CN108135886A - 用于糖尿病性肾病治疗的pde4抑制剂 - Google Patents

Abstract

本发明涉及糖尿病性肾病的治疗，即用a)磷酸二酯酶4抑制剂，b)磷酸二酯酶4抑制剂与AT₁血管紧张素II受体拮抗剂的组合或c)磷酸二酯酶4抑制剂与血管紧张素‑转化酶抑制剂的组合来治疗。

Description

用于糖尿病性肾病治疗的PDE4抑制剂

发明领域

本发明涉及糖尿病性肾病的治疗。更特别地，本发明涉及用a) 磷酸二酯酶4抑制剂(在本说明书中有时缩写为PDE4抑制剂)，b) 磷酸二酯酶4抑制剂与AT₁血管紧张素II受体拮抗剂的组合或c) 磷酸二酯酶4抑制剂与血管紧张素-转化酶抑制剂的组合治疗糖尿病性肾病。

发明背景

国际糖尿病联盟(International Diabetes Federation)估计糖尿病的世界流行率将从2010年的285,000,000人增加至2030年的439,000,000人，相对增加50% (Shaw JE,Diabetes Res Clin Pract 2010, Vol 87, pp 4-14)。在1型糖尿病患者中，糖尿病性肾病的发病率已从在40-50年前发生糖尿病的人群的30-35%明显减少至最近的人群的10-15%(Bojestig M, N Engl J Med 1994, Vol 330, pp 15-18; Hovind P Diabetes Care2003, Vol 26, pp 1258-1264)。然而，由于2型糖尿病的增加，糖尿病性肾病的绝对流行率在过去的二十年间已有增加。在2009年的美国，糖尿病性肾病被报道是全部晚期肾病(ESDR)病例的44%的原因，伴有每年每百万155名糖尿病患者发展为ESRD的发病率。当前在美国和欧洲已经注意到，发展为ESRD的2型糖尿病患者的数目有适度的下降(Burrows NRDiabetes Care 2010, Vol 33, pp 73-77; Zocalli C Clin J Am Soc Nephrol 2009,Vol 4, pp S18-S22)。

糖尿病性肾病的特征为肾损伤，伴有白蛋白尿水平的进行性增加、高血压、肾小球硬化和肾小球滤过率(GFR)的最终减少，导致ESRD。

早期糖尿病性肾病被定义为在至少两个不同的场合测量为20-200 µg/min或30-300 mg/24 h的白蛋白排泄率的持续微量白蛋白尿(例如：“Programm für nationaleVersorgungsLeitlinien Germany 2010)。通常地在今天，临床中心很可能会用随机尿液(spot urine)测量白蛋白-与-肌酐比率，以界定微量白蛋白尿的存在。基于白蛋白-与-肌酐比率的微量白蛋白尿的存在标准在各国之间稍有不同，但通常地在对于男性2.5-25 mg/mmol (或20-200 mg/g)和对于女性3.5-35 mg/mmol (或30-300 mg/g)的范围内。明显的糖尿病性肾病被定义为白蛋白排泄超出微量白蛋白尿范围，或尿蛋白排泄>500mg/24h。

依据今天关于该病的知识，在1型糖尿病患者中的糖尿病性肾病通常经历5-10年以上的发展，而在2型糖尿病患者中，在2型糖尿病诊断时，该病可能由于数年未确诊的高血糖而已经存在。

糖尿病性肾病发展及恶化的主要危险因素是高血糖、高血压、白蛋白排泄率、吸烟、增加的BMI、脂质异常(LDL-胆固醇和甘油三酯的水平增加，HDL-胆固醇的水平降低)、高龄、男性、糖尿病病程的总长、遗传倾向、高血压或肾病的阳性家族既往症和种族，其中高血糖、高血压、白蛋白排泄率、吸烟、增加的BMI和脂质异常可被治疗影响。

除了生活方式改变，例如，达到或维持健康体重(BMI 20-25)，降低盐摄入量，执行频繁的锻炼计划和限制酒精摄入量，对于处于发展糖尿病性肾病的风险中的或已被诊断患有糖尿病性肾病的糖尿病患者的治疗建议包括

•用降血压药，例如ARB (血管紧张素II受体阻断剂或拮抗剂)或ACE-I (血管紧张素I转化酶抑制剂)治疗其血压持续地是 > 140 mm Hg (收缩压)或 > 90 mm Hg (舒张压)的这些患者，以独立地维持血压持续地是 ≤ 140 mm Hg (收缩压)和≤ 90mm Hg (舒张压)，由此无论这些患者中的尿白蛋白排泄是<30 mg/24h，在30-300 mg/24h之间或是>300 mg/24h

•用降HbA1c剂治疗这些患者，以在那些无血糖过低的风险的患者中达到7.0%血红蛋白A1c的目标

•用降HbA1c剂治疗患者，以在那些具有共存病症或有限的预期寿命和血糖过低的风险的患者中达到略高于7.0%的血红蛋白A1c的目标。

虽然糖尿病和血压增加至某种程度的现代治疗已经稳定了糖尿病性肾病的发生，在西方世界需要透析和移植的患者中，该病仍是一个主要原因。因此，对于治疗(和预防)所有阶段的糖尿病性肾病的新的和有效的替代药物仍有高的需求。

发明概述

在第一方面，本发明提供一种在需要这样的治疗的哺乳动物中治疗糖尿病性肾病的方法，其包括给予罹患糖尿病性肾病的哺乳动物治疗有效量的磷酸二酯酶4抑制剂。

磷酸二酯酶4抑制剂选自5-((2R,4aR,10bR)-9-乙氧基-2-羟基-8-甲氧基-1,2,3,4,4a,10b-六氢-菲啶-6-基)1-甲基-1H-吡啶-2-酮(此后称为“化合物A”)及其药学上可接受的盐。

在第二方面，本发明提供一种在需要这样的治疗的哺乳动物中治疗糖尿病性肾病的方法，其包括给予罹患糖尿病性肾病的哺乳动物治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂的组合。

在第二方面的一个实施方案中，化合物A或其药学上可接受的盐和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂以一个单一剂型给予。

在第二方面的另一个实施方案中，化合物A或其药学上可接受的盐和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂以两个分开的剂型同时或依次给予。

在第三方面，本发明涉及一种药用组合物，其包含：化合物A或其药学上可接受的盐与AT₁血管紧张素II受体拮抗剂的组合，和药学上可接受的载体。

AT₁血管紧张素II受体拮抗剂可选自厄贝沙坦(irbesartan)、厄贝沙坦的药学上可接受的盐、氯沙坦(losartan)、氯沙坦的药学上可接受的盐、阿齐沙坦(azilsartan)和阿齐沙坦的药学上可接受的盐。

在第三方面的一个实施方案中，药用组合物在一个单一剂型中包含化合物A或其药学上可接受的盐和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂。

在第三方面的另一个实施方案中，药用组合物包含在要同时或依次给予的、两个分开的剂型中的化合物A或其药学上可接受的盐和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂。

在第四方面，本发明提供一种在需要这样的治疗的哺乳动物中治疗糖尿病性肾病的方法，其包括给予罹患糖尿病性肾病的哺乳动物化合物A或其药学上可接受的盐和血管紧张素-转化酶(ACE)抑制剂的组合。

在第四方面的一个实施方案中，化合物A或其药学上可接受的盐和血管紧张素-转化酶(ACE)抑制剂以一个单一剂型给予。

在第四方面的另一个实施方案中，化合物A或其药学上可接受的盐和血管紧张素-转化酶(ACE)抑制剂以两个分开的剂型同时或依次给予。

在第五方面，本发明涉及药用组合物，其包含：与血管紧张素-转化酶(ACE)抑制剂组合的化合物A或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的载体。

血管紧张素-转化酶(ACE)抑制剂可选自卡托普利和卡托普利的药学上可接受的盐。

在第五方面的一个实施方案中，药用组合物包含在一个单一剂型中的化合物A或其药学上可接受的盐和血管紧张素-转化酶(ACE)抑制剂。

在第五方面的另一个实施方案中，药用组合物包含在要同时或依次给予的、两个分开的剂型中的化合物A或其药学上可接受的盐和血管紧张素-转化酶(ACE)抑制剂。

在本发明第一、第二和第四方面的进一步的实施方案中，罹患糖尿病性肾病的哺乳动物是具有以下任何一项的人：(a) 在30-300 mg/24h的范围内的尿白蛋白排泄率；(b)300 mg/24h以上的尿白蛋白排泄率；(c) 在30-300 mg/g的范围内的尿白蛋白/肌酐比率；或(d) 300 mg/g以上的尿白蛋白/肌酐比率。

本发明的一个或多个方面的细节及其实施方案在在以下附图和描述中阐述。其它特征和优点将从说明书、附图和权利要求书而变得显而易见。

附图简述

图1：用化合物A、罗氟司特或厄贝沙坦治疗8-周对单侧肾切除后的db/db小鼠的尿白蛋白/肌酐比率的影响(8周治疗从单侧肾切除术后4周开始)

图2：用化合物A、罗氟司特或厄贝沙坦治疗8-周对单侧肾切除后的db/db小鼠的糖基化血红蛋白的血液水平(GHb，A)、葡萄糖的血浆水平(B)和体重(C)的影响(8周治疗从单侧肾切除术后4周开始)

图3：用化合物A、罗氟司特或厄贝沙坦治疗8-周对单侧肾切除后的db/db小鼠的尿白蛋白/肌酐比率的影响(8周治疗从单侧肾切除术后12周开始)

图4：用化合物A或厄贝沙坦治疗8-周对单侧肾切除后的db/db小鼠的糖基化血红蛋白的血液水平(GHb，A)、葡萄糖的血浆水平(B)和体重(C)的影响(8周治疗从单侧肾切除术后12周开始)

图5：化合物A对人系膜细胞的细胞内cAMP水平的影响

图6：化合物A对TGF-β-诱导的结缔组织生长因子(CTGF)图6A和纤溶酶原激活物抑制剂-1 (PAI-1)图6B在人系膜细胞中的mRNA表达的抑制作用

图7：化合物A对TGF-β-诱导的胶原蛋白1型α1链(图7A)和纤连蛋白(图7B)的mRNA表达的抑制作用

图8：在雄性DIO小鼠中用化合物A治疗28天对体重和总食物摄入量的影响

图9：在雄性DIO小鼠中用化合物A治疗28天对脂肪量和瘦肉量(lean mass)的影响

图10：在口服治疗28天后化合物A对雌性db/db小鼠的HbA1c水平的影响

定义

在本发明中，短语“治疗有效量”指活性化合物或药物的量，或在组合疗法的情况下，指在组织、系统、动物、个体或人中引起生物学或医学反应的各个化合物或药物的合并量，这样的反应是研究者、兽医、医生或其他临床医师所寻求的，其包括以下的一或多项：

改善疾病或抑制疾病及其进展；例如，在显示出疾病、病症或障碍的病理或症状(即，阻止病理和/或症状的进一步发展或甚至逆转病理和/或症状)的个体中改善/抑制疾病、病症或障碍，例如在糖尿病性肾病的情况下，例如，主要通过降低以下的一或多项指标：(a) 尿白蛋白排泄率，(b) 尿白蛋白与肌酐的比率，和/或(c) 通过减少估计的肾小球滤过率(eGFR)的下降速率。改善/抑制糖尿病性肾病可通过活性化合物或药物对一或多项以下指标下降的影响额外评价：(d) 血红蛋白A1c值，(e) 身体质量指数，(f) 高血压和/或(g) 脂质代谢障碍的改善。

如本文所用的，“哺乳动物”指人、小鼠、大鼠、兔、狗、猫、牛、马、猪和猴，优先选择人。

“早期糖尿病性肾病”被定义为在至少两个不同的场合测量为30-300 mg/24 h的白蛋白排泄率或其等价物(对于其等价物，参见下表)的持续微量白蛋白尿。

“明显的糖尿病性肾病”被定义为超出微量白蛋白尿范围的白蛋白排泄率，即>300 mg/24h或其等价物(对于其等价物，参见下表)。

对于白蛋白尿、蛋白尿、白蛋白/肌酐比率和蛋白/肌酐比率的类别之间的关系：

白蛋白尿和蛋白尿可使用在定时尿收集中的排泄率，在随机尿样中的浓度与肌酐浓度的比率来测量。在一个类别之内的测量方法之间的关系并不确切。AER和ACR之间和PER和PCR之间的关系是基于平均肌酐排泄率是约1.0 g/24 h或10 mmol/24h的假设。上表中的换算出于实用的原因被四舍五入(为从mg/g的肌酐准确转换为mg/mmol的肌酐，乘以0.113)。肌酐排泄随着年龄、性别、种族和饮食而变化；因此在这些类别之间的关系仅仅是近似的。ACR < 10 mg/g (<1 mg/mmol)被认为是正常的；ACR 10-30 mg/g (1.0-3 mg/mmol)被认为高度正常(肾脏国际增刊(Kidney International Supplements) (2013), Vol 3, 1期;KDIGO CKD工作组(KDIGO CKD Work group))。

如本文所用的，“药学上可接受的盐”指与碱所成的盐和与酸所成的盐。

可以提及的与氯沙坦和厄贝沙坦相关的药学上可接受的盐是与碱金属，例如钠、钾等所成的盐。

可以提及的与化合物A相关的药学上可接受的盐是化合物A的盐酸盐、富马酸盐、L-酒石酸盐、乙二磺酸盐(edisilate)，乙磺酸盐、氢溴酸盐和甲苯磺酸盐。

“同时”给予(也包括“共同给予(concomitant administration)”)，如本文所用的，意指化合物A或其药学上可接受的盐和厄贝沙坦(氯沙坦、阿齐沙坦、卡托普利)或其药学上可接受的盐二者(a) 以单一剂型同时、共同给予给予需要治疗的哺乳动物(患者)或(b) 以两个分开的剂型，和两个分开的剂型一个紧接一个地给予需要治疗的患者。在本文中，两个分开的剂型被一个紧接一个地给予，如果所述剂型彼此在0和15分钟内给予的话；或更优选彼此在0和10分钟内；或最优选彼此在0和1分钟内。

“依次”给予(也包括“顺序”给予)，如本文所用的，意指化合物A或其药学上可接受的盐以一个剂型给予需要治疗的患者，而厄贝沙坦(氯沙坦、阿齐沙坦、卡托普利)或其药学上可接受的盐以另一个分开的剂型给予需要治疗的哺乳动物(患者)，其中在第一剂型仍对待治疗的患者具有作用时，给予需要治疗的哺乳动物(患者)第二剂型。在本发明的优选的实施方案中，第一和第二剂型以这样一种时间间隔给予，即联合治疗对要治疗的哺乳动物(患者)的作用是协同作用。在本文中，两个分开的剂型被依次给予，如果剂量彼此在超过15分钟和少于6小时内；或更优选在超过15分钟和少于4小时内；或更优选在超过15分钟和少于两个小时内给予的话。

发明详述

本发明提供一种治疗糖尿病性肾病的方法，其包括给予有需要的患者治疗有效量的

a) 某种磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂(单独)或者

b) 某种磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和AT1血管紧张素II受体拮抗剂的组合或者

c) 某种磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和血管紧张素-转化酶抑制剂的组合。

本发明使用的磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂选自5-((2R,4aR,10bR)-9-乙氧基-2-羟基-8-甲氧基-1,2,3,4,4a,10b-六氢-菲啶-6-基)-1-甲基-1H-吡啶-2-酮及其药学上可接受的盐。

为便于在贯穿本说明书和权利要求书中多次阅读，5-((2R,4aR,10bR)-9-乙氧基-2-羟基-8-甲氧基-1,2,3,4,4a,10b-六氢-菲啶-6-基)-1-甲基-1H-吡啶-2-酮的化学名由措辞“化合物A”替代。

化合物A公开于美国专利8,324,391中，其通过引用以其整体结合到本文中。

化合物A的药学上可接受的盐公开于US2013/096152中，其也通过引用以其整体结合到本文中。可以提及的化合物A的药学上可接受的盐的实例是化合物A的盐酸盐、富马酸盐、L-酒石酸盐、乙二磺酸盐、乙磺酸盐、氢溴酸盐和甲苯磺酸盐。化合物A优选地以其游离形式而非其药学上可接受的盐的形式使用。

化合物A可如在美国专利8,324,391中所公开的合成。

本发明所用的AT₁血管紧张素II受体拮抗剂优选地选自厄贝沙坦、厄贝沙坦的药学上可接受的盐、氯沙坦、氯沙坦的药学上可接受的盐、阿齐沙坦和阿齐沙坦的药学上可接受的盐。

厄贝沙坦的化学名是2-丁基-3-[p-(o-1H-四唑-5-基苯基)苄基]-1,3-二氮杂螺[4.4]壬-1-烯-4-酮。

厄贝沙坦及其合成方法公开于美国专利5,270,317中，其通过引用以其整体结合到本文中。厄贝沙坦的各种片剂制剂公开于美国专利6,342,247中，其通过引用以其整体完全结合到本文中。

可以提及的厄贝沙坦的药学上可接受的盐的实例是厄贝沙坦的钠盐、钾盐、盐酸盐和氢溴酸盐。

氯沙坦的化学名是2-丁基-4-氯-1-[p-(o-1H-四唑-5-基苯基)苄基]咪唑-5-甲醇。

氯沙坦及其合成方法公开于美国专利5,138,069中，其通过引用以其整体结合到本文中。特别优选的氯沙坦的药学上可接受的盐是氯沙坦钾。

氯沙坦的多晶型及其制剂公开于美国专利5,608,075中，其通过引用以其整体结合到本文中。

氯沙坦钾的片剂制剂例如公开于EP2392318、WO03/35039和WO89/06233中。

阿齐沙坦的化学名是2-乙氧基-1-{[2'-(5-氧代-4,5-二氢-1,2,4-噁唑-3-基)联苯基-4-基]甲基}-1H-苯并咪唑-7-甲酸。

阿齐沙坦优选地以前药阿齐沙坦奥美沙坦酯(azilsartan medoxomil)的形式给予，其在吸收期间在胃肠道中被水解为阿齐沙坦。

阿齐沙坦奥美沙坦酯及其合成方法公开于美国专利7,157,584和7,572,920中，其通过引用以其整体结合到本文中。优选的阿齐沙坦奥美沙坦酯的药学上可接受的盐是阿齐沙坦奥美沙坦酯钾。

阿齐沙坦奥美沙坦酯的片剂制剂公开于例如美国专利7,572,920中。

卡托普利的化学名是1-[(2S)-3-巯基-2-甲基丙酰基]-L-脯氨酸。

卡托普利及其合成方法公开于例如德国专利DE2703828中。

在几个体外和体内(动物)实验中，现在已发现化合物A不仅显示出对治疗2型糖尿病相关的参数(例如降低HbA1c和降低体重)强烈的改善作用，而且还显示出对治疗糖尿病性肾病相关的参数(例如降低尿白蛋白/肌酐比率和在源自肾的细胞系中抗-纤维化作用)强烈的改善作用。

相信在动物实验中观察到的这些作用将转化为在人类临床环境中的相应的效果。

在第一方面，本发明涉及一种治疗糖尿病性肾病的方法，其包括给予有需要的哺乳动物(患者)治疗有效量的磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂，其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂选自化合物A及其药学上可接受的盐。

AT₁血管紧张素II受体拮抗剂厄贝沙坦和氯沙坦二者除了被批准治疗高血压外，还用于治疗糖尿病性肾病。因此，例如，在美国对厄贝沙坦(氯沙坦)批准的适应症和用法的措辞提及厄贝沙坦(氯沙坦；以氯沙坦钾的形式)适合在具有2型糖尿病和高血压史的患者中治疗伴有升高的血清肌酐和蛋白尿(尿白蛋白与肌酐比率≥ 300 mg/g)的糖尿病性肾病。

血管紧张素-转化酶抑制剂卡托普利也被批准除了治疗高血压外，还用于治疗糖尿病性肾病。在美国对卡托普利批准的适应症和用法的措辞提及卡托普利适合在患有1型胰岛素-依赖性糖尿病和视网膜病的患者中治疗糖尿病性肾病(蛋白尿 >500 mg/天)。

磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和AT1血管紧张素II受体拮抗剂(血管紧张素-转化酶抑制剂)经由不同的作用机理起作用；由于糖尿病性肾病是多因素疾病，相信通过利用这些不同类型的化合物的两种作用机理，糖尿病性肾病的甚至更有效的治疗可以实现。

进一步相信这些类型的化合物的不同作用机理之间存在着相互作用，其导致共同给予化合物A (或其药学上可接受的盐)与或者厄贝沙坦、氯沙坦、阿齐沙坦或者卡托普利(或这些化合物的任何一个的药学上可接受的盐)在糖尿病性肾病的治疗中的协同作用。

共同给予化合物A (或其药学上可接受的盐)与或者厄贝沙坦、氯沙坦、阿齐沙坦或者卡托普利(或这些化合物的任何一个的药学上可接受的盐)的协同作用可允许减少活性化合物的一个或两个的剂量，同时仍获得临床效果，从而减少给予这些化合物的一个或两个所见到的不利作用的发生率和/或严重性。

已经发现的与给予厄贝沙坦/氯沙坦钾/阿齐沙坦奥美沙坦酯钾相关的副作用是例如腹泻、消化不良/胃灼热、疲劳和头昏眼花。

给予磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂通常见到的可能的副作用，包括腹泻、恶心、头痛、背痛、流感、失眠和头昏眼花。

在第二方面，本发明涉及一种治疗糖尿病性肾病的方法，其包括给予有需要的哺乳动物(患者)治疗有效量的磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂的组合，其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂选自化合物A及其药学上可接受的盐和其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂选自厄贝沙坦、厄贝沙坦的药学上可接受的盐、氯沙坦、氯沙坦的药学上可接受的盐、阿齐沙坦和阿齐沙坦的药学上可接受的盐。

在本发明第一和第二方面的优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A。

在本发明第二方面的优选的实施方案中，AT₁血管紧张素II受体拮抗剂选自厄贝沙坦及其药学上可接受的盐。

在本发明第二方面的另一个优选的实施方案中，AT₁血管紧张素II受体拮抗剂选自氯沙坦和氯沙坦的药学上可接受的盐。

在本发明第二方面的另一个优选的实施方案中，AT₁血管紧张素II受体拮抗剂选自阿齐沙坦和阿齐沙坦的药学上可接受的盐。

在本发明第二方面的另一个优选的实施方案中，AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是厄贝沙坦。

在本发明第二方面的另一个优选的实施方案中，AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是氯沙坦钾。

在本发明第二方面的另一个优选的实施方案中，AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是阿齐沙坦。

在本发明第二方面的另一个优选的实施方案中，AT1血管紧张素II受体拮抗剂是阿齐沙坦或其药学上可接受的盐，且阿齐沙坦或其药学上可接受的盐以阿齐沙坦奥美沙坦酯钾的形式被给予哺乳动物(患者)。

在本发明第二方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A，而AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是厄贝沙坦。

在本发明第二方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A，而AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是氯沙坦钾。

在本发明第二方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A，而AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是阿齐沙坦。

在本发明第二方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A，而AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是阿齐沙坦或其药学上可接受的盐，和阿齐沙坦或其药学上可接受的盐以阿齐沙坦奥美沙坦酯钾的形式被给予哺乳动物(患者)。

磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和AT1血管紧张素II受体拮抗剂的组合以药用组合物的形式或者同时或者依次给予需要治疗的哺乳动物(患者)。

在第三方面，本发明因此涉及药用组合物，其包含

(1)磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂与

(2)AT₁血管紧张素II受体拮抗剂的组合，和

(3)至少一种药学上可接受的载体，

其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂选自化合物A及其药学上可接受的盐，

和其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂选自厄贝沙坦、厄贝沙坦的药学上可接受的盐、氯沙坦、氯沙坦的药学上可接受的盐、阿齐沙坦和阿齐沙坦的药学上可接受的盐。

药用组合物可或者是(a) 包含磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂二者的单一剂型或者作为选择的(b) 两个分开的剂型，其中一个包含磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂，而另外一个包含AT₁血管紧张素II受体拮抗剂。

单一剂型被用来同时、共同给予组合的两种化合物，而两个分开的剂型可被用来或者同时、共同给予(一个接一个给予)或者依次给予所述组合的两个化合物。

在本发明的优选的实施方案中，措辞“药用组合物”与两种化合物的组合联系时，指包含两种化合物的单一剂型。

在本发明第三方面的一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A。

在本发明第三方面的另一个优选的实施方案中，AT₁血管紧张素II受体拮抗剂选自厄贝沙坦和厄贝沙坦的药学上可接受的盐。

在本发明第三方面的另一个优选的实施方案中，AT₁血管紧张素II受体拮抗剂选自氯沙坦和氯沙坦的药学上可接受的盐。

在本发明第三方面的另一个优选的实施方案中，AT₁血管紧张素II受体拮抗剂选自阿齐沙坦及其药学上可接受的盐。

在本发明第三方面的另一个优选的实施方案中，AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是厄贝沙坦。

在本发明第三方面的另一个优选的实施方案中，AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是氯沙坦钾。

在本发明第三方面的另一个优选的实施方案中，AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是阿齐沙坦。

在本发明第三方面的另一个优选的实施方案中，AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是阿齐沙坦或其药学上可接受的盐，且阿齐沙坦或其药学上可接受的盐以阿齐沙坦奥美沙坦酯钾的形式被给予哺乳动物(患者)。

在本发明第三方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A，而AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是厄贝沙坦。

在本发明第三方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A，而AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是氯沙坦钾。

在本发明第三方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A，而AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是阿齐沙坦。

在本发明第三方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A，而AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是阿齐沙坦或其药学上可接受的盐，且阿齐沙坦或其药学上可接受的盐以阿齐沙坦奥美沙坦酯钾的形式被给予哺乳动物(患者)。

在第四方面，本发明涉及一种治疗糖尿病性肾病的方法，其包括给予有需要的哺乳动物(患者)治疗有效量的磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和血管紧张素-转化酶抑制剂的组合，其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂选自化合物A及其药学上可接受的盐和其中血管紧张素-转化酶抑制剂选自卡托普利和卡托普利的药学上可接受的盐。

在本发明第四方面的一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A。

在本发明第四方面的另一个优选的实施方案中，血管紧张素-转化酶抑制剂是卡托普利。

在本发明第四方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A和血管紧张素-转化酶抑制剂是卡托普利。

磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和血管紧张素-转化酶抑制剂的组合也以药用组合物的形式同时或者依次给予需要治疗的哺乳动物(患者)。

在第五方面，本发明因此涉及药用组合物，其包含

(a) 磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂与

(b) 血管紧张素-转化酶抑制剂的组合，和

(c) 至少一种药学上可接受的载体，

其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂选自化合物A及其药学上可接受的盐，

和其中血管紧张素-转化酶抑制剂选自卡托普利和卡托普利的药学上可接受的盐。

药用组合物可或者是(a) 包含磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和血管紧张素-转化酶抑制剂二者的单一剂型或者备选地是(b) 两个分开的剂型，其中一个包含磷酸二酯酶4(PDE4)抑制剂和另外一个包含血管紧张素-转化酶抑制剂。

单一剂型被用来同时、共同给予组合中的两种化合物，而两个分开的剂型可被用来或者同时, 共同给予(一个接一个给予)或者依次给予所述组合的两种化合物。

在本发明的一个优选的实施方案，措辞“药用组合物”与两种化合物的组合联系时，指包含两种化合物的单一剂型。

在本发明第五方面的一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A。

在本发明第五方面的另一个优选的实施方案中，血管紧张素-转化酶抑制剂选自卡托普利和卡托普利的药学上可接受的盐。

在本发明第五方面的另一个优选的实施方案中，血管紧张素-转化酶抑制剂是卡托普利。

在本发明第五方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A，而血管紧张素-转化酶抑制剂是卡托普利。

在本发明第一、第二和第四方面的另一个优选的实施方案中，罹患糖尿病性肾病的哺乳动物是具有白蛋白排泄率在30-300 mg/24h的范围内的人。

在本发明第一、第二和第四方面的另一个优选的实施方案中，罹患糖尿病性肾病的哺乳动物是具有300 mg/24h以上的白蛋白排泄率的人。

在本发明第一、第二和第四方面的另一个优选的实施方案中，罹患糖尿病性肾病的哺乳动物是具有白蛋白/肌酐比率在30-300mg/g范围内的人。

在本发明第一、第二和第四方面的另一个优选的实施方案中，罹患糖尿病性肾病的哺乳动物是具有300 mg/g以上的白蛋白/肌酐比率的人。

在本发明第一、第二和第四方面的另一个优选的实施方案中，罹患糖尿病性肾病的哺乳动物是被诊断患有高血压和2型糖尿病的人。

在本发明第一、第二和第四方面的另一个优选的实施方案中，罹患糖尿病性肾病的哺乳动物是(a) 具有白蛋白排泄率在30 -300 mg/24h的范围内和(b) 被诊断患有高血压和2型糖尿病的人。

在本发明第一、第二和第四方面的另一个优选的实施方案中，罹患糖尿病性肾病的哺乳动物是(a) 具有300 mg/24h以上的白蛋白排泄率和(b) 被诊断患有高血压和2型糖尿病的人。

在本发明第一、第二和第四方面的另一个优选的实施方案中，罹患糖尿病性肾病的哺乳动物是(a) 具有白蛋白/肌酐比率在30-300mg/g的范围和(b) 被诊断患有高血压和2型糖尿病的人。

在本发明第一、第二和第四方面的另一个优选的实施方案中，罹患糖尿病性肾病的哺乳动物是(a) 具有300mg/g以上的白蛋白/肌酐比率和(b) 被诊断患有高血压和2型糖尿病的人。

单一疗法

在一个方面，本发明提供一种治疗糖尿病性肾病的方法，其包括给予需要治疗的哺乳动物(患者)化合物A或其药学上可接受的盐。化合物A或其药学上可接受的盐可通过各种给予途径给予。给药可以是例如，口服、胃肠外或经皮。优选的给药途径是口服。

用于单一疗法的优选的剂型是口服剂型。合适的口服剂型包括片剂、胶囊、散剂、丸剂、溶液剂、混悬液、乳剂、糊剂和颗粒剂。最优选的口服剂型是片剂。

组合疗法

作为对单一疗法的替代选择，化合物A或其药学上可接受的盐和厄贝沙坦、厄贝沙坦的药学上可接受的盐、氯沙坦、氯沙坦的药学上可接受的盐、阿齐沙坦、阿齐沙坦的药学上可接受的盐、卡托普利或卡托普利的药学上可接受的盐的组合可被用于糖尿病性肾病的治疗。

对于组合疗法，化合物A或其药学上可接受的盐可与厄贝沙坦(氯沙坦、阿齐沙坦、卡托普利)或其药学上可接受的盐同时、共同或依次给予。化合物A或其药学上可接受的盐可与厄贝沙坦(氯沙坦、阿齐沙坦、卡托普利)或其药学上可接受的盐通过相同或不同的给药途径共同给予。化合物A或其药学上可接受的盐可与厄贝沙坦(氯沙坦、阿齐沙坦、卡托普利)或其药学上可接受的盐在相同或不同的制剂中共同给予，包括，但不限于：

a) 单一口服剂型，其包含1) 化合物A或其药学上可接受的盐和2) 厄贝沙坦(氯沙坦、阿齐沙坦、卡托普利)或其药学上可接受的盐；

b) 两个分开的口服剂型，其中一个口服剂型含有化合物A或其药学上可接受的盐，和其它口服剂型含有厄贝沙坦(氯沙坦、阿齐沙坦、卡托普利)或其药学上可接受的盐；

c) 单一经皮剂型，其包含1) 化合物A或其药学上可接受的盐和2) 厄贝沙坦(氯沙坦、阿齐沙坦、卡托普利)或其药学上可接受的盐；

d) 两个分开的经皮剂型，其中一个经皮剂型含有化合物A或其药学上可接受的盐，而另一个经皮剂型含有厄贝沙坦(氯沙坦、阿齐沙坦、卡托普利)或其药学上可接受的盐；

e) 单一静脉剂型，其包含1) 化合物A或其药学上可接受的盐和2) 厄贝沙坦(氯沙坦、阿齐沙坦、卡托普利)或其药学上可接受的盐；

f) 两个分开的静脉剂型，其中一个静脉剂型含有化合物A或其药学上可接受的盐，而另一个静脉剂型含有厄贝沙坦(氯沙坦、阿齐沙坦、卡托普利)或其药学上可接受的盐；

g) 两个分开的剂型，其中第一剂型含有化合物A或其药学上可接受的盐，而第二剂型含有厄贝沙坦(氯沙坦、阿齐沙坦、卡托普利)或其药学上可接受的盐，且其中第一和第二剂型通过不同的给药途径给予。

优选的剂型是提供给予1) 化合物A或其药学上可接受的盐和2) 厄贝沙坦(氯沙坦、阿齐沙坦、卡托普利)或其药学上可接受的盐的单一口服剂型。合适的口服剂型包括片剂、胶囊、散剂、丸剂、溶液剂、混悬液、乳剂、糊剂和颗粒剂。最优选的口服剂型包括片剂，各个片剂包含1) 化合物A或其药学上可接受的盐和2) 厄贝沙坦(氯沙坦、阿齐沙坦、卡托普利)或其药学上可接受的盐二者。

如果化合物A或其药学上可接受的盐和厄贝沙坦(氯沙坦、阿齐沙坦、卡托普利)或其药学上可接受的盐不在相同剂型中给予，则各活性成分可在其它活性成分之前或之后给予。

剂量信息

单一疗法

化合物A或其药学上可接受的盐可每日1次、每日2次、一天3次或一天4次给予。每日1次给予是特别优选的且可能是最好在早上或晚上进行。

化合物A可以任何量存在于打算每日1次给予的口服剂型中，所述量为从0.05 mg至1.0 mg，例如，但不限于0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45、0.5、0.6、0.7、0.75、0,8、0.9或1.0 mg；更优选为从0.05 mg至0.5 mg的任何量，例如，但不限于0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45或0.5 mg。

如果打算用每日2次给药代替每日1次给药，则上面指定的化合物A的量可除以二。

化合物A的药学上可接受的盐的相应量可容易地由普通技术人员，根据各自的盐的选择来计算。

组合疗法

化合物A或其药学上可接受的盐与厄贝沙坦或其药学上可接受的盐、氯沙坦或其药学上可接受的盐、阿齐沙坦或其药学上可接受的盐、或卡托普利或其药学上可接受的盐的任一种组合可每日1次，或一天2次、3次或4次共同给予。

在化合物A或其药学上可接受的盐与厄贝沙坦(氯沙坦、阿齐沙坦)或其药学上可接受的盐组合的情况下，每日1次共同给予是特别优选的。每日1次共同给予可能最好在早上或晚上进行。

在化合物A或其药学上可接受的盐与卡托普利或其药学上可接受的盐组合的情况下，一天3次共同给予是优选的。

用于每日1次共同给予化合物A或其药学上可接受的盐和厄贝沙坦(氯沙坦、阿齐沙坦、卡托普利)或其药学上可接受的盐的组合的口服剂型，可或者呈现为这样的形式：

a) 含有化合物A或其药学上可接受的盐和厄贝沙坦(氯沙坦、阿齐沙坦、卡托普利)或其药学上可接受的盐二者的单一口服剂型

或者呈现为这样的形式：

b) 两个分开的口服剂型，其中一个剂型含有化合物A或其药学上可接受的盐和其它剂型含有厄贝沙坦(氯沙坦、阿齐沙坦、卡托普利)或其药学上可接受的盐)。

厄贝沙坦可以从约75 mg至约300 mg，例如75 mg、150 mg、225 mg和300 mg的任何量存在。

氯沙坦优选地以其钾盐氯沙坦钾的形式使用。氯沙坦钾可以从约50 mg至约100mg的任何量存在。

阿齐沙坦优选地以前药阿齐沙坦奥美沙坦酯钾的形式使用。阿齐沙坦奥美沙坦酯钾可以从20至80 mg，例如20 mg、40 mg和80 mg的任何量存在。假使阿齐沙坦原样使用，而不是以阿齐沙坦奥美沙坦酯钾的形式使用，阿齐沙坦可以从10 mg至80 mg，例如10 mg、20mg、40 mg和80 mg的任何量存在。

卡托普利可以从12.5 mg至100 mg，例如12.5 mg、25 mg、50 mg和100 mg的任何量存在，用于糖尿病性肾病的长期治疗的优选的量是25 mg，一天3次。

化合物A可以从0.05 mg至1.0 mg的任何量存在，例如，但不限于0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45、0.5、0.6、0.7、0.75、0.8、0.9或1.0 mg；更优选以从0.05 mg至0.5 mg的任何量存在，例如，但不限于0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45或0.5 mg。

化合物A和厄贝沙坦在打算每日1次共同给予成人患者的口服剂型中的量可分别选自0.05 mg/75 mg；0.1 mg/75 mg；0.15 mg/75 mg；0.2 mg/75 mg；0.25 mg/75 mg；0.3mg/75 mg；0.35 mg/75 mg；0.4 mg/75 mg；0.45 mg/75 mg；0.5 mg/75 mg；0.6 mg/75 mg；0.7 mg/75 mg；0.75 mg/75 mg；0.8 mg/75 mg；0.9 mg/75 mg；1.0 mg/75 mg；0.05 mg/150mg；0.1 mg/150 mg；0.15 mg/150 mg；0.2 mg/150 mg；0.25 mg/150 mg；0.3 mg/150 mg；0.35 mg/150 mg；0.4 mg/150 mg；0.45 mg/150 mg；0.5 mg/150 mg；0.6 mg/150 mg；0.7mg/150 mg；0.75 mg/150 mg；0.8 mg/150 mg；0.9 mg/150 mg；1.0 mg/ 150 mg；0.05 mg/300 mg；0.1 mg/225 mg；0.15 mg/225 mg；0.2 mg/225 mg；0.25 mg/225 mg；0.3 mg/225mg；0.35 mg/225 mg；0.4 mg/225 mg；0.45 mg/225 mg；0.5 mg/225 mg；0.6 mg/225 mg；0.7 mg/225 mg；0.75 mg/225 mg；0.8 mg/225 mg；0.9 mg/225 mg；1.0 mg/225 mg；0.1mg/300 mg；0.15 mg/300 mg；0.2 mg/300 mg；0.25 mg/300 mg；0.3 mg/300 mg；0.35 mg/300 mg；0.4 mg/300 mg；0.45 mg/300 mg；0.5 mg/300 mg；0.6 mg/300 mg；0.7 mg/300mg；0.75 mg/300 mg；0.8 mg/300 mg；0.9 mg/300 mg；和1.0 mg/300 mg (化合物A的量/厄贝沙坦的量)。

化合物A和氯沙坦钾在打算每日1次共同给予成人患者的口服剂型中的量可分别选自0.05 mg/50 mg；0.10 mg/50 mg；0.15 mg/50 mg；0.20 mg/50 mg；0.25 mg/50 mg；0.3mg/50 mg；0.35 mg/50 mg；0.4 mg/50 mg；0.45 mg/50 mg；0.5 mg/50 mg；0.6 mg/50 mg；0.7 mg/50 mg；0.75 mg/50 mg；0.8 mg/50 mg；0.9 mg/50 mg；1.0 mg/50 mg；0.05 mg/100mg；0.1 mg/100 mg；0.15 mg/100 mg；0.2 mg/100 mg；0.25 mg/100 mg；0.3 mg/100 mg；0.35 mg/100 mg；0.4 mg/100 mg；0.45 mg/100 mg；0.5 mg/100 mg；0.6 mg/100 mg；0.7mg/100 mg；0.75 mg/100 mg；0.8 mg/100 mg；0.9 mg/100 mg；和1.0 mg/100 mg (化合物A的量/氯沙坦钾的量)。

化合物A和阿齐沙坦奥美沙坦酯钾在打算每日1次共同给予成人患者的口服剂型中的量可分别选自0.05 mg/20 mg；0.10 mg/20 mg；0.15 mg/20 mg；0.20 mg/20 mg；0.25mg/20 mg；0.3 mg/20 mg；0.35 mg/20 mg；0.4 mg/20 mg；0.45 mg/20 mg；0.5 mg/20 mg；0.6 mg/20 mg；0.7 mg/20 mg；0.75 mg/20 mg；0.8 mg/20 mg；0.9 mg/20 mg；1.0 mg/20mg；0.05 mg/40 mg；0.10 mg/40 mg；0.15 mg/40 mg；0.20 mg/40 mg；0.25 mg/40 mg；0.3mg/40 mg；0.35 mg/40 mg；0.4 mg/40 mg；0.45 mg/40 mg；0.5 mg/40 mg；0.6 mg/40 mg；0.7 mg/40 mg；0.75 mg/40 mg；0.8 mg/40 mg；0.9 mg/40 mg；1.0 mg/40 mg；0.05 mg/80mg；0.1 mg/80 mg；0.15 mg/80 mg；0.2 mg/80 mg；0.25 mg/80 mg；0.3 mg/80 mg；0.35mg/80 mg；0.4 mg/80 mg；0.45 mg/80 mg；0.5 mg/80 mg；0.6 mg/80 mg；0.7 mg/80 mg；0.75 mg/80 mg；0.8 mg/80 mg；0.9 mg/80 mg；和1.0 mg/80 mg (化合物A的量/阿齐沙坦奥美沙坦酯钾的量)。

化合物A和阿齐沙坦在打算每日1次共同给予成人患者的口服剂型中的量可分别选自0.05 mg/10 mg；0.10 mg/10 mg；0.15 mg/10 mg；0.20 mg/10 mg；0.25 mg/10 mg；0.3mg/10 mg；0.35 mg/10 mg；0.4 mg/10 mg；0.45 mg/10 mg；0.5 mg/10 mg；0.6 mg/10 mg；0.7 mg/10 mg；0.75 mg/10 mg；0.8 mg/10 mg；0.9 mg/10 mg；1.0 mg/10 mg；0.05 mg/20mg；0.10 mg/20 mg；0.15 mg/20 mg；0.20 mg/20 mg；0.25 mg/20 mg；0.3 mg/20 mg；0.35mg/20 mg；0.4 mg/20 mg；0.45 mg/20 mg；0.5 mg/20 mg；0.6 mg/20 mg；0.7 mg/20 mg；0.75 mg/20 mg；0.8 mg/20 mg；0.9 mg/20 mg；1.0 mg/20 mg；0.05 mg/40 mg；0.10 mg/40mg；0.15 mg/40 mg；0.20 mg/40 mg；0.25 mg/40 mg；0.3 mg/40 mg；0.35 mg/40 mg；0.4mg/40 mg；0.45 mg/40 mg；0.5 mg/40 mg；0.6 mg/40 mg；0.7 mg/40 mg；0.75 mg/40 mg；0.8 mg/40 mg；0.9 mg/40 mg；1.0 mg/40 mg；0.05 mg/80 mg；0.1 mg/80 mg；0.15 mg/80mg；0.2 mg/80 mg；0.25 mg/80 mg；0.3 mg/80 mg；0.35 mg/80 mg；0.4 mg/80 mg；0.45mg/80 mg；0.5 mg/80 mg；0.6 mg/80 mg；0.7 mg/80 mg；0.75 mg/80 mg；0.8 mg/80 mg；0.9 mg/80 mg；和1.0 mg/80 mg (化合物A的量/阿齐沙坦的量)。

化合物A和卡托普利在打算每日3次共同给予成人患者的口服剂型中的量可分别选自0.05 mg/25 mg；0.10 mg/25 mg；0.15 mg/25 mg；0.20 mg/25 mg；0.25 mg/25 mg；0.3mg/25 mg和0.35 mg/25 mg；(化合物A的量/卡托普利的量)。

如果打算以每日2次共同给予代替每日1次共同给予，则上面化合物A和厄贝沙坦(氯沙坦、阿齐沙坦)的指定的量可除以2。

化合物A和/或厄贝沙坦(氯沙坦、阿齐沙坦、卡托普利)的药学上可接受的盐的相应量可容易地由普通技术人员，根据各自的盐的选择来计算。

氯沙坦或其它盐的对应的量比氯沙坦钾可更容易地由普通技术人员计算。氯沙坦钾50 mg含有4.24 mg的量的钾；氯沙坦钾100 mg含有8.48 mg的量的钾。

在本发明第一方面的另一个优选的实施方案中，化合物A以在0.05 mg和1 mg之间(更优选在0.05 mg和0.5 mg之间)的日剂量给予或化合物A的药学上可接受的盐以对应于0.05 mg和1.0 mg之间(更优选在0.05 mg和0.5 mg之间)的化合物A日剂量的日剂量给予。

在本发明第一方面的另一个优选的实施方案中，化合物A以选自0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45和0.5 mg的日剂量给予或化合物A的药学上可接受的盐以对应于选自0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45和0.5 mg的化合物A日剂量的日剂量给予。

在本发明第二方面的另一个优选的实施方案中，化合物A以在0.05 mg和1 mg之间的日剂量给予或化合物A的药学上可接受的盐以对应于0.05 mg和1.0 mg之间的化合物A日剂量的日剂量给予，而厄贝沙坦以在75 mg和300 mg之间的日剂量给予或厄贝沙坦的药学上可接受的盐以对应于75 mg和300 mg之间的厄贝沙坦日剂量的日剂量给予。

在本发明第二方面的另一个优选的实施方案中，化合物A以选自0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45和0.5 mg的日剂量给予或化合物A的药学上可接受的盐以对应于选自0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45和0.5 mg的化合物A日剂量的日剂量给予，而厄贝沙坦以选自75 mg、150 mg、225 mg和300 mg的日剂量给予或厄贝沙坦的药学上可接受的盐以对应于选自75 mg、150 mg、225 mg和300 mg的厄贝沙坦日剂量的日剂量给予。

在本发明第二方面的另一个优选的实施方案中，化合物A以在0.05 mg和1.0 mg之间的日剂量给予或化合物A的药学上可接受的盐以对应于0.05 mg和1.0 mg之间的化合物A日剂量的日剂量给予，而氯沙坦钾以在50 mg和100 mg之间的日剂量给予或氯沙坦或氯沙坦的另一种药学上可接受的盐以对应于50 mg和100 mg之间的氯沙坦钾日剂量的日剂量给予。

在本发明第二方面的另一个优选的实施方案中，化合物A以选自0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45和0.5 mg的日剂量给予或化合物A的药学上可接受的盐以对应于选自0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45和0.5 mg的化合物A日剂量的日剂量给予，而氯沙坦钾以选自50 mg和100 mg的日剂量给予或氯沙坦或氯沙坦的另一种药学上可接受的盐以对应于选自50 mg和100 mg的氯沙坦钾日剂量的日剂量给予。

在本发明第二方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂以一个单一剂型给予。

在发明第二方面的一个特别优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂以一个单一口服剂型给予。

在本发明第二方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂以两个分开的剂型同时给予。

在本发明第二方面的另一个特别优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂以两个分开的口服剂型同时给予。

在本发明第二方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂以两个分开的剂型依次给予。

在本发明第二方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂以两个分开的口服剂型依次给予。

在本发明第三方面的优选的实施方案中，药用组合物包含a) 在0.05 mg和1 mg之间的量的化合物A或对应于0.05 mg和1.0 mg之间的化合物A量的量的化合物A的药学上可接受的盐和b) 在75 mg和300 mg之间的量的厄贝沙坦或对应于75 mg和300 mg之间的厄贝沙坦量的量的厄贝沙坦的药学上可接受的盐。

在本发明第三方面的另一个优选的实施方案中，药用组合物包含a) 选自0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45和0.5 mg的量的化合物A或对应于选自0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45和0.5 mg化合物A量的量的化合物A的药学上可接受的盐和b) 选自75 mg、150 mg、225 mg和300 mg的量的厄贝沙坦或对应于选自75 mg、150 mg、225 mg和300 mg的厄贝沙坦量的量的厄贝沙坦的药学上可接受的盐。

在本发明第三方面的另一个优选的实施方案中，药用组合物包含a) 在0.05 mg和1.0 mg之间的量的化合物A或对应于0.05 mg和1.0 mg之间量的化合物A的量的化合物A的药学上可接受的盐和b) 在50 mg和100 mg之间的量的氯沙坦钾或对应于50 mg和100 mg之间的氯沙坦钾量的量的氯沙坦或氯沙坦的另一种药学上可接受的盐。

在本发明第三方面的另一个优选的实施方案中，药用组合物包含a) 选自0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45和0.5 mg的量的化合物A或对应于选自0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45和0.5 mg的化合物A量的量的化合物A的药学上可接受的盐和b) 选自50 mg和100 mg的量的氯沙坦钾或对应于选自50 mg和100 mg的氯沙坦钾量的量的氯沙坦或氯沙坦的另一种药学上可接受的盐。

在本发明第三方面的另一个优选的实施方案中，药用组合物包含a) 在0.05 mg和1.0 mg之间的量的化合物A或对应于0.05 mg和1.0 mg之间的化合物A量的量的化合物A的药学上可接受的盐和b) 在20 mg和80 mg之间的量的阿齐沙坦奥美沙坦酯钾或对应于20mg和80 mg之间的阿齐沙坦奥美沙坦酯钾量的量的阿齐沙坦奥美沙坦酯或阿齐沙坦奥美沙坦酯的另一种药学上可接受的盐。

在本发明第三方面的另一个优选的实施方案中，药用组合物包含a) 选自0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45和0.5 mg的量的化合物A或对应于选自0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45和0.5 mg的化合物A量的量的化合物A的药学上可接受的盐和b) 选自20 mg、40 mg和80 mg的量的阿齐沙坦奥美沙坦酯钾或对应于选自20 mg、40mg和80 mg的阿齐沙坦奥美沙坦酯钾量的量的阿齐沙坦奥美沙坦酯或阿齐沙坦奥美沙坦酯的另一种药学上可接受的盐。

在本发明第三方面的另一个优选的实施方案中，药用组合物包含a) 在0.05 mg和1.0 mg之间的量的化合物A或对应于0.05 mg和1.0 mg之间的化合物A量的量的化合物A的药学上可接受的盐和b) 在10 mg和80 mg之间的量的阿齐沙坦或对应于10 mg和80 mg之间的阿齐沙坦量的量的阿齐沙坦的药学上可接受的盐。

在本发明第三方面的另一个优选的实施方案中，药用组合物包含a) 选自0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45和0.5 mg的量的化合物A或对应于选自0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4、0.45和0.5 mg的化合物A量的量的化合物A的药学上可接受的盐和b) 选自10 mg、20 mg、40 mg和80 mg的量的阿齐沙坦或对应于选自10 mg、20 mg、40mg和80 mg的阿齐沙坦量的量的阿齐沙坦的药学上可接受的盐。

在本发明第三方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂呈现为一个单一剂型。

在本发明第三方面的特别优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂呈现为一个单一口服剂型。

在本发明第三方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂呈现为两个分开的剂型。

在本发明第三方面的另一个特别优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂呈现为两个分开的口服剂型。

在本发明第三方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂呈现为两个分开的(口服)剂型，且两个分开的(口服)剂型被同时给予。

在本发明第三方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂呈现为两个分开的(口服)剂型，且两个分开的(口服)剂型被依次给予。

在本发明第四方面的另一个优选的实施方案中，化合物A以在0.05 mg和1 mg之间的日剂量给予或化合物A的药学上可接受的盐以对应于0.05 mg和1.0 mg之间的化合物A日剂量的日剂量给予，而卡托普利以75 mg (一天3次，每次25 mg)的日剂量给予或卡托普利的药学上可接受的盐以对应于75 mg (一天3次，每次25 mg)的卡托普利日剂量的日剂量给予。

在本发明第四方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和血管紧张素-转化酶抑制剂以一个单一剂型给予。

在本发明第四方面的一个特别优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和血管紧张素-转化酶抑制剂以一个单一口服剂型给予。

在本发明第四方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和血管紧张素-转化酶抑制剂以两个分开的剂型同时给予。

在本发明第四方面的另一个特别优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和血管紧张素-转化酶抑制剂以两个分开的口服剂型同时给予。

在本发明第四方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和血管紧张素-转化酶抑制剂以两个分开的剂型依次给予。

在本发明第四方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和血管紧张素-转化酶抑制剂以两个分开的口服剂型依次给予。

在本发明第五方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和血管紧张素-转化酶抑制剂呈现为一个单一剂型。

在本发明第五方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和血管紧张素-转化酶抑制剂呈现为一个单一口服剂型。

在本发明第五方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和血管紧张素-转化酶抑制剂呈现为两个分开的剂型。

在本发明第五方面的另一个特别优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和血管紧张素-转化酶抑制剂呈现为两个分开的口服剂型。

在本发明第五方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和血管紧张素-转化酶抑制剂呈现为两个分开的(口服)剂型，且两个分开的(口服)剂型被同时给予。

在本发明第五方面的另一个优选的实施方案中，磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和血管紧张素-转化酶抑制剂呈现为两个分开的(口服)剂型，且两个分开的(口服)剂型被依次给予。

药物制剂和剂型

当用作药物时，本发明的化合物(PDE4抑制剂、AT₁血管紧张素II受体拮抗剂、血管紧张素-转化酶抑制剂或这些化合物的任何一个的药学上可接受的盐在本说明书中统称为“本发明的化合物”)可以药用组合物的形式给予。这些药用组合物可以制药领域熟知的方式制备并可通过各种途径给予。给药可以是经肺(例如，通过散剂或气溶胶的吸入或吹入，包括通过喷雾器、气管内、鼻内、表皮和经皮)、口服或胃肠外。胃肠外给予包括静脉、皮下、腹膜内或肌内注射，或输注。胃肠外给予可以是单一大剂量的形式或例如，可通过一个连续灌注泵。用于局部给予的药用组合物和制剂可包括：经皮贴剂；传统药物载体；水性、粉末或油性基质；增稠剂和/或可能是必须或需要的类似物。

本发明也包括含有与一或多种药学上可接受的载体组合的、作为活性成分的一个或多个本发明化合物的药用组合物。本领域已知的药学上可接受的载体可被使用。在制备本发明的药用组合物中，活性成分通常与赋形剂混合，用赋形剂稀释或以例如，胶囊、小袋、纸，或其它容器的形式被封装在这样一种载体内。当赋形剂用作稀释剂时，它可以是固体、半-固体，或液体材料，其用作活性成分的介质、载体或媒介。因此，药用组合物可呈现为片剂、丸剂、散剂、含片、袋剂、药包(cachets)、酏剂、混悬液、乳剂、溶液剂、糖浆剂、气溶胶(作为固体或在液体媒介中)、软和硬明胶胶囊、栓剂、无菌可注射溶液，和无菌包装散剂的形式。

药用组合物可以单位剂型配制，各个剂量包含一定量的如上所述的各个活性成分。术语"单位剂型"指适合作为用于人类受试者和其它哺乳动物的单一剂量的物理离散单位，各单位包含与合适的药用赋形剂混合的、经计算产生所需治疗作用的预定量的活性成分。

本发明的化合物在宽的剂量范围内可以是有效的且一般以治疗有效量给予。然而，应该理解化合物实际给予的量通常地由临床医师根据相关的情况，包括要治疗的病症，选择的给药途径，给予的实际化合物，个体患者的年龄、体重，和反应，患者症状的严重性等决定。

临床前研究

1) 化合物A对单侧肾切除后的db/db小鼠的糖尿病性肾病的效果(8周化合物A治疗，从单侧肾切除术后4周开始)

雄性5-周龄BKS.Cg-+Lepr^db/+Lepr^db (db/db)小鼠购自CLEA Japan, Inc。全部小鼠用标准食物(CE-2、CLEA Japan, Inc.)喂饲并自由饮用自来水。

化合物A从Takeda GmbH, Konstanz, Germany获得。厄贝沙坦从LKTLaboratories, Inc (USA)购得。

实验方案

在6周龄雄性db/db小鼠中执行单侧肾切除术。在用异氟烷吸入麻醉下，从小鼠除去右肾。4-周恢复期后，通过面部静脉穿刺获得血样，且糖基化血红蛋白的血液水平(GHb)通过自动HPLC-基GHb分析仪(HLC-723 G8, TOSOH, Japan)测量。通过离心血浆样本分离后，葡萄糖(PG)的血浆水平也通过自动分析仪7180 (Autoanalyzer 7180) (Hitachi, Japan)测量。使用代谢笼收集尿样8 h时段并用自动分析仪7180 (Autoanalyzer 7180)测量尿肌酐水平。尿样用PD MiniTrap G-25柱(GE healthcare, UK)脱盐后，尿白蛋白水平用ELISA测量，并计算尿白蛋白/肌酐比率(UACR)。

使化合物A (1、3和10 mg/kg, QD)、罗氟司特(3 mg/kg, QD)和厄贝沙坦(50 mg/kg, QD)悬浮于0.5%甲基纤维素溶液中并在单侧肾切除术后4周开始口服给予小鼠8周。

每日1次给予8周后，血、血浆和尿样依据如上所述的相同方法获得。测量GHb、PG、尿肌酐和白蛋白并计算UACR。在治疗期间每周测量体重(BW)。

统计学分析

为评价化合物A的效果，溶媒和化合物A处理组之间的统计学差异用双尾Williams’检验(对PG和BW)和双尾Shirley-Williams’检验(对UACR和GHb)分析。P-值低于0.05被认为在双尾Williams’检验或Shirley-Williams'检验中是统计学显著的。

对于罗氟司特和厄贝沙坦，溶媒-和化合物-处理组之间的统计学差异用Student's t-检验(对GHb, PG和BW)和Welch检验(对UACR)分析。P-值低于0.05被认为在Student'st-检验和Welch检验中是统计学显著的。

结果

尿白蛋白/肌酐比率(UACR)

在溶媒处理组中，在8周治疗期间观察到UACR的进行性增加。化合物A甚至在最低的测试剂量(1 mg/kg)也明显地抑制UACR的增加并在较高的剂量(3和10 mg/kg)几乎完全抑制UACR的增加。

厄贝沙坦(50 mg/kg)，其被用作倾向于抑制UACR的增加的阳性对照，但其作用在实验环境下不是统计学显著的(p=0.0557)。罗氟司特(另一种PDE4抑制剂)在3 mg/kg对UACR的作用也是温和的且不是统计学显著的。总之，化合物A对UACR的抑制作用基于剂量比罗氟司特作用更强(图1)。

糖基化血红蛋白(GHb)和葡萄糖血浆水平(PG)

在实验开始时，单侧肾切除后的db/db小鼠已经显示出高水平的GHb和PG，并且在溶媒组中，GHb和PG二者的水平在8周治疗期间进一步增加。化合物A已从最低测试剂量(1 mg/kg)开始，以剂量-依赖性方式显著地抑制GHb和PG的升高。至于GHb和PG的水平，与溶媒组比较，在罗氟司特(3 mg/kg)和厄贝沙坦(50 mg/kg)处理组中几乎未观察到作用(图2A和2B)。总之，化合物A对GHb和PG的作用基于剂量也比罗氟司特作用更强。

体重

在这个肥胖小鼠模型中，10 mg/kg剂量的化合物A稍稍(但统计学上显著地)抑制体重的增加(图2C)。

2) 化合物A对单侧肾切除后的db/db小鼠(8周化合物A治疗在单侧肾切除术后12周开始)的糖尿病性肾病的影响

实验方案

实验方案类似于上述实验方案，不同的是用化合物A或厄贝沙坦的8周治疗不是在单侧肾切除术后4周开始，而是只在单侧肾切除术后12周开始(即当尿白蛋白/肌酐比率(UACR)的增加已经处于一个更晚期的阶段)。罗氟司特不用作该实验的对比剂。

使化合物A (1、3和10 mg/kg, QD)和厄贝沙坦(50和100 mg/kg, QD)悬浮于0.5%甲基纤维素溶液中并在单侧肾切除术后12周开始口服给予小鼠8周。

统计学分析

为评价化合物A的效果，溶媒和化合物A处理组之间的统计学差异用单尾Williams’检验(对GHB、PG和BW)和单尾Shirley-Williams’检验(对UACR)分析。对于厄贝沙坦，溶媒和厄贝沙坦处理组之间的统计学差异用单尾Williams’检验(对UACR、GHb、PG和BW)分析。P-值低于0.025被认为在单尾Williams’检验或单尾Shirley-Williams'检验中是有统计学显著的。

结果

尿白蛋白/肌酐比率(UACR)

由于在该实验中，8周治疗期仅在单侧肾切除术后12周开始的事实，UACR在8周治疗期之前已经大大高于上述实验中的UACR，其中8周治疗期在单侧肾切除术后4周开始。如同在上述实验中，在溶媒处理的组中，UACR的进行性增加在8周治疗期间被观察到。化合物A不仅在全部3种测试剂量(1、3和10 mg/kg)抑制UACR的增加，而且还在3 mg/kg和10 mg/kg组中减少UACR至低于在8周治疗期开始时的值。UACR增加的抑制在3 mg/kg和10 mg/kg组中是统计学显著的。虽然在厄贝沙坦治疗组中未观察到明显剂量-依赖性，但是化合物也显示在两个测试的剂量中对UACR增加的显著抑制作用(图3)。

糖基化血红蛋白(GHb)和葡萄糖血浆水平(PG)

在实验开始时，单侧肾切除后的db/db小鼠已经显示出高水平的GHb和PG，且这些高水平在溶媒-处理组中，在8周治疗期间分别维持少量的增加。化合物A以剂量-依赖性方式减少GHb和PG，显示出在10 mg/kg的统计学显著作用。厄贝沙坦未显示出对这些血糖参数的抑制作用(图4A和4B)。

体重(BW)

在实验环境中，无论是化合物A还是厄贝沙坦均未影响体重(图4C)。

3) 化合物A对人系膜细胞中促纤维化因子(profibrotic factor)的TGF-β-诱导的mRNA表达的抑制作用

人系膜细胞购自DS Pharma Biomedical (US)。化合物A从Takeda GmbH, Konstanz,Germany购得。毛喉素和二甲亚砜(DMSO)购自Wako Pure Chemical Industries, Ltd(Japan)。重组人TGF-β从R&D系统(USA)购得。

测量的描述

a) 细胞内cAMP水平的测量

在0天，于37℃，在95%空气和5% CO₂的气氛下，将人系膜细胞以2 x 10⁵细胞/孔的细胞密度接种于1型胶原-涂布的24-孔板(AGC TECHNO GLASS Co. Ltd., Japan)上的CSC完全培养基(Cell Systems, USA)中。在第1天，细胞用不含血清和生长因子的CSC培养基经血清饥饿。在第2天，将最终浓度0.001、0.01、0.1、1和10 μM的化合物A或DMSO (对照)加入到培养基中。然后，加入化合物后30分钟，加入毛喉素(最终浓度1 μM)。加入毛喉素后30分钟，将细胞在溶胞缓冲液(Cell Signaling Technology, USA)中溶解。细胞上清液被用来依据制造商的指示，用AlphaScreen cAMP功能性分析(PerkinElmer, USA)测定细胞内cAMP水平。

b) 测量mRNA表达水平

在0天，于37℃，在95%空气和5% CO₂的气氛下，将人系膜细胞以2 x 10⁵细胞/孔的细胞密度接种于1型胶原-涂布的24-孔板(AGC TECHNO GLASS Co. Ltd., Japan)上的CSC完全培养基(Cell Systems, USA)中。在第1天，细胞用不含血清和生长因子的CMC培养基经血清饥饿。在第2天，将最终浓度0.001、0.01、0.1、1和10 μM的化合物A或DMSO (对照)加入到培养基中。然后，加入化合物后30分钟，加入毛喉素(最终浓度1 μM)和TGF-β (最终浓度3 ng/mL)。加入毛喉素和TGF-β后6和24小时，除去培养基并将细胞在RNeasy 96试剂盒(Qiagen,Germany)中含有的溶胞缓冲液中溶解。依据制造商的指示，用RNeasy 96试剂盒纯化总RNA。互补DNA (cDNA)通过逆转录反应(高容量cDNA逆转录试剂盒，Life Technologies, USA)，使用分离的总RNA作为模板合成。为测量结缔组织生长因子(CTGF)和纤溶酶原激活物抑制剂-1 (PAI-1)的mRNA水平，使用在毛喉素/TGF-β刺激后6小时分离的总RNA。为了测量胶原蛋白1型α1链和纤连蛋白的mRNA水平，使用在毛喉素/TGF-β刺激后24小时分离的总RNA。mRNA表达水平通过定量实时RT-PCR方法，用TaqMan基因表达预混液(master mix)和具有目标mRNA特异性引物和探针集合[人结缔组织生长因子(Hs1026927_g1)；人纤溶酶原激活物抑制剂-1 (Hs00167155_m1)；人1型胶原α1链(Hs00164004_m1)；人纤连蛋白(HS00365052_m1)；人甘油醛3-磷酸脱氢酶(HS2758991_g1)]的ABI PRISM 9700 (Life Technologies,USA)测定。

各个mRNA表达水平依据制造商的说明书，通过ΔΔCt方法计算，和CTGF、PAI-1、1型胶原α1链和纤连蛋白的mRNA表达水平用作为内部对照的甘油醛3-磷酸脱氢酶(GAPDH)mRNA表达水平校正。

统计学

为评价化合物A对细胞内cAMP水平的影响， DMSO-治疗和化合物A治疗组之间的统计学差异用单尾Williams'检验分析。为评价化合物A对mRNA表达水平的影响，毛喉素/TGF-β-治疗和化合物A治疗组之间的统计学差异用单尾Williams'检验分析。为证实由TGF-β对mRNA的诱导，未处理的和TGF-β-处理的组之间的mRNA表达水平用Student's t-检验分析。TGF-β单独和TGF-β/毛喉素共同-治疗组之间的统计学差异也用Student's t-检验测试以证实毛喉素的作用。在单尾Williams'检验中P-值少于0.025被认为是统计学显著的。在Student'st-检验中低于0.05的P-值被认为是统计学显著的。

结果

化合物A是一种PDE4选择性抑制剂并在适宜的Gs-介导的腺苷酸环化酶激活下，具有通过抑制cAMP降解途径增加细胞内cAMP水平的效力。在这个体外测定中，1 μM的毛喉素被用来直接激活腺苷酸环化酶以提高cAMP生产。在实验条件下，毛喉素单独温和地刺激细胞内cAMP积聚。用毛喉素和化合物A共同-治疗进一步以浓度依赖性方式提高细胞内cAMP积聚并在0.1 μM或0.1 μM以上的化合物A观察到显著的作用(图5)。该结果表明功能性PDE4在人系膜细胞中表达并提示PDE4在细胞中起着生物作用。

为证实化合物A在体外的抗-纤维化作用，研究了化合物A对TGF-β-诱导的促纤维化基因的mRNA表达的影响。根据以往的初步研究，CTGF和PAI-1的mRNA的最大诱导在TGF-β刺激后6小时被观察到，而1型胶原和纤连蛋白的mRNA的最大诱导在24 h被观察到(数据未显示)。在该实验中，化合物A对mRNA诱导的效果在对CTGF和PAI-1刺激后6 h和对胶原蛋白1型α1链和纤连蛋白刺激后24 h分别进行了研究。

用TGF-β刺激6 h，CTGF和PAI-1的明显的mRNA诱导在人系膜细胞中观察到。mRNA表达的这些增加是适度的，但被毛喉素单独治疗显著地减少，且被化合物A治疗以浓度-依赖性方式进一步抑制(图6A和6B)。TGF-β刺激24 h也明显诱导胶原蛋白1型α1链和纤连蛋白二者的mRNA表达，且毛喉素单独治疗显著地抑制这些mRNA的表达。在毛喉素的存在下，化合物A在0.1 μM或0.1 μM以上时，在人系膜细胞中进一步提高对1型胶原α1链和纤连蛋白的mRNA表达的抑制作用(图7A和7B)。

合起来考虑，这些结果证实化合物A抑制人系膜细胞中的PDE4并提高细胞内cAMP水平的积聚。而且，化合物A显示对TGF-β-诱导的几种促纤维化标记的mRNA表达的可靠抑制作用。

4) 化合物A –对体重的影响/对脂肪量和瘦肉量的影响–在食物-引起的肥胖(DIO)小鼠中的4周治疗

模型描述

雄性C57BL/6J小鼠从CLEA Japan, Inc获得。给从5周至54周龄的小鼠喂饲高脂肪食物D12451 (Research diets, Inc)并自由饮水。

实验方案

所有小鼠分别圈养在动物笼中并用于适应期2周后的研究。动物组(n=7)用溶媒(0.5w/v%甲基纤维素, p.o.)或者化合物A (1 mg /kg或3 mg/kg, p.o.混悬液，在0.5w/v%甲基纤维素溶液中)在晚上一天一次处理，持续4周(从50周龄开始)。每周测量体重2或3次。关于身体组成，测量脂肪量(fast mass)和瘦肉量(lean mass)。

测量

身体组成(脂肪量和瘦肉量)用Echo-MRI-900 (ALOKA Japan)测量。

统计学分析

所有数据表示为平均数 ± S.D.。为评价化合物A的作用，溶媒(p.o.)和化合物A处理组之间的统计学显著性在各组中的变量是均匀或非均匀时，分别用单尾Williams’检验或Shirley-Williams检验分析。在单尾Williams’检验或Shirley-Williams检验中，p-值低于0.025被认为是统计学显著的。离治疗前(0天)的体重变化使用下式计算：[(BW-0天的BW) /0天的BW] x 100。

结果

在DIO小鼠中用化合物A (1和3 mg/kg)的4周-治疗与溶媒(p.o.)处理的组 (+3.8%±2.4%)比较，剂量-依赖性地和显著地降低体重(1 mg/kg；-4.9±3.5%, 3 mg/kg；-17.2±4.0%)。化合物A在4-周研究期间显示一种持久的体重降低的效果(图8)。当用溶媒(p.o.)-处理的体重变化校正时，化合物A (1 mg/kg)显示体重减轻-8.7±3.5%。用化合物A (1和3mg/kg)治疗剂量依赖性地和显著地降低脂肪量(图9A)，而不影响瘦肉量(图9B)，提示化合物A的体重降低作用源自脂肪量的特异性减少。

5) 化合物A - 在db/db小鼠中治疗4周对HbA1c的影响

模型描述

5-6周龄的雌性db/db小鼠购自Taconic (Lille Skensved, Denmark)并维持在标准条件下(5只动物/笼；12 h光-暗循环；室温222℃；相对湿度6015 %)。全部小鼠自由接近水和标准食物(Provimi Kliba, Kaiseraugst, Switzerland)。到达4天后，动物根据体重和糖化血红蛋白1c (HbA1c)的水平随机分配。在7周龄，动物通过使用剂量1、3和10 mg/kgs.i.d. (相对于游离碱的剂量)用溶媒(4%甲基纤维素)或用化合物A (包含在4 %甲基纤维素水溶液中)管饲来每日处理。所需的剂量以10 ml体积/kg体重应用。各个剂量组由10只动物组成。在治疗期结束时，分离血浆样本用于测定HbA1c水平。全部实验程序依据德国动物保护法(German Animal Protection Law)进行。

HbA1c

从尾尖-血液(治疗前HbA1c测定)以及从眼眶后静脉丛收集的血液(4周治疗后的HbA1c测定)使用血红蛋白A1c检验(Hemoglobin A1c Test) (Siemens, Bad Nauheim, Germany)分析HbA1c。

统计学分析

值表示为均值SEM。统计学差异使用单因素方差分析(one-way-ANOVA)，接着用Dunnet´s校正(GraphPad Prism)的post-hoc分析测定。

显著性的定义：n.s.= 无显著性(p > 0.05)

*, **, *** = p < 0.05, < 0.01, < 0.001

结果

用化合物A治疗(在所有测试的剂量)以剂量依赖性地显著和强烈地减少HbA1c水平。在剂量1、3和10 mg/kg的化合物A 时，HbA1c水平从9.06 % (对照)减少至7.27 (p<0.05)、7.06 (p<0.01)和6.16% (p<0.001) (图10)。

在用化合物A (n = 10；相对于游离碱的剂量)口服治疗28天后雌性db/db小鼠中的HbA1c水平。

本发明的其它方面：

a) 磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂在制备用于治疗糖尿病性肾病的药用组合物中的用途，其中磷酸二酯酶4抑制剂选自化合物A及其药学上可接受的盐。

b) 依据a)的用途，其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A。

c) 依据a)的用途，其中化合物A以0.05和1.0 mg之间的日剂量给予或化合物A的药学上可接受的盐以对应于0.05 mg和1.0 mg之间的化合物A日剂量的剂量给予。

d) 依据b)的用途，其中化合物A以0.05 mg和1.0 mg之间的日剂量给予。

e) 以下I)和II)项的组合：

I) 磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂；和

II) AT₁血管紧张素II受体拮抗剂,

在制备用于治疗糖尿病性肾病的药用组合物中的用途，

其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂选自化合物A及其药学上可接受的盐，

和其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂选自厄贝沙坦、厄贝沙坦的药学上可接受的盐、氯沙坦、氯沙坦的药学上可接受的盐、阿齐沙坦和阿齐沙坦的药学上可接受的盐。

f) 依据e)的用途，其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A。

g) 依据e)的用途，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是厄贝沙坦或其药学上可接受的盐。

h) 依据e)的用途，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是厄贝沙坦。

i) 依据f)的用途，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是厄贝沙坦或其药学上可接受的盐。

j) 依据f)的用途，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是厄贝沙坦。

k) 依据e)的用途，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是氯沙坦或其药学上可接受的盐。

l) 依据e)的用途，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是氯沙坦钾。

m) 依据e)的用途，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是氯沙坦。

n) 依据f)的用途，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是氯沙坦或其药学上可接受的盐。

o) 依据f)的用途，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是氯沙坦钾。

p) 依据f)的用途，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是氯沙坦。

q) 依据e)的用途，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是阿齐沙坦或其药学上可接受的盐。

r) 依据e)的用途，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是阿齐沙坦或其药学上可接受的盐，且阿齐沙坦或其药学上可接受的盐以阿齐沙坦奥美沙坦酯钾的形式给予。

s) 依据e)的用途，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是阿齐沙坦。

t) 依据f)的用途，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是阿齐沙坦或其药学上可接受的盐。

u) 依据f)的用途，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是阿齐沙坦或其药学上可接受的盐，且阿齐沙坦或其药学上可接受的盐以阿齐沙坦奥美沙坦酯钾的形式给予。

v) 依据f)的用途，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是阿齐沙坦。

w) 依据e)的用途，其中化合物A以0.05 mg和1.0 mg之间的日剂量给予，或化合物A的药学上可接受的盐以对应于0.05 mg和1.0 mg之间的化合物A日剂量的日剂量给予。

x) 依据f)的用途，其中化合物A以0.05 mg和1.0 mg之间的日剂量给予。

y) 依据g)-h)的任一项的用途，其中化合物A以0.05 mg和1.0 mg之间的日剂量给予或化合物A的药学上可接受的盐以对应于0.05 mg和1.0 mg之间的化合物A日剂量的日剂量给予，和其中厄贝沙坦以75 mg和300 mg之间的日剂量给予，或厄贝沙坦的药学上可接受的盐以对应于75 mg和300 mg之间的厄贝沙坦日剂量的日剂量给予。

z) 依据i)-j)的任一项的用途，其中化合物A以0.05 mg和1.0 mg之间的日剂量给予，和其中厄贝沙坦以75 mg和300 mg之间的日剂量给予，或厄贝沙坦的药学上可接受的盐以对应于75 mg和300 mg之间的厄贝沙坦日剂量的日剂量给予。

aa) 依据l)的用途，其中化合物A以0.05 mg和1.0 mg之间的日剂量给予，或化合物A的药学上可接受的盐以对应于0.05 mg和1.0 mg之间的化合物A日剂量的日剂量给予，和其中氯沙坦钾以50 mg和100 mg之间的日剂量给予。

bb) 依据o)的用途，其中化合物A以0.05 mg和1.0 mg之间的日剂量给予，和其中氯沙坦钾以50 mg和100 mg之间的日剂量给予。

cc) 依据e)-j)、y)或z)的任一项的用途，其中化合物A或其药学上可接受的盐和厄贝沙坦或其药学上可接受的盐以一个单一剂型给予。

dd) 依据e)-j)、y)或z)的任一项的用途，其中化合物A或其药学上可接受的盐和厄贝沙坦或其药学上可接受的盐以一个单一口服剂型给予。

ee) 依据e)-j)、y)或z)的任一项的用途，其中化合物A或其药学上可接受的盐和厄贝沙坦或其药学上可接受的盐以两个分开的剂型同时给予。

ff) 依据e)-j)、y)或z)的任一项的用途，其中化合物A或其药学上可接受的盐和厄贝沙坦或其药学上可接受的盐以两个分开的口服剂型同时给予。

gg) 依据e)-j)、y)或z)的任一项的用途，其中化合物A或其药学上可接受的盐和厄贝沙坦或其药学上可接受的盐以两个分开的剂型依次给予。

hh) 依据e)-j)、y)或z)的任一项的用途，其中化合物A或其药学上可接受的盐和厄贝沙坦或其药学上可接受的盐以两个分开的口服剂型依次给予。

ii) 依据k)-p)、aa)或bb)的任一项的用途，其中化合物A或其药学上可接受的盐和氯沙坦或其药学上可接受的盐以一个单一剂型给予。

jj) 依据k)-p)、aa)或bb)的任一项的用途，其中化合物A或其药学上可接受的盐和氯沙坦或其药学上可接受的盐以一个单一口服剂型给予。

kk) 依据k)-p)、aa)或bb)的任一项的用途，其中化合物A或其药学上可接受的盐和氯沙坦或其药学上可接受的盐以两个分开的剂型同时给予。

ll) 依据k)-p)、aa)或bb)的任一项的用途，其中化合物A或其药学上可接受的盐和氯沙坦或其药学上可接受的盐以两个分开的口服剂型同时给予。

mm) 依据k)-p)、aa)或bb)的任一项的用途，其中化合物A或其药学上可接受的盐和氯沙坦或其药学上可接受的盐以两个分开的剂型依次给予。

nn) 依据k)-p)、aa)或bb)的任一项的用途，其中化合物A或其药学上可接受的盐和氯沙坦或其药学上可接受的盐以两个分开的口服剂型依次给予。

oo) 依据q)-v)的任一项的用途，其中化合物A或其药学上可接受的盐和阿齐沙坦或其药学上可接受的盐以一个单一剂型给予。

pp) 依据q)-v)的任一项的用途，其中化合物A或其药学上可接受的盐和阿齐沙坦或其药学上可接受的盐以一个单一口服剂型给予。

qq) 依据q)-v)的任一项的用途，其中化合物A或其药学上可接受的盐和阿齐沙坦或其药学上可接受的盐以两个分开的剂型同时给予。

rr) 依据q)-v)的任一项的用途，其中化合物A或其药学上可接受的盐和阿齐沙坦或其药学上可接受的盐以两个分开的口服剂型同时给予。

ss) 依据q)-v)的任一项的用途，其中化合物A或其药学上可接受的盐和阿齐沙坦或其药学上可接受的盐以两个分开的剂型依次给予。

tt) 依据q)-v)的任一项的用途，其中化合物A或其药学上可接受的盐和阿齐沙坦或其药学上可接受的盐以两个分开的口服剂型依次给予。

uu) 依据a)-d)、e)-v)或w)-tt)的任一项的用途，其中糖尿病性肾病代表早期糖尿病性肾病(尿白蛋白排泄率在30-300 mg/24h的范围内或尿白蛋白与肌酐比率为30-300mg/g)。

vv) 依据a)-d)、e)-v)或w)-tt)的任一项的用途，其中糖尿病性肾病代表明显的糖尿病性肾病(尿白蛋白排泄率>300 mg/24h或尿白蛋白与肌酐比率>300 mg/g)。

ww) 用于治疗糖尿病性肾病的包含磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂的药用组合物，

其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂选自化合物A及其药学上可接受的盐。

xx) 依据ww)的药用组合物，其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A。

yy) 依据ww)的药用组合物，其中化合物A是以0.05 mg和1.0 mg之间的日剂量给予或化合物A的药学上可接受的盐是以0.05 mg和1.0 mg之间的化合物A日剂量的剂量给予。

zz) 依据xx)的药用组合物，其中化合物A是以0.05 mg-1.0 mg的日剂量给予。

aaa) 一种用于治疗糖尿病性肾病的药用组合物，其包含：

(1) 磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂与

(2) AT₁血管紧张素II受体拮抗剂的组合，

其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂选自化合物A及其药学上可接受的盐，

和其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂选自厄贝沙坦、厄贝沙坦的药学上可接受的盐、氯沙坦、氯沙坦的药学上可接受的盐、阿齐沙坦和阿齐沙坦的药学上可接受的盐。

bbb) 依据aaa)的药用组合物，其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A。

ccc) 依据aaa)的药用组合物，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是厄贝沙坦或其药学上可接受的盐。

ddd) 依据aaa)的药用组合物，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是厄贝沙坦。

eee) 依据bbb)的药用组合物，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是厄贝沙坦或其药学上可接受的盐。

fff) 依据bbb)的药用组合物，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是厄贝沙坦。

ggg) 依据aaa)的药用组合物，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是氯沙坦或其药学上可接受的盐。

hhh) 依据aaa)的药用组合物，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是氯沙坦钾。

iii) 依据aaa)的药用组合物，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是氯沙坦。

jjj) 依据bbb)的药用组合物，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是氯沙坦或其药学上可接受的盐。

kkk) 依据bbb)的药用组合物，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是氯沙坦钾。

lll) 依据bbb)的药用组合物，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是氯沙坦。

mmm) 依据aaa)的药用组合物，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是阿齐沙坦或其药学上可接受的盐。

nnn) 依据aaa)的药用组合物，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是阿齐沙坦或其药学上可接受的盐和阿齐沙坦或其药学上可接受的盐以阿齐沙坦奥美沙坦酯钾的形式给予。

ooo) 依据aaa)的药用组合物，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是阿齐沙坦。

ppp) 依据bbb)的药用组合物，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是阿齐沙坦或其药学上可接受的盐。

qqq) 依据bbb)的药用组合物，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是阿齐沙坦或其药学上可接受的盐和阿齐沙坦或其药学上可接受的盐以阿齐沙坦奥美沙坦酯钾的形式给予。

rrr) 依据bbb)的药用组合物，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是阿齐沙坦。

sss) 依据aaa)的药用组合物，其中化合物A是以0.05 mg和1.0 mg之间的日剂量给予，或化合物A的药学上可接受的盐是以对应于0.05 mg和1.0 mg之间的化合物A日剂量的日剂量给予。

ttt) 依据bbb)的药用组合物，其中化合物A是以0.05 mg和1.0 mg之间的日剂量给予。

uuu) 依据ccc)-ddd)的任一项的药用组合物，其中化合物A是以0.05 mg和1.0 mg之间的日剂量给予，或化合物A的药学上可接受的盐是以对应于0.05 mg和1.0 mg之间的化合物A日剂量的日剂量给予，和其中厄贝沙坦是以75 mg和300 mg之间的日剂量给予，或厄贝沙坦的药学上可接受的盐是以对应于75 mg和300 mg之间的厄贝沙坦日剂量的日剂量给予。

vvv) 依据eee)-fff)的任一项的药用组合物，其中化合物A是以0.05 mg和1.0 mg之间的日剂量给予，和其中厄贝沙坦是以75 mg和300 mg之间的日剂量给予，或厄贝沙坦的药学上可接受的盐是以对应于75 mg和300 mg之间的厄贝沙坦日剂量的日剂量给予。

www) 依据hhh)的药用组合物，其中化合物A是以0.05 mg和1.0 mg之间的日剂量给予或化合物A的药学上可接受的盐是以对应于0.05 mg和1.0 mg之间的化合物A日剂量的日剂量给予，和其中氯沙坦钾是以50 mg和100 mg之间的日剂量给予。

xxx) 依据kkk)的药用组合物，其中化合物A是以0.05 mg和1.0 mg之间的日剂量给予，和其中氯沙坦钾是以50 mg和100 mg之间的日剂量给予。

yyy) 依据ccc)-fff)或uuu)-vvv)的任一项的药用组合物，其中化合物A或其药学上可接受的盐和厄贝沙坦或其药学上可接受的盐是以一个单一剂型同时给予。

zzz) 依据ccc)-fff)或uuu)-vvv)的任一项的药用组合物，其中化合物A或其药学上可接受的盐和厄贝沙坦或其药学上可接受的盐是以一个单一口服剂型给予。

aaaa) 依据ccc)-fff)或uuu)-vvv)的任一项的药用组合物，其中化合物A或其药学上可接受的盐和厄贝沙坦或其药学上可接受的盐是以两个分开的剂型同时给予。

bbbb) 依据ccc)-fff)或uuu)-vvv)的任一项的药用组合物，其中化合物A或其药学上可接受的盐和厄贝沙坦或其药学上可接受的盐是以两个分开的口服剂型同时给予。

cccc) 依据ccc)-fff)或uuu)-vvv)的任一项的药用组合物，其中化合物A或其药学上可接受的盐和厄贝沙坦或其药学上可接受的盐是以两个分开的剂型依次给予。

dddd) 依据ccc)-fff)或uuu)-vvv)的任一项的药用组合物，其中化合物A或其药学上可接受的盐和厄贝沙坦或其药学上可接受的盐是以两个分开的口服剂型依次给予。

eeee) 依据ggg)-lll)或www)-xxx)的任一项的药用组合物，其中化合物A或其药学上可接受的盐和氯沙坦或其药学上可接受的盐是以一个单一剂型给予。

ffff) 依据ggg)-lll)或www)-xxx)的任一项的药用组合物，其中化合物A或其药学上可接受的盐和氯沙坦或其药学上可接受的盐是以一个单一口服剂型给予。

gggg) 依据ggg)-lll)或www)-xxx)的任一项的药用组合物，其中化合物A或其药学上可接受的盐和氯沙坦或其药学上可接受的盐是以两个分开的剂型同时给予。

hhhh) 依据ggg)-lll)或www)-xxx)的任一项的药用组合物，其中化合物A或其药学上可接受的盐和氯沙坦或其药学上可接受的盐是以两个分开的口服剂型同时给予。

iiii) 依据ggg)-lll)或www)-xxx)的任一项的药用组合物，其中化合物A或其药学上可接受的盐和氯沙坦或其药学上可接受的盐是以两个分开的剂型依次给予。

jjjj) 依据ggg)-lll)或www)-xxx)的任一项的药用组合物，其中化合物A或其药学上可接受的盐和氯沙坦或其药学上可接受的盐是以两个分开的口服剂型依次给予。

kkkk) 依据mmm)-rrr)的任一项的药用组合物，其中化合物A或其药学上可接受的盐和阿齐沙坦或其药学上可接受的盐是以一个单一剂型给予。

llll) 依据mmm)-rrr)的任一项的药用组合物，其中化合物A或其药学上可接受的盐和阿齐沙坦或其药学上可接受的盐是以一个单一口服剂型给予。

mmmm) 依据mmm)-rrr)的任一项的药用组合物，其中化合物A或其药学上可接受的盐和阿齐沙坦或其药学上可接受的盐是以两个分开的剂型同时给予。

nnnn) 依据mmm)-rrr)的任一项的药用组合物，其中化合物A或其药学上可接受的盐和阿齐沙坦或其药学上可接受的盐是以两个分开的口服剂型同时给予。

oooo) 依据mmm)-rrr)的任一项的药用组合物，其中化合物A或其药学上可接受的盐和阿齐沙坦或其药学上可接受的盐是以两个分开的剂型依次给予。

pppp) 依据mmm)-rrr)的任一项的药用组合物，其中化合物A或其药学上可接受的盐和阿齐沙坦或其药学上可接受的盐是以两个分开的口服剂型依次给予。

qqqq) 依据ww)-zz)、aaa)-xxx)或yyy)-pppp)的任一项的药用组合物，其中糖尿病性肾病代表早期糖尿病性肾病(尿白蛋白排泄率在30-300 mg/24h的范围内或尿白蛋白与肌酐比率为30 - 300 mg/g)。

rrrr) 依据ww)-zz)、aaa)-xxx)或yyy)-pppp)的任一项的药用组合物，其中糖尿病性肾病代表明显的糖尿病性肾病(尿白蛋白排泄率>300 mg/24h或尿白蛋白与肌酐比率>300 mg/g)。

ssss) 以下I)和II)的组合：

I) 磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂；和

II) 血管紧张素-转化酶抑制剂，

在制备用于治疗糖尿病性肾病的药用组合物中的用途，

其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂选自化合物A及其药学上可接受的盐，

和其中血管紧张素-转化酶抑制剂选自卡托普利和卡托普利的药学上可接受的盐。

tttt) 依据ssss)的用途，其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A。

uuuu) 依据ssss)的用途，其中血管紧张素-转化酶抑制剂是卡托普利。

vvvv) 一种用于治疗糖尿病性肾病的药用组合物，其包含：

(1) 磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂与

(2) 血管紧张素-转化酶抑制剂的组合，

其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂选自化合物A及其药学上可接受的盐、

和其中血管紧张素-转化酶抑制剂选自卡托普利和卡托普利的药学上可接受的盐。

wwww) 依据vvvv)的药用组合物，其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A。xxxx) 依据vvvv)或wwww)的任一项的药用组合物，其中血管紧张素-转化酶抑制剂是卡托普利。

Claims (26)

1.用于治疗糖尿病性肾病的包含磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂的药用组合物，

其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂选自5-((2R,4aR,10bR)-9-乙氧基-2-羟基-8-甲氧基-1,2,3,4,4a,10b-六氢-菲啶-6-基)1-甲基-1H-吡啶-2-酮(此后称为“化合物A”)及其药学上可接受的盐。

2.依据权利要求1的药用组合物，其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A。

3.一种用于治疗糖尿病性肾病的药用组合物，其包含：

(1) 磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂与

(2) AT₁血管紧张素II受体拮抗剂的组合，

其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂选自化合物A及其药学上可接受的盐，

和其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂选自厄贝沙坦、厄贝沙坦的药学上可接受的盐、氯沙坦、氯沙坦的药学上可接受的盐、阿齐沙坦和阿齐沙坦的药学上可接受的盐。

4.依据权利要求3的药用组合物，其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A。

5.依据权利要求3的药用组合物，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是厄贝沙坦或其药学上可接受的盐。

6.依据权利要求4的药用组合物，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是厄贝沙坦或其药学上可接受的盐。

7.依据权利要求1-6中任一项的药用组合物，其中糖尿病性肾病代表早期糖尿病性肾病(尿白蛋白排泄率在30-300 mg/24h的范围内)。

8.依据权利要求1-6中任一项的药用组合物，其中糖尿病性肾病代表明显的糖尿病性肾病(尿白蛋白排泄率> 300 mg/24h)。

9.依据权利要求1-6中任一项的药用组合物，其中糖尿病性肾病代表早期糖尿病性肾病(尿白蛋白与肌酐比率30-300 mg/g)。

10.依据权利要求1-6中任一项的药用组合物，其中糖尿病性肾病代表明显的糖尿病性肾病(尿白蛋白与肌酐比率> 300 mg/g)。

11.药用组合物，其包含

(1) 磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂与

(2) AT₁血管紧张素II受体拮抗剂的组合，和

(3) 至少一种药学上可接受的载体，

其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂选自化合物A及其药学上可接受的盐，

和其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂选自厄贝沙坦、厄贝沙坦的药学上可接受的盐、氯沙坦、氯沙坦的药学上可接受的盐、阿齐沙坦和阿齐沙坦的药学上可接受的盐。

12.依据权利要求11的药用组合物，其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A。

13.依据权利要求11的药用组合物，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是厄贝沙坦或其药学上可接受的盐。

14.依据权利要求11的药用组合物，其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A 和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是厄贝沙坦或其药学上可接受的盐。

15.依据权利要求11-14中任一项的药用组合物，其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂呈现为一个单一口服剂型。

16.依据权利要求11-14中任一项的药用组合物，其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂呈现为两个分开的口服剂型。

17.一种在有需要的哺乳动物中治疗糖尿病性肾病的方法，其包括给予罹患糖尿病性肾病的哺乳动物治疗有效量的磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂，

其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂选自化合物A及其药学上可接受的盐。

18.依据权利要求18的方法，其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A。

19.一种在有需要的哺乳动物中治疗糖尿病性肾病的方法，其包括：给予罹患糖尿病性肾病的哺乳动物治疗有效量的以下药物的组合：

(1) 磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂；和

(2) AT₁血管紧张素II受体拮抗剂，

其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂选自化合物A及其药学上可接受的盐，

和其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂选自厄贝沙坦、厄贝沙坦的药学上可接受的盐、氯沙坦、氯沙坦的药学上可接受的盐、阿齐沙坦和阿齐沙坦的药学上可接受的盐。

20.依据权利要求19的方法，其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A。

21.依据权利要求19的方法，其中AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是厄贝沙坦或其药学上可接受的盐。

22.依据权利要求19的方法，其中磷酸二酯酶4 (PDE4)抑制剂是化合物A和AT₁血管紧张素II受体拮抗剂是厄贝沙坦或其药学上可接受的盐。

23.依据权利要求17-22中任一项的方法，其中罹患糖尿病性肾病的哺乳动物是具有尿白蛋白排泄率在30-300 mg/24h的范围内的人。

24.依据权利要求17-22中任一项的方法，其中罹患糖尿病性肾病的哺乳动物是具有300 mg/24h以上的尿白蛋白排泄率的人。

25.依据权利要求17-22中任一项的方法，其中罹患糖尿病性肾病的哺乳动物是具有尿白蛋白与肌酐比率在30-300mg/g的范围内的人。

26.依据权利要求17-22中任一项的方法，其中罹患糖尿病性肾病的哺乳动物是具有300 mg/g以上的尿白蛋白与肌酐比率的人。