CN109251865B - 一种小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法 - Google Patents

一种小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN109251865B
CN109251865B CN201811156727.3A CN201811156727A CN109251865B CN 109251865 B CN109251865 B CN 109251865B CN 201811156727 A CN201811156727 A CN 201811156727A CN 109251865 B CN109251865 B CN 109251865B
Authority
CN
China
Prior art keywords
chlorella pyrenoidosa
cells
chlorella
protective layer
laccase
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201811156727.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109251865A (zh
Inventor
黄鑫
苏东悦
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Harbin Institute of Technology
Original Assignee
Harbin Institute of Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Harbin Institute of Technology filed Critical Harbin Institute of Technology
Priority to CN201811156727.3A priority Critical patent/CN109251865B/zh
Publication of CN109251865A publication Critical patent/CN109251865A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109251865B publication Critical patent/CN109251865B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/12—Unicellular algae; Culture media therefor

Landscapes

  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

一种小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法。本发明属于生物技术领域，具体涉及一种小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法。本发明的目的是将细胞表面工程技术引入到了绿藻细胞表面，通过绿藻细胞表面的单包覆实现了绿藻细胞在大气环境下产生氢气；在细胞表面人工构筑功能化保护层来改进生物体固有的性质和功能。方法：一、蛋白核小球藻细胞的培养；二、制备聚多巴胺修饰的蛋白核小球藻细胞；三、制备聚多巴胺与漆酶包覆的蛋白核小球藻细胞。本发明在蛋白核小球藻表面构筑一层双组分结构的耗氧保护层。该耗氧保护层具有较好的生物相容性，不但能够维持生物体自身活性，使蛋白核小球藻周围保持厌氧环境产生氢气，并且在外界环境不利时对于生物体具有一定的防御保护作用。

Description

一种小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法。
背景技术
能源是人类社会生存与发展的重要物质基础。随着化石燃料的日益消耗殆尽,寻求并开发清洁无污染的绿色替代能源已成为科技工作者关注的重要课题。氢能作为一种无碳的清洁能源，具有发热值高、能量转化效率高和燃烧产物清洁无污染等优点，无疑是一种极有潜力的化石燃料替代能源。但是氢能是次级能源载体，必须由其他能源转换生成。目前制氢的方法有电解水制氢、水煤气法制氢、由石油热裂的合成气和天然气制氢、焦炉煤气冷冻制氢、电解食盐水的副产氢、酿造工业副产和铁与水蒸气反应制氢；上述方式将不可再生的化石能源转化成氢能，或需消耗大量的电能进行转化，这种以消耗不可再生能源为代价的转化方式并不能改进能源消耗的结构，也不能节约能源，成本高，并且不可持续等。相比之下，生物制氢是氢气生产的一种绿色途径，在氢能的研究中越来越受到重视，基于光能驱动的氢气转化过程颇具发展前景。所谓的生物制氢是通过完整的细胞催化有机物或水裂解生成氢气，制氢机制包括直接光裂解、间接光裂解、光发酵和暗发酵。其中直接光裂解是指生物体利用太阳能作为能量，光系统Ⅱ(PSⅡ)催化水裂解产生氢气的过程。该过程的产氢电子来源于水，绿藻在光照厌氧条件下主要以该方式产生氢气。绿藻中催化产氢的酶为[FeFe]-氢酶。直接光裂解机制的优点在于产氢电子来源于水，无需添加其他有机底物作为电子供体；光能、CO2、无机营养盐和构成了绿藻产氢的基本体系。这种制备氢气过程的优点为耗能低、效率高、可再生、原料成本低、制氢过程不污染环境等。
自1939年Gaffron发现厌氧条件Scenedesmus obliquus与氢气代谢相关的活动后，科学家们陆续开展了绿藻产氢方面的研究。绿藻制氢在氢能的研究中越来越受到重视，这种光能驱动的氢气转化过程颇具发展前景。在自然界中，绿藻能够通过光合系统与氢酶的共同作用下将水光解生成氢气，其中水光解生成的电子经过铁氧化还原蛋白传递给氢酶，氢酶还原质子生成氢气，所以氢酶的正常表达与激活是绿藻产氢的关键。PSⅡ光裂解水生成氧气、电子和质子，产生的电子通过线性电子传递链(LET)经Fd传递到氢酶，还原质子生成氢气。通过该途径能达到将太阳能转化为氢能的理论最大能量转化率。但是氢酶对氧气极为敏感，PSⅡ光解水伴随着大量氧气的放出，短时间内就能完全抑制氢酶反应的进行，只有在厌氧的环境下氢酶才能够表达与激活。目前，绿藻制氢的方法主要有缺硫培养、基因工程手段构造耐氧氢酶和仿生硅化自组装等方法，使绿藻处于厌氧环境产生氢气。但现有通过细胞表面工程技术来改变绿藻细胞在大气环境下由产氧变为产氢的相关研究还比较少。
发明内容
本发明的目的是将细胞表面工程技术引入到了绿藻细胞表面，通过绿藻细胞表面的单包覆实现了绿藻细胞在大气环境下产生氢气；在细胞表面人工构筑功能化保护层来改进生物体固有的性质和功能，而提供了一种小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法。
一种小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法具体是按以下步骤进行的：
一、蛋白核小球藻细胞的培养：选择蛋白核小球藻作为生物模板，利用TAP培养基在温度为25～30℃的光照培养箱中持续光照1200～4800LUX进行培养，当蛋白核小球藻细胞数目达到对数生长期时进行包覆，得到生长对数期的蛋白核小球藻细胞；
二、先采用浓度为0.01～0.06mol/L的NaCl溶液对生长对数期的蛋白核小球藻细胞进行清洗，再采用去离子水对生长对数期的蛋白核小球藻细胞进行清洗，离心收集细胞，将收集到的细胞加入到Tris缓冲溶液中，得到细胞培养缓冲液；将多巴胺加入到细胞培养缓冲液中，搅拌反应0.5～3h，反应完成后，采用去离子水清洗，离心收集，得到聚多巴胺修饰的蛋白核小球藻细胞；所述细胞培养缓冲液的OD值为1.0～3.0；所述多巴胺的质量与细胞培养缓冲液的体积比为1mg:(0.1～2.5)mL；
三、将漆酶溶解在醋酸-醋酸钠溶液中，得到漆酶溶液，调节pH为(5～7)，将漆酶溶液加入到聚多巴胺修饰的蛋白核小球藻细胞中，搅拌反应0.5～3h，反应完成后，采用去离子水清洗，离心收集，得到聚多巴胺-漆酶修饰的蛋白核小球藻细胞；所述漆酶溶液的浓度为0.5～3mg/mL。
本发明的有益效果：
本发明采用多巴胺和漆酶作为涂层材料，在蛋白核小球藻表面构筑一层双组分结构的耗氧保护层。该耗氧保护层具有较好的生物相容性，不但能够维持生物体自身活性，使蛋白核小球藻周围保持厌氧环境产生氢气，并且在外界环境不利时对于生物体具有一定的防御保护作用。因此，这种生物涂层材料与生物体的结合，在未来生物界面功能化领域将会得到更广泛的应用和发展。相比于其他产氢的方法，本发明是绿藻产氢构筑方法上创新，这种单细胞包覆的方法不仅制备简单，易操作，而且可促使绿藻持续产氢。
附图说明
图1是实施例一中裸露的蛋白核小球藻的扫描电子显微镜照片；
图2是实施例一中聚多巴胺-漆酶修饰的蛋白核小球藻细胞的扫描电子显微镜照片；
图3是实施例一中裸露的蛋白核小球藻的透射电子显微镜照片；
图4是实施例一中聚多巴胺-漆酶修饰的蛋白核小球藻细胞的透射电子显微镜照片；
图5是实施例一中裸露的蛋白核小球藻和聚多巴胺-漆酶修饰的蛋白核小球藻细胞在48小时内的产氢量对比图；其中1为裸露的蛋白核小球藻，2为聚多巴胺-漆酶修饰的蛋白核小球藻细胞。
具体实施方式
具体实施方式一：本实施方式一种小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法具体是按以下步骤进行的：
一、蛋白核小球藻细胞的培养：选择蛋白核小球藻作为生物模板，利用TAP培养基在温度为25～30℃的光照培养箱中持续光照1200～4800LUX进行培养，当蛋白核小球藻细胞数目达到对数生长期时进行包覆，得到生长对数期的蛋白核小球藻细胞；
二、先采用浓度为0.01～0.06mol/L的NaCl溶液对生长对数期的蛋白核小球藻细胞进行清洗，再采用去离子水对生长对数期的蛋白核小球藻细胞进行清洗，离心收集细胞，将收集到的细胞加入到Tris缓冲溶液中，得到细胞培养缓冲液；将多巴胺加入到细胞培养缓冲液中，搅拌反应0.5～3h，反应完成后，采用去离子水清洗，离心收集，得到聚多巴胺修饰的蛋白核小球藻细胞；所述细胞培养缓冲液的OD值为1.0～3.0；所述多巴胺的质量与细胞培养缓冲液的体积比为1mg:(0.1～2.5)mL；
三、将漆酶溶解在醋酸-醋酸钠溶液中，得到漆酶溶液，调节pH为(5～7)，将漆酶溶液加入到聚多巴胺修饰的蛋白核小球藻细胞中，搅拌反应0.5～3h，反应完成后，采用去离子水清洗，离心收集，得到聚多巴胺-漆酶修饰的蛋白核小球藻细胞；所述漆酶溶液的浓度为0.5～3mg/mL。
本实施方式通过加入底物单宁酸与包覆后细胞表面的漆酶反应，消耗体系内部的氧气，协同于细胞的呼吸作用，促使绿藻细胞处于厌氧环境，使绿藻在大气环境下产生氢气。
将本实施方式制备的聚多巴胺-漆酶修饰的蛋白核小球藻细胞放入密闭的锥形瓶中，加入5～20mL TAP培养基进行培养。
具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是：步骤二中所述细胞培养缓冲液的OD值为2.0。其它与具体实施方式一相同。
具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一或二不同的是：步骤二中所述多巴胺的质量与细胞培养缓冲液的体积比为1mg:0.375mL。其它与具体实施方式一或二相同。
具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一至三之一不同的是：步骤二中所述Tris缓冲溶液的pH值为8～9。其它与具体实施方式一至三之一相同。
具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式一至四之一不同的是：步骤三中所述醋酸-醋酸钠溶液的pH值为4～5。其它与具体实施方式一至四之一相同。
通过以下实施例验证本发明的有益效果：
实施例一：一种小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法具体是按以下步骤进行的：
一、蛋白核小球藻细胞的培养：选择蛋白核小球藻作为生物模板，利用TAP培养基在温度为25～30℃的光照培养箱中持续光照1200～4800LUX进行培养，当蛋白核小球藻细胞数目达到对数生长期时进行包覆，得到生长对数期的蛋白核小球藻细胞；
二、先采用浓度为0.01mol/L的NaCl溶液对生长对数期的蛋白核小球藻细胞进行清洗，再采用去离子水对生长对数期的蛋白核小球藻细胞进行清洗，离心收集细胞，将收集到的细胞加入到Tris缓冲溶液中，得到细胞培养缓冲液；将8mg多巴胺加入到3mL细胞培养缓冲液中，搅拌反应40min，反应完成后，采用去离子水清洗，离心收集，得到聚多巴胺修饰的蛋白核小球藻细胞；所述细胞培养缓冲液的OD值为1.0～3.0；所述Tris缓冲溶液的pH值为8.5；
三、将漆酶溶解在醋酸-醋酸钠溶液中，得到漆酶溶液，调节pH为5，将漆酶溶液加入到聚多巴胺修饰的蛋白核小球藻细胞中，搅拌反应1h，反应完成后，采用去离子水清洗，离心收集，得到聚多巴胺-漆酶修饰的蛋白核小球藻细胞；所述漆酶溶液的浓度为1.5mg/mL；所述醋酸-醋酸钠溶液的pH值为4。
将修饰后的细胞放入密闭的锥形瓶中，加入5mLTAP培养基进行培养，利用氢气检测器氧气检测器监测修饰细胞不同时间段下的氢气量和氧气量。
实施例二：一种小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法具体是按以下步骤进行的：
一、蛋白核小球藻细胞的培养：选择蛋白核小球藻作为生物模板，利用TAP培养基在温度为25～30℃的光照培养箱中持续光照1200～4800LUX进行培养，当蛋白核小球藻细胞数目达到对数生长期时进行包覆，得到生长对数期的蛋白核小球藻细胞；
二、先采用浓度为0.04mol/L的NaCl溶液对生长对数期的蛋白核小球藻细胞进行清洗，再采用去离子水对生长对数期的蛋白核小球藻细胞进行清洗，离心收集细胞，将收集到的细胞加入到Tris缓冲溶液中，得到细胞培养缓冲液；将10mg多巴胺加入到8mL细胞培养缓冲液中，搅拌反应1h，反应完成后，采用去离子水清洗，离心收集，得到聚多巴胺修饰的蛋白核小球藻细胞；所述细胞培养缓冲液的OD值为1.0～3.0；所述Tris缓冲溶液的pH值为8.5；
三、将漆酶溶解在醋酸-醋酸钠溶液中，得到漆酶溶液，调节pH为6，将漆酶溶液加入到聚多巴胺修饰的蛋白核小球藻细胞中，搅拌反应3h，反应完成后，采用去离子水清洗，离心收集，得到聚多巴胺-漆酶修饰的蛋白核小球藻细胞；所述漆酶溶液的浓度为2mg/mL；所述醋酸-醋酸钠溶液的pH值为4.5。
将修饰后的细胞放入密闭的锥形瓶中，加入15mL TAP培养基进行培养，利用氢气检测器氧气检测器监测修饰细胞不同时间段下的氢气量和氧气量。
实施例三：一种小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法具体是按以下步骤进行的：
一、蛋白核小球藻细胞的培养：选择蛋白核小球藻作为生物模板，利用TAP培养基在温度为25～30℃的光照培养箱中持续光照1200～4800LUX进行培养，当蛋白核小球藻细胞数目达到对数生长期时进行包覆，得到生长对数期的蛋白核小球藻细胞；
二、先采用浓度为0.06mol/L的NaCl溶液对生长对数期的蛋白核小球藻细胞进行清洗，再采用去离子水对生长对数期的蛋白核小球藻细胞进行清洗，离心收集细胞，将收集到的细胞加入到Tris缓冲溶液中，得到细胞培养缓冲液；将15mg多巴胺加入到10mL细胞培养缓冲液中，搅拌反应2h，反应完成后，采用去离子水清洗，离心收集，得到聚多巴胺修饰的蛋白核小球藻细胞；所述细胞培养缓冲液的OD值为1.0～3.0；所述Tris缓冲溶液的pH值为8.5；
三、将漆酶溶解在醋酸-醋酸钠溶液中，得到漆酶溶液，调节pH为7，将漆酶溶液加入到聚多巴胺修饰的蛋白核小球藻细胞中，搅拌反应4h，反应完成后，采用去离子水清洗，离心收集，得到聚多巴胺-漆酶修饰的蛋白核小球藻细胞；所述漆酶溶液的浓度为3mg/mL；所述醋酸-醋酸钠溶液的pH值为5。
将修饰后的细胞放入密闭的锥形瓶中，加入20mL TAP培养基进行培养，利用氢气检测器氧气检测器监测修饰细胞不同时间段下的氢气量和氧气量。
图1是实施例一中裸露的蛋白核小球藻的扫描电子显微镜照片；从照片中可以观察到裸露的细胞表面较为光滑；
图2是实施例一中聚多巴胺-漆酶修饰的蛋白核小球藻细胞的扫描电子显微镜照片；从照片中可以观察到包覆后的细胞表面变为粗糙，有颗粒状物质存在，这是由于表面包覆了聚多巴胺和漆酶使细胞表面变得粗糙；
图3是实施例一中裸露的蛋白核小球藻的透射电子显微镜照片；从照片中可以观察到裸露细胞的细胞壁较为光滑；
图4是实施例一中聚多巴胺-漆酶修饰的蛋白核小球藻细胞的透射电子显微镜照片，从照片中可以观察到包覆后细胞的细胞壁上存在颗粒状物质，这是由于表面包覆了聚多巴胺和漆酶导致；
图5是实施例一中裸露的蛋白核小球藻和表面包覆聚多巴胺和漆酶的蛋白核小球藻在48小时内的产氢量对比，从图中可观察到在48小时内，裸露的小球藻几乎没有氢气产生，而包覆后的细胞在48小时内随着时间的增加，产氢量逐渐增加。

Claims (5)

1.一种小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法，其特征在于小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法具体是按以下步骤进行的：
一、蛋白核小球藻细胞的培养：选择蛋白核小球藻作为生物模板，利用TAP培养基在温度为25～30℃的光照培养箱中持续光照1200～4800LUX进行培养，当蛋白核小球藻细胞数目达到对数生长期时进行包覆，得到生长对数期的蛋白核小球藻细胞；
二、先采用浓度为0.01～0.06mol/L的NaCl溶液对生长对数期的蛋白核小球藻细胞进行清洗，再采用去离子水对生长对数期的蛋白核小球藻细胞进行清洗，离心收集细胞，将收集到的细胞加入到Tris缓冲溶液中，得到细胞培养缓冲液；将多巴胺加入到细胞培养缓冲液中，搅拌反应0.5～3h，反应完成后，采用去离子水清洗，离心收集，得到聚多巴胺修饰的蛋白核小球藻细胞；所述细胞培养缓冲液的OD值为1.0～3.0；所述多巴胺的质量与细胞培养缓冲液的体积比为1mg:(0.1～2.5)mL；
三、将漆酶溶解在醋酸-醋酸钠溶液中，得到漆酶溶液，调节pH为5～7，将漆酶溶液加入到聚多巴胺修饰的蛋白核小球藻细胞中，搅拌反应0.5～3h，反应完成后，采用去离子水清洗，离心收集，得到聚多巴胺-漆酶修饰的蛋白核小球藻细胞；所述漆酶溶液的浓度为0.5～3mg/mL。
2.根据权利要求1所述的一种小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法，其特征在于步骤二中所述细胞培养缓冲液的OD值为2.0。
3.根据权利要求1所述的一种小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法，其特征在于步骤二中所述多巴胺的质量与细胞培养缓冲液的体积比为1mg:0.375mL。
4.根据权利要求1所述的一种小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法，其特征在于步骤二中所述Tris缓冲溶液的pH值为8～9。
5.根据权利要求1所述的一种小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法，其特征在于步骤三中所述醋酸-醋酸钠溶液的pH值为4～5。
CN201811156727.3A 2018-09-30 2018-09-30 一种小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法 Active CN109251865B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811156727.3A CN109251865B (zh) 2018-09-30 2018-09-30 一种小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811156727.3A CN109251865B (zh) 2018-09-30 2018-09-30 一种小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109251865A CN109251865A (zh) 2019-01-22
CN109251865B true CN109251865B (zh) 2021-06-15

Family

ID=65045416

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201811156727.3A Active CN109251865B (zh) 2018-09-30 2018-09-30 一种小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109251865B (zh)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110144368B (zh) * 2019-06-20 2022-06-07 哈尔滨工业大学 一种维持小球藻细胞死亡后持续产氢的方法
CN110468121B (zh) * 2019-09-16 2023-09-01 中国矿业大学 一种聚多巴胺包覆的小球藻及其制备方法
CN111471722B (zh) * 2020-04-14 2022-06-07 哈尔滨工业大学 一种基于小球藻细胞生物矿化实现高效产氢的方法
CN115341000B (zh) * 2022-08-19 2024-04-16 哈尔滨工业大学 一种基于小球藻细胞原位形成金纳米粒子实现高效产氢的方法

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102421891A (zh) * 2009-03-04 2012-04-18 生命之叶公司 用于生物分子的位点活化络合的方法与物质
CN104962585A (zh) * 2015-06-25 2015-10-07 浙江大学 一种培养微藻生产氢气的方法
CN106414762A (zh) * 2014-05-16 2017-02-15 3M创新有限公司 用于厌氧或微需氧微生物的液体培养的系统和方法
CN107267395A (zh) * 2017-07-13 2017-10-20 浙江大学 一种微藻培养基及培养微藻生产氢气的方法
EP3357514A1 (en) * 2015-09-30 2018-08-08 NOF Corporation Lipid derivative in which hydrophilic polymers are bound via cyclic benzylidene acetal linkers
CN110144368A (zh) * 2019-06-20 2019-08-20 哈尔滨工业大学 一种维持小球藻细胞死亡后持续产氢的方法
CN111471722A (zh) * 2020-04-14 2020-07-31 哈尔滨工业大学 一种基于小球藻细胞生物矿化实现高效产氢的方法

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102421891A (zh) * 2009-03-04 2012-04-18 生命之叶公司 用于生物分子的位点活化络合的方法与物质
CN106414762A (zh) * 2014-05-16 2017-02-15 3M创新有限公司 用于厌氧或微需氧微生物的液体培养的系统和方法
CN104962585A (zh) * 2015-06-25 2015-10-07 浙江大学 一种培养微藻生产氢气的方法
EP3357514A1 (en) * 2015-09-30 2018-08-08 NOF Corporation Lipid derivative in which hydrophilic polymers are bound via cyclic benzylidene acetal linkers
CN107267395A (zh) * 2017-07-13 2017-10-20 浙江大学 一种微藻培养基及培养微藻生产氢气的方法
CN110144368A (zh) * 2019-06-20 2019-08-20 哈尔滨工业大学 一种维持小球藻细胞死亡后持续产氢的方法
CN111471722A (zh) * 2020-04-14 2020-07-31 哈尔滨工业大学 一种基于小球藻细胞生物矿化实现高效产氢的方法

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Enzyme-Modulated Anaerobic Encapsulation of Chlorella Cells Allows Switching from O2 to H2 Production;Dongyue Su等;《Angew. Chem. Int. Ed》;20190117;第58卷(第12期);第203-208页 *
Organic/inorganic double-layered shells for multiple cytoprotection of individual living cells;Daewha Hong等;《The Royal Society of Chemistry》;20150101;第6卷(第1期);第3992-3995页 *
Silicification-InducedCell Aggregation for the Sustainable Production;WeiXiong等;《Angew Chem Int Ed Engl》;20151015;第54卷(第41期);第11961-11965页 *
基于单细胞表面的人工细胞壁构筑与功能化;苏东悦等;《中国博士学位论文全文数据库基础科学辑（电子期刊）》;20200115(第1期);A006-6 *
细胞表面生物大分子杂化界面的构筑;苏东悦等;《中国化学会2017全国高分子学术论文报告会摘要集——主题J：高分子组装与超分子体系》;20171010;JP017 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN109251865A (zh) 2019-01-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109251865B (zh) 一种小球藻细胞表面耗氧保护层的制备方法
Tiang et al. Recent advanced biotechnological strategies to enhance photo-fermentative biohydrogen production by purple non-sulphur bacteria: an overview
Brentner et al. Challenges in developing biohydrogen as a sustainable energy source: implications for a research agenda
Rashid et al. Enhanced electricity generation by using algae biomass and activated sludge in microbial fuel cell
Levin et al. Biohydrogen production: prospects and limitations to practical application
Lee et al. Recent developments and key barriers to microbial CO2 electrobiorefinery
Tremblay et al. Nonmetallic abiotic-biological hybrid photocatalyst for visible water splitting and carbon dioxide reduction
Christopher et al. A review on critical assessment of advanced bioreactor options for sustainable hydrogen production
Show et al. Bioreactor and bioprocess design for biohydrogen production
CN110144368B (zh) 一种维持小球藻细胞死亡后持续产氢的方法
Hosseini et al. Thermodynamic evaluation of a photobioreactor for hydrogen production from syngas via a locally isolated Rhodopseudomonas palustris PT
CN106520897B (zh) 一种提高衣藻产氢量的方法
Das A road map on biohydrogen production from organic wastes
Kim et al. Semi-continuous photo-fermentative H2 production by Rhodobacter sphaeroides: effect of decanting volume ratio
Wang et al. Visible-Light-Driven Enhanced Biohydrogen Production by Photo-Biohybrid System Based on Photoelectron Transfer between Intracellular Photosensitizer Gold Nanoparticles and Clostridium butyricum
Poudyal et al. Current insights to enhance hydrogen production by photosynthetic organisms
Gürtekin Biological hydrogen production methods
Wang et al. Improved polyhydroxybutyrate production by Cupriavidus necator and the photocatalyst graphitic carbon nitride from fructose under low light intensity
Krishna et al. Bio hydrogen production from pharmaceutical waste water treatment by a suspended growth reactor using environmental anaerobic technology
Kim et al. Long-term operation of continuous culture of the hyperthermophilic archaeon, Thermococcus onnurineus for carbon monoxide-dependent hydrogen production
Morales-Ibarría et al. Biohydrogen from microalgae
Kovacs et al. Improvement of biohydrogen production and intensification of biogas formation
JP3224992B2 (ja) 水素生産光合成微生物及びこれを用いた水素の生産方法
Nath et al. Amelioration of biohydrogen production by a two-stage fermentation process
Lehr et al. Photobiotechnological hydrogen production with microalgae

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant