CN110338064B - 一种刺榆组培苗的生根培养及育苗方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种刺榆组培苗的生根培养及育苗方法，包括以下步骤：1)生根材料的选取；2)瓶内生根培养；3)瓶内炼苗；4)营养钵苗抚育，得刺榆苗；采用该方法解决了刺榆用传统播种、扦插、嫁接繁殖出苗率低的问题，培育出的刺榆组培苗根系须根较多、根系活力强、植株叶片浓绿、生长较快，还可以免除一般组培苗的洗苗过程直接进行种植，节省人力成本，更适于工业化规模生产，培育出的刺榆组培苗生根率达到95.3％以上，成活率能达到96.9％以上；本发明适用于刺榆组培苗的育苗。
Description
技术领域
本发明属于植物培育领域，涉及一种生根及育苗方法，具体涉及一种刺榆组培苗的生根培养及育苗方法。
背景技术
刺榆为榆科刺榆属落叶小乔木，高可达10米，或呈灌木状；常生于海拔2000米以下的坡地次生林中；耐瘠薄、干旱、抗低温、风沙，适合各种土质生长，适应性强，萌蘖能力强，生长速度较慢，可在荒山、荒坡、沙地等立地条件恶劣的地带生长。其作用首先可为防沙治沙绿化树种使用，发挥防风固沙、保持水土、涵养水源等作用；其次，在干旱瘠薄地带，可作为重要的绿化树种广泛栽植；园林绿化中有时也作为绿篱栽植，经过整形修剪，可用作种植区的围护及建筑基础种植，还可作为绿地的防范、屏障视线、分隔空间、作其它景物的背景等；再次，刺榆木材细致而坚硬，可用来制作各种农家用的器具，应用于农业生产当中。刺榆的各个不同的部位也可应用于人们的日常生活当中，如树皮纤维可作为人造棉、绳索、麻袋的原料；嫩叶可制作成饮料；种子可榨油等。
刺榆主要以种子繁殖为主，也可嫁接、扦插或分株繁育。但是种子繁殖易发生性状变异，不利于保持母本优良性状；而采用传统的无性繁殖方法，母本材料无法大量获得，因此繁殖系数低，成苗缓慢，不能提供大量苗木，限制了其应用。
目前，关于刺榆的研究报道较少，仅在传统育苗、造林、生物学特性、活性物质等方面有少量研究，关于刺榆组培生根方面的研究几乎没有看到相关报道。
因此，建立一种刺榆组培苗的育苗方法，能够快速、大量提供优良刺榆苗木具有重要的意义。
发明内容
本发明要解决的技术问题，是提供一种刺榆组培苗的生根培养及育苗方法，通过植物组织培养技术，不仅提升了种苗质量，还能为市场快速、大量提供优良刺榆苗木。
为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：
一种刺榆组培苗的生根培养及育苗方法，包括以下步骤：
1)生根材料的选取：挑选植株高度为2～4cm、继代周期为30～35天的刺榆继代组培苗，切除基部的丛生芽及愈伤，保留高度大于2cm的单株，单株茎秆1cm处的叶片贴茎秆去除，获得生根材料A；
2)瓶内生根培养：将生根材料A接种到瓶内生根培养基M中，在密封无菌条件下培养35-40天，获得生根瓶苗B；
3)瓶内炼苗：将生根瓶苗B转移至温室中，在自然温室环境条件下，部分解除密封，培养1-2天；而全部解除密封，培养3-4天，获得炼苗C；
4)营养钵苗抚育：将炼苗C移栽至装有基质Ⅰ的营养钵中，温室内空气温度保持在22-30℃，土壤温度为24-32℃，空气湿度为75％-90％，光照强度保持在10000Lux以内，待新根及新叶发出后逐渐降低空气湿度并提高光照强度，培养25-35天得刺榆苗。
作为本发明的一种限定，所述步骤2)中的培养条件为：光培养和暗培养每12h交替培养，培养温度为24-28℃，光照强度为2000-3500Lx。
作为本发明的另一种限定，所述步骤2)中的瓶内生根培养基M为：在改良DKW基本培养基中添加0.01-0.08mg/L的IBA、凝固剂和10-15g/L的白砂糖，培养基的pH调节至5.8-6.0。
作为上述限定的进一步限定，所述凝固剂为卡拉胶、琼脂或蛭石。
作为上述限定的更进一步限定，所述蛭石的用量为40-60mL，其中蛭石为20-40目。
作为上述限定的更进一步限定，所述改良DKW基本培养基、IBA和白砂糖的总量与蛭石的体积比为1:1。
作为本发明的另一种限定，所述改良DKW基本培养基包括硝酸铵1720～1900mg/L，硫酸铵1108～1225mg/L，七水硫酸镁705～775mg/L，磷酸二氢钾250～280mg/L，二水氯化钙135～165mg/L，四水硝酸钙1770～2165mg/L，七水硫酸亚铁30～37mg/L，乙二胺四乙酸二钠41～50mg/L，烟酸0.85～1.25mg/L mg/L，盐酸硫胺素1.85～2.25mg/L，甘氨酸1.85～2.25mg/L，肌醇100～110mg/L，硼酸4.35～5.3mg/L，一水硫酸锰30～37mg/L，六水硝酸锌15.5～19mg/L，二水钼酸钠0.35～0.45mg/L，五水硫酸铜0.23～0.28mg/L。
作为本发明的另一种限定，所述步骤4)中的基质Ⅰ包括体积比为2:2:1:1的草炭：珍珠岩：细沙：园土。
作为本发明的另一种限定，所述步骤4)中的新根及新叶发出后空气湿度降低至50-70％，光照强度提高至10000-15000Lx。
由于采用了上述的技术方案，本发明与现有技术相比，所取得的技术进步在于：
采用本发明的方法解决了刺榆用传统播种、扦插、嫁接繁殖出苗率低的问题。采用的生根培养基M解决了刺榆在其他基本培养基中进行生根培养时叶片发黄、脱落的问题。瓶内炼苗过程中采用部分解除密封的方式使得生根瓶苗的茎秆木质化程度明显提高，后期营养钵苗培育成活率能提高20％以上。培育出的刺榆组培苗根系须根较多、根系活力强、植株叶片浓绿、生长较快，还可以免除洗苗过程直接进行种植，节省人力成本，更适于工业化规模生产。培育出的刺榆组培苗生根率达到95.3％以上，成活率能达到96.9％以上。
本发明适用于刺榆组培苗的生根培养及育苗。
本发明下面将结合具体实施例作进一步详细说明。
具体实施方式
实施例1
一种刺榆组培苗的生根培养及育苗方法，其特征在于它包括以下步骤：
1)生根材料的选取：挑选植株高度为3cm、继代周期为30天的刺榆继代组培苗，切除基部的丛生芽及愈伤，保留高度大于2cm的单株，单株茎秆1cm处的叶片贴茎秆去除，获得生根材料A；
2)瓶内生根培养：将生根材料A接种到瓶内生根培养基M中，在密封无菌条件下培养35天，获得生根瓶苗B；其中，培养条件为：光培养和暗培养每12h交替培养，培养温度为24℃，光照强度为2000Lx；
所述瓶内生根培养基M为：在改良DKW为基本培养基中添加0.03mg/L的IBA、40mL的蛭石和10g/L的白砂糖，培养基的pH调节至5.8；
上述所述改良DKW为基本培养基包括硝酸铵1720mg/L，硫酸铵1108mg/L，七水硫酸镁705mg/L，磷酸二氢钾250mg/L，二水氯化钙135mg/L，四水硝酸钙1770mg/L，七水硫酸亚铁30mg/L，乙二胺四乙酸二钠41mg/L，烟酸0.85mg/L mg/L，盐酸硫胺素1.85mg/L，甘氨酸1.85mg/L，肌醇100mg/L，硼酸4.35mg/L，一水硫酸锰30mg/L，六水硝酸锌15.5mg/L，二水钼酸钠0.35mg/L，五水硫酸铜0.23mg/L。
3)瓶内炼苗：将生根瓶苗转移至温室中，在自然温室环境条件下，部分解除密封，培养2天；而全部解除密封，培养3天，获得炼苗C；
4)营养钵苗抚育：将炼苗C移栽至装有基质Ⅰ的营养钵中，温室内空气温度保持在22℃，土壤温度为24℃，空气湿度为75％，光照强度保持在10000Lux以内，待新根及新叶发出后空气湿度降低至70％，光照强度提高至12000Lx，培养25天得刺榆苗；其中，基质Ⅰ包括体积比为2:2:1:1的草炭：珍珠岩：细沙：园土。
通过上述方法制得的刺榆组培苗根系须根较多、根系活力强、植株叶片浓绿、生长较快，还可以免除洗苗过程直接进行种植，节省人力成本，更适于工业化规模生产。培育出的刺榆组培苗生根率达到95.3％，成活率能达到96.9％。
实施例2-6
实施例2-6分别为一种刺榆组培苗的生根培养及育苗方法，其步骤与实施例1相似，不同之处仅在于其中涉及的技术参数不同，具体详见下表：
上表中所使用的凝固剂为20-40目的蛭石。
实施例2-6中所涉及的改良DKW基本培养基的成分如下所示：
通过上述实施例2-6方法制得的刺榆组培苗根系须根较多、根系活力强、植株叶片浓绿、生长较快，还可以免除洗苗过程直接进行种植，节省人力成本，更适于工业化规模生产。培育出的刺榆组培苗生根率达到95.3％以上，成活率能达到96.9％以上。
对比例1
一)在刺榆组培苗生根方法中所使用的凝固剂，对刺榆生根苗的培养结果具有直接的影响。
在生根培养基M中使用不同凝固剂进行处理，处理结果如下表所示：
由上表可以看出，不同种类的凝固剂对刺榆组培苗生根率的影响较大，其中在添加蛭石的生根培养基培养下，刺榆组培苗生根率较高、须根多、根系颜色健康，后期种植在营养钵中生长更好。
二)在刺榆组培苗生根方法中所使用的生根激素，对刺榆生根苗的培养结果具有直接的影响。
由上表可以看出，不同种类的生根激素对刺榆组培苗生根率及生长情况的影响较大，其中在添加IBA的生根培养基培养下，刺榆组培苗生根率较高，其余激素容易出现叶片畸形的现象，并且具有较多的黄叶生成。
三)在刺榆组培苗生根方法中所使用的培养基添加不同浓度的白砂糖，对刺榆生根苗的培养结果具有直接的影响。
由上表可知，刺榆组培苗生根培养最适配方为：改良DKW+IBA0.01-0.08mg/L+蛭石40-60mL+白砂糖10-15g/L，采用该配方培养的刺榆组培苗生根率最高达95.3％，且植株长势良好，根系健康发达，利于后期营养钵苗培育。
四)在刺榆组培苗生根方法中所使用的部分解除密封步骤，对刺榆生根苗的培养结果具有直接的影响。
为了提高刺榆生根苗营养钵苗种植成活率，将生根瓶苗B从无菌培养室转移至温室中，在自然温室环境条件下部分解除封闭，从而提刺榆生根苗的木质化程度，可将刺榆生根苗的种植成活率提高20％以上。
由上表可知，部分解除密封为此步骤的关键，使得植株叶片不易失水萎蔫，植株茎秆从基部往上2/3颜色变成浅褐色，移栽后成活率提高。
五)在刺榆组培苗生根培养及育苗方法中所使用的不同的钵苗基质，对刺榆生根苗的培养结果具有直接的影响。
使用单一基质进行刺榆生根苗进行培养时，对于透气性差的基质，茎秆容易发生腐烂现象，根系生长效果差；对于透气性较好的基质，整体基质的成型性较差，浇水后基质易流失，不利于植株后期长高，并且基质易失水，后期养护需频繁浇水，养护成本高。因此为了减少茎秆的腐烂现象，使得叶片和根系生长效果较好，对基质进行组合使用，并对组合比例进行了调整，筛选出最佳的基质组合：
由上表可以看出，选用草炭、珍珠岩、细沙和园土作为培养基质，植株根系发达，主根长，须根多，叶色浓绿，生长速度快，为刺榆组培苗培养的最佳钵苗基质。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述技术内容作为启示加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作出的简单修改，等同变化与改型，仍属于本发明权利要求的保护范围。
Claims (5)
1.一种刺榆组培苗的生根培养及育苗方法，其特征在于它包括以下步骤：
1)生根材料的选取：挑选植株高度为2～4cm、继代周期为30～35天的刺榆继代组培苗，切除基部的丛生芽及愈伤，保留高度大于2cm的单株，单株茎秆1cm处的叶片贴茎秆去除，获得生根材料A；
2)瓶内生根培养：将生根材料A接种到瓶内生根培养基M中，在密封无菌条件下培养35-40天，获得生根瓶苗B；其中，所述步骤2)中的瓶内生根培养基M为：在改良DKW基本培养基中添加0.01-0.08mg/L的IBA、蛭石和10-15g/L的白砂糖，培养基的pH调节至5.8-6.0；
其中，所述改良DKW基本培养基由硝酸铵1720～1900mg/L，硫酸铵1108～1225mg/L，七水硫酸镁705～775mg/L，磷酸二氢钾250～280mg/L，二水氯化钙135～165mg/L，四水硝酸钙1770～2165mg/L，七水硫酸亚铁30～37mg/L，乙二胺四乙酸二钠41～50mg/L，烟酸0.85～1.25mg/L，盐酸硫胺素1.85～2.25mg/L，甘氨酸1.85～2.25mg/L，肌醇100～110mg/L，硼酸4.35～5.3mg/L，一水硫酸锰30～37mg/L，六水硝酸锌15.5～19mg/L，二水钼酸钠0.35～0.45mg/L，五水硫酸铜0.23～0.28mg/L组成；
3)瓶内炼苗：将生根瓶苗B转移至温室中，在自然温室环境条件下，部分解除密封，培养1-2天；而后全部解除密封，培养3-4天，获得炼苗C；
4)营养钵苗抚育：将炼苗C移栽至装有基质Ⅰ的营养钵中，温室内空气温度保持在22-30℃，土壤温度为24-32℃，空气湿度为75％-90％，光照强度保持在10000Lux以内，待新根及新叶发出后逐渐降低空气湿度并提高光照强度，培养25-35天得刺榆苗；其中，所述步骤4)中的基质Ⅰ包括体积比为2:2:1:1的草炭：珍珠岩：细沙：园土。
2.根据权利要求1所述的刺榆组培苗的生根培养及育苗方法，其特征在于：所述步骤2)中的培养条件为：光培养和暗培养每12h交替培养，培养温度为24-28℃，光照强度为2000-3500Lx。
3.根据权利要求1所述的刺榆组培苗的生根培养及育苗方法，其特征在于：所述蛭石的用量为40mL，其中蛭石为20-40目。
4.根据权利要求3所述的刺榆组培苗的生根培养及育苗方法，其特征在于：所述改良DKW基本培养基、IBA和白砂糖的总量与蛭石的体积比为1:1。
5.根据权利要求1所述的刺榆组培苗的生根培养及育苗方法，其特征在于：所述步骤4)中的新根及新叶发出后空气湿度降低至50-70％，光照强度提高至10000-15000Lx。
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