CN110839596B - 一种利用烟蚜茧蜂繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属农业害虫生物防治技术领域，具体涉及一种利用烟蚜茧蜂作为二级寄主人工繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法。本发明方法包括以下步骤：寄主植物的培育；初级寄主烟粉虱、烟蚜的培育；二级寄主的培育；母代浅黄恩蚜小蜂的准备；浅黄恩蚜小蜂雄蜂的繁育。本发明利用蚜虫的天敌昆虫烟蚜茧蜂幼虫作为浅黄恩蚜小蜂繁殖雄蜂的替代二级寄主，相比之前二级寄主，利用该二级寄主所繁的浅黄恩蚜小蜂雄蜂个体显著增大，寿命显著延长且生殖力显著提高，实现浅黄恩蚜小蜂雄蜂的优质、高效生产，对烟粉虱具有更好的生防效果。
Description
技术领域
本发明属农业害虫生物防治技术领域，具体涉及一种利用烟蚜茧蜂繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法。
背景技术
烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)被IUCN列为全球100种最具威胁的入侵种之一，在世界各地广泛传播与蔓延，每年造成的经济损失达数十亿美元，其几乎遍及我国所有省份。烟粉虱不仅可以直接取食危害，还可以分泌蜜露诱发霉污病，同时传播多种植物病毒病害。化学农药的长期不合理使用造成烟粉虱的抗药性迅速增加，单纯依靠化学农药已难以有效控制烟粉虱，因此，生物防治烟粉虱的的重要性不断突显。浅黄恩蚜小蜂Encarsiasophia是烟粉虱的优势寄生蜂，在我国广泛分布。该蜂为单寄生性内寄生蜂，且生殖方式为兼性自复寄生，交配后的雌蜂寄生于初级寄主烟粉虱若虫，而未交配雌蜂只能复寄生二级寄主，即将未受精卵产在同种或异种寄生蜂幼虫上，发育为雄蜂。因此，只有交配后的雌蜂才能对烟粉虱发挥防控作用。
浅黄恩蚜小蜂独特的生殖方式使其在田间及温室释放时，一定比例的雄蜂将会在烟粉虱的防治中发挥重要作用。而利用海氏桨角蚜小蜂或其他二级寄主繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂时，所生产的雄蜂寿命短且一生交配次数少，导致其生殖力较低，不能提供雌蜂充足的精子，使得雌蜂在产尽体内受精卵后无法寄生烟粉虱，从而严重影响了浅黄恩蚜小蜂对烟粉虱的防控效果。
发明内容
本发明的目的在于提供一种利用烟蚜茧蜂繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法。
根据本发明具体实施方式的利用烟蚜茧蜂繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法，所述方法包括以下步骤：
(1)培育寄主植物棉花、烟草；
(2)培养初级寄主烟粉虱、烟蚜：
将步骤(1)培育的棉花植株接入烟粉虱，然后移除烟粉虱成虫，当烟粉虱若虫发育至3-4龄时备用；
将烟蚜接入步骤(1)培育的烟草上培养，当烟蚜若虫发育至2-3龄时备用；
(3)培养二级寄主：
将带2-3龄烟蚜若虫的烟苗植株接入烟蚜茧蜂成蜂，然后移除烟蚜茧蜂成蜂，当烟蚜茧蜂发育至僵蚜1-3日龄时，用于浅黄恩蚜小蜂雄蜂的繁殖；
(4)繁殖母代浅黄恩蚜小蜂：
将带有3-4龄烟粉虱若虫的棉花植株接入已交配的浅黄恩蚜小蜂雌蜂，然后移除浅黄恩蚜小蜂雌蜂，继续培养并采集初羽化的未交配的浅黄恩蚜小蜂雌蜂，用于寄生二级寄主以生产浅黄恩蚜小蜂的雄蜂；
(5)繁殖浅黄恩蚜小蜂雄蜂：
向步骤(3)中培育的具有僵蚜期的烟蚜茧蜂烟草植株接入步骤(4)中所采集的初羽化浅黄恩蚜小蜂雌蜂，然后移除浅黄恩蚜小蜂雌蜂，收集浅黄恩蚜小蜂雄蜂，其中，接蜂数量为浅黄恩蚜小蜂雌蜂：烟蚜茧蜂僵蚜≥3：1。
本发明中浅黄恩蚜小蜂雌蜂：烟蚜茧蜂僵蚜≥3：1，减少了二级寄主的使用数量，因此，可在二级寄主数量较低时，达到快速繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂的目的。
根据本发明具体实施方式的利用烟蚜茧蜂繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法，步骤(1)中，将棉花培育至3-4片真叶时备用，将烟草培育至2-3片真叶时备用。
根据本发明具体实施方式的利用烟蚜茧蜂繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法，步骤(2)培养烟粉虱时，接入烟粉虱24h后，移除烟粉虱。
根据本发明具体实施方式的利用烟蚜茧蜂繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法，步骤(3)培养烟蚜二级寄主时，接入烟蚜茧成蜂48h后，移除烟蚜茧成蜂。
根据本发明具体实施方式的利用烟蚜茧蜂繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法，步骤(4)繁殖母代浅黄恩蚜小蜂时，接入已交配的浅黄恩蚜小蜂雌蜂48h后，移除浅黄恩蚜小蜂雌蜂。
根据本发明具体实施方式的利用烟蚜茧蜂繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法，步骤(5)繁殖浅黄恩蚜小蜂雄蜂时，接入初羽化未交配的浅黄恩蚜小蜂雌蜂72h后，移除浅黄恩蚜小蜂雌蜂。
根据本发明具体实施方式的利用烟蚜茧蜂繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法，步骤(2)中，每片烟草叶子上接入烟蚜的数量为500-600头，培养条件为温度26±2℃、RH65％±5％、L:D＝14:10。
本发明的有益效果：
本发明利用利用烟蚜茧蜂作为浅黄恩蚜小蜂的二级寄主，所生产的浅黄恩蚜小蜂雄蜂个体较大、寿命延长、交配次数增加，生殖力显著增强，单头雄蜂所对应雌蜂的寄生量显著增加，使得其在对烟粉虱的防控中效果明显提升。
附图说明
图1显示烟蚜茧蜂僵蚜被浅黄恩蚜小蜂复寄生情况；
图2显示烟蚜茧蜂僵蚜被浅黄恩蚜小蜂复寄生的窗口期；
图3显示不同类型二级寄主被浅黄恩蚜小蜂复寄生所繁雄蜂的大小，其中，A为二级寄主海氏桨角蚜小蜂，B为二级寄主棉短瘤蚜茧蜂，C为二级寄主烟蚜茧蜂。
具体实施方式
供试昆虫
寄主昆虫：B型烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)；
寄生蜂：浅黄恩蚜小蜂Encarsia sophia(Girault&Dodd)；烟蚜茧蜂Aphidiusgifuensis(Ashmead)；棉短瘤蚜茧蜂Trioxys rietscheli(Mackauer)；海氏桨角蚜小蜂Eretmocerus hayati(Zolnerowich&Rose)。
供试寄主植物
棉花Gossypium spp河北中创农科种业科技有限公司，新科8号)、烟草(河北中创农科种业科技有限公司，亚布力旱烟种子)。
盆栽棉花生长至4片真叶、烟叶2片真叶时备用。
实施例1以烟蚜茧蜂为二级寄主大量繁殖浅黄恩蚜小蜂雄蜂
(1)寄主植物棉花、烟草的培育
将棉花、烟草种子播种于放有营养基质的育苗盘中进行培养，1粒种子/穴，所述营养基质由蛭石:花卉营养土和土组成；蛭石:花卉营养土:土的体积比为1-1.5:2-4:3-5；定期查看棉花、烟草种子萌发和幼苗长势，保持育苗盘内营养基质的湿度。待幼苗植株长至1-2片真叶移栽至放有营养基质的营养杯中进行培养，1株/杯，待棉花幼苗植株长至3-4片真叶、烟苗植株长至1-2片真叶时备用.
所述寄主植物的培育在光照充足、环境条件可控的温室内进行，保证无任何病虫害的污染，温度26±2℃，相对湿度70-75％，光照明暗度为L:D＝14:10。
(2)初级寄主烟粉虱、烟蚜的培育
将3株棉花植株放入烟粉虱接虫室内配有培养皿底座的接虫笼(规格25cm×25cm×40cm)中，每笼内放置1株棉花植株，每笼按1:1的雌雄比例接入200-300头烟粉虱成虫。24h后，抽检叶背的卵数，当叶背平均卵量高于300粒时，收卵结束，并将具烟粉虱卵的甜瓜植株转入养虫室内继续培养。14d后，当烟粉虱若虫发育至3-4龄时备用。
将培养好的烟草植株放入烟蚜接虫室内养虫架的养虫笼内，(规格25cm×25cm×40cm)中，每笼内放置1株烟草植株，每片叶子接入1龄烟蚜500-600头，3-4d后，待烟蚜若虫发育至2-3龄时备用。培养温度26±2℃、RH65％±5％、L:D＝14:10。
(3)二级寄主的培育
将10株载有2-3龄烟蚜若虫的植株移入繁蜂室中配有蓝色塑料盒的养虫笼(规格60cm×60cm×60cm)，接入烟蚜茧蜂，30对/株，48h后去除烟蚜茧蜂成蜂(用吹风机吹落小蜂并保留在养虫笼内，供新接入的植株用)，并将寄主植物转入烟蚜茧蜂发育室内的养虫笼中。3d后，检查烟蚜茧蜂的发育进度，当发育至2-3日龄僵蚜阶段时备用。培养温度26±2℃、RH65％±5％、L:D＝14:10。
(4)母代浅黄恩蚜小蜂的准备
将3株载有3-4龄烟粉虱若虫的植株移入繁蜂室中配有蓝色塑料盒的养虫笼(规格同上)，接入已交配的浅黄恩蚜小蜂雌蜂30头/株，48h后去除浅黄恩蚜小蜂雌蜂(用吹风机吹落小蜂并保留在养虫笼内，供新接入的植株用)，并将植株转入浅黄恩蚜小蜂发育室内的养虫笼中。
13-16d后，采集初羽化的未交配的浅黄恩蚜小蜂雌蜂，约可生产5000头雌蜂，这些雌蜂用于寄生二级寄主来生产浅黄恩蚜小蜂的雄蜂。培养温度26±2℃、RH65％±5％、L:D＝14:10。
(5)浅黄恩蚜小蜂雄蜂的繁育
将上述(3)步骤中备用的载有适龄二级寄主(僵蚜期的烟蚜茧蜂)的烟草植株移入繁蜂室中配有蓝色塑料盒的养虫笼内，同时将上述(4)步骤中所采集的初羽化(<24h)浅黄恩蚜小蜂雌蜂接入，接蜂数量为浅黄恩蚜小蜂：二级寄主≥3：1，48h后去除浅黄恩蚜小蜂。
5d后开始镜检烟蚜茧蜂的发育进度，去除未被寄生的僵蚜，采摘植株叶片，制作蜂卡，包装储藏或直接与雌蜂应用于田间释放。
实施例2比较浅黄恩蚜小蜂寄生不同二级寄主所繁雄蜂的生殖力
1.供试昆虫
寄主昆虫：B型烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)
寄生蜂：浅黄恩蚜小蜂Encarsia sophia(Girault&Dodd)；烟蚜茧蜂Aphidiusgifuensis(Ashmead)；棉短瘤蚜茧蜂Trioxys rietscheli(Mackauer)；海氏桨角蚜小蜂Eretmocerus hayati(Zolnerowich&Rose)。
2.供试寄主植物
棉花Gossypium spp(河北中创农科种业科技有限公司，新科8号)。盆栽棉花生长至4片真叶时备用。
3.实验方法
(1)取载有50头2-3龄烟蚜若虫的烟苗放入养虫笼中，接入5对烟蚜茧蜂成蜂，48h后移除，待僵蚜发育至2日龄时，接入30头初羽化未交配浅黄恩蚜小蜂雌蜂，24h后移除，复寄生情况如图1所示。
取载有50头2-3龄棉蚜若虫的棉花苗放入养虫笼中，接入5对棉短瘤蚜茧蜂成蜂，48h后移除，待僵蚜发育至2日龄时，接入30头初羽化未交配浅黄恩蚜小蜂雌蜂，24h后移除。
取载有3龄烟粉虱若虫的棉花苗放入养虫笼中，接入5对海氏桨角蚜小蜂成蜂，48h后移除，待海氏桨角蚜小蜂发育至三龄若虫-预蛹阶段，接入30头初羽化未交配浅黄恩蚜小蜂雌蜂，24h后移除。
每日镜检浅黄恩蚜小蜂雄蜂发育进度，记录羽化前期发育时间。
(2)待羽化出浅黄恩蚜小蜂雄蜂时，将初羽化雄蜂移至培养皿中(d＝3.5cm)，在一定时间间隔下(0、0.5、1、2h)为其提供初羽化未交配雌蜂，统计交配次数；为雄蜂提供5％蜂蜜水并每天更换，观察雄蜂寿命；将交配后的雌蜂提供带有适龄初级寄主(3龄烟粉虱若虫)的培养基叶碟，每天更换，7天后统计黑蛹数量，即总寄生量。重复≥20组。
上述试验均在标准的人工气候室内进行(26-28℃，60-70％R.H.和14:10L:D)。
表1浅黄恩蚜小蜂复寄生不同二级寄主所繁雄蜂发育时间
如表1及图2所示，在繁殖浅黄恩蚜小蜂雄蜂时，所利用的三种二级寄主的初级寄主及被复寄生窗口期均有差异，且因蚜虫发育时间短于烟粉虱，因此，相比利用寄主为烟粉虱的海氏桨角蚜小蜂，利用寄主为蚜虫的蚜茧蜂作为二级寄主，可缩短生产浅黄恩蚜小蜂的总时间。
表2浅黄恩蚜小蜂复寄生不同二级寄主所繁雄蜂生殖力差异
如表2、图3所示，浅黄恩蚜小蜂利用烟蚜茧蜂作为二级寄主所繁雄蜂，相比利用海氏桨角蚜小蜂、棉短瘤蚜茧蜂为二级寄主所繁的雄蜂，不但个体较大，而且其生殖力显著增强，寿命可延长2倍，一生交配次数可增加5倍，且交配后的雌蜂对烟粉虱的寄生量显著增多，对烟粉虱的防治效果可提升约4倍。
Claims (7)
1.利用烟蚜茧蜂繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
(1)培育寄主植物棉花、烟草；
(2)培养初级寄主烟粉虱、烟蚜：
将步骤(1)培育的棉花植株接入烟粉虱，然后移除烟粉虱成虫，当烟粉虱若虫发育至3-4龄时备用；
将烟蚜接入步骤(1)培育的烟草上培养，当烟蚜若虫发育至2-3龄时备用；
(3)培养二级寄主：
将带2-3龄烟蚜若虫的烟草植株接入烟蚜茧蜂成蜂，然后移除烟蚜茧蜂成蜂，当烟蚜茧蜂发育至僵蚜1-3日龄时，用于浅黄恩蚜小蜂雄蜂的繁殖；
(4)繁殖母代浅黄恩蚜小蜂：
将带有3-4龄烟粉虱若虫的棉花植株接入已交配的浅黄恩蚜小蜂雌蜂，然后移除浅黄恩蚜小蜂雌蜂，继续培养并采集初羽化的未交配的浅黄恩蚜小蜂雌蜂，用于寄生二级寄主以生产浅黄恩蚜小蜂的雄蜂；
(5)繁殖浅黄恩蚜小蜂雄蜂：
向步骤(3)中培养的具有僵蚜期烟蚜茧蜂的烟草植株接入步骤(4)中所采集的初羽化的未交配的浅黄恩蚜小蜂雌蜂，然后移除浅黄恩蚜小蜂雌蜂，收集浅黄恩蚜小蜂雄蜂，其中，接蜂数量为浅黄恩蚜小蜂雌蜂：烟蚜茧蜂僵蚜≥3：1。
2.根据权利要求1所述的利用烟蚜茧蜂繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法，其特征在于，步骤(1)中，将棉花培育至3-4片真叶时备用，将烟草培育至2-3片真叶时备用。
3.根据权利要求1所述的利用烟蚜茧蜂繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法，其特征在于，步骤(2)培养烟粉虱时，接入烟粉虱24h后，移除烟粉虱成虫。
4.根据权利要求1所述的利用烟蚜茧蜂繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法，其特征在于，步骤(3)培养烟蚜二级寄主时，接入烟蚜茧成蜂48h后，移除烟蚜茧成蜂。
5.根据权利要求1所述的利用烟蚜茧蜂繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法，其特征在于，步骤(4)繁殖母代浅黄恩蚜小蜂时，接入已交配的浅黄恩蚜小蜂雌蜂48h后，移除浅黄恩蚜小蜂雌蜂。
6.根据权利要求1所述的利用烟蚜茧蜂繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法，其特征在于，步骤(5)繁殖浅黄恩蚜小蜂雄蜂时，接入初羽化的未交配的浅黄恩蚜小蜂雌蜂72h后，移除浅黄恩蚜小蜂雌蜂。
7.根据权利要求1所述的利用烟蚜茧蜂繁育浅黄恩蚜小蜂雄蜂的方法，其特征在于，步骤(2)中，每片烟草叶子上接入烟蚜的数量为500-600头，培养条件为温度26±2℃、RH65％±5％、L:D＝14:10。
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