CN109134724A - 一种动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法 - Google Patents
一种动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109134724A CN109134724A CN201810819225.8A CN201810819225A CN109134724A CN 109134724 A CN109134724 A CN 109134724A CN 201810819225 A CN201810819225 A CN 201810819225A CN 109134724 A CN109134724 A CN 109134724A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- monomer
- adjuvant
- polymerization
- production
- initiator
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 title claims abstract description 91
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 66
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 62
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 title claims abstract description 50
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title claims abstract description 38
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 34
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims abstract description 140
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 claims abstract description 95
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 claims abstract description 38
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims abstract description 12
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 11
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims abstract description 10
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 claims abstract description 10
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 claims abstract description 10
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 claims description 76
- 239000003999 initiator Substances 0.000 claims description 64
- 238000007720 emulsion polymerization reaction Methods 0.000 claims description 40
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 38
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N acrylic acid group Chemical group C(C=C)(=O)O NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 28
- -1 perfluoroalkyl acrylate Chemical compound 0.000 claims description 20
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 239000003945 anionic surfactant Substances 0.000 claims description 17
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 12
- 238000010792 warming Methods 0.000 claims description 11
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 claims description 9
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 9
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 9
- 239000006174 pH buffer Substances 0.000 claims description 9
- 125000005425 toluyl group Chemical group 0.000 claims description 9
- BAPJBEWLBFYGME-UHFFFAOYSA-N Methyl acrylate Chemical compound COC(=O)C=C BAPJBEWLBFYGME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- JIGUQPWFLRLWPJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acrylate Chemical compound CCOC(=O)C=C JIGUQPWFLRLWPJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 3
- PNJWIWWMYCMZRO-UHFFFAOYSA-N pent‐4‐en‐2‐one Natural products CC(=O)CC=C PNJWIWWMYCMZRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methoxy-5-methylphenyl)ethanamine Chemical compound COC1=CC=C(C)C=C1CCN SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- RUMACXVDVNRZJZ-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropyl 2-methylprop-2-enoate Chemical compound CC(C)COC(=O)C(C)=C RUMACXVDVNRZJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- CFVWNXQPGQOHRJ-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropyl prop-2-enoate Chemical compound CC(C)COC(=O)C=C CFVWNXQPGQOHRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- VVQNEPGJFQJSBK-UHFFFAOYSA-N Methyl methacrylate Chemical compound COC(=O)C(C)=C VVQNEPGJFQJSBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- CQEYYJKEWSMYFG-UHFFFAOYSA-N butyl acrylate Chemical compound CCCCOC(=O)C=C CQEYYJKEWSMYFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- KBLWLMPSVYBVDK-UHFFFAOYSA-N cyclohexyl prop-2-enoate Chemical compound C=CC(=O)OC1CCCCC1 KBLWLMPSVYBVDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- GMSCBRSQMRDRCD-UHFFFAOYSA-N dodecyl 2-methylprop-2-enoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCOC(=O)C(C)=C GMSCBRSQMRDRCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- PCIBVZXUNDZWRL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol monophosphate Chemical compound OCCOP(O)(O)=O PCIBVZXUNDZWRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- PBOSTUDLECTMNL-UHFFFAOYSA-N lauryl acrylate Chemical compound CCCCCCCCCCCCOC(=O)C=C PBOSTUDLECTMNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000012646 vaccine adjuvant Substances 0.000 claims description 2
- 229940124931 vaccine adjuvant Drugs 0.000 claims description 2
- SOGAXMICEFXMKE-UHFFFAOYSA-N Butylmethacrylate Chemical compound CCCCOC(=O)C(C)=C SOGAXMICEFXMKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 claims 1
- JRZJOMJEPLMPRA-UHFFFAOYSA-N olefin Natural products CCCCCCCC=C JRZJOMJEPLMPRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N propylene Natural products CC=C QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000004805 propylene group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([*:1])C([H])([H])[*:2] 0.000 claims 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 abstract description 7
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 abstract description 5
- 230000007774 longterm Effects 0.000 abstract description 5
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 abstract description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 4
- 230000036541 health Effects 0.000 abstract description 4
- 244000144972 livestock Species 0.000 abstract description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 23
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 14
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 10
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 8
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 8
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 8
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 8
- JRKICGRDRMAZLK-UHFFFAOYSA-L peroxydisulfate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)OOS([O-])(=O)=O JRKICGRDRMAZLK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- 239000012966 redox initiator Substances 0.000 description 8
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 8
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 7
- FYAMXEPQQLNQDM-UHFFFAOYSA-N Tris(1-aziridinyl)phosphine oxide Chemical compound C1CN1P(N1CC1)(=O)N1CC1 FYAMXEPQQLNQDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 7
- 238000009830 intercalation Methods 0.000 description 7
- 230000002687 intercalation Effects 0.000 description 7
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 6
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 6
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 4
- 238000009781 safety test method Methods 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 231100000041 toxicology testing Toxicity 0.000 description 4
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 231100000820 toxicity test Toxicity 0.000 description 3
- DXPPIEDUBFUSEZ-UHFFFAOYSA-N 6-methylheptyl prop-2-enoate Chemical group CC(C)CCCCCOC(=O)C=C DXPPIEDUBFUSEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-N Methacrylic acid Chemical compound CC(=C)C(O)=O CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001252 acrylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 101150094793 Hes3 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000006054 immunological memory Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 239000002563 ionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 125000005004 perfluoroethyl group Chemical group FC(F)(F)C(F)(F)* 0.000 description 1
- 238000011056 performance test Methods 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000002787 reinforcement Effects 0.000 description 1
- DCKVNWZUADLDEH-UHFFFAOYSA-N sec-butyl acetate Chemical compound CCC(C)OC(C)=O DCKVNWZUADLDEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 229940031626 subunit vaccine Drugs 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F120/00—Homopolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and only one being terminated by only one carboxyl radical or a salt, anhydride, ester, amide, imide or nitrile thereof
- C08F120/02—Monocarboxylic acids having less than ten carbon atoms; Derivatives thereof
- C08F120/04—Acids; Metal salts or ammonium salts thereof
- C08F120/06—Acrylic acid; Methacrylic acid; Metal salts or ammonium salts thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F2/00—Processes of polymerisation
- C08F2/12—Polymerisation in non-solvents
- C08F2/16—Aqueous medium
- C08F2/22—Emulsion polymerisation
- C08F2/24—Emulsion polymerisation with the aid of emulsifying agents
- C08F2/26—Emulsion polymerisation with the aid of emulsifying agents anionic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F4/00—Polymerisation catalysts
- C08F4/40—Redox systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
- A61K2039/552—Veterinary vaccine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55555—Liposomes; Vesicles, e.g. nanoparticles; Spheres, e.g. nanospheres; Polymers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/32011—Picornaviridae
- C12N2770/32111—Aphthovirus, e.g. footandmouth disease virus
- C12N2770/32134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Polymerisation Methods In General (AREA)
Abstract
本发明公开了一种动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法，包括以下步骤：1）原料筛选；2）合成工艺及参数确立；3）预乳化单体；4）聚合反应；5）制备佐剂。采用本发明制备的动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂能诱导强烈的免疫反应并实现短期快速免疫保护和长期持续免疫保护，同时，安全性与206佐剂相比基本一致；采用本发明制备的佐剂具有良好的生物相容性和生物可降解性，与国内现有疫苗生产技术水平相适应，可应用于疫苗生产；同时，粘度低，易分散，易吸附，安全、无刺激，可以制备出流动性好并稳定的疫苗，可填补国内空白，为我国安全高效动物疫苗生产提供新的技术支撑，带动畜禽健康养殖和畜牧业发展。
Description
技术领域
本发明涉及疫苗佐剂配制技术领域，具体是一种动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法。
背景技术
佐剂是指与抗原同时或预先应用，能增强机体针对抗原的免疫应答能力，或改变免疫反应类型的物质。佐剂对疫苗起着至关重要的作用，理想的佐剂不仅没有免疫原性并能增强机体的免疫应答，更能使机体获得最佳的保护性免疫和免疫记忆。
近年来，随着亚单位疫苗免疫原性的降低，需要更好的佐剂来增强它们诱导免疫反应的能力。尽管佐剂研究已有几十年的历史，但是，应用在实际生产中应用的佐剂种类、品种很少，无法满足日益增长的需求，同时，随着人们环保意识的加强，大家对佐剂的生物可降解性也提出了要求。因此，需要设计一种安全无刺激且具有良好的生物相容性和可降解性的动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法，用于制备新型佐剂来填补国内空白，为我国安全高效动物疫苗生产提供新的技术支撑，带动畜禽健康养殖和畜牧业发展。
发明内容
本发明的目的在于提供一种动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法，其特征在于，它包括以下步骤：
1）原料筛选：选择单体进行备用，同时对乳化剂和引发剂进行选择，备用；
2）合成工艺及参数确立：选择合适的聚合工艺，通过单体与乳化剂的HLB值相近的原则或通过单体的乳液稳定性试验来确立乳化剂用量，确立引发剂用量为单体总量的0.2%-0.6%；
3）预乳化单体：在搅拌速度为150-300r/min的条件下，将单体总量20%的单体和引发剂总量1/3的引发剂加入至反应器中，同时加入全部乳化剂、pH缓冲剂和适量的蒸馏水，水浴升温至75-85℃，混合均匀，得预乳化单体；
4）聚合反应：将步骤3）中的预乳化单体按照常规方法进行聚合反应，然后将余下的单体和引发剂通过滴液漏斗连续滴加到反应器中；
5）制备佐剂：定时测量步骤4）中反应单体的转化率，当转化率恒定时，升温至90-95℃，保温45min，用氨水调节PH至6.0-7.0，冷却至40℃，即得。
作为本发明进一步的方案：步骤1）中，所述单体为丙烯酸、丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯、丙烯酸丁酯、丙烯酸异丁酯、丙烯酸异辛酯、丙烯酸月桂酯、丙烯酸环己酯、丙烯酸全氟烷基酯、丙烯酸羟乙基磷酸酯、甲基丙烯酸、甲基丙烯酸甲酯、甲级丙烯酸乙酯、甲基丙烯酸丁酯、甲基丙烯酸异丁酯、丙烯酸异辛酯、甲基丙烯酸月桂酯中的一种或两种的组合。
作为本发明再进一步的方案：步骤1）中，所述乳化剂为阴离子型表面活性剂；乳化剂类型的选择和用量的确定是决定乳液聚合体系稳定的两个重要因素；乳化剂有非离子型表面活性剂和离子型表面活性剂，通过采用阴离子型表面活性剂作为乳化剂，聚合物粒子表面吸附已电离的乳化剂阴离子而带负电，这种带电的乳胶粒子是靠同种电荷的斥力而稳定的，因而具有较好的机械稳定性。
作为本发明再进一步的方案：步骤1）中，所述引发剂为过氧化甲苯酰、过氧化2-乙基己基酸叔戊酯、过氧化2-乙基己基酸叔丁酯、1,1’-双（叔戊基过氧）环己烷中的一种或两种的组合；引发体系对于油溶性单体乳液的聚合稳定性影响不明显，但对于含有水溶性官能团单体的聚合体系的乳液聚合稳定性有较大的影响，由于丙烯酸类乳液聚合绝大多数属自由基聚合反应，对丙烯酸乳液聚合体系，采用油溶性的氧化还原引发体系比用水溶性的过硫酸盐引发体系的聚合稳定性好。
作为本发明再进一步的方案：步骤2）中，所述聚合工艺为间歇聚合、半连续聚合、连续聚合、种子乳液聚合中的一种。
作为本发明再进一步的方案：步骤2）中，所述引发剂用量为单体总量的0.3%-0.4%。
作为本发明再进一步的方案：步骤3）中，所述水浴升温至79-81℃。
所述的动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法在制备动物疫苗用佐剂产品中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
1）采用本发明制备的动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂能诱导强烈的免疫反应并实现短期快速免疫保护和长期持续免疫保护，同时，安全性与206佐剂相比基本一致；
2）采用本发明制备的新型、高效的聚丙烯酸类聚合物佐剂是一种生物可降解的聚合物纳米粒子佐剂，利用丙烯酸衍生物聚合而成，与国内现有疫苗生产技术水平相适应，可应用于疫苗生产；
3）采用本发明制备的佐剂粘度低，易分散，易吸附，安全、无刺激，具有良好的生物相容性，可以制备出流动性好并稳定的疫苗，所制备的疫苗易于注射，并且安全有效，可以诱导强烈的免疫反应，短期快速免疫保护和长期持续免疫保护，可填补国内空白，为我国安全高效动物疫苗生产提供新的技术支撑，带动畜禽健康养殖和畜牧业发展。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明的技术方案作进一步详细地说明。
实施例1
一种动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法，它包括以下步骤：
1）原料筛选：选择单体进行备用，同时对乳化剂和引发剂进行选择，备用；
其中，所述单体为丙烯酸；所述乳化剂为阴离子型表面活性剂；乳化剂类型的选择和用量的确定是决定乳液聚合体系稳定的两个重要因素；乳化剂有非离子型表面活性剂和离子型表面活性剂，通过采用阴离子型表面活性剂作为乳化剂，聚合物粒子表面吸附已电离的乳化剂阴离子而带负电，这种带电的乳胶粒子是靠同种电荷的斥力而稳定的，因而具有较好的机械稳定性；
所述引发剂为过氧化甲苯酰和过氧化2-乙基己基酸叔戊酯（TAPO）按照重量比为1:1的比例混合而成；引发体系对于油溶性单体乳液的聚合稳定性影响不明显，但对于含有水溶性官能团单体的聚合体系的乳液聚合稳定性有较大的影响，由于丙烯酸类乳液聚合绝大多数属自由基聚合反应，对丙烯酸乳液聚合体系，采用油溶性的氧化还原引发体系比用水溶性的过硫酸盐引发体系的聚合稳定性好；
2）合成工艺及参数确立：选择合适的聚合工艺，通过单体与乳化剂的HLB值相近的原则或通过单体的乳液稳定性试验来确立乳化剂用量，确立引发剂用量为单体总量的0.2%；通过确定引发剂用量，可使制备的聚合物乳液呈现出蓝光，乳液粒子的粒度小，乳液的稳定性好；
其中，所述聚合工艺为半连续聚合；此法可以避免其他聚合反应的出现；
3）预乳化单体：在搅拌速度为225r/min的条件下，将单体总量20%的单体和引发剂总量1/3的引发剂加入至反应器中，同时加入全部乳化剂、pH缓冲剂和适量的蒸馏水，水浴升温至75℃，混合均匀，得预乳化单体；通过预乳化单体有利于乳液聚合正常进行和共聚物组成均一；
4）聚合反应：将步骤3）中的预乳化单体按照常规方法进行聚合反应，然后将余下的单体和引发剂通过滴液漏斗连续滴加到反应器中，
所述单体的正常滴加速度要略慢于聚合反应速度，稍延长滴加时间，有利于降低残余单体含量，提高乳液聚合反应稳定性；
5）制备佐剂：定时测量反应单体的转化率，当转化率恒定时，升温至90℃，保温45min，用氨水调节PH至6.5，冷却至40℃，即得。
实施例2
一种动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法，它包括以下步骤：
1）原料筛选：选择单体进行备用，同时对乳化剂和引发剂进行选择，备用；
其中，所述单体为丙烯酸；所述乳化剂为阴离子型表面活性剂；乳化剂类型的选择和用量的确定是决定乳液聚合体系稳定的两个重要因素；乳化剂有非离子型表面活性剂和离子型表面活性剂，通过采用阴离子型表面活性剂作为乳化剂，聚合物粒子表面吸附已电离的乳化剂阴离子而带负电，这种带电的乳胶粒子是靠同种电荷的斥力而稳定的，因而具有较好的机械稳定性；
所述引发剂为过氧化甲苯酰和过氧化2-乙基己基酸叔戊酯（TAPO）按照重量比为1:1的比例混合而成；引发体系对于油溶性单体乳液的聚合稳定性影响不明显，但对于含有水溶性官能团单体的聚合体系的乳液聚合稳定性有较大的影响，由于丙烯酸类乳液聚合绝大多数属自由基聚合反应，对丙烯酸乳液聚合体系，采用油溶性的氧化还原引发体系比用水溶性的过硫酸盐引发体系的聚合稳定性好；
2）合成工艺及参数确立：选择合适的聚合工艺，通过单体与乳化剂的HLB值相近的原则或通过单体的乳液稳定性试验来确立乳化剂用量，确立引发剂用量为单体总量的0.6%；通过确定引发剂用量，可使制备的聚合物乳液呈现出蓝光，乳液粒子的粒度小，乳液的稳定性好；
其中，所述聚合工艺为半连续聚合；此法可以避免其他聚合反应的出现；
3）预乳化单体：在搅拌速度为225r/min的条件下，将单体总量20%的单体和引发剂总量1/3的引发剂加入至反应器中，同时加入全部乳化剂、pH缓冲剂和适量的蒸馏水，水浴升温至85℃，混合均匀，得预乳化单体；通过预乳化单体有利于乳液聚合正常进行和共聚物组成均一；
4）聚合反应：将步骤3）中的预乳化单体按照常规方法进行聚合反应，然后将余下的单体和引发剂通过滴液漏斗连续滴加到反应器中，
所述单体的正常滴加速度要略慢于聚合反应速度，稍延长滴加时间，有利于降低残余单体含量，提高乳液聚合反应稳定性；
5）制备佐剂：定时测量反应单体的转化率，当转化率恒定时，升温至95℃，保温45min，用氨水调节PH至6.5，冷却至40℃，即得。
实施例3
一种动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法，它包括以下步骤：
1）原料筛选：选择单体进行备用，同时对乳化剂和引发剂进行选择，备用；
其中，所述单体为丙烯酸；所述乳化剂为阴离子型表面活性剂；乳化剂类型的选择和用量的确定是决定乳液聚合体系稳定的两个重要因素；乳化剂有非离子型表面活性剂和离子型表面活性剂，通过采用阴离子型表面活性剂作为乳化剂，聚合物粒子表面吸附已电离的乳化剂阴离子而带负电，这种带电的乳胶粒子是靠同种电荷的斥力而稳定的，因而具有较好的机械稳定性；
所述引发剂为过氧化甲苯酰和过氧化2-乙基己基酸叔戊酯（TAPO）按照重量比为1:1的比例混合而成；引发体系对于油溶性单体乳液的聚合稳定性影响不明显，但对于含有水溶性官能团单体的聚合体系的乳液聚合稳定性有较大的影响，由于丙烯酸类乳液聚合绝大多数属自由基聚合反应，对丙烯酸乳液聚合体系，采用油溶性的氧化还原引发体系比用水溶性的过硫酸盐引发体系的聚合稳定性好；
2）合成工艺及参数确立：选择合适的聚合工艺，通过单体与乳化剂的HLB值相近的原则或通过单体的乳液稳定性试验来确立乳化剂用量，确立引发剂用量为单体总量的0.4%；通过确定引发剂用量，可使制备的聚合物乳液呈现出蓝光，乳液粒子的粒度小，乳液的稳定性好；
其中，所述聚合工艺为半连续聚合；此法可以避免其他聚合反应的出现；
3）预乳化单体：在搅拌速度为225r/min的条件下，将单体总量20%的单体和引发剂总量1/3的引发剂加入至反应器中，同时加入全部乳化剂、pH缓冲剂和适量的蒸馏水，水浴升温至80℃，混合均匀，得预乳化单体；通过预乳化单体有利于乳液聚合正常进行和共聚物组成均一；
4）聚合反应：将步骤3）中的预乳化单体按照常规方法进行聚合反应，然后将余下的单体和引发剂通过滴液漏斗连续滴加到反应器中，
所述单体的正常滴加速度要略慢于聚合反应速度，稍延长滴加时间，有利于降低残余单体含量，提高乳液聚合反应稳定性；
5）制备佐剂：定时测量反应单体的转化率，当转化率恒定时，升温至92.5℃，保温45min，用氨水调节PH至6.5，冷却至40℃，即得。
实施例4
一种动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法，它包括以下步骤：
1）原料筛选：选择单体进行备用，同时对乳化剂和引发剂进行选择，备用；
其中，所述单体为丙烯酸；所述乳化剂为阴离子型表面活性剂；乳化剂类型的选择和用量的确定是决定乳液聚合体系稳定的两个重要因素；乳化剂有非离子型表面活性剂和离子型表面活性剂，通过采用阴离子型表面活性剂作为乳化剂，聚合物粒子表面吸附已电离的乳化剂阴离子而带负电，这种带电的乳胶粒子是靠同种电荷的斥力而稳定的，因而具有较好的机械稳定性；
所述引发剂为过氧化甲苯酰和过氧化2-乙基己基酸叔戊酯（TAPO）按照重量比为1:1的比例混合而成；引发体系对于油溶性单体乳液的聚合稳定性影响不明显，但对于含有水溶性官能团单体的聚合体系的乳液聚合稳定性有较大的影响，由于丙烯酸类乳液聚合绝大多数属自由基聚合反应，对丙烯酸乳液聚合体系，采用油溶性的氧化还原引发体系比用水溶性的过硫酸盐引发体系的聚合稳定性好；
2）合成工艺及参数确立：选择合适的聚合工艺，通过单体与乳化剂的HLB值相近的原则或通过单体的乳液稳定性试验来确立乳化剂用量，确立引发剂用量为单体总量的0.4%；通过确定引发剂用量，可使制备的聚合物乳液呈现出蓝光，乳液粒子的粒度小，乳液的稳定性好；
其中，所述聚合工艺为半连续聚合；此法可以避免其他聚合反应的出现；
3）预乳化单体：在搅拌速度为225r/min的条件下，将单体总量20%的单体和引发剂总量1/3的引发剂加入至反应器中，同时加入全部乳化剂、pH缓冲剂和适量的蒸馏水，水浴升温至80℃，混合均匀，得预乳化单体；通过预乳化单体有利于乳液聚合正常进行和共聚物组成均一；
4）聚合反应：将步骤3）中的预乳化单体按照常规方法进行聚合反应，然后将余下的单体和引发剂通过滴液漏斗连续滴加到反应器中，
所述单体的正常滴加速度要略慢于聚合反应速度，稍延长滴加时间，有利于降低残余单体含量，提高乳液聚合反应稳定性；
5）制备佐剂：定时测量反应单体的转化率，当转化率恒定时，升温至90℃，保温45min，用氨水调节PH至6.5，冷却至40℃，即得。
实施例5
一种动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法，它包括以下步骤：
1）原料筛选：选择单体进行备用，同时对乳化剂和引发剂进行选择，备用；
其中，所述单体为丙烯酸；所述乳化剂为阴离子型表面活性剂；乳化剂类型的选择和用量的确定是决定乳液聚合体系稳定的两个重要因素；乳化剂有非离子型表面活性剂和离子型表面活性剂，通过采用阴离子型表面活性剂作为乳化剂，聚合物粒子表面吸附已电离的乳化剂阴离子而带负电，这种带电的乳胶粒子是靠同种电荷的斥力而稳定的，因而具有较好的机械稳定性；
所述引发剂为过氧化甲苯酰和过氧化2-乙基己基酸叔戊酯（TAPO）按照重量比为1:1的比例混合而成；引发体系对于油溶性单体乳液的聚合稳定性影响不明显，但对于含有水溶性官能团单体的聚合体系的乳液聚合稳定性有较大的影响，由于丙烯酸类乳液聚合绝大多数属自由基聚合反应，对丙烯酸乳液聚合体系，采用油溶性的氧化还原引发体系比用水溶性的过硫酸盐引发体系的聚合稳定性好；
2）合成工艺及参数确立：选择合适的聚合工艺，通过单体与乳化剂的HLB值相近的原则或通过单体的乳液稳定性试验来确立乳化剂用量，确立引发剂用量为单体总量的0.3%；通过确定引发剂用量，可使制备的聚合物乳液呈现出蓝光，乳液粒子的粒度小，乳液的稳定性好；
其中，所述聚合工艺为半连续聚合；此法可以避免其他聚合反应的出现；
3）预乳化单体：在搅拌速度为225r/min的条件下，将单体总量20%的单体和引发剂总量1/3的引发剂加入至反应器中，同时加入全部乳化剂、pH缓冲剂和适量的蒸馏水，水浴升温至79℃，混合均匀，得预乳化单体；通过预乳化单体有利于乳液聚合正常进行和共聚物组成均一；
4）聚合反应：将步骤3）中的预乳化单体按照常规方法进行聚合反应，然后将余下的单体和引发剂通过滴液漏斗连续滴加到反应器中，
所述单体的正常滴加速度要略慢于聚合反应速度，稍延长滴加时间，有利于降低残余单体含量，提高乳液聚合反应稳定性；
5）制备佐剂：定时测量反应单体的转化率，当转化率恒定时，升温至90℃，保温45min，用氨水调节PH至6.5，冷却至40℃，即得。
实施例6
一种动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法，它包括以下步骤：
1）原料筛选：选择单体进行备用，同时对乳化剂和引发剂进行选择，备用；
其中，所述单体为丙烯酸；所述乳化剂为阴离子型表面活性剂；乳化剂类型的选择和用量的确定是决定乳液聚合体系稳定的两个重要因素；乳化剂有非离子型表面活性剂和离子型表面活性剂，通过采用阴离子型表面活性剂作为乳化剂，聚合物粒子表面吸附已电离的乳化剂阴离子而带负电，这种带电的乳胶粒子是靠同种电荷的斥力而稳定的，因而具有较好的机械稳定性；
所述引发剂为过氧化甲苯酰和过氧化2-乙基己基酸叔戊酯（TAPO）按照重量比为1:1的比例混合而成；引发体系对于油溶性单体乳液的聚合稳定性影响不明显，但对于含有水溶性官能团单体的聚合体系的乳液聚合稳定性有较大的影响，由于丙烯酸类乳液聚合绝大多数属自由基聚合反应，对丙烯酸乳液聚合体系，采用油溶性的氧化还原引发体系比用水溶性的过硫酸盐引发体系的聚合稳定性好；
2）合成工艺及参数确立：选择合适的聚合工艺，通过单体与乳化剂的HLB值相近的原则或通过单体的乳液稳定性试验来确立乳化剂用量，确立引发剂用量为单体总量的0.4%；通过确定引发剂用量，可使制备的聚合物乳液呈现出蓝光，乳液粒子的粒度小，乳液的稳定性好；
其中，所述聚合工艺为半连续聚合；此法可以避免其他聚合反应的出现；
3）预乳化单体：在搅拌速度为225r/min的条件下，将单体总量20%的单体和引发剂总量1/3的引发剂加入至反应器中，同时加入全部乳化剂、pH缓冲剂和适量的蒸馏水，水浴升温至81℃，混合均匀，得预乳化单体；通过预乳化单体有利于乳液聚合正常进行和共聚物组成均一；
4）聚合反应：将步骤3）中的预乳化单体按照常规方法进行聚合反应，然后将余下的单体和引发剂通过滴液漏斗连续滴加到反应器中，
所述单体的正常滴加速度要略慢于聚合反应速度，稍延长滴加时间，有利于降低残余单体含量，提高乳液聚合反应稳定性；
5）制备佐剂：定时测量反应单体的转化率，当转化率恒定时，升温至90℃，保温45min，用氨水调节PH至6.5，冷却至40℃，即得。
实施例7
一种动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法，它包括以下步骤：
1）原料筛选：选择单体进行备用，同时对乳化剂和引发剂进行选择，备用；
其中，所述单体为丙烯酸；所述乳化剂为阴离子型表面活性剂；乳化剂类型的选择和用量的确定是决定乳液聚合体系稳定的两个重要因素；乳化剂有非离子型表面活性剂和离子型表面活性剂，通过采用阴离子型表面活性剂作为乳化剂，聚合物粒子表面吸附已电离的乳化剂阴离子而带负电，这种带电的乳胶粒子是靠同种电荷的斥力而稳定的，因而具有较好的机械稳定性；
所述引发剂为过氧化甲苯酰和过氧化2-乙基己基酸叔戊酯（TAPO）按照重量比为1:1的比例混合而成；引发体系对于油溶性单体乳液的聚合稳定性影响不明显，但对于含有水溶性官能团单体的聚合体系的乳液聚合稳定性有较大的影响，由于丙烯酸类乳液聚合绝大多数属自由基聚合反应，对丙烯酸乳液聚合体系，采用油溶性的氧化还原引发体系比用水溶性的过硫酸盐引发体系的聚合稳定性好；
2）合成工艺及参数确立：选择合适的聚合工艺，通过单体与乳化剂的HLB值相近的原则或通过单体的乳液稳定性试验来确立乳化剂用量，确立引发剂用量为单体总量的0.35%；通过确定引发剂用量，可使制备的聚合物乳液呈现出蓝光，乳液粒子的粒度小，乳液的稳定性好；
其中，所述聚合工艺为半连续聚合；此法可以避免其他聚合反应的出现；
3）预乳化单体：在搅拌速度为225r/min的条件下，将单体总量20%的单体和引发剂总量1/3的引发剂加入至反应器中，同时加入全部乳化剂、pH缓冲剂和适量的蒸馏水，水浴升温至80℃，混合均匀，得预乳化单体；通过预乳化单体有利于乳液聚合正常进行和共聚物组成均一；
4）聚合反应：将步骤3）中的预乳化单体按照常规方法进行聚合反应，然后将余下的单体和引发剂通过滴液漏斗连续滴加到反应器中，
所述单体的正常滴加速度要略慢于聚合反应速度，稍延长滴加时间，有利于降低残余单体含量，提高乳液聚合反应稳定性；
5）制备佐剂：定时测量反应单体的转化率，当转化率恒定时，升温至90℃，保温45min，用氨水调节PH至6.5，冷却至40℃，即得。
实施例8
将实施例7中制备的佐剂进行制备口蹄疫疫苗，具体方法如下：
1）分别将50g抗原和50g佐剂加热到30℃±2℃；
2）在低速搅拌下将抗原加入佐剂中，搅拌乳化10min（温度保持在30±2℃）；
3）在搅拌下将温度降至室温，即得口蹄疫疫苗，备用。
对上述制备的口蹄疫疫苗进行稳定性检测，其中，将疫苗静置于37℃，放置15天，未出现严重破乳；将疫苗静置于25℃，放置30天，未出现严重破乳；采用本实施例制备的佐剂具有优异的稳定性。
对比例1
206佐剂，即Montanide ISA 206 VG。
对比例2
与实施例8相比，除了将实施例7中制备的佐剂改为206佐剂外，其他条件均与实施例8相同。
性能试验
一、佐剂检测
对实施例7制备的佐剂进行检测，检测方法按照聚合物佐剂产品质量标准进行检测。具体为检测佐剂外观、分子量、PH值、异常毒性。
表1 聚合物佐剂检测结果
| 检测项 | 检测结果 | 标准 |
| 25℃外观 | 白色，不透明 | 白色，不透明 |
| 分子量 | 16.5万 | 10-20万 |
| pH | 6.45 | 6.0-7.0 |
| 乳化特性 | 合格 | 合格 |
| 异常毒性检查 | 合格 | 合格 |
二、佐剂安全性综合评价
将实施例7制备的佐剂进行安全性综合评价。
其中，将实施例7制备的佐剂分别皮下、腹腔注射小鼠和豚鼠，观察14日，结果表明各剂量组小鼠和豚鼠均健活，注射部位未见肿块、结节，符合《中华人民共和国兽药典》2015年版一部《异常毒性检查法》的规定，聚合物佐剂异常毒性检查合格，具体实施办法见表2和3。
表2 佐剂小鼠安全性试验
表3 佐剂豚鼠安全性试验
其中，将实施例7制备的佐剂分别超剂量皮下注射小鼠、豚鼠，超剂量肌肉注射仔猪、架子猪，观察14日，小鼠、豚鼠、仔猪、架子猪均健活，未见明显不良反应，且小鼠、豚鼠、仔猪、架子猪注射部位均未见肿块、结节，吸收良好，说明佐剂对小鼠、豚鼠、仔猪均具有良好的安全性，且与对比例1的206佐剂相比，安全性基本一致，综上所述：本发明制备的佐剂安全性检验合格，具体实施办法见表4。
表4 佐剂安全性试验
三、疫苗效力评价
将2批实施例8制备的疫苗样品分别命名为疫苗1和疫苗2，将1批对比例2采用206佐剂制备的疫苗样品命名为疫苗3，将疫苗1-3分别注射架子猪，每批疫苗样品注射10头；设定空白对照，分别在注射后14日、21日、28日采血，检测血清抗体，比较抗体效价。
疫苗样品免疫试验猪后，14日抗体产生并全部达到阳性的水平（1:64），免疫后21日、28日，抗体水平呈现持续升高的趋势，聚合物佐剂制备的2批疫苗样品与ISA206佐剂制备的疫苗样品抗体水平基本相同，抗体上升快且高，符合口蹄疫效力检验标准要求。结果见表5、6和7。
表5 疫苗样品免疫猪14日血清抗体结果
表6 疫苗样品免疫猪21日血清抗体结果
表7 疫苗样品免疫猪28日血清抗体结果
本发明通过：1）构建聚合物佐剂基础配方，分别为筛选单体、引发剂、分散剂等原料；优化工艺参数（单体浓度、温度等）；2）初步的佐剂动物实验，分别为佐剂稳定性试验；佐剂安全性试验（小鼠）；疫苗安全性、效力试验（小鼠）；3）优化佐剂配方、确定乳化工艺，分别为优化筛选佐剂配方；确定乳化温度、乳化方式、乳化时间等参数；佐剂性能检验；4）针对优化的佐剂配方进行动物试验，分别为佐剂安全性试验（小鼠、仔猪）；疫苗（抗原+佐剂）稳定性、安全性、效力试验（小鼠）；疫苗（抗原+佐剂）安全性、效力试验、免疫持续期试验（仔猪）；研制出与206佐剂相比，安全性基本一致的动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂。
从以上结果中可以看出，采用本发明制备的动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂能诱导强烈的免疫反应并实现短期快速免疫保护和长期持续免疫保护，同时，安全性与206佐剂相比基本一致；采用本发明制备的新型、高效的聚丙烯酸类聚合物佐剂是一种生物可降解的聚合物纳米粒子佐剂，利用丙烯酸衍生物聚合而成，与国内现有疫苗生产技术水平相适应，可应用于疫苗生产；采用本发明制备的佐剂粘度低，易分散，易吸附，安全、无刺激，具有良好的生物相容性，可以制备出流动性好并稳定的疫苗，所制备的疫苗易于注射，并且安全有效，可以诱导强烈的免疫反应，短期快速免疫保护和长期持续免疫保护，可填补国内空白，为我国安全高效动物疫苗生产提供新的技术支撑，带动畜禽健康养殖和畜牧业发展。
上面对本发明的较佳实施方式作了详细说明，但是本发明并不限于上述实施方式，在本领域的普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。
Claims (8)
1.一种动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法，其特征在于，它包括以下步骤：
1）原料筛选：选择单体进行备用，同时对乳化剂和引发剂进行选择，备用；
2）合成工艺及参数确立：选择合适的聚合工艺，通过单体与乳化剂的HLB值相近的原则或通过单体的乳液稳定性试验来确立乳化剂用量，确立引发剂用量为单体总量的0.2%-0.6%；
3）预乳化单体：在搅拌速度为150-300r/min的条件下，将单体总量20%的单体和引发剂总量1/3的引发剂加入至反应器中，同时加入全部乳化剂、pH缓冲剂和适量的蒸馏水，水浴升温至75-85℃，混合均匀，得预乳化单体；
4）聚合反应：将步骤3）中的预乳化单体按照常规方法进行聚合反应，然后将余下的单体和引发剂通过滴液漏斗连续滴加到反应器中；
5）制备佐剂：定时测量步骤4）中反应单体的转化率，当转化率恒定时，升温至90-95℃，保温45min，用氨水调节PH至6.0-7.0，冷却至40℃，即得。
2.根据权利要求1所述的动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法，其特征在于，步骤1）中，所述单体为丙烯酸、丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯、丙烯酸丁酯、丙烯酸异丁酯、丙烯酸异辛酯、丙烯酸月桂酯、丙烯酸环己酯、丙烯酸全氟烷基酯、丙烯酸羟乙基磷酸酯、甲基丙烯酸、甲基丙烯酸甲酯、甲级丙烯酸乙酯、甲基丙烯酸丁酯、甲基丙烯酸异丁酯、丙烯酸异辛酯、甲基丙烯酸月桂酯中的一种或两种的组合。
3.根据权利要求2所述的动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法，其特征在于，步骤1）中，所述乳化剂为阴离子型表面活性剂。
4.根据权利要求3所述的动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法，其特征在于，步骤1）中，所述引发剂为过氧化甲苯酰、过氧化2-乙基己基酸叔戊酯、过氧化2-乙基己基酸叔丁酯、1,1’-双（叔戊基过氧）环己烷中的一种或两种的组合。
5.根据权利要求1所述的动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法，其特征在于，步骤2）中，所述聚合工艺为间歇聚合、半连续聚合、连续聚合、种子乳液聚合中的一种。
6.根据权利要求5所述的动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法，其特征在于，步骤2）中，所述引发剂用量为单体总量的0.3%-0.4%。
7.根据权利要求1所述的动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法，其特征在于，步骤3）中，所述水浴升温至79-81℃。
8.一种如权利要求1-7任一所述的动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法在制备动物疫苗用佐剂产品中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810819225.8A CN109134724A (zh) | 2018-07-24 | 2018-07-24 | 一种动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201810819225.8A CN109134724A (zh) | 2018-07-24 | 2018-07-24 | 一种动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN109134724A true CN109134724A (zh) | 2019-01-04 |
Family
ID=64797891
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201810819225.8A Pending CN109134724A (zh) | 2018-07-24 | 2018-07-24 | 一种动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN109134724A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2024086599A1 (en) * | 2022-10-17 | 2024-04-25 | Access To Advanced Health Institute | Oligomeric acrylate- and methacrylate-based vaccine adjuvants and formulations |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20030021793A1 (en) * | 1996-10-24 | 2003-01-30 | Luuk Hilgers | Polyanionic polymers as adjuvants for mucosal immunization |
| CN106317295A (zh) * | 2016-09-14 | 2017-01-11 | 河北省科学院能源研究所 | 一种纳米粒径肠溶型丙烯酸树脂乳液及其制备方法和应用 |
| CN109475615A (zh) * | 2016-06-17 | 2019-03-15 | 梅里亚股份有限公司 | 包含直链或支链聚丙烯酸聚合物佐剂的新免疫原性制剂 |
-
2018
- 2018-07-24 CN CN201810819225.8A patent/CN109134724A/zh active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20030021793A1 (en) * | 1996-10-24 | 2003-01-30 | Luuk Hilgers | Polyanionic polymers as adjuvants for mucosal immunization |
| CN109475615A (zh) * | 2016-06-17 | 2019-03-15 | 梅里亚股份有限公司 | 包含直链或支链聚丙烯酸聚合物佐剂的新免疫原性制剂 |
| CN106317295A (zh) * | 2016-09-14 | 2017-01-11 | 河北省科学院能源研究所 | 一种纳米粒径肠溶型丙烯酸树脂乳液及其制备方法和应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 叶青: "丙烯酸酯乳液及其共混乳液的制备和性能研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技I辑》 * |
| 陈冠荣: "《化工百科全书 第8卷 计算机控制系统-聚硅氧烷》", 30 September 1994, 化学工业出版社 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2024086599A1 (en) * | 2022-10-17 | 2024-04-25 | Access To Advanced Health Institute | Oligomeric acrylate- and methacrylate-based vaccine adjuvants and formulations |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| WO2012087821A1 (en) | Cold water soluble polyvinyl alcohol/alkyl acrylate copolymers and films thereof | |
| CN105482342B (zh) | 低温性能优良的氯乙烯树脂及其制备方法 | |
| CN109134724A (zh) | 一种动物疫苗用聚丙烯酸类聚合物佐剂的研制方法 | |
| CN103154041B9 (zh) | 通过在溶液中的自由基聚合制备含叔氨基的（甲基）丙烯酸酯共聚物的方法 | |
| AU2011261203B2 (en) | Peptide particle formulation | |
| CN106084116A (zh) | 水凝胶及其制备方法，水凝胶的应用 | |
| CN108602902B (zh) | 得到具有至少双峰分子量分布的阳离子聚合物的方法 | |
| CN108495868B (zh) | 具有至少双峰分子量分布的阳离子聚合物 | |
| DE19531515B4 (de) | Herstellung von Polyvinylester-Dispersionen | |
| CN1908026A (zh) | 丙烯酰胺交联共聚物乳液及其制备方法 | |
| ES2656683T3 (es) | Copolímeros de ésteres vinílicos de ácidos grasos con propiedades de cera | |
| Bajpai et al. | Swelling behavior of poly (MMA‐co‐BA‐co‐PPGDA) polymers | |
| Jiang et al. | Copolymerization of organosilicone-veova10-vac emulsion modified with protective colloid of pam-peg | |
| CN104430400B (zh) | 一种速溶小檗碱制剂及其制备方法和应用 | |
| Guo et al. | The effect of buffer species on hydration and mechanical properties of polymeric films prepared from aqueous colloidal cationic polymer dispersions | |
| CN106750026A (zh) | 有机两性共聚高分子互穿网络凝胶的制备方法 | |
| CN106750022A (zh) | 有机两性共聚高分子互穿网络凝胶的制备方法 | |
| CN106750018A (zh) | 有机两性共聚高分子互穿网络凝胶的制备方法 | |
| CN106749993A (zh) | 有机两性共聚高分子互穿网络凝胶的制备方法 | |
| CN106749995A (zh) | 有机两性共聚高分子互穿网络凝胶的制备方法 | |
| CN106699993A (zh) | 有机两性共聚高分子互穿网络凝胶的制备方法 | |
| CN104086684A (zh) | 一种窄分子量分布的聚2-丙烯酸-2(2-甲氧基乙氧基)乙酯的制备方法 | |
| CN106699991A (zh) | 有机两性共聚高分子互穿网络凝胶的制备方法 | |
| CN110511324A (zh) | 一种含有磺酸基烷基的超浓乳液聚合物制备方法 | |
| CN106749977A (zh) | 有机两性共聚高分子互穿网络凝胶的制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20190104 |