CN110301433A - 一种含有微量元素组合的猪精液体外常温保存剂 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种含有微量元素组合的猪精液体外常温保存剂，涉及精液保存技术领域，所述猪精液体外常温保存剂以适用于猪精液常温保存的溶液为基质，所述猪精液体外常温保存剂还含有50‑150mg/L的葡萄糖酸锌，30‑70mg/L的天门冬氨酸锰，100‑300mg/L的氯化镁；使用本发明的猪精液保存剂保存的猪精液，其精子活力达到0.78‑0.88，精子顶体完整率达到0.87以上，超过人工受精的要求；本发明满足猪精液体外保存过程中猪精子对无机盐、氮源、碳源、抗菌素等方面需求，同时又组合了一组微量元素合剂以满足猪精液在体外常温保存过程中对必需微量元素的需求，防止在保存过程中微量元素缺乏而引起的猪精液保存时间短以及活力不足。

Description

一种含有微量元素组合的猪精液体外常温保存剂

技术领域

本发明涉及精液保存技术领域，具体是一种含有微量元素组合的猪精液体外常温保存剂。

背景技术

随着生物化学研究水平的发展和提高，科学家们发现生物体内的微量元素与细胞的结构、功能和各种生命现象的发生和发展有着重要的内在联系。

必需微量元素是参与生物体新陈代谢过程，生物组织细胞中不可缺少的组成部分，例如铁、锌、铜、锰、钴、钼、硒、铬等，微量元素虽然在生物体内含量甚微，但在生命活动中作用十分重要，它直接参与细胞体内高度的化合过程和分解反应，其作用和蛋白质、酶、维生素等都有密切的关系；微量元素是精液中的重要生化成分，对维持精子生存环境和稳定有重要的生物学意义，一些必需微量元素对精子的产生、成熟、活力、获能和顶体反应等一系列生理功能产生影响。

目前，在猪精液体外常温保存过程中，以往的相关专利重点关注了其保存过程中pH值、渗透压、能量、维生素及蛋白质的需求，而忽视一些必需微量元素对猪精液体外保存过程的作用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种含有微量元素组合的猪精液体外常温保存剂，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种含有微量元素组合的猪精液体外常温保存剂，所述猪精液体外常温保存剂以适用于猪精液常温保存的溶液为基质，所述猪精液体外常温保存剂还含有50-150mg/L的葡萄糖酸锌，30-70mg/L的天门冬氨酸锰，100-300mg/L的氯化镁。

所述猪精液体外常温保存剂含有100mg/L的葡萄糖酸锌，50mg/L的天门冬氨酸锰，200mg/L的氯化镁。

所述猪精液体外常温保存剂还含有3-7g/L的柠檬酸钠，0.3-0.7g/L的氯化钾，0.2-0.6g/L的氯化钠，1.5-3.5g/L的EDTA，0.8-1.6g/L的碳酸氢钠，0.6-1.4g/L的胶原蛋白，0.08-0.12g/L的生育三烯酚，0.3-0.7g/L的抗菌素。

所述猪精液体外常温保存剂还含有5g/L的柠檬酸钠，0.5g/L的氯化钾，0.4g/L的氯化钠，2.5g/L的EDTA，1.2g/L的碳酸氢钠，1g/L的胶原蛋白，0.1g/L的生育三烯酚，0.5g/L的抗菌素。

所述抗菌素为青霉素或链霉素。

所述适用于猪精液常温保存的溶液为蒸馏水。

所述天门冬氨酸锰为L-天门冬氨酸锰。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

1、使用本发明的猪精液保存剂保存的猪精液，其精子活力达到0.78-0.88，精子顶体完整率达到0.87以上，超过人工受精的要求；

2、本发明满足猪精液体外保存过程中猪精子对无机盐、氮源、碳源、抗菌素等方面需求，同时又组合了一组微量元素合剂以满足猪精液在体外常温保存过程中对必需微量元素的需求，防止在保存过程中微量元素缺乏而引起的猪精液保存时间短以及活力不足。

具体实施方式

下面结合具体实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1：

一种含有微量元素组合的猪精液体外常温保存剂，所述猪精液体外常温保存剂以适用于猪精液常温保存的蒸馏水为基质，所述猪精液体外常温保存剂还含有50mg/L的葡萄糖酸锌，30mg/L的L-天门冬氨酸锰，100mg/L的氯化镁，3g/L的柠檬酸钠，0.3g/L的氯化钾，0.2g/L的氯化钠，1.5g/L的EDTA，0.8g/L的碳酸氢钠，0.6g/L的胶原蛋白，0.08g/L的生育三烯酚，0.3g/L的青霉素。

制备方法：

步骤一，分别计量称取50mg的葡萄糖酸锌，30mg的L-天门冬氨酸锰，100mg的氯化镁，3g的柠檬酸钠，0.3g的氯化钾，0.2g的氯化钠，1.5g的EDTA，0.8g的碳酸氢钠，0.6g的胶原蛋白，0.08g的生育三烯酚，0.3g的青霉素；

步骤二，将步骤一中的组分置入容器内，加蒸馏水溶解至1升，摇匀；

步骤三，将步骤二中得到的溶液过滤，得到保存剂；

步骤四，使用时，以1份精液加2份保存剂的比例使用，并保存在16-22摄氏度的温度环境下。

实施例2：

一种含有微量元素组合的猪精液体外常温保存剂，所述猪精液体外常温保存剂以适用于猪精液常温保存的蒸馏水为基质，所述猪精液体外常温保存剂还含有150mg/L的葡萄糖酸锌，30mg/L的L-天门冬氨酸锰，100mg/L的氯化镁，3g/L的柠檬酸钠，0.3g/L的氯化钾，0.2g/L的氯化钠，1.5g/L的EDTA，0.8g/L的碳酸氢钠，0.6g/L的胶原蛋白，0.08g/L的生育三烯酚，0.3g/L的链霉素。

制备方法：

步骤一，分别计量称取150mg的葡萄糖酸锌，30mg的L-天门冬氨酸锰，100mg的氯化镁，3g的柠檬酸钠，0.3g的氯化钾，0.2g的氯化钠，1.5g的EDTA，0.8g的碳酸氢钠，0.6g的胶原蛋白，0.08g的生育三烯酚，0.3g的青霉素；

步骤二，将步骤一中的组分置入容器内，加蒸馏水溶解至1升，摇匀；

步骤三，将步骤二中得到的溶液过滤，得到保存剂；

步骤四，使用时，以1份精液加2份保存剂的比例使用，并保存在16-22摄氏度的温度环境下。

实施例3：

一种含有微量元素组合的猪精液体外常温保存剂，所述猪精液体外常温保存剂以适用于猪精液常温保存的蒸馏水为基质，所述猪精液体外常温保存剂还含有150mg/L的葡萄糖酸锌，70mg/L的L-天门冬氨酸锰，300mg/L的氯化镁，7g/L的柠檬酸钠，0.7g/L的氯化钾，0.6g/L的氯化钠，3.5g/L的EDTA，1.6g/L的碳酸氢钠，1.4g/L的胶原蛋白，0.12g/L的生育三烯酚，0.7g/L的青霉素。

制备方法：

步骤一，分别计量称取150mg的葡萄糖酸锌，70mg的L-天门冬氨酸锰，300mg的氯化镁，7g的柠檬酸钠，0.7g的氯化钾，0.6g的氯化钠，3.5g的EDTA，1.6g的碳酸氢钠，1.4g的胶原蛋白，0.12g的生育三烯酚，0.7g的青霉素；

步骤二，将步骤一中的组分置入容器内，加蒸馏水溶解至1升，摇匀；

步骤三，将步骤二中得到的溶液过滤，得到保存剂；

步骤四，使用时，以1份精液加2份保存剂的比例使用，并保存在16-22摄氏度的温度环境下。

实施例4：

一种含有微量元素组合的猪精液体外常温保存剂，所述猪精液体外常温保存剂以适用于猪精液常温保存的蒸馏水为基质，所述猪精液体外常温保存剂还含有50mg/L的葡萄糖酸锌，70mg/L的L-天门冬氨酸锰，300mg/L的氯化镁，7g/L的柠檬酸钠，0.7g/L的氯化钾，0.6g/L的氯化钠，3.5g/L的EDTA，1.6g/L的碳酸氢钠，1.4g/L的胶原蛋白，0.12g/L的生育三烯酚，0.7g/L的链霉素。

制备方法：

步骤一，分别计量称取50mg的葡萄糖酸锌，70mg的L-天门冬氨酸锰，300mg的氯化镁，7g的柠檬酸钠，0.7g的氯化钾，0.6g的氯化钠，3.5g的EDTA，1.6g的碳酸氢钠，1.4g的胶原蛋白，0.12g的生育三烯酚，0.7g的青霉素；

步骤二，将步骤一中的组分置入容器内，加蒸馏水溶解至1升，摇匀；

步骤三，将步骤二中得到的溶液过滤，得到保存剂；

步骤四，使用时，以1份精液加2份保存剂的比例使用，并保存在16-22摄氏度的温度环境下。

实施例5：

一种含有微量元素组合的猪精液体外常温保存剂，所述猪精液体外常温保存剂以适用于猪精液常温保存的蒸馏水为基质，所述猪精液体外常温保存剂还含有100mg/L的葡萄糖酸锌，50mg/L的L-天门冬氨酸锰，200mg/L的氯化镁，5g/L的柠檬酸钠，0.5g/L的氯化钾，0.4g/L的氯化钠，2.5g/L的EDTA，1.2g/L的碳酸氢钠，1g/L的胶原蛋白，0.1g/L的生育三烯酚，0.5g/L的青霉素。

制备方法：

步骤一，分别计量称取100mg的葡萄糖酸锌，50mg的L-天门冬氨酸锰，200mg的氯化镁，5g的柠檬酸钠，0.5g的氯化钾，0.4g的氯化钠，2.5g的EDTA，1.2g的碳酸氢钠，1g的胶原蛋白，0.1g的生育三烯酚，0.5g的青霉素；

步骤二，将步骤一中的组分置入容器内，加蒸馏水溶解至1升，摇匀；

步骤三，将步骤二中得到的溶液过滤，得到保存剂；

步骤四，使用时，以1份精液加2份保存剂的比例使用，并保存在16-22摄氏度的温度环境下。

本发明不同实施例的保存剂，保存猪精液的效果如表1和表2所示（以BTS精液保存液配方为对照）：

表1猪精液保存7天后精子活力和顶体完整率

表2本发明的保存剂与BTS保存剂对人工受精与自然交配效果对比

通过上述的表1和表2可知，使用本发明的猪精液保存剂保存的猪精液，其精子活力达到0.78-0.88，精子顶体完整率达到0.87以上，超过人工受精的要求。

本发明满足猪精液体外保存过程中猪精子对无机盐、氮源、碳源、抗菌素等方面需求，同时又组合了一组微量元素合剂以满足猪精液在体外常温保存过程中对必需微量元素的需求，防止在保存过程中微量元素缺乏而引起的猪精液保存时间短以及活力不足。

锌离子是二价阳离子，能和许多阴离子结合，而且对电子亲和力特别高，所以锌能与许多基因和配体相结合，所生成的络合物稳定，锌在体内主要起的作用为：酶的催化剂、酶的调控剂。

锌对猪精子代谢的影响主要表现为作用精液中各种酶的活剂与调节剂，起到调节作用，在猪精子中，锌元素能与硫基和二硫键关系密切，并且主要集中在其尾部；锌能通过ATP系统控制精子的活力，通过控制精子在精浆内运动过程中能量的合理利用；锌还能通过精子的磷脂代谢进一步调控精子的能量储备，锌还能够延缓精子膜的脂质氧化，维持细胞膜结构的通透性和稳定性，从而使精子保持良好的活力。

锰是精氨酸酶的活性因子或辅助因子，参与氧化、磷酸化过程及维生素合成，如果猪精液中锰的含量过低，会影响精子的活力。

镁是细胞体内多种酶的重要组成部分，精子运动需要镁离子存在以及适宜的离子强度和pH值等环境，镁参与精子能量活力，镁可以使精子线粒体保持持续供能，使精子不会过早丧失活动能而失去活力，从而提高猪精子的受精能力。

微量元素对猪精液的体外保存具有重要的生化作用，通过实验对比14种必须微量元素，筛选出了锌、锰、镁三种对猪精液体外保存效果明显的微量元素。

对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (7)

1.一种含有微量元素组合的猪精液体外常温保存剂，其特征在于，所述猪精液体外常温保存剂以适用于猪精液常温保存的溶液为基质，所述猪精液体外常温保存剂还含有50-150mg/L的葡萄糖酸锌，30-70mg/L的天门冬氨酸锰，100-300mg/L的氯化镁。

2.根据权利要求1所述的含有微量元素组合的猪精液体外常温保存剂，其特征在于，所述猪精液体外常温保存剂含有100mg/L的葡萄糖酸锌，50mg/L的天门冬氨酸锰，200mg/L的氯化镁。

3.根据权利要求1或2所述的含有微量元素组合的猪精液体外常温保存剂，其特征在于，所述猪精液体外常温保存剂还含有3-7g/L的柠檬酸钠，0.3-0.7g/L的氯化钾，0.2-0.6g/L的氯化钠，1.5-3.5g/L的EDTA，0.8-1.6g/L的碳酸氢钠，0.6-1.4g/L的胶原蛋白，0.08-0.12g/L的生育三烯酚，0.3-0.7g/L的抗菌素。

4.根据权利要求3所述的含有微量元素组合的猪精液体外常温保存剂，其特征在于，所述猪精液体外常温保存剂还含有5g/L的柠檬酸钠，0.5g/L的氯化钾，0.4g/L的氯化钠，2.5g/L的EDTA，1.2g/L的碳酸氢钠，1g/L的胶原蛋白，0.1g/L的生育三烯酚，0.5g/L的抗菌素。

5.根据权利要求3所述的含有微量元素组合的猪精液体外常温保存剂，其特征在于，所述抗菌素为青霉素或链霉素。

6.根据权利要求1所述的含有微量元素组合的猪精液体外常温保存剂，其特征在于，所述适用于猪精液常温保存的溶液为蒸馏水。

7.根据权利要求1所述的含有微量元素组合的猪精液体外常温保存剂，其特征在于，所述天门冬氨酸锰为L-天门冬氨酸锰。