CN110075769A - 一种使干巴菌解休眠的溶胶制备工艺及装置 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种可使休眠干巴菌子实体解除休眠进入生长期的溶胶的制备工艺及装置，制备工艺是，将灭微生物后的松香在无水乙醇中提前浸提，获得棕黄色无水乙醇松香溶液，将得到的无水乙醇松香溶液与无菌水混合，采用离心喷雾法制成溶胶，在制得的溶胶中添加硝酸钙和木糖制得可使干巴菌解休眠的溶胶；制备装置包括储液罐、储无水乙醇罐和诺贝斯蒸汽发生器，采用分段灭菌法，气密性好，溶胶可促使干巴菌解休眠，为干巴菌科研和促繁技术提供有利的基础，将干巴菌的繁殖体进一步扩大，可改善林地生物群落，促进被毁坏林地的修复。

Description

一种使干巴菌解休眠的溶胶制备工艺及装置

技术领域

本发明涉及溶胶制备技术领域，具体涉及一种使干巴菌解休眠的溶胶制备工艺及装置。

背景技术

目前，我国对于林业资源的利用正呈现一种上升趋势，人们对森林中的野生菌的认识也在逐步加深，但始终停留在一个依赖于自然环境给予和馈赠的水平，在众多的研究中，我们只能通过基础科学研究其生境，分子生物学研究其遗传；以干巴菌为典型，由于干巴菌存在休眠期，使得干巴菌的形成需要漫长的周期，人们只能使用低效的方法对其增加繁殖体进行栽培，对干巴菌的繁育和培育效率很低，在目前，没有公开的人工干涉干巴菌孢子休眠期，促进干巴菌孢子萌发的方法，极大限制了干巴菌这一珍贵资源的利用。

发明内容

为了克服上述现有技术的缺陷，本发明的目的在于提供一种使干巴菌解休眠的溶胶制备工艺及装置，通过溶液置换的方法，制备出能够解除干巴菌休眠期的溶胶，这种溶胶具有稳定性高、反应简单和制备过程容易控制的优点。

为了达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的。

一种使干巴菌解休眠的溶胶制备工艺，包括下面步骤：

步骤一：使用400k～450K，250kpa～255Kpa的高温高压杀灭天然松香中的微生物；

步骤二：将步骤一得到的松香按照质量比松香：无水乙醇＝120～180：900～1000提前浸提，得到棕黄色的无水乙醇与松香溶液，过滤除去无水乙醇与松香溶液中的不溶性长链树脂和松针杂草；

步骤三：将步骤二得到的无水乙醇与松香溶液与无菌水按照1:4的体积比加入到溶剂置换釜中，采用离心喷雾法分散到无菌水中制成溶胶；

步骤四：在溶胶中加入磷酸二氢钠或碳酸氢钠，调整溶胶PH＝5.5～6.0；

步骤五：添加与溶胶质量比为0.1％～0.2％的硝酸钙和与溶胶质量比为0.3％～0.5％的木糖到步骤四得到的溶胶中，制得可使休眠干巴菌子实体解除休眠进入生长期的溶胶。

所述离心喷雾法的具体条件是：当雾化离心盘的圆周速度达到60m/s时，缓慢输送松香乙醇溶液和无菌水到雾化离心盘，使两者被雾化成球状小液滴后充分混合。

完成上述制备工艺的具体装置的技术方案如下：

一种使干巴菌解休眠的溶胶制备装置，包括储液罐2、储无水乙醇罐4和诺贝斯蒸汽发生器27，储液罐2的液体输出端与第一输液管g-l1的一端相连，第一输液管g-l1管路中设有清水泵3和阀门j25，第一输液管g-l1的另一端与高位储液罐7的液体输入端相连，高位储液罐7的液体输出端与第一计量泵8的液体输入端相连；储无水乙醇罐4的液体输出端与第二输液管g-l2的一端相连，第二输液管g-l2管路中设有油泵5和阀门j24，第二输液管道g-l2的另一端与高位储无水乙醇罐6的无水乙醇输入端相连，高位储无水乙醇罐6的无水乙醇输出端与第二计量泵9的无水乙醇输入端相连，第一计量泵8的液体输出端、第二计量泵9的无水乙醇输出端分别与溶剂置换釜12的液体输入端相连，溶剂置换釜12的液体输出端通过隔膜泵18与浮动盘管换热器19的液体输入端相连，浮动盘管换热器19的液体输出端通过恒压阀j20和底阀j21与组份调配槽20的液体输入端相连；调配槽20的气压输入端通过恒压管与耐压钢瓶22的气压输出端相连，调配槽20的气压输出端通过恒压管和恒压阀j20与浮动盘管换热器19的气压输入端相连，浮动盘管换热器19的气压输出端与溶剂置换釜12的气压输入端相连，溶剂置换釜12的气压输出端通过第一计量泵8与高位储液罐7的气压输入端相连，高位储液罐7的气压输出端通过恒压管与储液罐2的气压输入端相连，置换釜12的另一气压输出端通过第二计量泵9与高位储液罐7的气压输入端相连，高位储液罐7的气压输出端通过恒压管与储无水乙醇罐4的气压输入端相连；耐压钢瓶22的气压输入端经装有阀门j16的输气管与真空缓冲罐23的气压输出端相连，真空缓冲罐23的气压输入端与真空泵24相连，真空泵24上设有压力表25；

诺贝斯蒸汽发生器27的蒸汽输出端通过灭菌蒸汽管路g1与分气缸26的蒸汽输入端相连，分气缸26的蒸汽输出端经调节阀j11、j12调节流向，调节阀j11通过灭菌蒸汽管路g3与浮动盘管换热器19相连，调节阀j12与灭菌蒸汽管路g2相连，灭菌蒸汽管路g2的管路上设有第一三通节ST1、第二三通节ST2和输气阀门j1，灭菌蒸汽管路g2经输气阀门j1后分成两路蒸汽管路支路，支路一与储液罐2的蒸汽输入端相连，支路二与储无水乙醇罐4的蒸汽输入端相连，支路一上通过阀门j1、j2、j3组成一蒸汽回流管支路控流系统，支路二上通过阀门j4、j5、j6组成另一蒸汽回流管支路控流系统；高位储液罐7的蒸汽输出端通过弯管连接第四三通节ST4与灭菌蒸汽管路g4相连，储无水乙醇罐4的蒸汽输入端自第五三通节ST5输入，经过无水乙醇罐4和高位储无水乙醇罐6后经弯管过第六三通节ST6与灭菌蒸汽管路g4相连；第一三通节ST1通过阀门j7、j8、j9，分别与溶剂置换釜12的蒸汽输入端、浮动盘换热器19相连，溶剂置换釜12的蒸汽输出端通过隔膜泵18、阀门j23和阀门j22与浮动盘换热器19的蒸汽输入端相连，经浮动盘换热器19分流，浮动盘换热器19的一蒸汽输出端通过阀门j21与组份调配槽20的蒸汽输入端相连，浮动盘换热器19的另一蒸汽输出端通过阀门j17与灭菌蒸汽管路g4相连，组份调配槽20的蒸汽输出端通过阀门j19与耐压钢瓶22的蒸汽输入端相连，耐压钢瓶22的蒸汽输出端通过阀门j10与灭菌蒸汽管路g4相连，灭菌蒸汽管路g4于第九三通节ST9处汇合成为灭菌蒸汽管路g5，回流进入诺贝斯蒸汽发生器27重新加热，形成闭合回路。

所述的溶剂置换釜12立式放置，上部装有第二电机11经第二皮带P2带动置换釜中央轴10，中央轴10经密封套15-1密封后装有离心雾化盘W，输液管穿过溶剂置换釜体12，由末端细管通入离心雾化盘W，溶剂置换釜12下部配置有液体搅拌耙30，经中央轴封套15密封，由第一皮带P1与第一电机16连接，第一电机16使用电机脚支座与地基相连。

所述的浮动盘管换热器19连接套管换热器21，套管换热器21通过耐压钢瓶22，真空缓冲罐23，连接真空泵24减压。

所述的连接储液罐2和高位储液罐7的管路为恒压管和蒸汽输送管的共用管，连接无水乙醇罐4和高位储液罐6的管路为恒压管和蒸汽输送管的共用管，连接溶剂置换釜12和浮动盘管换热器19的管路g-l3为恒压和蒸汽输送管的共用管。

所述的输气管g2、输气管g4、输气管g5优选直径28mm的输气管道；输气管g1、输气管g3优选直径35mm的输气管。

所述的组份调配槽20与耐压钢瓶22使用管路连接。

所述的诺贝斯蒸汽发生器27上装有阀门j14和j15，分别调控冷凝水和蒸汽流量，蒸汽流经管路需进行包裹，做保温处理。

本发明提供的一种使干巴菌解休眠的溶胶制备工艺及装置，制得的溶胶物可以用于解除干巴菌的休眠，为干巴菌的科研和促繁技术提供有利的基础；使用本发明制得的溶胶可以将干巴菌的繁殖体进一步扩大，用于促繁技术和改善林地生物群落；本发明配合干巴菌子实体的粉末进行雨季施用可改善松树的生长状况，促进被毁坏林地的修复。

附图说明

图1是本发明的一种使干巴菌解休眠的溶胶制备装置示意图，其中：图1(a)是一种使干巴菌解休眠的溶胶制备装置总图；图1(b)是一种使干巴菌解休眠的溶胶制备装置管路图；图1(c)是一种使干巴菌解休眠的溶胶制备装置阀门标识图；图1(d)是一种使干巴菌解休眠的溶胶装置蒸汽循环图。

图中：1.长颈漏斗，2.储液罐，3.清水泵，4.储无水乙醇罐，5.油泵，6.高位储无水乙醇罐，7.高位储液罐，8.第一计量泵，9.第二计量泵，10.置换釜中央轴，11.第二电机，12.溶剂釜，13.液体搅拌耙，14.中央轴，15.轴封套，16.第一电机，17.电机脚支座，18.隔膜泵，19.浮动盘管换热器，20.组分调配槽，21.套管换热器，22.耐压钢瓶，23.真空缓冲罐，24.真空泵，25.压力表，26.分气缸，27.诺贝斯蒸汽发生器，W.离心雾化盘，g-l1.第一输液管，g-l2.第二输液管，g-l3.恒压管，g1、g2、g3、g4、g5为灭菌蒸汽管路，j1、j2、j3、j4、j5、j6、j7、j8、j9、j10、j11、j12、j13、j14、j15、j16、j17、j17-b、j19为输气阀门，j20、j21、j22、j23、j24、j25为输液阀门，ST1.第一三通节，ST2.第二三通节，ST3.第三三通节，ST4.第四三通节，ST5.第五三通节，ST6.第六三通节，ST7.第七三通节，ST8.第八三通节，ST9.第九三通节。

图2是本发明的一种使干巴菌解休眠的溶胶制备工艺实验效果示意图，其中：图2(a)是溶胶成品用于干巴菌孢子萌发实验；图2(b)是溶胶干巴菌孢子土壤接种实验；图2(c)是自然条件下菌塘发育环节图；图2(d)是干巴菌孢子萌发体土壤接种图；图2(e)是溶胶效果图。

具体实施方式

下面结合附图对一种使干巴菌解休眠的溶胶制备工艺及装置的基本流程和工作原理作进一步详细说明。

参见图1，一种使干巴菌解休眠的溶胶制备装置，包括储液罐2、储无水乙醇罐4和诺贝斯蒸汽发生器27，储液罐2的液体输出端与第一输液管g-l1的一端相连，第一输液管g-l1管路中设有清水泵3和阀门j25，第一输液管g-l1的另一端与高位储液罐7的液体输入端相连，高位储液罐7的液体输出端与第一计量泵8的液体输入端相连；储无水乙醇罐4的液体输出端与第二输液管g-l2的一端相连，第二输液管g-l2管路中设有油泵5和阀门j24，第二输液管道g-l2的另一端与高位储无水乙醇罐6的无水乙醇输入端相连，高位储无水乙醇罐6的无水乙醇输出端与第二计量泵9的无水乙醇输入端相连，第一计量泵8的液体输出端、第二计量泵9的无水乙醇输出端分别与溶剂置换釜12的液体输入端相连，溶剂置换釜12的液体输出端通过隔膜泵18与浮动盘管换热器19的液体输入端相连，浮动盘管换热器19的液体输出端通过恒压阀j20和底阀j21与组份调配槽20的液体输入端相连；调配槽20的气压输入端通过恒压管与耐压钢瓶22的气压输出端相连，调配槽20的气压输出端通过恒压管和恒压阀j20与浮动盘管换热器19的气压输入端相连，浮动盘管换热器19的气压输出端与置换釜12的气压输入端相连，置换釜12的气压输出端通过第一计量泵8与高位储液罐7的气压输入端相连，高位储液罐7的气压输出端通过恒压管与储液罐2的气压输入端相连，置换釜12的另一气压输出端通过第二计量泵9与高位储液罐7的气压输入端相连，高位储液罐7的气压输出端通过恒压管与储无水乙醇罐4的气压输入端相连；耐压钢瓶22的气压输入端经装有阀门j16的输气管与真空缓冲罐23的气压输出端相连，真空缓冲罐23的气压输入端与真空泵24相连，真空泵24上设有压力表25；

诺贝斯蒸汽发生器27的蒸汽输出端通过灭菌蒸汽管路g1与分气缸26的蒸汽输入端相连，分气缸26的蒸汽输出端经调节阀j11、j12调节流向，调节阀j11通过灭菌蒸汽管路g3与浮动盘管换热器19相连，调节阀j12与灭菌蒸汽管路g2相连，灭菌蒸汽管路g2的管路上设有第一三通节ST1、第二三通节ST2和输气阀门j1，灭菌蒸汽管路g2经输气阀门j1后分成两路蒸汽管路支路，支路一与储液罐2的蒸汽输入端相连，支路二与储无水乙醇罐4的蒸汽输入端相连，支路一上通过阀门j1、j2、j3组成一蒸汽回流管支路控流系统，支路二上通过阀门j4、j5、j6组成另一蒸汽回流管支路控流系统；高位储液罐7的蒸汽输出端通过弯管连接第四三通节ST4与灭菌蒸汽管路g4相连，储无水乙醇罐4的蒸汽输入端自第五三通节ST5输入，经过无水乙醇罐4和高位储无水乙醇罐6后经弯管过第六三通节ST6与灭菌蒸汽管路g4相连；第一三通节ST1通过阀门j7、j8、j9，分别与溶剂置换釜12的蒸汽输入端、浮动盘换热器19相连，溶剂置换釜12的蒸汽输出端通过隔膜泵18、阀门j23和阀门j22与浮动盘换热器19的蒸汽输入端相连，经浮动盘换热器19分流，浮动盘换热器19的一蒸汽输出端通过阀门j21与组份调配槽20的蒸汽输入端相连，浮动盘换热器19的另一蒸汽输出端通过阀门j17与灭菌蒸汽管路g4相连，组份调配槽20的蒸汽输出端通过阀门j19与耐压钢瓶22的蒸汽输入端相连，耐压钢瓶22的蒸汽输出端通过阀门j10与灭菌蒸汽管路g4相连，灭菌蒸汽管路g4于第九三通节ST9处汇合成为灭菌蒸汽管路g5，回流进入诺贝斯蒸汽发生器27重新加热，形成闭合回路。

所述的溶剂置换釜12立式放置，上部装有第二电机11经第二皮带P2带动置换釜中央轴10，中央轴10经密封套15-1密封后装有离心雾化盘W，输液管穿过溶剂置换釜体12，由末端细管通入离心雾化盘W，溶剂置换釜12下部配置有液体搅拌耙30，经中央轴封套15密封，由第一皮带P1与第一电机16连接，第一电机16使用电机脚支座与地基相连。

所述的浮动盘管换热器19连接套管换热器21，套管换热器21通过耐压钢瓶22，真空缓冲罐23，连接真空泵24减压。

所述的连接储液罐2和高位储液罐7的管路为恒压管和蒸汽输送管的共用管，连接无水乙醇罐4和高位储液罐6的管路为恒压管和蒸汽输送管的共用管，连接溶剂置换釜12和浮动盘管换热器19的管路g-l3为恒压和蒸汽输送管的共用管。

所述的输气管g2、g4、g5，输气阀门j1、j2、j3、j4、j5、j6、j7、j8、j9、j17-b、j18、j19、j10构成蒸汽管路系统，优选直径28mm的输气管道；g1、g3为蒸汽输送主管路，优选直径35mm的输气管。

所述的组份调配槽20与耐压钢瓶22使用管路连接。

所述的诺贝斯蒸汽发生器27上装有阀门j14和j15，分别调控冷凝水和蒸汽流量，蒸汽流经管路需进行包裹，做保温处理。

本装置的工作原理是：诺贝斯蒸汽发生器27产生1的饱和蒸汽由气体输送管道输送至分气缸26，经调节阀j11、j12调节气流，使蒸汽在灭菌蒸汽管路g2流动加热灭菌，灭菌完成后，关闭阀门j17-b、浮动盘管换热器19上的恒压阀门j20和真空泵管路阀门j16，打开灭菌蒸汽管路阀门j1、j3、j4、j5、j8、j12、j10、j11、j14、j15、j17-b、j19、j21、j20、j22，关闭阀门j2、j5、j7、j9、j18、j16、j13、j23、j24、j25，蒸汽由灭菌蒸汽管路g2的进气管路进入设备后从蒸汽回流管流出循环到诺贝斯蒸汽发生器27二次加热，再循环；设备完成3小时灭菌后，关闭阀门j1、j3、j4、j5、j8、j12、j10、j11、j14、j15、j17-b、j19、j21、j20、j22，打开阀门j2、j5、j7、j9、j18、j16、j13、j23、j24、j25，使装置处于隔离外界的工作状态，打开真空泵24，打开输气管管路阀门j16，将装置中气体抽出，使装置处于低压环境，降低乙醇与水的混合体系沸点；在储液罐2中加入无菌水，打开输水泵3，输送无菌水到高位槽7，将从不锈钢桶1中取出的乙醇松香溶液加入储无水乙醇罐4中，打开油泵5，输送乙醇松香溶液到高位储无水乙醇罐6，由第二计量泵9缓慢输送松香乙醇溶液到雾化离心盘W，同时打开第一计量泵8缓慢输送无菌水到雾化离心盘W，打开第二电机11带动雾化离心盘W转动雾化无菌水和乙醇松香溶液，当流入25L松香乙醇溶液后，关闭所有输送泵，电机继续带动液体搅拌耙13使溶胶继续混匀，2min后打开溶剂置换釜12和减压蒸馏器间的液体输送管和输气共用管，无菌水和无水乙醇树脂溶液在溶剂置换釜完成溶剂置换后，经溶剂置换釜底部管路j23打开，j22关闭，底阀j21打开，隔膜泵18开启，输送溶胶进入浮动盘换热器中减压提取乙醇，提取乙醇后打开浮动盘换热器底阀j21，恒压阀门j20打开后，溶胶受自重流入组份调配槽20中，溶胶自组份调配槽20中取出即可分罐储存备用；流出后，关闭阀门j20、j21，真空泵与真空缓冲罐通过管路连接，工作时关闭阀门j10、j16，抽真空工作开始，缓慢打开阀门j16。完成减压蒸馏后打开阀门j17，回收乙醇；将制备得到的溶胶取出后，在溶胶中加入磷酸二氢钠或碳酸氢钠，调整溶胶PH＝5.5～6.0；添加与溶胶质量比为0.1％～0.2％的硝酸钙和与溶胶质量比为0.3％～0.5％的木糖到步骤四得到的溶胶中，制得可使休眠干巴菌子实体解除休眠进入生长期的溶胶。

实施例1

步骤一：使用400k，250kpa的高温高压杀灭天然松香中的微生物；再对制备装置进行灭菌，通入蒸汽封闭灭菌三小时，灭菌过程中采用分段灭菌，关闭各出口阀门，由三通节气路阀门调节蒸汽流向形成回路灭菌，打开隔膜泵18管路上的调节阀，同时打开组份调配槽20的气路阀门，并在灭菌后关闭；

步骤二：按照质量比松香：无水乙醇＝120：900提前浸提，获得棕黄色无水乙醇松香溶液，过滤除去无水乙醇松香溶液中不溶性长链树脂和松针杂草；

步骤三：打开液体输送设备的恒压管路阀门j25，打开清水泵3，向储液罐2中加入45L无菌水，向储无水乙醇罐4中加入步骤二得到的无水乙醇松香溶液，再打开油泵5，输送无水乙醇松香溶液到高位储无水乙醇罐6，由第二计量泵9缓慢输送无水乙醇松香溶液到雾化离心盘11，同时打开无菌水输入第一计量泵8，打开电机16带动雾化离心盘11转动雾化无菌水和无水乙醇松香溶液，当流入10L松香乙醇溶液后，关闭所有输送泵，电机16继续带动液体搅拌耙13使溶胶继续混匀，2min后打开溶剂置换釜12底下隔膜泵18，使得混合的溶胶进入浮动盘管换热器19，打开阀门j21，使得溶胶受重力自流到低位的组分调配槽20内；

步骤四：在溶胶中加入磷酸二氢钠或碳酸氢钠，调整溶胶PH＝5.5；

步骤五：量取110mg的溶胶，将其置于组分调配槽20内，通过调配罐20上连接的管路加入0.11mg硝酸钙和0.33mg木糖后，制得110.44mg的可使干巴菌解休眠的溶胶。

实施例2

步骤一：使用410k，251kpa的高温高压杀灭天然松香中的微生物；再对制备装置进行灭菌，通入蒸汽封闭灭菌三小时，灭菌过程中采用分段灭菌，关闭各出口阀门，由三通节气路阀门调节蒸汽流向形成回路灭菌，打开隔膜泵18管路上的调节阀，同时打开组份调配槽20的气路阀门，并在灭菌后关闭；

步骤二：按照质量比松香：无水乙醇＝135：920提前浸提，获得棕黄色无水乙醇松香溶液，过滤除去无水乙醇松香溶液中不溶性长链树脂和松针杂草；

步骤三：打开液体输送设备的恒压管路阀门j25，打开清水泵3，向储液罐中加入40L无菌水，向储无水乙醇罐4中加入步骤二得到的无水乙醇松香溶液，再打开油泵5，输送无水乙醇松香溶液到高位储无水乙醇罐6，由第二计量泵9缓慢输送无水乙醇松香溶液到雾化离心盘11，同时打开无菌水输入第一计量泵8，打开电机16带动雾化离心盘11转动雾化无菌水和无水乙醇松香溶液，当流入9L无水乙醇松香溶液后，关闭所有输送泵，电机16继续带动液体搅拌耙13使溶胶继续混匀，2min后打开溶剂置换釜12底下隔膜泵18，使得混合的溶胶进入浮动盘管换热器19，打开阀门j21，使得溶胶受重力自流到低位的组分调配槽20内；

步骤四：在溶胶中加入磷酸二氢钠或碳酸氢钠，调整溶胶PH＝5.6；

步骤五：量取110mg的溶胶，将其置于组分调配槽20内，通过调配罐20上连接的管路加入0.13mg硝酸钙和0.35mg木糖后，制得110.48mg的可使干巴菌解休眠的溶胶。

实施例3

步骤一：使用425k，252kpa的高温高压杀灭天然松香中的微生物；再对制备装置进行灭菌，通入蒸汽封闭灭菌三小时，灭菌过程中采用分段灭菌，关闭各出口阀门，由三通节气路阀门调节蒸汽流向形成回路灭菌，打开隔膜泵18管路上的调节阀，同时打开组份调配槽20的气路阀门，并在灭菌后关闭；

步骤二：按照质量比松香：无水乙醇＝144：950提前浸提，获得棕黄色无水乙醇松香溶液，过滤除去无水乙醇松香溶液中不溶性长链树脂和松针杂草；

步骤三：打开液体输送设备的恒压管路阀门j25，打开清水泵3，向储液罐中加入35L无菌水，向储无水乙醇罐4中加入步骤二得到的无水乙醇松香溶液，再打开油泵5，输送无水乙醇松香溶液到高位储无水乙醇罐6，由第二计量泵9缓慢输送无水乙醇松香溶液到雾化离心盘11，同时打开无菌水输入第一计量泵8，打开电机16带动雾化离心盘11转动雾化无菌水和无水乙醇松香溶液，当流入8L无水乙醇松香溶液后，关闭所有输送泵，电机16继续带动液体搅拌耙13使溶胶继续混匀，2min后打开溶剂置换釜12底下隔膜泵18，使得混合的溶胶进入浮动盘管换热器19，打开阀门j21，使得溶胶受重力自流到低位的组分调配槽20内；

步骤四：在溶胶中加入磷酸二氢钠或碳酸氢钠，调整溶胶PH＝5.7；

步骤五：量取110mg的溶胶，将其置于组分调配槽20内，通过调配罐20上连接的管路加入0.15mg硝酸钙和0.40mg木糖后，制得110.55mg的可使干巴菌解休眠的溶胶。

实施例4

步骤一：使用440k，253kpa的高温高压杀灭天然松香中的微生物；再对制备装置进行灭菌，通入蒸汽封闭灭菌三小时，灭菌过程中采用分段灭菌，关闭各出口阀门，由三通节气路阀门调节蒸汽流向形成回路灭菌，打开隔膜泵18管路上的调节阀，同时打开组份调配槽20的气路阀门，并在灭菌后关闭；

步骤二：按照质量比松香：无水乙醇＝156：970提前浸提，获得棕黄色无水乙醇松香溶液，过滤除去无水乙醇松香溶液中不溶性长链树脂和松针杂草；

步骤三：打开液体输送设备的恒压管路阀门j25，打开清水泵3，向储液罐中加入30L无菌水，向储无水乙醇罐4中加入步骤二得到的无水乙醇松香溶液，再打开油泵5，输送无水乙醇松香溶液到高位储无水乙醇罐6，由第二计量泵9缓慢输送无水乙醇松香溶液到雾化离心盘11，同时打开无菌水输入第一计量泵8，打开电机16带动雾化离心盘11转动雾化无菌水和无水乙醇松香溶液，当流入7L无水乙醇松香溶液后，关闭所有输送泵，电机16继续带动液体搅拌耙13使溶胶继续混匀，2min后打开溶剂置换釜12底下隔膜泵18，使得混合的溶胶进入浮动盘管换热器19，打开阀门j21，使得溶胶受重力自流到低位的组分调配槽20内；

步骤四：在溶胶中加入磷酸二氢钠或碳酸氢钠，调整溶胶PH＝5.8；

步骤五：量取110mg的溶胶，将其置于组分调配槽20内，通过调配罐20上连接的管路加入0.18mg硝酸钙和0.45mg木糖后，制得110.63mg的可使干巴菌解休眠的溶胶。

实施例5

步骤一：使用450k，255kpa的高温高压杀灭天然松香中的微生物；再对制备装置进行灭菌，通入蒸汽封闭灭菌三小时，灭菌过程中采用分段灭菌，关闭各出口阀门，由三通节气路阀门调节蒸汽流向形成回路灭菌，打开隔膜泵18管路上的调节阀，同时打开组份调配槽20的气路阀门，并在灭菌后关闭；

步骤二：按照质量比松香：无水乙醇＝180：1000提前浸提，获得棕黄色无水乙醇松香溶液，过滤除去无水乙醇松香溶液中不溶性长链树脂和松针杂草；

步骤三：打开液体输送设备的恒压管路阀门j25，打开清水泵3，向储液罐中加入25L无菌水，向储无水乙醇罐4中加入步骤二得到的无水乙醇松香溶液，再打开油泵5，输送无水乙醇松香溶液到高位储无水乙醇罐6，由第二计量泵9缓慢输送无水乙醇松香溶液到雾化离心盘11，同时打开无菌水输入第一计量泵8，打开电机16带动雾化离心盘11转动雾化无菌水和无水乙醇松香溶液，当流入6L无水乙醇松香溶液后，关闭所有输送泵，电机16继续带动液体搅拌耙13使溶胶继续混匀，2min后打开溶剂置换釜12底下隔膜泵18，使得混合的溶胶进入浮动盘管换热器19，打开阀门j21，使得溶胶受重力自流到低位的组分调配槽20内；

步骤四：在溶胶中加入磷酸二氢钠或碳酸氢钠，调整溶胶PH＝6.0；

步骤五：量取110mg的溶胶，将其置于组分调配槽20内，通过调配罐20上连接的管路加入0.20mg硝酸钙和0.50mg木糖后，制得110.70mg的可使干巴菌解休眠的溶胶。

Claims (8)

1.一种使干巴菌解休眠的溶胶制备工艺，特征在于，具体操作步骤如下：

步骤一：使用400k～450K，250kpa～255Kpa的高温高压杀灭天然松香中的微生物；

步骤二：将步骤一得到的松香按照质量比松香：无水乙醇＝120～180：900～1000提前浸提，得到棕黄色的无水乙醇与松香溶液，过滤除去无水乙醇与松香溶液中的不溶性长链树脂和松针杂草；

步骤三：将步骤二得到的无水乙醇与松香溶液与无菌水按照1:4的体积比加入到溶剂置换釜中，采用离心喷雾法分散到无菌水中制成溶胶；

步骤四：在溶胶中加入磷酸二氢钠或碳酸氢钠，调整溶胶PH＝5.5～6.0；

步骤五：添加与溶胶质量比为0.1％～0.2％的硝酸钙和与溶胶质量比为0.3％～0.5％的木糖到步骤四得到的溶胶中，制得可使休眠干巴菌子实体解除休眠进入生长期的溶胶。

2.如权利要求1所述的一种使干巴菌解休眠的溶胶制备工艺，其特征在于，所述离心喷雾法的具体条件是：当雾化离心盘的圆周速度达到60m/s时，缓慢输送松香乙醇溶液和无菌水到雾化离心盘，使两者被雾化成球状小液滴后充分混合。

3.实现如权利要求1或2所述的一种使干巴菌解休眠的溶胶制备工艺的装置，其特征在于，包括储液罐(2)、储无水乙醇罐(4)和诺贝斯蒸汽发生器(27)，储液罐(2)的液体输出端与第一输液管(g-l1)的一端相连，第一输液管(g-l1)管路中设有清水泵(3)和阀门j25，第一输液管(g-l1)的另一端与高位储液罐(7)的液体输入端相连，高位储液罐(7)的液体输出端与第一计量泵(8)的液体输入端相连；储无水乙醇罐(4)的液体输出端与第二输液管(g-l2)的一端相连，第二输液管(g-l2)管路中设有油泵(5)和阀门j24，第二输液管道(g-l2)的另一端与高位储无水乙醇罐(6)的无水乙醇输入端相连，高位储无水乙醇罐(6)的无水乙醇输出端与第二计量泵(9)的无水乙醇输入端相连，第一计量泵(8)的液体输出端、第二计量泵(9)的无水乙醇输出端分别与溶剂置换釜(12)的液体输入端相连，溶剂置换釜(12)的液体输出端通过隔膜泵(18)与浮动盘管换热器(19)的液体输入端相连，浮动盘管换热器(19)的液体输出端通过恒压阀j20和底阀j21与组份调配槽(20)的液体输入端相连；调配槽(20)的气压输入端通过恒压管与耐压钢瓶(22)的气压输出端相连，调配槽(20)的气压输出端通过恒压管和恒压阀j20与浮动盘管换热器(19)的气压输入端相连，浮动盘管换热器(19)的气压输出端与溶剂置换釜(12)的气压输入端相连，溶剂置换釜(12)的气压输出端通过第一计量泵(8)与高位储液罐(7)的气压输入端相连，高位储液罐(7)的气压输出端通过恒压管与储液罐(2)的气压输入端相连，溶剂置换釜(12)的另一气压输出端通过第二计量泵(9)与高位储液罐(7)的气压输入端相连，高位储液罐(7)的气压输出端通过恒压管与储无水乙醇罐(4)的气压输入端相连；耐压钢瓶(22)的气压输入端经装有阀门j16的输气管与真空缓冲罐(23)的气压输出端相连，真空缓冲罐(23)的气压输入端与真空泵(24)相连，真空泵(24)上设有压力表(25)；

诺贝斯蒸汽发生器(27)的蒸汽输出端通过灭菌蒸汽管路g1与分气缸(26)的蒸汽输入端相连，分气缸(26)的蒸汽输出端经调节阀j11、j12调节流向，调节阀j11通过灭菌蒸汽管路g3与浮动盘管换热器(19)相连，调节阀j12与灭菌蒸汽管路g2相连，灭菌蒸汽管路g2的管路上设有第一三通节ST1、第二三通节ST2和输气阀门j1，灭菌蒸汽管路g2经输气阀门j1后分成两路蒸汽管路支路，支路一与储液罐(2)的蒸汽输入端相连，支路二与储无水乙醇罐(4)的蒸汽输入端相连，支路一上通过阀门j1、j2、j3组成一蒸汽回流管支路控流系统，支路二上通过阀门j4、j5、j6组成另一蒸汽回流管支路控流系统；高位储液罐(7)的蒸汽输出端通过弯管连接第四三通节ST4与灭菌蒸汽管路g4相连，储无水乙醇罐(4)的蒸汽输入端自第五三通节ST5输入，经过无水乙醇罐(4)和高位储无水乙醇罐(6)后经弯管过第六三通节ST6与灭菌蒸汽管路g4相连；第一三通节ST1通过阀门j7、j8、j9，分别与溶剂置换釜(12)的蒸汽输入端、浮动盘换热器(19)相连，溶剂置换釜(12)的蒸汽输出端通过隔膜泵(18)、阀门j23和阀门j22与浮动盘换热器(19)的蒸汽输入端相连，经浮动盘换热器(19)分流，浮动盘换热器(19)的一蒸汽输出端通过阀门j21与组份调配槽(20)的蒸汽输入端相连，浮动盘换热器(19)的另一蒸汽输出端通过阀门j17与灭菌蒸汽管路g4相连，组份调配槽(20)的蒸汽输出端通过阀门j19与耐压钢瓶(22)的蒸汽输入端相连，耐压钢瓶(22)的蒸汽输出端通过阀门j10与灭菌蒸汽管路g4相连，灭菌蒸汽管路g4于第九三通节ST9处汇合成为灭菌蒸汽管路g5，回流进入诺贝斯蒸汽发生器(27)重新加热，形成闭合回路。

4.如权利要求3所述的装置，其特征在于，所述的溶剂置换釜(12)立式放置，上部装有第二电机(11)经第二皮带P2带动置换釜中央轴(10)，中央轴(10)经密封套15-1密封后装有离心雾化盘W，输液管穿过溶剂置换釜体(12)，由末端细管通入离心雾化盘W，溶剂置换釜(12)下部配置有液体搅拌耙(30)，经中央轴封套(15)密封，由第一皮带P1与第一电机(16)连接，第一电机(16)使用电机脚支座与地基相连。

5.如权利要求3所述的装置，其特征在于，所述的浮动盘管换热器(19)连接套管换热器(21)，套管换热器(21)通过耐压钢瓶(22)，真空缓冲罐(23)，连接真空泵(24)减压。

6.如权利要求3所述的装置，其特征在于，所述的连接储液罐(2)和高位储液罐(7)的管路为恒压管和蒸汽输送管的共用管，连接无水乙醇罐(4)和高位储液罐(6)的管路为恒压管和蒸汽输送管的共用管，连接溶剂置换釜(12)和浮动盘管换热器(19)的管路g-l3为恒压和蒸汽输送管的共用管。

7.如权利要求3所述的装置，其特征在于，所述的输气管g2、输气管g4、输气管g5优选直径28mm的输气管道；输气管g1、输气管g3优选直径35mm的输气管。

8.如权利要求3所述的装置，其特征在于，所述的组份调配槽(20)与耐压钢瓶(22)使用管路连接。