CN111202750A

CN111202750A - 毛囊干细胞移植术治疗疤痕过程中离体毛囊的制备方法

Info

Publication number: CN111202750A
Application number: CN202010150961.6A
Authority: CN
Inventors: 刘景卫
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2020-03-06
Filing date: 2020-03-06
Publication date: 2020-05-29

Abstract

本发明公开了毛囊干细胞移植术治疗疤痕过程中离体毛囊的制备方法，该方法包括以下步骤：毛囊的提取，毛囊的分离，在电子显微镜下将所述毛囊单位完整分离为单株毛囊，尽量保留提取到的皮脂腺、汗腺等皮肤附属器；光滑无毛区的疤痕则切除毛乳头下1/3，使得毛囊无法进入下一个生长周期，疤痕区无终毛生长。毛囊的体外培养，将提取分离的单株毛囊放入特制培养液培养、备用；以毛囊为依托，将毛囊干细胞种植于疤痕特定区域。本发明通过毛囊体外培养技术，采用不同于毛发移植手术的分离方法分离出单株毛囊并灭活，放入特殊培养液培养，有利于毛囊干细胞的生长与增殖；实现抑制疤痕增生、软化修复疤痕、去除美化疤痕的目的。

Description

毛囊干细胞移植术治疗疤痕过程中离体毛囊的制备方法

技术领域

本发明涉及毛囊移植技术领域，具体涉及毛囊干细胞移植术治疗疤痕过程中离体毛囊的处理方法。

背景技术

疤痕较专业的分类可分为增生性疤痕、疤痕疙瘩、疤痕癌。

“疤痕”是物理、生物、化学等因素的损害作用于人体皮肤软组织，导致皮肤软组织的严重损伤而不能完全自行正常修复，转由纤维组织替代修复留下的即影响外观又影响功能的局部症状。“疤痕”给患者带来的是巨大的肉体痛苦和精神痛苦，尤其是烧伤、烫伤、严重外伤后遗留的疤痕。疤痕增生期的几年时间几乎让患者苦不堪言。而后的萎缩期又使患者面目全非，功能障碍，造成患者极大的身、心双重障碍。

疤痕疙瘩隆起皮表呈瘤状增生，表面光滑，颜色红润而发亮，常发现有扩张的毛细血管。皮肤损害自边缘向外伸出，蟹脚形变。皮肤损伤大小各一，外形差异，质硬，如软骨样，自觉症状多感到奇痒难受或有疼痛、灼热感。由于痛感敏锐，可能系神经末梢传导敏感或微神经瘤的形成，甚至衣服等轻轻触及即感疼痛。发展比较缓慢，大多持续增大，有的疤痕表皮及周边组织发亮，色稍呈白色。极少有自行回缩的现象，偶尔有恶变。疤痕疙瘩好发于胸、肩、颈、背与耳廓，极少见于眼睑、手掌、足跖及外生殖器等部位。虽然疤痕疙瘩较为常见，但是其病因迄今不明，这给治疗带来很大困难。如何抑制纤维细胞的疯狂增殖，防止其复发和继续增长已成为当今医学界的一道难关。目前治疗有如下方法：手术切除、磨削术、激光、放射、局封、冷冻等。单一治疗往往不能取得满意效果且容易使患处更加恶化。如手术切除复发率高，激光、封闭往往疼痛难忍，并出现多种病发症，女性出现月经不调，男性出现阳痿、肥胖等。皮肤磨销、激光、冷冻等不能防止复发，这使许多的病人和医生都感到非常棘手。总之，传统方法创伤大，治疗费用高，易形成二次瘢痕，部分患者即使进行多次治疗仍旧难以获得满意疗效。

疤痕癌发病较少，不在本发明治疗范畴。

本发明的创新之处：尽管目前有毛发移植手术治疗疤痕性脱发的报导，但与本发明在体外毛囊处理上有较大差异。与本发明相比其提取的毛囊分离较干净，未保留皮肤附属器部分的组织，并且未对毛乳头灭活，因此不仅对疤痕的修复较差且不适合光滑皮肤部位的疤痕，会有毛发生长；同时本发明毛囊干细胞经过特殊培养，毛囊干细胞的增殖能力进一步提高，移植后可以改善疤痕组织结构，软化疤痕，促进血液循环。

本发明具有微创、安全、持久等特点，对治疗增生性疤痕疗效更佳，尤其还适用于无毛疤痕的治疗，且无移植毛发生长。毛囊干细胞可以抑制纤维细胞的疯狂增殖，为防止疤痕的复发和继续增长以及治疗提供了一种更有效的微创方法；尤其植入毛囊附属器不仅可以恢复正常皮肤的生理功能，还会减轻疤痕的增生及痒、痛等不适症状。很好的解决了上述背景技术中疤痕治疗中出现的损伤大、恢复时间长、效果不理想、易复发、副作用大等问题。

发明内容

本发明的目的在于提供毛囊干细胞移植术治疗疤痕时离体毛囊的处理方法。采用FUE技术提取并分离出完整的单株毛囊，与毛发移植不同之处在于不仅保留完整的毛囊干细胞，而且保留了尽可能多的皮肤附属器不受损伤，更好的修复疤痕组织，接近于正常皮肤；光滑无毛区的疤痕则切除毛乳头下1/3，使得毛囊无法进入下一个生长周期，疤痕区无终毛生长。放入特殊培养液培养，通过培育，提高毛囊存活率和毛囊干细胞活性，保证术后疗效；达到改善疤痕血供、软化疤痕、有利于毛囊干细胞的生长；实现抑制疤痕增生、软化修复疤痕、去除疤痕、美化疤痕的目的。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

毛囊干细胞移植术治疗疤痕过程中离体毛囊的处理方法，该技术方法包括以下步骤：

步骤S1，毛囊的提取，采用FUE技术提取一个毛囊单位；

步骤S2，毛囊的分离，在电子显微镜下将所述毛囊单位分离出完整的单株毛囊；

步骤S3，毛囊的体外培养，将提取分离的毛囊放入特殊培养液培养、备用，进行培育达到增强毛囊干细胞活性，促进其分化增殖；

步骤S4，毛囊的移植，以毛囊为依托将毛囊种植于疤痕特定区域，促进毛囊干细胞的增殖与分化及组织的形成，实现抑制疤痕增生、软化修复疤痕、去除美化疤痕的目的。

所述步骤S1中采用FUE技术，提取含有毛囊干细胞及毛囊附属器成份的毛囊。

进一步的，所述步骤S2中，提取毛囊单位放在在电子显微镜下分离出单株毛囊，在放大2-10倍的状态下进行分离，并尽可能的保留了提取全部皮肤、皮肤附属器和毛囊干细胞的完备性；无毛区域切除毛乳头下1/3，使得毛囊无法进入下一个生长周期，疤痕区无终毛生长。

进一步的，所述步骤S3中，将步骤S2分离出的完整的单株毛囊，放入特殊培养液培养，在0-4℃培养60分钟以上备用。

进一步的，所述特殊培养液的主要成分为10%的葡萄糖注射液、复方甘草酸苷注射液和地塞米松磷酸钠注射液。

进一步的，所述步骤S4中，毛囊种植要求精准，将培养后的毛囊干细胞以毛囊为依托种植到术前设计好的疤痕特定区域。根据种植与现有技术相比，本发明的有益效果如下：

1、本发明采用在电子显微镜下对提取的毛囊进行分离，避免了分离过程中毛囊受损，在保留毛囊干细胞不受损伤的同时尽可能的保留了皮肤附属器的组织成分，该成分对于皮肤的修复和恢复皮肤功能具有重要意义；光滑无毛区的疤痕则切除毛乳头下1/3，使得毛囊无法进入下一个生长周期，疤痕区无终毛生长；

2、本发明通过毛囊体外培养技术，放入特殊培养液培养，进行培育提高毛囊干细胞存活率，达到改善疤痕血供，软化疤痕，有利于毛囊干细胞的生长；

3、本发明经过提取得到的毛囊干细胞，存在于皮脂腺开口和竖毛肌附着点之间的毛囊隆突部。其具有慢周期性、自我更新能力强、多分化潜能、未分化性、体外增殖能力强等特性。毛囊干细胞属于成体干细胞，在体内处于静止状态，在体内培养和内环境作用下表现出惊人的增殖能力，而体外培养同样具有非常强大的增殖能力。毛囊干细胞具有很高的增殖潜能，在体外培养时呈克隆性生长，可诱导分化为神经元细胞，神经胶质细胞，平滑肌细胞和黑色素细胞等细胞，而植入体内则可分化形成神经元、黑色素细胞和角化细胞等。这些细胞对于疤痕的修复具有重要意义，基于此我们发明了毛囊干细胞体外培养液。研究发现，毛囊干细胞具有多向分化潜能，它可以分化成表皮、毛囊、皮脂腺，参与皮肤创伤愈合的过程。通过临床研究发现我们发明的培养液诱发了毛囊干细胞的增殖潜能，在体外培养时呈克隆性生长明显，相较于现有的毛发移植方法治疗疤痕性脱发疗效更显著。

附图说明

附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的具体实施方式一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。

图1为本发明毛囊干细胞移植治疗疤痕时离体毛囊的处理方法流程图。

具体实施方式

以下结合附图对本发明的优选实施例进行详细说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本发明，并不用于限定本发明。

本发明的技术关键点：分离得到完备的毛囊干细胞和皮肤附属器的组织成分、毛囊的灭活、毛囊干细胞体外培养。

1、采用FUE技术提取并分离出单株毛囊，在电子显微镜下对提取的毛囊进行分离，避免了分离过程中毛囊受损，在保留毛囊干细胞不受损伤的同时尽可能的保留了皮肤附属器的组织；同时光滑无毛区的疤痕则切除毛乳头下1/3，使得毛囊无法进入下一个生长周期，疤痕区无终毛生长；

2、放入特殊培养液培养，主要成分10%葡萄糖注射液、复方甘草酸苷注射液和地塞米松磷酸钠注射液，在0-4℃培养60分钟后以上备用；

实施例一：

步骤S1，毛囊的提取，采用FUE技术提取一个毛囊单位；

步骤S2，毛囊的分离，在电子显微镜下将所述毛囊单位分离出完整的单株毛囊；光滑无毛区的疤痕则切除毛乳头下1/3，使得毛囊无法进入下一个生长周期，疤痕区无终毛生长；

步骤S3，毛囊的体外培养，将提取分离的单株毛囊放入特制培养液培养备用，进行培育达到增强毛囊干细胞活性，促进其分化增殖；

步骤S4，毛囊的移植，以毛囊为依托将毛囊干细胞植入疤痕特定区域，促进毛囊干细胞的增殖与分化及组织的形成，实现抑制疤痕增生、软化修复疤痕、去除美化疤痕的目的。

在本实施例中，所述步骤S1在本实施例中，采用FUE技术，提取1个单位枕部头发或胡须的毛囊。

在本实施例中，所述步骤S2中，采用步骤S1提取毛囊后，在电子显微镜下分离毛囊，在放大2-10倍的状态下进行分离，避免了分离过程中毛囊受损，在保留毛囊干细胞不受损伤的同时尽可能的保留了皮肤附属器的组织成份。光滑无毛区的疤痕则切除毛乳头下1/3，使得毛囊无法进入下一个生长周期，疤痕区无终毛生长。

在本实施例中，所述步骤S3中，采用FUE技术提取并分离出单株毛囊，放入特殊培养液培养，在0-4℃培养60分钟以上备用，其中，所述特殊培养液的主要成分为10%葡萄糖注射液、复方甘草酸苷注射液和地塞米松磷酸钠注射液，通过特殊培养液对提取分离的毛囊进行培育，提高毛囊存活率和增殖能力。

在本实施例中，所述步骤S4中，种植时以毛囊为依托将毛囊干细胞植入疤痕区。

实施例二：

在本实施例中，通过毛囊黑素细胞干细胞移植术治疗疤痕的有效率达到100%以上，本发明经临床对比发现通过对毛囊干细胞移植治疗疤痕时离体毛囊处理之后，疤痕修复时间明显缩短，疗效明显提高。

本发明的技术难点：“毛囊干细胞及皮肤附属器的完整性”是指种植后的毛囊干细胞能否直接存活，关系到后期的治疗效果。而经过特殊分离和体外培养的自体毛囊干细胞，具有慢周期性、自我更新能力强、高增殖能力、多分化潜能等特性，移植后可以持续对疤痕组织进行修复。光滑无毛区的疤痕则切除毛乳头下1/3，使得毛囊无法进入下一个生长周期，疤痕区无终毛生长。

本发明的原理：本发明基于毛囊干细胞体外培养具有慢周期性、自我更新能力强、高增殖能力、多分化潜能等特性。根据所处环境不同，毛囊干细胞可分化为毛囊细胞、皮脂腺细胞、毛囊间表皮细胞等。这些细胞对于皮肤的重构和再生具有重要意义，因此可成功应用于疤痕的修复，治疗各种疤痕。尤其对于增生性疤痕和瘢痕疙瘩疗效显著。光滑无毛区的疤痕则切除毛乳头下1/3，使得毛囊无法进入下一个生长周期，疤痕区无终毛生长。

以上所述仅为本发明的优选实例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.毛囊干细胞移植术治疗疤痕过程中离体毛囊的处理方法，其特征在于，该技术方法包括以下步骤：

步骤S2，毛囊的分离，在电子显微镜下将步骤S1提取的毛囊单位分离出单株毛囊，分离时尽量保留提取到的皮脂腺、汗腺等皮肤附属器的部分组织成份，移植后的毛囊对疤痕组织具有良好的修复作用；光滑无毛区的疤痕则切除毛乳头下1/3，使得毛囊无法进入下一个生长周期，疤痕区无终毛生长；

步骤S3，毛囊的体外培养，将提取分离的单株毛囊放入特殊培养液培养备用，进行培育达到增强毛囊干细胞活性，促进其分化增殖。

2.根据权利要求1所述毛囊干细胞移植术治疗疤痕过程中离体毛囊的处理方法，其特征在于，所述步骤S2毛囊的分离，在电子显微镜下将提取的毛囊单位分离出单株毛囊，分离时不去除皮肤附属器的组织，尽量保留提取到的皮脂腺、汗腺的部分组织成分，该成分对于皮肤的修复和恢复皮肤功能具有重要意义，移植后的毛囊可对疤痕组织进行全面的修复，新生的皮脂腺、汗腺等组织可以解决疤痕组织的痒痛问题；创新之处有二：一是不仅保留了毛囊干细胞，还保留了更多皮肤附属器的部分组织成份，使得修复的疤痕组织具有更多正常皮肤的功能；二是光滑无毛区的疤痕则切除毛乳头下1/3，使得毛囊无法进入下一个生长周期，疤痕区无终毛生长，使得疤痕修复而无毛长出，以上2处正是本发明有别于目前毛发移植治疗疤痕性脱发。

3.根据权利要求1所述的用于毛囊干细胞移植治疗疤痕时离体毛囊的制备方法，其特征在于，所述步骤S3毛囊的体外培养，将提取分离的单株毛囊放入特殊培养液培养备用，进行培育达到增强毛囊干细胞活性，促进其分化增殖，培养液的主要成分为复方甘草酸苷注射液、地塞米松磷酸钠注射液和10%的葡萄糖注射液，我们通过研究发现培养液能够诱发毛囊干细胞的增殖潜能，在体外培养时呈克隆性生长速度明显提高，毛囊干细胞体外培养方法为本发明创新处之三。