CN111134109A - 一种尿液单细胞保存液及其制备方法 - Google Patents

一种尿液单细胞保存液及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明专利公开了一种尿液单细胞保存液及其制备方法，所述尿液保存液的组成部分按照质量百分比计为：氯化钠0.15‑0.27％、甲醛8‑12％、乙醇45‑60％、防腐剂0.1‑1.1％、PH剂1‑2％，余量为蒸馏水，其制备方法包括如下步骤：按照重量份数的配方量称取蒸馏水、氯化钠、甲醛、乙醇、防腐剂和PH剂。本发明专利通过一系列防腐药剂的添加，以及适量的氯化钠，可以保证细胞的稳定性和保持性，而且能避免细菌滋生，有效延长尿液保存时间，解决了目前的尿液保存液对细胞组织的稳定和保持性不佳，而且保存的持续性不够长久，同时保存期间细菌容易滋生，影响对尿液检验判断的问题，既提高了保存液的实用性，同时也使得尿液数据的判断更加精确。

Description

一种尿液单细胞保存液及其制备方法
技术领域
本发明专利涉及细胞保存液技术领域，具体为一种尿液单细胞保存液及其制备方法。
背景技术
尿液检查是临床最常见的检查项目，广泛应用于健康体检和疾病筛查与诊断。尿液标本的采集和保存的正确与否，直接关系到尿液检查的结果，而尿液检查结果的准确性又直接关系到医疗质量的好坏，尿液中许多有形成分及化学物质，一经排出即开始发生许多物理和化学变化，如尿胆原、尿胆红素被氧化，细菌生长可导致尿PH值升高，有形成分破坏，葡萄糖被细菌降解，使病理性糖尿消失，菌体蛋白和病理性蛋白相互干扰。故尿液标本留取后应尽早送检，最好到医院后留取并立即送检，不要超过30分钟。
目前的尿液保存液对细胞组织的稳定和保持性不佳，而且保存的持续性不够长久，同时保存期间细菌容易滋生，影响对尿液检验的判断，为此提出一种可以保证细胞的稳定性和保持性，而且能避免细菌滋生，有效延长尿液保存时间的保存液来解决此问题。
发明专利内容
本发明专利的目的在于提供一种尿液单细胞保存液及其制备方法，具备可以保证细胞的稳定性和保持性，而且能避免细菌滋生，有效延长尿液保存时间的优点，解决了目前的尿液保存液对细胞组织的稳定和保持性不佳，而且保存的持续性不够长久，同时保存期间细菌容易滋生，影响对尿液检验判断的问题。
为实现上述目的，本发明专利提供如下技术方案：一种尿液单细胞保存液，所述尿液保存液的组成部分按照质量百分比计为：氯化钠0.15-0.27％、甲醛8-12％、乙醇45-60％、防腐剂0.1-1.1％、PH剂1-2％，余量为蒸馏水。
优选的，所述尿液保存液按重量份数包括如下组成部分：氯化钠0.21份、甲醛10份、乙醇52.5份、防腐剂0.6份、PH剂1.5份，余量为蒸馏水。
一种尿液单细胞保存液的制备方法，其制备方法包括如下步骤：
(1)配方称重：按照重量份数的配方量称取蒸馏水、氯化钠、甲醛、乙醇、防腐剂和PH剂；
(2)配方混合：将步骤(1)中的蒸馏水导入混合容器中，随后加入配方量的氯化钠、甲醛和乙醇，充分搅拌使得氯化钠完全溶解后，得到混合溶液A；
(3)防腐处理：向步骤(2)中所得到的混合溶液A中添加配方量的防腐剂，充分搅拌后，得到混合溶液B；
(4)PH调节：向步骤(3)中所得到的混合溶液B中添加配方量的PH剂，充分搅拌后，得到混合溶液C；
(5)过滤保存：将步骤(4)中所得到的混合溶液C通过过滤膜进行过滤，最终在适宜条件下进行保存。
优选的，所述步骤(1)中，甲醛的质量浓度为10％，乙醇的质量浓度为95％。
优选的，所述步骤(1)中，10％质量浓度的甲醛分别通过40％的甲醛溶液120ml、蒸馏水880ml、磷酸二氢钠4g以及磷酸氢二钠17g充分混合制备而成。
优选的，所述步骤(1)中，95％质量浓度的乙醇通过选取无水乙醇950ml以及用于配比的50ml水充分混合制备而成。
优选的，所述步骤(2)中，在混合溶液时，制备环境的湿度为45-75RH％，制备环境的温度为25-30℃。
优选的，所述步骤(3)中，除取甲醛以外，所添加的防腐剂可以为甲苯、二甲苯溶液或麝香草酚晶体，且甲苯或二甲苯按照每100ml溶液0.5-1ml的量进行添加，麝香草酚晶体按照每100ml溶液0.1g的量进行添加。
优选的，所述步骤(4)中，PH剂的酸性成分可选用柠檬酸或山梨酸，PH剂的碱性成分可选用碳酸氢钠或磷酸氢二钠，且混合溶液C调节后的PH值为6.8-7.5。
优选的，所述步骤(5)中，过滤膜的孔径为0.22μm，保存的适宜温度为4℃，且在避光的环境下保存。
与现有技术相比，本发明专利的有益效果如下：
本发明专利通过一系列防腐药剂的添加，以及适量的氯化钠，可以保证细胞的稳定性和保持性，而且能避免细菌滋生，有效延长尿液保存时间，解决了目前的尿液保存液对细胞组织的稳定和保持性不佳，而且保存的持续性不够长久，同时保存期间细菌容易滋生，影响对尿液检验判断的问题，既提高了保存液的实用性，同时也使得尿液数据的判断更加精确。
具体实施方式
下面将结合本发明专利中的实施例，对本发明专利实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明专利一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明专利中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明专利保护的范围。
一种尿液单细胞保存液及其制备方法，尿液保存液的组成部分按照质量百分比计为：氯化钠0.15-0.27％、甲醛8-12％、乙醇45-60％、防腐剂0.1-1.1％、PH剂1-2％，余量为蒸馏水，尿液保存液按重量份数包括如下组成部分：氯化钠0.21份、甲醛10份、乙醇52.5份、防腐剂0.6份、PH剂1.5份，余量为蒸馏水，其制备方法包括如下步骤：
(1)配方称重：按照重量份数的配方量称取蒸馏水、氯化钠、甲醛、乙醇、防腐剂和PH剂；
(2)配方混合：将步骤(1)中的蒸馏水导入混合容器中，随后加入配方量的氯化钠、甲醛和乙醇，充分搅拌使得氯化钠完全溶解后，得到混合溶液A；
(3)防腐处理：向步骤(2)中所得到的混合溶液A中添加配方量的防腐剂，充分搅拌后，得到混合溶液B；
(4)PH调节：向步骤(3)中所得到的混合溶液B中添加配方量的PH剂，充分搅拌后，得到混合溶液C；
(5)过滤保存：将步骤(4)中所得到的混合溶液C通过过滤膜进行过滤，最终在适宜条件下进行保存。
实施例一：
一种尿液单细胞保存液及其制备方法，尿液保存液的组成部分按照质量百分比计为：氯化钠0.15-0.27％、甲醛8-12％、乙醇45-60％、防腐剂0.1-1.1％、PH剂1-2％，余量为蒸馏水，尿液保存液按重量份数包括如下组成部分：氯化钠0.21份、甲醛10份、乙醇52.5份、防腐剂0.6份、PH剂1.5份，余量为蒸馏水，其制备方法包括如下步骤：
(1)配方称重：按照重量份数的配方量称取蒸馏水、氯化钠、甲醛、乙醇、防腐剂和PH剂，甲醛的质量浓度为10％，乙醇的质量浓度为95％，10％质量浓度的甲醛分别通过40％的甲醛溶液120ml、蒸馏水880ml、磷酸二氢钠4g以及磷酸氢二钠17g充分混合制备而成，95％质量浓度的乙醇通过选取无水乙醇950ml以及用于配比的50ml水充分混合制备而成，经过95％质量浓度乙醇固定的标本，可以使细胞核保存较好，而且结构清晰，颜色鲜艳，10％质量浓度的中性缓冲甲醛液对大多数抗原保存较好，是免疫组织化学最常用的固定液，组织穿透好，组织收缩较小，细胞、管型等有形成分保存较好；
(2)配方混合：将步骤(1)中的蒸馏水导入混合容器中，随后加入配方量的氯化钠、甲醛和乙醇，充分搅拌使得氯化钠完全溶解后，得到混合溶液A；
(3)防腐处理：向步骤(2)中所得到的混合溶液A中添加配方量的防腐剂，充分搅拌后，得到混合溶液B；
(4)PH调节：向步骤(3)中所得到的混合溶液B中添加配方量的PH剂，充分搅拌后，得到混合溶液C；
(5)过滤保存：将步骤(4)中所得到的混合溶液C通过过滤膜进行过滤，最终在适宜条件下进行保存。
实施例二：
一种尿液单细胞保存液及其制备方法，尿液保存液的组成部分按照质量百分比计为：氯化钠0.15-0.27％、甲醛8-12％、乙醇45-60％、防腐剂0.1-1.1％、PH剂1-2％，余量为蒸馏水，尿液保存液按重量份数包括如下组成部分：氯化钠0.21份、甲醛10份、乙醇52.5份、防腐剂0.6份、PH剂1.5份，余量为蒸馏水，其制备方法包括如下步骤：
(1)配方称重：按照重量份数的配方量称取蒸馏水、氯化钠、甲醛、乙醇、防腐剂和PH剂，甲醛的质量浓度为10％，乙醇的质量浓度为95％，10％质量浓度的甲醛分别通过40％的甲醛溶液120ml、蒸馏水880ml、磷酸二氢钠4g以及磷酸氢二钠17g充分混合制备而成，95％质量浓度的乙醇通过选取无水乙醇950ml以及用于配比的50ml水充分混合制备而成，经过95％质量浓度乙醇固定的标本，可以使细胞核保存较好，而且结构清晰，颜色鲜艳，10％质量浓度的中性缓冲甲醛液对大多数抗原保存较好，是免疫组织化学最常用的固定液，组织穿透好，组织收缩较小，细胞、管型等有形成分保存较好；
(2)配方混合：将步骤(1)中的蒸馏水导入混合容器中，随后加入配方量的氯化钠、甲醛和乙醇，充分搅拌使得氯化钠完全溶解后，得到混合溶液A，在混合溶液时，制备环境的湿度为45-75RH％，制备环境的温度为25-30℃，此环境有利于溶液的混合，而且氯化钠的适量加入，使保存液达到合适的浓度，当细胞样品加入后，可维持有效细胞的渗透压，有助于使有效细胞保持原始的状态，不易使细胞形态、细胞核形态发生变化；
(3)防腐处理：向步骤(2)中所得到的混合溶液A中添加配方量的防腐剂，充分搅拌后，得到混合溶液B，除取甲醛以外，所添加的防腐剂可以为甲苯、二甲苯溶液或麝香草酚晶体，且甲苯或二甲苯按照每100ml溶液0.5-1ml的量进行添加，麝香草酚晶体按照每100ml溶液0.1g的量进行添加，甲苯可防止细菌生长，对化学成分的测定比较适宜，麝香草酚晶体为检查尿中化学成分而需抑制细菌生长的防腐剂，其能做到对细菌繁殖的有效抑制；
(4)PH调节：向步骤(3)中所得到的混合溶液B中添加配方量的PH剂，充分搅拌后，得到混合溶液C；
(5)过滤保存：将步骤(4)中所得到的混合溶液C通过过滤膜进行过滤，最终在适宜条件下进行保存。
实施例三：
一种尿液单细胞保存液及其制备方法，尿液保存液的组成部分按照质量百分比计为：氯化钠0.15-0.27％、甲醛8-12％、乙醇45-60％、防腐剂0.1-1.1％、PH剂1-2％，余量为蒸馏水，尿液保存液按重量份数包括如下组成部分：氯化钠0.21份、甲醛10份、乙醇52.5份、防腐剂0.6份、PH剂1.5份，余量为蒸馏水，其制备方法包括如下步骤：
(1)配方称重：按照重量份数的配方量称取蒸馏水、氯化钠、甲醛、乙醇、防腐剂和PH剂，甲醛的质量浓度为10％，乙醇的质量浓度为95％，10％质量浓度的甲醛分别通过40％的甲醛溶液120ml、蒸馏水880ml、磷酸二氢钠4g以及磷酸氢二钠17g充分混合制备而成，95％质量浓度的乙醇通过选取无水乙醇950ml以及用于配比的50ml水充分混合制备而成，经过95％质量浓度乙醇固定的标本，可以使细胞核保存较好，而且结构清晰，颜色鲜艳，10％质量浓度的中性缓冲甲醛液对大多数抗原保存较好，是免疫组织化学最常用的固定液，组织穿透好，组织收缩较小，细胞、管型等有形成分保存较好；
(2)配方混合：将步骤(1)中的蒸馏水导入混合容器中，随后加入配方量的氯化钠、甲醛和乙醇，充分搅拌使得氯化钠完全溶解后，得到混合溶液A，在混合溶液时，制备环境的湿度为45-75RH％，制备环境的温度为25-30℃，此环境有利于溶液的混合，而且氯化钠的适量加入，使保存液达到合适的浓度，当细胞样品加入后，可维持有效细胞的渗透压，有助于使有效细胞保持原始的状态，不易使细胞形态、细胞核形态发生变化；
(3)防腐处理：向步骤(2)中所得到的混合溶液A中添加配方量的防腐剂，充分搅拌后，得到混合溶液B，除取甲醛以外，所添加的防腐剂可以为甲苯、二甲苯溶液或麝香草酚晶体，且甲苯或二甲苯按照每100ml溶液0.5-1ml的量进行添加，麝香草酚晶体按照每100ml溶液0.1g的量进行添加，甲苯可防止细菌生长，对化学成分的测定比较适宜，麝香草酚晶体为检查尿中化学成分而需抑制细菌生长的防腐剂，其能做到对细菌繁殖的有效抑制；
(4)PH调节：向步骤(3)中所得到的混合溶液B中添加配方量的PH剂，充分搅拌后，得到混合溶液C，PH剂的酸性成分可选用柠檬酸或山梨酸，PH剂的碱性成分可选用碳酸氢钠或磷酸氢二钠，且混合溶液C调节后的PH值为6.8-7.5，pH值保持在较为稳定的6.8-7.5的范围内，有助于细胞样品处于合适的pH环境下，保证尿液的生物活性；
(5)过滤保存：将步骤(4)中所得到的混合溶液C通过过滤膜进行过滤，最终在适宜条件下进行保存，过滤膜的孔径为0.22μm，保存的适宜温度为4℃，且在避光的环境下保存。
尽管已经示出和描述了本发明专利的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明专利的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明专利的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (10)

1.一种尿液单细胞保存液，其特征在于：所述尿液保存液的组成部分按照质量百分比计为：氯化钠0.15-0.27％、甲醛8-12％、乙醇45-60％、防腐剂0.1-1.1％、PH剂1-2％，余量为蒸馏水。
2.根据权利要求1所述的一种尿液单细胞保存液，其特征在于：所述尿液保存液按重量份数包括如下组成部分：氯化钠0.21份、甲醛10份、乙醇52.5份、防腐剂0.6份、PH剂1.5份，余量为蒸馏水。
3.根据权利要求1-2任意一项所述的一种尿液单细胞保存液的制备方法，其特征在于：其制备方法包括如下步骤：
(1)配方称重：按照重量份数的配方量称取蒸馏水、氯化钠、甲醛、乙醇、防腐剂和PH剂；
(2)配方混合：将步骤(1)中的蒸馏水导入混合容器中，随后加入配方量的氯化钠、甲醛和乙醇，充分搅拌使得氯化钠完全溶解后，得到混合溶液A；
(3)防腐处理：向步骤(2)中所得到的混合溶液A中添加配方量的防腐剂，充分搅拌后，得到混合溶液B；
(4)PH调节：向步骤(3)中所得到的混合溶液B中添加配方量的PH剂，充分搅拌后，得到混合溶液C；
(5)过滤保存：将步骤(4)中所得到的混合溶液C通过过滤膜进行过滤，最终在适宜条件下进行保存。
4.根据权利要求3所述的一种尿液单细胞保存液的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中，甲醛的质量浓度为10％，乙醇的质量浓度为95％。
5.根据权利要求4所述的一种尿液单细胞保存液的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中，10％质量浓度的甲醛分别通过40％的甲醛溶液120ml、蒸馏水880ml、磷酸二氢钠4g以及磷酸氢二钠17g充分混合制备而成。
6.根据权利要求4所述的一种尿液单细胞保存液的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中，95％质量浓度的乙醇通过选取无水乙醇950ml以及用于配比的50ml水充分混合制备而成。
7.根据权利要求3所述的一种尿液单细胞保存液的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中，在混合溶液时，制备环境的湿度为45-75RH％，制备环境的温度为25-30℃。
8.根据权利要求3所述的一种尿液单细胞保存液的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中，除取甲醛以外，所添加的防腐剂可以为甲苯、二甲苯溶液或麝香草酚晶体，且甲苯或二甲苯按照每100ml溶液0.5-1ml的量进行添加，麝香草酚晶体按照每100ml溶液0.1g的量进行添加。
9.根据权利要求3所述的一种尿液单细胞保存液的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)中，PH剂的酸性成分可选用柠檬酸或山梨酸，PH剂的碱性成分可选用碳酸氢钠或磷酸氢二钠，且混合溶液C调节后的PH值为6.8-7.5。
10.根据权利要求3所述的一种尿液单细胞保存液的制备方法，其特征在于：所述步骤(5)中，过滤膜的孔径为0.22μm，保存的适宜温度为4℃，且在避光的环境下保存。
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