CN108307833B - 一种适用于果菜嫁接的砧木重复利用方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种适用于果菜嫁接的砧木重复利用方法，包括以下步骤：(1)砧木的选择和培育；(2)接穗的选择和培育；(3)第一次嫁接；(4)砧木幼苗的第一次再生培育；(5)第二次嫁接。通过对经过嫁接的砧木幼苗进行再生和再次嫁接，以提高砧木种子的利用率，并保证每次嫁接的成活率以及果菜质量和产量。
Description
技术领域
本发明涉及果菜栽培技术领域，具体地说，涉及一种适用于果菜嫁接的砧木重复利用方法。
背景技术
我国是世界蔬菜生产面积最大的国家。近年来，随着果菜类蔬菜市场需求量逐年增加，栽培面积也逐渐增大。然而，由于我国蔬菜生产中复种指数高，对于番茄、茄子、辣椒、甜瓜、西瓜、黄瓜等果菜蔬菜的很多品种而言，容易导致土壤肥力减退、土壤传染性病虫害加重等问题的发生，进而影响果菜品质和产量。蔬菜嫁接技术可将优质高产果菜品种接穗嫁接到抗逆性强的砧木上，从而增强植株抗病能力，既有效快速又不改变遗传性状，是一种解决蔬菜根际问题的有效手段。
随着果菜类蔬菜嫁接技术的推广，市场上对砧木的需求量日益增加，果菜类蔬菜种子价格较高，尤其是特异专用的砧木品种价格居高不下。而现有技术中对果菜进行一次嫁接后，通常直接将砧木苗做废弃处理，每次嫁接前需要重新进行砧木的播种，造成嫁接育苗的成本较实生育苗用种成本高。生产中如果能将砧木进行再次利用而且保证嫁接苗质量，就可极大的降低嫁接育苗用种成本，但目前，研究嫁接砧木再次利用的研究较少。因此，亟需研究一种既减少砧木用种量又保证嫁接质量的砧木重复利用方法。
发明内容
基于现有技术的不足之处，本发明提供一种适用于果菜嫁接的砧木重复利用方法，通过对经过嫁接的砧木幼苗进行再生和再次嫁接，以提高砧木种子的利用率，并保证每次嫁接的成活率以及果菜质量和产量。
本发明为了实现上述目的所采取的技术方案是：
一种适用于果菜嫁接的砧木重复利用方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)砧木的选择和培育
选择生长势强、抗逆抗病性好的专用瓜类或茄果类砧木种子，穴盘育苗后获得适于嫁接的砧木幼苗；其中茄果类砧木采用72孔穴盘，瓜类砧木采用32或50孔穴盘，嫁接前均不需降温炼苗；茄果类砧木种子可选用番茄、茄子、辣椒等茄果类蔬菜品种种子；瓜类砧木种子可选用黄瓜、西瓜、甜瓜等瓜类蔬菜品种种子。
(2)接穗的选择和培育
选择品质好产量高的番茄、茄子、辣椒等茄果类或黄瓜、西瓜、甜瓜等瓜类蔬菜品种种子，穴盘育苗后获得适于第一次嫁接用的接穗幼苗。所述接穗为分批播种，在第一次嫁接用接穗播种后，间隔每次砧木再生时间进行再次接穗播种育苗，作为后续嫁接用接穗幼苗。
优选地，视嫁接方法、砧木和接穗的生长速度，进行接穗播种育苗，播种数量同砧木播种数量。
(3)第一次嫁接
将接穗主干嫁接在砧木上，采用常规方法对嫁接后的幼苗进行管理。
优选地，茄果类蔬菜使用劈接或套管法嫁接，瓜类蔬菜使用套管法嫁接。
(4)砧木幼苗的第一次再生培育
保留第一次嫁接后已切掉下半部分的砧木幼苗，将其扦插到种植穴盘中，培育15-20天，有新叶长出后表明生根成活，可用于第二次嫁接。
优选地，第一次再生培育包括以下步骤：
1)第一次嫁接后已切掉下半部分的砧木幼苗扦插于种植穴盘中，置于白天25-28℃、夜间20-23℃、空气湿度95％-100％、光照40-50μmol·m-2·s-1的环境中进行根系再生培育3-5天，培育过程中保持土壤湿度为70-85％；
2)转入白天23-25℃、夜间18-20℃，空气湿度85％-90％、光照80-100μmol·m-2·s-1的环境中培育4-5天；
3)转入白天20-23℃、夜间16-18℃、空气湿度65-85％、光照150-200μmol·m-2·s-1的环境中培育8-10天。
优选地，上述步骤1)中第一次嫁接后已切掉下半部分的砧木幼苗在扦插入种植穴盘之前先用砧木再生剂浸泡1-2h，浸泡深度1-2cm；茄果类砧木幼苗使用1号砧木再生剂浸泡；1号砧木再生剂为含有10mg/L GR24和25mg/L IAA的水溶液；瓜类砧木幼苗使用2号砧木再生剂浸泡；2号砧木再生剂为含有0.1mg/L GR24和25mg/L IAA的水溶液，其中，GR24为独脚金内酯；IAA为吲哚乙酸。
(5)第二次嫁接
取步骤(2)中再次播种培育好的嫁接用接穗幼苗，嫁接到再生砧木上，按常规方法对嫁接后的幼苗进行管理；第二次嫁接后瓜类蔬菜砧木幼苗作废弃处理，而茄果类蔬菜砧木幼苗可作废弃处理，或进行第二次再生培育及第三次嫁接。
优选地，第二次茄果类蔬菜砧木再生培育方法为：保留嫁接后已切掉下半部分的砧木幼苗，将其种植于穴盘中进行再生培育；培育18-25天后有新叶长出后表明生根成活，可用于第三次嫁接；培育过程具体包括以下步骤：
1)第二次嫁接后已切掉下半部分的砧木幼苗扦插于种植穴盘中，置于白天25-28℃、夜间20-23℃、空气湿度95％-100％、光照40-50μmol·m-2·s-1的环境中进行根系再生培育5-8天，培育过程中保持土壤湿度为70-85％；
2)转入白天23-25℃、夜间18-20℃，空气湿度85％-90％、光照80-100μmol·m-2·s-1的环境中培育5-7天；
3)转入白天20-23℃、夜间16-18℃、空气湿度65-85％、光照150-200μmol·m-2·s-1的环境中培育8-10天。
优选地，上述步骤1)中第二次嫁接后已切掉下半部分的茄果类砧木幼苗在扦插入种植穴盘之前先置于3号砧木再生剂中浸泡3h，浸泡深度1cm-2cm；3号砧木再生剂为含有20mg/L GR24和20mg/L IAA的水溶液。
优选地，上述步骤3)中于第三次嫁接前7、4、1天分别浇灌1/2倍浓度Hogland大量元素营养液一次，浇灌量为15-20ml/株；1/2倍浓度Hogland大量元素营养液具体成分如下：硝酸钙472.5mg/L，硝酸钾303.5mg/L，磷酸二氢铵57.5mg/L，硫酸镁246.5mg/L。
进一步优选地，将步骤(2)中第三次播种的接穗嫁接到第二次再生砧木上进行第三次嫁接，按常规方法对嫁接后的幼苗进行管理；
第三次嫁接后已切掉下半部分的茄果类砧木幼苗作废弃处理。
与现有嫁接方法相比，通过果菜嫁接砧木重复利用方法进行果菜类蔬菜嫁接，具有节约砧木种子成本、保持优良砧木抗病能力、缩短嫁接育苗时间等优势，对嫁接成活率和产量影响较小，适宜在茄果类和瓜类生产中进行应用。
本发明取得的有益效果是：①砧木重复利用技术节约用种量、种子成本，第二次和第三次嫁接所用砧木来源于第一次嫁接砧木，无需重复播种育苗；②砧木种子发芽时间较长，砧木重复利用技术无需重复播种育苗，缩短砧木培育时间，第二次和第三次嫁接用砧木的育苗时间可缩短15-25天，可显著降低砧木生产成本；③嫁接砧木幼苗，特别是茄果类砧木幼苗可再生2-3次，再生成活率高，嫁接成活率也较高，适用于集约化嫁接育苗生产；④与第一次嫁接苗相比，茄果类蔬菜砧木经第二次和第三次嫁接对蔬菜产量和抗病性等指标影响较小，瓜类蔬菜砧木经第二次嫁接对蔬菜产量和抗病性等指标影响也较小，可广泛适用于茄果类蔬菜和瓜类蔬菜生产。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进行进一步详述。
实施例1
(1)砧木的选择和培育
选择1000粒抗逆性强的番茄砧木品种‘TMS150’，温烫浸泡5h后，在27℃的恒温箱内进行催芽。出芽后，将芽苗播种于装满1:1混合的草炭、蛭石育苗基质的72孔穴盘中，在白天23-25℃，夜晚18-20℃，空气湿度80-90％，光照强度150-200μmol·m-2·s-1的环境下进行培育。培育35-40天后，当幼苗长至2叶一心，达到壮苗标准即可进行第一次嫁接。
(2)接穗的选择和培育
选择1000粒‘粉都53’番茄种子，温烫浸泡5h后，在27℃的恒温箱内进行催芽。出芽后，将芽苗播种于装满1:1混合的草炭、蛭石育苗基质的穴盘中，在白天23-25℃，夜晚18-20℃，空气湿度80-90％，光照强度150-200μmol·m-2·s-1的环境下进行培育。培育35-40天后，当幼苗长至2叶一心，达到壮苗标准即可进行第一次嫁接。于第一次接穗播种18天后选择1000粒‘粉都53’番茄种子，采用上述方法进行育苗，作为第二次嫁接接穗。于第二次接穗播种23天后选择1000粒‘粉都53’番茄种子，采用上述方法进行育苗，作为第三次嫁接接穗。
(3)第一次嫁接
使用套管法将接穗主干嫁接在砧木上，按常规方法对嫁接后的幼苗进行管理；
(4)砧木幼苗的第一次再生培育
保留第一次嫁接后已切掉下半部分的番茄砧木幼苗，将其置于1号砧木再生剂(10mg/LGR24+25mg/L IAA)的溶液中浸泡1h，浸泡深度2cm，作为T1；并且设置无浸泡的番茄砧木幼苗作为对照1(CK1)。之后置于白天25-26℃、夜间20-21℃，空气湿度95％、光照45-50μmol·m-2·s-1的环境中进行再次生根培育，培育过程中保持土壤湿度为70-75％；3天后转入白天23-25℃、夜间18-20℃，空气湿度85％、光照90-100μmol·m-2·s-1的环境中培育5天；之后转入白天20-22℃、夜间16-18℃、空气湿度65-70％、光照180-200μmol·m-2·s-1的环境中培育10天，有新叶长出，进行第二次嫁接。
(5)第二次嫁接
取第二次播种的接穗，采用套管法嫁接到步骤(4)中得到的再生砧木上，按常规方法对嫁接后的幼苗进行管理；
(6)砧木幼苗的第二次再生培育
继续保留第二次嫁接后已切掉下半部分的番茄砧木幼苗，置于3号砧木再生剂(20mg/L GR24+20mg/L IAA)的溶液中浸泡3h，浸泡深度2cm，作为T2；并且设置无浸泡的番茄砧木幼苗作为对照2(CK2)。之后置于白天25-26℃、夜间20-21℃，空气湿度95％、光照45-50μmol·m-2·s-1的环境中进行再次生根培育，培育过程中保持土壤湿度为70-75％；8天后转入白天23-25℃、夜间18-20℃，空气湿度85％、光照90-100μmol·m-2·s-1的环境中培育7天；之后转入白天20-22℃、夜间16-18℃、空气湿度65-70％、光照180-200μmol·m-2·s-1的环境中培育8天。
对于经3号砧木再生剂处理并进行上述阶段性条件变换培育的再生砧木，于第三次嫁接前7天、4天、1天浇灌1/2倍浓度Hogland大量元素营养液，浇灌量为15ml/株，作为T3，具体成分如下：硝酸钙472.5mg/L，硝酸钾303.5mg/L，磷酸二氢铵57.5mg/L，硫酸镁246.5mg/L；设置同时浇灌清水的番茄砧木幼苗，作为对照3(CK3)。
(7)第三次嫁接
再生得到的砧木继续进行下一次嫁接，按常规方法对嫁接后的幼苗进行管理；嫁接后砧木幼苗做废弃处理。
统计第一次再生砧木处理T1及CK1砧木培育第10天和15天时的根数、根长及成活数量、成活率，每处理随机统计200株；统计第二次再生砧木处理T2及CK2砧木培育第15天和20天时的根数、根长及成活数量、成活率，每处理随机统计200株；统计第二次再生砧木处理T3及CK3砧木培育第23天时的根数、根长及成活数量、成活率，每处理随机统计100株；实验结果如表1所示。
表1
将各批次嫁接苗分别种植于当年第一年种植番茄和连续五年种植番茄的土壤中，统计每一批次嫁接苗的嫁接株数、嫁接成活数、嫁接成活率、总产量、单株平均产量、根腐病发病率，每处理统计100株。另外，以非嫁接‘粉都53’实生苗和非再生‘粉都53’接穗嫁接作为实验对照，实验结果如表2所示。
表2
实施例2
(1)砧木的选择和培育
选择1000粒抗逆性强的辣椒砧木‘卡特188’种子，温烫浸泡5h后，在27℃的恒温箱内进行催芽。出芽后，将芽苗播种于装满1:1混合的草炭、蛭石育苗基质的72孔穴盘中，在白天25-26℃，夜晚20-22℃，空气湿度85％，光照强度180-200μmol·m-2·s-1的环境下进行培育。培育35-40天后，当幼苗长至2叶一心，达到壮苗标准即可进行第一次嫁接。
(2)接穗的选择和培育
选择1000粒‘冀研18号’辣椒种子，温烫浸泡5h后，在28℃的恒温箱内进行催芽。出芽后，将芽苗播种于装满1:1混合的草炭、蛭石育苗基质的穴盘中，在白天25-26℃，夜晚20-22℃，空气湿度80％，光照强度150-200μmol·m-2·s-1的环境下进行培育。培育35-40天后，当幼苗长至2叶一心，达到壮苗标准即可进行第一次嫁接。
于第一次接穗播种20天后选择1000粒‘冀研18号’辣椒种子，采用上述方法进行育苗，作为第二次嫁接接穗。于第二次接穗播种25天后选择1000粒‘冀研18号’辣椒种子，采用上述方法进行育苗，作为第三次嫁接接穗。
(3)第一次嫁接
使用劈法将接穗主干嫁接在砧木上，按常规方法对嫁接后的幼苗进行管理；
(4)砧木幼苗的第一次再生培育
保留第一次嫁接后已切掉下半部分的辣椒砧木幼苗，取其置于1号砧木再生剂(10mg/LGR24+25mg/L IAA)的溶液中浸泡2h，浸泡深度2cm，作为T4；
或将第一次嫁接后已切掉下半部分的辣椒砧木幼苗置于1-1号砧木再生剂(5mg/LGR24+25mg/L IAA)的溶液中浸泡2h，浸泡深度2cm，作为对照4(CK4)。
浸泡后置于白天26-28℃、夜间20-22℃，空气湿度95％、光照40-45μmol·m-2·s-1的环境中进行再次生根培育，培育过程中保持土壤湿度为70-75％；5天后转入白天23-25℃、夜间18-20℃，空气湿度90％、光照80-90μmol·m-2·s-1的环境中培育；5天之后转入白天21-23℃、夜间16-18℃、空气湿度80-85％、光照180-200μmol·m-2·s-1的环境中培育10天，有新叶长出，进行第二次嫁接。
(5)第二次嫁接
取第二次播种的接穗，采用套管法嫁接到步骤(4)中得到的再生砧木上，按常规方法对嫁接后的幼苗进行管理；
(6)砧木幼苗的第二次再生培育
继续保留第二次嫁接后已切掉下半部分的番茄砧木幼苗，将其置于3号砧木再生剂(20mg/L GR24+20mg/L IAA)的溶液中浸泡3h，浸泡深度2cm，作为T5；或置于3-1号砧木再生剂(5mg/L GR+20mg/L IAA)的溶液中浸泡3h，浸泡深度2cm，作为对照5(CK5)。
随后置于白天26-28℃、夜间20-22℃，空气湿度95％、光照40-45μmol·m-2·s-1的环境中进行再次生根培育，培育过程中保持土壤湿度为70-75％；8天后转入白天23-25℃、夜间18-20℃，空气湿度90％、光照80-90μmol·m-2·s-1的环境中培育；7天之后转入白天21-23℃、夜间16-18℃、空气湿度80-85％、光照180-200μmol·m-2·s-1的环境中培育10天；
对于经3号砧木再生剂处理并进行上述阶段性条件变换培育的再生砧木，于第三次嫁接前第7、4、1天分别浇灌1/2倍浓度Hogland大量元素营养液一次，浇灌量为20ml/株，作为T6，1/2倍浓度Hogland大量元素营养液具体成分如下：硝酸钙472.5mg/L，硝酸钾303.5mg/L，磷酸二氢铵57.5mg/L，硫酸镁246.5mg/L。
或于第三次嫁接前第7、4、1天分别浇灌1/3倍浓度Hogland大量元素营养液一次，浇灌量为20ml/株，作为对照6(CK6)；1/3倍浓度Hogland大量元素营养液具体成分如下：硝酸钙315mg/L，硝酸钾202.3mg/L，磷酸铵38.3mg/L，硫酸镁164.3mg/L。
(7)第三次嫁接
再生得到的砧木继续进行下一次嫁接，按常规方法对嫁接后的幼苗进行管理；嫁接后砧木幼苗做废弃处理。
统计第一次再生砧木处理T4及CK4砧木培育第10天和15天时的根数、根长及成活数量、成活率，每处理随机统计200株；统计第二次再生砧木处理T5及CK5砧木培育第15天和20天时的根数、根长及成活数量、成活率，每处理随机统计200株；统计第二次再生砧木处理T6及CK6砧木培育第25天时的根数、根长及成活数量、成活率，每处理随机统计100株；实验结果如表3所示。
表3
将各批次嫁接苗分别种植于当年第一年种植辣椒和连续五年种植辣椒的土壤中，统计每一批次嫁接苗的嫁接株数、嫁接成活数、嫁接成活率、总产量、单株平均产量、根腐和茎基腐病发病率，每处理统计100株。另外，以非嫁接‘冀研18号’实生苗和非再生‘冀研18号’接穗嫁接作为实验对照，实验结果如表4所示。
表4
实施例3
(1)砧木的选择和培育
选择1000粒抗逆性强的茄子砧木‘托鲁巴姆’，100mg/L的赤霉素浸泡12h后，清水浸泡12h，在28℃的恒温箱内进行催芽。出芽后，将芽苗播种于装满1:1混合的草炭、蛭石育苗基质的72孔穴盘中，在白天25-26℃，夜晚20-22℃，空气湿度85％，光照强度180-200μmol·m-2·s-1的环境下进行培育。培育45-60天后，当幼苗长至5叶一心，达到壮苗标准即可进行第一次嫁接。
(2)接穗的选择和培育
选择1000粒‘茄杂12号’茄子种子，温烫浸泡5h后，在28℃的恒温箱内进行催芽。出芽后，将芽苗播种于装满1:1混合的草炭、蛭石育苗基质的穴盘中，在白天25-26℃，夜晚20-22℃，空气湿度80％，光照强度150-200μmol·m-2·s-1的环境下进行培育。培育35-40天后，当幼苗长至3叶一心，达到壮苗标准即可进行第一次嫁接。
于第一次接穗播种20天后选择1000粒‘茄杂12号’，采用上述方法进行育苗，作为第二次嫁接接穗。于第二次接穗播种25天后选择1000粒‘茄杂12号’茄子种子，采用上述方法进行育苗，作为第三次嫁接接穗。
(3)第一次嫁接
使用劈法将接穗主干嫁接在砧木上，按常规方法对嫁接后的幼苗进行管理。
(4)砧木幼苗的第一次再生培育
保留第一次嫁接后已切掉下半部分的茄子砧木幼苗，将其置于1号砧木再生剂(10mg/LGR24+25mg/L IAA)的溶液中浸泡2h，浸泡深度2cm。
随后置于白天26-28℃、夜间20-22℃，空气湿度95％、光照40-45μmol·m-2·s-1的环境中进行再次生根培育，培育过程中保持土壤湿度为70-75％；5天后转入白天23-25℃、夜间18-20℃，空气湿度90％、光照80-90μmol·m-2·s-1的环境中培育5天；之后转入白天21-23℃、夜间16-18℃、空气湿度80-85％、光照180-200μmol·m-2·s-1的环境中培育10天，作为T7，有新叶长出，进行第二次嫁接。另外，设置对照组，将砧木幼苗始终置于白天22-25℃、夜间16-18℃、空气湿度80-85％、光照180-200μmol·m-2·s-1环境中，作为对照7(CK7)。
(5)第二次嫁接
取第二次播种的接穗，采用套管法嫁接到步骤(4)中得到的再生砧木上，按常规方法对嫁接后的幼苗进行管理；
(6)砧木幼苗的第二次再生培育
继续保留第二次嫁接后已切掉下半部分的茄子砧木幼苗，将其置于3号砧木再生剂(20mg/L GR24+20mg/L IAA)的溶液中浸泡3h，浸泡深度2cm。
随后置于白天26-28℃、夜间20-22℃，空气湿度95％、光照40-45μmol·m-2·s-1的环境中进行再次生根培育，培育过程中保持土壤湿度为70-75％；8天后转入白天23-25℃、夜间18-20℃，空气湿度90％、光照80-90μmol·m-2·s-1的环境中培育7天；之后转入白天21-23℃、夜间16-18℃、空气湿度80-85％、光照180-200μmol·m-2·s-1的环境中培育10天。
培育过程中于第三次嫁接前第7、4、1天分别浇灌1/2倍浓度Hogland大量元素营养液一次，浇灌量为15ml/株，作为T8；1/2倍浓度Hogland大量元素营养液具体成分如下：硝酸钙472.5mg/L，硝酸钾303.5mg/L，磷酸二氢铵57.5mg/L，硫酸镁246.5mg/L。
于第三次嫁接前第11、6、1天分别浇灌1/2倍浓度Hogland大量元素营养液一次，浇灌量为15ml/株，作为对照8(CK8)；
于第三次嫁接前第7、4、1天分别浇灌1/2倍浓度Hogland大量元素营养液一次，浇灌量为5ml/株，作为对照9(CK9)；
于第三次嫁接前第7、4天分别浇灌1/2倍浓度Hogland大量元素营养液一次，浇灌量为15ml/株，作为对照10(CK10)；
于第三次嫁接前第7、1天分别浇灌1/2倍浓度Hogland大量元素营养液一次，浇灌量为15ml/株，作为对照11(CK11)。
(7)第三次嫁接
再生得到的砧木继续进行下一次嫁接，按常规方法对嫁接后的幼苗进行管理；嫁接后砧木幼苗做废弃处理。
统计第一次再生砧木处理T7砧木培育第10天和15天时的根数、根长及成活数量、成活率，随机统计200株；统计CK7砧木培育第10天和15天时的根数、根长及成活数量、成活率，随机统计200株；统计第二次再生砧木处理T8及CK8、CK9、CK10、CK11砧木培育第25天时的根数、根长及成活数量、成活率，每处理随机统计100株。实验结果如表5所示。
表5
将各批次嫁接苗分别种植于当年第一年种植茄子和连续五年种植茄子的土壤中，统计每一批次嫁接苗的嫁接株数、嫁接成活数、嫁接成活率、总产量、单株平均产量、发病率，每处理随机统计100株，另外，以非嫁接‘茄杂12号’实生苗和非再生‘茄杂12号’接穗嫁接作为实验对照，实验结果如表6所示。
表6
实施例4
(1)砧木的选择和培育
选择1000粒抗逆性强的‘强力金砧’南瓜种子，温烫浸泡5h后，在28℃的恒温箱内进行催芽。出芽后，将芽苗播种于装满1:1混合的草炭、蛭石育苗基质的32孔穴盘中，在白天25-26℃，夜晚20-22℃，空气湿度85％，光照强度160-180μmol·m-2·s-1的环境下进行培育。培育35-40天后，当幼苗长至2叶一心，达到壮苗标准即可进行第一次嫁接。
(2)接穗的选择和培育
选择1000粒高产抗病的优质‘早佳8424’西瓜种子，温烫浸泡5h后，在28℃的恒温箱内进行催芽。出芽后，将芽苗播种于装满1:1混合的草炭、蛭石育苗基质的穴盘中，在白天25-26℃，夜晚20-22℃，空气湿度80％，光照强度150-200μmol·m-2·s-1的环境下进行培育。培育35-40天后，当幼苗长至2叶一心，达到壮苗标准即可进行第一次嫁接。
于第一次接穗播种20天后选择1000粒‘早佳8424’西瓜种子，采用上述方法进行育苗，作为第二次嫁接接穗。于第二次接穗播种25天后选择1000粒‘早佳8424’西瓜种子，采用上述方法进行育苗，作为第三次嫁接接穗。
(3)第一次嫁接
使用套管法将接穗主干嫁接在砧木上，按常规方法对嫁接后的幼苗进行管理；
(4)砧木幼苗的第一次再生培育
保留第一次嫁接后已切掉下半部分的南瓜砧木幼苗，将其置于2号砧木再生剂(0.1mg/L GR24+25mg/L IAA)的溶液中浸泡2h，浸泡深度1cm，作为T12；
将其置于2-1号砧木再生剂(0.1mg/L GR24+10mg/L IAA)的溶液中浸泡2h，浸泡深度1cm，作为对照12(CK12)；
将其置于2-2号砧木再生剂(1mg/L GR24+25mg/L IAA)中浸泡浸泡2h，浸泡深度1cm，作为对照13(CK13)；
将其置于2-3号砧木再生剂(25mg/L IAA)的溶液中浸泡2h，浸泡深度1cm，作为对照14(CK14)；
将其置于2号砧木再生剂(0.1mg/L GR24+25mg/L IAA)的溶液中浸泡1h，浸泡深度1cm，作为对照15(CK15)。
之后全部置于白天26-28℃、夜间20-22℃，空气湿度95％、光照40-45μmol·m-2·s-1的环境中进行再次生根培育，培育过程中保持土壤湿度为70-75％，培育5天，之后转入白天23-25℃、夜间18-20℃，空气湿度90％、光照80-90μmol·m-2·s-1的环境中培育5天，之后转入白天21-23℃、夜间16-18℃、空气湿度80-85％、光照180-200μmol·m-2·s-1的环境中培育10天，有新叶长出，进行第二次嫁接。
(5)第二次嫁接
取第二次播种的接穗，采用套管法嫁接到步骤(4)中得到的再生砧木上，按常规方法对嫁接后的幼苗进行管理；嫁接后砧木幼苗做废弃处理。
统计第一次再生砧木处理T12及CK12、CK13、CK14、CK15砧木培育第15天和20天时的根数、根长及成活数量、成活率，每处理随机统计100株。实验结果如表7所示。
表7
将各批次嫁接苗分别种植于当年第一年种植西瓜和连续五年种植西瓜的土壤中，统计每一批次嫁接苗的嫁接株数、嫁接成活数、嫁接成活率、总产量、单株平均产量、发病率，每处理随机统计100株，另外，以非嫁接‘早佳8424’实生苗和非再生‘早佳8424’接穗嫁接作为实验对照，实验结果如表8所示。
表8
实施例5
(1)砧木的选择和培育
选择1000粒抗逆性强的‘强力金砧’南瓜种子，温烫浸泡5h后，在28℃的恒温箱内进行催芽。出芽后，将芽苗播种于装满1:1混合的草炭、蛭石育苗基质的50孔穴盘中，在白天25-26℃，夜晚20-22℃，空气湿度85％，光照强度160-180μmol·m-2·s-1的环境下进行培育。培育35-40天后，当幼苗长至2叶一心，达到壮苗标准即可进行第一次嫁接。
(2)接穗的选择和培育
选择1000粒高产抗病的优质‘西州蜜’甜瓜种子，温烫浸泡5h后，在28℃的恒温箱内进行催芽。出芽后，将芽苗播种于装满1:1混合的草炭、蛭石育苗基质的穴盘中，在白天25-26℃，夜晚20-22℃，空气湿度80％，光照强度150-200μmol·m-2·s-1的环境下进行培育。培育35-40天后，当幼苗长至2叶一心，达到壮苗标准即可进行第一次嫁接。
于第一次接穗播种20天后选择1000粒‘西州蜜’甜瓜种子，采用上述方法进行育苗，作为第二次嫁接接穗。于第二次接穗播种25天后选择1000粒‘西州蜜’甜瓜种子，采用上述方法进行育苗，作为第三次嫁接接穗。
(3)第一次嫁接
使用套管法将接穗主干嫁接在砧木上，按常规方法对嫁接后的幼苗进行管理；
(4)砧木幼苗的第一次再生培育
保留第一次嫁接后已切掉下半部分的南瓜砧木幼苗，将其置于2号砧木再生剂(0.1mg/LGR24+25mg/L IAA)的溶液中浸泡2h，浸泡深度2cm；随后置于白天26-28℃、夜间20-22℃，空气湿度95％、光照40-45μmol·m-2·s-1的环境中进行再次生根培育，培育过程中保持土壤湿度为70-75％，培育5天，之后转入白天23-25℃、夜间18-20℃，空气湿度90％、光照80-90μmol·m-2·s-1的环境中培育5天，之后转入白天21-23℃、夜间16-18℃、空气湿度80-85％、光照180-200μmol·m-2·s-1的环境中培育10天，新叶长出，进行第二次嫁接。
(5)第二次嫁接
取第二次播种的接穗，采用套管法嫁接到步骤(4)中得到的再生砧木上，按常规方法对嫁接后的幼苗进行管理。嫁接后砧木幼苗做废弃处理。
将各批次嫁接苗分别种植于当年第一年种植甜瓜和连续五年种植甜瓜的土壤中，统计每一批次嫁接苗的嫁接株数、嫁接成活数、嫁接成活率、总产量、单株平均产量、发病率，每处理随机统计100株，另外，以非嫁接‘西州蜜’实生苗和非再生‘西州蜜’接穗嫁接作为实验对照，实验结果如表9所示。
表9
实施例6
(1)砧木的选择和培育
选择1000粒抗逆性强的‘和美二号’南瓜种子，温烫浸泡5h后，在28℃的恒温箱内进行催芽。出芽后，将芽苗播种于装满1:1混合的草炭、蛭石育苗基质的50孔穴盘中，在白天25-26℃，夜晚20-22℃，空气湿度85％，光照强度160-180μmol·m-2·s-1的环境下进行培育。培育35-40天后，当幼苗长至2叶一心，达到壮苗标准即可进行第一次嫁接。
(2)接穗的选择和培育
选择1000粒高产抗病的优质‘津优35’黄瓜种子，温烫浸泡5h后，在28℃的恒温箱内进行催芽。出芽后，将芽苗播种于装满1:1混合的草炭、蛭石育苗基质的穴盘中，在白天25-26℃，夜晚20-22℃，空气湿度80％，光照强度150-200μmol·m-2·s-1的环境下进行培育。培育35-40天后，当幼苗长至2叶一心，达到壮苗标准即可进行第一次嫁接。于第一次接穗播种20天后选择1000粒‘津优35’黄瓜种子，采用上述方法进行育苗，作为第二次嫁接接穗。于第二次接穗播种25天后选择1000粒‘津优35’黄瓜种子，采用上述方法进行育苗，作为第三次嫁接接穗。
(3)第一次嫁接
使用套管法将接穗主干嫁接在砧木上，按常规方法对嫁接后的幼苗进行管理；
(4)砧木幼苗的第一次再生培育
保留第一次嫁接后已切掉下半部分的南瓜砧木幼苗，将其置于2号砧木再生剂(0.1mg/LGR24+25mg/L IAA)的溶液中浸泡2h，浸泡深度1cm；随后置于白天26-28℃、夜间20-22℃，空气湿度95％、光照40-45μmol·m-2·s-1的环境中进行再次生根培育，培育过程中保持土壤湿度为70-75％，培育5天，之后转入白天23-25℃、夜间18-20℃，空气湿度90％、光照80-90μmol·m-2·s-1的环境中培育5天，之后转入白天21-23℃、夜间16-18℃、空气湿度80-85％、光照180-200μmol·m-2·s-1的环境中培育10天，有新叶长出，进行第二次嫁接。
(5)第二次嫁接
取第二次播种的接穗，采用套管法嫁接到步骤(4)中得到的再生砧木上，按常规方法对嫁接后的幼苗进行管理；嫁接后砧木幼苗做废弃处理。
将各批次嫁接苗分别种植于当年第一年种植黄瓜和连续五年种植黄瓜的土壤中，统计每一批次嫁接苗的嫁接株数、嫁接成活数、嫁接成活率、总产量、单株平均产量、枯萎病发病率，每处理随机统计100株，另外，以非嫁接‘津优35’实生苗和非再生‘津优35’接穗嫁接作为实验对照，实验结果如表10所示。
表10
以上仅是本发明的优选实施方式，本发明的保护范围并不仅限制于本文所示的实施例，凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明的保护范围。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理前提下对本发明各原料的等效替换及辅助成分的增减均落在本发明的保护范围和公开范围内。
Claims (2)
1.一种适用于果菜嫁接的砧木重复利用方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)砧木的选择和培育
选择生长势强、抗逆抗病性好的专用茄果类或瓜类砧木种子，穴盘育苗后获得适于嫁接的砧木幼苗；
(2)接穗的选择和培育
选择品质好产量高的茄果类或瓜类蔬菜品种种子，穴盘育苗后获得适于嫁接的接穗幼苗；所述接穗为分批播种，在第一次嫁接用接穗播种后，间隔每次砧木再生时间进行再次接穗播种育苗，作为后续嫁接用接穗幼苗；
(3)第一次嫁接
将接穗主干嫁接在砧木上，按常规方法对嫁接后的幼苗进行管理；
(4)砧木幼苗的第一次再生培育
保留第一次嫁接后已切掉下半部分的砧木幼苗，将其扦插到种植穴盘中，培育15-20天，有新叶长出后表明生根成活，可用于第二次嫁接；
(5)第二次嫁接
取步骤(2)中再次播种培育好的嫁接用接穗幼苗，嫁接到再生砧木上，按常规方法对嫁接后的幼苗进行管理；
第二次嫁接后已切掉下半部分的瓜类蔬菜砧木幼苗作废弃处理，茄果类蔬菜砧木幼苗可作废弃处理，或进行第二次再生培育及第三次嫁接；
所述步骤(4)中第一次再生培育包括以下步骤：
1)第一次嫁接后已切掉下半部分的砧木幼苗先用砧木再生剂浸泡1-2h，浸泡深度1-2cm；再扦插于种植穴盘中，置于白天25-28℃、夜间20-23℃、空气湿度95％-100％、光照40-50μmol·m-2·s-1的环境中进行根系再生培养3-5天，培养过程中保持土壤湿度为70-85％；茄果类砧木幼苗使用1号砧木再生剂浸泡；1号砧木再生剂为含有10mg/L GR24和25mg/LIAA的水溶液；瓜类砧木幼苗使用2号砧木再生剂浸泡；2号砧木再生剂为含有0.1mg/L GR24和25mg/L IAA的水溶液；
2)转入白天23-25℃、夜间18-20℃，空气湿度85％-90％、光照80-100μmol·m-2·s-1的环境中培养4-5天；
转入白天20-23℃、夜间16-18℃、空气湿度65-85％、光照150-200μmol·m-2·s-1的环境中培养8-10天；
所述步骤(5)中茄果类蔬菜砧木幼苗的第二次再生培育方法为：
保留嫁接后已切掉下半部分的茄子果类砧木幼苗，将其种植于穴盘中进行再生培育；培育18-25天后有新叶长出后表明生根成活，可用于第三次嫁接；
所述步骤(5)中茄果类蔬菜砧木幼苗的第二次再生培育包括以下步骤：
1)第二次嫁接后已切掉下半部分的砧木幼苗先置于3号砧木再生剂中浸泡3h，浸泡深度1cm-2cm；再扦插于种植穴盘中，置于白天25-28℃、夜间20-23℃、空气湿度95％-100％、光照40-50μmol·m-2·s-1的环境中进行根系再生培养5-8天，培养过程中保持土壤湿度为70-85％；3号砧木再生剂为含有20mg/L GR24和20mg/L IAA的水溶液；
2)转入白天23-25℃、夜间18-20℃，空气湿度85％-90％、光照80-100μmol·m-2·s-1的环境中培养5-7天；
3)转入白天20-23℃、夜间16-18℃、空气湿度65-85％、光照150-200μmol·m-2·s-1的环境中培养8-10天；于第三次嫁接前7、4、1天分别浇灌1/2倍浓度Hogland大量元素营养液一次，浇灌量为15-20ml/株；
1/2倍浓度Hogland大量元素营养液具体成分如下：硝酸钙472.5mg/L，硝酸钾303.5mg/L，磷酸二氢铵57.5mg/L，硫酸镁246.5mg/L。
2.根据权利要求1所述的一种适用于果菜嫁接的砧木重复利用方法，其特征在于，将步骤(2)中第三次播种的接穗嫁接到第二次再生砧木上进行第三次嫁接，按常规方法对嫁接后的幼苗进行管理；
第三次嫁接后已切掉下半部分的茄果类砧木幼苗作废弃处理。
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