CN110511856A - 一种寡核苷酸电洗脱仪 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种寡核苷酸电洗脱仪，其包括电泳仪和若干电洗脱槽，若干电洗脱槽呈若干列组分布，每行电洗脱槽之间为串联，行与行之间为并联，两端分别并接于正、负极；由电泳仪供电为DC0‑600v可调电压。本发明提供的寡核苷酸电洗脱仪，作为寡核苷酸产物回收装置，能够有效的提高回收产率，减少回收时间，整体提高回收工作的效率。
Description
技术领域
本发明涉及寡核苷酸的纯化方案，具体涉及凝胶电泳纯化方案。
背景技术
在寡核苷酸的纯化方式中会用到凝胶电泳的纯化方式，这种纯化方式得到的产品纯度高，符合很多高标准产品客户的生产要求。
目前采用的回收方法是将凝胶切碎放入到离心管中，使用盐溶液浸泡，然后脱盐回收。
这种凝胶电泳纯化方式回收方案在实际操作过程中存在如下的缺点：
(一)回收产率低；
(二)回收过程耗时长。
由此可见本领域亟需一种高效的寡核苷酸的纯化方案。
发明内容
针对现有寡核苷酸纯化采用凝胶电泳纯化方式回收方案，存在耗时长，产率低的问题，需要一种高效的寡核苷酸纯化方案。
为此，本发明的目的在于提供一种寡核苷酸电洗脱仪，以实现寡核苷酸的高效纯化。
为了达到上述目的，本发明提供的寡核苷酸电洗脱仪，包括若干电洗脱槽，若干电洗脱槽呈若干列组分布，每列电洗脱槽列组中的若干电洗脱槽之间依次串、并联接，若干电洗脱槽列组之间并列设置，且两端分别并接于正、负极。
进一步的，所述寡核苷酸电洗脱仪的正、负极连接DC0-600V的直流电压。
进一步的，每个电洗脱槽沿负极到正极方向依次设置第一槽孔、过滤膜以及第二槽孔，所述第一槽孔与第二槽孔之间通过过滤膜导通。
进一步的，所述第一槽孔的深度小于第二槽孔的深度，所述第一槽孔的深度为4-8mm(用于放置含所含基因的胶)，第二槽孔的深度为9-12mm(用于电离后基因的聚集点)。
进一步的，所述过滤膜为分子膜。
进一步的，所述每列电洗脱槽列组中电洗脱槽之间通过采用铂金丝作为联接导线。
进一步的，所述每列电洗脱槽列组中若干电洗脱槽之间等距分布。
进一步的，所述若干电洗脱槽列组之间等距分布。
本发明提供的寡核苷酸电洗脱仪，作为寡核苷酸产物回收装置，能够有效的提高回收产率，减少回收时间，整体提高回收工作的效率。
附图说明
以下结合附图和具体实施方式来进一步说明本发明。
图1为本发明实例中寡核苷酸电洗脱仪的结构示意图；
图2为本发明实例中电洗脱槽的结构示意图；
图3为本发明实例中电洗脱槽的剖视图。
具体实施方式
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体图示，进一步阐述本发明。
本方案摒弃现有通过浸泡凝胶，再依靠寡核苷酸自行析出的方案，通过创造性的方案，实现寡核苷酸在凝胶中自动迁移，由此大大提高寡核苷酸产物回收的效率。
参见图1，其所示为本方案基于上述原理给出的一种寡核苷酸电洗脱仪的构成示例图。
由图可知，该寡核苷酸电洗脱仪100整体主要由若干电洗脱槽110相互配合构成。其中，若干电洗脱槽110分成若干列组120，每列电洗脱槽列组120中的若干电洗脱槽110之间依次串接，并实现电导通；同时，若干电洗脱槽列组120之间并列设置，并且每列电洗脱槽列组120的两端分别并接于正极130和负极140；而正极130和负极140连接直流电压的正极和负极。
参见图2和图3，每个电洗脱槽110为一个单元电迁移槽，其沿负极到正极方向依次设置第一槽孔111、过滤膜112以及第二槽孔113，过滤膜112设置在第一槽孔111与第二槽孔113之间，第一槽孔111与第二槽孔113之间通过滤膜112实现导通。
第一槽孔111为深度为4-8mm的槽孔，用于放置含寡核苷酸凝胶。该第一槽孔111接负电极，使得其内的沉浮在胶上的寡核苷酸电离后带负电荷。
作为优选，该第一槽孔111上设置第一铂金丝114作为负极联接导线。基于铂金丝导电性好，稳定，不会产生杂质污染，不易电解，来保证整个寡核苷酸电洗脱仪100的可靠性。
第二槽孔113的深度为9-12mm，用作电离后基因的聚集点，即作为回收槽。由于第二槽孔113处设有正电极，而第一槽孔111中沉浮在胶上的寡核苷酸会电离后，寡核苷酸带负电荷，这样带负电荷的寡核苷酸将可通过分子膜112进入带正电极的第二槽孔113中。
作为优选，该第二槽孔113上设置第二铂金丝115作为正极联接导线。基于铂金丝导电性好，稳定，不会产生杂质污染，不易电解，来保证整个寡核苷酸电洗脱仪100的可靠性。
这里的过滤膜112由相应的分子膜构成，用于过滤凝胶，以防止切胶时的碎胶进入到第二槽孔113中。
由此构成的每个电洗脱槽110若在在接入相应的直流电压时，将使得第一槽孔111内凝胶的中寡核苷酸可以在电场的作用下经过过滤膜112过滤完全迁移到第二槽孔113内。
如此结构的电洗脱槽110在构成寡核苷酸电洗脱仪100时，本实例以十个电洗脱槽110为一组，且各单元之间用铂金丝将十个单元(即电洗脱槽110)相串联，以形成列电洗脱槽列组120。进一步的，将十列电洗脱槽列组120再进行并联形成寡核苷酸电洗脱仪100。
其中，每列电洗脱槽列组120中电洗脱槽110之间采用等距设置，相邻电洗脱槽110之间间隔12mm；与此同时，每列电洗脱槽列组120之间也采用等距等距，且相邻电洗脱槽列组120之间间隔15mm。如此分布设置的电洗脱槽110，通过间隔一定距离便于操作，也有利于降低污染和收集。
上述方案在具体实现，对于每个电洗脱槽110中第一槽孔111的深度优选6mm，同时第二槽孔113的深度优选10mm。
如此设置的电洗脱槽110中，在第一槽孔111处含寡核苷酸的胶电离后，寡核苷酸经过过滤膜112过滤，到第二槽孔113的深坑，由于第二槽孔113的位置低于第一槽孔111且寡核苷酸的质量重，由此可有效阻止寡核苷酸的返流(如图3所示)。
如此构成的电洗脱仪100，其输出DC0-600v，正极接130，负极接140；这样使得每一电洗脱槽110的放凝胶处(第一槽孔111)是负电极，回收处(即第二槽孔113)为正极。
作为优选，这里电洗脱仪100输出DC500V，使得每一单元(即每个电洗脱槽110)的二端的电压为50V，由此既能够满足每个电洗脱槽两端所需的工作电压，能够避免电洗脱仪100运行时电流过载，保证整个电洗脱仪100的运行的可靠性和稳定性。
据此构成的电洗脱仪100在工作时，根据寡核苷酸由负极向正极迁移的原理，将凝胶电泳后切下来的胶放到电洗脱仪100中电洗脱槽110的第一槽孔111处，同时由过滤膜112防止碎胶到第二槽孔113中去；每个槽内加入适量缓冲液，且没过槽内的胶。
在此基础上，将寡核苷酸电洗脱仪100的正极130和负极140连接500V直流电压，使得每个电洗脱槽110的二端具有DC50V，让其电泳20分钟，此时位于第一槽孔111中的沉浮在胶上的寡核苷酸电离后带负电荷，带负电荷的寡核苷酸将朝正极反向运行，即将会从位于第一槽孔111中的凝胶中迁移到第二槽孔113内。最后，从第二槽孔113内吸出液体再进行脱盐完成回收工作
由上可知，使用本方案，能够使得凝胶的中寡核苷酸在电场的作用下完全迁移到第二槽孔113内，可以快速、彻底的让寡核苷酸从凝胶中迁移出来，比原先浸泡的方法回收寡核苷高效，省时，可整体提高工作效率。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
Claims (8)
1.寡核苷酸电洗脱仪，其特征在于，包括若干电洗脱槽，若干电洗脱槽呈若干列组分布，每列电洗脱槽列组中的若干电洗脱槽之间依次联接，并电导通；若干电洗脱槽列组之间并列设置，且两端分别并接于正、负极。
2.根据权利要求1所述的寡核苷酸电洗脱仪，其特征在于；所述寡核苷酸电洗脱仪的正、负极连接DC0-600V的直流电压。
3.根据权利要求1所述的寡核苷酸电洗脱仪，其特征在于；每个电洗脱槽沿负极到正极方向依次设置第一槽孔、过滤膜以及第二槽孔，所述第一槽孔与第二槽孔之间通过过滤膜导通。
4.根据权利要求3所述的寡核苷酸电洗脱仪，其特征在于，所述第一槽孔的深度小于第二槽孔的深度。
5.根据权利要求3所述的寡核苷酸电洗脱仪，其特征在于，所述过滤膜为分子膜。
6.根据权利要求1所述的寡核苷酸电洗脱仪，其特征在于；所述每列电洗脱槽列组中电洗脱槽之间通过采用铂金丝作为联接导线。
7.根据权利要求1所述的寡核苷酸电洗脱仪，其特征在于，所述每列电洗脱槽列组中若干电洗脱槽之间等距分布。
8.根据权利要求1所述的寡核苷酸电洗脱仪，其特征在于，所述若干电洗脱槽列组之间等距分布。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
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| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB02 | Change of applicant information |
Address after: No. 13 and 14, Lane 5398, shenzhuan Road, Dongjing Town, Songjiang District, Shanghai, 201619 Applicant after: SHANGHAI GENERAY BIOTECH Co.,Ltd. Address before: 200233 room 33, building 680, No. 301-19, Guiping Road, Shanghai, Xuhui District Applicant before: SHANGHAI GENERAY BIOTECH Co.,Ltd. |
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| CB02 | Change of applicant information | ||
| GR01 | Patent grant | ||
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