CN110354388A - 一种神经刺激抑制房颤的动物实验方法 - Google Patents

Abstract

一种神经刺激抑制房颤的动物实验方法，步骤1、测量并记录基线时实验犬心房六个测量点的有效不应期、房颤诱发窗口和房颤诱发阈值；步骤2、使用诱发房颤刺激仪；步骤3、重复步骤2，测量并记录心房快速起搏1小时后；步骤4、将两根无菌针灸针插入桡神经干中形成刺激回路，末端接上电刺激末端，以桡神经干阈值强度的30%进行右侧桡神经干的低强度电刺激；步骤5、以桡神经干阈值强度的50%进行右侧桡神经干的低强度电刺激1小时。通过犬房颤研究，确定无线便携式神经刺激仪有效抑制房颤的刺激阈值、刺激频率、刺激持续时间及最佳外周神经刺激部位等参数，优化无线便携式神经刺激仪的产品设计及功能开发。

Description

一种神经刺激抑制房颤的动物实验方法

技术领域

本发明涉及一种动物实验方法，尤其涉及一种神经刺激抑制房颤的动物实验方法。

背景技术

心房颤动（房颤）是心血管疾病中最常见的心律失常之一，房颤发病率高，且患病概率随着年龄的增高大幅上升，目前药物治疗效果不佳，其机制还不是特别明确。房颤可能是多种机制共同作用的结果。1947年Scherf等用乌头碱在犬心耳局部注射后，能诱发房颤，用夹钳夹住心耳根部后，阻断心耳和心房的电传导，心耳部位还是维持房颤，但心房其他部位维持窦性心律。1950年，Scherf等进一步研究发现用乙酰胆碱在窦房结或房室结部位最能有效诱发房颤，用冰块在这些部位标测时，能终止房颤的发作，由此最早提出了局灶触发可启动房颤的观点。1964年，Moe等提出“多子波学说”，随后Allessie等学者在动物实验中完美标测证实多折返环存在是房颤维持的基质，此后“多子波学说”一直被广泛接受。多子波赖以存在的心房肌被称作房颤维持的基质。1997年到1998年间Jais和Haissaguerre分别在一些阵发性房颤的患者中发现肺静脉肌袖的高兴奋性与房颤发生有关，在肺静脉口行点消融或节段性消融能根治房颤。证实了肺静脉触发房颤的发生。由此，肺静脉隔离成为导管射频消融治疗心房颤动的基本术式。然而，导管消融术只针对阵发性房颤有较高疗效，且治疗费用高昂，探寻一种疗效显著且费用低廉的房颤疗法具有巨大的现实意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种神经刺激抑制房颤的动物实验方法。因此，本发明采用以下技术方案。

一种神经刺激抑制房颤的动物实验方法包括：

步骤1、测量并记录基线时实验犬心房六个测量点的有效不应期、房颤诱发窗口和房颤诱发阈值；

步骤2、使用诱发房颤刺激仪，刺激强度为左心耳起搏阈值的5倍；对左心耳进行连续1小时的心房快速起搏后，测量并记录心房快速起搏1小时后，实验犬心房六个测量点的有效不应期、房颤诱发窗口和房颤诱发阈值；

步骤3、重复步骤2，测量并记录心房快速起搏1小时后，实验犬心房六个测量点的有效不应期、房颤诱发窗口和房颤诱发阈值；

步骤4、切开实验犬右侧前臂皮肤，分离组织后，暴露右侧桡神经，将两根无菌针灸针插入桡神经干中形成刺激回路，末端接上电刺激末端，以桡神经干阈值强度的30%进行右侧桡神经干的低强度电刺激，同时仍然对左心耳进行心房快速起搏，两者共同刺激1小时后，测量并记录心房快速起搏3小时后，实验犬心房六个测量点的有效不应期、房颤诱发窗口和房颤诱发阈值，用于评估30%阈值的低强度神经电刺激是否能有效抑制房颤发生；

步骤5、以桡神经干阈值强度的50%进行右侧桡神经干的低强度电刺激1小时，同时继续对左心耳进行心房快速起搏1小时， 测量并记录心房快速起搏4小时后，实验犬心房六个测量点的有效不应期、房颤诱发窗口和房颤诱发阈值，用于评估50%阈值的低强度神经电刺激是否能有效抑制房颤发生。

优选的，所述诱发房颤刺激仪输出频率为20Hz，脉宽为0.1ms。

优选的，所述方法使用的实验仪器包括：穿戴式神经电刺激仪器、动物手术床、动物麻醉呼吸机和动物多功能参数监护仪、多功能心脏电生理监护仪、心脏电生理刺激仪、诱发房颤刺激仪。

优选的，所述穿戴式神经电刺激仪器在实验中给予上肢外周神经中的桡神经低强度的电刺激，用于探索是否有抑制房颤的效果。

优选的，所述多功能心脏电生理监护仪具有实现以下功能：

1）实时显示犬的肢体导联和腔内心房表面固定的电极导管处的心电信号，能及时发现犬的房颤波；2）通过其转接板接入心脏电生理刺激仪的输出端；在测量ERP和WOV时，将心脏电生理刺激仪输出的S1-S2刺激波施加到心房某个测量点的4极电极导管上进行刺激；3）通过其转接板接入Grass S88 Stimulator的输出端；进行心房快速起搏时，将诱发房颤刺激仪输出的房颤诱发波施加在左心耳上；在测量心房某点的房颤诱发阈值时，将诱发房颤刺激仪输出的诱发刺激波施加到心房的测量点的4极电极导管上进行诱发；4）实时显示接入其转接板的刺激仪器输出的波形，实现刺激波和心电波叠加显示功能；5）辅助测量心房的电生理参数、存储波形数据和打印指定时间窗口的心电图。

本发明的有益效果是：通过犬房颤研究，确定无线便携式神经刺激仪有效抑制房颤的刺激阈值、刺激频率、刺激持续时间及最佳外周神经刺激部位等参数，优化无线便携式神经刺激仪的产品设计及功能开发，为将来无线便携式神经刺激仪产品的生产标准、产品参数设置及使用说明等完成动物研究数据。

附图说明

图1 实验中RAP刺激1-2h各测量位点ERP变化趋势图。

图2实验中不同强度桡神经电刺激下各测量位点ERP变化趋势图。

图3 实验中1-2h和不同阈值桡神经电刺激ΣWOV变化趋势图。

图4实验中不同强度桡神经电刺激之间各测量位点ERP变化趋势图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

1、低强度桡神经刺激预防房颤诱导的实验研究

1.1 实验目的和原理

1.1.1 动物实验目的

（1）建立诱发犬急性房颤的模型。

（2）明确急性房颤会造成心房的急性电生理重构带来什么影响。

（3）经动物实验研究，探索给予犬桡神经干低强度的电刺激能否有效抑制房颤的发生，并比较不同刺激强度对房颤的抑制效果。

1.1.2 动物实验原理及房颤模型建立

采用的实验动物都是无房颤的健康犬，在抑制房颤之前，需要对犬的心房进行快速起搏（RAP），建立诱发犬急性房颤的模型；其原理是通过对心房的左心耳处施加了其10倍起搏阈值的20Hz高频电刺激波，诱发左心耳处心肌快速颤动并传导兴奋到心房，使得心房的心肌快速颤动,模拟自然情况下心房颤动的状态。无直接刺激心室心肌，且房室结等传导组织具有高频兴奋过滤作用，并不诱发出恶性室性心律失常。

实验通过两次进行1h的RAP，并在每次结束后，测量了心房多点的电生理参数ERP、WOV、和房颤诱发阈值，并和RAP之前正常犬测得的心房多点的电生理参数进行比较，分析心房各点的电生理参数变化情况，用于总体评估心房持续发生房颤后，其电生理结构是否发生急性重构。同时这些参数是评估诱发房颤难度的指标，可以定量评估发生房颤的难易程度。

成功建立了房颤模型后，在持续模拟发生房颤的过程中，同时对犬的桡神经施予不同强度的电刺激一段时间后，测得心房各点的电生理参数，用于整体评估上肢外周神经低强度电刺激后，发生房颤的难易程度；因该神经刺激疗法要求该电刺激不能对神经自身功能造成影响，所以刺激强度不能超过神经本身的阈值，本研究选取其30%的阈值和50%的阈值进行尝试。

实验完成后，通过正常时、持续发生房颤后、持续发生房颤的同时有上肢外周神经低强度刺激后的心房各点发生房颤的难易程度的趋势变化，可以判断出上肢外周神经电刺激是有抑制心房颤动的效果。

1.2 实验使用的仪器和用途

1.2.1 穿戴式神经电刺激仪器

本次探索性实验而研制的穿戴式神经电刺激仪，其功能是在实验中给予上肢外周神经中的桡神经低强度的电刺激，用于探索是否有抑制房颤的效果。

1.2.2 动物手术床

动物手术床其功能有承载和固定实验动物，可恒温加热用于保持动物体温，高度可抬升或降低方便手术操作，自带手术照明灯等功能。

1.2.3 动物麻醉呼吸机和动物多功能参数监护仪

在给实验犬进行气管插管后，可使用动物麻醉呼吸机（Matrx Model 3000）给予正压通气，防止犬在实验中因缺氧而死亡或因静脉麻醉过时失效而苏醒，导致实验无法正常进行；实验中还使用到动物多参数监护仪（CARDELL 9500 HD）用于实时监测犬的心律、血氧等生理参数。

1.2.4 多功能心脏电生理监护仪

实验中使用Bard公司的心脏电生理监测仪（Labsystem Pro）系统。在本实验中其功能有：1）实时显示犬的肢体导联和腔内心房表面固定的电极导管处的心电信号，能及时发现犬的房颤波。2）通过其转接板接入东方DF-5A心脏电生理刺激仪的输出端；在测量ERP和WOV时，将DF-5A输出的S1-S2刺激波施加到心房某个测量点的4极电极导管上进行刺激。3）通过其转接板接入Grass S88 Stimulator的输出端；进行心房快速起搏（RAP）时，将Grass S88Stimulator输出的房颤诱发波施加在左心耳上；在测量心房某点的房颤诱发阈值时，将Grass S88 Stimulator输出的诱发刺激波施加到心房某个测量点的4极电极导管上进行诱发。4）实时显示接入其转接板的刺激仪器输出的波形，实现刺激波和心电波叠加显示功能。5）辅助测量心房的电生理参数、存储波形数据和打印指定时间窗口的心电图。

1.2.5 心脏电生理刺激仪

在测量心房上各点的有效不应期（ERP）及房颤窗口（WOV）时，使用了东方DF-5A心脏电生理刺激仪对心房某点施加刺激波S1-S2，然后在心脏电生理监护仪的显示屏上监测结果，测得ERP和WOV。

1.2.6 Grass S88 Stimulator诱发房颤

Grass S88 Stimulator仪器在本实验中主要功能是诱发房颤，功能可细分为：1）多次持续1h生成刺激方波，在左心耳处进行心房快速起搏（RAP），诱发出房颤，建立房颤模型；2）在测量心房六个测量点处的房颤诱发阈值时，将其生成诱发方波施加在某测量点上，方波幅度从0V开始，以0.5V步进增大，进行心房该点的房颤诱发，最低诱发成功的电压即为该点此时的房颤诱发阈值。

1.2.7实验手术器械

7F血管穿刺鞘4个 （St. Jude Medical Inc. 美国） 、腔内体温检测仪 （Bio-TechInc. 美国）、大动物呼吸仪（Medtronic Inc. 美国）、血管钳 12把、手术剪 2把和胸撑 1把。

2、 神经刺激抑制房颤的探索性动物实验

2.1. 实验方法：

2.1.1 实验动物准备：

24条成年雄性犬，均采用苯巴比妥钠麻醉，负荷量剂量为50mg/kg，此后每小时30~50mg/kg维持。麻醉后立即给予气管插管并予呼吸机正压通气。切开皮肤，小心分离出双侧股动脉及股静脉，分别植入7F血管鞘，左侧股静脉予持续小剂量液体输注；右侧股动脉予持续血压监测；左侧动脉鞘内置入4极标测电极到主动脉根部无冠窦记录His束电位；左侧静脉鞘内置入腔内体温检测仪 （Bio-Tech Inc. 美国），进行持续体温检测，保持体温在36.5+1.5°C。标准肢体导联持续记录体表心电图。

在狗左侧第四肋间切开皮肤后采用电刀逐层分离止血，至第四肋间处进入胸腔并用胸撑将第四和第五肋分开固定并暴露心脏。切开心包，并用细线结扎固定形成心包吊床，仔细止血，保持良好的手术视野。分别将十极电极导管缝在左上、左下肺静脉口部和左心耳体部记录局部的心电信息。逐层关闭左胸后再在右侧第四肋间开胸，将十极电极导管缝在右上、右下肺静脉口部和右心耳体部。右侧股静脉置入可控弯4极标测电极，在右心房内均匀缓慢移动导管，进行右心房解剖的三维重建。

分别在右上、右下肺静脉及右心耳处缝合固定4极电极导管，用于进行心电信号记录和给予电刺激，缝合完成后，扎紧心包并缝合右胸皮肤。

再进行左侧开胸，步骤如上，分别在左上、左下肺静脉和左心耳处缝合固定上4极电极导管用于心电信号记录和进行电刺激，缝合完成后，扎紧心包并缝合左胸皮肤。

本步骤在RAP 累计2小时，准备进行桡神经电刺激前执行；切开犬的右前臂处皮肤，逐层分离组织，暴露出桡神经后，分别将两根针灸针插入神经干内，用胶布固定好针灸针后，连接上研制的神经电刺激末端。

2.1.2 心脏电生理程序刺激

在实验犬的左心耳处以1200bpm（20HZ, 脉宽0.1ms) 的频率进行快速起搏，输出电压为10倍起搏阈值。这种快速起搏可以导致心房急性的电重构。根据实验方案，实验组进行3个小时的心房快速起搏，在起搏的每个小时末，我们会暂停5-10分钟来进行有效不应期（ERP）和房颤诱发窗口(WOV)测量。

ERP测量：心房某处心肌有效不应期（ERP）越长，心肌细胞细胞响应和传导兴奋的动作频率越低，可以有效阻断局灶传来的高频颤动兴奋，使得房颤难易发生和维持，是评估房颤治疗效果的一大指标。

在心房或肺静脉各个测量点上首先进行8个连续刺激（S1-S1间期为330ms），接着紧跟一个刺激诱发一个早搏（S1-S2）。S1-S2间期从150ms开始先以10ms步长逐步递减，接近后再改为1ms，刺激不能诱发早搏的S1-S2间期被定义为有效不应期（ERP）。

当S1-S2间期降至190ms临界时，每个刺激波S1的上升沿，心房其他5个测量点均有信号响应，表明RIPV处心肌能将S1诱发的兴奋传导到其他测试点；而最后一个S1发生后，紧跟的S2不能诱发一个早搏，即心电图上各测试点没对S2上升沿的响应信号，表明RIPV处心肌无法在此S1-S2间期中两次响应和传导兴奋；S2波诱发时，其正处于有效不应期。此临界S1-S2间期值190ms为该RIPV处此时的有效不应期（ERP）的值。

WOV测量：心房颤动被定义为绝对不规则的心房节律，频率>500次/分钟，持续时间>5秒。测量ERP过程中能够诱发房颤的最长和最短的S1-S2间期之差被定义为房颤诱发窗口（WOV）。WOV用来作为评估房颤诱发能力的量化指标，房颤诱发窗口越大，越容易诱发房颤，反之窗口越小，房颤越难以发生和维持。其原理是房颤诱发窗口反映了该点能诱发房颤的兴奋信号频率范围，范围越小，对诱发房颤的兴奋频率要求越高，在真实中越难以满足，该处心肌无法传导频率区域外的高频颤动兴奋，所以房颤越难以发生和维持。∑WOV是犬的心房在同一时间所有测量位点上得到的WOV的总和，用来评估心脏整体的房颤诱发能力的指标。

实验中基线时心房左上肺静脉测量点(LSPV)在测量ERP的过程中，诱发了房颤，房颤窗ΣWOV的值为能诱发房颤的最大S1-S2间期减去最小S1-S2间期。房颤发生时，心房各个测量点处的心电信号杂乱无规律，有频率较高的小锯齿波。

房颤诱发阈值：使用频率为20Hz，脉宽为0.1ms，幅度从0V开始，以0.5V步进增大的诱发方波对心房某个测试点进行房颤诱发，诱发成功的最低幅值即为该点此时的房颤诱发阈值。房颤诱发阈值反映了该处心肌可以传导的高频颤动波的最低幅值大小，是房颤诱发能力的量化指标之一。房颤诱发阈值越大，则颤动兴奋的幅值需要更高才能使该处心肌兴奋并有效传导，提高了房颤发生和维持的难度。

Grass S88 Stimulator刺激仪对心房右下肺静脉测量点（RIPV）的刺激强度刚升至8V处时，首次诱发出了房颤，所以该测量点房颤诱发阈值强度为8V。

2.1.3心电信号检查

开胸并在心房表面6处缝合好测量和刺激电极后，在进行桡神经电刺激能否抑制房颤发生的探索实验之前，需要检查一下犬的肢体导联和腔内导联的心电信号是否正常，是否有电极接触不良或脱落现象。正常情况下：1）犬的肢体导联心电图显示出心电波形正常。2）腔内心电图中心房6个测量(刺激)点上的心电信号波形清晰有规律，表明缝合的电极接触良好且犬心房的电活动正常。

2.2 动物实验步骤

2.2.1: 测量并记录基线时犬心房六个测量点的有效不应期（ERP）、房颤诱发窗口（WOV）和房颤诱发阈值。

2.2.2: 使用标准的Grass-S88仪器，输出频率为20Hz，脉宽为0.1ms，刺激强度为左心耳起搏阈值的5倍；对左心耳进行连续1小时的心房快速起搏(rapid atrial pacing)后，测量并记录RAP 1h后，犬心房六个测量点的ERP、WOV和房颤诱发阈值。

2.2.3: 重复3.2.2，测量记录RAP 2h后，犬心房六个测量点的ERP、WOV和房颤诱发阈值。

2.2.4: 切开犬右侧前臂皮肤，分离组织后，暴露右侧桡神经，将两根无菌针灸针插入桡神经干中形成刺激回路，末端接上电刺激末端，以桡神经干阈值强度的30%进行右侧桡神经干的低强度电刺激，同时仍然对左心耳进行心房快速起搏，两者共同刺激1h后，测量并记录RAP 3h后，犬心房六个测量点的ERP、WOV和房颤诱发阈值，用于评估30%阈值的低强度神经电刺激是否能有效抑制房颤发生。

2.2.5: 以桡神经干阈值强度的50%进行右侧桡神经干的低强度电刺激1h，同时继续对左心耳进行心房快速起搏1h， 测量并记录RAP 4h后，犬心房六个测量点的ERP、WOV和房颤诱发阈值。用于评估50%阈值的低强度神经电刺激是否能有效抑制房颤发生。

3.仪器性能测试和实验结果分析

3.1 动物实验数据处理分析

3.1.1 统计学方法

统计学处理用IBM SPSS Statistic v23以及Graphpad Prism v5统计软件，数据以均数±标准差(±s)表示，每个记录位点采用非参数检验（Friedman test），如果发现Ｆ值有显著性差异(Statistical significance)时，我们则继续进行事后的两两比较(Posthoc Comparison)，P <0.05认为差异有统计学意义。

3.1.2.实验结果分析

实验中，RAP诱发房颤2小时后，各测量点ERP有显著缩短，如图1所示，一颗星、两颗星、三颗星分别表示: p<0.05, p<0.01, p<0.001，每小时起搏末ERP和基线ERP比较。RAP 2小时左上肺静脉（71.50±4.78 VS 91.67±4.12, p<0.001）、左下肺静脉（78.42±4.32 VS84.83±4.73, p<0.05)、右上肺静脉（85.33±4.77 VS 94.00±2.62, p<0.01)、右下肺静脉（88.92±4.27 VS 95.33±3.24, p<0.05)和左心耳部（88.83±7.72 VS 98.00±3.20,p<0.05)ERP有显著缩短，达统计学差异，右心耳ERP有下降趋势（88.58±7.08 VS 84.06±6.24, p=NS)，但无统计学差异。

不同阈值强度桡神经电刺激后，基线水平ERP和RAP诱发房颤3、4小时后各测量点ERP比较，30%阈值强度桡神经刺激线下，左上肺静脉（71.00±4.98 VS 91.67±4.12, p<0.01）、左下肺静脉（74.00±3.46 VS 84.83±4.73, p<0.05)、右上肺静脉（82.83±5.32VS 94.00±2.62, p<0.01)、右下肺静脉（87.83±4.37 VS 95.33±3.24, p<0.05)和左心耳部（87.00±6.15 VS 98.00±3.20, p<0.05)ERP有显著缩短，达统计学差异，右心耳ERP有下降趋势（87.25±6.69 VS 84.06±6.24, p=NS)，但无统计学差异，如图2所示，其中一颗星、两颗星分别表示: p<0.05，p<0.01，不同强度桡神经电刺激后每小时起搏末ERP和基线ERP比较。

但当刺激强度调整为阈值的50%时，左上肺静脉（83.20±7.50 VS 87.20±5.46,p=NS）、左下肺静脉（88.80±9.24 VS 82.40±3.49, p=NS)、右上肺静脉（100.00±6.78 VS93.60±4.35, p=NS)、右下肺静脉（93.60±7.47 VS 92.80±6.34, p=NS)、左心耳部（102.0±5.55 VS 87.60±6.62, p=NS)和右心耳（82.40±6.11 VS 90.40±2.32, p=NS)ERP均无明显缩短。提示该强度刺激可抑制房颤引起ERP下降。

在本研究中，RAP诱发房颤2小时后，总的房颤诱发窗口（∑ WOV) 较基线时比较明显升高（80.83±13.30 VS 8.83±4.74，p<0.01)。在桡神经电刺激后，基线时∑ WOV和RAP诱发房颤3、4小时后∑ WOV比较，其实30%阈值的电刺激提示∑ WOV仍明显上升（105.67±18.99 VS 8.83±4.74，p<0.01），但50%的阈值电刺激下∑ WOV较基线水平虽上升，但无统计学显著差异（18.80±16.84 VS 2.00±2.00，p=NS)。如图3所示，一颗星、两颗星、三颗星分别 表示: p<0.05, p<0.01, p<0.001，每小时起搏末ΣWOV和基线ΣWOV比较，RAP2hours 为心房快速起搏2小时。

对RAP 3、4小时不同阈值电刺激强度的ERP进行比较，我们发现，50%的桡神经阈值强度刺激，较30%的桡神经阈值强度比可引起多个测量点ERP的显著延长，如图4所示，其中一颗星、两颗星分别表示p<0.05， p<0.01，不同强度桡神经电刺激后每小时起搏末ERP两组间比较（30%阈值刺激vs50%阈值刺激）RAP为心房快速起搏。其中左下肺静脉（88.80±9.24VS 74.40±7.28, p<0.01)、右上肺静脉（100.00±6.78 VS 78.00±6.29, p<0.05) 左心耳部（102.00±5.55 VS 88.80±6.77, p<0.01)ERP有显著延长。左上肺静脉（83.20±7.50VS 65.20±7.61, p=NS）、右下肺静脉（93.60±7.47 VS 83.60±3.49, p=NS) ERP有延长趋势，但无统计学差异；在ΣWOV方面， 50%的桡神经阈值强度刺激，较30%的桡神经阈值强度引起的总房颤诱发窗口（∑ WOV)显著下降（122.80±34.40 VS 18.80±16.84，p<0.01)。

上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。

Claims (5)

1.一种神经刺激抑制房颤的动物实验方法，其特征在于，所述方法包括：

步骤1、测量并记录基线时实验犬心房六个测量点的有效不应期、房颤诱发窗口和房颤诱发阈值；

步骤2、使用诱发房颤刺激仪，刺激强度为左心耳起搏阈值的5倍；对左心耳进行连续1小时的心房快速起搏后，测量并记录心房快速起搏1小时后，实验犬心房六个测量点的有效不应期、房颤诱发窗口和房颤诱发阈值；

步骤3、重复步骤2，测量并记录心房快速起搏1小时后，实验犬心房六个测量点的有效不应期、房颤诱发窗口和房颤诱发阈值；

步骤4、切开实验犬右侧前臂皮肤，分离组织后，暴露右侧桡神经，将两根无菌针灸针插入桡神经干中形成刺激回路，末端接上电刺激末端，以桡神经干阈值强度的30%进行右侧桡神经干的低强度电刺激，同时仍然对左心耳进行心房快速起搏，两者共同刺激1小时后，测量并记录心房快速起搏3小时后，实验犬心房六个测量点的有效不应期、房颤诱发窗口和房颤诱发阈值，用于评估30%阈值的低强度神经电刺激是否能有效抑制房颤发生；

步骤5、以桡神经干阈值强度的50%进行右侧桡神经干的低强度电刺激1小时，同时继续对左心耳进行心房快速起搏1小时， 测量并记录心房快速起搏4小时后，实验犬心房六个测量点的有效不应期、房颤诱发窗口和房颤诱发阈值，用于评估50%阈值的低强度神经电刺激是否能有效抑制房颤发生。

2.根据权利要求1所述的一种神经刺激抑制房颤的动物实验方法，其特征在于，所述诱发房颤刺激仪输出频率为20Hz，脉宽为0.1ms。

3.根据权利要求1所述的一种神经刺激抑制房颤的动物实验方法，其特征在于，所述方法使用的实验仪器包括：穿戴式神经电刺激仪器、动物手术床、动物麻醉呼吸机和动物多功能参数监护仪、多功能心脏电生理监护仪、心脏电生理刺激仪、诱发房颤刺激仪。

4.根据权利要求3所述的一种神经刺激抑制房颤的动物实验方法，其特征在于，所述穿戴式神经电刺激仪器在实验中给予上肢外周神经中的桡神经低强度的电刺激，用于探索是否有抑制房颤的效果。

5.根据权利要求3所述的一种神经刺激抑制房颤的动物实验方法，其特征在于，所述多功能心脏电生理监护仪具有实现以下功能：

1）实时显示犬的肢体导联和腔内心房表面固定的电极导管处的心电信号，能及时发现犬的房颤波；2）通过其转接板接入心脏电生理刺激仪的输出端；在测量ERP和WOV时，将心脏电生理刺激仪输出的S1-S2刺激波施加到心房某个测量点的4极电极导管上进行刺激；3）通过其转接板接入Grass S88 Stimulator的输出端；进行心房快速起搏时，将诱发房颤刺激仪输出的房颤诱发波施加在左心耳上；在测量心房某点的房颤诱发阈值时，将诱发房颤刺激仪输出的诱发刺激波施加到心房的测量点的4极电极导管上进行诱发；4）实时显示接入其转接板的刺激仪器输出的波形，实现刺激波和心电波叠加显示功能；5）辅助测量心房的电生理参数、存储波形数据和打印指定时间窗口的心电图。