CN109164266B - 细胞因子在区分淋巴瘤相关噬血细胞综合征和淋巴瘤中的应用 - Google Patents

细胞因子在区分淋巴瘤相关噬血细胞综合征和淋巴瘤中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及检测试剂在制备用于区分淋巴瘤相关噬血细胞综合征和淋巴瘤的诊断试剂中的应用，以及根据所述应用制成的诊断试剂。本发明所述应用的检测试剂包括检测以下一种或多种细胞因子的试剂：IFN‑γ、IL‑10、IL‑18、TNF‑α、MIP‑1α、SDF‑1α、Rantes、IP‑10、IL‑1RA、IL‑4、IL‑6和IL‑13，根据所述细胞因子的检测结果能够准确、快速地区分淋巴瘤相关噬血细胞综合征和淋巴瘤的诊断试剂，有利于淋巴瘤相关噬血细胞综合征的确诊以及后续的针对性治疗。

Description

细胞因子在区分淋巴瘤相关噬血细胞综合征和淋巴瘤中的 应用
技术领域
本发明涉及噬血细胞综合征领域，具体而言，涉及细胞因子在区分淋巴瘤相关噬血细胞综合征和淋巴瘤中的应用。
背景技术
噬血细胞综合征(Hemophagocytic Lymphohistiocytosis，HLH)是一种由各种致病因素引起的一种致死性疾病，主要病理机制是由于巨噬细胞和CTL细胞异常激活而引起的无效免疫反应导致高细胞因子血症，但具体详细的病理基础仍然未知。根据原发病的不同将HLH分为有基因缺陷的原发性噬血细胞综合征(FHL)和与感染、肿瘤、风湿等引起的继发性噬血细胞综合征，如风湿病相关噬血细胞综合征、淋巴瘤相关噬血细胞综合征。
原发性噬血细胞综合征与风湿病相关噬血细胞综合征，风湿病与风湿病相关噬血细胞综合征之间，以及淋巴瘤与淋巴瘤相关噬血细胞综合征之间的临床症状有重叠，有时通过临床症状鉴别有困难，患者需要长期的临床观察和检测才能确诊，不能快速地对症下药，延误病情。
因此，本领域亟待提出能够快速、准确地区分上述疾病的方法或诊断试剂。
有鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种检测试剂在制备用于区分噬血细胞综合征相关疾病和其他疾病、或噬血细胞综合征相关疾病的分型、或指示噬血细胞综合征相关疾病的治疗进展的诊断试剂中的应用，本发明所述应用根据对检测细胞因子的试剂进行选择和组合可以准确、快速地将噬血细胞综合征相关疾病与和其临床症状相似的其他疾病区分开，能够将噬血细胞综合征相关疾病进行分型以及指示噬血细胞综合征相关疾病的治疗进展。
本发明的第二目的在于提供根据前述应用制成的诊断试剂，能够快速、准确地对噬血细胞综合征相关疾病进行鉴定、分型和指示治疗效果。
为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：
检测试剂在制备用于区分噬血细胞综合征相关疾病和其他疾病、或噬血细胞综合征相关疾病的分型、或指示噬血细胞综合征相关疾病的治疗进展的诊断试剂中的应用，所述检测试剂包括检测以下一种或多种细胞因子的试剂：sST2、sCD163、IFN-γ、TNF-α、IL-10、IL-18、IL-1α、IL-8、IL-15、IL-4、IL-12p70、MIP-1α、SDF-1α、Rantes、IP-10、IL-1RA、IL-6、IL-13、IL-2、IL-27、GM-CSF、IL-9、IL-31、IL-22、GRO-α、IL-5、IL-17A、IL-23和IFN-α；
所述噬血细胞综合征相关疾病选自风湿病相关噬血细胞综合征、原发性噬血综合征或淋巴瘤并发噬血细胞综合征中的一种或多种；
所述其他疾病选自风湿病、淋巴瘤的一种或多种。
本发明所述应用以检测在噬血细胞综合征相关疾病、或某一具体的噬血细胞综合征类型或在治疗过程中症状缓解的噬血细胞综合征患者中特异性表达的细胞因子的试剂为对象，制备诊断试剂。由于前述细胞因子或细胞因子的组合具有特异性的指示作用，因此，根据本发明所述应用获得的诊断试剂能够快速、准确地将噬血细胞综合征和与其临床诊断相似的其他疾病区分开来，或者，将噬血细胞综合征进行具体的分型，或者，指示噬血细胞综合征患者在治疗过程中病情是否得到缓解。
在一些具体实施方式中，所述诊断试剂用于区分风湿病相关噬血细胞综合征和风湿病，所述检测试剂包括检测sST2、sCD163、IFN-γ、TNF-α、IL-10和IL-18的试剂；
或者，所述检测试剂包括检测IL-1α、IL-8和IL-15的试剂；
或者，所述检测试剂包括检测sST2、sCD163、IFN-γ、TNF-α、IL-10、IL-18、IL-1α、IL-8和IL-15的试剂。
本发明上述应用选择在风湿病相关噬血细胞综合征和风湿病中差异化表达且具有统计学意义的标志物为对象，由此制备的诊断的试剂能够快速、准确地将风湿病相关噬血细胞综合征与风湿病区分开。
在一些具体的实施方式中，所述诊断试剂用于原发性噬血细胞综合征与风湿病相关噬血细胞综合征的分型，所述检测试剂包括检测sST2、sCD163、IL-4和IL-12p70的试剂。
本发明上述应用选择在原发性噬血细胞综合征和风湿病相关噬血细胞综合征中差异化表达且具有统计学意义的标志物为对象，由此制备的诊断的试剂能够快速、准确地将原发性噬血细胞综合征和风湿病相关噬血细胞综合征区分开。
在一些具体的实施方式中，所述诊断试剂用于区分淋巴瘤并发噬血细胞综合征和淋巴瘤，所述检测试剂包括用于检测IFN-γ、IL-10、IL-18和TNF-α的试剂；
或者，所述检测试剂包括用于检测MIP-1α、SDF-1α、Rantes和IP-10的试剂；
或者，所述检测试剂包括用于检测IL-1RA、IL-4、IL-6和IL-13的试剂；
或者，所述检测试剂包括用于检测IFN-γ、IL-10、IL-18、TNF-α、MIP-1α、SDF-1α、Rantes、IP-10、IL-1RA、IL-4、IL-6和IL-13的试剂。
本发明上述应用选择在淋巴瘤并发噬血细胞综合征和淋巴瘤中差异化表达且具有统计学意义的标志物为对象，由此制备的诊断的试剂能够快速、准确地将淋巴瘤并发噬血细胞综合征和淋巴瘤区分开。
在一些具体的实施方式中，所述诊断试剂用于指示噬血细胞综合征的治疗效果，所述检测试剂包括用于检测IFN-γ、IL-10、TNF-α和IL-1RA的试剂；优选地，所述噬血细胞综合征为急性期噬血细胞综合征。
本发明上述应用选择在噬血细胞综合征急性期患者与经治疗处于噬血细胞综合征缓解期患者中差异化表达且具有统计学意义的标志物为对象，由此制备的诊断的试剂能够快速、准确地判断对噬血细胞综合征患者的治疗是否有效。
在一些具体的实施方式中，所述诊断试剂用于将噬血细胞综合征相关病与其他疾病区分，所述检测试剂包括检测IFN-γ、TNF-α、IL-10和IL-18的试剂。
本发明上述应用选择的是与其他疾病(风湿病、淋巴瘤)相比，原发性噬血细胞综合征、风湿病相关噬血细胞综合征和淋巴瘤相关噬血细胞综合征的表达均上调的细胞因子。因此，本发明上述应用能够快速、准确地将噬血细胞综合征与其他临床表现相似的疾病，如风湿病和淋巴瘤，区分开。
在一些具体的实施方式中，所述检测试剂选自抗体、抗原结合片段、适配体中的一种或多种，优选地，所述抗原结合片段选自Fab、F(ab’)2、scFv或dsFv。
在一些具体的实施方式中，所述检测试剂上还偶联有缀合物。
在一些具体的实施方式中，所述缀合物选自荧光标记、量子点、化学发光标记物、酶、放射性标记、磁珠、胶体金或胶乳颗粒中的一种或多种。
本发明还涉及根据上述应用制成的诊断试剂。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明所述应用以检测在噬血细胞综合征相关疾病、或在某一具体的噬血细胞综合征类型或在治疗过程中症状缓解的噬血细胞综合征患者中特异性表达的细胞因子的试剂为对象，制备诊断试剂。由于前述细胞因子或细胞因子的组合具有特异性的指示作用，因此，根据本发明所述应用获得的诊断试剂能够快速、准确地将噬血细胞综合征和与其临床诊断相似的其他疾病区分开来，或者，将噬血细胞综合征进行具体的分型，或者，指示噬血细胞综合征患者在治疗过程中病情是否得到缓解。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为：与风湿病患者相比，MAS急性期患者血清中升高的细胞因子；
图2为：MAS急性期患者与风湿病患者血清中同时升高的细胞因子；
图3为：与风湿病患者相比，MAS急性期患者血清中降低的细胞因子；
图4为：原发性噬血细胞综合征患者(pHLH)与MAS急性期患者血清中差异表达的细胞因子；
图5为：与淋巴瘤患者相比，淋巴瘤-HLH患者血清中升高的细胞因子；
图6为：与淋巴瘤患者相比，淋巴瘤-HLH患者血清中升高的细胞因子；
图7为：与淋巴瘤患者相比，淋巴瘤-HLH患者血清中升高的细胞因子；
图8为：与HLH急性期相比，HLH缓解期患者血清中降低的细胞因子；
图9为：与HLH急性期相比，HLH缓解期患者血清中降低的细胞因子。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购买获得的常规产品。
用Luminex200检测受试者血清中的MIP-1alpha，SDF-1alpha，IL-27，IL-1beta，IL-2，IL-4，IL-5，IP-10，IL-6，IL-7，IL-8，IL-10，Eotaxin，IL-12p70，IL-13，IL-17A，IL-31，IL-1RA，RANTES，IFN-gamma，GM-CSF，TNF-alpha，MIP-1beta，IFN-alpha，MCP-1，IL-9，TNF-beta，GRO-alpha，IL-1alpha，IL-23，IL-15，IL-18，IL-21，IL-22，用Elisa检测了受试者血清中的sST2和sCD163。
应用SPSS22.0软件进行统计分析。符合正态分布的计量资料用X±s表示，不符合者采用中位数(极小值，极大值)表示。符合正态分布的多个样本不同组间数值比较(不同原发病的HLH之间的比较)通过独立样本t检验，非正态数据采用秩和检验(*P<0.05；**P<0.01；***P＝0.000)。
实施例1
受试者：风湿病相关噬血细胞综合征急性期患者(MAS患者)，共22人；风湿病患者，共28人；健康对照者，共20人。
方法：检测受试者血清中细胞因子的浓度情况。
结果：具体检测结果参见表1以及图1～3。
根据表1和图1～3所示数据可知，与风湿病患者相比，MAS急性期患者血清中sST2、sCD163、IFN-γ、TNF-α、IL-10和IL-18的含量显著升高，差异显著，具有统计学意义；与风湿病患者相比，MAS急性期患者血清中IL-1RA、Rantes、IL-1β的含量轻微升高，但差异不显著，不具有统计学意义；与风湿病患者相比，MAS急性期患者血清中IL-1α，IL-8和IL-15的含量降低，在二者中的差异显著，具有统计学意义。
表1.MAS急性期与风湿病患者相比有统计学意义的细胞因子
Figure GDA0003177401740000071
Figure GDA0003177401740000081
实施例2
受试者：原发性噬血细胞综合征患者(pHLH)，共5人；MAS急性期患者，共28人；健康对照者，共20人。
方法：检测受试者血清中细胞因子的浓度情况。
结果：具体检测结果参见表2以及图4。
根据表2和图4所示数据可知，与pHLH患者相比，MAS急性期患者血清中sST2和sCD163的含量显著升高，差异显著，具有统计学意义；与pHLH患者相比，MAS急性期患者血清中IL-4、IL-12p70的含量显著降低，差异显著，具有统计学意义。因此，sST2、sCD163、IL-4和IL-12p70可用于有效鉴别pHLH患者和MAS患者。
表2.pHLH与MAS急性期相比有统计学意义的细胞因子
Figure GDA0003177401740000082
Figure GDA0003177401740000091
实施例3
受试者：淋巴瘤并发噬血细胞综合征患者(淋巴瘤-HLH)，共11人；淋巴瘤患者，共57人；健康对照者，共20人。
方法：检测受试者血清中细胞因子的浓度情况。
结果：具体检测结果参见表3以及图5～7。
根据表3和图5～7所示数据可知，与淋巴瘤患者相比，淋巴瘤-HLH患者血清中IFN-γ、TNF-α、IL-10、IL-18的含量显著升高，差异显著，具有统计学意义；与淋巴瘤患者相比，淋巴瘤-HLH患者血清中IL-1RA、IL-4、IL-6和IL-13的含量轻微升高，具有统计学意义；MIP-1α,SDF-1α,Rantes和IP-10在淋巴瘤患者中低水平表达，而在淋巴瘤-HLH患者中高水平表达。因此，通过检测上述细胞因子，可以有效鉴别淋巴瘤-HLH患者和淋巴瘤患者。
表3.淋巴瘤-HLH和单纯淋巴瘤患者相比较有统计学意义的细胞因子
Figure GDA0003177401740000092
Figure GDA0003177401740000101
实施例4
受试者：治疗前的噬血细胞综合征患者(即，HLH急性期)，共23人；经过治疗后的噬血细胞综合征患者(即，HLH缓解期)，共23人。
方法：检测受试者血清中细胞因子的浓度情况。
结果：具体检测结果参见表4以及图8～9。根据表4以及图8～9可知，IFN-γ、IL-10、TNF-α和IL-1RA在HLH急性期明显高于缓解或者部分缓解期，且上述因子的检测结果均具备统计学意义，可以起到对病情判断的作用。
表4 HLH治疗前后细胞因子的比较
Figure GDA0003177401740000102
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，但本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

Claims (10)

1.检测试剂在制备用于区分淋巴瘤相关噬血细胞综合征和淋巴瘤的诊断试剂中的应用，其特征在于，所述检测试剂包括检测以下一种或多种细胞因子的试剂：IL-18、TNF-α、SDF-1α、Rantes、IL-1RA、IL-4和IL-13。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测试剂包括用于检测IL-18和TNF-α的试剂。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述检测试剂还包括用于检测SDF-1α和Rantes 的试剂。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述检测试剂还包括用于检测IL-1RA、IL-4和IL-13的试剂。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测试剂选自抗体、抗原结合片段、适配体中的一种或多种。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述抗原结合片段选自Fab、F(ab’)2、scFv或dsFv。
7.根据权利要求1~6任一项所述的应用，其特征在于，所述检测试剂上还偶联有缀合物。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述缀合物选自荧光标记、量子点、化学发光标记物、酶、放射性标记、磁珠、胶体金或胶乳颗粒中的一种或多种。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述缀合物选自荧光标记、量子点、化学发光标记物或酶。
10.根据权利要求1~9任一项所述应用制成的诊断试剂。
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