CN111437388A - 金银合金纳米材料、其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种金银合金纳米材料，包括金银合金纳米粒子与巯基修饰的透明质酸，所述巯基修饰的透明质酸包覆在金银合金纳米粒子表面。本发明还公开一种金银合金纳米材料的制备方法，包括提供金银合金纳米粒子与巯基修饰的透明质酸；将所述巯基修饰的透明质酸包覆在金银合金纳米粒子表面，获得所述的金银合金纳米材料。本发明的金银合金纳米材料，具有低毒性、高肿瘤靶向性的特点，且具有在X射线辐射后提高胞内活性氧、降低谷胱甘肽的功效，从而达到放疗增敏的目的。金银合金纳米材料兼具良好的CT造影能力，因此亦可应用于肿瘤临床诊断与治疗的同步进行，有助于实现和推进诊疗一体化平台的构建。

Description

金银合金纳米材料、其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及生物纳米材料制备技术领域，尤其涉及一种金银合金纳米材料、其制备方法及应用。

背景技术

放射治疗是临床上肿瘤疾病最重要的治疗策略之一。在放射治疗的过程中，高能射线(如X-ray或者γ-ray)可以直接对DNA分子造成不同程度的损伤；同时这些高能射线还可以作用于胞内有机分子和水分子产生多种自由基，从而诱导细胞凋亡，进而达成对目标组织的有效杀伤的目的。

尽管肿瘤放射治疗的方法发展迅速且应用普及，但仍存在明显不足之处。如当前在常规辐射剂量进行临床治疗时，肿瘤的平均治愈率仅近四成，其可待优化的方面可包含降低肿瘤细胞对辐射的抵抗性，以及减少正常细胞的毒副作用。

近年来，纳米材料与技术在不同领域的应用研究得到普遍关注。其中在生物医学领域，多功能的纳米材料被应用为肿瘤放射治疗增敏剂或增敏剂载体的研究被广泛报道。纳米材料具有良好生物安全性和独特光学性质，其本身的增强肿瘤渗透与滞留效应(EPR效应)可以增强肿瘤区域富集，提高对肿瘤组织的杀伤效果，同时降低对正常组织的损伤。

贵金属元素制备的纳米粒子，如金纳米粒子，不仅具备良好生物相容性、成熟合成工艺，其高原子序数带来增强的高能射线能量沉积，使其在放疗增敏的同时兼具优异的CT造影效果；而在我们的研究中发现，银纳米粒子在吸收高能射线后，会释放出对细胞具有毒性作用的银离子，进一步增强对细胞的杀伤效果。结合金、银的以上特性，制备金银合金纳米粒子，可以作为一种优良的放疗增敏剂，有效地增强高能射线对肿瘤细胞的杀伤。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种金银合金纳米材料、其制备方法及应用，以克服现有技术中的不足。

为实现上述发明目的，本发明采用了如下技术方案：

本发明实施例提供了一种金银合金纳米材料，包括金银合金纳米粒子与巯基修饰的透明质酸，所述巯基修饰的透明质酸包覆在金银合金纳米粒子表面。

本发明实施例还提供了一种金银合金纳米材料的制备方法，包括：

提供金银合金纳米粒子与巯基修饰的透明质酸；

将所述巯基修饰的透明质酸包覆在金银合金纳米粒子表面，获得所述的金银合金纳米材料。

本发明实施例还提供了一种产品，包括前述的金银合金纳米材料，所述的产品应用于肿瘤的诊断和/或冶疗。

本发明实施例还提供了一种肿瘤放射治疗增敏剂产品，包括前述的金银合金纳米材料。

较之现有技术，本发明的有益效果在于：

(1)本发明实施例提供的金银合金纳米材料，可应用于肿瘤放射治疗增敏中，其以透明质酸包覆金银合金纳米粒子的外层，以获得靶向能力提高、X射线敏感性增强的肿瘤放疗增敏剂。相较普通纳米粒子具有更优的肿瘤靶向能力，且在经X射线照射后，相较单独金纳米粒子、银纳米粒子，具有更好的辐射吸收和增敏性能。

(2)本发明制得的金银合金纳米材料，可应用于肿瘤放射治疗增敏剂中，具有以下特点：

易于存储、性质稳定，室温数月放置不会发生聚集；

在体内具有良好的肿瘤组织靶向性，可减少被正常组织吸收从而降低放疗副作用；

在X射线的辐照下优异的放疗增敏效果；

具备良好的CT造影效果，有望实现临床意义上的诊疗一体化。

(3)本发明实施例提供的金银合金纳米材料，具有良好的生物相容性，在无X射线辐射存在时，被吞入胞内后表现为低毒性。

附图说明

图1是本发明实施例5中金银合金纳米粒子形貌及分布的TEM表征；

图2a-2d是本发明实施例5中金银合金纳米粒子元素组成分析的高分辨TEM表征；

图3是本发明实施例5中金银合金纳米粒子的紫外可见光吸收光谱表征；

图4a-4b是本发明实施例5中透明质酸(HA)以巯基乙胺(HS-CH₂-CH₂-NH₂)修饰前后的核磁共振氢谱图；

图5a-5b是本发明实施例5中金银合金纳米粒子在透明质酸包覆前后的水合粒径与Zeta电势表征；

图6是本发明实施例5中金银合金纳米材料的细胞毒副作用评估；

图7是本发明实施例5中金银合金纳米材料的肿瘤靶向效果评估；

图8是本发明实施例5中金银合金纳米材料体外经不同剂量X-ray辐照处理后，银离子的释放曲线；

图9是本发明实施例5中金银合金纳米材料经细胞摄取及在X-ray辐照处理前后，细胞ROS产生情况；

图10是本发明实施例5中金银合金纳米材料经细胞摄取及在不同剂量X-ray辐照处理后，细胞内谷胱甘肽含量变化曲线；

图11a-11b是本发明实施例5中金银合金纳米材料的CT造影效果评估。

具体实施方式

针对现有技术的诸多缺陷，本案发明人经长期研究和大量实践，得以提出本发明的技术方案。如下将对该技术方案、其实施过程及原理等作进一步的解释说明。但是，应当理解，在本发明范围内，本发明的上述各技术特征和在下文(实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以相互结合，从而构成新的或者优选的技术方方案。限于篇幅，在此不再一一累述。

透明质酸是一种具有良好生物相容性、可降解性及非免疫原性的高分子聚合物，可以特异地与肿瘤细胞膜表面高表达的CD44结合，因而常被应用于肿瘤细胞靶向递送的载体。透明质酸结构中具有多种活性基团，将透明质酸修饰在纳米粒子的表面，可显著提高纳米粒子的肿瘤靶向能力。

作为本发明技术方案的一个方面，其所涉及的系一种金银合金纳米材料，包括金银合金纳米粒子与巯基修饰的透明质酸，所述巯基修饰的透明质酸包覆在金银合金纳米粒子表面。

在一些实施方案中，所述巯基修饰的透明质酸的重均分子量为50000～1000000，优选为600000～900000。

在一些实施方案中，所述金银合金纳米粒子的形状呈球形，金银合金纳米粒子的粒径为5nm～100nm，优选为10nm～50nm，进一步优选为20nm～40nm。

在一些实施方案中，金银合金纳米粒子按金计，巯基修饰的透明质酸重均分子量按800000计，金银合金纳米粒子和巯基修饰的透明质酸的摩尔比为1.5∶1～100∶1，优选为3∶1～20∶1，进一步优选为5∶1～10∶1。

其中，金银合金纳米材料的材料组成为球状金银合金纳米粒子构成内核，巯基修饰的透明质酸修饰在其表面。

在一些实施方案中，所述金银合金纳米粒子的组成包括金和银，其中金和银的摩尔比为0.01∶1～100∶1，优选为0.1∶1～10∶1，进一步优选为0.5∶1～2∶1。

在一些实施方案中，所述巯基修饰的透明质酸选自巯基乙胺修饰的透明质酸。

在一些实施方案中，所述金银合金纳米粒子选自柠檬酸钠包覆的金银合金纳米粒子。

本发明实施例还提供前述金银合金纳米材料的制备方法，包括：

提供金银合金纳米粒子与巯基修饰的透明质酸；

将所述巯基修饰的透明质酸包覆在金银合金纳米粒子表面，获得所述的金银合金纳米材料。

在一些实施方案中，所述巯基修饰的透明质酸通过金硫键与银硫键结合在金银合金纳米粒子表面。

在一些实施方案中，所述金银合金纳米粒子的表面还包覆有柠檬酸钠。

在一些较为优选的实施方案中，具体包括：

以柠檬酸钠溶液、氯金酸溶液和硝酸银溶液为原料，经氧化还原反应，合成柠檬酸钠包覆的金银合金纳米粒子。

进一步地，柠檬酸钠溶液、氯金酸溶液和硝酸银溶液的体积比为1∶0.01∶0.01～1∶100∶100，优选为1∶0.1∶0.1～1∶10∶10，进一步优选为1∶0.2∶0.2～1∶2∶2。

在一些较为具体的实施方案中，包括：在暴沸的水溶液中进行所述的氧化还原反应，合成柠檬酸钠包覆的金银合金纳米粒子。

其中，柠檬酸钠为还原剂。柠檬酸钠包覆的金银合金纳米粒子的溶液外观为橙色透明液体。

在一些实施方案中，具体包括：

以巯基乙胺(HS-CH₂-CH₂-NH₂)和透明质酸(HA)为原料，经酰胺化反应，合成巯基乙胺修饰的透明质酸。

在一些较为优选的实施方案中，所述巯基乙胺和透明质酸的质量比为0.01∶1～100∶1，优选为0.05∶1～20∶1，进一步优选为0.2∶1～5∶1。

在一些较为优选的实施方案中，具体包括：在室温下进行所述的酰胺化反应，反应结束后，经透析、冻干，获得巯基乙胺修饰的透明质酸。

其中，酰胺化的反应条件为室温，并慢速搅拌过夜。

酰胺化反应过程，如下所示：

在一些实施方案中，具体包括：

以所述金银合金纳米粒子和巯基修饰的透明质酸为原料，通过巯基与金及巯基与银的配位作用，将巯基修饰的透明质酸包覆在金银合金纳米粒子表面，获得所述的金银合金纳米材料。

在一些较为优选的实施方案中，具体包括：在所述金银合金纳米粒子的溶液中加入巯基修饰的透明质酸，室温下搅拌3～48小时后，通过离心、洗涤及浓缩获得所述的金银合金纳米材料。

其中，反应条件为室温，并慢速搅拌3～48小时。反应结束后，通过高速离心法，洗涤、浓缩获得终产物。

本发明实施例还提供了一种产品，包括前述的金银合金纳米材料，所述的产品应用于肿瘤的诊断和或冶疗。

在一些实施方案中，所述产品应用于CT造影。

在一些实施方案中，所述产品应用于放射治疗。

本发明实施例还提供一种肿瘤放射治疗增敏剂产品，包括前述的金银合金纳米材料。

本发明还对金银合金纳米材料的放疗增敏性能进行了评估，具体包括：

金银合金纳米材料的外观为橙色透明液体(高浓度不透明)，水溶液稳定，在乙醇中容易析出。

金银合金纳米材料在X-ray照射下，能够释放出银离子，且银离子(Ag⁺)释放量与辐射剂量(Gy)呈正相关。

金银合金纳米材料在常温下，以及加热条件(80摄氏度持续两个小时)下，不会释放出银离子。长时间(3个月)静置也不会释放出银离子。

金银合金纳米材料在X-ray照射下，能够透过对X-ray的散射，折射，以及俄歇效应增强粒子周边局部的电离辐射强度。

细胞摄取该材料以后，在X-ray照射下，会极大地增加细胞内活性氧(ROS)含量。

细胞摄取该材料以后，在X-ray照射后，细胞会由于DNA损伤而发生凋亡与坏死。

细胞摄取该材料以后，在X-ray照射后，细胞内谷胱甘肽含量急剧下降。下降的程度与辐射剂量和细胞内材料浓度呈正相关。

金银合金纳米材料拥有极好的CT造影能力，相同摩尔浓度(金计)的金银合金纳米材料是临床使用的碘基造影剂HU值的4倍左右。

下面结合若干优选实施例及附图对本发明的技术方案做进一步详细说明，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。以下实施例中采用的实施条件可以根据实际需要而做进一步调整，未注明的实施条件通常为常规实验中的条件。

实施例1

1.合成金银合金纳米粒子(Au-Ag NPs)：

在200mL圆底烧瓶中置入100mL三次水，再加入5mL质量分数为1％的柠檬酸钠溶液，设置磁力搅拌速度为800转/分钟，温度设为120℃。待溶液沸后立即加入1mL浓度为24mM的硝酸银水溶液，3s后加入1mL浓度为24mM的氯金酸水溶液，继续搅拌10min，从恒温磁力搅拌器中取出圆底烧瓶，室温冷却保存。

2.合成巯基乙胺修饰的透明质酸：

称取HA 10mg，称取50mg SH-CH₂-CH₂-NH₂，在超声辅助下使其溶于100mL三次水中，然后加入50mg EDC与50mg NHS，室温搅拌48h后透析3天，第一天每隔3h换水一次，第二天和第三天每12h换水一次。透析完成后使用冻干机将溶液冻干，得到粉末状固体。

3.合成透明质酸修饰的金银合金纳米材料(HA@Au-Ag NPs)：

以金：透明质酸摩尔比5∶1的比例将金银合金纳米粒子溶液和改性透明质酸溶液混合，室温慢速搅拌，3小时后离心洗去多余的改性透明质酸。

实施例2

1.合成金银合金纳米粒子(Au-Ag NPs)：

在200mL圆底烧瓶中置入100mL三次水，再加入3mL质量分数为1％的柠檬酸钠溶液，设置磁力搅拌速度为800转/分钟，温度设为120℃。待溶液沸后立即加入1mL浓度为24mM的硝酸银水溶液，3s后加入1mL浓度为24mM的氯金酸水溶液，继续搅拌10min，从恒温磁力搅拌器中取出圆底烧瓶，室温冷却保存。

2.合成巯基乙胺修饰的透明质酸：

称取HA 20mg，称取40mg SH-CH₂-CH₂-NH₂，在超声辅助下使其溶于100mL三次水中，然后加入50mg EDC与50mg NHS，室温搅拌48h后透析3天，第一天每隔3h换水一次，第二天和第三天每12h换水一次。透析完成后使用冻干机将溶液冻干，得到粉末状固体。

3.合成透明质酸修饰的金银合金纳米材料(HA@Au-Ag NPs)：

以金：透明质酸摩尔比4∶1的比例将金银合金纳米粒子溶液和改性透明质酸溶液混合，室温慢速搅拌，8小时后离心洗去多余的改性透明质酸。

实施例3

1.合成金银合金纳米粒子(Au-Ag NPs)：

在200mL圆底烧瓶中置入100mL三次水，再加入2mL质量分数为1％的柠檬酸钠溶液，设置磁力搅拌速度为800转/分钟，温度设为120℃。待溶液沸后立即加入2mL浓度为24mM的硝酸银水溶液，3s后加入2mL浓度为24mM的氯金酸水溶液，继续搅拌10min，从恒温磁力搅拌器中取出圆底烧瓶，室温冷却保存。

2.合成巯基乙胺修饰的透明质酸：

称取HA 10mg，称取10mg SH-CH₂-CH₂-NH₂，在超声辅助下使其溶于100mL三次水中，然后加入50mg EDC与50mg NHS，室温搅拌48h后透析3天，第一天每隔3h换水一次，第二天和第三天每12h换水一次。透析完成后使用冻干机将溶液冻干，得到粉末状固体。

3.合成透明质酸修饰的金银合金纳米材料(HA@Au-Ag NPs)：

以金：透明质酸摩尔比3∶1的比例将金银合金纳米粒子溶液和改性透明质酸溶液混合，室温慢速搅拌，24小时后离心洗去多余的改性透明质酸。

实施例4

1.合成金银合金纳米粒子(Au-Ag NPs)：

在200mL圆底烧瓶中置入100mL三次水，再加入1mL质量分数为1％的柠檬酸钠溶液，设置磁力搅拌速度为800转/分钟，温度设为120℃。待溶液沸后立即加入2mL浓度为24mM的硝酸银水溶液，3s后加入2mL浓度为24mM的氯金酸水溶液，继续搅拌10min，从恒温磁力搅拌器中取出圆底烧瓶，室温冷却保存。

2.合成巯基乙胺修饰的透明质酸：

称取HA 50mg，称取10mg SH-CH₂-CH₂-NH₂，在超声辅助下使其溶于100mL三次水中，然后加入50mg EDC与50mg NHS，室温搅拌48h后透析3天，第一天每隔3h换水一次，第二天和第三天每12h换水一次。透析完成后使用冻干机将溶液冻干，得到粉末状固体。

3.合成透明质酸修饰的金银合金纳米材料(HA@Au-Ag NPs)：

以金：透明质酸摩尔比1.5∶1的比例将金银合金纳米粒子溶液和改性透明质酸溶液混合，室温慢速搅拌，48小时后离心洗去多余的改性透明质酸。

实施例5

1.合成金银合金纳米粒子(Au-Ag NPs)：

在200mL圆底烧瓶中置入100mL三次水，再加入2mL质量分数为1％的柠檬酸钠溶液，设置磁力搅拌速度为800转/分钟，温度设为120℃。待溶液沸后立即加入0.5mL浓度为24mM的硝酸银水溶液，3s后加入0.5mL浓度为24mM的氯金酸水溶液，继续搅拌10min，从恒温磁力搅拌器中取出圆底烧瓶，室温冷却保存。

2.合成巯基乙胺修饰的透明质酸：

称取HA 10mg，称取50mg SH-CH₂-CH₂-NH₂，在超声辅助下使其溶于100mL三次水中，然后加入50mg EDC与50mg NHS，室温搅拌48h后透析3天，第一天每隔3h换水一次，第二天和第三天每12h换水一次。透析完成后使用冻干机将溶液冻干，得到粉末状固体。

3.合成透明质酸修饰的金银合金纳米材料(HA@Au-Ag NPs)：

以金：透明质酸摩尔比2∶1的比例将金银合金纳米粒子溶液和改性透明质酸溶液混合，室温慢速搅拌，3小时后离心洗去多余的改性透明质酸。

对实施例5所得巯基乙胺改性透明质酸进行核磁共振氢谱检测(图4a-4b)，透明质酸以巯基乙胺修饰前后的二者均有处于4.7ppm处的水峰，以及1.9ppm处的属于透明质酸的甲基峰等。但是经过巯基乙胺改性后的透明质酸出现了一个2.8ppm处的峰，其属于巯基乙胺的亚甲基，证明巯基乙胺改性的透明质酸已成功制备。

利用动态光散射技术对透明质酸修饰前后的金银合金纳米粒子进行表征(图5a-5b)：在透明质酸修饰后，纳米粒子的水合粒径由61nm变为104nm，粒子Zeta电势由-17mV变为-32mV；在经透明质酸酶(Hyal)处理后，水合粒径变为80nm，Zeta电势变为+13mV(透明质酸被除去后暴露出的氨基为正电荷)。以上证明透明质酸已成功包覆在金银合金纳米粒子表面。

通过透射电子显微镜及紫外可见分光光度仪对其进行表征，证明金银合金纳米粒子的成功合成：所制备金银合金纳米粒子呈球形，大小均一，分散性良好，平均尺寸为17.4nm(图1)；高分辨透射电子显微镜结果进一步表明金银元素的同时存在(图2a-2d)；紫外可见吸收峰在465nm左右，为金银合金纳米粒子的等离子体共振峰(图3)。

对实施例5中的金银合金纳米材料进行评估测试，结果如下：

(1)金银合金纳米材料对细胞毒副作用的评估：

将人脐静脉内皮细胞(HUVECs)经消化后接种到96孔板内。待细胞全部贴壁并长至50-60％后，将培养液替换为含有不同浓度的金银合金纳米材料的培养液。培养24小时后，使用CCK-8试剂盒对细胞增殖活性进行检测(见图6)。

由图6可知即使在较高的浓度(200μg Au/ml)时，HA@Au-Ag NPs仍旧没有显现出任何毒性，并且随着浓度增加对细胞存活率影响甚微。这说明HA@Au-Ag NPs具有很好的生物相容性。

(2)金银合金纳米材料的肿瘤靶向效果评估：

通过比较分别注射了HA@Au-Ag NPs与Au-Ag NPs的两组的肿瘤在各时间点的金的浓度可以清楚地发现，注射了HA@Au-AgNPs的小鼠肿瘤部位的Au浓度在各个时间点在肿瘤部位的浓度均高于Au-Ag NPs(见图7)。造成这种差异的主要原因是我们在小鼠后腿皮下所荷的肿瘤细胞是小鼠乳腺癌细胞(4T1)细胞，这是一种CD44高表达的细胞，而HA具有对CD44有靶向作用，这种主动靶向的作用使得更多的金银合金纳米材料蓄积在肿瘤部位。

(3)金银合金纳米材料、X-ray联合作用促进胞内ROS产生：

金、银等高原子序数原子组成的纳米粒子对高能射线的局部吸收增强，及银原子在经X-ray辐照后释放出银离子造成的细胞毒性，是本发明金银合金纳米材料放疗增敏的主要原因。金银合金纳米材料在经不同辐照剂量(Gy)X-ray辐照后，银离子释放量随辐照剂量变化曲线如图8。可知银离子释放量与X-ray辐照剂量呈正相关。

而后根据各组肿瘤细胞的处理方式，如是否摄取金银合金纳米材料、是否经X-ray辐照，将各组分别命名为：无X射线辐照处理的无材料组(PBS组)、无X射线辐照处理的有材料组(HA@Au-AgNPs组)、有X射线辐照的无材料组(PBS+X-ray组)、有X射线辐照的有材料组(HA@Au-Ag NPs+X-ray)及阳性对照组。使用活性氧检测试剂盒对各组活性氧水平进行检测(图9)。

由图9可见含有金银合金纳米材料的肿瘤细胞经X-ray辐照后，具有最多且亮度最强的荧光水平，即ROS的产生量最多，表明金银合金纳米材料显著提高了肿瘤细胞经X射线辐照后的ROS水平，而ROS会进一步破坏细胞的DNA结构与膜结构，从而达到杀伤肿瘤细胞的目的。

(4)金银合金纳米材料、X-ray联合作用降低胞内谷胱甘肽含量：

细胞内本身含有的谷胱甘肽，可以在细胞内发生氧化应激时，结合并减少胞内ROS，维持细胞稳态；如果ROS水平过高导致谷胱甘肽被耗竭，ROS将进一步破坏细胞的DNA、蛋白、膜结构，最后诱导细胞发生凋亡。因此细胞内谷胱甘肽的含量与细胞对抗氧化应激的能力密切相关。

通过对胞内谷胱甘肽(GSH)的含量进行检测(图10)：对照组(PBS组)的GSH含量随X-ray辐照剂量的提高而升高，在6Gy时达到最高水平而后开始降低；而细胞在摄取金银合金纳米材料后(HA@Au-Ag NPs组)，在较低X-ray辐照剂量时GSH含量即发生明显降低，并持续保持远低于对照组的水平。以上说明摄取金银合金纳米材料的肿瘤细胞在经X-ray的辐照处理后，胞内的GSH被显著耗竭，失去GSH保护作用的肿瘤细胞更容易受到胞内氧化应激的损伤，从而达到对肿瘤细胞放疗增敏的目的。

(5)金银合金纳米材料的CT造影效果评估：

高原子序数的金银合金纳米材料具有良好的X射线衰减能力，表明其在放疗增敏的同时兼具优异的CT造影效果，有望应用在临床上肿瘤疾病精准诊断与高效治疗结合的一体化平台构建。因此对本发明金银合金纳米材料的CT造影效果进行评估(图11a-11b)。

配置摩尔浓度(金)梯度的金银合金纳米材料，与等摩尔浓度(碘)梯度的商用造影剂碘佛醇。经CT辐照后，根据HU值绘制曲线，进行造影效果的比较(见图11a-11b)。由图HU值的曲线斜率可知，在同等摩尔浓度下，金银合金纳米材料的CT造影效果约为碘佛醇的4倍。以上说明本发明金银合金纳米材料具有优于现有商用造影剂碘佛醇的良好造影效果。

综上，本发明提供了一种改性透明质酸修饰的金银合金纳米粒子，即金银合金纳米材料的制备方法，该材料具有低毒性、高肿瘤靶向性的特点，且具有可以在X射线辐射后提高胞内活性氧(ROS)、降低谷胱甘肽(GSH)的功效，从而达到放疗增敏的目的。其兼具良好的CT造影能力，因此亦可应用于肿瘤临床诊断与治疗的同步进行，有助于实现和推进诊疗一体化平台的构建。

此外，本案发明人还利用前文所列出的其它工艺条件等替代实施例1-5中的相应工艺条件进行了相应试验，所需要验证的内容和与实施例1-5产品均接近。故而此处不对各个实施例的验证内容进行逐一说明，仅以实施例1-5作为代表说明本发明申请优异之处。

需要说明的是，在本文中，在一般情况下，由语句“包括......”限定的要素，并不排除在包括所述要素的步骤、过程、方法或者实验设备中还存在另外的相同要素。

应当理解，以上所述实例仅为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人是能够了解本发明的内容并据以实施，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所做的等效变换或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (17)

1.一种金银合金纳米材料，其特征在于：包括金银合金纳米粒子与巯基修饰的透明质酸，所述巯基修饰的透明质酸包覆在金银合金纳米粒子表面。

2.根据权利要求1所述的金银合金纳米材料，其特征在于：所述巯基修饰的透明质酸的重均分子量为50000～1000000，优选为600000～900000。

3.根据权利要求1所述的金银合金纳米材料，其特征在于：所述金银合金纳米粒子的形状呈球形，金银合金纳米粒子的粒径为5nm～100nm，优选为10nm～50nm，进一步优选为20nm～40nm。

4.根据权利要求1所述的金银合金纳米材料，其特征在于：金银合金纳米粒子按金计，巯基修饰的透明质酸重均分子量按800000计，金银合金纳米粒子和巯基修饰的透明质酸的摩尔比为1.5∶1～100∶1，优选为3∶1～20∶1，进一步优选为5∶1～10∶1。

5.根据权利要求1所述的金银合金纳米材料，其特征在于：所述金银合金纳米粒子的组成包括金和银，其中金和银的摩尔比为0.01∶1～100∶1，优选为0.1∶1～10∶1，进一步优选为0.5∶1～2∶1。

6.根据权利要求1所述的金银合金纳米材料，其特征在于：所述巯基修饰的透明质酸选自巯基乙胺修饰的透明质酸；和/或，所述金银合金纳米粒子选自柠檬酸钠包覆的金银合金纳米粒子。

7.一种金银合金纳米材料的制备方法，其特征在于包括：

提供金银合金纳米粒子与巯基修饰的透明质酸；

将所述巯基修饰的透明质酸包覆在金银合金纳米粒子表面，获得所述的金银合金纳米材料。

8.根据权利要求7所述的金银合金纳米材料的制备方法，其特征在于：所述巯基修饰的透明质酸通过金硫键与银硫键结合在金银合金纳米粒子表面。

9.根据权利要求7所述的金银合金纳米材料的制备方法，其特征在于：所述金银合金纳米粒子的表面还包覆有柠檬酸钠。

10.根据权利要求9所述的金银合金纳米材料的制备方法，其特征在于具体包括：

以柠檬酸钠溶液、氯金酸溶液和硝酸银溶液为原料，经氧化还原反应，合成柠檬酸钠包覆的金银合金纳米粒子；

优选的，所述柠檬酸钠溶液、氯金酸溶液和硝酸银溶液的体积比为1∶0.01∶0.01～1∶100∶100，优选为1∶0.1∶0.1～1∶10∶10，进一步优选为1∶0.2∶0.2～1∶2∶2。

11.根据权利要求10所述的金银合金纳米材料的制备方法，其特征在于具体包括：在暴沸的水溶液中进行所述的氧化还原反应，合成柠檬酸钠包覆的金银合金纳米粒子。

12.根据权利要求7所述的金银合金纳米材料的制备方法，其特征在于具体包括：

以巯基乙胺和透明质酸为原料，经酰胺化反应，合成巯基乙胺修饰的透明质酸；优选的，所述巯基乙胺和透明质酸的质量比为0.01∶1～100∶1，优选为0.05∶1～20∶1，进一步优选为0.2∶1～5∶1。

13.根据权利要求12所述的金银合金纳米材料的制备方法，其特征在于具体包括：在室温下进行所述的酰胺化反应，反应结束后，经透析、冻干，获得巯基乙胺修饰的透明质酸。

14.根据权利要求7所述的金银合金纳米材料的制备方法，其特征在于具体包括：

以所述金银合金纳米粒子和巯基修饰的透明质酸为原料，通过巯基与金及巯基与银的配位作用，将巯基修饰的透明质酸包覆在金银合金纳米粒子表面，获得所述的金银合金纳米材料。

15.根据权利要求14所述的金银合金纳米材料的制备方法，其特征在于具体包括：在所述金银合金纳米粒子的溶液中加入巯基修饰的透明质酸，室温下搅拌3～48小时后，通过离心、洗涤及浓缩获得所述的金银合金纳米材料。

16.一种产品，其特征在于：包括权利要求1-6中任一项所述金银合金纳米材料，所述的产品应用于肿瘤的诊断和或冶疗；优选的，所述的产品应用于CT造影；优选的，所述产品应用于放射治疗。

17.一种肿瘤放射治疗增敏剂产品，其特征在于：包括权利要求1-6中任一项所述的金银合金纳米材料。

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