CN108864113B - 一种mdm2-hdac双靶点抑制剂、药物组合物及其制备和用途 - Google Patents

一种mdm2-hdac双靶点抑制剂、药物组合物及其制备和用途 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种MDM2‑HDAC双靶点抑制剂、药物组合物及其制备和用途，所述MDM2‑HDAC双靶点抑制剂具有式I所示的结构，本发明的具有式I所示结构的抑制剂能够同时抑制MDM2和HDAC的活性，促进癌细胞凋亡、细胞生长抑制和周期停滞，具有双靶点抑制性，可以降低肿瘤细胞的凋亡阈值，并且可增加p53乙酰化水平，使p53稳定存在于细胞核，延长p53的半衰期，本发明的MDM2‑HDAC双靶点抑制剂可保护正常细胞免遭某些化学治疗剂和放射的毒性作用，对癌症进行更加有效的治疗。

Description

一种MDM2-HDAC双靶点抑制剂、药物组合物及其制备和用途
技术领域
本发明属于药物制剂领域，本发明涉及一种MDM2-HDAC双靶点抑制剂、药物组合物及其制备和用途。
背景技术
TP53(p53基因)是人体最重要的抑瘤基因，临床数据表明约50％的肿瘤发生均与TP53突变相关。p53蛋白是TP53的编码产物，也被称为基因组的“守护天使”。p53蛋白在修复细胞基因组损伤、维持基因组稳定，以及细胞在应激条件下发生不可逆损伤后诱导细胞凋亡，防止细胞由于基因变异发生恶性转化等方面发挥着核心作用。
在肿瘤细胞中，p53蛋白可以诱导肿瘤细胞周期停滞和凋亡。MDM2是一种癌蛋白，是p53蛋白的主要抑制剂。MDM2抑制p53活性主要通过三种途径：1)MDM2占据p53的转录结合域，抑制p53与DNA启动子的结合从而抑制转录活性；2)将p53输出细胞核外，减少其核内水平，使其不能与靶基因结合，促进p53降解；3)MDM2作为E3泛素蛋白连接酶，诱导p53泛素化，促进p53被蛋白酶体降解。MDM2常高表达于p53野生型肿瘤细胞中，导致MDM2-p53的比例失衡，p53的活性受到抑制。已有研究显示，MDM2抑制剂可以恢复p53的抗癌活性，在体内外均可抑制p53野生型肿瘤细胞的生长。进一步地，MDM2抑制剂引起的正常组织中野生型p53的稳定化还能选择性地保护正常组织免受化疗药物或/有丝分裂毒的损伤。
HDAC是一类表观遗传修饰酶，也是一种转录后修饰酶，可对组蛋白和非组蛋白的赖氨酸残基ε-氨基进行去乙酰化修饰，改变某些基因的转录。在肿瘤细胞中，HDAC高表达，致使部分抑癌基因的转录受到抑制，而癌基因的转录则得到激活，从而促进癌细胞的生长与增殖。因此，HDAC是一类重要的抗癌药物靶标，HDAC抑制剂已经在临床上用于癌症的治疗。同时，p53是HDAC的一种非组蛋白底物，MDM2可以招募HDAC对p53进行去乙酰化修饰，促进MDM2对p53介导的泛素化修饰，从而诱导p53被蛋白酶体降解而失活。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于提供一种MDM2-HDAC双靶点抑制剂、药物组合物、及其制备和用途。
为达到此申请目的，本发明采用以下技术方案：
一方面，本发明提供一种MDM2-HDAC双靶点抑制剂，其具有如式I所示的结构：
Figure BDA0001753867430000011
其中，R1选自H、羟基、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的烷氧基、取代或未取代的氨基；R2、R3独立地选自H、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的环烷基、C1-C6烷氧基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的环烯基、取代或未取代的芳基或取代或未取代的杂芳基；或者R2和R3形成取代或未取代的螺环烷基或取代或未取代的杂环基；
R4、R6独立地选自H、氰基、卤素、取代或未取代的C1-C6烷基或取代或未取代的C1-C6烷氧基；R5、R7独立地选自取代或未取代的芳基或取代或未取代的杂芳基；或者R4和R5与它们都键接的碳原子所在的环组合形成取代或未取代的螺环基；
R8选自H或C1-C6烷基；
L选自
Figure BDA0001753867430000021
Figure BDA0001753867430000022
或-(CH2)q-，其中m，n，p＝0～1；t＝3-7；q＝3～7；Z选自单键、C1-C7烷基或C2-C6链烯基；Y1、Y2独立地选自CH或N；Y3选自-CH2-，或取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基；
Q选自H、卤素、-CN、-CF3、C1-C6烷基、-OH或C1-C6烷氧基；
R9选自-C(O)NHOH、-C(O)CF3、-C(O)CH3或
Figure BDA0001753867430000023
R13选自H、F、Cl或取代或未取代的芳基。
本发明提供的具有式I所示结构的抑制剂能够同时抑制MDM2和HDAC的活性，促进癌细胞凋亡、细胞生长抑制和周期停滞，一方面通过抑制MDM2的活性阻止MDM2-p53之间的相互作用，恢复p53的转录活性并激活p53下游效应基因，所述MDM2-p53之间的相互作用通常会促进p53降解；另一方面还可以通过抑制HDAC活性来增强p53乙酰化水平，抑制MDM2介导的p53泛素化，使p53稳定存在于细胞核，延长p53的半衰期。
癌症的发生机制非常复杂，通常癌细胞的生长和存活依赖于多个信号通路的传导，使得单纯作用一个靶点的化合物不能彻底杀死肿瘤细胞，并且容易产生耐药性。事实上，药物的联合用药是癌症临床治疗的主要策略。本发明涉及的MDM2-HDAC双功能抑制剂将从多途径同时发挥药效，与现有的MDM2或HDAC单靶点抑制剂相比，在一些实施方案中，用治疗有效量的本发明提供的化合物可以降低耐药性的发生，提高抗癌的疗效，增加临床益处。
在一些实施方案中，所述取代或未取代的烷氧基为取代或未取代的C1-C3烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基。
在一些实施方案中，所述R5、R7独立地选自如下取代或未取代的芳基或杂芳基：
Figure BDA0001753867430000024
其中X为H或至少一个取代基。在一些实施方案中，X为H或卤素。在一些优选的实施方案中，X为氟或氯。
在一些实施方案中，R4和R5与它们都键接的碳原子形成如下环状结构：
Figure BDA0001753867430000025
，其中*位置的碳原子代表与R4和R5都键接的碳原子，X为H或至少一个取代基，A选自O或-NH-。在一些实施方案中，X选自H或卤素；在一些优选的实施方案中，所述卤素为氟、氯或溴。
在一些实施方案中，式I所示化合物中，R1、R2选自H，R3选自-CH2C(CH3)3。
在一些实施方案中，式I所示化合物中，R4选自氰基。
在一些实施方案中，式I所示化合物中，R4和R5与它们都键接的碳原子形成如下环状结构：
Figure BDA0001753867430000031
其中，*位置的碳原子代表与R4和R5都键接的碳原子，Ra、Rb独立地选自H、氟或氯。
在一些实施方案中，式I所示化合物中，R6选自H。
在一些实施方案中，式I所示化合物中，R2和R3形成取代或未取代的螺环烷基或取代或未取代的杂环基。
在一些优选的实施方案中，本发明所提供的MDM2-HDAC双靶点抑制剂具有如下式II所示的结构：
Figure BDA0001753867430000032
其中，B环选自C4-C7环烷基；Rc和Rd是环B的一个碳原子上的取代基，独立地选自H、C1-C3烷基或取代或未被取代的C1-C3烷氧基，或者Rc和Rd与它们所连接的碳一起形成4元至6元螺环取代基；除此之外，式II中取代基R1、R4、R5、R6、R7、R8、R9和L与式I中相应基团的限定相同。优选地，所述Rc和Rd与它们所连接的碳一起形成含有氧原子或氮原子的4元至6元螺环取代基。
在一些实施方案中，式II所示化合物中，R1选自H、或C1-C3烷基；
在一些实施方案中，式II所示化合物中，R4和R5与它们都键接的碳原子形成如下环状结构：
Figure BDA0001753867430000033
其中*位置的碳原子代表与R4和R5都键接的碳原子，X为H或卤素。
在一些实施方案中，式II所示化合物中，R6选自H。
在一些实施方案中，式II所示化合物中，R7选自以下的芳基或杂芳基，
Figure BDA0001753867430000034
其中X为H或卤素。在一些优选的实施方案中，X为氟或氯。
在本发明中，取代基X可以代表一个取代基，也可以表示至少两个取代基，例如在其连接的苯环上有五个位置可以取代，则其取代基的个数可以为1-5，又如在其连接的氮杂环上有三个可取代的位置，则X可表示取代基的个数可以为1-3。
在一些实施方案中，式II所示化合物中，B环为
Figure BDA0001753867430000035
#，其中*位置碳为与式II结构中含氮五元环共用的碳原子，#位置碳原子为与Rc和Rd连接的碳原子。
在一些实施方案中，本发明所提供的MDM2-HDAC双靶点抑制剂为如下化合物中的任意一种或至少两种的组合：
Figure BDA0001753867430000041
在另一些实施方案中，本发明所提供的MDM2-HDAC双靶点抑制剂为如下化合物中的任意一种或至少两种的组合：
Figure BDA0001753867430000051
在另一些实施方案中，本发明所提供的MDM2-HDAC双靶点抑制剂为如下化合物中的任意一种或至少两种的组合：
Figure BDA0001753867430000061
另一方面，本发明提供了如上所述的MDM2-HDAC双靶点抑制剂的对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐。
在本发明中，MDM2-HDAC双靶点抑制剂对MDM2和HDAC的IC50值均为100μM或更低，例如95μM或更低、90μM或更低、85μM或更低、80μM或更低、75μM或更低、70μM或更低、60μM或更低、50μM或更低、40μM或更低、30μM或更低、20μM或更低。
本发明的如上所述的MDM2-HDAC双靶点抑制剂，可以参照现有文献的方法制备得到，例如J.Med.Chem.2013,56,5979-5983；Org.Process Res.Dev.2016,20,2057-2066；J.Med.Chem.2017,60,2819-2839；J.Peptide Res.2001,58,338-341中记载的方法。
其制备方法简单概括如下：
(1)式A所示化合物与式B所示化合物进行缩合反应得到式C所示化合物；
(2)式C所示化合物脱保护得到式I所示化合物，具体反应流程如下所述：
Figure BDA0001753867430000071
其中R1-R9以及L的限定范围与式I所示化合物中的限定范围相同，R14保护基团为苄基
Figure BDA0001753867430000072
或THP
Figure BDA0001753867430000073
等常见的保护基团。
具体地说，
当R4、R6独立地选自H、氰基、卤素、取代或未取代的C1-C6烷基或取代或未取代的C1-C6烷氧基，R5、R7独立地选自取代或未取代的芳基或取代或未取代的杂芳基，化合物A可通过以下反应流程合成：
Figure BDA0001753867430000074
化合物D和化合物E缩合得到中间体F。化合物G和化合物H在强碱加热条件下脱水消除可生成中间体I。中间体F和中间体I经[2+3]环加成可以生成中间体J，然后与相应的醛(Aldehydes)通过还原胺化、酯基水解即可得到化合物A。
当R4和R5与它们都键接的碳原子所在的环组合形成取代或未取代的螺环基时，化合物A可通过以下反应流程合成：
Figure BDA0001753867430000081
其中，Ar表示取代或未取代的芳环或杂芳环。
化合物H和化合物L在碱性条件(Base)下加热回流生成中间体M，然后再与化合物N和E在甲苯(Toluene)中回流可生成中间体O，在浓硫酸(conc.H2SO4)-甲醇的体系中开环生成中间体P。中间体P在硝酸铈铵的作用下移除氨基侧链，再与相应的醛经还原胺化得中间体R，最后在碱性条件下水解酯基即可得到化合物A。
另一方面，本发明提供一种药物组合物，所述药物组合物包含如上所述的MDM2-HDAC双靶点抑制剂或如上所述的MDM2-HDAC双靶点抑制剂的对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐。
在本发明中，所述药物组合物还包括至少一种抗癌剂。本发明所述MDM2-HDAC双靶点抑制剂或其对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐可以与一种或多种抗癌剂联合应用。
本发明提供的双靶点抑制剂可以降低肿瘤细胞的凋亡阈值，在一些实施方案中，抗癌药物与一种或多种本文提供的双靶点抑制剂化合物组合使用时，成功地执行细胞凋亡程序(作为对抗癌药物/放射的细胞凋亡诱导的响应)的细胞比例将会增加。因此本发明提供的化合物、组合物和方法能与一种或多种经批准的抗癌药物和/放射治疗一起使用。
由于本发明提供的MDM2-HDAC双靶点抑制剂可增加p53乙酰化水平，使p53稳定存在于细胞核，延长p53的半衰期。因此，在本发明提供的化合物可保护正常细胞(例如非过度增殖性细胞)免遭某些化学治疗剂和放射的毒性作用。当化学治疗剂或放射治疗与本文提供的化合物组合给药时，可以允许使用更高剂量或更长期治疗的化学治疗剂或疗法，而不增加所述治疗的毒性副作用，这种有差别的保护性作用可允许更有效地治疗癌症。
如本文使用的，MDM2意指人MDM2蛋白，p53意指人p53蛋白，HDAC意指人HDAC蛋白。注意，人MDM2蛋白也可以称为HDM2蛋白或hMDM2蛋白。
在一些实施方案中，所述药物组合物还包含药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
在另一方面，本发明提供了如上所述的MDM2-HDAC双靶点抑制剂或所述MDM2-HDAC双靶点抑制剂的对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐在制备用于治疗由细胞过度增殖和/或血管新生所导致、关联或伴随的疾病或病况的药物中的用途。
在本发明中，所述细胞过度增殖和/或血管新生所导致、关联或伴随的疾病或病况包括但不限于：增生性病症、神经变性疾病、代谢性疾病、眼部退化疾病、炎性疾病和/或免疫系统病症，涉及血管新生的疾病、心理病症、心血管疾病、纤维化疾病、感染性疾病、造血性病症。
在本发明中，所述神经变性疾病包括亨廷顿病、聚谷氨酰胺病、帕金森病、阿尔茨海默病、癫痈发作、纹状体黑质变性、进行性核上性麻痹、扭转张力不全、痉挛性斜颈和运动障碍、家族性震颤、抽动秽语综合征、弥漫性Lewy体疾病、进行性核上性麻痹、皮克病、颅内出血、原发性侧索硬化症、脊髓性肌肉萎缩症、肌萎缩侧索硬化症、肥大性间质性多神经病、视网膜色素变性、遗传性视神经萎缩、遗传性痉挛性截瘫、进行性共济失调症和Shy-Drager症候群。
在本发明中，所述代谢性疾病包括2-型糖尿病。所述眼部退化疾病包括青光眼、老年黄斑变性、虹膜红变性青光眼。
在本发明中，所述炎性疾病和/或免疫系统病症包括类风湿性关苄炎(RA)、骨性关苄炎、青少年慢性关苄炎、移植物抗宿主病、牛皮癣、哮喘、脊椎关苄病变、牛皮癣、克罗恩病、炎性肠病、结肠溃疡、酒精性肝炎、糖尿病、Sjoegrens综合征(Sjoegrens's syndrome)、多发性硬化症、强直性脊椎炎、膜性肾小球病、椎间盘性疼痛、全身性红斑狼疮。
在本发明中，所述涉及血管新生的疾病包括癌症、牛皮癣、类风湿性关节炎。所述心理病症包括双相性精神障碍、精神分裂症、抑郁、痴呆等。所述心血管疾病包括心力衰竭、再狭窄和动脉硬化、纤维化疾病。所述纤维化疾病包括肝纤维化、囊性纤维病、血管纤维瘤。
在本发明中，所述感染性疾病包括真菌感染，例如白色念玖菌(CandidaAlbicans)；病毒性感染，例如单纯疤疹；原虫感染，例如疟疾、利什曼原虫感染、布氏锥虫(Trypanosoma brucei)感染、弓形体病。
在本发明中，所述造血性病症包括海洋性贫血、贫血和镰状细胞性贫血。
在一个实施方案中，所述过度增殖性疾病为癌症。
在一些实施方案中，所述癌症为固态肿瘤或血液恶性疾病。
在本发明中，所述癌症包括但不限于骨癌类(包括尤因肉瘤、骨肉瘤、软骨肉瘤等)、脑和CNS肿瘤(包括听神经瘤、神经母细胞瘤、神经胶瘤和其他脑肿瘤，脊髓肿瘤、乳癌、结肠直肠癌、晚期结肠直肠腺癌)、内分泌癌类(包括肾上腺皮质癌、胰癌、脑垂体癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、胸腺癌、多发性内分泌肿瘤)；胃肠癌类(包括胃癌、食道癌、小肠癌、肝癌、肝外胆管癌、胃肠类癌性肿瘤、胆囊癌)、泌尿生殖器癌类(包括翠丸癌、阴茎癌、前列腺癌)；妇科癌类(包括子宫颈癌、卵巢癌、阴道癌、子宫/子宫内膜癌、阴部癌、妊娠滋养细胞肿瘤、输卵管癌、子宫肉瘤)、头和颈部肿瘤类(包括口腔癌、唇癌、唾腺癌、喉头癌、下咽癌、正咽癌、鼻癌、鼻窦癌、鼻咽癌)；血癌类(包括儿童白血病、急性淋巴性白血病、急性骨髓性白血病、慢性淋巴性白血病、慢性骨髓性白血病、发状细胞性白血病、急性早幼粒细胞白血病、血浆细胞性白血病)；骨髓癌血液病症(包括骨髓分化不良症候群、骨髓增生性病症、再生障碍性贫血、范禾尼贫血、特发性巨球蛋白血症)；肺癌类(包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌)；淋巴癌类(包括霍奇金病、非霍奇金氏淋巴瘤、皮肤型T-细胞淋巴瘤、周围T-细胞林巴瘤、AIDS相关性淋巴瘤)、眼癌类(包括视网膜母细胞瘤、葡萄膜黑色素瘤)、皮肤癌类(包括黑色素瘤、非黑色素瘤皮肤癌、梅克尔细胞癌)、软组织肉瘤类(例如儿童软组织肉瘤、成人软组织肉瘤、卡波希肉瘤)、泌尿系统癌症(包括肾癌维尔姆斯肿瘤、膀肤癌、尿道癌和转移性细胞癌)。
在一些实施方案中，所述癌症选自黑色素瘤、肺癌、肉瘤、结肠癌、前列腺癌、绒毛膜癌、乳腺癌、视网膜母细胞瘤、胃癌、淋巴瘤、多发性骨髓瘤或白血病。
在一些实施方案中，所述癌症选自脂肪肉瘤、黑色素瘤、皮肤T-细胞淋巴瘤(CTCL)、周围T-细胞淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、多发性骨髓瘤和急性髓系白血病。
另一方面，本发明提供了如上所述的MDM2-HDAC双靶点抑制剂或所述MDM2-HDAC双靶点抑制剂的对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐在制备用于治疗MDM2抑制剂所适用的疾病或病况的药物中的用途。
另一方面，本发明提供了如上所述的MDM2-HDAC双靶点抑制剂或所述MDM2-HDAC双靶点抑制剂的对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐在制备用于治疗HDAC抑制剂所适用的疾病或病况的药物中的用途。
另一方面，本发明提供一种药用试剂盒，所述药用试剂盒包含如上所述的MDM2-HDAC双靶点抑制剂、所述MDM2-HDAC双靶点抑制剂的对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐。
在一个实施方案中，所述药用试剂盒包含经过包装的包含所述的MDM2-HDAC双靶点抑制剂、所述MDM2-HDAC双靶点抑制剂的对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐的组合物。
在一个实施方案中，所述药用试剂盒还包含可用于治疗关注的疾病或病况的第二治疗剂。在一些实施方案中，所述第二治疗剂包括抗癌剂或细胞凋亡调节剂。
在一个实施方案中，所述药用试剂盒还包含经过包装的包含可用于治疗关注的疾病或病况的第二治疗剂的组合物。
在一个实施方案中，所述药用试剂盒包含(a)容器；(b1)经过包装的包含本文所述MDM2-HDAC双靶点抑制剂的组合物；(b2)经过包装的包含可用于治疗关注的疾病或病况的第二治疗剂的组合物；以及(c)含有(b1)所述组合物和/或(b2)所述组合物的使用说明的包装插页。
另一方面，本发明提供一种保护哺乳动物的正常细胞(例如非过度增殖性细胞)免受化学治疗剂和放射治疗的毒性副作用的方法，所述方法包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的至少一种如上所述的MDM2-HDAC双靶点抑制剂，或其对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐。
本发明所使用的术语“未取代”是指无取代基或仅被氢取代。“取代”是指其中的一个氢或多个氢原子被取代，取代基选自本发明所使用的部分术语定义如下：
“卤素”是指氟、氯、溴和碘。
“烷基”当作一基团或一基团的部分时是指直链或者带有支链的脂肪烃基团。优先选择烷基为C1-C14(例如C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9、C10、C11、C12、C13或C14)的烷基，除非另有指明。
例如在一些实施方案中，烷基选自C1-C6烷基。直链或和带有支链的C1-C6烷基的实例包括，但不限于：甲基、乙基、正丙基、2-丙基、正丁基、异丁基、特丁基、己基等。
“烯基”作为一基团或一基团的一部分时是指至少含有一个碳-碳双键的脂肪烃基团，可为直链也可以带有支链。例如可以选择C2-C14(例如C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9、C10、C11、C12、C13或C14)的烯基，例如在一些实施方案中，选择C2-C12的烯基；另一些实施方案中，选择的是C2-C6的烯基。该基团可在其主链中含有一个或者多个双键且其构象可各自为E或Z。烯基基团的例子包括，但不限于：乙烯基、丙烯基等。
“链烯基”是指指至少含有一个碳-碳双键的直链烯基。其中，烯基见本文有关定义。在一些实施方案中，链烯基为C2-C12(例如C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9、C10、C11、C12、C13或C14)的链烯基。
“烷氧基”是指(烷基-O)-的基团。其中，烷基见本文有关定义。在一些实施方案中，烷氧基为C1-C6(例如C1、C2、C3、C4、C5或C6)的烷氧基。其实例包括，但不限于：甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基等。
“芳基”作为一基团或基团的一部分是指：(1)芳香性的单环或稠环，例如具有5-12个碳原子的芳香性碳环(环原子均为碳的环状构造)。芳基的实例包括，但不限于：苯基、萘基；(2)可以连接部分饱和的碳环，例如：苯基和C5-C7环烷基或C5-C7环烯基基团互相稠合而形成的环状结构；实例包括，但不限于：四氢萘基、茚基或氢茚基等。芳基基团可被一个或多个取代基取代。
“杂芳基”是指单环性或稠合的多环芳香杂环，含有一个或多个选自N，O、S的杂原子的5-7元芳香环。典型的杂芳基取代基包括但不限于：呋喃基、噻吩基、吡咯、吡唑、三唑、噻唑、吡啶、嘧啶、吡嗪、吲哚、苯并咪唑等。
本发明中式I所示化合物的可能的各种异构型式包括：非镜像异构体、镜像异构体、互变异构体和“E”或“Z”构型异构体的几何异构体等。任何具有一定基础的化学工作者均可以分离出上述光学纯或者立体异构纯的化合物。
在本发明中，C1-C7烷基指的是可以为C1、C2、C3、C4、C5、C6或C7烷基，C2-C6链烯基指的是C2、C3、C4、C5或C6链烯基，C1-C6烷氧基指的是可以为C1、C2、C3、C4、C5或C6烷氧基，以此类推。
本发明包括式I所示化合物及其可能的消旋体或/和镜像异构物/或/和非镜像异构物的混合物。
此外，式I所示化合物在应用上也涵盖该化合物的溶剂化及非溶剂化型式。因此，各式均包括具有所指明构造的化合物，包括其水合及无水合型式。
除了式I所示化合物外，不同具体实施方案的MDM2-HDAC抑制剂还包括：药学上可接受的盐，前药和该化合物的活性代谢物，以及这些代谢物的药学上可接受的盐。
术语“药学上可接受的盐”是指上述化合物能保持原有生物活性并且适合于医药用途的某些盐类。
式I所示化合物的药学上可接受的盐有两种形成形式：一种是与酸形成的盐；另一种是与碱或者碱金属形成的盐。与式I所示化合物形成药学上可接受的盐的酸包括无机酸和有机酸。合适的无机酸包括：盐酸、硫酸和磷酸。合适的有机酸包括脂肪族、环脂肪族、芳香性、杂环羧酸和磺酸类有机酸，其实例包括但不限于：甲酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、甘醇酸、葡萄糖酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、甘氨酸、精氨酸、柠檬酸、反丁烯二酸、烷基磺酸、芳级磺酸等。与式I所示化合物形成药学上可接受的盐的碱金属包括锂、钠、钾、镁、钙、铝、锌等；与式I所示化合物形成药学上可接受的盐的碱包括胆碱、二乙醇胺、吗啉等。
“前药”是一些式I所示化合物的衍生物借助于在体内代谢的方式将其于活体内转化(例如：藉由水解，还原或氧化)成式I所示化合物，这些衍生物就称为前药。例如，可以将式I所示的、含有羟基基团的化合物与酸反应制备成相应的酯，所述制成的酯即为前药，可以在活体内水解母体药物。适合来制备“前药”的酸包括但不限于：乙酸、柠檬酸、乳酸、酒石酸、丙二酸、草酸、水杨酸、琥珀酸、反丁烯二酸、顺丁烯二酸、亚甲基-双-β-羟基萘酸、龙胆酸、羟乙基磺酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸等。
相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
本发明的具有式I所示结构的抑制剂能够同时抑制MDM2和HDAC的活性，促进癌细胞凋亡、细胞生长抑制和周期停滞，具有双靶点抑制性，可以降低肿瘤细胞的凋亡阈值，并且可增加p53乙酰化水平，使p53稳定存在于细胞核，延长p53的半衰期，本发明的MDM2-HDAC双靶点抑制剂可保护正常细胞(例如非过度增殖性细胞)免遭某些化学治疗剂和放射的毒性作用，对癌症进行更加有效的治疗。
附图说明
图1为本发明代表性化合物26L对肿瘤细胞LNCaP的抑制活性；
图2为本发明代表性化合物26L对肿瘤细胞SJSA-1的抑制活性；
图3为本发明代表性化合物26L以及阳性对照药对肿瘤细胞DU-145的抑制活性；
图4为本发明代表性化合物26L对肿瘤细胞MV-4-11的抑制活性。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
本发明所述MDM2-HDAC双靶点抑制剂可以用下面的合成路线和合成方法来合成。所用原材料方便易得。但是，本发明所用的合成路线和合成方法，可以广泛应用于类似物的合成，只需要变换起始原材料即可。例如，在本文实例中没有详细描述的化合物的合成，只要把始原材料更换成相应目标化合物的起始原材料，依据现有参考文献来合成本发明所述化合物。
可用以合成本发明化合物的试剂可以方便获得或者可以根据此项技艺中已知的技术加以制备。
在下列实例中，除非另有指明，所有温度为摄氏度。
各种起始原料和试剂均来自市售。供应商包括但不限于：Aldrich ChemicalCompany、Lancaster Synthesis Ltd等等。市售原料和试剂均不经进一步纯化直接使用，除非另有指明。
玻璃器皿用烘箱干燥和/或加热干燥。反应用玻璃硅胶-60F254平板(0.25mm)(TLC)上进行跟踪。分析性薄层层析并以适当的溶剂比例(v/v)加以展开。以TLC上起始物质耗尽时为反应终点。
通常，后续处理是用反应所用的溶剂将反应液的体积增大一倍，然后用总体积的25％萃取溶剂来进行萃取三次，除非另有指明。将含产物萃取经无水硫酸钠脱水，再加以过滤，于旋转蒸发器上，于减压之下将溶剂蒸发并注意溶剂于真空中去除。最后，用快速柱层析分离得到目标化合物(J.Org.Chem.,1978，43：2923)。
1H NMR图谱是用Bruker仪器(400MHz或者500MHz)测定而得，化学位移用ppm表示。使用氯仿作为参照标准(7.25ppm)或四甲基硅烷内标准(0.00ppm)。视需要，也可以使用其它NMR常用的溶剂。1H NMR的表示方法：s＝单峰，d＝双重峰，t＝三重峰，m＝多重峰，br＝变宽的，dd＝双重峰的双重峰，dt＝三重峰的双重峰。若提供偶合常数时，其单位为Hz。
质谱是用LC/MS仪测定得到，离子化方式可为ESI或APCI。
下面的实例仅仅是用来说明所发明的具体化合物的合成方法。但在合成方法上并没有任何限制。在下面未列出的化合物，也可以用与下面同样的合成路线与合成方法，选择适当的起始原材料、在有必要的地方稍加适当的常识性的反应条件调整即可加以制备。
通式I中的化合物可通过合成路线一来合成。
合成路线一
Figure BDA0001753867430000121
具体地说，前体A和前体B在缩合剂1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDCI)和1-羟基苯并三唑(HOBT)以及三乙胺(TEA)的碱性条件下偶合可以生成关键中间体C，在经移除保护基团即可得到通式I所示化合物。
实施例1
Figure BDA0001753867430000122
将化合物1(62mmol)和化合物2(60mmol)溶于200ml甲醇，溶解充分后加入哌啶(12mmol)，70℃下回流。5小时后冷却至室温，搅拌过夜。反应完全后将悬浊液过滤，将所得固体用甲醇洗涤三次后烘干，得到黄色固体3。化合物3的数据：1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ7.76–7.72(m,1H),7.67(td,J＝2.8,5.5Hz,1H),7.64(s,1H),7.57–7.54(m,2H),7.39(d,J＝8.2Hz,1H),6.94(dd,J＝2.0,8.2Hz,1H),6.90(d,J＝1.9Hz,1H)；13C NMR(125MHz,DMSO)δ168.76,144.95,136.89,135.32,134.97,134.02,131.21,130.01,129.39,128.18,128.10,124.13,121.54,119.99,110.71；
Figure BDA0001753867430000123
化合物4(1eq)溶于超干甲苯后依次加入化合物5(1.1eq),6(1.2eq)，70℃条件下搅拌5h，反应完全后冷却至室温，过滤浓缩，硅胶柱层析(PE/EA＝3/1)得黄色固体7，不需纯化，直接用于下一步反应。
Figure BDA0001753867430000124
将化合物7(1eq)溶于甲醇后,缓慢滴加浓硫酸(0.5ml/mmol)，60℃条件下搅拌过夜。反应完全后用饱和碳酸氢钠溶液中和溶液至中性，萃取浓缩有机相，柱层析(PE/EA＝3:1)纯化得浅黄色固体8，直接用于下一步反应。
Figure BDA0001753867430000131
将化合物8(1eq)溶于乙腈后，缓慢加入硝酸铈铵(2.5eq)，常温下搅拌5分钟后加入与乙腈等量的水。反应30min后，滴加饱和碳酸氢钠中溶液至中性，萃取浓缩有机相，柱层析(PE/EA＝2:1)纯化得淡黄色固体9。
Figure BDA0001753867430000132
化合物9(1eq)溶于四氢呋喃后，向溶液中滴加饱和氢氧化锂(2.5eq)水溶液，室温下搅拌过夜(如反应不完全可升高温度至50℃)。滴加饱和碳酸氢钠中溶液至中性，萃取浓缩有机相，不需经进一步纯化即可用于下一步。
Figure BDA0001753867430000133
向圆底烧瓶中加入化合物14(1eq)和2mL DMF，充分溶解后依次加入EDCI(1.5eq)，HOBT(1.5eq)，三乙胺(3eq)，充分搅拌10分钟后加入化合物15(1.2eq),室温下反应过夜。反应结束后萃取后干燥浓缩，色谱分离(PE:EA＝2:1)后浓缩得到黄色油状液体16。ESI-MS(m/z)：331(M+Na+)(n＝1)；345(M+Na+)(n＝2)；359(M+Na+)(n＝3)；373(M+Na+)(n＝4)；387(M+Na+)(n＝5)。
Figure BDA0001753867430000134
向圆底烧瓶中加入化合物16(3mmol)和盐酸/二氧六环(10ml)后搅拌1h，旋转蒸发得到白色固体17。ESI-MS(m/z)：209(M+H+)(n＝1)；223(M+H+)(n＝2)；237(M+H+)(n＝3)；251(M+H+)(n＝4)；265(M+H+)(n＝5)。
Figure BDA0001753867430000135
向圆底烧瓶中加入化合物19(1eq)和2mL DMF，充分溶解后依次加入EDCI(1.5eq),HOBT(1.5eq),三乙胺(3eq)，充分搅拌10分钟后加入化合物20(1.2eq).室温下反应过夜。反应结束后萃取干燥浓缩，色谱分离浓缩得到白色固体。ESI-MS(m/z):428(M+H+),450(M+Na+)，877(2M+Na+)(n＝1)；442(M+H+),464(M+Na+)，905(2M+Na+)(n＝2)；456(M+H+),478(M+Na+),933(2M+Na+)(n＝3)；470(M+H+),492(M+Na+),961(2M+Na+)(n＝4)；484(M+H+),506(M+Na+),989(2M+Na+)(n＝5)。
Figure BDA0001753867430000141
向圆底烧瓶中加入化合物21和盐酸1，4-二氧六环后搅拌1h，旋转蒸发得到黄色固体。ESI-MS(m/z)：328(M+H+)(n＝1)；342(M+H+)(n＝2)；356(M+H+)(n＝3)；370(M+H+)(n＝4)；384(M+H+)(n＝5).
Figure BDA0001753867430000142
向圆底烧瓶中加入化合物10(1eq)和2mL DMF，充分溶解后依次加入EDCI(1.5eq),HOBT(1.5eq),三乙胺(3eq)，充分搅拌10分钟后加入化合物17(1.2eq).室温下反应过夜。反应结束后萃取干燥浓缩，色谱分离浓缩得到白色固体，直接用于下一步反应。
Figure BDA0001753867430000143
向圆底烧瓶中加入化合物25(1eq)和2mL乙酸乙酯，溶解后加入钯碳(0.03eq)，氢气置换三次，搅拌1h。反应结束后过滤除去钯碳，制备液相色谱分离浓缩得到白色固体26。
通过上述合成方法，可制备通式I中部分目标化合物，具体实施例及其结构数据如下：
化合物26A：
Figure BDA0001753867430000144
化合物26A：1H NMR(500MHz,Methanol-d4)δ7.63(d,J＝8.1Hz,1H),7.29(dd,J＝8.0,1.9Hz,1H),7.26–7.17(m,3H),7.06(d,J＝7.7Hz,1H),6.80(d,J＝1.7Hz,1H),5.24(d,J＝11.2Hz,1H),4.46(dd,J＝8.5,1.9Hz,1H),4.13(d,J＝11.3Hz,1H),3.21(t,J＝6.9Hz,2H),1.97(t,J＝7.4Hz,2H),1.71(pd,J＝6.9,3.4Hz,2H),1.23–1.14(m,2H),0.91(s,9H)；13C NMR(125MHz,Methanol-d4)δ176.26,170.72,166.53,143.80,135.52,134.27,132.98,129.91,128.84,127.96,126.91,124.78,122.61,110.60,63.50,62.69,61.51,55.68,41.89,38.95,29.47,29.43,28.01,24.67；ESI-MS(m/z):547(M+H)+.
化合物26B：
Figure BDA0001753867430000151
化合物26B:1H NMR(500MHz,Methanol-d4)δ7.51(d,J＝8.1Hz,1H),7.21–7.16(m,1H),7.15(t,J＝2.0Hz,1H),7.10(t,J＝7.9Hz,1H),7.07(dd,J＝8.1,1.9Hz,1H),6.95(dt,J＝7.7,1.3Hz,1H),6.68(d,J＝1.9Hz,1H),5.13(d,J＝11.3Hz,1H),4.35(dd,J＝8.3,2.1Hz,1H),3.99(d,J＝11.3Hz,1H),3.19–3.09(m,1H),3.03(dt,J＝14.5,5.8Hz,1H),1.90–1.83(m,2H),1.27(dq,J＝9.7,5.3Hz,4H),1.17–0.98(m,2H),0.79(s,9H)；13C NMR(125MHz,Methanol-d4)δ176.26,170.99,166.39,143.78,135.54,134.28,132.89,129.97,128.90,127.98,127.03,124.80,122.63,122.54,110.61,63.43,62.73,61.55,55.98,41.91,38.88,31.48,29.42,28.01,27.78,21.95；ESI-MS m/z 561(M+H)+.
化合物26C
Figure BDA0001753867430000152
化合物26C:1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.63(d,J＝8.1Hz,1H),7.31(dd,J＝7.8,1.9Hz,1H),7.27–7.16(m,3H),7.07(d,J＝7.8Hz,1H),6.80(d,J＝1.8Hz,1H),5.29(d,J＝11.4Hz,1H),4.48(dd,J＝8.2,2.0Hz,1H),4.11(d,J＝11.4Hz,1H),3.29(d,J＝6.8Hz,1H),3.06(dt,J＝13.3,6.5Hz,1H),2.04(t,J＝7.3Hz,2H),1.53–1.43(m,2H),1.35(ddd,J＝18.6,8.8,4.2Hz,3H),1.18(ddt,J＝12.5,10.4,4.7Hz,3H),1.05(d,J＝7.3Hz,2H),0.90(s,9H)；ESI-MS m/z 589(M+H)+.
化合物26D：
Figure BDA0001753867430000153
化合物26D:1H NMR(400MHz,Acetone-d6)δ7.73(d,J＝8.0Hz,1H),7.16(dd,J＝7.8,1.8Hz,1H),7.08(ddd,J＝14.4,8.2,4.4Hz,3H),6.98(d,J＝8.7Hz,1H),6.73(s,1H),5.63(d,J＝11.3Hz,1H),4.60(d,J＝8.1Hz,1H),4.30–4.16(m,1H),3.02(d,J＝7.2Hz,2H),2.00(t,2H),1.45(d,J＝13.9Hz,2H),1.31–1.20(m,2H),1.15–0.93(m,8H),0.78(s,9H)；ESI-MS m/z 603(M+H)+.
化合物26E：
Figure BDA0001753867430000161
化合物26E:1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.67–7.52(m,2H),7.39(t,J＝7.4Hz,1H),7.17(ddd,J＝2.1,7.8,10.1Hz,2H),6.81(d,J＝1.8Hz,1H),5.28(d,J＝10.4Hz,1H),4.64(dd,J＝6.9,11.3Hz,1H),4.53(d,J＝8.3Hz,1H),3.30–3.10(m,2H),2.04(d,J＝10.0Hz,1H),2.00–1.84(m,2H),1.69(dp,J＝7.2,14.8Hz,2H),1.47–1.31(m,1H),0.90(s,9H)；ESI-MS m/z 565(M+H)+.
化合物27F：
Figure BDA0001753867430000162
化合物27F:1H NMR(500MHz,Methanol-d4)δ7.65–7.55(m,2H),7.49–7.38(m,1H),7.24–7.12(m,2H),6.81(d,J＝1.8Hz,1H),5.23(d,J＝11.4Hz,1H),4.61(d,J＝11.4Hz,1H),4.51(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),3.09(dt,J＝13.5,6.7Hz,1H),2.13(dqd,J＝11.7,7.3,3.9Hz,2H),1.89(dd,J＝15.4,8.4Hz,1H),1.48(qd,J＝7.5,2.5Hz,2H),1.41–1.34(m,2H),1.09(q,J＝7.7Hz,2H),0.90(s,9H)；13C NMR(125MHz,Methanol-d4)δ177.45,176.28,166.46,156.29(d,JC-F＝249.9Hz),143.56,135.56,131.02,127.17,125.22,125.09(d,JC-F＝4.7Hz),122.55,122.02,120.97(d,JC-F＝18.9Hz),120.22(d,JC-F＝13.3Hz),110.50,63.07,62.95,61.54,41.95,39.09,34.71,29.44,28.21,28.03(3C),25.64,24.74；ESI-MSm/z 579(M+H)+.
化合物26G
Figure BDA0001753867430000163
化合物26G:1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.71–7.53(m,2H),7.42(t,J＝7.5Hz,1H),7.26–7.11(m,2H),6.81(s,1H),5.30(d,J＝11.3Hz,1H),4.63(d,J＝11.3Hz,1H),4.56(d,J＝7.9Hz,1H),3.04(dt,J＝13.3,6.5Hz,1H),2.11–2.00(m,2H),1.98–1.89(m,1H),1.48(q,J＝8.6,8.1Hz,2H),1.37–1.28(m,3H),1.18(td,J＝12.1,11.1,7.3Hz,3H),1.00(q,J＝7.3Hz,2H),0.89(s,9H)；13C NMR(100MHz,Methanol-d4)δ176.16,171.43,166.04,156.29(d,JC-F＝249.8Hz),143.59,135.61,131.08,127.18,125.24,125.11(d,JC-F＝4.75Hz),122.56,121.93,120.99(d,JC-F＝18.9Hz),120.00(d,JC-F＝12.9Hz),110.55,62.93,62.78,61.40,41.91,39.21,32.24,29.43,28.31,28.17,28.01(3C),25.72,25.07.ESI-MS m/z 607(M+H)+.
化合物26H：
Figure BDA0001753867430000171
化合物26H:1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.70–7.53(m,2H),7.49–7.39(m,1H),7.26–7.10(m,2H),6.85–6.76(m,1H),5.24(d,J＝11.4Hz,1H),4.61(d,J＝11.5Hz,1H),4.54(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),3.02(p,J＝6.3Hz,1H),2.06(q,J＝7.6Hz,2H),1.90(dd,J＝15.4,8.3Hz,1H),1.59–1.46(m,2H),1.33(hept,J＝6.9Hz,3H),1.27–1.08(m,6H),0.98(d,J＝7.4Hz,1H),0.90(s,9H)；ESI-MS m/z 621.44(M+H)+.
化合物26I：
Figure BDA0001753867430000172
化合物26I:1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.65(t,J＝7.4Hz,1H),7.50(dd,J＝2.5,8.2Hz,1H),7.40–7.31(m,1H),7.16(t,J＝8.0Hz,1H),7.09(dd,J＝1.9,8.2Hz,1H),6.78(d,J＝1.8Hz,1H),5.19(d,J＝11.0Hz,1H),4.81(d,J＝11.0Hz,1H),3.19(tt,J＝5.1,10.4Hz,2H),2.84(d,J＝10.3Hz,1H),2.20(dd,J＝3.2,14.0Hz,1H),1.95(tqd,J＝5.4,9.1,11.0,19.0Hz,5H),1.77(s,1H),1.71(ddd,J＝4.7,10.0,20.2Hz,3H),1.58–1.48(m,1H),1.27–1.13(m,2H)；13C NMR(100MHz,Methanol-d4)δ176.62,170.67,167.00,156.55(d,JC-F＝247.38Hz),143.92,135.69,131.01,128.23,127.54,125.17(d,JC-F＝4.84Hz),121.94,120.96(d,JC-F＝19.16Hz),120.89,120.40(d,JC-F＝12.26Hz),110.39,71.80,66.57,60.68,44.96(d,JC-F＝2.41Hz),39.09,30.62,29.98,29.42,24.68,23.95,21.69,20.30；ESI-MS m/z 563(M+H)+.
化合物26J：
Figure BDA0001753867430000173
化合物26J:1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.64(ddd,J＝1.5,6.2,8.0Hz,1H),7.49(dd,J＝2.4,8.3Hz,1H),7.42–7.31(m,1H),7.15(t,J＝8.0Hz,1H),7.09(dd,J＝1.9,8.2Hz,1H),6.77(d,J＝1.8Hz,1H),5.16(d,J＝11.1Hz,1H),4.79(d,J＝11.0Hz,1H),3.24(q,J＝6.0,6.7Hz,1H),3.09(dt,J＝4.9,12.4Hz,1H),2.84(dd,J＝8.0,11.3Hz,1H),2.23–2.15(m,1H),2.06–1.82(m,5H),1.82–1.69(m,2H),1.52(q,J＝13.9Hz,1H),1.41–1.32(m,4H),1.25–1.16(m,2H)；13C NMR(100MHz,Methanol-d4)δ176.64,170.96,166.91,156.57(d,JC-F＝247.63Hz),143.90,135.69,131.05,128.22,127.55,125.15(d,JC-F＝4.17Hz),121.95,120.95(d,JC-F＝18.84Hz),120.90,120.40(d,JC-F＝12.28Hz),110.38,71.85,66.51,60.73,45.13(d,JC-F＝3.13Hz),39.00,31.46,30.66,29.97,27.76,23.94,21.94,21.68,20.28；ESI-MS m/z 577(M+H)+.
化合物26K：
Figure BDA0001753867430000181
化合物26K:1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.68(t,J＝7.4Hz,1H),7.52(dd,J＝2.4,8.3Hz,1H),7.44–7.37(m,1H),7.19(t,J＝8.0Hz,1H),7.11(dd,J＝1.8,8.2Hz,1H),6.80(d,J＝1.9Hz,1H),5.20(d,J＝11.1Hz,1H),4.81(d,J＝11.2Hz,1H),3.28(t,J＝6.7Hz,1H),3.09(dt,J＝6.7,13.5Hz,1H),2.92–2.82(m,1H),2.26–2.16(m,1H),2.06–1.88(m,4H),1.84–1.70(m,2H),1.53(ddh,J＝6.6,7.3,13.2,20.3Hz,3H),1.44–1.33(m,3H),1.27–1.17(m,2H),1.09(p,J＝7.7Hz,2H)；13C NMR(100MHz,Methanol-d4)δ176.63,171.32,166.86,156.57(d,JC-F＝247.54Hz),143.91,135.69,131.03,128.17,127.59,125.18(d,JC-F＝4.17Hz),121.96,120.91,120.73,120.45(d,JC-F＝12.23Hz),110.40,71.84,66.49,60.74,45.15,39.12,32.03,30.70,29.98,28.08,25.45,24.61,23.95,21.68,20.29；ESI-MS m/z 591(M+H)+.
化合物26L：
Figure BDA0001753867430000182
化合物26L:1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.67(ddd,J＝1.5,6.2,7.8Hz,1H),7.49(dd,J＝2.4,8.2Hz,1H),7.42–7.33(m,1H),7.17(t,J＝8.0Hz,1H),7.09(dd,J＝1.8,8.2Hz,1H),6.79(d,J＝1.8Hz,1H),5.19(d,J＝11.1Hz,1H),4.79(d,J＝11.1Hz,1H),3.35(dt,J＝5.2,12.3Hz,1H),3.00(dt,J＝6.5,13.3Hz,1H),2.84(d,J＝10.2Hz,1H),2.25–2.16(m,1H),2.03(t,J＝7.4Hz,2H),1.92(td,J＝4.8,14.3Hz,3H),1.75(d,J＝13.0Hz,2H),1.49(td,J＝9.5,15.1,16.8Hz,3H),1.34(dt,J＝7.0,15.5Hz,2H),1.18(tdd,J＝5.5,9.4,13.2Hz,4H),0.99(p,J＝7.7Hz,2H)；13C NMR(100MHz,Methanol-d4)δ176.60,171.49,166.86,156.58(d,JC-F＝247.63Hz),143.92,135.69,131.05,128.17,127.61,125.22(d,JC-F＝4.57Hz),121.95,120.94(d,JC-F＝19.05Hz),120.90,120.45(d,JC-F＝12.32Hz),110.43,71.85,66.47,60.74,45.19(d,JC-F＝2.98Hz),39.31,32.27,30.71,29.97,28.33,28.21,25.73,25.12,23.95,21.69,20.29；ESI-MS m/z 605(M+H)+.
化合物26M：
Figure BDA0001753867430000183
化合物26M:1H NMR(500MHz,Methanol-d4)δ7.70(ddd,J＝1.6,6.2,7.9Hz,1H),7.52(dd,J＝2.0,7.5Hz,1H),7.39(td,J＝1.6,7.2,7.7Hz,1H),7.27(td,J＝1.1,7.8Hz,1H),7.21–7.16(m,1H),7.12(td,J＝1.0,7.6Hz,1H),6.78(d,J＝7.6Hz,1H),5.15(d,J＝11.1Hz,1H),4.82(d,J＝11.1Hz,1H),3.41(dd,J＝6.8,13.4Hz,1H),3.00(dt,J＝6.5,13.2Hz,1H),2.90–2.79(m,1H),2.26–2.18(m,1H),2.07(t,J＝7.5Hz,2H),1.97(dd,J＝10.9,17.8Hz,3H),1.78(d,J＝12.9Hz,2H),1.61–1.50(m,3H),1.38–1.30(m,2H),1.26–1.14(m,6H),0.99(q,J＝7.3Hz,2H)；13C NMR(125MHz,Methanol-d4)δ176.82,171.54,167.22,156.41(d,JC-F＝249.28Hz),142.49,130.86,129.88,127.55,126.89,125.05(d,JC-F＝4.74Hz),122.36,122.11,120.84,120.69,109.98,71.82,66.82,60.97,45.29(d,JC-F＝3.21Hz),39.26,32.31,30.74,30.02,28.53,28.46,28.43,25.84,25.21,24.03,21.73,20.34；ESI-MS m/z 585(M+H)+.
化合物27A：
Figure BDA0001753867430000191
化合物27A：1H NMR(500MHz,Methanol-d4)δ7.85–7.78(m,2H),7.73(ddd,J＝1.6,6.2,8.0Hz,1H),7.69–7.62(m,2H),7.55(dd,J＝2.5,8.2Hz,1H),7.38(td,J＝1.5,7.1,7.7Hz,1H),7.24–7.16(m,1H),7.13(dd,J＝2.0,8.2Hz,1H),6.81(d,J＝1.9Hz,1H),5.30(d,J＝10.8Hz,1H),4.98(d,J＝10.8Hz,1H),3.40(t,J＝6.9Hz,2H),2.87(s,1H),2.19(q,J＝7.5Hz,3H),2.03–1.87(m,5H),1.78(dd,J＝7.0,13.2Hz,2H),1.57(dtd,J＝3.9,10.6,14.0Hz,1H),1.30–1.19(m,2H)；13C NMR(125MHz,Methanol-d4)δ176.86,170.98,168.01,166.40,156.29(d,JC-F＝249.43Hz),143.90,140.15,135.58,130.93,130.57,128.22,127.94(2C),127.58,125.05(d,JC-F＝4.93Hz),121.92,121.17,120.94,120.78,119.34(2C),110.35,71.76,66.88,61.40,45.31(d,JC-F＝2.77Hz),39.04,30.78,30.19,25.20,24.10,21.82,20.47；ESI-MS m/z 682(M+H)+.
化合物27B：
Figure BDA0001753867430000192
化合物27B:1H NMR(500MHz,Methanol-d4)δ7.80(d,J＝8.2Hz,2H),7.74(t,J＝7.2Hz,1H),7.65(d,J＝8.4Hz,2H),7.55(dd,J＝2.3,8.2Hz,1H),7.36(t,J＝7.5Hz,1H),7.19(t,J＝8.0Hz,1H),7.12(d,J＝8.3Hz,1H),6.82(s,1H),5.40(d,J＝10.7Hz,1H),4.99(d,J＝10.8Hz,1H),3.38(t,J＝6.6Hz,2H),2.92(d,J＝9.8Hz,1H),2.22(d,J＝14.0Hz,1H),2.16(t,J＝7.1Hz,2H),1.95(dt,J＝12.9,23.3Hz,3H),1.78(d,J＝12.8Hz,2H),1.72–1.61(m,4H),1.60–1.50(m,1H),1.23(ddd,J＝5.4,12.3,19.9Hz,2H)；13C NMR(125MHz,Methanol-d4)δ176.81,171.34,167.93,166.21,156.29(d,JC-F＝249.61Hz),143.92,140.10,135.62,130.97,130.72,128.24(d,JC-F＝2.93Hz),127.90(2C),127.58,125.05(d,JC-F＝4.81Hz),121.94,121.10,120.95,120.80,119.33(2C),110.36,71.82,66.80,61.33,45.28,39.09,31.92,30.75,30.15,28.46,24.08,22.72,21.81,20.43；ESI-MS m/z 696(M+H)+.
化合物27C：
Figure BDA0001753867430000201
化合物27C:1H NMR(500MHz,Methanol-d4)δ7.80(d,J＝8.3Hz,2H),7.74(t,J＝7.2Hz,1H),7.65(d,J＝8.3Hz,2H),7.55(dd,J＝2.5,8.3Hz,1H),7.38(t,J＝7.6Hz,1H),7.20(t,J＝7.9Hz,1H),7.13(dd,J＝1.8,8.3Hz,1H),6.82(d,J＝1.8Hz,1H),5.36(d,J＝10.5Hz,1H),4.99(d,J＝10.8Hz,1H),3.37(t,J＝7.1Hz,2H),2.97–2.86(m,1H),2.25–2.17(m,1H),2.12(t,J＝7.4Hz,2H),2.03–1.91(m,3H),1.79(d,J＝13.1Hz,2H),1.65(dq,J＝7.4,7.8,22.5Hz,4H),1.56(d,J＝13.7Hz,1H),1.42(dp,J＝5.3,7.0,9.8Hz,2H),1.29–1.21(m,2H)；13C NMR(125MHz,Methanol-d4)δ176.87,171.49,167.89,166.37,156.30(d,JC-F＝249.38Hz),143.90,140.05,135.62,130.98,130.80,128.26,127.90(2C),127.52,125.04,121.94,121.13,120.98,120.83,119.30(2C),110.33,71.80,66.85,61.38,45.33,39.40,32.26,30.74,30.16,28.73,26.08,25.03,24.08,21.82,20.44；ESI-MS m/z 710(M+H)+.
化合物27D：
Figure BDA0001753867430000202
化合物27D:1H NMR(500MHz,Methanol-d4)δ7.79(d,J＝8.4Hz,2H),7.74(t,J＝7.1Hz,1H),7.65(d,J＝8.5Hz,2H),7.55(dd,J＝2.5,8.2Hz,1H),7.36(t,J＝7.5Hz,1H),7.19(t,J＝8.0Hz,1H),7.12(dd,J＝1.9,8.2Hz,1H),6.81(d,J＝1.9Hz,1H),5.40(d,J＝10.8Hz,1H),4.99(d,J＝10.9Hz,1H),3.35(d,J＝7.1Hz,2H),2.94(d,J＝9.4Hz,1H),2.23(dt,J＝3.4,14.7Hz,1H),2.11(t,J＝7.4Hz,2H),2.04–1.91(m,3H),1.79(d,J＝13.1Hz,2H),1.70–1.49(m,5H),1.39(qp,J＝4.2,5.1,7.4Hz,4H),1.23(dt,J＝6.1,15.4Hz,2H)；13CNMR(125MHz,Methanol-d4)δ176.78,171.61,171.58,167.87,166.11,157.29(d,JC-F＝249.58Hz),143.94,140.07,135.64,130.99,130.81,128.26,128.23,127.88,127.57,125.07,125.04,121.94,121.05,120.96,120.81,119.34,110.37,71.85,66.76,61.31,45.25(d,JC-F＝3.16Hz),39.54,32.30,30.72,30.13,28.93,28.40,26.31,25.27,24.06,21.80,20.41；ESI-MS m/z 724(M+H)+.
化合物27E：
Figure BDA0001753867430000203
化合物27E:1H NMR(500MHz,Methanol-d4)δ7.71–7.65(m,2H),7.61(ddd,J＝1.6,6.3,8.0Hz,1H),7.57–7.50(m,2H),7.43(dd,J＝2.5,8.2Hz,1H),7.30–7.22(m,1H),7.07(t,J＝8.0Hz,1H),7.01(dd,J＝2.0,8.2Hz,1H),6.69(d,J＝2.0Hz,1H),5.14(s,1H),4.85(d,J＝10.7Hz,1H),3.26–3.23(m,2H),2.68(d,J＝38.0Hz,1H),2.04(t,J＝8.0Hz,1H),1.98(t,J＝7.4Hz,2H),1.90–1.73(m,3H),1.66(t,J＝13.2Hz,2H),1.56–1.43(m,5H),1.33–1.21(m,6H),1.12(d,J＝13.3Hz,2H)；ESI-MS m/z 738(M+H)+.
另外，参考实施例1的方法，只要适当选择起始原材料，还可以合成出更加广泛的各种各样的衍生物，如表1所列的化合物就是其中的一些例子。
表1.本发明代表性化合物
Figure BDA0001753867430000211
实施例2
Figure BDA0001753867430000221
将化合物28(30mmol)和化合物29(29mmol)充分溶于150ml甲醇后，缓慢滴加甲醇钠的甲醇溶液(25wt％，10mL，44mmol)。50℃加热搅拌3小时。混合物变浑浊，冷却至室温后过滤。用水和冰甲醇洗涤三次后，滤饼真空干燥，得6.4g白色固体化合物30。1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ7.88–7.79(m,2H),7.66–7.59(m,2H),7.49–7.42(m,5H).
Figure BDA0001753867430000222
将化合物31(2.71g，20.0mmol)和化合物32(21.0mmol)溶于50ml二氯甲烷溶液中，室温下搅拌过夜。反应完成后，真空下浓缩反应液，得到4.4g化合物33，不经进一步纯化即可用于下一步。ESI-MS(m/z):427(2M+H)+
Figure BDA0001753867430000223
将化合物30(7.3mmol)和化合物33(7.3mmol)溶于100ml二氯甲烷中，向溶液中依次加入三乙胺(1.7g，12mmol)和AgF(0.9g，7.3mmol)。室温下搅拌18小时后，加入饱和氯化铵溶液淬灭，用CH2Cl2萃取，有机相用Na2SO4干燥并浓缩。通过柱层析纯化得到化合物34(3.66g)。ESI-MS(m/z):487(M+H+)
Figure BDA0001753867430000224
将3.66g化合物34溶于四氢呋喃(40ml)和乙醇(20ml)的混合溶液后，加入NaOH水溶液(2.5eq),室温下搅拌24小时后用HCl(1M)水溶液淬灭。浓缩掉有机溶剂后过滤，将产物用水洗三次，得到橙黄色固体。将少量异丙醇缓慢滴加到橙黄色固体中，搅拌加热至100摄氏度，趁热过滤，重复上述步骤三次，得白色滤饼即化合物35。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.53–7.45(m,4H),7.35–7.26(m,2H),7.22(d,J＝1.9Hz,1H),7.03(d,J＝7.3Hz,1H),4.35(d,J＝8.8Hz,1H),4.05(d,J＝8.8Hz,1H),3.73(d,J＝9.1Hz,1H),1.47(dd,J＝14.1,9.3Hz,1H),1.18(d,J＝14.0Hz,1H),0.82(s,9H)；ESI-MS(m/z):431(M+H+).
Figure BDA0001753867430000231
向圆底烧瓶中加入化合物35(1.0eq)和2mL DMF，充分溶解后依次加入EDCI(1.5eq),HOBT(1.5eq),三乙胺(3.0eq)，充分搅拌10分钟后加入化合物17(1.2eq).室温下反应过夜。反应结束后萃取干燥浓缩，色谱分离浓缩得到白色固体36，ESI-MS(m/z):621(M+H+)；
向圆底烧瓶中加入化合物36(1eq)和2mL乙酸乙酯，溶解后加入钯碳(0.03eq)，氢气置换三次，搅拌1h。反应结束后过滤除去钯碳，制备液相色谱分离浓缩得到白色固体37A。1H NMR(500MHz,Methanol-d4)δ7.55–7.47(m,4H),7.33(dt,J＝8.5,1.2Hz,1H),7.31–7.24(m,2H),7.13(dt,J＝7.8,1.4Hz,1H),4.68(d,J＝10.4Hz,1H),4.21(d,J＝9.0Hz,1H),4.11(d,J＝10.5Hz,1H),3.31–3.19(m,2H),2.08–2.01(m,2H),1.84(dd,J＝15.0,9.1Hz,1H),1.83–1.73(m,2H),1.52(dd,J＝15.1,1.5Hz,1H),0.93(s,9H)；13C NMR(125MHz,Methanol-d4)δ170.82,169.29,135.12,134.70,134.11,130.35,129.76,129.29(2C),128.64,128.42,128.36(2C),127.02,116.71,65.59,63.01,62.81,58.72,43.56,38.74,29.67,29.63,28.44(3C),24.80；ESI-MS m/z 531(M+H)+.
Figure BDA0001753867430000232
化合物37B可通过化合物37A的合成策略来合成。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.56–7.44(m,4H),7.32(ddd,J＝7.9,2.2,1.1Hz,1H),7.30–7.21(m,2H),7.12(dt,J＝7.7,1.4Hz,1H),4.80(d,J＝10.9Hz,1H),4.39–4.32(m,1H),4.14(d,J＝10.8Hz,1H),3.27–3.11(m,2H),2.05–1.92(m,3H),1.54(dd,J＝15.3,1.6Hz,1H),1.47–1.38(m,4H),0.89(s,9H)；13C NMR(100MHz,Methanol-d4)δ171.05,167.23,135.44,134.26,133.51,129.97,129.71,129.47(2C),129.02,128.46,128.36(2C),127.09,116.15,65.39,62.55,62.21,56.95,43.10,38.83,31.57,29.63,28.25(3C),27.88,22.09；ESI-MS m/z 545(M+H)+.
Figure BDA0001753867430000233
化合物37C可通过化合物37A的合成策略来合成。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.54(qd,J＝7.5,6.2,2.2Hz,4H),7.37(d,J＝8.7Hz,1H),7.35–7.25(m,2H),7.17(d,J＝7.7Hz,1H),4.91–4.81(m,1H),4.43(t,J＝8.1Hz,1H),4.18(dt,J＝11.2,3.0Hz,1H),3.27(dt,J＝13.6,6.9Hz,1H),3.14(dt,J＝13.9,6.9Hz,1H),2.03(q,J＝6.2,5.0Hz,3H),1.58(d,J＝14.9Hz,1H),1.52(q,J＝7.6Hz,2H),1.42(t,J＝7.5Hz,2H),1.19–1.10(m,2H),0.92(s,9H)；13C NMR(125MHz,Methanol-d4)δ171.38,166.93,135.49,134.28,133.33,130.01,129.59,129.49(2C),129.08,128.51,128.36(2C),127.06,116.11,65.36,62.53,62.13,58.14,43.12,39.03,32.06,29.62,28.22(3C),28.15,25.55,24.70；ESI-MS m/z 559(M+H)+.
Figure BDA0001753867430000241
化合物37D可通过化合物37A的合成策略来合成。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.58–7.47(m,4H),7.36(dd,J＝7.8,1.9Hz,1H),7.34–7.25(m,2H),7.15(d,J＝7.6Hz,1H),4.78(d,J＝12.9Hz,1H),4.34(d,J＝11.7Hz,1H),4.14(ddd,J＝10.5,6.2,3.1Hz,1H),3.34–3.24(m,1H),3.18–3.08(m,1H),2.06(t,J＝7.3Hz,2H),1.98(s,1H),1.60–1.49(m,3H),1.46–1.37(m,2H),1.33–1.19(m,2H),1.14(d,J＝8.0Hz,2H),0.92(s,9H)；13C NMR(125MHz,Methanol-d4)δ171.51,167.61,135.36,134.23,133.76,129.94,129.90,129.43(2C),128.96,128.48,128.33(2C),127.05,116.30,65.47,62.68,62.38,58.43,43.27,39.12,32.26,29.63,28.40,28.29(3C),28.20,25.88,25.12；ESI-MS m/z 573(M+H)+.
Figure BDA0001753867430000242
化合物37E可通过化合物37A的合成策略来合成。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.53(d,J＝3.0Hz,4H),7.39–7.34(m,1H),7.32(d,J＝7.8Hz,1H),7.29–7.25(m,1H),7.16(d,J＝7.6Hz,1H),4.86–4.76(m,1H),4.39(d,J＝10.7Hz,1H),4.15(ddd,J＝11.7,5.0,2.6Hz,1H),3.30(dd,J＝12.1,5.4Hz,1H),3.10(ddd,J＝15.2,7.7,5.6Hz,1H),2.08(t,J＝7.4Hz,2H),2.05–1.93(m,1H),1.62–1.51(m,3H),1.39(q,J＝7.5Hz,2H),1.28–1.16(m,4H),1.15–1.02(m,2H),0.92(s,9H)；13C NMR(125MHz,Methanol-d4)δ171.56,167.19,135.44,134.26,133.49,129.98,129.73,129.46,129.05,128.50,128.33,127.02,116.19,65.44,62.63,62.25,58.34,43.20,39.18,32.28,29.63,28.52,28.41,28.24,25.95,25.14；ESI-MS m/z 587(M+H)+.
Figure BDA0001753867430000243
化合物38A可通过化合物37A的合成策略来合成。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.84(d,J＝8.5Hz,2H),7.68(d,J＝8.5Hz,2H),7.55–7.42(m,4H),7.36–7.21(m,3H),7.15(d,J＝7.5Hz,1H),4.76(d,J＝9.7Hz,1H),4.20(d,J＝9.7Hz,1H),4.08(d,J＝9.1Hz,1H),3.41(t,J＝6.9Hz,2H),2.20(t,J＝7.3Hz,2H),1.92(p,J＝7.1Hz,2H),1.77(dd,J＝14.8,9.2Hz,1H),1.48(d,J＝14.6Hz,1H),0.97(s,9H)；ESI-MS m/z 650(M+H)+；HRMS-ESI(m/z):[M+H]+ calcd for C34H38O4N5Cl2,650.2295；found,650.2277。
化合物38B可通过化合物37A的合成策略来合成。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.35(s,1H),10.16(s,1H),8.67(br,1H),8.38(t,J＝5.7Hz,1H),7.83(d,J＝8.3Hz,2H),7.65(d,J＝8.3Hz,2H),7.52(d,J＝2.1Hz,4H),7.36–7.24(m,3H),7.00(d,J＝7.5Hz,1H),4.55(d,J＝9.0Hz,1H),4.14(d,J＝9.0Hz,1H),3.85(d,J＝9.2Hz,1H),3.22(d,J＝6.1Hz,2H),1.97(t,J＝7.0Hz,2H),1.51(p,J＝7.5,6.7Hz,6H),0.86(s,9H)；13C NMR(125MHz,Methanol-d4)δ171.40,168.02,140.49,134.58,133.88,131.55,130.01,129.51,129.07,128.35,128.30,128.06,127.93,126.97,118.81,117.58,65.97,64.54,63.79,59.81,53.41,44.00,39.06,31.86,29.72,28.82,28.49,22.69；ESI-MS m/z 664(M+H)+；HRMS-ESI(m/z):[M+H]+ calcd for C35H40O4N5Cl2,664.2452；found,664.2437.
化合物38C可通过化合物37A的合成策略来合成。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.75–7.67(m,2H),7.62–7.53(m,2H),7.42–7.28(m,4H),7.21–7.08(m,3H),7.02–6.97(m,1H),4.51(d,J＝9.3Hz,1H),3.98(d,J＝9.0Hz,1H),3.74(d,J＝9.2Hz,1H),3.27(q,J＝6.7Hz,2H),2.16–2.08(m,2H),1.53(dd,J＝8.4,16.0Hz,4H),1.35–1.29(m,2H),1.24(d,J＝8.5Hz,2H),0.86(s,9H)；ESI-MS m/z 678(M+H)+；HRMS-ESI(m/z):[M+H]+ calcd forC36H42O4N5Cl2,678.2608；found,678.2595.
化合物38D可通过化合物37A的合成策略来合成。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.89–7.76(m,2H),7.68(d,J＝8.3Hz,2H),7.57–7.43(m,4H),7.29(q,J＝7.9Hz,3H),7.14(d,J＝7.6Hz,1H),4.73(d,J＝7.9Hz,1H),4.21–4.15(m,1H),4.02(d,J＝9.1Hz,1H),3.39(t,J＝7.2Hz,2H),2.14(t,J＝7.5Hz,2H),1.76–1.61(m,6H),1.43(d,J＝7.6Hz,4H),0.97(d,J＝2.0Hz,9H)；ESI-MS m/z 692(M+H)+；HRMS-ESI(m/z):[M+H]+ calcd forC37H44O4N5Cl2,692.2765；found,692.2762.
化合物38E可通过化合物37A的合成策略来合成。1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ7.87–7.77(m,2H),7.72–7.63(m,2H),7.57–7.43(m,4H),7.31(q,J＝7.3,8.5Hz,3H),7.15(d,J＝7.7Hz,1H),4.77(d,J＝9.8Hz,1H),4.21(d,J＝9.8Hz,1H),4.12–4.07(m,1H),3.40–3.35(m,2H),2.10(t,J＝7.6Hz,2H),1.78(t,J＝12.4Hz,1H),1.63(t,J＝7.4Hz,4H),1.39(s,7H),0.97(s,9H)；ESI-MS m/z 706(M+H)+；HRMS-ESI(m/z):[M+H]+ calcd forC38H46O4N5Cl2,706.2921；found,706.2921.
实施例3
Figure BDA0001753867430000251
将化合物39(100mg,0.536mmol)与化合物40(230mg,1.072mmol)溶解于3mL甲苯中，依次加入醋酸钯(2.4mg,0.01072mmol)和叔丁醇钾(138mg,1.233mmol),过夜回流反应。充分冷却后向体系内加入6mL石油醚后过滤，分别用石油醚和甲苯进行淋洗后浓缩，粗略柱层析纯化后加入盐酸1，4-二氧六环溶液搅拌1h，浓缩得到白色固体即化合物42。ESI-MS m/z 265(M+H)+.
Figure BDA0001753867430000252
向25mL圆底烧瓶中化合物35(70mg,0.16mmol)和2mL DCM，充分溶解后依次加入HATU(93mg,0.24mmol)，DIEA(0.48mmol)，充分搅拌10分钟后加入化合物42(0.19mmol)，室温下反应过夜。反应结束后萃取干燥浓缩，柱层析纯化后浓缩得到白色固体43。ESI-MS m/z677(M+H)+.
Figure BDA0001753867430000261
在25mL圆底烧瓶中将化合物43(1.0eq)溶解于THF/H2O混合物中后加入LiOH水合物(2.5eq)，搅拌过夜，经TLC鉴定反应完全后加入1M盐酸酸化后萃取干燥，旋转蒸发得到白色固体44，不需经过纯化即可用于下一步反应。
Figure BDA0001753867430000262
向25mL圆底烧瓶中加入化合物44(1eq)和2mL DCM，充分溶解后依次加入HATU(1.5eq)，DIEA(3eq)，充分搅拌10分钟后加入化合物45(1.2eq).室温下反应过夜。反应结束后萃取后干燥浓缩得化合物46，ESI-MS m/z 748(M+H)+。再加入2ml盐酸1，4-二氧六环后搅拌1h，浓缩后使用制备高效液相纯化得到白色固体即化合物47。1H NMR(500MHz,Methanol-d4)δ8.65(s,2H),7.54(q,J＝8.5Hz,4H),7.32(d,J＝1.8Hz,1H),7.32–7.22(m,2H),7.15(d,J＝7.2Hz,1H),4.87(d,J＝11.3Hz,1H),4.78–4.67(m,2H),4.48–4.42(m,1H),4.17(d,J＝11.3Hz,1H),3.38(dd,J＝6.3,13.5Hz,1H),2.92(dd,J＝6.4,13.5Hz,1H),2.78(dd,J＝2.7,13.3Hz,1H),2.73(dd,J＝2.7,13.3Hz,1H),2.04(dd,J＝8.9,15.4Hz,1H),1.63(ddd,J＝5.0,13.1,24.3Hz,2H),1.50–1.43(m,1H),1.44–1.36(m,1H),0.96(dd,J＝10.9,15.1Hz,1H),0.92(s,9H),0.86(dd,J＝4.1,12.4Hz,1H)；13C NMR(125MHz,Methanol-d4)δ166.53,164.20,161.42,157.02,135.60,134.41,132.83,130.05,129.54,129.33,129.19,128.57,128.32,127.20,115.98,113.52,65.41,62.67,61.79,58.20,44.40,43.40,43.15,36.25,29.63,28.96,28.94,28.12；ESI-MS m/z 664(M+H)+.
实施例4
Figure BDA0001753867430000263
向25mL圆底烧瓶中加入化合物35(1eq)和2mL DCM，充分溶解后依次加入HATU(1.5eq)，DIEA(3eq)，充分搅拌10分钟后加入化合物48(1.2eq)，室温下反应过夜。反应结束后萃取后干燥浓缩，硅胶柱纯化得到产物49。
Figure BDA0001753867430000271
在25mL圆底烧瓶中将化合物49溶解于THF/H2O混合物中后加入LiOH水合物(2.5eq)，搅拌过夜，加入1M盐酸酸化后萃取干燥，旋转蒸发浓缩得到化合物50。
Figure BDA0001753867430000272
向25mL圆底烧瓶中加入化合物50(1eq)和2mL DCM，充分溶解后依次加入HATU(1.5eq)，DIEA(3eq)，充分搅拌10分钟后加入化合物45(1.2eq)，室温下反应过夜。反应结束后萃取后干燥浓缩，柱色谱纯化得到白色固体51。再加入盐酸1，4-二氧六环搅拌1h，浓缩得到白色固体52。1H NMR(500MHz,Methanol-d4)δ7.63(d,J＝7.9Hz,2H),7.58–7.44(m,7H),7.35–7.23(m,3H),7.15(d,J＝7.5Hz,1H),6.42(d,J＝15.7Hz,1H),4.77(d,J＝9.7Hz,1H),4.25–4.15(m,1H),4.09(d,J＝9.0Hz,1H),1.77(dt,J＝9.0,12.4Hz,1H),1.52–1.46(m,1H),0.96(s,9H)；13C NMR(125MHz,Methanol-d4)δ169.41,165.00,139.45,138.79,135.94,134.82,133.99,131.18,131.04,129.63,129.18,128.38,128.32,128.24,126.99,119.59,117.23,116.21,65.87,63.99,63.59,59.46,43.75,29.69,28.69；ESI-MS m/z 591(M+H)+.
实施例5
Figure BDA0001753867430000273
在氮气保护下，将化合物46(500mg)、47(165mg)及P(o-tolyl)3)(63mg)、Pd(OAc)2(40mg)、DIEA(0.65ml)加入乙腈中室温搅拌2h，反应完全后加入100mL水，用乙酸乙酯萃取(100mL*3)，分别用100mL水，100mL盐水，洗涤有机层后用无水硫酸钠干燥。旋蒸浓缩后柱色谱纯化分离产物后(PE:EA＝3:1)，加入盐酸1，4-二氧六环搅拌30min，浓缩得化合物49。ESI-MS m/z 192(M+H)+.
Figure BDA0001753867430000281
向25mL圆底烧瓶中加入化合物9(1eq)和2mL DCM，充分溶解后依次加入HATU(1.5eq)，DIEA(3eq)，充分搅拌10分钟后加入化合物49(1.2eq)，室温下反应过夜。反应结束后萃取后干燥浓缩，柱色谱纯化得到产物50。
Figure BDA0001753867430000282
在25mL圆底烧瓶中将化合物43(1eq)溶解于THF/H2O混合物中后加入LiOH水合物(2.5eq)，搅拌过夜，加入1M盐酸酸化后萃取干燥，旋转蒸发浓缩得到化合物51。
Figure BDA0001753867430000283
向25mL圆底烧瓶中加入化合物51(1eq)和2mL DCM，充分溶解后依次加入HATU(1.5eq)，DIEA(3eq)，充分搅拌10分钟后加入化合物39(1.2eq)，室温下反应过夜。反应结束后萃取后干燥浓缩，柱色谱纯化得到白色固体52。再加入盐酸1，4-二氧六环搅拌1h，浓缩得到化合物53。1H NMR(500MHz,Methanol-d4)δ7.55(d,J＝15.8Hz,1H),7.48(d,J＝5.6Hz,6H),7.37–7.31(m,1H),7.31–7.23(m,2H),7.15(t,J＝7.9Hz,3H),6.50–6.42(m,1H),4.65(s,1H),4.51(d,J＝15.3Hz,1H),4.34(d,J＝15.4Hz,1H),4.10–4.01(m,2H),1.75(dd,J＝7.5,14.0Hz,1H),1.46(d,J＝14.7Hz,1H),0.90(s,9H)；ESI-MS m/z 605(M+H)+；HRMS-ESI(m/z):[M+H]+ calcd for C33H35O3N4Cl2,605.2081；found,605.2077.
Figure BDA0001753867430000284
在氮气保护下，将化合物54(1eq)、55(1.1eq)及Pd(AcO)2(0.3eq)、t-BuOK(2eq)加入甲苯中室温搅拌2h，反应完全后加入100mL水，用乙酸乙酯萃取(100mL*3)，分别用100mL水，100mL盐水，洗涤有机层后用无水硫酸钠干燥。向化合物56中加入盐酸1，4-二氧六环后搅拌1h，旋转蒸发得到白色固体57。
Figure BDA0001753867430000291
向25mL圆底烧瓶中加入化合物9(1eq)和2mL DCM，充分溶解后依次加入HATU(1.5eq)，DIEA(3eq)，充分搅拌10分钟后加入化合物57(1.2eq)，室温下反应过夜。反应结束后萃取后干燥浓缩，柱色谱纯化得到化合物58。
Figure BDA0001753867430000292
在25mL圆底烧瓶中将化合物58(1eq)溶解于THF/H2O混合物中后加入NaOH(2.5eq)，搅拌过夜，加入1M盐酸酸化后萃取干燥，旋转蒸发得到白色固体59。
Figure BDA0001753867430000293
向25mL圆底烧瓶中加入化合物59(1eq)和2mL DCM，充分溶解后依次加入HATU(1.5eq)，DIEA(3eq)，充分搅拌10分钟后加入化合物39(1.2eq)，室温下反应过夜。反应结束后萃取后干燥浓缩，柱色谱纯化得到白色固体60。再加入盐酸1，4-二氧六环搅拌1h，浓缩得到化合物61。1H NMR(500MHz,Methanol-d4)δ8.68(s,2H),7.52(s,4H),7.44–7.31(m,3H),7.26(d,J＝7.6Hz,1H),5.30(d,J＝9.1Hz,1H),4.33(d,J＝9.1Hz,1H),4.24(d,J＝8.7Hz,1H),4.02(ddd,J＝2.4,6.3,9.9Hz,1H),3.91–3.82(m,1H),3.79(qt,J＝2.6,6.5Hz,2H),3.72–3.64(m,1H),3.55(ddd,J＝2.9,8.0,14.4Hz,1H),3.42–3.34(m,1H),3.32–3.29(m,1H),1.91(dd,J＝9.0,15.1Hz,1H),1.53(dd,J＝1.6,15.1Hz,1H),0.94(s,9H)；13C NMR(125MHz,Methanol-d4)δ167.93,163.89,161.70,157.05,135.26,134.86,134.44,130.28,130.14,129.37,129.03,128.69,128.31,127.23,116.59,114.80,65.85,62.57,59.79,58.72,45.28,43.28,42.88,42.73,42.48,29.61,28.44；ESI-MS m/z 636(M+H)+；HRMS-ESI(m/z):[M+H]+ calcd for C32H36O3N7Cl2,636.2251；found,636.2245.
Figure BDA0001753867430000301
向25mL圆底烧瓶中加入化合物9(1eq)和2mL DCM，充分溶解后依次加入HATU(1.5eq)，DIEA(3eq)，充分搅拌10分钟后加入化合物62(1.2eq)，室温下反应过夜。反应结束后萃取后干燥浓缩，柱色谱纯化得到白色固体63。
Figure BDA0001753867430000302
在25mL圆底烧瓶中将化合物63溶解于THF/H2O混合物中后加入NaOH(2.5eq)，搅拌过夜，加入1M盐酸酸化后萃取干燥，旋转蒸发得到白色固体64。
Figure BDA0001753867430000303
向25mL圆底烧瓶中加入化合物64(1eq)和2mL DCM，充分溶解后依次加入HATU(1.5eq)，DIEA(3eq)，充分搅拌10分钟后加入化合物39(1.2eq)，室温下反应过夜。反应结束后萃取后干燥浓缩，柱色谱纯化得到白色固体65。再加入盐酸1，4-二氧六环搅拌1h，浓缩得到化合物66。1H NMR(500MHz,Methanol-d4)δ7.76(d,J＝8.4Hz,2H),7.69(d,J＝8.5Hz,2H),7.54–7.45(m,4H),7.35–7.23(m,3H),7.15(d,J＝7.6Hz,1H),4.75(d,J＝9.6Hz,1H),4.19(d,J＝9.7Hz,1H),4.06(d,J＝9.2Hz,1H),1.75(dd,J＝9.3,14.7Hz,1H),1.47(d,J＝14.6Hz,1H),0.97(s,9H)；13C NMR(125MHz,Methanol-d4)δ170.07,166.13,140.56,136.16,134.75,133.96,131.19,129.60,129.15,128.36,128.31,128.25,127.76,126.97,119.01,117.36,65.92,64.18,63.66,59.57,43.84,29.70,28.73；ESI-MS m/z 565(M+H)+；HRMS-ESI(m/z):[M+H]+ calcd for C30H31O3N4Cl2,565.1768；found,565.1767.
实施例6
MDM2抑制活性的测定
为了证实本发明的双功能MDM2-HDAC抑制剂对MDM2蛋白质的结合能力，进行竞争性荧光极化结合测定。
使用基于荧光偏振的结合测定，使用重组人类His标记的MDM2蛋白(残基1-118)和荧光标记的基于p53的肽PMDM6-F来测定本文所公开的MDM2抑制剂的结合亲和力(J.Med.Chem.,2000,43,3205-3208)。PMDM6-F与重组MDM2蛋白的Kd值是根据饱和曲线测定的。MDM2蛋白用缓冲液连续2倍稀释，共12个浓度点。在黑色96孔板中加入60μL的MDM2蛋白溶液、60μL的PMDM6-F肽溶液以及5μL的DMSO。其中，PMDM6-F的终浓度为1nM。缓冲液为：pH＝7.5的100mM磷酸钾缓冲液+100μg/mL的γ-牛球蛋白+0.02％的叠氮化钠+0.01％的TritonX-100。室温孵育30分钟后，用多功能酶标仪(Bioteck Synergy H1)测定偏振值，激发波长485nm，发射波长530nm。采用Prism 6.0软件计算Kd值。
受试化合物的MDM2结合力测定：将受试化合物用DMSO溶解，按溶度需求3倍稀释，8个浓度点。取5μL化合物溶液加入预先孵育的MDM2蛋白(终浓度10nM，60μL)和PMDM6-F肽(终浓度1nM，60μL)，孵育30分钟后测定偏振值。对于每次测定，对照包括100％抑制组(反应体系只包括MDM2蛋白和PMDM6-F)和0％抑制组(反应体系只有单独的PMDM6-F肽)。采用Prism6.0软件来计算化合物与MDM2的结合力。代表性化合物的MDM2抑制结果见表2，这些数据表明本发明之化合物具有较强的MDM2抑制活性。
实施例7
HDAC抑制活性的测定
为了证实本发明的双功能MDM2-HDAC抑制剂对HDAC的抑制活性，使用Enzo公司的荧光活性检测试剂盒进行HDAC抑制活性测定。根据试剂盒说明书，于白色96孔板中进行HDAC抑制活性测定：倍比稀释标准品从20μM至0.3125μM，并设置time zero孔，以优化实验条件和获取最佳激发光和发射光波长。实验设置空白对照，阴性对照，阳性对照(SAHA)和化合物5个剂量组。反应溶液包括缓冲液(包含50mM Tris pH 8.0，137mM NaCl，2.7mM KC1，1mM MgCl2，1mg/mL BSA)、受试化合物或阳性药、HDAC酶、Fluor de lys荧光底物。随后于室温放置2小时，震摇。加入Fluor de lys展开剂并使该反应于室温进行10分钟。底物的去乙酰化可使其对展开剂敏感，并产生荧光信号团(标记)。在多功能检测仪(Bioteck SynergyH1)上以360nm激发荧光信号团并于460nm检测其发射光。
使用分析软件Prism 6.0计算抑制率或IC50。代表性化合物的HDAC酶抑制结果显示于表2，这些数据表明本发明所述化合物具有较强的抑制HDAC酶的活性(见表2)。
表2.部分化合物的MDM2和HDAC抑制活性
Figure BDA0001753867430000311
Figure BDA0001753867430000321
如表2所示，这些数据表明本发明所述化合物同时具有MDM2抑制活性和HDAC抑制活性而单纯的MDM2抑制剂(如Nultin-3)没有HDAC抑制活性，单纯的HDAC抑制剂(如SAHA)没有MDM2抑制活性。
实施例8
肿瘤细胞抑制活性GI50值的测定
利用Celltiter-Glo化学发光法(Celltiter-Glo，Promega)测定本发明之化合物体外实验对各系肿瘤细胞的半数生长抑制浓度。人类前列腺癌细胞株LNCaP(p53野生型)和DU-145(p53突变型)、人类骨肉瘤细胞株SJSA-1(p53野生型)、人类急性髓系白血病细胞MV-4-11(p53野生型)。LNCaP、DU-145和SJSA-1细胞培养于10％FBS的RPMI-1640中，MV-4-11细胞培养于10％FBS的IMDM培养基中。
将LNCaP、DU-145和SJSA-1细胞接种于96孔板中，90μL/孔，每孔分别为2000个细胞。将MV-4-11细胞接种于96孔板中，90μL/孔，每孔分别为4000个细胞。将96孔板于37℃，5％CO2，100％相对湿度培养箱预培养24小时。加入不同浓度的化合物10μL，每个药物浓度设3个复孔，并设空白对照(细胞培养液，不含细胞)、无药对照孔(不加药物，加等量完全培养基)、阳性药对照，置于37℃、5％CO2培养箱在全湿(100％相对湿度)条件下培养72h。每孔加入100μL的Cell Titer-Glo检测试剂，室温静置10分钟后，使用多功能检测仪(BioteckSynergy H1)进行化学发光检测。使用Prism 6.0软件分析计算GI50值。
代表性化合物的肿瘤细胞抑制活性的结果见表3。这些数据指出本发明的化合物对于多种肿瘤细胞生长的抑制具有高度活性，其中包括p53野生型肿瘤细胞和p53突变型肿瘤细胞。阳性对照Nultin-3(已报道的MDM2抑制剂)仅对p53野生型肿瘤细胞有效。
表3.部分化合物的抑制肿瘤细胞增殖的活性(GI50,μM)
化合物编号 LNCaP DU-145 SJSA-1 MV-4-11
61 1.65 3.74 5.52 1.33
26J 0.84 14.31 2.03 0.19
26L 0.63 3.36 2.41 0.17
Nultin-3 1.02 >100 2.51 0.32
SAHA 0.89 2.39 2.36 0.15
本发明是结合优选的实施方案来说明的。然而，应当了解的是，本发明不限于所公开的实施方案。应当了解的是，鉴于本文对本发明的实施方案的说明，本领域技术人员可以作出各种修改。这些修改由权力要求书所覆盖。
本发明通过上述实施例来说明本发明的MDM2-HDAC双靶点抑制剂、药物组合物及其制备和用途，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明所选用原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。

Claims (14)

1.一种MDM2-HDAC双靶点抑制剂，其特征在于，所述MDM2-HDAC双靶点抑制剂为如下化合物中的任意一种或至少两种的组合：
Figure FDA0003015358950000011
Figure FDA0003015358950000021
Figure FDA0003015358950000031
2.根据权利要求1所述的MDM2-HDAC双靶点抑制剂的对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐。
3.一种药物组合物，所述药物组合物包含如权利要求1所述的MDM2-HDAC双靶点抑制剂或如权利要求2所述的MDM2-HDAC双靶点抑制剂的对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐。
4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物还包括至少一种抗癌剂。
5.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物还包含药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
6.根据权利要求1所述的MDM2-HDAC双靶点抑制剂或权利要求2所述的MDM2-HDAC双靶点抑制剂的对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐在制备用于治疗由细胞过度增殖和/或血管新生所导致、关联或伴随的疾病或病况的药物中的用途。
7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，所述细胞过度增殖和/或血管新生所导致、关联或伴随的疾病或病况为增生性病症、神经变性疾病、代谢性疾病、眼部退化疾病、炎性疾病和/或免疫系统病症，涉及血管新生的疾病、心理病症、心血管疾病、纤维化疾病、感染性疾病、造血性病症。
8.根据权利要求1所述的MDM2-HDAC双靶点抑制剂或权利要求2所述的MDM2-HDAC双靶点抑制剂的对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐在制备用于治疗MDM2抑制剂所适用的疾病或病况的药物中的用途。
9.根据权利要求1所述的MDM2-HDAC双靶点抑制剂或权利要求2所述的MDM2-HDAC双靶点抑制剂的对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐在制备用于治疗HDAC抑制剂所适用的疾病或病况的药物中的用途。
10.一种药用试剂盒，其特征在于，所述药用试剂盒包含如权利要求1所述的MDM2-HDAC双靶点抑制剂或如权利要求2所述MDM2-HDAC双靶点抑制剂的对映异构体、非对映异构体或药学上可接受的盐。
11.根据权利要求10所述的药用试剂盒，其特征在于，所述药用试剂盒还包含可用于治疗关注的疾病或病况的第二治疗剂。
12.根据权利要求11所述的药用试剂盒，其特征在于，所述第二治疗剂为抗癌剂或细胞凋亡调节剂。
13.根据权利要求10所述的药用试剂盒，其特征在于，所述药用试剂盒还包含经过包装的包含可用于治疗关注的疾病或病况的第二治疗剂的组合物。
14.根据权利要求10所述的药用试剂盒，其特征在于，所述药用试剂盒包含(a)容器；(b1)经过包装的包含权利要求3-5中任一项所述MDM2-HDAC双靶点抑制剂的组合物；(b2)经过包装的包含可用于治疗关注的疾病或病况的第二治疗剂的组合物；以及(c)含有(b1)所述组合物和/或(b2)所述组合物的使用说明的包装插页。
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Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101595107A (zh) * 2006-06-30 2009-12-02 先灵公司 能提高p53活性的有取代哌啶及其用途
WO2012121361A1 (ja) * 2011-03-10 2012-09-13 第一三共株式会社 ジスピロピロリジン誘導体
WO2012155066A2 (en) * 2011-05-11 2012-11-15 Shaomeng Wang Spiro-oxindole mdm2 antagonists
CN106632687A (zh) * 2016-12-07 2017-05-10 湖北工业大学 一种用于筛选弱MdmX抑制剂或测试弱MdmX抑制剂的抑制活性的融合蛋白
WO2017176957A1 (en) * 2016-04-06 2017-10-12 The Regents Of The University Of Michigan Mdm2 protein degraders

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101595107A (zh) * 2006-06-30 2009-12-02 先灵公司 能提高p53活性的有取代哌啶及其用途
WO2012121361A1 (ja) * 2011-03-10 2012-09-13 第一三共株式会社 ジスピロピロリジン誘導体
WO2012155066A2 (en) * 2011-05-11 2012-11-15 Shaomeng Wang Spiro-oxindole mdm2 antagonists
WO2017176957A1 (en) * 2016-04-06 2017-10-12 The Regents Of The University Of Michigan Mdm2 protein degraders
CN106632687A (zh) * 2016-12-07 2017-05-10 湖北工业大学 一种用于筛选弱MdmX抑制剂或测试弱MdmX抑制剂的抑制活性的融合蛋白

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Assignee: Shenzhen exen Biotechnology Co., Ltd

Assignor: South University of Science and Technology of China

Contract record no.: X2020440020003

Denomination of invention: MDM2-HDAC double-target inhibitor, medicinal composition and preparation and application of MDM2-HDAC double-target inhibitor

License type: Exclusive License

Record date: 20200117

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