CN109679860B - 一种用于园林绿色废弃物处理的复合菌剂及其制备方法与应用 - Google Patents

一种用于园林绿色废弃物处理的复合菌剂及其制备方法与应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种用于园林绿色废弃物处理的复合菌剂及其制备方法与应用，所述复合菌剂包含黄孢原毛平革菌、绿色木霉、白地霉、产朊假丝酵母、酿酒酵母、胶冻样芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、嗜热链球菌和褐球固氮菌。本发明提供的复合菌剂在进行园林绿色废弃物处理过程中无需添加任何辅料来调节碳氮比和碳磷比，仅通过单独添加复合菌剂就可以完成整个堆肥发酵过程，有效节约了园林绿色废弃物的处理成本，简化了处理工艺。复合菌剂中的微生物能够在发酵过程中快速大量繁殖，促进堆肥快速升温和腐熟，缩短了园林绿色废弃物的处理时间，适于在实践中用于园林绿色废弃物的处理。

Description

一种用于园林绿色废弃物处理的复合菌剂及其制备方法与 应用
技术领域
本发明涉及生物技术和环境保护领域，具体涉及一种用于园林绿色废弃物处理的复合菌剂及其制备方法与应用。
背景技术
园林绿色废弃物也可称为绿色植物废弃物、园林有机废弃物或园林植物废弃物，主要来源于行道树、草坪、公园等的园林植物自然凋落或人工修剪、砍伐产生的植物残体，包括杂草、枯枝、落叶等。
目前，对于园林绿色废弃物的最主要的处理方式为焚烧或填埋，只有少量用于生产有机肥料回归土壤。填埋和焚烧容易形成二次污染，并会造成有限土地资源的浪费。园林绿色废弃物含有丰富的有机质，将园林绿色废弃物进行堆肥发酵处理，通过堆腐使得园林废弃物转化为生物有机肥，与焚烧或填埋的处理方式相比具有明显优势。然而，园林绿色废弃物的成分复杂，且与农业废弃物、动物废弃物等其它有机废弃物的成分差异较大，含有大量的纤维素、木质素和半纤维素等难以降解的成分，自然堆肥需要时间较长，效果不佳。目前报道的园林绿色废弃物堆肥菌剂需要额外配合用于调节C/N比、酸碱度的辅料添加、以及需要调整好氧状态等才能够促进堆肥腐熟，处理过程复杂，处理成本高，因此，亟需开展能够用于园林绿色废弃物高效堆肥处理、且在堆肥处理过程中无需添加辅料的园林绿色废弃物处理菌剂。
发明内容
为解决现有技术中存在的技术问题，本发明的目的在于提供一种用于园林绿色废弃物处理的复合菌剂及其制备方法与应用。
首先，本发明提供一种用于园林绿色废弃物处理的复合菌剂，其含有白腐真菌、木霉属真菌、地霉属真菌、酵母菌、芽孢杆菌属细菌、乳酸菌属细菌、链球菌属细菌和固氮菌；
其中，所述白腐真菌包含黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)；
所述木霉属真菌包含绿色木霉(Trichoderma viride)；
所述地霉属真菌包含白地霉(Geotrichum candidum)；
所述酵母包含产朊假丝酵母(Candida utilis)、酿酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)中的一种或两种；
所述乳酸菌属细菌包含植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)；
所述芽孢杆菌属细菌包含胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)中的一种或两种；
所述链球菌属细菌包含嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)；
所述固氮菌包含褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)。
本发明中，所述复合菌剂的活性成分由黄孢原毛平革菌 (Phanerochaetechrysosporium)、绿色木霉(Trichoderma viride)、白地霉(Geotrichum candidum)、产朊假丝酵母(Candida utilis)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)组成。
为使得本发明所述的复合菌剂对于园林绿色废弃物的处理效果更佳，优选地，所述复合菌剂中褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum) 和黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)的有效活菌数的含量比为3：4～2：1；所述褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)和黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)的有效活菌数之和为占所述复合菌剂的总有效活菌数的25％-40％。
本发明中，所述复合菌剂中各菌株的有效活菌数占复合菌剂的总有效活菌数的比例如下：黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)10-20％，绿色木霉(Trichoderma viride)5-10％，白地霉(Geotrichum candidum)10-15％，产朊假丝酵母(Candida utilis) 10-15％，酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)10-15％，胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)5-10％，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) 15-20％，植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)5-10％，嗜热链球菌 (Streptococcusthermophilus)5-10％，褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)15-20％。
为使得本发明所述的菌剂在接种园林绿色废弃物后实现更好的繁殖，优选地，所述黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)、绿色木霉(Trichoderma viride)、白地霉(Geotrichum candidum)、产朊假丝酵母(Candida utilis)、酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、嗜热链球菌 (Streptococcusthermophilus)、褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum) 的有效活菌数为均≥108。
更优选地，所述复合菌剂中各菌种的有效活菌数均≥109。
为使得本发明所述的复合菌剂对于园林绿色废弃物的具有更好的处理效率，所述褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)和黄孢原毛平革菌(Phanerochaetechrysosporium)的有效活菌数含量比为1： 1～2：1。
作为本发明的一种优选实施方式，所述复合菌剂的总有效活菌数的含量为109～1013；其中，所述黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)的有效活菌数为108～1011cfu/g，绿色木霉(Trichoderma viride)的有效活菌数为107～1011cfu/g，白地霉(Geotrichum candidum) 的有效活菌数为108～1011cfu/g，产朊假丝酵母(Candidautilis)的有效活菌数为108～1011cfu/g，酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的有效活菌数为108～1011cfu/g，胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus) 的有效活菌数为107～1011cfu/g，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的有效活菌数为108～1011cfu/g，植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)的有效活菌数为107～1011cfu/g，嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus) 的有效活菌数为107～1011cfu/g，褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum) 的有效活菌数为108～1011cfu/g。
作为本发明的优选实施方式，所述黄孢原毛平革菌 (Phanerochaetechrysosporium)选自菌种保存编号为CICC 14076的菌株、菌种保存编号为CICC 40299的菌株中的一种或两种；所述绿色木霉(Trichoderma viride)为菌种保存编号CICC 13038的菌株；所述白地霉(Geotrichum candidum)为菌种保存编号CICC 1410的菌株；所述产朊假丝酵母(Candida utilis)为菌种保藏号CICC 31856的菌株；所述酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)为菌种保存编号CICC 1027 的菌株；所述胶冻样芽孢杆菌(Bacillusmucilaginosus)为菌种保存编号CICC 21700的菌株、所述枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)为菌种保存编号CICC 10020的菌株；所述植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)为菌种保藏编号CICC 20264的菌株；所述嗜热链球菌 (Streptococcusthermophilus)为菌种保存编号CICC 20370的菌株；所述褐球固氮菌(Azotobacterchroococcum)为菌种保存编号CICC 22662的菌株。
优选地，本发明中，所述黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)为菌株CICC 14076和菌株CICC 40299。
本发明中，所述复合菌剂为固体菌剂；所述固体菌剂还包括固体载体，所述固体载体为麸皮、玉米粉、园林废弃物、葡萄糖、蔗糖、硫酸铵中的一种或多种。
作为本发明的一种实施方式，所述复合菌剂由黄孢原毛平革菌(Phanerochaetechrysosporium)、绿色木霉(Trichoderma viride)、白地霉(Geotrichum candidum)、产朊假丝酵母(Candida utilis)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)的固体发酵培养物混合制备得到。
进一步地，本发明提供所述复合菌剂的制备方法，包括如下步骤：分别培养黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)、绿色木霉 (Trichoderma viride)、白地霉(Geotrichum candidum)、产朊假丝酵母(Candida utilis)、酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus)、褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)，将得到的发酵培养物混合。
本发明中，所述培养采用固体发酵的方式培养。
为使得本发明的复合菌剂中各菌种能够维持较高的产酶和发酵性能，优选地，所述固体培养基中含有园林绿色废弃物；所述园林绿色废弃物的含量为1％～50％；所述固体发酵的培养基的水分含量为 55％～60％。
进一步地，本发明提供所述的复合菌剂在园林绿色废弃物处理中的应用，所述应用为将所述复合菌剂添加至园林绿色废弃物中。
优选地，所述添加中所述复合菌剂与园林绿色废弃物的质量比为 0.1～1％。
更进一步地，本发明还提供含有本发明所述的复合菌剂的园林绿色废弃物处理剂或园林绿色废弃物堆肥剂。
在此基础上，本发明提供一种园林绿色废弃物的堆肥处理方法，包括如下步骤：
(1)园林绿色废弃物预处理：将园林绿色废弃物粉碎过筛；
(2)堆肥发酵：将所述的复合菌剂以0.1～1％的质量比添加至步骤(1)得到的园林绿色废弃物中，混合均匀，控制初始堆肥水分控制在45～65％。
本申请的技术方案构思原理如下：
园林绿色废弃物含有较高的有机质成分，但多为木质素、纤维素和半纤维素，不易被普通微生物降解，需要能够高效产生木质素、纤维素酶的微生物降解才能够被利用，即便能够被微生物有效降解，园林绿色废弃物的碳氮比过高，速效氮含量十分有限，导致微生物对速效氮的竞争，不利于微生物的快速繁殖，因此，现有技术在处理园林绿色废弃物时一般需要通过添加含有氮源的营养元素调理剂，调节碳氮比，以为微生物创造有利的繁殖条件。本申请在对大量微生物的生理代谢特性、生长繁殖条件和菌群相互作用的研究的基础上，对不同微生物的组合进行了筛选，通过有效利用不同微生物生长代谢的特性，利用黄孢原毛平革菌、绿色木霉、白地霉生产木质素酶、纤维素酶和半纤维素酶的特性，三者复配能够高效降解园林绿色废弃物中的大量木质素、纤维素和半纤维素，为其它发酵微生物提供充分的可利用碳源；通过利用褐球固氮菌固定空气或环境中的氮，提高发酵环境的提高碳氮比和速效氮的含量，合理的固氮菌与产酶真菌的复配能够有效控制发酵体系的碳氮平衡，为发酵微生物的快速大量繁殖提供了营养基础，有效促进了堆肥的快速升温和腐熟，缩短了整体的发酵进程。
同时本申请通过大量筛选得到的微生物组合，能够充分发挥不同菌群的在堆肥发酵过程中的协同和配合的作用，使得发酵微生物在堆肥发酵的不同阶段能够有效衔接，始终占据优势菌群的位置，同时将微生物之间的相互竞争、抑制作用尽量降低，解决了因堆肥发酵的复杂菌群环境中微生物细胞生长、代谢的竞争和不协调，而导致的堆肥腐熟速度慢、周期长的问题。此外，菌体自溶和不良发酵是产生气态氨氮的主要问题，本发明利用特定微生物之间的互生互利关系，使得发酵的不同阶段都会有不同菌种替代衔接，而且前一阶段的死亡或衰老菌体，能够成为下一阶段菌种的一部分营养物质直接消化吸收，有效减少了氨氮的逃逸。
本发明的有益效果在于：
(1)本发明提供的复合菌剂在进行园林绿色废弃物处理过程中无需添加任何辅料来调节碳氮比、碳磷比，通过单独添加复合菌剂就可以完成整个堆肥发酵过程，有效节约了园林绿色废弃物的处理成本，简化了处理工艺，缩减了发酵体积，提高了堆肥地的利用率。
(2)经本发明提供的复合菌剂处理的园林绿色废弃物中的有害物质大大降低：园林绿色废弃物中含有大量有害物质，如较多的酚类、松解油脂、大肠杆菌、寄生虫卵、杂草种子、农药等，本发明提供的复合菌剂在处理园林绿色废弃物时会产生大量的生物热，发酵48h堆体温度可达到45-55℃，72小时后中心温度达到70℃以上，高温维持7 天以上，可有效杀灭虫卵、致病菌、杂草种子等有害物质。微生物的分解代谢过程还可以有效地分解还原有机农药、灭草剂等，有效减少了农药等有害物质的残留。
(3)有效缩短了堆肥发酵时间：本发明提供的复合菌剂能够在无需辅料调节园林绿色废弃物的发酵环境的情况下，在发酵过程中快速大量繁殖，有效促进了堆肥腐熟；同时，因无需辅料添加，减少了其余复杂有机质的干扰，菌种的分解代谢具有靶向性，当木质素、纤维素、半纤维素分解完成后发酵过程随之完毕，仅需一次性发酵过程，无需二次产热发酵。与常规腐熟发酵时间(25-30天)相比，采用本发明的复合菌剂仅需要10-15天即可完成整个堆肥发酵过程。
(4)本发明的复合菌剂中各菌种的生长和适应力强，在园林废弃物发酵处理过程中能够分阶段生长、上阶段发酵菌种为下阶段发酵菌种创造适宜的生长和发酵条件，因此，不需要提前活化菌种，能够有效抵抗其它微生物，抗染菌能力强；同时，本发明复合菌剂中的微生物的温度适应范围广，一年四季温度高低都可使用，冬季仅需酌量增加菌剂添加量即可，无需冬季停工停产。
(5)堆肥发酵气味愉悦，蚊蝇不滋生：现有技术中添加辅料(粪便类、污泥等)的园林绿色废弃物处理过程都有恶臭味产生，本发明无需添加辅料不但减少了第一污染源，而且发酵前期还会产生愉快的发酵酸香气味，发酵中后期逐渐变成无味或泥土的气味，整个发酵过程没有腐臭异味。
(6)采用本发明的复合菌剂处理后的园林绿色废弃物的肥力高，可用于增强土壤肥力，有效促进植物生长。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的优选实施方式进行详细说明。需要理解的是以下实施例的给出仅是为了起到说明的目的，并不是用于对本发明的范围进行限制。本领域的技术人员在不背离本发明的宗旨和精神的情况下，可以对本发明进行各种修改和替换。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法；所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
以下实施例中，如无特殊说明，所述复合菌剂的制备方法如下： 1、斜面培养：
将黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)CICC 14076、黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)CICC 40299、绿色木霉(Trichoderma viride)CICC13038、白地霉 (Geotrichum candidum)CICC 1410分别接种于斜面培养基中，所述斜面培养基的组分如下(1L)：葡萄糖10g、甲基纤维素10g、磷酸氢二钾5g、琼脂15g、加马铃薯提取液定容至1L，pH 7.0-7.2，121℃灭菌，维持时间30min。菌种培养温度25℃，培养48-72h。
将产朊假丝酵母(Candida utilis)CICC 31856和酿酒酵母 (Saccharomycescerevisiae)CICC 1027分别接种于斜面培养基中，所述斜面培养基的组分如下(1L)：蔗糖20g、葡萄糖10g、玉米浆干粉10g、磷酸二氢钾2g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁0.5g、琼脂15g、加水定容至1L，pH 5.5-6.5，121℃灭菌维持30min。菌种培养温度 30℃、培养时间12-24h。
将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CICC 10020接种于斜面培养基，所述斜面培养基的组分如下(1L)：蛋白胨10g、牛肉膏5g、葡萄糖5g、甲基纤维素10g、氯化钠5g、琼脂15g，加水定容至1L， pH 7.0-7.2，121℃灭菌维持30min。菌种培养温度37℃、培养时间 24-48h。
将胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)CICC 21700接种于斜面培养基，所述斜面培养基组分如下(1L)：蔗糖5g、淀粉10g、硫酸镁0.5g、磷酸氢二钾1g、玻璃粉1g、碳酸钙0.2g、琼脂15g，加水定容至1L，pH 7-7.2，121℃灭菌维持30min。菌种培养温度 30℃、培养时间12-24h。
将植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)CICC 20264和嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)CICC 20370分别接种于斜面培养基，所述斜面培养基的组分如下(1L)：大豆蛋白粉5g、甲基纤维素10g、葡萄糖2g、酵母膏1g、乙酸钠5g、玉米浆粉5g、琼脂15g，加水定容至1L，pH 5.0-5.5，121℃灭菌维持30min。菌种培养温度37℃、培养12-24h。
将褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)CICC 22662接种于斜面培养基，所述斜面培养基的组分如下(1L)：酵母浸膏5g、甘露醇5g、磷酸氢二钾0.5g、磷酸二氢钾0.5g、硫酸镁0.2g、氯化铁1 滴、琼脂15g、加豆浆定容至1L，pH 7.0-7.2，121℃灭菌维持30min。菌种培养温度28℃、培养24-48h。
2、固体发酵
将上述步骤1制备的黄孢原毛平革菌 (Phanerochaete chrysosporium)CICC14076、黄孢原毛平革菌 (Phanerochaete chrysosporium)CICC 40299、绿色木霉(Trichoderma viride)CICC 13038、白地霉(Geotrichum candidum) CICC 1410的斜面培养物，分别接种于固体发酵培养基中，所述固体发酵培养基配方如下(各组分均为质量百分含量)：麸皮50％、玉米粉2％、园林绿色废弃物(粉碎40目)47％、葡萄糖0.5％、碳酸钙0.1％、尿素0.3％、磷酸氢二钾0.1％，水分调节55-60％，罐头瓶中牛皮纸封口，温度121℃灭菌维持30min。放置于恒温箱中，于 25℃、培养48-72小时。
将上述步骤1制备的产朊假丝酵母(Candida utilis)CICC 31856 和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CICC 1027的斜面培养物分别接种于固体发酵培养基中。所述固体发酵培养基的配方如下：麸皮50％、玉米粉2％、园林绿色废弃物(粉碎40目)45％、葡萄糖 1％、蔗糖1％、尿素0.5％、硫酸铵0.3％、磷酸氢二钾0.1％、磷酸二氢钾0.1％，水分调节55-60％，罐头瓶中牛皮纸封口，121℃灭菌维持时间30min。放置于恒温箱中，培养温度30℃、培养24-48 小时。
将上述步骤1制备的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CICC 10020 的斜面培养物接种于固体发酵培养基中。所述固体发酵培养基的配方如下：麸皮50％、玉米粉2％、园林绿色废弃物(粉碎40目)45％、葡萄糖1％、蔗糖1％、尿素0.5％、硫酸铵0.3％、磷酸氢二钾0.1％、磷酸二氢钾0.1％，水分调节55-60％，罐头瓶中牛皮纸封口，121℃灭菌维持时间30min，放置于恒温箱中，温度37℃、培养24-48小时。
将上述步骤1制备的胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus) CICC 21700的斜面培养物接种于固体发酵培养基中，所述固体发酵培养基的配方如下：麸皮50％、玉米粉2％、园林绿色废弃物(粉碎 40目)46％蔗糖1％、硫酸镁0.5g、磷酸氢二钾0.1、玻璃粉0.1、碳酸钙0.2％、蛋白胨0.1％，水分调节55-60％、，罐头瓶中牛皮纸封口， 121℃灭菌维持时间30min。放置于恒温箱中温度30℃、培养24-48 小时。
将上述步骤1制备的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)CICC 20264和嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)CICC 20370的斜面培养物分别接种于固体发酵培养基中，所述固体发酵培养基的配方如下：麸皮50％、玉米粉2％、园林绿色废弃物(粉碎40目)4％、奶粉1％、葡萄糖1％、蔗糖1％、尿素0.5％、硫酸铵0.3％、磷酸氢二钾0.1％、磷酸二氢钾0.1％，水分调节55-60％，罐头瓶中牛皮纸封口，121℃灭菌维持时间30min，放置于恒温箱中，温度37℃、厌氧培养24-48小时。
将上述步骤1制备的褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum) CICC 22662的斜面培养物，接种于固体发酵培养基中，所述固体发酵培养基的配方如下：麸皮50％、豆粕粉2％、园林绿色废弃物(粉碎40目)45％、葡萄糖1％、蔗糖1％、尿素0.5％、硫酸铵0.3％、磷酸氢二钾0.1％、磷酸二氢钾0.1％，水分调节55-60％，罐头瓶中牛皮纸封口，121℃灭菌维持时间30min，放置于恒温箱中，温度 28℃、培养24-48小时。
3、复合菌剂的制备
将上述获得的复合菌剂各组分的固体发酵培养物按比例混合，通过调整发酵培养时间和固体发酵培养物添加的质量百分含量，得到含有特定的有效活菌数的复合菌剂。
本发明的复合菌剂中各菌株的有效活菌数占复合菌剂的总有效活菌数的比例如下：
Figure BDA0001887408760000121
实施例1
本实施例提供一种用于园林绿色废弃物处理的复合菌剂，所述复合菌剂的组分如下(有效活菌数/g菌剂)：
Figure BDA0001887408760000122
Figure BDA0001887408760000131
实施例2
本实施例提供一种用于园林绿色废弃物处理的复合菌剂，所述复合菌剂的组分如下(有效活菌数/g菌剂)：
Figure BDA0001887408760000132
实施例3
本实施例提供一种用于园林绿色废弃物处理的复合菌剂，所述复合菌剂的组分如下(有效活菌数/g菌剂)：
Figure BDA0001887408760000133
Figure BDA0001887408760000141
实验例1园林绿色废弃物处理实验
取园林绿色废弃物1吨，粉碎成40目，分别添加本发明实施例 1～3制备的复合菌剂1kg，添加量为0.1％，混合均匀。调节堆肥混合体系的水分为60％，以抓握物料略有水分渗出为好，将上述混合物堆砌成三角垛静止培养。堆肥开始前检测园林绿色废弃物合复合菌剂混合的堆肥体系的原始有机质(绝干)为99％、pH为6.8、水分为61％、初始菌数0.17×108cfu/mL、初始温度24℃。堆肥发酵过程共计12天，当堆肥温度升至55℃时开始翻抛，当堆肥水分低于 50％时进行补水。每12小时监测堆肥的温度、水分和微生物含量，每24小时监测有机质含量(采用重络酸钾法检测有机质含量)，添加实施例1的复合菌剂的堆肥过程中各指标变化如表1所示。
表1园林绿色废弃物堆肥处理过程监测
Figure BDA0001887408760000142
Figure BDA0001887408760000151
结果表明，添加实施例1的复合菌剂的园林绿色废弃物堆肥处理过程中，复合菌剂中的菌种可以快速生长繁殖，整个堆肥发酵阶段升温明显、快速，发酵48h堆体温度可达到55℃；并维持了较高的温度(72小时后中心温度达到70℃以上)，高温维持时间长(7 天以上)，仅需12天即完成了整个堆肥发酵。复合菌剂中的菌种能够有效降解园林绿色废弃物中的有机质，随着堆肥时间的延长，有机质含量明显下降。堆肥后监测未发现大肠杆菌、蛔虫卵等致病菌各项指标完全达到国家要求的无害化处理工艺指标，同时，堆肥发酵的整个过程中菌群稳定、无臭气散发、且有机质分解彻底。添加实施例2和3的复合菌剂进行园林绿色废弃物堆肥处理同样可以达到上述处理效果。
实验例2植物发芽率试验
参考GB/T 5520-2011(籽粒发芽试验)进行植物发芽率的试验，经实施例1的复合菌剂处理得到的园林绿色废弃物的处理物取样 100g，加入500mL水混合均匀后，取上清液备用。将小麦种子分别放在铺有2-4层滤纸的9cm培养皿，加入15mL上清液使滤纸湿润，播种100粒，每组做3个平行样品，放入20℃气候培养箱中，开始观察发芽情况，于播种后第15天统计种子发芽率。结果表明，经实施例1的复合菌剂处理得到的园林绿色废弃物的处理物培养的小麦的发芽率达到97％。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明的基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (15)

1.一种用于园林绿色废弃物处理的复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂的活性成分由黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)、绿色木霉(Trichoderma viride)、白地霉(Geotrichum candidum)、产朊假丝酵母(Candida utilis)、酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus)、褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)组成。
2.根据权利要求1所述的复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂中褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)和黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)的有效活菌数的含量比为3：4～2：1；所述褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)和黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)的有效活菌数之和占所述复合菌剂的总有效活菌数的25％-40％。
3.根据权利要求1或2所述的复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂中各菌株的有效活菌数占所述菌剂的总有效活菌数的比例如下：黄孢原毛平革菌(Phanerochaetechrysosporium)10-20％，绿色木霉(Trichoderma viride)5-10％，白地霉(Geotrichumcandidum)10-15％，产朊假丝酵母(Candida utilis)10-15％，酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)10-15％，胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)5-10％，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)15-20％，植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)5-10％，嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)5-10％，褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)15-20％。
4.根据权利要求3所述的复合菌剂，其特征在于，所述黄孢原毛平革菌(Phanerochaetechrysosporium)、绿色木霉(Trichoderma viride)、白地霉(Geotrichum candidum)、产朊假丝酵母(Candida utilis)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)的有效活菌数均≥108；
所述褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)和黄孢原毛平革菌(Phanerochaetechrysosporium)的有效活菌数的含量比为1：1～2：1。
5.根据权利要求1或2所述的复合菌剂，其特征在于，所述菌剂为固体菌剂；所述固体菌剂还包括固体载体。
6.根据权利要求3所述的复合菌剂，其特征在于，所述菌剂为固体菌剂；所述固体菌剂还包括固体载体。
7.根据权利要求5所述的复合菌剂，其特征在于，所述固体载体为麸皮、玉米粉、园林废弃物、葡萄糖、蔗糖、硫酸铵中的一种或多种。
8.根据权利要求6所述的复合菌剂，其特征在于，所述固体载体为麸皮、玉米粉、园林废弃物、葡萄糖、蔗糖、硫酸铵中的一种或多种。
9.权利要求1～8任一项所述的复合菌剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：分别培养黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)、绿色木霉(Trichoderma viride)、白地霉(Geotrichum candidum)、产朊假丝酵母(Candida utilis)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)，将得到的发酵培养物混合。
10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述培养为采用固体发酵的方式培养。
11.根据权利要求10所述的制备方法，其特征在于，所述固体发酵的培养基中含有园林绿色废弃物；所述园林绿色废弃物的含量为1％～50％；所述固体发酵的培养基的水分含量为55％～60％。
12.权利要求1～8任一项所述的复合菌剂在园林绿色废弃物处理中的应用，其特征在于，所述应用为将所述复合菌剂添加至园林绿色废弃物中。
13.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述添加中所述复合菌剂与园林绿色废弃物的质量比为0.1～1％。
14.含有权利要求1～8任一项所述的复合菌剂的园林绿色废弃物处理剂或园林绿色废弃物堆肥剂。
15.一种园林绿色废弃物的堆肥处理方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)园林绿色废弃物预处理：将园林绿色废弃物粉碎过筛；
(2)堆肥发酵：将权利要求1～8任一项所述的复合菌剂以0.1～1％的质量比添加至步骤(1)得到的园林绿色废弃物中，混合均匀，控制初始堆肥水分为45～65％。
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Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109852557B (zh) * 2018-11-30 2021-03-26 北京国环清华环境工程设计研究院有限公司 一种用于城镇存量垃圾稳定化处理的复合菌剂及其制备方法与应用
CN111217638B (zh) * 2020-01-15 2022-02-01 山东省农业科学院农业资源与环境研究所 一种含有过酸化沼液的堆肥添加剂及制备方法与应用
CN111285713A (zh) * 2020-04-08 2020-06-16 环创(厦门）科技股份有限公司 一种以园林垃圾为原料的有机肥料及其制备方法
CN111528043A (zh) * 2020-05-09 2020-08-14 武汉华天园林艺术有限公司 利用园林废弃物栽培绿化苗木的方法
CN112125712A (zh) * 2020-09-08 2020-12-25 华侨大学 一种垃圾处理方法
CN112522164B (zh) * 2020-12-25 2023-04-21 新疆农业科学院微生物应用研究所（中国新疆-亚美尼亚生物工程研究开发中心） 一种林果枝条腐熟菌剂及其制备方法和应用
CN114685213A (zh) * 2020-12-30 2022-07-01 北京农学院 一种桃枝有机复合肥料的制备方法
CN114685200A (zh) * 2020-12-30 2022-07-01 北京农学院 一种桃树废弃物的降解方法
CN113582777A (zh) * 2021-09-08 2021-11-02 重庆市风景园林科学研究院 一种发酵菌剂及其在园林植物废弃物堆肥中的应用技术
CN113816780A (zh) * 2021-11-22 2021-12-21 山东绿达建设发展集团有限公司 一种园林绿化废弃物的堆肥化处理方法
CN114606168B (zh) * 2022-04-26 2023-12-22 中国林业科学研究院林业研究所 一种用于生态恢复的复合菌剂、组合物及其制备方法和应用

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015100432A2 (en) * 2013-12-24 2015-07-02 Symbiota, Inc. Method for propagating microorganisms within plant bioreactors and stably storing microorganisms within agricultural seeds
WO2015100431A2 (en) * 2013-12-24 2015-07-02 Symbiota, Inc. Plants containing beneficial endophytes
CN104988095A (zh) * 2015-07-03 2015-10-21 北京农学院 一株嗜热一氧化碳链霉菌低温亚种Dstr3-3及其应用
WO2015200902A2 (en) * 2014-06-26 2015-12-30 Symbiota, LLC Endophytes, associated compositions, and methods of use thereof
WO2015200852A2 (en) * 2014-06-26 2015-12-30 Ait Austrian Institute Of Technology Gmbh Plant-endophyte combinations and uses therefor
CN105385618A (zh) * 2015-09-29 2016-03-09 路域生态工程有限公司 边坡、驳岸植被群落免人工养护菌剂及其施工方法

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015100432A2 (en) * 2013-12-24 2015-07-02 Symbiota, Inc. Method for propagating microorganisms within plant bioreactors and stably storing microorganisms within agricultural seeds
WO2015100431A2 (en) * 2013-12-24 2015-07-02 Symbiota, Inc. Plants containing beneficial endophytes
WO2015200902A2 (en) * 2014-06-26 2015-12-30 Symbiota, LLC Endophytes, associated compositions, and methods of use thereof
WO2015200852A2 (en) * 2014-06-26 2015-12-30 Ait Austrian Institute Of Technology Gmbh Plant-endophyte combinations and uses therefor
CN104988095A (zh) * 2015-07-03 2015-10-21 北京农学院 一株嗜热一氧化碳链霉菌低温亚种Dstr3-3及其应用
CN105385618A (zh) * 2015-09-29 2016-03-09 路域生态工程有限公司 边坡、驳岸植被群落免人工养护菌剂及其施工方法

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