CN109348952B - 一种提高旱柳耐盐性能的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种利用提高旱柳耐盐性能的方法，利用旱柳和沙柳进行杂交，对杂种苗静培育，然后制取插穗进行水插苗培育，待水插苗苗干开始木质化后进行盐浓度胁迫处理。本发明提高了旱柳的耐盐性能，耐盐能力提高至0.5％以上，达到培育耐盐速生柳树的目的。本发明公开的杂交育种方法通过选择适宜年龄和适宜位置的沙柳雄花枝与旱柳杂交，显著提高了杂交子代的耐盐能力，该方法操作简单、易于接受和掌握，同时成本较低，具有良好的推广应用之价值。
Description
技术领域
本发明属于树木抗逆生理技术领域，具体涉及一种提高旱柳耐盐性能的方法。
背景技术
这里的陈述仅提供与本公开有关的背景信息，而不必然构成现有技术。
全世界约有57亿亩土地具有不同程度的盐渍化，约可耕地面积的10％。我国也约有15亿多亩各种盐渍土地，其中现代盐渍土约5.6亿亩，残余盐渍土约6.7亿亩，其他潜在盐渍土约216亿多亩。如何开发和利用我国上亿亩盐渍化土壤，培养抗盐作物品种，提高作物产量就成为我国农业生产中十分重要的任务。
柳属在世界上有500多种，柳属种质资源多样，不同种间在生长、耐盐、耐寒、形态、适应性等方面存在丰富遗传变异。旱柳分布很广，生长速度快，寿命长达50～70年，也有超过200年的老树，具有很好的应用价值，但是耐盐性较差，耐盐能力只有0.2-0.25％，超过此浓度就会使得成活率非常低。目前尚无提高旱柳耐盐性能的高效方法。
发明内容
针对上述问题，本发明的目的是提供一种提高旱柳耐盐性能的方法。本发明选择旱柳和沙柳进行杂交，利用旱柳和沙柳在耐盐性能上的遗传变异特点，通过选择适宜的杂交亲本母株和杂交花枝，提高了旱柳子代耐盐性能，子代耐盐能力提高到0.5％，达到培育耐盐速生柳树的目的。
本公开具体采用以下技术方案：
一种提高旱柳耐盐性能的方法，包括以下步骤：
步骤一、亲本选择：选择4-5年生旱柳孤立木雌株做母本，选择4-5年生沙柳孤立木雄株做父本；
步骤二、花枝制取：采取旱柳树冠中上部健壮枝条做雌花枝，沙柳树冠中上部枝条做雄花枝；
步骤三、温室水培杂交，并进行杂种苗培育；
步骤四、插穗制取：在步骤四培育的苗木中部2/3苗干截取插穗；
步骤五、耐盐胁迫处理：将上述插穗进行水培，待苗干开始木质化后，将其固定在盐浓度中进行胁迫处理7～10天，10天后存活下来的即为耐盐性能较高的旱柳。
优选地，所述雌花枝直径2-3cm，长度90-110cm，雄花枝直径0.8-2.0cm，长度50-100cm。
优选地，温室水培杂交条件为控制温度在18-20℃之间，湿度60％左右，每天换水1次并及时剪除花枝底部枝条。
优选地，杂种苗培育过程为：收集杂交种子，去除絮毛后进行播种育苗，待苗木高度达到15-20cm后进行移植，株行距为50cm╳50cm；移植后常规管理，注意灌溉、病虫害防治和杂草控制。
优选地，步骤四中，所述苗木生长至少1年；所述插穗长度为12-16cm，每个插穗至少1个叶芽，最上部叶芽距插穗顶端0.8-1cm。
优选地，插穗水培深度为6-8cm，并定时更换营养液并用氧气泵对营养液进行加氧。
优选地，所述胁迫处理用NaCl单盐浓度，设置0.2％～0.6％的盐分梯度浓度。
上述所述的方法在提高柳树耐盐性能中的应用。
优选地，所述柳树为旱柳。
与相关技术相比，本发明具有如下有益效果：
1、本公开的技术方案能够充分利用旱柳和沙柳在耐盐性能上的遗传变异特点，通过选择适宜的杂交亲本母株和杂交花枝，利用旱柳和沙柳进行种间杂交，并进行耐盐胁迫处理，培育杂交子代，提高杂交子代的耐盐性能，耐盐能力提高到0.5％，达到培育耐盐速生柳树的目的。
2、本发明公开的杂交育种方法通过选择适宜年龄和适宜位置的沙柳雄花枝与旱柳杂交，显著提高了杂交子代的耐盐能力，该方法操作简单、易于接受和掌握，同时成本较低，具有良好的推广应用之价值。
具体实施方式
应该指出，以下详细说明都是示例性的，旨在对本公开提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本公开所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本公开的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作和/或它们的组合。
正如背景技术所介绍的，发明人所知晓的柳树抗逆育种存在一定的不足，为了解决如上的技术问题，本发明的一个具体实施方式中，提供一种提高旱柳耐盐性能的方法，包括以下步骤：
步骤一、亲本选择：选择4-5年生旱柳孤立木雌株做母本，选择4-5年生沙柳孤立木雄株做父本；
步骤二、花枝制取：采取旱柳树冠中上部健壮枝条做雌花枝，沙柳树冠中上部枝条做雄花枝；
步骤三、温室水培杂交，并进行杂种苗培育；
步骤四、插穗制取：在步骤四培育的苗木中部2/3苗干截取插穗；
步骤五、耐盐胁迫处理：将上述插穗进行水培，待苗干开始木质化后，将其固定在盐浓度中进行胁迫处理7～10天，10天后存活下来的即为耐盐性能较高的旱柳。
本发明的又一具体实施方式中，所述雌花枝直径2-3cm，长度90-110cm，雄花枝直径0.8-2.0cm，长度50-100cm。
本发明的又一具体实施方式中，温室水培杂交条件为控制温度在18-20℃之间，湿度60％左右，每天换水1次并及时剪除花枝底部枝条。
本发明的又一具体实施方式中，杂种苗培育过程为：收集杂交种子，去除絮毛后进行营养杯播种育苗，待苗木高度达到15-20cm后进行移植，株行距为50cm╳50cm；移植后常规管理，注意灌溉、病虫害防治和杂草控制。
本发明的又一具体实施方式中，步骤四中，所述苗木生长至少1年；所述插穗长度为12-16cm，每个插穗至少1个叶芽，最上部叶芽距插穗顶端0.8-1cm。
本发明的又一具体实施方式中，插穗水培深度为6-8cm，并定时更换营养液并用氧气泵对营养液进行加氧。
本发明的又一具体实施方式中，所述胁迫处理用NaCl单盐浓度梯度，设置0.2％～0.6％的盐分梯度浓度。
为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本公开的技术方案，以下将结合10个具体的实验例详细说明本公开的技术方案，但实验研究探索过程中并不仅仅限于以下实验例。
实施例1
步骤一、亲本选择：选择旱柳做母本，沙柳做父本。
步骤二、母株选择：选择5年生旱柳孤立木做雌株，5年生沙柳孤立木做雄株。
步骤三、花枝制取：采取旱柳树冠中上部健壮枝条做雌花枝，沙柳树冠中上部枝条做雄花枝。雌花枝直径2-3cm，长度100cm左右，雄花枝直径0.8-2.0cm，长度50-100cm。
步骤四、温室水培杂交：将雌雄花枝按照杂交组合分开放于温室进行水培。控制温室温度在20℃，湿度60％左右。每天换水1次并及时剪除花枝底部枝条。
步骤五、杂种苗培育：收集杂交种子，去除絮毛后进行营养杯播种育苗，待苗木高度达到15-20cm后进行移植，株行距为50cm╳50cm左右。移植后常规管理，注意灌溉、病虫害防治和杂草控制。
步骤六、插穗制取：待苗木生长1年后，在休眠期测量子代苗木高度，计算平均值，选取平均苗木20株，利用苗木中部2/3苗干截取100个插穗，插穗长度为20cm，每个插穗至少1个叶芽，最上部叶芽距插穗顶端0.8-1cm。
步骤七、水插苗培育：利用营养液对插穗进行水培，水插深度8cm，注意定时更换营养液并用氧气泵对营养液进行加氧。
步骤八、盐溶液配制：采用NaCl单盐浓度，设置0.2％、0.4％、0.5％和0.6％四个盐分浓度。
步骤九、胁迫处理：待水插苗苗干长至15cm左右，开始木质化后，将水插苗固定于步骤五配制好的盐溶液中，一起放置于温室中进行盐胁迫测定，盐溶液体积要根据水分消耗程度进行及时补足。
步骤十、数理统计：每天进行观测记录死亡株数，胁迫开始后第8天有苗木开始死亡，直至连续10天没有苗木死亡为止。0.2％、0.4％、0.5％和0.6％四个盐浓度胁迫的成活株数分别为100株、90株、45株和12株，成活率分别为100％、90％、45％和12％。
实施例2
步骤一、亲本选择：选择旱柳做母本，沙柳做父本。
步骤二、母株选择：选择5年生旱柳孤立木做雌株，5年生沙柳孤立木做雄株。
步骤三、花枝制取：采取旱柳树冠中上部健壮枝条做雌花枝，沙柳树冠下部枝条做雄花枝。雌花枝直径2-3cm，长度100cm左右，雄花枝直径0.8-2.0cm，长度50-100cm。
步骤四、温室水培杂交：将雌雄花枝按照杂交组合分开放于温室进行水培。控制温室温度在18℃，湿度60％左右。每天换水1次并及时剪除花枝底部枝条。
步骤五、杂种苗培育：收集杂交种子，去除絮毛后进行营养杯播种育苗，待苗木高度达到15-20cm后进行移植，株行距为50cm╳50cm左右。移植后常规管理，注意灌溉、病虫害防治和杂草控制。
步骤六、插穗制取：待苗木生长1年后，在休眠期测量子代苗木高度，计算平均值，选取平均苗木20株，利用苗木中部2/3苗干截取100个插穗，插穗长度为15cm，每个插穗至少1个叶芽，最上部叶芽距插穗顶端0.8-1cm。
步骤七、水插苗培育：利用营养液对插穗进行水培，水插深度7cm，注意定时更换营养液并用氧气泵对营养液进行加氧。
步骤八、盐溶液配制：采用NaCl单盐浓度，设置0.2％、0.4％、0.5％和0.6％四个盐分浓度。
步骤九、胁迫处理：待水插苗苗干长至15cm左右，开始木质化后，将水插苗固定于步骤五配制好的盐溶液中，一起放置于温室中进行盐胁迫测定，盐溶液体积要根据水分消耗程度进行及时补足。
步骤十、数理统计：每天进行观测记录死亡株数，胁迫开始后第7天有苗木开始死亡，直至连续10天没有苗木死亡为止。0.2％、0.4％、0.5％和0.6％四个盐浓度胁迫的成活株数分别为100株、84株、36株和7株，成活率分别为100％、84％、36％和7％。
实施例3
步骤一、亲本选择：选择旱柳做母本，沙柳做父本。
步骤二、母株选择：选择5年生旱柳孤立木做雌株，5年生沙柳林分单株做雄株。
步骤三、花枝制取：采取旱柳树冠中上部健壮枝条做雌花枝，沙柳树冠中上部枝条做雄花枝。雌花枝直径2-3cm，长度100cm左右，雄花枝直径0.8-2.0cm，长度50-100cm。
步骤四、温室水培杂交：将雌雄花枝按照杂交组合分开放于温室进行水培。控制温室温度在18℃，湿度60％左右。每天换水1次并及时剪除花枝底部枝条。
步骤五、杂种苗培育：收集杂交种子，去除絮毛后进行营养杯播种育苗，待苗木高度达到15-20cm后进行移植，株行距为50cm╳50cm左右。移植后常规管理，注意灌溉、病虫害防治和杂草控制。
步骤六、插穗制取：待苗木生长1年后，在休眠期测量子代苗木高度，计算平均值，选取平均苗木20株，利用苗木中部2/3苗干截取100个插穗，插穗长度为15cm，每个插穗至少1个叶芽，最上部叶芽距插穗顶端0.8-1cm。
步骤七、水插苗培育：利用营养液对插穗进行水培，水插深度6cm，注意定时更换营养液并用氧气泵对营养液进行加氧。
步骤八、盐溶液配制：采用NaCl单盐浓度，设置0.2％、0.4％、0.5％和0.6％四个盐分浓度。
步骤九、胁迫处理：待水插苗苗干长至15cm左右，开始木质化后，将水插苗固定于步骤五配制好的盐溶液中，一起放置于温室中进行盐胁迫测定，盐溶液体积要根据水分消耗程度进行及时补足。
步骤十、数理统计：每天进行观测记录死亡株数，胁迫开始后第7天有苗木开始死亡，直至连续10天没有苗木死亡为止。0.2％、0.4％、0.5％和0.6％四个盐浓度胁迫的成活株数分别为100株、81株、30株和5株，成活率分别为100％、81％、30％和5％。
实施例4
步骤一、亲本选择：选择旱柳做母本，沙柳做父本。
步骤二、母株选择：选择5年生旱柳孤立木做雌株，5年生沙柳林分单株做雄株。
步骤三、花枝制取：采取旱柳树冠中上部健壮枝条做雌花枝，沙柳树冠下部枝条做雄花枝。雌花枝直径2-3cm，长度100cm左右，雄花枝直径0.8-2.0cm，长度50-100cm。
步骤四、温室水培杂交：将雌雄花枝按照杂交组合分开放于温室进行水培。控制温室温度在20℃，湿度60％左右。每天换水1次并及时剪除花枝底部枝条。
步骤五、杂种苗培育：收集杂交种子，去除絮毛后进行营养杯播种育苗，待苗木高度达到15-20cm后进行移植，株行距为50cm╳50cm左右。移植后常规管理，注意灌溉、病虫害防治和杂草控制。
步骤六、插穗制取：待苗木生长1年后，在休眠期测量子代苗木高度，计算平均值，选取平均苗木25株，利用苗木中部2/3苗干截取100个插穗，插穗长度为15cm，每个插穗至少1个叶芽，最上部叶芽距插穗顶端0.8-1cm。
步骤七、水插苗培育：利用营养液对插穗进行水培，水插深度7cm，注意定时更换营养液并用氧气泵对营养液进行加氧。
步骤八、盐溶液配制：采用NaCl单盐浓度，设置0.2％、0.4％、0.5％和0.6％四个盐分浓度。
步骤十、胁迫处理：待水插苗苗干长至15cm左右，开始木质化后，将水插苗固定于步骤五配制好的盐溶液中，一起放置于温室中进行盐胁迫测定，盐溶液体积要根据水分消耗程度进行及时补足。
步骤七、数理统计：每天进行观测记录死亡株数，胁迫开始后第7天有苗木开始死亡，直至连续10天没有苗木死亡为止。0.2％、0.4％、0.5％和0.6％四个盐浓度胁迫的成活株数分别为100株、70株、26株和3株，成活率分别为100％、70％、26％和3％。
实施例5
步骤一、亲本选择：选择旱柳做母本，沙柳做父本。
步骤二、母株选择：选择4年生旱柳孤立木做雌株，4年生沙柳孤立木做雄株。
步骤三、花枝制取：采取旱柳树冠中上部健壮枝条做雌花枝，沙柳树冠中上部枝条做雄花枝。雌花枝直径2-3cm，长度100cm左右，雄花枝直径0.8-2.0cm，长度50-100cm。
步骤四、温室水培杂交：将雌雄花枝按照杂交组合分开放于温室进行水培。控制温室温度在20℃，湿度60％左右。每天换水1次并及时剪除花枝底部枝条。
步骤五、杂种苗培育：收集杂交种子，去除絮毛后进行营养杯播种育苗，待苗木高度达到15-20cm后进行移植，株行距为50cm╳50cm左右。移植后常规管理，注意灌溉、病虫害防治和杂草控制。
步骤六、插穗制取：待苗木生长1年后，在休眠期测量子代苗木高度，计算平均值，选取平均苗木20株，利用苗木中部2/3苗干截取100个插穗，插穗长度为20cm，每个插穗至少1个叶芽，最上部叶芽距插穗顶端0.8-1cm。
步骤七、水插苗培育：利用营养液对插穗进行水培，水插深度8cm，注意定时更换营养液并用氧气泵对营养液进行加氧。
步骤八、盐溶液配制：采用NaCl单盐浓度，设置0.2％、0.4％、0.5％和0.6％四个盐分浓度。
步骤九、胁迫处理：待水插苗苗干长至15cm左右，开始木质化后，将水插苗固定于步骤五配制好的盐溶液中，一起放置于温室中进行盐胁迫测定，盐溶液体积要根据水分消耗程度进行及时补足。
步骤十、数理统计：每天进行观测记录死亡株数，胁迫开始后第8天有苗木开始死亡，直至连续10天没有苗木死亡为止。0.2％、0.4％、0.5％和0.6％四个盐浓度胁迫的成活株数分别为100株、88株、42株和10株，成活率分别为100％、88％、42％和10％。
实施例6
步骤一、亲本选择：选择旱柳做母本，沙柳做父本。
步骤二、母株选择：选择4年生旱柳孤立木做雌株，4年生沙柳孤立木做雄株。
步骤三、花枝制取：采取旱柳树冠中上部健壮枝条做雌花枝，沙柳树冠下部枝条做雄花枝。雌花枝直径2-3cm，长度100cm左右，雄花枝直径0.8-2.0cm，长度50-100cm。
步骤四、温室水培杂交：将雌雄花枝按照杂交组合分开放于温室进行水培。控制温室温度在18℃，湿度60％左右。每天换水1次并及时剪除花枝底部枝条。
步骤五、杂种苗培育：收集杂交种子，去除絮毛后进行营养杯播种育苗，待苗木高度达到15-20cm后进行移植，株行距为50cm╳50cm左右。移植后常规管理，注意灌溉、病虫害防治和杂草控制。
步骤六、插穗制取：待苗木生长1年后，在休眠期测量子代苗木高度，计算平均值，选取平均苗木22株，利用苗木中部2/3苗干截取100个插穗，插穗长度为16cm，每个插穗至少1个叶芽，最上部叶芽距插穗顶端0.8-1cm。
步骤七、水插苗培育：利用营养液对插穗进行水培，水插深度6cm，注意定时更换营养液并用氧气泵对营养液进行加氧。
步骤八、盐溶液配制：采用NaCl单盐浓度，设置0.2％、0.4％、0.5％和0.6％四个盐分浓度。
步骤九、胁迫处理：待水插苗苗干长至15cm左右，开始木质化后，将水插苗固定于步骤五配制好的盐溶液中，一起放置于温室中进行盐胁迫测定，盐溶液体积要根据水分消耗程度进行及时补足。
步骤十、数理统计：每天进行观测记录死亡株数，胁迫开始后第7天有苗木开始死亡，直至连续10天没有苗木死亡为止。0.2％、0.4％、0.5％和0.6％四个盐浓度胁迫的成活株数分别为100株、86株、36株和6株，成活率分别为100％、86％、36％和6％。
实施例7
步骤一、亲本选择：选择旱柳做母本，沙柳做父本。
步骤二、母株选择：选择4年生旱柳孤立木做雌株，4年生沙柳林分单株做雄株。
步骤三、花枝制取：采取旱柳树冠中上部健壮枝条做雌花枝，沙柳树冠中上部枝条做雄花枝。雌花枝直径2-3cm，长度100cm左右，雄花枝直径0.8-2.0cm，长度50-100cm。
步骤四、温室水培杂交：将雌雄花枝按照杂交组合分开放于温室进行水培。控制温室温度在18℃，湿度60％左右。每天换水1次并及时剪除花枝底部枝条。
步骤五、杂种苗培育：收集杂交种子，去除絮毛后进行营养杯播种育苗，待苗木高度达到15-20cm后进行移植，株行距为50cm╳50cm左右。移植后常规管理，注意灌溉、病虫害防治和杂草控制。
步骤六、插穗制取：待苗木生长1年后，在休眠期测量子代苗木高度，计算平均值，选取平均苗木25株，利用苗木中部2/3苗干截取100个插穗，插穗长度为18cm，每个插穗至少1个叶芽，最上部叶芽距插穗顶端0.8-1cm。
步骤七、水插苗培育：利用营养液对插穗进行水培，水插深度7cm，注意定时更换营养液并用氧气泵对营养液进行加氧。
步骤八、盐溶液配制：采用NaCl单盐浓度，设置0.2％、0.4％、0.5％和0.6％四个盐分浓度。
步骤九、胁迫处理：待水插苗苗干长至15cm左右，开始木质化后，将水插苗固定于步骤五配制好的盐溶液中，一起放置于温室中进行盐胁迫测定，盐溶液体积要根据水分消耗程度进行及时补足。
步骤十、数理统计：每天进行观测记录死亡株数，胁迫开始后第7天有苗木开始死亡，直至连续10天没有苗木死亡为止。0.2％、0.4％、0.5％和0.6％四个盐浓度胁迫的成活株数分别为100株、82株、36株和5株，成活率分别为100％、86％、36％和5％。
实施例8
步骤一、亲本选择：选择旱柳做母本，沙柳做父本。
步骤二、母株选择：选择4年生旱柳孤立木做雌株，4年生沙柳林分单株做雄株。
步骤三、花枝制取：采取旱柳树冠中上部健壮枝条做雌花枝，沙柳树冠下部枝条做雄花枝。雌花枝直径2-3cm，长度100cm左右，雄花枝直径0.8-2.0cm，长度50-100cm。
步骤四、温室水培杂交：将雌雄花枝按照杂交组合分开放于温室进行水培。控制温室温度在20℃，湿度60％左右。每天换水1次并及时剪除花枝底部枝条。
步骤五、杂种苗培育：收集杂交种子，去除絮毛后进行营养杯播种育苗，待苗木高度达到15-20cm后进行移植，株行距为50cm╳50cm左右。移植后常规管理，注意灌溉、病虫害防治和杂草控制。
步骤六、插穗制取：待苗木生长1年后，在休眠期测量子代苗木高度，计算平均值，选取平均苗木25株，利用苗木中部2/3苗干截取100个插穗，插穗长度为15cm，每个插穗至少1个叶芽，最上部叶芽距插穗顶端0.8-1cm。
步骤七、水插苗培育：利用营养液对插穗进行水培，水插深度6cm，注意定时更换营养液并用氧气泵对营养液进行加氧。
步骤八、盐溶液配制：采用NaCl单盐浓度，设置0.2％、0.4％、0.5％和0.6％四个盐分浓度。
步骤九、胁迫处理：待水插苗苗干长至15cm左右，开始木质化后，将水插苗固定于步骤五配制好的盐溶液中，一起放置于温室中进行盐胁迫测定，盐溶液体积要根据水分消耗程度进行及时补足。
步骤十、数理统计：每天进行观测记录死亡株数，胁迫开始后第6天有苗木开始死亡，直至连续10天没有苗木死亡为止。0.2％、0.4％、0.5％和0.6％四个盐浓度胁迫的成活株数分别为100株、71株、22株和0株，成活率分别为100％、71％、22％和0％。
实施例9
步骤一、亲本选择：选择旱柳做母本，沙柳做父本。
步骤二、母株选择：选择4年生旱柳孤立木做雌株，3年生沙柳孤立木做雄株。
步骤三、花枝制取：采取旱柳树冠中上部健壮枝条做雌花枝，沙柳树冠中上部枝条做雄花枝。雌花枝直径2-3cm，长度100cm左右，雄花枝直径0.8-2.0cm，长度50-100cm。
步骤四、温室水培杂交：将雌雄花枝按照杂交组合分开放于温室进行水培。控制温室温度在20℃，湿度60％左右。每天换水1次并及时剪除花枝底部枝条。
步骤五、杂种苗培育：收集杂交种子，去除絮毛后进行营养杯播种育苗，待苗木高度达到15-20cm后进行移植，株行距为50cm╳50cm左右。移植后常规管理，注意灌溉、病虫害防治和杂草控制。
步骤六、插穗制取：待苗木生长1年后，在休眠期测量子代苗木高度，计算平均值，选取平均苗木25株，利用苗木中部2/3苗干截取100个插穗，插穗长度为15cm，每个插穗至少1个叶芽，最上部叶芽距插穗顶端0.8-1cm。
步骤七、水插苗培育：利用营养液对插穗进行水培，水插深度6cm，注意定时更换营养液并用氧气泵对营养液进行加氧。
步骤八、盐溶液配制：采用NaCl单盐浓度，设置0.2％、0.4％、0.5％和0.6％四个盐分浓度。
步骤九、胁迫处理：待水插苗苗干长至15cm左右，开始木质化后，将水插苗固定于步骤五配制好的盐溶液中，一起放置于温室中进行盐胁迫测定，盐溶液体积要根据水分消耗程度进行及时补足。
步骤十、数理统计：每天进行观测记录死亡株数，胁迫开始后第5天有苗木开始死亡，直至连续10天没有苗木死亡为止。0.2％、0.4％、0.5％和0.6％四个盐浓度胁迫的成活株数分别为100株、68株、18株和0株，成活率分别为100％、68％、18％和0％。
实施例10
步骤一、亲本选择：选择旱柳做母本，旱柳做父本。
步骤二、母株选择：选择4年生旱柳孤立木做雌株，4年生旱柳孤立木做雄株。
步骤三、花枝制取：采取旱柳树冠中上部健壮枝条做雌花枝，旱柳树冠中上部枝条做雄花枝。雌花枝直径2-3cm，长度100cm左右，雄花枝直径0.8-2.0cm，长度50-100cm。
步骤四、温室水培杂交：将雌雄花枝按照杂交组合分开放于温室进行水培。控制温室温度在20℃，湿度60％左右。每天换水1次并及时剪除花枝底部枝条。
步骤五、杂种苗培育：收集杂交种子，去除絮毛后进行营养杯播种育苗，待苗木高度达到15-20cm后进行移植，株行距为50cm╳50cm左右。移植后常规管理，注意灌溉、病虫害防治和杂草控制。
步骤六、插穗制取：待苗木生长1年后，在休眠期测量子代苗木高度，计算平均值，选取平均苗木20株，利用苗木中部2/3苗干截取100个插穗，插穗长度为20cm，每个插穗至少1个叶芽，最上部叶芽距插穗顶端0.8-1cm。
步骤七、水插苗培育：利用营养液对插穗进行水培，水插深度8cm，注意定时更换营养液并用氧气泵对营养液进行加氧。
步骤八、盐溶液配制：采用NaCl单盐浓度，设置0.2％、0.4％、0.5％和0.6％四个盐分浓度。
步骤九、胁迫处理：待水插苗苗干长至15cm左右，开始木质化后，将水插苗固定于步骤五配制好的盐溶液中，一起放置于温室中进行盐胁迫测定，盐溶液体积要根据水分消耗程度进行及时补足。
步骤十、数理统计：每天进行观测记录死亡株数，胁迫开始后第4天有苗木开始死亡，直至连续10天没有苗木死亡为止。0.2％、0.4％、0.5％和0.6％四个盐浓度胁迫的成活株数分别为82株、31株、2株和0株，成活率分别为82％、31％、2％和0％。表1为上述10个实施例的数理统计。
表1 实施例1-10的数理统计
以上10个实施例的统计数据表明：利用旱柳做母本、沙柳做父本进行种间杂交，能够显著提高杂交子代的耐盐性能，提高至0.4％以上，而旱柳种内杂交的子代耐盐性能在0.3％以下。在旱柳和沙柳杂交组合中，以4-5年生旱柳孤立木中上部雌花枝和沙柳孤立木中上部雄花枝杂交产生的子代耐盐性能最高，耐盐性能达到0.5％以上，部分子代个体在0.6％以上含盐量条件下也能存活。沙柳孤立木下部和沙柳林分单株中上部雄花枝与旱柳杂交，子代的耐盐性能也较高，达到0.4-0.5％。3年生沙柳雄花枝于旱柳杂交子代的耐盐性较差，低于0.2％。说明通过选择适宜年龄和适宜部位的雄花枝与旱柳进行杂交，能够显著提高杂交子代的耐盐能力。
以上所述仅为本申请的优选实施例而已，并不用于限制本申请，对于本领域的技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种提高旱柳耐盐性能的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一、亲本选择：选择4-5年生旱柳孤立木雌株做母本，选择4-5年生沙柳孤立木雄株做父本；
步骤二、花枝制取：采取旱柳树冠中上部健壮枝条做雌花枝，沙柳树冠中上部枝条做雄花枝；
步骤三、温室水培杂交，并进行杂种苗培育；
温室水培杂交条件为控制温度在18-20℃，湿度50～70％；
步骤四、插穗制取：在培育的苗木中部2/3苗干截取插穗；
步骤五、耐盐胁迫处理：将上述插穗进行水培，待苗干开始木质化后，将其固定在盐浓度中进行胁迫处理7～10天，10天后存活下来的即为耐盐性能较高的旱柳。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述雌花枝直径2-3cm，长度90～110cm，雄花枝直径0.8-2.0cm，长度50-100cm。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，杂种苗培育过程为：收集杂交种子，进行播种育苗，待苗木高度达到15-20cm后进行移植。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤四中，所述苗木生长至少1年。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤四中，所述插穗长度为12-16cm，每个插穗至少1个叶芽，最上部叶芽距插穗顶端0.8-1cm。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，插穗水培深度为6-8cm，并定时更换营养液并用氧气泵对营养液进行加氧。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述胁迫处理用NaCl单盐浓度，设置0.2％～0.6％的盐分梯度浓度。
8.权利要求1～7任一所述的方法在提高柳树耐盐性能中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述柳树为旱柳。
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