预防和治疗毒侵肺卫型猪繁殖与呼吸综合征的中药组合物及
制备方法
技术领域
本发明属于兽药技术领域,具体涉及一种预防和治疗毒侵肺卫型猪繁殖与呼吸综合征的中药组合物及制备方法。
背景技术:
猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由病毒引起的猪的一种繁殖障碍和呼吸系统的传染病。部分病猪的耳部发紫,又称“猪蓝耳病”。其特征为厌食、发热、怀孕后期发生流产,产死胎和木乃伊胎;幼龄仔猪发生呼吸系统疾病和大量死亡。本病只感染猪,各种年龄和品种的猪均易感,但主要侵害繁殖母猪和仔猪,而育肥猪发病温和。病猪和带毒猪是本病的主要传染源。感染母猪可明显排毒,如鼻分泌物、粪便、尿均含有病毒。耐过猪可长期带毒和不断向外排毒,有证据显示感染猪在临诊症状消失后8周仍可向外排毒。由于该病本身主要是导致机体免疫力下降,抗病力减弱,引起免疫失败,从而继发感染猪瘟和链球菌等其他疾病,造成严重危害。
本病目前尚无特效药物疗法,主要采取综合防制措施及对症疗法。最根本的办法是消除病毒、带毒猪和彻底消毒,切断传播途径。对于易感猪群通常采用复方花青素、阿莫西林拌料进行饲喂预防;对已感染猪群进行隔离,采用柴胡、阿司匹林、利巴韦林等药物进行治疗,但是无论预防还是治疗,都存在抗生素残留的隐患。
发明内容:
针对猪感染猪繁殖与呼吸综合征后出现的症状,表现为体温升高,有的出现神经症状,呼吸困难,气喘,眼结膜潮红,眼睑水肿,鼻镜及口腔干燥,粪便干、量少、呈球状,腹部有红色斑点,耳尖及四肢呈现蓝紫色,根据临床症状及分子诊断,确诊为猪繁殖与呼吸综合征,属毒侵肺卫型症型。
针对抗生素药物治疗猪繁殖与呼吸综合征存在抗生素残留的隐患,本发明提供一种用于预防和治疗毒侵肺卫型猪繁殖与呼吸综合征的中药组合物及其制备方法。
本发明解决其技术问题所采用的方案是:一种预防和治疗毒侵肺卫型猪繁殖与呼吸综合征的中药组合物,包括以下重量份计的中药:桑叶20-30份,菊花25-40份,桔梗15-40份,麻黄25-40份,板蓝根25-45份,杏仁25-35份,僵蚕15-30份,陈皮15-30份,甘草35-50份,荷叶5-15份,知母15-25份,党参15-25份,滑石25-45份,大黄25-35份,石膏5-20份,苍术15-40份,瓜蒌15-25份。
上述的一种预防和治疗毒侵肺卫型猪繁殖与呼吸综合征的中药组合物,包括以下重量份计的中药:桑叶25-30份,菊花35-40份,桔梗15-30份,麻黄25-30份,板蓝根35-45份,杏仁25-30份,僵蚕15-20份,陈皮25-30份,甘草35-40份,荷叶10-15份,知母15-20份,党参20-25份,滑石25-35份,大黄25-30份,石膏15-20份,苍术15-25份,瓜蒌15-20份。
上述的一种预防和治疗毒侵肺卫型猪繁殖与呼吸综合征的中药组合物,包括以下重量份计的中药:桑叶27份,菊花40份,桔梗25份,麻黄28份,板蓝根40份,杏仁25份,僵蚕18份,陈皮30份,甘草35份,荷叶12份,知母17份,党参23份,滑石30份,大黄28份,石膏16,苍术20份,瓜蒌18份。
本发明还提供一种预防和治疗毒侵肺卫型猪繁殖与呼吸综合征的中药组合物的制备方法:按照重量份比称取各中药,将其放入煎药罐中,向罐中加入10倍量的纯净水或70%乙醇浸泡1h,煎煮30min,过滤,得第一次煎煮滤液;向滤渣中再加入10倍量的纯净水或70%乙醇煎煮30 min,过滤得第二次煎煮滤液;合并两次滤液,减压浓缩成浸膏,干燥喷成粉末;所得滤渣烘干粉碎,与滤液所得粉末混合均匀,分装装袋。
本发明所述的中药组合物,方中桑叶,苦、甘、寒,归肺、肝经,疏散风热,清肺润燥,清肝明目,泄肺热,用治风热感冒、肺热燥咳等症;
菊花,甘、苦、微寒,归肺、肝经,散风清热,清肝明目;
桔梗,苦、辛、平,归肺经,宣肺、祛痰、利咽、排脓,治外感风寒或风热所致咳嗽痰多、咽喉肿痛,用治肺热咳喘,排脓消肿,疮疡不溃;
麻黄,辛,微苦,温,入肺,膀胱经,发汗散寒,宣肺平喘,利水消肿,发汗作用较强,是辛温发汗的主药,有较强的平喘作用,用于感受风寒、肺气壅遏所引起的咳嗽、气喘;
板蓝根,苦、寒、归心、胃经,清热解毒,凉血利咽,善清实热火毒,清热凉血,用治热毒斑疹;
杏仁,苦,温,入肺,大肠经,止咳平喘,润肠通便,苦泄降气,主要用于咳逆,喘促,肺热气喘,肠燥便秘和产后便秘;
僵蚕,辛,咸,平,入肝,肺经,息风止痉,化痰,用治风热上扰导致的目赤肿痛,咽喉肿痛;
陈皮,辛,苦,温,入脾,肺经,理气健脾,调畅中焦气机,气行则痛止,用于中气不和而引起的肚胀腹胀满,食欲不振,呕吐,腹泻,燥湿化痰,用治痰湿滞塞、气逆喘咳,消化不良;
甘草,甘,平,入十二经,补中益气,清热解毒,润肺止咳,缓和药性,有甘缓润肺止咳之功,用治咳嗽喘息,肺寒或肺热咳喘,能缓和药物峻烈之性,具有调和诸药的作用;
荷叶,苦,平,入肝、脾、胃经,解暑清热,升发清阳,尿短赤,升发脾阳,用治暑热泄泻,脾虚气陷,散瘀止血,便血;
知母,苦,寒,入肺,胃,肾经,清热,滋阴,润肺,生津,本品苦寒,既泄肺热,又清胃火,适用于肺、胃有实热的病症,肺热痰稠,滋阴润肺,用于阴虚潮热,肺虚燥咳,热病贪饮;
党参,甘,平,入脾,肺经,补中益气,健脾生津,用于久病气虚、倦怠乏力、肺虚喘促、脾虚泄泻,用于气虚下陷所致的脱肛、子宫脱垂;
滑石,甘,寒,入胃,膀胱经,利水通淋,清热解暑,滑石性寒而滑,寒能清热,滑能利窍,泻膀胱热结而通利水道,用治湿热下注的尿赤涩疼痛,淋证,水肿;
大黄,苦,寒,入脾,胃,大肠,肝,心包经,攻积导滞,泻火凉血,活血祛瘀,本品善于荡涤胃实热,燥结积滞,为苦寒攻下之要药,用治热结便秘、腹痛起卧、实热壅滞,既能泻下,又可泄热,活血祛瘀,用于瘀血阻滞,清化湿热,清热解毒;
石膏,辛,甘,大寒,入肺,胃经,清热泻火,本品大寒,具有强大的清热泻火作用,善清气分实热,用于肺胃大热,高热不退等实热亢盛证,清泄肺热,用于肺热咳嗽,气喘,口渴贪饮等实热证,泄胃热,用于胃火亢盛等证;
苍术,辛,苦,温,入脾,胃经,燥湿健脾,发汗解表,祛风湿,用治湿困脾胃,运化失司,食欲不振,消化不良,腹痛泄泻,辛温发散而解表,又能祛风湿;
瓜蒌,甘,寒,入肺,胃,大肠经,清热化痰,宽中散结,本品甘寒清润,能清热化痰,用于肺热咳嗽,痰液粘稠,下润大肠之燥而通便,用于粪便燥结。
诸药相合,共奏清热化痰,发汗解表,清热泻火,活血祛瘀,宣肺平喘,疏散风热,清肺润燥,清肝明目,宣肺祛痰,凉血利咽,补中益气,健脾生津,利水消肿,润肠通便,苦泄降气,理气健脾,利水通淋,清热解暑,散寒除湿之效。
本发明的有益效果:本发明为纯中药制剂,中药组合物配伍合理,安全有效,而且药液和药渣均被利用,既可提高药效又没有造成资源浪费;而且中药有效成分复杂,复方制剂其化学成分更加多元化,抗病毒作用好,且标本兼治,无复发,避免了用抗生素预防和治疗的药物残留,确保食品安全,适宜在畜牧生产中进行推广。上述中药合用对猪繁殖与呼吸综合征毒侵肺卫型症状具有较好的疗效,具有广阔的市场前景和较大的经济效益。
具体实施方式:
下面结合实施例对本发明作进一步说明。
实施例1:本实施例所述的一种预防和治疗毒侵肺卫型猪繁殖与呼吸综合征的中药组合物,包括以下重量份计的中药:桑叶20g,菊花25g,桔梗30g,麻黄40g,板蓝根30g ,杏仁30g,僵蚕20g,陈皮15g,甘草40g,荷叶5g,知母15g,党参25g,滑石45g,大黄25g,石膏15g,苍术15g,瓜蒌25g。
制备方法:准确称取上述各中药,将各味中药逐一粉碎,分别过400目筛,将所有粉末混合均匀即得本发明所述中药组合物粉末。
实施例2:本实施例所述的一种预防和治疗毒侵肺卫型猪繁殖与呼吸综合征的中药组合物,包括以下重量份计的中药:桑叶27g,菊花40g,桔梗25g,麻黄28g,板蓝根40g ,杏仁25g,僵蚕18g,陈皮30g,甘草35g,荷叶12g,知母17g,党参23g,滑石30g,大黄28g,石膏16g,苍术20g,瓜蒌18g。
制备方法:准确称取上述各中药,将其放入煎药罐中,向罐中加入10倍量的纯净水浸泡1h,煎煮30min,过滤,得第一次煎煮滤液;向滤渣中再加入10倍量的体积分数为70%乙醇煎煮30 min,过滤得第二次煎煮滤液;合并两次滤液,减压浓缩成浸膏,干燥喷成粉末;所得滤渣烘干粉碎,与滤液所得粉末混合均匀,分装装袋。
实施例3:本实施例所述的一种预防和治疗毒侵肺卫型猪繁殖与呼吸综合征的中药组合物,包括以下重量份计的中药:桑叶25g,菊花35g,桔梗15g,麻黄30g,板蓝根45g,杏仁35g,僵蚕30g,陈皮25g,甘草50g,荷叶10g,知母20g,党参15g,滑石25g,大黄35g,石膏5g,苍术25g,瓜蒌15g。
制备方法:准确称取上述各中药,将其放入煎药罐中,向罐中加入10倍量的纯净水浸泡1h,煎煮30min,过滤,得第一次煎煮滤液;向滤渣中再加入10倍量的纯净水煎煮30min,过滤得第二次煎煮滤液;合并两次滤液,减压浓缩成浸膏,干燥喷成粉末;所得滤渣烘干粉碎,与滤液所得粉末混合均匀,分装装袋。
实施例4:本实施例所述的一种预防和治疗毒侵肺卫型猪繁殖与呼吸综合征的中药组合物,包括以下重量份计的中药:桑叶30g,菊花35g,桔梗40g,麻黄25g,板蓝根25g,杏仁30g,僵蚕15g,陈皮25g,甘草40g,荷叶15g,知母25g,党参20g,滑石35g,大黄30g,石膏20g,苍术40g,瓜蒌20g。
制备方法:准确称取上述各中药,将其放入煎药罐中,向罐中加入10倍量体积分数为70%乙醇浸泡1h,煎煮30min,过滤,得第一次煎煮滤液;向滤渣中再加入10倍量体积分数为70%乙醇煎煮30 min,过滤得第二次煎煮滤液;合并两次滤液,减压浓缩成浸膏,干燥喷成粉末;所得滤渣烘干粉碎,与滤液所得粉末混合均匀,分装装袋。
实施例5:药物效果测定
(1)本发明中药组合物对Marc-145细胞毒性测定
制备长满Marc-145细胞单层的96孔细胞培养板,本发明的中药组合物用DMEM培养基按照倍比法进行稀释后,使药物的终浓度为(500 g/mL、250 g/mL、125 g/mL、62. 5 g/mL、31.25 g/mL、15. 63 g/mL、7. 81 g/mL、3.95 g/mL、1.98 g/mL、0.99 g/mL、0.49 g/mL、0.25g/mL、0.12 g/mL、0.06 g/mL、0.03 g/mL、15.43 mg/mL、7.71 mg/mL、3.86 mg/mL、1.93 mg/mL、0.97 mg/mL、0.48 mg/mL、0.24 mg/mL),分别加入到细胞孔中,每个药物浓度做4个重复,在5% CO2、37 ℃条件下培养48 h,48 h后取出96孔板,每孔加入20 µL MTT溶液(5 mg/mL),继续培养8 h后取出培养板,吸弃孔内培养液,向每孔加入150 µL二甲基亚砜,置摇床上低速震荡5 min,在OD570nm 条件下测量各孔的吸光值,然后计算药物的最大安全浓度;
(2)本发明中药组合物对PRRSV抑制效果的测定
将本发明中药组合物按照倍比稀释法进行稀释,使药物的终浓度为(500 g/mL、250 g/mL、125 g/mL、62. 5 g/mL、31. 25 g/mL、15. 63 g/mL、7. 81 g/mL、3.95 g/mL、1.98 g/mL、0.99 g/mL、0.49 g/mL、0.25 g/mL、0.12 g/mL、0.06 g/mL、0.03 g/mL、15.43 mg/mL、7.71 mg/mL、3.86 mg/mL、1.93 mg/mL、0.97 mg/mL、0.48 mg/mL、0.24 mg/mL),按照每个浓度4次重复,分别按照每孔接入100 µL药液,接入已长满单层Marc-145细胞的96孔细胞培养板内,5% CO2,37 ℃培养1 h,弃药液;再加入TCID50病毒液每孔100 µL,5% CO2,37 ℃培养1h,另设细胞对照和病毒对照。5% CO2,37 ℃培养5 d,每天观察细胞情况。计算本发明中药组合物在Marc-145细胞上对病毒的吸附阻断浓度;
(3)本发明中药组合物在Marc-145细胞上对病毒的抑制作用
用已长满单层Marc-145细胞的96孔细胞板作为培养板,按照100 µL/孔将TCID50病毒液接入培养板上,5% CO2,37 ℃培养1 h,吸弃病毒液,用PBS液清洗3次,再加入倍比稀释的药液,使药物的终浓度为(500 g/mL、250 g/mL、125 g/mL、62. 5 g/mL、31. 25 g/mL、15.63 g/mL、7. 81 g/mL、3.95 g/mL、1.98 g/mL、0.99 g/mL、0.49 g/mL、0.25 g/mL、0.12 g/mL、0.06 g/mL、0.03 g/mL、15.43 mg/mL、7.71 mg/mL、3.86 mg/mL、1.93 mg/mL、0.97 mg/mL、0.48 mg/mL、0.24 mg/mL),按照100 µL/孔,每个浓度重复4次,设细胞对照组和病毒对照组。将接种好的细胞培养板放入5% CO2,37 ℃培养5 d,每天观察细胞情况;计算本发明中药组合物在Marc-145细胞上对病毒的抑制浓度。
(4)本发明中药组合物在Marc-145细胞上对病毒的直接灭活作用
将TCID50浓度的病毒液与倍比稀释的药液等体积混匀,使药物的终浓度为(500 g/mL、250 g/mL、125 g/mL、62. 5 g/mL、31. 25 g/mL、15. 63 g/mL、7. 81 g/mL、3.95 g/mL、1.98 g/mL、0.99 g/mL、0.49 g/mL、0.25 g/mL、0.12 g/mL、0.06 g/mL、0.03 g/mL、15.43mg/mL、7.71 mg/mL、3.86 mg/mL、1.93 mg/mL、0.97 mg/mL、0.48 mg/mL、0.24 mg/mL),5%CO2,37 ℃培养1 h,分别按照每孔100 µL,每个孔重复4次,接种到长满Marc-145单层细胞的96孔板,同时设置病毒对照孔、药物对照孔和空白细胞对照,5% CO2,37 ℃培养5 d,每天观察细胞情况;计算本发明中药组合物在Marc-145细胞上对病毒的直接灭活浓度。
测定结果见表1.
表1 本发明中药组合物的效果测定结果
最大安全浓度g/ml |
吸附阻断浓度g/ml |
抑制浓度mg/ml |
灭活浓度mg/ml |
250 |
125 |
1.93 |
3.86 |
由表1可知,本发明中药组合物对Marc-145细胞的最大安全浓度为250g/ml,即中药组合物浓度在250g/ml以下时,均可进行细胞实验,对细胞没有毒性;通过本发明中药组合物对PRRSV抑制效果的测定,本发明中药组合物阻断PRRSV对Marc-145细胞不发生病变的最小浓度为125g/ml;通过本发明中药组合物在Marc-145细胞上对病毒的抑制作用的测定,本发明中药组合物完全抑制PRRSV对Marc-145细胞不发生病变的最小浓度为1.93mg/ml;通过本发明中药组合物在Marc-145细胞上对病毒的直接灭活作用测定,本发明中药组合物完全灭活PRRSV对Marc-145细胞不发生病变的最小浓度为3.86 mg/ml。
实施例6:临床应用效果
2016年6月,河北一猪场赵某饲养育肥猪800头,其中80 kg左右的育肥猪45头发病,其中13头出现死亡。患猪体温39~41.5 ℃,有的出现神经症状,呼吸困难,气喘,眼结膜潮红,眼睑水肿,鼻镜及口腔干燥,粪便干量少,呈球状,腹部有红色斑点,耳尖及四肢呈现蓝紫色,根据临床症状及分子诊断,确诊为猪蓝耳病,属毒侵肺卫型,用本发明的中药组合物1kg 兑水5吨,一日两次,连用5 d,让猪自由饮用;第4天症状消失,用药5天后猪群恢复正常。
本发明的中药组合物,制备方法并不仅限于上述实施例所述,还可按照本领域常规方法制成药剂学上各种剂型,如散剂、颗粒剂,口服液、膏剂、丸剂、片剂等各种剂型。所述中药组合物在具体使用时,既可以作为药物使用,也可以作为添加剂使用,也可以作为预混料的载体。