CN110959527B - 一种秋水仙素处理杜梨种子胚根诱导四倍体的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种秋水仙素处理杜梨种子胚根诱导四倍体的方法,涉及杜梨育苗技术领域。即对杜梨种子进行沙藏处理以打破休眠,种子露白0.5cm时用0.4%秋水仙素溶液浸泡处理24h,播种后形成苗木,对苗木进行倍性鉴定,确定四倍体植株。采用上述诱导方法,提高了诱导四倍体植株的效率,并且方法简便易行。
Description
技术领域
本发明涉及一种秋水仙素处理杜梨种子胚根诱导四倍体的方法。
背景技术
杜梨 (Pyrus betulifolia Bunge) 是我国使用最广泛的梨砧木,具有适应性强、抗逆性强等优点,但嫁接后树体高大,在矮化密植栽培上的利用具有一定的难度。而生产上的多倍体多表现节间长度短,生长缓慢等优良矮生性状;再者果树在适当多倍化后,一般具有适应性和抗逆性增强的特点。因此,非常有必要进行杜梨四倍体诱导,既可进行适应性和抗逆性性状改良,又可为获得具有矮化效应的杜梨砧木提供材料。因此,进行杜梨四倍体诱导对梨产业发展具有重要意义。
针对上述问题,本发明用秋水仙素溶液对已萌芽露出胚根的杜梨种子进行浸泡处理,使其在细胞分裂期进行染色体加倍进而得到四倍体杜梨植株,本方法简便易行,诱导效果较好。
发明内容
本发明建立了一种秋水仙素处理杜梨种子胚根诱导四倍体的方法。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:对杜梨种子进行沙藏处理以打破休眠,催芽处理后用秋水仙素溶液浸泡处理,播种后形成苗木,对苗木进行倍性鉴定,确定四倍体植株。
本发明的具体内容,即一种秋水仙素浸泡杜梨种子人工诱导四倍体的方法如下:
1.沙藏:杜梨种子用清水浸泡8小时后,将种子与细河沙以1:3的比例混匀,河沙的湿度以手握成团松手即散为宜,装入塑料袋中,置于0-4℃的冰箱,每隔5天翻动一次,沙藏20天。
2.筛选:将沙藏种子用清水冲洗干净,去掉杂质,将质量不好的种子剔除,选取饱满活力强的种子待用。
3.催芽:以2层滤纸作为种子发芽床,发芽温度控制在25℃,用湿毛巾盖上种子,每天进行洒水保证足够水分。
4.浸泡:将露白0.5cm左右的种子用秋水仙素浸泡,浓度为0.4%,处理时间为24h。待秋水仙素浸泡结束后用蒸馏水冲洗3次,解除药液作用。
5.播种:将种子进行穴盘播种,基质为草炭土,每个穴盘杯播1粒种子,播种深度约2cm,并用塑料薄膜覆盖穴盘,以保持基质水分。培养温度为25℃,空气湿度为60%。
6.检测:通过流式细胞仪鉴定法对成苗进行植株倍性鉴定。
本发明专利的有益效果是:采用上述诱导方法,提高了诱导四倍体植株的效率,并且方法简便易行。
具体实施方式
2017年3月24日对杜梨种子进行沙藏,2017年4月12日进行筛选、催芽处理,一周后将种子浸泡到0.4%的秋水仙素溶液中24h后,用蒸馏水清洗3次之后播种,长成苗木后,用流式细胞仪检测植株倍性。诱导效果表明:浓度为0.4%的秋水仙素浸泡杜梨种子24h后,四倍体诱导率为6.67%,且无嵌合体植株。
Claims (1)
1.一种秋水仙素处理杜梨种子胚根诱导四倍体的方法,其特征在于包括以下几个步骤:
(1)沙藏:杜梨种子用清水浸泡8小时后,将种子与细河沙以1:3的比例混匀,河沙的湿度以手握成团松手即散为宜,装入塑料袋中,置于0-4℃的冰箱,每隔5天翻动一次,沙藏20天;(2)筛选:将沙藏种子用清水冲洗干净,去掉杂质,将质量不好的种子剔除,选取饱满活力强的种子待用;(3)催芽:以2层滤纸作为种子发芽床,发芽温度控制在25℃,用湿毛巾盖上种子,每天进行洒水保证足够水分;(4)浸泡:将露白0.5cm左右的种子用秋水仙素浸泡,浓度为0.4%,处理时间为24h,待秋水仙素浸泡结束后用蒸馏水冲洗3次,解除药液作用;(5)播种:将种子进行穴盘播种,基质为草炭土,每个穴盘杯播1粒种子,播种深度约2cm,并用塑料薄膜覆盖穴盘,以保持基质水分,培养温度为25℃,空气湿度为60%;(6)检测:通过流式细胞仪鉴定法对成苗进行植株倍性鉴定。
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