CN110075012A - 山桐子油的应用及化妆品和酪氨酸酶活性抑制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明属于天然提取物应用技术领域，具体涉及一种山桐子油的应用及化妆品和酪氨酸酶活性抑制剂。山桐子油的应用为用于制备化妆品；或者，用作酪氨酸酶活性抑制剂。山桐子油作为一种具有美白作用的原料油运用到化妆品中，可以为化妆品行业提供一种来源广泛的、新的美白原料，而山桐子油本身就是一种高品质的食用油，是皮肤所需要的生理性脂质，可以更好的被皮肤吸收、利用，相比其他美白剂具有更大的安全性、健康性和皮肤相容性。其可作为一种安全健康、绿色高效的美白化妆品原料油。
Description
技术领域
本发明属于天然提取物应用技术领域，具体涉及一种山桐子油的应用及化妆品和酪氨酸酶活性抑制剂。
背景技术
白皙的肌肤自古以来就是东方人的审美标准，美白是化妆品的最主要的功能诉求之一。当前随着社会大工业的发展，随之带来了臭氧层的破坏、环境的污染等生态环境问题，以及人们生活节奏的加快、作息时间的不规律、生物节律被打乱，等等，导致了色斑症人群增多，美白淡斑与美白剂的研究与开发是当今化妆品领域的热点。
山桐子油是我国当前正在大力推广种植的一种新型木本油料，其不饱和脂肪酸含量高达80％以上，亚油酸含量高达64-75％，是一种具有保健功效的高品质食用植物油脂，也是制取生物柴油的原料油，然而，山桐子油在化妆品中的运用鲜有报道。
黑色素是影响皮肤颜色与色斑的最主要因素，在黑色素的生物合成过程中，酪氨酸酶是关键酶，对黑色素的生成起着决定性作用。通过对酪氨酸酶活性的抑制率来评价美白剂的美白功效进而筛选美白剂是化妆品领域最常用的方法之一。
发明内容
本发明提供了一种山桐子油的应用及化妆品和酪氨酸酶活性抑制剂。本发明所提供的技术方案扩展了山桐子油的应用。
本发明所提供的技术方案如下：
本发明提供了一种山桐子油的应用，用于制备化妆品。
基于上述技术方案，本发明所提供的山桐子油具有很好的美白作用，可以用于制备化妆品。
本发明提供了一种山桐子油的应用，作为酪氨酸酶活性抑制剂。
基于上述技术方案，本发明所提供的山桐子油具有很好的酪氨酸酶活性抑制作用，可以用作为酪氨酸酶活性抑制剂。
本发明还提供了一种山桐子油化妆品，包括山桐子油。
上述技术方案以山桐子油为天然提取产物，具有良好的美白效果，使得本发明所提供的化妆品健康、安全、有效。
具体的，山桐子油化妆品为膏剂、霜剂或乳剂。
具体的，膏剂山桐子油化妆品还包括油相、水相、乳化剂和保湿剂。
上述技术方案中，山桐子油具有良好的美白效果，使得本发明所提供的化妆品健康、安全、有效。而作为膏剂化妆品，基质较为浓稠，可适合各种肤质。可含有较高的油相润肤剂，特别适合干性皮肤以及在干燥的季节使用。
上述技术方案中：
油相含量为5.0～50.0wt％，可选自天然动植物油脂及其衍生物、矿物油脂、合成酯、硅油等；
水相含量为30.0～85.0wt％，可选自去离子水、蒸馏水；
乳化剂含量为0.2～5.0wt％，可选自表面活性剂、乳化助剂等；
保湿剂含量为1.0～15.0wt％，可选自甘油、1，2-丙二醇，1，3-丁二醇，山梨醇、透明质酸、氨基酸、植物多糖等。
具体的，膏剂还包括助剂，所述助剂含量为0.1～5.0wt％，选自膏霜流变剂、防腐剂、抗氧剂或增香剂中的任意一种或多种的混合。
具体的，霜剂山桐子油化妆品还包括油相、水相、乳化剂和保湿剂。
上述技术方案中，山桐子油具有良好的美白效果，使得本发明所提供的化妆品健康、安全、有效。而作为霜剂化妆品，其基质粘稠度与含油度适中，可适合各种肤质。
上述技术方案中：
油相含量为3.0～40.0wt％，可选自天然动植物油脂及其衍生物、矿物油脂、合成酯、硅油等；
水相含量为40～90wt％，可选自去离子水、蒸馏水；
乳化剂含量为0.2～5.0wt％，可选自表面活性剂、乳化助剂等；
保湿剂含量为1.0～15.0wt％，可选自甘油、山梨醇、1，2-丙二醇，1，3-丁二醇，透明质酸、氨基酸、植物多糖等。
具体的，霜剂还包括助剂，所述助剂含量为0.1～5.0wt％，选自膏霜流变剂、防腐剂、抗氧剂或增香剂中的任意一种或多种的混合。
具体的，乳剂山桐子油化妆品还包括油相、水相、乳化剂和保湿剂。
上述技术方案中，山桐子油具有良好的美白效果，使得本发明所提供的化妆品健康、安全、有效。而作为乳剂化妆品，其基质相对稀薄，肤感清爽，为皮肤补水润肤，适合各种肌肤、各种季节使用。
上述技术方案中：
油相含量为2～30wt％，可选自天然动植物油脂及其衍生物、矿物油脂、合成酯、硅油等；
水相含量为50.0～90.0wt％，可选自蒸馏水、去离子水；
乳化剂含量为0.2～3.0wt％，可选自表面活性剂、乳化助剂等；
保湿剂含量为1.0～15.0wt％，可选自甘油、1，2-丙二醇，1，3-丁二醇，山梨醇、透明质酸、植物多糖等。
具体的，乳剂还包括助剂，所述助剂含量为0.1～5.0wt％，选自膏霜流变剂、防腐剂、抗氧剂或增香剂中的任意一种或多种的混合。
具体的，山桐子油化妆品中山桐子油的含量为0.1～10.0wt％。优选的，山桐子油化妆品中山桐子油的含量为0.8～5.0wt％。
上述技术方案提供了山桐子油在化妆品中的有效用量。
本发明还提供了一种酪氨酸酶活性抑制剂，包括山桐子油。
基于上述技术方案，本发明所提供的山桐子油具有很好的酪氨酸酶活性抑制作用，可以用于制备酪氨酸酶活性抑制剂。
具体的，山桐子油的含量为0.05～10.0wt％。
上述技术方案提供了山桐子油在酪氨酸酶活性抑制剂中的有效用量。
优选的，山桐子油的含量为0.8～10.0wt％。
有益效果：
山桐子油作为一种具有美白作用的原料油运用到化妆品中，可以为化妆品行业提供一种来源广泛的、新的美白原料，而山桐子油本身就是一种高品质的食用油，为皮肤生理性脂质，可以更好的被皮肤吸收、利用，相比其他美白剂具有更大的安全性、健康性和皮肤相容性。其可作为一种安全健康、绿色高效的美白化妆品原料油，用作美白剂成分。
总体上，本发明解决了山桐子油的美白作用在市场上还没有被用到化妆品中的问题。山桐子油资源丰富，来源广泛，价格便宜；其天然来源，可直接通过山桐子压榨精炼而来，与合成的美白剂相比，来源简单易得。
附图说明
图1是三种植物油脂的脂肪酸组成GC谱图。
图2是亚油酸及几种不同亚油酸含量的植物油脂对酪氨酸酶的抑制率。
图3是不同形态亚油酸的酶活抑制作用对比图。
图4是山桐子油、VC乙基醚、a-熊果苷在不同质量浓度下对酪氨酸酶活性的抑制率。
图5是各级肤色效果图。
具体实施方式
以下对本发明的原理和特征进行描述，所举实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
具体实施方式
1.1试剂与仪器
山桐子油，湖北旭舟林农科技有限公司提供；米糠油，湖北天星粮油股份有限公司提供；花生油、橄榄油，超市购得；酪氨酸酶，Worthington，美国；L-酪氨酸，Amresco，美国；亚油酸，上海伊卡生物技术有限公司；α-熊果苷，山东众山生物科技有限公司；磷酸二氢钾、磷酸氢二钾，盐酸，氢氧化钠，氢氧化钾，甲醇，三氟化硼甲醇，正己烷，氯化钠，无水硫酸钠，均为分析纯。
UV-1700PC紫外-可见分光光度计，上海美析仪器有限公司；天美GC7900(色谱柱：TM-5，柱长30m,内径0.25mm,膜厚0.25μm)；PHS-3C PH计，上海精密科学仪器有限公司；DF-101S电热恒温水浴锅，巩义市予华仪器有限责任公司；德国sartorius BS223S电子天平。
1.2实验方法
1.2.1酪氨酸酶活性抑制率的测定
将亚油酸、植物油脂、α-熊果苷、VC乙基醚分别用微量1,2-丙二醇溶解，再用pH6.8的磷酸缓冲液配制成浓度为0.2、0.6、0.8、1.0、1.2、1.5、2.0wt％的待测溶液。反应液的组成如表1所示，先准确移取0.04wt％的酪氨酸溶液1.0mL于10mL试管中，再加入待测液，于30℃水浴保温20min，再准确移入100U/mL的酪氨酸酶溶液1.0mL，混匀，在30℃下反应10min，空白对照以pH6.8的磷酸缓冲溶液代替，设三个重复。反应后迅速将反应液移至石英比色皿，测其在475nm下的吸光度值。
表1反应液组成
由吸光度值计算不同物质对酪氨酸酶活性的抑制率I，计算方法如式(1-1)所示。
I＝[(A1-A2)-(B1-B2)]/(A1-A2)*100％ (1-1)
1.2.2植物油脂脂肪酸含量的测定
采用气相色谱法(GC)测定植物油脂脂肪酸的含量。
植物油脂的甲酯化：用移液管移取0.35mL油脂置于50mL圆底烧瓶中，加入6.0mL氢氧化钾甲醇溶液(0.5mol/L)，然后将回流冷凝管固定于烧瓶上，将烧瓶置于水浴中，并开磁力搅拌，76℃加热回流约30min后油滴消失，用移液管从冷凝管顶部加入6.0mL三氟化硼甲醇溶液(14％)于沸腾溶液内，继续煮沸2min，经冷凝管顶部加入4.0mL正己烷，继续煮沸1min，停止加热，冷却至室温后取下冷凝管，加入适量饱和氯化钠溶液振摇，静置分层后吸取上层溶液于小试管中，经无水硫酸钠除去痕量水，置于4℃冰箱冷藏待分析。
色谱操作条件：
进样器温度：280℃，FID检测器温度：280℃；
程序升温：初始温度80℃，持续1min；80-150℃，升温速率15℃/min；150-190℃，升温速率5℃/min，保持2min；190-200℃，升温速率0.5℃/min，保持5min；
载气：氮气；不分流进样,进样体积0.2μL。
2结果与分析
2.1山桐子油对酪氨酸酶的抑制作用
在不同浓度下，山桐子油对酪氨酸酶活性的抑制率如表2所示。
表2不同浓度下山桐子油对酪氨酸酶的抑制率
表2结果可知，随着质量浓度的增高，山桐子油对酪氨酸酶活性的抑制率增大，当达到0.8wt％时，抑制率高达67.6％，随着质量浓度的进一步增高，其抑制率变化不大。由此可见，山桐子油对酪氨酸酶活性具有显著的抑制作用。
2.2几种亚油酸含量不同的植物油对酪氨酸酶抑制作用的比较
如图1所示，是三种植物油脂的GC谱图。
根据图1结果，亚油酸甲酯的保留时间t＝34.4min，由峰面积归一化法计算出三种油脂的亚油酸甲酯含量并进一步进算出亚油酸的含量如表3所示。
表3三种植物油脂的亚油酸含量
比较以上三种亚油酸含量不同的植物油脂以及亚油酸对酪氨酸酶酶活的抑制作用，结果如图2所示。从图2可以看出，几种植物油及亚油酸对酪氨酸酶均具有抑制作用。比较分析，亚油酸含量低的橄榄油和花生油对酪氨酸酶的抑制作用明显偏低，亚油酸含量高的山桐子油以及纯的亚油酸对酪氨酸酶的抑制作用明显要高，说明对酪氨酸酶活性的抑制与亚油酸含量有关，亚油酸含量较高的油脂表现出更大的酪氨酸酶抑制作用。进一步比较山桐子油和纯的亚油酸，亚油酸含量较低的山桐子油表现出了较高的酶活抑制率，纯的亚油酸的酶活抑制率反而相对较低，这可能与亚油酸的存在形式有关。2.3亚油酸的存在形态对酪氨酸酶活性抑制作用的影响分析
根据图1GC图谱，山桐子油的脂肪酸甲酯组成如表4所示。根据山桐子油的脂肪酸甲酯的含量，计算山桐子油中亚油酸含量。
表4山桐子油的脂肪酸组成数据
计算方法如下：
脂肪酸的含量(％)＝(脂肪酸的分子量÷脂肪酸甲酯分子量)×脂肪酸甲酯含量×100
计算得到亚油酸在山桐子油中的含量＝64.3％
根据亚油酸在山桐子油中的含量计算出不同浓度山桐子油对应的的亚油酸含量，并与不同浓度的游离亚油酸比较，绘制成不同形态亚油酸含量与酶活抑制率的曲线图，如图3所示。从图3中可以看出，在相同的亚油酸浓度下，以甘三酯形式存在的亚油酸表现出的酶活抑制率大大高于游离态的亚油酸，由此可见，亚油酸的存在形式对酪氨酸酶的酶活抑制率存在明显差异，亚油酸以甘三酯形式存在时对酪氨酸酶活性的抑制作用比游离态的亚油酸对酪氨酸酶活性的抑制作用大。
2.4山桐子油与两种美白剂对酪氨酸酶抑制率的比较
α-熊果苷与VC乙基醚是化妆品中常用的两种重要的美白剂，为了进一步阐述山桐子油对酪氨酸酶的活性抑制率及其美白作用的大小，本发明还对三者进行了比较。在不同浓度下，山桐子油、α-熊果苷和VC乙基醚三种物质对酪氨酸酶的抑制率如图4所示。
由图4可知，α-熊果苷在0.2wt％的浓度下对酪氨酸酶的抑制率超过90％，在1.0wt％左右时达到98％，表现出对酪氨酸酶的近乎完全的抑制作用。VC乙基醚则需要在0.6wt％以上的浓度才表现出较好的抑制率。山桐子油对酪氨酸酶抑制作用的起始浓度较低，在0.2wt％时抑制率即可达到47％，随着质量浓度的增加，抑制率增大，在0.8wt％时抑制率达到67.6％，与VC乙基醚接近，随着质量浓度的进一步增加，其抑制率变化较小。从本实验结果可知，α-熊果苷的美白效果最好(α-熊果苷水解后形成氢醌，目前对其安全性存在质疑)，山桐子油对酪氨酸酶的最大抑制率超过67％，与VC乙基醚相当，说明其具有显著的美白作用。
应用例1
山桐子油在护肤膏中的运用。
以下以山桐子在护肤膏中的运用为例。
(1)配方(共100g)
(2)实验过程
按配方称取油相各组分于50ml烧杯中，再称取水相各组分于另一200ml烧杯中，在80℃下保温30min，使油相各组分熔化成均相，使水相各组分溶解、混容成均相，再将油相倒入水相中，在15000rpm下均质3min，制得膏状护肤产品。
(3)产品美白评价
选择40位不同年龄阶段的女性志愿者，其中处于肤色Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级的志愿者分别为10人，肤色效果如图5，进行为期60天的产品试用，使用方法为：每次用量约0.5g，均匀涂覆于面部，一天2次(早晚各一次)，60天后对产品的美白效果进行评价。
由上表结果可知，Ⅰ级的10人中脸部皮肤肤色均得到改善(改善是指变白，下同)，其中有6人达到Ⅱ级，4人达到Ⅲ级；Ⅱ级的10人中有1人脸部皮肤肤色变化不明显，有9人皮肤肤色有改善，其中7人达到Ⅲ级，2人达到Ⅳ级；Ⅲ级的10人中有2人脸部皮肤肤色无明显变化，有8人皮肤得到改善，其中7人达到Ⅳ级，1人达到Ⅴ级；Ⅳ级的10人中有5人脸部皮肤肤色无明显变化，有5人皮肤得到改善达到Ⅴ级。由此可见，此款产品具有明显的美白效果，且对脸部皮肤肤色较黑(Ⅲ级及以下)的人有更好的美白作用。
上述护肤膏中，山桐子油的含量为1.5wt％。根据实验，护肤膏中山桐子油的含量宜为0.2～3.0wt％。低于最低值0.1wt％，山桐子油效果不明显，高于10.0wt％，山桐子油的美白功能没有明显增加。
应用例2
山桐子油在护肤霜的运用。
(1)配方(100g)
(2)实验过程
同实施例1
(3)美白效果评价
选择40位不同年龄阶段的女性志愿者，其中处于肤色Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级的志愿者分别为10人，肤色效果如图5所示，进行为期60天的产品试用，使用方法为：每次产品用量约0.5g，均匀涂覆于面部，一天2次(早晚各一次)，60天后对产品的美白效果进行评价。
由上表可得，Ⅰ级的10人中脸部皮肤肤色均得到改善(改善是指变白，下同)，其中有5人达到Ⅱ级，4人达到Ⅲ级，1人达到Ⅳ级；Ⅱ级的10人中有2人脸部皮肤肤色无变化，有8人皮肤肤色有改善，其中7人达到Ⅲ级，1人达到Ⅳ级；Ⅲ级的10人中有2人脸部皮肤肤色无变化，有8人皮肤得到改善，此8人均达到Ⅳ级；Ⅳ级的10人中有7人脸部皮肤肤色无变化，有3人皮肤得到改善达到Ⅴ级。由此可见，此款产品具有明显的美白效果，且对脸部皮肤肤色较黑(Ⅲ级及以下)的人有更好的美白作用。
上述护肤水中，山桐子油的含量为1.0wt％。根据实验，护肤霜中山桐子油的含量宜为0.2～3.0wt％。低于最低值0.1wt％，山桐子油效果不明显，高于10.0wt％，山桐子油的美白功能没有明显增加。
应用例3
山桐子油在护肤乳中的运用。
(1)配方(100g)
(2)实验过程
同实施例1
(3)美白效果评价
选择40位不同年龄阶段的女性志愿者，其中处于肤色Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级的志愿者分别为10人，肤色效果如图5所示，进行为期60天的产品试用，使用方法为：每次产品用量约0.5g，均匀涂覆于面部，一天2次(早晚各一次)，60天后对产品的美白效果进行评价。
由上表结果可知，Ⅰ级的10人中脸部皮肤肤色均得到改善(改善是指变白，下同)，其中有6人达到Ⅱ级，4人达到Ⅲ级；Ⅱ级的10人中有1人脸部皮肤肤色无变化，有9人皮肤肤色有改善，此9人均达到Ⅲ级；Ⅲ级的10人中有2人脸部皮肤肤色无变化，有8人皮肤得到改善，其中6人达到Ⅳ级，2人达到Ⅴ级；Ⅳ级的10人中有7人脸部皮肤肤色无变化，有3人皮肤得到改善达到Ⅴ级。由此可见，此款产品有明显的美白效果，且对脸部皮肤肤色较黑(Ⅲ级及以下)的人有更好的美白作用。
上述护肤乳中，山桐子油的含量为1.8wt％。根据实验，护肤膏中山桐子油的含量宜为0.2～3.0wt％。低于最低值0.1wt％，山桐子油效果不明显，高于10.0wt％，山桐子油的美白功能没有明显增加。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种山桐子油的应用，其特征在于：用于制备化妆品；或者，作为酪氨酸酶活性抑制剂。
2.一种山桐子油化妆品，其特征在于：至少包括山桐子油。
3.根据权利要求2所述的山桐子油化妆品，其特征在于：为膏剂、霜剂或乳剂。
4.根据权利要求3所述的山桐子油化妆品，其特征在于：
膏剂山桐子油化妆品还包括：油相、水相、乳化剂和保湿剂；
霜剂山桐子油化妆品还包括：油相、水相、乳化剂和保湿剂；
乳剂山桐子油化妆品还包括：油相、水相、乳化剂和保湿剂。
5.根据权利要求4所述的山桐子油化妆品，其特征在于：还包括助剂，所述助剂选自膏霜流变剂、防腐剂、抗氧剂或增香剂中的任意一种或多种的混合。
6.根据权利要求2至5任一所述的山桐子油化妆品，其特征在于：山桐子油化妆品中山桐子油的含量为0.1～10.0wt％。
7.一种酪氨酸酶活性抑制剂，其特征在于，包括山桐子油。
8.根据权利要求7所述的酪氨酸酶活性抑制剂，其特征在于，山桐子油的含量为0.05～10.0wt％。
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| 温波: "美白淡斑化妆品的研究进展", 《中国化妆品(行业)》 * |
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| CN110075012B (zh) | 2023-02-21 |
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