CN111349069A - 一种检测巯基的近红外有机小分子探针、其制备方法及应用 - Google Patents

一种检测巯基的近红外有机小分子探针、其制备方法及应用 Download PDF

Info

Publication number
CN111349069A
CN111349069A CN202010315888.3A CN202010315888A CN111349069A CN 111349069 A CN111349069 A CN 111349069A CN 202010315888 A CN202010315888 A CN 202010315888A CN 111349069 A CN111349069 A CN 111349069A
Authority
CN
China
Prior art keywords
small molecule
probe
detecting
sulfydryl
acid
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202010315888.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111349069B (zh
Inventor
罗稳
李景华
丁旭
房茹
赵永梅
赵凯
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Henan University
Original Assignee
Henan University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Henan University filed Critical Henan University
Priority to CN202010315888.3A priority Critical patent/CN111349069B/zh
Publication of CN111349069A publication Critical patent/CN111349069A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111349069B publication Critical patent/CN111349069B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
    • C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D311/04—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
    • C07D311/22—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4
    • C07D311/26—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4 with aromatic rings attached in position 2 or 3
    • C07D311/28—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4 with aromatic rings attached in position 2 or 3 with aromatic rings attached in position 2 only
    • C07D311/30—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4 with aromatic rings attached in position 2 or 3 with aromatic rings attached in position 2 only not hydrogenated in the hetero ring, e.g. flavones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K11/00—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials
    • C09K11/06—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials containing organic luminescent materials
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6486—Measuring fluorescence of biological material, e.g. DNA, RNA, cells
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
    • G01N21/77—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator
    • G01N21/78—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator producing a change of colour
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
    • C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
    • C09K2211/1003—Carbocyclic compounds
    • C09K2211/1007—Non-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
    • C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
    • C09K2211/1003—Carbocyclic compounds
    • C09K2211/1011—Condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
    • C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
    • C09K2211/1003—Carbocyclic compounds
    • C09K2211/1014—Carbocyclic compounds bridged by heteroatoms, e.g. N, P, Si or B
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
    • C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
    • C09K2211/1018—Heterocyclic compounds
    • C09K2211/1025—Heterocyclic compounds characterised by ligands
    • C09K2211/1088—Heterocyclic compounds characterised by ligands containing oxygen as the only heteroatom

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Plasma & Fusion (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)

Abstract

本发明公开一种检测巯基的近红外有机小分子探针、其制备方法及应用，属于化学分析技术领域。所述有机小分子探针的化学结构如式（I）表示：
Figure 100004_DEST_PATH_IMAGE001
（I）其制备方法如下：将2‑氯‑1‑(2,4‑二羟基苯基)乙酮、6‑(二甲基氨基)‑2‑萘醛和有机溶剂混合，然后滴入碱溶液，室温反应后，浓缩有机相，用酸中和，得到中间体。中间体与2，4‑二硝基苯磺酰氯在有机溶剂中反应后，分离提纯得到产物。本发明制备方法简单易行，所得到的小分子探针可实现巯基的紫外和荧光双响应，检测细胞内的巯基物质。具有灵敏度高、响应快速、特异性高等诸多优点，而且可以用于活体成像，在化工、环境、生物医药等领域具有广阔的应用前景。

Description

一种检测巯基的近红外有机小分子探针、其制备方法及应用
技术领域
本发明属于化学分析技术领域，具体涉及一种检测巯基的近红外有机小分子荧光探针及其制备方法和应用。
背景技术
巯基是生物体中化学活性最高的基团之一，在生物氧化还原体系、蛋白质翻译后修饰过程中起着关键作用，对生命体的新陈代谢具有重要的调节作用。生命体的巯基化合物包括半胱氨酸（Cys）、同型半胱氨酸（Hcy）和谷胱甘肽（GSH），具有广泛的细胞生物学功能，在人体的生化防御系统中起着重要作用。例如，Cys的浓度异常与白化病、水肿和肝脏损伤等疾病有关。Hcy的浓度异常与心血管疾病和老年痴呆等疾病相关。GSH是体内重要的抗氧化剂和解毒剂，其浓度异常变化会影响细胞内氧化还原动态平衡，与多种疾病的发生发展有密切关系。由此可见，过高或过低的巯基化合物水平都会影响正常的生理功能和病理功能，因此维持体内巯基化合物的平衡性非常重要。正是由于巯基化合物的重要性，检测生物体系的巯基化合物，尤其是跟踪其在生命活动中的过程具有重要意义。
传统检测生物巯基的方法大多需要昂贵的仪器，或专业的技术人员，无法在不损伤活细胞或组织的前提下进行检测，更无法实时检测生物体系中巯基浓度的变化。与这些传统方法相比，荧光探针技术可用于生物巯基的实时原位检测，具有显著的优势。然而文献报道的探针大多处于短波区，激发时会对细胞产生损伤，并且生物体中的自发荧光对检测也产生了严重的干扰，使其在应用中受到了限制。因此，开发一种用于活体检测生物巯基的近红外荧光探针在化学、环境、生物及医药等领域具有非常重要的意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有高灵敏度、高选择性、响应速度快的检测巯基的近红外有机小分子探针。本发明的另一目的是提供一种上述近红外有机小分子探针的制备方法。本发明目的之三是提供一种上述近红外有机小分子探针在巯基检测中的应用。
本发明的目的通过以下技术方案实现：
一种检测巯基的近红外有机小分子探针，所述有机小分子探针的化学结构如（I）所示：
Figure DEST_PATH_IMAGE001
（I）
上述检测巯基的近红外有机小分子探针的制备方法，合成路线如下：
Figure DEST_PATH_IMAGE003
具体制备步骤如下：
（1）将化合物1、化合物2和有机溶剂混合，然后滴氢氧化钠溶液，室温反应后，浓缩有机相，用酸中和，得到中间体3；
（2）中间体3、化合物4在和有机溶剂混合，加入碱，室温搅拌反应，反应结束后，浓缩有机相，分离提纯即可得所述检测巯基的近红外有机小分子探针（I）。
所述步骤（1）和步骤（2）中有机溶剂为乙腈、甲醇、乙醇、二氯甲烷、三氯甲烷，四氢呋喃或N,N-二甲基甲酰胺。
所述的化合物1、化合物2及氢氧化钠摩尔比为1：（1~2）：（1~5）。
所述的酸为无机酸盐酸，硫酸，硝酸，磷酸，或有机酸柠檬酸，苹果酸，抗坏血酸。
所述步骤（2）中化合物3、化合物4和碱的摩尔比为1:1:1；碱为碳酸钠、碳酸钾、三乙胺或DIPEA。
所述的分离提纯包括色谱柱层析和/或重结晶分离，所用溶剂选自乙醇、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、氯仿、二氯甲烷、石油醚和正己烷中的任一单组份溶剂或两种以上的混合溶剂。
所述的近红外有机小分子探针作为比色探针和/或荧光探针用于巯基含量检测。
所述的近红外有机小分子探针的应用，用于荧光检测、目视定性检测和细胞成像检测含巯基氨基酸。
本发明的制备方法及产物具有如下优点：
1. 本发明的近红外有机小分子探针反应步骤短，后处理简单，产率高。
2. 本发明的近红外有机小分子探针用于生物巯基检测可快速识别且裸眼可见其颜色变化，可以实现可视化检测。
3. 本发明的近红外有机小分子探针用于生物巯基的双响应，灵敏度高、响应快速。在365 nm便携紫外灯下直接观察其荧光变化。
4. 本发明的近红外有机小分子探针可用于活细胞或者组织中检测巯基。
附图说明
图1是本发明有机小分子探针（I）的合成路线；
图2是本发明所述的探针（I）的1H NMR图；
图3是实施例1所得探针（I）的溶液加入Cys前后的溶液颜色对比图；
图4是实施例1所得探针（I）的溶液加入Cys前后的溶液在365 nm紫外照射下的荧光对比图；
图5是实施例1所得探针（I）的荧光发射强度随Cys的浓度的变化曲线图；
图6示Cys浓度和荧光强度的线性关系；
图7是实施例1所得探针（I）在加入不同氨基酸后635 nm处的荧光强度图；
图8是实施例1所得探针（I）的溶液加入生物巯基前后的细胞成像图。
具体实施方式
下面结合实例及附图对本发明作进一步的描述，但本发明的实施方式不限于此。
核磁谱图采用美国BrukerAV-300型核磁共振仪测定，氘代DMSO作溶剂，荧光光谱采用美国Agilent公司荧光分光光度计，紫外光谱采用北京莱伯泰科仪器有限公司UV9100A紫外分光光度计。其他参数参照常规仪器即可。
实施例1
本实施例的有机小分子探针（I），合成路线如图1所示，其合成步骤如下：
将373 mg的2-氯-1-(2,4-二羟基苯基)乙酮（2 mmol）加入到40 mL含有398 mg 6-(二甲基氨基)-2-萘醛（2 mmol）的乙醇溶液中，边搅拌边缓慢滴加含有2 mmoL氢氧化钠的水溶液5 mL，滴加完毕，室温搅拌12小时。反应结束后，用体积分数为10%稀盐酸溶液调至中性。过滤，滤饼用乙醇重结晶，得到中间体（化合物3）。将该中间体和533 mg的2,4-二硝基苯磺酰氯（2 mmol）溶于40 mL二氯甲烷中，搅拌下缓慢滴加202 mg三乙胺（2 mmol），室温搅拌12反应小时。反应完毕，浓缩，剩余物用无水乙醇重结晶得有机小分子探针（I）842 mg，产率75%。所得产物核磁氢谱图见图2所示。产物鉴定数据如下：
1H NMR (300 MHz, DMSO-d 6) δ 9.15 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.63 (d, J = 8.7Hz, 1H), 8.36 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.99 (d, J = 8.7 Hz, 1H),7.88 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 8.7 Hz, 1H),7.66 (s, 1H), 7.27 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.96 (s,1H), 3.08 (s, 6H). ESI-MS m/z: 562.1 [M+H]+. Elemental Anal. Calcd forC27H19N3O9S: C, 57.75; H, 3.41; N, 7.48. Found: C, 57.55; H, 3.35; N, 4.81.
实施例2
本实施例的有机小分子探针（I），其合成步骤如下：
将上述实施例1所得到的中间体和533 mg的2,4-二硝基苯磺酰氯（2 mmol）溶于40 mL二氯甲烷中，搅拌下加入276 mg的K2CO3（2 mmol），室温搅拌24小时。反应完毕，水洗有机层，取有机层，干燥浓缩后，剩余物用无水乙醇重结晶，得有机小分子探针（I）786 mg，产率70%。产物鉴定数据同实施例1。
实施例3
本实施例的有机小分子探针（I），其合成步骤如下：
将上述实施例1所得到的中间体和533 mg的2,4-二硝基苯磺酰氯（2 mmol）溶于40 mL二氯甲烷中，搅拌下加入258 mg的DIPEA（2 mmol），室温搅拌12小时。反应完毕，水洗有机层，取有机层，干燥浓缩后，剩余物用柱层析分离，V(二氯甲烷)：V（甲醇）=100 ：1，得有机小分子探针（I）820 mg，产率73%。产物鉴定数据同实施例1。
性能测试：
（1）探针（I）的可视化检测
取实施例1制备的有机小分子探针（I）1.0 mmol溶于DMSO中，取Cys（1.0 mmol）溶于纯净水中，配制成浓度为10 mmol/L的储备液，使用时用THF和PBS缓冲溶液的混合液（体积比为3:7）稀释Cys储备液。取2只EP管，其中一支为浓度20 μM的探针（I），另一支为20 μM的探针（I）和40 μM的Cys，静置5～10分钟后肉眼观察，如图3所示。探针（I）为粉红色（图3左），加入2当量的Cys后溶液颜色为淡黄色（图3右）。将此两个待测液放置在365 nm手提紫外灯下，探针（I）为淡紫色（图4左），加入2当量的Cys，溶液发出亮红色荧光（图4右）。以上实验结果证实有机小分子探针（I）具有紫外和荧光双响应，并且能够裸眼检测Cys。将Cys替换为Hcy或GSH后，观察结果与图3和图4一致。
（2）探针（I）的荧光发射强度随Cys的浓度的变化
使用（1）中的储备液和混合液稀释，将探针（I）浓度稀释为10 μM，Cys浓度范围为0~20μM。用荧光分光光度计测其加入不同浓度的Cys时荧光发射光谱。其光谱图如图5所示。由图5可知，探针（I）在452 nm激发下荧光强度很弱，加入Cys后在635 nm处出现新的发射峰。在离子浓度为0~20 μM范围内，随着离子浓度的增加，荧光强度逐渐升高。将Cys替换为Hcy或GSH后，图谱与图5基本相同。
（3）探针（I）对Cys的检测限
采用荧光滴定实验对探针的检测限进行测定，激发波长为452 nm。在探针（I） (10 μmol/L)的缓冲体系中加入不同浓度的Cys (0～20 μmol/L)。10 min后测其荧光数据。以Cys浓度为横坐标，荧光强度为纵坐标作图，得到工作曲线，Cys浓度和荧光强度呈现良好的线性关系，具体详见图6。根据检测限（LOD）计算公式：LOD=3×SD/K（3为设定的置信参数，SD为未加Cys时荧光变化的标准偏差，K为线性关系斜率），利用Origin软件拟合实验数据，计算得到检测限为2.1×10-8 mol/L，远低于人体血浆中Cys的浓度（μmol/L级）。采用同样方法，可测得Hcy或GSH的检测限为1.6×10-8 mol/L和3.1×10-8 mol/L。
（4）探针（I）对不同氨基酸的选择性
使用（1）中的储备液和混合液稀释，将探针（I）浓度稀释为10 μM，氨基酸浓度为20 μM，激发波长为452 nm。用荧光光度计测其加入不同种氨基酸的荧光发射光谱，具体结果见图7，由图7可知，探针（I）与Cys、Hcy和GSH孵育后，635 nm处荧光发射强度明显增加。而与其他氨基酸（天冬氨酸Asp，丙氨酸Ala，缬氨酸Val，苯丙氨酸Phe，组氨酸His，异亮氨酸Ile，赖氨酸Lys，精氨酸Arg，脯氨酸Pro，甘氨酸Gly，甲硫氨酸Met，天冬氨酸Asn，谷氨酸Glu，苏氨酸Thr等不含巯基的氨基酸）孵育后，635 nm处荧光强度并没有明显变化，说明探针（I）对生物巯基具有很好的选择性响应。
（5）探针的细胞成像
取繁殖期人宫颈癌（Hela）细胞，在加入100 U/mL青霉素，100 mg/mL链霉素和10%胎牛血清的DMEM培养液，于5% CO2环境中37 ℃培养。将细胞以1×105个/mL的密度接种在φ30mm玻璃底培养皿中，采用激光共聚焦扫描显微镜（CLSM）进行成像。首先将Hela细胞用10 μM的探针（I）在37 ℃下孵育30分钟，并用PBS洗涤3次，然后通过CLSM成像并拍照。然后将细胞与Cys（20 μM）在37 ℃下孵育30分钟，并用PBS洗涤3次，然后通过CLSM成像并拍照。激发波长为577 nm，具体见图8。
如图8左所示，正常培养条件下的HeLa细胞与10 μM探针（I）孵育后没有红色信号。在加了20 μM的Cys孵育后，可以清楚地观察到强的红色荧光（图8，右）。将Cys替换为Hcy或GSH后，图片与图8右图相似，有明显红色荧光；将Cys替换为其他氨基酸后，图片与图8左图相似，无红色荧光。表明该探针可以进入细胞并在活细胞中检测Cys、Hcy或GSH，对不含巯基的氨基酸没有荧光响应。因此，探针（I）可以作为活细胞中快速灵敏地检测生物巯基的工具。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所做的改变、修饰、替换、组合、简化均为等效的置换方式，都包含在本发明保护范围之内。

Claims (9)

1.一种检测巯基的近红外有机小分子探针，其特征在于，所述有机小分子探针的化学结构如式（I）所示：
Figure 597454DEST_PATH_IMAGE001
（I）。
2.权利要求1所述的检测巯基的近红外有机小分子探针的制备方法，其特征在于，合成路线如下：
Figure DEST_PATH_IMAGE002
具体制备步骤如下：
（1）将化合物1、化合物2和有机溶剂混合，然后滴氢氧化钠溶液，室温反应后，浓缩有机相，用酸中和，得到中间体3；
（2）中间体3、化合物4在和有机溶剂混合，加入碱，室温搅拌反应，反应结束后，浓缩有机相，分离提纯即可得所述检测巯基的近红外有机小分子探针（I）。
3.根据权利要求2所述的检测巯基的近红外有机小分子探针的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）和步骤（2）中有机溶剂为乙腈、甲醇、乙醇、二氯甲烷、三氯甲烷，四氢呋喃或N,N-二甲基甲酰胺。
4.根据权利要求2所述的检测巯基的近红外有机小分子探针的制备方法，其特征在于：所述的化合物1、化合物2及氢氧化钠摩尔比为1：（1~2）：（1~5）。
5.根据权利要求2所述的检测巯基的近红外有机小分子探针的制备方法，其特征在于：所述的酸为无机酸盐酸，硫酸，硝酸，磷酸，或有机酸柠檬酸，苹果酸，抗坏血酸。
6.根据权利要求2所述的检测巯基的近红外有机小分子探针的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中化合物3、化合物4和碱的摩尔比为1:1:1；碱为碳酸钠、碳酸钾、三乙胺或DIPEA。
7.根据权利要求2所述的检测巯基的近红外有机小分子探针的制备方法，其特征在于：所述的分离提纯包括色谱柱层析和/或重结晶分离，所用溶剂选自乙醇、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、氯仿、二氯甲烷、石油醚和正己烷中的任一单组份溶剂或两种以上的混合溶剂。
8.根据权利要求1所述的近红外有机小分子探针作为比色探针和/或荧光探针用于巯基含量检测。
9.根据权利要求1所述的近红外有机小分子探针的应用，其特征在于，用于荧光检测、目视定性检测和细胞成像检测含巯基氨基酸。
CN202010315888.3A 2020-04-21 2020-04-21 一种检测巯基的近红外有机小分子探针、其制备方法及应用 Active CN111349069B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010315888.3A CN111349069B (zh) 2020-04-21 2020-04-21 一种检测巯基的近红外有机小分子探针、其制备方法及应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010315888.3A CN111349069B (zh) 2020-04-21 2020-04-21 一种检测巯基的近红外有机小分子探针、其制备方法及应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111349069A true CN111349069A (zh) 2020-06-30
CN111349069B CN111349069B (zh) 2021-10-15

Family

ID=71196465

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010315888.3A Active CN111349069B (zh) 2020-04-21 2020-04-21 一种检测巯基的近红外有机小分子探针、其制备方法及应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111349069B (zh)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2016166773A1 (en) * 2015-04-16 2016-10-20 Council Of Scientific & Industrial Research Novel coumarin derivative for detection of cysteine and process for the synthesis thereof
CN107098915A (zh) * 2017-05-16 2017-08-29 中国科学院理化技术研究所 一种区分巯基化合物的反应型荧光探针及其合成方法和应用
CN107235946A (zh) * 2017-06-20 2017-10-10 济南大学 一种谷胱甘肽荧光探针及其制备方法和应用
KR20170118597A (ko) * 2016-04-15 2017-10-25 고려대학교 산학협력단 시스테인 검출용 이광자 형광 프로브 화합물

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2016166773A1 (en) * 2015-04-16 2016-10-20 Council Of Scientific & Industrial Research Novel coumarin derivative for detection of cysteine and process for the synthesis thereof
KR20170118597A (ko) * 2016-04-15 2017-10-25 고려대학교 산학협력단 시스테인 검출용 이광자 형광 프로브 화합물
CN107098915A (zh) * 2017-05-16 2017-08-29 中国科学院理化技术研究所 一种区分巯基化合物的反应型荧光探针及其合成方法和应用
CN107235946A (zh) * 2017-06-20 2017-10-10 济南大学 一种谷胱甘肽荧光探针及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JUN LI 等: "Novel coumarin-based sensitive and selective fluorescent probes for biothiols in aqueous solution and in living cells", 《RSC ADV.》 *
MINHUAN LAN 等: "Highly sensitive fluorescent probe for thiols based on combination of PET and ESIPT mechanisms", 《SENSORS AND ACTUATORS B: CHEMICAL》 *
NA HEE KIM 等: "A benzothioate native chemical ligation-based cysteine-selective fluorescent probe", 《DYES AND PIGMENTS》 *
SONG CHEN 等: "A red fluorescent probe for thiols based on 3-hydroxyflavone and its application in living cell imaging", 《RSC ADVANCES》 *
胡云 等: "基于黄酮醇的高选择性半胱氨酸荧光探针的合成及性能研究", 《分析试验室》 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN111349069B (zh) 2021-10-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Sheng et al. A highly selective ESIPT-based fluorescent probe with a large Stokes shift for the turn-on detection of cysteine and its application in living cells
Wang et al. A series of BODIPY-based probes for the detection of cysteine and homocysteine in living cells
Liu et al. A novel near-infrared fluorescent probe with a large Stokes shift for biothiol detection and application in in vitro and in vivo fluorescence imaging
Zhang et al. A ratiometric lysosomal pH probe based on the coumarin–rhodamine FRET system
Huo et al. A turn-on green fluorescent thiol probe based on the 1, 2-addition reaction and its application for bioimaging
CN107602502B (zh) 一种用于生物硫醇检测的esipt型荧光探针及应用
Wang et al. Thiazolyl substituted NBD as fluorescent probe for the detection of homocysteine and cysteine
Fan et al. A simple fluorescent probe for sensing cysteine over homocysteine and glutathione based on PET
Wang et al. A fast-response two-photon fluorescent probe for the detection of Cys over GSH/Hcy with a large turn-on signal and its application in living tissues
CN107056769A (zh) 一种l‑半胱氨酸荧光探针及其制备方法
Gao et al. BODIPY-based turn-on fluorescent probes for cysteine and homocysteine
Chen et al. A nitroso-based fluorogenic probe for rapid detection of hydrogen sulfide in living cells
Liu et al. A phthalimide-based fluorescent probe for thiol detection with a large Stokes shift
Liu et al. A squaraine-based red emission off–on chemosensor for biothiols and its application in living cells imaging
Hou et al. A colorimetric and red emissive fluorescent probe for cysteine and its application in bioimaging
Liu et al. Oxidized-morpholine dressing ratiometric fluorescent probe for specifically visualizing the intracellular glutathione
Wang et al. A novel reaction-based fluorescent turn-on probe for biothiols and its application in cell imaging
KR101472318B1 (ko) 넓은 범위의 pH 측정이 가능한 비율계량적 pH 프로브
Lu et al. Ultrafast deep-red emission fluorescent probe for highly selective imaging of endogenous cysteine in living cells and mice
CN107286151B (zh) 一种基于咔唑的双光子荧光探针及其制备方法和用途
CN108383774B (zh) 一种基于端基炔酮的半胱氨酸荧光探针及其制备和应用
CN110452236B (zh) 一种香豆素类半胱氨酸荧光探针及其制备方法与应用
CN109608495B (zh) 一种检测hno的化合物及其制备方法和应用
Li et al. Fast detecting hypochlorous acid based on electron-withdrawing group promoted oxidation and its biological applications in cells and root tips of plants
CN111349069B (zh) 一种检测巯基的近红外有机小分子探针、其制备方法及应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant