CN111500454B - 一种细胞爬片、细胞爬片拾取装置、细胞培养板及应用方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种细胞爬片、细胞爬片拾取装置、细胞培养板及应用方法，细胞爬片的爬片本体的边缘设有偏心孔；细胞爬片拾取装置包括套筒和插设于套筒中的内芯杆，内芯杆的一端设有弹性骨架；细胞培养板包括培养板本体和培养板盖，培养板本体上设有培养孔，培养孔的底部设有圆柱状平台，且当细胞爬片同心置于圆柱状平台上时偏心孔位于圆柱状平台的外侧；应用方法包括利用细胞爬片拾取装置将带有偏心孔的细胞爬片从细胞培养板中取出的步骤。本发明的细胞爬片、细胞爬片拾取装置、细胞培养板及应用方法便于科研工作者拾取和收集细胞爬片，一方面能够防止细胞爬片碎裂，另一方面也能避免细胞爬片上原本生长均匀的细胞被破坏。

Description

一种细胞爬片、细胞爬片拾取装置、细胞培养板及应用方法

技术领域

本发明涉及医学生物研究用的细胞培养设备，具体涉及一种细胞爬片、细胞爬片拾取装置、细胞培养板及应用方法。

背景技术

在医学生物研究中，组织学、免疫组织化学、冰冻切片、细胞涂片和原位杂交等检测等需用到细胞爬片。细胞爬片一般为圆形玻璃片，用于让爬片浸没在细胞培养基内，利用细胞能在爬片上贴壁生长的特性来进行体外细胞培养和实验操作的一种技术，目前主要用于体外培养和研究贴壁细胞。

目前研制的细胞爬片具备以下特点：（1）爬片表面经过Tissue Culturetreated（即TC）处理，双面均可使用；（2）γ射线灭菌,保证无菌；（3）使用便捷,只需打开包装,将爬片放入孔板内，将细胞悬液滴到爬片上即可培养；（4）爬片厚度为0.17mm，直径为8mm/14mm/20mm/25mm，分别适用于48孔细胞培养板/24孔细胞培养板/12孔细胞培养板/6孔细胞培养板；（5）超强吸附：爬片表面具有永久的阳离子电荷，可以通过静电作用吸附冰冻切片组织或细胞，使之粘附在爬片上，进而在爬片玻璃和切片组织之间形成共价键，无需额外添加粘黏剂或者蛋白包被，爬片也能牢固的粘附细胞。利用细胞爬片进行体外实验时，可以排除体内诸多干扰因素的影响，是诸多实验的第一步，也是能否成功获得客观实验结果的关键步骤，故对细胞爬片的需求和质量要求很高。采用传统细胞爬片及匹配的细胞培养板进行体外细胞培养及实验时，需借助针尖预弯的1mL通用型注射器将爬片边缘从培养孔板底部钩起，接着用显微镊将爬片从培养孔中夹出，再放置于黏附玻璃载玻片上。在此过程中，由于表面张力，爬片底面会与培养孔板底部面紧密贴合，或因实验员操作不当，在注射器钩起爬片或显微镊夹取爬片过程中难免会出现爬片被夹碎的现象，即使未夹碎爬片，爬片上原本长满的细胞也会被镊子所破坏，影响实验结果（参见图1，显微镜下可见虚线之间即被镊子夹取的区域，局部细胞已然被破坏）。这些无疑极大地浪费了科研人员的精力和时间，同时也对科研资源造成浪费，极大地影响了细胞爬片在细胞学实验中的应用。

发明内容

本发明要解决的技术问题：针对现有技术的上述问题，提供一种细胞爬片、细胞爬片拾取装置、细胞培养板及应用方法，本发明的细胞爬片通过偏心孔的定位，可以根据需要采用现有的钛合金显微镊或本发明下述的细胞爬片拾取装置安全取出细胞爬片，能够防止细胞爬片碎裂和避免细胞爬片上原本生长均匀的细胞被破坏；本发明细胞爬片拾取装置、细胞培养板及应用方法便于科研工作者拾取和收集细胞爬片，一方面能够防止细胞爬片碎裂，另一方面也能避免细胞爬片上原本生长均匀的细胞被破坏。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：

一种细胞爬片，包括爬片本体，所述爬片本体的边缘设有偏心孔。

可选地，所述爬片本体为圆形玻璃片。

本发明还提供一种用于前述细胞爬片的细胞爬片拾取装置，包括套筒和插设于套筒中的内芯杆，所述内芯杆的一端设有多根横向伸出布置的弹性骨架。

可选地，所述弹性骨架为弹性金属片或弹性金属条。

可选地，所述弹性骨架通过焊接或者卡接的方式固定在内芯杆上。

可选地，所述弹性骨架的数量为四根，且呈放射状均匀布置于内芯杆的外壁上。

可选地，所述内芯杆的另一端设有手柄。

本发明还提供一种前述细胞爬片拾取装置的应用方法，将带有偏心孔的细胞爬片从细胞培养板中取出的步骤包括：S1）将内芯杆内缩使得弹性骨架完全被退入套筒中；S2）将套筒连同内芯杆一起插入偏心孔中；S3）保持套筒不动、将内芯杆前推，使得弹性骨架在偏心孔的下侧张开；S4）基于弹性骨架对细胞爬片底部的支撑，通过将套筒连同内芯杆一起将细胞爬片从细胞培养板中取出。

本发明还提供一种用于前述细胞爬片的细胞培养板，包括培养板本体和培养板盖，所述培养板本体上设有培养孔，所述培养孔的底部设有用于支承细胞爬片的圆柱状平台，且当所述细胞爬片同心布置支承于圆柱状平台上时偏心孔至少部分位于圆柱状平台的外侧。

可选地，所述培养板本体上布置的培养孔的数量为六个，且分为两行三列布置。

和现有相比，本发明的细胞爬片具有下述优点：本发明细胞爬片的爬片本体的边缘设有偏心孔，因此既可以通过现有的钛合金显微镊通过偏心孔直接夹取出细胞爬片，还可以采用本发明下述的细胞爬片拾取装置安全取出细胞爬片，通过偏心孔的定位，能够防止细胞爬片上原本长满的细胞被破坏。

和现有相比，本发明的细胞爬片拾取装置具有下述优点：本发明细胞爬片拾取装置提供了一种用于前述细胞爬片的全新采集方式，通过内芯杆的一端设有多根横向伸出布置的弹性骨架可实现对偏心孔的定位和支撑，从而能够方便地实现对细胞爬片的拾取，一方面，弹性骨架从底部支撑细胞爬片的方式，且接触面小，能够避免细胞爬片上的生长细胞被破坏；另一方面，多根弹性骨架的支撑方式，相对传统的针尖预弯的1mL通用型注射器将爬片边缘从培养孔板底部钩起的方式而言，受力更加均匀，能够防止细胞爬片碎裂。

和现有相比，本发明的细胞培养板具有下述优点：本发明的细胞培养板在培养孔的底部设有用于支承细胞爬片的圆柱状平台，且当所述细胞爬片同心布置支承于圆柱状平台上时偏心孔至少部分位于圆柱状平台的外侧，通过上述结构一方面能够减少细胞爬片的黏附力，能够防止在拾取细胞爬片时导致细胞爬片碎裂；另一方面由于细胞爬片同心布置支承于圆柱状平台上时偏心孔位于圆柱状平台的外侧，因此便于通过钛合金显微镊或者本发明前述细胞爬片拾取装置来拾取细胞爬片。

本发明细胞爬片拾取装置的应用方法将带有偏心孔的细胞爬片从细胞培养板中取出的步骤包括：S1）将内芯杆内缩使得弹性骨架完全被退入套筒中；S2）将套筒连同内芯杆一起插入偏心孔中；S3）保持套筒不动、将内芯杆前推，使得弹性骨架在偏心孔的下侧张开；S4）基于弹性骨架对细胞爬片底部的支撑，通过将套筒连同内芯杆一起将细胞爬片从细胞培养板中取出，通过上述步骤，能够方便地实现对细胞爬片的拾取，一方面，弹性骨架从底部支撑细胞爬片的方式，且接触面小，能够避免细胞爬片上的生长细胞被破坏；另一方面，多根弹性骨架的支撑方式，相对传统的针尖预弯的1mL通用型注射器将爬片边缘从培养孔板底部钩起的方式而言，受力更加均匀，能够防止细胞爬片碎裂。

附图说明

图1为现有采集方式在显微镜下所见的细胞爬片上被破坏的细胞痕迹图。

图2为本发明实施例中细胞爬片的结构示意图。

图3为本发明实施例中细胞爬片拾取装置的剖视结构示意图。

图4为本发明实施例中细胞爬片拾取装置的俯视结构示意图。

图5为本发明实施例中细胞爬片拾取装置的使用原理示意图。

图6为本发明实施例中细胞爬片拾取装置与细胞爬片的配合状态示意图。

图7为本发明实施例中细胞培养板的剖视结构示意图。

图8为本发明实施例中细胞培养板的俯视结构示意图（移除培养板盖后）。

图9为本发明实施例采集方式在显微镜下所见的细胞爬片的细胞痕迹图。

图例说明：1、爬片本体；11、偏心孔；2、套筒；3、内芯杆；31、弹性骨架；32、手柄；4、培养板本体；41、培养孔；42、圆柱状平台；5、培养板盖。

具体实施方式

如图2所示，本实施例的细胞爬片包括爬片本体1，爬片本体1的边缘设有偏心孔11。因此既可以通过现有的钛合金显微镊通过偏心孔11直接夹取出细胞爬片，还可以采用本发明下述的细胞爬片拾取装置安全取出细胞爬片，通过偏心孔11的定位，能够防止细胞爬片上原本长满的细胞被破坏。

参见图2，本实施例中爬片本体1为圆形玻璃片，此外也可以根据需要采用其他形状。

作为一种可选的实施方式，本实施例中爬片本体3直径为25mm，偏心孔31的孔径为4mm，厚度与传统细胞爬片相同。

如图3和图4所示，本实施例还提供一种专用于前述细胞爬片的细胞爬片拾取装置，包括套筒2和插设于套筒2中的内芯杆3，内芯杆3的一端设有多根横向伸出布置的弹性骨架31。本实施例细胞爬片拾取装置提供了一种用于前述细胞爬片的全新采集方式，通过内芯杆的一端设有多根横向伸出布置的弹性骨架可实现对偏心孔的定位和支撑，从而能够方便地实现对细胞爬片的拾取，一方面，弹性骨架从底部支撑细胞爬片的方式，且接触面小，能够避免细胞爬片上的生长细胞被破坏；另一方面，多根弹性骨架的支撑方式，相对传统的针尖预弯的1mL通用型注射器将爬片边缘从培养孔板底部钩起的方式而言，受力更加均匀，能够防止细胞爬片碎裂。

本实施例中，弹性骨架31可根据需要采用弹性金属片或弹性金属条，具有结构强度高、韧性好、使用寿命长的优点。此外，也可以根据需要采用具有类似特性（结构强度高、韧性好、使用寿命长）的塑料部件。

弹性骨架31可根据需要通过焊接或者卡接的方式固定在内芯杆3上。

如图4所示，弹性骨架31的数量为四根，且呈放射状均匀布置于内芯杆3的外壁上。此外也可以调整弹性骨架31的数量。

为了便于内芯杆3的伸缩操作，如图3所示，本实施例中内芯杆3的另一端设有手柄32。

作为一种可选的实施方式，本实施例中内芯杆3长度50mm，粗2mm；套筒2长40mm，直径4mm；弹性骨架31长4mm，粗1mm，全开状态，4根弹性骨架31向四周打开形成直径8mm圆形“伞状”形态。

如图5和图6所示，本实施例还提供一种前述细胞爬片拾取装置的应用方法，将带有偏心孔11的细胞爬片从细胞培养板中取出的步骤包括：S1）将内芯杆3内缩使得弹性骨架31完全被退入套筒2中，如图5中第一个子图所示；S2）将套筒2连同内芯杆3一起插入偏心孔11中；S3）保持套筒2不动、将内芯杆3前推，如图5中第二个子图所示，使得弹性骨架31在偏心孔11的下侧张开，如图5中第三个子图所示；S4）基于弹性骨架31对细胞爬片底部的支撑，通过将套筒2连同内芯杆3一起将细胞爬片从细胞培养板中取出，如图6所示。顺利地取出细胞爬片后，即可将细胞爬片转移至玻璃黏附载玻片上。毫无疑问，将带有偏心孔11的细胞爬片从细胞培养板中取出之前需要消毒（例如高温高压灭菌消毒等）。

如图7和图8所示，本实施例用于前述细胞爬片的细胞培养板，包括培养板本体4和培养板盖5，培养板本体4上设有培养孔41，培养孔41的底部设有用于支承细胞爬片的圆柱状平台42，且当细胞爬片同心布置支承于圆柱状平台42上时偏心孔11至少部分位于圆柱状平台42的外侧。作为一种可选的实施方式，本实施例中圆柱状平台42直径为8mm、高度为2mm。

本实施例中，培养板本体4上布置的培养孔41的数量为六个，且分为两行三列布置。毫无疑问，本实施例细胞培养板的实施不依赖于培养孔41的特定数量。

作为一种可选的实施方式，本实施例中改良型的细胞培养孔板中，培养板本体4及培养孔41的外观和尺寸与细胞培养板一样。

科研工作者在使用本实施例中的细胞培养孔板培养细胞时，只需将带偏心孔31的细胞爬片直接放置在培养孔41底面的圆柱状平台42上，加入适量培养基重悬的细胞悬液，圆柱状平台42的存在有助于解决因细胞爬片与培养孔41底面直接黏附太紧而导致拾片困难、爬片碎裂的问题。而且，由于当细胞爬片同心布置支承于圆柱状平台42上时偏心孔31位于圆柱状平台42的外侧，因此可以通过现有的钛合金显微镊通过偏心孔11直接夹取出细胞爬片，还可以采用本发明下述的细胞爬片拾取装置安全取出细胞爬片，通过偏心孔11的定位，能够防止细胞爬片上原本长满的细胞被破坏。图9为本实施例采集方式在显微镜下所见的细胞爬片的细胞痕迹图，参见图9可知，本实施例采集方式在显微镜下所见的细胞爬片上，细胞密布均匀、完整。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，本发明的保护范围并不仅局限于上述实施例，凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明的保护范围。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理前提下的若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (8)

1.一种用于细胞爬片的细胞爬片拾取装置，其特征在于，包括套筒（2）和插设于套筒（2）中的内芯杆（3），所述内芯杆（3）的一端设有多根能横向伸出布置的弹性骨架（31）；所述细胞爬片包括爬片本体（1），所述爬片本体（1）的边缘设有偏心孔（11），使得弹性骨架（31）在偏心孔（11）的下侧张开，并基于弹性骨架（31）对细胞爬片底部的支撑通过将套筒（2）连同内芯杆（3）一起将细胞爬片从细胞培养板中取出。

2.根据权利要求1所述的细胞爬片拾取装置，其特征在于，所述弹性骨架（31）为弹性金属片或弹性金属条。

3.根据权利要求1所述的细胞爬片拾取装置，其特征在于，所述弹性骨架（31）通过焊接或者卡接的方式固定在内芯杆（3）上。

4.根据权利要求1所述的细胞爬片拾取装置，其特征在于，所述弹性骨架（31）的数量为四根，且呈放射状均匀布置于内芯杆（3）的外壁上。

5.根据权利要求1所述的细胞爬片拾取装置，其特征在于，所述内芯杆（3）的另一端设有手柄（32）。

6.一种权利要求1～5中任意一项所述细胞爬片拾取装置的应用方法，其特征在于，将带有偏心孔（11）的细胞爬片从细胞培养板中取出的步骤包括：S1）将内芯杆（3）内缩使得弹性骨架（31）完全被退入套筒（2）中；S2）将套筒（2）连同内芯杆（3）一起插入偏心孔（11）中；S3）保持套筒（2）不动、将内芯杆（3）前推，使得弹性骨架（31）在偏心孔（11）的下侧张开；S4）基于弹性骨架（31）对细胞爬片底部的支撑，通过将套筒（2）连同内芯杆（3）一起将细胞爬片从细胞培养板中取出。

7.一种用于细胞爬片的细胞培养板，包括培养板本体（4）和培养板盖（5），所述培养板本体（4）上设有培养孔（41），其特征在于，所述培养孔（41）的底部设有用于支承细胞爬片的圆柱状平台（42），且当所述细胞爬片同心布置支承于圆柱状平台（42）上时偏心孔（11）至少部分位于圆柱状平台（42）的外侧；所述细胞爬片包括爬片本体（1），所述爬片本体（1）的边缘设有偏心孔（11）。

8.根据权利要求7所述的细胞培养板，其特征在于，所述培养板本体（4）上布置的培养孔（41）的数量为六个，且分为两行三列布置。