地贪夜蛾成虫产卵承载介质；
b、每天清晨更替一次牛皮纸，检查并沿卵块外边缘0.5cm处剪下含卵块的纸片，用含纯净水的注射器冲洗卵块并晾干，去除可能病原物，晾干后待保存；
(2)草地贪夜蛾卵的保鲜处理流程
a、使用毛笔蘸取少量的固体胶，将已晾干承载卵块的牛皮纸碎片粘附在半张大小的A4打印纸上，在并在含卵的纸片上记录产卵的日期；
b、取气密良好并烘干处理后的体积为500ml玻璃密封罐，将粘有承载卵块纸张小心折叠并避免相互挤压，投置于玻璃密封罐中气密封存；
c、使用黑色塑料袋遮光包裹密封罐，放置于8℃恒定低温的冰箱中，可保存14天待用；
(3)夜蛾黑卵蜂寄生草地贪夜蛾的卵块及其释放前保存
a、从冰箱中取出保存了14天粘有承载卵块纸张(累计约3000粒卵)，将卵块一面向外卷成纸桶状，使卵块暴露在外，有利于夜蛾黑卵蜂发现并寄生，小心放入到另一只体积约为2L密封罐中；
b、引入羽化后1天的夜蛾黑卵蜂约100头，并投入含20％蜜糖水半干棉花棒作为寄生蜂补充营养，密封罐体并放置于室温环境下12小时，供夜蛾黑卵蜂寄生草地贪夜蛾的卵；
c、将粘有承载卵块纸张取出，小心折叠并避免相互挤压，投置于另一只500ml密封罐中，室温下密封遮光保存。
实施例3
本发明保鲜草地贪夜蛾卵块用于扩繁夜蛾黑卵蜂的方法，包括以下步骤：
(1)牛皮纸作为草地贪夜蛾成虫产卵的承载介质
a、将刚羽化草地贪夜蛾成虫引入至30×30×30cm养虫笼中，投入含10％蜜糖水的棉花球为补充营养，2天后，在笼子顶中央悬挂一张约15×15cm牛皮纸作诱集产卵用，作为诱集草地贪夜蛾成虫产卵承载介质；
b、每天清晨更替一次牛皮纸，检查并沿卵块外边缘0.8cm处剪下含卵块的纸片，用含生理盐水的注射器冲洗卵块并晾干，去除可能病原物，晾干后待保存；
(2)草地贪夜蛾卵的保鲜处理流程
a、使用毛笔蘸取少量的胶水，将已晾干承载卵块的牛皮纸碎片粘附在半张大小的A4打印纸上，在并在含卵的纸片上记录产卵的日期；
b、取气密良好并烘干处理后的体积为500ml玻璃密封罐，将粘有承载卵块纸张小心折叠并避免相互挤压，投置于玻璃密封罐中气密封存；
c、使用黑色塑料袋遮光包裹密封罐，放置于4℃恒定低温的冰箱中，可保存21天待用；
(3)夜蛾黑卵蜂寄生草地贪夜蛾的卵块及其释放前保存
a、从冰箱中取出保存了21天粘有承载卵块纸张(累计约3000粒卵)，将卵块一面向外卷成纸桶状，使卵块暴露在外，有利于夜蛾黑卵蜂发现并寄生，小心放入到另一只体积约为2L密封罐中；
b、引入羽化后1天的夜蛾黑卵蜂约100头，并投入含20％蜜糖水半干棉花棒作为寄生蜂补充营养，密封罐体并放置于室温环境下12小时，供夜蛾黑卵蜂寄生草地贪夜蛾的卵；
c、将粘有承载卵块纸张取出，小心折叠并避免相互挤压，投置于另一只500ml密封罐中，室温下密封遮光保存。
试验过程
取出本发明实施例1-3分别保存了7天、14天和21天不同时间段卵块的牛皮纸，分别取出一部分卵块，恢复至室温，观察并记录卵的孵化率。另一部分卵块一面向外卷成纸桶状，将卵块暴露在外(累计约3000粒卵)，小心放入到一只体积约为2L玻璃密封罐中。引入羽化后的夜蛾黑卵蜂约100头，投入含20％蜜糖水棉花棒作为寄生蜂补充营养，室温环境下12小时后，将粘有承载卵块纸张取出小心折叠后再次放入另一只500ml的玻璃密封罐中，密封遮光保存。在第4天取出不同保存批次的卵，并置于解剖镜下观察卵的寄生情况和卵粒数量，以卵粒变黑作为被寄生标准。尔后将各批次的卵块放置于的不同玻璃管中，记录羽化后夜蛾黑卵蜂的数量。
卵孵化率＝(孵化的幼虫数/总卵粒数)×100％
卵寄生率＝(被寄生的卵粒数/总卵粒数)×100％
出蜂率＝(被寄生的卵粒数/总卵粒数)×100％
试验数据
如下表1所示。
表1使用本发明保鲜草地贪夜蛾卵块来扩繁天敌夜蛾黑卵蜂的参数指标
从表1中可以看出：使用本发明保鲜草地贪夜蛾卵块后，再进行扩繁夜蛾黑卵蜂的方法，在草地贪夜蛾卵保鲜处理7天、14天和21天后，其卵均不能孵化为幼虫，其孵化率为0。通过设置约30：1的卵与夜蛾黑卵蜂的寄生比例后，在7天、14天和21天保鲜条件下，草地贪夜蛾卵的寄生率分别是93.04％、86.13％和72.8％，显示了大部分的卵粒在进行保鲜处理后仍可以被夜蛾黑卵蜂寄生，且被寄生后卵粒的夜蛾黑卵蜂出蜂率，分别可达93.94％、82.9％和79.64％，表明了大多数被寄生的卵粒可以孵化出夜蛾黑卵蜂。因此可利用该方法去保鲜和积累草地贪夜蛾卵块，用于大量扩繁夜蛾黑卵蜂，为田间生物防治提供充足的生理指标一致的蜂源。
以上所揭露的仅为本发明的较佳实施例而已，当然不能以此来限定本发明之权利范围，因此依本发明权利要求所作的等同变化，仍属于本发明所涵盖的范围。
Claims (7)
1.一种保鲜草地贪夜蛾卵块用于扩繁夜蛾黑卵蜂的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)牛皮纸作为草地贪夜蛾成虫产卵的承载介质
(1-1)将刚羽化草地贪夜蛾成虫引入至养虫笼中，投入含蜜糖水的棉花球或棉花棒为补充营养，并在养虫笼内挂上牛皮纸，作为诱集草地贪夜蛾成虫产卵承载介质；
(1-2)每天更替一次牛皮纸，检查并沿卵块外边缘0.5～1cm处剪下含卵块的纸片，并使用生理盐水或纯净水小心冲刷卵块，去除可能病原物，晾干后待保存；
(2)草地贪夜蛾卵的保鲜处理流程
(2-1)取气密良好并烘干处理后的玻璃密封罐，将粘有承载卵块纸张小心折叠并避免相互挤压，投置于玻璃密封罐中气密封存；
(2-2)使用深色遮蔽物遮光包裹密封罐，放置于4～8℃恒定低温的冰箱中，保存7～25天待用；
(3)夜蛾黑卵蜂寄生草地贪夜蛾的卵块及其释放前保存
(3-1)从冰箱中取出粘有承载卵块纸张，将卵块一面向外卷成纸桶状，使卵块暴露在外，有利于夜蛾黑卵蜂发现并寄生，小心放入到另一只密封罐中；
(3-2)按照30：1的卵与夜蛾黑卵蜂的寄生比例，引入羽化后1～2天的夜蛾黑卵蜂，并投入含蜜糖水的半干棉花球或棉花棒作为寄生蜂补充营养，密封罐体并放置于室温环境下10～12小时，供夜蛾黑卵蜂寄生草地贪夜蛾的卵；
(3-3)将粘有承载卵块纸张取出，小心折叠并避免相互挤压，投置于另一只密封罐中，室温下密封遮光保存，在1～7天内取出用于释放防治。
2.根据权利要求1所述的保鲜草地贪夜蛾卵块用于扩繁夜蛾黑卵蜂的方法，其特征在于：步骤(1-1)中，蜜糖水为浓度10～20％蜜糖水。
3.根据权利要求1所述的保鲜草地贪夜蛾卵块用于扩繁夜蛾黑卵蜂的方法，其特征在于：步骤(2-1)前，还将已晾干承载卵块的牛皮纸碎片粘附在纸上，并在含卵的纸片上记录产卵的日期或批次信息。
4.根据权利要求1所述的保鲜草地贪夜蛾卵块用于扩繁夜蛾黑卵蜂的方法，其特征在于：步骤(3-2)中，蜜糖水为浓度10～20％蜜糖水。
5.根据权利要求1所述的保鲜草地贪夜蛾卵块用于扩繁夜蛾黑卵蜂的方法，其特征在于：所述卵块是指草地贪夜蛾产卵后黏结成的块状物，由大量的卵堆积而成。
6.根据权利要求1所述的保鲜草地贪夜蛾卵块用于扩繁夜蛾黑卵蜂的方法，其特征在于：所述生理盐水为浓度0.9％氯化钠溶液。
7.根据权利要求1所述的保鲜草地贪夜蛾卵块用于扩繁夜蛾黑卵蜂的方法，其特征在于：所述纯净水为双蒸水或经过灭菌处理后的无菌水，也包含市售的可饮用的瓶装水。
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